natgillin/translations-raw huggingface dataset:
A subsample of the unfortified control male plasma will be analysed in at least two duplicate wells.
Tämän jälkeen ne punnitaan lähimmän milligramman tarkkuudella.
The fortified sample also will be analysed in at least two duplicate wells.
Jokaiselta sammakonpoikaselta määritetään takajalan pituus, kuonon ja peräaukon välinen pituus sekä kehitysvaihe (kaksiokulaarista dissektiomikroskooppia käyttäen).
The mean quantity of vitellogenin in the two unfortified control male plasma samples will be added to the calculated quantity of vitellogenin added to fortification the samples to determine an expected concentration.
Päivänä 21 tehtävät mittaukset (testin päätös)
The ratio of this expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Testin päättyessä (päivänä 21) loput sammakonpoikaset otetaan pois testisäiliöistä ja lopetetaan inhimillisesti liuoksessa, joka sisältää 150–200 mg/l esimerkiksi MS-222:ta; liuos on puskuroitava asianmukaisesti natriumbikarbonaatilla edellä kuvatun mukaisesti.
Decision flowchart for the statistical analysis
Sammakonpoikaset huuhdellaan vedellä ja kuivataan imeyttämällä vesi paperiin.
Dunnett test on nested ANOVA
Tämän jälkeen ne punnitaan lähimmän milligramman tarkkuudella.
No Yes
Jokaiselta sammakonpoikaselta määritetään kehitysvaihe sekä mitataan kuonon ja peräaukon välinen pituus ja takajalan pituus.
>=4 reps per conc
Koska follikkelisolun korkeus määräytyy kehitysvaiheen mukaan (10), tarkoituksenmukaisin tapa ottaa näytteet histologisia analyyseja varten on käyttää sellaisia yksilöitä, joiden kehitysvaihe on sopiva, jos mahdollista.
<=3 reps per conc Dunn test Yes
Kehitysvaiheeltaan sopivien yksilöiden valitsemiseksi kaikkien toukkien kehitysvaihe on määritettävä ennen valintaa, ja sen jälkeen ne on käsiteltävä tiedonkeruuta ja säilöntää varten.
No Normalising transform?
Tämä on tarpeen, koska kehitykseen kuuluvan normaalien poikkeamien vuoksi kehitysvaiheet jakautuvat eri tavoin kussakin rinnakkaisnäytesäiliössä.
Tamhane-Dunnett test >=4 reps per conc
Histopatologisiin analyyseihin valittujen eläinten (n = 5 kustakin rinnakkaisnäytteestä) tulee vastata kontrollien (yhdistetyt rinnakkaisnäytteet) kehitysvaiheiden mediaania, jos mahdollista.
<=3 reps per conc Nested ANOVA not normal No Yes No
Jos rinnakkaisnäytesäiliöissä on enemmän kuin viisi sopivassa kehitysvaiheessa olevaa toukkaa, valitaan viisi toukkaa satunnaisotannalla.
Yes variance stabilising transformation
Jos rinnakkaisnäytesäiliöissä on vähemmän kuin viisi sopivassa kehitysvaiheessa olevaa toukkaa, näytteeksi otetaan satunnaisesti valittuja yksilöitä edellisestä tai seuraavasta kehitysvaiheesta, jotta näytteen koko olisi viisi toukkaa jokaisesta rinnakkaisnäytteestä.
Dunnett test Variances unequal
Päätös ottaa lisää toukkia joko edellisestä tai seuraavasta kehitysvaiheesta on tehtävä sen perusteella, miten kehitysvaiheiden arvioidaan kokonaisuudessaan jakautuvan kontrolliryhmissä ja kemikaalikäsittelyryhmissä.
Variances equal
Toisin sanoen jos kemikaalikäsittely aiheuttaa kehityksen hidastumista, muut toukat on otettava edellisestä kehitysvaiheesta.
Not monotone
Jos kemikaalikäsittely taas aiheuttaa kehityksen nopeutumista, muut toukat on otettava seuraavasta kehitysvaiheesta.
Stept-down Jonckheere or Williams' test
Jos sammakonpoikasen kehityksessä on vakavia muutoksia, jotka johtuvat testikemikaalilla käsittelystä, vaiheen jakautuminen kemikaalikäsittelyryhmissä ei välttämättä limity kontrolliryhmien kehitysvaiheen laskettuun mediaaniin.
Step-down trendtest on replicate means
Vain näissä tapauksissa valintamenettelyä on muutettava siten, että käytetään muuta vaihetta kuin kontrolliryhmän mediaanivaihetta, jotta kilpirauhasen histopatologiaa varten saadaan näytteeksi toukkia, joiden kehitysvaihe on sopiva.
Monotone
Lisäksi jos vaiheet ovat määrittämättömiä (esimerkiksi epäsynkronisia), jokaisesta rinnakkaisnäytteestä tulee valita satunnaisesti viisi sammakonpoikasta histologista analyysia varten.
Tamhane-Dunnett test on nested ANOVA
Jos näytteeksi valitaan toukkia, joiden kehitysvaihe ei vastaa kontrolliryhmän mediaanikehitysvaihetta, syy on ilmoitettava.
Dunn test on rep means
Biologisten ominaisuuksien määrittäminen
Dunn or Mann-Whitney test
Kahdenkymmenenyhden päivän mittaisen altistusvaiheen aikana ensisijaiset ominaisuudet mitataan päivinä 7 ja 21, mutta koe-eläimiä tulee silti havainnoida päivittäin.
Nested ANOVA normal
Taulukossa 3 on yhteenveto mitattavista ominaisuuksista ja vastaavista havainnointiajankohdista.
Rep means normally distributed
Tarkempia tietoja apikaalisten ominaisuuksien mittaamisen ja histologisten arviointien teknisistä menetelmistä on OECD:n ohjeasiakirjoissa (9).
Step-down Jonckheere test
AMA-tutkimuksen ensisijaisten ominaisuuksien havainnointiajankohdat
Rep means normal or not homogenous
Apikaaliset ominaisuudet
Rep means normal & homogenous
Päivittäin
Determine whether Dose-Response is monotone
Kuolleisuus
C.38.
Takajalan Pituus
THE AMPHIBIAN METAMORPHOSIS ASSAY
Kuonon ja peräaukon välinen pituus
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 231 (2009).
Ruumiin märkäpaino
The need to develop and validate an assay capable of detecting chemicals active in the thyroid system of vertebrate species originates from concerns that environmental levels of chemicals may cause adverse effects in both humans and wildlife.
Kilpirauhasen histologia
In 1998, the OECD initiated a high-priority activity to revise existing TGs and to develop new TGs for the screening and testing of potential endocrine disrupters.
AMA-tutkimuksen apikaalisia ominaisuuksia ovat kehitysvaihe, takajalan pituus, kuonon ja peräaukon välinen pituus sekä märkäpaino, ja ne kuvataan lyhyesti jäljempänä.
One element of the activity was to develop a TG for the screening of chemicals active on the thyroid system of vertebrate species.
Lisää teknistä tietoa näiden tietojen keräämisestä on viiteohjeasiakirjoissa, mukaan luettuina käytettäväksi suositellut tietokoneavusteiset analyysimenetelmät.
Both an enhancement of the Repeated dose 28-day oral toxicity study in rodents (Chapter B.7 of this Annex) and the Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) were proposed.
laevis -lajin sammakonpoikasten kehitysvaihe määritetään Nieuwkoopin ja Faberin (8) laatimien kriteerien perusteella.
The enhanced test method B.7 underwent validation and a revised test method has been issued.
Kehitysvaihetietojen perusteella määritetään se, onko kehitys nopeutunutta, epäsynkronista, viivästynyttä vai normaalia.
The Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) underwent an extensive validation programme which included intra- and inter-laboratory studies demonstrating the relevance and reliability of the assay (1, 2).
Kehityksen nopeutuminen tai viivästyminen määritetään vertailemalla kontrolli- ja käsittelyryhmissä saavutettua mediaanivaihetta.
Subsequently, the validation of the assay was subject to peer-review by a panel of independent experts (3).
Kehitys määritetään epäsynkroniseksi, kun tutkitut kudokset eivät ole epämuodostuneita tai poikkeavia, vaan kun morfogeneesin suhteellinen ajoittuminen tai eri kudosten kehittyminen yksittäisellä sammakonpojalla on häiriintynyt.
This test method is the outcome of the experience gained during the validation studies for the detection of thyroid active chemicals, and of work conducted elsewhere in OECD member countries.
Kilpirauhashormonit säätelevät takajalkojen eriytymistä ja kasvua, jotka ovat keskeisiä kehitysvaiheen määrittämisessä käytettyjä kehityksen tunnusmerkkejä.
The Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) is a screening assay intended to empirically identify chemicals which may interfere with the normal function of the hypothalamic-pituitary-thyroid (HPT) axis.
Kehitysvaiheen määrittämisessä takajalan kehittymistä arvioidaan laadullisesti, mutta tässä tutkimuksessa sitä tarkastellaan määrällisenä ominaisuutena.
The AMA represents a generalised vertebrate model to the extent that it is based on the conserved structures and functions of the HPT axis.
Siksi takajalan pituus mitataan ominaisuutena, jonka perusteella voidaan havaita kilpirauhasakseliin kohdistuvia vaikutuksia (kuva 2).
It is an important assay because amphibian metamorphosis provides a well-studied, thyroid-dependent process which responds to chemicals active within the HPT axis, and it is the only existing assay that detects thyroid activity in an animal undergoing morphological development.
Yhtenäisyyden vuoksi takajalan pituus mitataan vasemmasta takajalasta.
The general experimental design entails exposing stage 51 Xenopus laevis tadpoles to a minimum of three different concentrations of a test chemical and a dilution water control for 21 days.
Takajalan pituus arvioidaan testissä sekä päivänä 7 että päivänä 21.
There are four replicates of each test treatment.
Päivänä 7 takajalan pituuden mittaaminen on helppoa, kuten kuvasta 2 näkyy.
Larval density at test initiation is 20 tadpoles per test tank for all treatment groups.
Päivänä 21 takajalan pituuden mittaaminen on kuitenkin hankalampaa jalassa olevien taipeiden vuoksi.
The observational endpoints are hind limb length, snout to vent length (SVL), developmental stage, wet weight, thyroid histology, and daily observations of mortality.
Sen vuoksi takajalan pituuden mittaaminen päivänä 21 on aloitettava siitä kohdasta, jossa jalka yhtyy muuhun ruumiiseen, ja pituus on mitattava jalan keskiviivaa pitkin kaikkien kulmapoikkeamien läpi.
Test Species
Mahdollisen kilpirauhaseen kohdistuvan vaikutuksen kannalta takajalan pituudessa päivänä 7 havaittuja muutoksia pidetään merkittävinä, vaikka niitä ei ilmenisi enää päivänä 21.
Xenopus laevis is routinely cultured in laboratories worldwide and is easily obtainable through commercial suppliers.
Pituuden mittaukset tehdään digitaalisista valokuvista käyttämällä kuvan analysointiohjelmaa, kuten OECD:n ohjeasiakirjassa ’Amphibian Thyroid Histology’ (9) on kuvattu.
Reproduction can be easily induced in this species throughout the year using human chorionic gonadotropin (hCG) injections and the resultant larvae can be routinely reared to selected developmental stages in large numbers to permit the use of stage-specific test protocols.
Ruumiin pituus ja märkäpaino
It is preferred that larvae used in the assay are derived from in-house adults.
Kuonon ja peräaukon välisen pituuden (kuva 2) ja märkäpainon määrittämiset sisältyvät testiprotokollaan, jotta voidaan arvioida testikemikaalien mahdollisia vaikutuksia sammakonpoikasten kasvunopeuteen kontrolliryhmään verrattuna.
As an alternative although this is not the preferred procedure, eggs or embryos may be shipped to the laboratory performing the test and allowed to acclimate;
Nämä tiedot ovat hyödyllisiä myös testikemikaalin yleisen myrkyllisyyden havaitsemisessa.
the shipping of larval stages for use in the test is unacceptable.
Koska ylimääräisen veden poistaminen ennen painon määrittämistä voi aiheuttaa sammakonpoikasille stressiä ja ihovaurioita, nämä mittaukset tehdään päivänä 7 alaryhmään valituille sammakonpoikasille ja kaikille muille sammakonpoikasille testin päättyessä (päivänä 21).
Equipment and Supplies
Käytä mittauksen pyrstönpuoleisena rajana peräaukon kallonpuoleista reunaa yhtenäisyyden vuoksi.
The following equipment and supplies are needed for the conduct of this assay:
Kuonon ja peräaukon välistä pituutta käytetään arvioitaessa sammakonpoikasen kasvua, kuten kuvassa 2 on näytetty.
Exposure system (see description below);
Ruumiin pituuden mittausten tyypit ja B) X. laevis -lajin sammakonpoikasten takajalan pituuden mittaukset (1).
Glass or stainless steel aquaria (see description below);
Vaikka kehitysvaihe ja takajalan pituus ovat tärkeitä ominaisuuksia, kun arvioidaan altistukseen liittyviä muutoksia muodonvaihdoksen kehittymisessä, kehityksen viivästymistä ei sinänsä voida pitää diagnostisena indikaattorina kilpirauhasen toimintaa hillitsevästä vaikutuksesta.
Breeding tanks;
Jotkin muutokset saattavat olla havaittavissa vain tavanomaisessa histopatologisessa analyysissa.
Temperature controlling apparatus (e.g., heaters or coolers (adjustable to 22° ± 1 °C));
Diagnostisia kriteerejä ovat kilpirauhasen hypertrofia/atrofia, follikkelisolun hypertrofia ja follikkelisolun hyperplasia.
Thermometer;
Muita laadullisia kriteerejä ovat lisäksi follikkelin ontelon alue, kolloidin laatu ja follikkelisolun korkeus/muoto.
Binocular dissection microscope;
Vaikeusaste (neljä luokkaa) on ilmoitettava.
Digital camera with at least 4 megapixel resolution and micro function;
Kaikki testisäiliöt on tarkastettava päivittäin kuolleiden sammakonpoikasten varalta, ja kuolleiden määrä on kirjattava muistiin jokaisesta säiliöstä.
Image digitising software;
Kaikista kuolleisuuteen liittyvistä havainnoista on kirjattava päivämäärä, pitoisuus ja säiliön numero.
Petri dish (e.g. 100 × 15 mm) or transparent plastic chamber of comparable size;
Kuolleet eläimet on poistettava testisäiliöstä heti, kun ne havaitaan.
Analytical balance capable of measuring to 3 decimal places (mg);
Jos kuolleisuus on yli 10 prosenttia, se saattaa olla merkki epätarkoituksenmukaisista testiolosuhteista tai testikemikaalin myrkyllisistä vaikutuksista.
Dissolved oxygen meter;
Muut havainnot
pH meter;
Poikkeava käyttäytyminen sekä selvästi nähtävät epämuodostumat ja leesiot on merkittävä muistiin.
Light intensity meter capable of measuring in lux units;
Kaikista poikkeavaan käyttäytymiseen sekä selviin epämuodostumiin tai leesioihin liittyvistä havainnoista on kirjattava päivämäärä, pitoisuus ja säiliön numero.
Miscellaneous laboratory glassware and tools;
Vesikolonnissa olevien sammakonpoikasten käyttäytyminen on normaalia, kun i) niiden pyrstö on päätä korkeammalla, ii) niiden peräevän liike on säännöllisen rytmikästä, iii) ne tulevat ajoittain pintaan, iv) niiden kiduskannet toimivat ja v) ne reagoivat ärsykkeisiin.
Adjustable pipettes (10 to 5000 μl) or assorted pipettes of equivalent sizes;
Epänormaalia käyttäytymistä on esimerkiksi pinnalla kelluminen, säiliön pohjassa makaaminen, käänteinen tai epäsäännöllinen uiminen, pintatoiminnan puuttuminen ja ärsykkeisiin reagoimattomuus.
Test chemical in sufficient quantities to conduct the study, preferably of one lot;
Lisäksi selvät eron ravinnon kulutuksessa käsittelyjen välillä on merkittävä muistiin.
Analytical instrumentation appropriate for the chemical on test or contracted analytical services.
Selviä epämuodostumia ja leesioita voivat olla esimerkiksi morfologiset poikkeamat (esimerkiksi raajojen epämuodostumat), verta vuotavat leesiot sekä bakteeri- tai sieni-infektiot.
Chemical Testability
Nämä määritykset ovat laadullisia, ja ne on rinnastettava sairaudesta/stressistä kertoviin kliinisiin merkkeihin kontrollieläimiin vertaamalla.
The AMA is based upon an aqueous exposure protocol whereby test chemical is introduced into the test chambers via a flow-through system.
Jos näitä merkkejä esiintyy altistussäiliöissä enemmän tai nopeammin kuin kontrollisäiliöissä, niitä on pidettävä osoituksena selvästä myrkyllisyydestä.
Flow-through methods however, introduce constraints on the types of chemicals that can be tested, as determined by the physicochemical properties of the chemical.
Tiedonkeruu
Therefore, prior to using this protocol, baseline information about the chemical should be obtained that is relevant to determining the testability, and the OECD Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures (4) should be consulted.
Kaikki tiedot on kerättävä käyttäen elektronisia tai manuaalisia järjestelmiä, jotka ovat hyvää laboratoriokäytäntöä koskevien periaatteiden mukaisia.
Characteristics which indicate that the chemical may be difficult to test in aquatic systems include:
Testikemikaalin luonnehdinta:
high octanol water partitioning coefficients (log Kow), high volatility, susceptibility to hydrolysis, and susceptibility to photolysis under ambient laboratory lighting conditions.
Kemialliset tiedot ja aineisto:
Other factors may also be relevant to determining testability and should be determined on a case by case basis.
Testikemikaalimittaukset voi olla tarpeen tehdä niin varastoliuoksista kuin testiliuoksistakin.
If a successful test is not possible for the chemical using a flow-through test system, a static renewal system may be employed.
Liuotin (jos se on muu kuin vesi):
If neither system is capable of accommodating the test chemical, then the default is to not test it using this protocol.
liuottimen valinnan perustelu ja liuottimen luonnehdinta (tyyppi, käytetty pitoisuus).
Exposure System
Operatiiviset tiedot:
A flow-through diluter system is preferred, when possible, over a static renewal system.
havainnot, jotka liittyvät testijärjestelmän toimintaan sekä tukevaan ympäristöön ja infrastruktuuriin.
If physical and/or chemical properties of any of the test chemicals are not amenable to a flow-through diluter system, then an alternative exposure system (e.g., static-renewal) can be employed.
Tyypillisiä tietoja ovat seuraavat:
The system components should have water-contact components of glass, stainless steel, and/or Polytetrafluoroethylene.
ympäristön lämpötila, testilämpötila, valoisa aika, altistusjärjestelmän kriittisten osien (kuten pumppujen, jaksolaskureiden, painemittareiden) tila, virtausnopeudet, vesimäärät, varastopullojen vaihdot ja ruokintatiedot.
However, suitable plastics can be utilised if they do not compromise the study.
Poikkeamiset testimenetelmästä:
Exposure tanks should be glass or stainless steel aquaria, equipped with standpipes that result in an approximate tank volume between 4,0 and 10,0 l and minimum water depth of 10 to 15 cm.
näiden tietojen tulee sisältää kaikki tiedot tai sanalliset kuvaukset testimenetelmästä poikkeamisista.
The system should be capable of supporting all exposure concentrations and a control, with four replicates per treatment.
Biologiset havainnot ja tiedot:
Special attention should be given that the water is free of copper, chlorine and chloramines, all of which are toxic to frogs and tadpoles.
Suorituskykyvaatimukset ja testin hyväksyttävyys/validiteetti
It is further recommended to analyse the water concerning background levels of fluoride, perchlorate and chlorate (by-products of drinking water disinfection) as all of these anions are substrates of the iodine transporter of the thyroid gland and elevated levels of each of these anions may confound the study outcome.
Selvät poikkeamat testimenetelmästä johtavat yleensä siihen, että tutkimuksesta saatuja tietoja ei voida hyväksyä tulkittaviksi tai raportoitaviksi.
Analysis should be performed before testing begins and the testing water should normally be free from these anions.
Seuraavat, taulukossa 4 esitetyt kriteerit on sen vuoksi laadittu ohjeeksi toteutetun testin laadun ja kontrolliorganismien suorituskyvyn määrittämiseen.
Iodide Concentration in Test Water
Taulukko 4
In order for the thyroid gland to synthesise TH, sufficient iodide needs to be available to the larvae through a combination of aqueous and dietary sources.
AMA-tutkimuksen suorituskykyvaatimukset
Currently, there are no empirically derived guidelines for minimal iodide concentrations.
Arviointiperuste
However, iodide availability may affect the responsiveness of the thyroid system to thyroid active agents and is known to modulate the basal activity of the thyroid gland, an aspect that deserves attention when interpreting the results from thyroid histopathology.
Hyväksyttävät rajat
Therefore, measured aqueous iodide concentrations from the test water should be reported.
Testipitoisuudet
Based on the available data from the validation studies, the protocol has been demonstrated to work well when test water iodide (I-) concentrations ranged between 0,5 and 10 μg/l.
Pitoisuudet pysyneet ≤ 20 prosentin sisällä variaatiokertoimesta (mitatun testipitoisuuden vaihtelevuus) 21 päivän testin aikana
Ideally, the minimum iodide concentration in the test water should be 0,5 μg/l.
Kontrollien kuolleisuus
If the test water is reconstituted from deionised water, iodine should be added at a minimum concentration of 0,5 μg/l.
≤10 % – kuolleisuus missä tahansa kontrollien rinnakkaisnäytteessä saa olla enintään kaksi sammakonpoikasta
Any additional supplementation of the test water with iodine or other salts should be noted in the report.
Kontrollien mediaani vähimmäiskehitysvaihe testin lopussa
Holding of animals
Kehitysvaiheen jakauma kontrolliryhmässä
Adult Care and Breeding
Kehitysvaiheen jakauman 10. ja 90. persentiilin välinen ero saa olla enintään neljä vaihetta
Adult care and breeding is conducted in accordance with standard guidelines and the reader is directed to the standard guide for performing the Frog Embryo Teratogenesis Assay (FETAX) (6) for more detailed information.
Liuennut happi
Such standard guidelines provide an example of appropriate care and breeding methods, but strict adherence is not required.
≥ 40 % ilman kyllästysarvosta [8]
To induce breeding, pairs (3-5) of adult females and males are injected with human chorionic gonadotropin (hCG).
pH-arvon on pysyttävä välillä 6,5–8,5.
Female and male specimens are injected with approximately 800 IU-1000 IU and 600 IU-800 IU, respectively, of hCG dissolved in 0,6-0,9 % saline solution.
Rinnakkaisnäytteiden/käsittelyjen välinen ero saa olla enintään 0,5.
Breeding pairs are held in large tanks, undisturbed and under static conditions in order to promote amplexus.
± 1 °C – rinnakkaisnäytteiden/käsittelyjen välinen ero saa olla enintään 0,5 °C
The bottom of each breeding tank should have a false bottom of stainless steel or plastic mesh which permits the egg masses to fall to the bottom of the tank.
Testipitoisuudet, joihin ei liity selvää myrkyllisyyttä
Frogs injected in the late afternoon will usually deposit most of their eggs by mid morning of the next day.
Rinnakkaisnäytteiden suorituskyky
After a sufficient quantity of eggs are released and fertilised, adults should be removed from the breeding tanks.
≤ 2 rinnakkaisnäytettä testin aikana saa heikentyä
Larval Care and Selection
Liuottimen käytön edellytykset
After the adults are removed from the breeding tanks, the eggs are collected and evaluated for viability using a representative sub-set of the embryos from all breeding tanks.
Jos kantoaineena käytetään liuotinta, on käytettävä sekä liuotinkontrollia että puhdasvesikontrollia, ja tulokset on ilmoitettava.
The best individual spawn(s) (2-3 recommended to evaluate the quality of the spawns) should be retained based upon embryo viability and the presence of an adequate number (minimum of 1500) of embryos.
Tilastollisesti merkitsevät erot liuotinkontrolli- ja vesikontrolliryhmien välillä käsitellään erikseen.
All the organisms used in a study should originate from a single spawning event (i.e., the spawns should not be co-mixed).
Ks. lisätiedot jäljempänä.
The embryos are transferred into a large flat pan or dish and all obvious dead or abnormal eggs (see definition in (5)) are removed using a pipette or eyedropper.
Staattista menetelmää (jossa liuos ei vaihdu) koskevat edellytykset
The sound embryos from each of the three spawns are transferred into three separate hatching tanks.
Edustavat kemialliset analyysit ennen vaihtoa ja sen jälkeen on raportoitava.
Four days after being placed in the hatching tanks, the best spawn, based on viability and hatching success, is selected and the larvae are transferred into an appropriate number of rearing tanks at 22° ± 1 °C.
Ammoniakkipitoisuudet tulee mitata juuri ennen vaihtoa.
In addition, some additional larvae are moved into extra tanks for use as replacements in the event that mortalities occur in the rearing tanks during the first week.
Kaikki lisäyksessä 1 olevassa taulukossa 1 luetellut veden laatuparametrit on mitattava juuri ennen vaihtoa.
This procedure maintains consistent organism density and thereby reduces developmental divergence within the cohort of a single spawn.
Vaihtoväli saa olla enintään 72 tuntia.
All rearing tanks should be siphoned clean daily.
Asianmukainen ruokinta-aikataulu (50 prosenttia kaupallisen sammakonpoikasten ruoan päivittäisestä ruoka-annoksesta)
As a precaution, vinyl or nitrile gloves are preferred to latex gloves.
Testin pätevyys