natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Wash the combined acid extracts by swirling for approximately 10 seconds with 10 ml of ethyl acetate (3.4).
Kogutud happeekstrakte pestakse 10 ml etüülatsetaadiga (3.4) loksutades umbes 10 sekundit.
Quantitatively transfer the aqueous layer into a 250 ml round-bottomed flask and discard the organic phase.
Veekiht kantakse kvantitatiivselt 250 ml ümarkolbi ja orgaaniline faas valatakse ära.
Evaporate all the remaining ethyl acetate from the acid solution using a rotary film evaporator (4.2).
Happelahusest aurustatakse filter-pöördaurusti (4,2) abil kogu allesjäänud etüülatsetaat.
The temperature of the water bath must not exceed 40 oC.
Veevanni temperatuur ei tohi olla üle 40 oC.
Under a vacuum of approximately 25 mbar all of the residual ethyl acetate will be removed within 5 minutes at 38 oC.
Umbes 25-millibaarises vaakumis eemaldatakse 5 minutiga temperatuuril 38 oC kogu allesjäänud etüülatsetaat.
Preparation of the Amberlite column
Amberlite'i kolonni ettevalmistamine
An XAD-2 column is prepared for each sample extract.
XAD-2 kolonn valmistatakse ette eraldi iga proovi ekstrakti jaoks.
Transfer 10 g of prepared Amberlite (3.19) into a glass column (4.5) with methanol (3.8).
10 g valmistatud Amberlite'i (3.19) kantakse metanooliga (3.8) klaaskolonni (4.5).
Add a small plug of glass-wool to the top of the resin bed.
Vaigukihi peale pannakse väike klaasvillatropp.
Drain the methanol from the column and wash the resin with 100 ml of water, stopping the flow as the liquid reaches the top of the resin bed.
Metanool kallatakse kolonnist välja ja vaiku pestakse 100 ml veega, peatades voolu, kui vedelik jõuab vaigukihi ülemise piirini.
Allow the column to equilibrate for 10 minutes before use.
Kolonnil lastakse enne kasutamist 10 minutit tasakaalustuda.
Never allow the column to run dry.
Kolonni ei tohi kunagi lasta ära kuivada.
Sample clean up
Proovi puhastamine
Transfer the extract (5.2) quantitatively to the top of the prepared Amberlite column (5.3.1) and elute, discarding the eluate.
Ekstrakt (5.2) kantakse kvantitatiivselt ettevalmistatud Amberlite'i kolonni (5.3.1), elueeritakse, valades eluaadi ära.
The rate of elution must not exceed 20 ml/min.
Elueerimiskiirus ei tohi ületada 20 ml/min.
Rinse the round-bottomed flask with 20 ml of hydrochlorid acid (3.17) and use this to wash the resin column.
Ümarkolb loputatakse 20 ml soolhappega (3.17) ja seda lahust kasutatakse vaigukolonni pesemiseks.
Blow through any remaining acid solution with a stream of air.
Allesjäänud happelahus kõrvaldatakse õhuvoolu abil.
Discard the washings.
Pesulahused valatakse ära.
Add 100 ml of methanol (3.8) to the column and allow 5 to 10 ml to elute, collecting the eluate in a 250 ml round-bottomed flask.
Kolonni lisatakse 100 ml metanooli (3.8) ja lastakse elueerida 5–10 ml, kogudes eluaadi 250 ml ümarkolbi.
Leave the remaining methanol for 10 minutes to equilibrate with the resin and continue the elution at a rate not exceeding 20 ml/min. collecting the eluate in the same round-bottomed flask.
Allesjäänud metanoolil lastakse 10 minutit vaiguga tasakaalustuda ja jätkatakse elueerimist kiirusel kuni 20 ml/min, kogudes eluaadi samasse ümarkolbi.
Evaporate the methanol on the rotary film evaporator (4.2), the temperature of the water bath must not exceed 40 oC.
Metanool aurustatakse filter-pöördaurusti (4.2) abil, veevanni temperatuur ei tohi olla üle 40 oC.
Transfer the residue quantitatively into a 10 ml calibrated flask using the mobile phase (3.21).
Jääk kantakse liikuva faasi (3.21) abil kvantitatiivselt 10 ml mõõtekolbi.
Make up to the mark with mobile phase and mix.
Täidetakse liikuva faasiga kuni märgini ja segatakse.
An aliquot is filtered through a membrane filter (4.7).
Alikvootne osa filtreeritakse läbi membraanfiltri (4.7).
Reserve this solution for the HPLC determination (5.4).
See lahus hoitakse HPLC määramise (5.4) jaoks.
The following conditions are offered for guidance, other conditions may be used provided they yield equivalent results.
Soovitatakse juhinduda järgmistest tingimustest (muid tingimusi võib kasutada juhul, kui need tagavad samaväärsed tulemused):
Liquid chromatographic column (4.4.1)
Vedelikkromatograafia kolonn (4.4.1)
HPLC Mobile phase (3.21)
HPLC liikuv faas (3.21)
Flow rate: 1,5 to 2 ml/min.
Voolukiirus: 1,5–2 ml/min.
Detection wavelength: 243 nm
Avastamise lainepikkus: 243 nm
Injection volume: 40 to 100 μl.
Sissesüstitav ruumala: 40 kuni 100 μl.
Check the stability of the chromatographic system, injecting the calibration solution (3.6.2) containing 3,0 μg/ml several times, until constant peak heights (or areas) and retention times are achieved.
Kromatograafiaseadme tasakaalustatust kontrollitakse, süstides korduvalt kalibreerimislahust (3.6.2) kontsentratsiooniga 3,0 μg/ml, kuni saavutatakse konstantsed piigi kõrgused (pindalad) ja retentsiooniajad.
Calibration graph
Kalibreerimisgraafik
Inject each calibration solution (3.6.2) several times and measure the peak heights (areas) for each concentration.
Iga kalibreerimislahust (3.6.2) süstitakse korduvalt ja mõõdetakse igale kontsentratsioonile vastavad piigi kõrgused (pindalad).
Plot a calibration graph using the mean peak heights or areas of the calibration solutions as the ordinates and the corresponding concentrations in μg/ml as the abscissae.
Koostatakse kalibreerimisgraafik, kandes ordinaatteljele kalibreerimislahuste keskmised piigi kõrgused (pindalad) ja abstsissteljele vastavad kontsentratsioonid (μg/ml).
Sample solution
Proovilahus
Inject the sample extract (5.3.2) several times, using the same volume as taken for the calibration solutions and determine the mean peak height (area) of the halofuginone peaks.
Prooviekstrakti (5.3.2) süstitakse mitu korda samas mahus kui kalibreerimislahuste puhul ja määratakse halofuginoonipiikide keskmine kõrgus (pindala).
Determine the concentration of the sample solution in μg/ml, from the mean height (area) of the halofuginone peaks of the sample solution by reference to the calibration graph (5.4.2).
Proovilahuse halofuginoonipiikide keskmise kõrguse (pindala) alusel määratakse kalibreerimisgraafiku (5.4.2) abil proovilahuse kontsentratsioon (μg/ml).
The content of halofuginone w (mg/kg) of the sample is given by the following formula:
Halofuginoonisisaldus w (mg/kg) proovis arvutatakse järgmise valemi järgi:
c halofuginone concentration of the sample solution in μg/ml,
c proovilahuse halofuginoonikontsentratsioon (μg/ml);
m weight of the test portion in grams.
m kaalutise mass grammides.
Validation of the results
Tulemuste kehtivuse kontroll
Identity
Identsus
The identity of the analyte can be confirmed by co-chromatography, or by using a diode-array detector by which the spectra of the sample extract and the calibration solution (3.6.2) containing 6,0 μg/ml are compared.
Uuritava aine identsust saab kinnitada täiendava kromatograafiakatse abil või kasutades dioodireadetektorit, mille puhul võrreldakse prooviekstrakti ja 6,0 μg/ml sisaldusega kalibreerimislahuse (3.6.2) spektreid.
Co-chromatography
Täiendav kromatograafia
A sample extract is fortified by addition of an appropriate amount of a calibration solution (3.6.2).
Prooviekstraktile lisatakse vajalik kogus kalibreerimislahust (3.6.2).
The amount of added halofuginone must be similar to the estimated amount of halofuginone found in the sample extract.
Lisatud halofuginoonikogus peab olema ligikaudu sama suur nagu prooviekstraktist leitud halofuginoonikogus.
Only the height of the halofuginone peak shall be enhanced after taking into account both the amount added and the dilution of the extract.
Võttes arvesse nii lisatud kogust kui ka ekstrakti lahjendust, peab tõusma üksnes halofuginoonipiigi kõrgus.
The peak width, at half of its maximum height, must be within ± 10 % of the original width.
Piigi laius poolel kõrgusel ei tohi erineda rohkem kui 10 % kontsentreerimata prooviekstrakti halofuginoonipiigi laiusest.
Diode-array detection
Dioodireadetektori kasutamine
The results are evaluated according to the following criteria:
Tulemusi hinnatakse järgmiste kriteeriumide kohaselt:
the wavelength of maximum absorption of the sample and of the standard spectra, recorded at the peak apex on the chromatogram, must be the same within a margin determined by the resolving power of the detection system.
proovi ja standardi kromatogrammidel oleva piigi tipu spektri suurima neeldumise lainepikkused peavad analüüsiseadme lahutusvõime piires ühte langema.
For diode-array detection, this is typically within ± 2 nm;
Dioodireadetektori lahutusvõime on tavaliselt ± 2 nm;
between 225 and 300 nm, the sample and standard spectra recorded at the peak apex on the chromatogram, must not be different for those parts of the spectrum within the range 10 % to 100 % of relative absorbance.
lainepikkustel 225–300 nm ning suhtelise neeldumise vahemikus 10–100 % peavad proovi ja standardi piigi tipu spektrid kromatogrammil ühte langema.
This criterion is met when the same maxima are present and at no observed point the deviation between the two spectra exceeds 15 % of the absorbance of the standard analyte;
Seda nõuet peetakse täidetuks, kui nimetatud spektrites esinevad ühed ja samad maksimumid ning erinevused kahe spektri kõigis uuritud punktides ei ületa 15 % standardainele vastavatest neeldumistest;
between 225 and 300 nm, the spectra of the upslope, apex and downslope of the peak produced by the sample extract must not be different from each other for those parts of the spectrum within the range 10 % to 100 % of relative absorbance.
lainepikkustel 225–300 nm ei tohi prooviekstrakti kromatogrammi piigi ülespoole suunduvas osas, tipus ja allapoole suunduvas osas registreeritud spektrid erineda üksteisest nende spektriosade puhul, mis jäävad 10–100 % suhtelise neeldumise piirkonda.
This criterion is met when the same maxima are present and when at all observed points the deviation between the spectra does not exceed 15 % of the absorbance of the spectrum of the apex.
Seda nõuet peetakse täidetuks, kui mainitud spektrites esinevad ühed ja samad maksimumid ning erinevused kõigis uuritud punktides ei ületa 15 % piigi tipu spektri vastavatest neeldumistest.
If one of these criteria is not met the presence of the analyte has not been confirmed.
Kui mõni nendest nõuetest ei ole täidetud, ei peeta otsitava aine olemasolu tõestatuks.
The difference between results of two parallel determinations carried out on the same sample must not exceed 0,5 mg/kg for halofuginone contents up to 3 mg/kg.
Sama prooviga tehtud kahe paralleelse määramise tulemuste erinevus ei tohi kuni 3 mg/kg suuruste halofuginoonisisalduste puhul ületada 0,5 mg/kg.
For the fortified blank sample the recovery shall be at least 80 %.
Suurendatud kontsentratsiooniga fooniproovi puhul peab saagis olema vähemalt 80 %.
On receipt
Algul
Sample B (Meal)
Proov B (jahu)
Sample C (Pellets)
Proov C (graanulid)
After two months
Kahe kuu pärast
Mean [mg/kg]
Keskmine [mg/kg]
ND not detected
ND allpool avastamisläve
coefficient of variation of reproducibility (%)
reprodutseeritavuse variatsioonikordaja (%)
Rec. recovery (%)
Sg saagis (%)
DETERMINATION OF ROBENIDINE
ROBENIDIINI MÄÄRAMINE
1,3-bis [(4-chlorobenzylidene)amino]guanidine — hydrochloride
1,3-bis[(p-klorobensülideen)amino]guanidiinhüdrokloriid
This method makes it possible to determine the levels of robenidine in feed.
Selle meetodiga on võimalik määrata robenidiini kogust söödas.
The limit of quantification is 5 mg/kg.
Määramispiir on 5 mg/kg.
The sample is extracted with acidified methanol.
Proov ekstraheeritakse hapestatud metanooliga.
The extract is dried and an aliquot portion subjected to a clean-up on an aluminium oxide column.
Ekstrakt kuivatatakse ja selle alikvootne osa puhastatakse alumiiniumoksiidi kolonnis.
Robenidine is eluted from the column with methanol, concentrated, and made up to a suitable volume with mobile phase.
Robenidiin elueeritakse kolonnist metanooliga, kontsentreeritakse ja viiakse liikuva faasiga sobiva mahuni.
The content of robenidine is determined by reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) using an UV detector.
Robenidiinisisaldus määratakse pöördfaasilise kõrgefektiivse vedelikkromatograafia (HPLC) abil, kasutades UV-detektorit.
Acidified methanol.
Hapestatud metanool
Transfer 4,0 ml hydrochloric acid (ρ20 = 1,18 g/ml) into a 500 ml graduated flask, make up to the mark with methanol (3.1) and mix.
4,0 ml soolhapet (ρ20 = 1,18 g/ml) viiakse 500 ml mõõtekolbi, kolb täidetakse kuni märgini metanooliga (3.1) ja segatakse.
This solution shall be freshly prepared before use.
See lahus tuleb valmistada vahetult enne kasutamist.
Molecular sieve.
Molekulaarsõel
Type 3A, 8 to 12 mesh beads (1,6-2,5 mm beads, crystalline alumino-silicate, diameter of pores 0,3 mm).
Tüüp 3A, 8–12 mešši (1,6–2,5 mm osakesed, kristalne alumosilikaat, pooride läbimõõt 0,3 mm)
Aluminium oxide acidic activity grade I for column chromatography.
Alumiiniumoksiid, happeline aktiivsusaste 1, kolonnkromatograafiajaoks
Transfer 100 g aluminium oxide into a suitable container and add 2,0 ml of water.
100 g alumiiniumoksiidi viiakse sobivasse anumasse ja lisatakse 2,0 ml vett.
Potassium dihydrogen phosphate solution, c = 0,025 mol/l.
Kaaliumdivesinikfosfaadi lahus, c = 0,025 mol/l
Dissolve 3,40 g of potassium dihydrogen phosphate in water (HPLC grade) in a 1000 ml graduated flask, make up to the mark and mix.
1000 ml mõõtekolvis lahustatakse 3,40 g kaaliumdivesinikfosfaati vees (HPLC-puhtusastmega), kolb täidetakse märgini ja segatakse.
Di-sodium hydrogen phosphate solution, c = 0,025 mol/l.
Dinaatriumvesinikfosfaadi lahus, c = 0,025 mol/l
Dissolve 3,55 g of anhydrous (or 4,45 g of dihydrate or 8,95 g of dodecahydrate) di-sodium hydrogen phosphate in water (equivalent to HPLC grade) in a 1 litre graduated flask, make up to the mark and mix.
Üheliitrises mõõtekolvis lahustatakse 3,55 g veevaba dinaatriumvesinikfosfaati (või 4,45 g dihüdraati või 8,95 g dodekahüdraati) vees (HPLC-puhtusastmega), kolb täidetakse märgini veega ja segatakse.
HPLC mobile phase.
HPLC liikuv faas
Mix together the following reagents:
Segada järgmised reaktiivid:
650 ml acetonitrile (3.3),
650 ml atsetonitriili (3.3),
250 ml water (equivalent to HPLC-grade),
250 ml vett (HPLC-puhtusastmega),
50 ml potassium di-hydrogen phosphate solution (3.6),
50 ml kaaliumdivesinikfosfaadi lahust (3.6),
50 ml di-sodium hydrogen phosphate solution (3.7).
50 ml kaaliumdivesinikfosfaadi lahust (3.7).
Filter through a 0,22 μm filter (4.6) and degas the solution, (e.g. by ultrasonification for 10 minutes).
Filtreeritakse läbi 0,22 μm filtri (4.6) ja lahus degaseeritakse (nt töödeldes ultraheliga 10 minutit).
Standard substance.
Standardaine
Pure robenidine: 1,3-bis [(4-chlorobenzylidene)amino]guanidine — hydrochloride.
Puhas robenidiin: 1,3-bis[(p-klorobensülideen) amino]guanidiinhüdrokloriid.
Robenidine stock standard solution: 300 μg/ml
Robenidiini põhistandardlahus: 300 μg/ml
Weigh to the nearest 0,1 mg, 30 mg of robenidine standard substance (3.9).
30 mg robenidiini standardainet (3.9) kaalutakse 0,1 mg täpsusega.
Dissolve in acidified methanol (3.2) in a 100 ml graduated flask, make up to the mark with the same solvent and mix.
Lahustatakse hapestatud metanooliga 100 ml mõõtekolvis (3.2), täidetakse kolb märgini sama lahustiga ja segatakse.
Wrap the flask with aluminium foil and store in a dark place.
Kolb mähitakse alumiiniumfooliumi ja hoitakse pimedas kohas.
Robenidine intermediate standard solution: 12 μg/ml
Robenidiini vahestandardlahus: 12 μg/ml
Transfer 10,0 ml of the stock standard solution (3.9.1) into a 250 ml graduated flask, make up to the mark with the mobile phase (3.8) and mix.
Valatakse 10,0 ml põhistandardlahust (3.9.1) 250 ml mõõtekolbi, täidetakse see liikuva faasiga (3.8) kuni märgini ja segatakse.
Into a series of 50 ml calibrated flasks, transfer 5,0, 10,0, 15,0, 20,0 and 25,0 ml of the intermediate standard solution (3.9.2).
50 ml mõõtekolbidesse viiakse 5,0, 10,0, 15,0, 20,0 ja 25,0 ml vahestandardlahust (3.9.2).
Make up to the mark with mobile phase (3.8) and mix.
Täidetakse kuni märgini liikuva faasiga (3.8) ja segatakse.
These solutions correspond to 1,2, 2,4, 3,6, 4,8 and 6,0 μg/ml of robenidine respectively.
Lahuste robenidiinisisaldused on vastavalt 1,2; 2,4; 3,6; 4,8 ja 6,0 μg/ml.
Water equivalent to HPLC grade.
HPLC-puhtusastmega vesi
Glass column.
Klaaskolonn
Constructed of amber glass fitted with a stopcock and a reservoir of approximately 150 ml capacity, internal diameter 10 to 15 mm, length 250 mm.
Valmistatud tumedast klaasist, korkkraaniga, ligikaudu 150 ml reservuaariga, sisemine läbimõõt 10–15 mm, kõrgus 250 mm.
HPLC equipment with variable wavelength ultraviolet detector or diode array detector operating in the range of 250 to 400 nm.
HPLC-seadmed erinevatel lainepikkustel registreeriva ultraviolettdetektoriga või dioodireadetektoriga, mis töötab vahemikus 250–400 nm.
Liquid chromatographic column: 300 mm x 4 mm, C18 10 μm packing or equivalent.
Vedelikkromatograafia kolonn: 300 mm × 4 mm, C18, täidise terasuurus 10 μm või samaväärne
Glass fibre filter paper (Whatman GF/A or equivalent).
Klaaskiudfilterpaber (Whatman GF/A või selle analoog)
Membrane filters, 0,22 μm.
Membraanfiltrid 0,22 μm.
Membrane filters, 0,45 μm.
Membraanfiltrid, 0,45 μm
Robenidine is light-sensitive.
robenidiin on valgustundlik.
Amber glassware shall be used in all operations.
Kõikide operatsioonide puhul tuleb kasutada tumedast klaasist anumaid.
A blank feed shall be analysed to check that neither robenidine nor interfering substances are present.
Tuleb analüüsida võrdlussööta, veendumaks, et selles ei ole robenidiini ega teisi segavaid aineid.
A recovery test shall be carried out by analysing the blank feed (5.1.1) which has been fortified by addition of a quantity of robenidine, similar to that present in the sample.
Tuleb teha saagisekatse, analüüsides võrdlussööta (5.1.1), mida on rikastatud ligikaudu sama koguse robenidiiniga, nagu seda sisaldab proov.
To fortify at a level of 60 mg/kg, transfer 3,0 ml of the stock standard solution (3.9.1) to a 250 ml conical flask.
Et saada kontsentratsiooni 60 mg/kg, kantakse 3,0 ml põhistandardlahust (3.9.1) 250 ml koonilisse kolbi.
Evaporate the solution to ca. 0,5 ml in a stream of nitrogen.
Lahus aurustatakse lämmastikuvoolus kuni ligikaudu 0,5 ml-ni.
Add 15 g of the blank feed, mix and wait for 10 minutes before proceeding with the extraction step (5.2).
Lisatakse 15 g võrdlussööta, segatakse ja jäetakse enne ekstraheerima (5.2) asumist 10 minutiks seisma.
For the purpose of this method, the blank feed shall be similar in type to that of the sample and on analysis robenidine shall not be detected.
selle meetodi puhul peab võrdlussööt olema prooviga samalaadne ja analüüsimisel ei tohi selles leiduda halofuginooni.
Weigh to the nearest 0,01 g, approximately 15 g of the prepared sample.
Umbes 15 g ettevalmistatud proovi kaalutakse 0,01 g täpsusega.
Transfer to a 250 ml conical flask and add 100,0 ml of acidified methanol (3.2), stopper and shake for one hour on the shaker (4.2).
Proov pannakse 250 ml koonilisse kolbi ja lisatakse 100,0 ml hapestatud metanooli (3.2), kolb suletakse ja loksutatakse üks tund loksutil (4.2).
Filter the solution through a glass fibre filter paper (4.5) and collect the whole filtrate in a 150 ml conical flask.
Lahus filtreeritakse läbi klaaskiudfilterpaberi (4.5) ja kogu filtraat kogutakse 150 ml koonilisse kolbi.
Retain this solution for the purification step (5.3).
See lahus säilitatakse puhastamiseks (5.3).
Purification
Puhastamine
Preparation of the aluminium-oxide column
Alumiiniumoksiidi kolonni ettevalmistamine
Insert a small glass-wool plug into the lower end of a glass column (4.1) and tamp it down using a glass rod.
Klaaskolonni (4.1) põhja asetatakse väike klaasvatist tropp ja surutakse see klaaspulka kasutades kokku.
Weigh out 11,0 g of the prepared aluminium oxide (3.5) and transfer to the column.
Kaalutakse 11,0 g ettevalmistatud alumiiniumoksiidi (3.5) ja pannakse kolonni.
Care shall be taken to minimise the exposure to the atmosphere during this stage.
Tuleb jälgida, et kokkupuutumine õhuga oleks selles etapis minimaalne.
Gently tap the loaded column at its lower end to settle the aluminium oxide.
Koputatakse kergelt vastu kolonni alumist otsa, et alumiiniumoksiid paigutuks ühtlaselt.
Sample purification
Proovi puhastamine
Transfer onto the column by pipette 5,0 ml of the sample extract prepared in (5.2) Rest the pipette tip close to the column wall and allow the solution to be absorbed onto the aluminium oxide.
Kolonni pipetitakse 5,0 ml vastavalt punktile 5.2 ettevalmistatud prooviekstrakti. Pipeti ots asetatakse tihedalt kolonni seina vastu ja lastakse lahusel absorbeeruda alumiiniumoksiidi.
Elute the robenidine from the column using 100 ml methanol (3.1), at a flow rate of 2 to 3 ml/minute and collect the eluate in a 250 ml round bottomed flask.
Robenidiin elueeritakse kolonnist, kasutades 100 ml metanooli (3.1) voolukiirusel 2–3 ml/min, ja eluaat kogutakse 250 ml ümarkolbi.
Evaporate the methanol solution to dryness under reduced pressure at 40 oC by means of a rotary film evaporator (4.3).
Metanoolilahus aurustatakse filter-pöördaurusti (4.3) abil kuivaks vähendatud rõhul, temperatuuril 40 oC.
Re-dissolve the residue in 3 to 4 ml of mobile phase (3.8) and transfer quantitatively to a 10 ml graduated flask.
Jääk lahustatakse uuesti 3–4 ml liikuvas faasis (3.8) ja viiakse kvantitatiivselt 10 ml mõõtekolbi.
Rinse the flask with several 1 to 2 ml portions of mobile phase and transfer these rinsings to the graduated flask.
Kolbi loputatakse mitme 1–2 ml koguse liikuva faasiga ja pannakse need loputusvedelikud mõõtekolbi.
Make up to the mark with the same solvent and mix.
Kolb täidetakse sama lahustiga märgini ja segatakse.
An aliquot is filtered through a 0,45 μm membrane filter (4.7).
Alikvootne osa filtreeritakse läbi 0,45 μm membraanfiltri (4.7).
Reserve this solution for HPLC determination (5.4).
Seda lahust hoitakse HPLC määramiseks (5.4).
The following conditions are offered for guidance, other conditions may be used provided they yield equivalent results:
Soovitatakse juhinduda järgmistest tingimustest (muid tingimusi võib kasutada juhul, kui need annavad samaväärsed tulemused):
Liquid chromatographic column (4.4.1),
Vedelikkromatograafia kolonn (4.4.1)
HPLC mobile phase (3.8),
HPLC liikuv faas (3.8)
Flow rate: 1,5 to 2 ml/minute,
Voolukiirus: 1,5–2 ml/min
Detector wavelength: 317 nm,
Detektori lainepikkus: 317 nm,
Injection volume: 20 to 50 μl.
sissesüstitav ruumala: 20–50 μl.
Check the stability of the chromatographic system, injecting the calibration solution (3.9.3) containing 3,6 μg/ml several times, until constant peak heights and retention times are achieved.
Kromatograafilise süsteemi stabiilsust kontrollitakse, süstides 3,6 μg/ml sisaldavat kalibreerimislahust (3.9.3) mitu korda, kuni saavutatakse konstantsed piigi kõrgused ja retentsiooniajad.
Inject each calibration solution (3.9.3) several times and measure the peak heights (areas) for each concentration.
Iga kalibreerimislahust (3.9.3) süstitakse korduvalt ja mõõdetakse igale kontsentratsioonile vastavad piigi kõrgused (pindalad).
Plot a calibration curve using the mean peak heights or areas of the calibration solutions as the ordinates and corresponding concentrations in μg per ml as abscissae.
Koostatakse kalibreerimiskõver, kasutades kalibreerimislahuste keskmisi piigi kõrgusi või pindalasid ordinaatidena ja vastavaid kontsentratsioone μg/ml abstsissidena.
Inject the sample extract (5.3.2) several times, using the same volume as taken for the calibration solutions and determine the mean peak height (area) of the robenidine peaks.
Prooviekstrakti (5.3.2) süstitakse mitu korda, kasutades sama mahtu nagu kalibreerimislahuste puhul, ja määratakse robenidiini piikide keskmine kõrgus (pindala).
From the mean height (area) of the robenidine peaks of the sample solution determine the concentration of the sample solution in μg/ml by reference to the calibration graph (5.4.2).
Proovilahuse robenidiini piikide keskmise kõrguse (pindala) järgi määratakse proovilahuse kontsentratsioon μg/ml, kasutades kalibreerimisgraafikut (5.4.2).
The content of robenidine w (mg/kg) in the sample is given by the following formula:
Robenidiini sisaldus w (mg/kg) proovis arvutatakse järgmise valemi järgi: