natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Detection of cows’ milk in cheeses from ewes’ milk, goats’ milk and buffalos’ milk and mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk is done via the γ3- and γ2-caseins, whose isoelectric points range between pH 6,5 and pH 7,5 (Figures 4 a, b, Figure 5).
Lehmänmaidon toteaminen uuhen-, vuohen- ja puhvelinmaidosta sekä uuhen-, vuohen- ja puhvelinmaidon seoksesta valmistetuissa juustoissa tapahtuu γ2- ja γ3-kaseiinien välityksellä, joiden isoelektriset pisteet vaihtelevat välillä pH 6,5–7,5 (kuvat 4 a ja 4 b, kuva 5).
The detection limit is less than 0,5 %.
Toteamisraja on alle 0,5 %.
Visual estimation
Silmämääräinen arviointi
For visual evaluation of the amount of bovine milk it is advisable to adjust the concentrations of samples and standards to obtain the same level of intensity of the ovine, caprine and/or buffalo γ2- and γ3-caseins (see ‘γ2 E,G,B’ and ‘γ3 E,G,B’ in Figures 4 a, b and Figure 5).
Naudanmaidon määrän arvioimiseksi silmämääräisesti on suositeltavaa säätää näytteiden ja standardien pitoisuudet samantasoisten väri-intensiteettien saamiseksi lampaan, vuohen ja/tai puhvelin γ2- ja γ3-kaseiineille (ks. ”γ2 E, G, B” ja ”γ3 E, G, B” kuvissa 4 a ja 4 b ja kuvassa 5).
After which the amount of bovine milk (less than, equal to or greater than 1 %) in the unknown sample can be judged directly by comparing the intensity of the bovine γ3- and γ2-caseins (see ‘γ3 C’ and ‘γ2 C’ in Figures 4a, b and Figure 5) to those of the 0 % and 1 % reference standards (ewe, goat) or, laboratory interim-standards (buffalo).
Naudanmaidon määrä (vähemmän kuin, yhtä paljon kuin tai enemmän kuin 1 %) tuntemattomassa näytteessä voidaan todeta suoraan vertaamalla naudan γ3- ja γ2-kaseiinien isoelektrisessä fokusoinnissa saadun värin intensiteettiä (ks. ”γ3 C” ja ”γ2 C” kuvissa 4 a, 4 b ja 5) vastaaviin 0 %:n ja 1 %:n vertailustandardeihin (uuhi, vuohi) tai laboratoriostandardeihin (puhveli).
Densitometric estimation
Tiheysmittaukseen perustuva arviointi
If available, apply densitometry (5.19) for the determination of the peak area ratio of bovine to ovine, caprine and/or buffalo γ2- and γ3-caseins (see Figure 5).
Jos mahdollista, käytetään tiheysmittaria (5.19) naudan γ2- ja γ3-kaseiinien piikkien pinta-alojen määrittämiseksi suhteessa lampaan, vuohen ja/tai puhvelin vastaaviin (ks. kuva 5).
Compare this value to γ2- and γ3-casein peak area ratio of the 1 % reference standard (ewe, goat) or laboratory interim-standard (buffalo) analysed on the same gel.
Tätä arvoa verrataan 1 %:n vertailustandardin (uuhi, vuohi) tai laboratorion standardin (puhveli) γ2- ja γ3-kaseiinipiikkien pinta-alan suhteeseen, kun analysointi on suoritettu samassa geelissä.
Note: The method is operating satisfactorily, if there is a clear positive signal for both bovine γ2- and γ3-caseins in the 1 % reference standard but not in the 0 % reference standard.
Huomautus: Menetelmä toimii tyydyttävästi, jos 1 %:n vertailustandardissa esiintyy selvä positiivinen merkki sekä naudan γ2- että γ3-kaseiineista, muttei merkkejä 0 %:n vertailustandardeissa.
If not, optimize the procedure following the details of the method precisely.
Jos näin ei ole, menettelyä on parannettava noudattamalla täsmällisesti menetelmän yksityiskohtia.
A sample is judged as being positive, if both bovine γ2- and γ3-caseins or the corresponding peak area ratios are equal to or greater than the level of the 1 % reference standard.
Näyte todetaan positiiviseksi, jos naudan sekä γ2- että γ3-kaseiinien tai vastaavien piikkien pinta-alojen suhteet ovat yhtä suuret tai suuremmat kuin 1 %:n vertailustandardin taso.
Krause I., Berner I, Klostermeyer H.: Sensitive detection of cow milk in ewe and goat milk and cheese by carrier ampholyte — and carrier ampholyte/immobilized pH gradient — isoelectric focusing of γ-caseins using plasmin as signal amplifier. in: Electrophoresis-Forum 89 (B. J. Radola, ed.) pp 389-393, Bode-Verlag, München (1989).
Krause I., Berner I, Klostermeyer H.: Sensitive detection of cow milk in ewe and goat milk and cheese by carrier ampholyte – and carrier ampholyte/immobilized pH gradient – isoelectric focusing of γ-caseins using plasmin as signal amplifier. in: Electrophoresis-Forum 89 (B. J. Radola, ed.) pp 389–393, Bode-Verlag, München (1989).
Radola B.J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50-100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films.
Radola B.J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50–100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films.
Schematic drawing of the covering sheet
Kuva peitearkista
Spacer tape
Väliketeippi
Polyester sheet
Polyesteriarkki
Casein layer floating between aqueous and organic phases after centrifugation
Vesifaasin ja orgaanisen faasin välissä kelluva kaseiinikerros sentrifugoinnin jälkeen
H2O-Phase
H2O-faasi
CH2Cl2-Phase
CH2Cl2-faasi
Flapping technique for casting of ultrathin polyacrylamide gels
Sulkemistekniikka erittäin ohuiden polyakryyliamidigeelien valmistamiseksi
a = spacer tape (0,25 mm); b = covering sheet (5.3); c, e = glass plates (5.1); d = gel solution (4.1.2); f = gel carrier sheet (5.2)
a = väliketeippi (0,25 mm); b = peitearkki (5.3); c, e = lasilevyt (5.1); d = geeliliuos (4.1.2); f = geelin kantaja-arkki (5.2)
Figure 4a
Kuva 4 a
Isoelectric focusing of plasmin-treated caseins from ewes’ and goats’ milk cheese containing different amounts of cows’ milk.
Uuhen- ja vuohenmaidosta valmistetun, eri määriä lehmänmaitoa sisältävän juuston plasmiinilla käsiteltyjen kaseiinien isoelektrinen fokusointi
% CM = percentage of cows’ milk, C = cow, E = ewe, G = goat
% CM = lehmänmaidon prosenttiosuus, C = lehmä, E = uuhi, G = vuohi.
Upper half of the IEF gel is shown.
Kuvassa on esitetty IEF-geelin ylempi puolisko.
Figure 4b
Kuva 4 b
Isoelectric focusing of plasmin treated caseins from cheese made from mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk containing different amounts of cows’ milk.
Uuhen-, vuohen- ja puhvelinmaidon seoksista valmistetun, eri määriä lehmänmaitoa sisältävän juuston plasmiinilla käsiteltyjen kaseiinien isoelektrinen fokusointi
% CM = percentage of cows’ milk; 1 + = sample containing 1 % of cows’ milk and spiked with pure bovine casein at the middle of the track.
% CM = lehmänmaidon prosenttiosuus; 1 + = näyte, joka sisältää 1 % lehmänmaitoa ja johon on lisätty puhdasta naudan kaseiinia aplikoidun elektroforeesinäytteen keskikohdalle.
C = cow, E = ewe, G = goat, B = buffalo.
C = lehmä, E = uuhi; G = vuohi, B = puhveli.
Total separation distance of the IEF gel is shown.
Kuvassa on esitetty IEF-geelin koko erotusetäisyys.
Superposition of densitograms of standards (STD) and cheese samples made from a mixture of ewes’ and goats’ milk after isoelectric focusing
Standardin (STD) sekä uuhen- ja vuohenmaidon seoksesta valmistetun juuston näytteiden densitogrammit päällekkäin asetettuna isoelektrisen fokusoinnin jälkeen.
a,b = standards containing 0 and 1 % of cows’ milk; c-g = cheese samples containing 0, 1, 2, 3 and 7 % of cows’ milk.
a, b = standardit, jotka sisältävät 0 ja 1 % lehmänmaitoa; c–g = juustonäytteet, jotka sisältävät 0, 1, 2, 3 ja 7 % lehmänmaitoa.
C = cow, E = ewe, G = goat.
C = lehmä, E = uuhi, G = vuohi.
Upper half of the IEF gel was scanned at λ = 634 nm.
Ylempi puolisko IEF-geelistä tutkittiin aallonpituudella λ = 634 nm.
The produce Ampholine® pH 3,5-9,5 (Pharmacia) and Resolyte® pH 5-7 and pH 6-8 (BDH, Merck) have proved particularly suitable for obtaining the required separation of γ-caseins.
Valmisteet Ampholine® pH 3,5–9,5 (Pharmacia) ja Resolyte® pH 5–7 ja pH 6–8 (BHD, Merck) ovat osoittautuneet erityisen sopiviksi γ-kaseiinien erottamiseksi.
Sample application: After pre-focusing (step 1), pipette 18 μl of the sample and standard solutions onto the sample applicators (10 × 5 mm), place them on the gel at 1 mm intervals from each other and 5 mm longitudinally from the anode and press lightly.
Näytteiden lisääminen: Esifokusoinnin jälkeen (vaihe 1) pipetoidaan 18 μl näytettä ja standardiliuoksia näyteaplikaattoreille (10 × 5 mm), asetetaan ne geelin päälle 1 mm:n etäisyydellä toisistaan ja 5 mm:n päähän pituussuunnassa anodista ja painetaan niitä kevyesti.
Carry out focusing using the above conditions, carefully removing the sample applicators after the 60 minutes of sample focusing.
Fokusoidaan edellä annettuja olosuhteita noudattaen, ja näyteapplikaattorit poistetaan varovasti, kun näytettä on fokusoitu 60 minuuttia.
REFERENCE METHOD FOR DETECTING COLIFORMS IN BUTTER, SKIMMED-MILK POWDER, CASEIN AND CASEINATES
VERTAILUMENETELMÄ KOLIFORMIEN OSOITTAMISEKSI VOISSA, RASVATTOMASSA MAITOJAUHEESSA, KASEIINISSA JA KASEINAATEISSA
PREPARATION OF SAMPLES
NÄYTTEIDEN VALMISTELU
ISO standard 8261
ISO-standardi 8261
ISO standard 4831
ISO-standardi 4831
Samples corresponding to 1 g of butter or 0,1 g of skimmed-milk powder or casein/caseinates are inoculated in the culture medium.
Näytteet, jotka vastaavat 1 g:aa voita tai 0,1 g:aa rasvatonta maitojauhetta tai kaseiinia/kaseinaatteja, inokuloidaan kasvatusväliaineeseen.
Three tubes are inoculated per sample.
Näytettä pannaan kolmeen putkeen.
If the 3 tubes produce 3 negative results, the result is ‘compliant’
Jos kolme putkea antaa kolme negatiivista tulosta, tulos on ”vaatimustenmukainen”.
If the 3 tubes produce 2 or 3 positive results, the result is ‘non-compliant’
Jos kolme putkea antaa kaksi tai kolme positiivista tulosta, tulos on ”vaatimustenvastainen”.
If the 3 tubes produce 2 negative results, the analysis is redone twice (with two tubes)
Jos kolme putkea antaa kaksi negatiivista tulosta, analyysi on tehtävä kahdesti uudelleen (kahdella putkella).
If the 2 results are negative, the result is ‘compliant’
Jos nämä kaksi tulosta ovat negatiivisia, tulos on ”vaatimustenmukainen”.
If at least 1 result is positive, the result is ‘non-compliant’.
Jos yksikin tulos on positiivinen, tulos on ”vaatimustenvastainen”.
(Article 8)
(8 artikla)
DETERMINATION OF LACTOSE IN COMPOUND FEEDINGSTUFFS
LAKTOOSIPITOISUUDEN MÄÄRITTÄMINEN REHUSEOKSISSA
Determination of lactose in compound feedingstuffs.
Laktoosipitoisuuden määrittäminen rehuseoksissa
The content of lactose is defined as the percentage by mass as determined by the procedure described.
Laktoosipitoisuus ilmoitetaan massaprosentteina ja määritetään tässä esitetyllä menetelmällä.
The anhydrous lactose content is expressed as g per 100 g.
Vedetön laktoosipitoisuus ilmaistaan grammoina 100:aa grammaa kohden.
The compound feedingstuff is reconstituted with water.
Rehuseos rekonstituoidaan vedellä.
A ‘Biggs’ solution is added to a dilute weighed aliquot to precipitate out the fat and the protein component fractions of the compound feedingstuff.
Lisätään Biggs-liuosta laimeaan punnittuun määräosaan rehuseoksen sisältämän rasvan ja proteiinien saostamiseksi.
The sample is filtered (or centrifuged) and the filtrate (or supernatant) is injected on a cation exchange HPLC column in the lead form using HPLC grade water as the mobile phase.
Näyte suodatetaan (tai sentrifugoidaan) ja suodos (tai supernatantti) injektoidaan kationinvaihto-HPLC-kolonniin (lyijymuodossa) käyttämällä liikkuvana faasina HPLC-laatuista vettä.
The eluted lactose is detected by a differential refractometer.
Eluoitunut laktoosi osoitetaan differentiaalisella taitekerroindetektorilla.
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and degassed HPLC grade water.
Jollei toisin täsmennetä, kaikkien reagenssien on oltava tunnustettua analyysilaatua; lisäksi on käytettävä vain HPLC-laatua olevaa vettä, josta on poistettu kaasut.
D-Lactose monohydrate ((C12H22)O11H2O) can take up additional moisture.
D-laktoosimonohydraatti ((C12H22)O11. H2O) voi imeä itseensä ylimääräistä kosteutta.
Before use measure the real amount of water by Karl-Fisher or remove the additional moisture by placing lactose in an oven at 105 °C for 8 hours (the lactose does not lose its crystal water by this treatment).
Ennen käyttöä mitataan veden todellinen määrä Karl-Fisher-menetelmällä tai poistetaan ylimääräinen kosteus pitämällä laktoosia 8 tuntia uunissa, lämpötila 105 °C (tässä käsittelyssä laktoosista ei katoa kidevesi).
Concentrated Biggs/Szijarto solution
Konsentroitu Biggs/Szijarto-liuos
Dissolve 9,10 g zinc acetate ehydrate (Zn(CH3COO)2.2H2O) and 5,46 g phosphotungstic acid monohydrate (H3[P(W3O10)4.xH2O]) in about 70 ml with HPLC grade water (6.8) in a 100 ml volumetric flask.
Liuotetaan 9,10 g sinkkiasetaattidihydraattia (Zn(CH3COO)2.2H2O) ja 5,46 g fosfowolframihappomonohydraattia (H3[P(W3O10)4.xH2O]) noin 70 ml:aan HPLC-laatuista vettä (6.8) 100 ml:n mittapullossa.
Add 5,81 ml glacial acetic acid (CH3COOH).
Lisätään 5,81 ml jääetikkaa (CH3COOH).
Dilute to the 100 ml mark with HPLC grade water (6.8) water and mix.
Laimennetaan 100 ml:n merkkiin saakka HPLC-laadun vedellä (6.8) ja sekoitetaan.
The solution can be stored at room temperature for 1 year.
Liuos säilyy huoneenlämmössä yhden vuoden ajan.
Diluted Biggs/Szijarto solution
Laimea Biggs/Szijarto-liuos
Dilute 25 ml concentrated Biggs/Szijarto solution (5.3) with water to 500 ml using a volumetric flask.
Laimennetaan 25 ml konsentroitua Biggs/Szijarto-liuosta (5.3) vedellä 500 ml:aan mittapullossa.
The solution can be stored at room temperature for 1 month.
Liuosta voidaan säilyttää huoneenlämmössä yhden kuukauden ajan.
Preparation of HPLC grade water
HPLC-laatua olevan veden valmistus
Filter the ultra pure water (6.8) by using the vacuum system filtration (6.9).
Suodatetaan ultrapuhdasta vettä (6.8) tyhjiössä (6.9).
To improve the pump performance and to obtain a stable baseline, degas the mobile phase daily by selecting one of the available techniques such as sparging by helium, sonication, vacuum or in-line degassing system.
Pumpun toiminnan parantamiseksi ja vakaan perusviivan saamiseksi liikkuvasta faasista poistetaan kaasut päivittäin jollakin käytettävissä olevista tekniikoista, kuten heliumilla, ultraäänellä, tyhjiössä tai in-line-kaasunpoistojärjestelmällä.
Note: In order to prolong column life it is essential that the carbon dioxide content of the eluent is as low as possible and that re-uptake is prevented.
Huomautus: Kolonnin käyttöiän pidentämiseksi eluentin hiilidioksidipitoisuuden on oltava mahdollisimman alhainen eikä eluaattia saa päästä takaisin kolonniin.
Usual laboratory equipment and, in particular, the following:
Tavalliset laboratoriovälineet ja erityisesti seuraavat:
HPLC ion exchange resin column
HPLC-ioninvaihtohartsikolonni
Column packing: 8 % cross-linked polystyrene-divinylbenzene copolymer functionalised with cation-exchange groups in the lead form.
Kolonnin pakkaaminen: 8 % ristisidottu polystyreeni-divinyylibentseenin kopolymeeri, jossa on funktionaalisina ryhminä lyijymuodossa olevia kationinvaihtoryhmiä.
Column dimensions: Length 300 mm, internal diameter ca. 8 mm.
Kolonnin pituus 300 mm, sisäinen halkaisija noin 8 mm.
Use of other diameters is possible provided that the flow-rate is adjusted accordingly.
Halkaisijaltaan erikokoisia kolonneja voidaan käyttää, jos virtausnopeutta muutetaan vastaavasti.
Guard column
Esikolonni
The guard column is a combination of a separate cation exchanger (H+) and an anion exchanger (CO3-), each packed in columns of ca. 30 mm × 4,6 mm (L × ID) (e.g. micro-guard columns in a micro-guard holder) and connected in series or in the form of a mixed bed consisting of AG 50W-X4, -400 mesh (H+) and AG3-X4A, 200–400 mesh (OH-) in the ratio of 35:65 (m/m) manually packed in a column of ca. 20 × 9 mm (L × ID).
Esikolonni on seuraavien yhdistelmä: erillinen kationinvaihtaja (H+) ja anioninvaihtaja (CO3-), jotka molemmat on pakattu noin 30 mm × 4,6 mm (L × ID) kokoisiin kolonneihin (esim. Micro-Guard-kolonni Micro-Guard-pidikkeessä) ja yhdistetty sarjaan tai jotka ovat samassa hartsissa, jossa AG 50W–X4, – 400 mesh (H+) ja AG3-X4A, 200–400 mesh (OH-) ovat manuaalisesti pakattuina suhteessa 35:65 (m/m) noin 20 × 9 mm (L × ID) kokoiseen kolonniin.
Column oven
Kolonniuuni
Oven capable of maintaining a constant temperature of 85 °C ± 1 °C.
Uuni, joka voidaan pitää tasaisessa lämpötilassa 85 °C ± 1 °C.
HPLC pump
HPLC-pumppu
Pump capable of generating a constant flow-rate (< 0,5 % fluctuations) at 0,2-1,0 m/min.
Pumppu, joka pystyy kehittämään tasaisen virtausnopeuden (< 0,5 % vaihtelu) 0,2–1,0 m/min.
HPLC injection device
HPLC-injektiolaite
Auto sampler capable of injecting 25 µL and having a repeatability < 0,5 %.
Automaattinen näytteensyöttäjä, joka pystyy injektoimaan 25 µL ja jonka toistettavuus on < 0,5 %.
Alternatively a manual device may be used (same requirements as the auto sampler).
Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää manuaalista laitetta (samat vaatimukset kuin automaattisella näytteensyöttäjällä).
HPLC detector
HPLC-detektori
Highly sensitive refractive index detector having a noise < 5,10-9 RI units.
Erittäin herkkä taitekerroindetektori, jonka kohina on < 5,10-9 RI-yksikköä.
Integrator
Integraattori
Software or a dedicated integrator to perform data acquisition, processing and generating peak areas and peak heights, which can be converted to lactose concentrations.
Ohjelmisto tai laitteeseen kuuluva integraattori, joka kerää ja prosessoi datan sekä laskee piikkien pinta-alat ja korkeudet, jotka voidaan muuntaa laktoosipitoisuuksiksi.
Water purification unit
Vedenpuhdistusyksikkö
System capable to provide ultra pure water (type 1) having a resistivity >14 MΩ.cm.
Järjestelmä, jolla saadaan ultrapuhdasta vettä (tyyppi 1), jonka vastus on >14 MΩ.cm.
Solvent filtration unit
Liuottimien suodatusyksikkö
System that enables filtration of the water using 0,45 µm pore size membrane filter.
Järjestelmä veden suodattamiseksi kalvosuodattimella, jonka huokoskoko on 0,45 µm.
Note: Many water purification units (6.8) have a built in 0,45 or 0,2 µm filtration.
Huomautus: Monissa vedenpuhdistusyksiköissä (6.8) on sisäänrakennettu 0,45 tai 0,2 µm:n suodatin.
Additional filtration can be omitted if this water is directly used.
Jos tätä vettä käytetään suoraan, lisäsuodatus voidaan jättää tekemättä.
Analytical balance
analyysivaaka
Balance having a read-out of 0,1 mg.
Vaaka, jossa saa lukemat 0,1 mg:n tarkkuudella
Water bath
Vesihaude
Water bath capable of maintaining a temperature at 40 °C (±0,5).
Vesihaude, joka voidaan pitää lämpötilassa 40 °C (±0,5).
Centrifuge
Sentrifugi
Having a capacity of generating at least 3000 g for Eppendorf vials or equivalent or larger type of vials.
Sentrifugi, joka pystyy kehittämään vähintään 3000 g Eppendorf-putkille tai vastaaville tai suuremmille putkille.
Volumetric flask 50 mL
Mittapullo, 50 mL
Capacity of 50 mL, class A.
Vetoisuus 50 mL, A-luokka.
Note: Flasks of other capacity can be used by taking into account the volume factor.
Huomautus: Muunvetoisia pulloja voidaan käyttää, jos vetoisuus otetaan huomioon.
Volumetric flask 100 mL
Mittapullo, 100 mL
Capacity of 100 mL, class A.
Vetoisuus 100 mL, A-luokka.
Graduated pipette
Mittapipetti
Graduated pipette of 10 mL
Mittapipetti, 10 mL
Note: Alternatively, a handpipettor having a capacity of 5 mL can be used by adding twice a volume of 5 mL of reagent (5.3).
Huomautus: Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää 5 mL:n pipetointilaitetta, jolloin pipetoidaan 5 mL:n reagenssimäärä (5.3) kahdesti.
It is important that the laboratory receives a sample taken according to ISO 707/IDF 50, which is truly representative and has not been damaged during transport or storage.
Laboratorion on tärkeää saada ISO-standardia ISO 707/IDF 50 noudattaen otettu aidosti edustava näyte, joka ei ole vahingoittunut kuljetuksen tai varastoinnin aikana.
PREPARATION OF LACTOSE STANDARD SOLUTION
STANDARDILAKTOOSILIUOKSEN VALMISTAMINEN
Standard 1
Standardi 1
Dissolve an accurately (read-out at 0,1 mg) weighed amount of ca. 50 mg lactose monohydrate (5.2) in a volumetric flask of 100 mL (6.14) and make up to the mark with water.
Liuotetaan tarkasti (0,1 mg:n tarkkuudella) mitattu noin 50 mg:n määrä laktoosimonohydraattia (5.2) 100 mL:n mittapulloon (6.14) ja täytetään merkkiin vedellä.
Standard 2
Standardi 2
Dissolve an accurately (read-out at 0,1 mg) weighed amount of ca. 100 mg lactose monohydrate (5.2) in a volumetric flask of 100 mL (6.14) and make up to the mark with water.
Liuotetaan tarkasti (0,1 mg:n tarkkuudella) mitattu noin 100 mg:n määrä laktoosimonohydraattia (5.2) 100 mL:n mittapulloon (6.14) ja täytetään merkkiin vedellä.
Note: The standard solutions can be stored for maximal 1 week at ca. 5 °C.
Huomautus: Standardiliuoksia voidaan varastoida enintään yksi viikko noin 5 °C:ssa.
PREPARATION OF THE TEST SAMPLE
NÄYTTEEN ESIKÄSITTELY
Reconstitution of the sample
Näytteen ennastus
Weigh ca. 5 g of the powder into a flask of 50 mL (6.13) and note the weight at 1 mg accuracy (W1, (11)).
Mitataan noin 5 g jauhetta 50 mL:n pulloon (6.13) ja merkitään paino muistiin 1 mg:n tarkkuudella (W1 (11)).
Let it subsequently cool to room temperature.
Annetaan jäähtyä huoneenlämpöiseksi.
Sample treatment
Näytteen käsittely
Take ca. 1 g of this solution and deposit it in a 50 mL volumetric flask (6.13), note the weight at 1 mg accuracy (W3 (11)), add 20 mL of water followed by the addition of 10 mL diluted Biggs/Szijarto reagent (5.4), make up to the mark with water.
Otetaan noin 1 g tätä liuosta ja pannaan se 50 mL:n mittapulloon (6.13), merkitään paino muistiin 1 mg:n tarkkuudella (W3 (11)), lisätään 20 mL vettä ja 10 mL laimeaa Biggs/Szijarto-reagenssia (5.4) ja täytetään mittaan vedellä.
Gently invert the flask 5 times during the first 30 min.
Käännellään pulloa varovasti 5 kertaa ensimmäisten 30 minuutin aikana.
After 1 hour take an aliquot and centrifuge (6.12) at 3000 g for 10 min (higher g can be used at correspondingly shorter time).
Otetaan tunnin kuluttua määränäyte, joka sentrifugoidaan (6.12) 3000 g:ssä 10 minuutin ajan (voidaan käyttää korkeampaa g-arvoa vastaavasti lyhyemmän ajan).
Use an aliquot of the supernatant for HPLC analysis.
HPLC-määritykseen käytetään määräosa supernatantista.
HPLC DETERMINATION
HPLC-MÄÄRITYS
Preliminary preparation of HPLC
HPLC:n esivalmistelu
Installation of the column and pre-column
Kolonnin ja esikolonnin asentaminen
Install the pre-column (6.2) outside the column oven (6.3) and the column (6.1) in the oven.
Asenna esikolonni (6.2) kolonniuunin ulkopuolelle (6.3) ja kolonni (6.1) uuniin.
Note: If the oven does not contain tubing to preheat the eluent, it is necessary that the eluent passes ca. 15 cm stainless steel tubing in the oven before entering the column (it is absolutely necessary that the eluent has heated up before entering the column, otherwise peak broadening shall occur).
Huomautus: Jos uunissa ei ole eluointiliuoksen esikuumentamiseen tarkoitettua putkistoa, eluointiliuoksen on kuljettava uunissa noin 15 cm:n pituisessa ruostumattomasta teräksestä valmistetussa putkistossa ennen kolonniin menoa (eluointiliuos on ehdottomasti lämmitettävä ennen kolonniin menoa, koska muutoin piikki levenee).
Detector and initial flow
Detektori ja alkuvirtausnopeus
In order to get a stable baseline, turn on the detector (6.6) at least 24 h before starting the analysis.
Vakaan perusviivan saamiseksi detektori (6.6) kytketään päälle vähintään 24 tuntia ennen määrityksen aloittamista.
Set the internal temperature of the detector at 35 °C.
Säädetään detektorin sisälämpötilaksi 35 °C.
Set the flow rate at 0,2 ml/min (6.4) for at least 20 min while the column oven (6.3) is set to room temperature.
Säädetään virtausnopeudeksi 0,2 ml/min (6.4) vähintään 20 minuutin ajaksi ja kolonniuuni (6.3) huoneenlämpötilaan.
Column oven and final flow-rate
Kolonniuuni ja lopullinen virtausnopeus
Set the column oven (6.3) at 85 °C.
Säädetään kolonniuunin (6.3) lämpötilaksi 85 °C.
When that temperature is reached, increase after 30 minutes gradually the flow rate from 0,2 ml/min to 0,6 ml/min (6.4).
Kun lämpötila on saavutettu, lisätään 30 minuutin kuluttua virtausnopeutta asteittain nopeudesta 0,2 ml/min nopeuteen 0,6 ml/min (6.4).
Allow the system to equilibrate with that flow rate and at 85 °C for 2 h or until a stable baseline is obtained.
Annetaan järjestelmän tasaantua kyseisellä virtausnopeudella 85 °C:ssa 2 tunnin ajan tai kunnes perusviiva on vakaa.
Integration
Integrointi