natgillin/translations-raw huggingface dataset:
It is necessary to update Regulation (EC) No 440/2008 to include with priority new and updated alternative test methods recently adopted by the OECD, in order to obtain a reduction of the number of animals to be used for experimental purposes, in accordance with Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes [3] and Council Directive 86/609/EEC of 24 November 1986 on the approximation of laws, regulations and administrative provisions of the Member States regarding the protection of animals used for experimental and other scientific purposes [4].
Uredbu (EZ) br. 440/2008 potrebno je ažurirati kako bi se u nju prioritetno uključile nove i ažurirane alternativne ispitne metode koje je nedavno donio OECD radi smanjenja broja životinja koje se koriste u pokusima u skladu s Direktivom 2010/63/EU Europskog parlamenta i Vijeća od 22. rujna 2010. o zaštiti životinja koje se koriste u znanstvene svrhe [3] i Direktivom Vijeća 86/609/EEZ od 24. studenog 1986. o usklađivanju odredaba utvrđenih zakonom i drugim propisima država članica o zaštiti životinja koje se koriste za pokusne i druge znanstvene svrhe [4].
The adaptation contains two methods for the determination of physicochemical properties including an update of the water solubility test method and a new partition coefficient test method relevant for the persistent, bioaccumulative and toxic (PBT) assessment; four new and one updated method for the determination of ecotoxicity and environmental fate and behaviour; nine methods for the determination of toxicity and other health effects including four inhalation toxicity test methods, which include an update of three methods and one new method to reduce the number of animals used and to improve assessment of effects, an update of the repeat dose 28-day oral toxicity test method to include parameters for assessment of endocrine activity, an update of the toxicokinetics test method relevant for the design and understanding of toxicological studies and an update of chronic, carcinogenicity and combined chronic and carcinogenicity test methods.
Prilagodbom su obuhvaćene dvije metode za utvrđivanje fizikalno-kemijskih svojstava, uključujući ažuriranu verziju ispitne metode za određivanje topljivost u vodi i novu ispitnu metodu za određivanje koeficijenta razdiobe bitnog za ocjenu postojanosti, bioakumulativnosti i otrovnosti (PBT); četiri nove i jedna ažurirana metoda za određivanje ekotoksičnosti tvari te njezina ostanka i ponašanja u okolišu; devet metoda za određivanje toksičnosti i drugih učinaka na zdravlje, uključujući četiri ispitne metode za određivanje inhalacijske toksičnosti, koje obuhvaćaju ažurirane verzije triju metoda i jednu novu metodu za smanjenje broja životinja koje se koriste u pokusima i poboljšanu ocjenu učinaka, ažuriranu verziju ispitne metode za utvrđivanje oralne toksičnosti kod ponovljenog doziranja u trajanju 28 dana radi uključivanja parametara za ocjenu endokrinog djelovanja, ažuriranu verziju ispitne metode za određivanje toksikokinetičnosti bitne za osmišljavanje i razumijevanje toksikoloških studija te ažurirane verzije ispitnih metoda za određivanje kronične toksičnosti i kancerogenosti i kombinirane kronične toksičnosti i kancerogenosti.
Regulation (EC) No 440/2008 should therefore be amended accordingly.
Uredbu (EZ) br. 440/2008 bi stoga trebalo na odgovarajući način izmijeniti.
The Annex to Regulation (EC) No 440/2008 is amended in accordance with the Annex to this Regulation.
Prilog Uredbi (EZ) br. 440/2008 mijenja se u skladu s Prilogom ovoj Uredbi.
OJ L 358, 18.12.1986, p. 1.
SL L 358, 18.12.1986., str. 1.
The Annex to Regulation (EC) No 440/2008 is amended as follows:
Prilog Uredbi (EZ) br. 440/2008 mijenja se i glasi:
Chapter A.6 is replaced by the following:
Poglavlje A.6 mijenja se i glasi:
WATER SOLUBILITY
TOPLJIVOST U VODI
This Test Method is equivalent to OECD Test Guideline (TG) 105 (1995).
Ova je ispitna metoda ekvivalentna Smjernici za ispitivanje OECD-a (TG) 105 (1995.).
This Test Method is a revised version of the original TG 105 which was adopted in 1981.
Ova je ispitna metoda revidirana verzija originalne smjernice TG 105 donesene 1981.
The revision was based on the EU Test Method “Water Solubility” (1).
Revizija se temelji na ispitnoj metodi EU-a ‚Topljivost u vodi’ (1).
INITIAL CONSIDERATIONS
POČETNA RAZMATRANJA
The water solubility of a substance can be considerably affected by the presence of impurities.
Prisutnost nečistoća može znatno utjecati na topljivost tvari u vodi.
This Test Method addresses the determination of the solubility in water of essentially pure substances which are stable in water and not volatile.
Ova se ispitna metoda bavi određivanjem topljivosti u vodi tvari koje su načelno čiste, stabilne u vodi i nehlapljive.
Before determining water solubility, it is useful to have some preliminary information on the test substance, like structural formula, vapour pressure, dissociation constant and hydrolysis as a function of pH.
Prije određivanja topljivosti u vodi korisno je imati neke preliminarne podatke o ispitivanoj tvari, kao što su strukturna formula, tlak pare, konstanta disocijacije i hidroliza kao funkcija pH.
Two methods, the column elution method and the flask method which cover respectively solubilities below and above 10–2 g/l are described in this Test Method.
U ovoj ispitnoj metodi opisane su dvije metode, metoda eluiranja kolone i metoda tikvice, koje obuhvaćaju odgovarajuću topljivost ispod i iznad 10 –2 g/l.
A simple preliminary test is also described.
Također je opisan i jednostavni preliminarni test.
It allows the determination of approximately the appropriate amount of sample to be used in the final test, as well as the time necessary to achieve saturation.
Taj test omogućuje određivanje približno prikladnog broja uzoraka koji će se rabiti u završnom ispitivanju te vrijeme potrebno za postizanje zasićenja.
DEFINITIONS AND UNITS
DEFINICIJE I JEDINICE
The water solubility of a substance is the saturation mass concentration of the substance in water at a given temperature.
Topljivost tvari u vodi jest koncentracija mase zasićenosti tvari u vodi na zadanoj temperaturi.
Water solubility is expressed in mass of solute per volume of solution.
Topljivost u vodi izražava se masom otopljene tvari po volumenu otopine.
The SI unit is kg/m3 but g/l may also be used.
Jedinica prema sustavu SI je kg/m3, ali se može rabiti i g/l.
REFERENCE CHEMICALS
REFERENTNE KEMIKALIJE
Reference chemicals do not need to be employed when investigating a test substance.
Pri istraživanju ispitivane tvari ne moraju se primjenjivati referentne kemikalije.
DESCRIPTION OF THE METHODS
OPIS METODA
The test is preferably run at 20 ± 0,5 °C.
Ispitivanje valja provoditi na 20 ± 0,5 °C.
The chosen temperature should be kept constant in all relevant parts of the equipment.
Odabranu temperaturu valja održavati konstantnom u svim relevantnim dijelovima opreme.
Preliminary test
Preliminarno ispitivanje
In a stepwise procedure, increasing volumes of water are added at room temperature to approximately 0,1 g of the sample (solid test substances must be pulverized) in a 10 ml glass-stoppered measuring cylinder.
Sve veći volumeni vode na sobnoj temperaturi postupno se dodaju u otprilike 0,1 g uzorka (krute ispitivane tvari moraju se fino usitniti) u cilindar od 10 ml sa staklenim čepom.
After each addition of an amount of water, the mixture is shaken for 10 minutes and is visually checked for any undissolved parts of the sample.
Nakon svakog dodavanja određene količine vode mješavinu treba protresati 10 minuta i zatim vizualno provjeriti ima li u uzorku još neotopljenih dijelova.
If, after addition of 10 ml of water, the sample or parts of it remain undissolved, the experiment is continued in a 100 ml measuring cylinder.
Ako nakon dodavanja 10 ml vode uzorak ili dijelovi uzorka ostanu neotopljeni, pokus treba ponoviti u cilindru od 100 ml.
The approximate solubility is given in Table 1 below under that volume of water in which complete dissolution of the sample occurs.
Približna topljivost navedena je u tablici 1. pod onim volumenom vode u kojem dolazi do potpunog otapanja uzorka.
When the solubility is low, a long time may be required to dissolve a test substance and at least 24 hours should be allowed.
Ako je topljivost niska, može biti potrebno dugo vrijeme za otapanje ispitivane tvari za što treba omogućiti najmanje 24 sata.
If, after 24 hours, the test substance is still not dissolved, more time (up to 96 hours) should be allowed or further dilution should be attempted to ascertain whether the column elution method or flask method should be used.
Ako se nakon 24 sata ispitivana tvar još uvijek ne otopi, treba produljiti vrijeme otapanja (do 96 sati) ili je pokušati dodatno razrijediti kako bi se utvrdilo treba li primijeniti metodu eluiranja kolone ili metodu tikvice.
ml of water for 0,1 g soluble
ml vode na 0,1 g otopljene tvari
approximate solubility in g/l
približna topljivost u g/l
Column elution method
Metoda eluiranja kolone
Principle
Načelo
This method is based on the elution of a test substance with water from a micro-column which is charged with an inert support material, previously coated with an excess of the test substance (2).
Ova se metoda zasniva na eluiranju vodom ispitivane tvari iz mikro-kolone koja je napunjena inertnim nosivim materijalom, prethodno obloženim prekomjernom količinom ispitivane tvari (2).
The water solubility is given by the mass concentration of the eluate when this has reached a plateau as a function of time.
Topljivost u vodi određuje se kada koncentracija mase eluata dosegne plato kao funkciju vremena.
Apparatus
Aparatura
The apparatus consists of a microcolumn (Figure 1), maintained at constant temperature.
Aparatura obuhvaća mikro-kolonu (slika 1.) koja se održava na konstantnoj temperaturi.
It is connected either to a recirculating pump (Figure 2) or to a levelling vessel (Figure 3).
Mikro-kolona je povezana s recirkulacijskom crpkom (slika 2.) ili nivelacijskom posudom (slika 3.).
The microcolumn contains an inert support held in place by a small plug of glasswool which also serves to filter out particles.
Mikro-kolona sadrži inertni nosač koji na mjestu drži mali čep od staklene vune koji također služi i za filtriranje čestica.
Possible materials which can be employed for the support are glass beads, diatomaceous earth, or other inert materials.
Materijali koji se mogu upotrijebiti kao nosač jesu staklene kuglice, dijatomejska zemlja ili drugi inertni materijali.
The microcolumn shown in Figure 1 is suitable for the set-up with recirculating pump.
Mikro-kolona prikazana na slici 1. prikladna je za povezivanje s recirkulacijskom crpkom.
It has a head space providing for five bed volumes (discarded at the start of the experiment) and the volume of five samples (withdrawn for analysis during the experiment).
U koloni iznad uzorka mora biti mjesta za pet volumena vode (koji se odbacuju na početku pokusa) i volumen pet uzoraka (koji se uzimaju za analizu tijekom pokusa).
Alternatively, the size can be reduced if water can be added to the system during the experiment to replace the initial five bed volumes removed with impurities.
Druga je mogućnost smanjiti veličinu ako se sustavu tijekom pokusa može dodavati voda kako bi se zamijenilo početnih pet volumena vode koji su uklonjeni s nečistoćama.
The column is connected with tubing made of an inert material to the recirculating pump, capable of delivering approximately 25 ml/h.
Kolona je preko cijevi od inertnog materijala povezana s recirkulacijskom crpkom koja može dobaviti približno 25 ml/h.
The recirculating pump can be, for example, a peristaltic or membrane pump.
Recirkulacijska crpka može biti, primjerice, peristaltička ili membranska crpka.
Care must be taken that no contamination and/or adsorption occur with the tube material.
Treba voditi računa da ne dođe do kontaminacije materijalom same cijevi i/ili adsorpcije na materijal cijevi.
A schematic arrangement using a levelling vessel is shown in Figure 3.
Shematski raspored s nivelacijskom posudom prikazan je na slici 3.
In this arrangement the microcolumn is fitted with a one way stopcock.
U tom je rasporedu mikro-kolona opremljena jednosmjernom slavinom.
The connection to the levelling vessel consists of a ground glass joint and tubing made of an inert material.
Spoj s nivelacijskom posudom sastoji se od ubrušenog staklenog spoja i cjevovoda od inertnog materijala.
The flow rate from the levelling vessel should be approximately 25 ml/h.
Brzina protoka iz nivelacijske posude trebala bi iznositi otprilike 25 ml/h.
Dimensions in mm
Dimenzije u mm
A. Connection for ground glass joint
A. Priključak za ubrušeni stakleni spoj
B. Headspace
B. Prostor u koloni
C. Interior 5
C. Unutrašnji 5
D. Exterior 19
D. Vanjski 19
E. Plug of glass wool
E. Čep od staklene vune
F. Stopcock
F. Slavina
A. Atmospheric equilibration
A. Atmosfersko uravnoteženje
B. Flowmeter
B. Mjerač protoka
C. Microcolumn
C. Mikro-kolona
D. Thermostatically controlled circulating pump
D. Termostatski kontrolirana crpka za cirkulaciju
E. Recirculating pump
E. Recirkulacijska crpka
F. Two-way valve for sampling
F. Dvosmjerni ventil za uzorkovanje
A. Levelling vessel (e.g. 2,5 litres chemical flask)
A. Nivelacijska posuda (npr. 2,5-litarska tikvica)
B. Column
B. Kolona
C. Fraction accumulator
C. Skupljač frakcije
D. Thermostat
D. Termostat
E. Teflon tubing
E. Teflonski cjevovod
F. Ground glass joint
F. Ubrušeni stakleni spoj
G. Water line (between thermostat and column, inner diameter approximately 8 mm)
G. Cjevovod (između termostata i kolone, unutarnjeg promjera približno 8 mm)
Approximately 600 mg of support material is transferred to a 50 ml round-bottom flask.
Oko 600 mg nosivog materijala prebacuje se u tikvicu zaobljenog dna od 50 ml.
A suitable amount of test substance is dissolved in a volatile solvent of analytical reagent quality and an appropriate amount of this solution is added to the support material.
Odgovarajuća količina ispitivane tvari otapa se u hlapljivom otapalu kvalitete analitičkog reagensa, a odgovarajuća količina te otopine dodaje se nosivom materijalu.
The solvent is completely evaporated, e.g. using a rotary evaporator, as otherwise water saturation of the support will not be achieved during the elution step because of partitioning on the surface.
Otapalo posve isparava, npr. primjenom okretnog isparivača, jer se u protivnom neće postići zasićenost nosača vodom tijekom faze eluacije zbog razdjeljivanja na površini.
The loaded support material is soaked for two hours in approximately 5 ml of water and the suspension is poured into the microcolumn.
Napunjeni nosivi materijal namače se dva sata u oko 5 ml vode, a zatim se ta otopina ulijeva u mikro-kolonu.
Alternatively, dry loaded support material may be poured into the water-filled microcolumn and two hours are allowed for equilibrating.
Kao druga mogućnost, suhi napunjeni nosivi materijal može se usuti u mikro-kolonu ispunjenu vodom i ostaviti dva sata da se uravnoteži.
The loading of the support material may cause problems, leading to erroneous results, e.g. when the test substance is deposited as an oil.
Dodavanje nosivog materijala može izazvati probleme koji dovode do pogrešnih rezultata, npr. kad se ispitivana tvar taloži kao ulje.
These problems should be examined and the details reported.
Takve probleme valja ispitati i izvijestiti o pojedinostima.
Procedure using a recirculating pump
Postupak s recirkulacijskom crpkom
The flow through the column is started.
Započinje protok kroz kolonu.
It is recommended that a flow rate of approximately 25 ml/h, corresponding to 10 bed volumes per hour for the column described, be used.
Preporuča se primjena brzine protoka od približno 25 ml/h, što kod opisane kolone odgovara veličini od 10 volumena punjenja na sat.
At least the first five bed volumes are discarded to remove water soluble impurities.
Najmanje prvih pet volumena vode potroše se na uklanjanje nečistoća topljivih u vodi.
Following this, the pump is allowed to run until equilibrium is established, as defined by five successive samples whose concentrations do not differ by more than ± 30 % in a random fashion.
Nakon toga, crpka se ostavi u radu dok se ne postigne ravnoteža, nasumice utvrđena s pet uzastopnih uzoraka čije se koncentracije ne razlikuju za više od ± 30 %.
These samples should be separated from each other by time intervals corresponding to the passage of at least ten bed volumes.
Te uzorke treba međusobno razdvojiti vremenskim intervalima koji odgovaraju prolasku najmanje deset volumena punjenja.
Depending on the analytical method used, it may be preferable to establish a concentration/time curve to show that equilibrium is reached.
Ovisno o primijenjenoj analitičkoj metodi, prednost se može dati izradi krivulje koncentracije u ovisnosti o vremenu kako bi se pokazalo da je postignuta ravnoteža.
Procedure using a levelling vessel
Postupak s nivelacijskom posudom
Successive eluate fractions should be collected and analysed by the chosen method.
Susljedne frakcije eluata treba prikupiti i analizirati odabranom metodom.
Fractions from the middle eluate range, where the concentrations are constant within ± 30 % in at least five consecutive fractions, are used to determine the solubility.
Za određivanje topljivosti koriste se frakcije iz srednjeg područja eluata u kojem su koncentracije stalne unutar ± 30 % u najmanje pet uzastopnih frakcija.
Double distilled water is the preferred eluent.
Najprikladniji je eluat dvostruko destilirana voda.
Deionized water with a resistivity above 10 megohms/cm and total organic carbon content below 0,01 % can also be used.
Također se može upotrebljavati i deionizirana voda s otpornošću većom od 10 megaohm/cm i ukupnim sadržajem organskog ugljika ispod 0,01 %.
Under both procedures, a second run is performed at half the flow rate of the first.
U oba slučaja drugi krug pokusa treba provesti s pola brzine protoka prvog kruga.
If the results of the two runs are in agreement, the test is satisfactory.
Ako se rezultati oba kruga slažu, ispitivanje se smatra zadovoljavajućim.
If the measured solubility is higher with the lower flow rate, then the halving of the flow rate must continue until two successive runs give the same solubility.
Ako je izmjerena topljivost veća s nižom brzinom protoka, tada se prepolavljanje brzine protoka mora nastaviti sve dok dva uzastopna kruga ne daju istu topljivost.
Under both procedures, the fractions should be checked for the presence of colloidal matter by examination of the Tyndall effect.
U oba slučaja kod frakcija treba provjeriti prisutnost koloidne tvari na način da se provjeri javlja li se Tyndallov efekt.
The presence of particles invalidates the test and the test should be repeated after improvement of the filtering action of the column.
Prisutnost takvih čestica ispitivanje čini nevaljanim te ispitivanje valja ponoviti nakon poboljšanja filtriranja kolone.
The pH of each sample should be measured, preferably by using special indicator strips.
Valja izmjeriti pH vrijednost svakog uzorka, po mogućnosti posebnim indikatorskim trakama.
Flask method
Metoda tikvice
The test substance (solids must be pulverized) is dissolved in water at a temperature somewhat above the test temperature.
Ispitivana tvar (krutine treba fino usitniti) otapa se u vodi na temperaturi malo višoj od ispitne temperature.
When saturation is achieved, the mixture is cooled and kept at the test temperature.
Kada se postigne zasićenje, smjesa se hladi i održava na ispitnoj temperaturi.
Alternatively, and if it is assured by appropriate sampling that the saturation equilibrium is reached, the measurement can be performed directly at the test temperature.
Ako je odgovarajućim uzorkovanjem potvrđeno da se postiglo uravnoteženje zasićenosti, mjerenje se alternativno može obaviti izravno na ispitnoj temperaturi.
Subsequently, the mass concentration of the test substance in the aqueous solution, which must not contain any undissolved particles, is determined by a suitable analytical method (3).
Zatim se koncentracija mase ispitivane tvari u vodenoj otopini, koja ne smije sadržavati neotopljene čestice, određuje prikladnom analitičkom metodom (3).
The following materials are needed:
Potreban je sljedeći materijal:
normal laboratory glassware and instrumentation;
obične laboratorijske staklene posude i instrumenti,
a device for the agitation of solutions under controlled constant temperature;
uređaj za miješanje otopina na kontroliranoj konstantnoj temperaturi,
if required for emulsions, a centrifuge (preferably thermostated); and
centrifuga (poželjno termostatski regulirana), po potrebi s emulzijama, i
analytical equipment.
analitička oprema.
The quantity of test substance necessary to saturate the desired volume of water is estimated from the preliminary test.
Količina ispitivane tvari koja je potrebna za zasićenje željenog volumena vode procjenjuje se iz preliminarnog ispitivanja.
About five times that quantity is weighed into each of three glass vessels fitted with glass stoppers (e.g. centrifuge tubes, flasks).
U svaku od tri staklene posude opremljene staklenim zatvaračima (npr. cijevi centrifuge, tikvice) odmjerava se peterostruka gore određena količina tvari.
A volume of water, chosen in function of the analytical method and solubility range, is added to each vessel.
U svaku posudu dodaje se volumen vode odabran ovisno o analitičkoj metodi i području topljivosti.
The vessels are tightly stoppered and then agitated at 30 °C.
Posude se čvrsto začepe i protresaju na 30 °C.
A shaking or stirring device capable of operating at constant temperature should be used, e.g. magnetic stirring in a thermostated water bath.
Treba koristiti uređaj za protresanje ili miješanje koji može raditi na stalnoj temperaturi, npr. magnetsku miješalicu u termostatiranoj vodenoj kupki.
After one day, one of the vessels is equilibrated for 24 hours at the test temperature with occasional shaking.
Nakon jednog dana jedna od posuda uravnotežuje se 24 sata na temperaturi ispitivanja uz povremeno protresanje.
The contents of the vessel are then centrifuged at the test temperature and the concentration of the test substance in the clear aqueous phase is determined by a suitable analytical method.
Sadržaj posude zatim se centrifugira na temperaturi ispitivanja, a koncentracija ispitivane tvari u jasnoj vodenoj fazi određuje se odgovarajućom analitičkom metodom.
The other two flasks are treated similarly after initial equilibration at 30 °C for two and three days respectively.
S druge dvije tikvice postupa se na sličan način nakon početnog uravnoteženja na 30 °C tijekom dva odnosno tri dana.
If the concentrations measured in at least the two last vessels do not differ by more than 15 %, the test is satisfactory.
Ako se koncentracije izmjerene u najmanje dvije posljednje posude ne razlikuje za više od 15 %, ispitivanje se smatra uspješnim.
If the results from vessels 1, 2 and 3 show a tendency of increasing values, the whole test should be repeated using longer equilibration times.
Ako rezultati iz posuda 1., 2. i 3. imaju tendenciju sve većih vrijednosti, ispitivanje treba u potpunosti ponoviti s duljim vremenom uravnoteženja.
The test can also be performed without pre-incubation at 30 °C.
Ispitivanje se također može provoditi i bez prethodne inkubacije na 30 °C.
In order to estimate the rate of establishment of the saturation equilibrium, samples are taken until the stirring time no longer influences the concentrations measured.
Kako bi se procijenila brzina postizanja uravnoteženja zasićenja, uzorci se uzimaju sve do trenutka kada vrijeme miješanja više nema utjecaja na izmjerene koncentracije.
Analytical determinations
Analitička određivanja
A substance-specific method is preferred since small amounts of soluble impurities can cause large errors in the measured solubility.
Za ova ispitivanja poželjno je analitičku metodu odrediti točno prema ispitivanoj tvari jer male količine topljivih nečistoća mogu uzrokovati velike pogreške u izmjerenoj topljivosti.
Examples of such methods are: gas or liquid chromatography, titration, photometry, voltametry.
Te metode mogu biti primjerice plinska ili tekućinska kromatografija, titracija, fotometrija te voltametrija.