natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Spawning rate
Svako ispitivanje trebalo bi uključivati kontrole u kojima su hranjivi medij, ispitni organizam (odabir što je više moguće homogenog biljnog materijala, svježe bočne grane iz pretkultura skraćene na 2,5 cm od baze), okolni uvjeti i postupci isti kao u ispitnim posudama, ali bez ispitivane kemikalije.
A single mature female spawns at least 50-80 eggs per day.
Ako se upotrebljava pomoćno otapalo ili dispergent, potrebna je dodatna kontrola koja sadržava istu koncentraciju otapala/dispergenta kao i posude s ispitivanom kemikalijom.
Depending on the strain, spawning rates may be considerably higher.
Potrebno je barem 10 kontrolnih posuda kao ponovljenih uzoraka (i posuda s otapalom, ako se ono upotrebljava).
The fertilisation rate should be ≥ 70 %.
Ako nije potrebno odrediti NOEC, plan ispitivanja može se izmijeniti tako da se poveća broj koncentracija i smanji broj ponovljenih uzoraka po koncentraciji.
For first time spawning fish, fertilisation rates of the eggs may be lower in the first few spawns.
No svakako je potrebno barem 10 kontrolnih ponovljenih uzoraka.
Static, semi-static renewal, flow-through, 26 ± 1 °C, 24 hrs conditioned test chambers (e.g. 24-well plates 2,5-5 ml per cavity)
Izlaganje
NORMAL ZEBRAFISH DEVELOPMENT AT 26 °C
Svježe bočne grane iz pretkulture skraćene na 2,5 cm od baze nasumično se raspoređuju po ispitnim posudama u aseptičkim uvjetima; svaka ispitna posuda trebala bi sadržavati po jednu bočnu granu dugu 2,5 cm s apikalnim meristemom na jednom kraju.
Fig.
Odabrani biljni materijal u svim posudama trebao bi biti jednake kvalitete.
1: Selected stages of early zebrafish (Danio rerio) development: 0,2 – 1,75 hrs post-fertilisation (from Kimmel et al., 1995 (35)).
Ispitne posude treba nasumično rasporediti po inkubatoru kako bi se minimizirao utjecaj prostornih razlika u intenzitetu svjetlosti i temperaturi.
The time sequence of normal development may be taken to diagnose both fertilisation and viability of eggs (see paragraph 26: Selection of fertilised eggs).
Usto ih je potrebno pri promatranju rasporediti zajedno u blokove ili nasumično premještati posude (ili ih češće premještati).
Fig.
Ako preliminarno ispitivanje stabilnosti pokaže da se koncentracija ispitivane kemikalije ne može održati (tj. izmjerena koncentracija pada ispod 80 % od izmjerene početne koncentracije) tijekom razdoblja ispitivanja (14 dana), preporučuje se polustatičko ispitivanje.
2: Selected stages of late zebrafish (Danio rerio) development (de-chorionated embryo to optimise visibility): 22 – 48 hrs after fertilisation (from Kimmel et al., 1995 (35)).
U tom slučaju biljke bi trebalo izložiti svježe pripremljenim ispitnim i kontrolnim otopinama najmanje jednom tijekom ispitivanja (npr.
Fig.
7. dan).
3: Normal development of zebrafish (Danio rerio) embryos: (1) 0,75 hrs, 2-cell stage; (2) 1 hr, 4-cell stage; (3) 1,2 hrs, 8-cell stage; (4) 1,5 hrs, 16-cell stage; (5) 4,7 hrs, beginning epiboly; (6) 5,3 hrs, approx.
Učestalost izlaganja svježem mediju ovisit će o stabilnosti ispitivane kemikalije; za vrlo nestabilne ili hlapljive kemikalije možda će biti potrebno češće izlaganje da bi se održale približno stalne koncentracije.
50 % epiboly (from Braunbeck & Lammer 2006 (40)).
Ova ispitna metoda ne obuhvaća izlaganje folijarnom primjenom (raspršivanje po lišću).
Layout of 24-well plates
Za rasvjetu bi se trebalo koristiti toplim i/ili hladnim bijelim fluorescentnim svjetlom od 100 – 150 μE m.2 s1 izmjereno kao fotosintetski aktivno zračenje (400 – 700 nm) na točkama koje su jednako udaljene od izvora svjetlosti kao i dno ispitnih posuda (jednako osvjetljenju od 6000 – 9000 lux) te u ciklusu svjetlost-tama od 16: 8 h.
1-5 five test concentrations/chemical;
Metoda detekcije i mjerenja svjetlosti, posebno vrsta senzora, utjecat će na izmjerenu vrijednost.
nC negative control (dilution water);
Sferičnim senzorima (koji reagiraju na svjetlost iz svih kutova iznad i ispod mjerne ravnine) i ‚kosinusnim’ senzorima (koji reagiraju na svjetlost iz svih kutova iznad mjerne ravnine) daje se prednost u odnosu na usmjerene senzore jer bolje mjere vrijednosti za višetočkasti izvor svjetlosti kakav je ovdje opisan.
iC internal plate control (dilution water);
Temperatura u ispitnim posudama trebala bi biti 23 ± 2 °C.
pC positive control (3,4-DCA 4 mg/l);
Posebnu pozornost treba obratiti na pomak pH-vrijednosti u nekim slučajevima, npr. kad se ispituju nestabilne kemikalije ili metali; pH-vrijednost trebala bi ostati u rasponu 6 – 9.
sC solvent control.
Za dodatne smjernice vidjeti (5.).
Scheme of the zebrafish embryo acute toxicity test procedure (from left to right): production of eggs, collection of the eggs, pre-exposure immediately after fertilisation in glass vessels, selection of fertilised eggs with an inverted microscope or binocular and distribution of fertilised eggs into 24-well plates prepared with the respective test concentrations/controls, n = number of eggs required per test concentration/control (here 20), hpf = hours post-fertilisation.
Ispitivanje završava 14 dana nakon prenošenja biljaka u ispitne posude.
Waste
Mjerenja i analitička određivanja
24 h pre-conditioning n fertilised eggs per test concentration/ control Selection of fertilised eggs & fertilisation rate determination Glass vessel with respective test concentrations/ controls at volumes to fully cover eggs
Na početku ispitivanja duljina glavnog izdanka ispitnog organizma je 2,5 cm (vidjeti stavak 29.); mjeri se pomičnim mjerilom (vidjeti Dodatak 4.) ili fotografiranjem i analizom slike.
eggs per conc./ control
Duljinu glavnog izdanka ispitnog organizma koji izgleda normalno ili neuobičajeno treba odrediti na početku ispitivanja, najmanje jedanput tijekom 14-dnevnog razdoblja izlaganja i na kraju ispitivanja.
Spawning unit
Napomena: kao alternativa za one kojima nije dostupna analiza slika, ako je radna površina sterilizirana prije stavljanja biljaka u ispitne posude, duljina glavnog izdanka može se izmjeriti i sterilnim pomičnim mjerilom na početku i tijekom ispitivanja.
ATLAS OF LETHAL ENDPOINTS FOR THE ZEBRAFISH EMBRYO ACUTE TOXICITY TEST
Treba zabilježiti sve promjene u razvoju biljaka npr. deformaciju izdanka, izgled, naznake nekroze, klorozu, raspadanje ili gubitak sposobnosti plutanja te promjene duljine i izgleda korijenja.
The following apical endpoints indicate acute toxicity and, consequently, death of the embryos: coagulation of the embryo, non-detachment of the tail, lack of somite formation and lack of heartbeat.
Treba zabilježiti i bitne značajke ispitnog medija (npr. prisutnost neotopljenog materijala, rast algi, gljivica ili bakterija u ispitnoj posudi).
The following micrographs have been selected to illustrate these endpoints.
Uz određivanja duljine glavnog izdanka tijekom ispitivanja, trebalo bi procijeniti i učinke ispitivane kemikalije na tri sljedeće mjerne varijable (ili više njih):
Coagulation of the embryo:
ukupna duljina bočnih grana
Under bright field illumination, coagulated zebrafish embryos show a variety of intransparent inclusions.
ukupna duljina izdanka
Figure 2
ukupna duljina korijena
Lack of somite formation:
svježa masa
Although retarded in development by approx.
suha masa
10 hrs, the 24 hrs old zebrafish embryo in (a) shows well-developed somites (→), whereas the embryo in (b) does not show any sign of somite formation (→).
broj pršljena
Although showing a pronounced yolk sac oedema (*), the 48 hrs old zebrafish embryo in (c) shows distinct formation of somites (→), whereas the 96 hrs old zebrafish embryo depicted in (d) does not show any sign of somite formation (→).
Napomena 1.:
Note also the spinal curvature (scoliosis) and the pericardial oedema (*) in the embryo shown in (d).
opažanja tijekom ispitivanja za utvrđivanje raspona mogu pomoći u odabiru odgovarajućih dodatnih mjerenja šest navedenih varijabli.
Bud in lateral view (a: →; 96 hrs old zebrafish embryo).
Napomena 2.:
Note also the lack of the eye bud (*).
svakako je poželjno odrediti svježu i suhu masu (parametri iv. i v.).
Figure 4
Napomena 3.:
Lack of heartbeat is, by definition, difficult to illustrate in a micrograph.
zbog činjenice da saharoza i svjetlost (izloženost korijenja svjetlosti tijekom ispitivanja) mogu utjecati na nositelje auksina (biljni hormon rasta) i da neke kemikalije mogu imati način djelovanja sličan djelovanju auksina, upitno je treba li uključiti krajnju točku koja se odnosi na korijen (parametar iii.).
Lack of heartbeat is indicated by non-convulsion of the heart (double arrow).
Napomena 4.:
Immobility of blood cells in, e.g. the aorta abdominalis (→ in insert) is not an indicator for lack of heartbeat.
rezultati međulaboratorijskog ispitivanja pokazuju velike koeficijente varijacije (> 60 %) za ukupnu duljinu bočnih grana (parametar i.).
Note also the lack of somite formation in this embryo (*, homogenous rather than segmental appearance of muscular tissues).
Ukupna duljina bočnih grana u svakom je slučaju uključena u mjeru ukupne duljine izdanka (parametar ii.) koja pokazuje prihvatljivije koeficijente varijacije od < 30 %.
The observation time to record an absence of heartbeat should be at least of one minute with a minimum magnification of 80×.
Napomena 5.:
C.50 Sediment-free Myriophyllum spicatum toxicity test
s obzirom na navedeno, glavne krajnje točke koje je preporučljivo mjeriti su: ukupna duljina izdanka, svježa masa i suha masa (parametri ii., iv. i v.); mjerenje parametra vi. (broj pršljena) ovisi o izboru izvođača pokusa.
This test method is equivalent to OECD test guideline 238 (2014).
Prednost je duljine glavnog izdanka i broja pršljena u tome što ih se može odrediti za svaku ispitnu i kontrolnu posudu na početku, za vrijeme i na kraju ispitivanja fotografiranjem i analizom slike, iako se može upotrijebiti i (sterilno) pomično mjerilo.
It is designed to assess the toxicity of chemicals to Myriophyllum spicatum, a submersed aquatic dicotyledon, a species of the water milfoils family.
Ukupna duljina bočnih grana, ukupna duljina korijena (kao zbroj svih bočnih grana ili korijena) te ukupna duljina izdanka (kao zbroj duljine glavnog izdanka i ukupne duljine bočnih grana) mogu se mjeriti pomičnim mjerilom na kraju izlaganja.
It is based on an ASTM existing test method (1) modified as a sediment-free test system (2) to estimate the intrinsic ecotoxicity of test chemicals (independent of the distribution-behaviour of the test chemical between water and sediment).
Svježu i/ili suhu masu trebalo bi odrediti na početku ispitivanja na uzorku pretkulture reprezentativnom za biljni materijal koji se upotrebljava na početku ispitivanja te na kraju ispitivanja na biljnom materijalu iz svake ispitne i kontrolne posude.
A test system without sediment has a low analytical complexity (only in the water phase) and the results can be analysed in parallel and/or comparison with those obtained in Lemna sp. test (3); in addition, the required sterile conditions allow to keep the effects of microorganisms and algae (chemical uptake/ degradation, etc.) as low as possible.
Ukupna duljina bočnih grana, ukupna duljina izdanka, ukupna duljina korijena, svježa masa, suha masa i broj pršljena mogu se odrediti kako slijedi:
This test does not replace other aquatic toxicity tests; it should rather complement them so that a more complete aquatic plant hazard and risk assessment is possible.
duljina bočnih grana može se odrediti mjerenjem svih bočnih grana pomičnim mjerilom na kraju izlaganja.
The test method has been validated by a ring-test (4).
Ukupna duljina bočnih grana zbroj je duljina svih bočnih grana u svakoj ispitnoj i kontrolnoj posudi;
Details of testing with renewal (semi-static) and without renewal (static) of the test solution are described.
duljina glavnog izdanka može se odrediti analizom slike ili pomičnim mjerilom.
Depending on the objectives of the test and the regulatory requirements, the use of semi-static method is recommended, e.g. for substances that are rapidly lost from solution as a result of volatilisation, adsorption, photodegradation, hydrolysis, precipitation or biodegradation.
Ukupna duljina izdanka zbroj je ukupne duljine bočnih grana i duljine glavnog izdanka u svakoj ispitnoj i kontrolnoj posudi na kraju izlaganja;
Further guidance is given in (5).
ukupna duljina korijena može se odrediti mjerenjem svih korijena pomičnim mjerilom na kraju izlaganja.
This test method applies to substances, for which the test method has been validated, (see details in the ring-test report (4)) or to formulations, or known mixtures; if a mixture is tested, its constituents should be as far as possible identified and quantified.
Ukupna duljina korijena zbroj je duljina svih korijena u svakoj ispitnoj i kontrolnoj posudi;
The sediment-free Myriophyllum spicatum test method complements the water-sediment Myriophyllum spicatum Toxicity Test (6).
svježa masa može se odrediti vaganjem ispitnih organizama na kraju izlaganja.
Before use of the test method for the testing of a mixture intended for a regulatory purpose, it should be considered whether, and if so why, it may provide adequate results for that purpose.
Sav biljni materijal iz svake ispitne i kontrolne posude ispire se destiliranom vodom i lagano suši celuloznim papirom.
Continuously growing plant cultures of Myriophyllum spicatum (only in modified Andrews' medium, see Appendix 2) are allowed to grow as monocultures in different concentrations of the test chemical over a period of 14 days in a sediment-free test system.
Nakon te pripreme svježa masa određuje se vaganjem.
The objective of the test is to quantify chemical-related effects on vegetative growth over this period based on assessments of selected measurement variables.
Početna biomasa (svježa masa) određuje se na temelju uzorka ispitnih organizama uzetog iz iste šarže koja je upotrijebljena za inokulaciju ispitnih posuda;
Growth of shoot length, of lateral branches and roots as well as development of fresh and dry weight and increase of whorls are the measurement variables.
nakon pripreme za određivanje svježe mase, ispitni organizmi suše se na 60 °C dok ne dosegnu konstantnu masu.
In addition, account is taken of distinctive qualitative changes in test organisms, such as disfigurement or chlorosis and necrosis indicated by yellowing or white and brown colouring.
Ta je masa suha masa.
To quantify chemical-related effects, growth in the test solutions is compared with that of the controls and the concentration bringing about a specified x % inhibition of growth is determined and expressed as the ECx; “x” can be any value depending on the regulatory requirements, e.g. EC10, EC20, EC50.
Početna biomasa (suha masa) određuje se na temelju uzorka ispitnih organizama uzetog iz iste šarže koja je upotrijebljena za inokulaciju ispitnih posuda;
It should be noted that estimates of EC10 and EC20 values are only reliable and appropriate in tests where coefficients of variation in control plants fall below the effect level being estimated, i.e. coefficients of variation should be < 20 % for robust estimation of an EC20.
broje se svi pršljeni na glavnom izdanku.
Both average specific growth rate (estimated from assessments of main shoot length and three additional measurement variables) and yield (estimated from the increase in main shoot length and three additional measurement variables) of untreated and treated plants should be determined.
Učestalost mjerenja i analitičkih određivanja
Specific growth rate (r) and yield (y) are subsequently used to determine the ErCx (e.g. ErC10, ErC20, ErC50) and EyCx (e.g. EyC10, EyC20, EyC50), respectively.
Ako se primjenjuje statičko ispitivanje, trebalo bi na početku i kraju ispitivanja odrediti pH svake tretirane skupine.
In addition, the lowest observed effect concentration (LOEC) and the no observed effect concentration (NOEC) may be statistically determined.
Ako se primjenjuje polustatičko ispitivanje, pH bi trebalo izmjeriti u svakoj šarži ‚svježe’ ispitne otopine prije svakog obnavljanja te u odgovarajućim ‚potrošenim’ otopinama.
An analytical method, with adequate sensitivity for quantification of the test chemical in the test medium, should be available.
Intenzitet svjetlosti trebalo bi mjeriti u uzgojnoj komori, inkubatoru odnosno prostoriji, na točkama koje su jednako udaljene od izvora svjetlosti kao i ispitni organizmi.
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes the structural formula, purity and impurities, water solubility, stability in water and light, acid dissociation constant (pKa), partition coefficient octanol-water (Kow), vapour pressure and biodegradability.
Mjerenja bi trebalo provesti najmanje jedanput tijekom ispitivanja.
Water solubility and vapour pressure can be used to calculate Henry's Law constant, which will indicate if significant losses of the test chemical during the test period are likely.
Usto najmanje jedanput dnevno (ili neprekidno, s pomoću uređaja za automatsko bilježenje podataka) treba bilježiti temperaturu medija u zamjenskoj posudi koja se drži u istim uvjetima u uzgojnoj komori, inkubatoru odnosno prostoriji.
This will help indicate whether particular steps to control such losses should be taken.
Koncentracije ispitivane kemikalije (ili više kemikalija) određuju se u prikladnim razmacima tijekom ispitivanja.
Where information on the solubility and stability of the test chemical are uncertain, it is recommended that these be assessed under the conditions of the test, i.e. growth medium, temperature, lighting regime to be used in the test.
U statičkom ispitivanju koncentracije se moraju odrediti barem na početku i na kraju ispitivanja.
The pH control of the test medium is particularly important, e.g. when testing metals or substances which are hydrolytically unstable.
U polustatičkom ispitivanju u kojemu se očekuje da koncentracija ispitivane kemikalije (ili više kemikalija) neće ostati u granicama od ± 20 % nazivne koncentracije potrebno je analizirati sve svježe pripremljene ispitne otopine i ponoviti analizu pri svakom obnavljanju otopine.
Further guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to test is provided in a OECD Guidance Document (5).
Međutim, u svim ispitivanjima u kojima izmjerene početne koncentracije ispitivane kemikalije (ili više kemikalija) nisu u granicama od ± 20 % nazivne koncentracije, ali ima dovoljno dokaza da su početne koncentracije ponovljive i stabilne (tj. unutar područja od 80 – 120 % početne koncentracije), kemijska se određivanja mogu provoditi samo na najvišoj i najnižoj ispitnoj koncentraciji.
For the test to be valid, the doubling time of main shoot length in the control must be less than 14 days.
U svakom slučaju, određivanje ispitnih koncentracija prije obnavljanja potrebno je provesti samo na po jednoj posudi za svaku ispitnu koncentraciju (ili na združenom sadržaju posuda iste koncentracije).
Using the media and test conditions described in this test method, this criterion can be attained using a static or semi-static test regime.
Ako se može dokazati da se ispitna koncentracija tijekom cijelog ispitivanja na zadovoljavajući način održavala u granicama od ± 20 % nazivne ili izmjerene početne koncentracije, analiza rezultata može se temeljiti na nazivnim ili izmjerenim početnim vrijednostima.
The mean coefficient of variation for yield based on measurements of shoot fresh weight (i.e. from test initiation to test termination) and the additional measurement variables (see paragraph 37) in the control cultures do not exceed 35 % between replicates.
Ako je odstupanje od nazivne ili izmjerene početne koncentracije veće od ± 20 %, analiza rezultata treba se temeljiti na srednjoj geometrijskoj koncentraciji tijekom izlaganja ili na modelima kojima se opisuje pad koncentracije ispitivane kemikalije (5.).
More than 50 % of the replicates of the control group are kept sterile over the exposure period of 14 days, which means visibly free of contamination by other organisms such as algae, fungi and bacteria (clear solution).
U određenim okolnostima, npr. kad preliminarno ispitivanje ukazuje na to da ispitivana kemikalija ne djeluje toksično u koncentraciji do 100 mg/l ili do granice svoje topljivosti u ispitnom mediju, odnosno, ako je riječ o formulaciji, do granice disperzivnosti, može se provesti ispitivanje granične koncentracije koje uključuje usporedbu odgovora kontrolne skupine s odgovorom jedne tretirane skupine (100 mg/l ili koncentracija koja odgovara granici topljivosti).
Note: Guidance on how to assess sterility is provided in the ring-test report (4).
Preporučuje se da se uz ispitivanje granične koncentracije svakako provede i analiza koncentracije za izlaganje.
REFERENCE CHEMICAL
Svi navedeni ispitni uvjeti i kriteriji valjanosti vrijede i za ispitivanje granične koncentracije, s time da broj tretiranih ponovljenih uzoraka treba udvostručiti.
Reference chemical(s), such as 3,5-dichlorophenol used in the ring test (4), may be tested as a mean of checking the test procedure; from the ring test data, the mean EC50-values of 3,5-DCP for the different response variables (see paragraphs 37-41 of this test method) are between 3,2 mg/l and 6,9 mg/l (see ring test report for details about confidence interval for these values).
Rast u kontrolnoj i tretiranoj skupini može se analizirati statističkim testom za usporedbu srednjih vrijednosti, npr.
It is advisable to test a reference chemical at least twice a year or, where testing is carried out at a lower frequency, in parallel to the determination of the toxicity of a test chemical.
Studentovim t-testom.
All equipment in contact with the test media should be made of glass or other chemically inert material.
Varijable odgovora
Glassware used for culturing and testing purposes should be cleaned of chemical contaminants that might leach into the test medium and should be sterile.
Svrha je ispitivanja odrediti učinke ispitivane kemikalije na vegetativni rast klasastog krocnja (Myriophyllum spicatum).
The test vessels should be long enough for the shoot in the control vessels to grow in the water phase without reaching the surface of the test medium at the end of the test.
U ovoj ispitnoj metodi opisane su dvije varijable odgovora:
Thick-walled borosilicate glass test tubes without lip, inner diameter approximately 20 mm, length approximately 250 mm, with aluminium caps are recommended.
Prosječna specifična brzina rasta
Since the modified Andrews' medium contains sucrose (which stimulates the growth of fungi and bacteria), the test solutions have to be prepared under sterile conditions.
ta se varijabla odgovora izračunava na temelju promjena logaritama duljine glavnog izdanka, i usto na temelju promjena logaritama drugih mjernih parametara – ukupne duljine izdanka, svježe mase, suhe mase ili broja pršljena – tijekom vremena (izraženo po danu) u kontrolama i svim tretiranim skupinama.
All liquids as well as equipment are sterilised before use.
Napomena: za mjerne parametre ukupnu duljinu bočnih grana i ukupnu duljinu korijena ne može se izračunati prosječna specifična brzina rasta.
Sterilisation is carried out via heated air treatment (210 °C) for 4 hours or autoclaving for 20 minutes at 121 °C.
Na početku ispitivanja ispitni organizam nema bočne grane ni korijenje (nakon pripreme iz pretkulture); nakon početne vrijednosti nula, izračun prosječne specifične brzine rasta nije definiran;
In addition, all flasks, dishes, bowls etc. and other equipment undergo flame treatment at a sterile workbench just prior to use.
Prirast
The cultures and test vessels should not be kept together.
ta se varijabla odgovora izračunava na temelju promjena duljine glavnog izdanka, i usto na temelju promjena drugih mjernih parametara – najbolje ukupne duljine izdanka, svježe mase, suhe mase ili broja pršljena, te drugih parametara ako se smatraju korisnima, u kontrolama i svim tretiranim skupinama do kraja ispitivanja.
This is best achieved using separate environmental growth chambers, incubators, or rooms.
Procjene toksičnosti trebale bi se temeljiti na duljini glavnog izdanka i trima dodatnim mjernim varijablama (najbolje ukupna duljina izdanka, svježa masa, suha masa ili broj pršljena, vidjeti stavak 37. i napomene 2., 4. i 5. uz taj stavak) jer neke kemikalije mogu utjecati na druge mjerne varijable znatno više nego na duljinu glavnog izdanka.