natgillin/translations-raw huggingface dataset:
A pre-determined amount of the test substance is dissolved in the test medium in a concentration of usually 2-10 mg of test substance per litre (one or more concentrations may be used).
Biolagunemise määr arvutatakse tekkinud anorgaanilise süsiniku ja metaanis oleva süsiniku protsendina uuritavas aines olnud süsiniku mõõdetud või arvutatud kogusest.
The solution is kept in a filled closed bottle in the dark in a constant temperature bath or enclosure controlled to ± 1 °C within a range of 15-20 °C.
Biolagunemise käiku saab jälgida üksnes tekkinud gaasi vahepealsete mõõtmistega.
In those cases where the objective of the study is to simulate environmental situations, tests may be carried out beyond this normal temperature range providing suitable adjustments are made for temperature control.
Lisaks sellele võib primaarse biolagunemise määrata konkreetse aine määramisega katse alguses ja lõpus.
The degradation is followed by oxygen analyses over a 28-day period.
Tulemuste õigesti tõlgendamiseks on vaja teada uuritava aine puhtust, vees lahustuvust, lenduvus- ja adsorptsiooniomadusi.
The ring test showed that if the test was extended beyond 28 days no useful information could be gathered, in most cases, due to severe interferences.
Uuritava kemikaali orgaanilise süsiniku sisaldus (massiprotsent) peab olema teada kas selle keemilise struktuuri põhjal või mõõtmise teel.
Thus, the recommended duration is 28 days, but if the blank BOD value remains within the 30 per cent limit (paragraphs 15 and 40) the test could be prolonged.
Sobiva uuritava kontsentratsiooni valimiseks ning halba biolagunduvust näitavate tulemuste tõlgendamiseks on kasulik omada teavet uuritava aine mürgisuse kohta anaeroobsete bakterite suhtes.
otherwise the chemical oxygen demand (COD) of the substance must be determined to serve as the reference value.
Meetodit võib rakendada vees lahustuvate ainete puhul;
The use of COD is less satisfactory since some substances are not fully oxidised in the COD test.
seda võib rakendada ka halvasti lahustuvate või lahustumatute ainete korral eeldusel, et kasutatakse täpse doseerimise meetodit, näiteks vt ISO 10634 (13).
The solubility of the substance should be at least 2 mg/l, though in principle less soluble substances could be tested (e.g. using ultra sonication) as could volatile substances.
Üldiselt tuleb iga lenduva aine puhul teha otsus eraldi.
Information on the toxicity of the substance to bacteria e.g. as measured in short-term respiration tests (4) may be very useful when selecting appropriate test concentrations and may be essential for the correct interpretation of low biodegradation values.
Võib-olla on vaja kasutada erimeetmeid, näiteks mitte lasta gaasi katse ajal välja.
However, such information is not always sufficient for interpreting results obtained in the biodegradation test and the procedure described in paragraph 27 is more suitable.
Katse läbiviimise kontrollimiseks tehakse katse võrdluskemikaaliga; selleks pannakse osana tavapärasest katsest käima ka sobivad anumad võrdlusainega.
Aniline, sodium acetate or sodium benzoate (for example) may be used for this purpose.
Fenool, naatriumbensoaat ja polüetüleenglükool 400 on näiteks ühendid, millest teoreetilise gaaside (metaani ja anorgaanilise süsiniku) vabanemise järgi peaks 60 päevaga lagunema üle 60 % (3, 14).
A degradation of these substances of at least 60 per cent (of their ThOD) must occur within a reasonably short time span, otherwise it is recommended that the test be repeated using another seawater sample.
KATSETULEMUSTE KORRATAVUS
In the EC ring-test where seawater samples were taken at different locations and at different times of the year, the lag phase (tL) and the time to achieve 50 per cent degradation (t50), not including the lag phase, were 0 to 2 days and 1 to 4 days respectively for sodium benzoate.
Rahvusvahelises võrdluskatses (14) oli kolme paralleelkatse korratavus gaasi rõhu mõõtmiste järgi hea.
For aniline the tL and t50 values were 0 to 7 and 2 to 12 days respectively.
Suhteline standardhälve (variatsioonikordaja, COV) oli üldiselt alla 20 %, kuigi sageli tõusis see väärtus üle 20 % mürgise aine juuresolekul või 60-päevase inkubatsiooniperioodi lõpus.
REPRODUCIBILITY
Suuremaid kõrvalekaldeid esines ka nõudes, mille maht oli alla 150 ml.
The reproducibility of the methods was established in the EC ring test (3).
Katsekeskkonna pH oli katse lõpus vahemikus 6,5–7,0.
Normal laboratory equipment and:
Laboritevahelises võrdluskatses saadi järgmised tulemused.
250-300 ml BOD bottles with glass stoppers or narrow neck 250 ml bottle with glass stoppers may be used;
Uuritav aine
Several 2-, 3- and 4- litre bottles with litre marks for the preparation of the experiment and for the filling of the BOD bottles;
Andmeid kokku
Waterbath or constant temperature room for keeping the bottles at constant temperature (± 1 °C) with the exclusion of light.
Keskmine lagunemine
Equipment for analysis of dissolved oxygen;
(kõigist andmetest)
Membrane filters, 0,2-0,45 μm (optional);
Suhteline standardhälve
Equipment for specific analysis (optional).
Nõuetekohaseid andmeid
Collect a seawater sample in a thoroughly cleansed container and transport to the laboratory, preferably within one or two days of collection.
(nõuetekohastest andmetest)
During transport do not allow the temperature of the sample to exceed significantly the temperature to be used in the test.
Andmeid lagunemisprotsendiga > 60 % nõuetekohastes katsetes
Identify the sampling location precisely and describe it in terms of its pollutional and nutritional status.
Palmitiinhape
Especially for coastal or polluted waters, include in this characterisation a heterotrophic microbial colony count and the determination of concentrations of dissolved nitrate, ammonium and phosphate.
Polüetüleen-glükool 400
appearance of sample — turbid etc.;
Kõigist palmitiinhappe ja polüetüleenglükool 400 tulemustest leitud keskväärtuse variatsioonikordaja oli vastavalt 45 % (n = 36) ja 35 % (n = 38).
dissolved organic carbon (DOC);
Kui väärtused alla 40 % ja üle 100 % jäeti välja (esimeste puhul oletati ebasoodsaid tingimusi, teiste puhul mingeid tundmatuid põhjusi), vähenesid COV väärtused vastavalt 26 % ja 23 %-ni.
If the DOC content of the sample is found to be high or if it is thought that the blank BOD after 28 days would be more than 30 per cent of that of the reference substances, it is recommended that the seawater be aged for about a week prior to use.
Selliste „nõuetekohaste” väärtuste osakaal, milles saavutati vähemalt 60 % lagunemine, oli palmitiinhappe puhul 70 % ja polüetüleenglükool 400 puhul 83 %.
Age the sample by storing it under aerobic conditions at the test temperature and in the dark or in diffuse light.
Biolagunemise protsendi osa, mis määrati lahustunud anorgaanilise süsiniku mõõtmistest, oli suhteliselt madal, kuid muutuv.
In the ring-test (3), no difference was revealed between the degradation potential of aged and freshly collected seawater samples.
Palmitiinhappe puhul oli see vahemikus 0–35 %, keskmine 12 % ja COV 92 % ning polüetüleenglükool 4000 puhul 0–40 %, keskmine 24 % ja COV oli 54 %.
Prior to use, pretreat the seawater to remove coarse particles e.g. by filtration through a nylon filter or a coarse paper filter (not membrane or GF-C filters), or by sedimentation and decanting.
a. sädemekindel inkubaator, mis hoiab temperatuuri 35 ± 2 °C;
Report the procedure used.
b. sobiva nominaalmahuga [14] ja rõhule vastupidavad klaasist katsenõud, millest igaüks on varustatud gaasi mitte läbilaskva membraaniga, mis talub survet ligikaudu 2 baari.
Pretreat after ageing, if used.
Vabaruum peaks olema ligikaudu 10–30 % koguruumalast.
Prepare the following stock solutions using analytical grade reagents:
Kui biogaasi vabaneb pidevalt, piisab vabaruumist 10 %, kuid kui gaas vabaneb alles katse lõpus, on vajalik vabaruum 30 %.
Add per litre of pre-treated seawater 1 ml of each of the above stock solutions.
Kui igal proovivõtuajal lastakse rõhul langeda, soovitatakse kasutada klaasist seerumipudeleid nominaalmahuga 125 ml ja üldmahuga ligikaudu 160 ml, mis on suletud seerumimembraaniga [15] ja sellele valtsitud alumiiniumrõngaga;
Saturate the test medium with air at the test temperature by aerating with clean compressed air for about 20 minutes.
c. rõhumõõtmisseade, [16] mis sobib tekkiva gaasi mõõtmiseks ja väljalaskmiseks, näiteks käeshoitav täppismanomeeter, mis on varustatud sobiva süstlanõelaga;
Determine the concentration of dissolved oxygen for control purposes.
gaasipidav 3-käiguline kraan hõlbustab ülerõhu väljalaskmist (1. liide).
The saturated concentration of dissolved oxygen as a function of salinity and temperature may be read from the nomogram enclosed with this test method (Appendix 4).
rõhu näitu kasutatakse otse selleks, et arvutada tekkinud süsiniku kogus vabaruumis (punktid 42–44).
Determine (optionally) the number of colony-forming heterotrophs in the seawater test medium (and preferably also in the original seawater sample), e.g. by plate count using a marine agar.
Teise võimalusena võib rõhunäidud sobiva teisendusgraafiku abil muuta tekkinud gaasi ruumaladeks (35 °C juures atmosfäärirõhul).
Preparation of test bottles
Teisendusgraafik koostatakse andmete põhjal, mis saadakse teadaolevate lämmastiku ruumalade süstimisega katsenõudesse (näiteks seerumipudelitesse) 35 ± 2 °C juures ja saadavate stabiliseerunud rõhunäitude registreerimisega (vt 2. liide).
Perform all necessary manipulations including ageing and pre-treatment of the seawater at the chosen test temperature between 15 to 20 °C, ensuring cleanliness, but not sterility of all glassware.
Arvutus on esitatud punkti 44 märkuses.
Prepare groups of BOD bottles for the determination of the BOD of the test and reference substances in simultaneous experimental series.
Hoiatus: mikrosüstalde kasutamisel vältige torkevigastusi;
Perform all analyses on duplicate bottles (blanks, reference and test substances), i.e. prepare two bottles for each determination.
d. süsinikuanalüsaator, mis sobib anorgaanilise süsiniku otseseks määramiseks vahemikus 1–200 mg/l;
Perform analyses at least on days 0, 5, 15 and 28 (four determinations).
e. suure täpsusega süstlad gaasi- ja vedelikeproovide võtmiseks;
For oxygen analyses, four determinations require a total of 3 × 2 × 4 = 24 bottles (blank, reference and test substance), and thus about 8 litres of test medium (for one concentration of test substance).
f. magnetsegajad ja magnetpulgad (soovi korral);
Prepare separate solutions of test and reference substances in large bottles of sufficient volume (paragraph 11) by first adding test and reference substances either directly or by using a concentrated stock solution to the partly filled large bottles.
g. kindakapp (soovituslik).
Add further test medium to give the final desired concentrations.
Destilleeritud või deioniseeritud vesi, mis on vabastatud hapnikust läbipuhumisega, milleks kasutatakse gaasilist lämmastikku hapnikusisaldusega alla 5 μl/l; vesi peab sisaldama vähem kui 2 mg/l lahustunud orgaanilist süsinikku (DOC).
If stock solutions of test and/or reference substances are used, ensure that the salinity of the seawater medium is not significantly altered.
Valmistatakse lahjenduslahus, mis sisaldab järgmisi aineid näidatud koguses:
Select concentrations of test and reference substances by taking into account:
veevaba kaaliumdivesinikfosfaat, KH2PO4
the solubility of dissolved oxygen in seawater at the prevailing test temperature and salinity (see the enclosed nomogram — Appendix 4);
dinaatriumvesinikfosfaatdodekahüdraat, Na2HPO4 · 12H2O
the blank BOD of the seawater;
ammooniumkloriid, NH4Cl
and
kaltsiumkloriiddihüdraat, CaCl2 · 2H2O
the expected biodegradability of the test substance.
0,075 g
At 15 °C and 20 °C and 32 parts per thousand salinity (ocean water), the solubility of dissolved oxygen is about 8,1 and 7,4 mg/l respectively.
magneesiumkloriidheksahüdraat, MgCl2 · 6H2O
The oxygen consumption of the seawater itself (blank respiration) may be 2 mg O2/l or more, if the seawater is not aged.
raud(II)kloriidtetrahüdraat, FeCl2 · 4H2O
Therefore in order to ensure a significant oxygen concentration remaining after oxidation of the test substance, use a starting concentration of test substance of about 2-3 mg/l (depending on the ThOD) for the substances that are expected to become completely degraded under the conditions of the test (such as reference substances).
resasuriin (hapniku indikaator)
Test less degradable substances at higher concentrations, up to about 10 mg/l, provided that toxic effects do not occur.
0,001 g
It can be advantageous to run parallel tests with a low (about 2 mg/l) and a high (about 10 mg/l) concentration of test substance.
naatriumsulfiidnonahüdraat, Na2S · 9H2O
An oxygen blank must be determined in parallel in bottles containing neither test or reference substance.
mikroelementide põhilahus (soovi korral, punkt 18)
If inhibitory effects are to be determined, prepare the following series of solutions in separate large bottles (paragraph 13):
lisada hapnikuvaba vett (punkt 15)
2 mg per litre of an easily-degradable substance, e.g. any of the reference substances mentioned;
kuni 1 liitrini
x mg per litre of test substance (x is usually 2);
kasutada tuleks värskelt tarnitud naatriumsulfiidi või see peaks olema pestud ja enne kasutamist kuivatatud, et tagada piisav taandamisvõime.
2 mg per litre of the easily-degradable substance plus x mg per litre of test substance.
Katse võib teha ilma kindakappi kasutamata (vt punkt 26).
If the option of using specific analyses is used, a physical-chemical experiment may be performed in order to check whether the test substance is removed by abiotic mechanisms, such as hydrolysis or adsorption.
Sel juhul peaks naatriumsulfiidi lõppkontsentratsioon katsekeskkonnas olema suurem, 0,20 g Na2S · 9H2O liitris.
A physical-chemical control test may be performed by adding mercury (II) chloride (HgCl2) [11] (50-100 mg/l) to duplicate flasks with test substance in order to stop microbial activity.
Naatriumsulfiidi võib lisada ka sobiva anaeroobse põhilahusena läbi suletud katsenõu membraani, kuna see vähendab oksüdeerumisohtu.
A significant decrease in specific substance concentration in the course of the test indicates abiotic removal mechanisms.
Naatriumsulfiidi võib asendada titaan(III)tsitraadiga, mida lisatakse läbi suletud katsenõu membraani lõppkontsentratsioonini 0,8–1,0 mmol/l.
Number of BOD bottles in a typical run
Titaan(III)tsitraat on väga tõhus ja vähemürgine taandav reagent, mis valmistatakse järgmiselt:
In a typical run the following bottles are used:
lahustakse 2,94 g trinaatriumtsitraatdihüdraati 50 ml hapnikuvabas vees (saadakse kontsentratsioon 200 mmol/l) ja lisatakse 5 ml 15 % (mass/maht) titaan(III)kloriidi lahust;
at least 8 containing test substance;
lahuse pH viiakse leelisega 7 ± 0,2 juurde ja lahus viiakse lämmastikujoa all sobivasse nõusse;
at least 8 containing nutrient-fortified seawater only;
titaan(III)tsitraadi kontsentratsioon sellises põhilahuses on 164 mmol/l.
at least 8 containing reference substance, and when necessary
Katsekeskkonna komponendid, välja arvatud taandaja (naatriumsulfiid, titaantsitraat) segatakse ja lahusest puhutakse vahetult enne kasutamist läbi gaasilist lämmastikku umbes 20 minutit, et eemaldada hapnik.
6 bottles containing test and reference substances (toxicity control).
Seejärel lisatakse sobiv kogus värskelt valmistatud taandaja lahust (valmistatud hapnikuvabas vees) vahetult enne katsekeskkonna kasutamist.
After preparation, immediately siphon each solution, from the lower quarter (not from the bottom) of the appropriate large bottle, to fill the respective group of BOD bottles.
Katsekeskkonna pH viiakse vajaduse korral lahjendatud mineraalse happe või leelise abil 7 ± 0,2 peale.
Immediately analyse the zero controls (time zero) for dissolved oxygen (paragraph 33) or preserve them for later chemical analysis by precipitation with MnCl2 (manganese (II) chloride) and NaOH (sodium hydroxide).
Mikroelementide põhilahus (soovi korral)
Incubate the remaining parallel BOD bottles at the test temperature (15-20 °C), keep in the dark, and remove from the incubation area at appropriate time intervals, (e.g. after 5, 15 and 28 days as a minimum) and analyse for dissolved oxygen (paragraph 33).
On soovitatav, et kasvukeskkond sisaldaks järgmisi mikroelemente, kuna see tõhustab anaeroobse lagunemise protsesse, eriti kui kasutatakse madalat inokulumi kontsentratsiooni (nt 1 g/l) (11).
Membrane filter (0,2-0,45 μm) or centrifuge, for 15 minutes, samples for specific analyses (optional).
mangaankloriidtetrahüdraat, MnCl2 · 4H2O
Store for up to 48 hours at 2-4 °C, or for longer periods at – 18 °C, if not analysed immediately (if it is known that the test substance will remain unaffected, acidify to pH 2 before storing).
50 mg
Dissolved oxygen determination
boorhape, H3BO3
Determine the concentration of dissolved oxygen using a chemical or electrochemical method which is recognised nationally or internationally.
5 mg
Record analytical results on the attached data sheets (Appendix 5).
vask(II)kloriid, CuCl2
Calculate the BOD as the difference of the oxygen depletion between a blank and a solution of test substance under the conditions of the test.
3 mg
Divide the net oxygen depletion by the concentration (w/v) of the substance in order to express the BOD as mg BOD/mg test substance.
dinaatriummolübdaatdihüdraat, Na2MoO4 · 2H2O
The degradation is defined as the ratio of the biochemical oxygen demand to either, preferably, the theoretical oxygen demand (ThOD) or the chemical oxygen demand (COD) and expressed as a percentage (see paragraph 36).
koobaltkloriidheksahüdraat, CoCl2 · 6H2O
Calculate the biodegradation values for each sampling time for both test and reference substances using one or other of the equations:
100 mg
ThOD theoretical oxygen demand (calculation, Appendix 3)
nikkelkloriidheksahüdraat, NiCl2 · 6H2O
COD chemical oxygen demand, determined experimentally.
10 mg
Sometimes the two ways of calculation (percentage of the ThOD or percentage of the COD) do not give the same results;
dinaatriumselenit, Na2SeO3
it is preferable to use ThOD, since some substances are not fully oxidised in the COD test.
Uuritav aine lisatakse põhilahuse, suspensiooni või emulsioonina või otse tahke aine või vedelikuna või adsorbeerituna klaaskiudfiltrile, nii et lõppkontsentratsioon ei ületaks 100 mg orgaanilist süsinikku liitris.
Illustrate the course of the degradation test graphically in a diagram (see example in section on “Validity and interpretation of results”.
Kui kasutatakse põhilahust, tehakse sobiv lahus vees (punkt 15) (mis on enne gaasilise lämmastiku läbipuhumisega hapnikust vabastatud) sellise kontsentratsiooniga, et lisatav ruumala ei suurendaks reaktsioonisegu koguruumala rohkem kui 5 %.
If there are sufficient data, calculate the lag phase (tL) and the time (t50) to reach 50 per cent removal from the end of the lag phase from the biodegradation curve.
Põhilahuse pH viiakse vajaduse korral 7 ± 0,2 peale.
If specific analysis is used (optional), state the percentage of primary degradation as the percentage of specific substance removal within the test period (corrected for analytical blanks).
Kui aine ei ole vees piisavalt lahustuv, tuleb järgida standardit ISO 10634 (13).
location and description of the sampling site:
Lahusti kasutamise korral tehakse täiendav kontroll, milles inokuleeritud kasvukeskkonnale lisatakse ainult lahustit.
characteristics of the sample (date of sampling, depth, appearance, temperature, salinity, DOC (optional), delay between collection and use in the test);
Orgaanilisi lahusteid nagu kloroform ja süsiniktetrakloriid, mis teadaolevalt takistavad metaani vabanemist, tuleks vältida.
method used for the COD determination (if performed);
Hoiatus: ettevaatlikult tuleb käsitseda mürgiseid aineid ja aineid, mille omadused ei ole teada.
method used for the oxygen measurements;
Võrdlusained
dispersion procedure for substances which are poorly soluble under the test conditions;
Võrdlusaineid nagu naatriumbensoaat, fenool ja polüetüleenglükool 400 on edukalt kasutatud meetodi õige rakendamise kontrollimiseks; 60 päevaga toimub nendel ainetel biolagunemine enam kui 60 % ulatuses.
method used for determining the number of heterotrophs in the seawater (plate count method or alternative procedure);
Valmistatakse valitud võrdlusaine põhilahus (hapnikust vabastatud vees) samal viisil kui uuritava aine korral ning kui see on vajalik, reguleeritakse pH väärtuseni 7 ± 0,2.
method used for determining DOC in seawater (optional);
Inhibeerimise kontroll (tingimisi vajalik)
other optional methods used to characterise the seawater (ATP measurements, etc.).
Selleks et valida kõige sobivam kontsentratsioon katse jaoks, tuleb hankida teavet uuritava aine mürgisuse kohta anaeroobsetele mikroorganismidele; selleks lisatakse uuritavat ainet ja võrdlusainet katsekeskkonnaga (vt punkt 16) nõusse kumbagi samas kontsentratsioonis kui eespool lisatud (vt punktid 19 ja 20 ning ISO 13641-1 (12)).
analytical data reported on a data sheet (as attached, Appendix 5);
Läbikäärinud muda
the course of the degradation test represented graphically in a diagram showing the lag phase, (tL), slope and time (starting from the end of the lag phase) to reach 50 per cent of the final oxygen uptake caused by oxidation of the test substance (t50).
Kogutakse läbikäärinud muda reoveepuhasti käärimistankist, milles peamiselt töödeldakse olmereovett.
The lag phase may be estimated graphically as shown in the attached figure, or conveniently taken as the time needed for 10 per cent degradation;
Muda tuleks täielikult iseloomustada ja esitada muda kohta taustteave (vt punkt 54).
per cent degradation measured after 28 days.
Kui kasutatakse kohandatud inokulumi, võib kaaluda tööstusettevõtte reoveepuhasti läbikäärinud muda kasutamist.
The blank respiration should not exceed 30 per cent of the oxygen in the test bottle.
Läbikäärinud muda võtmiseks kasutatakse laia kaelaga pudeleid, mis võivad venida, näiteks kõrgtihedast polüetüleenist vms materjalist pudeleid.
If it is not possible to meet this criterion using freshly collected seawater, the seawater must be aged (stabilized) before use.
Pudel täidetakse mudaga kuni umbes 1 cm-ni ülemisest servast, ja suletakse õhukindlalt, eelistatav on kaitseventiiliga kork.
The possibility that nitrogen-containing substances may affect the results should be considered.
Pärast laborisse toomist võib võetud muda kohe kasutada või panna see laboratoorsesse kääritustanki.
Results obtained with the reference substances sodium benzoate and aniline should be comparable to the results obtained in the ring-test (3) (paragraph 9).
Biogaasi ülerõhku tuleb pudelite ettevaatliku avamisega välja lasta.
The test substance can be considered to be inhibitory to bacteria (at the concentration used) if the BOD of the mixture of reference and test substances is less than the sum of the BOD of the separate solutions of the two substances.
Teise võimalusena võib inokulumiallikana kasutada laboris kasvatatud anaeroobset muda, kuid selle aktiivsuse spekter võib olla väiksem.
Owing to the relatively high test concentrations as compared with most natural systems, and consequently an unfavourable ratio between the concentrations of test substance and other carbon sources, the method is to be regarded as a preliminary test which can be used to indicate whether or not a substance is easily biodegradable.
Hoiatus: läbikäärinud mudast vabaneb süttivaid gaase, mis tekitab tulekahju- ja plahvatusohtu;
Accordingly, a low result does not necessarily mean that the test substance is not biodegradable in marine environments, but indicates that more work will be necessary in order for this to be established.
Mudast taustgaaside vabanemise ja tühikatsete mõju vähendamiseks võib kaaluda muda eelnevat kääritamist.
An example of a theoretical degradation experiment illustrating a feasible way of estimating the values of tL (length of “lag phase”) and t50, time interval (starting at tL), needed to reach 50 % of the final oxygen uptake caused by oxidation of the test substance, is given below:
Kui on vajalik eelkääritamine, tuleks mudal lasta ilma toitainete või substraatide lisamiseta käärida 35 ± 2 °C kuni 7 päeva.