natgillin/translations-raw huggingface dataset:
To avoid coagulation of blood and degradation of protein the samples are collected within Phosphate-buffered saline (PBS) buffer containing heparin (1000 units/ml) and the protease inhibitor aprotinin (2 TIU/ml).
Somiittien muodostumattomuus
As ingredients for the buffer, heparin, ammonium-salt and lyophilised aprotinin are recommended.
Häntäsilmun irtoamattomuus sivulta nähtynä
For blood sampling, a syringe (1ml) with a fixed thin needle (e.g. Braun Omnikan-F) is recommended.
Sydämenlyöntien puutetta
The syringe should be prefilled with buffer (approximately 100 microliter) to completely elute the small blood volumes from each fish.
Alkion koaguloituminen: Koaguloituneet alkiot ovat maidonvalkeita ja näkyvät mikroskoopissa tummina (ks. lisäyksessä 5 oleva kuva 1).
The blood samples are taken by cardiac puncture.
Koaguloituneiden alkioiden määrä lasketaan 24, 48, 72 ja 96 tunnin jälkeen.
At first the fish should be anesthetized with MS-222 (100 mg/l).
Somiittien muodostumattomuus: Lämpötilassa 26 ± 1 °C normaalisti kehittyvässä seeprakalan alkiossa on 24 tunnin jälkeen muodostunut noin 20 somiittia (ks. lisäyksessä 5 oleva kuva 2).
The proper plane of anaesthesia allows the user to distinguish the heartbeat of the zebrafish.
Normaalisti kehittynyt alkio liikkuu spontaanisti (sivuttaissuuntaisia supistuksia).
While puncturing the heart, keep the syringe piston under weak tension.
Spontaanit liikkeet ovat osoitus somiittien muodostumisesta.
Collectable blood volumes range between 20 - 40 microliters.
Somiittien puuttuminen kirjataan 24, 48, 72 ja 96 tunnin jälkeen.
After cardiac puncture, the blood/buffer-mixture should be filled into the test tube.
Somiittien muodostumattomuus 24 tunnin jälkeen saattaa johtua kehityksen yleisestä hidastumisesta.
Plasma is separated from the blood via centrifugation (20 min; 5000 g) and should be stored at – 80°C until required for analysis.
Viimeistään 48 tunnin jälkeen somiitteja pitäisi olla muodostunut.
Procedure 3C:
Jos näin ei ole, alkiot katsotaan kuolleiksi.
SOP: Zebrafish, homogenisation of head & tail
Hännän irtoamattomuus: Normaalisti kehittyvissä seeprakalojen alkioissa hännän havaitaan irtoavan (ks. lisäyksessä 5 oleva kuva 3) ruskuaisesta alkion takaosan pidennyttyä.
The fish are anaesthetised and euthanised in accordance with the test description.
Hännän irtoamattomuus kirjataan 24, 48, 72 ja 96 tunnin jälkeen.
The head and tail are cut of the fish in accordance with Figure 1.
Sydämenlyöntien puute: Normaalisti kehittyvissä seeprakalojen alkioissa sydämenlyönnit näkyvät 26 ± 1 °C lämpötilassa 48 tunnin jälkeen (ks. lisäyksessä 5 oleva kuva 4).
Important: All dissection instruments, and the cutting board should be rinsed and cleaned properly (e.g. with 96 % ethanol) between handling of each single fish to prevent “vitellogenin pollution” from females or induced males to uninduced males.
Tämän päätepisteen kirjaamisessa on oltava erityisen huolellinen, sillä epäsäännöllisiä sydämenlyöntejä ei saa kirjata letaalina päätepisteenä.
For gonad histology
Lisäksi näkyviä sydämenlyöntejä ilman verenkiertoa vatsa-aortassa ei katsota letaaliksi päätepisteeksi.
Cut behind
Tämän päätepisteen kirjaamiseksi alkioita, joilla ei havaita sydämenlyöntejä, on havainnoitava vähintään 80-kertaisella suurennuksella vähintään minuutin ajan.
Cut behind dorsal fin
Sydämenlyöntien puute kirjataan 48, 72 ja 96 tunnin jälkeen.
For Vtg analysis
Kaikkien käsiteltyjen ryhmien ja kontrolliryhmien kuoriutumisasteet on kirjattava 48 tunnista lähtien ja raportoitava.
The weight of the pooled head and tail from each fish is measured to the nearest mg.
Vaikka kuoriutuminen ei ole LC50-arvon laskennassa käytettävä päätepiste, se varmistaa alkion altistumisen ilman korionin suojaavaa vaikutusta ja voi siten auttaa tietojen tulkinnassa.
After being weighed, the parts are placed in appropriate tubes (e.g. 1,5 ml eppendorf) and frozen at – 80 °C until homogenisation or directly homogenised on ice with two plastic pistils.
Yksityiskohtaisia kuvauksia seeprakalan alkioiden normaalista (35) kehityksestä ja esimerkkejä epänormaalista kehityksestä esitetään lisäyksissä 3 ja 5.
(Other methods can be used if they are performed on ice and the result is a homogenous mass).
Mittaukset
Important: The tubes should be numbered properly so that the head and tail from the fish can be related to their respective body-section used for gonad histology.
Testin alussa ja lopussa määritetään pH, kokonaiskovuus ja johtavuus kontrollissa (tai kontrolleissa) ja testikemikaalin suurimmassa pitoisuudessa.
When a homogenous mass is achieved, 4 x the tissue weight of ice-cold homogenisation buffer [1] is added.
Semistaattisissa vaihtojärjestelmissä pH on määritettävä ennen veden vaihtamista ja sen jälkeen.
Keep working with the pistils until the mixture is homogeneous.
Liuenneen hapen pitoisuus mitataan testin lopussa negatiivisissa kontrolleissa sekä suurimmassa testipitoisuudessa, jossa on elinkykyisiä alkioita, ja sen olisi siinä oltava testin validiteettikriteerien mukainen (ks. 8 kohdan f alakohta).
Important note: New pistils are used for each fish.
Jos lämpötilan pelätään vaihtelevan eri 24-kuoppalevyjen välillä, lämpötila mitataan kolmesta satunnaisesti valitusta astiasta.
The samples are placed on ice until centrifugation at 4 °C at 50000 g for 30 min.
Lämpötila olisi kirjattava mieluiten jatkuvasti testin ajan tai vähintään päivittäin.
Use a pipette to dispense portions of 20 μl supernatant into at least two tubes by dipping the tip of the pipette below the fat layer on the surface and carefully sucking up the supernatant without fat- or pellet fractions.
Staattisessa järjestelmässä testikemikaalin pitoisuus on mitattava ainakin suurimmassa ja pienimmässä testipitoisuudessa, mutta mieluiten kaikissa käsittelyissä, testin alussa ja lopussa.
The tubes are stored at – 80 °C until use.
Semistaattisissa testeissä (joissa liuokset vaihdetaan) suositellaan, että määritetään vähintään suurimmat ja pienimmät pitoisuudet tuoreesta liuoksesta ja juuri ennen liuoksen vaihtoa, jos testikemikaalipitoisuuksien odotetaan pysyvän 20 prosentin sisällä nimellisarvosta.
Homogenisation buffer:(50 mM Tris-HCl pH 7,4; 1 % Protease inhibitor cocktail (Sigma)): 12 ml Tris-HCl pH 7,4 + 120 μl Protease inhibitor cocktail.TRIS: TRIS-ULTRA PURE (ICN) e.g. from Bie & Berntsen, Denmark.Protease inhibitor cocktail: From Sigma (for mammalian tissue) Product number P 8340.NOTE: The homogenisation buffer should be used the same day as manufactured.
Jos testikemikaalin pitoisuuden ei odoteta pysyvän 20 prosentin sisällä nimellisarvosta, kaikki testipitoisuudet on analysoitava vasta valmistettuina sekä välittömästi ennen vaihtamista.
Place on ice during use.
Jos määrä ei ole riittävä analysointia varten, voi olla hyödyllistä yhdistää testiliuoksia tai käyttää korvaavia kammioita, jotka ovat samaa materiaalia kuin 24-kuoppalevyt ja joiden tilavuuden ja pinta-alan suhde on sama.
VITELLOGENIN FORTIFICATION SAMPLES AND INTER-ASSAY REFERENCE STANDARD
On erittäin suositeltavaa määritellä tulokset mitattujen pitoisuuksien perusteella.
On each day that VTG assays are performed, a fortification sample made using an inter-assay reference standard will be analysed.
Jos mitatut pitoisuudet eivät pysy 80–120 prosentissa nimellispitoisuudesta, vaikuttavat pitoisuudet olisi ilmaistava suhteessa mitattujen pitoisuuksien geometriseen keskiarvoon; katso vaikeiden aineiden ja seosten toksisuustestausta vesieliöillä koskevan OECD:n ohjeasiakirjan luku 5 (28).
The VTG used to make the inter-assay reference standard will be from a batch different from the one used to prepare calibration standards for the assay being performed.
RAJA-ANNOSTESTI
The fortification sample will be made by adding a known quantity of the inter-assay standard to a sample of control male plasma.
Tässä testimenetelmässä kuvattuja menettelyjä käyttäen voidaan suorittaa raja-annostesti, jossa testikemikaalin pitoisuus on 100 mg/l tai sama kuin aineen liukoisuusraja-arvo testissä käytettävässä viljelynesteessä (sen mukaan, kumpi on alempi), sen osoittamiseksi, että LC50on suurempi kuin kyseinen pitoisuus.
The sample will be fortified to achieve a VTG concentration between 10 and 100 times the expected vitellogenin concentration of control male fish.
Raja-annostesti on suoritettava 20 alkiolla käsittelyssä, positiivisessa kontrollissa ja – tarvittaessa – liuotinkontrollissa ja 24 alkiolla negatiivisessa kontrollissa.
The sample of control male plasma that is fortified may be from an individual fish or may be a composite from several fish.
Jos kuolleisuus testatussa pitoisuudessa ylittää negatiivisen kontrollin (tai liuotinkontrollin) kuolleisuuden 10 prosentilla, on suoritettava kattava testi.
A subsample of the unfortified control male plasma will be analysed in at least two duplicate wells.
Kaikki havaitut vaikutukset on kirjattava.
The fortified sample also will be analysed in at least two duplicate wells.
Jos kuolleisuus negatiivisessa kontrollissa (tai liuotinkontrollissa) on suurempi kuin 10 prosenttia, testiä ei voida hyväksyä ja se on uusittava.
The mean quantity of vitellogenin in the two unfortified control male plasma samples will be added to the calculated quantity of VTG added to fortification the samples to determine an expected concentration.
Tässä testissä yksittäisiä kuoppia pidetään tilastollisen analyysin kannalta riippumattomina toistoina.
The ratio of this expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Niiden alkioiden prosenttiosuus, joista ainakin yksi apikaalinen havainto on positiivinen 48 ja/tai 96 tunnin jälkeen, esitetään testipitoisuuksien funktiona.
DECISION FLOWCHART FOR THE STATISTICAL ANALYSIS
Kuvaajien kulmakertoimien, LC50-arvojen ja luottamusvälin (95 prosenttia) laskemiseksi on käytettävä sopivia tilastomenetelmiä (38) sekä OECD:n ohjeasiakirjaa ”Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data” (39).
Rep means normally distributed
kemialliset tunnistetiedot, kuten IUPAC- tai CAS-nimi, CAS-numero, SMILES- tai InChI-koodi. rakennekaava, puhtaus, tarvittaessa epäpuhtauksien kemikaaliset tunnistetiedot sen mukaan kuin käytännössä on mahdollista ja niin edelleen (tarvittaessa esimerkiksi orgaanisen hiilen pitoisuus).
Stept-down Jonckheere or Williams' test
Testiorganismit:
Normalising transform?
käytetty testimenettely (esimerkiksi liuos vaihtuu semistaattisissa olosuhteissa)
variance stabilising transform?
valoisa aika
Tamhane-Dunnett test on nested ANOVA
koejärjestely (esimerkiksi testauskammioiden määrä, kontrollien tyyppi)
Dunnett test on nested ANOVA No
kalojen ylläpitoon käytetyn veden laatua koskevat tiedot (esimerkiksi pH, kovuus, lämpötila, johtavuus, liuenneen hapen pitoisuus)
Yes Yes
testiliuosten liuenneen hapen pitoisuus, pH, kokonaiskovuus, lämpötila ja johtavuus kokeen alussa ja 96 tunnin jälkeen
No >=4 reps per conc
kantaliuosten ja testiliuosten valmistusmenetelmä sekä vaihtotiheys
<=3 reps per conc
perustelut liuottimen käyttämiselle ja sen valinnalle, jos se on muu kuin vesi
Dunn or Mann-Whitney test on rep means
nimelliset testipitoisuudet sekä tulokset kaikista analyyseistä, joilla määritetään testikemikaalin pitoisuus koeastioissa; lisäksi on ilmoitettava menetelmän saantoteho sekä kvantifiontiraja (LoQ)
Dunn test on rep means Dunn or Mann-Whitney test
näyttö siitä, että kontrollit täyttivät yleiset eloonjäämistä koskevat validiteettivaatimukset
Dunn test <=3 reps per conc
munien hedelmöitymisaste
>=4 reps per conc Tamhane-Dunnett test
kuoriutumisaste käsitellyissä ryhmissä ja kontrolliryhmissä.
Nested ANOVA normal
suurin pitoisuus, joka ei ole aiheuttanut kuolleisuutta kokeen aikana
Nested ANOVA not normal
pienin pitoisuus, joka on aiheuttanut 100 prosentin kuolleisuuden kokeen aikana
variance stabilising transformation
kumulatiivinen kuolleisuus kussakin pitoisuudessa suositeltuina havainnointiajankohtina
Variances unequal Dunnett test
jos mahdollista LC50-arvot kuolleisuudelle 96 tunnin (ja valinnaisesti 48 tunnin) kohdalla 95 prosentin luottamusrajoin
Variances equal
pitoisuus/kuolleisuus -käyrä kokeen päätyttyä
Step-down Jonckheere test
kuolleisuus kontrolleissa (negatiiviset kontrollit, levyjen sisäiset kontrollit sekä positiivinen kontrolli ja mahdollisesti käytetty liuotinkontrolli)
Rep means normal or not homogenous
tiedot kunkin neljän apikaalisen havainnon tuloksista
Rep means normal & homogenous
mahdollisten morfologisten ja fysiologisten poikkeavuuksien esiintyvyys ja kuvaus (ks. lisäyksessä 5 olevassa kuvassa 2 esitetyt esimerkit)
Step-down trendtest on replicate means
testin aikaiset tapahtumat, jotka ovat saattaneet vaikuttaa tuloksiin
Not monotone
tilastollinen analyysi ja tietojen käsittely (Probit-analyysi, logistinen regressiomalli ja LC50-arvojen geometrinen keskiarvo)
Monotone
(muunnetun) pitoisuus-vastekuvaajan regression kaltevuus ja luottamusväli.
Determine whether Dose-Response is monotone
Mahdolliset poikkeamat testimenetelmästä ja syyt niihin.
C.49 Fish Embryo Acute Toxicity (FET) Test
Tulosten tarkastelu ja tulkinta.
This test method (TM) is equivalent to OECD test guideline (TG) 236 (2013).
OECD (2011) Validation Report (Phase 1) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II.
It describes a Fish Embryo Acute Toxicity (FET) test with the zebrafish (Danio rerio).
Series on Testing and Assessment No.
This test is designed to determine acute toxicity of chemicals on embryonic stages of fish.
157, OECD, Paris.
The FET-test is based on studies and validation activities performed on zebrafish (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)(8)(9)(10)(11)(12)(13)(14).
OECD (2012) Validation Report (Phase 2) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II (Annexes).
The FET-test has been successfully applied to a wide range of chemicals exhibiting diverse modes of action, solubilities, volatilities, and hydrophobicities (reviewed in 15 and 16).
Series on Testing and Assessment No.
Newly fertilised zebrafish eggs are exposed to the test chemical for a period of 96 hrs.
179, OECD, Paris.
Every 24 hrs, up to four apical observations are recorded as indicators of lethality (6): (i) coagulation of fertilised eggs, (ii) lack of somite formation, (iii) lack of detachment of the tail-bud from the yolk sac, and (iv) lack of heartbeat.
Belanger, S. E., Rawlings J. M. ja Carr G. J. (2013) Use of Fish Embryo Toxicity Tests for the Prediction of Acute Fish Toxicity to Chemicals.
At the end of the exposure period, acute toxicity is determined based on a positive outcome in any of the four apical observations recorded, and the LC50 is calculated.
Environmental Toxicology and Chemistry 32:1768–1783.
Useful information about substance-specific properties include the structural formula, molecular weight, purity, stability in water and light, pKa and Kow, water solubility and vapour pressure as well as results of a test for ready biodegradability (TM C.4 (17) or TM C.29 (18)).
Pharmacol.: 149 (2), s. 196-209
Solubility and vapour pressure can be used to calculate Henry's law constant, which will indicate whether losses due to evaporation of the test chemical may occur.
Tämän liitteen luku C.4: Biohajoavuuden määritys
A reliable analytical method for the quantification of the substance in the test solutions with known and reported accuracy and limit of detection should be available.
Tämän liitteen luku C.29: Biohajoavuus – CO2 suljetuissa astioissa
If the test method is used for the testing of a mixture, its composition should, as far as possible, be characterised, e.g. by the chemical identity of its constituents, their quantitative occurrence and their substance-specific properties (see paragraph 4).
Tämän liitteen luku C.48: Kalojen lyhytaikainen lisääntymistutkimus.
Concerning substances that may be activated via metabolism, there is evidence that zebrafish embryos do have biotransformation capacities (19)(20)(21)(22).
Ks. lisäys 4a.
However, the metabolic capacity of embryonic fish is not always similar to that of juvenile or adult fish.
35, s. 4097–4102.
For instance, the protoxicant allyl alcohol (9) has been missed in the FET.
Saatavilla osoitteessa: [http://www.iso.org].
Therefore, if there are any indications that metabolites or other transformation products of relevance may be more toxic than the parent compound, it is also recommended to perform the test with these metabolites/transformation products and to also use these results when concluding on the toxicity of the test chemical, or alternatively perform another test which takes metabolism into further account.
23, OECD, Paris.
For substances with a molecular weight ≥ 3kDa, a very bulky molecular structure, and substances causing delayed hatch which might preclude or reduce the post-hatch exposure, embryos are not expected to be sensitive because of limited bioavailability of the substance, and other toxicity tests might be more appropriate.
Euroopan komissio (2007): Komission suositus 2007/526/EY, annettu 18 päivänä kesäkuuta 2007, kokeellisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten säilytystä ja hoitoa koskevista ohjeista (tiedoksiannettu numerolla K(2007) 2525) [http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2007:197:0001:0089:EN:PDF]
For the test results to be valid, the following criteria apply:
Euroopa unioni (2010): Euroopan parlamentin ja neuvoston direktiivi 2010/63/EU, annettu 22 päivänä syyskuuta 2010, tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta.
The overall fertilisation rate of all eggs collected should be ≥ 70 % in the batch tested.
EUVL L 276, 20.10.2010, s. 33
The water temperature should be maintained at 26 ± 1 °C in test chambers at any time during the test.
Tämän liitteen luku C.2: Daphnia sp., akuutin immobilisaation testi
Overall survival of embryos in the negative (dilution-water) control, and, where relevant, in the solvent control should be ≥ 90 % until the end of the 96 hrs exposure.
Series on Testing and Assessment No.
Exposure to the positive control (e.g. 4,0 mg/l 3,4-dichloroaniline for zebrafish) should result in a minimum mortality of 30 % at the end of the 96 hrs exposure.
OECD, Paris.
Hatching rate in the negative control (and solvent control if appropriate) should be ≥ 80 % at the end of 96 hrs exposure.
Detailed review paper ”Fish embryo toxicity assays”.
At the end of the 96 hrs exposure, the dissolved oxygen concentration in the negative control and highest test concentration should be ≥ 80 % of saturation.
UBA report under contract no.
An overview of recommended maintenance and test conditions is available in Appendix 2.
Apikaalinen päätepiste
The following equipment is needed:
aiheuttaa vaikutuksen populaation tasolla.
Fish tanks made of chemically inert material (e.g. glass) and of a suitable capacity in relation to the recommended loading (see “Maintenance of brood fish”, paragraph 14);
Epibolia
Inverted microscope and/or binocular with a capacity of at least 80-fold magnification.
IUPAC
If the room used for recording observations cannot be adjusted to 26 ± 1 °C, a temperature-controlled cross movement stage or other methods to maintain temperature are necessary;
Kansainvälinen puhtaan ja sovelletun kemian liitto (International Union of Pure and Applied Chemistry) Kemikaali
Test chambers; e.g., standard 24-well plates with a depth of approx.
aine tai seos.
20 mm. (see “Test chambers”, paragraph 11);
Levyn sisäinen kontrolli
e.g., self-adhesive foil to cover the 24-well plates;
Läpivirtauskoe
Incubator or air-conditioned room with controlled temperature, allowing to maintain 26 ± 1 °C in wells (or test chambers);
Mediaani tappava pitoisuus (LC50)
Oxygen meter;
Testikemikaalin pitoisuus, jonka arvioidaan aiheuttavan 50 prosentin kuolleisuuden altistuneissa testiorganismeissa testin aikana.
Equipment for determination of hardness of water and conductivity;
Semistaattinen ajoittaisvaihtotesti
Spawn trap: instrument trays of glass, stainless steel or other inert materials; wire mesh (grid size 2 ± 0,5 mm) of stainless steel or other inert material to protect the eggs once laid; spawning substrate (e.g. plant imitates of inert material) (TM C.48, Appendix 4a (23));
Testi, jossa testiliuokset vaihdetaan säännöllisesti määritellyin välein (esimerkiksi 24 tunnin välein).
Pipettes with widened openings to collect eggs;
SMILES-järjestelmä (Simplified Molecular Input Line Entry Specification).
Glass vessels to prepare different test concentrations and dilution water (beakers, graduated flasks, graduated cylinders and graduated pipettes) or to collect zebrafish eggs (e.g. beakers, crystallisation dishes);
Somiitti
If alternative exposure systems, such as flow-through (24) or passive dosing (25) are used for the conduct of the test, appropriate facilities and equipment are needed.
Somiitit ovat kehittyvissä selkärankaisten alkioissa hermostoputken molemmin puolin olevia mesodermirykelmiä, joista kehittyy verinahka (dermatomi), luustolihakset (myotoomi) ja selkäranka (sklerotomi).
Glass or polystyrene test chambers should be used (e.g. 24-well plates with a 2,5-5 ml filling capacity per well).
Staattinen testi
In case adsorption to polystyrene is suspected (e.g., for non-polar, planar substances with high KOW), inert materials (glass) should be used to reduce losses due to adsorption (26).
Testi, jossa testiliuokset pysyvät muuttumattomina testin ajan.
Test chambers should be randomly positioned in the incubator.
aine tai seos, jota testataan tällä testimenetelmällä.
Water and test conditions
koostumukseltaan tuntemattomat tai vaihtelevat aineet, kompleksit reaktiotuotteet tai biologiset materiaalit (Chemical Substances of Unknown or Variable Composition, Complex Reaction Products and Biological Materials) Ylläpitovesi Vesi, jossa täysikasvuisia kaloja pidetään.
Dilution of the maintenance water is recommended to achieve hardness levels typical of a wide variety of surface waters.
YLLÄPITO, KASVATUS JA TYYPILLISET OLOSUHTEET SEEPRAKALAN ALKIOILLA TEHTÄVÄÄ AKUUTTIA TOKSISUUSTESTIÄ VARTEN
Dilution water should be prepared from reconstituted water (27).
Seeprakala (Danio rerio)
The resulting degree of hardness should be equivalent to 100-300 mg/l CaCO3 in order to prevent excessive precipitation of calcium carbonate.
Lajin alkuperä
Other well-characterised surface or well water may be used.
Naaraiden ja koiraiden erilaisuus
The reconstituted water may be adapted to maintenance water of low hardness by dilution with deionised water up to a ratio of 1:5 to a minimum hardness of 30-35 mg/l CaCO3.
Naaraat: esiin työntyvä vatsa mätiä kantavina
The water is aerated to oxygen saturation prior to addition of the test chemical.
Koiraat: hoikempia, oranssi vivahde sinisten pituussuuntaisten raitojen välissä (erityisen näkyvä peräevän lähellä)
Temperature should be kept at 26 ± 1 °C, in the wells, throughout the test.
Kuivaa hiutaleruokaa (enintään 3 prosenttia kalan painosta päivässä) 3–5 kertaa päivässä; lisäksi suolalehtijalkaisen (Artemia-suku) nauplius-toukkia ja/tai kontaminoitumattomasta lähteestä saatuja sopivan kokoisia pieniä vesikirppuja.
The pH should be in a range between pH 6,5 and 8,5, and not vary within this range by more than 1,5 units during the course of the test.
Elävä ravinto lisää ympäristön virikkeellisyyttä, joten sitä olisi käytettävä lisäksi aina, kun se on mahdollista.
If the pH is not expected to remain in this range, then pH adjustment should be done prior to initiating the test.
Veden optimaalisen laadun varmistamiseksi ylimääräinen rehu ja ulosteet on poistettava noin tunnin kuluttua ruokinnasta.
The pH adjustment should be made in such a way that the stock solution concentration is not changed to any significant extent and that no chemical reaction or precipitation of the test chemical is caused.
Täysikasvuisen kalan arvioitu paino
Use of hydrogen chloride (HCl) and sodium hydroxide (NaOH) to correct pH in the solutions containing the test chemical is recommended.
Naaraat: 0,65 ± 0,13 g
Test solutions of the selected concentrations can be prepared, e.g. by dilution of a stock solution.
Koiraat: 0,5 ± 0,1 g
The stock solutions should preferably be prepared by simply mixing or agitating the test chemical in the dilution water by mechanical means (e.g. stirring and/or ultra-sonification).
Emokalojen ylläpito