natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Estimating the MTC can be inexact and typically requires some professional judgment.
Mätimunatuotannon määrälliseen määrittämiseen liittyy merkittävää vaihtelua [variaatiokerroin voi vaihdella 20–60 prosenttia], mikä vaikuttaa kykyyn havaita tutkimuksessa alle 70 prosentin merkitsevä vähennys munatuotannossa, kun variaatiokerroin lähenee 50:tä prosenttia tai ylittää sen.
Three test concentrations, spaced by a constant factor not exceeding 10, and a dilution-water control (and solvent control if necessary) are required.
Jos variaatiokerroin rajoitetaan tätä alempiin arvoihin (noin 20–30 prosenttiin), tutkimuksessa saavutetaan hyväksyttävä voima (80 prosenttia) havaita 40–50 prosentin vähennys mätimunatuotannossa.
A range of spacing factors between 3,2 and 10 is recommended.
Rasvapäämudulla käytetty testisuunnitelma, johon sisällytetään neljä rinnakkaisnäytettä käsittelytasoa kohden, antaa lisää voimaa hedelmällisyysominaisuuden tutkimiseen verrattuna testisuunnitelmaan, jossa on vain kaksi rinnakkaisnäytettä.
Selection and weighing of test fish
Jos laboratorio ei ole tehnyt määritystä aikaisemmin tai jos on tehty huomattavia muutoksia (esimerkiksi kalakannan tai toimittajan vaihto), on syytä tehdä tekninen pätevyystutkimus.
It is important to minimise variation in weight of the fish at the beginning of the assay.
On suositeltavaa, että siinä käytetään kemikaaleja, joilla on monenlaisia vaikutustapoja tai jotka vaikuttavat lukuisiin testissä tutkittaviin ominaisuuksiin.
Suitable size ranges for the different species recommended for use in this test are given in Appendix 2.
Käytännössä jokaista laboratoriota kehotetaan keräämään oma kontrollitietokanta koiraita ja naaraita varten sekä käyttämään positiivista kemikaalikontrollia estrogeeniaktiivisuuden osalta (esimerkiksi 17β-estradioli pitoisuudella 100 ng/l tai tunnettu heikko agonisti), jolloin koiraskalojen vitellogeniini lisääntyy, positiivista kemikaalikontrollia aromataasin eston osalta (esimerkiksi fadrotsoli tai prokloratsi pitoisuudella 300 μg/l), jolloin naaraskalojen vitellogeniini vähenee, ja positiivista kemikaalikontrollia androgeeniaktiivisuuden osalta (esimerkiksi 17β-trenboloni pitoisuudella 5 μg/l), jolloin rasvapäämutu- ja medakanaaraille alkaa kehittyä sekundaarisia sukupuoliominaisuuksia.
For the whole batch of fish used in the test, the range in individual weights for male and female fish at the start of the test should be kept, if possible, within ± 20 % of the arithmetic mean weight of the same sex.
Kaikkia näitä tietoja voidaan verrata validointitutkimuksista (1, 2, 3) saatuihin tietoihin, jotta laboratorion pätevyys saadaan varmistettua.
It is recommended to weigh a subsample of the fish stock before the test in order to estimate the mean weight.
Yleensä vitellogeniinimittauksia pidetään positiivisina, jos koiraiden vitellogeniini lisääntyy tilastollisesti merkitsevästi (p < 0,05), tai jos naaraiden vitellogeniini vähenee tilastollisesti merkitsevästi (p < 0,05) ainakin suurimman testatun annoksen yhteydessä kontrolliryhmään verrattuna ja jos merkkejä yleisestä toksisuudesta ei ole.
The test duration is 21 days, following a pre-exposure period.
Positiivista tulosta tukee myös se, että annoksen ja vastekäyrän välillä voidaan osoittaa olevan biologisesti todennäköinen suhde.
The recommended pre-exposure period is one to two weeks.
Kuten aiemmin on mainittu, vitellogeniinin vähentyminen ei välttämättä johdu pelkästään hormonijärjestelmästä, mutta positiivinen tulos on yleensä kuitenkin tulkittava todisteeksi hormonijärjestelmään kohdistuvasta vaikutuksesta in vivo, minkä perusteella asiaa on tutkittava tarkemmin.
Fish should be fed ad libitum with an appropriate food (Appendix 2) at a sufficient rate to maintain body condition.
Sääntelyviranomaiset saattavat vaatia sukurauhasten histopatologista arviointia, jonka avulla määritetään testieläinten lisääntymiskunto ja testituloksia voidaan arvioida näytön perusteella.
Care should be taken to avoid microbial growth and water turbidity.
Sukurauhasten histopatologinen tutkimus ei ehkä ole tarpeen tapauksissa, joissa joko vitellogeniini tai sekundaariset sukupuoliominaisuudet ovat positiivisia (eli vitellogeniini on lisääntynyt tai vähentynyt tai sekundaarisia sukupuoliominaisuuksia on kehittynyt).
As a general guidance, the daily ration may be divided into two or three equal portions for multiple feeds per day, separated by at least three hours between each feed.
OECD (2006b), Report of the Initial Work Towards the Validation of the 21-Day Fish Screening Assay for the Detection of Endocrine active Substances (Phase 1B).
A single larger ration is acceptable particularly for weekends.
, Phase 3 report of the validation of the OECD Fish Screening Assay.
Food should be withheld from the fish for 12 hours prior to sampling/necropsy.
OECD Environmental Health and Safety Publications Series on Testing and Assessment No.
Fish food should be evaluated for the presence of contaminants such as organochlorine pesticides, polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), polychlorinated biphenyls (PCBs).
Androgenic and estrogenic effects of the synthetic androgen 17alpha-methyltestosterone on sexual development and reproductive performance in the fathead minnow (Pimephales promelas) determined using the gonadal recrudescence assay.
Food with an elevated level of phytoestrogens that would compromise the response of the assay to known oestrogen agonist (e.g. 17β- estradiol) should be avoided.
Ankley G. T. ja muut (2003), Effects of the androgenic growth promoter 17-beta-trenbolone on fecundity and reproductive endocrinology of the fathead minnow.
Uneaten food and faecal material should be removed from the test vessels at least twice weekly, e.g. by carefully cleaning the bottom of each tank using a siphon.
Panter G. H. ja muut (1999), Application of an ELISA to quantify vitellogenin concentrations in fathead minnows (Pimephales promelas) exposed to endocrine disrupting chemicals.
Prior to initiation of the exposure period, proper function of the chemical delivery system should be ensured.
CEFIC-EMSG research report reference AQ001.
All analytical methods needed should be established, including sufficient knowledge on the chemical stability in the test system.
CEFIC, Bryssel, Belgia.
During the test, the concentrations of the test chemical are determined at regular intervals, as follows: the flow rates of diluent and toxicant stock solution should be checked preferably daily but as a minimum twice per week, and should not vary by more than 10 % throughout the test.
Phys.
It is recommended that the actual test chemical concentrations be measured in all vessels at the start of the test and at weekly intervals thereafter.
C 129 (3): 217–232.
It is recommended that results be based on measured concentrations.
(14) Holbech H. ja muut (2001), Development of an ELISA for vitellogenin in whole body homogenate of zebrafish (Danio rerio).
However, if concentration of the test chemical in solution has been satisfactorily maintained within ±20 % of the nominal concentration throughout the test, then the results can either be based on nominal or measured values.
Comparative Biochemistry and Physiology.
Samples may need to be filtered (e.g. using a 0,45 μm pore size) or centrifuged.
Brion F. ja muut (2002), Development and validation of an enzyme-linked immunosorbent assay to measure vitellogenin in the zebrafish (Danio rerio).
If needed, then centrifugation is the recommended procedure.
Yokota H. ja muut (2001), Development of an ELISA for determination of the hepatic vitellogenin in Medaka (Oryzias latipes).
However, if the test material does not adsorb to filters, filtration may also be acceptable.
Jpn J Environ Toxicol 4:87–98.
During the test, dissolved oxygen, temperature, and pH should be measured in all test vessels at least once per week.
Journal of Health Science 50:301–308.
A number of general (e.g. survival) and biological responses (e.g. VTG levels) are assessed over the course of the assay or at termination of the assay.
OECD (2010), Guidance Document on Fish Gonadal Histopathology.
Measurement and evaluation of these endpoints and their utility are described below.
123, Pariisi.
Fish should be examined daily during the test period and any mortality should be recorded and the dead fish removed as soon as possible.
Series on Testing and Assessment No.
Sex of fish that die during the test should be determined by macroscopic evaluation of the gonads.
Aquat.
Additionally external abnormalities (such as haemorrhage, discoloration) should be noted.
Martinovic D. ja muut (2008), Characterization of reproductive toxicity of vinclozolin in the fathead minnow and co-treatment with an androgen to confirm an anti-androgenic mode of action.
For example, territorial aggressiveness in normal males or masculinised females has been observed in fathead minnows under androgenic exposure; in zebrafish, the characteristic mating and spawning behaviour after the dawn onset of light is reduced or hindered by oestrogenic or anti-androgenic exposure.
Chem.
Because some aspects of appearance (primarily colour) can change quickly with handling, it is important that qualitative observations be made prior to removal of animals from the test system.
OECD (2006c), Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: A Guidance to Application, OECD environmental Health and Safety Publications Series on Testing and Assessment No.
Egg production should be recorded as the number of eggs/surviving female/day on a replicate basis.
ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
Appendix 4 gives further details of recommended spawning substrates for zebrafish (Appendix 4A) and fathead minnow (Appendix 4B).
Kalatiheys
Observation of secondary sex characteristics
Vitellogeniini – fosfolipoglykoproteiini, munankeltuaisen esiaste, jota tavataan yleensä kaikilla munimalla lisääntyvien lajien sukukypsillä naarailla.
Some endocrine active chemicals may induce changes in specialised secondary sex characteristics (number of nuptial tubercles in male fathead minnow, papillary processes in male medaka).
KALOJEN HORMONIJÄRJESTELMÄÄN KOHDISTUVAN SEULONTATUTKIMUKSEN KOEOLOSUHTEET
Such gross morphological observations may provide useful qualitative and quantitative information to inform potential future fish testing requirements.
Veden lämpötila
The number and size of nuptial tubercles in fathead minnow and papillary processes in medaka can be quantified directly or more practically in preserved specimens.
Valaistus
Recommended procedures for the evaluation of secondary sex characteristics in fathead minnow and medaka are available from Appendix 5A and Appendix 5B, respectively.
Loistelamppu (laajakirjoinen)
Vitellogenin (VTG)
Valovoimat
It is recommended to use a method capable to detect VTG levels as low as few ng/ml plasma (or ng/mg tissue), which is the background level in unexposed male fish.
2 l (vähintään)
Quality control of VTG analysis will be accomplished through the use of standards, blanks and at least duplicate analyses.
5 l (vähintään)
For each ELISA method, a test for matrix effect (effect of sample dilution) should be run to determine the minimum sample dilution factor.
Testiliuoksen tilavuus
At least two aliquots (well-duplicates) of each sample dilution will be analysed.
4 l (vähintään)
Well-duplicates that differ by more than 20 % should be re-analysed.
Testiliuosten vaihto
The correlation coefficient (R2) for calibration curves should be greater than 0,99.
Vähintään 6 kertaa päivässä
However, a high correlation is not sufficient to guarantee adequate prediction of concentration in all ranges.
Vähintään 5 kertaa päivässä
If the nominal concentrations trend away from the calibration regression line (e.g. at lower concentrations), it may be necessary to split the calibration curve into low and high ranges or to use a nonlinear model to adequately fit the absorbance data.
Ks. 21 kohta.
If the curve is split, both line segments should have R2 > 0,99.
Täysikasvuisen kalan arvioitu tuorepaino (g)
The limit of detection (LOD) is defined as the concentration of the lowest analytical standard, and limit of quantitation (LOQ) is defined as the concentration of the lowest analytical standard multiplied by the lowest dilution factor.
Naaraat: 1,5 ± 20 %
On each day that VTG assays are performed, a fortification sample made using an inter-assay reference standard will be analysed (Appendix 7).
Urokset: 2,5 ± 20 %
The ratio of the expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Naaraat: 0,35 ± 20 %
These diagnostic responses essentially include the presence of testicular oocytes, Leydig cell hyperplasia, decreased yolk formation, increased spermatogonia and perifollicular hyperplasia.
6 (2 koirasta ja 4 naarasta)
Other gonadal lesions like oocyte atresia, testicular degeneration, and stage changes, may have various causes.
6 (3 koirasta ja 3 naarasta)
The Guidance document on fish gonadal histopathology specifies procedures that will be used in the dissection, fixation, sectioning and histopathological evaluation of the gonads (22).
10 (5 koirasta ja 5 naarasta)
Where a solvent control is used, an appropriate statistical test should be performed between the dilution water and solvent controls for each endpoint.
Astioiden lkm. käsittelyä kohti
Guidance on how to handle dilution water and solvent control data in the subsequent statistical analysis can be found in OECD, 2006c (28).
Vähintään 4
All biological response data should be analysed and reported separately by sex.
Vähintään 2
If the required assumptions for parametric methods are not met — non-normal distribution (e.g. Shapiro-Wilk's test) or heterogeneous variance (Bartlett's test or Levene's test), consideration should be given to transforming the data to homogenise variances prior to performing the ANOVA, or to carrying out a weighted ANOVA.
Kalojen lkm. testipitoisuutta kohti
Dunnett's test (parametric) on multiple pair-wise comparisons or a Mann-Whitney with Bonferroni adjustment (non-parametric) may be used for non-monotonous dose-response.
16 täysikasvuista naarasta ja 8 koirasta (4 naarasta ja 2 koirasta jokaisessa rinnakkaisnäyteastiassa)
Other statistical tests may be used (e.g. Jonckheere-Terpstra test or Williams test) if the dose-response is approximately monotone.
12 täysikasvuista naarasta ja 12 koirasta (3 naarasta ja 3 koirasta jokaisessa rinnakkaisnäyteastiassa)
A statistical flowchart is provided in Appendix 8 to help in the decision on the most appropriate statistical test to be used.
10 täysikasvuista naarasta ja 10 koirasta (5 naarasta ja 5 koirasta jokaisessa rinnakkaisnäyteastiassa)
Reporting of test results
Eläviä tai pakastettuja täysikasvuisia suolalehtijalkaisia tai niiden nauplius-toukkia 2–3 kertaa päivässä (ad libitum), kaupallisesti saatavaa rehua tai edellisten yhdistelmä
Study data should include:
Suolalehtijalkaisten nauplius-toukkia 2–3 kertaa päivässä (ad libitum), kaupallisesti saatavaa rehua tai edellisten yhdistelmä
Testing facility:
Suolalehtijalkaisten nauplius-toukkia 2–3 kertaa päivässä (ad libitum), kaupallisesti saatavaa rehua tai edellisten yhdistelmä
Responsible personnel and their study responsibilities
Ei tarpeen, ellei liuenneen hapen pitoisuus ole alle 60 % ilman kyllästysarvosta
Each laboratory should have demonstrated proficiency using a range of representative chemicals
Laimennusvesi
Characterisation of test chemical
Puhdas pinta-, kaivo- tai synteettinen vesi tai dekloorattu hanavesi
Physical nature and relevant physicochemical properties
Esialtistusjakso
Method and frequency of preparation of test concentrations
Suositus 7–14 vrk
Information on stability and biodegradability
Kemikaalialtistuksen kesto
Characterisation of solvent (nature, concentration used)
Tutkittavat biologiset ominaisuudet
Justification of choice of solvent (if other than water)
eloonjäänti
Species and strain
käytös
Supplier and specific supplier facility
hedelmällisyys
Age of the fish at the start of the test and reproductive/spawning status
sekundaariset sukupuoliominaisuudet
Details of animal acclimation procedure
valinnaisesti sukurauhasten histopatologia
Body weight of the fish at the start of the exposure (from a sub-sample of the fish stock)
Testin hyväksyttävyys
Test procedure used (test-type, loading rate, stocking density, etc.);
Liuennut happi ≥ 60 % kyllästysarvosta; keskilämpötila 25 ± 2 °C; kontrollikalojen eloonjääneisyys 90 %; mitatut testipitoisuudet 20 %:n sisällä keskimääräisistä mitatuista arvoista käsittelytasoa kohti.
Method of preparation of stock solutions and flow-rate;
Liuennut happi ≥ 60 % kyllästysarvosta; keskilämpötila 26 ± 2 °C; kontrollikalojen eloonjääneisyys 90 %; mitatut testipitoisuudet 20 %:n sisällä keskimääräisistä mitatuista arvoista käsittelytasoa kohti.
The nominal test concentrations, weekly measured concentrations of the test solutions and analytical method used, means of the measured values and standard deviations in the test vessels and evidence that the measurements refer to the concentrations of the test chemical in true solution;
JOITAKIN HYVÄKSYTTÄVÄN LAIMENNUSVEDEN KEMIALLISIA OMINAISUUKSIA
Dilution water characteristics (including pH, hardness, alkalinity, temperature, dissolved oxygen concentration, residual chlorine levels, total organic carbon, suspended solids and any other measurements made)
AINESOSA
Water quality within test vessels: pH, hardness, temperature and dissolved oxygen concentration;
PITOISUUDET
Detailed information on feeding (e.g. type of food(s), source, amount given and frequency and analyses for relevant contaminants if available (e.g. PCBs, PAHs and organochlorine pesticides).
< 2mg/l
Evidence that the controls met the acceptance criteria of the test;
Ionisoitumaton ammoniakki
Data on mortalities occurring in any of the test concentrations and control;
Orgaanista fosforia sisältävien torjunta-aineiden kokonaismäärä
Statistical analytical techniques used, treatment of data and justification of techniques used;
Lisäys 4A
Data on biological observations of gross morphology, including secondary sex characteristics, egg production and VTG;
SEEPRAKALAN KUTUALUSTA
Results of the data analyses preferably in tabular and graphical form;
Kututarjotin
Incidence of any unusual reactions by the fish and any visible effects produced by the test chemical
Lasinen instrumenttitarjotin (koko esimerkiksi 22 × 15 × 5,5 cm (p × l × s)), jonka päällä irrotettava ruostumaton teräsristikko (silmäkoko 2 mm).
GUIDANCE FOR THE INTERPRETATION AND ACCEPTANCE OF THE TEST RESULTS
Ristikonon peitettävä instrumenttitarjotin hieman reunojen alapuolelta.
This section contains a few considerations to be taken into account in the interpretation of test results for the various endpoints measured.
Kutualusta on kiinnitettävä ristikkoon.
The results should be interpreted with caution where the test chemical appears to cause overt toxicity or to impact on the general condition of the test animal.
Kutualustaan on muodostettava rakenne, jolle kalat voivat siirtyä.
In setting the range of test concentrations, care should be taken not to exceed the maximum tolerated concentration to allow a meaningful interpretation of the data.
Sopivia rakenteita ovat esimerkiksi vihreästä muovimateriaalista valmistetut keinotekoiset akvaariokasvit (huom. testikemikaalin adsorptio muovimateriaaliin on muistettava ottaa huomioon).
It is important to have at least one treatment where there are no signs of toxic effects.
Muovimateriaalia on huuhdeltava runsaassa lämpimässä vedessä riittävän kauan, jotta varmistetaan, ettei testiveteen joudu kemikaaleja.
Signs of disease and signs of toxic effects should be thoroughly assessed and reported.
Lasimateriaaleja käytettäessä on varmistettava, etteivät kalat vahingoitu ja että niillä on riittävästi tilaa rajuihinkin liikkeisiin.
For example, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Tarjottimen ja lasilevyjen välisen etäisyyden on oltava vähintään kolme senttimetriä sen varmistamiseksi, ettei kuteminen tapahdu tarjottimen ulkopuolella.
However, interpretation of effects may be strengthened by other treatment levels that are not confounded by systemic toxicity.
Tarjottimelle lasketut mätimunat putoavat ristikon läpi, ja ne voidaan kerätä näytteenottoa varten 45–60 minuutin kuluttua valojen sytyttämisestä.
There are a few aspects to consider for the acceptance of test results.
Läpinäkyvät mätimunat eivät ole tahmeita, ja ne on helppo laskea poikittaisvalossa.
As a guide, the VTG levels in control groups of males and females should be distinct and separated by about three orders of magnitude in fathead minnow and zebrafish, and about one order of magnitude for medaka.
Kun astiassa on viisi naarasta, 20:tä mätimunaa päivässä voidaan pitää pienenä määränä, 100:aa mätimunaa kohtalaisena määränä ja yli 100:aa mätimunaa suurena määränä.
Examples of the range of values encountered in control and treatment groups are available in the validation reports (1, 2, 3, 4).
Kutualusta on poistettava astiasta ja mätimunat on kerättävä joko mahdollisimman myöhään illalla tai erittäin varhain aamulla, ja alusta on laitettava sen jälkeen takaisin testiastiaan.
High VTG values in control males could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect weak oestrogen agonists.
Alusta on laitettava takaisin astiaan tunnin kuluessa sen poisottamisesta, sillä muutoin kutualusta saattaa houkutella kalat parittelemaan tai kutemaan yksilöllisesti epätavallisiin aikoihin.
Low VTG values in control females could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect aromatase inhibitors and oestrogen antagonists.
Jos tilanne vaatii kutualustan laittamista takaisin myöhemmin, se on tehtävä vähintään yhdeksän tunnin kuluttua valojen sytyttämisestä.
The validation studies were used to build that guidance.
Niin myöhäiseen vuorokaudenaikaan se ei aiheuta enää kutemista.
Concerning the quantification of egg production, this is subject to important variations [the coefficient of variation (CV) may range from 20 to 60 %] that impinge the ability of the assay to detect a significant decrease in egg production smaller than 70 % as the CV approaches 50 % or more.
Lisäys 4B
When the CV is confined to lower values (around 20-30 %), then the assay will have acceptable power (80 %) to detect 40-50 % decrease in egg production.
RASVAPÄÄMUDUN KUTUALUSTA
The test design used for the fathead minnow, including four replicates per treatment level, should allow more power to the fecundity endpoint, compared to a test design with 2 replicates only.
Jokaiseen testiastiaan asetetaan kaksi tai kolme muovista/keramiikasta/lasista tai ruostumattomasta teräksestä valmistettua kutulaattaa ja -levyä (esimerkiksi 80 mm pitkä harmaa puoliympyrän muotoinen katos 130 mm pitkän huulletun levyn päälle) (ks. kuva).
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier) have been made it is advisable that a technical proficiency study is conducted.
Asianmukaisesti katetut PVC- tai keramiikkalaatat ovat osoittautuneet sopiviksi kutualustoiksi (Thorpe ja muut 2007).
It is recommended that chemicals covering a range of modes of action or impacts on a number of the test endpoints are used.
Laattoja kannattaa karhentaa hieman, jotta mätimunat kiinnittyvät niihin paremmin.
In practice, each laboratory is encouraged to build its own historical control data for males and females and to perform a positive control chemical for estrogenic activity (e.g. 17β-estradiol at 100 ng/l, or a known weak agonist) resulting in increased VTG in male fish, a positive control chemical for aromatase inhibition (e.g. fadrozole or prochloraz at 300 μg/l) resulting in decreased VTG in female fish, and a positive control chemical for androgenic activity (e.g. 17β-trenbolone at 5 μg/l) resulting in induction of secondary sex characteristics in female fathead minnow and medaka.
Tarjotin on suojattava siten, etteivät kalat pääse laskettujen mätimunien luokse, ellei ole osoitettu, että munat kiinnittyvät käytettyyn alustaan pitävästi.