natgillin/translations-raw huggingface dataset:
physical nature and physical-chemical properties (water solubility, vapour pressure, log Kow, partition coefficient in soil (or in sediment if available), stability in water and sediment etc.);
Siirtoajankohta vaihtelee lajeittain, eikä siirto ehkä ole aina välttämätöntä.
chemical identification data (common name, chemical name, structural formula, CAS number, etc.) including purity and analytical method for the quantification of the test chemical.
Testivedeksi sopii mikä tahansa vesi, jossa testilajin kontrollieläimet pysyvät elossa vähintään yhtä hyvin kuin lisäyksessä 3 kuvatussa vedessä.
test organisms used:
Sen varmistamiseksi, ettei laimennusvesi vaikuta liikaa testituloksiin (esimerkiksi reagoimalla testikemikaalin kanssa) tai haitallisesti siitoskalakannan vointiin, näytteitä on otettava säännöllisin väliajoin analysoitavaksi.
information on how the egg masses and larvae were handled;
Orgaanisen hiilen kokonaispitoisuus, johtavuus, pH ja suspendoituneet kiinteät aineet on mitattava esimerkiksi kolmen kuukauden välein, jos laimennusveden laadun tiedetään pysyvän melko vakiona.
information on handling of the emerged adults of the 1st generation with the help of an exhauster etc (see Appendix 5)
Raskasmetallien (esimerkiksi Cu, Pb, Zn, Hg, Cd, Ni), pääasiallisten anionien ja kationien (esimerkiksi Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl–, SO42–) ja torjunta-aineiden pitoisuudet tulee mitata, jos veden laatu on kyseenalainen.
age of the test organisms at the time of insertion into the test vessels of the 1st and 2nd generation.
Tarkempia tietoja kemiallisesta analyysista ja veden keräämisestä on 34 kohdassa.
sediment used, i.e. natural or formulated (artificial) sediment;
Testissä tulisi käyttää läpivirtausjärjestelmää, jos se on käytännössä mahdollinen.
location and description of sediment sampling site, including, if possible, contamination history;
Varastoliuosten ja laimennusveden virtausnopeudet on tarkistettava säännöllisin väliajoin, mieluiten kerran päivässä, ja virtausnopeus saa vaihdella enintään 10 prosenttia koko testin aikana.
sediment characteristics:
Virtausnopeus, joka on vähintään viisi kertaa testiastian tilavuus 24 tunnissa, on havaittu sopivaksi (1).
pH, organic carbon content, C/N ratio and granulometry (if appropriate).
Muoviletkujen tai muiden sellaisten materiaalien, jotka saattavat sisältää biologisesti aktiivisia kemikaaleja tai joihin testikemikaali saattaa adsorboitua, käyttämistä on pyrittävä välttämään.
formulated sediment:
Varastoliuos valmistetaan mieluiten liuottimia käyttämättä yksinkertaisesti sekoittamalla testikemikaali laimennusveteen käyttäen mekaanisia menetelmiä (kuten sekoittamista tai ultraääntä).
preparation, ingredients and characteristics (organic carbon content, pH, moisture, etc. measured at the start of the test);
Jos testikemikaali liukenee veteen huonosti, on noudatettava OECD:n toimintaohjetta, joka koskee vaikeasti testattavien aineiden ja seosten vesieliöille myrkyllisyyden testaamista (OECD Guidance Document on aquatic toxicity testing of difficult substances and mixtures) (36).
preparation of the test water (if reconstituted water is used) and characteristics (oxygen concentration, pH, hardness, etc. measured at the start of the test);
Liuottimien käyttöä tulee välttää, mutta se voi olla tarpeen joissakin tapauksissa riittävän väkevän varastoliuoksen valmistamiseksi.
depth of sediment and overlaying water for the test vessels and crystallising dishes;
Esimerkkejä sopivista liuottimista on kirjallisuusviitteessä (36).
volume of overlying and pore water;
Puolistaattisia testiolosuhteita tulee välttää, ellei niiden käyttö ole perusteltua testikemikaaliin liittyvistä pakottavista syistä (esimerkiksi stabiilius, rajallinen saatavuus, kalleus tai vaarallisuus).
weight of wet sediment with and without pore water for the test vessels and the crystallising dishes;
Altistumisolosuhteet
test vessels (material and size);
Munien kerääminen ja altistuksen kesto
crystallising dishes (material and size);
Geneettisten poikkeamien välttämiseksi munia kerätään vähintään kolmelta kalaparilta tai -ryhmältä, jotka sekoitetaan ja valitaan satunnaisesti testin aloitukseen.
breeding cages (material and size)
Katso kuvaus kolmipiikin keinohedelmöityksestä lisäyksestä 11.
method of preparation of stock solutions and test concentrations for the test vessels and crystallising dishes;
Testi tulee aloittaa mahdollisimman pian munien hedelmöittymisen jälkeen.
application of the test chemical into the test vessels and crystallising dishes:
Alkiot on upotettava testiliuoksiin mieluiten ennen kuin emosolun jakautuminen alkaa tai mahdollisimman pian tämän vaiheen jälkeen, viimeistään kuitenkin 12 tunnin kuluttua hedelmöittymisestä.
test concentrations, number of replicates and solvents if needed;
Testiä tulee jatkaa siihen saakka, kunnes sukupuolten eriytyminen kontrolliryhmässä on päättynyt (60 päivää kuoriutumisen jälkeen medakalla, kolmipiikillä ja seeprakalalla).
incubation conditions for the test vessels:
Täyttöaste
temperature, light cycle and intensity, aeration (bubbles per second);
Testin alussa hedelmöityneitä munia on oltava vähintään 120 pitoisuutta kohti jaettuna vähintään neljään rinnakkaisnäytteeseen (kontrolliryhmiin jakaminen neliöjuuren perusteella on hyväksyttävää).
incubation conditions for the breeding cages and the crystallising dishes:
Munat tulee jakaa käsittelyihin satunnaistetusti (käyttämällä satunnaistamiseen tilastollisia taulukoita).
temperature, light cycle and intensity;
Astioiden täyttöaste (ks. määritelmä lisäyksestä 1) tulee olla riittävän pieni, jotta liuenneen hapen pitoisuus (vähintään 60 prosenttia ilman kyllästysarvosta) voidaan säilyttää ilman astioiden suoraa ilmastusta.
incubation conditions for the egg ropes in the micro plates (or other vessels):
Läpivirtaustesteissä täyttöaste saisi olla enintään 0,5 g/l per 24 tuntia ja enintään 5 g/l liuosta minä tahansa ajankohtana.
temperature, light cycle and intensity:
Viimeistään 28 päivän kuluttua hedelmöittymisestä rinnakkaisnäytekohtainen kalojen määrä tulee jakaa uudelleen, jotta jokaisessa rinnakkaisnäytteessä mahdollisimman tarkasti sama määrä kaloja.
detailed information on feeding including type of food, preparation, amount and feeding regime.
Jos altistumiseen liittyvää kuolleisuutta ilmenee, rinnakkaisnäytteiden määrää tulee vähentää vastaavasti, jotta käsittelytasojen välinen kalatiheys säilyy mahdollisimman samankaltaisena.
nominal test concentrations, measured test concentrations and the results of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels and crystallising dishes;
Valoisan ajan ja testiveden lämpötilan pitää olla sopivia käytetylle testilajille (ks. lisätietoja FSDT-testin koeolosuhteista lisäyksestä 2).
water quality within the test vessels and crystallising dishes, i.e. pH, temperature, dissolved oxygen, hardness and ammonia;
Ruoka ja ruokinta ovat hyvin tärkeitä, ja on olennaista, että kussakin vaiheessa annetaan asianmukaista ruokaa sopivin väliajoin sellainen määrä, joka tukee normaalia kasvua.
replacement of evaporated test water for the test vessels, if any;
Ruokinnassa tulee noudattaa ad libitum -periaatetta ylimäärä minimoiden.
number of emerged male and female midges per vessel and per day for the 1st and 2nd generation;
Jotta kasvunopeus olisi riittävä, kalat on ruokittava vähintään kahdesti päivässä (viikonloppuisin riittää yksi kerta), ja ruokintakertojen välillä tulee olla vähintään kolme tuntia.
mean development rate of fully emerged and alive midges per replicate and treatment rate (male and female midges separate and also pooled) for the 1st and 2nd generation;
Ruokinta on lopetettava 24 h ennen testin päättymistä.
number of egg ropes deposited in the crystallising dishes per breeding cage and day;
Esimerkkejä sopivista ruoista on lisäyksessä 2 (katso myös OECD:n kaloilla testausta koskeva asiakirja ’Fish Testing Framework’ (39).
characteristics of each egg rope (size, shape and fertility);
Testikemikaalien pitoisuudet on porrastettava lisäyksessä 4 kuvatun mukaisesti.
fecundity — total number of egg ropes per total number of females added to the breeding cage;
Testissä on käytettävä vähintään kolmea testipitoisuutta vähintään neljässä rinnakkaisnäytteessä.
fertility — total number of fertile egg ropes per total number of females added to the breeding cage;
Käyrää, jossa esitetään LC50 saatavilla olevien välittömien myrkyllisyystestien altistusajan funktiona, olisi käytettävä apuna valittaessa testipitoisuusaluetta.
estimates of toxic endpoints e.g. ECx (and associated confidence intervals), NOEC and the statistical methods used for its determination;
Jos tietoja on määrä käyttää riskinarviointiin, testissä suositellaan käytettäväksi viittä testipitoisuutta.
Chapter C.28 of this Annex, Sediment-water chironomid toxicity test using spiked water.
Kemikaalipitoisuuksia, jotka ovat suurempia kuin 10 prosenttia aikuisen eläimen välittömän myrkyllisyyden LC50-arvosta tai 10 mg/l (näistä pienempi arvo), ei tarvitse testata.
Chapter C.27 of this Annex, Sediment-water chironomid toxicity test using spiked sediment.
Enimmäistestipitoisuus on 10 prosenttia toukan tai nuoren eläimen LC50-arvosta.
J. Amer.
Kontrollit
OECD (2006), Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data:
Testipitoisuuksien lisäksi testissä on käytettävä laimennusvesikontrollia (≥ 4 rinnakkaisnäytettä) ja tarvittaessa liuotinkontrollia (≥ 4 rinnakkaisnäytettä).
a Guidance to Application, OECD Series on Testing and Assessment No. 54, 146 pp., ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
Testissä saa käyttää vain sellaisia liuottimia, joilla ei tutkitusti ole tilastollisesti merkitsevää vaikutusta testissä tutkittaviin ominaisuuksiin.
Formulated sediment or reconstituted, artificial or synthetic sediment is a mixture of materials used to mimic the physical components of natural sediment.
Liuotinta käytettäessä sen lopullinen pitoisuus saa olla enintään 0,1 ml/l (36), ja kaikissa testiastioissa pitää olla sama pitoisuus laimennusvesikontrollia lukuun ottamatta.
Overlying water is the water placed over sediment in the test vessel.
Liuottimen käyttöä tulee kuitenkin pyrkiä välttämään kaikin keinoin tai niiden pitoisuudet tulee pitää mahdollisimman pieninä.
Interstitial water or pore water is the water occupying space between sediment and soil particles.
Analyyttisten määritysten ja mittausten taajuus
Spiked water is the test water to which test chemical has been added.
Ennen testin aloittamista testikemikaalipitoisuus on analysoitava kemiallisesti sen tarkistamiseksi, että hyväksymiskriteerit täyttyvät.
Recommendations for culture of Chironomus riparius
Kaikki rinnakkaisnäytteet on analysoitava yksittäin testin alussa ja lopussa.
Chironomus larvae may be reared in crystallising dishes or larger containers.
Testin aikana on analysoitava yksi rinnakkaisnäyte testipitoisuutta kohti vähintään kerran viikossa, ja rinnakkaisnäytteitä on vaihdettava järjestelmällisesti (1, 2, 3, 4, 1, 2…).
Fine quartz sand is spread in a thin layer of about 5 to 10 mm deep over the bottom of the container.
Jos näytteet varastoidaan analysoitavaksi myöhemmin, niiden varastointimenetelmä on validoitava etukäteen.
Suitable water is then added to a depth of several cm.
Testin aikana kaikista testiastioista on mitattava liuennut happi, pH, kokonaiskovuus, johtavuus, suolapitoisuus (jos tarpeen) ja lämpötila.
Water levels should be topped up as necessary to replace evaporative loss, and prevent desiccation.
Vähintään liuennut happi, suolapitoisuus (jos tarpeen) ja lämpötila on mitattava viikoittain, ja pH, johtavuus ja kovuus testin alussa ja lopussa.
Water can be replaced if necessary.
Lämpötilaa on mielellään seurattava jatkuvasti vähintään yhdessä testiastiassa.
Gentle aeration should be provided.
Tulosten perustana tulee käyttää mitattuja pitoisuuksia.
The larval rearing vessels should be held in a suitable cage which will prevent escape of the emerging adults.
Jos testikemikaalin pitoisuus pysyy kuitenkin tyydyttävästi ± 20 prosentin sisällä nimellispitoisuudesta koko testin ajan, tulosten perustana voidaan käyttää joko nimellispitoisuuksia tai mitattuja pitoisuuksia.
The cage should be sufficiently large to allow swarming of emerged adults, otherwise copulation may not occur (minimum is ca.
Havainnot ja mittaukset
30 × 30 × 30 cm).
Alkiokehityksen vaiheet
Cages should be held at room temperature or in a constant environment room at 20 ± 2 °C with a photo period of 16 hour light (intensity ca.
Altistus pitää aloittaa mahdollisimman pian hedelmöittymisen jälkeen ja ennen kuin emosolun jakautuminen alkaa, kuitenkin viimeistään 12 tunnin kuluttua hedelmöittymisestä.
1000 lux), 8 hours dark.
Näin varmistetaan varhaisen alkiokehityksen aikainen altistus.
It has been reported that air humidity of less than 60 % RH can impede reproduction.
Kuoriutuminen ja eloonjääminen
Any suitable natural or synthetic water may be used.
Kuoriutumisesta ja eloonjäämisestä olisi tehtävä havaintoja vähintään kerran päivässä, ja yksilöiden lukumäärät on kirjattava.
Well water, dechlorinated tap water and artificial media (e.g. Elendt “M4” or “M7” medium, see below) are commonly used.
Kuolleet alkiot, toukat ja nuoret kalat on poistettava heti kun ne on havaittu, koska ne saattavat hajota nopeasti tai muiden kalojen toiminta saattaa rikkoa ne.
If necessary, the culture water may be renewed by pouring or siphoning the used water from culture vessels carefully without destroying the tubes of larvae.
Kuolemantapaukset todetaan eri kehitysvaiheessa eri tavoin:
Feeding larvae
Munat:
Chironomus larvae should be fed with a fish flake food (Tetra Min®, Tetra Phyll® or other similar brand of proprietary fish food), at approximately 250 mg per vessel per day.
Erityisesti varhaisvaiheissa läpikuultavuus vähenee ja väri muuttuu, mikä johtuu valkuaisaineiden hyytymisestä ja/tai saostumisesta, josta on seurauksena valkoinen väri ja läpinäkymättömyys.
This can be given as a dry ground powder or as a suspension in water:
Toukat ja nuoret kalat:
1,0 g of flake food is added to 20 ml of dilution water and blended to give a homogenous mix.
Toukat eivät liiku ja/tai niiden hengitysliikkeet puuttuvat ja/tai sydän ei lyö ja/tai keskushermosto on valkoinen ja läpinäkymätön ja/tai ne eivät reagoi mekaanisiin ärsykkeisiin.
This preparation may be fed at a rate of about 5 ml per vessel per day.
Epänormaali ulkonäkö
(shake before use.)
Niiden toukkien tai kalojen lukumäärä, joiden muoto on poikkeava, on kirjattava muistiin, ja poikkeavuuden ulkonäkö ja luonne on kuvattava.
Older larvae may receive more.
Huomattakoon, että epänormaaleja alkioita ja toukkia esiintyy luonnollisesti, ja niiden määrä voi olla useita prosentteja kontroll(e)issa joissakin lajeissa.
Feeding is adjusted according to the water quality.
Epänormaalit eläimet tulee vain poistaa testiastioista, kun ne kuolevat.
If the culture medium becomes “cloudy”, the feeding should be reduced.
Jos poikkeavuudet aiheuttavat kuitenkin kipua, tuskaa, kärsimystä tai pysyvää haittaa ja jos kuolema voidaan ennustaa luotettavasti, Euroopan parlamentin ja neuvoston 22 päivänä syyskuuta 2010 tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta antaman direktiivin 2010/63/EU mukaan eläimet on nukutettava ja lopetettava 44 kohdassa kuvatulla tavalla.
Food additions should be carefully monitored.
Epänormaali käyttäytyminen
Too little food will cause emigration of the larvae towards the water column, and too much food will cause increased microbial activity and reduced oxygen concentrations.
Poikkeavuudet, kuten hyperventilaatio, koordinoimaton uinti, epätyypilliset äänet ja epätyypillinen syömiskäyttäytyminen on kirjattava muistiin niitä havaittaessa.
Both conditions can result in reduced growth rates.
Paino
Some green algae (e.g. Scenedesmus subspicatus, Chlorella vulgaris) cells may also be added when new culture vessels are set up.
Testin lopussa kaikki eloonjääneet kalat on lopetettava (nukutettava, jos on määrä ottaa verikokeita), ja niiden yksilöllinen märkäpaino (kun ne on kuivattu imeyttämällä vesi paperiin) on punnittava.
Feeding emerged adults
Pituus
Some experimenters have suggested that a cotton wool pad soaked in a saturated sucrose solution may serve as a food for emerged adults.
Testin lopussa kalojen yksilölliset pituudet (vakiopituus) on mitattava.
At 20 ± 2 °C adults will begin to emerge from the larval rearing vessels after approximately 13 - 15 days.
Näiden havaintojen avulla voidaan raportoida seuraavat tiedot:
Males are easily distinguished by having plumose antennae and thin body.
kertyvä kuolleisuus
Egg masses
terveiden kalojen lukumäärät testin lopussa
Once adults are present within the breeding cage, all larval rearing vessels should be checked three times weekly for deposition of the gelatinous egg masses.
kuoriutumisen alkamis- ja päättymisajankohdat
If present, the egg masses should be carefully removed.
eloon jääneiden eläinten pituus ja paino
They should be transferred to a small dish containing a sample of the breeding water.
epämuodostuneiden toukkien lukumäärät
Egg masses are used to start a new culture vessel (e.g. 2 - 4 egg masses/vessel) or are used for toxicity tests.
epätavallisesti käyttäytyvien kalojen lukumäärä.
First instar larvae should hatch after 2 - 3 days.
Näytteenotto kaloilta
Set-up of new culture vessels
Kaloilta otetaan tarvittavat näytteet testin päättyessä.
Once cultures are established it should be possible to set up a fresh larval culture vessel weekly or less frequently depending on testing requirements, removing the older vessels after adult midges have emerged.
Kalat, joilta otetaan näytteitä, on lopetettava esimerkiksi MS-222:lla (100–500 mg litrassa liuosta, joka on puskuroitu 200 mg:lla NaHCO3:a litrassa) tai FA-100:lla (4-allyyli-2-metoksofenoli: eugenoli), ja jokaisen kalan pituus on mitattava ja märkäpaino punnittava (kun kala on kuivattu imeyttämällä vesi paperiin), tai nukutettava, jos niiltä on määrä ottaa verinäyte (ks. 49 kohta).
Using this system a regular supply of adults will be produced with a minimum of management.
Näytteenotto vitellogeniinianalyysia varten ja sukupuolen määritys histologisen arvioinnin avulla
Preparation of test solutions “M4” and “M7”
Kaikilta kaloilta tulee ottaa näytteet ja ne pitää valmistella sukupuolen määritystä ja vitellogeniinianalyysia varten.
Elendt (1990) has described the “M4” medium.
Kaikki kalat on analysoitava histologisesti sukupuolen määrittämiseksi.
The “M7” medium is prepared as the “M4” medium except for the substances indicated in Table 1, for which concentrations are four times lower in “M7” than in “M4”.
Vitellogeniinimittauksissa vähintään 16 kalaa käsittävä osanäyte jokaisesta rinnakkaisnäytteestä on hyväksyttävä.
The test solution should not be prepared according to Elendt and Bias (1990) for the concentrations of NaSiO3 · 5H2O, NaNO3, KH2PO4 and K2HPO4 given for the preparation of the stock solutions are not adequate.
Vitellogeniini on analysoitava useammista kaloista, jos osanäytteen tulokset osoittautuvat epäselviksi.
Preparation of the “M7”-medium
Näytteenottomenetelmä vitellogeniinipitoisuuden ja sukupuolen määritystä varten määräytyy vitellogeniinin analyysimenetelmän mukaan:
Each stock solution (I) is prepared individually and a combined stock solution (II) is prepared from these stock solutions (I) (see Table 1).
Pää-/pyrstöhomogenaattimenetelmä vitellogeniinianalyysia varten
Fifty ml from the combined stock solution (II) and the amounts of each macro nutrient stock solution which are given in Table 2 are made up to 1 litre of deionised water to prepare the “M7” medium.
Kala lopetetaan.
A vitamin stock solution is prepared by adding three vitamins to deionised water as indicated in Table 3, and 0,1 ml of the combined vitamin stock solution are added to the final “M7” medium shortly before use.
Jokaisen kalan pää ja pyrstö irrotetaan muusta ruumiista heti rintaevien ja selkäevän takaa tehtävillä viilloilla skalpellia käyttäen (ks. kuva 1).
The vitamin stock solution is stored frozen in small aliquots.
Jokaisen kalan pää- ja pyrstöosa yhdistetään, punnitaan ja numeroidaan yksitellen.
The medium is aerated and stabilised.
Sen jälkeen ne jäädytetään nestemäisessä typessä, ja niitä säilytetään vähintään – 70 °C:ssa vitellogeniinianalyysia varten.
Stock solutions of trace elements for medium M4 and M7
Kalan ruumis numeroidaan ja kiinnitetään asianmukaisella kiinnitysaineella histologista arviointia varten (22).
Stock solutions (I)
Tätä menetelmää käyttämällä vitellogeniini ja histopatologia arvioidaan jokaiselta kalalta yksitellen, ja mahdollinen vitellogeniinipitoisuuden muutos voidaan näin liittää kalan fenotyyppiseen tai geneettiseen sukupuoleen (medaka ja kolmipiikki).
Amount (mg) made up to 1 litre of deionised water
Katso lisätietoja homogenisointia koskevista ohjeista (lisäys 5) ja vitellogeniinin kvantifiointia koskevista ohjeista (lisäys 6).
To prepare the combined stock solution (II):
Maksahomogenaattimenetelmä vitellogeniinianalyysia varten
mix the following amounts (ml) of stock solutions (I) and make up to 1 litre of deionised water
Maksa irrotetaan ja säilytetään vähintään – 70 °C:ssa.
Final concentrations in test solutions (mg/l)
Suositellut menetelmät maksan irrottamiseen ja esikäsittelyyn ovat saatavilla OECD:n testiohjeessa (TG) nro 229 (37) tai tämän liitteen luvussa C.37 (38).
MnCl2·4H2O [1]
Sen jälkeen maksat homogenisoidaan yksittäin OECD:n testiohjeessa (TG) nro 229 tai tämän liitteen luvussa C.37 kuvatun mukaisesti.
SrCl2·6H2O [1]
Kerättyä supernatanttia käytetään vitellogeniinin mittaamiseen homologisella ELISA-tekniikalla (ks. esimerkki kvantifioinnista seeprakalan yhteydessä lisäyksestä 6 tai medakan yhteydessä OECD:n testiohjeesta (TG) nro 229 (37)).
MoO4·2H2O [1]
Tällä tavalla on myös mahdollista saada kalakohtaista tietoa sekä vitellogeniinista että sukurauhasten histologiasta.
CuCl2·2H2O [1]
Veriplasmamenetelmä vitellogeniinianalyysia varten
CaCl2·6H2O
Verinäyte otetaan nukutetuilta kaloilta sydänpunktiolla, pyrstösuonesta tai leikkaamalla pyrstö, ja se sentrifugoidaan 4 °C:ssa plasman keräämistä varten.
EDTA·2H2O [1] [2]
Plasma säilytetään vähintään – 70 °C:ssa käyttämiseen saakka.
FeSO4·7H2O [1] [2]
Kaikki kalat lopetetaan ja kiinnitetään kiinnitysaineella histologista tutkimusta varten.
Macro nutrient stock solutions for medium M4 and M7
Sekä plasmanäytteet että kalat numeroidaan yksilöllisesti, jotta vitellogeniinipitoisuudet voidaan yhdistää kalan sukupuoleen.
Amount made up to 1 litre of deionised water
Kalan leikkaaminen pää-/pyrstöhomogenaattiosiin vitellogeniinin mittausta varten ja keskiruumiin histologista arviointia varten
Amount of macro nutrient stock solutions added to prepare medium M4 and M7
Geneettisen sukupuolen määrittäminen
(ml/l)
Biologinen näyte geneettisen sukupuolen määrittämistä varten otetaan jokaiselta niiden lajien kalalta, joilla on asianomaiset merkit sukupuolesta.
Final concentrations in test solutions M4 and M7
Medakalta näytteeksi otetaan peräevä tai selkäevä.
Vitamin stock solution for medium M4 and M7
Tarkat ohjeet ovat lisäyksessä 9, mukaan luettuina kudosnäytteiden ottaminen ja sukupuolen määrittäminen PCR-menetelmällä.
All three vitamin solutions are combined to make a single vitamin stock solution.
Kolmipiikkiä koskevat ohjeet kudosnäytteiden ottamisesta ja sukupuolen määrittämisestä PCR-menetelmällä ovat lisäyksessä 10.
Amount of vitamin stock solution added to prepare medium M4 and M7
Vitellogeniinipitoisuuden mittaaminen
Thiamine hydrochloride
Vitellogeniinipitoisuus on mitattava määrällisesti ja analyyttisesti validoidulla menetelmällä.
Cyanocobalamin (B12)
Tietyssä laboratoriossa käytetyn menetelmän testin sisäisestä ja testien välisestä vaihtelusta tulisi olla saatavilla tietoa.
Biotine
Laboratorioiden välisen ja laboratorion sisäisen vaihtelun lähde perustuu (todennäköisimmin) kalapopulaation eri kehitysvaiheisiin.
These substances differ in M4 and M7, as indicated above.
Kun otetaan huomioon vitellogeniinimittauksiin liittyvä vaihtelu, pelkästään tähän ominaisuuteen perustuvaan NOEC-arvoon tulee suhtautua hyvin varauksellisesti.
These solutions are prepared individually, then poured together and autoclaved immediately.
Käytettävissä on eri menetelmiä, joilla voidaan arvioida vitellogeniinin tuotantoa tässä testissä käytetyillä lajeilla.