natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Two sets of reaction mixtures should be prepared according to the test designs for ECx or NOEC described in paragraph 41, but additionally, ATU should be added to each mixture of one set at a final concentration of 11,6 mg/l, which has been shown to inhibit nitrification completely in sludge with suspended solids concentrations of up to 3000 mg/l (4).
Tulosten tulkinta
The oxygen uptake rates should be measured after the exposure period;
ECx-arvot, mukaan lukien niitä koskevat parametrin 95 prosentin luottamusvälit, lasketaan sopivien tilastollisten menetelmien avulla (esimerkiksi tilastollinen koestus, logistinen funktio tai Weibullin funktio, viritetty Spearmanin ja Kärberin menetelmä tai yksinkertainen interpolointi (11)).
these direct values represent heterotrophic respiration only, and the differences between these and the corresponding total respiration rates represent nitrification.
ECx-arvo saadaan lisäämällä yhtälöön arvo, joka vastaa x:ää prosenttia kontrollin keskiarvosta.
The various degrees of inhibition are then calculated.
Jos halutaan laskea EC50 tai jokin muu ECx-arvo, käsittelyä edeltävälle keskiarvolle (x) olisi tehtävä regressioanalyysi.
Measurements
NOEC-estimointi
After the exposure period(s) a sample from the first aeration vessel should be transferred to the oxygen electrode cell (Fig.
Jos tilastollisella analyysilla on tarkoitus määrittää NOEC-arvo, astiakohtaiset tilastot (yksittäisiä astioita pidetään rinnakkaisnäytteinä) ovat tarpeen.
1 of Appendix 2) and the concentration of dissolved oxygen should immediately be measured.
Tässä käytetään sopivia tilastollisia menetelmiä, jotka perustuvat OECD:n asiakirjaan Document on Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data:
If a multiple electrode system is available, then the measurements may be made simultaneously.
Yleensä testikemikaalin haitallisia vaikutuksia verrattuna kontrolliin tutkitaan käyttämällä yksisuuntaista (pienempää) hypoteesitestausta, jossa p ≤ 0,05.
Stirring (by means of a covered magnet) is essential at the same rate as when the electrode is calibrated to ensure that the probe responds with minimal delay to changing oxygen concentrations, and to allow regular and reproducible oxygen measurements in the measuring vessel.
Testiraporttiin on sisällytettävä seuraavat tiedot:
Usually, the self-stirring probe system of some oxygen electrodes is adequate.
yleisnimi, kemiallinen nimi, CAS-numero, puhtaus;
The cell should be rinsed with water between measurements.
testikemikaalin fysikaalis-kemialliset ominaisuudet (esimerkiksi log Kow, vesiliukoisuus, höyrynpaine, Henryn vakio (H) sekä mahdolliset tiedot testikemikaalin kulkeutumisesta, esimerkiksi adsorboituminen aktiivilietteeseen);
Alternatively, the sample can be used to fill a BOD bottle (Fig.
Testijärjestelmä
2 of Appendix 3) fitted with a magnetic stirrer.
hankintapaikka, jäteveden käsittelylaitoksen toimintaolosuhteet ja sille saapuva tulovesi, pitoisuus, aktiivilietteen esikäsittely ja hoitotapa;
An oxygen probe with a sleeve adaptor should then be inserted into the neck of the bottle and the magnetic stirrer should be started.
testilämpötila, pH testin aikana sekä altistusvaiheen tai -vaiheiden kesto;
In both cases the concentration of dissolved oxygen should continuously be measured and recorded for a period, usually 5 to 10 minutes or until the oxygen concentration falls below 2 mg/l.
Tulokset
For some purposes, it may be necessary to measure the concentration of the test chemical in the test vessels.
sekä mahdollisuuksien mukaan 95 prosentin luottamusvälit, mahdollisesti EC20 ja EC80;
It should be noted that if stock solutions of:
mahdollisesti NOEC sekä käytetyt tilastolliset menetelmät, jos EC50:n määrittäminen ei ole mahdollista;
poorly water soluble substances,
kokonaisinhibitiota sekä tarvittaessa heterotrofista ja nitrifikaatioinhibitiota koskevat tulokset;
mixtures with components with different water solubility, or
abioottinen hapen yhteytys fysikaalis-kemiallisessa kontrollissa (jos käytössä);
substances with good water solubility, but where the concentration of the stock solution is near the maximum water solubility,
vertailukemikaalin nimi ja sillä saadut tulokset;
are used, the dissolved fraction is unknown, and the true concentration of the test chemical that is transferred into the test vessels is not known.
kaikki tarkkailutulokset ja tuloksiin mahdollisesti vaikuttavat poikkeamat standarditestausmenetelmästä.
In order to characterise the exposure, an analytical estimation of the test chemical concentrations in the test vessels is necessary.
Current approaches in the statistical analysis of ecotoxicity data: A guidance to application.
To simplify matters, analytical estimation should be performed before the addition of the inoculum.
54, ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
Due to the fact that only dissolved fractions will be transferred into test vessels, measured concentrations may be very low.
Tässä testimenetelmässä sovelletaan seuraavia määritelmiä:
To avoid time-consuming and expensive analytics, it is recommended to simply weigh the test chemical directly into the test vessels and to refer to the initial weighed nominal concentration for subsequent calculations.
aine tai seos.
A differentiation between dissolved, undissolved or adsorbed fractions of the test chemical is not necessary because all these fractions appear under real conditions in a waste water treatment plant likewise, and these fractions may vary depending on the composition of the sewage.
Testikemikaali
The aim of the test method is to estimate a non inhibitory concentration realistically and it is not suitable to investigate in detail which fractions make a contribution to the inhibition of the activated sludge organisms.
ECx (Effect concentration for x % effect = vaikuttava pitoisuus, joka aiheuttaa x prosenttia muutoksia) on pitoisuus, joka aiheuttaa x prosentin suuruisen vaikutuksen testiorganismeihin tietyn altistusjakson aikana kontrolliin verrattuna.
Finally, adsorptive substances should be also weighed directly into the test vessels;
Esimerkiksi EC50-arvo on pitoisuus, jonka on arvioitu aiheuttavan vaikutuksen testiominaisuuteen 50 prosentilla altistuneesta populaatiosta tietyn altistusjakson aikana.
and the vessels should be silanised in order to minimise losses through adsorption.
NOEC (no observed effect concentration = pitoisuus, joka ei aiheuta havaittavaa vaikutusta) on se testikemikaalin pitoisuus, josta ei aiheudu vaikutuksia.
Calculation of oxygen uptake rates
Tässä testissä NOEC-arvoa vastaavalla pitoisuudella ei ole tilastollisesti merkitsevää vaikutusta (p < 0,05) tietyn altistusjakson aikana kontrolliin verrattuna.
The oxygen uptake rates should be calculated from the mean of the measured values, e.g. from the linear part of the graphs of oxygen concentration versus time, limiting the calculations to oxygen concentrations between 2,0 mg/l and 7,0 mg/l, since higher and lower concentrations may themselves influence rates of consumption.
Kuva 1:
Excursion into concentration bands below or above these values is occasionally unavoidable and necessary, for example, when respiration is heavily suppressed and consequently very slow or if a particular activated sludge respires very quickly.
Esimerkkejä mittausyksiköstä
This is acceptable provided the extended sections of the uptake graph are straight and their gradients do not change as they pass through the 2,0 mg/l or 7,0 mg/l O2 boundaries.
Selitykset:
Any curved sections of the graph indicate that the measurement system is stabilising or the uptake rate is changing and should not be used for the calculation of respiration rates.
1 Aktiiviliete
The oxygen uptake rate should be expressed in milligrammes per litre per hour (mg/lh) or milligrammes per gramme dry sludge per hour (mg/gh).
2 Synteettinen ravinneliuos
The oxygen consumption rate, R, in mg/lh, may be calculated or interpolated from the linear part of the recorded oxygen decrease graph according to Equation 1:
3 Testikemikaali
is the oxygen concentration at the beginning of the selected section of the linear phase (mg/l);
4 Ilmaa
is the time interval between these two measurements (min.).
6 Magneettisekoitin
The specific respiration rate (Rs) is expressed as the amount of oxygen consumed per g dry weight of sludge per hour (mg/gh) according to Equation 2:
7 Hapenmittauskenno
Rs= R/SS
8 Happielektrodi
where SS is the concentration of suspended solids in the test mixture (g/l).
9 Hapenmittausinstrumentti
The different indices of R which may be combined are:
10 Piirturi
S specific rate
Kuva 2:
T total respiration rate
Esimerkki mittausyksiköstä BOD-pulloa käytettäessä
N rate due to nitrification respiration
1 Testiastia
H rate due to heterotrophic respiration
2 Happielektrodi
A rate due to abiotic processes
3 Hapenmittausinstrumentti
B rate based on blank assays (mean)
Kuva 3:
Calculation of oxygen uptake rate due to nitrification
Esimerkki inhibitiokäyristä
The relationship between total respiration (RT), nitrification respiration (RN) and heterotrophic respiration (RH) is given by Equation 3:
X 3,5-dikloorifenolin pitoisuus (mg/l)
is the rate of oxygen uptake due to nitrification (mg/lh); R T
Y inhibitio ( %)
is the measured rate of oxygen uptake by the blank control (no ATU; FB) (mg/lh).
heterotrofisen soluhengityksen inhibitio nitrifioivaa lietettä käytettäessä
is the measured rate of oxygen uptake of the blank control with added ATU (FN) (mg/lh).
nitrifikaation inhibitio nitrifioivaa lietettä käytettäessä.
This relationship is valid for blank values (RNB, RTB, RHB), abiotic controls (RNA, RTA, RHA) and assays with test chemicals (RNS, RTS, RHS) (mg/gh).
Korvataan luku C.26 seuraavasti:
Specific respiration rates are calculated from:
26 LIMASKOJEN (LEMNA-LAJIEN) KASVUNESTYMISTESTI
RHS= RH/SS
Tämä testimenetelmä vastaa OECD:n testiohjetta (TG) nro 221 (2006).
If RN is insignificant (e.g. < 5 % of RT in blank controls) in a preliminary test, it may be assumed that the heterotrophic oxygen uptake equals the total uptake and that no nitrification is occurring.
Tällä testimenetelmällä arvioidaan kemikaalien myrkyllisyyttä Lemna-sukua (limaskat) oleville makean veden kasveille.
An alternative source of activated sludge would be needed if the tests were to consider effects on heterotrophic and nitrifying micro-organisms.
Menetelmä perustuu olemassa oleviin menetelmiin (1), (2), (3), (4), (5), (6), mutta niitä on muutettu viimeaikaisten tutkimustulosten ja keskeisiä kysymyksiä koskevien konsultointien pohjalta.
A definitive test is performed if there is evidence of suppressed oxygen uptake rates with different test chemical concentrations.
Testimenetelmä on validoitu kansainvälisellä yhteistutkimuksella (ring test) (7).
Calculation of percentage of inhibition
Testimenetelmässä kuvataan myrkyllisyyden testausta, jossa käytetään Lemna gibba- ja Lemna minor -lajeja.
The percentage inhibition, IT, of total oxygen consumption at each concentration of test chemical, is given by Equation 7:
Kumpaakin lajia on tutkittu laajalti ja käytetty edellä mainituissa standardeissa.
Similarly, the percentage inhibition of heterotrophic oxygen uptake, IH, at each concentration of test chemical, is given by Equation 8:
Lemna-suvun lajien taksonomia on hankala, koska fenotyyppejä on monta.
Finally, the inhibition of oxygen uptake due to nitrification, IN, at each concentration, is given by Equation 9:
Vaikka Lemna-suvussa voi esiintyä geneettistä vaihtelevuutta vasteessa myrkyllisiin aineisiin, vaihtelevuuden syistä ei toistaiseksi ole saatavilla riittävästi tietoja, joiden pohjalta voitaisiin suositella tietyn kloonin käyttöä tässä testimenetelmässä.
Inhibition curves are plotted for each aeration period of 3 h or additionally after 30 min.
Testimenetelmässä kuvataan yksityiskohtaisesti testausta, jossa testiliuos vaihtuu (semistaattinen ja läpivirtausmenetelmä) tai ei vaihdu (staattinen menetelmä).
The concentration of test chemical which inhibits the oxygen uptake by 50 % (EC50) should be calculated or interpolated from the graph.
Testin tavoitteista ja sääntelyvaatimuksista riippuen on suositeltavaa harkita semistaattisten tai läpivirtausmenetelmien käyttöä muun muassa sellaisten kemikaalien testauksessa, jotka häviävät nopeasti liuoksesta haihtumisen, valohajoamisen, saostumisen tai biohajoavuuden vuoksi.
If suitable data are available, the 95 % confidence limits of the EC50, the slope of the curve, and suitable values to mark the beginning of inhibition (for example, EC10 or EC20) and the end of the inhibition range (for example, EC80 or EC90) may be calculated or interpolated.
Tästä annetaan tarkempia ohjeita kirjallisuusviitteessä (8).
It should be noted that in view of the variability often observed in the results, it may in many cases be sufficient to express the results additionally in order of magnitude, for example:
Lemna-sukuun kuuluvien eksponentiaalisesti kasvavien kasviviljelmien annetaan kasvaa seitsemän päivän ajan monokulttuureina testikemikaalin eri pitoisuuksissa.
1 mg/l to 10 mg/l
Testin tavoitteena on kvantifioida testikemikaaliin liittyvät vaikutukset kasvien kasvuun tämän ajan kuluessa tiettyjen mittausmuuttujien arvioinnin perusteella.
10 mg/l to 100 mg/l
Ensisijaisena mittausmuuttujana on versojen lukumäärä.
> 100mg/l
Lisäksi mitataan ainakin yhtä muuta mittausmuuttujaa (versojen kokonaispinta-alaa, kuivapainoa tai tuorepainoa), koska eräät kemikaalit voivat vaikuttaa huomattavasti enemmän muihin mittausmuuttujiin kuin versojen lukumäärään.
Interpretation of results
Testikemikaaliin liittyvien vaikutusten kvantifioimiseksi testiliuoksissa tapahtunutta kasvua verrataan kontrolliryhmässä tapahtuneeseen kasvuun, minkä jälkeen määritetään pitoisuus, jossa kasvu estyy ennalta määrätyn prosenttimäärän x verran (esimerkiksi 50 prosenttia).
ECx-values including their associated lower and upper 95 % confidence limits for the parameter are calculated using appropriate statistical methods (e.g. probit analysis, logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method or simple interpolation (11)).
Kyseinen pitoisuus ilmoitetaan ECx-arvona (esimerkiksi EC50).
An ECx is obtained by inserting a value corresponding to x % of the control mean into the equation found.
Testin loppupisteenä on kasvun estyminen, joka ilmenee mittausmuuttujan logaritmisesta kasvusta (keskimääräisestä spesifisestä kasvunopeudesta) altistusaikana.
To compute the EC50 or any other ECx, the per-treatment means (x) should be subjected to regression analysis.
Toinen testimenetelmässä käytetty vastemuuttuja on tuotos, jota voidaan tarvita joissakin maissa erityisten sääntelyvaatimusten täyttämiseksi.
NOEC estimation
Sillä tarkoitetaan altistusajan lopussa mitattua mittausmuuttujien arvoa, josta on vähennetty altistusajan alussa mitattu mittausmuuttujien arvo.
If a statistical analysis is intended to determine the NOEC, per-vessel statistics (individual vessels are considered as replicates) are necessary.
Käytettävissä on oltava analyysimenetelmä, jolla testiviljelyaineessa oleva testikemikaali voidaan kvantifioida riittävän herkästi.
Appropriate statistical methods should be used according to the OECD Document on Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data:
Testikemikaalia koskevia tietoja, joista voi olla hyötyä päätettäessä testiolosuhteista, ovat rakennekaava, puhtaus, vesiliukoisuus, stabiilius vedessä ja valossa, pKa, Kow, höyrynpaine ja biohajoavuus.
a Guidance to Application (11).
Vesiliukoisuutta ja höyrynpainetta voidaan käyttää laskettaessa Henryn vakiota, josta voidaan päätellä, onko todennäköistä, että testikemikaalia häviää merkittävästi testin aikana.
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed (smaller) hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Tämän perusteella voidaan päättää, vaativatko tällaiset häviöt erityistoimia.
The test report should include the following information:
Jos testikemikaalin liukoisuutta ja stabiiliutta koskevat tiedot ovat epäluotettavia, nämä ominaisuudet olisi arvioitava testiolosuhteissa, toisin sanoen siinä viljelyaineessa, lämpötilassa ja valaistuksessa, joita testissä käytetään.
common name, chemical name, CAS number, purity;
Jos on erityisen tärkeää säädellä testiviljelyaineen pH:ta, esimerkiksi testattaessa metalleja tai hydrolyyttisesti epästabiileja kemikaaleja, on suositeltavaa lisätä testiviljelyaineeseen puskuria (ks. 21 kohta).
physico-chemical properties of the test chemical (e.g. log Kow, water solubility, vapour pressure, Henry's constant (H) and possible information on the fate of the test chemical e.g. adsorption to activated sludge);
Kirjallisuusviitteessä (8) annetaan lisäohjeita sellaisten kemikaalien testauksesta, joiden fysikaalis-kemialliset ominaisuudet vaikeuttavat niiden testaamista.
Test system
Jotta testi olisi validi, versojen lukumäärän on kaksinkertaistuttava kontrolliviljelmässä alle 2,5 päivässä (60 tunnissa), mikä vastaa noin seitsenkertaista kasvua seitsemän päivän kuluessa, kun keskimääräinen spesifinen kasvunopeus on 0,275 päivää kohden.
source, conditions of operation of the wastewater treatment plant and influent it receives, concentration, pre-treatment and maintenance of the activated sludge;
Käytettäessä tässä testimenetelmässä kuvattuja testiliuoksia ja -olosuhteita tämä vaatimus voidaan täyttää käyttämällä staattista testausta (5).
test temperature, pH during the test and duration of the exposure phase(s);
Vaatimus voidaan oletettavasti täyttää myös sellaisissa testiolosuhteissa, joissa käytetään semistaattista tai läpivirtausmenetelmää.
Results
Kaksinkertaistumisajan laskemista käsitellään tarkemmin 49 kohdassa.
specific oxygen consumption of the controls (mg O2/(g sludge × h);
Testimenetelmä voidaan tarkistaa testaamalla vertailukemikaali (-kemikaalit), kuten 3,5-dikloorifenoli, jota on käytetty kansainvälisessä yhteistutkimuksessa (7).
all measured data, inhibition curve(s) and method for calculation of EC50;
Vertailukemikaali on suotavaa testata vähintään kahdesti vuodessa tai, jos testausta tehdään harvemmin, rinnakkain määritettäessä testikemikaalin myrkyllisyyttä.
and, if possible, 95 per cent confidence limits, possibly EC20, EC80;
Kaikkien välineiden, jotka joutuvat kosketuksiin testiliuosten kanssa, on oltava kokonaan lasia tai muuta kemiallisesti inerttiä materiaalia.
possibly NOEC and the used statistical methods, if the EC50 cannot be determined;
Viljelyyn ja testaukseen käytettävien lasiastioiden on oltava steriilejä, ja ne on puhdistettava kemiallisista epäpuhtauksista, jotka voivat päästä testiviljelyaineeseen.
results for total, and if appropriate, heterotrophic and nitrification inhibition;
Koeastioiden on oltava niin tilavia, että eri kolonioiden versot voivat kasvaa kontrolliastioissa peittämättä toisiaan testin lopussa.
abiotic oxygen uptake in the physico-chemical control (if used);
Ei ole haitaksi, vaikka juuret ulottuvat testiastioiden pohjaan, mutta on suositeltavaa, että kaikki koeastiat ovat syvyydeltään vähintään 20 mm ja tilavuudeltaan vähintään 100 ml.
name of the reference chemical and results with this chemical;
Koeastioiden valinnalla ei ole muuten ratkaisevaa merkitystä, jos nämä vaatimukset täyttyvät.
all observations and deviations from the standard procedure, which could have influenced the result.
Sopivan kokoiset dekantterilasit, kiteytysmaljat ja lasiset petrimaljat ovat kaikki osoittautuneet käyttökelpoisiksi.
Current approaches in the statistical analysis of ecotoxicity data:
Haihtumisen ja tahattoman kontaminaation minimoimiseksi koeastiat on peitettävä, mutta samalla on huolehdittava riittävästä ilmanvaihdosta.
a guidance to application, Series on testing and assessment No. 54, ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
Koeastiat ja varsinkaan niiden sulkimet eivät saa varjostaa tai muuttaa valon spektriominaisuuksia.
The following definitions are applicable to this test method.
Viljelmiä ja koeastioita ei saa säilyttää toistensa kanssa.
Chemical means a substance or a mixture.
Sen vuoksi on paras käyttää erillisiä ilmastoituja kasvatuskaappeja, inkubaattoreita tai huoneita.
ECx (Effect concentration for x % effect) is the concentration that causes an x % of an effect on test organisms within a given exposure period when compared with a control.
Valaistuksen ja lämpötilan on oltava säädettävissä, ja ne on pidettävä tasaisina (ks. 35–36 kohdat).
For example, an EC50 is a concentration estimated to cause an effect on a test end point in 50 % of an exposed population over a defined exposure period.
Koe-eliö
NOEC (no observed effect concentration) is the test chemical concentration at which no effect is observed.
Testissä käytetään Lemna gibba- tai Lemna minor -lajia.
In this test, the concentration corresponding to the NOEC, has no statistically significant effect (p < 0,05) within a given exposure period when compared with the control.
Myrkyllisyyden testauksessa käytettyjä limaskalajeja kuvataan lyhyesti lisäyksessä 2.
Fig.
Kasvimateriaali voidaan hankkia kantakokoelmasta, toisesta laboratoriosta tai luonnosta.
1:
Jos kasvit kerätään luonnosta, niitä on viljeltävä testissä käytettävässä viljelyaineessa vähintään kahdeksan viikkoa ennen käyttöä.
Examples for measuring unit
Paikoissa, joista alkuviljelmien kasvit kerätään, ei saa olla ilmeisiä kontaminaatiolähteitä.
Key:
Jos kasvit hankitaan toisesta laboratoriosta tai kantakokoelmasta, niitä on viljeltävä vastaavalla tavalla kolmen viikon ajan.
1 activated sludge
Kasvimateriaalin lähde sekä testauksessa käytettävät lajit ja klooni (jos tiedossa) on aina ilmoitettava.
2 synthetic medium
Testissä on käytettävä monokulttuureita, joissa ei ole muita organismeja, kuten leviä tai alkueläimiä, näkyvinä epäpuhtauksina.
3 test chemical
L. minor -lajin terveet kasvit ovat kolonioina, joissa on 2–5 versoa, kun taas L. gibba -lajin terveissä kolonioissa voi olla jopa seitsemän versoa.
4 air
Testissä käytettävät kasvit on valittava huolellisesti, koska niiden laatu ja yhtenäisyys vaikuttavat merkittävästi testin tulokseen.
5 mixing vessel
Testissä on käytettävä nuoria, nopeasti kasvavia kasveja, joissa ei ole näkyviä vaurioita tai värimuutoksia (kloroosia).
6 magnetic stirrer
Hyvälaatuisen viljelmän tunnistaa siitä, että siinä esiintyy runsaasti vähintään kahdesta versosta koostuvia kolonioita.
7 oxygen measuring cell
Jos viljelmässä on monia yksittäisiä versoja, se on merkki ympäristörasituksesta, kuten ravinteiden puutteesta, eikä testissä saa käyttää tällaisista viljelmistä peräisin olevaa kasvimateriaalia.
8 oxygen electrode
Viljely
9 oxygen measuring instrument
Viljelmien ylläpidon helpottamiseksi (esimerkiksi silloin, kun Lemna-testejä ei aiota tehdä tiettynä aikana) niitä voidaan säilyttää normaalia heikommassa valaistuksessa ja alhaisemmassa lämpötilassa (4–10 °C).
10 recorder
Viljelyä käsitellään tarkemmin lisäyksessä 3.
Fig.
Jos viljelmässä näkyy selviä merkkejä levien ja muiden eliöiden aiheuttamasta kontaminaatiosta, Lemna-versoista on mahdollisesti otettava osanäyte, jolle tehdään pintasterilointi, jonka jälkeen se siirretään tuoreeseen viljelyaineeseen (ks. lisäys 3).
2:
Jäljelle jäävä kontaminoitunut viljelmä on heitettävä pois.
Example of measuring unit, using a BOD bottle
Riittävä määrä kolonioita siirretään aseptisesti vähintään seitsemän päivää ennen testausta tuoreeseen steriiliin viljelyaineeseen, ja kolonioita viljellään 7–10 päivän ajan testiolosuhteissa.
1 Test vessel
Testiviljelyaine
2 oxygen electrode
Lemna minor- ja Lemna gibba -lajeja varten suositetaan erilaisia viljelyaineita, joita kuvataan jäljempänä.
3 oxygen measuring instrument
On syytä harkita huolellisesti pH-puskurin lisäämistä testiviljelyaineeseen (MOPS (4-morfoliinipropaanisulfonihappo, CAS-numero: 1132-61-2) L. minor -lajin viljelyaineeseen ja NaHCO3 L. gibba -lajin viljelyaineeseen), jos testiviljelyaineen epäillään voivan reagoida testikemikaalin kanssa ja vaikuttaa sen myrkyllisyyden ilmentymiseen.
Fig.
Steinbergin viljelyainetta (9) voidaan käyttää, jos validiteettivaatimukset täyttyvät.
3:
Ruotsalaisen standardin (SIS) mukaisen Lemna-viljelyaineen muunnosta suositetaan käytettäväksi testauksessa, jossa viljellään ja käytetään L. minor -lajia.
Example of inhibition curves
Tämän viljelyaineen koostumus esitetään lisäyksessä 4.