natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Depending upon the size of the fish, collectable blood volumes generally range from 5 to 60 μl per individual for fathead minnows and 5-15 μl per individual for zebrafish.
Alusele koetud marjaterad langevad läbi võre ja need võib koguda 45–60 minutit pärast valgustuse sisselülitamist.
Plasma is separated from the blood via centrifugation, and stored with protease inhibitors at – 80 °C, until analysed for vitellogenin.
Läbipaistvad marjaterad ei ole kleepuvad ja on külgvalguses kergesti loendatavad.
Alternatively, in medaka the liver will be used, and in zebrafish the head/tail homogenate can be used as tissue-source for vitellogenin determination (Appendix 6).
Kui ühe nõu kohta kasutatakse viit emaskala, võib marjaterade arvu kuni 20 ühe päeva kohta pidada väikeseks, kuni 100 – keskmiseks ja üle 100 – rikkalikuks saagiseks.
The measurement of VTG should be based upon a validated homologous ELISA method, using homologous VTG standard and homologous antibodies.
Kudemisalus tuleks eemaldada, marjaterad kokku koguda ja kudemisalus uuesti katsenõusse tagasi panna kas võimalikult hilja õhtul või väga vara hommikul.
It is recommended to use a method capable to detect VTG levels as low as few ng/ml plasma (or ng/mg tissue), which is the background level in unexposed male fish.
Aeg kudemisaluse tagasipanekuni ei tohiks olla pikem kui üks tund, sest vastasel juhul võib kudemissubstraadi olemasolu mõjutada kalu individuaalselt paarituma ja kudema ebatavalisel ajal.
Quality control of vitellogenin analysis will be accomplished through the use of standards, blanks and at least duplicate analyses.
Kui olukord tingib kudemisaluse hilisema sissepanemise, tuleks seda teha vähemalt 9 tundi pärast valgustuse sisselülitamist.
For each ELISA method, a test for matrix effect (effect of sample dilution) should be run to determine the minimum sample dilution factor.
Sellisel hilisel kellaajal kudemist enam ei toimu.
Each ELISA plate used for VTG assays should include the following quality control samples:
B liide
at least 6 calibration standards covering the range of expected vitellogenin concentrations, and at least one non-specific binding assay blank (analysed in duplicate).
Tüseda tömpnina kudemissubstraat
Absorbance of these blanks should be less than 5 % of the maximum calibration standard absorbance.
Igasse katsekambrisse pannakse kaks või kolm plastikust, klaasist, keraamilist või roostevabast terasest kudemisvõlvi ja kandikut (nt 80 mm pikkune hall kaarja ristlõikega rentslikivi, mis asub 130 mm pikkusel servadega kandikul) (vt joonis).
If the nominal concentrations trend away from the calibration regression line (e.g. at lower concentrations), it may be necessary to split the calibration curve into low and high ranges or to use a nonlinear model to adequately fit the absorbance data.
A liide
If the curve is split, both line segments should have R2 > 0,99.
Teiseste sootunnuste hindamine tüseda tömpnina puhul endokriinse mõjuga kemikaalide tuvastamiseks
The limit of detection (LOD) is defined as the concentration of the lowest analytical standard, and limit of quantitation (LOQ) is defined as the concentration of the lowest analytical standard multiplied by the lowest dilution factor.
Ülevaade
The ratio of the expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Pulmarüü köbrukesed asuvad tüseda tömpnina suguliselt aktiivse isaskala pea peal (turjapadjandil) ja on tavaliselt paigutatud bilateraalsümmeetriliselt (Jensen et al., 2001).
Evaluation of Biomarker Responses by Analysis of Variance (ANOVA)
Kontrollrühma emaskaladel ning noortel isas- ja emaskaladel köbrukesi ei ole (Jensen et al., 2001).
To identify potential endocrine activity of a chemical, responses are compared between treatments and control groups using analysis of variance (ANOVA).
Isaskala silmade ümber ja sõõrmete vahel võib olla kuni kaheksa eraldi köbrukest.
Where a solvent control is used, an appropriate statistical test should be performed between the dilution water and solvent controls for each endpoint.
Suurim arv köbrukesi ja suurimad köbrukesed asuvad kahel paralleelsel joonel otse sõõrmete all ja suu kohal.
Guidance on how to handle dilution water and solvent control data in the subsequent statistical analysis can be found in OECD, 2006c (27).
Paljudel kaladel on köbrukeste rühmad alalõua all;
All biological response data should be analysed and reported separately by sex.
suule kõige lähemaid köbrukesi on tavaliselt üks paar, edasi kõhu poole võib neid olla kuni neli tükki.
If the required assumptions for parametric methods are not met — non-normal distribution (e.g. Shapiro-Wilk's test) or heterogeneous variance (Bartlett's test or Levene's test), consideration should be given to transforming the data to homogenise variances prior to performing the ANOVA, or to carrying out a weighted ANOVA.
Köbrukeste tegelik arv on harva üle 30 (vahemik 18–28; Jensen et al., 2001).
Dunnett's test (parametric) on multiple pair-wise comparisons or a Mann-Whitney with Bonferroni adjustment (non-parametric) may be used for non-monotonous dose-response.
Suurem osa (arvuliselt) köbrukesi kujutab endast eraldi võrdlemisi ümmargust struktuuri, mille kõrgus on ligikaudu võrdne selle raadiusega.
Other statistical tests may be used (e.g. Jonckheere-Terpstra test or Williams test) if the dose-response is approximately monotone.
Enamikul suguliselt aktiivsetel isaskaladel on vähemalt mõned köbrukesed suurenenud ja esil, nii et neid ei ole võimalik eristada eraldi struktuurina.
A statistical flowchart is provided in Appendix 8 to help in the decision on the most appropriate statistical test to be used.
Endokriinsüsteemi mõjutavate kemikaalide hulgas võivad teatavat liiki kemikaalid põhjustada teatavate vastassoo teiseste sootunnuste ebanormaalse ilmumise;
Additional information can also be obtained from the OECD Document on Current Approaches to Statistical Analysis of Ecotoxicity Data (27).
näiteks sellised androgeeniretseptori agonistid nagu 17β-metüültestosteroon ja 17β-trenboloon võivad põhjustada emasel tüsedal tömpninal pulmarüü köbrukeste ilmumise (Smith, 1974; Ankley et al., 2001, 2003), samal ajal kui östrogeeniretseptori agonistid võivad vähendada isaskaladel pulmarüü köbrukeste arvu või suurust (Miles-Richardson et al., 1999; Harries et al., 2000).
Reporting of test results
Allpool on esitatud tüseda tömpnina pulmarüüköbrukeste kirjeldamise meetod, mida kasutatakse Minnesota osariigis Duluthis asuvas Ameerika Ühendriikide Keskkonnakaitseameti laboris.
Study data should include:
Konkreetsed tooted ja/või seadmed võib asendada võrreldavate kättesaadavate materjalidega.
Responsible personnel and their study responsibilities
Vaadelge kala selja poolt ja eest (peaga vaataja poole).
Each laboratory should have demonstrated proficiency using a range of representative chemicals
Pange kala väiksele Petri tassile (läbimõõt nt 100 mm), esiotsaga enda poole ja kõhuga allapoole.
Characterisation of test chemical
Seadke objektiivi fookus nii, et oleks võimalik vaadelda köbrukesi.
Physical nature and relevant physicochemical properties
Pöörake kala ettevaatlikult ja aeglaselt küljelt küljele, et tuvastada köbrukeste piirkonnad.
Solvent:
Iga kala vaatlus tuleks viia lõpule kahe minutiga.
Characterization of solvent (nature, concentration used)
Köbrukeste arv ja hindamine
Justification of choice of solvent (if other than water)
Täiskasvanud tüseda tömpnina köbrukeste olemasolu ja suuruse hindamiseks on määratletud kuus konkreetset ala.
Test animals:
Olemasolevate köbrukeste asukoha ja arvu kaardistamiseks on välja töötatud vorm (vt käesoleva liite lõpus).
Species and strain
Iga kala köbrukeste arv ja suurus registreeritakse kvantitatiivselt järgmiselt:
Supplier and specific supplier facility
0 – puuduvad, 1– olemas, 2 – suurenenud ja 3 – tugevasti väljendunud (joonis 1).
Details of animal acclimation procedure
1 punkt – köbrukesed on olemas, igal köbrukesel on üks kõrgeim punkt, mille kõrgus on ligikaudu võrdne raadiusega (diameetriga).
Body weight of the fish at the start of the exposure (from a sub-sample of the fish stock)
2 punkti – suurenenud köbrukesed, mille kude meenutab kujult tärni, millel on tavaliselt lai alus keskelt algavate radiaalsete vagudega.
Test Conditions:
Köbrukeste tipp on sageli ebakorrapärasem, mõnikord võib olla mõnevõrra ümardunud.
Test procedure used (test-type, loading rate, stocking density, etc.);
3 punkti – selgelt väljendunud köbrukesed, on tavaliselt üsna suured ja ümmargused; struktuur on ebaselgem.
Method of preparation of stock solutions and flow-rate;
Mõnikord on need köbrukesed kokku kasvanud ja moodustavad ühtse massi, mis hõlmab üht või mitut ala (B, C ja D, mida on kirjeldatud allpool).
The nominal test concentrations, weekly measured concentrations of the test solutions and analytical method used, means of the measured values and standard deviations in the test vessels and evidence that the measurements refer to the concentrations of the test chemical in true solution;
Värvumine ja muster on sarnased 2 punktile vastavate köbrukeste omale, kuid on mõnikord raskesti eristatavad.
Dilution water characteristics (including pH, hardness, alkalinity, temperature, dissolved oxygen concentration, residual chlorine levels, total organic carbon, suspended solids and any other measurements made)
Selle süsteemi kasutamise korral on normaalsel kontrollrühma isasel, kelle köbrukeste arv on 18–20, üldine köbrukeste punktisumma < 50 (Jensen et al., 2001).
Water quality within test vessels:
Tegelik köbrukeste arv võib mõnel kalal olla suurem, kui on vormil (liide A) asjaomases hindamispiirkonnas lahtreid.
pH, hardness, temperature and dissolved oxygen concentration;
Kui see on nii, võib täiendavad hinded märkida lahtri sisse, lahtrist paremale või vasakule.
Detailed information on feeding (e.g. type of food(s), source, amount given and frequency and analyses for relevant contaminants if available (e.g. PCBs, PAHs and organochlorine pesticides).
Vormist ei pea olema näha sümmeetriat.
Evidence that the controls met the acceptance criteria of the test;
Täiendav meetod selliste köbrukeste kaardistamiseks, mis paiknevad piki suu horisontaaltasapinda vertikaalselt paaris või ühendatuna, on märkida kummagi köbrukese hinne samasse lahtrisse.
Data on mortalities occurring in any of the test concentrations and control;
Kaardistamispiirkonnad on järgmised.
Statistical analytical techniques used, treatment of data and justification of techniques used;
A silmade ümber olevad köbrukesed.
Data on biological observations of gross morphology, including secondary sex characteristics and vitellogenin;
Kaardistatakse selja poolt kõhu poole piki silma eesmist äärt.
Results of the data analyses preferably in tabular and graphical form;
Tavaliselt on kontrollrühma isaskaladel neid mitu, kontrollrühma emaskaladel neid ei ole; androgeenidega kokku puutunud emaskaladel esinevad need paaris (üks kummagi silma juures) või üksikult.
Incidence of any unusual reactions by the fish and any visible effects produced by the test chemical
B sõõrmete (meeleelundikanalite avade) vahel olevad köbrukesed.
This section contains a few considerations to be taken into account in the interpretation of test results for the various endpoints measured.
Kontrollrühma emaskaladel neid ei ole;
It is important to have at least one treatment where there are no signs of toxic effects.
Suguküpsetel kontrollrühma isaskaladel on need tavaliselt suurenenud ja selgelt väljendunud.
For example, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
D köbrukesed, mis paiknevad paralleelselt piki suujoont.
Examples of the range of values encountered in control and treatment groups are available in the validation reports (1, 2, 3, 4).
Kontrollrühma isaskaladel ning kemikaaliga kokku puutunud isaskaladel ja emaskaladel võivad need olla mitmesugused.
High VTG values in control males could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect weak oestrogen agonists.
F köbrukesed, mis paiknevad alast E kõhu pool.
Low VTG values in control females could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect aromatase inhibitors and oestrogen antagonists.
Tavaliselt väiksed ja paaris.
The validation studies were used to build that guidance.
Neid esineb kontrollrühma isastel ja androgeeniga kokku puutunud emaskaladel.
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier) have been made it is advisable that a technical proficiency study is conducted.
Köbrukeste hindamise vorm
It is recommended that chemicals covering a range of modes of action or impacts on a number of the test endpoints are used.
Numbriline hinnang
In practice, each laboratory is encouraged to build its own historical control data for males and females and to perform a positive control chemical for estrogenic activity (e.g. 17β-estradiol at 100 ng/l, or a known weak agonist) resulting in increased VTG in male fish, a positive control chemical for aromatase inhibition (e.g. fadrozole or prochloraz at 300 μg/l) resulting in decreased VTG in female fish, and a positive control chemical for androgenic activity (e.g. 17β-trenbolone at 5 μg/l) resulting in induction of secondary sex characteristics in female fathead minnow and medaka.
1 – on olemas
All these data can be compared to available data from the validation studies (1, 2, 3) to ensure laboratory proficiency.
Kuupäev
In general, vitellogenin measurements should be considered positive if there is a statistically significant increase in VTG in males (p < 0,05), or a statistically significant decrease in females (p < 0,05) at least at the highest dose tested compared to the control group, and in the absence of signs of general toxicity.
2 – suurenenud
A positive result is further supported by the demonstration of a biologically plausible relationship between the dose and the response curve.
Üldsumma
As mentioned earlier, the vitellogenin decrease may not entirely be of endocrine origin;
3 – tugevasti väljendunud
however a positive result should generally be interpreted as evidence of endocrine activity in vivo, and should normally initiate actions for further clarification.
B liide
Vitellogenin induction by 17β-estradiol and 17β-ethinylestradiol in male zebrafish (Danio rerio).
Teiseste sootunnuste hindamine jaapani riisikala puhul endokriinse mõjuga kemikaalide tuvastamiseks
Development of an ELISA for determination of the hepatic vitellogenin in Medaka (Oryzias latipes).
Allpool on kirjeldatud papillaarjätkete mõõtmist; nimetatud jätked on jaapani riisikala (Oryzias latipes) teisesed sootunnused.
Fish full life-cycle testing for androgen methyltestosterone on medaka (Oryzias latipes).
Pärast maksa väljalõikamist (6. liide) pannakse rümp (pea ülespoole, saba allapoole) koonilisse katseklaasi, mis sisaldab ligikaudu 10 ml puhverdatud neutraalse pH-ga 10 % formaliinilahust.
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as “signposts”, not “traffic lights”, in risk assessment.
Kui sugunäärmed fikseeritakse mingi muu lahusega kui neutraalne puhverdatud 10 % formaliinilahus, tehke pärakuuime eesosa ja päraku vahelt žiletiteraga ristilõige läbi rümba, hoolitsedes selle eest, et gonopoorid ja sugunäärmed ise ei saaks viga (joonis 3).
Effects of waterborne exposure to 17β-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
Pange kala keha peapoolne osa fikseerimislahusesse, et fikseerida sugunäärmed, ja sabapoolne osa neutraalsesse puhverdatud 10 % formaliinilahusesse, nagu on kirjeldatud eespool.
Villeneuve and G.T.
Pärast seda, kui kala keha on pandud 10 % neutraalsesse puhverdatud formaliini, võtke pärakuuime eesosast pintsettidega kinni ja tõmmake seda umbes 30 sekundit, et hoida pärakuuim lahti.
Ankley.
Pärakuuimest kinnivõtmisel võtke pintsettide vahele mõned uimekiired uime eesosas ja jälgige, et papillaarjätked ei saaks kriimustada.
Abbreviations & definitions
Pärast seda, kui olete pärakuuime hoidnud lahti ligikaudu 30 sekundit, hoidke kala keha 10 % neutraalses puhverdatud formaliinis toatemperatuuril kuni papillaarjätkete mõõtmiseni (neid tuleks mõõta pärast vähemalt 24 tunni pikkust fikseerimist).
Chemical
Mõõtmine
A substance or a mixture
Pärast kala keha fikseerimist 10 % neutraalses puhverdatud formaliinis vähemalt 24 tundi võtke kala rümp koonilisest katseklaasist ja pühkige formaliin filterpaberisse (või paberrätikusse).
Coefficient of variation.
Pange kala kõhuga ülespoole.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.
Seejärel lõigake väikeste lahkamiskääridega pärakuuim ettevaatlikult ära (parem on lõigata uim ära koos väikse koguse seda toestava koega).
Loading rate
Võtke äralõigatud pärakuuime eesosast pintsettidega kinni ja pange see objektiklaasile, millel on mõni tilk vett.
Wet weight of fish per volume of water.
Seejärel katke pärakuuim katteklaasiga.
Stocking density
Olge ettevaatlik, et pintsettidega pärakuuimest kinni võttes ei saaks papillaarjätked kriimustada.
Number of fish per volume of water.
Loendage bioloogilise mikroskoobi abil (tavaline või invertmikroskoop) loenduri abil papillaarjätketega liigeseplaatide arv.
VTG (Vitellogenin)
Papillaarjätketeks loetakse väikest rühma jätkeid liigeseplaadi tagumisel serval.
Phospholipoglycoprotein precursor to egg yolk protein that normally occurs in sexually active females of all oviparous species.
Kirjutage iga uimekiire papillaarjätketega liigeseplaatide arv töölehele (nt esimene uimekiir: 0, teine uimekiir: 10, kolmas uimekiir: 12 jne) ning sisestage nende arvude summa iga kala kohta Exceli tabelisse.
HPG axis
Vajaduse korral tehke pärakuuimest pilt ja loendage papillaarjätketega liigeseplaatide arv fotolt.
Hypothalamic-pituitary-gonadal axis.
Pärast mõõtmist pange pärakuuim koonilisse katseklaasi (1) ja hoidke see alles.
MTC
Joonis 1.
Maximum Tolerated Concentration, representing about 10 % of the LC50.
Pärakuuime kuju ja suuruse soolised erinevused.
Experimental conditions for the fish endocrine screening assay
A – isaskala;
Recommended species
B – emaskala.
Fathead minnow
Joonis 2.
(Pimephales promelas)
A. Jätked pärakuuime kiire liigeseplaatidel.
Medaka (Oryzias latipes)
J.P.
Zebrafish
(joint plate) – liigeseplaat; A.S.
Test type
(axial space) – teljesuunaline vahekaugus;
Flow-through
P. (process) – jätke.
Water temperature
B. Uimekiire lõpuosa.
Illumination quality
Otsas on aktinotrihhiumid (Act.) (luuniidid).
Fluorescent bulbs (wide spectrum)
Joonis 3.
Light intensity 10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
Kala keha, millel on näidatud lõikamiskoht, kui sugunäärmed fikseeritakse muus lahuses kui neutraalne puhverdatud 10 % formaliinilahus.
10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
Sellisel juhul lõigatakse keha pärakuuime eesosa ja päraku vahelt žiletiga läbi (punane joon);
Photoperiod (dawn/dusk transitions are optional, however not considered necessary)
peapoolne osa pannakse sugunäärmete fikseerimiseks ette nähtud lahusesse ja sabapoolne osa neutraalsesse puhverdatud 10 % formaliinilahusesse.
16 h light, 8 h dark
Papillaarjätkeid esineb tavaliselt ainult täiskasvanud isaskaladel ja need asuvad pärakuuime tagumisest otsast lugedes teisel kuni seitsmendal või kaheksandal uimekiirel (joonised 1 ja 2).
12-16 h light, 12-8 h dark
Mõnikord harva esineb selliseid jätkeid siiski ka pärakuuime tagumisest otsast lugedes esimesel uimekiirel.
< 5 g per l
Käesolev standardne töökord hõlmab jätkete mõõtmist esimesel uimekiirel (uimekiire järjekorranumber saadakse siin loendamisega pärakuuime tagumisest otsast).
Test chamber size
Vitellogeniini määramise puhul soovitatav proovi võtmise kord
10 l (minimum)
Tuleks olla hoolikas, et hoida ära isas- ja emaskalade vitellogeniiniproovide ristsaastumist.
2 l (minimum)
Meetod 1A.
5 l (minimum)
Tüseda tömpnina vere võtmine sabaveenist/-arterist
Test solution volume
Pärast tuimestamist lõigatakse sabavars skalpelliteraga osaliselt läbi ja veri kogutakse sabaveenist/-arterist hematokriti määramiseks ette nähtud hepariniseeritud mikrokapillaartorusse.
8 l (minimum)
Kui veri on kogutud, eraldatakse kiiresti plasma tsentrifuugimisega 3 minuti jooksul 15000 g juures (või selle asemel 10 minuti jooksul 15000 g ja 4 °C juures).
l (minimum)
Soovi korral võib määrata pärast tsentrifuugimist hematokriti.
4 l (minimum)
Plasmakogus eemaldatakse seejärel hematokriti määramiseks ette nähtud mikrokapillaartorust ja säilitatakse tsentrifuugitopsis 0,13 ühiku aprotiniini (proteaasiinhibiitor) juuresolekul – 80 °C juures, kuni on võimalik määrata vitellogeniin.
Volume exchanges of test solutions
Olenevalt tüseda tömpnina suurusest (see sõltub soost), on ühest kalast kogutava plasma maht tavaliselt vahemikus 5–60 mikroliitrit (Jensen et al., 2001).
Minimum of 6 daily
Meetod 1B.
Minimum of 5 daily
Tüseda tömpnina vere võtmine südamest
Age of test organisms See paragraph 20
Teise võimalusena võib vere koguda südamepunktsiooniga, kasutades hepariniseeritud süstalt (1000 ühikut hepariini ml kohta).
See paragraph 20
Veri viiakse üle Eppendorfi katsutisse (mida hoitakse jää peal) ja seejärel tsentrifuugitakse (5 minutit, 7000 g, toatemperatuuril).
See paragraph 20 12.
Plasma kantakse üle puhastesse Eppendorfi katsutitesse (alikvootidena, kui plasma maht seda võimaldab) ja külmutatakse viivitamata – 80 °C juures, kus seda säilitatakse kuni analüüsimiseni (Panter et al., 1998).
Approximate wet weight of adult fish (g) Females:
Meetod 2A.
1,5 ± 20 %
Jaapani riisikala maksa väljalõikamine
Males:
Katses kasutatavate kalade eemaldamine katsekambrist
2,5 ± 20 %
Katses kasutatavad kalad tuleks katsekambrist eemaldada väikse kahvaga.
Females:
Olge hoolikas, et mitte pillata neid teise katsekambrisse.
0,35 ± 20 %
Üldiselt tuleks katses kasutatavad kalad eemaldada järgmises järjekorras:
0,65 ± 20 %
kontrollrühm, lahusti kontrollrühm (vajaduse korral), madalaima kontsentratsiooniga rühm, keskmise kontsentratsiooniga rühm, kõrgeima kontsentratsiooniga rühm ja positiivne kontroll.
0,4 ± 20 %
Lisaks tuleks ühest katsekambrist eemaldada kõigepealt kõik isaskalad ja seejärel allesjäänud emaskalad.
No. of fish per test vessel
Iga kala sugu tehakse kindlaks väliste teiseste sootunnuste järgi (nt pärakuuime kuju).
6 (2 males and 4 females)
Paigutage uuritavad kalad transpordimahutisse ja viige nad maksa väljalõikamiseks töölauale.
10 (5 males and 5 females)
Kontrollige katsekambri ja mahuti märgistuse õigsust ning veenduge, et katsekambrist võetud kalade arv ja katsekambrisse jäänud kalade arv vastavad eeldustele.
No. of treatments
Kui kalade sugu ei ole võimalik tuvastada välise vaatlusega, eemaldatakse katsekambrist kõik kalad.
= 3 (plus appropriate controls)
Sellisel juhul tuleks nende sugu määrata sugunäärmete või teiseste sootunnuste vaatlemisega stereomikroskoobi abil.
No. vessels per treatment
Maksa väljalõikamine
4 minimum
Viige kala väikse kahvaga transpordimahutist üle tuimastilahusesse.
2 minimum
Pärast seda, kui kala on tuimestatud, viige ta tavaliste pintsettidega üle filterpaberile (või paberrätikule).
No. of fish per test concentration
Kala võtmisel haarake pintsettidega peast, et mitte murda saba.
16 adult females and 8 males (4 females and 2 males in each replicate vessel)
Pühkige vesi kala pealt filterpaberisse (või paberrätikusse).
10 adult females and 10 males (5 females and 5 males in each replicate vessel)
Seejärel tehke lahkamiskääridega väike lõige risti üle kõhupoolse kaelaosa ja kõhu keskosa.
Feeding regime
Pistke lahkamiskäärid väiksesse sisselõikesse ja lõigake kõht piki keskjoont lahti lõpusekattest saba pool asuvast punktist kuni päraku peapoolse servani.
Live or frozen adult or nauplii brine shrimp two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Olge ettevaatlik ja ärge torgake kääre liiga sügavale, et mitte vigastada maksa või sugunäärmeid.
Brine shrimp nauplii two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Järgmised toimingud tehke stereomikroskoobi all.
None unless DO concentration falls below 60 % air saturation
Pange kala kõhuga ülespoole paberrätikule (või klaasist Petri tassile või objektiklaasile).