natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If it can be demonstrated that: i) the validity criteria in paragraph 113 are fulfilled; and ii) lack of uptake is not due to some other shortcoming of the test (e.g. uptake duration not long enough, deficiency in food spiking technique leading to poor bioavailability, lack of sensitivity of the analytical method, fish not consuming food, etc.); it may be possible to terminate the study without the need to re-run it with a longer uptake duration.
Käesolevas jaotises kirjeldatakse katse ajal toimuva kalade kasvu (st kasvust tingitud lahjenemise) suhtes korrigeerimise standardmeetodit, mis on kohaldatav üksnes esimest järku reaktsiooni kineetika puhul.
If preliminary work has indicated that this may be the case, analysis of faeces, if possible, for undigested test substance may be advisable as part of a “mass balance” approach.
Omastamis- ja puhastumisetapi andmeid töödeldakse eraldi samal viisil.
Similar to the aqueous exposure test, fish of similar weight and length should be selected, with the smallest fish being no less than two-thirds of the weight of the largest (cf. paragraphs 40-42).
Igas rühmas (katserühm(ad) ja kontrollrühm) arvutatakse vähimruutude meetodil iga üksiku kala andmetest, mitte päevastest keskväärtustest lähtuvalt standardsete statistikameetodite abil kalade massi (ja massi pöördväärtuse) naturaallogaritmi ja aja (päevades) lineaarne korrelatsioon nii kogu katse vältel kui ka omastamisetapis ja puhastumisetapis.
The total number of fish for the study should be selected based on the sampling schedule (a minimum of one sample at the end of the uptake phase and four to six samples during the depuration phase, but depending on the phases' durations), taking into account the sensitivity of the analytical technique, the concentration likely to be achieved at the end of the uptake phase (based on prior knowledge) and the depuration duration (if prior knowledge allows estimation).
Näiteks on omastamisetapi kestus (st aeg, mille jooksul saavutatakse teatav protsentuaalne osakaal statsionaarsele olekule vastavast sisaldusest, nt t80 või t95) sellise uuritava aine puhul, mille log KOW = 4, järgmine (võrrandite A5.5, A5.16 ja A5.17 põhjal):
Fish should be stored, weighed individually (even if it proves necessary for the sample results to be combined subsequently) and total length measured.
Kui lipiidisisaldust ei ole määratud kõikidel proovivõtmiseks valitud kaladel, kasutatakse BCFi normaliseerimiseks keskmist lipiidisisaldust.
For a standard test with, for example, a 28-day depuration duration including five depuration samples, this means a total of 59-120 fish from test and 50-110 from control groups, assuming that the substance's analytical technique allows lipid content analysis to be carried out on the same fish.
Statsionaarsele olekule vastava BCFi puhul tuleks kasutada omastamisetapi lõpus uuritava ainega rühmas saadud tulemuste keskväärtust.
If lipid analysis cannot be conducted on the same fish as chemical analysis, and using control fish only for lipid analysis is also not feasible (cf. paragraph 56), an additional 15 fish would be required (three from the stock population at test start, three each from control and test groups at the start of depuration and three each from control and test groups at the end of the experiment).
Kineetilise BCFi normaliseerimise puhul on mõnel juhul õigustatud teistsuguse lähenemisviisi kasutamine, näiteks olukorras, kus lipiidisisaldus on omastamis- või puhastumisetapi jooksul märkimisväärselt muutunud.
An example sampling schedule with fish numbers can be found in Appendix 4.
Samas tuleks siiski alati kasutada söötmisrežiimi, millega hoitakse ära lipiidisisalduse muutumine suurel määral.
Similarly high water-to-fish ratios should be used as for the aqueous exposure method (cf. paragraphs 43 and 44).
[võrrand A5.30],
Although fish-to-water loading rates do not have an effect on exposure concentrations in this test, a loading rate of 0,1-1,0 g of fish (wet weight) per litre of water per day is recommended to maintain adequate dissolved oxygen concentrations and minimise test organism stress.
on lipiidisisalduse suhtes normaliseeritud kineetiline BCF (l/kg),
Test diet and Feeding
on lipiidide keskmine osakaal (märgmassi alusel) ja
During the acclimatisation period, fish should be fed an appropriate diet as described above (paragraph 117).
on kineetiline BCF (l/kg).
If the test is being conducted under flow-through conditions, the flow should be suspended while the fish are fed.
Käesoleva lisa peatükk C.20 „Hiidkiivriku (Daphnia magna) sigivuse katse“.
During the test, the diet for the test group should adhere to that described above (paragraphs 116-121).
Influence of partition coefficient of lipophilic compounds on bioconcentration kinetics with fish.
In addition to consideration of substance-specific factors, analytical sensitivity, expected concentration in the diet under environmental conditions and chronic toxicity levels/body burden, selection of the target spiking concentration should take into account palatability of the food (so that fish do not avoid eating).
Water Res.
Nominal spiking concentration of the test substance should be documented in the report.
22: 701–707.
Based on experience, spiking concentrations in the range of 1-1000 μg/g provide a practical working range for test substances that do not exhibit a specific toxic mechanism.
Nagu kõikide muudegi empiiriliste seoste puhul, tuleks enne veenduda, et asjaomane seos on kohaldatav ka uuritava aine puhul.
For substances acting via a non-specific mechanism, tissue residue levels should not exceed 5 μmol/g lipid since residues above this level are likely to pose chronic effects (19) (48) (50) [50].
Kalade massi omastamisetapi lõpus saab hinnata lähtuvalt varasematest uuringuandmetest või teadmistest katseliigi kalade massi eeldatava suurenemise kohta omastamisetapi tüüpilise kestuse (nt 28 päeva) jooksul võrdluses kalade tavapärase massiga katse alguses.
For other substances care should be taken that no adverse effects occur from the accumulated exposure (cf. paragraph 127).
Enamiku programmide puhul, mis võimaldavad kasutada lineaarset regressiooni (nt andmeanalüüsi mooduliga Microsoft Excel), arvutatakse ka asjaomase hinnangulise väärtuse standardviga ja usaldusvahemik.
This is especially true if more than one substance is being tested simultaneously (cf. paragraph 112).
Erinevalt lineaarse regressiooni meetodist ei võimalda see valem arvutada k2 standardviga.
The appropriate amount of the test substance can be spiked to the fish food in one of three ways, as described in paragraph 119 and Appendix 7.
Erinevalt lineaarse regressiooni meetodist ei võimalda see valem tavaliselt arvutada hinnangulise k1 standardviga ega usaldusvahemikku.
The methods and procedures for spiking the feed should be documented in the report.
Tuleks tähele panna, et hinnangulisek2 usaldusväärsust ei kasutata bioakumuleerumise mudelis õigel viisil, kui seda näitajat vaadeldakse järjestikuse lähendamise meetodi kohasel k1 lähendamisel konstantsena.
Untreated food is fed to the control fish, containing an equivalent quantity of unspiked oil vehicle if this has been used in the spiked feed for the uptake phase, or having been treated with “pure” solvent if a solvent vehicle was used for test group diet preparation.
Sellest tulenevalt on BCFi usaldusväärsus üheaegse ja järjestikuse lähendamise mudeli puhul erinev.
The treated and untreated diets should be measured analytically at least in triplicate for test substance concentration before the start and at the end of the uptake phase.
Jätked pärakuuime kiire lülidel.
After exposure to the treated feed (uptake phase), fish (both groups) are fed untreated food (depuration phase).
VEEKAUDSE KOKKUPUUTE MEETODI VÕRRANDITE OSA: MINIMEERITUD KATSEPLAAN
Fish are fed at a fixed ration (dependent on species; e.g. approximately 1-2 % of wet body weight per day in the case of rainbow trout).
Kui aine sisaldust kudedes (Cf1) mõõdetakse kokkupuute lõpus (t1) ja uuesti (Cf2) pärast teatava ajavahemiku möödumist (t2), võib puhastumise kiiruskonstandi (k2) hindamiseks kasutada 5. liites esitatud võrrandit A5.22.
The exact feeding rate set during the experiment should be recorded.
Omastamise kiiruskonstandi k1 võib seejärel algebraliste tehete abil arvutada 5. liites esitatud võrrandist A5.23 (kus Cf on võrdne Cf1-ga ja t on võrdne t1-ga) (1).
Initial feeding should be based on the scheduled weight measurements of the stock population just prior to the start of the test.
Minimeeritud katseplaani alusel saadud kineetiline biokontsentratsioonitegur (selle tähis on BCFKm, et eristada seda mõne muu meetodi kohaselt leitud kineetilisest biokontsentratsioonitegurist) on seega:
The amount of feed should be adjusted based on the wet weights of sampled fish at each sampling event to account for growth during the experiment.
[võrrand A6.1].
Weights and lengths of fish in the test and control tanks can be estimated from the weights and total lengths of fish used at each sampling event; do not weigh or measure the fish remaining in the test and control tanks.
Kontsentratsiooniandmeid või saadud tulemusi tuleks korrigeerida kasvust tingitud lahjenemise suhtes ja normaliseerida need lähtuvalt kala lipiidisisaldusest 5 %, nagu on kirjeldatud 5. liites.
It is important to maintain the same set feeding rate throughout the experiment.
Minimeeritud katseplaani alusel saadud BCFSS on BCF, mis on arvutatud omastamisetapi lõpus lähtuvalt eeldusest, et on saavutatud statsionaarne olek.
Feeding should be observed to ensure that the fish are visibly consuming all of the food presented in order to guarantee that the appropriate ingestion rates are used in the calculations.
Viimast on võimalik üksnes eeldada, sest proovivõtupunktide arv ei ole selle tõendamiseks piisav.
Preliminary feeding experiments or previous experience should be considered when selecting a feeding rate that will ensure that all food from once-daily feeding is consumed.
Minimeeritud katseplaani kohaneBCFSS
In the event that food is consistently being left uneaten, it may be advisable to spread the dose over an extra feeding period in each experimental day (e.g. replace once-daily feeding with feeding half the amount twice daily).
[võrrand A6.2],
If this is necessary, the second feeding should occur at a set time and be timed so that the maximum period of time possible passes before fish sampling (e.g. time for second feeding is set within the first half of an experimental day).
on kontsentratsioon kalas omastamisetapi lõpus eeldatavalt saavutatud statsionaarses olekus (mg/kg märgmassi alusel) ja
Although fish generally rapidly consume the food, it is important to ensure that the substance remains adsorbed to the food.
on kontsentratsioon vees omastamisetapi lõpus eeldatavalt saavutatud statsionaarses olekus (mg/l).
Efforts should be made to avoid the test substance becoming dispersed in water from the food, thereby exposing the fish to aqueous concentrations of the test substance in addition to the dietary route.
liide
This can be achieved by removing any uneaten food (and faeces) from the test and control tanks within one hour of feeding, but preferably within 30 minutes.
TOIDUKAUDSE KOKKUPUUTE MEETODI VÕRRANDITE OSA
In addition, a system where the water is continuously cleaned over an active carbon filter to absorb any ‘dissolved’ contaminant may be used.
Näide sobiva kaubandusliku kalasööda koostisosade sisalduse kohta
Flow-through systems may help to flush away food particles and dissolved substances rapidly [51].
Sööda rikastamise meetodite näited
In some cases, a slightly modified spiked food preparation technique can help to alleviate this problem (see paragraph 119).
Imendumistõhususe ja biokuhjumisteguri arvutamine
Light and Temperature
Lipiidisisalduse suhtes korrigeerimine
As for the aqueous exposure method (cf. paragraph 48), a 12 to 16 hour photoperiod is recommended and temperature (± 2 °C) appropriate for the test species used (cf. Appendix 3).
Alghetke iseloomustava mõõdetud sisalduse (C0,m) ja eeldatava sisalduse (C0,d) vahelise erinevuse hindamine
Type and characteristics of illumination should be known and documented.
Juhised uuritavate ainete kohta, millest puhastumine on väga kiire
One control group should be used, with fish fed the same ration as the test group but without the test substance present in the feed.
NÄIDE SOBIVA KAUBANDUSLIKU KALASÖÖDA KOOSTISOSADE SISALDUSE KOHTA
If an oil or solvent vehicle has been used to spike the feed in the test group, the control group food should be treated in exactly the same way but with the absence of test substance so that the diets of the test group and control group are equivalent (cf. paragraphs 121 and 139).
Peamine koostisosa
The conditions described in the aqueous exposure method apply here also, except that TOC need only be measured before the test as part of the test water characterisation (cf. paragraph 53).
Sisaldus kalajahus
Sampling and Analysis of Fish and Diet
Toorvalk
Analysis of Diet Samples
on üldine (kasvu suhtes korrigeerimata) puhastumise kiiruskonstant (päeva kohta), mis on arvutatud vastavalt 5. liite jaotises 3 esitatud võrranditele, I on söödatarbimise kiiruskonstant (sööda grammides grammi kala kohta päevas), Csööt on aine sisaldus söödas (milligrammides sööda kilogrammi kohta) ja
Samples of the test and control diets should be analysed at least in triplicate for the test substance and for lipid content at least before the beginning and at the end of the uptake phase.
t on söötmisperioodi kestus (päevades).
The methods of analysis and procedures for ensuring homogeneity of the diet should be included in the report.
Imendumistõhususe a täpse väärtuse leidmiseks võib siiski olla vaja korrigeerida arvutustes kasutatavat söödatarbimise kiirust I kalade kasvu suhtes.
Samples should be analysed for the test substance by the established and validated method.
[võrrand A7.4].
Pre-study work should be conducted to establish the limit of quantification, percent recovery, interferences and analytical variability in the intended sample matrix.
Samal viisil tuleks arvutada ka kasvu suhtes korrigeeritud biokuhjumistegur, mille puhul lähtutakse kasvu suhtes korrigeeritud puhastumise kiiruskonstandist (see leitakse vastavalt 5. liite jaotisele 7).
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
Kui α leidmiseks on kasutatud Ig-d, tuleks siingi kasutada I asemel seda konstanti:
Analysis of Fish
[võrrand A7.5],
At each fish sampling event, 5-10 individuals will be sampled from exposure and control treatments (in some instances numbers of control fish can be reduced; cf. paragraph 134).
on imendumistõhusus (uuritava aine absorbeerumine soolestikus),
Sampling events should occur at the same time on each experimental day (relative to feeding time), and should be timed so that the likelihood of food remaining in the gut during the uptake phase and the early part of the depuration phase is minimised to prevent spurious contributions to total test substance concentrations (i.e. sampled fish should be removed at the end of an experimental day, keeping in mind that an experimental day starts at the time of feeding and ends at the time of the next feeding, approximately 24 hours later.
on üldine (kasvu suhtes korrigeerimata) puhastumise kiiruskonstant (päeva kohta), mis on arvutatud vastavalt 5. liite jaotises 3 esitatud võrranditele,
Depuration begins with the first feeding of unspiked food; cf. paragraph 128).
on kasvu suhtes korrigeeritud puhastumise kiiruskonstant (päeva kohta) ja
The first depuration phase sample (taken shortly before the second feeding with unspiked food) is important as extrapolation back one day from this measurement is used to estimate the time zero concentration (C0,d, the concentration in the fish at the end of uptake/start of depuration).
on söödatarbimise kiiruskonstant (sööda grammides grammi kala kohta päevas).
Optionally, the gastrointestinal tract of the fish can be removed and analysed separately at the end of uptake and at days 1 and 3 of depuration.
Kasvu suhtes korrigeeritud poolväärtusaeg (t1/2) arvutatakse järgmiselt:
At each sampling event fish should be removed from both test vessels and treated in the same way as described in the aqueous method (cf. paragraphs 61-63).
[võrrand A7.6].
Concentrations of test substance in whole fish (wet weight) are measured at least at the end of the uptake phase and during the depuration phase in both control and test groups.
Aine toidust imendumise tõhusust saab hinnata ka aine jääkide määramisega omastamisetapi lineaarses osas (1.–3. omastamispäeval).
During the depuration phase, four to six sampling points are recommended (e.g. 1, 3, 7, 14 and 28 days).
Sel juhul leitakse aine imendumistõhusus (α) järgmiselt:
Optionally, an additional sampling point may be included after 1-3 days' uptake to estimate assimilation efficiency from the linear phase of uptake for the fish while still near the beginning of the exposure period.
[võrrand A7.7],
Two main deviations from the schedule exist: i) if an extended uptake phase is employed for the purposes of investigating uptake kinetics, there will be additional sampling points during the uptake phase and so additional fish will need to be included (cf. paragraph 126); ii) if the study has been terminated at the end of the uptake phase owning to no measurable uptake (cf. paragraph 131).
on uuritava aine kontsentratsioon kalas ajahetkel t (mg/kg märgmassi alusel).
Individual fish that are sampled should be weighed (and their total length measured) to allow growth rate constants to be determined.
LIPIIDISISALDUSE SUHTES KORRIGEERIMINE
Concentrations of the substance in specific fish tissue (edible and non-edible portions) can also be measured at the end of uptake and selected depuration times.
Kui kõikides proovivõtupunktides on nii lipiidisisaldus kui ka kemikaali sisaldus määratud samal kalal, tuleks igas kalas mõõdetud aine sisaldust korrigeerida asjaomase kala lipiidisisalduse alusel ja kanda lipiidisisalduse suhtes korrigeeritud naturaallogaritmitud kontsentratsiooniandmed graafikule päevades väljendatud puhastumisaja funktsioonina, et leida C0,d ja k2.
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
Seejärel saab arvutada imendumistõhususe (võrrand A7.1) lipiidisisalduse alusel; selleks kasutatakse näitaja Csööt puhul lipiidisisaldusest lähtuvat väärtust (st Csööt korrutatakse lipiidide keskmise osakaaluga söödas).
For the periodic use of a reference substance (cf. paragraph 25), it is preferable that concentrations are measured in the test group at the end of uptake and at all depuration times specified for the test substance (whole fish); concentrations need only be analysed in the control group at end of uptake (whole fish).
Järgnevalt saab võrrandite A7.4 ja A7.5 abil otse arvutada lipiidisisalduse (ja kasvust tingitud lahjenemise) suhtes korrigeeritud BMFi.
In certain circumstances (for example if analysis techniques for test substance and reference substance are incompatible, such that additional fish would be needed to follow the sampling schedule) another approach may be used as follows to minimise the number of additional fish required.
Muul juhul leitakse lipiidide keskmine massiosa kalades ja söödas nii katserühmas kui ka kontrollrühmas (sööda ja kontrollrühma kalade puhul kasutatakse tavaliselt kokkupuute alguses ja lõpus saadud andmeid, katserühma kalade puhul aga üksnes kokkupuute lõpus saadud andmeid).
Concentrations of the reference substance are measured during depuration only on days 1, 3 and two further sampling points, selected such that reliable estimations of time zero concentration (C0,d) and k2 can be made for the reference substance.
Mõne katse vältel võib kalade lipiidisisaldus oluliselt suureneda; sel juhul on asjakohasem kasutada katsealuste kalade keskmist lipiidisisaldust, mis on arvutatud kokkupuute lõpus ja puhastumise lõpus mõõdetud väärtuste põhjal.
If possible the lipid content of the individual fish should be determined on each sampling occasion, or at least at the start and end of the uptake phase and at the end of the depuration phase.
Üldjuhul tuleks kummagi lipiidide osakaalu näitaja leidmiseks kasutada üksnes katserühma andmeid.
(cf. paragraphs 56 and 67).
Lipiidisisalduse suhtes korrigeerimise tegur (Lc) arvutatakse järgmiselt:
Depending on the analytical method (refer to paragraph 67 and to Appendix 4), it may be possible to use the same fish for both lipid content and test substance concentration determination.
[võrrand A7.8],
This is preferred on the grounds of minimising fish numbers.
kus Lf ja Lsööt on lipiidide keskmine osakaal vastavalt kalades ja söödas.
However, should this not be possible, the same approach as described in the aqueous exposure method can be used (see paragraph 56 for these alternative lipid measurement options).
Lipiidisisalduse suhtes korrigeerimise teguri abil leitakse lipiidisisalduse suhtes korrigeeritud biokuhjumistegur (BMFL):
The method used to quantify the lipid content should be documented in the report.
[võrrand A7.9].
Quality of the analytical method
Alghetke iseloomustavat mõõdetud sisaldust (C0,m) ja eeldatavat sisaldust (C0,d) tuleks omavahel võrrelda.
Experimental checks should be conducted to ensure the specificity, accuracy, precision and reproducibility of the substance-specific analytical technique, as well as recoveries of the test substance from both food and fish.
Nende näitajate suur omavaheline sarnasus viitab puhastumisparameetrite leidmiseks kasutatud esimest järku reaktsiooni mudeli sobivusele.
At the start of the test a sample of fish from the stock population need to be weighed (and their total length measured).
Mõnes katses võidakse täheldada märkimisväärset erinevust alghetke iseloomustava eeldatava väärtuse C0,d ja mõõtmistulemuste keskväärtuse C0,m vahel (vt käesoleva katsemeetodi punkti 159 viimane alapunkt).
These fish should be sampled shortly before the first spiked feeding (e.g. one hour), and assigned to experimental day 0.
Kui C0,d on väga palju väiksem kui C0,m (C0,d << C0,m), võib see erinevus viidata seedimata rikastatud sööda esinemisele soolestikus.
The number of fish for this sample should be at least the same as that for the samples during the test.
Seda võib katseliselt kontrollida väljalõigatud seedekulgla eraldi analüüsimise teel, kui omastamisetapi lõpus on proovide jaoks võetud ja säilitatud täiendav arv terveid kalu.
Some of these can be the same fish used for lipid analysis before the start of the uptake phase (cf. paragraph 153).
Vastasel juhul ning kui puhastumisetapi andmete lineaarse regressiooni puhul kasutatud statistiliselt usaldusväärsest võõrväärtuste testist nähtub, et puhastumisetapi esimeses proovis mõõdetud sisaldus on ekslikult suur, võib olla asjakohane viia lineaarne regressioon k2 leidmiseks läbi ilma puhastumisetapi esimese kontsentratsioonipunktita.
At each sampling interval fish are first weighed and their length measured.
Kui sellise lineaarse regressiooni määramatus on oluliselt väiksem ja on selge, et puhastumiskineetika vastab ligikaudselt esimest järku reaktsiooni kineetikale, võib olla sobiv kasutada saadud C0,d ja k2 väärtust imendumistõhususe arvutamiseks.
In each individual fish the measured weight (and length) should be linked to the analysed chemical concentration (and lipid content, if applicable), for example using a unique identifier code for each sampled fish.
Katseprotokollis tuleks esitada sellekohane ammendav põhjendus.
The measurements of these sampled fish can be used to estimate the weight (and length) of fish remaining in the test and control tanks.
Samuti on võimalik, et puhastumine ei toimu vastavalt esimest järku reaktsiooni kineetikale.
Experimental Evaluation
Kui see on tõenäoline (st naturaallogaritmitud andmed näivad järgivat lineaarse regressiooni sirge asemel kõverjoont), on k2 ja C0,d arvutuslik väärtus ilmselt vale ning tuleks kasutada biostatistiku abi.