natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Using the procedures described in this test method, a limit test may be performed at 100 mg/l of test chemical or at its limit of solubility in the test medium (whichever is the lower) in order to demonstrate that the LC50 is greater than this concentration.
Viljelyä käsitellään tarkemmin lisäyksessä 3.
The limit test should be performed using 20 embryos in the treatment, the positive control and –if necessary- in the solvent control and 24 embryos in the negative control.
Riittävä määrä koe-eliöitä siirretään aseptisesti vähintään 14–21 päivää ennen testausta tuoreeseen steriiliin viljelyaineeseen, ja niitä viljellään 14–21 päivän ajan testiolosuhteissa esiviljelmänä.
If the percentage of lethality at the concentration tested exceeds the mortality in the negative control (or solvent control) by 10 %, a full study should be conducted.
Esiviljelyä on kuvattu yksityiskohtaisesti lisäyksessä 4.
Any observed effects should be recorded.
Myriophyllum spicatum -lajia varten suositellaan vain yhtä viljelyainetta sedimentittömässä testijärjestelmässä lisäyksen 2 mukaisesti.
If mortality exceeds 10 % in the negative control (or solvent control), the test becomes invalid and should be repeated.
Andrewsin kasvualustan muunnosta suositellaan Myriophyllum spicatum -lajin viljelyyn ja sillä tehtävään testaukseen kirjallisuusviitteen (1) mukaisesti.
In this test, the individual wells are considered independent replicates for statistical analysis.
Muutettu Andrewsin kasvualusta sekoitetaan viidestä erikseen valmistetusta kantaravinneliuoksesta lisäämällä 3 prosenttia sakkaroosia.
The percentages of embryos for which at least one of the apical observations is positive at 48 and/or 96 hrs are plotted against test concentrations.
Esiviljelyä käsitellään tarkemmin lisäyksessä 2.
For calculation of the slopes of the curve, LC50 values and the confidence limits (95 %), appropriate statistical methods should be applied (38) and the OECD Guidance Document on Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data should be consulted (39).
Kymmenkertaisesti tiivistettyä muutettua Andrewsin kasvualustaa tarvitaan testiliuosten valmistamiseen (tarvittaessa laimentamalla).
chemical identification, such as IUPAC or CAS name, CAS number, SMILES or InChI code, structural formula, purity, chemical identity of impurities as appropriate and practically feasible, etc. (including the organic carbon content, if appropriate).
Tämän viljelyaineen koostumus esitetään lisäyksessä 2.
Test organisms:
Testiliuokset valmistetaan yleensä laimentamalla kantaliuosta.
test procedure used (e.g., semi-static renewal);
Testikemikaalin kantaliuokset valmistetaan tavallisesti liuottamalla kemikaali demineralisoituun (eli tislattuun tai deionisoituun) veteen.
photoperiod;
Ravinteet lisätään käyttämällä kymmenkertaisesti tiivistettyä muutettua Andrewsin kasvualustaa.
test design (e.g., number of test chambers, types of controls);
Testikemikaalin kantaliuokset voidaan steriloida autoklavoimalla ne 121 °C:n lämpötilassa 20 minuutin ajan tai steriilin suodatuksen avulla edellyttäen, että käytettävä sterilointimenetelmä ei denaturoi testikemikaalia.
water quality characteristics in fish maintenance (e.g. pH, hardness, temperature, conductivity, dissolved oxygen);
Testiliuokset voidaan myös valmistaa steriiliin demineralisoituun veteen tai viljelyaineeseen steriileissä olosuhteissa.
dissolved oxygen concentration, pH, total hardness, temperature and conductivity of the test solutions at the start and after 96 hrs;
Lämpövakaus ja adsorboituminen erilaisiin pintoihin on otettava huomioon testikemikaalin kantaliuosten sterilointimenettelyn valinnassa.
method of preparation of stock solutions and test solutions as well as frequency of renewal;
Tästä syystä suositellaan, että kantaliuokset valmistetaan steriileissä olosuhteissa eli käyttämällä steriiliä materiaalia testikemikaalin liuottamiseen steriileissä olosuhteissa (esimerkiksi liekityssterilointi, laminaarivirtauskuvut) steriiliin veteen.
justification for use of solvent and justification for choice of solvent, if other than water;
Tämä steriilien kantaliuosten valmistusmenetelmä on validi sekä aineille että seoksille.
the nominal test concentrations and the result of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels; the recovery efficiency of the method and the limit of quantification (LoQ) should also be reported;
Testikemikaalin suurin testattu pitoisuus ei yleensä saa ylittää kyseisen kemikaalin vesiliukoisuutta testiolosuhteissa.
evidence that controls met the overall survival validity criteria;
Jos testikemikaali liukenee huonosti veteen, voi olla tarpeen valmistaa kyseisestä kemikaalista väkevä kantaliuos tai dispersio käyttämällä orgaanista liuotinta tai dispergointiainetta, joilla voidaan helpottaa tarkkojen testikemikaalimäärien lisäämistä testiviljelyaineeseen sekä testikemikaalin dispersiota ja liukenemista.
fertilisation rate of the eggs;
Tällaisten aineiden käyttöä on vältettävä mahdollisimman pitkälle.
hatching rate in treatment and control groups.
Jos liuottimia tai dispergointiaineita käytetään apuna testiliuosten valmistuksessa, niistä ei saa aiheutua fytotoksisuutta.
maximum concentration causing no mortality within the duration of the test;
Asetoni ja dimetyyliformamidi ovat esimerkkejä yleisesti käytetyistä liuottimista, jotka eivät aiheuta fytotoksisuutta pitoisuuden ollessa enintään 100 μl/l.
minimum concentration causing 100 % mortality within the duration of the test;
Jos liuotinta tai dispergointiainetta käytetään, sen lopullinen pitoisuus on ilmoitettava ja pidettävä mahdollisimman pienenä (≤ 100 μl/l), ja liuottimeen tai dispergointiaineen pitoisuuden on oltava sama kaikissa käsitellyissä ja kontrolliliuoksissa.
cumulative mortality for each concentration at the recommended observation times;
Dispergointiaineiden käytöstä annetaan lisäohjeita kirjallisuusviitteessä (5).
the LC50 values at 96 hrs (and optionally at 48 hrs) for mortality with 95 % confidence limits, if possible;
Testi- ja kontrolliryhmät
graph of the concentration-mortality curve at the end of the test;
Sopivat testipitoisuudet on helpompi valita, jos testikemikaalin toksisuudesta Myriophyllum spicatum -lajille on saatavilla aiempia tietoja esimerkiksi alustavista pitoisuusalueen määrityskokeista.
mortality in the controls (negative controls, internal plate controls, as well as positive control and any solvent control used);
Lopullisessa toksisuustestissä on yleensä oltava vähintään viidestä (kuten limaskojen kasvunestymistestissä, tämän liitteen C.26 luku) seitsemään testipitoisuutta, jotka muodostavat geometrisen sarjan; ne on valittava siten, että NOEC- ja EC50-arvot ovat kyseisellä pitoisuusalueella (ks. jäljempänä).
data on the outcome of each of the four apical observations;
Testipitoisuuksien suhdeluvun ei tulisi olla suurempi kuin 3,2, mutta suurempikin suhdeluku sallitaan, jos pitoisuus-vastekäyrä on laakea.
incidence and description of morphological and physiological abnormalities, if any (see examples provided in Appendix 5, Figure 2);
Jos käytetään alle viittä testipitoisuutta, se on perusteltava.
incidents in the course of the test which might have influenced the results;
Jokaisesta testipitoisuudesta on tehtävä vähintään kolme toistoa.
statistical analysis and treatment of data (probit analysis, logistic regression model and geometric mean for LC50);
Valittaessa testin pitoisuusaluetta (pitoisuusalueen määritystä ja/tai lopullista toksisuustestiä varten) on otettava huomioon seuraavat näkökohdat:
slope and confidence limits of the regression of the (transformed) concentration-response curve.
ECx-pitoisuuden määrittämiseksi testipitoisuudet on valittava siten, että ECx-arvo on kyseisellä pitoisuusalueella, jotta saavutettaisiin riittävä luottamustaso.
Any deviation from the test method and relevant explanations.
Esimerkiksi EC50-pitoisuutta arvioitaessa suurimman testipitoisuuden on ylitettävä EC50-arvo.
Discussion and interpretation of results.
Jos EC50-arvo on testin pitoisuusalueen ulkopuolella, vastaavat luottamusvälit ovat suuria, jolloin voi olla mahdotonta arvioida mallin tilastollista sopivuutta.
OECD (2011) Validation Report (Phase 1) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II.
Jos tavoitteena on arvioida LOEC- tai NOEC-pitoisuus, pienimmän testipitoisuuden on oltava niin pieni, että kasvu ei ole merkittävästi vähäisempää kuin kontrolliryhmässä.
Series on Testing and Assessment No. 157, OECD, Paris.
Suurimman testipitoisuuden on myös oltava niin suuri, että kasvu on huomattavasti vähäisempää kuin kontrolliryhmässä.
OECD (2012) Validation Report (Phase 2) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II (Annexes).
Muussa tapauksessa testi on toistettava käyttämällä toista pitoisuusaluetta (jollei suurin pitoisuus ole liukoisuusrajalla tai jollei se ole suurin vaadittu rajapitoisuus, esimerkiksi 100 mg/l).
Series on Testing and Assessment No. 179, OECD, Paris.
Jokaiseen testiin on sisällyttävä kontrolleja, joissa ravinneliuos, koe-eliö (valitaan mahdollisimman homogeeninen kasvimateriaali, tuoreita sivuhaaroja esiviljelmistä, jotka lyhennetään 2,5 cm:n mittaisiksi haaran juuresta mitattuna), ympäristöolosuhteet ja menettelyt ovat samat kuin testiryhmässä mutta ilman testikemikaalia.
Belanger, S. E., Rawlings J. M. and Carr G. J. (2013).
Jos apuna käytetään liuotinta tai dispergointiainetta, testiin on kuuluttava ylimääräinen kontrollikäsittely, jossa liuottimen tai dispergointiaineen pitoisuus on sama kuin testikemikaalia sisältävissä astioissa.
Use of Fish Embryo Toxicity Tests for the Prediction of Acute Fish Toxicity to Chemicals.
Toistoissa kontrolliastioiden (ja liuotinta käytettäessä liuotinta sisältävien astioiden) lukumäärän on oltava vähintään kymmenen.
Environmental Toxicology and Chemistry 32: 1768-1783. .
Jos NOEC-pitoisuutta ei tarvitse määrittää, testimenetelmää voidaan muuttaa lisäämällä pitoisuuksien määrää ja vähentämällä toistojen määrää pitoisuutta kohden.
Pharmacol.: 149 (2), 196-209
Kontrollitoistoja on kuitenkin oltava vähintään kymmenen.
Chapter C.4 of this Annex: Ready Biodegradability.
Altistus
Chapter C.29 of this Annex: Ready Biodegradability, CO2 in sealed vessels.
Tuoreita sivuhaaroja, jotka on lyhennetty 2,5 cm:n mittaisiksi tyvestä mitattuna, siirretään esiviljelmästä ja jaetaan satunnaisesti koeastioihin aseptisissa olosuhteissa.
Chapter C.48 of this Annex: Fish Short Term Reproduction Assay.. See Appendix 4a.
Jokaisessa koeastiassa on oltava yksi 2,5 cm:n pituinen sivuttaishaara, jonka yhdessä päässä on oltava apikaalimeristeemi.
35, 4097–4102.
Valitun kasvimateriaalin olisi oltava laadultaan samanlaista jokaisessa koeastiassa.
Available: [http://www.iso.org].
Koeastiat on sijoitettava inkubaattoriin satunnaistetusti, jotta valon voimakkuuden ja lämpötilan spatiaalisista eroista johtuvat vaikutukset olisivat mahdollisimman pienet.
Series on Testing and Assessment No. 23, OECD, Paris.
Vaatimuksena on myös, että jokaisella havainnointikerralla käytetään lohkoittaista järjestystä tai astioiden satunnaistettua uudelleensijoittelua (joka voidaan tehdä useamminkin)
European Commission (2007) Commission recommendation 2007/526/EC of 18 June 2007 on guidelines for the accommodation and care of animals used for experimental and other scientific purposes (notified under document number C(2007) 2525) [http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2007:197:0001:0089:EN:PDF]
Jos alustava stabiiliustesti osoittaa, että testikemikaalin pitoisuutta ei voida pitää yllä testin ajan eli 14 päivää (toisin sanoen mitattu pitoisuus vähenee alle 80 prosenttiin mitatusta alkupitoisuudesta), on suositeltavaa käyttää semistaattista testijärjestelmää.
European Union (2010) Directive 2010/63/EU of the European Parliament and Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (OJ L 276, 20.10.2010, p.
Siinä tapauksessa kasvit on altistettava vastavalmistetuille testi- ja kontrolliliuoksille ainakin kerran testin aikana (esimerkiksi päivänä 7).
33).
Testikemikaalin stabiiliudesta riippuu, kuinka usein koloniat on altistettava vastavalmistetulle viljelyaineelle.
http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2010:276:0033:0079:EN:PDF
Testattaessa hyvin epästabiileja tai haihtuvia kemikaaleja pitoisuuksien pitäminen lähes vakioina voi vaatia useampia altistuskertoja.
Chapter C.2 of this Annex: Daphnia sp., Acute Immobilistaion Test.
Tähän testimenetelmään ei kuulu versojen altistaminen ruiskuttamalla.
Series on Testing and Assessment No. 54.
Testissä käytetään lämpimän- tai kylmänvalkoista loistevaloa, jotta valon säteilyvoimakkuudeksi saadaan 100–150 μE m– 2 s– 1, kun se mitataan fotosyynteesille suotuisalla aallonpituusalueella (400–700 nm) pisteissä, jotka ovat samalla etäisyydellä valolähteestä kuin koeastioiden pohjat (tämä vastaa voimakkuusaluetta 6000–9000 luksia), ja valoisien ja pimeiden jaksojen kestot ovat 16 tuntia valoa ja 8 tuntia pimeää.Valoilmaisin- ja valonmittausmenetelmä ja erityisesti anturityyppi vaikuttavat mittausarvoon.
OECD, Paris.
Pallomaiset anturit (jotka reagoivat valoon mistä tahansa kulmasta mittaustason ylä- ja alapuolelta) ja kosinikorjaimella varustetut anturit (jotka reagoivat valoon mistä tahansa kulmasta mittaustason yläpuolelta) ovat suositeltavampia kuin yksisuuntaiset anturit.
Detailed review paper “Fish embryo toxicity assays”.
Ensin mainitut antavat suurempia lukemia mitattaessa tässä kuvatun kaltaista monipisteistä valonlähdettä.
UBA report under contract no.
Lämpötilan on oltava koeastioissa 23 ± 2 °C.
20385422 German Federal Environment Agency, Berlin.
Erityistapauksissa, esimerkiksi testattaessa epästabiileja kemikaaleja tai metalleja, on kiinnitettävä erityistä huomiota pH:n vaihteluun; pH-arvon on pysyttävä välillä 6–9.
Apical endpoint
Tästä annetaan lisäohjeita kirjallisuusviitteessä (5).
Causing effect at population level.
Testi päättyy 14 päivän kuluttua kasvien siirtämisestä koeastioihin.
Blastula
Mittaukset ja analyyttiset määritykset
A cellular formation around the animal pole that covers a certain part of the yolk.
Testin alussa koe-eliön pääverson pituus on 2,5 cm (ks. 29 kohta); se mitataan mittaviivaimella (ks. lisäys 4) tai valokuvaamalla ja kuva-analyysillä.
A substance or a mixture
Normaaleilta tai epänormaaleilta vaikuttavien koe-eliöiden pääverson pituus määritetään testinalussa, ainakin kerran 14 päivää kestävän altistusjakson aikana ja testin päättyessä.
Epiboly
Huomautus: Jos kuva-analyysiä ei ole käytettävissä, pääverson pituuden mittaamiseen testin alussa ja sen aikana voidaan vaihtoehtoisesti käyttää myös steriiliä mittaviivainta edellyttäen, että työpöytä steriloidaan ennen kasvien laittamista koeastioihin.
is a massive proliferation of predominantly epidermal cells in the gastrulation phase of the embryo and their movement from the dorsal to the ventral side, by which entodermal cell layers are internalised in an invagination-like process and the yolk is incorporated into the embryo.
Kasvien kehityksessä tapahtuvat muutokset, esimerkiksi versojen epämuodostumat, merkit nekroosista tai kloroosista, hajoaminen tai kelluvuuden heikkeneminen sekä muutokset juurien pituudessa ja ulkonäössä, rekisteröidään.
Flow-through test
Lisäksi on rekisteröitävä testiviljelyaineen erityiset ominaisuudet (esimerkiksi liukenemattoman materiaalin esiintyminen ja levien, sienien ja bakteerien kasvu koeastiassa).
A test with continued flow of test solutions through the test system during the duration of exposure.
Pääverson pituuden määrittämisen lisäksi testin aikana arvioidaan myös testikemikaalin vaikutuksia kolmeen (tai useampaan) seuraavista mittausmuuttujista:
Internal Plate Control
Sivuhaarojen kokonaispituus
Internal control consisting of 4 wells filled with dilution water per 24-well plate to identify potential contamination of the plates by the manufacturer or by the researcher during the procedure, and any plate effect possibly influencing the outcome of the test (e.g. temperature gradient).
Versojen kokonaispituus
International Union of Pure and Applied Chemistry
Juurien kokonaispituus
Maintenance water
Tuorepaino
Water in which the husbandry of the adult fish is performed.
Kuivapaino
Median Lethal Concentration (LC50)
Kiehkuroiden määrä
The concentration of a test chemical that is estimated to be lethal to 50 % of the test organisms within the test duration.
Huomautus 1:
Semi-static renewal test
Alueenmäärityskokeen aikana tehdyt havainnot voivat auttaa valitsemaan merkitykselliset muut mitattavat muuttujat edellä luetelluista kuudesta muuttujasta.
A test with regular renewal of the test solutions after defined periods (e.g., every 24 hrs).
Huomautus 2:
Simplified Molecular Input Line Entry Specification
Tuore- ja kuivapainon (muuttujat iv ja v) määrittäminen on erittäin suositeltavaa.
Somite
Huomautus 3:
In the developing vertebrate embryo, somites are masses of mesoderm distributed laterally to the neural tube, which will eventually develop dermis (dermatome), skeletal muscle (myotome), and vertebrae (sclerotome).
Koska sakkaroosi ja valo (juurien altistaminen valolle testin aikana) voi vaikuttaa auksiinin (kasvien kasvuhormoni) kuljettajiin ja eräiden kemikaalien vaikutustapa saattaa muistuttaa auksiinia, juuria koskevan päätepisteen (muuttuja iii) mukaan ottaminen on kyseenalaista.
Static test
Huomautus 4:
A test in which test solutions remain unchanged throughout the duration of the test.
Kansainvälisen yhteistutkimuksen tulokset osoittavat, että sivuhaarojen kokonaispituuden (muuttuja i) variaatiokertoimet ovat suuria (> 60 prosenttia).
Any substance or mixture tested using this test method
Sivuhaarojen kokonaispituus sisältyy joka tapauksessa versojen kokonaispituuden (muuttuja ii) mittaamiseen, jonka variaatiokertoimet ovat hyväksyttävämmällä tasolla (< 30 prosenttia).
Substances of unknown or variable composition, complex reaction products or biological materials
Huomautus 5:
MAINTENANCE, BREEDING AND TYPICAL CONDITIONS FOR ZEBRAFISH EMBRYO ACUTE TOXICITY TESTS
Edellä esitettyjen näkökohtien perusteella suositellut tärkeimmät mitattavat päätepisteet ovat: versojen kokonaispituus, tuorepaino ja kuivapaino (muuttujat ii, iv ja v); muuttuja vi – kiehkuroiden määrä – jätetään kokeen suorittajan harkinnan varaan.
Zebrafish (Danio rerio)
Pääverson pituudella ja kiehkuroiden määrällä on se etu, että ne voidaan määrittää jokaisen testi- ja kontrolliastian osalta testin alussa, sen aikana ja sen lopussa valokuvien ja kuva-analyysin avulla, joskin myös (steriiliä) mittaviivainta voidaan käyttää.
Origin of species
Sivuhaarojen kokonaispituus, juurien kokonaispituus (kaikkien sivuhaarojen tai juurien summa) ja versojen kokonaispituus (pääverson pituuden ja sivuhaarojen kokonaispituuden summa) voidaan mitata mittaviivaimella altistuksen lopussa.
India, Burma, Malakka, Sumatra
Tuore- ja/tai kuivapaino on määritettävä testin alussa esiviljelmästä otetusta näytteestä, jonka on oltava edustava näyte testin käynnistämiseen käytetystä materiaalista, sekä testin lopussa jokaisesta testi- ja kontrolliastiasta otetusta kasvimateriaalista.
Sexual dimorphism
Sivuhaarojen kokonaispituus, versojen kokonaispituus, juurien kokonaispituus, tuorepaino, kuivapaino ja kiehkuroiden määrä voidaan määrittää seuraavasti:
Females: protruding belly, when carrying eggs
Sivuhaarojen kokonaispituus voidaan määrittää mittaamalla kaikki sivuhaarat mittaviivaimella altistuksen lopussa.
Males: more slender, orange tint between blue longitudinal stripes (particularly evident at the anal fin)
Sivuhaarojen kokonaispituus on jokaisen testi- ja kontrolliastian kaikkien sivuhaarojen summa.
Dry flake food (max.
Pääverson pituus voidaan määrittää kuva-analyysillä tai mittaviivaimella.
3 % fish weight per day) 3 - 5 times daily; additionally brine shrimp (Artemia spec.) nauplii and/or small daphnids of appropriate size obtained from an uncontaminated source.
Versojen kokonaispituus on jokaisen testi- ja kontrolliastian pääverson pituuden ja sivuhaarojen kokonaispituuden summa altistuksen lopussa.
Feeding live food provides a source of environmental enrichment and therefore live food should be given wherever possible.
Juurien pituus voidaan määrittää mittaamalla kaikki sivuhaarat mittaviivaimella altistuksen lopussa.
To guarantee for optimal water quality, excess food and faeces should be removed approx. one hour after feeding.
Juurien kokonaispituus on jokaisen testi- ja kontrolliastian kaikkien juurien summa.
Approximate weight of adult fish
Tuorepaino voidaan määrittää punnitsemalla koe-eliöt altistuksen lopussa.
Females: 0,65 ± 0,13 g
Jokaisessa testi- ja kontrolliastiassa oleva kaikki kasvimateriaali huuhdotaan tislatulla vedellä ja imeytetään kuivaksi selluloosapaperiin.
Males: 0,5 ± 0,1 g
Tämän valmistelun jälkeen tuorepaino määritetään punnitsemalla.
Maintenance of parental fish
Testin alussa oleva biomassa (tuorepaino) määritetään samasta erästä otetun koe-eliönäytteen avulla, jota on käytetty koeastioiden siirrostamiseen.
Illumination
Tuorepainon määrittämiseksi tehtyjen valmistelujen jälkeen koe-eliöt kuivataan 60 °C:n lämpötilassa, kunnes niiden paino on vakio.
Fluorescent bulbs (wide spectrum); 10-20 μE/m2/s, 540-1080 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels); 12-16 hrs photoperiod
Tämä massa on kuivapaino.
26 ± 1 °C
Testin alussa oleva biomassa (kuivapaino) määritetään samasta erästä otetun koe-eliönäytteen avulla, jota on käytetty koeastioiden siirrostamiseen.
Water quality
Kaikki pääversosta kasvavat kiehkurat lasketaan.
O2 ≥ 80 % saturation, hardness: e.g. ~30-300 mg/l CaCO3, NO3-: ≤ 48mg/l, NH4+ and NO2-: < 0,001 mg/l, residual chlorine < 10 μg/l, total organic chlorine < 25 ng/l, pH = 6,5 – 8,5
Mittausten ja analyyttisten määritysten tiheys
Further water quality criteria
Käytettäessä staattista testimenetelmää kunkin käsittelyn liuoksen pH on mitattava testin alussa ja lopussa.
Particulate matter < 20 mg/l, total organic carbon < 2 mg/l, total organophosphorus pesticides < 50 ng/l, total organochlorine pesticides plus polychlorinated biphenyls < 50 ng/l
Jos testimenetelmä on semistaattinen, pH on mitattava jokaisesta erästä ”tuoretta” testiliuosta ennen kutakin vaihtoa ja myös vastaavista ”käytetyistä” liuoksista.
Tank size for maintenance
Valon voimakkuus kasvatuskaapissa, inkubaattorissa tai huoneessa on mitattava pisteistä, jotka ovat samalla etäisyydellä valolähteestä kuin koe-eliöistä.
e.g. 180 l, 1 fish/l
Mittaukset on tehtävä ainakin kerran testin aikana.
Water purification
Viljelyaineen lämpötila surrogaattiastiassa, jota säilytetään kasvatuskaapissa, inkubaattorissa tai huoneessa samoissa olosuhteissa, on mitattava vähintään kerran päivässä (tai jatkuvasti tiedonkeruulaitteen avulla).
Permanent (charcoal filtered); other possibilities include combinations with semi-static renewal maintenance or flow-through system with continuous water renewal
Testikemikaali(e)n pitoisuudet määritetään testin aikana sopivin väliajoin.
Recommended male to female ratio for breeding
Staattisissa testeissä vähimmäisvaatimuksena on määrittää pitoisuudet testin alussa ja lopussa.
2:1 (or mass spawning)
Semistaattisissa testeissä, joissa testikemikaali(e)n pitoisuuksien ei oleteta pysyvän ± 20 prosentin rajoissa nimellispitoisuudesta, on analysoitava kaikki vastavalmistetut testiliuokset ja samat liuokset käytettyinä kunkin vaihdon yhteydessä.
Spawning tanks
Kuitenkin niissä testeissä, joissa testikemikaali(e)n mitatut alkupitoisuudet eivät ole ± 20 prosentin rajoissa nimellispitoisuudesta, mutta joissa voidaan antaa riittävä näyttö siitä, että alkupitoisuudet ovat toistettavissa ja stabiileja (toisin sanoen 80–120 prosenttia alkupitoisuudesta), kemialliset määritykset voidaan tehdä ainoastaan suurimmista ja pienimmistä testipitoisuuksista.
e.g. 4 l tanks equipped with steel grid bottom and plant dummy as spawning stimulant; external heating mats, or mass spawning within the maintenance tanks
Kaikissa tapauksissa on testipitoisuudet ennen vaihtoa määritettävä vain yhdestä toistossa käytetystä astiasta (tai kaikkien toistoissa käytettyjen astioiden yhdistetystä sisällöstä) kutakin testipitoisuutta kohden.