natgillin/translations-raw huggingface dataset:
In general, use the sludge without dilution.
Katse loetakse nõuetekohaseks, kui võrdluskemikaaliga rühmas, kus 3,5-diklorofenooli kontsentratsioon on 150 mg/l, on pärssumise määr üle 20 %, kemikaalita kontrollrühmas toodetakse üle 50 ml gaasi kuivaine grammi kohta ning pH väärtus jääb katse lõpus vahemikku 6,2–7,5.
The solids concentration is usually between 2 % and 4 % (w/v).
Katseprotokoll
Check the pH value of the sludge and, if necessary, adjust to 7 ± 0,5.
tavanimetus, keemiline nimetus, CASi number, struktuurivalem ja asjakohased füüsikalis-keemilised omadused;
Test substrate
uuritava kemikaali puhtus (lisandid).
Dissolve 10 g nutrient broth (e.g. Oxoid), 10 g of yeast extract and 10 g of D-glucose in deionised water and dilute to 100 ml.
katsenõudes oleva vedeliku ja vabaruumi maht;
Sterilise by filtration through a 0,2 μm membrane filter (paragraph 12(h)) and use immediately or store at 4 °C for not longer than 1 day.
katsenõude ja gaasimõõteseadme kirjeldus (nt rõhumõõturi tüüp);
Prepare a separate stock solution for each water-soluble test chemical to contain, for example, 10 g/l of the chemical in oxygen-free dilution water (paragraph 14).
teave uuritava kemikaali ja võrdluskemikaali lisamise kohta katsesüsteemi, katses kasutatud kontsentratsioonide kohta ja lahustite kasutamise kohta;
Use appropriate volumes of these stock solutions to prepare the reaction mixtures containing graded concentrations.
andmed kasutatud inokulumi kohta:
Alternatively, prepare a dilution series of each stock solution so that the volume added to the test bottles is the same for each required final concentration.
reoveepuhasti nimi, töödeldava reovee päritolu kirjeldus (nt töötemperatuur, muda retentsiooniaeg, kas tegemist on peamiselt olmereovee või tööstusliku reoveega jne), tahke aine sisaldus, gaasitootmise intensiivsus anaeroobses kääritusmahutis, varasem kokkupuude või võimalik eelnev kohanemine mürgiste kemikaalidega, muda või sette võtmise koht jne;
The pH of the stock solutions should be adjusted to 7 ± 0,2 if necessary.
inkubeerimise temperatuur ja kestus;
For test chemicals which are insufficiently soluble in water, consult ISO 10 634 (12) or equivalent EU standard.
paralleelkatsete arv.
If an organic solvent is needed to be used, avoid solvents such as chloroform and carbon tetrachloride, which are known strongly to inhibit methane production.
pH väärtus katse lõpus;
Prepare a solution of an appropriate concentration of water-insoluble chemical in a suitable volatile solvent, for example, acetone, di-ethylether.
kõik asjakohased katsenõudest, kemikaalita kontrollnõudest ja võrdluskemikaaliga nõudest saadud mõõteandmed (nt rõhk paskalites või millibaarides) tabeli kujul;
Add the required volumes of solvent solution to the empty test bottles (paragraph 12(b)) and evaporate the solvent before the addition of sludge.
pärssumise protsentuaalne määr katsepudelites ja võrdluskemikaaliga pudelites ning pärssumise määra ja kontsentratsiooni vahelise sõltuvuse kõverad;
For other treatments use ISO 10 634 (12) or equivalent EU standard, but be aware that any surfactants used to produce emulsions may be inhibitory to anaerobic gas production.
arvutatud EC50 väärtused, väljendatuna kujul mg/l ja mg/g;
If it is thought that the presence of organic solvents and emulsifying agents causes artefacts, the test chemical could be added directly to the test mixture as a powder or liquid.
gaasitoodang muda grammi kohta 48 tunni jooksul;
Volatile chemicals and water-insoluble liquid test chemicals may be injected into inoculated serum bottles, using micro-syringes (paragraph 12(i)).
teave selle kohta, kas katse eesmärk oli mõõta mürgisust kemikaaliga varem kokku puutunud mikroorganismidele või sellega varem mitte kokku puutunud mikroorganismidele.
Add test chemicals to the bottles to give a geometric series of concentrations, for example, 500 mg/l, 250 mg/l, 125 mg/l, 62,5 mg/l, 31,2 mg/l and 15,6 mg/l.
Käesoleva lisa peatükk B.11.
If the range of toxicity is not known from similar chemicals, first carry out a preliminary range-finding test with concentration of 1000 mg/l, 100 mg/l and 10 mg/l to ascertain the appropriate range.
mõõtmine gaasi eraldumise järgi”.
Prepare an aqueous solution of 3,5-dichlorophenol (10 g/l) by gradually adding the minimum amount of 5 mol/l of sodium hydroxide solution to the solid, while shaking, until it has dissolved.
A screening method for assessing the inhibition of the anaerobic gas production from sewage sludge.
Then add de-oxygenated dilution water (paragraph 14) to the required volume;
International Symposium on Ecotoxicology.
sonication may aid dissolution.
November 19-20, 1990, GSF-Forschungzentrum Neuherberg.
Other reference chemicals may be used when the average range of the EC50 has been obtained in at least three tests with different inocula (different sources or different times of collection).
Toim.
INTERFERENCE/ERRORS
Steinberg, C., ja Kettrup, A. Lk 117–132 (1992).
Some constituents of sludge presumably could react with potential inhibitors making them unavailable to micro-organisms so giving lower, or no, inhibition.
Näidisseade biogaasi tootmise mõõtmiseks gaasi rõhu järgi
Also, if the sludge already contains a chemical which is inhibitory, erroneous results would be obtained when that chemical was subjected to the test.
1 rõhumõõtur
Apart from these possibilities, there are a number of identified factors which can lead to false results.
2 gaasipidav 3-käiguline kraan
These are listed in Appendix 3, together with methods of eliminating or at least reducing errors.
3 süstlanõel
The number of necessary replicates depends on the degree of precision required for the inhibition indices.
4 gaasi mitte läbilaskev sulgur (valtsitav rõngaskork ja membraan)
If the bottle seals are sufficiently gas-tight over the duration of the test, set up just one batch (at least triplicates) of test bottles at each concentration required.
5 vabaruum
Similarly, set up one batch of bottles with reference chemical and one set of controls.
6 kääriva muda inokulum
However, if the seals of the bottles are reliable for only one or a few piercings, set up a batch (e.g. triplicates) of the test bottles for each interval (t) for which results are required for all concentrations of a test chemical to be tested.
Katsenõusid inkubeeritakse temperatuuril 35 ± 2 °C
Similarly, set up “t” batches of bottles for the reference chemical and for the controls.
Rõhumõõturi näitude teisendamine
The use of a glove box (paragraph 12(j)) is recommended.
Rõhumõõturi näidu põhjal gaasikoguse arvutamiseks võib kasutada standardkõverat, mille alusel leitakse muda kuivaine grammi kohta 48 tunni jooksul toodetud gaasi kogus.
At least 30 minutes before starting the test, start a flow of nitrogen gas through the glove box containing all the necessary equipment.
Seda muda aktiivsuse näitajat kasutatakse ühe kriteeriumina katsetulemuste nõuetekohasuse hindamisel.
Ensure that the temperature of the sludge is within 35 °C ± 2 °C during handling and sealing of the bottles.
Kaliibrimiskõvera koostamiseks süstitakse teadaolev kogus gaasi temperatuuril 35 ± 2 °C seerumipudelisse, mis sisaldab reaktsioonisegu ruumalale (VR) vastavas koguses vett.
Preliminary Test
viiesse seerumipudelisse, mida on hoitud temperatuuril 35 ± 2 °C, viiakse vee alikvoodid ruumalaga VR ml.
If the activity of the sludge is unknown, it is recommended to carry out a preliminary test.
Pudelid suletakse ja paigutatakse tasakaalustamiseks 1 tunniks veevanni, mille temperatuur on 35 ± 2 °C.
Set up controls to give, for example, concentrations of solids of 10 g/l, 20 g/l and 40 g/l plus substrate but use no test chemical.
rõhumõõtur lülitatakse sisse, lastakse stabiliseeruda ja viiakse selle näit 0 peale;
Also, use different volumes of reaction mixture in order to have three or four ratios of volume of headspace to volume of liquid.
Süstlanõel torgatakse läbi ühe pudeli korgi, avatakse ventiil ja suletakse see pärast rõhumõõturi näidu langemist nulli.
From the results of gas volumes produced at various time intervals, the most suitable conditions which allow two daily measurements yielding significant volumes of gas and release of pressure per day at optimal sensitivity [7] without fear of explosions.
sama korratakse ülejäänud pudelitega;
Addition of test chemicals
igasse pudelisse süstitakse 1 ml õhku temperatuuriga 35 ± 2 °C.
Add water-soluble test chemicals to empty test bottles (paragraph 12(b)) as aqueous solutions (paragraph 18).
Rõhumõõturiga ühendatud nõel surutakse läbi membraani ühte pudelisse ja lastakse rõhu näidul stabiliseeruda.
Use at least triplicate sets of bottles for each of a range of concentrations (paragraph 20).
Märgitakse rõhk üles, avatakse kraan, kuni rõhk on 0, ja seejärel kraan suletakse;
In the case of insoluble and poorly soluble test chemical, inject solutions of these in organic solvents using a micro-syringe into empty bottles to give replicate sets of each five concentrations of test chemical.
Kõiki kirjeldatud toiminguid korratakse, kasutades 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml, 6 ml, 8 ml, 10 ml, 12 ml, 16 ml, 20 ml ja 50 ml õhku.
Evaporate the solvent by passing a jet of nitrogen gas over the surface of the solutions in the test bottles.
Koostatakse rõhu (Pa) ja lisatud gaasikoguse (ml) vahelist sõltuvust väljendav teisendusgraafik.
Alternatively, add insoluble solid chemicals as weighed amounts of the solid directly to the test bottles.
Mõõturi näidud on lineaarsed rõhu vahemikus 0–70000 Pa ja vabanenud gaasi ruumala vahemikus 0–50 ml.
If insoluble and poorly water-soluble liquid test chemicals are not added using a solvent, add them directly by micro-syringe to the test bottles after addition of inoculum and test substrate (see paragraph 30).
Valesid tulemusi põhjustada võivad teadaolevad tegurid
Volatile test chemicals may be added in the same way.
Pudelikorkide kvaliteet
Addition of inoculum and substrate
Seerumipudelite jaoks on müügil eri tüüpi tihendkorke;
Stir an appropriate volume of sieved digesting sludge (see paragraph 16) in a 5 litre bottle (paragraph 12(g)), while passing a stream of nitrogen gas through the headspace.
paljud neist – sealhulgas butüülkummist korgid – kaotavad käesoleva katsemeetodi kohastes tingimustes pärast nõelaga läbitorkamist oma gaasikindluse.
Flush test bottles, containing aqueous solutions or evaporated solvent solutions of test chemicals, with a stream of nitrogen gas, for about two minutes to remove air.
Mõnikord langeb rõhk pärast süstlanõela korgist läbi torkamist väga aeglaselt.
Dispense aliquots, e.g. 100 ml, of the well-mixed sludge into the test bottles using a large-tipped pipette or a measuring cylinder.
Lekete ärahoidmiseks soovitatakse kasutada gaasikindlaid tihendkorke (punkti 12 alapunkt b).
It is essential to fill the pipette in one step to the exact volume of sludge required because of the ease of settlement of sludge solids.
Niiskus süstlanõelas
If more is taken up, empty the pipette and start again.
Mõnikord koguneb süstlanõela ja voolikusse niiskust, millest annab märku väike negatiivne rõhunäit.
Then add sufficient substrate solution (paragraph 17) to give a concentration of 2 g/l of each of the nutrient broth, yeast extract and D-glucose in the mixture, while nitrogen is still flushing through.
Olukorra parandamiseks eemaldatakse nõel, raputatakse voolikut, kuivatatakse see pehmepaberiga ja paigaldatakse uus nõel (punkti 12 alapunkt c ja punkt 35).
The following is an example for test batches.
Hapnikuga saastumine
Total volume of bottle = 160 ml.
Anaeroobseid protsesse käsitlevate meetoditega võidakse saada valed tulemused hapnikuga saastumise tõttu, mille tagajärjel võib gaasitootmine väheneda.
Volume of liquid = 103 ml
Käesoleva katsemeetodi puhul peaks see võimalus olema väga väike, kuna kasutatakse üksnes anaeroobsete protsesside jaoks ette nähtud metoodikat, sealhulgas kindakambrit.
Gas volume = 57 ml, or 35,6 % of total volume.
Mudas sisalduvad suuremõõtmelised substraadid
Final mass concentration of test chemical in test bottles
Anaeroobset gaasitootmist ja muda tundlikkust mõjutavad koos inokulumiga katsepudelisse viidavad substraadid.
Volume of test chemical
Olmereovee kääritusmahutitest pärit kääriv muda sisaldab sageli veel äratuntavaid koostisosi, näiteks juukseid ja tselluloosist koosnevaid taimejääke, mis võivad muuta representatiivse proovi võtmise raskeks.
Reagents and media
Mudas leiduvad suured lahustumatud koostisosad saab kõrvaldada sõelumise teel, mis suurendab representatiivsete proovide saamise tõenäosust (punkt 16).
Stock solution
Lenduv uuritav kemikaal
para.
Lenduv uuritav kemikaal koguneb katsepudeli vabaruumi.
18
See võib kaasa tuua uuritava kemikaali osalise kao süsteemist rõhu mõõtmisele järgneva gaasi väljalaskmise ajal ning sellest tuleneva EC50 väärtuse ülehindamise.
1 g/l
Kõnealust viga on võimalik vähendada, kui valitakse sobiv vabaruumi mahu ja vedelikumahu suhe ega lasta pärast rõhu mõõtmist gaasi välja (10).
Dilution water
Toodetava gaasikoguse mittelineaarne suurenemine
para.
Kui kõver, mis väljendab keskmise kumulatiivse toodetud gaasikoguse sõltuvust inkubeerimisajast, ei ole 48 tunni pikkuse perioodi lõikes üldjoontes lineaarne, võib katsetulemuste täpsus väheneda.
14
Selle ärahoidmiseks võib abi olla erinevast allikast pärit kääriva muda kasutamisest ja/või toitepuljongit, pärmiekstrakti ja glükoosi sisaldava katsesubstraadi (punkt 29) sisalduse suurendamisest.
para.
Mõju hindamine väikese biomassisisaldusega keskkonnaproovide – anaeroobse muda, sette jmt – puhul
para.
Sellest tulenevalt on vaja sellistele väiksema aktiivsusega proovidele avalduva kemikaalide pärssiva mõju hindamiseks teatavaid katsetingimusi muuta.
17
Kõnealuste väiksema aktiivsusega proovide puhul on võimalik kasutada ühte kahest üldisest lähenemisviisist:
Similarly flush out with nitrogen gas sufficient empty test bottles to deal with any volatile and insoluble liquid test chemical (see paragraph 27).
teha muudetud kujul eelkatse (punkt 25) lahjendamata mudaproovi, mullaproovi vmt-ga temperatuuril 35 ± 2 °C või keskkonnatingimuste täpsemaks jäljendamiseks proovi kogumiskohas valitseval temperatuuril (nagu on kirjeldatud standardi ISO 13641 1. osas);
Controls and reference chemical
teha katse kääritusmahutist pärit sajakordselt lahjendatud reoveemudaga, et jäljendada keskkonnaproovi eeldatavalt väikest aktiivsust, ent hoida temperatuuri väärtusel 35 ± 2 °C (nagu on kirjeldatud standardi ISO 13 641 2. osas).
Set up at least triplicate sets of bottles, containing sludge and substrate only, to act as controls.
A.2.
Set up further replicate bottles containing sludge and substrate plus sufficient stock solution of the reference chemical, 3,5-dichlorophenol (paragraph 21) to result in a final concentration of 150 mg/l.
Valiku a puhul võib järgida siin kirjeldatud meetodit (mis on samaväärne standardi ISO 13641 1. osaga), kuid on oluline teha eelkatse (punkt 25) optimaalsete tingimuste kindlakstegemiseks, kui need ei ole varasematest katsetest juba teada.
This concentration should inhibit gas production by about 50 %.
Muda- või setteproov tuleks näiteks segisti abil põhjalikult läbi segada ning lahjendada seda vajaduse korral väikese koguse desaereeritud lahjendusveega (punkt 14), et muuta see laiaotsalise pipeti või mõõtesilindriga ülekandmiseks piisavalt vedelaks.
Alternatively, set up a range of concentrations of the reference chemical.
Kui leitakse, et toitaineid on liiga vähe, võib mudaproovi tsentrifuugida (anaeroobsetes tingimustes) ja suspendeerida selle uuesti pärmiekstrakti sisaldavas mineraalses toitelahuses (A.11).
In addition, set up four extra bottles for pH measurement which contain sludge, de-oxygenated water and substrate.
A.3.
Add the test chemical to two bottles at the highest concentration being tested and add de-oxygenated water to the remaining two bottles.
Valik b.
Ensure that all bottles — test and reference chemicals, and controls — contain the same volume (VR) of liquid;
Selle valiku puhul jäljendatakse piisavalt hästi keskkonnaproovide väikest aktiivsust, saavutamata samal ajal sellistele proovidele omast suurt hõljuvaine sisaldust.
where necessary, add de-oxygenated deionised water (paragraph 14) to make up the volume.
Kõnealuse hõljuvaine roll pärssiva mõju avaldumisel ei ole teada, kuid on võimalik, et uuritava kemikaali reageerimine muda koostisosadega ja adsorbeerumine tahketele osakestele vähendab uuritava kemikaali mürgisust.
The headspace should be between 10 % and 40 % of the bottle volume, the actual value being selected from the data obtained from the preliminary test.
A.4.
After adding all constituents to the bottles, remove the needle supplying the gas and seal each bottle with a rubber stopper and an aluminium cap (Paragraph 12(b)) moistening the stopper with a drop of deionised water to aid insertion.
Üks oluline tegur on ka temperatuur:
Mix the contents of each bottle by shaking.
tingimuste range jäljendamise huvides tuleks katse teha proovivõtukoha temperatuuril, kuna on teada, et eri rühmadesse kuuluvad metaani tootvad bakterid eelistavad eri temperatuurivahemikke – termofiilid temperatuuri umbes 30–35 °C, mesofiilid temperatuuri 20–25 °C ja psührofiilid temperatuuri alla 20 °C – ning neile avalduv pärssiv mõju võib olla erinev.
Incubation of bottles
A.5.
Transfer the bottles to the thermostatically controlled incubator, preferably equipped with a shaking device, and maintained at 35 °C ± 2 °C.
Kestus.
The bottles are incubated in the dark.
Võrdlusuuringus täheldati, et 1. osa kohases üldkatses lahjendamata reoveemudaga toodetakse 2–4 ööpäeva jooksul alati piisavas koguses gaasi, kuid 2. osa kohases katses sajakordselt lahjendatud reoveemudaga toodetakse sama perioodi jooksul liiga vähe gaasi või ei toodeta seda üldse.
After about 1 hour, equalise the pressure in the bottles to atmosphere by inserting the syringe needle, attached to the pressure-meter (paragraph 12(c)), through the seal of each bottle in turn, open the valve until the pressure-meter reads zero and finally close the valve.
Madsen et al.
The needle should be inserted at an angle of about 45° to prevent gas leaking from the bottles.
(1996) on viimati nimetatud katset kirjeldades seisukohal, et katse kestus peaks olema vähemalt 7 ööpäeva.
If the bottles are incubated without shaking facility, shake manually twice each day during the total incubation period to equilibrate the system.
Katse väikesel biomassi kontsentratsioonil (valik b)
Incubate the bottles and invert them to prevent any loss of gas through the septum.
Põhitekstis tuleks teha järgmised muudatused ja parandused, millega täiendatakse mõnda olemasolevat punkti või alapunkti või asendatakse need.
Inversion is, however, not appropriate in cases in which insoluble test chemicals may adhere to the bottom of the flask.
A.6.
Pressure measurement
Punkti 6 „Katse põhimõte” täiendatakse järgmiselt:
When the bottles have reached 35 °C ± 2 °C, measure and record the pH of the contents of two of the four bottles set up for the purpose and discard the contents;
„Seda meetodit võib kasutada sajakordselt lahjendatud anaeroobse reoveemuda puhul, millega osaliselt jäljendatakse loodusliku muda ja sette väikest aktiivsust.
continue incubating remaining bottles in the dark.
Inkubeerimistemperatuur võib olla kas 35 °C või proovi kogumiskohas valitsev temperatuur.
Measure and record the pressure in the bottles twice a day over the following 48 hours to 72 hours by inserting the needle of the pressure-meter through the seal of each bottle, in turn, drying the needle between measurements.
Kuna bakterite aktiivsus sellises proovis on oluliselt väiksem kui lahjendamata reoveemudas, tuleks inkubeerimisperioodi pikendada vähemalt 7 ööpäevani.”
Keep all parts of the bottle at the incubation temperature during the measurement, which should be carried out as quickly as possible.
A.7.
Allow the pressure reading to stabilise and record it.
Punkti 12 alapunkti a täiendatakse järgmiselt:
Then open the valve for ventilation and close it when the pressure reads zero.
„inkubaator peaks olema võimeline hoidma ka madalamat, 15 °C-ni ulatuvat temperatuuri;”
The number of readings and ventilations should be limited for volatile chemicals to one (at the end of incubation) or two to minimise loss of test chemical (10).
Punkti 13 lõppu lisatakse järgmine reaktiiv:
If the pressure reading is negative, do not open the valve.
„Fosforhape (H3PO4) – 85 massiprotsendiline vesilahus.”
Measure and record the pH of the contents of each bottle after the final pressure measurement.
A.10.
Expression of results
Punkt 17:
Calculate the sum and average of the pressures recorded at each time interval for each set of replicate bottles and calculate the mean cumulative gross gas pressure at each time interval for each set of replicates.
Seda substraati ei kasutata, vaid see asendatakse pärmiekstraktiga (vt punktid 17, A.11, A.12 ja A.13).
Plot curves of mean cumulative gas production (Pa) against time for control, test and reference bottles.
A.11.
Select a time on the linear part of the curve, usually 48 hours, and calculate the percentage inhibition (I) for each concentration from equation [1]:
Anaeroobse reoveemuda lahjendamiseks on vaja mikroelemente sisaldavat mineraalset toitelahust, millele mugavuse huvides lisatakse orgaanilise substraadina pärmiekstrakt.
I percentage inhibition,in %;
Punkti 17 lõppu lisatakse järgmine tekst:
the gas pressure produced with test material at selected time, in Pascal (Pa);
Katses kasutatav mineraalne toitelahus pärmiekstraktiga.
the gas pressure produced in the control at the same time, in Pascal (Pa).
See toitelahus valmistatakse 10 korda kontsentreeritumast toitelahusest (punkti 17 alapunkt b ja punkt A.12) ja mikroelementide lahusest (punkti 17 alapunkt c ja punkt A.13).
It would be advisable to draw both plots, i.e. Plot I against concentration and also against logarithm of the concentration so that the curve which is nearer to linearity may be selected.
Kasutatakse äsja tarnitud naatriumsulfiidnonahüdraati (punkti 17 alapunkt b ja punkt A.12) või pestakse ja kuivatatakse see enne kasutamist, et tagada selle piisav redutseerimisvõime.
Assess the EC50 (mg/l) value visually or by regression analysis from that curve nearer to linearity.
Kui katse tegemisel ei kasutata kindakambrit (punkti 12 alapunkt j), tuleks suurendada naatriumsulfiidi sisaldust põhilahuses nii, et see oleks 1 g/l asemel 2 g/l.
For comparative purposes it may be more useful to express the concentration of the chemical as mg chemical/g of total dry solids.
Naatriumsulfiidi võib oksüdeerumisohu vähendamiseks lisada sobiva põhilahuse kujul ka suletud katsepudeli korgi kaudu, et saavutada lõppsisaldus 0,2 g/l.
To obtain this concentration, divide the volumetric concentration (mg/l) by the volumetric concentration of dry sludge solids (g/l) (paragraph 16).
Teise võimalusena võib kasutada titaan(III)tsitraati (punkti 17 alapunkt b).
Calculate either the percentage inhibition achieved by the single concentration of the reference chemical used or the EC50 if a sufficient number of concentrations have been investigated.
See lisatakse suletud katsepudeli korgi kaudu, et saavutada kontsentratsioon 0,8–1,0 mmol/l.
Convert the mean pressure of the gas produced in the control Pc(Pa) to the volume by reference to the pressure-meter calibration curve (Appendix 2) and from this calculate the yield of gas, expressed as the volume produced in 48 hours from 100 ml undiluted sludge at a solids concentration of 2 % (20 g/l) to 4 % (40 g/l).
Titaan(III)tsitraat on vähemürgine ja väga tõhus redutseeriv aine, mis valmistatakse järgmiselt:
Validity criteria
2,94 g trinaatriumtsitraatdihüdraati lahustatakse 50 ml hapnikuvabas lahjendusvees (punkt 14), et saada lahus kontsentratsiooniga 200 mmol/l, ning lisatakse 5 ml titaan(III)kloriidi lahust (15 g ainet 100 ml lahjendusvee kohta).
Results from the ISO inter-laboratory trial (5) showed the reference chemical (3,5-dichlorophenol) caused 50 % inhibition of gas production in a range of concentrations of 32 mg/l to 510 mg/l mean 153 mg/l (paragraph 10).
Lahuse pH reguleeritakse naatriumkarbonaadiga tasemele 7 ± 0,5 ühikut ja see viiakse gaasilise lämmastiku joa all sobivasse seerumipudelisse.