natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Food and feeding are critical, and it is essential that the correct food for each stage is supplied at appropriate time intervals and at a level sufficient to support normal growth.
Hrana i hranjenje kritični su i bitno je za svaki stadij osigurati pravilnu hranu u odgovarajućim vremenskim razmacima i na razinama dostatnima za normalan rast.
Feeding should be ad libitum whilst minimising the surplus.
Hranjenje bi trebalo biti ad libitum vodeći računa o tome da višak bude minimalan.
To obtain a sufficient growth rate, fish should be fed at least twice daily (accepting once daily on weekends), separated by at least three hours between each feed.
Kako bi se postigla dostatna stopa rasta, ribe je potrebno hraniti najmanje dva puta dnevno (vikendom je prihvatljivo jedanput dnevno) uz razmak od najmanje tri sata između svakog hranjenja.
Surplus food and faeces should be removed, as necessary, to avoid accumulation of waste.
Suvišnu hranu i izmet potrebno je po potrebi ukloniti kako bi se izbjeglo nakupljanje otpada.
As experience is gained, food and feeding regimes are continuously being refined to improve survival and optimise growth.
Na temelju stečenog iskustva hrana i režimi hranjenja neprestano se unapređuju u cilju optimizacije rasta i poboljšanja preživljavanja.
Effort should therefore be made to confirm the proposed regime with acknowledged experts.
Stoga je potrebno nastojati od priznatih stručnjaka dobiti potvrdu za predloženi režim.
Feeding should be withheld 24 hours before ending the test.
Hranjenje je potrebno prekinuti 24 sata prije završetka ispitivanja.
Examples of appropriate food items are listed in Appendix 2 (see also the OECD Fish Testing Framework (39).
Primjeri odgovarajuće hrane navedeni su u Dodatku 2. (vidi i Okvir za ispitivanje riba OECD-a) (39).
Test chemicals should be spaced as described in Appendix 4.
Ispitivane kemikalije potrebno je rasporediti kako je opisano u Dodatku 4.
A minimum of three test concentrations in at least four replicates should be used.
Potrebno je upotrijebiti minimalno tri ispitne koncentracije u najmanje četiri ponavljanja.
The curve relating LC50 to period of exposure in the acute studies available should be considered when selecting the range of test concentrations.
Pri odabiru raspona ispitnih koncentracija potrebno je uzeti u obzir krivulju ovisnosti LC50 o vremenu izlaganja kod dostupnih istraživanja akutne toksičnosti.
Five test concentrations are recommended if the data are to be used for risk assessment.
Ako se podaci upotrebljavaju za procjenu rizika, preporučuje se pet ispitnih koncentracija.
Concentrations of the chemical higher than 10 % of the acute adult LC50 or 10 mg/l, whichever is the lower, need not be tested.
Nije potrebno ispitivati koncentracije kemikalije iznad 10 % LC50 kod akutne toksičnosti za odrasle ribe ili 10 mg/l, ovisno o tome što je manje.
The maximum test concentration should be 10 % of the LC50 on the larval/juvenile life-stage.
Maksimalna ispitna koncentracija trebala bi biti 10 % LC50 po životnom stadiju ličinke / juvenilne ribe.
Controls
Kontrolne skupine
A dilution water control (≥ 4 replicates) and, if relevant, a solvent control (≥ 4 replicates) should be run in addition to the test concentrations.
Uz ispitne koncentracije potrebno je provesti jednu kontrolnu skupinu s vodom za razrjeđivanje (≥ 4 ponavljanja) i po potrebi jednu kontrolnu skupinu s otapalom.
Only solvents that have been investigated not to have any statistical significant influence on the test endpoints should be used in the test.
U ispitivanju potrebno je upotrebljavati samo otapala za koja je ispitivanjem utvrđeno da nemaju statistički značajan utjecaj na krajnje učinke ispitivanja.
Where a solvent is used, its final concentration should not be greater than 0,1 ml/l (36) and it should be the same concentration in all test chambers, except the dilution water control.
Ako se upotrebljava otapalo, njegova konačna koncentracija ne bi trebala biti veća od 0,1 ml/l (36) i koncentracija bi trebala biti jednaka u svim ispitnim posudama, osim u slučaju kontrole s vodom za razrjeđivanje.
However, every effort should be made to avoid the use of such solvent or keep solvent's concentrations to a minimum.
Međutim, potrebno je uložiti sve napore da se izbjegne upotreba takvih otapala ili bi koncentracije otapala trebale biti minimalne.
Frequency of Analytical Determinations and Measurements
Učestalost analitičkih određivanja i mjerenja
Chemical analysis of the test chemical concentration should be performed before initiation of the test to check compliance with the acceptance criteria.
Kemijsku je analizu koncentracije ispitivane kemikalije potrebno provesti prije početka ispitivanja kako bi se provjerila usklađenost s kriterijima prihvatljivosti.
All replicates should be analysed individually at the beginning and termination of the test.
Sva ponavljanja potrebno je analizirati pojedinačno na početku i kraju ispitivanja.
One replicate per test concentration should be analysed at least once per week during the test, changing systematically between replicates (1,2,3,4,1,2…).
Jedno ponavljanje po ispitnoj koncentraciji potrebno je analizirati najmanje jedanput tjedno tijekom ispitivanja uz sustavnu izmjenu ponavljanja (1, 2, 3, 4, 1, 2….).
If samples are stored to be analysed at a later time, the storage method of the samples should be previously validated.
Ako se uzorci pohranjuju za kasniju analizu, metoda pohrane uzoraka trebala bi biti prethodno validirana.
Samples should be filtered (e.g. using a 0,45 μm pore size) or centrifuged to ensure that the determinations are made on the chemical in true solution.
Uzorke je potrebno filtrirati (npr. primjenom veličine pora 0,45 μm) ili centrifugirati kako bi se osigurala određivanja kemikalije u pravoj otopini.
During the test, dissolved oxygen, pH, total hardness, conductivity, salinity (if relevant), and temperature should be measured in all test chambers.
Otopljeni kisik, pH-vrijednost, ukupnu tvrdoću, provodljivost, salinitet (po potrebi) i temperaturu potrebno je mjeriti u svim ispitnim posudama tijekom ispitivanja.
As a minimum dissolved oxygen, salinity (if relevant), and temperature should be measured weekly, and pH, conductivity and hardness at the beginning and at the end of the test.
Otopljeni kisik, salinitet (po potrebi) i temperaturu potrebno je mjeriti najmanje jedanput tjedno, a pH-vrijednost, provodljivost i tvrdoću na početku i na kraju ispitivanja.
Temperature should preferably be monitored continuously in at least one test chamber.
Temperaturu je po mogućnosti potrebno neprekidno pratiti u najmanje jednoj ispitnoj posudi.
Results should be based on measured concentrations.
Rezultati bi se trebali temeljiti na izmjerenim koncentracijama.
However, if the concentration of the test chemical in solution has been satisfactorily maintained within ± 20 % of the nominal concentration throughout the test, then the results can either be based on nominal or measured values.
Međutim, ako se koncentracija ispitivane kemikalije u otopini tijekom čitavog ispitivanja na zadovoljavajući način održava u granicama ± 20 % nazivne koncentracije, rezultati se mogu temeljiti na nazivnim ili izmjerenim vrijednostima.
Observations and measurements
Opažanja i mjerenja
Stage of embryonic development
Stadij embrionalnog razvoja
The exposure should begin as soon as possible after fertilisation and before cleavage of the blastodisc commences and no later than 12 h post fertilisation to ensure exposure during early embryonic development.
Izlaganje bi trebalo započeti što je prije moguće nakon oplodnje i prije početka cijepanja blastodiska, a najkasnije 12 sati nakon oplodnje kako bi se osiguralo izlaganje tijekom ranog embrionalnog razvoja.
Hatching and survival
Valjenje i preživljavanje
Observations on hatching and survival should be made at least once daily and numbers recorded.
Valjenje i preživljavanje potrebno je promatrati najmanje jedanput dnevno i relevantne brojke dokumentirati.
Dead embryos, larvae and juvenile fish should be removed as soon as observed since they can decompose rapidly and may be broken up by the actions of the other fish.
Mrtve embrije, ličinke i juvenilne ribe potrebno je ukloniti čim ih se uoči jer se mogu brzo raspasti i druge ih ribe svojim aktivnostima mogu raskidati.
Extreme care should be taken when removing dead individuals not to knock or physically damage adjacent eggs/larvae, these being extremely delicate and sensitive.
Kod uklanjanja mrtvih jedinki nužan je krajnji oprez kako bi se izbjegli udarci ili fizičko ozljeđivanje susjednih jajašaca/ličinki, koji su izuzetno nježni i osjetljivi.
Criteria for death vary according to life stage:
Kriteriji za utvrđivanje smrti razlikuju se ovisno o životnom stadiju:
for eggs:
za jajašca:
particularly in the early stages, a marked loss of translucency and change in coloration, caused by coagulation and/or precipitation of protein, leading to a white opaque appearance;
posebno u ranim stadijima, vidan gubitak prozirnosti i promjena boje zbog koagulacije i/ili taloženja proteina, što rezultira bjelkasto-mutnim izgledom,
for larvae and juvenile fish:
za ličinke i juvenilne ribe:
immobility and/or absence of respiratory movement and/or absence of heart-beat and/or white opaque coloration of central nervous system and/or lack of reaction to mechanical stimulus.
nepomičnost i/ili odsutnost pokreta disanja i/ili odsutnost bila i/ili bijela mutna boja središnjeg živčanog sustava i/ili izostanak reakcije na mehaničke podražaje.
Abnormal appearance
Neuobičajeni izgled
The number of larvae or fish showing abnormality of body form should be recorded, and the appearance and the nature of the abnormality described.
Potrebno je zabilježiti broj ličinki ili riba u kojih su vidljive nepravilnosti u obliku tijela i opisati izgled i vrstu nepravilnosti.
It should be noted that abnormal embryos and larvae occur naturally and can be of the order of several per cent in the control(s) in some species.
Važno je napomenuti da je pojava abnormalnih embrija i ličinki prirodna i da ih u nekih vrsta u kontroli/kontrolama može biti i više postotaka.
Abnormal animals should only be removed from the test chambers on death.
Abnormalne životinje potrebno je ukloniti iz ispitnih posuda tek nakon smrti.
However, in accordance with Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes, if abnormalities result in pain, suffering and distress or lasting harm, and death can be reliably predicted, animals should be anaesthetised and euthanised according to the description in paragraph 44 and treated as mortality for data analysis..
Međutim, u skladu s Direktivom 2010/63/EU Europskog parlamenta i Vijeća od 22. rujna 2010. o zaštiti životinja koje se koriste u znanstvene svrhe, ako nepravilnosti prouzroče bol, patnju, stres ili trajno oštećenje i ako se smrt može pouzdano predvidjeti, životinje je potrebno anestezirati i usmrtiti kako je opisano u stavku 44. i obraditi kao smrtnost u analizi podataka.
Abnormal behaviour
Neuobičajeno ponašanje
Abnormalities, e.g. hyperventilation, uncoordinated swimming, atypical quiescence and atypical feeding behaviour should be recorded at appearance.
Nepravilnosti, npr. hiperventilaciju, nekoordinirano plivanje, atipičnu mirnoću i atipično ponašanje pri hranjenju potrebno je bilježiti kada se pojave.
At the end of the test all surviving fish should be euthanised (anaesthetised if blood samples should be taken), and individual wet weight (blotted dry) should be measured.
Na kraju ispitivanja potrebno je usmrtiti (anestezirati ako je potrebno uzeti uzorke krvi) sve preživjele ribe i izmjeriti pojedinačnu mokru masu riba (osušenih upijajućim materijalom).
At the end of the test, individual lengths (standard length) should be measured.
Na kraju ispitivanja potrebno je izmjeriti pojedinačne dužine (standardne dužine).
These observations will result in some or all of the following data being available for reporting:
Na temelju navedenih opažanja dobit će se svi ili neki od sljedećih podataka koji se upotrebljavaju u izvješćivanju:
cumulative mortality;
kumulativna smrtnost,
numbers of healthy fish at end of test;
broj zdravih riba na kraju ispitivanja,
time to start of hatching and end of hatching;
vrijeme do početka valjenja i kraja valjenja,
length and weight of surviving animals;
dužina i masa preživjelih životinja,
numbers of deformed larvae;
broj deformiranih ličinki,
numbers of fish exhibiting abnormal behaviour.
broj riba koje pokazuju neuobičajeno ponašanje.
Sampling of fish
Uzorkovanje riba
Fish sampling is performed at termination of the test.
Uzorkovanje riba provodi se nakon završetka ispitivanja.
Sampled fish should be euthanised with e.g. MS-222 (100-500 mg per l buffered with 200 mg NaHCO3 per l) or FA-100 (4-allyl-2-methoxyphenol: eugenol) and individually measured and weighed as wet weight (blotted dry) or anaesthetised if a blood sample should be taken (see paragraph 49).
Uzorkovanu ribu potrebno je usmrtiti npr. primjenom MS-222 (100 – 500 mg po litri puferirano s 200 mg NaHCO3 po litri) ili FA-100 (4-alil-2-metoksifenol: eugenol) i pojedinačno izmjeriti i izvagati kao mokru masu ribe (osušene upijajućim materijalom) ili anestezirati ako je potrebno uzeti uzorak krvi (vidi stavak 49.).
Sampling for VTG analysis and sex determination via histological evaluation
Uzorkovanje za analizu VTG-a i određivanje spola histološkom procjenom
All fish should be sampled and prepared for analysis of sex and VTG.
Sve ribe potrebno je uzorkovati i pripremiti za analizu spola i VTG-a.
All fish should be analysed histologically to determine sex.
Sve ribe potrebno je histološki analizirati kako bi im seodredio spol.
For the VTG measurements, a sub-sampling of at least 16 fish from each replicate is accepted.
Za mjerenje VTG-a prihvaća se poduzorkovanje najmanje 16 riba iz svakog ponavljanja.
More fish should be analysed for VTG if the results of the sub-sampling turn out to be unclear.
Potrebno je analizirati više riba za VTG ako se rezultati poduzorkovanja pokažu nejasnima.
The sampling procedure for VTG and sex determination is dependent on the VTG analysis method:
Postupak uzorkovanja za VTG i određivanje spola ovise o metodi analize VTG-a.
Head/tail homogenate method for VTG analysis
Metoda homogenata glave/repa za analizu VTG-a
The fish is euthanised.
Ribe se usmrćuju.
Head and tail of each fish are separated from the body of the fish by cuts made right behind the pectoral fins, and right behind the dorsal fin, using a scalpel (See Figure 1).
Glava i rep svake ribe skalpelom se odvajaju od tijela ribe rezovima neposredno iza prsnih peraja i neposredno iza leđne peraje (vidi sliku 1.).
The head and tail part from each fish are pooled, weighed and individually numbered, frozen in liquid nitrogen and stored at – 70° or less for VTG analysis.
Glava i rep svake ribe ujedinjuju se, važu i pojedinačno označuju brojem, zamrzavaju tekućim dušikom i pohranjuju na – 70 ° ili manje za analizu VTG-a.
The body part of the fish is numbered and fixed in an appropriate fixative for histological evaluation (22).
Tijelo ribe označuje se brojem i fiksira u odgovarajućem fiksativu za histološku procjenu (22).
By use of this method VTG and histopathology are evaluated on each individual and a possible change in the VTG level can thus be related to the phenotypic sex of the fish or genetic sex (Japanese medaka and the three-spined stickleback) of the fish.
Primjenom ove metode VTG i histopatološka analiza ocjenjuju se za svaku jedinku i stoga se svaka promjena razine VTG-a može povezati s fenotipskim spolom ribe ili genetskim spolom (medaka i koljuška) ribe.
For further information see guidance for homogenisation (Appendix 5) and guidance for VTG quantification (Appendix 6).
Za više informacija vidi smjernicu za homogenizaciju (Dodatak 5.) i smjernicu za kvantifikaciju VTG-a (Dodatak 6.).
Liver homogenate method for VTG analysis
Metoda homogenata jetre za analizu VTG-a
The liver is dissected out and stored at – 70 °C or below.
Jetra se secira i pohranjuje na ili ispod – 70 °C.
Recommended procedures for liver excision and pre-treatment are available in OECD TG 229 (37) or Chapter C.37 of this Annex (38).
Preporučeni su postupci za eksciziju i prethodnu obradu jetre navedeni u Smjernici OECD-a TG 229 (37.) ili poglavlju C.37. ovog Priloga (38).
Livers are then individually homogenised as described in OECD TG 229 or Chapter C.37 of this Annex.
Potom se jetra pojedinačno homogenizira kako je opisano u Smjernici OECD-a TG 229 ili poglavlju C.37. ovog Priloga.
The supernatant collected is used for measuring VTG with a homologous ELISA technique (see Appendix 6 for an example of quantification in zebrafish or OECD TG 229 (37) for Japanese medaka).
Prikupljeni supernatant upotrebljava se za mjerenje VTG-a homolognom ELISA tehnikom (vidi Dodatak 6. za primjer kvantifikacije u slučaju zebrica ili Smjernicu OECD-a TG 229 (37) za medaku).
Following this approach, it is also possible to have individual fish data on both VTG and gonad histology.
Primjenom tog pristupa moguće je dobiti i podatke o VTG-u i histološkoj analizi spolnih žlijezda za pojedinačne ribe.
Blood plasma method for VTG analysis
Metoda krvne plazme za analizu VTG-a
Blood is collected from the anaesthetised fish by cardiac puncture, caudal vein or tail cutting, and centrifuged at 4 °C for plasma collection.
Krv se prikuplja iz riba pod anestezijom punkcijom srca, iz kaudalne vene ili rezanjem repa i centrifugira na 4 °C za prikupljanje plazme.
The plasma is stored at – 70 °C or below until use.
Plazma se pohranjuje na ili ispod – 70 °C.
The whole fish is euthanised and fixed for histology.
Sve se ribe usmrćuju i fiksiraju za histološku analizu.
Both plasma samples and fish are numbered individually to relate VTG levels to the sex of the fish.
Uzorci plazme i ribe pojedinačno se označuju brojevima kako bi se razine VTG-a povezale sa spolom riba.
How to cut a fish for measurement of VTG in head/tail homogenate and histological evaluation of the mid section
Kako rezati ribu za mjerenje VTG-a u homogenatu glave/repa i histološkoj procjeni srednjeg dijela.
Genetic sex determination
Određivanje genetskog spola
A biological sample for the determination of the genetic sex is taken from individual fish in species possessing appropriate markers.
Biološki uzorak za određivanje genetskog spola uzima se iz pojedinačnih riba u vrsta koje imaju odgovarajuće markere.
For Japanese medaka, the anal fin or dorsal fin is collected.
U slučaju medake uzima se analna ili leđna peraja.
A detailed description is given in Appendix 9 including tissue sampling and sex determination by a PCR-method.
U Dodatku 9. naveden je detaljan opis uključujući uzorkovanje tkiva i određivanje spola metodom PCR-a.
Equally, for the three spined stickleback, a description of tissue sampling and a sex determining PCR-method is given in Appendix 10.
Isto tako, u Dodatku 10. opisano je uzorkovanje tkiva i određivanje spola metodom PCR-a za koljušku.
VTG measurement
Mjerenje VTG-a
The measurement of VTG should be based upon a quantitative and analytically validated method.
Mjerenje VTG-a trebalo bi se temeljiti na kvantitativnoj i analitički provjerenoj metodi.
Information should be available upon the intra-assay and inter-assay variability of the method used in a given laboratory.
Informacije bi trebale biti dostupne na temelju varijabilnosti metode upotrijebljene u odgovarajućem laboratoriju unutar testa i između testova.
The source of inter- and intra-laboratory variability is (most likely) based on the different developing stages of the fish population.
Izvor međulaboratorijske i unutarlaboratorijske varijabilnosti (najvjerojatnije) temelji se na različitim razvojnim stadijima populacije riba.
Considering the variability of VTG measurement, NOECs based on this endpoint alone should be treated with great care.
Uzimajući u obzir varijabilnost mjerenja VTG-a, najviše koncentracije bez vidljivog učinka (NOEC) koje se temelje samo na tom krajnjem učinku potrebno je obraditi s velikom pažnjom.
Different methods are available to assess VTG production in the fish species considered in this assay.
Dostupne su različite metode za procjenu proizvodnje VTG-a u ribljim vrstama koje se razmatraju u ovom ispitivanju.
A measurement technique that is both relatively sensitive and specific is the determination of protein concentrations via enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).
Mjerna je tehnika koja je relativno osjetljiva i specifična određivanje koncentracija proteina enzimskim imunosorbentnim testom (ELISA).
Homologous antibodies (raised against VTG of the same species) and most important homologous standards should be used.
Trebala bi se upotrebljavati homologna antitijela (na VTG iste vrste) i najvažniji homologni standardi.
Sex determination
Određivanje spola
Dependent on the VTG sampling procedure, whole fish or the remaining mid-section of each fish is placed in a pre-labelled processing cassette and fixed in an appropriate fixative for histological determination of sex (optionally also for evaluation of gonadal staging).
Ovisno o postupku uzorkovanja VTG-a, cijela se riba ili preostali srednji dio svake ribe stavlja u prethodno označenu kasetu za obradu i fiksira u odgovarajućem fiksativu za histološko određivanje spola (po izboru i za procjenu stadija razvoja spolnih žlijezda).
Guidance on fixation and embedding is provided in Appendix 7 as well as in the OECD Guidance Document on the Diagnosis of Endocrine-Related Histopathology of Fish Gonads (22).
Smjernica za fiksiranje i uklapanje navedena je u Dodatku 7. i Smjernici OECD-a za dijagnozu histopatološke analize spolnih žlijezda riba povezane s endokrinim sustavom (22).
After processing, the fish are embedded in paraffin blocks.
Nakon obrade ribe se uklapaju u parafinske blokove.
The individuals should be placed longitudinally in the paraffin block.
Jedinke se polažu longitudinalno u parafinski blok.
At least six longitudinal sections (3-5 μm in thickness) in a frontal plane including gonadal tissue from both gonads are taken from each individual.
Od svake se jedinke uzima najmanje šest longitudinalnih sekcija (debljine 3 – 5 μm) u prednjoj ravnini uključujući tkivo obiju spolnih žlijezda.
The interval between these sections should be approximately 50 μm for males and 250 μm for females.
Razmak između navedenih sekcija trebao bi biti oko 50 μm za mužjake i 250 μm za ženke.
However, since each block will often contain males and females (if more than one individual are embedded in each block), the interval between sections from these blocks should be approximately 50 μm until at least six sections of the gonads from each male are obtained.
Međutim, s obzirom na to da će svaki blok često sadržavati mužjake i ženke (ako je u svaki blok uklopljeno više jedinki), razmak između sekcija iz navedenih blokova trebao bi biti oko 50 μm dok se ne dobije najmanje šest sekcija spolnih žlijezda od svakog mužjaka.
Thereafter, the interval between sections can be increased to approximately 250 μm for the females.
Nakon toga razmak između sekcija može se povećati na oko 250 μm za ženke.
Sections are stained with haematoxylin and eosin and examined by light-microscopy with focus on sex (male, female, intersex or undifferentiated).
Sekcije se boje hematoksilinom i eozinom i ispituju svjetlosnom mikroskopijom s fokusom na spol (muški, ženski, međuspol, nediferenciran).
Intersex is defined as presence of more than one oocyte in testis per six sections analysed or spermatogenic cells (yes/no) in ovaries.
Međuspol je definiran kao prisutnost više od jedne jajne stanice u testisu u šest analiziranih sekcija ili spermatogenih stanica (da/ne) u jajnicima.
Histopathology and staging of ovaries and testis is optional but if investigated, the results should be statistically analyzed and reported.
Histopatološka analiza i određivanje stadija jajnika i testisa nisu obvezni, ali ako se ispituju, rezultate je potrebno statistički analizirati i navesti u izvješću.