natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For the F. fimetaria test twenty adults, 10 males and 10 females, 23-26 days old should be used per test-vessel.
Lisäksi on suositeltavaa, että sedimentit saavat sopeutua testiolosuhteisiin seitsemän päivän ajan.
On day 21 collembolans are extracted from the soil and counted.
Suositeltava (1) (20) (21) synteettinen sedimentti, jota on kuvattu kirjallisuusviitteessä (1), valmistetaan seuraavasti:
For F. fimetaria the gender are discriminated by size in the synchronised animal batch used for the test.
a. 4–5 % (kuivapaino) turvetta:
Females are distinctively larger than the males (See Appendix 3)
pH mahdollisimman tarkasti 5,5–6,0;
For the F. candida test, ten 9-12 days old juveniles per test vessel should be used.
on tärkeää käyttää jauhemaista turvetta, joka on jauhettu hienoksi (hiukkaskoko ≤ 1 mm), ja ainoastaan ilmakuivattua versiota.
On day 28, the collembolans are extracted from the soil and counted.
b. 20 % (kuivapaino) kaoliniittisavea (kaoliniitin osuus mieluiten yli 30 %).
As a suitable food source, a sufficient amount, e.g. 2-10 mg, of granulated dried baker's yeast, commercially available for household use, is added to each container at the beginning of the test and after about 2 weeks.
c. 75–76 % (kuivapaino) kvartsihiekkaa (pääosin hienoa hiekkaa, jossa yli puolet 50–200 μm:n hiukkasia).
At the end of the test, mortality and reproduction are assessed.
d. Deionisoitua vettä lisätään, kunnes lopullisen seoksen kosteus on 30––50 %.
After 3 weeks (F. fimetaria) or 4 weeks (F. candida), collembolans are extracted from the test soil (see Appendix 4) and counted (12).
e. Kemiallisesti puhdasta kalsiumkarbonaattia (CaCO3) lisätään, jotta lopullisen sedimenttiseoksen pH-arvoksi tulee 7,0 ± 0,5.
A collembolan is recorded as dead if not present in the extraction.
f. Orgaanisen hiilen pitoisuuden on oltava lopullisessa seoksessa 2 % (± 0,5 %).
The extraction and counting method should be validated.
Sitä voidaan säätää lisäämällä sopiva määrä turvetta ja hiekkaa kohtien a ja c mukaisesti.
The validity includes extraction efficiency of juveniles greater than 95 %, e.g. by adding a known number to soil.
Turpeen, kaoliniittisaven ja hiekan alkuperän on oltava tiedossa.
Practical summary and timetable of the test procedure are described in Appendix 2.
Tarkista, ettei sedimentin ainesosissa ole kemikaalista kontaminaatiota (esimerkiksi raskasmetalleja, orgaanisia klooriyhdisteitä ja orgaanisia fosforiyhdisteitä).
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example, five test chemical concentrations of 0,1, 1,0, 10, 100, and 1000 mg/kg dry weight of soil and two replicates for each treatment and control.
Esimerkki synteettisen sedimentin valmistuksesta on lisäyksessä 3.
Additional information, from tests with similar chemicals or from literature, on mortality or reproduction of Collembola may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the range-finding test.
Myös kuivien ainesosien sekoittaminen on hyväksyttävää, jos voidaan osoittaa, että sedimentin ainesosat eivät erotu (esim. kelluvia turvehiukkasia) veden lisäämisen jälkeen ja että turve tai sedimentti on sopeutunut tarpeeksi.
The duration of the range-finding test is two weeks for F. fimetaria and 3 weeks for F. candida to ensure one clutch of juveniles has been produced.
Testivedeksi soveltuu vesi, joka täyttää lisäyksissä 2 ja 4 luetellut laimennusveden kemialliset ominaisuudet.
At the end of the test, mortality and reproduction of the Collembola are assessed.
Kasvatus- ja testivedeksi soveltuu mikä tahansa vesi, luonnonvesi (pinta- tai pohjavesi), synteettinen vesi (katso lisäys 2) tai talousvesi, josta on poistettu kloori, jos surviaissääsket voivat elää siinä viljelyn ja testauksen ajan osoittamatta stressaantumisen merkkejä.
The number of adults and the occurrence of juveniles should be recorded.
Testiveden pH-arvon on oltava testin alussa 6–9, eikä kokonaiskovuus CaCO3:na saa olla yli 400 mg/l.
At least two replicates for each test concentration treatment and six control replicates are recommended.
Jos kovuusionien ja testikemikaalin välillä epäillään yhteisvaikutusta, on kuitenkin käytettävä pehmeämpää vettä (tässä tapauksessa ei saa käyttää Elendt M4 -viljelynestettä).
The spacing factor may vary depending on the dose-response pattern.
Samantyyppistä vettä on käytettävä koko tutkimuksen ajan.
For determination of the NOEC/LOEC, at least five concentrations in a geometric series should be tested.
Lisäyksessä 4 luetellut vedenlaadun ominaisuudet on mitattava vähintään kahdesti vuodessa tai aina kun on epäilystä siitä, että nämä ominaisuudet ovat voineet muuttua merkittävästi.
Four replicates for each test concentration treatment plus eight controls are recommended.
Varastoliuokset – vesi, johon on lisätty testikemikaalia
The statistical analysis, e.g. ANOVA procedures, compares treatments by Student t-test, Dunnett's test, or Williams' test.
Sallittuja dispergointiaineita ovat Cremophor RH40, Tween 80, 0,01-prosenttinen metyyliselluloosa ja HCO-40.
95 % confidence intervals are calculated for individual treatment means.
b. Sedimentit, joiden pitoisuus on haluttu, valmistetaan yleensä lisäämällä testikemikaaliliuosta suoraan sedimenttiin.
The number of surviving adults in the untreated controls is a major validity criterion and should be documented.
Testikemikaalin varastoliuos, joka on liuotettu deionisoituun veteen, sekoitetaan synteettiseen sedimenttiin valssauskoneella, sekoittimella tai käsin.
As in the range-finding test, all other harmful signs should be reported in the final report as well.
Jos testikemikaali liukenee huonosti veteen, se voidaan liuottaa käyttämällä pienintä mahdollista määrää soveltuvaa orgaanista liuotinta (esimerkiksi heksaania, asetonia tai kloroformia).
LCx and ECx
Seuraavaksi liuokseen sekoitetaan 10 g hienoa kvartsihiekkaa yhtä testiastiaa kohden.
ECx-values, including their associated lower and upper 95 % confidence limits for the parameter, are calculated using appropriate statistical methods (e.g. logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
Sen jälkeen liuottimen annetaan haihtua;
To compute the EC50 or any other ECx, the complete data set should be subjected to regression analysis.
sen pitäisi hävitä hiekasta kokonaan, minkä jälkeen hiekkaan sekoitetaan sopiva määrä sedimenttiä.
is usually estimated by probit analysis or similar analysis that takes into account the binomially distributed mortality data.
Testikemikaalin liuottamiseen, dispergoimiseen tai emulgointiin saa käyttää vain helposti haihtuvia aineita.
Appropriate statistical methods should be used according to OECD Document 54 on the Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application (9).
On pidettävä mielessä, että testikemikaalin ja hiekkaseoksen mukana tuleva hiekka on otettava huomioon sedimentin valmistuksessa (eli sedimentin valmistukseen on käytettävä pienempi määrä hiekkaa).
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Homogeenisuusasteen voi määrittää tarvittaessa analysoimalla osanäytteitä.
Normal distribution and variance homogeneity can be tested using an appropriate statistical test, e.g. the Shapiro-Wilk test and Levene test, respectively (p ≤ 0,05).
Testin suunnittelu tarkoittaa testipitoisuuksien lukumäärän ja pitoisuusvälien valintaa, testiastioiden lukumäärää kutakin pitoisuutta kohti, toukkien lukumäärää kutakin astiaa kohti sekä kiteytysmaljojen ja kasvatushäkkien lukumäärää.
One-way Analysis of Variance (ANOVA) and subsequent multi-comparison tests can be performed.
ECx,- ja NOEC-arvoja sekä raja-annostestiä koskevat suunnitelmat kuvataan jäljempänä.
Multiple comparisons (e.g. Dunnett's test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test chemical concentrations (selection of the recommended test according to OECD Document 54 (9)).
Regressioanalyysille suositeltava testisuunnitelma
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) could be used to determine the NOEC and the LOEC.
Testin on katettava vaikuttava pitoisuus (ECx,) ja se pitoisuusalueväli, jossa testikemikaalin vaikutuksella on merkitystä, siten, että ominaisuutta ei ekstrapoloida saatujen tietojen rajojen ulkopuolelle.
the identity of the test chemical, batch, lot and CAS-number, purity;
Paljon pienimmän pitoisuuden alapuolelle tai suurimman pitoisuuden yläpuolelle menevää ekstrapolointia tulee välttää.
physico-chemical properties of the test chemical (e.g. log Kow, water solubility, vapour pressure, Henry's constant (H) and preferably information on the fate of the test chemical in soil) if available;
Testimenetelmien C.27 tai C.28 mukaisesta alustavasta pitoisuusalueen määritystestistä saattaa olla apua, kun valitaan testipitoisuuksien sopivaa vaihteluväliä.
the formulation of the test chemical and the additives should be specified if not the pure chemical is tested;
ECx-lähestymistavassa tarvitaan vähintään viisi pitoisuutta ja kahdeksan rinnakkaisnäytettä kutakin pitoisuutta kohti.
identification of species and supplier of the test organisms, description of the breeding conditions and age range of test organisms;
Jokaisen pitoisuuden yhteydessä on käytettävä kahta kasvatushäkkiä (A) ja (B).
detailed specification if natural soil is used (origin, history, particle size distribution, pH, organic matter content);
Kahdeksan rinnakkaisnäytettä jaetaan kahteen ryhmään, joissa kummassakin on neljä rinnakkaisnäytettä, ja nämä kaksi ryhmää vastaavat kumpaakin kasvatushäkkiä.
water holding capacity of the soil;
Rinnakkaisnäytteet on tarpeen yhdistää tällä tavalla siksi, että häkissä tarvitaan tietty määrä sääskiä vankkojen lisääntymisarviointien tekemiseksi.
description of the technique used to apply the test chemical to the soil;
Toisessa sukupolvessa on kuitenkin taas kahdeksan rinnakkaisnäytettä, jotka ovat saaneet alkunsa kasvatushäkkien altistuneista populaatioista.
pH and water content of the soil at the start and end of the test (control and each treatment);
Pitoisuuksien välinen kerroin ei saa olla yli kaksi (poikkeus voidaan tehdä, jos annosvastekäyrä on loiva).
detailed description of the extraction method and extraction efficiency;
Käsittelyssä käytettävien rinnakkaisnäytteiden määrää voidaan vähentää kuuteen (kolme kumpaakin kasvatushäkkiä kohti), jos eri vasteita aiheuttavien testipitoisuuksien määrää lisätään.
number of adults and their mortality (%) in each test vessel at the end of the test;
Jos rinnakkaisnäytteiden määrää lisätään tai testipitoisuuden välejä pienennetään, ECX-testin luottamusväli yleensä kapenee.
a description of obvious physiological or pathological symptoms or distinct changes in behaviour;
NOEC-arvon estimointiin suositeltava testisuunnitelma
the NOEC/LOEC values, LCx for mortality and ECx for reproduction (mostly LC50, LC10, EC50, and EC10) together with 95 % confidence intervals.
NOEC-lähestymistavassa on käytettävä viittä testipitoisuutta ja vähintään kahdeksaa rinnakkaisnäytettä (neljä kumpaakin kasvatushäkkiä, A:ta ja B:tä, kohti), ja pitoisuuksien välinen kerroin saa olla enintään kaksi.
A graph of the fitted model used for calculation, its function equation and its parameters (See (9));
Rinnakkaisnäytteiden määrän on oltava riittävän suuri, jotta tilastollinen voima on riittävä ja kontrollista havaitaan 20 prosentin ero viiden prosentin merkitsevyystasolla (α = 0,05).
all information and observations helpful for the interpretation of the results;
Kehittymisnopeuden, hedelmällisyyden ja lisääntymiskyvyn osalta varianssianalyysi on yleensä tarkoituksenmukainen, ja sen jälkeen voi tehdä Dunnettin testin tai Williamsin testin (22–25).
power of the actual test if hypothesis testing is done (9);
Kuoriutumisasteen ja sukupuolten välisen suhteen osalta Cochran-Armitagen testi, Fisherin tarkka testi (Bonferroni-korjauksella) tai Mantel-Haentzalin testi voivat olla sopivia.
for NOEC, when estimated, the minimal detectable difference.
Veden osalta pitoisuudeksi ehdotetaan 100 mg/l ja sedimentin osalta 1000 mg/kg (kuivapaino).
Wiles JA and Krogh PH (1998) Testing with the collembolans I. viridis, F. candida and F. fimetaria.
Yleensä vähintään kahdeksan rinnakkaisnäytettä sekä käsittelystä että kontrollista on tarpeen.
In Handbook of soil invertebrate toxicity tests (ed.
On osoitettava, että tilastollinen voima on riittävä, jotta kontrollista havaitaan 20 prosentin ero viiden prosentin merkitsevyystasolla (α = 0,05).
H Løkke and CAM Van Gestel), pp. 131-156.
Jos vaste on metrinen (kehittymisnopeus), t-testi on soveltuva tilastollinen menetelmä, jos aineisto täyttää tämän testin vaatimukset (normaalisuus, homogeeniset vaihtelut).
Chapter C.36 of this Annex, Predatory mite (Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer) reproduction test in soil.
Jos nämä vaatimukset eivät täyty, voidaan käyttää t-testiä, jossa varianssit ovat heterogeenisia, tai parametritonta testiä, kuten Wilcoxon-Mann-Whitneyn testiä.
Toxicity testing with the collembolans Folsomia fimetaria and Folsomia candida and the results of a ringtest.
Fisherin tarkka testi soveltuu kuoriutumisasteeseen.
Danish Environmental Protection Agency, Environmental Project No. 1256, pp. 66.
Vesi-sedimenttijärjestelmän valmistelu (testikemikaalin lisääminen veteen)
In Soil Zoology (Kevan D.K. McE., Ed).
a. Jokaiseen testiastiaan ja kiteytysmaljaan laitetaan vähintään 1,5 cm:n (kiteytysmaljaan voi laittaa hieman vähemmänkin) ja enintään 3 cm:n kerros synteettistä sedimenttiä (ks. 13–14 kohta ja lisäys 3).
Butterworths, London, pp. 412-416
Vettä (ks. 15 kohta) lisätään siten, että sedimenttikerroksen syvyyden ja veden syvyyden suhde on enintään 1:4.
Chemical is a substance or a mixture.
Testiastioiden valmistelun jälkeen sedimentti-vesijärjestelmän tulee antaa asettua kevyesti ilmastettuna noin seitsemän päivän ajan ennen ensimmäisen tai toisen sukupolven ensimmäisen kehitysvaiheen munatoukkien lisäämistä (ks. 14 kohta ja lisäys 3).
Main actions and timetable for performing a collembolan test
Kiteytysmaljojen sedimentti-vesijärjestelmää ei ilmasteta testin aikana, koska niiden ei tarvitse tukea toukkien elossapysymistä (munat on jo kerätty ennen niiden kuoriutumista).
Time (day)
Sedimentin voi peittää muovikiekolla, kun testivettä lisätään vesipatsaaseen, jotta sedimentin ainesosien erottuminen ja hienon materiaalin resuspensio voidaan välttää, mutta kiekko on poistettava heti tämän jälkeen.
Action
Myös muut välineet voivat olla sopivia.
23 to – 26
Myös muut välineet voivat olla sopivia.
Preparation of synchronous F. fimetaria culture
b Sedimentit, jotka on valmisteltu 16.b kohdan mukaisesti ja joihin on lisätty testikemikaalia, laitetaan astioihin ja kiteytysmaljaan, ja niiden päälle lisätään vettä siten, että sedimentin ja veden tilavuuden suhde on 1:4.
Check pH of artificial soil and adjust accordingly
Sedimenttikerroksen syvyyden tulisi olla 1,5–3 cm (kiteytysmaljassa se voi olla vähän matalampi).
9 to – 12
Sedimentin voi peittää muovikiekolla, kun testivettä lisätään vesipatsaaseen, jotta sedimentin ainesosien erottuminen ja hienon materiaalin resuspensio voidaan välttää, mutta kiekko on poistettava heti tämän jälkeen.
Preparation of synchronous F. candida culture
Kun sedimenttiin on lisätty testikemikaali ja sedimentin päälle on lisätty vesi, testikemikaalin on hyvä antaa erottua sedimentistä vesifaasiin (4) (5)(7) (18).
2 to – 7
Sopiva tasapainottumisaika on sedimentti- ja kemikaalikohtaista, ja se voi vaihdella tunneista päiviin; harvinaisissa tapauksissa se voi olla jopa viisi viikkoa.
Pre-moist soil
Koska monet kemikaalit voisivat hajota tässä ajassa, tasapainotilaa ei jäädä odottamaan, vaan tasapainottumisajaksi suositellaan 48:aa tuntia.
Distribute juveniles into batches
Jos kuitenkin tiedetään, että sedimentissä olevan kemikaalin hajoamisen puoliintumisaika on pitkä, tasapainottumisaikaa voi pidentää.
Prepare stock solutions and apply test chemical if solvent required
Tämän tasapainottumisajan jälkeen testikemikaalin pitoisuus on mitattava sedimentin yläpuolisessa vedessä, huokosvedessä ja sedimentissä vähintään suurimman pitoisuuden ja yhden pienemmän pitoisuuden osalta (ks. 38 kohta).
stock solutions and apply test chemical if solid chemical, water soluble or surface application is required.
Näiden testikemikaalin analyyttisten määritysten perusteella voidaan laskea massatase, ja tulokset voidaan ilmoittaa mitattujen pitoisuuksien pohjalta.
Measure soil pH and weigh the containers.
Testiastiat on peitettävä (esimerkiksi lasilevyillä).
Add food.
Tutkimuksen aikana vettä voidaan tarvittaessa lisätä alkuperäiseen tilavuuteen saakka haihtumisen kompensoimiseksi.
Introduce collembolans.
Käytä tähän tarkoitukseen tislattua tai deionisoitua vettä, jotta suoloja ei keräydy.
Range-finding test F. fimetaria:
Kasvatushäkeissä olevia kiteytysmaljoja ei peitetä, ja testijakson aikaista veden haihtumista saa kompensoida lisäämällä vettä, mutta se ei ole välttämätöntä, koska munaryppäät ovat kosketuksissa veden kanssa vain noin yhden päivän ajan ja koska maljoja käytetään testissä vain lyhyen aikaa.
Definitive tests:
Neljä tai viisi päivää ennen ensimmäisen sukupolven ensimmäisen kehitysvaiheen munatoukkien lisäämistä viljelmästä on poistettava munamassat, ja ne tulee laittaa pieniin astioihin kasvatusalustalle.
Measure moisture content and replenish water and add 2-10 mg yeast
Alustana voidaan käyttää varastoliuoksesta saatua kypsynyttä alustaa tai vasta valmistettua alustaa.
Definitive F. fimetaria test:
Kasvatusalustalle on lisättävä pieni määrä ruokaa, esimerkiksi muutama pisara filtraattia, joka on tehty hiutalemaisen kalanruoan hienoksi jauhetusta suspensiosta (ks. lisäys 2).
Range-finding F. candida:
Käytä ainoastaan vastamunittuja munamassoja.
Definitive F. candida test:
Tavallisesti toukat alkavat kuoriutua muutaman päivän kuluttua muninnasta (C. riparius kuoriutuu 2–3 päivässä, kun lämpötila on 20 °C, ja C. dilutus 1–4 päivässä, kun lämpötila on 23 °C; C. yoshimatsui tarvitsee 25 °C:n lämpötilan).
Guidance on rearing and synchronisation of F. fimetaria and F. candida
Toukat kasvavat neljässä vaiheessa, joista jokainen kestää 4–8 päivää.
The time and durations given in this guidance should be checked for each specific collembolan strain to ensure that timing will allow for sufficient synchronised juveniles.
Testissä käytetään ensimmäisen kehitysvaiheen munatoukkia (enintään kaksi vrk kuoriutumisen jälkeen).
Basically, the incidence of oviposition after the adults are transferred to fresh substrate and egg hatching determines the appropriate day for egg collection and collection of synchronous juveniles.
Ensimmäisen kehitysvaiheen munatoukat voidaan tarkastaa käyttämällä pääkotelon leveyttä (7).
It is recommended to have a permanent stock culture consisting of e.g. 50 containers/Petri dishes.
Kaksikymmentä ensimmäisen kehitysvaiheen munatoukkaa ensimmäisestä sukupolvesta jaetaan satunnaisesti kuhunkin testiastiaan, joka sisältää sedimentti-vesijärjestelmän, käyttämällä tylppäkärkistä pipettiä.
The stock culture should be kept in a good feeding condition by weekly feeding, watering and removal of old food and carcasses.
Veden ilmastus keskeytetään siksi aikaa, kun toukkia lisätään testiastioihin, ja se tulee pitää keskeytettynä 24 tunnin ajan toukkien lisäämisen jälkeen (ks. 32 kohta).
Too few collembolans on the substrate may result in inhibition by more fungal growth.
Käytettävän testisuunnitelman (ks. 19 ja 20 kohta) mukaan kutakin pitoisuutta kohti käytettävien toukkien määrä on ECX-tutkimuksessa vähintään 120 (kuusi rinnakkaisnäytettä pitoisuutta kohti) ja NOEC-tutkimuksessa 160 (kahdeksan rinnakkaisnäytettä pitoisuutta kohti).
If the stock culture is used for egg production too often, the culture may get fatigue.
Tutkimuksessa, jossa sedimenttiin on lisätty testikemikaalia, altistus alkaa toukkien lisäämisellä.
Signs of fatigue are dead adults and mould on the substrate.
Testikemikaalin lisääminen sedimentin yläpuoliseen veteen
The remaining eggs from the production of synchronous animals can be used to rejuvenate the culture.
Vuorokauden (24 h) kuluttua ensimmäisen sukupolven ensimmäisessä kehitysvaiheessa olevien munatoukkien lisäämisestä testikemikaali lisätään sedimentin yläpuoliseen vesipatsaaseen, ja kevyt ilmastus aloitetaan uudestaan (ks. testisuunnitelman mahdolliset muutokset 7 kohdasta).
In a synchronous culture of F. fimetaria, males are distinguished from females primarily by size.
Pieni määrä testikemikaalia sisältävää varastoliuosta lisätään pipetillä vedenpinnan alle.
Males are clearly smaller than females, and the walking speed of the males is faster than for females.
Sen jälkeen sedimentin päällä oleva vesi sekoitetaan varoen häiritsemästä sedimenttiä.
Correct selection of the gender requires little practice and can be confirmed by microscopic inspection of the genital area (13).
Tutkimuksessa, jossa kemikaali lisätään veteen, altistus aloitetaan, kun kemikaali on lisätty veteen (ts. yhden päivän kuluttua toukkien lisäämisestä).
Preparation of culturing substrate
Ensimmäisen sukupolven kuoriutuneet sääsket kerätään testiastioista vähintään kerran mutta mieluiten kahdesti päivässä (ks. kohta 36) käyttämällä imulaitetta, imuria tai vastaavaa laitetta (ks. lisäys 5).
The culturing substrate is plaster of Paris (calcium sulphate) with activated charcoal.
Keräämisessä on oltava varovainen, etteivät aikuiset sääsket vaurioidu.
This provides a moist substrate, with the function of the charcoal being to absorb waste gases and excreta (14) (15).
Yhden käsittelyn neljästä testiastiasta kerätyt sääsket laitetaan siihen kasvatushäkkiin, jossa ne olivat aiemmin olleet.
Different forms of charcoal may be used to facilitate observations of the Collembola.
Kun ensimmäinen sääski (koiras) kuoriutuu, kiteytysmaljoihin laitetaan pipetillä pieni määrä testikemikaalin varastoliuosta veden pinnan alle (tutkimus, jossa testikemikaalia lisätään veteen).
For example, powdered charcoal is used for F. candida and F. fimetaria (producing a black/grey plaster of Paris):
Kiteytysmaljan testikemikaalipitoisuus on nimellisesti sama kuin käsittelyastioissa, jotka kuuluvat kyseiseen kasvatushäkkiin.
Substrate constituents:
Tutkimuksessa, jossa testikemikaalia lisätään sedimenttiin, kiteytysmaljat valmistellaan suurin piirtein 11. päivänä altistuksen alkamisesta (ts. ensimmäisen sukupolven toukkien lisäämisestä), jotta ne voivat tasapainottua noin 48 tuntia ennen ensimmäisten munaryppäiden tuottamista.
20 ml of activated charcoal
Munaryppäät kerätään kiteytysmaljasta kasvatushäkkiin pinseteillä tai tylppäkärkisellä pipetillä.
200 ml of distilled water
Jokainen munarypäs asetetaan astiaan, joka sisältää siitä kiteytysmaljasta otettua kasvatusalustaa, josta rypäs kerättiin (esimerkiksi 12-kuoppaisen mikrolevyn kuoppaan, jossa on vähintään 2,5 ml alustaa).
200 ml of plaster of Paris
Munaryppäät sisältävät astiat peitetään kannella merkittävän haihtumisen estämiseksi.
50 g of activated pulverized charcoal
Munaryppäitä tarkkaillaan vähintään kuusi päivää niiden tuottamisen jälkeen, jotta ne voidaan luokitella joko hedelmöittyneiksi tai hedelmöittymättömiksi.
260-300 ml of distilled water
Toisen sukupolven osalta valitaan vähintään kolme mutta mieluiten kuusi hedelmöittynyttä munarypästä jokaisesta kasvatushäkistä ja myös hieman ruokaa, jotta munat pystyvät kuoriutumaan.
400 g plaster of Paris.
Nämä munaryppäät olisi täytynyt tuottaa muninnan ollessa huipussaan, mikä tapahtuu kontrollieläimillä yleensä testipäivänä 19.
The substrate mixture is allowed to set before use.
Ihannetapauksessa kaikkien käsittelyjen toisen sukupolven altistus aloitetaan samana päivänä, mutta koska kemikaali vaikuttaa toukkien kehitykseen, se ei ehkä ole aina mahdollista.
Breeding
Tällöin altistus suuremmilla pitoisuuksilla voidaan aloittaa myöhemmin kuin käsittely pienemmillä pitoisuuksilla ja (liuotin)kontrollin tarkkailu.