natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Abbreviations: CAS NR = Chemical Abstracts Service Registry Number
See on viinud veendumusele, et meetodi keerukust saab konkreetsetele kriteeriumidele vastavuse korral (vt punkt 88) vähendada ning on võimalik kasutada astmelist lähenemisviisi.
CAS NR
Samuti ilmneb kogemustest, et sellised bioloogilised tegurid nagu kalade kasv ja lipiidisisaldus võivad tulemustele tugevat mõju avaldada ja neid võib olla vaja arvesse võtta.
Corrosive/Severe Irritant
Peale selle on jõutud arusaamisele, et vees väga raskesti lahustuvate ainetega katsete tegemine ei pruugi olla tehniliselt teostatav.
Promethazine hydrochloride
Lisaks võib vees väga vähe lahustuvate ainete puhul olla veekaudne kokkupuude veekeskkonnas väiksema tähtsusega kui kokkupuude toidu kaudu.
Amine/Amidine, Heterocyclic, Organic sulphur compound
Sellest tulenevalt on välja töötatud katsemeetod, mille puhul kalade kokkupuude toimub toidu kaudu (vt punktid 7–14 ja alates punktist 97).
Sodium hydroxide (10 %)
Toidu kaudu kokkupuudet käsitleva katsemeetodi valideerimine (laboritevaheline võrdlusuuring) viidi läbi 2010. aastal (51).
Alkali
Peamised muudatused hõlmavad järgmist.
Sodium lauryl sulfate (15 %)
Kui on tõenäoline, et biokontsentratsioonitegur (BCF) on katsekontsentratsioonist sõltumatu, võib ainult ühe katsekontsentratsiooni kasutamist katses lugeda piisavaks.
Carboxylic acid (salt)
Teatavatele kriteeriumidele vastavuse korral on võimalik kasutada veekaudse kokkupuute määramiseks minimeeritud katseplaani, mille puhul proovivõtupunktide arv on väiksem.
arboxy-benzaldehyde
Tuleks määrata kalade lipiidisisaldus, et biokontsentratsioonitegurit oleks võimalik väljendada lähtuvalt lipiidisisaldusest 5 %.
Carboxylic acid, Aldehyde
Statsionaarset olekut iseloomustava biokontsentratsiooniteguri hindamise kõrval on pandud suuremat rõhku biokontsentratsiooniteguri kineetika hindamisele (kui see on võimalik).
Category 2(A)
Teatava rühma ainete puhul nähakse ette toidukaudse kokkupuute katse juhtudel, mil seda peetakse asjakohasemaks kui veekaudse kokkupuute katset.
Non-corrosive/Non-severe irritant
Tuleks määrata kalade mass, et BCFk-d oleks võimalik korrigeerida kasvust tingitud lahjenemise suhtes.
Noncorrosive/Non-severe irritant
Enne mis tahes bioakumuleerumiskatse alustamist peaksid uuritava aine kohta olema teada järgmised andmed:
Category 2(B)
analüüsimeetodi tundlikkus uuritava aine ja selle võimalike metaboliitide sisalduse määramisel kudedes, samuti vees või toidus (vt punkt 65);
Based on results from the in vivo rabbit eye test (OECD TG 405, TM B.5) and using the UN GHS and EU CLP.
lahustuvus vees (katsemeetod A.6; (2)); see tuleks määrata vastavalt meetodile, mis on asjaomase (hinnangulise) lahustuvusvahemiku jaoks sobiv ja tagab usaldusväärse tulemuse.
Based on results obtained with FL (INVITTOX Protocol No. 71(6))
Hüdrofoobsete ainete puhul kasutatakse üldjuhul kolonnist elueerimisel põhinevat meetodit;
B.62 In Vivo Mammalian Alkaline Comet Assay
süsteemi n-oktanool/vesi iseloomustav jaotuskoefitsient KOW [21] (katsemeetodid A.8 (4), A.24 (5) ja A.23 (6)) või muu asjakohane teave jaotumisega seotud omaduste kohta (näiteks sorbeerumine lipiididele – KOC); see tuleks määrata vastavalt meetodile, mis on KOW asjaomase (hinnangulise) vahemiku jaoks sobiv ja tagab usaldusväärse tulemuse.
This test method (TM) is equivalent to OECD test guideline (TG) 489 (2016).
Hüdrofoobsete ainete puhul kasutatakse üldjuhul aeglasel segamisel põhinevat meetodit (katsemeetod A.23 (6));
The in vivo alkaline comet (single cell gel electrophoresis) assay (hereafter called simply the comet assay) is used for the detection of DNA strand breaks in cells or nuclei isolated from multiple tissues of animals, usually rodents, that have been exposed to potentially genotoxic material(s).
aine püsivus vees (hüdrolüüs – katsemeetod C.7 (7));
The comet assay has been reviewed and recommendations have been published by various expert groups (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10).
aine püsivus toidus (kui konkreetselt on valitud lähenemisviis, mis põhineb toidukaudse kokkupuute hindamise meetodil);
This test method is part of a series of test methods on genetic toxicology.
fotokeemilist muundumist käsitlevad andmed, mis on katses kasutatavaid kiirgustingimusi silmas pidades asjakohased (8);
An OECD document that provides succinct information on genetic toxicology testing and an overview of the recent changes that were made to these Test Guidelines has been developed (11).
pindpinevus (ainete puhul, mille log KOW-d ei ole võimalik määrata) (katsemeetod A.5 (9));
The purpose of the comet assay is to identify chemicals that cause DNA damage.
aururõhk (katsemeetod A.4 (10));
Under alkaline conditions (> pH 13), the comet assay can detect single and double stranded breaks, resulting, for example, from direct interactions with DNA, alkali labile sites or as a consequence of transient DNA strand breaks resulting from DNA excision repair.
vajaduse korral kõik andmed aine biootilise ja abiootilise vees lagunemise kohta, näiteks (kuid mitte ainult) kiire biolagundatavuse kohta (katsemeetod C.4, II–VII osa (11), ja katsemeetod C.29 (12));
These strand breaks may be repaired, resulting in no persistent effect, may be lethal to the cell, or may be fixed into a mutation resulting in a permanent viable change.
vajaduse korral teave metaboliitide kohta: struktuur, log KOW, teke ja lagundatavus;
They may also lead to chromosomal damage which is also associated with many human diseases including cancer.
happe dissotsiatsioonikonstant (pKa) ainete puhul, mis võivad ioniseeruda.
A formal validation trial of the in vivo rodent comet assay was performed in 2006-2012, coordinated by the Japanese Center for the Validation of Alternative Methods (JaCVAM), in conjunction with the European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM), the Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods (ICCVAM) and the NTP Interagency Center for the Evaluation of Alternative Toxicological Methods (NICEATM) (12).
Kui see on katsealuse kalaliigi puhul vastuvõetav, tuleks vajaduse korral katses kasutatava vee pH-d reguleerida, et tagada katses aine esinemine ioniseerimata kujul.
This test method includes the recommended use and limitations of the comet assay, and is based on the final protocol (12) used in the validation trial, and on additional relevant published and unpublished (laboratories proprietary) data.
Käesolevas katsemeetodis kirjeldatakse valitud kokkupuuteviisist ja proovivõtukorrast sõltumatut korda aine võimaliku kalades bioakumuleerumise hindamiseks.
Definitions of key terms are set out in Appendix 1.
TEAVE UURITAVA AINE KOHTA
It is noted that many different platforms can be used for this assay (microscope slides, gel spots, 96-well plates etc.).
KATSE NÕUETEKOHASUS
For convenience the term “slide” is used throughout the remainder of this document but encompasses all of the other platforms.
Katse vastab nõuetele, kui on täidetud järgmised tingimused:
The comet assay is a method for measuring DNA strand breaks in eukaryotic cells.
Oluline erinevus katserühma(de)st ja kontrollrühmast analüüsimiseks võetud kalade kasvukiiruses võib viidata uuritava aine mürgisele toimele.
Single cells/nuclei embedded in agarose on a slide are lysed with detergent and high salt concentration.
VÕRDLUSAINED
This lysis step digests the cellular and nuclear membranes and allows the release of coiled DNA loops generally called nucleoids and DNA fragments.
Seadmed
Electrophoresis at high pH results in structures resembling comets, which, by using appropriate fluorescent stains, can be observed by fluorescence microscopy; DNA fragments migrate away from the “head” into the “tail” based on their size, and the intensity of the comet tail relative to the total intensity (head plus tail) reflects the amount of DNA breakage (13) (14) (15).
Vesi
The in vivo alkaline comet assay is especially relevant to assess genotoxic hazard in that the assay's responses are dependent upon in vivo ADME (absorption, distribution, metabolism and excretion), and also on DNA repair processes.
Siiski võib öelda, et selliste ainete puhul, mille log KOW väärtus on üle 5 ja vees lahustuvus alla ~ 0,01–0,1 mg/l, võib veekaudse kokkupuute hindamine muutuda üha raskemaks.
These may vary among species, among tissues and among the types of DNA damage.
Tuleks kaaluda ka muid tegureid, mis võivad mõjutada katsemeetodi valikut, sealhulgas aine võimalikku adsorbeerumist katsenõudele ja -seadmetele, selle püsivust vesilahuses, võrrelduna püsivusega kalasöödas (17, 18), jne.
To fulfil animal welfare requirements, in particular the reduction in animal usage (3Rs — Replacement, Reduction, Refinement-- principles), this assay can also be integrated with other toxicological studies, e.g. repeated dose toxicity studies (10) (16) (17), or the endpoint can be combined with other genotoxicity endpoints such as the in vivo mammalian erythrocyte micronucleus assay (18) (19) (20).
Teave selliste praktiliste aspektide kohta võib olla kättesaadav muudest veekaudset kokkupuudet käsitlevatest lõpuleviidud uuringutest.
The comet assay is most often performed in rodents, although it has been applied to other mammalian and non-mammalian species.
Täiendavat teavet bioakumuleerumise uuringute teostamisega seotud aspektide hindamise kohta võib leida kirjandusest (nt viide 19).
The use of non-rodent species should be scientifically and ethically justified on a case-by-case basis and it is strongly recommended that the comet assay only be performed on species other than rodents as part of another toxicity study and not as a standalone test.
Ainete puhul, mille lahustuvus või kontsentratsiooni püsivus vees ja sellise kontsentratsiooni mõõtmine ei sea mingeid piiranguid veekaudse kokkupuute meetodi kasutamisele, tuleb aine võimaliku biokontsentreerumise hindamisel eelistada seda meetodit.
The selection of route of exposure and tissue(s) to be studied should be determined based on all available/existing knowledge of the test chemicals e.g. intended/expected route of human exposure, metabolism and distribution, potential for site-of-contact effects, structural alerts, other genotoxicity or toxicity data, and the purpose of the study.
Igal juhul tuleks veenduda, et veekaudsel kokkupuutel kasutatav(ad) kontsentratsioon(id) on aine katsekeskkonnas lahustuvuse vahemikus.
Thus, where appropriate, the genotoxic potential of the test chemicals can be assayed in the target tissue(s) of carcinogenic and/or other toxic effects.
Lahustunud uuritava aine püsiva sisalduse tagamiseks võib kasutada eri meetodeid, mis põhinevad näiteks põhilahuste kasutamisel või passiivsel doseerimissüsteemil (nt kolonnist elueerimise meetod), tingimusel, et on võimalik tõendada, et sealjuures säilitatakse püsiv kontsentratsioon ja punktis 27 esitatud soovituste kohane katsekeskkond ei muutu.
The assay is also considered useful for further investigation of genotoxicity detected by an in vitro system.
Väga hüdrofoobsete ainete puhul (log KOW > 5 ja lahustuvus alla ~ 0,01–0,1 mg/l) võib veekaudse kokkupuute hindamine muutuda üha raskemaks.
It is appropriate to perform an in vivo comet assay in a tissue of interest when it can be reasonably expected that the tissue of interest will be adequately exposed.
Sellega seotud piirangud võivad tuleneda asjaolust, et aine sisaldust vees ei ole võimalik hoida piisavalt püsivana (nt kokkupuutekatses kasutatavate nõude klaaspinnale sorbeerumise või kiire kalades omastamise tõttu), või sellest, et vesilahuses kasutatavad kontsentratsioonid on nii väikesed, et on võrreldavad analüütilise määmispiiriga või jäävad sellest allapoole [25].
The assay has been most extensively validated in somatic tissues of male rats in collaborative studies such as the JaCVAM trial (12) and in Rothfuss et al., 2010 (10).
Seejärel algab puhastumisetapp, mille vältel kalad ei puutu enam kokku uuritava ainega; selleks viiakse kalad üle puhtasse nõusse, mis sisaldab sama katselahust, kuid ilma uuritava aineta.
The liver and stomach were used in the JaCVAM international validation trial.
Võimaluse korral arvutatakse biokontsentratsioonitegur, soovitatavalt nii kalades mõõdetud kontsentratsiooni (Cf) ja vees mõõdetud kontsentratsiooni (Cw) suhtarvuna statsionaarses olekus (BCFSS; mõiste määratlus on esitatud 1. liites) kui ka kineetilise biokontsentratsioonitegurina (BCFK; mõisted ja ühikud on määratletud 1. liites), mis väljendab omastamise kiiruskonstandi (k1) ja puhastumise kiiruskonstandi (k2) suhet ning mille puhul eeldatakse esimest järku reaktsiooni kineetikat [28].
The liver, because it is the most active organ in metabolism of chemicals and also frequently a target organ for carcinogenicity.
Kui 28 päeva jooksul ei saavutata statsionaarset olekut, võib arvutada BCFi kineetilise lähenemisviisi abil (vt punkt 38) või pikendada omastamisetappi.
The stomach, because it is usually first site of contact for chemicals after oral exposure, although other areas of the gastro-intestinal tract such as the duodenum and jejunum should also be considered as site-of-contact tissues and may be considered more relevant for humans than the rodent glandular stomach.
Kui statsionaarse oleku saavutamiseks vajalik omastamisetapp on ebamõistlikult pikk (vt punktid 37 ja 38 ning 5. liide), tuleks eelistada kineetilist lähenemisviisi.
Care should be taken to ensure that such tissues are not exposed to excessively high test chemical concentrations (21).
Teise võimalusena tuleks väga hüdrofoobsete ainete puhul kaaluda toidukaudse kokkupuute katse tegemist [29], kui see on kooskõlas asjaomase õigusraamistikuga.
The technique is in principle applicable to any tissue from which analysable single cell/nuclei suspensions can be derived.
Omastamise kiiruskonstant, puhastumise (kao) kiiruskonstant (või keerulisemate mudelite puhul konstandid), biokontsentratsioonitegur (statsionaarses olekus ja/või kineetiline) ja võimaluse korral iga nimetatud parameetri usalduspiirid arvutatakse mudelist, mis kirjeldab kõige paremini uuritava aine mõõdetud kontsentratsioone kalades ja vees (vt 5. liide).
Proprietary data from several laboratories demonstrate its successful application to many different tissues, and there are many publications showing the applicability of the technique to organs or tissues other than liver and stomach, e.g. jejunum (22), kidney (23) (24), skin (25) (26), or urinary bladder (27) (28), lungs and bronchoalveolar lavage cells (relevant for studies of inhaled chemicals) (29) (30), and tests have also been performed in multiple organs (31) (32).
Kalade kehamassi suurenemine katse vältel põhjustab uuritava aine sisalduse vähenemise kasvavates kalades (nn kasvust tingitud lahjenemine), mistõttu kineetilise BCFi väärtust alahinnatakse juhul, kui seda ei korrigeerita kasvu suhtes (vt punktid 72 ja 73).
Whilst there may be an interest in genotoxic effects in germ cells, it should be noted that the standard alkaline comet assay as described in this test method is not considered appropriate to measure DNA strand breaks in mature germ cells.
BCF põhineb aine üldsisaldusel kalades (st kalade summaarsel märgmassil).
Since high and variable background levels in DNA damage were reported in a literature review on the use of the comet assay for germ cell genotoxicity (33), protocol modifications together with improved standardization and validation studies are deemed necessary before the comet assay on mature germ cells (e.g. sperm) can be included in the test method.
Eriotstarbel võib siiski kasutada ka kindlaksmääratud kudesid või organeid (näiteks lihaskude, maks), kui kalad on piisavalt suured, või jagada kala söödavaks (filee) ja mittesöödavaks (sisikond) osaks.
In addition, the recommended exposure regimen described in this test method is not optimal and longer exposures or sampling times would be necessary for a meaningful analysis of DNA strand breaks in mature sperm.
Kuna paljude orgaaniliste ainete biokontsentreerumise määra ja hüdrofoobsuse vahel on selge seos, on vastav seos ka uuritavate kalade lipiidisisalduse ja selliste ainete täheldatava biokontsentreerumise vahel.
Genotoxic effects as measured by the comet assay in testicular cells at different stages of differentiation have been described in the literature (34) (35).
Seega tuleks kõnealuste väga lipofiilsete ainetega (log KOW > 3) tehtavates katsetes sellest asjaolust tuleneva tulemuste varieeruvuse vähendamiseks kasutada biokontsentreerumise väljendamiseks peale katses otseselt saadud väärtuse ka normaliseeritud väärtust, mille aluseks on võetud kala lipiidisisaldus 5 % (terve kala märgmassist).
However, it should be noted that gonads contain a mixture of somatic and germ cells.
See on vajalik selleks, et eri ainete ja/või katsealuste liikidega saadud tulemusi oleks võimalik omavahel võrrelda.
For this reason, positive results in whole gonad (testis) are not necessarily reflective of germ cell damage; nevertheless, they indicate that tested chemical(s) and/or its metabolites have reached the gonad.
Valitud lipiidisisaldus 5 % on laialdaselt kasutusel, kuna see väljendab käesolevas katsemeetodis tavapäraselt kasutatavate kalade keskmist lipiidisisaldust (21).
Cross-links cannot be reliably detected with the standard experimental conditions of the comet assay.
TEAVE UURITAVA AINE KOHTA Peale sissejuhatuses punktis 3 kirjeldatud uuritava aine omaduste hõlmab nõutav teave ka aine mürgisust katses kasutatavale kalaliigile, soovitatavalt asümptootilist (st ajast sõltumatut) LC50, ja/või kaladega tehtud pikaajaliste katsete põhjal hinnatud mürgisust (nt katsemeetodid C.47 (22), C.15 (23) ja C.14 (24)).
Under certain modified experimental conditions, DNA-DNA and DNA-protein crosslinks, and other base modifications such as oxidized bases might be detected (23) (36) (37) (38) (39).
Uuritava aine kvantitatiivse sisalduse määramiseks katselahustes ja bioloogilises materjalis peaks olema kättesaadav teadaoleva mõõtetäpsusega, kordustäpsusega ja tundlikkusega asjakohane meetod koos üksikasjaliku kirjeldusega proovi ettevalmistamise ja säilitamise kohta.
But further work would be needed to adequately characterize the necessary protocol modifications.
Samuti peaks olema teada uuritava aine analüütiline määramispiir vees ja kalakudedes.
Thus detection of cross linking agents is not the primary purpose of the assay as described here.
Radioaktiivselt märgistatud uuritava aine kasutamise korral peaks see olema võimalikult puhas (soovitatavalt puhtusega > 98 %) ja peaks olema teada lisanditega seotud radioaktiivsuse protsentuaalne osakaal.
The assay is not appropriate, even with modifications, for detecting aneugens.
KATSE NÕUETEKOHASUS Katse vastab nõuetele, kui on täidetud järgmised tingimused: veetemperatuuri varieeruvus on väiksem kui ± 2 °C, kuna suured kõrvalekalded võivad mõjutada omastamise ja puhastumise puhul olulisi bioloogilisi parameetreid ning põhjustada loomadele stressi; lahustunud hapniku sisaldus ei lange alla 60 % küllastuskontsentratsioonist; uuritava aine kontsentratsiooni hoitakse omastamisetapi vältel kambrites vahemikus ± 20 % mõõtmistulemuste keskväärtusest; uuritava aine sisaldus on väiksem kui selle lahustuvus vees; seejuures võetakse arvesse katses kasutatava vee võimalikku mõju tegelikule lahustuvusele [30] suremus või kahjuliku mõju või haiguse osakaal kontroll- ja katserühma kalade hulgas on katse lõpus väiksem kui 10 %; kui katset pikendatakse mitme nädala või kuu võrra, peaks suremus või kahjuliku mõju osakaal kummaski kalade rühmas olema väiksem kui 5 % kuus ja kokku maksimaalselt 30 %.
Due to the current status of knowledge, several additional limitations (see Appendix 3) are associated with the in vivo comet assay.
Oluline erinevus katserühma(de)st ja kontrollrühmast analüüsimiseks võetud kalade kasvukiiruses võib viidata uuritava aine mürgisele toimele.
It is expected that the test method will be reviewed in the future and if necessary revised in light of experience gained.
VÕRDLUSAINED Teadaoleva biokontsentreerumise määraga ja aeglaselt metaboliseeruvate võrdlusainete kasutamine hõlbustab katsemeetodi kontrollimist, kui see on nõutav (näiteks kui laboris ei ole sellist katset varem läbi viidud või kui katsetingimused on muutunud).
PRINCIPLE OF THE METHOD
MEETODI KIRJELDUS Seadmed
A detailed description of dosing and sampling is given in paragraphs 36-40.
Tuleks jälgida, et katseseadmete mis tahes osade puhul ei kasutata materjale, mis võivad lahustuda, sorbeerida või leostuda ning avaldada kaladele kahjulikku mõju.
At the selected sampling time(s), the tissues of interest are dissected and single cells/nuclei suspensions are prepared (in situ perfusion may be performed where considered useful e.g. liver) and embedded in soft agar so as to immobilize them on slides.
Võib kasutada keemiliselt inertsest materjalist standardseid ristkülikukujulisi või silindrikujulisi mahuteid, mille mahutavus on kooskõlas biomassisisaldusega (vt punkt 43).
Cells/nuclei are treated with lysis buffer to remove cellular and/or nuclear membrane, and exposed to strong alkali e.g. pH ≥13 to allow DNA unwinding and release of relaxed DNA loops and fragments.
Pehmeid plasttorusid tuleks kasutada võimalikult vähe.
The nuclear DNA in the agar is then subjected to electrophoresis.
Kasutada tuleks polütetrafluoroetüleenist, roostevabast terasest ja/või klaasist torusid.
Normal non-fragmented DNA molecules remain in the position where the nuclear DNA had been in the agar, while any fragmented DNA and relaxed DNA loops would migrate towards the anode.
Kogemustest nähtub, et suure adsorptsiooniteguriga ainete, näiteks sünteetiliste püretroidide puhul võib olla vaja kasutada silaanitud klaasi.
After electrophoresis, the DNA is visualized using an appropriate fluorescent stain.
Sellisel juhul tuleks seadmed pärast kasutamist ära visata.
Preparations should be analysed using a microscope and full or semi-automated image analysis systems.
Enne katseorganismide viimist katsesüsteemi on soovitatav lasta süsteemil puutuda kokku katses kasutatavatel kontsentratsioonidel esineva uuritava ainega nii kaua, kui on vaja kokkupuutekontsentratsioonide püsivuse tõendamiseks.
The extent of DNA that has migrated during electrophoresis and the migration distance reflects the amount and size of DNA fragments.
Vesi
There are several endpoints for the comet assay.
Üldjuhul kasutatakse katses looduslikku vett, mis peaks pärinema saastumata ja ühtlase kvaliteediga allikast.
The DNA content in the tail ( % tail DNA or % tail intensity) has been recommended to assess DNA damage (12) (40) (41) (42).
Püsiva ühtlase kvaliteedi tagamiseks võib siiski olla otstarbekam kasutada taastatud vett (st demineraliseeritud vett, millele on lisatud teadaolev kogus teatud kindlaid toitaineid).
After analysis of a sufficient number of nuclei, the data are analysed with appropriate methods to judge the assay results.
Lahjendusvesi – st vesi, millesse segatakse uuritav aine enne katsenõusse viimist (vt punkt 30) – peaks olema sellise kvaliteediga, mis võimaldab valitud liigi kaladel kohanemis- ja katseperioodi vältel ellu jääda, ilma et neil täheldataks mingeid ebanormaalse välimuse või käitumise ilminguid.
It should be noted that altering various aspects of the methodology, including sample preparation, electrophoresis conditions, visual analysis parameters (e.g. stain intensity, microscope bulb light intensity, and use of microscope filters and camera dynamics) and ambient conditions (e.g. background lighting), have been investigated and may affect DNA migration (43) (44) (45) (46).
Ideaaljuhul tuleks tõendada, et katses kasutatava liigi kalad jäävad lahjendusvees ellu, kasvavad ja paljunevad (näiteks laborikultuuris või elutsüklit hõlmavas mürgisuskatses).
Each laboratory should establish experimental competency in the comet assay by demonstrating the ability to obtain single cell or nuclei suspensions of sufficient quality for each target tissue(s) for each species used.
Lahjendusvee kohta peaks teada olema vähemalt selle pH, karedus, tahkete osakeste üldsisaldus ja orgaanilise süsiniku üldsisaldus [31] ning soovitatavalt ka ammooniumisisaldus, nitritisisaldus ja mereliikide puhul soolsus.