natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Exponentially growing test organisms are exposed to the test substance in batch cultures over a period of normally 72 hours.
Portskultuuris lastakse eksponentsiaalse kasvu faasis olevatel katseorganismidel uuritava ainega kokku puutuda tavaliselt 72 tunni jooksul.
In spite of the relatively brief test duration, effects over several generations can be assessed.
Vaatamata suhteliselt lühikesele katseajale võimaldab see hinnata, millist mõju avaldab uuritava ainega kokkupuutumine mitme põlvkonna vältel.
The system response is the reduction of growth in a series of algal cultures (test units) exposed to various concentrations of a test substance.
Katsesüsteemi koste on vetikakultuuri seeriate (katseüksused) kasvu pidurdumine kokkupuutumisel uuritava aine mitmesuguste kontsentratsioonidega.
The response is evaluated as a function of the exposure concentration in comparison with the average growth of replicate, unexposed control cultures.
Katsesüsteemi koste hindamiseks uuritakse kasvu sõltuvust aine kontsentratsioonist ja võrreldakse seda keskmise kasvuga paralleelsetes kontrollkultuurides, kuhu uuritavat ainet ei ole lisatud.
The test endpoint is inhibition of growth, expressed as the logarithmic increase in biomass (average specific growth rate) during the exposure period.
Katsetulem on kasvu pidurdumine, kusjuures kasvu väljendatakse biomassi logaritmi suurenemisena kokkupuuteaja jooksul (keskmine kasvu erikiirus).
From the average specific growth rates recorded in a series of test solutions, the concentration bringing about a specified x % inhibition of growth rate (e.g. 50 %) is determined and expressed as the ErCx (e.g. ErC50).
Katselahuste seerias määratud keskmistest kasvu erikiirustest leitakse kontsentratsioon, mis vähendab kasvukiirust teatava protsendimäära x võrra (näiteks 50 %); selle kontsentratsiooni tähis on ErCx (nt ErC50).
For the application of this method within the EU regulatory framework, calculation of results should be based on an average specific growth rate for the reasons described in section 2.2 below.
Kui käesolevat meetodit rakendatakse ELi õigusraamistikus, peaksid tulemuste arvutused punktis 2.2 kirjeldatud põhjusi arvestades põhinema kasvu keskmisel erikiirusel.
From the yield recorded in a series of test solutions, the concentration bringing about a specified x % inhibition of yield (e.g. 50 %) is calculated and expressed as the EyCx (e.g. EyC50).
Lähtudes katselahuse seeriate puhul registreeritud saagistest, arvutatakse kontsentratsioon, mis põhjustab saagise vähenemise teatava x % (nt 50 %) võrra; selle kontsentratsiooni tähis on EyCx (nt EyC50).
In addition, the lowest observed effect concentration (LOEC) and the no observed effect concentration (NOEC) may be statistically determined.
Lisaks sellele võib statistiliselt määrata madalaima avastatava mõjuga kontsentratsiooni ja ka avastatava mõjuta kontsentratsiooni.
INFORMATION ON THE TEST SUBSTANCE
ANDMED UURITAVA AINE KOHTA
Information on the test substance, which may be useful in establishing the test conditions, includes the structural formula, purity, stability in light, stability under the conditions of the test, light absorption properties, pKa, and results of studies of transformation including biodegradability in water.
Katsetingimuste kindlaksmääramiseks võib uuritava aine kohta olla vaja teada järgmisi andmeid: struktuurivalem, puhtusaste, püsivus valguse käes, püsivus katsetingimustes, valguse neeldumisega seotud omadused, pKa ja andmed aine muundumiste kohta, sealhulgas biolagunduvus vees.
The water solubility, octanol water partition coefficient (Pow) and the vapour pressure of the test substance should be known, and a validated method for the quantification of the substance in the test solutions with reported recovery efficiency and limit of detection should be available.
On vaja teada uuritava aine lahustuvust vees, jaotuskoefitsienti oktanooli-vee süsteemis (Pow) ja aururõhku; katselahuses oleva aine kontsentratsiooni mõõtmiseks peaks olema valideeritud meetod, mille kohta oleksid teada tulemuslikkus ja määramispiir.
REFERENCE SUBSTANCE
STANDARDAINE
Reference substance(s), such as 3,5-dichlorophenol used in the international ring test (4), may be tested as a means of checking the test procedure.
Katse teostuse kontrollimiseks võib kasutada rahvusvahelistes võrdluskatsetes (4) kasutatavaid standardaineid, näiteks 3,5-diklorofenooli.
Potassium dichromate can also be used as a reference substance for green algae.
Rohevetikate puhul võib standardainena kasutada ka kaaliumdikromaati.
It is desirable to test a reference substance at least twice a year.
Kontrolli standardainega soovitatakse teha vähemalt kaks korda aastas.
VALIDITY OF THE TEST
KATSE VASTAVUS NÕUETELE
For the test to be valid, the following performance criteria should be met:
Katse on läbi viidud nõuetekohaselt, kui on täidetud järgmised kriteeriumid.
The biomass in the control cultures should have increased exponentially by a factor of at least 16 within the 72-hour test period.
Kontrollkultuuri biomass peab 72-tunnise katseaja jooksul olema eksponentsiaalselt suurenenud vähemalt 16 korda.
This corresponds to a specific growth rate of 0,92 day–1.
See vastab kasvu erikiirusele 0,92 ööpäev–1.
For the most frequently used species, the growth rate is usually substantially higher (see Appendix 1).
Kõige sagedamini kasutatavate liikide puhul on kasvukiirus tavaliselt palju suurem (vt 1. liide).
This criterion may not be met when species that grow slower than those listed in Appendix 1 are used.
See kriteerium ei pea olema täidetud, kui kasutatakse 1. liites loetletud liikidest aeglasemalt kasvavaid liike.
In this case, the test period should be extended to obtain at least a 16-fold growth in control cultures, while the growth has to be exponential throughout the test period.
Sellisel juhul tuleb katseaega pikendada, nii et kontrollkultuuri biomass kasvaks vähemalt 16-kordseks, kusjuures kasv peab kogu katse ajal olema eksponentsiaalne.
The test period may be shortened to at least 48 h to maintain unlimited exponential growth during the test, as long as the minimum multiplication factor of 16 is reached.
Kui piiramatu eksponentsiaalse kasvu tingimustes saavutatakse biomassi nõutav 16-kordne kasv lühema ajaga, võib katseaega lühendada 48 tunnini.
The mean coefficient of variation for section-by-section specific growth rates (days 0-1, 1-2 and 2-3, for 72-hour tests) in the control cultures (see section 1.2 under ‘coefficient of variation’) must not exceed 35 %.
Lõikude kaupa (72-tunnise katse puhul katsepäevad 0–1, 1–2 ja 2–3) leitud kontrollkultuuride kasvu erikiiruste keskmine variatsioonikordaja (vt punkt 1.2, variatsioonikordaja) ei tohi ületada 35 %.
See the second paragraph in section 2.2.1 for the calculation of section-by-section specific growth rate.
Kontrollkultuuride kasvu erikiiruste lõikude kaupa arvutamise kohta vt punkt 2.2.1, teine lõik.
This criterion applies to the mean value of coefficients of variation calculated for replicate control cultures.
Seda kriteeriumi rakendatakse paralleelsete kontrollkultuuride puhul arvutatud variatsioonikordaja keskmise väärtuse suhtes.
The coefficient of variation of average specific growth rates during the whole test period in replicate control cultures must not exceed 7 % in tests with Pseudokirchneriella subcapitata and Desmodesmussubspicatus.
Katsetes Pseudokirchneriella subcapitata ja Desmodesmus subspicatus’ega ei tohi paralleelsete kontrollkultuuride keskmiste kasvu erikiiruste variatsioonikordaja kogu katseaja jooksul ületada 7 %.
For other less frequently tested species, the value should not exceed 10 %.
Harvemini kasutatavate liikide korral ei tohi see väärtus ületada 10 %.
Test vessels and other apparatus, which will come into contact with the test solutions should be made entirely of glass or other chemically inert material.
Katselahusega kokku puutuvad katsenõud ja muud seadmed peavad olema tervenisti klaasist või muust keemiliselt inertsest materjalist.
The items should be thoroughly washed to ensure that no organic or inorganic contaminants may interfere with the algal growth or composition of the test solutions.
Seadmed peavad olema hoolikalt pestud, et orgaanilised või anorgaanilised lisandid ei mõjutaks vetikate kasvu või katselahuse koostist.
The test vessels will normally be glass flasks of dimensions that allow a sufficient volume of culture for measurements during the test and a sufficient mass transfer of CO2 from the atmosphere (see the second paragraph in section 1.8.9).
Katse viiakse tavaliselt läbi klaaskolvis, mis on piisavalt suur, et katse ajal saaks mõõtmisteks võtta küllaldases mahus kultuuri, ja oleks tagatud piisav CO2 massiülekanne atmosfäärist (vt punkt 1.8.9, teine lõik).
Note that the liquid volume must be sufficient for analytical determinations (see the fifth paragraph in section 1.8.11).
Tuleb silmas pidada, et vedeliku maht oleks küllaldane analüüside tegemiseks (vt punkt 1.8.11, viies lõik).
In addition, some or all of the following equipment will be required:
Lisaks sellele võib vaja minna järgmisi seadmeid.
Culturing apparatus: a cabinet or chamber is recommended, in which the chosen incubation temperature can be maintained at ±2 °C.
Kultiveerimisseade: soovitatav on kasutada kappi või kambrit, milles inkubatsioonitemperatuuri hoitakse täpsusega ±2 °C.
Light measurement instruments: it is important to note that the method of measurement of light intensity, and in particular the type of receptor (collector), will affect the measured value.
Fotomeetrid: on oluline silmas pidada, et valgustatuse mõõtmise meetod ja eriti vastuvõtja (kollektori) tüüp mõjutavad mõõdetavat väärtust.
Measurements should preferably be made using a spherical (4 π) receptor (which responds to direct and reflected light from all angles above and below the plane of measurement), or a 2 π receptor (which responds to light from all angles above the measurement plane).
Mõõtmiseks kasutatakse eelistatavalt sfäärilist (4π) vastuvõtjat (reageerib igast suunast, nii ülalt- kui ka altpoolt mõõtetasapinda saabuvale otsesele ja peegeldunud valgusele) või poolsfäärilist (2π) vastuvõtjat (reageerib igast suunast ülaltpoolt mõõtetasapinda saabuvale valgusele).
Apparatus to determine algal biomass.
Seade vetikate biomassi määramiseks.
Cell count, which is the most frequently used surrogate parameter for algal biomass, may be made using an electronic particle counter, a microscope with counting chamber, or a flow cytometer.
Rakkude arvu, mis on kõige sagedamini kasutatav vetikate biomassi asendusparameeter, võib määrata elektroonilise osakesteloenduri, loenduskambriga varustatud mikroskoobi või läbivoolutsütomeetri abil.
Other biomass surrogates can be measured using a flow cytometer, fluorimeter, spectrophotometer or colorimeter.
Muid biomassi asendusparameetreid võib mõõta läbivoolutsütomeetri, fluorimeetri, spektrofotomeetri või kolorimeetri abil.
A conversion factor relating cell count to dry weight is useful to calculate.
On kasulik arvutada ümberarvutustegur üleminekuks rakkude arvult kuivmassile.
In order to provide useful measurements at low biomass concentrations when using a spectrophotometer, it may be necessary to use cuvettes with a light path of at least 4 cm.
Kui madalatel biomassi kontsentratsioonidel kasutatakse spektrofotomeetrit, võib kasutuskõlblike mõõtmistulemuste saamiseks olla vaja küvette, mille optilise tee pikkus on vähemalt 4 cm.
Several species of non-attached microalgae and cyanobacteria may be used.
Võib kasutada mitmeid vabalt ujuvate mikrovetikate ja tsüanobakterite liike.
The strains listed in Appendix 1 have been shown to be suitable using the test procedure specified in this Testing Method.
On näidatud, et käesolevas metoodikas esitatud määramismeetodi korral sobivad kasutamiseks 1. liites loetletud tüved.
If other species are used, the strain and/or origin should be reported.
Kui kasutatakse muid liike, tuleb märkida kasutatud tüvi ja/või selle päritolu.
It has to be confirmed that exponential growth of the selected test alga can be maintained throughout the test period under the prevailing conditions.
Tuleb tõendada, et valitud katsevetikate kasv on kasutatavates tingimustes kogu katseaja kestel eksponentsiaalne.
Growth medium
Sööde
Two alternative growth media, the OECD and the AAP medium, are recommended.
Soovitatakse kasutada kas OECD või AAP söödet.
The compositions of these media are shown in Appendix 2.
Nende söötmete koostis on esitatud 2. liites.
Note that the initial pH value and the buffering capacity (regulating pH increase) of the two media are different.
Tuleb silmas pidada, et nende söötmete pH algväärtused ja puhvermahtuvused (viimane kompenseerib pH tõusu) on erinevad.
Therefore the results of the tests may be different depending on the medium used, particularly when testing ionising substances.
Seetõttu võivad katse tulemused sõltuda kasutatud söötmest, eriti kui uuritakse ioniseeruva aine mõju.
Modification of the growth media may be necessary for certain purposes, e.g. when testing metals and chelating agents or testing at different pH values.
Teatavatel juhtudel, näiteks metallide ja kelaaditekitajate uurimise korral või katsetel erineva pH väärtuse juures, võib olla vaja söödet muuta.
Use of a modified medium must be described in detail and justified (3)(4).
Muudetud söötme kasutamist tuleb üksikasjalikult kirjeldada ja põhjendada (3, 4).
Initial biomass concentration
Biomassi algkontsentratsioon
The initial biomass in the test cultures must be the same in all test cultures and sufficiently low to allow exponential growth throughout the incubation period without risk of nutrient depletion.
Biomassi algkontsentratsioon peab kõigis uuritava ainega kultuurides olema sama ja piisavalt madal, et kasv püsiks kogu inkubatsiooniaja kestel eksponentsiaalne ja ei tekiks toitainete ammendumise ohtu.
The initial biomass should not exceed 0,5 mg/l as dry weight.
Biomassi kuivaine algkontsentratsioon ei tohi olla kõrgem kui 0,5 mg/l.
The following initial cell concentrations are recommended:
Soovitatakse kasutada järgmisi rakkude algkontsentratsioone:
cells/ml
rakku/ml
Concentrations of test substance
Uuritava aine kontsentratsioon
The concentration range in which effects are likely to occur may be determined on the basis of results from range-finding tests.
Kontsentratsioonivahemiku, milles mõju tõenäoliselt avaldub, võib määrata mõjuvahemiku hindamise katsete tulemuste alusel.
For the final definitive test, at least five concentrations arranged in a geometric series with a factor not exceeding 3,2 should be selected.
Lõpliku katse tegemisel kasutatakse vähemalt viit geomeetrilise jadana järjestatud kontsentratsiooni, kus jadategur ei ole suurem kui 3,2.
For test substances showing a flat concentration response curve, a higher factor may be justified.
Laugema kontsentratsiooni-mõju kõvera korral võib olla õigustatud suurema jadateguri kasutamine.
The concentration series should preferably cover the range causing 5-75 % inhibition of algal growth rate.
Eelistatavalt peaks kontsentratsioonide jada hõlmama vahemiku, milles vetikate kasvukiirus pidurdub 5–75 % võrra.
Replicates and controls
Paralleel- ja kontrollkultuurid
The test design should include three replicates at each test concentration.
Katseplaanis tuleb ette näha kolm paralleelkultuuri iga uuritava kontsentratsiooni kohta.
If determination of the NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Kui avastatava mõjuta kontsentratsiooni määramist ei nõuta, võib katseplaani muuta selliselt, et suurendatakse uuritavate kontsentratsioonide arvu ja vähendatakse paralleelkultuuride arvu ühe kontsentratsiooni kohta.
The number of control replicates must be at least three, and ideally should be twice the number of replicates used for each test concentration.
Paralleelseid kontrollkultuure peab olema vähemalt kolm ja parimal juhul võiks neid olla kaks korda rohkem kui iga uuritava kontsentratsiooni puhul kasutatavaid paralleelkultuure.
A separate set of test solutions may be prepared for analytical determinations of test substance concentrations (see the fourth and sixth paragraphs in section 1.8.11).
Uuritava aine kontsentratsioonide määramiseks võib valmistada eraldi katselahuste seeria (vt punkt 1.8.11, neljas ja kuues lõik).
When a solvent is used to solubilise the test substance, additional controls containing the solvent at the same concentration as used in the test cultures must be included in the test design.
Kui uuritava aine lahustamiseks kasutatakse lahustit, tuleb katseplaanis ette näha täiendavad kontrollkultuurid, millele on lisatud lahustit samas kontsentratsioonis kui uuritava ainega kultuuridele.
Preparation of inoculum culture
Inokulum-kultuuri valmistamine
In order to adapt the test alga to the test conditions and ensure that the algae are in the exponential growth phase when used to inoculate the test solutions, an inoculum culture in the test medium is prepared 2-4 days before start of the test.
Harjutamaks katsevetikaid katsetingimustega ja tagamaks, et katselahuse inokuleerimisel on vetikad eksponentsiaalse kasvu faasis, valmistatakse katsekeskkonnas 2–4 päeva enne katse algust inokulum-kultuur.
The algal biomass should be adjusted in order to allow exponential growth to prevail in the inoculum culture until the test starts.
Vetikate biomass reguleeritakse nii, et inokulum-kultuuris oleks enne katse algust ülekaalus eksponentsiaalne kasv.
The inoculum culture shall be incubated under the same conditions as the test cultures.
Inokulum-kultuuri inkubeeritakse samades tingimustes kui uuritava ainega kultuure.
Measure the increase in biomass in the inoculum culture to ensure that growth is within the normal range for the test strain under the culturing conditions.
Veendumaks, et katsetüvi kasvab kultiveerimistingimustes normaalselt, mõõdetakse inokulum-kultuuris biomassi juurdekasvu.
An example of the procedure for algal culturing is described in Appendix 3.
liites on esitatud ühe vetikate kultiveerimise katse näide.
To avoid synchronous cell divisions during the test, a second propagation step of the inoculum culture may be required.
Rakkude sünkroonse pooldumise vältimiseks katse ajal võib olla vajalik inokulum-kultuuri teistkordne ülekandmise etapp.
Preparation of test solutions
Katselahuste valmistamine
All test solutions must contain the same concentrations of growth medium and initial biomass of test algae.
Kõigis katselahustes peab söötme kontsentratsioon ja katsevetikate biomassi algkontsentratsioon olema ühesugune.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by mixing a stock solution of the test substance with growth medium and inoculum culture.
Valitud kontsentratsiooniga katselahuste valmistamiseks segatakse tavaliselt uuritava aine põhilahus söötme ja inokulum-kultuuriga.
Stock solutions are normally prepared by dissolving the substance in test medium.
Põhilahuse saamiseks lahustatakse uuritav aine tavaliselt söötmes.
Solvents, e.g. acetone, t-butyl alcohol and dimethyl formamide, may be used as carriers to add substances of low water solubility to the test medium (2)(3).
Vees raskesti lahustuvate ainete lisamiseks söötmele võib kasutada lahusteid, näiteks atsetooni, t-butüülalkoholi või dimetüülformamiidi (2, 3).
The solvent concentration should not exceed 100 µl/l, and the same concentration of solvent should be added to all cultures (including controls) in the test series.
Lahusti kontsentratsioon ei tohi olla kõrgem kui 100 µl/l ja peab olema sama kõigis katseseeria kultuurides, kaasa arvatud kontrollkultuurid.
Incubation
Inkubeerimine
Cap the test vessels with air-permeable stoppers.
Katsenõud suletakse õhku läbi laskvate korkidega.
The vessels are shaken and placed in the culturing apparatus.
Nõusid loksutatakse ja need asetatakse kultiveerimisseadmesse.
During the test it is necessary to keep the algae in suspension and to facilitate transfer of CO2.
Katse ajal on vetikaid vaja hoida suspensioonis ja soodustada CO2 transporti.
To this end, constant shaking or stirring should be used.
Selleks loksutatakse või segatakse kultuure pidevalt.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 24 °C, controlled at ±2 °C.
Kultuure termostateeritakse temperatuurivahemikus 21–24 °C täpsusega ±2 °C.
For species other than those listed in Appendix 1, e.g. tropical species, higher temperatures may be appropriate, providing that the validity criteria can be fulfilled.
Kui kasutatakse 1. liites loetlemata liike (nt troopilised liigid), võib olla vaja valida kõrgem temperatuur, kuid nõuetele vastavuse kriteeriumid peavad olema täidetud.
It is recommended to place the flasks randomly and to reposition them daily in the incubator.
On soovitav paigutada kolvid inkubaatoris juhuslikult ja muuta iga päev nende paigutust.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
Katse ajal ei tohi kontrollkeskkonna pH tõusta enam kui 1,5 ühiku võrra.
For metals and compounds that partly ionise at a pH around the test pH, it may be necessary to limit the pH drift to obtain reproducible and well defined results.
Kui uuritakse metalle või ühendeid, mis katsekeskkonna pH väärtustel on osaliselt ioniseeritud, võib reprodutseeritavate ja selgete tulemuste saamiseks olla vaja piirata pH muutumist.
A drift of < 0,5 pH units is technically feasible and can be achieved by ensuring an adequate CO2 mass transfer rate from the surrounding air to the test solution, e.g. by increasing the shaking rate.
Tehniliselt on võimalik saavutada, et pH muutuks vähem kui 0,5 ühikut, kui tagada, näiteks loksutamiskiiruse suurendamisega, piisavalt kiire CO2 ülekanne atmosfääriõhust katselahusesse.
Another possibility is to reduce the demand for CO2 by reducing the initial biomass or the test duration.
Teine võimalus on vähendada CO2 tarvet, vähendades algset biomassi või katse kestust.
The surface where the cultures are incubated should receive continuous, uniform fluorescent illumination e.g. of ‘cool-white’ or ‘daylight’ type.
Pinnale, millel inkubeeritakse kultuure, suunatakse pidev ühtlane külmvalge või päevavalgusspektriga fluorestsentsvalgus.
Strains of algae and cyanobacteria vary in their light requirements.
Vetikate ja tsüanobakterite tüvede valgusetarve on erinev.
The light intensity should be selected to suit the test organism used.
Valguse intensiivsus valitakse vastavalt kasutatava katseorganismi vajadusele.
For the recommended species of green algae, the light intensity at the level of the test solutions shall be selected from the range of 60-120 µE·m–2·s–1 when measured in the photosynthetically effective wavelength range of 400-700 nm using an appropriate receptor.
Soovitatud rohevetikaliikide puhul valitakse valguse intensiivsuseks katselahuste tasapinnal 60–120 µEm–2s–1, mõõdetuna sobiva anduri abil fotosünteesiks sobivas lainepikkuse vahemikus 400–700 nm.
Some species, in particular Anabaena flos-aquae, grow well at lower light intensities and may be damaged at high intensities.
Mõni liik, eriti Anabaena flos-aquae, kasvab hästi nõrgema valguse juures ja liigne valgus võib teda kahjustada.
For such species an average light intensity in the range 40-60 µE·m–2·s–1 should be selected.
Sellise liigi puhul valitakse keskmiseks valguse intensiivsuseks 40–60 µEm–2s–1.
(For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 4440-8880 lux for cool white light corresponds approximately to the recommended light intensity 60-120 µE·m–2·s–1).
(Luksides kalibreeritud fotomeetri puhul vastab külmvalge valguse soovitatud valgustatuse vahemikule 60–120 µEm–2s–1 vahemik 4440 – 8880 luksi).
The light intensity shall not vary more than ±15 % from the average light intensity over the incubation area.
Valguse intensiivsus inkubatsiooniala eri osades ei tohi keskmisest väärtusest erineda üle 15 %.
The test duration is normally 72 hours.
Katse kestab harilikult 72 tundi.
However, shorter or longer test durations may be used, provided that all validity criteria in section 1.7 can be met.
Võib siiski kasutada ka lühema või pikema kestusega katseid tingimusel, et kõiki nõuetele vastavuse kriteeriume (vt punkt 1.7) on võimalik täita.
Measurements and analytical determinations
Mõõtmised ja analüütilised määramised