natgillin/translations-raw huggingface dataset:
However, the immature, as it has an intact hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis, is somewhat less specific but covers a larger scope of investigation than the ovariectomised animal because it can respond to chemicals that interact with the HPG axis rather than just the oestrogen receptor.
Sel eesmärgil püüti hoolikalt kontrollida, kuivõrd korratavalt ja tundlikult lubab meetod kindlaks teha östrogeensust, mis on paljude kemikaalide puhul peamine mure; vähem pöörati tähelepanu katsega antiöstrogeensuse tõendamise küljele.
The HGP axis of the rat is functional at about 15 days of age.
Katsetati ainult ühte tugevat antiöstrogeeni, kuna selgelt teadaolevate antiöstrogeensete kemikaalide (millel ei ole mingit varjavat östrogeenset mõju) on väga piiratud.
Prior to that, puberty cannot be accelerated with treatments like GnRH.
Käesolevas katsemeetodis käsitletakse seega östrogeensete omaduste tuvastamist;
As the females begin to reach puberty, prior to vaginal opening, the female will have several silent cycles that do not result in vaginal opening or ovulation, but there are some hormonal fluctuations.
antagonistliku toime tuvastamist on käsitletud ühes juhenddokumendis (37).
If a chemical stimulates the HPG axis directly or indirectly, precocious puberty, early ovulation and accelerated vaginal opening result.
Biokatse korratavus ja tundlikkus puhtalt antiöstrogeense toimega kemikaalide puhul määratletakse täpsemalt hiljem, kui katset on tavameetodina mõnda aega kasutatud ja leitud rohkem sellise toimeviisiga kemikaale.
Not only chemicals that act on the HPG axis do this but some diets with higher metabolisable energy levels than others will stimulate growth and accelerate vaginal opening without being oestrogenic.
Meetodi kasutamisel arvestatakse, et kõik katsed loomadega peavad vastama loomakaitse kohalikele normidele;
Such chemicals would not induce an uterotrophic response in OVX adult animals as their HPG axis does not work.
järgmised loomade hoolduse ja dooside manustamise kirjeldused vastavad miinimumstandarditele, ning kohalikud õigusaktid, nagu Euroopa Parlamendi ja nõukogu 22. septembri 2010. aasta direktiiv 2010/63/EL teaduslikel eesmärkidel kasutatavate loomade kaitse kohta (38), on nende suhtes ülimuslikud.
For animal welfare reasons preference should be given to the method using immature rats, avoiding surgical pre-treatment of the animals and avoiding also a possible non-use of those animals which indicate any evidence entering oestrous (see paragraph 30).
OECD on esitanud loomade humaanse kohtlemise täiendavad juhendid (25).
The uterotrophic response is not entirely of oestrogenic origin, i.e. chemicals other than agonists or antagonists of oestrogens may also provide a response.
Nagu elusloomadega tehtavate katsete puhul tavaliselt, on enne katse algust oluline tagada, et andmed on tõepoolest vajalikud.
For example, relatively high doses of progesterone, testosterone, or various synthetic progestins may all lead to a stimulative response (30).
Andmed võivad olla tõeliselt vajalikud näiteks järgmiste kahe olukorra puhul:
Any response may be analysed histologically for keratinisation and cornification of the vagina (30).
suur oht kokkupuuteks (kontseptuaalne raamistik, 1. tase, vt 2. liide) või kaudsed andmed kemikaali östrogeensuse kohta (2. tase), mille tõttu on vaja uurida, kas selline mõju võib esineda in vivo;
Irrespective of the possible origin of the response, a positive outcome of an Uterotrophic Bioassay should normally initiate actions for further clarification.
toimed, mis näitavad östrogeensust 4. või 5. tasemel in vivo katsetes ja millest selgub, et mõjud on seotud östrogeense mehhanismiga, mida ei saa uurida in vitro katses.
Additional evidence of oestrogenicity could come from in vitro assays, such as the ER binding assays and transcriptional activation assays, or from other in vivo assays such as the female pubertal assay.
Käesolevas katsemeetodis kasutatud mõisted on määratletud 1. liites.
Taking into account that the Uterotrophic Bioassay serves as an in vivo screening assay, the validation approach taken served both animal welfare considerations and a tiered testing strategy.
Uterotroofse biokatse tundlikkuse aluseks on loomkatsesüsteem, milles hüpotalamuse-ajuripatsi-munasarjade telg ei funktsioneeri, mistõttu vereringes on vähe endogeenset östrogeeni.
To this end, effort was directed at rigorously validating reproducibility and sensitivity for oestrogenicity — the main concern for many chemicals-, while little effort was directed at the antioestrogenicity component of the assay.
See tagab emaka väikse massi mõjutaja puudumisel (nn nulljoon) ja maksimaalse reageerimise manustatud östrogeenidele.
Only one antioestrogen with strong activity was tested since the number of chemicals with a clear antioestrogenic profile (not obscured by some oestrogenic activity) is very limited.
Näriliste emasloomadel esineb sellist östrogeenitundlikku seisundit kahes olukorras:
Thus this test method is dedicated to the oestrogenic protocol, while the protocol describing the antagonist mode of the assay is included in a Guidance Document (37).
ebaküpsed emasloomad pärast võõrutamist ja enne puberteeti, ning
The reproducibility and sensitivity of the assay for chemicals with purely anti-oestrogenic activity will be more clearly defined later on, after the test procedure has been in routine use for some time and more chemicals with this modality of action are identified.
noored täiskasvanud emasloomad pärast munasarjade eemaldamist, kui on antud piisavalt aega emaka taandarenguks.
It is acknowledged that all animal based procedures will conform to local standards of animal care;
Uuritavat kemikaali manustatakse iga päev suukaudselt sondiga või naha alla tehtava süstiga.
the descriptions of care and treatment set forth below are minimal performance standards, and will be superseded by local regulations such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (38).
Uuritava kemikaali eri doose manustatakse vähemalt kahele katseloomade doosirühmale (vt punkt 33), kasutades kummaski rühmas oma doositaset ja manustamist kolmel järjestikusel päeval ebaküpsete emasloomade meetodi puhul ja vähemalt kolmel järjestikusel päeval täiskasvanud OVX-emasloomade meetodi puhul.
Further guidance of the humane treatment of animals is given by the OECD (25).
Loomad lahatakse 24 tundi pärast viimase doosi manustamist.
As with all assays using live animals, it is essential to ensure that the data are truly necessary prior to the start of the assay.
Östrogeeni agonistide leidmiseks hinnatakse kemikaali saanud loomade keskmist emaka massi ja võrreldakse kandeainet saanud loomade rühma vastava näitajaga, et leida statistiliselt olulist suurenemist.
For example, two conditions where the data may be required are:
Emaka keskmise massi statistiliselt oluline suurenemine osutab, et kõnealuse biokatse vastus on positiivne.
high exposure potential (Level 1 of the Conceptual Framework, Appendix 2) or indications for oestrogenicity (Level 2) to investigate whether such effects may occur in vivo;
MEETODI KIRJELDUS
effects indicating oestrogenicity in Level 4 or 5 in vivo tests to substantiate that the effects were related to an oestrogenic mechanism that cannot be elucidated using an in vitro test.
Katseloomadena võib kasutada tavaliselt laboris peetavate näriliseliinide loomi.
Definitions used in this test method are given in Appendix 1.
Valideerimiseks kasutati näiteks Wistari ja Sprague-Dawley liini rotte.
The Uterotrophic Bioassay relies for its sensitivity on an animal test system in which the hypothalamic-pituitary-ovarian axis is not functional, leading to low endogenous levels of circulating oestrogen.
Ei tohiks kasutada selliste liinide emasloomi, kelle emakas on või arvatakse olevat vähem tundlik.
This will ensure a low baseline uterine weight and a maximum range of response to administered oestrogens.
Labor peaks tõendama liini tundlikkust, nagu on kirjeldatud punktides 26 ja 27.
Two oestrogen sensitive states in the female rodent meet this requirement:
Uterotroofseks biokatseks on juba alates 1930. aastatest tavaliselt kasutatud rotte ja hiiri.
immature females after weaning and prior to puberty; and
OECD valideerimisuuringud tehti ainult rottidega, lähtudes arusaamast, et neid liike võib pidada samaväärseks ja seepärast piisab ülemaailmseks valideerimiseks katsetest ühe liigi loomadega, kuna sellega säästetakse vahendeid ja loomi.
young adult females after ovariectomy with adequate time for uterine tissues to regress.
Rott valitakse katseloomaks enamiku reproduktiiv- ja arenguhäireid põhjustava toksilisuse uuringutes.
The test chemical is administered daily by oral gavage or subcutaneous injection.
Arvestades seda, et hiirte kohta on olemas ulatuslik varasema kasutuse andmebaas, ja selleks, et laiendada näriliste uterotroofse biokatse kasutamist ka hiirtele kui katseliigile, tehti piiratud valideerimisuuring hiljem ka hiirtel (16).
Graduated test chemical doses are administered to a minimum of two treatment groups (see paragraph 33 for guidance) of experimental animals using one dose level per group and an administration period of three consecutive days for immature method and a minimum administration period of three consecutive days for ovx-adult method.
Kuna peamine soov oli hoida kokku vahendeid ja loomi, valiti võrdlusmeetod, milles kasutati piiratud arvu uuritavaid kemikaale ja osalevaid laboreid ning ei kasutatud koodiga tähistatud näidiste katsetamist.
The animals are necropsied approximately 24 hours after the last dose.
Kõnealune uterotroofse biokatse võrdlev valideerimisuuring näitab, et noorte täiskasvanud OVX-hiirte puhul on rottide ja hiirtega saadud andmed omavahel kvalitatiivselt ja kvantitatiivselt heas kooskõlas.
For oestrogen agonists, the mean uterine weight of the treated animal groups relative to the vehicle group is assessed for a statistically significant increase.
Kui uterotroofse biokatse tulemus on pikema uuringu eelkatse, võimaldab selline kooskõla kasutada mõlemas uuringus sama liini samast allikast pärinevaid loomi.
A statistically significant increase in the mean uterine weight of a test group indicates a positive response in this bioassay.
Võrdleva lähenemisviisi juures piirduti OVX-hiirte kasutamisega ja katsed ei andnud töökindlaid andmeid, mis oleksid võimaldanud valideerida meetodi ka ebaküpsete emasloomade mudeli jaoks, seepärast ebaküpsete hiirte mudelit käesoleva katsemeetodi raames ei vaadelda.
DESCRIPTION OF THE METHOD
Seega võib mõnel juhul rottide asemel kasutada hiiri.
Commonly used laboratory rodent strains may be used.
Hiirte kasutamist tuleks põhjendada, lähtudes toksikoloogilistest, farmakokineetilistest ja/või muudest kriteeriumidest.
As an example, Sprague-Dawley and Wistar strains of rats were used during the validation.
Hiirte korral võib olla vaja muuta katse-eeskirja.
Strains with uteri known or suspected to be less responsive should not be used.
Näiteks kasutavad hiired oma kehamassi kohta rohkem sööta ja seepärast peab sööda fütoöstrogeenisisaldus olema hiirte puhul madalam kui rottide puhul (9, 20, 22).
The laboratory should demonstrate the sensitivity of the strain used as described in paragraphs 26 and 27.
Kogu katse teostus peaks vastama laboriloomade hooldamise kohalikele normidele.
The rat and mouse have been routinely used in the Uterotrophic Bioassay since the 1930s.
Siin esitatud loomade hoolduse ja dooside manustamise kirjeldused vastavad miinimumstandarditele, ning kohalikud õigusaktid, nagu Euroopa Parlamendi ja nõukogu 22. septembri 2010. aasta direktiiv 2010/63/EL teaduslikel eesmärkidel kasutatavate loomade kaitse kohta (38), on nende suhtes ülimuslikud.
The OECD validation studies were only performed with rats based on an understanding that both species are expected to be equivalent and therefore one species should be enough for the world-wide validation in order to save resources and animals.
Loomade katseruumi temperatuur peaks olema 22 °C (ligikaudne vahemik ±3 °C).
The rat is the species of choice in most reproductive and developmental toxicity studies.
Suhteline õhuniiskus peaks olema vähemalt 30 % ja eelistatavalt ei peaks olema üle 70 %, välja arvatud ruumi koristamise ajal.
Taking into consideration that a vast historical database exists for mice and thus to broaden the scope of the Uterotrophic Bioassay test method in rodents to the use of mice as test species, a limited follow-up validation study was carried out in mice (16).
Eesmärgiks peaks olema suhtelise õhuniiskuse hoidmine 50–60 % vahemikus.
A bridging approach with a limited number of test chemicals, participating laboratories and without coded sample testing has been selected in keeping with the original intent to save resources and animals.
Valgustus peaks olema kunstlik.
This bridging validation study shows for the Uterotrophic Bioassay in young adult ovariectomised mice that, qualitatively and quantitatively, the data obtained in rats and mice correspond well with each other.
Ööpäevas peaks olema 12 tundi valgust ja 12 tundi pimedust.
Where the Uterotrophic Bioassay result may be preliminary to a long-term study, this allows animals from the same strain and source to be used in both studies.
Laborisööda ja joogivee tarbimine peaks olema ad libitum.
The bridging approach was limited to the OVX mice and the report does not provide a robust data set to validate the immature model, thus the immature model for mice is not considered under the scope of the current test method.
Noori täiskasvanud loomi võib hoida puurides eraldi või kuni kolmest loomast koosneva rühmana.
Thus, in some cases mice may be used instead of rats.
Ebaküpsete loomade nooruse tõttu soovitatakse neid pidada puurides sotsiaalsete rühmadena.
A rationale should be given for this species, based on toxicological, pharmacokinetic, and/or other criteria.
On teada, et fütoöstrogeenide suur sisaldus laborisöödas suurendab näriliste emaka massi sedavõrd, et see segab uterotroofse biokatse tegemist (13, 14, 15).
Modifications of the protocol may be necessary for mice.
Fütoöstrogeenide ja metaboliseeritava energia kõrge tase kasutatavas söödas võib ebaküpsete loomade korral põhjustada ka varast puberteeti.
For example, the food consumption of mice on a body weight basis is higher than that of rats and therefore the phyto-oestrogen content in food should be lower for mice than for rats (9)(20)(22).
Laborisöödas on fütoöstrogeene peamiselt siis, kui söödaks kasutatakse soja- ja lutsernitooteid, ning on näidatud, et fütoöstrogeenide tase võib sõltuda standardse laborisööda partiist (23).
All procedures should conform with local standards of laboratory animal care.
Kehamass on oluline muutuja, kuna tarbitav sööda kogus on seotud kehamassiga.
These descriptions of care and treatment are minimum standards and will be superseded by local regulations such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (38).
Seetõttu võib tegelik saadav fütoöstrogeenide doos sama sööda juures sõltuda loomaliigist ja vanusest (9).
The temperature in the experimental animal room should be 22 °C (with an approximate range ± 3 °C).
Ebaküpsete emasrottide puhul võib sööda tarbimine kehamassi kohta olla ligikaudu kaks korda suurem kui eemaldatud munasarjadega noorte täiskasvanud emasloomade puhul.
The relative humidity should be a minimum of 30 % and preferably should not exceed a maximum 70 %, other than during room cleaning.
Noorte täiskasvanud hiirte puhul võib sööda tarbimine kehamassi kohta olla ligikaudu neli korda suurem kui eemaldatud munasarjadega noorte täiskasvanud emasrottide puhul.
The aim should be relative humidity of 50-60 %.
Uterotroofse biokatse tulemused (9, 17, 18, 19) näitavad siiski, et piiratud koguse fütoöstrogeenide olemasolu söödas on lubatav ja ei vähenda biokatse tundlikkust.
Lighting should be artificial.
Juhinduda tuleks sellest, et söödaga saadav fütoöstrogeenide kogus ei ületaks 350 μg genisteiiniekvivalenti laborisööda grammi kohta ebaküpsete Sprague-Dawley ja Wistari rottide puhul (6, 9).
The daily lighting sequence should be 12 hours light, 12 hours dark.
Selline sööt peaks samuti sobima katse tegemisel noorte täiskasvanud OVX-rottidega, kuna nende söödatarbimine kehamassi kohta on väiksem kui ebaküpsetel loomadel.
Laboratory diet and drinking water should be provided ad libitum.
Kui kasutatakse täiskasvanud OVX-hiiri või fütoöstrogeenide suhtes tundlikumaid rotte, tuleb sööda fütoöstrogeenisisaldust vastavalt vähendada (20).
Young adult animals may be housed individually or be caged in groups of up to three animals.
Lisaks võivad eri söötade kättesaadava metaboliseeritava energia erinevused põhjustada puberteedi algust eri vanuses (21, 22).
Due to the young age of the immature animals, social group housing is recommended.
Enne uuringut tuleb hoolikalt valida sööt, mille fütoöstrogeenide tase ei oleks liiga kõrge (vt juhendid 6, 9) või milles ei oleks liiga palju metaboliseeritavat energiat, mis võib moonutada tulemusi (15, 17, 19, 22, 36).
High levels of phyto-oestrogens in laboratory diets have been known to increase uterine weights in rodents to a degree enough as to interfere with the Uterotrophic Bioassay (13)(14)(15).
Laboris kasutatava katsesüsteemi õige toimimise tagamine, nagu on täpsustatud punktides 26 ja 27, on oluline mõlema teguri kontrolli alla võtmiseks.
High levels of phyto-oestrogens and of metabolisable energy in laboratory diets may also result in early puberty, if immature animals are used.
Hea laboritava kohane kaitsemeede on võtta uuringu ajal manustatava sööda igast partiist representatiivsed proovid, et oleks võimalik teha fütoöstrogenisisalduse analüüse (nt kui kontrollrühma keskmine emaka mass on suurem kui varasemate kontrollrühmade puhul või kui katsest standardöstrogeeni 17α-etinüülöstradiooliga saadakse ebasobiv tulemus).
The presence of phyto-oestrogens results primarily from the inclusion of soy and alfalfa products in the laboratory diets and concentrations of phyto-oestrogens have been shown to vary from batch-to-batch of standard laboratory diets (23).
Uuringu käigus tuleks teha alikvootide analüüs või need külmutada –20 °C juures või säilitada nii, et proovid ei laguneks enne analüüsimist.
Body weight is an important variable, as the quantity of food consumed is related to body weight.
Mõned allapanumaterjalid võivad sisaldada looduslikult esinevaid östrogeenseid või antiöstrogeenseid kemikaale (nt on teada, et maisitõlvik mõjutab emasrottide tsüklit ja näib olevat antiöstrogeenne).
Therefore, the actual phyto-oestrogen dose consumed from the same diet may vary among species and by age (9).
Valitud allapanumaterjal peaks sisaldama võimalikult vähe fütoöstrogeene.
For immature female rats, food consumption on a body weight basis may be approximately double that of ovariectomised young adult females.
Loomade ettevalmistamine
For young adult mice, food consumption on a body weight basis may be approximately quadruple that of ovariectomised young adult female rats.
Katseks valitakse loomad, kel ei esine mingeid haigusnähte ega füüsilisi kõrvalekaldeid, ja need jagatakse juhuvaliku alusel kontroll- ja doosirühmadesse.
Uterotrophic Bioassay results (9)(17)(18)(19), however, show that limited quantities of dietary phyto-oestrogens are acceptable and do not reduce the sensitivity of the bioassay.
Loomadele tuleks anda kordumatu märgis.
As a guide, dietary levels of phyto-oestrogens should not exceed 350 μg of genistein equivalents/gram of laboratory diet for immature female Sprague Dawley and Wistar rats (6)(9).
Ebaküpsed loomad peaksid eelistatavalt olema kuni võõrutamiseni puurides koos oma ema või kasuemaga.
Such diets should also be appropriate when testing in young adult ovariectomised rats because food consumption on a body weight basis is less in young adult as compared to immature animals.
Kohanemisaeg enne uuringu algust peaks olema umbes 5 päeva noorte täiskasvanud loomade puhul ja ebaküpsete loomade puhul, kes on tarnitud koos oma ema või kasuemaga.
If adult ovariectomised mice or more phyto-oestrogen-sensitive rats are to be used, proportional reduction in dietary phyto-oestrogen levels must be considered (20).
Kui ebaküpsed loomad ostetakse ilma emata kohe pärast võõrutamist, võib olla vajalik kasutada lühemat kohanemisaega, kuna dooside manustamine peaks algama kohe pärast võõrutamist (vt punkt 29).
In addition, the differences in available metabolic energy from different diets may lead to time shifts for the onset of puberty (21)(22).
Labori pädevuse kontrollimine
Prior to the study, careful selection is required of a diet without an elevated level of phyto-oestrogens (for guidance see (6)(9)) or metabolisable energy, that can confound the results (15)(17)(19)(22)(36).
Labori pädevuse kontrollimiseks saab kasutada kahte meetodit:
Ensuring the proper performance of the test system used by the laboratory as specified in paragraphs 26 and 27 is an important check on both of these factors.
perioodiline kontrollimine, mille aluseks on algse nulljoone positiivse kontrolli katse (vt punkt 27).
As a safeguard consistent with good laboratory practice (GLP) representative sampling of each batch of diet administered during the study should be conducted for possible analysis of phyto-oestrogen content (e.g. in the case of high uterine control weight relative to historic controls or an inadequate response to the reference oestrogen, 17 alpha ethinyl estradiol).
samaaegsete kontrollkatsete tegemine, milleks nähakse igas katses ette rühm, kellele manustatakse sobiv doos võrdlusöstrogeeni.
Aliquots should be analysed as part of the study or frozen at – 20 °C or in such a way as to prevent the sample from decomposing prior to analysis.
Kui süsteemi reaktsioon ei vasta ootustele, tuleb uurida katsetingimusi ja neid vastavalt muuta.
Some bedding materials may contain naturally occurring oestrogenic or antioestrogenic chemicals (e.g. corn cob is known to affects the cyclicity of rats and appears to be antioestrogenic).
On soovitatav, et kummagi lähenemisviisi puhul kasutatav võrdlusöstrogeeni doos oleks ligikaudu 70–80 efektiivdoosi.
The selected bedding material should contain a minimum level of phyto-oestrogens.
Nulljoone positiivse kontrolli katse.
Preparation of animals
Enne kui labor teeb käesoleva katsejuhendi järgi esimese katse, tuleks tal tõendada oma pädevust.
Experimental animals without evidence of any disease or physical abnormalities are randomly assigned to the control and treatment groups.
Selleks uuritakse loommudeli reageerimist võrdlusöstrogeeni 17α-etinüülöstradiooli (CASi nr 57-63-6) (EE) vähemalt neljale doosile.
The acclimatisation period prior to the start of the study should be about 5 days for young adult animals and for the immature animals delivered with dams or foster dams.
Ebaküpsete loomade vanus
If immature animals are obtained as weanlings without dams a shorter duration of the acclimatisation period may become necessary as dosing should start immediately after weaning (see paragraph 29).
Ebaküpsete loomade uterotroofse biokatse tegemisel peab olema täpsustatud loomade sünni kuupäev.
Verification of Laboratory Proficiency
Dooside manustamisega tuleks alustada piisavalt vara, et uuritava kemikaali manustamise lõpuks ei oleks puberteediga seotud endogeensete östrogeenide taseme tõus veel alanud.
Two different options can be used to verify laboratory proficiency:
Teisest küljest on tõendeid, et väga noored loomad võivad olla vähem tundlikud.
Periodic verification, relying on an initial baseline positive control study (see paragraph 27).
Optimaalse vanuse kindlaksmääramiseks peaks iga labor võtma arvesse oma varasemaid tulemusi suguküpsuse saavutamise kohta.
ethinyl estradiol (CAS No 57-63-6) (EE).
Dooside manustamine rottidele tuleks eelistatult lõpetada 21. sünnijärgsel päeval ja igal juhul enne 25. sünnijärgset päeva, kuna pärast seda päeva hakkab hüpotalamuse-ajuripatsi-munasarjade telg toimima ja endogeensete östrogeenide tase võib hakata tõusma, millele vastavalt hakkab suurenema keskmine nulljoone emaka mass ja rühma standardhälve (2, 3, 10, 11, 12).