natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Incubate at 37 °C for four to five hours or at 4 °C for 16 hours.
Inkuboidaan 37 °C:ssa 4–5 tunnin ajan tai 4 °C:ssa 16 tunnin ajan.
Wash the wells three times with PBS-Tween (Appendix 4).
Pestään syvennykset kolme kertaa PBS-Tweenillä (lisäys 4).
Add 190 µl of sample extract to at least two wells.
Lisätään 190 µl näyteuutetta vähintään kahteen syvennykseen.
Also add positive and negative controls in two wells each per plate.
Lisätään myös positiiviset ja negatiiviset kontrollit kahteen syvennykseen kullakin levyllä.
Incubate for 16 hr at 4 °C.
Inkuboidaan 16 tunnin ajan 4 °C:ssa.
Prepare an appropriate dilution of R. solanacearum-specific monoclonal antibodies in PBS (Appendix 4) also containing 0,5 % bovine serum albumin (BSA) and add 190 µl to each well.
Valmistetaan sopiva laimennos R. solanacearum -bakteerille spesifisistä monoklonaalisista vasta-aineista fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen (PBS) (lisäys 4), joka sisältää myös 0,5 % naudan seerumin albumiinia (BSA), ja lisätään 190 µl kuhunkin syvennykseen.
Incubate at 37 °C for two hours.
Inkuboidaan kahden tunnin ajan 37 °C:ssa.
Prepare an appropriate dilution of anti-mouse immunoglobulins conjugated with alkaline phosphatase in PBS.
Valmistetaan sopiva laimennus hiiren vasta-aineimmunoglobuliineja konjugoituna emäksiseen fosfataasiin fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa.
Prepare an alkaline phosphatase substrate solution containing 1 mg p-nitrophenyl phosphate per ml of substrate buffer (Appendix 4).
Valmistetaan emäksinen fosfataasisubstraattiliuos, jossa on 1 mg p-nitrofenyylifosfaattia substraattipuskurin millilitraa kohden (lisäys 4).
Incubate in the dark at ambient temperature and read absorbance at 40 nm at regular intervals within 90 minutes.
Inkuboidaan pimeässä huoneenlämmössä ja mitataan absorbanssi 405 nm:ssä säännöllisesti 90 minuutin välein.
Interpretation of ELISA test results:
ELISA-testitulosten tulkinta
The ELISA test is negative if the average optical density (OD) reading from duplicate sample wells is < 2x OD of that in the negative sample extract control well, providing the OD for the positive controls are all above 1,0 (after 90 minutes incubation with the substrate) and are greater than twice the OD obtained for negative sample extracts.
ELISA-testi on negatiivinen, jos kahden näytteen keskimääräinen optinen tiheys (OD) on < 2 × negatiivisen kontrollinäytesyvennyksen OD, sillä edellytyksellä, että kaikkien positiivisten kontrollien OD on suurempi kuin 1,0 (kun kontrolleja on inkuboitu 90 minuutin ajan substraatin kanssa) ja enemmän kuin kaksinkertainen negatiivista näyteuutteista saatuun OD:hen verrattuna.
The ELISA test is positive if the average OD readings from duplicate sample wells is > 2x OD in the negative sample extract well provided that OD readings in all negative control wells are < 2x those in the positive control wells.
ELISA-testi on positiivinen, jos kahden näytesyvennyksen keskimääräinen OD on > 2 × negatiivisen näyteuutteen syvennyksen OD, sillä edellytyksellä, että kaikkien negatiivisten kontrollisyvennysten OD on < 2 × positiivisten kontrollisyvennysten OD.
Negative ELISA readings in positive control wells indicate that the test has not been performed correctly or that it has been inhibited.
Negatiivinen ELISA-tulos positiivisissa kontrollisyvennyksissä osoittaa, että testiä ei ole tehty oikein tai se on inhiboitunut.
Positive ELISA readings in negative control wells indicate that cross-contamination or non-specific antibody binding has occurred.
Positiiviset ELISA-tulokset negatiivisissa kontrollisyvennyksissä ilmaiset, että testissä on tapahtunut ristikontaminaatiota tai epäspesifistä vasta-aineen sitoutumista.
Note: Preliminary testing with this method should permit reproducible detection of 103 to 104 colony-forming units of R. solanacearum per ml added to sample extracts that previously tested negative (preparation see Appendix 3).
Huomautus: Alustavan testauksen tällä menetelmällä pitäisi mahdollistaa se, että voidaan todeta aiemmin negatiivisiksi testattuihin näyteuutteisiin lisätyt R. solanacearum -bakteerin pesäkkeitä muodostavat yksiköt (103–104) (valmistus ks. lisäys 3). Testi on voitava toistaa.
Highest sensitivity of detection can be expected when using freshly prepared sample extract and optimal growth conditions.
Suurinta todentamisherkkyyttä voidaan odottaa, kun käytetään vasta valmistettua näyteuutetta optimaalisissa kasvuolosuhteissa.
However, the method can be successfully applied to extracts that have been stored under glycerol at –68 to –86 °C.
Menetelmää voidaan kuitenkin käyttää menestyksekkäästi myös sellaisiin uutteisiin, joita on varastoitu glyserolissa -68–-86 °C:ssa.
The following protocol is based upon Janse (1988):
Seuraava testausprotokolla on peräisin lähteestä Janse (1988):
Use 10 test plants of a susceptible tomato cultivar (e.g. Moneymaker or cultivar with equivalent susceptibility as determined by the testing laboratory) at the third true leaf stage for each sample.
Testikasveina käytetään 10 kasvia, jotka ovat taudille altista kolmilehtiasteella olevaa tomaattilajiketta (esim. Moneymaker tai lajike, jonka alttiuden testilaboratorio on määrittänyt vastaavaksi).
Symptoms have been show to be less severe and to develop more slowly in eggplant.
Munakoison oireiden on osoitettu olevan lievempiä ja kehittyvän hitaammin.
Where possible, it is therefore recommended to use tomato seedlings.
Tämän vuoksi suositellaan mahdollisuuksien mukaan tomaatin taimien käyttöä.
Distribute 100 µl of sample extract between the test plants.
Jaetaan 100 µl näyteuutetta testikasvien kesken.
Inoculate the plant stems just above the cotyledons using a syringe fitted with a hypodermic needle (not less than 23G).
Inokulointi tehdään ruiskulla, joka on varustettu hypodermisellä neulalla (vähintään 23G), kasvin varsiin juuri sirkkalehtien yläpuolelle.
Distribute the sample between the test plants.
Näyte jaetaan testikasvien kesken.
Holding the plant between two fingers, pipette a drop (approximately 5 - 10 µl) of the suspended pellet on the stem between the cotyledons and the first leaf.
Pidellään kasvia kahden sormen välissä ja tiputetaan pipetillä pisara (noin 5–10 µl) suspendoitua sakkaa varren päälle sirkkalehtien ja ensimmäisen kasvulehden väliin.
Using a sterile scalpel, make a diagonal slit, about 1.0 cm long and approximately 2/3 of the stem thickness deep, starting the cut from the pellet drop.
Tehdään steriilillä leikkausveitsellä sakan pisarasta lähtien vinosti poikittainen noin 1 cm:n viilto, jonka syvyys on noin kaksi kolmannesta varren paksuudesta.
Inoculate by the same technique, five seedlings with an aqueous suspension of 105 to 106 cells per ml prepared from a 48 hr culture of a virulent biovar 2 strain of R. solanacearum as a positive control and with pellet buffer (Appendix 4) as negative control.
Inokuloidaan samalla tekniikalla viisi taimea positiivisena kontrollina vesisuspensiolla, jossa on 105–106 solua/ml virulenttia R. solanacearum -bakteerin biovarin 2 kantaa (positiivinen kontrolli) 48 tunnin viljelmästä, ja negatiivisena kontrollina sakkapuskurilla (lisäys 4).
Separate positive and negative control plants from the other plants to avoid cross-contamination.
Kasvit, joita käytetään positiivisena ja negatiivisena kontrollina, pidetään erillään muista kasveista ristikontaminaation estämiseksi.
Grow the test plants in quarantine facilities for up to four weeks at 25 to 30 °C and high relative humidity with appropriate watering to prevent waterlogging or wilting through water deficiency.
Kasvatetaan testikasveja karanteenioloissa enintään 4 viikon ajan 25–30 °C:ssa ja korkeassa suhteellisessa kosteudessa sopivasti kastellen siten, että vältetään sekä vettyminen että toisaalta kuihtuminen vedenpuutteen vuoksi.
If plants for different samples must be incubated close together, separate them with appropriate screens.
Jos eri näytteisiin kuuluvat kasvit on inkuboitava lähellä toisiaan, ne on eroteltava asianmukaisilla suojilla.
Observe for symptoms of wilting, epinasty, chlorosis and/or stunting.
Tarkkaillaan nuutumisoireita, epinastiaa, kloroosia ja/tai hidastunutta kasvua.
Isolate from infected plants (Section II.3.) and identify purified cultures of presumptive R. solanacearum (Section VI.B.).
Tartunnan saaneista kasveista eristetään (II jakson 3 kohta) ja tunnistetaan oletetun R. solanacearum -bakteerin puhtaat viljelmät (VI jakson B kohta).
If no symptoms are observed after three weeks perform IF/PCR/Isolation on a composite sample of 1 cm stem sections of each test plant taken above the inoculation site.
Jos 3 viikon jälkeen ei havaita oireita, tehdään IF-, PCR- tai eristystesti kokoomanäytteelle, jossa on kustakin testikasvista 1 cm:n mittaisia varren palasia, jotka on otettu inokulointipaikan yläpuolelta.
If the test is positive perform dilution plating (section 4.1).
Jos testi on positiivinen, tehdään laimennussarja (alakohta 4.1).
Identify any purified cultures of presumptive R. solanacearum (Section VI.B.).
Tunnistetaan mahdolliset oletetun R. solanacearum -bakteerin puhtaat viljelmät (VI jakson B kohta).
Interpretation of the bioassay test results
Biologisen määrityksen tulosten tulkinta
The bioassay test is negative if test plants are not infected by R. solanacearum, and provided that R. solanacearum is detected in positive controls.
Biologisen määrityksen tulos on negatiivinen, jos testikasveissa ei ole R. solanacearum -bakteerin aiheuttamaa tartuntaa ja R. solanacearum -bakteeri todetaan positiivisista kontrolleista.
The bioassay test is positive if the test plants are infected by R. solanacearum.
Biologisen määrityksen tulos on positiivinen, jos testikasveissa on R. solanacearum -bakteerin aiheuttama tartunta.
IDENTIFICATION TESTS
TUNNISTUSTESTIT
Identify pure cultures of presumptive R. solanacearum isolates using at least two of the following tests based on different biological principles.
Tunnistetaan oletettujen R. solanacearum -isolaattien puhtaat viljelmät käyttäen ainakin kahta seuraavista eri biologisiin periaatteisiin perustuvista testeistä.
Include known reference strains where appropriate for each test performed (see Appendix 3).
Sisällytetään tarvittaessa tunnetut vertailukannat kuhunkin testiin (ks. lisäys 3).
Determine the following phenotypic properties, which are universally present or absent in R. solanacearum, according to the methods of Lelliott and Stead (1987), Klement et al.
Käytetään seuraavissa lähteissä kuvattuja menetelmiä: Lelliott ja Stead (1987), Klement et al.
Fluorescent pigment production
Fluoresoivan pigmentin muodostus
Poly-ß-hydroxybutyrate inclusions
Poly-β-hydroksibutyraatti-inkluusiot
Oxidation/fermentation (O/F) test
Hapettumis-/käymistesti (O/F)
Catalase activity
Katalaasi aktiivisuus
Kovac’s oxidase test
Kovacin oksidaasitesti
Reduction of nitrate
Nitraatin pelkistyminen
Utilisation of citrate
Sitraatin käyttö
Growth at 40 °C
Kasvu 40 °C:ssa
Growth in 1 % NaCl
Kasvu 1-prosenttisessa NaCl:ssa
Growth in 2 % NaCl
Kasvu 2-prosenttisessa NaCl:ssa
Arginine dihydrolase activity
Arginiinidihydrolaasin aktiivisuus
Gelatine liquefaction
Gelatiinin nesteytyminen
Starch hydrolysis
Tärkkelyksen hydrolyysi
Aesculin hydrolysis
Eskuliinin hydrolyysi
Levan production
Levaanin tuotanto
Prepare a suspension of approximately 106 cells per ml in IF buffer (Appendix 4).
Valmistetaan suspensio (noin 106 solua/ml) IF-puskuriin (lisäys 4).
Prepare a twofold dilution series of an appropriate antiserum (see website http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Valmistetaan kaksinkertaisia laimennoksia tarkoituksenmukaisesta antiseerumista (ks. www-sivusto osoitteessa http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Apply the IF procedure (Section VI.A.5.).
Sovelletaan IF-menettelyä (VI jakson A kohdan 5 alakohta).
Note: If performing only 2 identification tests, do not use another serological test in addition to this method.
Huomautus: Jos tehdään ainoastaan kaksi tunnistustestiä, ei tämän menetelmän lisäksi käytetä muuta serologista testiä.
Prepare a suspension of approximately 108 cells per ml in 1X PBS (Appendix 4).
Valmistetaan suspensio (noin 108 solua/ml) 1X PBS -puskuriin (lisäys 4).
Perform an appropriate ELISA procedure with a specific monoclonal antibody to R. solanacearum.
Toteutetaan soveltuva ELISA-menettely R. solanacearum -taudinaiheuttajalle spesifisellä monoklonaalisella vasta-aineella.
A positive ELISA test is achieved if the ELISA reading obtained from the culture is at least half that obtained for the positive control.
Positiivinen ELISA-testitulos saadaan, jos viljelmästä saatu ELISA-tulos on vähintään puolet positiivisen kontrollin tuloksesta.
Prepare a suspension of approximately 106 cells per ml in molecular grade sterile water.
Valmistetaan suspensio (noin 106 solua/ml) molekyylisuodattimilla puhdistettuun veteen.
The samples may then be stored at –16 to –24 °C until required.
Näytteet voidaan varastoida -16–-24 °C:ssa, kunnes niitä tarvitaan.
Apply appropriate PCR procedures to amplify R. solanacearum-specific amplicons (e.g. Seal et al.
Sovelletaan tarkoituksenmukaisia PCR-menettelyjä R. solanacearum -spesifisten amplikonien monistamiseksi (esim. Seal et al.
A positive identification of R. solanacearum is achieved if the PCR amplicons are the same size and have the same restriction fragment length polymorphisms as for the positive control strain.
solanacearum -bakteerin positiivinen tunnistus toteutuu, jos PCR-amplikonit ovat samankokoisia kuin positiivisen kontrollikannan amplikonit ja niillä esiintyy samaa restriktiofragmenttien pituuspolymorfiaa.
Apply the FISH procedure (Section VI.A.7.) with at least 2 R. solanacearum-specific oligo-probes (Appendix 7).
Käytetään FISH-menettelyä (VI jakson A kohdan 7 alakohta) vähintään kahdella R. solanacearum -spesifisellä oligokoettimella (lisäys 7).
Grow the culture on trypticase soy agar (Oxoid) for 48 hours at 28 °C.
Kasvatetaan viljelmä tryptikaasi-soija-agarissa (Oxoid) 48 tunnin ajan 28 °C:ssa.
The presence of characteristic fatty acids are 14:0 3OH, 16:0 2OH, 16:1 2OH and 18:1 2OH and absence of 16:0 3OH is highly indicative of a Ralstonia sp.
Tyypillisten rasvahappojen esiintyminen on seuraava: 14:0 3OH, 16:0 2OH, 16:1 2OH ja 18:1 2OH, ja 16:0 3OH:n puuttuminen on erittäin vahva osoitus Ralstonia sp:stä.
Strain characterisation using one of the following methods is recommended for each new case of isolation of R. solanacearum.
Kannan määritystä jollakin seuraavista menetelmistä suositellaan kaikissa uusissa R. solanacearum -bakteerin eristämistapauksissa.
solanacearum is separated into biovars on the basis of the ability to utilise and/or oxidise three disaccharides and three hexose alcohols (Hayward, 1964 and Hayward et al., 1990).
solanacearum -bakteerin biovarit erotetaan kolmen disakkaridin ja kolmen heksoosialkoholin käyttö- ja/tai hapetuskyvyn perusteella (Hayward, 1964 ja Hayward et al., 1990).
Growth media for the biovar test is described in Appendix 2.
Biovaritestin kasvualustat kuvataan lisäyksessä 2.
The test can be successfully performed by stab inoculating the media with pure cultures of R. solanacearum isolates and incubating at 28 °C.
Testi voidaan tehdä inokuloimalla kasvualusta pistämällä siihen R. solanacearum -bakteerin isolaattien puhdasta viljelmää ja inkuboimalla 28 °C:ssa.
If the media are dispensed into sterile 96 well cell culture plates (200 µl per well) colour change from olive green to yellow can be observed within 72 hours, indicating a positive test result.
Jos kasvualustat laitetaan steriileihin 96-syvennyksen soluviljelmälevyihin (200 µl/syvennys), 72 tunnin kuluessa voidaan havaita värinmuutos oliivinvihreästä keltaiseksi, mikä osoittaa positiivisen testituloksen.
Utilisation of:
Käyttö:
Maltose
Maltoosi
D (+) Cellobiose
D (+) sellobioosi
Additional tests differentiate biovar 2 sub-phenotypes
Lisätesteillä biovari 2 jaetaan alafenotyyppeihin.
(Worldwide distribution)
(esiintyy maailmanlaajuisesti)
(Found in Chile and Colombia)
(esiintyy Chilessä ja Kolumbiassa)
(Found in tropical areas)
(esiintyy tropiikissa)
Utilisation of trehalose
Trehaloosin käyttö
Utilisation of meso-inositol
Meso-inositolin käyttö
Utilisation of D ribose
D-riboosin käyttö
Pectolytic activity [101]
Pektolyyttinen aktiivisuus [101]
low
vähäinen
high
suuri
Molecular differentiation of strains in the R. solanacearum complex can be achieved using several techniques, including:
solanacearum -kompleksin kantojen molekulaarinen erottaminen voi tapahtua useilla menetelmillä. Näitä ovat
Restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis (Cook et al., 1989).
RFLP-analyysi (Restriction fragment length polymorphism analysis) (Cook et al., 1989).
Repetitive sequence PCR using REP, BOX and ERIC primers (Louws et al., 1995; Smith et al., 1995).
Toistuvan järjestyksen PCR, jossa käytetään REP-, ERIC- ja BOX-alukkeita (primers) (Louws et al., 1995; Smith et al., 1995).
Amplified fragment length polymorphism (AFLP) analysis (Van der Wolf et al., 1998).
AFLP-analyysi (Amplified fragment length polymorphism) (Van der Wolf et al., 1998).
Specific PCR primers (Pastrik et al, 2002; see Appendix 6) can be used to differentiate strains belonging to division 1 (biovars 3, 4 and 5) and division 2 (biovars 1, 2A and 2T) of R. solanacearum, as originally defined by RFLP analysis (Cook et al., 1989) and 16S rDNA sequencing (Taghavi et al., 1996).
Spesifisiä PCR-alukkeita (primers) (Pastrik et al., 2002; ks. lisäys 6) voidaan käyttää alunperin RFLP-analyysilla (Cook et al., 1989) ja 16S rDNA -sekvensoinnilla (Taghavi et al., 1996) R. solanacearum -bakteerin luokkaan 1 (biovarit 3, 4 ja 5) sekä luokkaan 2 (biovarit 1, 2A ja 2T) kuuluvien kantojen erottamiseksi.
The pathogenicity test must be performed as final confirmation of a diagnosis of R. solanacearum and for assessment of virulence of cultures identified as R. solanacearum.
Patogeenisyystesti on tehtävä R. solanacearum -bakteerin määrityksen lopulliseksi varmistamiseksi ja R. solanacearum -bakteeriksi tunnistettujen viljelmien virulenssin arvioimiseksi.
Prepare an inoculum of approximately 106 cells per ml from a 24 to 48 hour culture of the isolate to be tested and an appropriate positive control strain of R. solanacearum (e.g. NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; see Appendix 3).
Valmistetaan inokulaatti (noin 106 solua/ml) testattavan isolaatin 24–48 tunnin viljelmästä ja R. solanacearum -bakteerin asianmukaisesta positiivisesta kontrollikannasta (esim. NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; ks. lisäys 3).
Inoculate 5 to 10 susceptible tomato or eggplant seedlings at the third true leaf stage (see Section VI.A.9).
Inokuloidaan 5–10 taudille altista tomaatin tai munakoison taimea niiden kolmilehtiasteella (ks. VI jakson A kohdan 9 alakohta).
Incubate for up to two weeks at 25 to 28 °C and high relative humidity with appropriate watering to avoid waterlogging or drought stress.
Inkuboidaan enintään 2 viikon ajan 25–28 °C:ssa ja korkeassa suhteellisessa kosteudessa sopivasti kastellen siten, että vältetään sekä vettyminen että toisaalta kuivuusstressi.
With pure cultures typical wilting should be obtained within 14 days.
Puhtailla viljelmillä pitäisi 14 päivän kuluessa saavuttaa tyypillinen kasvin nuutuminen.
If after this period symptoms are not present, the culture cannot be confirmed as being a pathogenic form of R. solanacearum.
Jos oireita ei ole tämän ajan kuluessa ilmaantunut, ei voida vakuuttua siitä, että olisi kyse R. solanacearum -bakteerin patogeenisen muodon kasvustosta.
Observe for symptoms of wilting and/or epinasty, chlorosis and stunting.
Tarkkaillaan nuutumisoireita, epinastiaa, kloroosia ja hidastunutta kasvua.
Isolate from symptomatic plants by removing a section of stem about 2 cm above the inoculation point.
Eristetään kasveista, joilla esiintyy oireita, poistamalla pätkä varresta noin 2 cm inokulaatiokohdan yläpuolelta.
Comminute and suspend in a small volume of sterile distilled water or 50 mM phosphate buffer (Appendix 4).
Pienennetään ja suspendoidaan pieneen määrään steriiliä tislattua vettä tai 50 mM fosfaattipuskuria (lisäys 4).
Isolate from the suspension by dilution spreading or streaking on a suitable medium, preferably onto a selective medium (Appendix 2), incubate for 48 to 72 hours at 28 °C and observe the formation of colonies typical of R. solanacearum.
Eristetään suspensiosta levittämällä laimennos tai sivelemällä soveltuvalle alustalle, mieluiten selektiiviselle alustalle (lisäys 2), inkuboidaan 48–72 tuntia 28 °C:ssa ja tutkitaan, muodostuuko R. solanacearum -bakteerille tyypillisiä pesäkkeitä.
See Lelliott and Stead (1987)
Ks. Lelliott and Stead (1987).
Laboratory [201]
Laboratorio [201]
Vienna and Linz
Wien ja Linz
Contact scientists: see web site http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main.
Yhteyshenkilöt: ks. www-sivusto http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main.
Media for isolation and culture of R. solanacearum
Kasvatusalustat R. solanacearum -kasvintuhoojan eristämistä ja viljelyä varten
General growth media
Yleinen kasvatusalusta
Nutrient Agar (NA)
Ravinneagar (NA)
Nutrient Agar (Difco)
Ravinneagar (Difco)
Distilled water
Tislattua vettä
Dissolve ingredients and sterilise by autoclaving at 121 °C for 15 min.
Liuotetaan ainesosat ja steriloidaan autoklavoimalla 121 °C:ssa 15 minuutin ajan.
Yeast Peptone Glucose Agar (YPGA)
Hiiva-peptoni-glukoosiagar (YPGA) Hiivauute (Difco) 5,0 g
Yeast extract (Difco)
Bacto-Peptoni (Difco)
Bacto-Peptone (Difco)
10,0 g Glyseroli
D(+) Glucose (monohydrate)
Bacto-Agar (Difco)
Bacto-Agar (Difco)
Tislattua vettä
Sucrose Peptone Agar (SPA) Sucrose
Bacto-Peptoni (Difco)
pH 7,2 – 7,4
Liuotetaan ainesosat ja steriloidaan autoklavoimalla 121 °C:ssa 15 minuutin ajan. Kelmanin tetratsolium-alusta Casaminohapot (Difco)
Dissolve ingredients and sterilise by autoclaving at 121 °C for 15 minutes.
Liuotetaan ainesosat ja steriloidaan autoklavoimalla 121 °C:ssa 15 minuutin ajan.
Casamino acids (Difco)
Casaminohappoja (Difco)
Dextrose
Bacto-Agar (Difco)
Cool to 50 °C and add a filter-sterilised solution of 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride (Sigma) to obtain a final concentration of 50 mg per l.
Jäähdytetään 50 °C:een ja lisätään suodatinsteriloitua 2,3,5-trifenyylitetratsoliumkloridin (Sigma) vesiliuosta, jotta loppupitoisuudeksi saadaan 50 mg/l.
Validated selective growth media
Validoitu selektiivinen kasvatusalusta
SMSA medium (Englebrecht, 1994 as modified by Elphinstone et al., 1996)
SMSA-alusta (Englebrecht, 1994, sellaisena kuin se on muutettuna julkaisulla Elphinstone et al., 1996)
Basal medium
Kasvualusta
Bacto-Agar (Difco); see Note 2.
Tislattua vettä
Cool to 50 °C and add filter-sterilised aqueous stock solutions of the following ingredients to obtain the specified final concentrations:
Jäähdytetään 50 °C:een ja lisätään seuraavien aineiden suodatinsteriloituja vesikantaliuoksia, jotta saadaan määrätyt loppupitoisuudet:
Crystal Violet (Sigma)
Kristallivioletti (Sigma)
1250 U (approximately 25 mg) per l
1250 U (noin 25 mg)/l
Chloramphenicol (Sigma C-3175)
Kloramfenikoli (Sigma C-3175)
Penicillin-G (Sigma P-3032)
Penisilliini G (Sigma P-3032)
825 U (approximately 0,5 mg) per l
825 U (noin 0,5 mg)/l
2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride (Sigma)
2,3,5-trifenyylitetratsoliumkloridi (Sigma)
Use of reagents other than those specified above may affect growth of R. solanacearum.
Muiden kuin edellä määritettyjen reagenssien käyttö voi vaikuttaa R. solanacearum -bakteerin kasvuun.
Oxoid Agar #1 can be used in place of Bacto-Agar (Difco).
Oxoid Agar #1:tä voidaan käyttää Bacto-Agarin (Difco) sijaan.
In this case growth of R. solanacearum will be slower, although growth of competing saprophytes may also be reduced.
Tällöin R. solanacearum -bakteerien kasvu on hitaampaa, mutta kilpailevien saprofyyttien kasvu voi myös vähentyä.
Typical colonies of R. solanacearum may take 1 to 2 days longer to form and the red colouration may be lighter and more diffuse than on Bacto-Agar.
Tyypillisten R. solanacearum -pesäkkeiden syntymiseen voi mennä 1–2 päivää kauemmin ja niiden punainen väritys voi olla vaaleampaa ja hajanaisempaa kuin Bacto-Agarissa.
Increasing bacitracin concentration to 2500 U per l may reduce populations of competing bacteria without affecting growth of Ralstonia solanacearum.
Basitrasiinipitoisuuden nostaminen arvoon 2500 U/l voi pienentää kilpailevien bakteerien populaatiota vaikuttamatta Ralstonia solanacearum -bakteerin kasvuun.