natgillin/translations-raw huggingface dataset:
at least 6 calibration standards covering the range of expected vitellogenin concentrations, and at least one non-specific binding assay blank (analysed in duplicate).
najmanje šest kalibracijskih standarda kojima je obuhvaćen raspon očekivanih koncentracija vitelogenina i najmanje jedna nespecifična, obvezujuća testna prazna proba (analizira se dva takva kompleta).
Absorbance of these blanks should be less than 5 % of the maximum calibration standard absorbance.
Apsorpcija tih praznina trebala bi biti manja od 5 % maksimalne apsorpcije pri standardnoj kalibraciji.
At least two aliquots (well-duplicates) of each sample dilution will be analysed.
Analizirat će se najmanje dva alikvota (duplikati jažica) svakog razrjeđivanja uzorka.
Well-duplicates that differ by more than 20 % should be re-analysed.
Duplikate jažica koji se razlikuju više od 20 % potrebno je ponovno analizirati.
The correlation coefficient (R2) for calibration curves should be greater than 0,99.
Koeficijent korelacije (R2) za krivulje kalibracije trebao bi biti veći od 0,99.
However, a high correlation is not sufficient to guarantee adequate prediction of concentration in all ranges.
Međutim, visoka korelacija nije dostatna za jamstvo odgovarajućeg predviđanja koncentracije u svim rasponima.
In addition to having a sufficiently high correlation for the calibration curve, the concentration of each standard, as calculated from the calibration curve, should all fall between 70 and 120 % of its nominal concentration.
Osim što ima dovoljno visoku korelaciju za krivulju kalibracije, koncentracija svakog standarda prema izračunu iz krivulje kalibracije trebala bi se kretati od 70 do 120 % nominalne koncentracije.
If the nominal concentrations trend away from the calibration regression line (e.g. at lower concentrations), it may be necessary to split the calibration curve into low and high ranges or to use a nonlinear model to adequately fit the absorbance data.
U slučaju udaljavanja nominalnih koncentracija od linije regresije kalibracije (primjerice pri nižim koncentracijama) može se pojaviti potreba za razdvajanjem krivulje kalibracije u niske i visoke raspone ili potreba za primjenom nelinearnog modela za odgovarajuće prilagođavanje podataka o apsorpciji.
If the curve is split, both line segments should have R2 > 0,99.
U slučaju razdvajanja krivulje, oba segmenta linije trebala bi imati R2 > 0,99.
The limit of detection (LOD) is defined as the concentration of the lowest analytical standard, and limit of quantitation (LOQ) is defined as the concentration of the lowest analytical standard multiplied by the lowest dilution factor.
Granica otkrivanja (engl. limit of detection, LOD) definira se kao koncentracija najnižeg analitičkog standarda, dok se granica kvantitacije (engl. limit of quantitation, LOQ) definira kao koncentracija najnižeg analitičkog standarda pomnožena s najnižim faktorom razrjeđivanja.
On each day that vitellogenin assays are performed, a fortification sample made using an inter-assay reference standard will be analysed (Appendix 7).
Svakog dana provođenja testova vitelogenina analizirat će se uzorak za utvrđivanje izrađen s pomoću referentnog standarda dobivenog ponavljanjem testa (inter-assay) (Dodatak 7.).
The ratio of the expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Omjer očekivane i izmjerene koncentracije bilježit će se uz rezultate svakog kompleta testova provedenog tog dana.
Evaluation of Biomarker Responses by Analysis of Variance (ANOVA)
Procjena reakcija biomarkera s pomoću analize varijance (ANOVA)
To identify potential endocrine activity of a chemical, responses are compared between treatments and control groups using analysis of variance (ANOVA).
Reakcije tretiranih i kontrolnih skupina uspoređuju se s pomoću analize varijance (ANOVA) radi identifikacije moguće endokrine aktivnosti kemikalije.
Where a solvent control is used, an appropriate statistical test should be performed between the dilution water and solvent controls for each endpoint.
U slučaju upotrebe kontrolne skupine za otapalo, potrebno je za svaki krajnji učinak provesti odgovarajuće statističko ispitivanje između kontrolnih skupina s vodom za razrjeđivanje i kontrolnih skupina s otapalom.
Guidance on how to handle dilution water and solvent control data in the subsequent statistical analysis can be found in OECD, 2006c (27).
Smjernice o načinu obrade podataka za kontrolne skupine s vodom za razrjeđivanje i otapalom u naknadnoj statističkoj analizi nalaze se u dokumentu OECD, 2006.c (27).
All biological response data should be analysed and reported separately by sex.
Sve podatke o biološkim reakcijama potrebno je analizirati i o njima izvijestiti zasebno prema spolu.
If the required assumptions for parametric methods are not met — non-normal distribution (e.g. Shapiro-Wilk's test) or heterogeneous variance (Bartlett's test or Levene's test), consideration should be given to transforming the data to homogenise variances prior to performing the ANOVA, or to carrying out a weighted ANOVA.
Ako nisu zadovoljene tražene pretpostavke za parametrijske metode – nenormalna distribucija (npr. Shapiro-Wilkov test) ili heterogena varijanca (Bartlettov test ili Leveneov), potrebno je razmotriti mogućnost da se prije provedbe ANOVA-e podaci preoblikuju radi homogenizacije varijanci ili provesti ponderiranu ANOVA-u.
Dunnett's test (parametric) on multiple pair-wise comparisons or a Mann-Whitney with Bonferroni adjustment (non-parametric) may be used for non-monotonous dose-response.
Za neujednačenu reakciju na dozu mogu se upotrijebiti Dunnettov test (parametrijski) na višestrukim usporedbama parova ili Mann-Whitneyev test s prilagodbom Bonferroni (neparametrijski).
Other statistical tests may be used (e.g. Jonckheere-Terpstra test or Williams test) if the dose-response is approximately monotone.
Ako je reakcija na dozu približno ujednačena, mogu se upotrijebiti ostali statistički testovi (primjerice, Jonckheere-Terpstrin ili Williamsov test).
A statistical flowchart is provided in Appendix 8 to help in the decision on the most appropriate statistical test to be used.
Statistički dijagram nalazi se u Dodatku 8. i pomoć je pri odabiru najprikladnijeg statističkog testa za upotrebu.
Additional information can also be obtained from the OECD Document on Current Approaches to Statistical Analysis of Ecotoxicity Data (27).
Dodatne informacije nalaze se i u OECD-ovu Dokumentu o postojećim pristupima statističkoj analizi podataka o ekotoksičnosti (27).
Reporting of test results
Izvješćivanje o rezultatima ispitivanja
Study data should include:
Podaci o studiji trebali bi sadržavati:
Testing facility:
Ustanova u kojoj se obavlja ispitivanje:
Each laboratory should have demonstrated proficiency using a range of representative chemicals
svaki laboratorij treba biti dokazano stručan u upotrebi niza reprezentativnih kemikalija.
Characterisation of test chemical
karakterizaciju ispitivane kemikalije,
Physical nature and relevant physicochemical properties
fizikalnu narav i relevantna fizikalno-kemijska svojstva,
Method and frequency of preparation of test concentrations
metodu i učestalost pripreme ispitnih koncentracija,
Information on stability and biodegradability
informacije o stabilnosti i biorazgradivosti.
Characterization of solvent (nature, concentration used)
karakterizaciju otapala (svojstva, upotrijebljena koncentracija),
Justification of choice of solvent (if other than water)
obrazloženje odabira otapala (ako nije riječ o vodi).
Species and strain
vrstu i subpopulaciju,
Age of the fish at the start of the test and reproductive/spawning status
starost riba na početku ispitivanja i reproduktivni status / status mrijesta,
Details of animal acclimation procedure
podatke o postupku aklimatizacije životinja,
Body weight of the fish at the start of the exposure (from a sub-sample of the fish stock)
tjelesnu masu riba na početku izlaganja (iz poduzorka upotrijebljenog ribljeg jata).
Test Conditions:
Ispitni uvjeti:
Test procedure used (test-type, loading rate, stocking density, etc.);
primijenjeni postupak ispitivanja (vrsta ispitivanja, broj i masa riba u odnosu na prostor odn. litražu akvarija itd.),
Method of preparation of stock solutions and flow-rate;
metodu pripreme radne otopine i stopu protoka,
The nominal test concentrations, weekly measured concentrations of the test solutions and analytical method used, means of the measured values and standard deviations in the test vessels and evidence that the measurements refer to the concentrations of the test chemical in true solution;
nominalne ispitne koncentracije, tjedne izmjerene vrijednosti koncentracija ispitnih otopina i primijenjene analitičke metode, srednje izmjerene vrijednosti i standardna odstupanja u ispitnim posudama te dokaze da se izmjerene vrijednosti odnose na koncentracije ispitne kemikalije u stvarnoj otopini,
Dilution water characteristics (including pH, hardness, alkalinity, temperature, dissolved oxygen concentration, residual chlorine levels, total organic carbon, suspended solids and any other measurements made)
karakteristike vode za razrjeđivanje (uključujući pH-vrijednost, tvrdoću, lužnatost, temperaturu, koncentraciju otopljenog kisika, razine rezidualnog klora, ukupni organski ugljik, suspendirane krute tvari i sve ostale izmjerene vrijednosti),
Water quality within test vessels:
kvalitetu vode u ispitnim akvarijima:
pH, hardness, temperature and dissolved oxygen concentration;
pH-vrijednost, tvrdoću, temperaturu i koncentraciju otopljenog kisika,
Detailed information on feeding (e.g. type of food(s), source, amount given and frequency and analyses for relevant contaminants if available (e.g. PCBs, PAHs and organochlorine pesticides).
precizne informacije o hranjenju (primjerice vrsti/vrstama hrane, porijeklu, količini i učestalosti hranjenja te analizu relevantnih kontaminanata, ako postoji (primjerice poliklorirani bifenili, policiklički aromatski ugljikovodici i organoklorovi pesticidi).
Evidence that the controls met the acceptance criteria of the test;
dokaze da su kontrolne skupine u skladu s kriterijima prihvatljivosti ispitivanja,
Data on mortalities occurring in any of the test concentrations and control;
podatke o smrtnosti u svim ispitnim koncentracijama i kontrolnim skupinama,
Statistical analytical techniques used, treatment of data and justification of techniques used;
primijenjene statističke analitičke metode, obradu podataka i obrazloženje primijenjenih metoda,
Data on biological observations of gross morphology, including secondary sex characteristics and vitellogenin;
podatke o biološkim zapažanjima makromorfologije, uključujući sekundarna spolna obilježja i vitelogenin,
Results of the data analyses preferably in tabular and graphical form;
rezultate analiza podataka, poželjno u tabličnom i grafičkom obliku,
Incidence of any unusual reactions by the fish and any visible effects produced by the test chemical
pojavu neobičnih reakcija riba i sve vidljive učinke ispitivane kemikalije.
GUIDANCE FOR THE INTERPRETATION AND ACCEPTANCE OF THE TEST RESULTS
SMJERNICE ZA TUMAČENJE I PRIHVAĆANJE REZULTATA ISPITIVANJA
This section contains a few considerations to be taken into account in the interpretation of test results for the various endpoints measured.
U ovom se odlomku navode određena razmatranja koje treba uzeti u obzir pri tumačenju rezultata ispitivanja različitih izmjerenih krajnjih učinaka.
The results should be interpreted with caution where the test chemical appears to cause overt toxicity or to impact on the general condition of the test animal.
Rezultate je potrebno oprezno tumačiti kad se čini da ispitivana kemikalija prouzročuje vidljivu toksičnost ili utječe na opće stanje pokusne životinje.
In setting the range of test concentrations, care should be taken not to exceed the maximum tolerated concentration to allow a meaningful interpretation of the data.
Pri određivanju raspona ispitnih koncentracija, kako bi s moglo valjano tumačiti podatke, potrebno je paziti da se ne premaši maksimalna tolerirana koncentracija.
It is important to have at least one treatment where there are no signs of toxic effects.
Važno je da postoji najmanje jedna tretirana skupina na kojoj se ne pojavljuju znakovi toksičnih učinaka.
Signs of disease and signs of toxic effects should be thoroughly assessed and reported.
Znakove bolesti i toksičnih učinaka potrebno je detaljno ocijeniti i o njima izvijestiti.
For example, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Primjerice, moguće je da na nastajanje vitelogenina u ženki utječu i opća toksičnost te neendokrino toksični načini djelovanja, primjerice hepatotoksičnost.
However, interpretation of effects may be strengthened by other treatment levels that are not confounded by systemic toxicity.
Međutim, u tumačenju učinaka postiže se veća sigurnost ako postoje druge tretirane skupine, tretirane različitim koncentracijama, koje nisu narušene sustavnom toksičnošću.
There are a few aspects to consider for the acceptance of test results.
Za prihvaćanje rezultata ispitivanja potrebno je razmotriti nekoliko aspekata.
As a guide, the VTG levels in control groups of males and females should be distinct and separated by about three orders of magnitude in fathead minnow and zebrafish, and about one order of magnitude for medaka.
Primjerice, razine VTG-a u kontrolnim skupinama mužjaka i ženki trebale bi biti jasne i razlikovati se za približno tri reda veličine u debeloglave gavčice i zebrice, odnosno za jedan red veličine u medake.
Examples of the range of values encountered in control and treatment groups are available in the validation reports (1, 2, 3, 4).
Primjeri raspona vrijednosti u kontrolnim i tretiranim skupinama nalaze se u izvješćima o validaciji (1, 2, 3, 4).
High VTG values in control males could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect weak oestrogen agonists.
Visoke vrijednosti VTG-a u mužjaka iz kontrolnih skupina mogu utjecati na osjetljivost testa i njegovu sposobnost otkrivanja slabih agonista estrogena.
Low VTG values in control females could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect aromatase inhibitors and oestrogen antagonists.
Niske vrijednosti VTG-a u ženki iz kontrolnih skupina mogu utjecati na osjetljivost testa i njegovu sposobnost otkrivanja inhibitora aromataze i antagonista estrogena.
The validation studies were used to build that guidance.
Validacijske studije upotrebljavale su se za izradu te smjernice.
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier) have been made it is advisable that a technical proficiency study is conducted.
Ako laboratorij nije ranije proveo test ili ako je došlo do znatnih promjena (primjerice promjene riblje subpopulacije ili dobavljača), savjetuje se provedba studije tehničke osposobljenosti.
It is recommended that chemicals covering a range of modes of action or impacts on a number of the test endpoints are used.
Preporučuje se upotreba kemikalija kojima je obuhvaćen raspon načina djelovanja ili učinaka na brojne ispitne krajnje učinke.
In practice, each laboratory is encouraged to build its own historical control data for males and females and to perform a positive control chemical for estrogenic activity (e.g. 17β-estradiol at 100 ng/l, or a known weak agonist) resulting in increased VTG in male fish, a positive control chemical for aromatase inhibition (e.g. fadrozole or prochloraz at 300 μg/l) resulting in decreased VTG in female fish, and a positive control chemical for androgenic activity (e.g. 17β-trenbolone at 5 μg/l) resulting in induction of secondary sex characteristics in female fathead minnow and medaka.
U praksi se svaki laboratorij potiče na izradu vlastitih povijesnih kontrolnih podataka za mužjake i ženke i na primjenu pozitivne kontrolne kemikalije za estrogensko djelovanje (primjerice 17β-estradiola pri 100 ng/l ili poznatog slabog agonista) čija je posljedica povećanje VTG-a u mužjaka riba, pozitivne kontrolne kemikalije za inhibiciju aromataze (primjerice fadrozol ili prokloraz pri 300 μg/l) čija je posljedica smanjenje VTG-a u ženki riba te pozitivne kontrolne kemikalije za androgensko djelovanje (primjerice 17β-trenbolon pri 5 μg/l) čija je posljedica indukcija sekundarnih spolnih obilježja u ženki debeloglave gavčice i medake.
All these data can be compared to available data from the validation studies (1, 2, 3) to ensure laboratory proficiency.
Svi ti podaci mogu se usporediti s dostupnim podacima iz validacijskih studija (1, 2, 3) kako bi se osigurala osposobljenost laboratorija.
In general, vitellogenin measurements should be considered positive if there is a statistically significant increase in VTG in males (p < 0,05), or a statistically significant decrease in females (p < 0,05) at least at the highest dose tested compared to the control group, and in the absence of signs of general toxicity.
Općenito, vrijednosti vitelogenina smatraju se pozitivnima ako je došlo do statistički značajnog povećanja VTG-a u mužjaka (p < 0,05) ili statistički značajnog smanjenja u ženki (p < 0,05) najmanje pri najvećoj ispitivanoj dozi u usporedbi s kontrolnom skupinom te u izostanku znakova opće toksičnosti.
A positive result is further supported by the demonstration of a biologically plausible relationship between the dose and the response curve.
Pozitivan rezultat dodatno je potkrijepljen demonstracijom biološki vjerojatnog odnosa između doze i krivulje reakcije.
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as “signposts”, not “traffic lights”, in risk assessment.
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as ‚signposts,’ not ‚traffic lights,’ in risk assessment.
Effects of waterborne exposure to 17β-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
Effects of waterborne exposure to 17Β-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
Abbreviations & definitions
Kratice i definicije
A substance or a mixture
Tvar ili smjesa
Coefficient of variation.
koeficijent varijacije (engl. Coefficient of variation, CV).
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.
Imunoenzimski test (engl. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay).
Loading rate
Masa riba u odnosu na prostor
Wet weight of fish per volume of water.
mokra masa riba u odnosu na određenu količinu vode.
Stocking density
Broj riba u odnosu na prostor
Number of fish per volume of water.
broj riba u odnosu na određenu količinu vode.
VTG (Vitellogenin)
VTG (vitelogenin)
Phospholipoglycoprotein precursor to egg yolk protein that normally occurs in sexually active females of all oviparous species.
fosfolipoglikoproteinski prekursor proteina žumanjka koji je u pravilu prisutan u spolno aktivnih ženki svih vrsta koje polažu jaja.
HPG axis
Os HPG
Hypothalamic-pituitary-gonadal axis.
os hipotalamus-hipofiza-gonade.
MTC
MTK
Maximum Tolerated Concentration, representing about 10 % of the LC50.
maksimalna tolerirana koncentracija, iznosi približno 10 % LC50.
Experimental conditions for the fish endocrine screening assay
Eksperimentalni uvjeti za test probira endokrinog sustava riba
Recommended species
1 Preporučene vrste
Fathead minnow
Debeloglava gavčica
Zebrafish
Zebrica
Test type
Vrsta ispitivanja
Flow-through
Protok
Water temperature
Temperatura vode
Illumination quality
Kvaliteta osvjetljenja
Fluorescent bulbs (wide spectrum)
25 ± 2 °C
Light intensity 10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
Intenzitet svjetla
10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
10 – 20 μE/m2/s, 540 – 1000 luksa ili 50 – 100 ft-c (razine u laboratorijskim uvjetima) 10 – 20 μE/m2/s, 540 – 1000 luksa ili 50 – 100 ft-c (razine u laboratorijskim uvjetima)
Photoperiod (dawn/dusk transitions are optional, however not considered necessary)
Fotoperiod (prijelazi iz zore u sumrak su mogući, ali ne smatraju se nužnima)
16 h light, 8 h dark
16 h svjetlo, 8 h tama
12-16 h light, 12-8 h dark
12 – 16 sati svjetla, 12 – 8 sati tame
< 5 g per l
< 5 g po l
Test chamber size
Veličina ispitne komore
10 l (minimum)
Najmanje 10 l
2 l (minimum)
Najmanje 2 l
5 l (minimum)
Najmanje 5 l
Test solution volume
Volumen ispitne otopine
8 l (minimum)
Najmanje 8 l
l (minimum)
Najmanje 1,5 l
4 l (minimum)
Najmanje 4 l
Volume exchanges of test solutions
Zamjene volumena ispitnih otopina
Minimum of 6 daily
Najmanje šest puta dnevno
Minimum of 5 daily
Minimalno pet dnevno
Age of test organisms See paragraph 20
Starost ispitnih organizama
See paragraph 20
Vidjeti stavak 20.
See paragraph 20 12. Approximate wet weight of adult fish (g) Females:
Vidjeti stavak 20.
1,5 ± 20 %
Vidjeti stavak 20. 12. Približna mokra masa odraslih riba (g)
Males:
Ženke:
2,5 ± 20 %
1,5 ± 20 %
Females:
Mužjaci:
0,35 ± 20 %
0,35 ± 20 %
0,65 ± 20 %
0,35 ± 20 %
0,4 ± 20 %
0,65 ± 20 % Mužjaci: 0,4 ± 20 %
No. of fish per test vessel
Broj riba po ispitnoj posudi
6 (2 males and 4 females)
Šest (dva mužjaka i četiri ženke)
10 (5 males and 5 females)
Deset (pet mužjaka i pet ženki)
No. of treatments
Broj obrada
= 3 (plus appropriate controls)
= tri (uvećano za odgovarajuće kontrolne skupine)
No. vessels per treatment
Broj posuda (akvarija) po tretiranoj skupini
4 minimum
Najmanje četiri
2 minimum
Najmanje dvije
No. of fish per test concentration
Broj riba po ispitnoj koncentraciji
16 adult females and 8 males (4 females and 2 males in each replicate vessel)
16 odraslih ženki i osam mužjaka (četiri ženke i dva mužjaka u svakoj posudi replici)
10 adult females and 10 males (5 females and 5 males in each replicate vessel)
Deset odraslih ženki i deset mužjaka (pet ženki i pet mužjaka u svakoj posudi replici)
Feeding regime
Režim hranjenja
Live or frozen adult or nauplii brine shrimp two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Živi ili zamrznuti Artemia račići ili njihove ličinke dva ili tri puta dnevno (ad libitum), komercijalno dostupna hrana ili kombinacija prethodno navedenoga
Brine shrimp nauplii two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Ličinke Artemia račića dva ili tri puta dnevno (ad libitum), komercijalno dostupna hrana ili kombinacija prethodno navedenoga
Clean surface, well or reconstituted water or dechlorinated tap water
Čista površinska, izvorska ili voda dobivena miješanjem destilirane vode i odgovarajućeg masenog udjela minerala ili voda iz slavine iz koje je uklonjen klor
Pre-exposure period
Razdoblje prije izlaganja
7 days recommended
Preporučuje se sedam dana
Chemical exposure duration
Trajanje izlaganja kemikaliji
Biological endpoints
Biološki krajnji učinci
survival
preživljavanje,
behaviour
ponašanje,
sex characteristics
spolna obilježja 2y,
Test acceptability
Prihvatljivost ispitivanja
Dissolved oxygen > 60 % of saturation;
Otopljeni kisik > 60 % zasićenosti;
90 % survival of fish in the controls;
90 % preživljavanja riba u kontrolnim skupinama;
measured test concentrations within 20 % of mean measured values per treatment level.
izmjerene ispitne koncentracije unutar 20 % srednjih izmjerenih vrijednosti po razini tretmana.
mean temperature of 26 ± 2 °C;
srednja temperatura od 25 ± 2 °C;
< 2 mg/l
< 2 mg/l
The distance between the tray and the glass panes should be at least 3 cm to ensure that the spawning is not performed outside the tray.
Dodatak 3.
The eggs spawned onto the tray fall through the lattice and can be sampled 45-60 min after the start of illumination.
Neka kemijska svojstva prihvatljive vode za razrjeđivanje Sastojak
The transparent eggs are non-adhesive and can easily be counted by using transversal light.
KONCENTRACIJE Lebdeće čestice