natgillin/translations-raw huggingface dataset:
for example, when testing human female-specific drugs, or when investigating female-specific metabolism.
Jos tällaisilla kudoksilla on erityistä merkitystä, myöhempi 28 päivän näytteenottoajankohta, joka seuraa 28 päivän altistusaikaa, voi olla tarkoituksenmukaisempi (16)(29).
If there are significant differences between the sexes in terms of toxicity or metabolism, then both males and females will be required.
Tällaisissa tapauksissa myöhempi aika korvaisi 3 päivän näytteenottoajan ja edellyttäisi tieteellisiä perusteluja.
Administration Period
Sukusolut
Based on observations that mutations accumulate with each treatment, a repeated-dose regimen is necessary, with daily treatments for a period of 28 days.
Siirtogeenisillä jyrsijöillä tehtävät testit soveltuvat hyvin tutkimuksiin, jotka koskevat geenimutaatioiden syntyä uroksen sukusoluissa (7)(8)(27), joissa spermatogeneesin ajoitus ja kinetiikka on määritelty hyvin (27).
This is generally considered acceptable both for producing a sufficient accumulation of mutations by weak mutagens, and for providing an exposure time adequate for detecting mutations in slowly proliferating organs.
Koska analyysia varten saatavilla olevia munasoluja on vähän jopa superovulaation jälkeen ja koska oosyytissä ei ole DNA-synteesiä, siirtogeenisten eläinten testeissä ei voida määritellä naaraiden sukusolujen mutaatiota (31).
Alternative treatment regimens may be appropriate for some evaluations, and these alternative dosing schedules should be scientifically justified in the protocol.
Uroksen sukusolujen näytteenottoajat olisi valittava niin, että näytteet otetaan sarjasta altistettuja solutyyppejä koko sukusolujen kehityksen ajan ja että soluja on altistettu tarpeeksi vaiheessa, joka on näytteenoton kohteena.
Treatments should not be shorter than the time required for the complete induction of all the relevant metabolising enzymes, and shorter treatments may necessitate the use of multiple sampling times that are suitable for organs with different proliferation rates.
Kehittyvien sukusolujen kehittymisaika spermatogoniaalisista kantasoluista kypsiksi siittiöiksi, jotka siirtyvät siemenjohtimeen/lisäkiveksen häntään, on hiirellä noin 49 vuorokautta (36) ja rotalla noin 70 vuorokautta (34)(35).
In any case, all available information (e.g. on general toxicity or metabolism and pharmacokinetics) should be used when justifying a protocol, especially when deviating from the above standard recommendations.
Kolmen päivän näytteenottoaikana, joka seuraa 28 vuorokauden altistusta, siemenjohtimen/lisäkiveksen hännästä (7)(8) kerätty siemenneste edustaa solupopulaatiota, joka on altistettu suunnilleen spermatogeneesin jälkipuoliskolla.
While it may increase sensitivity, treatment times longer than 8 weeks should be explained clearly and justified, since long treatment times may produce an apparent increase in mutant frequency through clonal expansion (29).
Tähän sisältyy siis meioottinen ja postmeioottinen vaihe, mutta ei spermatogoniota tai kantasoluja koskevaa vaihetta.
Dose Levels
Jotta siemenjohtimen/lisäkiveksen hännän soluista, jotka olivat siittiökehityksen kantasoluja altistusaikana, otetaan näyte asianmukaisesti, altistuksen jälkeen tarvitaan täydentävää 7 viikon (hiiret) tai 10 viikon (rotat) näytteenottoaikaa.
Dose levels should be based on the results of a dose range-finding study measuring general toxicity that was conducted by the same route of exposure, or on the results of pre-existing sub-acute toxicity studies.
Soluihin, jotka irrotetaan siementiehyeistä 28 + 3 vuorokauden jälkeen, sisältyy sekapopulaatioita, joita on käsitelty kehittyvien sukusolujen kaikissa eri vaiheissa (7)(8).
Non-transgenic animals of the same rodent strain may be used for determining dose ranges.
Näytteenotolla näistä soluista geenimutaation seulontaa varten ei tarjota yhtä täsmällistä arviointia vaiheista, jolloin sukusolujen mutaatioita aiheutetaan, kuin silloin, jos näyte otetaan siemenjohtimesta/lisäkiveksen hännästä (koska tiehyeistä otetussa näytteissä esiintyy sukusolujen tyyppien osalta vaihtelua ja näytteeseen sisältyy joitain somaattisia soluja, jotka kontaminoivat tämän solupopulaation).
In the main test, in order to obtain dose response information, a complete study should include a negative control group (see paragraph 22) and a minimum of three, appropriately-spaced dose levels, except where the limit dose has been used (see paragraph 28).
Solunäytteen otto siementiehyistä siemenjohtimen/lisäkiveksen hännän siemennesteen näytteiden lisäksi pelkästään 28 + 3 vuorokauden näytteenotto-ohjelmassa tarjoaa kuitenkin jotain tietoja soluista, jotka on altistettu sukusolujen useampien kehitysvaiheiden aikana, ja tämä voi olla hyödyllinen keino seuloa joitain sukusolujen mutageenejä.
The top dose should be the Maximum Tolerated Dose (MTD).
Yleisiä kliinisiä havaintoja pitäisi tehdä ainakin kerran päivässä, mieluiten samaan aikaan joka päivä ottaen huomioon se, milloin annoksen antamisen jälkeen ennakoidut vaikutukset ovat suurimmillaan.
The MTD is defined as the dose producing signs of toxicity such that higher dose levels, based on the same dosing regimen, would be expected to produce lethality.
Eläinten terveydentila on kirjattava.
Chemicals with specific biological activities at low non-toxic doses (such as hormones and mitogens), and chemicals which exhibit saturation of toxicokinetic properties may be exceptions to the dose-setting criteria and should be evaluated on a case-by-case basis.
Kaikkien eläinten sairastuvuutta ja kuolleisuutta on havainnoitava ainakin kahdesti vuorokaudessa.
The dose levels used should cover a range from the maximum to little or no toxicity.
Kaikki eläimet olisi punnittava ainakin kerran viikossa ja lopetettaessa.
Limit Test
Ravinnon kulutus olisi mitattava ainakin kerran viikossa.
If dose range-finding experiments, or existing data from related rodent strains, indicate that a treatment regime of at least the limit dose (see below) produces no observable toxic effects,and if genotoxicity would not be expected based upon data from structurally related chemicals, then a full study using three dose levels may not be considered necessary.
Mikäli testikemikaalia annostellaan juomaveteen, veden kulutusta olisi mitattava, kun vesi vaihdetaan tai ainakin kerran viikossa.
For an administration period of 28 days (i.e. 28 daily treatments), the limit dose is 1000 mg/kg body weight/day.
Eläimet, joilla ilmenee ei-letaaleja merkkejä liiallisesta myrkytysvaikutuksesta, olisi lopetettava ennen tutkimusajan päättymistä (23).
For administration periods of 14 days or less, the limit dose is 2000 mg/kg/body weight/day (dosing schedules differing from 28 daily treatments should be scientifically justified in the protocol; see paragraph 26).
Kudosnäytteiden kerääminen
Administration of Doses
Kudosnäytteiden keräämistä koskevat perusteet olisi määritettävä selkeästi.
The test chemical is usually administered by gavage using a stomach tube or a suitable intubation cannula.
Koska mutaatioiden muodostumista voidaan tutkia lähes kaikista kudoksista, kerättävien kudosten valinnan olisi perustuttava tutkimuksen suorittamisen taustalla olevaan syyhyn ja olemassa oleviin tutkittavana olevan kemikaalin mutageenisyyttä, karsinogeenisyyttä tai toksisuutta koskeviin tietoihin.
In general, the anticipated route of human exposure should be considered when designing an assay.
Tärkeisiin tarkasteltaviin näkökohtiin pitäisi sisältyä altistusreitti (joka perustuu todennäköisiin ihmisen altistumista koskevaan reittiin (reitteihin)), ennustettava kudosjakauma ja mahdollinen vaikutusmekanismi.
Therefore, other routes of exposure (such as drinking water, subcutaneous, intravenous, topical, inhalation, intratracheal, dietary, or implantation) may be acceptable where they can be justified.
Jos taustatietoja ei ole, useita tutkimuksen kannalta mahdollisesti merkittäviä somaattisia kudoksia voidaan kerätä.
Intraperitoneal injection is not recommended since it is not a physiologically relevant route of human exposure.
Niiden pitäisi edustaa nopeasti lisääntyviä, hitaasti lisääntyviä ja kontaktikohdan kudoksia.
The maximum volume of liquid that can be administered by gavage or injection at one time depends on the size of the test animal.
Lisäksi siemenjohtimen/lisäkiveksen hännän siittiöitä ja siementiehyeiden kehittyviä sukusoluja (kuten kuvataan 32 ja 33 kohdassa) olisi kerättävä, ja ne olisi säilytettävä, jos myöhemmin tarvitaan lisätutkimuksia sukusolujen mutageenisyydestä.
The volume should not exceed 2 ml/100 g body weight.
Elinten painot olisi mitattava.
The use of volumes greater than this should be justified.
Suurempien elinten osalta kaikista eläimistä olisi punnittava sama ala.
Except for irritating or corrosive chemicals, which will normally reveal exacerbated effects at higher concentrations, variability in test volume should be minimised by adjusting the concentration to ensure a constant volume at all dose levels.
Kudoksien ja DNA:n säilyttäminen
Sampling Time
Kudokset (tai kudoshomogenaatit) olisi säilytettävä –70 °C:ssa tai alemmassa lämpötilassa, ja niitä voidaan käyttää DNA:n eristämiseen viiden vuoden aikana.
Somatic Cells
Eristetty DNA, joka varastoidaan jäähdytettynä 4 °C:een asianmukaisessa puskuriliuoksessa, olisi käytettävä mutaatioanalyysia varten optimaalisesti vuoden sisällä.
The sampling time is a critical variable because it is determined by the period needed for mutations to be fixed.
Kudosten valitseminen mutaatioanalyysia varten
This period is tissue-specific and appears to be related to the turnover time of the cell population, with bone marrow and intestine being rapid responders and the liver being much slower.
Kudosten valinnan olisi perustuttava seuraaviin näkökohtiin:
A suitable compromise for the measurement of mutant frequencies in both rapidly and slowly proliferating tissues is 28 consecutive daily treatments (as indicated in paragraph 26) and sampling three days after the final treatment;
altistusreitti tai ensimmäinen kontaktikohta (esim. rauhasmaha, jos annos annetaan suun kautta; keuhkot, jos annos annetaan inhalaationa; tai iho, jos käytetään paikallisesti ihon alueelle aplikoitavaa annosta);
although the maximum mutant frequency may not manifest itself in slowly proliferating tissues under these conditions.
ja 2) yleisiä myrkyllisyysvaikutuksia koskevissa tutkimuksessa havaitut farmakokineettiset parametrit, jotka osoittavat kudoksen disposition, pidättymisen tai kertymisen, tai myrkyllisyysvaikutuksien kohde-elimet.
If slowly proliferating tissues are of particular importance, then a later sampling time of 28 days following the 28 day administration period may be more appropriate (16) (29).
Jos tutkimukset suoritetaan karsinogeenisyystutkimusten seurantaa varten, olisi tarkasteltava karsinogeenisyysvaikutuksien kohdekudoksia.
In such cases, the later sampling time would replace the 3 day sampling time, and would require scientific justification.
Kudosten valitsemisella tutkimusta varten pitäisi maksimoida sellaisten kemikaalien havaitsemista, jotka toimivat suoraan in vitro -mutageeneinä, metaboloituvat nopeasti, jotka ovat erittäin reaktiivisia tai huonosti imeytyviä tai joiden kohdekudos määräytyy altistusreitin perusteella (6).
Germ Cells
Jos taustatietoja ei ole käytettävissä — ja kun otetaan huomioon altistusreitistä johtuva kontaktikohta –, olisi arvioitava maksan ja ainakin yhden nopeasti jakaantuvan kudoksen (kuten rauhasmaha, luuydin) mutageenisyytta.
TGR assays are well-suited for the study of gene mutation induction in male germ cells (7) (8) (27), in which the timing and kinetics of spermatogenesis have been well-defined (27).
Useimmissa tapauksissa edellä mainitut vaatimukset voidaan saavuttaa kahden huolellisesti valitun kudoksen analyyseista, mutta joissain tapauksessa tarvitaan kolmea tai useampaa kudosta.
The low numbers of ova available for analysis, even after super-ovulation, and the fact that there is no DNA synthesis in the oocyte, preclude the determination of mutation in female germ cells using transgenic assays (31).
Jos on syytä tarkastella erityisesti sukusoluihin aiheutuvia vaikutuksia, kuten positiivisia vasteita somaattisissa soluissa, sukusolujen kudoksia olisi arvioitava mutaatioiden osalta.
The sampling times for male germ cells should be selected so that the range of exposed cell types throughout germ cell development is sampled, and so that the stage targeted in the sampling has received sufficient exposure.
Mittausmenetelmät
The time for the progression of developing germ cells from spermatogonial stem cells to mature sperm reaching the vas deferens/cauda epididymisis ~ 49 days for the mouse (36) and ~70 days for the rat (34) (35).
Vakiomuotoisia laboratoriomenettelyjä tai julkaistuja menetelmiä mutanttien seulomiseksi saadaan suositelluista siirtogeenisiä eläimiä koskevista malleista:
Following a 28-day exposure with a subsequent three day sampling period, accumulated sperm collected from the vas deferens/cauda epididymis (7)(8) will represent a population of cells exposed during approximately the latter half of spermatogenesis, which includes the meiotic and postmeiotic period, but not the spermatogonial or stem cell period.
lacZ lambda bacteriophage and plasmid -malli (30);
In order to adequately sample cells in the vas deferens/cauda epididymis that were spermatogonial stem cells during the exposure period, an additional sampling time at a minimum of 7 weeks (mice) or 10 weeks (rat), after the end of treatment is required.
lacI mouse -malli (2)(18);
Cells extruded from seminiferous tubules after a 28 + 3 day regimen comprise a mixed population enriched for all stages of developing germ cells (7) (8).
gpt delta mouse -malli (22);
Sampling these cells for gene mutation detection does not provide as precise an assessment of the stages at which germ cell mutations are induced as can be obtained from sampling spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis (since there is a range of germ cell types sampled from the tubules, and there will be some somatic cells contaminating this cell population).
gpt delta rat -malli (28);
However, sampling cells from seminiferous tubules in addition to spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis following only a 28 + 3 day sampling regimen would provide some coverage of cells exposed across the majority of phases of germ cell development, and may be useful for detecting some germ cell mutagens.
Muutoksia olisi perusteltava ja dokumentoitava asianmukaisesti.
General clinical observations should be made at least once a day, preferably at the same time(s) each day and considering the peak period of anticipated effects after dosing.
Tietoja useista pakkauksista voidaan yhdistää ja käyttää, jotta saadaan sopiva määrä plakkeja tai pesäkkeitä.
The health condition of the animals should be recorded.
Tarve suurelle määrälle pakkausten reaktioita — jotta saadaan sopiva määrä plakkeja — voi kuitenkin olla osoitus heikkolaatuisesta DNA:sta.
At least twice daily, all animals should be observed for morbidity and mortality.
Tällaisissa tapauksissa tietoja olisi tarkasteltava varovaisesti, koska ne voivat olla epäluotettavia.
All animals should be weighed at least once a week, and at sacrifice.
Plakkien tai pesäkkeiden optimaalista kokonaismäärää DNA-näytettä kohti sääntelee tilastollinen todennäköisyys seuloa riittävän monta mutanttia tietyllä spontaanimutaatiotaajuudella.
Measurements of food consumption should be made at least weekly.
Yleisesti ottaen tarvitaan vähintään 125000–300000 plakkia, jos spontaanimutaatiotaajuus on 3 × 10–5 (15).
If the test chemical is administered via the drinking water, water consumption should be measured at each change of water and at least weekly.
Big Blue® lacI -testimallin osalta on tärkeää osoittaa, että koko sarja mutanttien värin fenotyyppejä voidaan havaita sisällyttämällä sopivia värikontrolleja rinnakkain kunkin maljauksen kanssa.
Animals exhibiting non-lethal indicators of excess toxicity should be euthanatised prior to completion of the test period (23).
Kudoksia ja saatua näytteitä (eriä) olisi käsiteltävä ja analysoitava käyttäen lohkokoetta, jossa kantaja-ainekontrollin/liuotinkontrollin ryhmän, positiivisen kontrollin ryhmän (jos sitä käytetään) tai positiivisen kontrolli-DNA:n ryhmän (tarvittaessa) ja kunkin koeryhmän erät käsitellään yhdessä.
Tissue Collection
Tulosten käsittely
The rationale for tissue collection should be defined clearly.
Yksittäisiä eläimiä koskevat tiedot olisi esitettävä taulukossa.
Since it is possible to study mutation induction in virtually any tissue, the selection of tissues to be collected should be based upon the reason for conducting the study and any existing mutagenicity, carcinogenicity or toxicity data for the chemical under investigation.
Kokeellinen yksikkö on eläin.
Important factors for consideration should include the route of administration (based on likely human exposure route(s)), the predicted tissue distribution, and the possible mechanism of action.
Raporttiin olisi sisällyttävä kustakin eläimestä plakkia muodostavien yksiköiden tai pesäkkeitä muodostavien yksiköiden kokonaismäärä, mutanttien määrä ja kunkin kudoksen mutaatiotaajuus.
In the absence of any background information, several somatic tissues as may be of interest should be collected.
Jos esiintyy useita reaktioita pakkausta/vapautumista kohti, olisi ilmoitettava reaktioiden määrä DNA-näytettä kohti.
These should represent rapidly proliferating, slowly proliferating and site of contact tissues.
Tiedot kustakin yksittäisestä reaktiosta olisi säilytettävä, mutta ainoastaan plakkia muodostavien yksiköiden tai pesäkkeitä muodostavien yksiköiden kokonaismäärä olisi ilmoitettava.
In addition, spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis and developing germ cells from the seminiferous tubules (as described in paragraphs 32 and 33) should be collected and stored in case future analysis of germ cell mutagenicity is required.
Tiedot 34 kohdassa tarkoitetuista myrkyllisyysvaikutuksista ja kliinisistä oireista olisi ilmoitettava.
Organ weights should be obtained, and for larger organs, the same area should be collected from all animals.
Sekventointitulokset olisi esitettävä kustakin analysoidusta mutantista.
Storage of Tissues and DNA
Tästä johtuvat mutaatiotaajuutta koskevat laskelmat kustakin eläimestä ja kudoksesta olisi esitettävä.
Tissues (or tissue homogenates) should be stored at or below – 70 °C and be used for DNA isolation within 5 years.
Tilastollinen arviointi ja tulosten tulkinta
Isolated DNA, stored refrigerated at 4 °C in appropriate buffer, should be used optimally for mutation analysis within 1 year.
Positiivisen tuloksen määrittelemistä varten on useita kriteerejä, kuten annoksesta riippuva mutaatiotaajuuden lisääntyminen, tai mutaatiotaajuuden selkeä lisääntyminen yhdessä koeryhmässä verrattuna liuotinta/kantaja-ainetta saavaan kontrolliryhmään.
Selection of Tissues for Mutant Analysis
Vähintään kolmea annosryhmää olisi analysoitava, jotta tarjotaan riittävästi tietoa altistumis-vastesuhdetta koskevaa analyysia varten.
The choice of tissues should be based on considerations such as:
Vaikka tulosten biologinen merkitys on ensisijainen näkökohta, asianmukaisia tilastollisia menetelmiä voidaan käyttää apuna testin tulosten arvioinnissa (4)(14)(15)(25)(26).
the route of administration or site of first contact (e.g. glandular stomach if administration is oral, lung if administration is through inhalation, or skin if topical application has been used);
Käytetyissä tilastollisissa testeissä kokeellisena yksikkönä olisi pidettävä eläintä.
and 2) pharmacokinetic parameters observed in general toxicity studies, which indicate tissue disposition, retention or accumulation, or target organs for toxicity.
Testikemikaalia, joiden osalta tulokset eivät täytä edellä mainittuja kriteerejä missään kudoksessa, pidetään tässä testissä ei-mutageenisenä.
If studies are conducted to follow up carcinogenicity studies, target tissues for carcinogenicity should be considered.
Negatiivisen tuloksen biologista merkitystä varten kudosten altistus olisi vahvistettava.
The choice of tissues for analysis should maximise the detection of chemicals that are direct-acting in vitro mutagens, rapidly metabolised, highly reactive or poorly absorbed, or those for which the target tissue is determined by route of administration (6).
DNA:n sekvensointianalyysien osalta on saatavilla useita tilastollisia menetelmiä, joilla tuetaan tulosten tulkintaa (1)(5)(9)(19).
In the absence of background information and taking into consideration the site of contact due to route of administration, the liver and at least one rapidly dividing tissue (e.g. glandular stomach, bone marrow) should be evaluated for mutagenicity.
Sen tarkastelemisella, ovatko havaitut arvot aikaisemman kontrollin arvojen puitteissa, voidaan antaa ohjeita, kun arvioidaan vasteen biologista merkitystä (32).
In most cases, the above requirements can be achieved from analyses of two carefully selected tissues, but in some cases, three or more would be needed.
tunnistetiedot mukaan lukien CAS-numero, jos tiedossa,
If there are reasons to be specifically concerned about germ cell effects, including positive responses in somatic cells, germ cell tissues should be evaluated for mutations.
lähde, erän numero, jos saatavilla
Methods of Measurement
fysikaalinen olomuoto ja puhtaus
Standard laboratory or published methods for the detection of mutants are available for the recommended transgenic models:
tutkimuksen suorittamiselle merkitykselliset fysikaalis-kemialliset ominaisuudet
lacZ lambda bacteriophage and plasmid (30);
testikemikaalin stabiilius, jos tiedossa
lacI mouse (2) (18);
Liuotin/kantaja-aine:
gpt delta mouse (22);
kantaja-aineen valintaperusteet
gpt delta rat (28);
tutkittavan aineen liukoisuus ja stabiliteetti liuottimessa/kantaja-aineessa, jos tiedossa
Modifications should be justified and properly documented.
ruoka-aineen, juomaveden tai inhalaatioiden formulointi
Data from multiple packagings can be aggregated and used to reach an adequate number of plaques or colonies.
formulointien analyyttiset määritelmät (kuten stabiilius, homogeenisyys, nimelliset pitoisuudet)
However, the need for a large number of packaging reactions to reach the appropriate number of plaques may be an indication of poor DNA quality.
käytetty eläinlaji/kanta ja perustelu sen valinnalle
In such cases, data should be considered cautiously because they may be unreliable.
eläinten lukumäärä, ikä ja sukupuoli
The optimal total number of plaques or colonies per DNA sample is governed by the statistical probability of detecting sufficient numbers of mutants at a given spontaneous mutant frequency.
toimittaja, häkit, ravinto ja niin edelleen
In general, a minimum of 125000 to 300000 plaques is required if the spontaneous mutant frequency is in the order of 3 × 10–5 (15).
eläinten yksilöllinen paino testin alussa, myös painon vaihteluväli, keskiarvo ja keskihajonta kussakin ryhmässä.
For the Big Blue® lacI assay, it is important to demonstrate that the whole range of mutant colour phenotypes can be detected by inclusion of appropriate colour controls concurrent with each plating.
positiiviset ja negatiiviset (kantaja-aine/liuotin) kontrollitiedot
Tissues and the resulting samples (items) should be processed and analysed using a block design, where items from the vehicle/solvent control group, the positive control group (if used) or positive control DNA (where appropriate), and each treatment group are processed together.
raja-annostutkimuksen tulokset
Treatment of Results
testikemikaalin valmistelun yksityiskohdat
Individual animal data should be presented in tabular form.
antotavan valintaperusteet
The experimental unit is the animal.
eläinten myrkyllisyysvaikutusten mittaamista koskevat menetelmät, missä käytetään tarvittaessa histopatologisia tai verianalyyseja, ja tiedot siitä, kuinka usein eläimiä koskevat havainnot ja ruumiinpainon mittaukset otettiin
The report should include the total number of plaque-forming units (pfu) or colony-forming units (cfu), the number of mutants, and the mutant frequency for each tissue from each animal.
menettelyt, joilla varmistetaan, että testikemikaali välittyi kohdekudokseen tai verenkiertoon, jos saadaan negatiivisia tuloksia