natgillin/translations-raw huggingface dataset:
It is anticipated that due to the large spacing of doses in the first run (log10 scale) in many cases it will not be possible to describe clear concentration-response relationships where the two greatest doses will be on the linear portion of the sigmoid curve.
Estroni
Therefore, for the first run or any other data sets where this condition occurs (e.g. where no maximum efficacy can be estimated) type I fixed variable statistics as described above will be applied.
eeta-estradioli
If more than two data points lie on the linear portion of the curve and where maximum efficacies can be calculated — as is anticipated for some of the 2nd runs that are conducted using a semi-log spacing of exposure concentrations — a probit, logit or other appropriate regression model should be utilised to calculate effective concentrations (e.g. EC50 and EC20).
eoksikortikosteroni
Results should be provided both in graphical (bar graphs representing mean ± 1 SD) and tabular (LOEC/NOEC, direction of effect, and strength of maximum response that is part of the dose-response portion of the data) formats (see Figure 3 for an example).
Deoksikortisoli
Data assessment is only considered valid if it has been based on at least two independently conducted runs.
Kortikosteroni
An experiment or run is considered independent if it has been conducted at a different date using a new set of solutions and controls.
Kortisoli
The concentration range used in runs 2 and 3 (if necessary) may be tailored on the basis of the results of run 1 to better define the dose response range containing the LOEC (see paragraph 47).
Aldosteroni
Figure 3
Tietojen tulkintaa koskeva menettely
Example of the presentation and evaluation of data obtained during the conduct of the H295R Assay in graphical and tabular format.
Testikemikaalia pidetään positiivisena, jos koetoiminnan suhde kontrolliin on tilastollisesti erilainen (p ≤ 0,05) liuotinkontrolliin nähden kahden vierekkäisen pitoisuuden osalta ainakin kahdessa toisistaan riippumattomassa testiajossa (taulukko 7).
Cholesterol
laitoksen nimi ja sijainti
Pregnenolone
tutkimusjohtaja ja muu henkilöstö ja heidän tutkimusta koskevat vastuualueensa
OH Pregnenolone
testin alku- ja päättymispäivä
Progesterone
Testikemikaali, reagenssit ja kontrollit
OH Progesterone
testikemikaalin, reagenssien ja kontrollien tunnistetiedot (nimi/CAS-nro tarvittaessa) lähde, erän/annoksen numero, puhtaus, toimittaja ja kuvaus
Androstenedione
testikemikaalin fysikaalinen olomuoto ja asiaankuuluvat fysikokemialliset ominaisuudet
Testosterone
varastointiolosuhteet ja testikemikaalien, reagenssien ja kontrollien valmistuksen menettely ja valmistustiheys
estradiol
testikemikaalin stabiilius.
eoxycorticosterone
Solut
Cortisol
solujen lähde ja tyyppi
Aldosterone
testissä käytettyjen solujen pasaasinumerot (solujen jakamiskerran tunniste)
Estrone
soluviljelmien ylläpitoa koskevien menettelyiden kuvaus.
Deoxycortisol
Vaatimukset ennen testiä (jos sovelletaan)
Corticosterone
testin, jossa arvioidaan, häiritseekö kemikaali hormonituotantoa (Chemical Hormone Assay Interference Test), kuvaus ja siitä saadut tulokset
LOEC Max Change
hormonien uuton tehokkuutta koskevien toimenpiteiden kuvaus ja tulokset
0,15 fold
standardikäyrät ja kalibrointikäyrät kaikille toteutettaville analyyttisille määrityksille
Letrozole
valittujen analyyttisten määritysten määritysrajat.
29 fold
Testiolosuhteet:
Data Interpretation Procedure
kasvatusliuoksien koostumus
A test chemical is judged to be positive if the fold induction is statistically different (p ≤ 0,05) from the solvent control at two adjacent concentrations in at least two independent runs (Table 7).
testikemikaalin pitoisuus
A test chemical is judged to be negative following two independent negative runs, or in three runs, comprising two negative runs and one equivocal or positive run.
solutiheys (arvioidut ja mitatut solutiheydet 24 tunnin ja 48 tunnin välein)
If the data generated in three independent experiments does not meet the decision criteria listed in Table 7, the experimental results are not interpretable.
testikemikaalin liukoisuus (liukoisuusraja, jos se määritetään)
Results at concentrations exceeding the limits of solubility or at cytotoxic concentrations should not be included in the interpretation of results.
inkubointiaika ja -olosuhteet.
Test Report
Testin tulokset
Name of facility and location;
käsittelemättömät tiedot kustakin kontrollin ja testikemikaalin kuopasta — kaikki toiset toimet, jotka esitetään alkuperäistiedoissa, jotka saadaan hormonintuotannon mittaamiseen käytetyllä välineellä (esim. optinen tiheys, fluoresenssiyksiköt, hajoaminen minuuttia kohti)
Study director and other personnel and their study responsibilities;
normaalisuuden validointi tai selvitys tietojen muunnoksesta
Dates the study began and ended;
keskimääräiset vasteet +/– 1 keskihajonta, kutakin mitattua kuoppaa kohti
Test chemical, reagents and controls
sytotoksisuustiedot (testipitoisuudet, jotka aiheuttavat sytotoksisuutta)
Identity (name/CAS No as appropriate), source, lot/batch number, purity, supplier, and characterisation of test chemical, reagents, and controls;
vahvistus siitä, että laadunvalvontavaatimukset täytettiin
Physical nature and relevant physicochemical properties of test chemical;
suhteellinen muutos verrattuna liuotinkontrolliin, jota on korjattu sytotoksisuuden osalta
Storage conditions and the method and frequency of preparation of test chemicals, reagents and controls;
pylväskuvaaja, joka osoittaa suhteen (kerrannaismuutos) kussakin pitoisuudessa, keskihajonnan ja tilastollisen merkityksen, kuten esitettiin 49–54 kohdassa.
Stability of test chemical;
Tietojen tulkinta
Cells
sovella tietojen tulkintaa koskeva menettelyä tuloksiin ja käsittele havaintoja.
Source and type of cells;
Pohdinta
Number of cell passages (cell passage identifier) of cells used in test;
käykö tutkimuksesta ilmi mahdollisuus, että gluko- ja mineraalikortikoideja koskevien reittien epäsuorat vaikutukset ovat voineet vaikuttaa T/E2-tietoihin?
Description of procedures for maintenance of cell cultures;
Päätelmät
Pre-test requirements (if applicable)
OECD (2002), OECD:n hormonaalisten haitta-aineiden testausta ja arviointia koskevat käsitteelliset puitteet (OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals), tämän liitteen B.54 luvussa oleva lisäys 2.
Description and results of chemical hormone-assay interference test;
Res., 14, 23–30.
Description and results of hormone extraction efficiency measurements;
OECD (2010), Multi-Laboratory Validation of the H295R Steroidogenesis Assay to Identify Modulators of Testosterone and Estradiol Production, OECD Series of Testing and Assessment No.
Standard and calibration curves for all analytical assays to be conducted;
132, ENV/JM/MONO(2010)31, Paris.
Detection limits for the selected analytical assays;
OECD (2010), Peer Review Report of the H295R Cell-Based Assay for Steroidogenesis, OECD Series of Testing and Assessment No.
Test conditions
133, ENV/JM/MONO(2010)32, Paris.
Composition of media;
Lisäys
Concentration of test chemical;
Konfluenttisuudella tarkoitetaan peittävyyttä tai jakaantuvuutta, joka sallitaan soluille kasvatusliuoksessa.
Cell density (estimated or measured cell concentrations at 24 hours and 48 hours)
Variaatiokertoimella tarkoitetaan keskihajonnan ja aritmeettisen keskiarvon osamäärää
Solubility of test chemical (limit of solubility, if determined);
CYP:llä tarkoitetaan sytokromin P450 mono-oksigenaaseja, niistä tuotettua geeni- ja entsyymiperhettä, joka osallistuu erilaisten biokemiallisten reaktioiden katalysointiin, mukaan lukien steroidihormonien synteesi ja aineenvaihdunta.
Validation of normality or explanation of data transformation;
H295R-soluilla tarkoitetaan ihmisen adreno-karsinooma-soluja, jotka ovat fysiologisilta ominaispiirteiltään sikiön erilaistumattomia lisämunuaisen soluja ja jotka ilmentävät kaikkia streroidogeneesin entsyymejä.
Mean responses ± 1 SD for each well measured;
Ne ovat saatavilla ATCC:ltä.
Cytotoxicity data (test concentrations that caused cytotoxicity);
Pakastusliuosta käytetään pakastamaan ja varastoimaan pakastettuja soluja.
Confirmation that QC requirements were met;
Se koostuu kasvatusliuoksen kantaliuoksesta, johon lisätään BD NuSerum -seeruminkorviketta ja dimetyylisulfoksidia.
Relative change compared with solvent control corrected for cytotoxicity;
Lineaarisella mittausalueella tarkoitetaan vaihteluväliä hormonin mittausjärjestelmän standardikäyrällä, jossa tulokset ovat verrannollisia näytteessä läsnä olevan analyytin pitoisuuteen.
A bar graph showing relative (fold change) at each concentration, SD and statistical significance as stated in paragraph 49-54;
Määritysrajalla tarkoitetaan pienintä määrää kemikaalia, joka voidaan erottaa siitä, että kyseistä kemikaalia ei esiinny (tyhjä arvo) todetulla luottamustasolla.
Data interpretation
Tässä menetelmässä testijärjestelmien valmistaja määrittelee tavanomaisesti määritysrajan, jos ei toisin ilmoiteta.
Apply the data interpretation procedure to the results and discuss findings;
LOEC:illa tarkoitetaan alhaisimman havaittavaan vaikutuksen aiheuttavaa pitoisuutta, jossa testireaktio poikkeaa tilastollisesti liuotinkontrollista.
Discussion
NOEC:illa tarkoitetaan pitoisuutta, joka aiheuta havaittavaa vaikutusta, mikä on korkein testattu pitoisuus, jos testi ei tarjoa positiivista reaktiota.
Are there any indications from the study regarding the possibility that the T/E2 data could be influenced by indirect effects on the gluco-, and mineral-corticoid pathways?
Pasaasilla tarkoitetaan niiden kertojen lukumäärää, jolloin solut jaetaan sen jälkeen kun viljelmä aloitetaan pakastetusta varastosta (jakamiskerta).
Conclusions
Ensimmäisen pakastetusta varastosta aloitetun viljelmän pasaasinumero on yksi (1).
OECD (2002), OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals, in Appendix 2 to Chapter B.54 of this Annex
Solut, jotka jaetaan yhden kerran merkitään pasaasinumerolla 2.
Res., 14, 23-30.
PBS:llä tarkoitetaan Dulbeccon fosfaattipuskuroitua suolaliuosta.
OECD (2010), Multi-Laboratory Validation of the H295R Steroidogenesis Assay to Identify Modulators of Testosterone and Estradiol Production, OECD Series of Testing and Assessment No 132, ENV/JM/MONO(2010)31, Paris.
Laadunvalvonnalla tarkoitetaan toimenpiteitä, joita tarvitaan validien tietojen varmistamiseen.
OECD (2010), Peer Review Report of the H295R Cell-Based Assay for Steroidogenesis, OECD Series of Testing and Assessment No 133, ENV/JM/MONO(2010)32, Paris.
Laadunvalvontalevyllä tarkoitetaan 24-kuoppalevyä, johon sisältyy positiivisen ja negatiivisen kontrollin kaksi pitoisuutta, joilla seurataan uuden soluerän tehokkuutta tai jolla tarjotaan kemikaalien testauksen ohessa positiivinen kontrolli testille.
Chapter B.55 of this Annex:
Testiajolla tarkoitetaan erillistä koetta, jossa käytetään uudenlaisia liuoksia ja kontrolleja.
Hershberger Bioassay in Rats:
Kasvatusliuoksen kantaliuoksella tarkoitetaan muiden reagenssien valmistelua varten käytettävää ainetta.
A short-term Screening Assay for (Anti)Androgenic Properties.
Se koostuu 1:1 seoksesta DMEM-kasvatusliuosta (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) ja DMEM/F12-kasvatusliuosta (Ham's F-12 Nutrient mixture) 15 mM:ssa Hepes-puskuria ilman fenoolipunaa tai natriumbikarbonaattia.
Appendix
Natriumbikarbonaatti lisätään puskuriksi, ks. validointiraportin lisäys II (4).
Confluency refers to the coverage or proliferation that the cells are allowed over or throughout the culture medium.
Lopullinen kasvatusliuos koostuu kasvatusliuoksen kantaliuoksesta, johon on lisätty ainetta BD seeruminkorvike ja ITS+ premium mix, ks. validointiraportin lisäys II (4).
CV refers to the coefficient of variation, and is defined as the ratio of the standard deviation of a distribution to its arithmetic mean.
Steroidogeneesillä tarkoitetaan synteesireittiä, joka johtaa kolesterolista useisiin steroidihormoneihin.
CYP stands for cytochrome P450 mono-oxygenases, a family of genes and the enzymes produced from them that are involved in catalysing a wide variety of biochemical reactions including the synthesis and metabolism of steroid hormones.
Useat reaktion välituotteet steroidisynteesireitillä, kuten progesteroni ja testosteroni, ovat jo itsessään tärkeitä hormoneja, mutta ne toimivat myös esiasteena synteesireitin loppupäässä oleville hormoneille (lopputuote).
DPM are disintegration per minute.
T:llä tarkoitetaan testosteronia, yhtä nisäkkäiden elimistön kahdesta tärkeimmästä androgeenista.
It is the number of atoms in a given quantity of radioactive material that is detected to have decayed in one minute.
Testikemikaalilla tarkoitetaan mitä tahansa ainetta tai seosta, jota testataan käyttämällä tätä testimenetelmää.
E2 is 17β-oestradiol, the most important oestrogen in mammalian systems.
Testilevyllä tarkoitetaan levyä, jolla H295R-solut altistetaan testikemikaaleille.
H295R cells are human adreno-carcinoma cells which have the physiological characteristics of zonally undifferentiated human foetal adrenal cells and which express all of the enzymes of the steroidogenesis pathway.
Testilevyille sisältyy liuotinkontrolli ja testikemikaali seitsemällä pitoisuustasolla kolmena kappaleena.
They are available from the ATCC.
Trypsiini 1X:llä tarkoitetaan laimennettua liuosta, joka koostuu trypsiini-entsyymistä, haiman seriiniproteasista, jota käytetään irrottamaan soluja viljelylevyiltä, ks. validointiraportin lisäys III (4).
Freeze medium is used to freeze and to store frozen cells.
B.58.
It consists of stock medium plus BD NuSerum and dimethyl sulfoxide.
SIIRTOGEENISTEN JYRSIJÖIDEN SOMAATTISTEN SOLUJEN JA SUKUSOLUJEN GEENIMUTAATIOTESTIT
Linear Range is the range within the standard curve for a hormone measurement system where the results are proportional to the concentration of the analyte present in the sample.
Tämä testimenetelmä vastaa OECD:n testiohjetta 488 (2013).
LOQ stands for “Limit of Quantification”, and is the lowest quantity of a chemical that can be distinguished from the absence of that chemical (a blank value) within a stated confidence limit.
EU:n testimenetelmiä on saatavilla laajasta valikoimasta in vitro -mutaatiotestejä, joissa voidaan havaita kromosomi- ja/tai geenimutaatioita.
For the purpose of this method, the LOQ is typically defined by the manufacturer of the test systems if not specified differently.
In vivo -päätetapahtumia (eli kromosomimuutokset ja ennakoimaton DNA-synteesi) varten on käytössä testimenetelmiä;
LOEC is the Lowest Observed Effect Concentration, the lowest concentration level at which the assay response is statistically different from that of the solvent control.
Siirtogeenisten jyrsijöiden mutaatiotestejä on tarkasteltu laajasti uudelleen (24)(33).
NOEC is the No Observed Effect Concentration, which is the highest concentration tested if the assay does not provide a positive response.
Niissä käytetään siirtogeenisiä rottia ja hiiriä, joissa on useita kopioita kromosomisesti integroituja plasmideja tai faagien sukkulavektoreita.
Passage is the number of times that cells are split after initiation of a culture from frozen stock.
Siirtogeeneihin sisältyy reportterigeenejä, joilla havaitaan monenlaisia mutaatioita, joita testikemikaalit indusoivat in vivo.
The initial passage that was started from the frozen stock is assigned the number one (1).
Jyrsijässä aiheutuvat mutaatiot merkitään muistiin ottamalla siirtogeeni talteen ja analysoimalla reportterigeenin fenotyyppiä bakteeri-isännässä, joka on reportterigeenin osalta vaillinainen.
Cells that were split 1 time are labelled passage 2, etc.
Siirtogeenisten jyrsijöiden geenimutaatiotesteissä mitataan mutaatioita, joita ovat aiheuttaneet geneettisesti neutraalit geenit, jotka on otettu talteen lähes mistä tahansa jyrsijän kudoksesta.
PBS is Dulbecco's phosphate buffered saline.
Tästä syystä näissä testeissä kierretään useita nykyisiä rajoituksia, jotka liittyvät endogeenisten geenien in vivo -geenimutaatioita koskevaan tutkimukseen (kuten rajallinen määrä testiin sopivia kudoksia, negatiivinen/positiivinen valinta mutaatioita vastaan).
Run is an independent experiment characterised by a new set of solutions and controls.
Tämä testimenetelmä perustuu näihin suosituksiin.
Stock medium is the base for the preparation of other reagents.
Täydentävä analyysi, jolla tuetaan tämän testiprotokollan käyttämistä, sisältyy lähteeseen (16).
It consists of a 1:1 mixture of Dulbecco's Modified Eagle's Medium and Ham's F-12 Nutrient mixture (DMEM/F12) in 15 mM HEPES buffer without phenol red or sodium bicarbonate.
On odotettavissa, että tulevaisuudessa voi olla mahdollista yhdistää siirtogeenisten jyrsijöiden geenimutaatiotestit toistuvan annostelun toksisuustutkimuksiin (tämän liitteen B.7 luku).
Sodium bicarbonate is added as the buffer, see Appendix II to the validation report (4).
Tietoja tarvitaan kuitenkin sen varmistamiseksi, että siirtogeenisten jyrsijöiden geenimutaatiotestien herkkyyteen ei vaikuteta altistusajan lopun ja näytteenottoajan välisellä lyhyemmällä yhden vuorokauden ajanjaksolla, jota sovelletaan toistuvan annostelun tutkimuksissa, verrattuna siirtogeenisten jyrsijöiden geenimutaatiotesteissä käytettyyn kolmeen vuorokauteen.
Supplemented medium consist of stock medium plus BD Nu-Serum and ITS+ premium mix, see Appendix II to the validation report (4).
Tarvitaan myös tietoja jotka osoittavat, että toistuvan annostelun tutkimuksiin ei vaikuteta haitallisesti, koska tavanomaisten jyrsijäkantojen sijaan käytetään siirtogeenisiä jyrsijäkantoja.
Steroidogenesis is the synthetic pathway leading from cholesterol to the various steroid hormones.
Kun nämä tiedot ovat saatavilla, tätä testimenetelmää päivitetään.
Several intermediates in the steroid synthesis pathway such as progesterone and testosterone are important hormones in their own right but also serve as precursors to hormones farther down the synthetic pathway.
Keskeisten termien määritelmät esitetään liitteessä.
T stands for testosterone, one of the two most important androgens in mammalian systems.
Siirtogeenisten jyrsijöiden geenimutaatiotestit, joiden osalta on saatavilla tarpeeksi tietoa, jotta niitä voidaan käyttää tässä testimenetelmässä, ovat:
Test chemical is any substance or mixture tested using this test method.
gpt delta (gpt ja Spi–)mouse ja rat -mallit;
Test plate is the plate on which H295R cells are exposed to test chemicals.
lacI mouse -malli ja lacI rat -malli (Big Blue® -malli), sellaisina kuin ne suoritetaan tavanomaisissa olosuhteissa.
Test plates contain the solvent control and the test chemical at seven concentration levels in triplicate.
Lisäksi positiivista valintaa koskevaa cII-testiä voidaan käyttää arvioimaan mutaatioita Big BlueÒ- ja MutaäMouse-malleissa.
Trypsin 1X is a dilute solution of the enzyme trypsin, a pancreatic serine protease, used to loosen cells from a cell cultivation plate, see Appendix III to the validation report (4).
Mutageneesiä siirtogeenisten jyrsijöiden geenimutaatiotestien malleissa arvioidaan normaalisti mutaatiofrekvenssillä;
B.58 TRANSGENIC RODENT SOMATIC AND GERM CELL GENE MUTATION ASSAYS
lisätietoja voidaan saada tarvittaessa mutaatioiden molekyylianalyysillä (ks. 24 kohta).
This test method is equivalent to OECD Test Guideline (TG) 488 (2013).
Nämä jyrsijöiden in vivo geenimutaatiotestit soveltuvat erityisesti mutageenisuusvaaran arvioimiseen, sillä testin vasteet riippuvat in vivo metaboloinnista, farmakokinetiikasta, DNA:n korjautumisprosesseista ja transleesio-DNA-synteesistä, joskin näissä saattaa esiintyä eroja lajien ja kudosten sekä DNA-vaurioiden tyyppien välillä.
EU test methods are available for a wide range of in vitro mutation assays that are able to detect chromosomal and/or gene mutations.
Geenimutaatioita koskeva in vivo -testi on hyödyllinen, jotta in vitro -järjestelmässä havaittua mutageenistä vaikutusta tutkitaan enemmän ja jotta suoritetaan testitulosten seuranta käyttäen muita in vivo -päätetapahtumia (24).
There are test methods for in vivo endpoints (i.e. chromosomal aberrations and unscheduled DNA synthesis);
Sen lisäksi, että geenimutaatiot ovat syy-yhteydellisiä syövän syntyyn, ne muodostavat olennaisen päätetapahtuman, jolla ennustetaan mutaatioon perustuvia muita kuin syöpäsairauksia somaattisissa kudoksissa (12)(13) sekä sairauksia, jotka tarttuvat ituradan välityksellä.
Transgenic Rodent (TGR) mutation assays fulfil the need for practical and widely available in vivo tests for gene mutations.
Edellä 8 kohdassa kuvatuissa testeissä kohdegeeni on alkuperältään bakteeri tai bakteriofagi, ja tapa saada näyte jyrsijän genomisesta DNA:sta on siirtogeenin sitoutuminen λ-bakteriofaagiin tai plasmidisukkulavektoriin.
The TGR mutation assays have been reviewed extensively (24) (33).
Menettelyyn sisältyy genomisen DNA:n ekstraktio jyrsijän kohdekudoksesta, genomisen DNA:n in vitro -käsittely (eli λ-vektorien pakkaaminen tai plasmidien ligaatio ja elektroporaatio sukkulavektorin tuottamiseksi) ja sitä seuraava mutaatioiden seulonta bakteeri-isännissä sopivissa olosuhteissa.
They use transgenic rats and mice that contain multiple copies of chromosomally integrated plasmid or phage shuttle vectors.
Testissä käytetään neutraaleja siirtogeenejä, jotka voidaan helposti kerätä useimmista kudoksista.
The transgenes contain reporter genes for the detection of various types of mutations induced in vivo by test chemicals.
Jyrsijöiden geenimutaatiota mittaavassa perustestissä jyrsijä altistetaan kemikaalille tietyn ajanjakson ajan.
Mutations arising in a rodent are scored by recovering the transgene and analysing the phenotype of the reporter gene in a bacterial host deficient for the reporter gene.
Kemikaalit voidaan antaa minkä tahansa annostelureitin, myös implantaation kautta (esim. lääkinnällisten laitteiden testaus).
TGR gene mutation assays measure mutations induced in genetically neutral genes recovered from virtually any tissue of the rodent.
Sitä ajanjaksoa kokonaisuudessaan, jolloin eläimelle annetaan annoksia, kutsutaan altistusajaksi.
These assays, therefore, circumvent many of the existing limitations associated with the study of in vivo gene mutation in endogenous genes (e.g. limited tissues suitable for analysis, negative/positive selection against mutations).
Tätä ajanjaksoa kutsutaan ammattikirjallisuudessa usein ilmenemisajaksi (manifestation time), kiinnitysajaksi (fixation time) tai ilmentymisajaksi (expression time), tämän ajanjakson loppua kutsutaan näytteenottoajaksi (15)(29).
The weight of evidence suggests that transgenes respond to mutagens in a similar manner to endogenous genes, especially with regard to the detection of base pair substitutions, frameshift mutations, and small deletions and insertions(24).
Eläimen lopettamisen jälkeen genominen DNA eristetään testin kohteena olevasta kudoksesta (kudoksista) ja se puhdistetaan.
The International Workshops on Genotoxicity Testing (IWGT) have endorsed the inclusion of TGR gene mutation assays for in vivo detection of gene mutations, and have recommended a protocol for their implementation (15) (29).
Tiedot yhdestä kudoksesta eläintä kohti useista pakkauksista/ligaatioista kootaan yleensä yhteen ja mutaatiotaajuus arvioidaan yleensä käyttäen yhteensä 105 ja 107 plakkia muodostavaa tai pesäkkeitä muodostavaa yksikköä.
This test method is based on these recommendations.
Jos käytetään positiivisia valintamenetelmiä, plakkia muodostavien yksiköiden kokonaismäärä määritellään käyttäen erillisiä ei-selektiivisiä maljoja.
Further analysis supporting the use of this protocol can be found in (16).
Positiivisia valintamenetelmiä on kehitetty, jotta mutaatioiden seulontaa helpotetaan gpt-geenissä (gpt delta mouse and rat -malli, gpt–-fenotyyppi (20)(22)(28)) ja lacZ-geenissä (Muta™Mouse- tai lacZ plasmid mouse -malli (3)(10)(11)(30));
It is anticipated that in the future it may be possible to combine a TGR gene mutation assay with a repeat dose toxicity study (Chapter B.7 of this Annex).
lacI-geenimutaatiot Big Blue® -eläimissä seulotaan non-selektiivisellä mallilla, jossa mutantit seulotaan värillisten (sinisten) plakkien syntymisen välityksellä.