natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This can result from either hormesis (“toxic stimulation”) or from addition of stimulating growth factors with the test material to the minimal medium used.
To može biti posljedica hormeze (toksička stimulacija) ili unošenja stimulirajućih faktora rasta s ispitivanim materijalom u upotrijebljeni minimalni medij.
Note that the addition of inorganic nutrients should not have any direct effect because the test medium should maintain a surplus of nutrients throughout the test.
Dodavanje anorganskih nutrijenata ne bi smjelo imati nikakav izravan utjecaj budući da ispitni medij tijekom ispitivanja mora stalno sadržavati višak nutrijenata.
Low dose stimulation can usually be ignored in EC50 calculations unless it is extreme.
Stimulacija pri niskim dozama u pravilu se može zanemariti kod izračunavanja EC50, osim ako je ekstremno visoka.
However, if it is extreme, or an ECx value for low x is to be calculated, special procedures may be needed.
U slučaju ekstremne stimulacije, ili kad je potrebno izračunati ECx za niske vrijednosti x, ponekad je potrebno primijeniti posebne postupke.
Deletion of stimulatory responses from the data analysis should be avoided if possible, and if available curve fitting software cannot accept minor stimulation, linear interpolation with bootstrapping can be used.
Pojave stimulacije rasta potrebno je kad je god to moguće uključiti u analizu podataka, a ako raspoloživi softver za prilagođavanje krivulje ne može prihvatiti male vrijednosti stimulacije, može se primijeniti linearna interpolacija sa samonadopunjavanjem (‚bootstrapping’).
If stimulation is extreme, use of a hormesis model may be considered (18).
U slučaju ekstremne stimulacije može se razmotriti primjena modela hormeze (18).
Non toxic growth inhibition
Netoksična inhibicija rasta
Light absorbing test materials may give rise to a growth rate reduction because shading reduces the amount of available light.
Ispitivani materijali koji apsorbiraju svjetlost mogu izazvati smanjenje brzine rasta stvaranjem sjene, koja smanjuje raspoloživu količinu svjetlosti.
Such physical types of effects should be separated from toxic effects by modifying the test conditions and the former should be reported separately.
Ove i druge slične fizikalne učinke treba odvojiti od toksičnih učinaka izmjenom ispitnih uvjeta i treba ih posebno navesti u izvješću o ispitivanju.
Guidance may be found in (2) and (3).
Smjernice se mogu pronaći u literaturi pod (2) i (3).
physical nature and relevant physical-chemical properties, including water solubility limit;
fizikalno stanje i relevantna fizikalno-kemijska svojstva, uključujući granicu topljivosti u vodi,
chemical identification data (e.g., CAS Number), including purity (impurities).
podaci za identifikaciju kemikalije (npr. CAS broj), uključujući čistoću (nečistoće).
the strain, supplier or source and the culture conditions used.
soj, dobavljač odnosno izvor i primijenjeni uvjeti uzgoja.
date of start of the test and its duration;
datum početka ispitivanja i trajanje,
description of test design:
plan ispitivanja:
test vessels, culture volumes, biomass density at the beginning of the test;
ispitne posude, volumeni kulture, gustoća biomase na početku ispitivanja,
composition of the medium;
sastav medija,
test concentrations and replicates (e.g., number of replicates, number of test concentrations and geometric progression used);
ispitne koncentracije i ponavljanja (npr. broj ponavljanja, broj ispitnih koncentracija i primijenjena geometrijska progresija),
description of the preparation of test solutions, including use of solvents etc.
opis pripreme ispitnih otopina, uključujući primjenu otapala itd.,
culturing apparatus;
inkubator za uzgoj:
light intensity and quality (source, homogeneity);
intenzitet i kvaliteta svjetlosti (izvor, homogenost),
temperature;
temperatura,
concentrations tested:
ispitane koncentracije:
the nominal test concentrations and any results of analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels.
nazivne ispitne koncentracije i rezultati analiza za određivanje koncentracije ispitivane kemikalije u ispitnim posudama;
The recovery efficiency of the method and the limit of quantification in the test matrix should be reported;
potrebno je navesti iskorištenje metode i granicu kvantifikacije u ispitnom matriksu,
all deviations from this test method;
sva odstupanja od ove ispitne metode,
method for determination of biomass and evidence of correlation between the measured parameter and dry weight;
metoda određivanja biomase i dokaz korelacije između izmjerenog parametra i suhe mase.
pH values at the beginning and at the end of the test at all treatments;
pH-vrijednosti na početku i kraju ispitivanja u svim obradama,
biomass for each flask at each measuring point and method for measuring biomass;
biomasa za svaku tikvicu u svakoj mjernoj točki i metoda mjerenja biomase,
growth curves (plot of biomass versus time);
krivulje rasta (grafički prikaz biomase u ovisnosti o vremenu),
calculated response variables for each treatment replicate, with mean values and coefficient of variation for replicates;
izračunane varijable odgovora za svako ponavljanje u ispitnim skupinama, uključujući srednje vrijednosti i koeficijente varijacije ponavljanja,
graphical presentation of the concentration/effect relationship;
grafički prikaz odnosa koncentracije i učinka,
estimates of toxicity for response variables e.g., EC50, EC10, EC20 and associated confidence intervals.
procjene toksičnosti za varijable odgovora, npr. EC50, EC10, EC20 i odgovarajući intervali pouzdanosti;
If calculated, LOEC and NOEC and the statistical methods used for their determination;
ako se izračunavaju, LOEC i NOEC te statističke metode koje su upotrijebljene za njihovo određivanje,
if ANOVA has been used, the size of the effect which can be detected (e.g. the least significant difference);
ako se primjenjuje ANOVA, veličina učinka koja se može utvrditi (npr. najmanja značajna razlika),
any stimulation of growth found in any treatment;
eventualna stimulacija rasta u bilo kojoj obradi,
any other observed effects, e.g. morphological changes of the algae;
svi ostali zapaženi učinci, npr. morfološke promjene algi,
discussion of the results, including any influence on the outcome of the test resulting from deviations from this test method.
rasprava o rezultatima, uključujući i svaki utjecaj na rezultate ispitivanja nastao uslijed odstupanja od ove ispitne metode.
OECD (2006).
OECD (2006.) Draft Guidance Document, Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data:
The following definitions and abbreviations are used for the purposes of this test method:
Za potrebe ove ispitne metode upotrebljavaju se sljedeće definicije i kratice:
Biomass is the dry weight of living matter present in a population expressed in terms of a given volume;
Biomasa je suha masa žive tvari u populaciji izražena u odnosu na dani volumen;
e.g., mg algae/litre test solution.
npr. mg algi / l l ispitne tekućine.
Usually “biomass” is defined as a mass, but in this test this word is used to refer to mass per volume.
‚Biomasa’ se obično definira kao masa, ali se u ovom testu ta riječ odnosi na masu po volumenu.
Also in this test, surrogates for biomass, such as cell counts, fluorescence, etc. are typically measured and the use of the term “biomass” thus refers to these surrogate measures as well.
Osim toga, u ovom se testu u pravilu mjere i zamjenski parametri biomase kao što su broj stanica, fluorescencija itd. pa se izraz ‚biomasa’ odnosi i na te zamjenske mjere.
Chemical means a substance or mixture
Kemikalija znači tvar ili smjesa.
Coefficient of variation is a dimensionless measure of the variability of a parameter, defined as the ratio of the standard deviation to the mean.
Koeficijent varijacije je bezdimenzionalna mjera varijabilnosti parametra, definirana kao omjer standardne devijacije i srednje vrijednosti.
This can also be expressed as a percent value.
Može se izraziti i kao postotak.
Mean coefficient of variation of average specific growth rate in replicate control cultures should be calculated as follows:
Srednji koeficijent varijacije prosječne specifične brzine rasta u ponavljanjima kontrolnih kultura izračunava se na sljedeći način:
Calculate % CV of average specific growth rate out of the daily/section by section growth rates for the respective replicate;
Izračuna se postotak koeficijenta varijacije (KV) prosječne specifične brzine rasta iz dnevnih/etapnih brzina rasta za odgovarajuće ponavljanje.
Calculate the mean value out of all values calculated under point 1 to get the mean coefficient of variation of the daily/section by section specific growth rate in replicate control cultures.
Izračuna se srednja vrijednost svih izračunanih vrijednosti iz točke 1. kako bi se dobio srednji koeficijent varijacije dnevne/etapne specifične brzine rasta u ponavljanjima kontrolnih kultura.
ECx is the concentration of the test chemical dissolved in test medium that results in an x % (e.g. 50 %) reduction in growth of the test organism within a stated exposure period (to be mentioned explicitly if deviating from full or normal test duration).
ECx je koncentracija ispitivane kemikalije otopljene u ispitnom mediju koja rezultira x-postotnim (npr. 50 %) smanjenjem rasta ispitnog organizma unutar navedenoga razdoblja izlaganja (koje je potrebno izričito navesti ako odstupa od punog ili uobičajenog trajanja ispitivanja).
To unambiguously denote an EC value deriving from growth rate or yield the symbol “ErC” is used for growth rate and “EyC” is used for yield.
Da bi se nedvosmisleno pokazalo je li vrijednost EC dobivena iz brzine rasta ili iz prirasta, za brzinu rasta upotrebljava se simbol ‚ErC’, a za prirast simbol ‚EyC’.
Growth medium is the complete synthetic culture medium in which test algae grow when exposed to the test chemical.
Uzgojni medij je kompletna sintetička hranjiva podloga u kojoj ispitne alge rastu kad se izlože ispitivanoj tvari.
The test chemical will normally be dissolved in the test medium.
Ispitivana se kemikalija u pravilu otapa u ispitnom mediju.
Growth rate (average specific growth rate) is the logarithmic increase in biomass during the exposure period.
Brzina rasta (prosječna specifična brzina rasta) logaritamsko je povećanje biomase tijekom razdoblja izlaganja.
Lowest Observed Effect Concentration (LOEC) is the lowest tested concentration at which the chemical is observed to have a statistically significant reducing effect on growth (at p < 0,05) when compared with the control, within a given exposure time.
Najniža koncentracija s vidljivim učinkom (LOEC) najniža je ispitana koncentracija kemikalije kod koje je uočen statistički značajan usporavajući učinak na rast (pri p < 0,05) u usporedbi s kontrolom u određenom razdoblju izlaganja.
However, all test concentrations above the LOEC must have a harmful effect equal to or greater than those observed at the LOEC.
Ipak, sve ispitne koncentracije iznad LOEC-a moraju imati jednak ili veći štetan učinak od onoga koji je zabilježen pri LOEC-u.
When these two conditions cannot be satisfied, a full explanation must be given for how the LOEC (and hence the NOEC) has been selected.
Ako se ova dva uvjeta ne mogu zadovoljiti, treba navesti detaljno obrazloženje za odabir LOEC-a (a time i NOEC-a).
No Observed Effect Concentration (NOEC) is the test concentration immediately below the LOEC.
Najviša koncentracija bez vidljivog učinka (NOEC) ispitna je koncentracija neposredno ispod LOEC-a.
Response variable is a variable for the estimation of toxicity derived from any measured parameters describing biomass by different methods of calculation.
Varijabla odgovora je varijabla za procjenu toksičnosti izvedena iz bilo kojeg izmjerenog parametra koji opisuje biomasu primjenom različitih računskih metoda.
For this test method growth rates and yield are response variables derived from measuring biomass directly or any of the surrogates mentioned.
Kod ove su ispitne metode stope rasta i prirast varijable odgovora dobivene izravnim mjerenjem biomase ili bilo kojeg navedenog zamjenskog parametra.
Specific growth rate is a response variable defined as quotient of the difference of the natural logarithms of a parameter of observation (in this test method, biomass) and the respective time period
Specifična brzina rasta je varijabla odgovora definirana kao kvocijent razlike prirodnih logaritama promatranog parametra (kod ove je ispitne metode to biomasa) i odgovarajućeg vremenskog razdoblja.
Test chemical means any substance or mixture tested using this test method.
Ispitivana kemikalija znači svaka tvar ili smjesa koje se ispituju ovom ispitnom metodom.
Yield is the value of a measurement variable at the end of the exposure period minus the measurement variable's value at the start of the exposure period to express biomass increase during the test.
Prirast je vrijednost mjerne varijable na kraju razdoblja izlaganja umanjena za vrijednost mjerne varijable na početku razdoblja izlaganja, kojom se izražava povećanje biomase tijekom ispitivanja.
Strains Shown to be Suitable for the Test
Sojevi koji su se pokazali prikladnima za ispitivanje
Green algae
Zelene alge
Pseudokirchneriella subcapitata (formerly known as Selenastrum capricornutum), ATCC 22662, CCAP 278/4, 61.81 SAG
Pseudokirchneriella subcapitata (ranije poznata kao Selenastrum capricornutum), ATCC 22662, CCAP 278/4, 61.81 SAG
Desmodesmus subspicatus (formerly known as Scenedesmus subspicatus), 86.81 SAG
Desmodesmus subspicatus (ranije poznata kao Scenedesmus subspicatus), 86.81 SAG
Diatoms
Dijatomeje
Cyanobacteria
Cijanobakterije
Sources of Strains
Izvori sojeva
The strains recommended are available in unialgal cultures from the following collections (in alphabetical order):
Preporučeni sojevi raspoloživi su u kulturama jedne vrste algi iz sljedećih zbirki (abecednim redom):
37073 Göttingen
3703 Göttingen
Appearance and characteristics of recommended species
Izgled i svojstva preporučenih vrsta
Curved, twisted single cells
Zakrivljene, uvijene pojedinačne stanice
Oval, mostly single cells
Duguljaste, većinom pojedinačne stanice
Rods
Štapićaste
Chains of oval cells
Lanci duguljastih stanica
Size (L × W) μm
Veličina (D × Š) μm
Cell volume (μm3/cell)
Volumen stanica (μm3/stanica)
Cell dry weight (mg/cell)
Suha masa stanica (mg/stanica)
2-3 × 10- 8
2 – 3 × 10– 8
3-4 × 10- 8
3 – 4 × 10– 8
1-2 × 10- 8
1 – 2 × 10– 8
2-3 × 10- 9
2 – 3 × 10– 9
Growth rate [3] (day- 1)
Brzina rasta [3] (dan– 1)
1,5 -1,7
1,5 – 1,7
Specific Recommendations on Culturing and Handling of Recommended Test Species
Posebne preporuke za uzgoj i rukovanje preporučenim ispitnim vrstama
Pseudokirchneriella subcapitata and Desmodesmus subspicatus
Pseudokirchneriella subcapitata i Desmodesmus subspicatus
These green algae are generally easy to maintain in various culture media.
Ove je zelene alge općenito lako održavati u različitim medijima kulture.
Information on suitable media is available from the culture collections.
Informacije o prikladnim medijima mogu se dobiti u zbirkama kultura.
The cells are normally solitary, and cell density measurements can easily be performed using an electronic particle counter or microscope.
U pravilu je riječ o pojedinačnim stanicama i mjerenja gustoće stanica mogu se jednostavno obaviti s pomoću elektroničkog brojača čestica ili mikroskopa.
Various growth media may be used for keeping a stock culture.
Za držanje radne kulture mogu se upotrebljavati različiti uzgojni mediji.
It is particularly important to avoid allowing the batch culture to go past log phase growth when renewing, recovery is difficult at this point.
Osobito je važno ne dopustiti da šaržna kultura kod obnavljanja ne prođe logaritamsku fazu rasta, jer je tada regeneracija teška.
Anabaena flos-aquae develops aggregates of nested chains of cells.
Anabaena flos-aquae tvori nakupine isprepletenih lanaca stanica.
The size of these aggregates may vary with culturing conditions.
Veličina nakupina može biti različita, ovisno o uzgojnim uvjetima.
It may be necessary to break up these aggregates when microscope counting or an electronic particle counter is used for determination of biomass.
Te je nakupine ponekad potrebno razbiti ako se biomasa određuje brojenjem pod mikroskopom ili elektroničkim brojačem čestica.
Sonication of sub-samples may be used to break up chains to reduce count variability.
Da bi se smanjila varijabilnost rezultata brojenja, lanci se mogu razbiti ultrazvučnom obradom poduzoraka.
Longer sonication than required for breaking up chains into shorter lengths may destroy the cells.
Ultrazvučna obrada ne smije trajati duže nego što je potrebno da se lanci razbiju na kraće lance, jer se u protivnom stanice mogu uništiti.
Sonication intensity and duration must be identical for each treatment.
Intenzitet i trajanje ultrazvučne obrade moraju biti jednaki kod svih uzoraka.
Count enough fields on the hemocytometer (at least 400 cells) to help compensate for variability.
Na hemocitometru treba izbrojiti dovoljan broj polja (najmanje 400 stanica) da bi se mogla ispraviti odstupanja.
This will improve reliability of microscopic density determinations.
Time se poboljšava pouzdanost mikroskopskih određivanja gustoće.
An electronic particle counter can be used for determination of total cell volume of Anabaena after breaking up the cell chains by careful sonification.
Nakon što se lanci stanica razbiju pažljivom ultrazvučnom obradom, za određivanje ukupnog volumena stanica Anabaena može se upotrijebiti elektronički brojač čestica.
The sonification energy has to be adjusted to avoid disruption of the cells.
Ultrazvučnu energiju potrebno je prilagoditi tako da se izbjegne oštećenje stanica.
Use a vortex mixer or similar appropriate method to make sure the algae suspension used to inoculate test vessels is well mixed and homogeneous.
Da bi se dobila dobro izmiješana i homogena suspenzija algi za inokulaciju ispitnih posuda, potrebno je upotrijebiti vortex miješalicu ili sličnu prikladnu metodu.
Test vessels should be placed on an orbital or reciprocate shaker table at about 150 revolutions per minute.
Ispitne posude potrebno je staviti na orbitalnu ili linearnu tresilicu na oko 150 okretaja u minuti.
Alternatively, intermittent agitation may be used to reduce the tendency of Anabaena to form clumps.
Drugi je način da se smanji tendencija tvorbe gruda kod Anabaena periodično mućkanje.
If clumping occurs, care must be taken to achieve representative samples for biomass measurements.
Kod pojave gruda treba paziti da se za mjerenje biomase dobiju reprezentativni uzorci.
Vigorous agitation before sampling may be necessary to disintegrate algal clumps.
Ponekad je prije uzorkovanja potrebno snažno protresti posude da bi se razbile grude algi.
Synechococcus leopoliensis grows as solitary rod-shaped cells.
Synechococcus leopoliensis raste u obliku pojedinačnih štapićastih stanica.
The cells are very small, which complicates the use of microscope counting for biomass measurements.
Stanice su vrlo malene, što otežava mjerenje biomase brojenjem pod mikroskopom.
Electronic particle counters equipped for counting particles down to a size of approximately 1 μm are useful.
Ovdje mogu pomoći elektronički brojači čestica opremljeni za brojenje čestica do veličine od oko 1 μm.
In vitro fluorometric measurements are also applicable.
Osim toga, mogu se primijeniti i fluorometrijska mjerenja in vitro.
Note that silicate is required in the medium.
Medij mora sadržavati silikat.
Navicula pelliculosa may form aggregates under certain growth conditions.
Navicula pelliculosa može u određenim uvjetima rasta stvarati nakupine.
Due to production of lipids the algal cells sometimes tend to accumulate in the surface film.
Stanice algi ponekad se nakupljaju u površinskoj emulziji zbog tvorbe lipida.
Under those circumstances special measures have to be taken when sub-samples are taken for biomass determination in order to obtain representative samples.
U tom se slučaju kod uzimanja poduzoraka za određivanje biomase moraju poduzeti posebne mjere kako bi se dobili reprezentativni uzorci.
Vigorous shaking, e.g. using a vortex mixer may be required.
Ponekad je nužno i snažno protresanje, npr. uz pomoć vortex miješalice.
Measured with electronic particle counter
Mjereno elektroničkim brojačem čestica
Calculated from size
Izračunano iz veličine
Most frequently observed growth rate in OECD medium at light intensity approx. 70 μE m- 2 s- 1 and 21 °C
Najčešće zapažena brzina rasta u mediju OECD pri intenzitetu svjetlosti od oko 70 μE m– 2 s– 1 i temperaturi od 21 °C
Appendix 3
Dodatak 3
Growth Media
Uzgojni mediji
One of the following two growth media may be used:
Može se upotrijebiti jedan od sljedećih dvaju uzgojnih medija:
OECD medium:
Medij OECD:
Original medium of OECD TG 201, also according to ISO 8692
izvorni medij OECD TG 201, također u skladu s normom ISO 8692,
EPA medium AAP also according to ASTM.
EPA medij AAP, također u skladu s normom ASTM.
When preparing these media, reagent or analytical-grade chemicals should be used and deionised water.
Kod pripreme tih medija treba upotrijebiti reagens odnosno analitički čiste kemikalije i deioniziranu vodu.
Composition of the AAP-medium (US. EPA) and the OECD TG 201 medium.
Sastav medija AAP (US. EPA) i medija OECD TG 201
Component
Sastojak
MgCl2·6(H2O)
MgCl2 · 6(H2O)
CaCl2·2(H2O)
CaCl2 · 2(H2O)
MgSO4·7(H2O)
MgSO4 · 7(H2O)
FeCl3·6(H2O)
FeCl3 · 6(H2O)
EDTA·2(H2O)
EDTA · 2(H2O)
MnCl2·4(H2O)
MnCl2 · 4(H2O)
CoCl2·6(H2O)
CoCl2 · 6(H2O)
MoO4·2(H2O)
MoO4 · 2(H2O)
CuCl2·2(H2O)
CuCl2 2(H2O)
The molar ratio of EDTA to iron slightly exceeds unity.
Molarni omjer EDTA – željezo nešto je veći od jedan.
This prevents iron precipitation and at the same time, chelation of heavy metal ions is minimised.
Time se sprječava taloženje željeza i istovremeno smanjuje kelatiranje iona teških metala.
In test with the diatom Navicula pelliculosa both media must be supplemented with Na2SiO3 ·9H20 to obtain a concentration of 1,4 mg Si/l.
Kod ispitivanja s dijatomejom Navicula pelliculosa oba medija treba nadopuniti s Na2SiO3 · 9H20 tako da se dobije koncentracija od 1,4 mg Si/l.
The pH of the medium is obtained at equilibrium between the carbonate system of the medium and the partial pressure of CO2 in atmospheric air.
pH-vrijednost medija određuje se kad se uspostavi ravnoteža između karbonatnog sustava medija i parcijalnog tlaka CO2 u atmosferskom zraku.
An approximate relationship between pH at 25 oC and the molar bicarbonate concentration is:
Približni odnos između pH na 25 °C i molarne koncentracije bikarbonata proizlazi iz sljedeće formule:
With 15 mg NaHCO3/l, pHeq = 7,5 (U.S. EPA medium) and with 50 mg NaHCO3/l, pHeq = 8,1 (OECD medium).
S 15 mg NaHCO3/l, pHeq = 7,5 (medij US EPA), a s 50 mg NaHCO3/l, pHeq = 8,1 (medij OECD).
Element composition of test media
Udjeli elemenata u ispitnim medijima
Preparation of OECD medium
Priprema medija OECD
Nutrient
Nutrijent
Concentration in stock solution
Koncentracija u radnoj otopini
Stock solution 1:
Radna otopina 1:
macro nutrients
makronutrijenti
MgCl2·6H2O
MgCl2 · 6H2O
CaCl2·2H2O
CaCl2 · 2H2O
MgSO4·7H2O
MgSO4 · 7H2O
Stock solution 2:
Radna otopina 2:
iron
željezo
FeCl3·6H2O
FeCl3 · 6H2O
64 mg/l
64 mg/l
EDTA·2H2O
EDTA · 2H2O
Stock solution 3:
Radna otopina 3:
trace elements
elementi u tragovima
185 mg/l
185 mg/l
MnCl2·4H2O
MnCl2 · 4H2O
415 mg/l
415 mg/l
3 mg/l
3 mg/l
CoCl2·6H2O
CoCl2 · 6H2O
1,5 mg/l
1,5 mg/l
CuCl2·2H2O
CuCl2 · 2H2O
0,01 mg/l
0,01 mg/l
MoO4·2H2O
MoO4 · 2H2O
7 mg/l
7 mg/l
Stock solution 4:
Radna otopina 4:
bicarbonate
bikarbonat
SiO3·9H20
SiO3 · 9H20
Sterilise the stock solutions by membrane filtration (mean pore diameter 0,2 μm) or by autoclaving (120 °C, 15 min).
Radne se otopine steriliziraju membranskom filtracijom (srednji promjer pora 0,2 μm) ili obradom u autoklavu (120 °C, 15 min).
Store the solutions in the dark at 4 °C.
Otopine se pohrane u mraku na temperaturi od 4 °C.
Do not autoclave stock solutions 2 and 4, but sterilise them by membrane filtration.
Radne otopine 2 i 4 ne steriliziraju se u autoklavu, nego membranskom filtracijom.
Prepare a growth medium by adding an appropriate volume of the stock solutions 1-4 to water:
Uzgojni medij priprema se dodavanjem odgovarajućeg volumena radnih otopina 1 do 4 u vodu.
Add to 500 ml of sterilised water:
U 500 ml sterilizirane vode doda se: