natgillin/translations-raw huggingface dataset:
All three measurements can be made if the appropriate image software analyser system is used.
Povećanje migracije DNK u prisutnosti jasnih dokaza o citotoksičnosti potrebno je tumačiti s oprezom.
However, the % tail DNA (also known as % tail intensity) is recommended for the evaluation and interpretation of results (12) (40) (41) (42), and is determined by the DNA fragment intensity in the tail expressed as a percentage of the cell's total intensity (13).
Predložena su mnoga mjerila citotoksičnosti, od kojih se histopatološke promjene smatraju relevantnim mjerilom tkivne toksičnosti.
Tissue damage and cytotoxicity
Zapažanja poput upale, infiltracije stanica, apoptotskih ili nekrotskih promjena povezana su s povećanom migracijom DNK; međutim, kako je pokazalo validacijsko ispitivanje što ga je proveo JaCVAM (12.), ne postoji konačan popis histopatoloških promjena koje su uvijek povezane s povećanom migracijom DNK.
Positive findings in the comet assay may not be solely due to genotoxicity, target tissue toxicity may also result in increases in DNA migration (12) (41).
Fantomske stanice (hedgehogs, clouds, ghost cells) jesu stanice na čijoj se mikroskopskoj slici vidi mala glava, ili glava ne postoji, i veliki difuzni rep te se smatraju teško oštećenim stanicama, iako nije moguće sa sigurnošću odrediti njihovu etiologiju (vidjeti Dodatak 3.).
Conversely, low or moderate cytotoxicity is often seen with known genotoxins (12), showing that it is not possible to distinguish DNA migration induced by genotoxicity versus that induced by cytotoxicity in the comet assay alone.
Zbog izgleda fantomskih stanica mjerenje postotka DNK u repu s pomoću analize slike nije pouzdano te bi stoga takve stanice trebalo ocijeniti odvojeno.
However, where increases in DNA migration are observed, it is recommended that an examination of one or more indicators of cytotoxicity is performed as this can aid in interpretation of the findings.
Pojavu fantomskih stanica trebalo bi zabilježiti i navesti u izvješću, a svako relevantno povećanje za koje se smatra da je uzrokovano ispitivanom kemikalijom trebalo bi istražiti i tumačiti s oprezom.
Increases in DNA migration in the presence of clear evidence of cytotoxicity should be interpreted with caution.
Poznavanje potencijalnog načina djelovanja ispitivanih kemikalija može pomoći pri tim razmatranjima.
Many measures of cytotoxicty have been proposed and of these histopathological changes are considered a relevant measure of tissue toxicity.
S obzirom na to da je životinja pokusna jedinica, trebalo bi navesti podatke za pojedinačne životinje i sažetak rezultata u obliku tablice.
Observations such as inflammation, cell infiltration, apoptotic or necrotic changes have been associated with increases in DNA migration, however, as demonstrated by the JaCVAM validation trial (12) no definitive list of histopathological changes that are always associated with increased DNA migration is available.
Zbog hijerarhijske prirode podataka preporučuje se odrediti medijan postotka DNK u repu za svako predmetno stakalce te izračunati srednju vrijednost medijana za svaku životinju (12.).
Changes in clinical chemistry measures (e.g. AST, ALT), can also provide useful information on tissue damage and additional indicators such as caspase activation, TUNEL stain, Annexin V stain, etc. may also be considered.
Potom se određuje srednja vrijednost pojedinačnih srednjih vrijednosti dobivenih za životinje kako bi se dobila srednja vrijednost za skupinu.
However, there are limited published data where the latter have been used for in vivo studies and some may be less reliable than others.
Sve te vrijednosti trebalo bi navesti u izvješću.
Hedgehogs (or clouds, ghost cells) are cells that exhibit a microscopic image consisting of a small or non-existent head, and large diffuse tails and are considered to be heavily damaged cells, although the etiology of the hedgehogs is uncertain (see Appendix 3).
Mogu se primijeniti i alternativni pristupi (vidjeti stavak 53.) ako su znanstveno i statistički opravdani.
Due to their appearance, % tail DNA measurements by image analysis are unreliable and therefore hedgehogs should be evaluated separately.
Za statističku analizu mogu se primijeniti različiti pristupi (58., 59., 60., 61.).
The occurrence of hedgehogs should be noted and reported and any relevant increase thought to be due to the test chemical should be investigated and interpreted with care.
Pri odabiru statističkih metoda trebalo bi uzeti u obzir potrebu za eventualnim pretvaranjem podataka (npr. u logaritme ili kvadratne korijene) i/ili dodavanjem malog broja (npr.
Knowledge of the potential mode of action of the test chemicals may help with such considerations.
0,001) svim vrijednostima (čak i nultima) kako bi se ublažili učinci nultih staničnih vrijednosti, kako je objašnjeno u literaturi na koju se upućuje prethodno u tekstu.
The animal is the experimental unit and therefore both individual animal data and summarized results should be presented in tabular form.
U Dodatku 2. navedeni su detalji o analizi interakcija između tretiranja i spolova u slučaju kada se upotrebljavaju oba spola te o naknadnoj analizi podataka ovisno o tome jesu li ili nisu utvrđene razlike.
All of these values should be included in the report.
b. istodobne pozitivne kontrole (vidjeti stavak 29.) trebale bi inducirati odgovore koji su u skladu s onima koji su dobiveni u bazi podataka o prijašnjim pozitivnim kontrolama te uzrokovati statistički značajno povećanje u usporedbi s istodobnom negativnom kontrolom;
Alternative approaches (see paragraph 53) may be used if scientifically and statistically justified.
c. analiziran je odgovarajući broj stanica i doza (stavak 52. i stavci od 36. do 38.);
Statistical analysis can be done using a variety of approaches (58) (59) (60) (61).
d. kriteriji za odabir najveće doze u skladu su s kriterijima opisanima u stavku 36.
When selecting the statistical methods to be used, the need for transformation (e.g. log or square root) of the data and/or addition of a small number (e.g. 0,001) to all (even non-zero) values to mitigate the effects of zero cell values, should be considered as discussed in the above references.
Pod uvjetom da su svi kriteriji prihvatljivosti ispunjeni, ispitivana kemikalija smatra se jasno pozitivnom ako:
Details of analysis of treatment/sex interactions when both sexes are used, and subsequent analysis of data where either differences or no differences are found is given in Appendix 2.
a. najmanje jedna od ispitnih doza pokazuje statistički značajno povećanje u usporedbi s istodobnom negativnom kontrolom;
Data on toxicity and clinical signs should also be reported.
c. bilo koji od rezultata nalazi se izvan raspona distribucije prijašnjih podataka o negativnim kontrolama za određenu vrstu, nosač, put primjene, tkivo i broj primjena.
The concurrent negative control is considered acceptable for addition to the laboratory historical negative control database as described in paragraph 16
Ako su svi navedeni kriteriji ispunjeni, smatra se da je ispitivana kemikalija sposobna uzrokovati lomove lanaca DNK u tkivima koja se proučavaju u tom ispitnom sustavu.
Concurrent positive controls (see paragraph 29) should induce responses that are compatible with those generated in the historical positive control database and produce a statistically significant increase compared with the concurrent negative control.
Ako su ispunjeni samo jedan ili dva navedena kriterija, vidjeti stavak 62.
Adequate numbers of cells and doses have been analysed (paragraphs 52 and 36-38).
Pod uvjetom da su svi kriteriji prihvatljivosti ispunjeni, ispitivana kemikalija smatra se jasno negativnom ako:
The criteria for the selection of highest dose are consistent with those described in paragraph 36.
b. odgovarajući test trenda pokazuje da ne postoji povećanje povezano s koncentracijom,
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered to be clearly positive if:
c. svi se rezultati nalaze unutar raspona distribucije prijašnjih podataka o negativnim kontrolama za određenu vrstu, nosač, put primjene, tkivo i broj primjena,
at least one of the test doses exhibits a statistically significant increase compared with the concurrent negative control,
d. dokazano je postojanje izravnih ili neizravnih dokaza o izloženosti ciljnog tkiva (ciljnih tkiva) ili toksičnosti za to tkivo (ta tkiva).
any of the results are outside the distribution of the historical negative control data for a given species, vehicle, route, tissue, and number of administrations.
Tada se smatra da ispitivana kemikalija nije sposobna uzrokovati lomove lanaca DNK u tkivima koja se proučavaju u tom ispitnom sustavu.
When all of these criteria are met, the test chemical is then considered able to induce DNA strand breakage in the tissues studied in this test system.
U slučaju kada odgovor nije ni jasno negativan niti jasno pozitivan (tj. nisu ispunjeni svi kriteriji koji su navedeni u stavku 59. ili 60.) te kako bi se utvrdila biološka relevantnost rezultata, podatke bi trebalo ocijeniti stručnom prosudbom i/ili bi trebalo provesti dodatna istraživanja ako je to znanstveno opravdano.
If only one or two of these criteria are satisfied, see paragraph 62.
Moglo bi biti korisno pregledati dodatne stanice (prema potrebi) ili ponoviti pokus s eventualno optimiziranim pokusnim uvjetima (npr. razmak između doza, drugi putovi primjene, druga vremena uzorkovanja ili druga tkiva).
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered clearly negative if:
U rijetkim slučajevima, čak i nakon dodatnih istraživanja, skup podataka neće omogućiti donošenje zaključka o tome je li rezultat pozitivan ili negativan te će se stoga zaključiti da je dvosmislen.
there is no concentration-related increase when evaluated with an appropriate trend test.
Da bi se procijenila biološka relevantnost pozitivnog ili dvosmislenog rezultata, potrebne su informacije o citotoksičnosti za ciljno tkivo (vidjeti stavke od 54. do 55.).
all results are inside the distribution of the historical negative control data for a given species, vehicle, route, tissue, and number of administrations.
Ako se pozitivni ili dvosmisleni rezultati uoče jedino u prisutnosti jasnih znakova citotoksičnosti, zaključuje se da je istraživanje dvosmisleno u pogledu genotoksičnosti, osim ako postoji dovoljno informacija koje omogućuju donošenje konačnog zaključka.
direct or indirect evidence supportive of exposure of, or toxicity to, the target tissue(s) has been demonstrated.
Ako je negativan rezultat istraživanja popraćen znakovima toksičnosti pri svim ispitanim dozama, može biti preporučljivo provesti dodatno istraživanje s netoksičnim dozama.
The test chemical is then considered unable to induce DNA strand breakage in the tissues studied in this test system.
izvor, broj serije, ako su dostupni,
In case the response is neither clearly negative nor clearly positive (i.e. not all the criteria listed in paragraphs 59 or 60 are met) and in order to assist in establishing the biological relevance of a result, the data should be evaluated by expert judgement and/or further investigations conducted, if scientifically justified.
stabilnost ispitivane kemikalije, rok uporabe, ili datum za ponovnu analizu ako je poznat.
Scoring additional cells (where appropriate) or performing a repeat experiment possibly using optimised experimental conditions (e.g. dose spacing, other routes of administration, other sampling times or other tissues) could be useful.
Otapalo/nosač:
In rare cases, even after further investigations, the data set will preclude making a conclusion of positive or negative results, and will therefore be concluded as equivocal.
obrazloženje za odabir otapala/nosača,
To assess the biological relevance of a positive or equivocal result, information on cytotoxicity at the target tissue is required (see paragraphs 54-55).
priprema formulacija za doziranje,
Where positive or equivocal findings are observed solely in the presence of clear evidence of cytotoxicity, the study would be concluded as equivocal for genotoxicity unless there is enough information that is supportive of a definitive conclusion.
analitička određivanja formulacija (tj. stabilnost, homogenost, nominalne koncentracije).
In cases of a negative study outcome where there are signs of toxicity at all doses tested, further study at non-toxic doses may be advisable.
upotrijebljena vrsta/subpopulacija te znanstveno i etičko obrazloženje njihova odabira,
source, lot number if available;
podrijetlo, uvjeti smještaja, prehrana, obogaćivanje okoliša itd.,
stability of the test chemical, limit date for use, or date for re-analysis if known.
pojedinačna tjelesna masa životinja na početku i na kraju ispitivanja, uključujući raspon tjelesnih masa, srednju vrijednost i standardno odstupanje za svaku skupinu.
Solvent/vehicle:
podaci iz studije za utvrđivanje raspona (ako je provedena),
justification for choice of solvent/vehicle;
obrazloženje odabira puta primjene,
preparation of dose formulations;
mjesto ubrizgavanja (za studije s potkožnom ili intravenoznom primjenom),
analytical determinations on formulations (e.g. stability, homogeneity, nominal concentrations).
metode pripremanja uzoraka, ovisno o slučaju, histopatološke analize, posebno za kemikalije koje su dale pozitivan rezultat u komet-testu,
species/strain used and scientific and ethical justifications for the choice;
obrazloženje odabira tkiva,
source, housing conditions, diet, enrichment, etc.;
metode kojima se provjerava je li ispitivana kemikalija dospjela u ciljno tkivo ili krvotok, ako se dobiju negativni rezultati,
individual weight of the animals at the start and at the end of the test, including body weight range, mean and standard deviation for each group.
pojedinosti o kvaliteti hrane i vode,
results from the range-finding study (if conducted);
detaljan opis rasporeda tretiranja i uzorkovanja te obrazloženje odabira (npr. toksikokinetički podaci, ako su dostupni),
rationale for route of administration;
metoda ublažavanja bolova, analgezija,
site of injection (for subcutaneous or intravenous studies);
postupak izdvajanja i očuvanja tkiva,
methods for sample preparation, where available, histopathological analyses, especially for a chemical giving a positive comet response;
metode pripremanja suspenzije pojedinačnih stanica/jezgri,
rationale for tissue selection;
izvor i brojevi serija svih reagensa (ako je moguće),
methods for verifying that the test chemical reached the target tissue, or general circulation, if negative results are obtained;
metode procjene citotoksičnosti,
details of diet and water quality;
uvjeti elektroforeze,
detailed description of treatment and sampling schedules and justifications for the choices (e.g. toxicokinetic data, where available);
opća klinička zapažanja, ako postoje, prije i tijekom razdoblja ispitivanja za svaku životinju,
method of pain relief, analgesia;
dokazi o citotoksičnosti, ako je provedena analiza,
procedures for isolating and preserving tissues;
za istraživanja dulja od tjedan dana: pojedinačna tjelesna masa životinja tijekom istraživanja, uključujući raspon tjelesnih masa, srednju vrijednost i standardno odstupanje za svaku skupinu; potrošnja hrane,
methods for preparing single cell/nucleus suspension;
odnos između doze i odgovora, ako je vidljiv,
source and lot numbers of all reagents (where possible);
za svako tkivo/životinju, postotak DNK u repu (ili drugi parametar, ako je izabran) te vrijednosti medijana po predmetnom stakalcu, srednje vrijednosti po životinji i srednje vrijednosti po skupini,
methods for evaluating cytotoxicity;
podaci o istodobnim negativnim kontrolama i podaci o negativnim kontrolama iz prijašnjih ispitivanja s rasponima, srednjim vrijednostima/medijanima i standardnim odstupanjima za svako pregledano tkivo,
electrophoresis conditions;
podaci o istodobnim pozitivnim kontrolama i podaci o pozitivnim kontrolama iz prijašnjih ispitivanja,
staining techniques used; and
za druga tkiva osim jetre, krivulja doza – odgovor koja odgovara pozitivnoj kontroli.
methods for scoring and measuring comets.
Krivulja se može utvrditi na temelju podataka prikupljenih tijekom dokazivanja tehničke osposobljenosti (vidjeti stavke 16. do 17.) i trebala bi biti popraćena obrazloženjem, s upućivanjima na aktualnu literaturu, koje pokazuje da opseg i disperzija odgovora odgovaraju kontrolama u predmetnom tkivu,
General clinical observations, if any, prior to and throughout the test period for each animal;
primijenjene statističke analize i metode te kriteriji prema kojima se odgovor smatra pozitivnim, negativnim ili dvosmislenim,
evidence of cytotoxicity if performed;
učestalost fantomskih stanica u svakoj skupini i po životinji.
for studies longer than one week: Individual body weights during the study, including body weight range, mean and standard deviation for each group; food consumption;
Durand (1990), Heterogeneity in radiation-induced DNA damage and repair in tumor and normal cells using the ‚Comet’ assay, Radiation Research, Vol.
dose-response relationship, where evident;
122/1, str.
for each tissue/animal, the % tail DNA (or other measures, if chosen) and median values per slide, mean values per animal and mean values per group;
86.–94.
for tissues other than liver, a dose-response curve using the positive control.
OECD (2002), ‚Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation’, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No. 19, OECD Publishing, Paris.
This can be from data collected during the demonstration of proficiency (see paragraphs 16-17) and should be accompanied by a justification, with citations to current literature, for the appropriateness of the magnitude and scatter of the responses to the controls in that tissue;
Elektroforeza pojedinačnih stanica u agaroznom gelu u alkalnim uvjetima
statistical analyses and methods applied; and criteria for considering a response as positive, negative or equivocal;
osjetljiva tehnika za otkrivanje primarnih oštećenja DNK na razini pojedinačnih stanica/jezgri.
frequency of hedgehogs in each group and per animal.
Komet
Durand (1990), Heterogeneity in radiation-induced DNA damage and repair in tumor and normal cells using the “Comet” assay, Radiation Research, Vol.
oblik koji poprimaju nukleoidi pod utjecajem jednog od elektroforetskih polja, nazvan tako zbog sličnosti s kometima: glava je jezgra, a rep čini DNK koji migrira od jezgre u električnom polju.
122/1, pp. 86-94.
Kritična varijabla/parametar
Chapter B.8 of this Annex: Subacute Inhalation Toxicity: 28-Day Study.
to je varijabla protokola čija mala promjena može u velikoj mjeri utjecati na zaključak testa.
Chapter B.29 of this Annex: Subchronic Inhalation Toxicity: 90-day Study.
Kritične varijable mogu biti specifične za određeno tkivo.
OECD (2002), “Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation”, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No. 19, OECD Publishing, Paris.
Kritične varijable ne bi trebalo izmijeniti, posebno ne tijekom ispitivanja, a da se ne razmotri kako će ta izmjena utjecati na testnu reakciju, što može biti vidljivo, na primjer, po opsegu i varijabilnosti reakcije u pozitivnim i negativnim kontrolama.
Alkaline single cell gel electrophoresis
U izvješću o ispitivanju trebalo bi navesti izmjene kritičnih varijabli izvršenih tijekom ispitivanja ili u usporedbi sa standardnim protokolom laboratorija te obrazložiti svaku izmjenu.
Sensitive technique for the detection of primary DNA damage at the level of individual cell/nucleus.
Intenzitet repa ili postotak DNK u repu
Comet
odgovara intenzitetu repa kometa u odnosu na ukupan intenzitet (glava plus rep).
The shape that nucleoids adopt after submitted to one electrophoretic field, due to its similarity to comets: the head is the nucleus and the tail is constituted by the DNA migrating out of the nucleus in the electric field.
Odražava količinu lomova DNK izraženu u obliku postotka.
A critical variable/parameter
FAKTORSKI MODEL ZA UTVRĐIVANJE RAZLIKA MEĐU SPOLOVIMA U IN VIVO KOMET-TESTU
This is a protocol variable for which a small change can have a large impact on the conclusion of the assay.
Prema ovom modelu svakoj se koncentraciji izlaže najmanje pet mužjaka i pet ženki, što znači da se upotrebljava najmanje 40 životinja (20 mužjaka i 20 ženki, plus odgovarajuće pozitivne kontrole).
Critical variables can be tissue-specific.
Varijabilnost u skupu podataka analizom se dijeli na varijabilnost među spolovima, varijabilnost među koncentracijama i varijabilnost povezanu s interakcijom između spolova i koncentracija.
Critical variables should not be altered, especially within a test, without consideration of how the alteration will alter an assay response, for example as indicated by the magnitude and variability in positive and negative controls.
Potpuni podaci o osnovnoj metodologiji dostupni su u brojnim standardnim statističkim priručnicima (vidjeti literaturu) i sadržajima za pomoć osiguranima u okviru statističkih paketa.
The test report should list alterations of critical variables made during the test or compared to the standard protocol for the laboratory and provide a justification for each alteration.
TRENUTAČNA OGRANIČENJA TESTA
Tail intensity or % tail DNA
S obzirom na trenutačne spoznaje nekoliko je ograničenja povezano s in vivo komet-testom.
This corresponds to the intensity of the comet tail relative to the total intensity (head plus tail).
Očekuje se da će se ta ograničenja smanjiti ili preciznije definirati u mjeri u kojoj će iskustvo stečeno u primjeni testa omogućiti odgovore na pitanja sigurnosti u regulatornom kontekstu.
It reflects the amount of DNA breakage, expressed as a percentage.
Neka oštećenja DNK mogu kratko trajati, tj. mogu se tako brzo popraviti da ih nije moguće uočiti 24 ili više sati nakon zadnje doze.
THE FACTORIAL DESIGN FOR IDENTIFYING SEX DIFFERENCES IN THE IN VIVO COMET ASSAY
Ne postoji potvrđen popis kratkotrajnih oštećenja ni kemikalija koje vjerojatno uzrokuju takve vrste oštećenja niti je poznato u kojem se vremenskom razdoblju ta oštećenja mogu otkriti.
In this design, a minimum of 5 males and 5 females are tested at each concentration level resulting in a design using a minimum of 40 animals (20 males and 20 females, plus relevant positive controls.)
Optimalno vrijeme uzorkovanja može isto tako biti specifično za pojedinu kemikaliju ili put primjene te bi stoga vremena uzorkovanja trebalo odrediti na temelju kinetičkih podataka (npr. vrijeme Tmax pri kojemu se postiže vršna koncentracija u plazmi ili tkivu), ako su takvi podaci dostupni.
The analysis partitions the variability in the dataset into that between the sexes, between the concentrations and that related to the interaction between the sexes and the concentrations.
U većini validacijskih studija na kojima se temelji ova ispitna metoda navodi se provedba obdukcije dva ili tri sata nakon primjene posljednje doze.
Full details of the underlying methodology are available in many standard statistical textbooks (see references) and in the 'help' facilities provided with statistical packages.
U većini objavljenih studija opisuje se davanje posljednje doze između dva i šest sati prije usmrćivanja životinje.
CURRENT LIMITATIONS OF THE ASSAY
Stoga su u ovoj ispitnoj metodi ta iskustva poslužila kao osnova za preporuku da bi posljednju dozu trebalo dati u određenom trenutku dva do šest sati prije obdukcije ako ne postoje podaci na temelju kojih bi trebalo postupiti drukčije.
Due to the current status of knowledge, several limitations are associated with the in vivo comet assay.
Ne postoje potvrđeni podaci iz studija koji govore o osjetljivosti testa za otkrivanje kratkotrajnih oštećenja DNK nakon primjene putem hrane ili vode za piće u usporedbi s primjenom sondom.