natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The test method is not applicable to volatile chemicals, i.e. chemicals for which the Henry's constant or the air/water partition coefficient is greater than one, or chemicals for which the vapour pressure exceeds 0,0133 Pa at 25 °C.
Igasse nõusse lisatakse sööt punktis 29 kirjeldatud viisil.
For the test to be valid, the following performance criteria should be met in the controls:
Igasse katsenõusse viiakse juhuvaliku alusel 10 ussi.
adult mortality should not exceed 20 % at the end of the range-finding test and after the first three weeks of the reproduction test.
Ussid pannakse näiteks juveliiripintsette, konksu või aasa kasutades ettevaatlikult igasse katsenõusse mullapinnale.
assuming that 10 adults per vessel were used in setting up the test, an average of at least 25 juveniles per vessel should have been produced at the end of the test.
Paralleelnõude arv iga katses kasutatava kontsentratsiooni puhul ja kontrollrühmades sõltub kasutatavast katseplaanist (vt punkt 34).
the coefficient of variation around the mean number of juveniles should not be higher than 50 % at the end of the reproduction test.
Katsenõud paigutatakse inkubaatorisse juhuslikult ja need paigutatakse iga nädal uuesti juhuslikkuse alusel ümber.
Where a test fails to meet the above validity criteria the test should be terminated unless a justification for proceeding with the test can be provided.
Kui uuritava kemikaaliga töötlemiseks kasutatakse kandeainet, tuleks moodustada lisaks katserühmadele üks kontrollrühm, kus kasutatakse kvartsliiva, millega on segatud või millele on pihustatud lahustit.
The justification should be included in the test report.
Lahusti või dispergaatori kasutamise korral peaks nende kontsentratsioon olema sama, mida kasutati uuritavat kemikaali sisaldavates nõudes.
A reference chemical should be tested either at regular intervals or possibly included in each test to verify that the response of the test organisms has not changed significantly over time.
Kemikaalide puhul, millega töötlemisel on vaja järgida punktis 21 kirjeldatud korda, tuleks moodustada kontrollrühm, kus kasutatakse täiendavalt kvartsliiva (2,5 g nõu kohta).
A suitable reference chemical is carbendazim, which has been shown to affect survival and reproduction of enchytraeids (13)(14), or other chemicals whose toxicity data are well known could be also used.
Katsetemperatuur on 20 ± 2 °C.
A formulation of carbendazim known by the trade name of Derosal™ supplied by AgrEvo Company (Frankfurt, Germany) and containing 360 g/l (32,18 %) active ingredient was used in a ring-test (2).
Et hoida ära usside põgenemist mullast, kasutatakse katses kontrollitavat valgustusrežiimi (soovitatavalt 16 tundi valgust ja 8 tundi pimedust) ja katsenõude inkubeerimisalal valgustustihedus 400–800 luksi.
The EC50 for reproduction determined in the ring test was in the range of 1,2 ± 0,8 mg active ingredient (a.i) /kg dry mass (2).
Mulla niiskusesisalduse kontrollimiseks kaalutakse katsenõusid katse alguses ja seejärel kord nädalas.
If a positive toxic standard is included in the test series, one concentration is used and the number of replicates should be the same as that in the controls.
Kaalu vähenemist kompenseeritakse sobiva koguse deioniseeritud vee lisamisega.
For carbendazim, the testing of 1,2 mg a.i./kg dry weight (tested as a liquid formulation) is recommended.
Tuleb märkida, et veekadu saab vähendada kõrge õhuniiskuse sisaldusega (> 80 %) katseinkubaatoris.
DESCRIPTION OF THE TEST
Niiskusesisaldust ja pH-d tuleks mõõta nii kontsentratsioonivahemiku leidmise katse kui ka lõpliku katse alguses ja lõpus.
Equipment
Mõõtmiste tegemiseks tuleks kasutada kemikaaliga igal kontsentratsioonil töödeldud mullaproove ja kontrollproove, mis on valmistatud ja mida inkubeeritakse samal viisil kui katsekultuure, kuid mis ei sisalda usse.
The test vessels should be made of glass or other chemically inert material.
Nendesse mullaproovidesse tuleks sööta lisada üksnes katse alguses, et soodustada mikroobide elutegevust.
Glass jars (e.g. volume: 0,20 - 0,25 litre; diameter: ≈ 6 cm) are suitable.
Lisatava sööda kogus peaks olema sama kui katsekultuuridesse lisatav kogus.
The vessels should have transparent lids (e.g. glass or polyethylene) that are designed to reduce water evaporation whilst allowing gas exchange between the soil and the atmosphere.
Nendesse nõudesse ei ole vaja katse vältel enam sööta juurde lisada.
The lids should be transparent to allow light transmission.
Söötmine
Normal laboratory equipment is required, specifically the following:
Võib kasutada sööta, mille puhul on tagatud valgeliimuklaste populatsiooni säilimine.
drying cabinet;
On kindlaks tehtud, et söödamaterjalina on sobiv kasutada valtsitud kaera, mis on soovitatav mikroobidega saastumise ärahoidmiseks enne kasutamist autoklaavida (sobib ka kuumutamine).
stereomicroscope;
Sööda esmakordseks lisamiseks segatakse 50 mg jahvatatud valtsitud kaera igas nõus mullaga enne usside lisamist.
pH-meter and photometer;
Seejärel lisatakse sööta igal nädalal kuni 21. katsepäevani.
suitable accurate balances;
Sööta ei lisata 28. katsepäeval, kuna selleks ajaks on täiskasvanud ussid juba eemaldatud ja noored ussid vajavad pärast seda suhteliselt vähe lisatoitu.
adequate equipment for temperature control;
Katse ajal lisatakse söödana 25 mg jahvatatud valtsitud kaera nõu kohta, pannes need ettevaatlikult mullapinnale, et usse mitte vigastada.
adequate equipment for humidity control (not essential if exposure vessels have lids);
Seente kasvu pärssimiseks tuleks kaerahelbed mulla sisse viia, kattes need väikese koguse mullaga.
incubator or small room with air-conditioner;
Kui sööt jäetakse söömata, tuleks söödakogust vähendada.
tweezers, hooks or loops;
Kontsentratsioonivahemiku leidmise katse plaan
photo basin.
Vajaduse korral tehakse kontsentratsioonivahemiku leidmise katse, milles kasutatakse näiteks viit uuritava kemikaali kontsentratsiooni: 0,1, 1,0, 10, 100 ja 1000 mg mulla kuivmassi kilogrammi kohta.
Preparation of the artificial soil
Iga katserühma ja kontrollrühma puhul piisab ühest nõust.
An artificial soil is used in this test (5)(7) with the following composition (based on dry weights, dried to a constant weight at 105 °C):
Kontsentratsioonivahemiku leidmise katse kestus on kaks nädalat.
10 % sphagnum peat, air-dried and finely ground (a particle size of 2 ± 1 mm is acceptable);
Katse lõpus hinnatakse usside suremust.
it is recommended to check that a soil prepared with a fresh batch of peat is suitable for culturing the worms before it is used in a test;
Uss loetakse surnuks, kui ta ei reageeri esiotsa mehaanilisele ärritamisele.
20 % kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %);
Lõplikus katses kasutamiseks sobiva kontsentratsioonivahemiku kindlaksmääramiseks võib olla kasu ka muust teabest peale suremuse.
approximately 0,3 to 1,0 % calcium carbonate (CaCO3, pulverised, analytical grade) to obtain a pH of 6,0 ± 0,5;
Seepärast tuleks registreerida ka muutused täiskasvanud isendite käitumises (nt võimetus mulda kaevuda või katsenõu klaasseina vastas liikumatult lamamine) ja morfoloogias (nt lahtiste haavade esinemine), samuti noorloomade esinemine.
the amount of calcium carbonate to be added may depend principally on the quality/nature of the peat;
Viimaste kindlakstegemiseks võib kasutada 6. liites kirjeldatud värvimismeetodit.
approximately 70 % air-dried quartz sand (depending on the amount of CaCO3 needed), predominantly fine sand with more than 50 % of the particles between 50 and 200 microns.
ligikaudseks määramiseks võib arvutada suremuse määra geomeetrilise keskväärtuse.
It is advisable to demonstrate the suitability of an artificial soil for culturing the worms and for achieving the test validity criteria before using the soil in a definitive test.
Lõplikus katses kasutatava kontsentratsioonivahemiku kindlaksmääramisel eeldatakse, et mõju sigivusele avaldub kuni 10 korda väiksemal kontsentratsioonil kui LC50.
It is especially recommended to make such a check to ensure that the performance of the test is not compromised if the organic carbon content of the artificial soil is reduced, e.g. by lowering the peat content to 4-5 % and increasing the sand content accordingly.
See suhe on siiski katseliselt leitud ja võib igal konkreetsel juhul olla erinev.
By such a reduction in organic carbon content, the possibilities of adsorption of test chemical to the soil (organic carbon) may be decreased and the availability of the test chemical to the worms may increase.
Lõplikus katses kasutatavat uuritava kemikaali kontsentratsioonide vahemikku võivad aidata kindlaks määrata ka muud kontsentratsioonivahemiku leidmise katses tehtud tähelepanekud, näiteks noorloomade esinemine.
It has been demonstrated that Enchytraeus albidus can comply with the validity criteria on reproduction when tested in field soils with lower organic carbon content than mentioned above (e.g. 2,7 %) (15), and there is experience — though limited — that this can also be achieved in artificial soil with 5 % peat.
täpseks määramiseks soovitatakse kasutada katses vähemalt nelja paralleelnõu uuritava kemikaali iga kontsentratsiooni kohta ja piisavat arvu eri kontsentratsioone, et saada vähemalt neli statistiliselt oluliselt erinevat vastuse keskväärtust.
When using natural soil in additional (e.g. higher tier) testing, the suitability of the soil and achieving the test validity criteria should also be demonstrated.
Vajaduse korral kasutatakse kontrollrühmade puhul sarnast arvu kontsentratsioone ja paralleelnõusid.
The dry constituents of the soil are mixed thoroughly (e.g. in a large-scale laboratory mixer).
Lõpliku sigivuskatse plaan
This should be done at least one week before starting the test.
Võrdlusuuringu (2) alusel välja töötatud soovitustest lähtuvalt pakutakse välja kolm katseplaani.
The mixed soil should be stored for two days in order to equilibrate/stabilise the acidity.
Täheldatavat toimet mitteavaldava kontsentratsiooni määramiseks tuleks kasutada vähemalt viit kontsentratsiooni geomeetrilises jadas.
For the determination of pH a mixture of soil and 1 M potassium chloride (KCl) or 0,01 M calcium chloride (CaCl2) solution in a 1:5 ratio is used (see (16) and Appendix 3).
Soovitatakse kasutada nelja paralleelnõu kontsentratsiooni kohta ja lisaks kaheksat kontrollnõu.
If the soil is more acidic than the required range (see paragraph 11), it can be adjusted by addition of an appropriate amount of CaCO3.
Kontsentratsioonide erinevused ei tohiks olla suuremad kui 1,8 korda.
If the soil is too alkaline it can be adjusted by the addition of more of the mixture, referred to in paragraph 11, but excluding the CaCO3.
ECx (nt EC10, EC50) määramiseks tuleks katses kasutada vähemalt viit kontsentratsiooni ja kasutatav kontsentratsioonivahemik peaks hõlmama ECx väärtust, et võimaldada määrata ECx interpoleerimise, mitte ekstrapoleerimise teel.
The maximum water holding capacity (WHC) of the artificial soil is determined in accordance with procedures described in Appendix 2.
Soovitatakse kasutada vähemalt nelja paralleelnõu kontsentratsiooni kohta ja nelja paralleelnõu kontrollrühmas.
One or two days before starting the test, the dry artificial soil is pre-moistened by adding enough de-ionised water to obtain approximately half of the final water content, that being 40 to 60 % of the maximum water holding capacity.
Kontsentratsioonide jada tegur võib varieeruda, st olla eeldatavas mõju avaldumise vahemikus 1,8 või väiksem ning sellest vahemikust väljaspool olevate suuremate ja väiksemate kontsentratsioonide puhul üle 1,8.
At the start of the test, the pre-moistened soil is divided into portions corresponding with the number of test concentrations (and reference chemical where appropriate) and controls used for the test.
Kombineeritud lähenemisviis võimaldab määrata nii täheldatavat toimet mitteavaldava kontsentratsiooni kui ka ECx.
The moisture content is adjusted to 40-60 % of the maximum WHC by the addition of the test chemical solution and/or by adding distilled or de-ionised water (see paragraphs 19-21).
Tuleks kasutada kaheksat uuritava kemikaali kontsentratsiooni geomeetrilises jadas.
The moisture content is determined at the beginning and at the end of the test (by drying to constant weight at 105 °C) and should be within the optimal range for the survival of the worms.
Soovitatav on teha neli paralleelkatset iga uuritava kontsentratsiooni juures ja kaheksa katset kontrollrühmaga.
A rough check of the soil moisture content can be obtained by gently squeezing the soil in the hand, if the moisture content is correct small drops of water should appear between the fingers.
Tuleks kasutada 10 täiskasvanud ussi katsenõu kohta (vt punkt 23).
Selection and preparation of test animals
Sööta lisatakse katsenõudesse katse alguses ja seejärel kord nädalas (vt punkt 29) kuni 21. katsepäeva lõpuni.
The recommended test species is Enchytraeus albidus Henle 1837 (white potworm), a member of the family Enchytraeidae (order Oligochaeta, phylum Annelida).
Kahekümne esimesel katsepäeval vaadatakse mullaproovid käsitsi hoolikalt läbi ning elusad täiskasvanud ussid loendatakse, neid vaadeldakse ja registreeritakse muutused nende käitumises (nt võimetus mulda kaevuda või katsenõu klaasseina vastas liikumatult lamamine) ja morfoloogias (nt lahtiste haavade esinemine).
E. albidus is one of the largest species of enchytraeids, with specimens of up to 35 mm in length being recorded (17)(18).
Seejärel eemaldatakse kõik täiskasvanud ussid katsenõudest ja katsemullast.
E. albidus has a world-wide distribution and is found in marine, freshwater and terrestrial habitats, mainly in decaying organic matter (seaweed, compost) and rarely in meadows (9).
Katsemulda koos kõikide selles sisalduvate moodustatud kookonitega inkubeeritakse veel kolm nädalat samades katsetingimustes;
E. albidus is commercially available, as a fish food.
Kuue nädala möödudes loendatakse katse vältel koorunud ussid.
It should be checked whether the culture is contaminated by other, usually smaller, species (1) (19).
Soovitatakse kasutada bengali punasega värvimisel põhinevat meetodit (vt 6. liide), kuid sobivaks on osutunud ka muud vedelikuga (kuid mitte kuumusega) ekstraheerimise ja vedelikupinnale toomise meetodid (vt 6. liide) (4, 10, 11, 20).
If contamination occurs, all worms should be washed with water in a petri dish.
Bengali punasega värvimist soovitatakse kasutada seepärast, et mullasubstraadist vedelikuga ekstraheerimise puhul võib segavaks teguriks olla suspendeeritud saviosakeste põhjustatud hägusus.
Large adult specimens of E. albidus should then be selected (using a stereomicroscope) to start a new culture and all other worms are discarded.
Kui kontsentratsioonivahemiku leidmise katses ei täheldata suurimal kasutatud kontsentratsioonil (nt kontsentratsioonil 1000 mg/kg) mingit mõju, võib sigivuskatse teha piirsisalduskatsena, kasutades kontsentratsiooni 1000 mg/kg, et tõendada, et täheldatavat toimet mitteavaldav kontsentratsioon on sigivuse puhul sellest väärtusest suurem.
E. albidus can be bred easily in a wide range of organic materials (see Appendix 4).
Katse lühikirjeldus ja ajakava
The life-cycle of E. albidus is short since maturity is reached between 33 days (at 18 °C) and 74 days (at 12 °C) (1).
Katse etapid võib kokku võtta järgmiselt:
Only cultures that have been kept without problems in the laboratory for at least 5 weeks (one generation) will be used for the test.
Aeg
Other species of the Enchytraeus genus are also suitable, e.g. E. buchholzi Vejdovsky 1879 or E. crypticus Westheide & Graefe 1992 (see Appendix 5).
7 päeva enne katset või varem
If other species of Enchytraeus are used, they must be clearly identified and the rationale for the selection of the species should be reported.
Valmistatakse tehismuld (kuivade koostisosade kokkusegamine)
The animals used in the tests are adult worms.
5 päeva enne katset
They should have eggs (white spots) in the clitellum region, and they should be approximately the same size (about 1 cm long).
Kontrollitakse kunstliku mulla pH-d
Synchronisation of the breeding culture is not necessary.
Mõõdetakse mulla maksimaalne veemahutavus
If the enchytraeids are not bred in the same soil type and under the conditions (including feeding) used for the final test they must be acclimatised for at least 24 hours and up to three days.
5 kuni 3 päeva enne katset
A larger number of adults than that needed for performing the test should initially be acclimatised to allow scope for rejection of damaged or otherwise unsuitable specimens.
Valitakse välja ussid katsetingimustega kohandamiseks
At the end of the acclimatisation period, only worms containing eggs and exhibiting no behavioural abnormalities (e.g. trying to escape from the soil) are selected for the test.
3 kuni 0 päeva enne katset
The worms are carefully removed using jeweller's tweezers, hooks or loops and placed in a petri dish containing a small amount of fresh water.
Nullpäev
Reconstituted fresh water as proposed in Chapter C.20 of this Annex (Daphnia magna Reproduction Test) is preferred for this purpose since de-ionised, de-mineralised or tap water could be harmful to the worms.
Loendatakse noorloomad Mõõdetakse mulla pH ja niiskusesisaldus
The worms are inspected under a stereomicroscope and any that do not contain eggs are discarded.
päev
Care is taken to remove and discard any mites or springtails that might have infected the cultures.
päev Kontrollitakse mulla niiskusesisaldust
Healthy worms not used for the test are returned to the stock culture.
Sööta ei lisata
Preparation of test concentrations
päev
Test chemical soluble in water
Määratakse noorloomade hinnanguline arv Mõõdetakse mulla pH ja niiskusesisaldus
A solution of the test chemical is prepared in deionised water in a quantity sufficient for all replicates of one test concentration.
Valmistatakse põhilahused Töödeldakse uuritava kemikaaliga
It is recommended to use an appropriate quantity of water to reach the required moisture content, i.e. 40 to 60 % of the maximum WHC (see paragraph 13).
päev
Each solution of test chemical is mixed thoroughly with one batch of pre-moistened soil before being introduced into the test vessel.
Kontrollitakse mulla niiskusesisaldust Lisatakse sööta 14. päev
Test chemical insoluble in water
Määratakse täiskasvanud usside suremus
For chemicals insoluble in water but soluble in organic solvents, the test chemical can be dissolved in the smallest possible volume of a suitable vehicle (e.g. acetone).
Jälgitakse täiskasvanud usside käitumist
Only volatile solvents should be used.
Kontrollitakse mulla niiskusesisaldust
The vehicle is sprayed on or mixed with a small amount, for example 2,5 g, of fine quartz sand.
Lisatakse sööta
The vehicle is eliminated by evaporation under a fume hood for at least one hour.
päev
This mixture of quartz sand and test chemical is added to the pre-moistened soil and thoroughly mixed after adding an appropriate amount of de-ionised water to obtain the moisture required.
Kontrollitakse mulla niiskusesisaldust Lisatakse sööta 42. päev
The final mixture is introduced into the test vessels.
Tulemuste töötlemine
For chemicals that are poorly soluble in water and organic solvents, the equivalent of 2,5 g of finely ground quartz sand per test vessel is mixed with the quantity of test chemical to obtain the desired test concentration.
Käesolevas katsemeetodis ei anta lõplikke juhiseid katsetulemuste statistilise analüüsi kohta; 7. liites on siiski esitatud asjakohane ülevaade.
This mixture of quartz sand and test chemical is added to the pre-moistened soil and thoroughly mixed after adding an appropriate amount of de-ionised water to obtain the required moisture content.
Kontsentratsioonivahemiku leidmise katses on peamine lõppnäitaja suremus.
The final mixture is divided between the test vessels.
Siiski tuleks registreerida ka muutused täiskasvanud isendite käitumises (nt võimetus mulda kaevuda või katsenõu klaasseina vastas liikumatult lamamine) ja morfoloogias (nt lahtiste haavade esinemine), samuti noorloomade esinemine.
The procedure is repeated for each test concentration and an appropriate control is also prepared.
Üldjuhul tuleks kasutada LC50 leidmiseks probitanalüüsi (21) või logistilist regressiooni.
Chemicals should not normally be tested at concentrations higher than 1000 mg/kg dry mass of soil.
Selle analüüsimeetodi sobimatuse korral (nt kui andmed hõlmavad vähem kui kolme kontsentratsiooni, mille puhul täheldatakse osalist suremust) võib kasutada mõnda alternatiivset meetodit.
Testing at higher concentrations may however be required in accordance with the objectives of a specific test.
Kõnealuse meetodina võib muu hulgas kasutada libiseva keskmise meetodit (22), kohandatud Spearmani-Kärberi meetodit (23) või lihtsat interpoleerimist (nt LC0 ja LC100 geomeetrilist keskmist, mis on saadud LC0 ja LC100 korrutisest ruutjuure võtmise teel).
PERFORMANCE OF THE TESTS
Lõplikus katses on lõppnäitaja sigivus (st sigitatud noorloomade arv).
Test groups and controls
Sarnaselt kontsentratsioonivahemiku leidmise katsele tuleks lõpp-protokolli siiski märkida ka kõik muud kahjuliku mõju ilmingud.
For each test concentration, an amount of test soil corresponding to 20 g dry weight is placed into the test vessel (see paragraphs 19-21).
Statistilise analüüsi käigus on vaja arvutada sigivuse aritmeetiline keskmine ja standardhälve igas katse- ja kontrollrühmas.
Controls, without the test chemical, are also prepared.
Dispersioonanalüüsi tegemise korral võib standardhälbe s ja selle vabadusastmete arvu df asendada vastavalt dispersioonianalüüsi (ANOVA) tulemusena leitud hajuvuse hinnangulise koondmäära ja selle vabadusastmete arvuga, eeldusel, et hajuvus ei sõltu kontsentratsioonist.
Food is added to each vessel in accordance with procedures described in paragraph 29.
Sellisel juhul kasutatakse kontroll- ja katserühmade puhul ühte hajuvuse väärtust.
Ten worms are randomly allocated to each test vessel.
Kõnealused väärtused arvutatakse tavaliselt müügiloleva statistilise analüüsi programmi abil, kasutades paralleelidena igas eraldi nõus saadud tulemusi.
The worms are carefully transferred into each test vessel and placed on the surface of the soil using, for example, jeweller's tweezers, hooks or loops.
Kui ilmneb, et negatiivse kontrolli ja lahustiga kontrolli andmete koondamine on mõistlikum kui võrdlemine ühe nimetatud kontrolliga, tuleks veenduda, et asjaomased andmed ei ole oluliselt erinevad (selleks sobivatele meetoditele osutatakse punktis 45 ja 7. liites).
The number of replicates for test concentrations and for controls depends on the test design used (see paragraph 34).
Edasine statistiline analüüs ja järeldused sõltuvad sellest, kas paralleelnõudes saadud väärtused on normaaljaotusega ja kas nende hajuvus on homogeenne.
The test vessels are positioned randomly in the test incubator and these positions are re-randomised weekly.
Täheldatavat toimet mitteavaldava kontsentratsiooni (NOEC) hindamine
If a vehicle is used for application of the test chemical, one control series containing quartz sand sprayed or mixed with solvent should be run in addition to the test series.
Soovitatavalt tuleks kasutada suure võimsusega meetodit.
The solvent or dispersant concentration should be the same as that used in the test vessels containing the test chemical.
Et hinnata andmete jaotuse ligikaudset vastavust normaaljaotusele, tuleks kasutada varasemal kogemusel, näiteks võrdlusuuringu andmetel või muudel varasematel andmetel põhinevat teavet.
A control series containing additional quartz sand (2,5 g per vessel) should be run for chemicals requiring administration in accordance with the procedures described in paragraph 21.
Hajuvuse homogeensus (homoskedastiivsus) on suurema tähtsusega.
The test temperature is 20 ± 2 °C.
Kogemusest nähtub, et hajuvus suureneb sageli keskväärtuse suurenedes.
To discourage worms from escaping from the soil, the test is carried out under controlled light-dark cycles (preferably 16 hours light and 8 hours dark) with illumination of 400 to 800 lux in the area of the test vessels.
Sellisel juhul võib homoskedastiivsuse saavutamiseks olla kasu andmete teisendamisest.