natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The number of adults and the occurrence of juveniles should be recorded.
katse mõlemas faasis (1. ja 2. põlvkond) kasutatakse katsesüsteemi korduvat rikastamist (või katva veekihi uuendamist), kusjuures rikastamise (uuendamise) aegade valimisel arvestatakse uuritava kemikaali lagunemise kiirust.
At least two replicates for each test concentration treatment and six control replicates are recommended.
Selliseid muudatusi saab teha üksnes vee rikastamise, kuid mitte sette rikastamise puhul.
The spacing factor may vary depending on the dose-response pattern.
Teada peaks olema uuritava kemikaali lahustuvus vees, aururõhk ja log Kow, mõõdetud või arvutatud jaotumine settesse ning stabiilsus vees ja settes.
For determination of the NOEC/LOEC, at least five concentrations in a geometric series should be tested.
Uuritava kemikaali kvantitatiivseks määramiseks katvas veekihis, poorivees ja settes peaks olema usaldusväärne analüüsimeetod; meetodi täpsus ja määramispiir peaksid olema teada.
Four replicates for each test concentration treatment plus eight controls are recommended.
Kasulik on teada uuritava kemikaali struktuurivalemit ja puhtust.
A combined approach allows for determination of both the NOEC/LOEC and ECx.
Samuti on kasulik teada uuritava kemikaali käitumist (näiteks hajumine, abiootiline ja biootiline lagunemine jne).
For this combined approach, eight treatment concentrations in a geometric series should be used.
Täiendavad juhised selliste kemikaalide mõju uurimiseks, mille füüsikalis-keemilised omadused raskendavad selle katse tegemist, on esitatud väljaandes (16).
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using a test concentration of 1000 mg/kg and the control.
Võrdluskemikaale võib katsetada regulaarselt, et veenduda selles, et laboris kasvatatava populatsiooni tundlikkus ei ole muutunud.
A limit test will provide the opportunity to demonstrate that there is no statistically significant effect at the limit concentration.
Nagu vesikirpudegi puhul, piisab sellest, kui teha 48-tunnine ägeda mürgisuse katse (17).
The reproductive output is the main endpoint (e.g. the number of juveniles produced per test vessel).
Ent kuni ägeda mürgisuse testimise valideeritud katse-eeskiri muutub kättesaadavaks, võib kaaluda kroonilise mürgisuse katse tegemist vastavalt käesoleva lisa peatükile C.28.
The statistical analysis, e.g. ANOVA procedures, compares treatments by Student t-test, Dunnett's test, or Williams' test.
Laboritevahelistes võrdlustes ja valideerimisuuringutes edukalt kasutatud võrdlustoksikandid on näiteks:
95 % confidence intervals are calculated for individual treatment means.
lindaan, trifluraliin, pentaklorofenool, kaadmiumkloriid ja kaaliumkloriid (1, 3, 6, 7, 18).
The number of surviving adults in the untreated controls is a major validity criterion and should be documented.
Katse nõuetekohasuse tõendamisel arvestatakse järgmist:
As in the range-finding test, all other harmful signs should be reported in the final report as well.
kontrollnõus peab katse lõpuks keskmiselt välja arenema vähemalt 70 % putukaid mõlema põlvkonna puhul (1, 7);
LCx and ECx
C. riparius'e ja C. yoshimatsui puhul peaks 85 % täiskasvanud mõlema põlvkonna sääskedest välja arenema kontrollnõus 12–23 päeva jooksul pärast esimese kasvujärgu vastsete viimist nõudesse;
ECx-values, including their associated lower and upper 95 % confidence limits for the parameter, are calculated using appropriate statistical methods (e.g. logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
C. dilutus'e puhul on vastuvõetav vahemik 20–65 päeva;
To compute the EC50 or any other ECx, the complete data set should be subjected to regression analysis.
Hapnikukontsentratsioon peaks olema vähemalt 60 % õhuga küllastamisel saadud väärtusest (ASV [9]) ja katva veekihi pH peaks kõigis katsenõudes olema vahemikus 6–9;
is usually estimated by probit analysis or similar analysis that takes into account the binomially distributed mortality data.
vee temperatuur ei tohiks erineda rohkem kui ± 1,0 °C võrra.
Appropriate statistical methods should be used according to OECD Document 54 on the Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application (9).
Katsenõud ja paljunduspuurid
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Vastsed viiakse kemikaaliga kokkupuutesse 600 ml keeduklaasides läbimõõduga umbes 8,5 cm (vt 5. liide).
Normal distribution and variance homogeneity can be tested using an appropriate statistical test, e.g. the Shapiro-Wilk test and Levene test, respectively (p ≤ 0,05).
Muud nõud on ka sobivad, kuid need peaksid tagama katva veekihi ja sette vajaliku paksuse.
One-way Analysis of Variance (ANOVA) and subsequent multi-comparison tests can be performed.
Sette pind peaks olema piisav, et tagada 2–3 cm2 pinda iga vastse kohta.
Multiple comparisons (e.g. Dunnett's test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test chemical concentrations (selection of the recommended test according to OECD Document 54 (9)).
Settekihi paksuse ja katva veekihi paksuse suhe peaks olema ligikaudu 1:4.
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) could be used to determine the NOEC and the LOEC.
Paljundamispuurid (suurusega vähemalt 30 cm kõik kolm mõõdet) on pealt ja vähemalt ühelt küljelt kaetud marliga (võrgusilma suurus on ligikaudu 1 mm) (vt 5. liide).
the identity of the test chemical, batch, lot and CAS-number, purity;
Igasse puuri pannakse munemise jaoks 2-liitrise mahutavusega kristallisaator, mis sisaldab katses kasutatavat vett ja setet.
physico-chemical properties of the test chemical (e.g. log Kow, water solubility, vapour pressure, Henry's constant (H) and preferably information on the fate of the test chemical in soil) if available;
Ka kristallisaatoris peaks settekihi paksuse ja seda katva veekihi paksuse suhe olema ligikaudu 1:4.
the formulation of the test chemical and the additives should be specified if not the pure chemical is tested;
Pärast munanööride kristallisaatorist eemaldamist pannakse need 12 süvendiga mikrotiiterplaadile (üks nöör igasse mikrotiiterplaadi süvendisse, mis sisaldab vähemalt 2,5 ml kristallisaatorist võetud rikastatud vett), seejärel plaat kaetakse kaanega, et vältida olulist aurumist.
identification of species and supplier of the test organisms, description of the breeding conditions and age range of test organisms;
Munanööride hoidmiseks võib kasutada ka muid sobivaid nõusid.
detailed specification if natural soil is used (origin, history, particle size distribution, pH, organic matter content);
Peale mikrotiiterplaatide peaksid kõik katsenõud ja muud katsesüsteemiga kokku puutuvad seadmed olema valmistatud täies ulatuses klaasist või muust keemiliselt inertsest materjalist (näiteks polütetrafluoroetüleenist).
water holding capacity of the soil;
Katses kasutatav liik on eelistatavalt Chironomus riparius.
description of the technique used to apply the test chemical to the soil;
Võib kasutada ka C. yoshimatsui'd.
pH and water content of the soil at the start and end of the test (control and each treatment);
Sobib ka C. dilutus, aga selle käsitlemine on keerukam ja see nõuab pikemat katseperioodi.
detailed description of the extraction method and extraction efficiency;
2. liites on esitatud andmed C. riparius'e kasvatamise meetodite kohta.
number of adults and their mortality (%) in each test vessel at the end of the test;
Teave kasvatamistingimuste kohta on kättesaadav ka kirjandusest:
a description of obvious physiological or pathological symptoms or distinct changes in behaviour;
C. dilutus (5) ja C. yoshimatsui (14).
the NOEC/LOEC values, LCx for mortality and ECx for reproduction (mostly LC50, LC10, EC50, and EC10) together with 95 % confidence intervals.
Enne katset tuleks kinnitada liigi määramist, aga seda ei nõuta enne iga katset, kui organismid pärinevad asutusesisesest kultuurist.
A graph of the fitted model used for calculation, its function equation and its parameters (See (9));
Eelistatavalt tuleks kasutada spetsiaalselt koostatud setet (mida nimetatakse ka taastatud, tehislikuks või sünteetiliseks setteks).
all information and observations helpful for the interpretation of the results;
Loodusliku sette kasutamise korral tuleks seda iseloomustada (vähemalt pH, orgaanilise süsiniku sisaldus, samuti on soovitatav määrata muud parameetrid, nagu süsiniku-lämmastiku suhe ja osakeste suurus) ning selles ei tohiks olla mingeid saasteaineid ega muid organisme, kes võiksid surusääsklaste vastsetega konkureerida või neid süüa.
power of the actual test if hypothesis testing is done (9);
Samuti soovitatakse lasta settel enne katse tegemist seitse päeva katsetingimustes tasakaalustuda.
deviations from procedures described in this Test Method and any unusual occurrences during the test;
Soovitatakse kasutada järgmist spetsiaalselt koostatud setet (1, 20, 21):
validity of the test;
a.
for NOEC, when estimated, the minimal detectable difference.
4–5 % (kuivmass) turvast:
Wiles JA and Krogh PH (1998) Testing with the collembolans I. viridis, F. candida and F. fimetaria.
pH väärtus võimalikult lähedal vahemikule 5,5–6,0;
In Handbook of soil invertebrate toxicity tests (ed.
tähtis on kasutada peeneks jahvatatud (osakese suurus ≤ 1 mm) pulbrilist turvast, mida on kuivatatud ainult õhu käes;
H Løkke and CAM Van Gestel), pp. 131-156.
b.
Chapter C.36 of this Annex, Predatory mite (Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer) reproduction test in soil.
20 % (kuivmass) kaoliinsavi (kaoliniidisisaldus eelistatavalt üle 30 %);
Toxicity testing with the collembolans Folsomia fimetaria and Folsomia candida and the results of a ringtest.
c.
Danish Environmental Protection Agency, Environmental Project No. 1256, pp. 66.
75–76 % (kuivmass) kvartsliiva (see peaks peamiselt koosnema peenest liivast ja rohkem kui 50 % osakestest peaksid olema vahemikus 50–200 μm);
In Soil Zoology (Kevan D.K. McE., Ed).
d. lisatakse deioniseeritud vett, et lõplikus segus oleks niiskusesisaldus 30–50 %;
Butterworths, London, pp. 412-416
e. sette lõpliku segu reguleerimiseks pH vahemikku 7,0 ± 0,5 lisatakse keemiliselt puhast kaltsiumkarbonaati (CaCO3);
Chemical is a substance or a mixture.
f. lõpliku segu orgaanilise süsiniku sisaldus peaks olema 2 % (± 0,5 %) ja see tuleks õigeks seada sobivas koguses turba ja liiva kasutamisega kooskõlas alapunktidega a ja c.
Main actions and timetable for performing a collembolan test
Turba, kaoliinsavi ja liiva päritolu peaks olema teada.
Time (day)
Sette koostisosi tuleks kontrollida, et tõendada keemilise saaste puudumine (näiteks raskmetallid, kloororgaanilised ühendid, fosfororgaanilised ühendid).
Action
Spetsiaalselt koostatud sette valmistamise näidis on esitatud 3. liites.
23 to – 26
Kuivade koostisosade segamine on samuti lubatav, kui tõendatakse, et pärast katva veekihi lisamist ei toimu sette koostisosade eraldumist (näiteks turbaosakeste hõljumist) ja et turvas või sete on piisavalt konditsioneerunud.
Preparation of synchronous F. fimetaria culture
Katseveeks sobib vesi, mis vastab 2. ja 4. liites esitatud lahjendamiseks kasutatava vee nõutavatele keemilistele omadustele.
Check pH of artificial soil and adjust accordingly
Kasvuveena ja katseveena lubatakse kasutada iga sobivat vett, looduslikku vett (pinna- või põhjavesi), taastatud vett (vt 2. liide) või deklooritud kraanivett, kui surusääsklased jäävad selles kasvatamise ja katsetamise ajal ellu ega ilmuta stressi tunnuseid.
9 to – 12
Katse alguses peaks katsevee pH olema vahemikus 6–9 ja vee summaarne karedus ei tohiks olla suurem kui 400 mg/l CaCO3-na.
Preparation of synchronous F. candida culture
Kui oletatakse karedust tekitavate ioonide ja uuritava aine omavahelist mõju, tuleks kasutada siiski väiksema karedusega vett (ja seega ei tohiks sel juhul kasutada Elendti kasvukeskkonda M4).
2 to – 7
Kogu uuringu vältel tuleks kasutada sama tüüpi vett.
Pre-moist soil
liites loetletud vee kvaliteedi omadusi tuleks mõõta vähemalt kaks korda aastas või siis, kui kahtlustatakse, et kõnealused omadused võivad olla oluliselt muutunud.
Distribute juveniles into batches
Põhilahused.
Prepare stock solutions and apply test chemical if solvent required
Rikastatud vesi
stock solutions and apply test chemical if solid chemical, water soluble or surface application is required.
a.
Measure soil pH and weigh the containers.
Uuritava aine kontsentratsioonid arvutatakse veesambas olevate kontsentratsioonide alusel, s.o setet katva veekihi alusel.
Add food.
Valitud kontsentratsiooniga uuritavad lahused valmistatakse tavaliselt põhilahuse lahjendamise teel.
Introduce collembolans.
Põhilahuse valmistamiseks on soovitatav lahustada uuritav kemikaal katsevees.
Range-finding test F. fimetaria:
Mõnel juhul võib sobiva kontsentratsiooniga põhilahuse valmistamiseks olla vajalik lahusti või dispergendi kasutamine.
Definitive tests:
Sobivad dispergendid on Cremophor RH40, Tween 80, metüültselluloos (0,01 %) ja HCO-40.
Measure moisture content and replenish water and add 2-10 mg yeast
b.
Definitive F. fimetaria test:
Tavaliselt valmistatakse valitud kontsentratsiooniga rikastatud setted uuritava kemikaali lahuse otse settesse lisamise teel.
Range-finding F. candida:
Deioniseeritud vees lahustatud uuritava kemikaali põhilahus segatakse spetsiaalselt koostatud settega valtsmasina või söödasegaja abil või käsitsi.
Definitive F. candida test:
Vees halvasti lahustuva uuritava kemikaali võib lahustada võimalikult väikses sobiva orgaanilise lahusti (näiteks heksaan, atsetoon või kloroform) koguses.
Guidance on rearing and synchronisation of F. fimetaria and F. candida
See lahus segatakse seejärel 10 g peene kvartsliivaga iga katsenõu jaoks.
The time and durations given in this guidance should be checked for each specific collembolan strain to ensure that timing will allow for sufficient synchronised juveniles.
Lahustil lastakse auruda ja see tuleks liivast täielikult kõrvaldada;
Basically, the incidence of oviposition after the adults are transferred to fresh substrate and egg hatching determines the appropriate day for egg collection and collection of synchronous juveniles.
seejärel segatakse liiv sobiva koguse settega.
It is recommended to have a permanent stock culture consisting of e.g. 50 containers/Petri dishes.
Uuritava aine solubiliseerimiseks, dispergeerimiseks või emulgeerimiseks võib kasutada ainult kergesti lenduvaid kemikaale.
The stock culture should be kept in a good feeding condition by weekly feeding, watering and removal of old food and carcasses.
Tuleks meeles pidada, et sette valmistamisel tuleks arvesse võtta uuritava kemikaali ja liiva segust pärit liiva (s.o sete tuleks siis valmistada väiksema liivakogusega).
Too few collembolans on the substrate may result in inhibition by more fungal growth.
Vajaduse korral võib homogeensuse taseme määramiseks analüüsida alamproove.
If the stock culture is used for egg production too often, the culture may get fatigue.
Katse kavandamine hõlmab katse kontsentratsioonide arvu ja vahemike valimist, iga kontsentratsioonitaseme jaoks nõude arvu ning igas nõus olevate vastsete arvu valimist, samuti kristallisaatorite ja paljunduspuuride arvu valimist.
Signs of fatigue are dead adults and mould on the substrate.
Allpool on kirjeldatud katsete kavandamine ECx ja NOEC määramiseks, samuti piirsisalduskatse kavandamine.
The remaining eggs from the production of synchronous animals can be used to rejuvenate the culture.
Katse kavandamine regressioonanalüüsi tegemiseks
In a synchronous culture of F. fimetaria, males are distinguished from females primarily by size.
Toimet avaldav kontsentratsioon (ECx) ja kontsentratsioonivahemik, mis pakub huvi uuritava kemikaali mõju uurimisel, tuleks hõlmata katses kasutatavate kontsentratsioonidega, nii et otsitavat näitajat ei tuleks leida ekstrapoleerimisega väljapoole mõõdetud andmete vahemikku.
Males are clearly smaller than females, and the walking speed of the males is faster than for females.
Tuleks vältida suurt ekstrapoleerimist allapoole madalaimat kontsentratsiooni või ülespoole kõrgeimat kontsentratsiooni.
Correct selection of the gender requires little practice and can be confirmed by microscopic inspection of the genital area (13).
Eelnev annusevahemiku leidmise katse katsemeetodi C.27 või C.28. järgi võib aidata valida sobivat uuritavate kontsentratsioonide vahemikku.
Preparation of culturing substrate
Iga kontsentratsiooni puhul tuleks kasutada kahte paljunduspuuri (A ja B).
The culturing substrate is plaster of Paris (calcium sulphate) with activated charcoal.
Kaheksa paralleelkatset jagatakse kahte rühma, kummaski neli paralleelkatset, millest valmikud kogutakse kumbagi paljunduspuuri.
This provides a moist substrate, with the function of the charcoal being to absorb waste gases and excreta (14) (15).
Selline paralleelkatsete koondamine on vajalik selleks, et saada paljunduspuuri piisav arv valmikuid paljunemise usaldusväärseks hindamiseks.
Different forms of charcoal may be used to facilitate observations of the Collembola.
Siiski tehakse ka 2. põlvkonnaga kaheksa paralleelkatset, mida alustatakse kemikaaliga kokkupuutunud populatsioonidest paljunduspuurides.
For example, powdered charcoal is used for F. candida and F. fimetaria (producing a black/grey plaster of Paris):
Kontsentratsioonidevaheline kordaja ei tohiks olla suurem kui 2 (erandi võib teha juhul, kui doosi mõju graafiku tõus on madal).
Substrate constituents:
Kui suurendatakse eri mõjuga uuritavate kontsentratsioonide arvu, võib iga doosi paralleelkatsete arvu vähendada kuuele (kolm kumbagi paljunduspuuri),.
20 ml of activated charcoal
Paralleelkatsete arvu suurendamine või uuritavate kontsentratsioonide vahemiku vähendamine enamasti vähendab usaldusvahemikku ECX ümber.
200 ml of distilled water
Täheldatavat toimet mitteavaldava kontsentratsiooni (NOEC) hindamise kavandamine
200 ml of plaster of Paris
NOEC lähenemisviisi puhul tuleks kasutada viit uuritavat kontsentratsiooni vähemalt kaheksa paralleelkatsega (neli kumbagi paljunduspuuri A ja B) ja nende kontsentratsioonide erinevuse kordaja ei tohiks olla suurem kui kaks.
50 g of activated pulverized charcoal
Paralleelkatsete arv peaks olema piisav, et tagada piisav statistiline võimsus, et tuvastada katse- ja kontrollnõu tulemuste 20 % erinevus 5 % statistilise olulisusega (α = 0,05).
260-300 ml of distilled water
Arengu kiiruse, viljakuse ja sigivuse puhul on tavaliselt kohane kasutada dispersioonanalüüsi (ANOVA), millele järgneb Dunnetti või Williamsi test (22–25).
400 g plaster of Paris.
Väljaarenemise suhte ja soolise jaotumise suhtarvu puhul võib kasutada Cochran-Armitage'i testi, Fisheri täpset testi (Bonferroni parandusega) või Mantel-Haentzali testi.
The substrate mixture is allowed to set before use.
Kui esialgsetes annusevahemiku leidmise katsetes kuni maksimaalse kontsentratsioonini mõju ei leitud, võib teha piirsisalduskatse (üks uuritava aine kontsentratsioon ja kontrollkatse(d)).
Breeding
Piirsisalduskatse eesmärk on näidata, et uuritava kemikaali mürgine toime avaldub kontsentratsioonil, mis on katses kasutatud piirkontsentratsioonist kõrgem.
Collembolans are held in containers such as Petri dishes (90 mm × 13 mm), with the bottom covered by a 0,5 cm layer of plaster /charcoal substrate.
Vee puhul soovitatakse kontsentratsiooni 100 mg/l ja sette puhul 1000 mg/kg (kuivmass).
They are cultured at 20 ± 1 °C at a light-dark cycle of 12-12 hours (400-800 Lux).
Enamasti tuleb nii kemikaaliga kokkupuutuvate rühmadega kui ka kontrollrühmadega teha vähemalt kaheksa paralleelkatset.
Containers are kept moist at all times ensuring that the relative humidity of the air within the containers is 100 %.
Tuleks tõendada piisava statistilise võimsuse olemasolu, et tuvastada katse- ja kontrollnõu tulemuste 20 % erinevus 5 % statistilise olulisusega (α = 0,05).
This can be guaranteed by presence of free water within the porous plaster, but avoiding generating a water film on the plaster surface.
Mõõdetavate suuruste (nt arengu kiirus) puhul, kui andmed vastavad käesoleva katse nõuetele (normaalsus, ühtlane hajumine), on statistilise meetodina asjakohane kasutada t-testi.
Water loss can be prevented by providing a humid ambient air.
Kui need nõuded ei ole täidetud, võib kasutada mittevõrdse hajumise t-testi või mitteparameetrilist testi, näiteks Wilcoxoni-Manni-Whitney testi.
Any dead individuals should be removed from the containers, as should any mouldy food.
Valmikute väljaarenemise suhte puhul on asjakohane kasutada Fisheri täpset testi.
To stimulate production of eggs it is necessary to transfer the adult animals to Petri dishes with newly prepared plaster of Paris/charcoal substrate.
Vee-sette süsteemi valmistamine (kui rikastatakse vesi)
Granulated dried baker's yeast is used as the sole food supply for both F. candida and F. fimetaria.
a.
Fresh food is provided once or twice a week, to avoid moulding.
Spetsiaalselt koostatud sete (vt punktid 13–14 ja 3. liide) lisatakse igasse katsenõusse ja kristallisaatorisse, et see moodustaks kihi paksusega vähemalt 1,5 cm (kristallisaatoris võib olla natuke õhem), kuid mitte üle 3 cm.
It is placed directly on the plaster of Paris in a small heap.
Lisatakse vesi (vt punkt 15), nii et settekihi paksuse ja veekihi sügavuse suhe ei oleks suurem kui 1:4.
The mass of baker's yeast added should be adjusted to the size of the collembolan population, but as a general rule 2-15 mg is sufficient.
Pärast katsenõu ettevalmistamist tuleks sette-vee süsteem jätta kerge aeratsiooniga seisma ligikaudu seitsmeks päevaks enne 1. või 2. põlvkonna esimese kasvujärgu vastsete lisamist (vt punkt 14 ja 3. liide).
Synchronisation
Kristallisaatori sette-vee süsteemi ei aereerita katse ajal, kuna nendes ei ole vaja tagada vastsete ellujäämist (munanöörid kogutakse juba enne koorumist).
The test should be performed with synchronised animals to obtain homogeneous test animals of the same instar and size.
Sette koostisosade eraldumise ja veesambas katsevee lisamise ajal peene materjali uue suspensiooni tekkimise vältimiseks võib sette katta plastikkettaga ja valada vett kettale.
Furthermore, the synchronisation enables discrimination of F. fimetaria males and females from the age of 3 weeks and onwards based on sexual dimorphism, i.e. size differences.
Ketas eemaldatakse kohe pärast valamist.
The procedure below is a suggestion on how to obtain synchronised animals (the practical steps are optional).
Võib kasutada ka muid võtteid.
Synchronisation.
Vee-sette süsteemi valmistamine (kui rikastatakse sete)
Prepare containers with a 0,5 cm layer of plaster of Paris/charcoal substrate.
b.
For egg laying transfer 150-200 adult F. fimetaria and 50-100 F. candida from the best 15-20 containers of the stock culture with 4-8 weeks old substrate to the containers and feed them 15 mg baker's yeast.
Rikastatud setted valmistatakse vastavalt punktile 16b, pannakse nõudesse ja kristallisaatoritesse ning neile lisatakse kattev veekiht, et saada sette-vee ruumala suhe 1:4.
Avoid bringing juveniles together with adults as presence of juveniles may inhibit egg production.
Settekihi paksus peaks olema 1,5–3 cm (kristallisaatoris võib see olla mõnevõrra õhem).
Keep the culture at 20 ± 1 °C (the mean should be 20 °C) and a light-dark cycle of 12-12 hours (400-800 Lux).
Sette osade eraldumise ja veesambas katsevee lisamisel peene materjali uue suspensiooni tekkimise vältimiseks võib sette katta vee valamise ajaks plastikkettaga, mis pärast vee valamist kohe eemaldatakse.
Ensure that fresh food is available and the air is water saturated.
Kui rikastatud sete koos katva veekihiga on valmistatud, on soovitatav lasta uuritaval kemikaalil jaotuda settefaasist vee faasi (4, 5, 7, 18).
Lack of food may lead the animals to defecate on the eggs resulting in fungal growth on the eggs or F. candida may cannibalise its own eggs.
Vajalik tasakaalustumisaeg sõltub settest ja kemikaalist ning võib kesta tunde, päevi ja harvadel juhtudel kuni viis nädalat.