natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Each vessel should receive a layer of approximately 1,5 – 3 cm of formulated sediment.
Tämä määrä vastaa noin 50–100 mg:aa märkää biomassaa.
The ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be 1:4.
Kun käytetään 22 kohdassa kuvattua synteettistä sedimenttiä, tämä vastaa noin 43 g:aa sedimenttiä (kuivapaino) kymmentä matoa kohti, kun orgaanisen hiilen kokonaispitoisuus on 2,0 prosenttia kuivasta sedimentistä.
The vessels should be of suitable capacity in compliance with the loading rate, i.e. the number of test worms added per weight unit of sediment, (see also paragraph 39).
Jos matoja käytetään astiaa kohti yli 10 kappaletta, sedimentin ja yläpuolisen veden määrää mukautetaan vastaavasti.
Test vessels and other apparatus that will come into contact with the test chemical should be made entirely of glass or other chemically inert material.
Testissä käytettävien matojen on oltava peräisin samasta lähteestä, ja eläinten fysiologisen tilan on oltava samanlainen (ks. lisäys 5).
Care should be taken to avoid the use of materials, for all parts of the equipment that can dissolve, absorb test chemicals or leach other chemicals and have an adverse effect on the test animals.
Testiä varten valitaan samankokoisia matoja (ks. 39 kohta).
Polytetrafluoroethylene (PTFE), stainless steel and/or glass should be used for any equipment having contact with the test media.
Matoerästä tai -kannasta otettu osanäyte on suositeltavaa punnita ennen testiä keskipainon arvioimiseksi.
For organic chemicals known to adsorb to glass, silanised glass may be required.
Testissä käytettävät madot poistetaan kasvatussäiliöstä (lisätietoa on lisäyksessä 5).
In these situations the equipment will have to be discarded after use.
Suurikokoiset (täysikasvuiset) eläimet, joissa ei ole merkkejä viimeaikaisesta jakaantumisesta, siirretään puhdasta vettä sisältäviin lasiastioihin (esimerkiksi petrimaljoihin).
Test species
Tämän jälkeen ne synkronisoidaan lisäyksessä 5 kuvatulla tavalla.
The test species used in this type of study is the freshwater oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller).
Kun madot ovat regeneroituneet 10–14 vuorokauden ajan, testiä varten valitaan vahingoittumattomia kokonaisia matoja, jotka ovat samankokoisia ja jotka uivat tai matelevat aktiivisesti kevyen mekaanisen ärsytyksen seurauksena.
This species is tolerant to a wide range of sediment types, and is widely used for sediment toxicity and bioaccumulation testing [e.g. (3), (5), (7), (9), (13), (15), (16), (22), (23), (24), (25), (26), (27), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35)].
Jos testiolosuhteet poikkeavat viljelyolosuhteista esimerkiksi lämpötilan, valon ja pimeyden vaihtelun tai yläpuolisen veden osalta, matojen mukautumiseen testiolosuhteisiin riittää yleensä esimerkiksi 24 tunnin totutusjakso, jonka aikana lämpötila, valon ja pimeyden vaihtelu ja yläpuolinen vesi ovat samoja kuin testissä.
The origin of the test animals, the confirmation of species identity (e.g. (36)) as well as the culture conditions should be reported.
Olosuhteisiin mukautuneet harvasukasmadot siirretään satunnaistetusti testiastioihin.
Identification of species is not required prior to every test if the organisms come from an in-house culture.
Ruokaa lisätään sedimenttiin ennen testikemikaalin applikointia (tai sen aikana), minkä vuoksi madoille ei anneta muuta ruokaa testin aikana.
Culturing of the test organisms
Valo ja lämpötila
In order to have a sufficient number of worms for conducting sediment toxicity tests, it is useful to keep the worms in permanent laboratory culture.
Valoisa jakso kasvatuksessa ja testissä on tavallisesti 16 tuntia (3), (7).
Guidance for laboratory culture methods for Lumbriculus variegatus, and sources of starter cultures are given in Appendix 5.
Valo pidetään suhteellisen heikkona (esimerkiksi 100–500 luksissa), millä jäljitellään luonnonolosuhteita sedimentin pinnalla.
For details on culturing this species see references (3), (7), (27).
Valon voimakkuus mitataan vähintään kerran altistumisjakson aikana.
To ensure that the tests are performed with animals of the same species, the establishment of single species cultures is strongly recommended.
Lämpötilan on oltava 20 ± 2 °C koko testin ajan.
Ensure that the cultures and especially the worms used in the tests are free from observable diseases and abnormalities.
Kaikkina mittausajankohtina testiastioiden välinen lämpötilaero saa olla enintään ± 1 °C.
Reconstituted water according to Chapter C.1 of this Annex (37) is recommended for use as overlying water in the tests;
Testiastiat sijoitetaan testi-inkubaattoriin tai testialueelle satunnaisessa järjestyksessä esimerkiksi siksi, että näin vältetään lisääntymisen vääristyminen astian sijainnin takia.
it can also be used for the laboratory cultures of the worms (see Appendix 2 for preparation).
Ilmastus
If required, natural water may be used.
Yläpuolista vettä testiastioissa on ilmastettava kevyesti (esimerkiksi 2–4 ilmakuplaa sekunnissa) Pasteur-pipetillä, joka sijaitsee noin kahden sentin päässä sedimentin pinnasta sedimentin sekoittumisen välttämiseksi.
The chosen water must be of a quality that will allow the growth and reproduction of the test species for the duration of the acclimation and test periods without showing any abnormal appearance or behaviour.
Samalla on varottava, että liuenneen hapen pitoisuus ei laske alle 30 prosenttiin ilman kyllästysarvosta (ASV).
Lumbriculus variegatus has been demonstrated to survive, grow, and reproduce in this type of water (30), and maximum standardisation of test and culture conditions is provided.
Tuloilman määrää on seurattava ja sitä on tarvittaessa säädettävä arkisin vähintään kerran päivässä.
If a reconstituted water is used, its composition should be reported, and the water should be characterised prior to use at least by pH, oxygen content, and hardness (expressed as mg CaCO3/l).
Veden laadun mittaaminen
Analysis of the water for micropollutants prior to use might provide useful information (see, e.g., Appendix 3).
Yläpuolisesta vedestä mitataan seuraavat laatua kuvaavat parametrit:
The pH of the overlying water should be in the range of 6,0 to 9,0 (see paragraph 13).
mitataan vähintään yhdestä kutakin pitoisuustasoa edustavasta testiastiasta sekä yhdestä kontrolleihin kuuluvasta testiastiasta kerran viikossa sekä altistusjakson alussa ja lopussa
If increased ammonia development is expected, it is considered useful to keep the pH between 6,0 and 8,0.
lisäksi ympäröivän väliaineen (huoneilman tai vesihauteen) lämpötila mitataan esimerkiksi tunnin välein
For testing of e.g. weak organic acids, it is advisable to adjust the pH by buffering the water to be used in the test, as described e.g. by (16).
Liuenneen hapen pitoisuus:
The total hardness of the water to be used in the test should be between 90 and 300 mg CaCO3 per liter for natural water.
ilmoitetaan yksikköinä mg/l ja prosenttiosuus ASV:stä (ilman kyllästysarvo)
Appendix 3 summarises additional criteria for acceptable dilution water according to OECD Guideline No. 210 (38).
Tuloilma:
Sediment
seurataan vähintään kerran päivässä arkipäivisin ja säädetään tarvittaessa
Since uncontaminated natural sediments from a particular source may not be available throughout the year, and indigenous organisms as well as the presence of micropollutants can influence the test, a formulated sediment (also called reconstituted, artificial or synthetic sediment) should preferably be used.
Veden kokonaiskovuus:
Use of a formulated sediment minimises variability of test conditions as well as introduction of indigenous fauna.
mitataan vähintään yhdestä kontrolleihin kuuluvasta rinnakkaisnäytteestä sekä yhdestä korkeinta pitoisuutta edustavasta testiastiasta altistusjakson alussa ja lopussa;
The following formulated sediment is based on the artificial sediment according to (6), (39) and (40).
ilmoitetaan yksikköinä mg/l CaCO3
It is recommended for use in this type of test ((6), (10), (30), (41), (42), (43)):
Ammoniakin kokonaispitoisuus:
4-5 % (dry weight) sphagnum peat;
mitataan vähintään yhdestä kontrolleihin kuuluvasta rinnakkaisnäytteestä sekä yhdestä kutakin pitoisuustasoa edustavasta testiastiasta altistusjakson alussa ja sen jälkeen kolmesti viikossa;
it is important to use peat in powder form, degree of decomposition:
ilmoitetaan yksikköinä mg/l NH4+ tai NH3 tai kokonaisammoniakki-N
“medium”, finely ground (particle size ≤ 0,5 mm), and only air-dried.
Jos veden laatua kuvaavien parametrien mittaaminen edellyttää merkittävien vesinäytteiden keräämistä astioista, voi olla suositeltavaa varata erilliset astiat veden laadun mittaamista varten, jotta veden ja sedimentin tilavuuksien välistä suhdetta ei muutettaisi.
20 ± 1 % (dry weight) kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %).
Biologiset havainnot
75-76 % (dry weight) quartz sand (fine sand, grain size: ≤ 2 mm, but > 50 % of the particles should be in the range of 50-200 μm).
Altistusaikana testiastioita on tarkkailtava, jotta voidaan arvioida silmämääräisesti mahdollisia eroja matojen käyttäytymisessä (esimerkiksi sedimentin välttely, sedimentin pinnalla näkyvät ulostepelletit) kontrolleihin verrattuna.
Deionised water, 30–50 % of sediment dry weight, in addition to the dry sediment components.
Havainnot kirjataan muistiin.
Calcium carbonate of chemically pure quality (CaCO3) is added to adjust the pH of the final mixture of the sediment.
Testin lopussa kaikki rinnakkaisnäytteet tutkitaan (kemiallisia analyysejä varten varatut ylimääräiset astiat voidaan jättää huomiotta).
The total organic carbon content (TOC) of the final mixture should be 2 % (± 0,5 %) of sediment dry weight and should be adjusted by the use of appropriate amounts of peat and sand, according to (a) and (c).
Kaikki madot kerätään testiastioista sopivaa menetelmää käyttäen.
Food, e.g. powdered leaves of Stinging Nettle (Urtica sp., in accordance with pharmacy standards, for human consumption), or a mixture of powdered leaves of Urtica sp. with alpha-cellulose (1:1), at 0,4 - 0,5 % of sediment d.w., in addition to the dry sediment components;
Madot on kerättävä niin varovasti, että ne saadaan talteen vahingoittumattomina.
for details see Appendix 4.
Eräs mahdollinen tapa on siivilöidä madot sedimentin joukosta.
The source of peat, kaolin clay, food material, and sand should be known.
Tähän tarkoitukseen voidaan käyttää silmäkooltaan sopivaa ruostumattomasta teräksestä valmistettua siivilää.
In addition to item g), Chapter C.27 of this Annex (6) lists alternative plant materials to be used as a source of nutrition:
Suurin osa yläpuolisesta vedestä dekantoidaan varovasti ja jäljelle jäävää sedimenttiä ja vettä sekoitetaan, jotta muodostuu lietettä, joka voidaan kaataa siivilän läpi.
dehydrated leaves of mulberry (Morus alba), white clover (Trifolium repens), spinach (Spinacia oleracea), or cereal grass.
Kun siivilän silmäkoko on 500 μm, suurin osa sedimenttihiukkasista menee nopeasti siivilän läpi.
The chosen food source should be added prior to or during spiking the sediment with the test chemical.
Siivilöinti on kuitenkin syytä tehdä ripeästi, jotta madot eivät pääse luikertelemaan siivilän reikiin tai niiden läpi.
The chosen food source should allow for at least acceptable reproduction in the controls.
Kustakin rinnakkaisnäyteastiasta peräisin oleva siivilöity liete voidaan siivilöidä vielä uudelleen, jotta kaikki madot saadaan varmasti talteen.
Analysis of the artificial sediment or its constituents for micro-pollutants prior to use might provide useful information.
Vaihtoehtoinen menetelmä on sedimentin lämmittäminen asettamalla testiastiat vesihauteeseen, jonka lämpötila on 50–60 °C.
An example for the preparation of the formulated sediment is described in Appendix 4.
Madot poistuvat sedimentistä, jolloin ne voidaan kerätä sedimentin pinnalta leveäsuisella, liekkikiillotetulla pipetillä.
Mixing of dry constituents is also acceptable if it is demonstrated that after addition of overlying water a separation of sediment constituents (e.g. floating of peat particles) does not occur, and that the peat or the sediment is sufficiently conditioned (see also paragraph 25 and Appendix 4).
Toisessa vaihtoehtoisessa menetelmässä sedimentistä tehdään lietettä, joka kaadetaan sopivankokoiseen matalaan astiaan.
The artificial sediment should be characterised at least by origin of the constituents, grain size distribution (percent sand, silt, and clay), total organic carbon content (TOC), water content, and pH.
Matalasta lietekerroksesta madot voidaan poimia teräsneulalla tai teräväkärkisillä pinseteillä (joita käytetään haarukan tapaan, ei pihteinä, jotta madot eivät vahingoitu) ja siirtää puhtaaseen veteen.
Measurement of redox potential is optional.
Kun madot on erotettu sedimenttilietteestä, ne huuhdellaan testiväliaineessa ja lasketaan.
If required, e.g. for specific testing purposes, natural sediments from unpolluted sites may also serve as test and/or culture sediment (3).
Käytetystä menetelmästä riippumatta laboratorioiden on osoitettava, että niiden henkilökunta pystyy ottamaan talteen vähintään 90 prosenttia koko sedimentissä olevista organismeista.
However, if natural sediment is used, it should be characterised at least by origin (collection site), pH and ammonia of the pore water, total organic carbon content (TOC) and nitrogen content, particle size distribution (percent sand, silt, and clay), and percent water content (7), and it should be free from any contamination and other organisms that might compete with, or prey on the test organisms.
Tietty määrä testiorganismeja voidaan esimerkiksi lisätä kontrollisedimenttiin tai testisedimentteihin ja talteenoton onnistumista voidaan arvioida tunnin kuluttua (7).
Measurement of redox potential and cation exchange capacity is optional.
Elävien ja kuolleiden yksilöiden kokonaismäärä rinnakkaisnäytettä kohti kirjataan muistiin ja analysoidaan.
It is also recommended that, before it is spiked with the test chemical, the natural sediment be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test.
Madot katsotaan kuolleiksi, jos ne täyttävät jonkin seuraavista tunnusmerkeistä:
At the end of this conditioning period, the overlying water should be removed and discarded.
varovainen mekaaninen ärsyke ei aiheuta reaktiota
The sediment to be used must be of a quality that will allow the survival and reproduction of the control organisms for the duration of the exposure period without showing any abnormal appearance or behaviour.
madossa näkyy merkkejä maatumisesta (yhdessä a-kohdan kanssa)
The control worms should burrow in the sediment, and they should ingest the sediment.
matoa ei löydy.
Reproduction in the controls should at least be according to the validity criterion as described in paragraph 13.
Lisäksi elävät madot voidaan jakaa kolmeen ryhmään:
The presence or absence of fecal pellets on the sediment surface, which indicate sediment ingestion by the worms, should be recorded and can be helpful for the interpretation of the test results with respect to exposure pathways.
suurikokoiset, vahingoittumat yksilöt (täysikasvuiset), joilla ei ole regeneroituneita vartalon osia
Additional information on sediment ingestion can be obtained by using methods described in (24), (25), (44), and (45), which specify sediment ingestion or particle selection in the test organisms.
vahingoittumat yksilöt, joilla on väriltään vaaleampia, regeneroituneita vartalon osia (uusi takapää, uusi etupää tai molemmat)
Manipulation procedures for natural sediments prior to use in the laboratory are described in (3), (7), and (12).
vahingoittuneet yksilöt (äskettäin osia menettäneet yksilöt, joiden vartalon osat eivät ole regeneroituneet).
The preparation and storage of the artificial sediment recommended to be used in the Lumbriculus test is described in Appendix 4.
Nämä lisähuomiot eivät ole välttämättömiä, mutta niitä voidaan hyödyntää biologisten tulosten tarkemmassa tulkitsemisessa (esimerkiksi suuri määrä c-ryhmään kuuluvia matoja saattaa tarkoittaa, että tietyssä käsittelyssä lisääntyminen tai regeneroituminen on viivästynyt).
The test chemical is to be spiked to the sediment.
Lisäksi on syytä todeta ja kirjata muistiin eroavaisuudet käsiteltyjen ja kontrollimatojen ulkonäössä (esimerkiksi integumentissa olevat leesiot tai pöhöttyneet vartalon osat).
As most test chemicals are expected to have low water solubility, they should be dissolved in a suitable organic solvent (e.g. acetone, n-hexane, cyclohexane) at a volume as small as possible in order to prepare the stock solution.
Välittömästi laskennan ja analysoinnin jälkeen jokaisesta rinnakkaisnäytteestä talteen otetut elävät madot siirretään kuivattuihin, etukäteen punnittuihin ja merkittyihin vaakakuppeihin (yksi jokaiselle rinnakkaisnäytteelle) ja lopetetaan tiputtamalla pisara etanolia jokaiseen vaakakuppiin.
The stock solution should be diluted with the same solvent to prepare the test solutions.
Vaakakuppeja kuivataan yön yli kuivausuunissa, jonka lämpötila on 100 ± 5 °C, minkä jälkeen vaakakupit jäähdytetään eksikkaattorissa ja punnitaan, ja matojen kuivapaino kirjataan muistiin (mieluiten grammoina ja vähintään neljän desimaalin tarkkuudella).
Toxicity and volatility of the solvent, and the solubility of the test chemical in the chosen solvent should be the main criteria for the selection of a suitable solubilising agent.
Kokonaiskuivapainon lisäksi voidaan todeta tuhkaton kuivapaino kirjallisuusviitteessä (49) kuvatulla tavalla, jotta huomioon otetaan myös matojen ruoansulatuskanavassa olevasta sulamattomasta sedimentistä peräisin olevat epäorgaaniset yhdisteet.
For each concentration level the same volume of the corresponding solution should be used.
Biomassa määritetään kokonaisbiomassana rinnakkaisnäytettä kohti sisältäen täysikasvuiset madot ja poikaset.
The sediment should be spiked in bulk for each concentration level in order to minimise between-replicate variability of the test chemical concentration.
Kuolleita matoja ei huomioida rinnakkaisnäytekohtaista biomassaa määritettäessä.
Each of the test solutions is then mixed with quartz sand as described in paragraph 22 (e.g. 10 g of quartz sand per test vessel).
Testikemikaalin pitoisuuksien toteaminen
In order to soak the quartz sand completely, a volume of 0,20 - 0,25 ml per g of sand has been found sufficient.
Otanta
Thereafter, the solvent must be evaporated to dryness.
Testikemikaalin kemiallista analyysia varten tarvittavat näytteet otetaan ainakin kaikkein suurimmasta pitoisuudesta sekä yhdestä pienemmästä pitoisuudesta vähintään tasapainottumisvaiheen lopussa (ennen testiorganismien lisäämistä) sekä testin lopussa.
In order to minimise losses of the test chemical through co-evaporation (e.g. depending on the chemical's vapour pressure), the coated sand should be used immediately after drying.
Analyysia varten otetaan näytteet vähintään irtosedimentistä ja yläpuolisesta vedestä.
The dry sand is mixed with the suitable amount of formulated sediment of the corresponding concentration level.
Jokaista matriisia ja käsittelyä kohti otetaan kaikkina näytteenottopäivinä vähintään kaksi näytettä.
The amount of sand provided by the test-chemical-and-sand mixture has to be taken into account when preparing the sediment (i.e. the sediment should thus be prepared with less sand).
Toinen kahdesta näytteestä voidaan säästää varalle (analysoitavaksi esimerkiksi siinä tapauksessa, että alkuperäinen analyysi ei ole nimellispitoisuuden ± 20 prosentin vaihteluvälin sisällä).
The major advantage of this procedure is that virtually no solvent is introduced to the sediment (7).
Jos kemikaalilla on erityisominaisuuksia ja sen esimerkiksi odotetaan hajoavan nopeasti, analyysien aikataulua voidaan muuttaa (esimerkiksi näytteenottotiheyttä voidaan kasvattaa tai analysoitavien pitoisuustasojen määrää lisätä) asiantuntija-arvion perusteella.
Alternatively, e.g. for field sediment, the test chemical may be added by spiking a dried and finely ground portion of the sediment as described above for the quartz sand, or by stirring the test chemical into the wet sediment, with subsequent evaporating of any solubilising agent used.
Näytteitä voidaan tällöin ottaa välinäytteenottopäivinä (esimerkiksi seitsemäntenä päivänä altistuksen alkamisesta lukien).
Care should be taken to ensure that the test chemical added to sediment is thoroughly and evenly distributed within the sediment.
Yläpuolisesta vedestä otetaan näytteitä varovasti dekantoimalla tai lapolla, jotta sedimentti sekoittuu mahdollisimman vähän.
If necessary, subsamples may be analysed to confirm the target concentrations in the sediment, and to determine degree of homogeneity.
Näytteiden tilavuus kirjataan muistiin.
It may also be useful to analyse subsamples of the test solutions to confirm the target concentrations in the sediment.
Kun yläpuolinen vesi on poistettu, sedimentti homogenoidaan ja siirretään sopivaan säiliöön.
Since a solvent is used for coating the test chemical on the quartz sand, a solvent control should be employed which is prepared with the same amount of the solvent as the test sediments.
Märän sedimentin paino kirjataan muistiin.
The method used for spiking, and the reasons for choosing a specific spiking procedure other than described above should be reported.
Jos lisäksi tarvitaan huokosvedessä olevan kemikaalin analysointia, homogenoidut ja punnitut sedimenttinäytteet sentrifugoidaan, jolloin saadaan huokosvettä.
This should preferably be done under the conditions of temperature and aeration used in the test.
Jäljelle jääneen sedimenttikakun paino kirjataan muistiin.
Appropriate equilibration time is sediment and chemicals specific, and can be in the order of hours to days and in rare cases up to several weeks (4-5 weeks) (e.g. (27)(47)).
Massataseen arviointi tai testikemikaalin talteenotto vesi-sedimenttijärjestelmästä on helpompaa, jos sedimentin kuivapaino määritetään jokaisena näytteenottopäivänä.
In this test, equilibrium is not awaited but an equilibration period of 48 hours to 7 days is recommended.
Joskus pitoisuuksien analysointi huokosvedestä ei ole mahdollista, koska näyte on liian pieni.
Thus, time for degradation of the test chemical will be minimised.
Jos analyysia ei tehdä välittömästi, kaikki näytteet varastoidaan asianmukaisesti esimerkiksi olosuhteissa, joita suositellaan, jotta kyseinen testikemikaali hajoaisi mahdollisimman vähän (esimerkiksi ympäristöstä kerättyjä näytteitä säilytetään yleensä pimeässä ja – 18 °C:n lämpötilassa).
Depending on the purpose of the study, e.g., when environmental conditions are to be mimicked, the spiked sediment may be equilibrated or aged for a longer period.
Kerää tietoa kunkin testikemikaalin asianmukaisista säilytysolosuhteista – esimerkiksi säilytyslämpötilasta, säilytyksen kestosta ja talteenottomenetelmistä – ennen tutkimuksen aloittamista.
At the end of this equilibration period, samples should be taken at least of the overlying water and the bulk sediment, at least at the highest concentration and a lower one, for analysis of the test chemical concentration.
Analyysimenetelmä
These analytical determinations of the test chemical should allow for calculation of mass balance and expression of results based on measured initial concentrations.
Koko menetelmään vaikuttaa olennaisesti testikemikaalin määritykseen käytettävän menetelmän tarkkuus, täsmällisyys ja herkkyys, minkä vuoksi on todettava kokeellisesti, että kyseisessä menetelmässä kemiallisen määrityksen täsmällisyys ja toistettavuus samoin kuin testikemikaalin saanto vesi- ja sedimenttinäytteistä ovat kyseisen menetelmän kannalta hyväksyttäviä ainakin pienimmän ja suurimman testipitoisuuden osalta.
In general, sampling disturbs or destroys the sediment water system.
Lisäksi on tarkistettava, ettei testikemikaalia havaita kontrolliastioissa määritysrajaa suurempia pitoisuuksia.
Therefore it is usually not possible to use the same replicates for sampling of sediment and worms.
Tarvittaessa laadunvalvonnan huippuarvojen saannon nimellispitoisuuksia voidaan korjata (esimerkiksi silloin, kun saanto on alle 80 tai yli 120 prosenttia lisätystä määrästä).