natgillin/translations-raw huggingface dataset:
χρώμα σώματος (ανοιχτό ή σκούρο), μοτίβα χρωματισμού (παρουσία κάθετων λωρίδων), και σχήμα σώματος (κεφάλι και θωρακική περιοχή).
dorsal setae setiform;
Ως εκ τούτου, οι παρατηρήσεις της φυσικής εμφάνισης των ψαριών θα πρέπει να πραγματοποιείται κατά τη διάρκεια της δοκιμής και κατά την ολοκλήρωση της μελέτης
genital shield normal, not very enlarged and not reaching the anal shield;
Μη βάναυση θανάτωση των ψαριών
posterior half of dorsal shield without unpaired setae;
Κατά την 21η ημέρα, δηλαδή κατά τον τερματισμό της έκθεσης, τα ψάρια θα πρέπει να υποβάλλονται σε ευθανασία με κατάλληλες ποσότητες τρικαΐνης (μεθανοσουλφονική τρικαΐνη, μετακαΐνη, MS-222 (CAS 886-86-2), 100-500 mg/l όπου έχει προστεθεί ποσότητα ρυθμιστικού διαλύματος 300 mg/l NaHCO3 (διττανθρακικό νάτριο, CAS 144-55-8) για τον περιορισμό του ερεθισμού του βλεννογόνου· στη συνέχεια λαμβάνονται δείγματα ιστών ή αίματος για τον προσδιορισμό της λεκιθογενίνης, όπως εξηγείται στην ενότητα για τη λεκιθογενίνη.
legs II and IV with some thick macrosetae;
Παρατήρηση των δευτερογενών χαρακτηριστικών του φύλου
dorsal seta Z5 about two times longer than J5;
Ιδίως χημικές ουσίες με ορισμένους τρόπους δράσης μπορεί να προκαλέσουν ασυνήθη εμφάνιση δευτερογενών χαρακτηριστικών του φύλου σε ζώα του αντίθετου φύλου· Για παράδειγμα, αγωνιστές των υποδοχέων ανδρογόνων, όπως η τρενβολόνη, η μεθυλοτεστοστερόνη και η διυδροτεστοστερόνη, μπορεί να κάνουν τους θηλυκούς λιποκέφαλους φοξίνους να αναπτύξουν προεξέχοντα γαμήλια φυμάτια ή τα θηλυκά ρυζόψαρα να αναπτύξουν θηλώδεις διεργασίες (11, 20, 21).
fixed digit of chelicera with 12-14 teeth and movable digit with 2 teeth;
Έχει επίσης αναφερθεί ότι οι αγωνιστές των υποδοχέων οιστρογόνων μπορούν να μειώσουν τον αριθμό των γαμήλιων φυματίων και το μέγεθος του ραχιαίου λιπώματος στα ενήλικα αρσενικά (25, 26).
Idiosoma 520-685 μm long.
Τέτοιες μακροσκοπικές μορφολογικές παρατηρήσεις μπορούν ενδεχομένως να παράσχουν χρήσιμες ποιοτικές και ποσοτικές πληροφορίες για την ενημέρωση των δυνητικών μελλοντικών απαιτήσεων για τις δοκιμές σε ψάρια.
Hypoaspis miles is also used in biological control and might get confused with H. aculeifer.
Ο αριθμός και το μέγεθος των γαμήλιων φυματίων στους λιποκέφαλους φοξίνους και οι θηλώδεις διεργασίες στα ρυζόψαρα μπορούν να προσδιοριστούν άμεσα ποσοτικά ή πιο ουσιαστικά σε διατηρημένα δείγματα.
The main difference is:
Συνιστώμενες διαδικασίες για την αξιολόγηση των δευτερογενών χαρακτηριστικών του φύλου στους λιποκέφαλους φοξίνους και στα ρυζόψαρα διατίθενται από το προσάρτημα 5α και 5β αντίστοιχα.
H. miles belongs to subgenus Cosmolaelaps and has knife-like dorsal setae while H. aculeifer belongs to subgenus Geolaelaps and has setiform dorsal setae.
Λεκιθογενίνη (VTG)
Hypoaspis aculeifer, dorsal shield with characteristic setae Hypoaspis aculeifer
Το αίμα συλλέγεται από την ουραία αρτηρία/φλέβα με τριχοειδή ηπαρινισμένα σωληνάρια αιματοκρίτη ή, εναλλακτικά, με καρδιακή παρακέντηση με σύριγγα.
Original drawings by F. Faraji
Ανάλογα με το μέγεθος των ψαριών, οι ποσότητες αίματος που μπορούν να συλλεγούν κυμαίνονται γενικά από 5 έως 60 μl ανά άτομο για τους λιποκέφαλους φοξίνους και 5-15 μl ανά άτομο για τα ζεβρόψαρα.
Hypoaspis miles After Hughes, 1976
Το πλάσμα διαχωρίζεται από το αίμα μέσω φυγοκέντρησης, και φυλάσσεται με αναστολείς πρωτεάσης στους – 80°C, μέχρι να αναλυθεί για λεκιθογενίνη.
Hypoaspis aculeifer After Hughes, 1976
Εναλλακτικά, στα ρυζόψαρα θα χρησιμοποιηθεί το ήπαρ, ενώ στα ζεβρόψαρα μπορεί να χρησιμοποιηθεί ομογενοποιημένο δείγμα κεφαλής/ουράς για τον προσδιορισμό της λεκιθογενίνης (προσάρτημα 6).
Leg IV (female)
Η μέτρηση της λεκιθογενίνης (VTG) θα πρέπει να βασίζεται σε επικυρωμένη ομόλογη μέθοδο ELISA, με χρήση πρότυπων και ομόλογων αντισωμάτων VTG.
Leg II (female)
Συνιστάται η χρήση μιας μεθόδου που να επιτρέπει την ανίχνευση επιπέδων VTG τόσο χαμηλών όσο λίγων ng/ml πλάσματος (ή ng/mg ιστού), που αποτελεί το επίπεδο υποβάθρου σε μη εκτεθειμένα αρσενικά ψάρια.
Basic information on the biology of Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer
Ο έλεγχος ποιότητας της ανάλυσης της λεκιθογενίνης θα διεξαχθεί με τη χρήση προτύπων, τυφλών δειγμάτων και τουλάχιστον διπλών αναλύσεων.
Hypoaspis aculeifer belongs to the family Lealapidae, order Acari (mites), class Arachnida, tribe Arthropoda.
Για κάθε μέθοδο ELISA θα πρέπει να διεξάγεται μια δοκιμή για την επίδραση της μήτρας (επίδραση της αραίωσης του δείγματος) για τον προσδιορισμό του ελάχιστου συντελεστή αραίωσης του δείγματος.
They are living in all kinds of soil and feed on other mites, nematodes, enchytraeids and collembolans (26).
Κάθε τρυβλίο ELISA που χρησιμοποιείται για δοκιμές VTG θα πρέπει να περιλαμβάνει τα ακόλουθα δείγματα ελέγχου της ποιότητας:
In case of food shortage they switch to cannibalism (27).
τουλάχιστον 6 πρότυπα βαθμονόμησης που καλύπτουν το εύρος των αναμενόμενων συγκεντρώσεων λεκιθογενίνης και τουλάχιστον μία τυφλή δοκιμή μη ειδικής δέσμευσης (ανάλυση εις διπλούν).
Predatory mites are segmented in idiosoma and gnathosoma.
Η απορρόφηση των εν λόγω τυφλών δειγμάτων πρέπει να είναι μικρότερη από το 5 % της μέγιστης απορρόφησης του προτύπου βαθμονόμησης.
A clear differentiation of the idiosoma in prosoma (head) and opisthosoma (abdomen) is missing.
Αναλύονται τουλάχιστον δύο κλάσματα (διπλές πλάκες βοθρίων) από κάθε αραίωση δείγματος.
The gnathosoma (head shield) contains the instruments for feeding such as palps and chelicera.
Διπλές πλάκες βοθρίων που διαφέρουν περισσότερο του 20 % θα πρέπει να επανυποβάλλονται σε ανάλυση.
The chelicers are trifurcated and tusked with teeth of different shape.
Ο συντελεστής συσχέτισης (R2) για τις καμπύλες βαθμονόμησης θα πρέπει να είναι μεγαλύτερος του 0,99.
Beside ingestion the males are using their chelicers mainly to transfer the spermatophores to the females.
Ωστόσο, η υψηλή συσχέτιση δεν αρκεί για να διασφαλιστεί επαρκής πρόβλεψη της συγκέντρωσης σε όλο το εύρος τιμών.
A dorsal shield covers nearly completely the idiosoma.
Πέρα από την ύπαρξη μίας αρκούντως υψηλής συσχέτισης για την καμπύλη βαθμονόμησης, η συγκέντρωση του κάθε προτύπου, όπως υπολογίζεται από την καμπύλη βαθμονόμησης, θα πρέπει να κυμαίνεται μεταξύ 70 και 120 % της ονομαστικής συγκέντρωσης.
A big part of the female idiosoma is occupied by the reproductive organs, which are in particular distinct shortly before egg deposition.
Εάν οι ονομαστικές συγκεντρώσεις τείνουν να απομακρύνονται από τη γραμμή παλινδρόμησης της βαθμονόμησης (π.χ. σε χαμηλότερες συγκεντρώσεις), μπορεί να είναι απαραίτητο να χωριστεί η καμπύλη βαθμονόμησης σε χαμηλό και υψηλό εύρος τιμών ή να χρησιμοποιηθεί μη γραμμικό μοντέλο για να ενταχθούν επαρκώς τα δεδομένα απορρόφησης.
Ventrally, two shields can be found, the sternal and the genital shield.
Εάν η καμπύλη διαχωριστεί, αμφότερα τα τμήματα γραμμής θα πρέπει να έχουν R2 > 0,99.
All legs are provided with bristles and thorns.
Το όριο ανίχνευσης (LOD) ορίζεται ως η συγκέντρωση του χαμηλότερου αναλυτικού προτύπου, και το όριο ποσοτικού προσδιορισμού (LOQ) ορίζεται ως η συγκέντρωση του χαμηλότερου αναλυτικού προτύπου πολλαπλασιαζόμενο με τον χαμηλότερο συντελεστή αραίωσης.
The bristles are used to anchor when moving in or on top of the soil.
Για κάθε ημέρα που εκτελούνται δοκιμές λεκιθογενίνης, αναλύεται ένα δείγμα εμπλουτισμού που καταρτίζεται με χρήση ενός προτύπου αναφοράς μεταξύ διαφορετικών δοκιμών (προσάρτημα 7).
The first pair of legs is used mainly as antenna.
Ο λόγος της αναμενόμενης συγκέντρωσης προς τη μετρούμενη συγκέντρωση θα πρέπει να αναφέρεται μαζί με τα αποτελέσματα από κάθε σύνολο δοκιμών που διενεργούνται τη συγκεκριμένη ημέρα.
The second pair of legs is used not only for moving but also to clinch the prey.
Αξιολόγηση των αποκρίσεων των βιοδεικτών με ανάλυση διασποράς (ANOVA)
The thorns of the fourth pair of legs can serve as protection as well as “moving motor” (28).
Για τον προσδιορισμό δυνητικής ενδοκρινικής δραστικότητας μιας χημικής ουσίας, οι αποκρίσεις συγκρίνονται μεταξύ των αγωγών και των ομάδων μαρτύρων με ανάλυση διασποράς (ANOVA).
Males are 0,55 - 0,65 mm long and have a weight of 10 - 15 μg.
Εάν χρησιμοποιείται μάρτυρας με διαλύτη, θα πρέπει να εκτελείται κατάλληλη στατιστική δοκιμή μεταξύ του νερού αραίωσης και των μαρτύρων με διαλύτη για κάθε τελικό σημείο.
Females are 0,8 - 0,9 mm long and are weighing 50 - 60 μg (8) (28) (Fig 1).
Οδηγίες για τον τρόπο χειρισμού των στοιχείων του νερού αραίωσης και του μάρτυρα με διαλύτη στη μετέπειτα στατιστική ανάλυση περιέχονται στον ΟΟΣΑ, 2006c (27).
Figure 1
Όλα τα δεδομένα βιολογικής απόκρισης θα πρέπει να αναλυθούν και να αναφέρονται χωριστά ανά φύλο.
Female, male, protonymph and larvae of H. aculeifer.
Άλλες στατιστικές δοκιμές μπορούν να χρησιμοποιηθούν (π.χ. δοκιμή Jonckheere-Terpstra ή δοκιμή Williams) εάν η σχέση δόσης-απόκρισης είναι σχεδόν μονοτονική.
In the ovar the sperms mature and will be stored.
Ένα στατιστικό διάγραμμα ροής παρέχεται στο προσάρτημα 8 για να βοηθήσει στην απόφαση σχετικά με την καταλληλότερη στατιστική δοκιμή που πρέπει να χρησιμοποιηθεί.
Fertilisation takes place only after maturation of the sperms in the ovar.
Συμπληρωματικές πληροφορίες διατίθενται επίσης από το έγγραφο του ΟΟΣΑ σχετικά με τις τρέχουσες προσεγγίσεις για στατιστική ανάλυση των δεδομένων οικοτοξικότητας (Current Approaches to Statistical Analysis of Ecotoxicity Data) (27).
The fertilised or unfertilised eggs will be deposited by the females in clumps or separately, preferably in crevices or holes.
Αναφορά των αποτελεσμάτων των δοκιμών
Copulated females can bear juveniles of both sexes whereas from eggs of uncopulated females only male juveniles are hatching.
Στα δεδομένα της μελέτης θα πρέπει να περιλαμβάνονται τα εξής:
During development to the adult four phases of development (egg — larvae, larvae — protonymph, protonymph — deutonymph, deutonymph — adult) are passed through.
Εγκαταστάσεις δοκιμών:
The egg is milky white, hyaline, elliptical and approximately 0,37 mm long with a solid mantle.
υπεύθυνο προσωπικό και οι αρμοδιότητές του στη μελέτη·
According to (8), the larvae are between 0,42 - 0,45 mm in size.
Φυσική μορφή και φυσικοχημικές ιδιότητες που άπτονται της δοκιμασίας,
The chelicers, having some few small denticles, are used to hatch from the egg.
Μέθοδος και συχνότητα προετοιμασίας των συγκεντρώσεων δοκιμής
After the first moult, 1 - 2 days after hatching, the protonymphs are developed.
Πληροφορίες για τη σταθερότητα και τη βιοαποδομησιμότητα
They are also white, the size is 0,45 - 0,62 mm (8) and they have four pairs of legs.
Διαλύτης:
On the chelicers the teeth are completely present.
Χαρακτηρισμός του διαλύτη (φύση, χρησιμοποιούμενη συγκέντρωση)
Beginning with that stadium the mites start to forage.
Είδος και στέλεχος
The chelicers can also be used to rip bigger particles out of food nuggets (28).
Προμηθευτής και συγκεκριμένες εγκαταστάσεις του προμηθευτή
After one further moult the deutonymphs are developed.
Ηλικία των ψαριών κατά την έναρξη της δοκιμής και αναπαραγωγική κατάσταση / κατάσταση ωοτοκίας
They are 0,60 - 0,80 mm (8) in size and yellow to light brown in colour.
Λεπτομέρειες σχετικά με τη διαδικασία εγκλιματισμού των ζώων
Beginning with that phase they can be separated into females and males.
Σωματικό βάρος των ψαριών κατά την έναρξη της έκθεσης (από ένα μερικό δείγμα από το απόθεμα ψαριών)
After further ecdysis, during which time the animals are inactive and the brown shield is developing (approx. after 14 days) the mites are adult (28) (29) (30).Their life span is between 48 and 100 days at 25 °C (27).
Συνθήκες δοκιμής:
Appendix 8
Χρησιμοποιηθείσα διαδικασία δοκιμής (είδος δοκιμής, ρυθμός πλήρωσης, πυκνότητα πληθυσμού, κ.λπ.)·
Summary and time schedule of the main actions to be taken in order to perform the Hypoaspis test
Μέθοδος παρασκευής των διαλυμάτων παρακαταθήκης και ταχύτητα ροής·
Time (days)
Ονομαστικές συγκεντρώσεις δοκιμής, εβδομαδιαία μετρούμενες συγκεντρώσεις των διαλυμάτων δοκιμής και αναλυτική μέθοδο που χρησιμοποιείται, μέσες τιμές των μετρηθεισών τιμών και οι τυπικές αποκλίσεις τους στα δοχεία δοκιμής και ενδείξεις που αποδεικνύουν ότι οι μετρήσεις αναφέρονται στις συγκεντρώσεις της υπό δοκιμή χημικής ουσίας σε αληθές διάλυμα·
test start = day 0
Χαρακτηριστικά του νερού αραίωσης (συμπεριλαμβανομένων του pH, της σκληρότητας, της αλκαλικότητας, της θερμοκρασίας, της συγκέντρωσης διαλελυμένου οξυγόνου, των επιπέδων υπολειμματικού χλωρίου, του ολικού οργανικού άνθρακα, των αιωρούμενων στερεών και τυχόν άλλων μετρήσεων)
Activity / task
Ποιότητα του νερού στα δοχεία δοκιμής:
Day – 35
Χρησιμοποιηθείσες στατιστικές αναλυτικές τεχνικές, επεξεργασία των δεδομένων και αιτιολόγηση των χρησιμοποιηθεισών τεχνικών·
Twice or three times a week:
Στοιχεία σχετικά με τις βιολογικές παρατηρήσεις της μακροσκοπικής μορφολογίας, συμπεριλαμβανομένων των δευτερογενών χαρακτηριστικών του φύλου και της λεκιθογενίνης·
supply with sufficient food
Αποτελέσματα της ανάλυσης των δεδομένων, κατά προτίμηση σε μορφή πίνακα και γραφική μορφή·
Day – 5 (+/- 2)
Στοιχεία για οποιαδήποτε ασυνήθη αντίδραση των ψαριών και κάθε ορατή επίδραση που προκλήθηκε από την υπό δοκιμή χημική ουσία.
Prepare artificial soil
ΟΔΗΓΙΕΣ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΚΑΙ ΤΗΝ ΑΠΟΔΟΧΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΤΗΣ ΔΟΚΙΜΗΣ
Day – 4 (+/- 2)
Η ενότητα αυτή περιλαμβάνει ορισμένα θέματα που πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των δοκιμών για τα διάφορα τελικά σημεία που μετρήθηκαν.
Determine WHC of artificial soil
Τα αποτελέσματα θα πρέπει να ερμηνεύονται με ιδιαίτερη προσοχή όταν η υπό δοκιμή χημική ουσία φαίνεται να προκαλεί έκδηλη τοξικότητα ή επιδρά στη γενική κατάσταση του ζώου δοκιμής.
Dry over night
Στον καθορισμό του πεδίου των συγκεντρώσεων της δοκιμής, θα πρέπει να λαμβάνεται μέριμνα ώστε να μη υπερβαίνεται η μέγιστη ανεκτή συγκέντρωση για να είναι δυνατή η ουσιαστική ερμηνεία των δεδομένων.
Next day:
Είναι σημαντικό να υπάρχει τουλάχιστον μία αγωγή στην οποία δεν υπάρχουν ενδείξεις τοξικών επιδράσεων.
weigh samples and calculate WHC
Ενδείξεις νόσου και ενδείξεις τοξικών επιδράσεων θα πρέπει να αξιολογούνται ενδελεχώς και να αναφέρονται.
Day – 4 (+/– 2)
Για παράδειγμα, η παραγωγή λεκιθογενίνης (VTG) στα θηλυκά μπορεί επίσης να επηρεαστεί από γενική τοξικότητα και μη ενδοκρινικούς τοξικούς τρόπους δράσης, π.χ. ηπατοτοξικότητα.
Pre moisture artificial soil to achieve 20 - 30 % of WHC
Ωστόσο, η ερμηνεία των επιδράσεων μπορεί να ενισχυθεί με άλλα επίπεδα αγωγής στα αποτελέσματα των οποίων δεν επιδρά η συστημική τοξικότητα ως συγχυτικός παράγοντας.
Start test:
Παραδείγματα από το φάσμα τιμών που ανέκυψαν στις ομάδες μαρτύρων και αγωγής είναι διαθέσιμες στις εκθέσεις επικύρωσης (1, 2, 3, 4).
Weigh each replicate
Υψηλές τιμές VTG σε αρσενικούς μάρτυρες μπορούν να διακυβεύσουν την ικανότητα απόκρισης της δοκιμής και την ικανότητα ανίχνευσης ασθενών αγωνιστών οιστρογόνων.
Set up abiotic controls for moisture content and pH, 2 replicates for each treatment
Χαμηλές τιμές VTG σε θηλυκούς μάρτυρες μπορούν να διακυβεύσουν την ικανότητα απόκρισης της δοκιμής και την ικανότητα ανίχνευσης αναστολέων αρωματάσης και αγωνιστών οιστρογόνων.
Dry moisture controls over night
Οι μελέτες επικύρωσης χρησιμοποιήθηκαν για τη δημιουργία των εν λόγω οδηγιών.
weigh moisture controls
Εάν το εργαστήριο δεν έχει πραγματοποιήσει τη δοκιμή στο παρελθόν ή εάν έχουν πραγματοποιηθεί ουσιαστικές αλλαγές (π.χ. αλλαγή του στελέχους ή του προμηθευτή ψαριών) είναι σκόπιμο να διεξαχθεί μελέτη τεχνικής ικανότητας.
measure pH of dried abiotic controls
Συνιστάται η χρήση χημικών ουσιών που καλύπτουν ένα φάσμα τρόπων δράσης ή επιπτώσεων για ορισμένα από τα τελικά σημεία της δοκιμής.
Day 3, 6, 9, 12 (approx.)
Vitellogenin induction by 17ß-estradiol and 17ß-ethinylestradiol in male zebrafish (Danio rerio).
weigh water content controls
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as “signposts,” not “traffic lights,” in risk assessment.
measure pH of dried controls
Συντμήσεις και ορισμοί
Day 16
Χημική ουσία
Terminate extraction
μια ουσία ή ένα μείγμα
Day 16 +
Συντελεστής μεταβλητότητας.
Record number of adults and juveniles in extracted material
Ενζυμική δοκιμή ανοσοπροσρόφησης
Report results on template tables
Κάθε ουσία ή μείγμα που υποβάλλεται σε δοκιμή με τη χρήση της παρούσας μεθόδου δοκιμών
Report testing procedure in test protocol sheets
Το υγρό βάρος των ψαριών κατ' όγκο νερού.
C.37.
Πυκνότητα πληθυσμού
AY FISH ASSAY:
Ο αριθμός των ψαριών κατ' όγκο νερού.
A SHORT-TERM SCREENING FOR OESTROGENIC AND ANDROGENIC ACTIVITY, AND AROMATASE INHIBITION
VTG (Λεκιθογενίνη)
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 230 (2009).
Πρόδρομη ουσία των φωσφογλυκολιποπρωτεϊνών της λεκίθου του αυγού σε σεξουαλικά ενεργά θηλυκά όλων των ωοτόκων ειδών.
The need to develop and validate a fish assay capable of detecting certain endocrine active chemicals originates from the concerns that environmental levels of chemicals may cause adverse effects in both humans and wildlife due to the interaction of these chemicals with the endocrine system.
Άξονας (HPG)
In 1998, the OECD initiated a high-priority activity to revise existing guidelines and to develop new guidelines for the screening and testing of potential endocrine disrupters.
Άξονας υποθαλάμου-υπόφυσης-γονάδων.
One element of the activity was to develop a Test Guideline for the screening of chemicals active on the endocrine system of fish species.
ΜΑΣ
The 21-day Fish Endocrine Screening Assay underwent an extensive validation programme consisting of inter-laboratory studies with selected chemicals to demonstrate the relevance and reliability of the assay for the detection of oestrogenic and aromatase inhibiting chemicals (1, 2, 3, 4, 5) in the three fish species investigated (the fathead minnow, the Japanese medaka and the zebrafish);
Μέγιστη ανεκτή συγκέντρωση, που αντιπροσωπεύει περίπου 10 % της LC50.
the detection of androgenic activity is possible in the fathead minnow and the medaka, but not in the zebrafish.
Πειραματικές συνθήκες για τη δοκιμή ενδοκρινικού έλεγχου σε ψάρια
This test method does not allow the detection of anti-androgenic chemicals.
Συνιστώμενα είδη
The validation work has been peer-reviewed by a panel of experts nominated by the National Coordinators of the Test Guideline Programme (6).
Λιποκέφαλος φοξίνος
The assay is not designed to identify specific mechanisms of hormonal disruption because the test animals possess an intact hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis, which may respond to chemicals that impact on the HPG axis at different levels.
Zεβρόψαρο
The Fish Short Term Reproduction assay (OECD TG 229) includes fecundity and, as appropriate, gonadal histopathology for the fathead minnow, as well as all endpoints included in this test method.
Θερμοκρασία νερού
This test method describes an in vivo screening assay where sexually mature male and spawning female fish are held together and exposed to a chemical during a limited part of their life-cycle (21 days).
Ποιότητα φωτισμού
At termination of the 21-day exposure period, depending on the species used, one or two biomarker endpoint(s) are measured in males and females as indicators of oestrogenic, aromatase inhibition or androgenic activity of the test chemical;
Λαμπτήρες φθορισμού (ευρέως φάσματος)
these endpoints are vitellogenin and secondary sexual characteristics.
10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, ή 50-100 ft-c (επίπεδα στο περιβάλλον του εργαστηρίου)
Vitellogenin is measured in fathead minnow, Japanese medaka and zebrafish, whereas secondary sex characteristics are measured in fathead minnow and Japanese medaka only.
Φωτοπερίοδος [οι φάσεις μετάβασης (χάραμα/σούρουπο) είναι προαιρετικές, ωστόσο δεν θεωρούνται απαραίτητες]
This bioassay serves as an in vivo screening assay for certain endocrine modes of action and its application should be seen in the context of the “OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals” (28).
16 ώρες φως, 8 ώρες σκοτάδι
INITIAL CONSIDERATIONS AND LIMITATIONS
12-16 ώρες φως, 12-8 ώρες σκοτάδι
Vitellogenin is normally produced by the liver of female oviparous vertebrates in response to circulating endogenous oestrogen.
< 5 g ανά l
It is a precursor of egg yolk proteins and, once produced in the liver, travels in the bloodstream to the ovary, where it is taken up and modified by developing eggs.
Μέγεθος θαλάμου δοκιμής
Vitellogenin is almost undetectable in the plasma of immature female and male fish because they lack sufficient circulating oestrogen;
10 l (τουλάχιστον)
however, the liver is capable of synthesizing and secreting vitellogenin in response to exogenous oestrogen stimulation.
2 l (τουλάχιστον)
The measurement of vitellogenin serves for the detection of chemicals with various oestrogenic modes of action.
5 l (τουλάχιστον)
The detection of oestrogenic chemicals is possible via the measurement of vitellogenin induction in male fish, and it has been abundantly documented in the scientific peer-reviewed literature (e.g. (7)).
Όγκος διαλύματος δοκιμής
Vitellogenin induction has also been demonstrated following exposure to aromatizable androgens (8, 9).
8 l (τουλάχιστον)
A reduction in the circulating level of oestrogen in females, for instance through the inhibition of the aromatase converting the endogenous androgen to the natural oestrogen 17β-estradiol, causes a decrease in the vitellogenin level, which is used to detect chemicals having aromatase inhibiting properties (10, 11).
1,5 l (τουλάχιστον)
The biological relevance of the vitellogenin response following oestrogenic/aromatase inhibition is established and has been broadly documented.
4 l (τουλάχιστον)
However, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Ανανεώσεις όγκου διαλυμάτων δοκιμής
Several measurement methods have been successfully developed and standardised for routine use.
Τουλάχιστον 6 ημερησίως
This is the case of species-specific Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) methods using immunochemistry for the quantification of vitellogenin produced in small blood or liver samples collected from individual fish (12, 13, 14, 15, 16, 17, 18).
Τουλάχιστον 5 ημερησίως
Fathead minnow blood, zebrafish blood or head/tail homogenate, and medaka liver are sampled for VTG measurement.
Βλ. σημείο 20
In medaka, there is a good correlation between VTG measured from blood and from liver (19).
Θηλυκά 1,5 ± 20 %
Appendix 6 provides the recommended procedures for sample collection for vitellogenin analysis.
Αρσενικά:
Kits for the measurement of vitellogenin are widely available;
Θηλυκά 0,35 ± 20 %
such kits should be based on a validated species-specific ELISA method.
Θηλυκά 0,65 ± 20 %
Secondary sex characteristics in male fish of certain species are externally visible, quantifiable and responsive to circulating levels of endogenous androgens;
Αριθμός ψαριών ανά δοχείο δοκιμής
this is the case for the fathead minnow and the medaka — but not for zebrafish, which does not possess quantifiable secondary sex characteristics.
6 (2 αρσενικά και 4 θηλυκά)
Females maintain the capacity to develop male secondary sex characteristics, when they are exposed to androgenic chemicals in water.
10 (5 αρσενικά και 5 θηλυκά)
Several studies are available in the scientific literature to document this type of response in fathead minnow (20) and medaka (21).
Αρ. αγωγών
A decrease in secondary sex characteristics in males should be interpreted with caution because of low statistical power, and should be based on expert judgement and weight of evidence.
= 3 (συν κατάλληλοι μάρτυρες)
There are limitations to the use of zebrafish in this assay, due to the absence of quantifiable secondary sex characteristics responsive to androgenic acting chemicals.
Αρ. δοχείων ανά αγωγή
In the fathead minnow, the main indicator of exogenous androgenic exposure is the number of nuptial tubercles located on the snout of the female fish.
4 κατ' ελάχιστο.
In the medaka, the number of papillary processes constitutes the main marker of exogenous exposure to androgenic chemicals in female fish.
2 κατ' ελάχιστο.
Appendix 5A and Appendix 5B indicate the recommended procedures to follow for the evaluation of sex characteristics in fathead minnow and in medaka, respectively.
Αριθμός ψαριών ανά συγκέντρωση δοκιμής
Definitions used in this test method are given in Appendix 1.