natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Procedure 3C:
Sete valmistatakse katsemeetodis C.28 kirjeldatud viisil; ainsa erinevusena lisatakse toitained järgmiselt:
SOP: Zebrafish, homogenisation of head & tail
4–5 % (kuivmass) turvast (orgaanilise süsiniku lõppsisaldus 2 ± 0,5 %), mille pH on võimalikult lähedal vahemikule 5,5–6,0; on oluline kasutada üksnes õhu käes kuivatatud peeneks jahvatatud pulbrilist turvast, mille osakeste suurus on soovitatavalt < 1 mm;
The fish are anaesthetised and euthanised in accordance with the test description.
20 % (kuivmass) kaoliinsavi (soovitatav kaoliniidisisaldus üle 30 %);
The head and tail are cut of the fish in accordance with Figure 1.
75–76 % (kuivmass) kvartsliiva (peamiselt peen liiv; > 50 % osakestest peaksid olema vahemikus 50–200 μm);
Important: All dissection instruments, and the cutting board should be rinsed and cleaned properly (e.g. with 96 % ethanol) between handling of each single fish to prevent “vitellogenin pollution” from females or induced males to uninduced males.
lisatakse selline kogus toitainete vesilahust, et nii ammooniumkloriidi kui ka naatriumfosfaadi sisaldus valmis settepartiis oleks 200 mg sette kuivmassi kilogrammi kohta ja lõpliku segu niiskusesisaldus oleks 30–50 %;
For gonad histology
lõpliku settesegu pH reguleerimiseks väärtusele 7,0 ± 0,5 lisatakse keemiliselt puhast kaltsiumkarbonaati (CaCO3).
Cut behind
Turba, kaoliinsavi ja liiva päritolu peaks olema teada ja dokumenteeritud.
Cut behind dorsal fin
Kui mõne nimetatud koostisosa päritolu ei ole teada või teeb teataval määral muret, tuleks veenduda, et asjaomane koostisosa ei ole saastunud kemikaalidega (nt raskmetallide, kloororgaaniliste ühendite või fosfororgaaniliste ühenditega).
For Vtg analysis
Sette kuivad koostisosad tuleks esmalt segada homogeensuse saavutamiseks omavahel ja alles siis tuleks settesse hoolikalt segada toitainete vesilahus.
The weight of the pooled head and tail from each fish is measured to the nearest mg.
Niiske sete tuleks teha valmis vähemalt kaks päeva enne kasutamist, et turvas jõuaks põhjalikult veest läbi imbuda ja hüdrofoobsed turbaosakesed ei kerkiks settele söötme lisamisel veepinnale; niisket setet võib enne kasutamist säilitada pimedas.
After being weighed, the parts are placed in appropriate tubes (e.g. 1,5 ml eppendorf) and frozen at – 80 °C until homogenisation or directly homogenised on ice with two plastic pistils.
Katse jaoks viiakse sete sobiva suurusega mahutitesse, näiteks sellise läbimõõduga taimepottidesse, mis võimaldab paigutada potid klaasnõudesse (sette pindala peaks olema minimaalselt umbes 70 % nõu pindalast).
(Other methods can be used if they are performed on ice and the result is a homogenous mass).
Kui mahuti põhjas on augud, aitab mahuti põhja paigutatud filterpaberi tükk setet mahutis hoida.
Important: The tubes should be numbered properly so that the head and tail from the fish can be related to their respective body-section used for gonad histology.
Potid täidetakse settega nii, et sette pind oleks tasane, ja seejärel kaetakse sete selle paigalhoidmiseks inertse materjali, näiteks liiva või peene aianduskruusa (või purustatud korallide) õhukese kihiga (~ 2–3 mm).
When a homogenous mass is achieved, 4 x the tissue weight of ice-cold homogenisation buffer [1] is added.
Myriophyllum spicatum'i kultiveerimiseks ja sellega katsete tegemiseks soovitatakse kasutada Smarti ja Barko söödet (12).
Keep working with the pistils until the mixture is homogeneous.
Selle söötme valmistamist on kirjeldatud 1. liites.
Important note: New pistils are used for each fish.
Katsekeskkonna (veefaasi) pH peaks optimaalse taimekasvu tagamiseks olema katse alguses vahemikus 7,5–8,0.
The samples are placed on ice until centrifugation at 4 °C at 50000 g for 30 min.
Katseplaan
Use a pipette to dispense portions of 20 μl supernatant into at least two tubes by dipping the tip of the pipette below the fat layer on the surface and carefully sucking up the supernatant without fat- or pellet fractions.
Katses tuleks kasutada kemikaaliga töötlemata kontrolli puhul vähemalt kuut paralleelnõu ja minimaalselt viiest katsekontsentratsioonist iga kontsentratsiooni puhul vähemalt nelja paralleelnõu.
The tubes are stored at – 80 °C until use.
Iga katsenõu näol on tegemist kolme võrset sisaldava paralleelkultuuriga.
Homogenisation buffer:(50 mM Tris-HCl pH 7,4; 1 % Protease inhibitor cocktail (Sigma)): 12 ml Tris-HCl pH 7,4 + 120 μl Protease inhibitor cocktail.TRIS: TRIS-ULTRA PURE (ICN) e.g. from Bie & Berntsen, Denmark.Protease inhibitor cocktail: From Sigma (for mammalian tissue) Product number P 8340.NOTE: The homogenisation buffer should be used the same day as manufactured.
Igas katsenõus kolme võrse kasvatamiseks on kaks võimalust:
Place on ice during use.
katseplaan A: üks võrse poti kohta ja kolm potti nõu kohta;
VITELLOGENIN FORTIFICATION SAMPLES AND INTER-ASSAY REFERENCE STANDARD
katseplaan B: kolm võrset poti kohta ja üks pott nõu kohta;
On each day that VTG assays are performed, a fortification sample made using an inter-assay reference standard will be analysed.
alternatiivse katseplaanina on lubatud kasutada ühte võrset poti ja nõu kohta, kui seejuures kohandatakse vastavalt vajadusele paralleelide arvu, et saavutada vastavus nõuetekohasuse kriteeriumidele.
The VTG used to make the inter-assay reference standard will be from a batch different from the one used to prepare calibration standards for the assay being performed.
Katsenõud tuleks jaotada katserühmadesse juhuslikkuse alusel.
The fortification sample will be made by adding a known quantity of the inter-assay standard to a sample of control male plasma.
Katsenõude paigutus katsealal peab olema juhuslik, et vähendada asukohast tingitud valgustiheduse ja temperatuuri erinevuste mõju.
The sample will be fortified to achieve a VTG concentration between 10 and 100 times the expected vitellogenin concentration of control male fish.
Uuritava kemikaali kontsentratsioonid ja kontrollrühmad
The sample of control male plasma that is fortified may be from an individual fish or may be a composite from several fish.
Katsekontsentratsioonid peaksid üldjuhul moodustama geomeetrilise jada, mille tegur ei tohiks olla suurem kui 3,2.
A subsample of the unfortified control male plasma will be analysed in at least two duplicate wells.
Uuritava kemikaali sobivate kontsentratsioonide valimine on hõlpsam, kui kemikaali mürgisus on kontsentratsioonivahemiku leidmise katsega eelnevalt kindlaks tehtud.
The fortified sample also will be analysed in at least two duplicate wells.
ECx määramisel peaks ECx väärtus jääma kasutatavasse kontsentratsioonivahemikku, et tagada tulemuste piisav usaldusväärsus.
The mean quantity of vitellogenin in the two unfortified control male plasma samples will be added to the calculated quantity of VTG added to fortification the samples to determine an expected concentration.
Leitud ECx väärtusega seotud kitsama usaldusvahemiku saamiseks tuleks kasutada suuremat arvu katsekontsentratsioone.
The ratio of this expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Valikulise lõppnäitajana vähima täheldatava toime avaldumise kontsentratsiooni või täheldatava toime puudumise kontsentratsiooni määramiseks peaks väikseim katsekontsentratsioon olema piisavalt väike, et kasv ei erineks selle kontsentratsiooni juures oluliselt kontrolltaimede kasvust.
DECISION FLOWCHART FOR THE STATISTICAL ANALYSIS
Peale selle peaks suurim katsekontsentratsioon olema piisavalt suur, et kasv oleks selle kontsentratsiooni juures oluliselt aeglasem kui kontrollrühmas.
Rep means normally distributed
Suurema arvu paralleelide kasutamine suurendab täheldatava toime puudumise kontsentratsiooni määramiseks kasutatava dispersioonanalüüsi (ANOVA) statistilist võimsust.
Stept-down Jonckheere or Williams' test
Kui kontsentratsioonivahemiku leidmise katsest selgub, et uuritav kemikaal ei avalda kontsentratsioonil kuni 100 mg/l või katsesöötmes lahustuvuse piirkontsentratsioonil või valmistise puhul dispergeeruvuse piirkontsentratsioonil kahjulikku mõju, võib teha piirsisalduskatse, mille abil on hõlbus võrrelda kasvu kontrollrühmas ja ühes katserühmas, kus kemikaal esineb kontsentratsioonis 100 mg/l või lahustuvuse piirkontsentratsioonis või kontsentratsioonis 1000 mg kuiva sette kilogrammi kohta.
Normalising transform?
Kõnealuse katse puhul tuleks järgida standardse kontsentratsioonist sõltuvuse katse üldpõhimõtteid; ainsa erinevusena soovitatakse suurendada minimaalset paralleelide arvu kuue katsenõuni kontrollrühma ja katserühma kohta.
variance stabilising transform?
Katselahused valmistatakse tavaliselt põhilahuse lahjendamise teel; viimane saadakse uuritava kemikaali lahustamisel või dispergeerimisel Smarti ja Barko söötmes, mille valmistamiseks on kasutatud demineraliseeritud (st destilleeritud või deioniseeritud) vett (vt 1. liide).
Tamhane-Dunnett test on nested ANOVA
Suurim katsekontsentratsioon ei tohiks üldjuhul olla suurem kui uuritava kemikaali vees lahustuvuse piirkontsentratsioon või valmistise puhul dispergeeruvuse piirkontsentratsioon katsetingimustes.
Dunnett test on nested ANOVA No
Vees raskesti lahustuva kemikaali puhul võib olla vaja kasutada selle kemikaali kontsentreeritud põhilahuse või dispersiooni valmistamiseks orgaanilist lahustit või dispergeerivat ainet, et hõlbustada uuritava kemikaali täpse koguse lisamist katsesöötmesse ja soodustada kemikaali lahustumist või dispergeerumist.
Yes Yes
Tuleks teha kõik selleks, et selliseid lahusteid või dispergeerivaid aineid ei oleks vaja kasutada.
No >=4 reps per conc
Tavaliselt kasutatavad lahustid, mis kuni kontsentratsioonini 100 μl/l ei ole fütotoksilised, on näiteks atsetoon ja dimetüülformamiid.
<=3 reps per conc
Lahusti või dispergeeriva aine kasutamise korral tuleks esitada selle lõppkontsentratsioon, mis peaks olema võimalikult väike (≤ 100 μl/l).
Dunn or Mann-Whitney test on rep means
Sellisel juhul peaks lahusti või dispergeeriva aine sisaldus olema kõikides katsenõudes ja (lahustiga) kontrollnõudes ühesugune.
Dunn test on rep means Dunn or Mann-Whitney test
Katseplaaniga nähakse ette ka lahustit või dispergeerivat ainet mittesisaldavate kemikaaliga töötlemata kontrollrühma paralleelide kasutamine.
Dunn test <=3 reps per conc
Täiendavad juhised dispergeeriva aine kasutamise kohta on esitatud asjaomases OECD juhenddokumendis (11).
>=4 reps per conc Tamhane-Dunnett test
Katse käik varieerub sõltuvalt uuritava kemikaaliga kokkupuutumise viisist (st veefaasi või settefaasi kaudu).
Nested ANOVA normal
Katses kasutatava kokkupuuterežiimi valimisel (st staatiline või uuendamisega poolstaatiline, rikastatud vesi või rikastatud sete) tuleks kaaluda uuritava kemikaali eeldatavat käitumist süsteemis vesi/sete.
Nested ANOVA not normal
Mõnel juhul, kui kemikaal koguneb eeldatavalt olulisel määral settesse, võib olla soovitatav teha katse rikastatud settega.
variance stabilising transformation
Ettevalmistusetapp
Variances unequal Dunnett test
Kultiveeritud taimede küljest lõigatakse terved võrsetipud ilma külgharudeta, et saada 6 ± 1 cm pikkused võrsed.
Variances equal
Katseplaani A puhul (üks võrse poti kohta ja kolm potti nõu kohta) istutatakse igasse potti üks võrsetipp.
Step-down Jonckheere test
Katseplaani B puhul (kolm võrset poti kohta ja üks pott nõu kohta) istutatakse igasse setet sisaldavasse potti neli kuni viis võrsetippu.
Rep means normal or not homogenous
Kummalgi juhul tuleks istutada taimed suuremasse arvu pottidesse kui katse jaoks vajalik, et katse alguses oleks võimalik valida ühesugused taimed ning et ülejäävaid taimi saaks kasutada juurte kasvu kontrollimiseks vahetult enne kemikaaliga kokkupuudet ja võrsete biomassi ja pikkuse määramiseks katse nullpäeval.
Rep means normal & homogenous
Võrsed istutatakse nii, et võrsest umbes kolme sentimeetri pikkune osa, mis sisaldab vähemalt kahte sõlme, jääb sette pinnast allapoole.
Step-down trendtest on replicate means
Seejärel viiakse potid katsenõudesse, milles valitsevad keskkonnatingimused on samad kui kokkupuuteetapi ajal, ning hoitakse neid juurekasvu esilekutsumiseks seitse päeva Smarti ja Barko söötmes.
Not monotone
Pärast seda tuleks varupottidest eemaldada mitu taime juurte kasvu kontrollimiseks.
Monotone
Kui nähtav juurekasv puudub (st juuretipud ei ole näha), tuleks ettevalmistusetappi pikendada, kuni täheldatakse nähtavat juurekasvu.
Determine whether Dose-Response is monotone
Selle soovitatava sammuga tagatakse, et taimed kasvavad katse alustamise ajal aktiivselt.
C.49 Fish Embryo Acute Toxicity (FET) Test
Ühetaolise taimse materjali valimine
This test method (TM) is equivalent to OECD test guideline (TG) 236 (2013).
Katseplaani A puhul (üks võrse poti kohta ja kolm potti nõu kohta) valitakse enne katse algust välja ühesuguste taimedega potid.
It describes a Fish Embryo Acute Toxicity (FET) test with the zebrafish (Danio rerio).
Katseplaani B puhul (kolm võrset poti kohta ja üks pott nõu kohta) eemaldatakse üleliigsed taimed nii, et kolm allesjäävat taime oleksid ühesuguse suuruse ja välimusega.
This test is designed to determine acute toxicity of chemicals on embryonic stages of fish.
Kokkupuude veefaasi kaudu
The FET-test is based on studies and validation activities performed on zebrafish (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)(8)(9)(10)(11)(12)(13)(14).
Ühesuguste taimede alusel välja valitud potid paigutatakse konkreetsest katseplaanist lähtuvalt katsenõudesse.
The FET-test has been successfully applied to a wide range of chemicals exhibiting diverse modes of action, solubilities, volatilities, and hydrophobicities (reviewed in 15 and 16).
Seejärel lisatakse katsenõudesse Smarti ja Barko sööde.
Newly fertilised zebrafish eggs are exposed to the test chemical for a period of 96 hrs.
Tuleks jälgida, et selle käigus ei häiritaks settekihti.
Every 24 hrs, up to four apical observations are recorded as indicators of lethality (6): (i) coagulation of fertilised eggs, (ii) lack of somite formation, (iii) lack of detachment of the tail-bud from the yolk sac, and (iv) lack of heartbeat.
Selleks võib söötme lisamisel kasutada lehtrit või katta sette söötme katsenõudesse valamise ajal plastkettaga, mis eemaldatakse kohe pärast söötme lisamist.
At the end of the exposure period, acute toxicity is determined based on a positive outcome in any of the four apical observations recorded, and the LC50 is calculated.
Teise võimalusena võib taimepotid panna katsenõudesse pärast söötme lisamist.
Useful information about substance-specific properties include the structural formula, molecular weight, purity, stability in water and light, pKa and Kow, water solubility and vapour pressure as well as results of a test for ready biodegradability (TM C.4 (17) or TM C.29 (18)).
Kummalgi juhul võib kokkupuuteetapi alguses kasutada värsket söödet, kui see on vajalik võimaliku vetikate ja bakterite kogunemise minimeerimiseks või selleks, et võimaldada valmistada katselahuse partii korraga kõikide paralleelide jaoks.
Solubility and vapour pressure can be used to calculate Henry's law constant, which will indicate whether losses due to evaporation of the test chemical may occur.
Sette kohal oleva võrse pikkus mõõdetakse kas enne või pärast söötme lisamist.
A reliable analytical method for the quantification of the substance in the test solutions with known and reported accuracy and limit of detection should be available.
Katsesöötmesse võib sobiva koguse uuritavat kemikaali lisada enne söötme viimist katsenõudesse.
If the test method is used for the testing of a mixture, its composition should, as far as possible, be characterised, e.g. by the chemical identity of its constituents, their quantitative occurrence and their substance-specific properties (see paragraph 4).
Teise võimalusena võib uuritava kemikaali lisada pärast seda, kui sööde on lisatud katsenõudesse.
Concerning substances that may be activated via metabolism, there is evidence that zebrafish embryos do have biotransformation capacities (19)(20)(21)(22).
Viimasel juhul tuleks tagada uuritava kemikaali ühtlane jaotumine katsesüsteemis ilma setet häirimata.
However, the metabolic capacity of embryonic fish is not always similar to that of juvenile or adult fish.
Kõikidel juhtudel registreeritakse katse alguses katsesöötme välimus (nt selge, hägune vmt).
For instance, the protoxicant allyl alcohol (9) has been missed in the FET.
Kokkupuude sette kaudu
Therefore, if there are any indications that metabolites or other transformation products of relevance may be more toxic than the parent compound, it is also recommended to perform the test with these metabolites/transformation products and to also use these results when concluding on the toxicity of the test chemical, or alternatively perform another test which takes metabolism into further account.
Valitud kontsentratsiooniga rikastatud sete valmistatakse uuritava kemikaali lahuse otse värskesse settesse lisamise teel.
For substances with a molecular weight ≥ 3kDa, a very bulky molecular structure, and substances causing delayed hatch which might preclude or reduce the post-hatch exposure, embryos are not expected to be sensitive because of limited bioavailability of the substance, and other toxicity tests might be more appropriate.
Deioniseeritud vees lahustatud uuritava kemikaali põhilahus segatakse valmistatud settega rullimisseadme või söödasegaja abil või käsitsi.
For the test results to be valid, the following criteria apply:
Vees raskesti lahustuva uuritava kemikaali võib lahustada võimalikult väikeses koguses sobivas orgaanilises lahustis (nt heksaanis, atsetoonis või kloroformis).
The overall fertilisation rate of all eggs collected should be ≥ 70 % in the batch tested.
Seejärel segatakse saadud lahus umbes 10 g peene kvartsliivaga ühe katsenõu kohta.
The water temperature should be maintained at 26 ± 1 °C in test chambers at any time during the test.
Lahustil lastakse aurustuda ja seejärel segatakse liiv sobiva koguse settega katses kasutatava keeduklaasi kohta.
Overall survival of embryos in the negative (dilution-water) control, and, where relevant, in the solvent control should be ≥ 90 % until the end of the 96 hrs exposure.
Uuritava kemikaali lahustuvaks muutmiseks, dispergeerimiseks või emulgeerimiseks võib kasutada üksnes kergesti lenduvat kemikaali.
Exposure to the positive control (e.g. 4,0 mg/l 3,4-dichloroaniline for zebrafish) should result in a minimum mortality of 30 % at the end of the 96 hrs exposure.
Tuleks meeles pidada, et lõpliku sette valmistamisel on vaja arvesse võtta ka uuritava kemikaaliga rikastatud liiva ruumala/massi (seega tuleks sette valmistamisel kasutada vähem liiva).
Hatching rate in the negative control (and solvent control if appropriate) should be ≥ 80 % at the end of 96 hrs exposure.
Tuleks jälgida, et settele lisatav uuritav kemikaal seguneks settega põhjalikult ja jaotuks selles ühtlaselt.
At the end of the 96 hrs exposure, the dissolved oxygen concentration in the negative control and highest test concentration should be ≥ 80 % of saturation.
Rikastatud sete lisatakse pottidesse (nagu on kirjeldatud eespool).
An overview of recommended maintenance and test conditions is available in Appendix 2.
Välja valitud ühesugused piisava juurestikuga taimed eemaldatakse ettevalmistusetapis kasutatud pottidest ja istutatakse eespool kirjeldatud viisil ümber rikastatud settesse.
The following equipment is needed:
Potid paigutatakse konkreetsest katseplaanist lähtuvalt katsenõudesse.
Fish tanks made of chemically inert material (e.g. glass) and of a suitable capacity in relation to the recommended loading (see “Maintenance of brood fish”, paragraph 14);
Seejärel lisatakse ettevaatlikult Smarti ja Barko sööde (nt lehtri abil), häirimata seejuures setet.
Inverted microscope and/or binocular with a capacity of at least 80-fold magnification.
Sette kohal oleva võrse pikkus mõõdetakse kas enne või pärast söötme lisamist.
If the room used for recording observations cannot be adjusted to 26 ± 1 °C, a temperature-controlled cross movement stage or other methods to maintain temperature are necessary;
Veetaseme säilitamine katse vältel
Test chambers; e.g., standard 24-well plates with a depth of approx.
Igas katsenõus tuleb registreerida vee lõplik ruumala ja märkida nõule veetase.
20 mm. (see “Test chambers”, paragraph 11);
Kui katse vältel aurustub üle 10 % veest, tuleks veetaset destilleeritud veega reguleerida.
e.g., self-adhesive foil to cover the 24-well plates;
Vajaduse korral võib keeduklaasid katta lahtise läbipaistva kattega, näiteks läbipaistvast plastist kaanega, et minimeerida aurustumist ja vetikate spooridega saastumist.
Incubator or air-conditioned room with controlled temperature, allowing to maintain 26 ± 1 °C in wells (or test chambers);
Kasutatakse päevavalguse spektriga ja/või külmvalget fluorestsentsvalgust, mille valgustihedus on umbes 140 (± 20) μE m– 2 s– 1, mõõdetuna fotosünteesiks sobivas lainepikkuste vahemikus (400–700 nm) veepinnal.
Oxygen meter;
Kohaldatakse valgustusrežiimi 16 tundi valgust ja 8 tundi pimedust.
Equipment for determination of hardness of water and conductivity;
Kõrvalekalle valitud valgustihedusest ei tohi katseala üheski punktis olla suurem kui ± 15 %.
Spawn trap: instrument trays of glass, stainless steel or other inert materials; wire mesh (grid size 2 ± 0,5 mm) of stainless steel or other inert material to protect the eggs once laid; spawning substrate (e.g. plant imitates of inert material) (TM C.48, Appendix 4a (23));
Temperatuur katsenõudes on 20 ± 2 °C.
Pipettes with widened openings to collect eggs;
Kontrollsöötme pH väärtus ei tohiks katse ajal suureneda rohkem kui 1,5 ühiku võrra.
Glass vessels to prepare different test concentrations and dilution water (beakers, graduated flasks, graduated cylinders and graduated pipettes) or to collect zebrafish eggs (e.g. beakers, crystallisation dishes);
Kui pH väärtus suureneb üle 1,5 ühiku võrra, ei loeta katset siiski nõuetele mittevastavaks, kui on võimalik tõendada, et eespool sätestatud nõuetekohasuse kriteeriumid on täidetud.
If alternative exposure systems, such as flow-through (24) or passive dosing (25) are used for the conduct of the test, appropriate facilities and equipment are needed.
Katse kestus
Glass or polystyrene test chambers should be used (e.g. 24-well plates with a 2,5-5 ml filling capacity per well).
Kokkupuuteperiood kestab 14 päeva.
In case adsorption to polystyrene is suspected (e.g., for non-polar, planar substances with high KOW), inert materials (glass) should be used to reduce losses due to adsorption (26).
Ettevalmistusetapi järel ja vahetult enne kemikaaliga kokkupuudet (st katse nullpäeval) kogutakse varutaimed viiest juhuslikult valitud potist, kui potis on katseplaani kohaselt kolm taime, või 15 potist, kui potis on üks taim, ning tehakse kindlaks võrsete pikkus, märgmass ja kuivmass, nagu on kirjeldatud allpool.
Test chambers should be randomly positioned in the incubator.
Kokkupuuteetapi jaoks kasutavate taimede puhul määratakse järgmised tabelis 1 esitatud näitajad:
Water and test conditions
peavõrse pikkus, külgharude arv ja külgharude pikkus registreeritakse vähemalt kokkupuuteperioodi lõpus (st 14. katsepäeval);
Dilution of the maintenance water is recommended to achieve hardness levels typical of a wide variety of surface waters.
taimede tervise visuaalse hindamise tulemused registreeritakse kokkupuuteperioodi jooksul vähemalt kolmel korral (nt nullpäeval ning 7. ja 14. päeval);
Dilution water should be prepared from reconstituted water (27).
võrsete märgmass ja kuivmass määratakse katse lõpus (st 14. päeval).
The resulting degree of hardness should be equivalent to 100-300 mg/l CaCO3 in order to prevent excessive precipitation of calcium carbonate.
Võrsete pikkust mõõdetakse joonlauaga.
Other well-characterised surface or well water may be used.
Külgharude esinemise korral tuleks kindlaks teha ka nende arv ja pikkus.
The reconstituted water may be adapted to maintenance water of low hardness by dilution with deionised water up to a ratio of 1:5 to a minimum hardness of 30-35 mg/l CaCO3.
Taimede tervise visuaalseks hindamiseks registreeritakse nende väljanägemine ja katsesöötme üldseisund.
The water is aerated to oxygen saturation prior to addition of the test chemical.
Vaatlused hõlmavad järgmist: