natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Επομένως, θα πρέπει να γίνονται παρατηρήσεις της φυσικής εμφάνισης των ψαριών, εάν είναι δυνατόν, στο τέλος της έκθεσης.
Well water, dechlorinated tap water and artificial media (e.g. Elendt “M4” or “M7” medium, see below) are commonly used.
Στο ρυζόψαρο, ο σχηματισμός της θηλής στο οπίσθιο τμήμα του εδρικού πτερυγίου στα θηλυκά άτομα είναι ευαίσθητος στα ανδρογόνα.
The water should be aerated before use.
Στο κεφάλαιο Γ.37 του παρόντος παραρτήματος (38) παρέχονται σχετικές φωτογραφίες των δευτερευόντων χαρακτηριστικών του φύλου για τα αρσενικά άτομα, καθώς και για τα θηλυκά άτομα στα οποία έχουν χορηγηθεί ανδρογόνα.
If necessary, the culture water may be renewed by pouring or siphoning the used water from culture vessels carefully without destroying the tubes of larvae.
Είναι σημαντικό ο καθορισμός του τελικού σημείου να πραγματοποιείται με βάση την ισχυρότερη έγκυρη στατιστική δοκιμασία.
Feeding larvae
Η επανάληψη αποτελεί την πειραματική μονάδα, αλλά η μεταβλητότητα εντός των επαναλήψεων θα πρέπει να συμπεριλαμβάνεται στις στατιστικές δοκιμασίες.
Chironomus larvae should be fed with a fish flake food (Tetra Min®, Tetra Phyll® or other similar brand of proprietary fish food), at approximately 250 mg per vessel per day.
Στο προσάρτημα 8 διατίθεται ένα διάγραμμα απόφασης που βοηθά στην επιλογή της καταλληλότερης στατιστικής δοκιμασίας που πρέπει να χρησιμοποιείται με βάση τα χαρακτηριστικά των δεδομένων που λαμβάνονται από τη δοκιμή.
This can be given as a dry ground powder or as a suspension in water:
Το επίπεδο στατιστικής σημαντικότητας είναι 0,05 για όλα τα τελικά σημεία που συμπεριλαμβάνονται.
1,0 g of flake food is added to 20 ml of dilution water and blended to give a homogenous mix.
Ποσοστά των φύλων και γενετικό φύλο
This preparation may be fed at a rate of about 5 ml per vessel per day.
Τα ποσοστά των φύλων θα πρέπει να αναλύονται για να διαπιστώνονται σημαντικές επιδράσεις (προσέγγιση NOEC/LOEC) της έκθεσης μέσω της δοκιμασίας Jonckheere-Terpstra (δοκιμασία τάσεων) εάν υπάρχει μονοτονική σχέση δόσης-απόκρισης.
(shake before use.)
Εάν διαπιστωθεί μη μονοτονικότητα, θα πρέπει να εφαρμόζεται δοκιμή που βασίζεται σε ζεύγη:
Older larvae may receive more.
Εάν είναι δυνατή η επίτευξη κανονικότητας και ομοιογενούς διασποράς, χρησιμοποιείται η δοκιμασία Dunnett.
Feeding is adjusted according to the water quality.
Εάν υπάρχει ομοιογενής διασπορά, χρησιμοποιείται η δοκιμασία Tamhane-Dunnett.
If the culture medium becomes “cloudy”, the feeding should be reduced.
Διαφορετικά, χρησιμοποιείται η δοκιμασία Mann-Whitney με διόρθωση κατά Bonferroni-Holm.
Food additions should be carefully monitored.
Στο προσάρτημα 8 περιλαμβάνεται ένα διάγραμμα ροής που περιγράφει τα στατιστικά στοιχεία των ποσοστών των φύλων.
Too little food will cause emigration of the larvae towards the water column, and too much food will cause increased microbial activity and reduced oxygen concentrations.
Τα ποσοστά των φύλων θα πρέπει να παρουσιάζονται σε πίνακες ως ποσοστά συγκέντρωσης ± τυπική απόκλιση (SD) για τα αρσενικά, τα θηλυκά, τα διεμφυλικά και τα αδιαφοροποίητα άτομα.
Both conditions can result in reduced growth rates.
Θα πρέπει να επισημαίνεται η στατιστική σημαντικότητα.
Some green algae (e.g. Scenedesmus subspicatus, Chlorella vulgaris) cells may also be added when new culture vessels are set up.
Παραδείγματα παρουσιάζονται στην έκθεση επικύρωσης φάσης 2 της δοκιμής FSDT (42).
Feeding emerged adults
Το γενετικό φύλο θα πρέπει να αναφέρεται ως ποσοστό αναστροφής του φαινοτυπικού φύλου των αρσενικών, θηλυκών, διεμφυλικών και αδιαφοροποίητων ατόμων.
Some experimenters have suggested that a cotton wool pad soaked in a saturated sucrose solution may serve as a food for emerged adults.
Συγκεντρώσεις της VTG
At 20 ± 2 °C adults will begin to emerge from the larval rearing vessels after approximately 13 - 15 days.
Οι συγκεντρώσεις της VTG θα πρέπει να αναλύονται για να διαπιστώνονται σημαντικές επιδράσεις (προσέγγιση NOEC/LOEC) της έκθεσης.
Males are easily distinguished by having plumose antennae and thin body.
Η δοκιμασία Dunnett προτιμάται σε σχέση με τη δοκιμασία t με διόρθωση κατά Bonferroni.
Egg masses
Όταν χρησιμοποιείται διόρθωση κατά Bonferroni, προτιμάται η διόρθωση κατά Bonferroni-Holm.
Once adults are present within the breeding cage, all larval rearing vessels should be checked three times weekly for deposition of the gelatinous egg masses.
Θα πρέπει να επιτρέπεται ένα περιθώριο για λογαριθμικό μετασχηματισμό της VTG για την επίτευξη κανονικότητας και ομοιογένειας της διασποράς.
If present, the egg masses should be carefully removed.
Επίσης, εάν η σχέση συγκέντρωσης-απόκρισης συνάδει με μονοτονικότητα, προτιμάται η δοκιμασία Jonckheere-Terpstra από όλες τις παραπάνω δοκιμασίες.
They should be transferred to a small dish containing a sample of the breeding water.
Εάν χρησιμοποιούνται δοκιμασίες t ή δοκιμασία Dunnett, δεν χρειάζεται να εφαρμοστεί έλεγχος F της ANOVA για συνέχιση.
Egg masses are used to start a new culture vessel (e.g. 2 - 4 egg masses/vessel) or are used for toxicity tests.
Για λεπτομέρειες, βλ. το διάγραμμα ροής στο προσάρτημα 8.
First instar larvae should hatch after 2 - 3 days.
Τα αποτελέσματα θα πρέπει να παρουσιάζονται σε πίνακες ως μέσες τιμές συγκέντρωσης ± SD για τα αρσενικά, τα θηλυκά, τα διεμφυλικά και τα αδιαφοροποίητα άτομα ξεχωριστά.
Set-up of new culture vessels
Θα πρέπει να επισημαίνεται η στατιστική σημαντικότητα για τα φαινοτυπικά θηλυκά και φαινοτυπικά αρσενικά άτομα.
Once cultures are established it should be possible to set up a fresh larval culture vessel weekly or less frequently depending on testing requirements, removing the older vessels after adult midges have emerged.
Πραγματικές συγκεντρώσεις της υπό δοκιμή χημικής ουσίας
Using this system a regular supply of adults will be produced with a minimum of management.
Οι πραγματικές συγκεντρώσεις της υπό δοκιμή χημικής ουσίας στον θάλαμο δοκιμής θα πρέπει να αναλύονται με τις συχνότητες που περιγράφονται στην παράγραφο 34.
Preparation of test solutions “M4” and “M7”
Τα αποτελέσματα θα πρέπει να αναφέρονται σε πίνακες ως μέση συγκέντρωση ± SD των επαναλήψεων, καθώς και των συγκεντρώσεων, περιλαμβάνοντας επισημασμένες πληροφορίες σχετικά με τον αριθμό των δειγμάτων και τις έκτοπες τιμές σε σχέση με τη μέση συγκέντρωση της αγωγής ± 20 %.
Elendt (1990) has described the “M4” medium.
Παραδείγματα περιλαμβάνονται στην έκθεση επικύρωσης φάσης 2 της δοκιμής FSDT (42).
The “M7” medium is prepared as the “M4” medium except for the substances indicated in Table 1, for which concentrations are four times lower in “M7” than in “M4”.
Τα αποτελέσματα της δοκιμής θα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή αν οι μετρούμενες συγκεντρώσεις της υπό δοκιμή χημικής ουσίας στα διαλύματα δοκιμής βρίσκονται σε επίπεδα κοντά στο όριο ανίχνευσης της αναλυτικής μεθόδου.
The test solution should not be prepared according to Elendt and Bias (1990) for the concentrations of NaSiO3 · 5H2O, NaNO3, KH2PO4 and K2HPO4 given for the preparation of the stock solutions are not adequate.
Ονομαστικές συγκεντρώσεις δοκιμής, μέσες τιμές των μετρηθεισών τιμών με τις τυπικές αποκλίσεις τους στους θαλάμους δοκιμής, μέθοδος με την οποία επιτεύχθηκαν (η χρησιμοποιηθείσα αναλυτική μέθοδος θα πρέπει να παρουσιάζεται σε ένα παράρτημα), καθώς και ενδείξεις που αποδεικνύουν ότι οι μετρήσεις αναφέρονται στις συγκεντρώσεις της υπό δοκιμή χημικής ουσίας σε αληθές διάλυμα,
Preparation of the “M7”-medium
Ποιότητα νερού στους θαλάμους δοκιμής:
Each stock solution (I) is prepared individually and a combined stock solution (II) is prepared from these stock solutions (I) (see Table 1).
Λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με τη σίτιση (π.χ. είδος τροφής, πηγή, ποσότητα και συχνότητα χορήγησης) καθώς και αναλύσεις για ανίχνευση προσμείξεων (π.χ. PCB, PAH και οργανοχλωριούχα φυτοφάρμακα), κατά περίπτωση.
Fifty ml from the combined stock solution (II) and the amounts of each macro nutrient stock solution which are given in Table 2 are made up to 1 litre of deionised water to prepare the “M7” medium.
Ενδείξεις που αποδεικνύουν ότι οι μάρτυρες πληρούν τα κριτήρια επικύρωσης:
A vitamin stock solution is prepared by adding three vitamins to deionised water as indicated in Table 3, and 0,1 ml of the combined vitamin stock solution are added to the final “M7” medium shortly before use.
Η επιβίωση θα πρέπει να παρουσιάζεται ως ποσοστό ανά επανάληψη και ανά συγκέντρωση.
The vitamin stock solution is stored frozen in small aliquots.
Τα αποτελέσματα θα πρέπει να παρουσιάζονται ως μέσες τιμές ± τυπική απόκλιση (SD) ή τυπικό σφάλμα (SE).
The medium is aerated and stabilised.
Στα στατιστικά στοιχεία θα πρέπει να αναφέρονται τουλάχιστον οι NOEC και LOEC και τα διαστήματα εμπιστοσύνης.
Stock solutions of trace elements for medium M4 and M7
Θα πρέπει να ακολουθείται το στατιστικό διάγραμμα ροής (προσάρτημα 8).
Stock solutions (I)
Sumpter, 1996, “Inhibition of testicular growth in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) exposed to estrogenic alkylphenolic chemicals”, Environmental Toxicology and Chemistry 15, σελ. 194-202.
Amount (mg) made up to 1 litre of deionised water
Sumpter, J.P. και S.
To prepare the combined stock solution (II):
Jobling, 1995, “Vitellogenesis As A Biomarker for Estrogenic Contamination of the Aquatic Environment”, Environmental Health Perspectives 103, σελ. 173-178.
mix the following amounts (ml) of stock solutions (I) and make up to 1 litre of deionised water
Hutchinson, S.
Final concentrations in test solutions (mg/l)
Maddix και H.
MnCl2·4H2O [1]
Trip (1999), “An in vivo testing system for endocrine disruptors in fish early life stages using induction of vitellogenin”, Environmental Toxicology and Chemistry 18, σελ. 337-347.
SrCl2·6H2O [1]
Pedersen και P.
MoO4·2H2O [1]
Bjerregaard (2001a), “Development of an ELISA for vitellogenin in whole body homogenate of zebrafish (Danio rerio)”, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 130, σελ. 119-131.
CuCl2·2H2O [1]
Andersen, L., P.
CaCl2·6H2O
Bjerregaard και B.
EDTA·2H2O [1] [2]
Korsgaard (2003), “Vitellogenin induction and brain aromatase activity in adult male and female zebrafish exposed to endocrine disrupters”, Fish Physiology and Biochemistry 28, σελ. 319-321.
FeSO4·7H2O [1] [2]
Petersen (2003), “Gonad development and vitellogenin production in zebrafish (Danio rerio) exposed to ethinylestradiol and methyltestosterone”, Aquatic Toxicology 65, σελ. 397-411.
Macro nutrient stock solutions for medium M4 and M7
Tyler (2002), “Utility of a juvenile fathead minnow screening assay for detecting (anti-)estrogenic substances”, Environmental Toxicology and Chemistry 21, σελ. 319-326.
Amount made up to 1 litre of deionised water
Wang (2007), “Toxicity of the aromatase inhibitor letrozole to Japanese medaka (Oryzias latipes) eggs, larvae and breeding adults”, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 145, σελ. 533-541.
Amount of macro nutrient stock solutions added to prepare medium M4 and M7
LeBlanc και C.V.Sullivan (1999), “Fathead minnow (Pimephales promelas) vitellogenin: purification, characterization and quantitative immunoassay for the detection of estrogenic compounds”, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 123, σελ. 113-125.
(ml/l)
Porcher (2002), “Development and validation of an enzyme-linked immunosorbent assay to measure vitellogenin in the zebrafish (Danio rerio)”, Environmental Toxicology and Chemistry 21, σελ. 1699-1708.
Final concentrations in test solutions M4 and M7
Hatano, H.
Vitamin stock solution for medium M4 and M7
Mizukami, M.
All three vitamin solutions are combined to make a single vitamin stock solution.
Yamashita, R.
Amount of vitamin stock solution added to prepare medium M4 and M7
Sakakibara και E.
Thiamine hydrochloride
Tamiya (2002), “Development and application of a monoclonal antibody-based sandwich ELISA for quantification of Japanese medaka (Oryzias latipes) vitellogenin”, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 132, σελ. 161-169.
Cyanocobalamin (B12)
Bengtsson (2004), “The juvenile three-spined stickleback (Gasterosteus aculeatus L.) as a model organism for endocrine disruption — II — kidney hypertrophy, vitellogenin and spiggin induction”, Aquatic Toxicology 70, σελ. 311-326.
Biotine
Tatarazako, N., M.
These substances differ in M4 and M7, as indicated above.
Koshio, H.
These solutions are prepared individually, then poured together and autoclaved immediately.
Hori, M.
Preparation of formulated sediment
Morita και T.
SEDIMENT COMPOSITION
Iguchi (2004), “Validation of an enzyme-linked immunosorbent assay method for vitellogenin in the medaka”, Journal of Health Science 50, σελ. 301-308.
The composition of the formulated sediment should be as follows:
Eidem, J.K., H.
Sphagnum moss peat, as close to pH 5,5-6,0 as possible, no visible plant remains, finely ground (particle size ≤ 1 mm) and air dried
Kleivdal, K.
4 - 5
Kroll, N.
> 50 % of the particles should be in the range of 50-200 μm
Denslow, R. van Aerle, C.
CaCO3, pulverised, chemically pure
Tyler, G.
0,05 - 0,1
Panter, T.
Conductivity ≤ 10 μS/cm
Hutchinson και A.
PREPARATION
Goksoyr (2006), “Development and validation of a direct homologous quantitative sandwich ELISA for fathead minnow (Pimephales promelas) vitellogenin.
The suspension is conditioned for at least two days with gentle stirring at 20 ± 2 °C, to stabilise pH and establish a stable microbial component. pH is measured again and should be 6,0 ± 0,5.
Aquatic Toxicology”, 78, σελ. 202-206.
The pH of the final mixture is measured once again and is adjusted to 6,5 to 7,5 with CaCO3 if necessary.
Ankley (2006), “Evaluation of a commercial kit for measuring vitellogenin in the fathead minnow (Pimephales promelas)”, Ecotoxicology and Environmental Safety 64, σελ. 101-105.
Then, before it is used in the chironomid toxicity test, it is recommended that the formulated sediment be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test.
Holbech, H., Petersen, G.
STORAGE
I., Norman, A., Örn, S, Norrgren, L. και Bjerregaard, P (2001b), “Suitability of zebrafish as test organism for detection of endocrine disrupting chemicals.
The dry constituents for preparation of the artificial sediment may be stored in a dry and cool place at room temperature.
Comparison of vitellogenin in plasma and whole body homogenate from zebrafish (Danio rerio) and rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)”, Nordic Council of Ministers, TemaNord 2001:597, σελ. 48-51.
The formulated (wet) sediment should not be stored prior to its use in the test.
Porcher και A.
It should be used immediately after the 7 days conditioning period that ends its preparation.
Goksoyr (2004), “Development of quantitative vitellogenin-ELISAs for fish test species used in endocrine disruptor screening”, Analytical and Bioanalytical Chemistry 378, σελ. 621-633.
OECD (1984), Earthworm, Acute Toxicity Test, Test Guideline No. 207, Guidelines for the Testing of Chemicals, OECD, Paris.
Orn, S., S.
Meller, M., Egeler, P., Roembke, J., Schallnass, H., Nagel, R. and B. Streit (1998), Short-term toxicity of lindane, hexachlorobenzene and copper sulfate on tubificid sludgeworms (Oligochaeta) in artificial media, Ecotox.
Yamani και L.
Environ.
Norrgren (2006), “Comparison of vitellogenin induction, sex ratio, and gonad morphology between zebrafish and Japanese medaka after exposure to 17 alpha-ethinylestradiol and 17 beta-trenbolone”, Archives of Environmental Contamination and Toxicology 51, σελ. 237-243.
Safety, 39:
Scholz, S. και N.
10-20.
Kluver (2009), “Effects of Endocrine Disrupters on Sexual, Gonadal Development in Fish, Sexual Development 3”, σελ. 136-151.
Chemical Characteristics of an Acceptable Dilution water
Fenske, M., G.
CONSTITUENT
Maack, C.
CONCENTRATIONS
Schafers και H.
Hardness as CaCO3
Nagahama (2004), “Two DM domain genes, DMY and DMRT1, involved in testicular differentiation and development in the medaka, Oryzias latipes”, Developmental Dynamics 231, σελ. 518-526.
Guidance for test performance
Togashi, S.
1 mm)
Hamaguchi και M.
B aperture for placing the emerged adults inside the breeding cage and to remove the laid egg ropes from the crystallisation dishes (not shown in this graphic)
Sakaizumi (2004), “Field survey of sex-reversals in the medaka, Oryzias latipes: genotypic sexing of wild populations”, Zoological Science 21, σελ. 613-619.
C breeding cage size minimum 30 cm length, 30 cm height and 30 cm width
Flick (2007), “Collapse of a fish population after exposure to a synthetic estrogen”, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 104, σελ. 8897-8901.
Example of a test vessel:
Kidd (2009), “Interspecies differences in biochemical, histopathological, and population responses in four wild fish species exposed to ethynylestradiol added to a whole lake”, Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 66, σελ. 1920-1935.
A pasteur pipette for air supply of the overlying water
Tyler (2006), “Development of chronic tests for endocrine active chemicals — Part 1.
B glass lid to prevent emerged midges from escaping
An extended fish early-life stage test for oestrogenic active chemicals in the fathead minnow (Pimephales promelas)”, Aquatic Toxicology 77, σελ. 279-290.
C water surface layer
Petersen, P.
D test vessel (glass beaker minimum 600 ml)
Jackson, K.
E sediment layer
Hylland, L.
Example of an exhauster for capturing adult midges (arrows indicate air flow direction):
Norrgren και P.
A glass tube (inner diameter ca.
Bjerregaard (2006), “Detection of endocrine disrupters: Evaluation of a Fish Sexual Development Test (FSDT)”, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 144, σελ. 57-66.
5 mm) connected to a self-priming pump B cork of vulcanised rubber, perforated with glass tube (A).
Andersen, L., K.
On the inside, the opening of glass tube (A) is covered with some cotton and a gauze (mesh size ca.
Kinnberg, H.
1 mm) to prevent damaging the midges when they are sucked into the exhauster
Holbech, B.
C transparent container (plastic or glass, length ca.
Korsgaard και P.
15 cm) for captured midges
Bjerregaard (2004), “Evaluation of a 40 day assay for testing endocrine disrupters: Effects of an anti-estrogen and an aromatase inhibitor on sex ratio and vitellogenin concentrations in juvenile zebrafish (Danio rerio)”, Fish Physiology and Biochemistry 30, σελ. 257-266.
D cork of vulcanised rubber, perforated with tube (E).
Morthorst, J.E., H.
To release midges into the breeding cage, cork D is released from container C
Holbech και P.
E tube (plastic or glass, inner diameter ca.
Bjerregaard (2010), “Trenbolone causes irreversible masculinization of zebrafish at environmentally relevant concentrations”, Aquatic Toxicology 98, σελ. 336-343.
8 mm) to collect adult midges from vessel
Metcalf (2003), “Effects of the antiandrogens, vinclozolin and cyproterone acetate on gonadal development in the Japanese medaka (Oryzias latipes)”, Aquatic Toxicology 63, σελ. 391-403.
Schematic presentation of a life-cycle test:
Tyler (2004), “Successful detection of (anti-) androgenic and aromatase inhibitors in pre-spawning adult fathead minnows (Pimephales promelas) using easily measured endpoints of sexual development”, Aquatic Toxicology 70, σελ. 11-21.
A 1st generation — test vessels containing a sediment-water system, eight replicates, 20 first instar larvae per vessel
Petersen και P.
B four test vessels for each breeding cage, A and B
Bjerregaard (2007), “Effects of the fungicide prochloraz on the sexual development of zebrafish (Danio rerio)”, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 145, σελ. 165-170.
C breeding cages (A and B) for swarming, mating and oviposition
Κεφάλαιο Γ.14 του παρόντος παραρτήματος, Δοκιμή ανάπτυξης νεαρών ψαριών.
D crystallising dishes for deposition of egg ropes
Κεφάλαιο Γ.4 του παρόντος παραρτήματος, Άμεση βιοαποικοδομησιμότητα.
E micro plates, one well for each egg rope
Κεφάλαιο Γ.37 του παρόντος παραρτήματος, Δοκιμασία ψαριών 21 ημερών:
F 2nd generation — test vessels containing a sediment-water system, eight replicates, 20 first instar larvae per vessel
Βραχυχρόνια διαλογή για οιστρογονική και ανδρογονική δραστηριότητα, και αναστολή αρωματάσης.
C.41.
Schäfers, C., Teigeler, M., Wenzel, A., Maack, G., Fenske, M., Segner, H (2007), “Concentration- and time-dependent effects of the synthetic estrogen, 17 alpha-ethinylestradiol, on reproductive capabilities of the zebrafish, Danio rerio” Journal of Toxicology and Environmental Health-Μέρος Α, 70, 9-10 σελ. 768-779.
FISH SEXUAL DEVELOPMENT TEST
Μια ουσία ή ένα μείγμα.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 234 (2011).
Βάρος ψαριού
It is based on a decision from 1998 to develop new or update existing test methods for the screening and testing of potential endocrine disrupters.
Βιοδείκτης
The Fish Sexual Development Test (FSDT) was identified as a promising test method covering a sensitive fish life stage responsive to both oestrogen and androgen-like chemicals.
Διεμφυλικό ψάρι
The test method went through an inter-laboratory validation exercise from 2006 to 2010, where Japanese medaka (Oryzias latipes), zebrafish (Danio rerio) and three spined stickleback (Gasterosteus aculeatus) were validated and fathead minnow (Pimephales promelas) was partially validated (41) (42) (43).
Ψάρι με περισσότερα του ενός ωοκύτταρα στον όρχι ανά 6 τομές που αναλύονται ή με σπερματογόνα κύτταρα στις ωοθήκες (ναι/όχι) Υπό δοκιμή χημική ουσία
This protocol includes Japanese medaka, the three-spined stickleback and zebrafish.
Κορυφαίο τελικό σημείο Που έχει επίδραση σε επίπεδο πληθυσμού
The protocol is in principle an enhancement of OECD TG 210 Fish, Early Life Stage Toxicity Test (1), where the exposure is continued until the fish are sexually differentiated, i.e. about 60 days post-hatch (dph) for Japanese medaka, the three-spined stickleback and zebrafish (the exposure period can be shorter or longer for other species that are validated in the future), and endocrine-sensitive endpoints are added.
Γονίδιο της περιοχής DM του Y χρωμοσώματος που απαιτείται για την ανάπτυξη του αρσενικού στο ρυζόψαρο Dph
The combination of the two core endocrine endpoints, vitellogenin (VTG) concentration and phenotypic sex ratio enable the test to indicate the mode of action of the test chemical.
Fish Sexual Development Test (δοκιμή σεξουαλικής ανάπτυξης ψαριών) RT-PCR
Due to the population-relevant change in phenotypic sex ratio, the FSDT can be used for hazard and risk assessment.
Reverse Transcriptase Polymerase Chain-Reaction (αντίστροφη μεταγραφάση-αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης)
However, if the test is used for hazard or risk assessment, the stickleback should not be used because the validation data available so far showed that in this species the alterations of phenotypic sex ratio by the test chemicals were uncommon.
Vitellogenin (λεκιθογενίνη)
The protocol is based on fish exposed via water to chemicals during the sex labile period in which the fish is expected to be most sensitive to the effects of endocrine disrupting chemicals that interfere with sexual development.
Πειραματικές συνθήκες για τη δοκιμή FSDT (είδη γλυκών Νέρων)
Two core endpoints are measured as indicators of endocrine-associated developmental aberrations, the VTG concentrations and sex ratios (proportions of sex) determined via gonad histology.
Ρυζόψαρο (Oryzias latipes)
Gonadal histopathology (evaluation and staging of oocytes and spermatogenetic cells) is optional.
Ζεβρόψαρο (Danio rerio)
Additionally, the genetic sex is determined whenever possible (e.g. in Japanese medaka and the three spined stickleback).
Τριάκανθος γαστερόστεος (Gasterostreus aculeatus)
The presence of a genetic sex marker is a considerable advantage as it increases the power of the sex ratio statistics and enables the detection of individual phenotypic sex reversal.
Συνεχούς ροής νερού ή ημιστατική
Other apical endpoints that should be measured include hatching rate, survival, length and body weight.