natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The sample is hydrolysed with ethanolic potassium hydroxide solution and the vitamin A is extracted into light petroleum.
Proov hüdrolüüsitakse kaaliumhüdroksiidi etanoolilahusega ja A-vitamiin ekstraheeritakse petrooleetrisse.
The solvent is removed by evaporation and the residue is dissolved in methanol and, if necessary, diluted to the required concentration.
Lahusti aurustatakse ja jääk lahustatakse metanoolis ning vajadusel lahjendatakse nõutud kontsentratsioonini.
The content of vitamin A is determined by reversed phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) using a UV or a fluorescence detector.
A-vitamiini sisaldus määratakse pööratud faasi kõrgefektiivse vedelikkromatograafia (RP-HPLC) meetodiga, kasutades UV- või fluorestsentsdetektorit.
The chromatographic parameters are chosen so that there is no separation between the all-trans-vitamin A alcohol and its cis isomers.
Kromatograafilised parameetrid valitakse nii, et täielikult trans-konfiguratsioonis A-vitamiini alkohol ja selle cis-isomeerid jääksid lahutamata.
Ethanol, σ = 96 %
Etanool, σ = 96 %
Light petroleum, boiling range 40 oC-60 oC
Petrooleeter, keemisvahemik 40–60 oC
Potassium hydroxide solution, c = 50 g/100 ml
Kaaliumhüdroksiidi lahus, c = 50 g/100 ml
Sodium ascorbate solution, c = 10 g/100 ml (see 7.7 observations)
Naatriumaskorbaadi lahus, c = 10 g/100 ml (vt tähelepanek 7.7)
Sodium sulphide, Na2S · x H2O (x = 7-9)
Naatriumsulfiid, Na2S· x H2O (x = 7 – 9)
Sodium sulphide solution, c = 0,5 mol/l in glycerol, ß = 120 g/l (for x = 9) (see 7.8 observations)
Naatriumsulfiidi lahus, c = 0,5 mol/l glütseroolis, ß = 120 g/l (kui x = 9) (vt tähelepanek 7.8)
Phenolphthalein solution, c = 2 g/100 ml in ethanol (3.1)
Fenoolftaleiini lahus, c = 2 g/100 ml etanoolis (3.1)
2-Propanol
2-propanool
Mobile phase for HPLC: mixture of methanol (3.3) and water, e.g. 980 + 20 (v + v).
HPLC liikuv faas: metanooli (3.3) ja vee segu, nt 980 + 20 (v+v).
The exact ratio will be determined by the characteristics of the column employed.
Täpne vahekord määratakse kasutatava kolonni parameetrite järgi.
Nitrogen, oxygen free
Hapnikuvaba lämmastik
All-trans-vitamin A acetate, extra pure, of certified activity, e.g. 2,80 x 106 IU/g
Täielikult trans-konfiguratsioonis A-vitamiini atsetaat, eriti puhas, kontrollitud aktiivsusega, nt 2,80 ×106 RÜ/g
Stock solution of all-trans-vitamin A acetate: Weigh to the nearest 0,1 mg, 50 mg of vitamin A acetate (3.11) into a 100 ml graduated flask.
Täielikult trans-konfiguratsioonis A-vitamiini atsetaadi põhilahus: 50 mg A-vitamiini atsetaati (3.11) kaalutakse täpsusega 0,1 mg ja pannakse see 100 ml mõõtekolbi.
Dissolve in 2-propanol (3.8) and make up to the mark with the same solvent.
Lahustatakse 2-propanoolis (3.8) ja täidetakse sama lahustiga märgini.
The nominal concentration of this solution is 1400 IU vitamin A per ml.
Selle lahuse nominaalne kontsentratsioon on 1400 RÜ A-vitamiini milliliitri kohta.
The exact content has to be determined according to 5.6.3.1.
Täpne sisaldus määratakse vastavalt punktile 5.6.3.1.
All-trans-vitamin A palmitate, extra pure, of certified activity, e.g. 1,80 x 106 IU/g
Täielikult trans-konfiguratsioonis A-vitamiini palmitaat, eriti puhas, kontrollitud aktiivsusega, nt 1,80 × 106 RÜ/g
Stock solution of all-trans-vitamin A palmitate: Weigh to the nearest 0,1 mg, 80 mg of vitamin A palmitate (3.12) into a 100 ml graduated flask.
Täielikult trans-konfiguratsioonis A-vitamiini palmitaadi põhilahus: 80 mg A-vitamiini palmitaati (3.12) kaalutakse täpsusega 0,1 mg ja pannakse 100 ml mõõtekolbi.
The exact content has to be determined according to 5.6.3.2.
Täpne sisaldus määratakse vastavalt punktile 5.6.3.2.
2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT) (see 7.5 observations)
2,6-di-tert-butüül-4-metüülfenool (BHT) (vt tähelepanek 7.5).
Vacuum rotary evaporator
Vaakumpöördaurusti
Amber glassware
Tumedast klaasist nõud
Flat bottom or conical flasks, 500 ml, with ground-glass socket
Lihvavaga lamedapõhjalised või koonilised kolvid, 500 ml
Graduated flasks with ground-glass stoppers, narrow-necked, 10, 25, 100 and 500 ml
Lihvkorgiga kitsakaelalised mõõtkolvid 10, 25, 100 ja 500 ml
Separating funnels, conical, 1000 ml, with ground-glass stoppers
Lihvkorgiga koonilised jaotuslehtrid, 1000 ml
Pear shaped flasks, 250 ml, with ground-glass sockets
Lihvavaga pirnkolvid, 250 ml
Allihn condenser, jacket length 300 mm, with ground-glass joint, with adapter for gas feed pipe
Lihvühendusega Allihni tagasivoolujahuti, ümbrise pikkus 300 mm, gaasitoru adapteriga
Pleated filter paper for phase separation, diameter 185 mm (e.g. Schleicher & Schuell 597 HY 1/2)
Kurdfilterpaber faaside eraldamiseks, diameeter 185 mm (nt Schleicher & Schuell 597 HY 1/2)
HPLC equipment with injection system
HPLC-seadmed sissepritsesüsteemiga
Liquid chromatographic column, 250 mm x 4 mm, C18, 5 or 10 μm packing, or equivalent (performance criterion: only a single peak for all retinol isomers under the HPLC-conditions)
Vedelikkromatograafia kolonn, 250 mm × 4 mm, C18, täidise terasuurus 5 või 10 μm, või samaväärne (lahutuskriteerium: ainult üks piik kõigi retinooli isomeeride jaoks antud HPLC tingimustel)
UV or fluorescence detector, with variable wavelength adjustment
Muudetava lainepikkusega UV- või fluorestsentsdetektor
Spectrophotometer with 10 mm quartz cells
Spektrofotomeeter 10 mm kvartsküvettidega
Water-bath with magnetic stirrer
Magnetseguriga veevann
Extraction apparatus (see figure 1) consisting of:
Ekstraktsiooniseade (vt joonis 1), mis koosneb:
Glass cylinder of 1 l capacity fitted with a ground glass neck and stopper
1-liitrisest lihvava ja lihvkorgiga klaassilindrist;
Ground glass insert equipped with a side-arm and an adjustable tube passing through the centre.
lihviga klaasotsakust, mis on varustatud kõrvaltoruga ja keskelt läbi mineva üles-alla nihutatava toruga.
The adjustable tube shall have a U-shaped lower end and a jet at the opposite end so that the upper liquid layer in the cylinder may be transferred into a separating funnel.
Nihutataval torul peab olema U-kujuline alumine ots ja teises otsas düüs, nii et silindris oleva vedeliku ülemist kihti oleks võimalik viia üle jaotuslehtrisse.
Vitamin A is sensitive to (UV-) light and to oxidation.
A-vitamiin on tundlik (UV-) valguse ja oksüdeerumise suhtes.
All operations shall be carried out in the absence of light (using amber glassware, or glassware protected with aluminium foil) and oxygen (flush with nitrogen).
Kõik toimingud tuleb teostada valguse ja hapniku juurdepääsuta (kasutades tumedast klaasist või alumiiniumfooliumiga kaetud nõusid ja voolutades lämmastikuga).
During extraction air above the liquid shall be replaced by nitrogen (avoid excess pressure by loosening the stopper from time to time).
Ekstraheerimise ajal tuleb vedeliku kohal olev õhk asendada lämmastikuga (ülerõhu vältimiseks tuleb korki aeg-ajalt kergitada).
Grind the sample so that it passes a 1 mm mesh sieve, taking care to avoid generation of heat.
Proov jahvatatakse kuumenemist vältides nii peeneks, et see läheks läbi 1 mm avadega sõela.
Grinding must be carried out immediately before weighing and saponification otherwise there may be losses of vitamin A.
Jahvatamine peab toimuma vahetult enne kaalumist ja seebistamist, vastasel juhul võib esineda A-vitamiini kadusid.
Saponification
Seebistamine
Depending on the vitamin A content weigh, to the nearest 1 mg, 2 g to 25 g of the sample into a 500 ml flat bottom or conical flask (4.2.1).
500 ml lamedapõhjalisse või koonilisse kolbi (4.2.1) kaalutakse 1 mg täpsusega 2–25 g proovi, sõltuvalt A-vitamiini sisaldusest.
Add successively with swirling 130 ml ethanol (3.1), approximately 100 mg BHT (3.13), 2 ml sodium ascorbate solution (3.5) and 2 ml sodium sulphide solution (3.6).
Seejärel lisatakse ringliigutustega segades 130 ml etanooli (3.1), umbes 100 mg BHT (3.13), 2 ml naatriumaskorbaadi lahust (3.5) ja 2 ml naatriumsulfiidi lahust (3.6).
Fit a condenser (4.3) to the flask and immerse the flask in a water-bath with magnetic stirrer (4.7).
Kolvi otsa ühendatakse tagasivoolujahuti (4.3) ja kolb pannakse magnetseguriga veevanni (4.7).
Heat to boiling and allow to reflux for 5 minutes.
Kuumutatakse keemiseni ja keedetakse tagasivoolujahuti all 5 minutit.
Then add 25 ml potassium hydroxide solution (3.4) through the condenser (4.3) and allow to reflux for a further 25 min., with stirring under a slow stream of nitrogen.
Seejärel lisatakse läbi jahuti (4.3) 25 ml kaaliumhüdroksiidi lahust (3.4) ja lastakse segamisel keeda tagasivoolujahuti all veel 25 minutit, voolutades nõrgalt lämmastikuga.
Then rinse the condenser with approximately 20 ml water and cool the content of the flask to room temperature.
Seejärel loputatakse jahutit umbes 20 ml veega ja jahutatakse kolvi sisu toatemperatuurini.
Extraction
Ekstraheerimine
Transfer by decantation the saponification solution quantitatively by rinsing with a total volume of 250 ml water to a 1000 ml separating funnel (4.2.3) or to the extraction apparatus (4.8).
Seebistamislahus viiakse dekanteerimise teel kvantitatiivselt üle 1000 ml jaotuslehtrisse (4.2.3) või ekstraktsiooniseadmesse (4.8), loputades kokku 250 ml veega.
Rinse the saponification flask successively with 25 ml ethanol (3.1) and 100 ml light petroleum (3.2) and transfer the rinsings to the separating funnel or to the extraction apparatus.
Seebistamiskolbi loputatakse järjest 25 ml etanooli (3.1) ja 100 ml petrooleetriga (3.2) ja viiakse ka need vedelikukogused üle jaotuslehtrisse või ekstraktsiooniseadmesse.
The proportion of water and ethanol in the combined solutions must be about 2:1.
Vee ja etanooli vahekord ühendatud lahuses peab olema umbes 2:1.
Shake vigorously for 2 min. and allow to settle for 2 minutes.
Raputatakse tugevasti kaks minutit ja lastakse kaks minutit selgineda.
Extraction using a separating funnel (4.2.3)
Ekstraheerimine jaotuslehtriga (4.2.3)
When the layers have separated (see observation 7.3) transfer the light petroleum layer to another separating funnel (4.2.3).
Kui kihid on eraldunud (vt tähelepanek 7.3), kantakse petrooleetri kiht üle teise jaotuslehtrisse (4.2.3).
Repeat this extraction twice, with 100 ml light petroleum (3.2) and twice, with 50 ml light petroleum (3.2).
Seda ekstraheerimist korratakse kaks korda 100 ml petrooleetriga (3.2) ja kaks korda 50 ml petrooleetriga (3.2).
Wash the combined extracts in the separating funnel twice by gently swirling (to avoid formation of emulsions) with 100 ml portions of water and then by repeated shaking with further 100 ml portions of water until the water remains colourless on addition of phenolphthalein solution (3.7) (washing four times is usually sufficient).
Ühendatud ekstrakte pestakse jaotuslehtris kergelt loksutades (et vältida emulsiooni tekkimist) kaks korda 100 ml veekogustega ja seejärel korduval raputamisel veel 100 ml veekogustega, kuni vesi ei muuda enam värvust fenoolftaleiini lahuse (3.7) lisamisel (tavaliselt piisab neljakordsest pesemisest).
Filter the washed extract through a dry pleated filter for phase separation (4.4) to remove any suspended water into a 500 ml graduated flask (4.2.2).
Emulgeerunud vee kõrvaldamiseks filtreeritakse pestud ekstrakt läbi kuiva faasieraldusfiltri (4.4) 500 ml mõõtekolbi (4.2.2).
Rinse the separating funnel and the filter with 50 ml light petroleum (3.2), make up to the mark with light petroleum (3.2) and mix well.
Jaotuslehtrit ja filtrit loputatakse 50 ml petrooleetriga (3.2), täidetakse petrooleetriga (3.2) märgini ja segatakse hästi.
Extraction using an extraction apparatus (4.8)
Ekstraheerimine ekstraktsiooniseadmega (4.8)
When the layers have separated (see observation 7.3) replace the stopper of the glass cylinder (4.8.1) by the ground glass insert (4.8.2) and position the U-shaped lower end of the adjustable tube so that it is just above the level of the interface.
Kui kihid on eraldunud (vt tähelepanek 7.3), pannakse klaassilindri (4.8.1) korgi asemele lihviga klaasotsak (4.8.2) ja seatakse nihutatava toru U-kujuline alumine ots nii, et see oleks täpselt faaside eralduspinna kohal.
By application of pressure from a nitrogen line to the side-arm, transfer the upper light petroleum-layer to a 1000 ml separating funnel (4.2.3).
Tõstes gaasivooliku kaudu kõrvaltorusse juhitava lämmastiku rõhku, viiakse ülemine petrooleetri kiht üle 1000 ml jaotuslehtrisse (4.2.3).
Add 100 ml light petroleum (3.2) to the glass cylinder, stopper and shake well.
Klaassilindrisse lisatakse 100 ml petrooleetrit (3.2), suletakse korgiga ja raputatakse tugevasti.
Allow the layers to separate and transfer the upper layer to the separating funnel as before.
Kihtidel lastakse eralduda ja ülemine kiht viiakse üle jaotuslehtrisse nagu ennegi.
Repeat the extraction procedure with further 100 ml of light petroleum (3.2), then twice with 50 ml portions of light petroleum (3.2) and add the light petroleum layers to the separating funnel.
Ekstraheerimist korratakse järgmise 100 ml petrooleetriga (3.2), siis kaks korda 50 ml petrooleetri (3.2) kogustega ja viiakse petrooleetri kihid üle jaotuslehtrisse.
Wash the combined light petroleum extracts as described in 5.3.1 and proceed as described there.
Ühendatud petrooleetri ekstrakte pestakse, nagu on kirjeldatud punktis 5.3.1, ja jätkatakse, nagu seal on kirjeldatud.
Preparation of the sample solution for HPLC
Proovilahuse valmistamine HPLC jaoks
Pipette an aliquot portion of the light petroleum solution (from 5.3.1 or 5.3.2) into a 250 ml pear shaped flask (4.2.4).
Petrooleetri lahuse (punktist 5.3.1 või 5.3.2) alikvoot viiakse pipetiga 250 ml pirnkolbi (4.2.4).
Evaporate the solvent nearly to dryness on the rotary evaporator (4.1) with reduced pressure at a bath temperature not exceeding 40 oC.
Vaakumpöördaurustiga (4.1) aurustatakse lahusti vaakumis peaaegu kuivaks veevanni temperatuuril mitte üle 40 oC.
Restore atmospheric pressure by admitting nitrogen (3.10) and remove the flask from the rotary evaporator.
Kolbi lastakse lämmastik (3,10) kuni atmosfäärirõhuni ja kolb eemaldatakse vaakumpöördaurustist.
Remove the remaining solvent with a stream of nitrogen (3.10) and dissolve the residue immediately in a known volume (10-100 ml) of methanol (3.3) (the concentration of vitamin A must be in the range of 5 IU/ml to 30 IU/ml).
Järelejäänud lahusti eemaldatakse lämmastikuga (3.10) voolutades ja jääk lahustatakse kohe teadaoleva koguse (10–100 ml) metanooliga (3.3) (A-vitamiini kontsentratsioon peab jääma vahemikku 5–30 RÜ/ml).
Determination by HPLC
Määramine HPLC-ga
Vitamin A is separated on a C18 reversed phase column (4.5.1) and the concentration is measured by means of a UV detector (325 nm) or a fluorescence detector (excitation: 325 nm, emission: 475 nm) (4.5.2).
A-vitamiin eraldatakse C18 pöördfaaskolonnil (4.5.1) ja mõõdetakse selle kontsentratsioon UV-detektori (325 nm) või fluorestsentsdetektori (ergastamine: 325 nm, emissioon: 475 nm) (4.5.2) abil.
Inject an aliquot portion (e.g. 20 μl) of the methanolic solution obtained in 5.4 and elute with the mobile phase (3.9).
Punktis 5.4 saadud metanoolilahuse alikvoot (nt 20 μl) süstitakse kolonni ja elueeritakse liikuva faasiga (3.9).
Calculate the mean peak height (area) of several injections of the same sample solution and the mean peak heights (areas) of several injections of the calibration solutions (5.6.2).
Arvutatakse sama proovilahuse erinevate süstide keskmine piigi kõrgus (pindala) ja kalibreerimislahuste (5.6.2) mitme süsti keskmised piigi kõrgused (pindalad).
HPLC conditions
HPLC tingimused
The following conditions are offered for guidance; other conditions may be used provided that they give equivalent results.
Soovitatakse juhinduda järgmistest tingimustest (muid tingimusi võib kasutada juhul, kui need tagavad samaväärsed tulemused).
Liquid chromatographic column (4.5.1):
Vedelikkromatograafia kolonn (4.5.1):
250 mm × 4 mm, C18, 5 or 10 μm packing, or equivalent
250 mm × 4 mm, C18, täidise terasuurus 5 või 10 μm või samaväärne
Mobile phase (3.9):
Liikuv faas (3.9):
Mixture of methanol (3.3) and water e.g. 980 + 20 (v + v).
Metanooli (3.3) ja vee segu, nt 980 + 20 (v + v).
1-2 ml/min.
1–2 ml/min
Detector (4.5.2):
Detektor (4.5.2):
UV detector (325 nm) or fluorescence detector
UV-detektor (325 nm) või fluorestsentsdetektor
(excitation: 325 nm/emission: 475 nm)
(ergastamine: 325 nm/emissioon: 475 nm)
Preparation of the working standard solutions
Standardtöölahuste ettevalmistamine
Pipette 20 ml of the vitamin A acetate stock solution (3.11.1) or 20 ml of the vitamin A palmitate stock solution (3.12.1) into a 500 ml flat bottom or conical flask (4.2.1) and hydrolyse as described under 5.2, but without addition of BHT.
20 ml A-vitamiini atsetaadi põhilahust (3.11.1) või 20 ml A-vitamiini palmitaadi põhilahust (3.12.1) pipetitakse 500 ml lamedapõhjalisse või koonilisse kolbi (4.2.1) ja hüdrolüüsitakse vastavalt punktile 5.2, kuid ilma BHT-d lisamata.
Subsequently extract with light petroleum (3.2) according to 5.3 and make up to 500 ml with light petroleum (3.2).
Seejärel ekstraheeritakse petrooleetriga (3.2) vastavalt punktile 5.3 ja täidetakse kuni 500 ml-ni petrooleetriga (3.2).
Evaporate 100 ml of this extract on the rotary evaporator (see 5.4) nearly to dryness, remove the remaining solvent with a stream of nitrogen (3.10) and redissolve the residue in 10,0 ml of methanol (3.3).
100 ml seda ekstrakti aurustatakse vaakumpöördaurustil (vt 5.4) peaaegu kuivaks, järelejäänud lahusti eemaldatakse lämmastikuga (3,10) voolutades ja jääk lahustatakse uuesti 10,0 ml metanooliga (3.3).
The nominal concentration of this solution is 560 IU vitamin A per ml.
Selle lahuse nominaalne kontsentratsioon on 560 RÜ A-vitamiini milliliitri kohta.
The exact content has to be determined according to 5.6.3.3.
Täpne sisaldus määratakse vastavalt punktile 5.6.3.3.
The working standard solution has to be freshly prepared before use.
Standardtöölahus tuleb valmistada vahetult enne kasutamist.
Pipette 2,0 ml of this working standard solution into a 20 ml graduated flask, make up to the mark with methanol (3.3) and mix.
2,0 ml kõnealust standardtöölahust pipetitakse 20 ml mõõtekolbi, täidetakse metanooliga (3.3) kuni märgini ja segatakse.
The nominal concentration of this diluted working standard solution is 56 IU vitamin A per ml.
Selle lahjendatud standardtöölahuse nominaalne kontsentratsioon on 56 RÜ A-vitamiini ml kohta.
Preparation of the calibration solutions and calibration graph
Kalibreerimislahuste valmistamine ja kalibreerimisgraafiku koostamine
Transfer 1,0, 2,0, 5,0 and 10,0 ml of the diluted working standard solution into a series of 20 ml graduated flasks, make up to the mark with methanol (3.3) and mix.
1,0, 2,0, 5,0 ja 10,0 ml lahjendatud standardtöölahust viiakse üle 20 ml mõõtekolbidesse, täidetakse metanooliga (3.3) märgini ja segatakse.
The nominal concentrations of these solutions are 2,8, 5,6, 14,0 and 28,0 IU vitamin A per ml.
Nende lahuste nominaalsed kontsentratsioonid on 2,8, 5,6, 14,0 ja 28,0 RÜ A-vitamiini ml kohta.
Inject 20 μl of each calibration solution several times and determine the mean peak heights (areas).
Igast kalibreerimislahusest süstitakse 20 μl mitu korda kolonni ja määratakse keskmised piigi kõrgused (pindalad).
Using the mean peak heights (areas) plot a calibration graph considering the results of the UV control (5.6.3.3).
Koostatakse kalibreerimisgraafik, kasutades keskmisi piigi kõrgusi (pindalasid) ja arvestades UV-kontrolli (5.6.3.3) tulemusi.
UV standardisation of the standard solutions
Standardlahuste UV-standardiseerimine
Vitamin A acetate stock solution
A-vitamiini atsetaadi põhilahus
Pipette 2,0 ml of the vitamin A acetate stock solution (3.11.1) into a 50 ml graduated flask (4.2.2) and make up to the mark with 2-propanol (3.8).
2,0 ml A-vitamiini atsetaadi põhilahust (3.11.1) pipetitakse 50 ml mõõtekolbi (4.2.2) ja täidetakse 2-propanooliga (3.8) märgini.
The nominal concentration of this solution is 56 IU vitamin A per ml.
Selle lahuse nominaalne kontsentratsioon on 56 RÜ A-vitamiini milliliitri kohta.
Pipette 3,0 ml of this diluted vitamin A acetate solution into a 25 ml graduated flask and make up to the mark with 2-propanol (3.8).
3,0 ml A-vitamiini atsetaadi lahjendatud lahust pipetitakse 25 ml mõõtekolbi ja täidetakse 2-propanooliga (3.8) märgini.
The nominal concentration of this solution is 6,72 IU vitamin A per ml.
Selle lahuse nominaalne kontsentratsioon on 6,72 RÜ A-vitamiini milliliitri kohta.
Measure the UV spectrum of this solution against 2-propanol (3.8) in the spectrophotometer (4.6) between 300 nm and 400 nm.
Spektrofotomeetriga (4.6) mõõdetakse selle lahuse UV-spekter 2-propanooli (3.8) suhtes vahemikus 300–400 nm.
The extinction maximum must be between 325 nm and 327 nm.
Ekstinktsioonimaksimum peab olema vahemikus 325–327 nm.
Calculation of the vitamin A content:
A-vitamiini sisalduse arvutamine:
IU vitamin A/ml = E326 × 19,0
RÜ A-vitamiini milliliitri kohta = E326 × 19,0
for vitamin A acetate = 1530 at 326 nm in 2-propanol)
A-vitamiini atsetaadi puhul = 1530 lainepikkusel 326 nm 2-propanoolis)
Vitamin A palmitate stock solution
A-vitamiini palmitaadi põhilahus
Pipette 2,0 ml of the vitamin A palmitate stock solution (3.12.1) into a 50 ml graduated flask (4.2.2) and make up to the mark with 2-propanol (3.8).
2,0 ml A-vitamiini palmitaadi põhilahust (3.12.1) pipetitakse 50 ml mõõtekolbi (4.2.2) ja täidetakse 2-propanooliga (3.8) märgini.
Pipette 3,0 ml of this diluted vitamin A palmitate solution into a 25 ml graduated flask and make up to the mark with 2-propanol (3.8).
3,0 ml A-vitamiini palmitaadi põhilahust pipetitakse 25 ml mõõtekolbi ja täidetakse 2-propanooliga (3.8) märgini.
for vitamin A palmitate = 957 at 326 nm in 2-propanol)
A-vitamiini palmitaadi puhul = 957 lainepikkusel 326 nm 2-propanoolis)
Vitamin A working standard solution
A-vitamiini standardtöölahus
Pipette 3,0 ml of the undiluted vitamin A working standard solution, prepared according to 5.6.1 into a 50 ml graduated flask (4.2.2) and make up to the mark with 2-propanol (3.8).
3,0 ml A-vitamiini lahjendamata standardtöölahust, mis on valmistatud vastavalt punktile 5.6.1, pipetitakse 50 ml mõõtekolbi (4.2.2) ja täidetakse 2-propanooliga (3.8) märgini.
Pipette 5,0 ml of this solution into a 25 ml graduated flask and make up to the mark with 2-propanol (3.8).
5,0 ml seda lahust pipetitakse 25 ml mõõtekolbi ja täidetakse 2-propanooliga (3.8) märgini.
IU vitamin A/ml = E325 × 18,3
RÜ A-vitamiini milliliitri kohta = E325 × 18,3
for vitamin A alcohol = 1821 at 325 nm in 2-propanol)
A-vitamiini alkoholi puhul = 1821 lainepikkusel 325 nm 2-propanoolis)
Calculation of the results
Tulemuste arvutamine
From the mean height (area) of the vitamin A peaks of the sample solution determine the concentration of the sample solution in IU/ml by reference to the calibration graph (5.6.2).
Proovilahuse A-vitamiini piigi keskmisest kõrgusest (pindalast) määratakse kalibreerimisgraafiku (5.6.2) järgi proovilahuse kontsentratsioon RÜ-des milliliitri kohta.
The vitamin A content w in IU/kg of the sample is given by the following formula:
Proovi A-vitamiini sisaldus w RÜ-des kilogrammi kohta arvutatakse järgmise valemi järgi:
[IU/kg]
[mg/kg]
c vitamin A concentration of the sample solution (5.4) in IU/ml
c A-vitamiini kontsentratsioon proovilahuses (5.4) RÜ/ml;
volume of sample solution (5.4) in ml
proovilahuse (5.4) kogus milliliitrites;
volume of aliquot taken in 5.4 in ml
vastavalt punktile 5.4 võetud alikvoodi kogus milliliitrites;
m weight of the test portion in g
m kaalutise mass grammides.
For samples with low vitamin A concentration it may be useful to combine the light petroleum-extracts of two saponification-charges (amount weighed: 25 g) to one sample solution for HPLC-determination.
Madala A-vitamiini kontsentratsiooniga proovides võib olla kasulik ühendada kahe seebistamiseks võetud koguse (kaalutud kogus: 25 g) petrooleetri ekstraktid üheks proovilahuseks, mida määratakse HPLC-ga.
The weight of the sample taken for the analysis shall not contain more than 2 g fat.
Analüüsiks võetud proov ei tohi sisaldada üle 2 g rasva.
If phase separation does not occur add approximately 10 ml ethanol (3.1) to break the emulsion.
Faaside halva eraldumise puhul lisatakse emulsiooni lõhkumiseks umbes 10 ml etanooli (3.1).