natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The solubility of the test chemical, forskolin and prochloraz in the solvent;
Kui pärast ekstraheerimist ei õnnestu kvaliteedikontrolli kriteeriume täita, siis ei ole kasutatav hormoonide määramise süsteem sobiv H295R steroidogeneesi katses kasutamiseks ja tuleb kasutada muud hormoonide määramise meetodit.Standardkõver
The cytotoxicity as a function of the concentration of solvent.
Lahusti kontrolli katsetest määratavad hormoonide kontsentratsioonid peaksid olema standardkõvera lineaarse osa peal.
It is recommended that the maximum allowable solvent concentration should not exceed a 10 × dilution of the least cytotoxic concentration of the solvent.
Eelistatavalt peaksid lahusti kontrolli tulemused asuma lineaarse osa keskel, mis tõendaks, et on võimalik mõõta nii hormoonisünteesi pärssimist kui ka aktiveerimist.
Prior to conducting testing for the first time, the laboratory should conduct a qualifying experiment demonstrating that the laboratory is capable of maintaining and achieving appropriate cell culture and experimental conditions required for chemical testing as described in paragraphs 33-35.
Vastavalt sellele tuleks valida keskkonna (või ekstraktide) lahjendused, mis tehakse enne mõõtmist.
When initiating testing using a new batch, a control plate should be run before using a new batch of cells to evaluate the performance of the cells as described in paragraphs 36 and 37.
Lineaarne sõltuvus määratakse kindlaks sobiva statistilise meetodiga.
Performance of the Hormone Measurement System
Kemikaali häiriva mõju katse
Method sensitivity, accuracy, precision and cross-reactivity with sample matrix
Kui hormoonide määramiseks kasutatakse antikeha-põhiseid meetodeid nagu ensüümimmuunsorptsioonanalüüs (ELISA) ja radioimmuunanalüüs (RIA), tuleks enne kemikaalidega tegelike katsete tegemist kontrollida kemikaalide võimalikku segavat mõju (valideerimisaruande III liide (4)), kuna mõni kemikaal võib neid katseid segada (17).
Each laboratory may use a hormone measurement system of its choice for the analysis of the production of T and E2 by H295R cells so long as it meets performance criteria, including the Limit of Quantification (LOQ).
Kui esineb segamine, mis on ≥ 20 % hormoonide T ja/või E2 baastasemest, mis määratakse hormoonianalüüsiga, tuleb kõigi uuritavate kemikaalide varulahuse lahjendustega teha hormoonide analüüsile kemikaali poolt avaldatava segava mõju katse (nagu on kirjeldatud valideerimisaruande (4) III liites, jaotis 5.0), et teha kindlaks lävidoos, mille juures esineb oluline (≥ 20 %) segamine.
Nominally these are 100 pg/ml for T and 10 pg/ml for E2, which are based on the basal hormone levels observed in the validation studies.
Kui segamine on alla 30 %, võib segamise arvestamiseks viia tulemusse sisse parandi.
However, greater or lower levels may be appropriate depending upon the basal hormone levels achieved in the performing laboratory.
Kui segamine on üle 30 %, on andmed kõlbmatud ja selliste kontsentratsioonide juures saadud andmed tuleks jätta arvestamata.
Prior to initiation of QC plate and test runs, the laboratory should demonstrate that the hormone assay to be used can measure hormone concentrations in supplemented medium with sufficient accuracy and precision to meet the QC criteria specified in Tables 1 and 5 by analysing supplemented medium spiked with an internal hormone control.
Kui uuritav kemikaal segab oluliselt hormoonide määramist rohkem kui ühel kontsentratsioonil, mis ei ole tsütotoksiline, tuleb kasutada muud hormoonide määramise süsteemi.
Supplemented medium should be spiked with at least three concentrations of each hormone (e.g. 100, 500 and 2500 pg/ml of T; 10, 50 and 250 pg/ml of E2; or the lowest possible concentrations based upon the detection limits of the chosen hormone measurement system can be used for the lowest spike concentrations for T and E2) and analysed.
Selleks et vältida saastavate kemikaalide segavat mõju, on soovitatav hormoonid keskkonnast sobiva lahustiga ekstraheerida;
Measured hormone concentrations of non-extracted samples should be within 30 % of nominal concentrations, and variation between replicate measurements of the same sample should not exceed 25 % (see also Table 8 for additional QC criteria).
võimalikud meetodid on esitatud valideerimisaruandes (4).
If these QC criteria are fulfilled it is assumed that the selected hormone measurement assay is sufficiently accurate, precise and does not cross-react with components in the medium (sample matrix) such that a significant influence on the outcome of the assay would be expected.
Tulemuste õigsuse kriteeriumid hormoonide mõõtmise süsteemide puhul
In this case, no extraction of samples prior to measurement of hormones is required.
Näitaja
In the case that the QC criteria in Tables 1 and 8 are not fulfilled, a significant matrix effect may be occurring, and an experiment with extracted spiked medium should be conducted.
Kriteerium
An example of an extraction procedure is described in Appendix II to the validation report (4).
Mõõtmismeetodi tundlikkus
Measurements of the hormone concentrations in the extracted samples should be made in triplicate.
Mõõtmispiir
If it can be shown that after extraction the components of the medium do not interfere with the hormone detection method as defined by the QC criteria, all further experiments should be conducted using extracted samples.
Hormoonide ekstraheerimise tõhusus (ainult siis, kui on vaja ekstraheerida)
If the QC criteria cannot be met after extraction, the utilised hormone measurement system is not suitable for the purpose of the H295R Steroidogenesis Assay, and an alternative hormone detection method should be used.Standard curve
Tembitud hormooniproovide keskmine ekstraheerimismäär (mis põhineb kolmel mõõtmisel) ei tohiks erineda üle 30 % lisatud kogusest.
The hormone concentrations of the solvent controls (SC) should be within the linear portion of the standard curve.
Kemikaali segav mõju (ainult antikeha-põhised süsteemid)
Preferably, the SC values should fall close to the centre of the linear portion to ensure that induction and inhibition of hormone synthesis can be measured.
Olulisi ristreaktsioone (> 30 % vastava hormooni baastasemest) ei ole ühegi raku poolt sünteesitava hormooniga [19] [20].
Dilutions of medium (or extracts) to be measured are to be selected accordingly.
Labori pädevuse katse
The linear relationship is to be determined by a suitable statistical approach.
Enne tundmatu kemikaali katsetamist peaks labor näitama, et ta suudab saavutada ja säilitada asjakohast rakukultuuri ja katsetingimusi, mis on vajalikud katse edukaks läbiviimiseks; selleks tehakse labori pädevuse katse.
Chemical interference test
Kuna katse tulemuslikkus sõltub otseselt laboris analüüsi tegevatest inimestest, tuleb neid katseid osaliselt korrata, kui labori töötajaskonnas on muutusi.
If antibody-based assays such as Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISAs) and Radio-Immuno Assays (RIAs) are going to be used to measure hormones, each chemical should be tested for potential interference with the hormone measurement system to be utilised prior to initiation of the actual testing of chemicals (Appendix III to the validation report (4)) because some chemicals can interfere with these tests (17).
Labori pädevuse katse tehakse samades tingimustes, mis on loetletud punktides 38–40: rakud viiakse kokkupuutesse tugeva, mõõduka ja nõrga aktivaatori ja pärssija 7 kontsentratsiooniga ja negatiivse kemikaaliga (vt tabel 2).
If interference occurs that is ≥ 20 % of basal hormone production for T and/or E2 as determined by hormone analysis, the Chemical Hormone Assay Interference Test (such as described in Appendix III to the validation report (4) section 5.0) should be run on all test chemical stock solution dilutions to identify the threshold dose at which significant (≥ 20 % ) interference occurs.
Konkreetselt kuuluvad uuritavate ainete hulka järgmised kemikaalid:
If interference is less than 30 %, results may be corrected for the interference.
tugev aktivaator forskoliin (CASi nr 66575-29-9);
If interference exceeds 30 %, the data are invalid and the data at these concentrations should be discarded.
tugev pärssija prokloraas (CASi nr 67747-09-5);
If significant interference of a test chemical with a hormone measurement system occurs at more than one non-cytotoxic concentration, a different hormone measurement system should be used.
mõõdukas aktivaator atrasiin (CASi nr 1912-24-9);
In order to avoid interference from contaminating chemicals it is recommended that hormones are extracted from the medium using suitable solvent, possible methods can be found in the validation report (4).
mõõdukas pärssija aminoglutetimiid (CASi nr 125-84-8);
Performance criteria for hormone measurement systems
Eraldi plaatidel tehakse katsed kõigi kemikaalidega, kasutades tabelis 6 näidatud formaati.
Parameter
Iga päev tuleb koos katsetega teha ka üks katse kvaliteedikontrolli plaadiga (tabel 4, punktid 36-37), millele pannakse labori pädevuse kontrollimise kemikaalid.
Limit of Quantification (LOQ)
Uuritavad kontsentratsioonid [μM]
Hormone Extraction Efficiency (only when extraction is needed)
prokloraas
The average recovery rates (based on triplicate measures) for the spiked amounts of hormone should not deviate more than 30 % from amount that was added.
forskoliin
Chemical Interference (only antibody based systems)
atrasiin
No substantial (≥ 30 % of basal hormone production of the respective hormone) cross-reactivity with any of the hormones produced by the cells should occur [19] [20]
aminoglutetimiid
Laboratory Proficiency Test
bisfenool A
Before testing unknown chemicals, a laboratory should demonstrate that it is capable of achieving and maintaining appropriate cell culture and test conditions required for the successful conduct of the assay by running the laboratory proficiency test.
H295R kokkupuude pädevuse kontrollimise kemikaalidega tuleks teha 24 süvendiga plaatidel labori pädevuse kontrollimise katse ajal.
As the performance of an assay is directly linked to the laboratory personnel conducting the assay, these procedures should be partly repeated if a change in laboratory personnel occurs.
Doosi ühik kõigi uuritavate kemikaalide puhul on μM.
This proficiency test will be conducted under the same conditions listed in paragraphs 38 through 40 by exposing cells to 7 increasing concentrations of strong, moderate and weak inducers and inhibitors as well as a negative chemical (see Table 2).
Doosid tuleks manustada DMSO-lahusena, 0,1 mahuprotsenti igasse süvendisse.
Specifically, chemicals to be tested include the strong inducer forskolin (CAS No 66575-29-9);
Iga uuritavat kontsentratsiooni tuleks katsetada kolmes süvendis (tabel 6).
the strong inhibitor prochloraz (CAS No 67747-09-5);
Iga kemikaali uuritakse eraldi plaadil.
the moderate inducer atrazine (CAS No 1912-24-9);
Iga päev lisatakse plaatide hulka üks kvaliteedikontrolli plaat.
the moderate inhibitor aminoglutethimide (CAS No 125-84-8);
Rakkude elujõulisuse ja hormoonide analüüsid tuleb teha vastavalt punktidele 42–46.
the weak inducer (E2 production) and weak inhibitor (T production) bisphenol A (CAS No 80-05-7);
Teatatakse läviväärtus (vähim avastatava mõjuga kontsentratsioon, lowest observed effect concentration, LOEC) ja otsus klassifitseerimise kohta ning tulemusi võrreldakse tabelis 3 esitatud väärtustega.
and the negative chemical human chorionic gonadotropin (HCG) (CAS No 9002-61-3) as shown in Table 2.
Andmed loetakse kasutamiskõlblikuks, kui need vastavad LOEC-le ja klassifitseerimisotsusele, mis on esitatud tabelis 3.
Separate plates are run for all chemicals using the format as shown in Table 6.
Läviväärtused (LOEC) ja klassifitseerimisotsused pädevuse kontrollimise kemikaalide puhul
One QC plate (Table 4, paragraphs 36-37) should be included with each daily run for the proficiency chemicals.
Puudub:
Proficiency chemicals and exposure concentrations
ei kohaldata, kuna pärast kokkupuudet negatiivse kontrolli mittetsütotoksilise kontsentratsiooniga ei tohiks muutusi olla.
Proficiency chemical
CASi number
Test Concentrations [μM]
Klassifitseerimisotsus
Prochloraz
+ [22] (Pärssimine)
Forskolin
+ (pärssimine)
Atrazine
+ (aktiveerimine)
Aminoglutethimide
Puudub
Bisphenol A
Negatiivne
Exposure of H295R to proficiency chemicals should be conducted in 24 well plates during the laboratory proficiency test.
Kvaliteedikontrolli plaat
Dosing is in μM for all test chemical doses.
Kvaliteedikontrolli plaati kasutatakse H295R-rakkude toimimise tõendamiseks rakkude kasvatamise standardtingimustes ja varasemate katsete andmebaasi loomiseks, millesse pannakse hormoonide kontsentratsioon lahusti kontrolli katsetes, positiivse ja negatiivse kontrolli katsetes, samuti varasemate katsete muud kvaliteedikontrolli peegeldavad näitajad.
Doses should be administered in DMSO at 0,1 % v/v per well.
H295R-rakkude toimimist tuleks hinnata nii, et kvaliteedikontrolli plaadiga kontrollitakse iga uut ATCC partiid, samuti varem külmutatud rakkude iga sulatatud partiid, kui sama rakkude partiiga ei tehta labori pädevuse katset (punktid 32–34).
All test concentrations should be tested in triplicate wells (Table 6).
Üks kvaliteedikontrolli plaat võimaldab täielikult hinnata katse tingimusi (nt rakkude elujõulisus, lahusti kontrollid, negatiivsed ja positiivsed kontrollid, samuti katsetevaheline ja katsesisene varieeruvus) kemikaali katsetamisel ning see peaks kuuluma iga katse juurde.
Separate plates are run for each chemical.
Kvaliteedikontrolli katse tehakse 24 süvendiga plaadil ja selle puhul kasutatakse samasugust inkubeerimise, dooside manustamise, rakkude eluvõimelisuse või tsütotoksilisuse määramise, hormoonide ekstraheerimise ja analüüsimise korda, mida on kirjeldatud punktides 38–46 kemikaalide katsetamiseks.
One QC plate is included with each daily run.
Plaadi üksikasjalik kirjeldus on esitatud tabelis 4.
Cell viability and hormone analyses should be conducted as provided in paragraphs 42 through 46.
Kriteeriumid, millele peavad vastama kvaliteedikontrolli plaadi tulemused, on loetletud tabelis 5.
The threshold value (lowest observed effect concentration, LOEC) and classification decision should be reported and compared with the values in Table 3.
Nii lahusti kontrolli kui ka tühikatsete süvendites tuleb saavutada T ja E2 sünteesi minimaalne baastase.
The data are considered acceptable if they meet the LOEC and decision classification in Table 3.
Pärast kokkupuutekatse lõpetamist ja keskkonna kõrvaldamist lisatakse kõikidesse MeOH süvenditesse 70 % metanoolilahust; see on tsütotoksilisuse positiivne kontroll (vt tsütotoksilisuse katse valideerimisaruande (4) III liites)
n/a:
Tühikatse [23](+ MeOH) [24]
not applicable as no changes should occur after exposure to non-cytotoxic concentrations of negative control.
(+ MeOH) [24]
CAS No
Tabel 5
+ [22] (Inhibition)
Hormoonide baassüntees lahusti kontrollis (SC)
+ (Inhibition)
≥ 5 korda LOQ
+ (Induction)
≥ 2,5 korda LOQ
n/a
Aktiveerimine (10 μM forskoliin)
Negative
≥ 1,5 korda SC
Quality Control Plate
≥ 7,5 korda SC
The quality control (QC) plate is used to verify the performance of the H295R cells under standard culture conditions, and to establish a historical database for hormone concentrations in solvent controls, positive and negative controls, as well as other QC measures over time.
Pärssimine (1μM prokloraas)
H295R cell performance should be assessed using a QC plate for each new ATCC batch or after using a previously frozen stock of cells for the first time unless the laboratory proficiency test (paragraphs 32-34) has been run with that batch of cells.
≥ 0,5 korda SC
A QC plate provides a complete assessment of the assay conditions (e.g. cell viability, solvent controls, negative and positive controls, as well as intra- and inter-assay variability) when testing chemicals and should be part of each test run.
KEMIKAALIGA KOKKUPUUTESSE VIIMINE
The QC test is conducted in a 24-well plate and follows the same incubation, dosing, cell viability/cytotoxicity, hormone extraction and hormone analysis procedures described in paragraphs 38 through 46 for testing chemicals.
Eelinkubeeritud rakud võetakse inkubaatorist välja (punkt 21) ja kontrollitakse mikroskoobi all, et teha kindlaks, kas need on heas seisundis (kleepumine, morfoloogia) enne kemikaaliga kokkupuutesse viimist.
The QC plate contains blanks, solvent controls, and two concentrations of a known inducer (forskolin, 1, 10 μM) and inhibitor (prochloraz, 0,1, 1 μM) of E2 and T synthesis.
Rakud pannakse bioohutuskambrisse ja eemaldatakse täiendatud keskkond ning asendatakse uue täiendatud keskkonnaga (1 ml süvendi kohta).
In addition, MeOH is used in select wells as a positive control for the viability/cytotoxicity assay.
Käesoleva katsemeetodi puhul on eelistatud lahusti DMSO.
A detailed description of the plate layout is provided in Table 4.
Kui on olemas põhjusi muude lahustite kasutamiseks, tuleks esitada teaduslik põhjendus.
The criteria to be met on the QC plate are listed in Table 5.
Rakud viiakse uuritava kemikaaliga kokkupuutesse, milleks lisatakse 1 μl sobivat põhilahust dimetüülsulfoksiidis (vt valideerimisaruande (4) II liide) süvendis oleva täiendatud keskkonna 1 ml kohta (süvendi maht).
The minimum basal hormone production for T and E2 should be met in both the solvent control and blank wells.
Sellega saavutatakse süvendites DMSO lõppkontsentratsioon 0,1 %.
Table 4 Quality control plate layout for testing performance of unexposed H295R cells and cells exposed to known inhibitors (PRO = prochloraz) and stimulators (FOR = forskolin) of E2 and T production.
Vajaliku segamise kindlustamiseks eelistatakse üldiselt segada uuritava kemikaali sobiv põhilahus DMSOs täiendatud keskkonnaga, et saada iga doosi vajalik lõppkontsentratsioon, ja selline segu lisatakse igasse süvendisse kohe pärast vana keskkonna eemaldamist.
After termination of the exposure experiment and removal of medium, a 70 % methanol solution will be added to all MeOH wells to serve as a positive control for cytotoxicity (see cytotoxicity assay in Appendix III to the validation report (4))
Kui kasutatakse sellist varianti, peaks DMSO kontsentratsioon (0,1 %) olema ühesugune kõikides süvendites.
Blank [23]
Süvendeid, milles on kaks kõige kõrgemat kontsentratsiooni, kontrollitakse visuaalselt stereomikroskoobiga, et neis ei oleks sadet ega hägu, mis osutaks kemikaali ebapiisavale lahustuvusele.
Blank [23](+ MeOH) [24]
Kui leitakse hägusust või sademe tekkimist, kontrollitakse ka järgmise kahe kontsentratsiooniga süvendeid (jne); kontsentratsioone, mille juures ei saavutatud täielikku lahustumist, ei arvestata edasisel hindamisel ja analüüsil.
(+ MeOH) [24]
Plaat pannakse tagasi inkubaatorisse 37 °C juurde 5 % CO2-sisaldusega õhu atmosfääri 48 tunniks.
Table 5
Uuritava kemikaaliga katse plaat on näidatud tabelis 6.
Performance criteria for the Quality Control Plate
Põhilahused 1–7 näitavad uuritava kemikaali suurenevate dooside paigutust.
Basal Production of hormone in the solvent control (SC)
Tabel 6
≥ 5 times the LOQ
Dooside manustamise skeem H295R-rakkude kokkupuutel uuritava kemikaaliga 24-süvendilisel plaadil
≥ 2,5 times the LOQ
Põhilahus 4
Induction (10 μM forskolin)
Põhilahus 1
≥ 1,5 times the SC
Põhilahus 1
≥ 7,5 times the SC
Põhilahus 5
Inhibition (1μM prochloraz)
Põhilahus 2
≤ 0,5 times the SC
Põhilahus 6
CHEMICAL EXPOSURE PROCEDURE
Põhilahus 3
The pre-incubated cells are removed from the incubator (paragraph 21) and checked under a microscope to assure that they are in good condition (attachment, morphology) prior to dosing.
Põhilahus 7
The cells are placed in a bio-safety cabinet and the supplemented medium removed and replaced with new supplemented medium (1 ml/well).
Pärast 48-tunnilist kokkupuudet võetakse plaadid inkubaatorist ja iga süvendit kontrollitakse mikroskoobiga rakkude seisundi (kleepumine, morfoloogia, laatumise määr) ja tsütotoksikoloogilisuse suhtes.
DMSO is the preferred solvent for this test method.
Iga süvendi keskkond jagatakse kaheks võrdseks osaks (kumbki ligikaudu 490 μl) ja kantakse kahte korralikult märgistatud viaali (st üks alikvoot annab iga süvendi kohta varuproovi).
However, if there are reasons for using other solvents the scientific rationale should be described.
Rakkude kuivamise vältimiseks eemaldatakse keskkond korraga ühe rea süvenditest ja asendatakse keskkonnaga rakkude eluvõimelisuse (tsütotoksilisuse) katseks.
Cells are exposed to the test chemical by adding 1 μl of the appropriate stock solution in DMSO (see Appendix II to the validation report (4)) per 1 ml supplemented medium (well volume).
Kui rakkude eluvõimelisust (tsütotoksilisust) kohe määrama ei hakata, lisatakse igasse süvendisse 200 μl fosfaatpuhvrit sisaldavat soolalahust, mis sisaldab Ca2+ ja Mg2+.
This results in a final concentration of 0,1 % DMSO in the wells.
Keskkond külmutatakse – 80 °C juures kuni edasise töötlemiseni hormoonikontsentratsioonide määramiseks (vt punktid 44–46).
To assure adequate mixing it is generally preferred that the appropriate stock solution of the test chemical in DMSO is mixed with supplemented medium to yield the desired final concentration for each dose, and the mixture added to each well immediately after removal of old medium.
T ja E2 on – 80 °C juures hoitavas keskkonnas üldiselt stabiilsed vähemalt kolm kuud, kuid hormoonide stabiilsus säilitamisel tuleks dokumentaalselt tõendada igas laboris.
If this option is used, the concentration of DMSO (0,1 %) should remain consistent among all wells.
Kohe pärast keskkonna eemaldamist määratakse igal kemikaaliga kokkupuute plaadil rakkude eluvõimelisus/tsütotoksilisus.
The wells containing the greatest two concentrations are visually assessed for formation of precipitates or cloudiness as an indication of incomplete solubility of the test chemical by using a stereo microscope.
Rakkude eluvõimelisuse määramine
If such conditions (cloudiness, formation precipitates) are observed, wells containing the next lesser concentrations are examined as well (and so forth) and concentrations that did not completely go into solution are to be excluded from further evaluation and analysis.
Rakkude eluvõimelisuse/tsütotoksilisuse katset võib teha mitmel viisil; katse eesmärk on teha kindlaks kemikaali võimalik mõju rakkude eluvõimele.
The plate is returned to the incubator at 37 °C under a 5 % CO2 in air atmosphere for 48 hours.
Katsega peaks saama määrata süvendis olevate eluvõimeliste rakkude tegelikku protsendimäära või tuleb näidata, et see on võrreldav katsega Live/Dead® (on selle lineaarne funktsioon) (vt valideerimisaruande (4) III liide).
The test chemical plate layout is shown in Table 6.
Samavõrra hästi töötab teine katse MTT-ga ([3-(4,5-dimetüültiasool-2-üül)-2,5-difenüültetrasooliumbromiid] (18)).
Stocks 1 -7 show placement of increasing doses of test chemical.
Rakkude eluvõimelisuse hindamine nimetatud meetoditega on suhteline ja selle puhul ei pruugi tingimata olla lineaarset sõltuvust süvendis olevate rakkude absoluutsest arvust.
Table 6
Seepärast tuleks igas süvendis rakke paralleelselt hinnata ka silmaga ning teha lahusti kontrolli ja kahe kõrgeima mittetsütotoksilise kontsentratsiooni katse digitaalpildid arhiivi jaoks, et hiljem oleks võimalik määrata tegelikku rakkude tihedust, kui seda on vaja.
Dosing schematic for the exposure of H295R cells to test chemicals in a 24 well plate
Kui visuaalne kontrollimine või eluvõimelisuse/tsütotoksilisuse katse näitab rakkude arvu suurenemist, tuleb seda näilist kasvu kontrollida.
Stock 4
Kui rakkude arvu suurenemist kontrollitakse, tuleks see märkida katseprotokolli.
Stock 1
Kui rakkude arvu suurenemist kontrollitakse, tuleks see märkida katseprotokolli.
Stock1
viimast peetakse 100 % eluvõimelisuseks ja see arvutatakse vastavalt kasutatava rakkude eluvõimelisuse/tsütoloogilisuse katse eeskirjale.
Stock 5
MTT-katse puhul võib kasutada järgmist valemit:
Stock 2
eluvõimeliste rakkude % = (väärtus süvendis – MeOH-ga [= 100 % surnud] süvendite keskväärtus) ÷ (lahustikontrolli süvendite keskväärtus – MeOH-ga [= 100 % surnud] süvendite keskväärtus)
Stock 6
Süvendid, milles eluvõimelisus on alla 80 % võrreldes keskmise eluvõimelisusega lahusti kontrolli katsetes (= 100 % eluvõimelisus), tuleks lõplikust andmete analüüsist välja jätta.