natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Tests at this level and above have demonstrated reproductive performance in compliance with the validity criteria (11) (12).
ECx) i koje su raspoređene u geometrijskom nizu i po mogućnosti se ne bi trebale razlikovati za faktor veći od 3,2.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by dilution of a stock solution.
Za svaku ispitnu koncentraciju trebalo bi upotrijebiti prikladan broj ponovljenih uzoraka (vidjeti stavke 24. i 25.).
Stock solutions should preferably be prepared, without using any solvents or dispersants if possible, by mixing or agitating the test chemical in test medium using mechanical means such as agitating, stirring or ultrasonication, or other appropriate methods.
Ako se upotrebljava manje od pet koncentracija, treba dati obrazloženje.
It is preferable to expose test systems to concentrations of the test chemical to be used in the study for as long as is required to demonstrate the maintenance of stable exposure concentrations prior to the introduction of test organisms.
Kemikalije se ne bi trebale ispitivati iznad granice topljivosti u ispitnom mediju.
If the test chemical is difficult to dissolve in water, procedures described in the OECD Guidance for handling difficult substances should be followed (13).
Preporučuje se prije provedbe pokusa razmotriti statističku snagu plana ispitivanja i primjenu prikladnih statističkih metoda (4.).
The use of solvents or dispersants should be avoided, but may be necessary in some cases in order to produce a suitably concentrated stock solution for dosing.
Pri utvrđivanju raspona koncentracija trebalo bi voditi računa o sljedećem:
A dilution water control with adequate replicates and, if unavoidable, a solvent control with adequate replicates should be run in addition to the test concentrations.
i. ako se ocjenjuje ECx u pogledu učinaka na reprodukciju, preporučuje se uporaba dovoljnih koncentracija kako bi se utvrdio ECx s prikladnom razinom pouzdanosti.
Only solvents or dispersants that have been investigated to have no significant or only minimal effects on the response variable should be used in the test.
Po mogućnosti, upotrijebljenim ispitnim koncentracijama trebalo bi obuhvatiti procijenjeni ECx koji je dobiven interpolacijom, a ne ekstrapolacijom.
Examples of suitable solvents (e.g. acetone, ethanol, methanol, dimethylformamide and triethylene glycol) and dispersants (e.g. Cremophor RH40, methylcellulose 0,01 % and HCO-40) are given in (13).
Prednost je ako statistička analiza koja slijedi ima više ispitnih koncentracija (npr. deset) i manje ponovljenih uzoraka za svaku koncentraciju (npr. pet, čime se zadržava stalan ukupni broj posuda) s deset kontrola;
Where a solvent or dispersant is used, its final concentration should not be greater than 0,1 ml/l (13) and it should be the same concentration in all test vessels, except the dilution water control.
pri ocjenjivanju LOEC-a i/ili NOEC-a najniža ispitna koncentracija trebala bi biti dovoljno niska da reproduktivna uspješnost pri toj koncentraciji nije znatno manja od reproduktivne uspješnosti u kontroli.
However, every effort should be made to keep the solvent concentration to a minimum.
Ako to nije slučaj, ispitivanje bi se trebalo ponoviti sa sniženom najnižom koncentracijom;
For semi-static tests, at least 10 animals individually held at each test concentration and at least 10 animals individually held in the control series.
Ako je možda potrebno provesti granično ispitivanje u protočnom sustavu, prikladan bi bio manji broj ponovljenih uzoraka.
For flow-through tests, 40 animals divided into four groups of 10 animals at each test concentration has been shown to be suitable (1).
Graničnim ispitivanjem osigurat će se mogućnost dokazivanja da ne postoji statistički značajan učinak pri graničnoj koncentraciji, ali ako su zabilježeni učinci, uobičajeno će biti potrebno potpuno ispitivanje.
A smaller number of test organisms may be used and a minimum of 20 animals per concentration divided into two or more replicates with an equal number of animals (e.g. four replicates each with five daphnids) is recommended.
Uz ispitni niz trebalo bi provesti jedan kontrolni niz s ispitnim medijem i, ako je to potrebno, jedan kontrolni niz koji sadržava otapalo ili dispergent.
Note that for tests where animals are held in groups, it will not be possible to exclude any offspring from the statistical analysis if inadvertent/ accidental parental mortality occurs when the reproduction has begun, and hence in these cases the reproductive output should be expressed as total number of living offspring produced per parent present at the beginning of the test.
Ako se upotrebljava otapalo ili dispergent, njegova koncentracija trebala bi biti jednaka kao u posudama koje sadržavaju ispitivanu kemikaliju.
Treatments should be allocated to the test vessels and all subsequent handling of the test vessels should be done in a random fashion.
Trebalo bi upotrijebiti prikladan broj ponovljenih uzoraka (vidjeti stavke 23. i 24.).
Failure to do this may result in bias that could be construed as being a concentration effect.
Općenito, u dobro provedenom ispitivanju koeficijent varijacije oko srednje vrijednosti broja živih potomaka po roditeljskoj životinji u kontrolama trebao bi biti ≤ 25 % i to bi trebalo dokumentirati za planove ispitivanja u kojima se upotrebljavaju životinje koje se drže pojedinačno.
In particular, if experimental units are handled in treatment or concentration order, then some time-related effect, such as operator fatigue or other error, could lead to greater effects at the higher concentrations.
Obnavljanje ispitnog medija
Furthermore, if the test results are likely to be affected by an initial or environmental condition of the test, such as position in the laboratory, then consideration should be given to blocking the test.
Učestalost obnavljanja medija ovisit će o stabilnosti ispitivane kemikalije, ali bi medij trebalo obnoviti najmanje tri puta tjedno.
For semi-static tests, feeding should preferably be done daily, but at least three times per week (i.e. corresponding to media changes).
Ako se preliminarnim ispitivanjima stabilnosti (vidjeti stavak 7.) pokazalo da koncentracija ispitivane kemikalije nije stabilna (odnosno da je izvan raspona od 80 do 120 % nazivne koncentracije ili da je ispod 80 % izmjerene početne koncentracije) u maksimalnom razdoblju obnavljanja (tj. tri dana), trebalo bi razmotriti češće obnavljanje medija ili primjenu protočnog ispitivanja.
The possible dilution of the exposure concentrations by food addition should be taken into account and avoided as much as possible with well concentrated algae suspensions.
Kada se medij obnavlja u polustatičkim ispitivanjima, priprema se drugi niz ispitnih posuda u koje se prenose roditeljske životinje, na primjer staklenom pipetom prikladnog promjera.
Deviations from this (e.g. for flow-through tests) should be reported.
Volumen medija koji se prenosi s dafnijama trebao bi biti što je moguće manji.
During the test, the diet of the parent animals should preferably be living algal cells of one or more of the following: Chlorella sp., Pseudokirchneriella subcapitata (formerly Selenastrum capricornutum) and Desmodesmus subspicatus (formerly Scenedesmus subspicatus).
Rezultate zapažanja tijekom ispitivanja trebalo bi zabilježiti u obrasce za dostavu podataka (vidjeti primjere u dodacima 4. i 5.).
The supplied diet should be based on the amount of organic carbon (C) provided to each parent animal.
Ako su potrebna druga mjerenja (vidjeti stavak 44.), možda će biti potrebna dodatna zapažanja.
Research (14) has shown that, for Daphnia magna, ration levels of between 0,1 and 0,2 mg C/Daphnia/day are sufficient for achieving the required number of living offspring to meet the test validity criteria.
Potomci
The ration can be supplied either at a constant rate throughout the period of the test, or, if desired, a lower rate can be used at the beginning and then increased during the test to take account of growth of the parent animals.
Po mogućnosti, potomke svake roditeljske životinje trebalo bi ukloniti i prebrojiti svakog dana od pojave prvog legla kako ne bi potrošili hranu namijenjenu roditeljskoj životinji.
In this case, the ration should still remain within the recommended range of 0,1 - 0,2 mg C/Daphnia/day at all times.
Za potrebe ove ispitne metode, prebrojavanjem treba utvrditi samo broj živih potomaka, ali trebalo bi zabilježiti i prisutnost propalih jajašaca ili mrtvih potomaka.
If surrogate measures, such as algal cell number or light absorbance, are to be used to feed the required ration level (i.e. for convenience since measurement of carbon content is time consuming), each laboratory should produce its own nomograph relating the surrogate measure to carbon content of the algal culture (see Appendix 3 for advice on nomograph production).
Smrtnost
Nomographs should be checked at least annually and more frequently if algal culture conditions have changed.
Po mogućnosti, smrtnost roditeljskih životinja trebalo bi bilježiti svakodnevno, a najmanje u vrijeme prebrojavanja potomstva.
Light absorbance has been found to be a better surrogate for carbon content than cell number (15).
Ostali parametri
A concentrated algal suspension should be fed to the Daphnia to minimise the volume of algal culture medium transferred to the test vessels.
Iako je ova ispitna metoda u načelu namijenjena ocjenjivanju učinaka na reproduktivnu uspješnost, moguće je i da se drugi učinci mogu u dovoljnoj mjeri kvantificirati za statističku analizu.
Concentration of the algae can be achieved by centrifugation followed by re-suspension in Daphnia culture medium.
Može se bilježiti reproduktivna uspješnost po preživjeloj roditeljskoj životinji, odnosno broj živih potomaka tijekom ispitivanja po preživjeloj roditeljskoj životinji.
Light
To se može usporediti s glavnom varijablom odgovora (reproduktivnom uspješnošću po roditeljskoj životinji na početku ispitivanja koja nije nenamjerno ili slučajno uginula tijekom ispitivanja).
For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 1000-1500 lux for cool white light corresponds close to the recommended light intensity 15-20 μE · m-2 · s-1.
Ako je smrtnost povezana s obrascem odgovora na koncentraciju, smrtnost roditeljskih životinja trebalo bi utvrditi kao učinak ispitivane kemikalije i ponovljene uzorke ne bi trebalo isključiti iz analize rezultata ispitivanja.
The temperature of the test media should be within the range 18-22 °C.
Mjerenja rasta vrlo su poželjna jer se na temelju njih dobivaju informacije o mogućim subletalnim učincima koja mogu biti korisna uz sama mjerenja reprodukcije; preporučuje se da se na kraju ispitivanja izmjeri dužina roditeljskih životinja (odnosno dužina tijela bez analne bodlje).
However, for any one test, the temperature should not, if possible, vary by more than 2 °C within these limits (e.g. 18-20, 19-21 or 20-22 °C) as daily range.
Ostali parametri koji se mogu mjeriti ili izračunati uključuju vrijeme do pojave prvog legla (i naknadnih legla), broj i veličinu legla po životinji, broj propalih legla, prisutnost novorođenih mužjaka (OECD, 2008.) ili efipija i možda intrinzičnu stopu prirasta populacije (vidjeti Dodatak 1. za definiciju i Dodatak 7. za utvrđivanje spola novorođenih životinja).
It may be appropriate to use an additional test vessel for the purposes of temperature monitoring.
Učestalost analitičkih određivanja i mjerenja
Aeration
Koncentraciju kisika, temperaturu, tvrdoću i pH-vrijednosti trebalo bi mjeriti najmanje jednom tjedno u svježem i starom mediju, u kontrolama i u najvišoj koncentraciji ispitivane kemikalije.
The test vessels should not be aerated during the test.
Koncentracije ispitivane kemikalije utvrđuju se u redovitim intervalima tijekom ispitivanja.
Test design
U polustatičkim ispitivanjima u kojima se očekuje da će koncentracija ispitivane kemikalije ostati u granicama ±20 % nazivne koncentracije (odnosno u rasponu od 80 do 120 %, vidjeti stavke 6., 7. i 39.) preporučuje se da se u prvom tjednu ispitivanja analiziraju najmanje najviša i najniža ispitna koncentracija odmah nakon pripreme i jednom u vrijeme obnavljanja (tj. analize bi trebalo provesti na uzorku iz iste otopine odmah nakon pripreme i pri obnavljanju).
Range finding test
Ta bi utvrđivanja zatim trebalo ponavljati najmanje u tjednim intervalima.
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example five test chemical concentrations and two replicates for each treatment and control.
U ispitivanjima u kojima se ne očekuje da će koncentracija ispitivane kemikalije ostati u granicama ±20 % nazivne koncentracije potrebno je analizirati sve ispitne koncentracije odmah nakon pripreme i pri obnavljanju.
Additional information, from tests with similar chemicals or from literature, on acute toxicity to Daphnia and/or other aquatic organisms may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the range-finding test.
Međutim, u ispitivanjima u kojima izmjerena početna koncentracija ispitivane kemikalije nije u granicama ±20 % nazivne koncentracije, ali ima dovoljno dokaza da su početne koncentracije ponovljive i stabilne (odnosno da su unutar raspona od 80 do 120 % početnih koncentracija), kemijska utvrđivanja mogu se u drugom i trećem tjednu ispitivanja ograničiti na najvišu i najnižu ispitnu koncentraciju.
The duration of the range-finding test is 21 days or of a sufficient duration to reliably predict effect levels.
U svakom slučaju, utvrđivanje koncentracija ispitivane kemikalije prije obnavljanja treba provesti samo na jednoj posudi s ponovljenim uzorkom pri svakoj ispitnoj koncentraciji.
At the end of the test, reproduction of the Daphnia is assessed.
Ako se primjenjuje protočno ispitivanje, prikladan je režim uzorkovanja sličan opisanom za polustatička ispitivanja (ali u tom slučaju nije primjenjivo mjerenje ‚starih’ otopina).
The number of parents and the occurrence of offspring should be recorded.
Međutim, može biti uputno povećati broj uzorkovanja u prvom tjednu (npr. tri seta mjerenja) kako bi se osigurala stabilnost ispitnih koncentracija.
Definitive test
U takvim vrstama ispitivanja trebalo bi svakodnevno provjeravati brzinu protoka razrjeđivača i ispitivane kemikalije.
Normally there should be at least five test concentrations, bracketing effective concentration (e.g. ECx), and arranged in a geometric series with a separation factor preferably not exceeding 3,2 An appropriate number of replicates for each test concentration should be used (see paragraphs 24-25).
Ako se može dokazati da se koncentracija ispitivane kemikalije cijelo vrijeme ispitivanja na zadovoljavajući način održava u granicama ± 20 % nazivne ili izmjerene početne koncentracije, rezultati se mogu temeljiti na nazivnim ili izmjerenim početnim vrijednostima.
Justification should be provided if fewer than five concentrations are used.
Ako je odstupanje od nazivne ili izmjerene početne koncentracije veće od ± 20 %, rezultate bi trebalo izraziti kao vremenski ponderiranu srednju vrijednost (vidjeti smjernice za izračun u Dodatku 6.).
Chemicals should not be tested above their solubility limit in test medium.
Svrha je ovog ispitivanja utvrditi učinke ispitivane kemikalije na reproduktivnu uspješnost.
Before conducting the experiment it is advisable to consider the statistical power of the tests design and using appropriate statistical methods (4).
Ukupni broj živih potomaka po roditeljskoj životinji trebalo bi izračunati za svaku ispitnu posudu (odnosno ponovljeni uzorak).
In setting the range of concentrations, the following should be borne in mind:
Osim toga, reprodukcija se može izračunati na temelju davanja živih potomaka preživjelih roditeljskih organizama.
When ECx for effects on reproduction is estimated, it is advisable that sufficient concentrations are used to define the ECx with an appropriate level of confidence.
Međutim, ekološki najrelevantnija varijabla odgovora ukupni je broj živih potomaka po roditeljskoj životinji koja ne ugine slučajno [58] ili nenamjerno [59] tijekom ispitivanja.
Test concentrations used should preferably bracket the estimated ECx such that ECx is found by interpolation rather than extrapolation.
Ako roditeljska životinja slučajno ili nenamjerno ugine tijekom ispitivanja ili ako se ispostavi da je riječ o mužjaku, ponovljeni se uzorak isključuje iz analize.
It is an advantage for the following statistical analysis to have more test concentrations (e.g. 10) and fewer replicates of each concentration (e.g. 5 thus holding the total number of vessels constant) and with 10 controls.
U tom se slučaju analiza temelji na smanjenom broju ponovljenih uzoraka.
When estimating the LOEC and/or NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that the reproductive output at that concentration is not significantly lower than that in the control.
Ukratko, kada se za izražavanja učinaka upotrebljavaju LOEC i NOEC ili ECx, preporučuje se izračunati učinak na reprodukciju primjenom obiju prethodno navedenih varijabli odgovora, odnosno
If this is not the case, the test should be repeated with a reduced lowest concentration.
kao ukupni broj živih potomaka po roditeljskoj životinji koja ne ugine slučajno ili nenamjerno tijekom ispitivanja i
When estimating the LOEC and/or NOEC, the highest test concentration should be high enough so that the reproductive output at that concentration is significantly lower than that in the control.
kao broj živih potomaka po preživjeloj roditeljskoj životinji,
If this is not the case, the test should be repeated with an increased highest concentration unless the maximum required test concentration for chronic effects testing (i.e., 10 mg/l) was used as the highest test concentration in the initial test.
i zatim kao konačni rezultat upotrijebiti najnižu vrijednost NOEC-a i LOEC-a ili ECx izračunatu primjenom bilo koje od tih dviju varijabli odgovora.
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (e.g. at 10 mg/l), or when the test chemical is highly likely to be of low/ no toxicity based on lack of toxicity to other organisms and/or low/no uptake, the reproduction test may be performed as a limit test, using a test concentration of e.g.10 mg/l and the control.
Prije primjene statističke analize, npr. postupaka analize varijance (ANOVA), usporedbe tretiranja i kontrole Studentovim t-testom, Dunnettovim testom, Williamsovim testom ili postupnim Jonckheere-Terpstraovim testom, preporučuje se razmotriti pretvorbu podataka ako je to potrebno za ispunjavanje zahtjeva određenog statističkog ispitivanja.
Ten replicates should be used for both the treatment and the control groups.
Kao neparametrijske alternative mogu se razmotriti Dunnov test ili Mann-Whitneyjev test.
When a limit test might need to be done in a flow-through system less replicates would be adequate.
Uobičajena razdioba i homogenost varijance mogu se ispitati primjenom prikladnog statističkog ispitivanja, npr.
A limit test will provide the opportunity to demonstrate that there is no statistically significant effect at the limit concentration, but if effects are recorded a full test will normally be required.
Shapiro-Wilkovog ispitivanja i Leveneovog ispitivanja (p ≤ 0,05).
The appropriate number of replicates should be used (see paragraphs 23-24).
Dunnettov test) ili postupni testovi trenda (npr.
Generally in a well-run test, the coefficient of variation around the mean number of living offspring produced per parent animal in the control(s) should be ≤ 25 %, and this should be reported for test designs using individually held animals.
Williamsov test ili postupni Jonckheere-Terpstraov test) mogu se upotrebljavati kako bi se izračunalo postoje li značajne razlike (p ≤ 0,05) između kontrola i različitih koncentracija ispitivane kemikalije (odabir preporučenog testa u skladu sa Smjernicom OECD-a 54 (4.)).
Test medium renewal
U protivnom, za utvrđivanje NOEC-a i LOEC-a mogle bi se primjenjivati neparametrijske metode (npr.
The frequency of medium renewal will depend on the stability of the test chemical, but should be at least three times per week.
Bonferronijevo-U-ispitivanje u skladu s Holmovim ili Jonckheere-Terpstraovim testom trenda).
If, from preliminary stability tests (see paragraph 7), the test chemical concentration is not stable (i.e. outside the range 80 - 120 % of nominal or falling below 80 % of the measured initial concentration) over the maximum renewal period (i.e. 3 days), consideration should be given to more frequent medium renewal, or to the use of a flow-through test.
Ako je provedeno granično ispitivanje (usporedba kontrole i samo jednog tretiranja) i ako su ispunjeni preduvjeti postupaka parametrijskog ispitivanja (normalnost, homogenost), metrički odgovori mogu se ocijeniti Studentovim testom (t-testom).
When the medium is renewed in semi-static tests, a second series of test vessels are prepared and the parent animals transferred to them by, for example, a glass pipette of suitable diameter.
Ako ti uvjeti nisu ispunjeni, mogu se primjenjivati t-test nejednake varijance (kao što je Welchov test) ili neki neparametrijski test, kao što je Mann-Whitheyjev-U-test.
The volume of medium transferred with the Daphnia should be minimised.
Za utvrđivanje značajnih razlika između kontrola (kontrola i kontrola s otapalom ili dispergentom) mogu se ispitati ponovljeni uzorci za svaku kontrolu kako je opisano za granično ispitivanje.
The results of the observations made during the test should be recorded on data sheets (see examples in Appendixes 4 and 5).
Ako se tim ispitivanjima ne otkriju značajne razlike, svi se kontrolni ponovljeni uzorci i kontrolni ponovljeni uzorci s otapalom mogu objediniti.
If other measurements are required (see paragraph 44), additional observations may be required.
U protivnom, sva tretiranja trebalo bi usporediti s kontrolom s otapalom.
Offspring
Izvješće o ispitivanju treba obuhvaćati sljedeće:
The offspring produced by each parent animal should preferably be removed and counted daily from the appearance of the first brood to prevent them consuming food intended for the parent.
fizičko stanje i relevantna fizičko-kemijska svojstva,
For the purpose of this test method it is only the number of living offspring that needs to be counted, but the presence of aborted eggs or dead offspring should be recorded.
podaci za identifikaciju kemikalije, uključujući čistoću.
Mortality
klon (bez obzira na to je li genetski tipiziran ili nije), dobavljač odnosno izvor (ako su poznati) i uvjeti uzgoja kulture.
Mortality among the parent animals should be recorded preferably daily, or at least as frequently as offspring are counted.
Ako se upotrebljava vrsta različita od vrste Daphnia magna, to bi trebalo dokumentirati i obrazložiti.
Other parameters
primijenjeni postupak ispitivanja (npr. polustatički ili protočni, volumen, količina punjenja kao broj dafnija po litri),
Although this test method is designed principally to assess effects on reproductive output, it is possible that other effects may also be sufficiently quantified to allow statistical analysis.
fotoperiod i intenzitet svjetlosti,
Reproductive output per surviving parent animal, i.e. number of living offspring produced during the test per surviving parent, may be recorded.
plan ispitivanja (npr. broj ponovljenih uzoraka, broj roditeljskih životinja po ponovljenom uzorku),
This may be compared with the main response variable (reproductive output per parent animal in the start of the test which did not inadvertently or accidentally die during the test).
pojedinosti o mediju za uzgoj kulture,
If parental mortality occurs in exposed replicates it should be considered whether or not the mortality follows a concentration-response pattern, e.g. if there is a significant regression of the response versus concentration of the test chemical with a positive slope (a statistical test like the Cochran-Armitage trend test may be used for this).
dodaci organskog materijala ako se upotrebljavaju, uključujući sastav, izvor, način pripreme, TOC/KPK radnih pripravaka, procjenu TOC-a/KPK-a u ispitnom mediju,