natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Proceed to the chromatography step (5.4).
Seejärel alustatakse kromotograafiat (5.4).
If the sample solutions are not being examined the same day they must be stored below 5 oC.
Kui proovilahuseid ei analüüsita samal päeval, tuleb neid säilitada temperatuuril alla 5 oC.
Before chromatography bring the extract (5.2) or hydrolysate (5.3.4) to room temperature.
Enne kromotograafiat viiakse ekstrakt (5.2) või hüdrolüsaat (5.3.4) toatemperatuurile.
Shake the mixture and filter a suitable amount through a 0,22 μm membrane filter (4.5).
Segu loksutatakse ja filtreeritakse sobiv kogus läbi 0,22 μm membraanfiltri (4.5).
The resulting clear solution is subjected to ion exchange chromatography, using an amino acid analyser (4.9).
Saadud selge lahusega tehakse ioonvahetuskromatograafia, kasutades aminohappe analüsaatorit (4.9).
The injection may be performed manually or automatically.
Sissesüstimist võib teostada käsitsi või automaatselt.
It is important that the same quantity of solution ±0,5 % is added to the column for the analysis of standards and samples except when an internal standard is used, and that the sodium:amino acid ratios in the standard and sample solutions are as similar as is practicable.
On oluline, et standardite ja proovide analüüsiks lisataks kolonni sama kogus lahust ±0,5 %, välja arvatud sisestandardi kasutamisel, ning et naatriumi ja aminohapete vahekord standard- ja proovilahustes oleks võimalikult sarnane.
In general the frequency of calibration runs depends on the stability of the ninhydrin reagent and the analytical system.
Üldiselt sõltub kalibreerimiskatsete sagedus ninhüdriini reaktiivi stabiilsusest ja analüütilisest süsteemist.
The standard or sample is diluted with citrate buffer (3.24) to give a peak area of the standard of 30 %-200 % of the sample amino acid peak area.
Standard või proov lahjendatakse tsitraapuhvriga (3.24), et saavutada standardi piigipindalaks 30–200 % proovi aminohappe piigipindalast.
The chromatography of amino acids will vary slightly according to the type of analyser employed and resin used.
Aminohapete kromatograafia varieerub kergelt vastavalt sellele, millist tüüpi analüsaatorit ja millist vaiku kasutatakse.
The chosen system must be capable of separating the amino acids from each other and from the ninhydrin-positive materials.
Valitud süsteem peab suutma eraldada aminohapped üksteisest ja ninhüdriinpositiivsetest materjalidest.
In the range of operation the chromatographic system must give a linear response to changes in the amounts of amino acids added to the column.
Kasutatavate kontsentratsioonide vahemikus peavad kromatograafilise süsteemiga saadavad tulemused sõltuma lineaarselt kolonni lisatud aminohapete muutustest.
During the chromatography step the valley:peak height ratios mentioned below apply, when an equimolar solution (of the amino acids being determined) is analysed.
Kromatograafia etapil kehtivad (määratavate aminohapete) ekvimolaarlahuse analüüsimisel allpool esitatud miinimumtaseme ja piigi kõrguse vahekorrad.
This equimolar solution must contain at least 30 % of the maximum load of each amino acid which can be accurately measured with the amino acid analyser system (4.9).
Ekvimolaarlahus peab sisaldama vähemalt 30 % iga aminohappe maksimumkogusest, mida on võimalik täpselt mõõta aminohappe analüüsisüsteemi (4.9) abil.
For separation of threonine-serine the valley:peak height ratio of the lower of the two overlapping amino acids on the chromatogram must not exceed 2:10.
Treoniini-seriini eraldamiseks ei tohi kahest kattuvast aminohappest madalama aminohappe miinimumtaseme ja piigi kõrguse vahekord kromatogrammil ületada suhet 2:10.
(if only cyst(e)ine, methionine, threonine and lysine are determined, insufficient separation from adjoining peaks will adversely influence the determination).
(Kui määratakse vaid tsüst(e)iini, metioniini, treoniini ja lüsiini, kahjustab nende määramist ebapiisav eraldamine külgnevatest piikidest.).
For all other amino acids the separation must be better than 1:10.
Kõigi teiste aminohapete puhul peab eraldatus olema parem kui suhe 1:10.
The system must ensure that lysine is separated from ‘lysine artifacts’ and ornithine.
Süsteem peab tagama lüsiini eraldamise „lüsiini artefaktidest” ja ornitiinist.
The area of the sample and standard peaks is measured for each individual amino acid and the amount (X), in g amino acid per kg sample, is calculated as follows:
Proovi ja standardi piikide pindala mõõdetakse iga üksiku aminohappe kohta ning arvutatakse kogus (X) ühes grammis aminohappes proovi kilo kohta.
If an internal standard is used multiply by: D
Kui kasutatakse sisestandardit, korrutatakse tulemus liikmega D
A peak area, hydrolysate or extract
A piigipindala, hüdrolüsaat või ekstrakt
B peak area, calibration standard solution
B piigipindala, kalibreerimisstandardlahus
C peak area, internal standard in hydrolysate or extract
C piigipindala, sisestandard hüdrolüsaadis või ekstraktis
D peak area, internal standard, calibration standard solution
D piigipindala, sisestandard, kalibreerimisstandardlahus
M molar weight of the amino acid being determined
M määratava aminohappe molaarmass
c concentration of standard in μmol/ml
c standardi kontsentratsioon μmol/ml
m sample weight (g) (corrected to original weight if dried or defatted)
m proovi mass grammides (korrigeeritud esialgsele massile, kui proovi on kuivatatud ja/või rasvatustatud)
V ml total hydrolysate (5.3.4) or ml calculated total dilution volume of extract (6.1)
V hüdrolüsaat (5.3.4) kokku milliliitrites või ekstrakti (6.1) lahjenduse koguruumala milliliitrites
Cystine and cysteine are both determined as cysteic acid in hydrolysates of oxidised sample, but calculated as cystine (C6H12N2O4S2, M 240,30 g/mol) by using M 120,15 g/mol (= 0,5 x 240,30 g/mol).
Tsüstiin ja tsüsteiin määratakse mõlemad tsüsteiinhappena oksüdeeritud proovide hüdrolüsaatides, kuid arvutatakse tsüstiiniks (C6H12N2O4S2, M 240,30 g/mol), kasutades M väärtust 120,15 g/mol (= 0,5 × 240,30 g/mol).
Methionine is determined as methionine sulphone in hydrolysates of oxidised sample, but calculated as methionine by using M of methionine: 149,21 g/mol.
Metioniin määratakse metioniinsulfoonina oksüdeeritud proovi hüdrolüsaatides, kuid arvutatakse metioniinina, kasutades metioniini M väärtust: 149,21 g/mol.
Added free methionine is determined after extraction as methionine, for the calculation the same M is used.
Lisatud vaba metioniin määratakse pärast ekstraheerimist metioniinina, arvutamisel kasutatakse sama M väärtust.
The total dilution volume of extracts (F) for determination of free amino acids (5.2) is calculated as follows:
Ekstraktide lahjenduse koguruumala (F) vabade aminohapete (5.2) määramiseks arvutatakse järgmiselt:
V Volume of final extract
V lõppekstrakti ruumala
Evaluation of the method
Meetodi hindamine
The method has been tested in an intercomparison made at international level in 1990 using four different feed (mixed pig feed, broiler compound, protein concentrate, premixture).
Meetodit on katsetatud rahvusvahelises võrdluskatses 1990. aastal, kasutades nelja erinevat sööta (sigade segasööt, broilerite segasööt, valgukontsentraat, eelsegu).
The results, after elimination of outliers, of mean and standard deviation are given in the tables in this point:
Tulemuste keskväärtused ja standardhälbed pärast võõrväärtuste elimineerimist on esitatud käesoleva punkti tabelis.
Means in g/kg
Keskväärtused g/kg
n Number of participating laboratories.
n osalenud laborite arv
Reference material
Etalonaine
Amino Acid
Aminohape
Cyst(e)ine
Tsüst(e)iin
Mixed Pig Feed
Sigade segasööt
Broiler Compound
Broilerite segasööt
Protein Concentrate
Valgukontsentraat
Premixture
Eelsegu
The repeatability expressed as ‘within laboratory standard deviation’ of the abovementioned intercomparison is given in the tables below:
Eespool nimetatud võrdluskatse korratavus on väljendatud laborisisese standardhälbena ja esitatud järgmistes tabelites.
Within Laboratory Standard Deviation (Sr) in g/kg
Laborisisesed standardhälbed (Sr) g/kg
Coefficient of Variation (%) for Within Laboratory Standard Deviation (Sr)
Laborisisese standardhälbe (Sr) variatsioonikordaja (%)
The results for between laboratory standard deviation by the abovementioned intercomparison are given in the table below:
Eespool nimetatud võrdluskatse laboritevahelise standardhälbe tulemused on esitatud järgmises tabelis:
Between Laboratory Standard Deviation (SR) in g/kg
Laboritevaheline standardhälve (SR) g/kg
Coefficient of Variation (%) for Between Laboratory Standard Deviation (SR)
Laboritevahelise standardhälbe (SR) variatsioonikordaja (%)
Use of reference materials
Etalonainete kasutamine
The correct application of the method shall be verified by making replicate measurements of certified reference materials when available.
Meetodi õige rakendamise kontrollimiseks tehakse korduvaid mõõtmisi sertifitseeritud etalonainetega, kui need ained on kättesaadavad.
Calibration with certified amino acid calibration solution is recommended.
Soovitatav on kalibreerida aminohapete sertifitseeritud kalibreerimislahusega.
Because of differences between amino acid analysers the final concentrations of the calibration solutions of standard amino acids (see 3.27.4 and 3.27.5) and of the hydrolysate (see 5.3.4) shall be taken as a guideline.
Aminohappeanalüsaatorite erinevustest tingituna tuleb standardaminohapete kalibreerimislahuste (vt 3.27.4 ja 3.27.5) ja hüdrolüsaadi (vt 5.3.4) lõppkontsentratsioone vaadelda suunistena.
The range of linear response of the apparatus has to be checked for all amino acids.
Kõigi aminohapete puhul tuleb kontrollida aparatuuri lineaarse ala vahemikku.
The standard solution is diluted with citrate buffer to give peak areas in the middle of the range.
Standardlahus lahjendatakse tsitraatpuhvriga, et piigialad oleksid vahemiku keskel.
Where high performance liquid chromatographic equipment is used to analyse the hydrolysates, the experimental conditions must be optimised in accordance with the manufacturer's recommendations.
Kui hüdrolüsaatide analüüsiks kasutatakse kõrgefektiivse vedelikkromatograafia aparatuuri, tuleb katsetingimused optimeerida vastavalt tootja soovitustele.
By applying the method to feed containing more than 1 % chloride (concentrate, mineral feeds, supplementary feeds) underestimation of methionine could occur and special treatment has to be done.
Meetodi rakendamisel sööda suhtes, mille kloriidisisaldus on suurem kui 1 % (kontsentraadid, mineraalsöödad, täiendsöödad), võib analüüs näidata tegelikust väiksemat metioniinisisaldust ning tuleb kasutada erimeetodit.
DETERMINATION OF TRYPTOPHAN
TRÜPTOFAANI MÄÄRAMINE
The method makes the determination possible of the total and free tryptophan in feed.
Selle meetodiga on võimalik määrata trüptofaani üldsisaldust ja vaba trüptofaani sisaldust söödas.
It does not distinguish between D- and L- forms.
Meetod ei erista D- ja L-vormi.
For the determination of the total tryptophan, the sample is hydrolysed under alkaline conditions with saturated barium hydroxide solution and heated to 110 oC for 20 hours.
Trüptofaani üldsisalduse määramiseks hüdrolüüsitakse proovi leeliselises keskkonnas küllastunud baariumhüdroksiidi lahusega ja kuumutatakse 110 oC juures 20 tundi.
After hydrolysis internal standard is added.
Pärast hüdrolüüsimist lisatakse sisestandard.
For the determination of free tryptophan, the sample is extracted under mild acidic conditions in the presence of internal standard.
Vaba trüptofaani määramiseks ekstraheeritakse proovi nõrgalt happelistes tingimustes sisestandardi juuresolekul.
The tryptophan and the internal standard in the hydrolysate or in the extract are determined by HPLC with fluorescence detection.
Trüptofaan ja sisestandard määratakse hüdrolüsaadis või ekstraktis HPLC-ga fluorestsentsdetektori abil.
Double distilled water or water of equivalent quality must be used (conductivity < 10 μS/cm).
Tuleb kasutada bidestilleeritud või samaväärse kvaliteediga vett (juhtivus < 10 μS/cm).
Standard substance: tryptophan (purity/content ≥ 99 %) dried under vacuum over phosphorous pentoxide.
Standardaine: trüptofaan (puhtus/sisaldus ≥ 99 %), mis on kuivatatud vaakumis fosforpentoksiidi kohal.
Internal standard substance: α-methyl-tryptophan (purity/content ≥ 99 %), dried under vacuum over phosphorous pentoxide.
Sisestandardaine: α-metüültrüptofaan (puhtus/sisaldus ≥ 99 %), mis on kuivatatud vaakumis fosforpentoksiidi kohal.
Barium hydroxide octa-hydrate (care shall be taken not to expose the Ba(OH)2 .8 H2O excessively to air in order to avoid formation of BaCO3, which could disturb the determination) (see observation 9.3).
Baariumhüdroksiidi oktahüdraat (vältida Ba(OH)2 .8 H2O ülemäärast kontakti õhuga, kuna see võib viia BaCO3 moodustumiseni, mis võib määramist segada) (vt tähelepanek 9.3).
Ortho-phosphoric acid, w (w/w) = 85 %.
Ortofosforhape, w (w/w) = 85 %
Hydrochloric acid, ρ201,19 g/ml.
Soolhape, ρ20 = 1,19 g/ml.
Methanol, equivalent to HPLC grade.
HPLC-puhtusastmega metanool
Dissolve 40,0 g NaOH (3.5) in water and make up to 1 litre with water (3.1).
40,0 g NaOH (3.5) lahustatakse vees ja täidetakse veega (3.1) 1 liitrini.
Hydrochloric acid, c = 6 mol/l:
Soolhape, c = 6 mol/l:
Take 492 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Võetakse 492 ml HCl (3.7) ja täidetakse veega 1 liitrini.
Hydrochloric acid, c = 1 mol/l:
Soolhape, c = 1 mol/l:
Take 82 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Võetakse 82 ml HCl (3.7) ja täidetakse veega 1 liitrini.
Hydrochloric acid, c = 0,1 mol/l:
Soolhape, c = 0,1 mol/l:
Take 8,2 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Võetakse 8,2 ml HCl (3.7) ja täidetakse veega 1 liitrini.
Ortho-phosphoric acid, c = 0,5 mol/l:
Ortofosforhape, c = 0,5 mol/l:
Take 34 ml ortho-phosphoric acid (3.6) and make up to 1 litre with water (3.1).
Võetakse 34 ml ortofosforhapet (3.6) ja täidetakse veega (3.1) 1 liitrini.
Concentrated solution of tryptophan (3.2), c = 2,50 μmol/ml:
Trüptofaani (3.2) kontsentreeritud lahus, c = 2,50μmol/ml:
In a 500 ml volumetric flask dissolve 0,2553 g tryptophan (3.2) in hydrochloric acid (3.13) and make up to the mark with hydrochloric acid (3.13).
500 ml mõõtkolvis lahustatakse 0,2553 g trüptofaani (3.2) soolhappes (3.13) ja täidetakse soolhappega (3.13) märgini.
Store at - 18 oC for a maximum of 4 weeks.
Säilitatakse temperatuuril –18 oC kuni neli nädalat.
Concentrated internal standard solution, c = 2,50 μmol/ml:
Sisestandardi kontsentreeritud lahus, c = 2,50 μmol/ml:
In a 500 ml volumetric flask dissolve 0,2728 g α-methyl-tryptophan (3.3) in hydrochloric acid (3.13) and make up to the mark with hydrochloric acid (3.13).
500 ml mõõtkolvis lahustatakse 0,2728 g α-metüültrüptofaani (3.3) soolhappes (3.13) ja täidetakse soolhappega (3.13) märgini.
Calibration standard solution of tryptophan and internal standard:
Trüptofaani ja sisestandardi kalibreerimisstandardlahus:
Take 2,00 ml concentrated solution of tryptophan (3.15), and 2,00 ml of concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Võetakse 2,00 ml trüptofaani kontsentreeritud lahust (3.15) ja 2,00 ml sisestandardi (α-metüültrüptofaani) kontsentreeritud lahust (3.16).
Dilute with water (3.1) and methanol (3.8) to approximately the same volume and to approximately the same concentration of methanol (10 %-30 %) as the finished hydrolysate.
Lahjendatakse veega (3.1) ja metanooliga (3.8) umbes sama ruumalani ja umbes sama metanooli kontsentratsioonini (10–30 %), nagu on valmis hüdrolüsaadil.
This solution must be prepared freshly before use.
Lahus tuleb valmistada vahetult enne kasutamist.
Protect from direct sunlight during preparation.
Valmistamise ajal vältida otsest päikesevalgust.
1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol.
1,1,1-trikloro-2-metüül-2-propanool
Ethanolamine w (w/w) > 98 %.
Etanoolamiin w (w/w) > 98 %
Solution of 1 g 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol (3.19) in 100 ml methanol (3.8).
1 grammi 1,1,1-trikloro-2-metüül-2-propanooli (3.19) lahus 100 ml metanoolis (3.8).
Mobile phase for HPLC: 3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1g/100ml).
HPLC liikuv faas: 3,00 g äädikhapet (3.18) + 900 ml vett (3.1) +50,0 ml 1,1,1-trikloro-2-metüül-2-propanooli (3.19) lahust (3.21) 1g/100 ml metanoolis (3.8).
Adjust pH to 5,00 using ethanolamine (3.20).
Täidetakse veega (3.1) 1000 ml-ni.
Make up to 1000 ml with water (3.1).
Täidetakse veega (3.1) 1000 ml-ni.
HPLC equipment with a spectrofluorometric detector.
HPLC-seadmed spektrofluorimeetrilise detektoriga
Liquid chromatographic column, 125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing, or equivalent.
Vedelikkromatograafia kolonn, 125 mm × 4 mm, C18, täidise terasuurus 3 μm, või samaväärne
pH-meter.
pH-meeter
Polypropylene flask, capacity 125 ml, with wide neck and screw cap.
Laia kaela ja keeratava korgiga polüpropüleenkolb, maht 125 ml
Membrane filter, 0,45 μm.
Membraanfilter 0,45 μm.
Autoclave, 110 (± 2) oC, 1,4 (±0,1) bar.
Autoklaav, 110 (±2) oC, 1,4 (±0,1) bar
Vortex mixer.
Pöörissegaja
Samples with high fat content shall be extracted with light petroleum (3.9) prior to grinding.
Suure rasvasisaldusega proove tuleb enne jahvatamist ekstraheerida petrooleetriga (3.9).
Determination of free tryptophan (extract)
Vaba trüptofaani määramine (ekstrakt)
Weigh to the nearest 1 mg an appropriate amount (1-5 g) of the prepared sample (5.1), into a conical flask.
Ettevalmistatud proovi (5.1) sobiv kogus (1–5 g) kaalutakse 1 mg täpsusega koonilisse kolbi.
Add 100,0 ml hydrochloric acid, (3.13) and 5,00 ml concentrated internal standard solution (3.16).
Lisatakse 100,0 ml soolhapet (3.13), c = 0,1 mol/l, ja 5,00 ml kontsentreeritud sisestandardlahust (3.16).
Shake or mix for 60 min. using a mechanical shaker or a magnetic stirrer (4.7).
Raputatakse või segatakse 60 min, kasutades mehaanilist loksutit või magnetsegurit (4.7).
Allow the sediment to settle and pipette 10,0 ml of the supernatant solution into a beaker.
Settel lastakse settida ja 10,0 ml supernatanti viiakse pipetiga üle keeduklaasi.
Add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Lisatakse 5 ml ortofosforhapet (3.14).
Adjust the pH to 3 using sodium hydroxide (3.10).
Naatriumhüdroksiidi (3.10) abil korrigeeritakse pH 3-le.
Add sufficient methanol (3.8) to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Lisatakse piisavalt metanooli (3.8), et viia metanooli kontsentratsioon lõpplahuses 10–30 protsendini.
Transfer to a volumetric flask of appropriate volume and dilute with water to a volume necessary for the chromatography (approx. the same volume as the calibration standard solution (3.17)).
Lahus viiakse üle sobiva suurusega mõõtekolbi ja lahjendatakse veega kuni kromatograafiaks sobiva koguseni (umbes sama kogus kui kalibreerimisstandardlahusel (3.17)).
Filter a few ml of the solution through a 0,45 μm membrane filter (4.5) before injection on the HPLC column.
Enne HPLC-kolonni süstimist filtreeritakse mõned milliliitrid lahust läbi 0,45 μm membraanfiltri (4.5).
Protect standard solution and extracts against direct sunlight.
Standardlahust ja ekstrakte tuleb kaitsta otsese päikesevalguse eest.
If it is not possible to analyse the extracts the same day, the extracts may be stored at 5 oC for a maximum of 3 days.
Kui ekstrakte ei ole võimalik samal päeval analüüsida, siis võib neid hoida temperatuuril 5 oC kuni kolm päeva.
Determination of total tryptophan (hydrolysate)
Trüptofaani üldsisalduse määramine (hüdrolüsaat).
Weigh to the nearest 0,2 mg from 0,1 to 1 g of the prepared sample (5.1) into the polypropylene flask (4.4).
0,1–1 g ettevalmistatud proovi (5.1) kaalutakse 0,2 mg täpsusega polüropüleenkolbi (4.4).
The weighed sample portion shall have a nitrogen content of about 10 mg.
Kaalutud proovipartii lämmastikusisaldus peab olema umbes 10 mg.
Add 8,4 g barium hydroxide octa-hydrate (3.4) and 10 ml water.
Lisatakse 8,4 g baariumhüdroksiidi oktahüdraati (3.4) ja 10 ml vett.
Mix on a vortex mixer (4.8) or magnetic stirrer (4.7).
Segatakse pöörissegajaga (4.8) või magnetseguriga (4.7).
Leave the teflon coated magnet in the mixture.
Tefloniga kaetud magnet jäetakse segusse.
Wash down the walls of the vessel with 4 ml water.
Nõu seinad loputatakse üle 4 ml veega.
Put on the screw cap and close the flask loosely.
Keeratav kork pannakse peale ja kolb suletakse lõdvalt.
Before opening the autoclave reduce the temperature to just under 100 oC.
Enne autoklaavi avamist langetatakse temperatuur natuke alla 100 oC kraadi.
In order to avoid crystallisation of Ba(OH)2 · 8 H2O, add to the warm mixture 30 ml water which is at room temperature.
Ba(OH)2 .8 H2O kristalliseerumise vältimiseks lisatakse soojale segule 30 ml toatemperatuuril olevat vett.
Shake or stir gently.
Raputatakse või segatakse kergelt.
Add 2,00 ml concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Lisatakse 2,00 ml sisestandardi (α-metüültrüptofaani) kontsentreeritud lahust (3.16).
Cool the vessels on water/ice bath for 15 minutes.
Nõusid jahutatakse vee-/jäävannis 15 minutit.
Then, add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Seejärel lisatakse 5 ml ortofosforhapet (3.14).
Keep the vessel in the cooling bath and neutralise with HCl (3.11) whilst stirring and adjust the pH to 3,0 using HCl (3.12).
Nõu hoitakse jahutusvannis ja neutraliseeritakse segamisel HCl-iga (3.11) ning pH korrigeeritakse 3,0-ni HCl (3.12) abil.
Add sufficient methanol to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Lisatakse piisavalt metanooli, et viia metanooli kontsentratsioon lõpplahuses 10–30 %ni.
Transfer to a volumetric flask of appropriate volume and dilute with water to the defined volume necessary for the chromatography (for example 100 ml).
Viiakse üle sobiva suurusega mõõtekolbi ja lahjendatakse veega kindla, kromatograafiaks sobiva ruumalani (näiteks 100 ml).
The addition of methanol shall not cause precipitation.
Metanooli lisamine ei tohi tekitada sadenemist.
Protect standard solution and hydrolysates against direct sunlight.
Standardlahust ja hüdrolüsaate tuleb kaitsta otsese päikesevalguse eest.
If it is not possible to analyse the hydrolysates the same day, they may be stored at 5 oC for a maximum of 3 days.
Kui hüdrolüsaate ei ole võimalik samal päeval analüüsida, siis võib neid hoida temperatuuril 5 oC kuni kolm päeva.
HPLC determination
HPLC määramine
The following conditions for isocratic elution are offered for guidance; other conditions may be used, provided they yield equivalent results (see also observations 9.1 and 9.2):
Muid tingimusi võib kasutada juhul, kui need tagavad samaväärsed tulemused (vt ka tähelepanekuid 9.1 ja 9.2):
Liquid chromatographic column (4.2):
Vedelikkromatograafia kolonn (4.2):
125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing or equivalent
125 mm × 4 mm, C18, täidise terasuurus 3 μm või samaväärne
Column temperature:
Kolonni temperatuur:
Room temperature
Ruumitemperatuur
Mobile phase (3.22):
Liikuv faas (3.22):
3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2- methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1 g/100 ml).
3,00 g äädikhapet (3.18) + 900 ml vett (3.1) +50,0 ml 1,1,1-trikloro-2-metüül-2-propanooli (3.19) lahust metanoolis (3.8) (1g/100ml). pH korrigeeritakse 5,00-le etanoolamiini (3.20) abil.
Make up to 1000 ml with water (3.1)
Voolukiirus:
Flow rate:
Voolukiirus:
Total run time:
Summaarne voolutamisaeg:
approx. 34 min.
umbes 34 min
Detection wavelength:
Avastamise lainepikkus:
excitation: 280 nm, emission: 356 nm.
ergastamine: 280 nm, emissioon: 356 nm.
Injection volume
Sissesüstitav ruumala
The amount of tryptophane (X), in g per 100g sample, is calculated as follows:
Arvutatakse trüptofaani (X) kogus grammides 100 g proovi kohta.
A peak area of internal standard, calibration standard solution (3.17)
A sisestandardi piipindala, kalibreerimisstandardlahus (3.17)
B peak area of tryptophan, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
B trüptofaani piigipindala, ekstrakt (5.2) või hüdrolüsaat (5.3)
volume in ml (2 ml) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to the calibration solution (3.17)
kalibreerimislahusele (3.17) lisatud kontsentreeritud trüptofaani lahuse (3.15) kogus milliliitrites (2 ml)