natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Τιμές επαναληψιμότητας για τα εξετασθέντα αμινοξέα. Η επαναληψιμότητα εκφραζόμενη ως «τυπική απόκλιση εντός εργαστηρίου» της προαναφερθείσας διεργαστηριακής σύγκρισης, εμφαίνεται στους ακόλουθους πίνακες:
The repeatability expressed as ‘within laboratory standard deviation’ of the abovementioned intercomparison is given in the tables below:
Τυπική απόκλιση εντός εργαστηρίου (Sr) σε g/kg
Within Laboratory Standard Deviation (Sr) in g/kg
Συντελεστής διακύμανσης ( %) για την τυπική απόκλιση εντός εργαστηρίου (Sr)
Coefficient of Variation (%) for Within Laboratory Standard Deviation (Sr)
Τα σχετικά αποτελέσματα για την τυπική απόκλιση μεταξύ εργαστηρίων για τη διεργαστηριακή σύγκριση που αναφέρθηκε παραπάνω, εμφαίνονται στον ακόλουθο πίνακα:
The results for between laboratory standard deviation by the abovementioned intercomparison are given in the table below:
Τυπική απόκλιση μεταξύ εργαστηρίων (SR) σε g/kg
Between Laboratory Standard Deviation (SR) in g/kg
Συντελεστής διακύμανσης ( %) για την τυπική απόκλιση μεταξύ εργαστηρίων (SR)
Coefficient of Variation (%) for Between Laboratory Standard Deviation (SR)
Χρήση υλικών αναφοράς
Use of reference materials
Η σωστή εφαρμογή της μεθόδου ελέγχεται πραγματοποιώντας επανειλημμένες μετρήσεις των πιστοποιημένων υλικών αναφοράς που είναι διαθέσιμα.
The correct application of the method shall be verified by making replicate measurements of certified reference materials when available.
Συνιστάται η διακρίβωση με πιστοποιημένο διάλυμα διακριβώσεων αμινοξέων.
Calibration with certified amino acid calibration solution is recommended.
Λόγω διαφορών μεταξύ αναλυτών αμινοξέων, ως κατευθυντήρια οδός πρέπει να χρησιμοποιούνται οι τελικές συγκεντρώσεις των διαλυμάτων διακρίβωσης των αμινοξέων (βλέπε παραγράφους 3.27.4 και 3.27.5) και του υδρολύματος (βλέπε παράγραφο 5.3.4).
Because of differences between amino acid analysers the final concentrations of the calibration solutions of standard amino acids (see 3.27.4 and 3.27.5) and of the hydrolysate (see 5.3.4) shall be taken as a guideline.
Το πεδίο της γραμμικής ανταπόκρισης της συσκευής, πρέπει να ελεγχθεί για όλα τα αμινοξέα.
The range of linear response of the apparatus has to be checked for all amino acids.
Το πρότυπο διάλυμα διαλύεται με ρυθμιστικό διάλυμα κιτρικού άλατος προκειμένου να παρουσιασθούν οι περιοχές αιχμής στο μέσο του πεδίου.
The standard solution is diluted with citrate buffer to give peak areas in the middle of the range.
Όταν για την ανάλυση των προϊόντων υδρόλυσης χρησιμοποιείται εξοπλισμός υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης, οι πειραματικές συνθήκες πρέπει να βελτιστοποιούνται σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή.
Where high performance liquid chromatographic equipment is used to analyse the hydrolysates, the experimental conditions must be optimised in accordance with the manufacturer's recommendations.
Με την εφαρμογή της μεθόδου σε ζωοτροφές που περιέχουν περισσότερο από 1 % χλωρίδιο (συμπυκνώματα, ανόργανες ζωοτροφές, συμπληρωματικές ζωοτροφές) θα μπορούσε να υπάρξει εκτίμηση κατώτερη της κανονικής όσον αφορά τη μεθειονίνη και πρέπει να υπάρξει ειδική αγωγή.
By applying the method to feed containing more than 1 % chloride (concentrate, mineral feeds, supplementary feeds) underestimation of methionine could occur and special treatment has to be done.
ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΘΡΥΠΤΟΦΑΝΗΣ
DETERMINATION OF TRYPTOPHAN
Η μέθοδος επιτρέπει τον προσδιορισμό της συνολικής και της ελεύθερης θρυπτοφάνης σε ζωοτροφές.
The method makes the determination possible of the total and free tryptophan in feed.
Δεν γίνεται διάκριση μεταξύ D- και L-μορφών.
It does not distinguish between D- and L- forms.
Για τον προσδιορισμό της συνολικής θρυπτοφάνης, το δείγμα υδρολύεται υπό αλκαλικές συνθήκες με κορεσμένο διάλυμα υδροξειδίου του βαρίου και θερμαίνεται στους 110 oC για 20 ώρες.
For the determination of the total tryptophan, the sample is hydrolysed under alkaline conditions with saturated barium hydroxide solution and heated to 110 oC for 20 hours.
Μετά την υδρόλυση, προστίθεται εσωτερικό πρότυπο.
After hydrolysis internal standard is added.
Για τον προσδιορισμό της ελεύθερης θρυπτοφάνης, το δείγμα εκχυλίζεται υπό ήπιες όξινες συνθήκες παρουσία εσωτερικού προτύπου.
For the determination of free tryptophan, the sample is extracted under mild acidic conditions in the presence of internal standard.
Η θρυπτοφάνη και το εσωτερικό πρότυπο στο υδρόλυμα ή στο εκχύλισμα προσδιορίζονται μέσω HPLC με ανίχνευση φθορισμού.
The tryptophan and the internal standard in the hydrolysate or in the extract are determined by HPLC with fluorescence detection.
Πρέπει να χρησιμοποιείται δισαπεσταγμένο νερό ή νερό ισοδύναμης καθαρότητας (αγωγιμότητα < 10 μS/cm).
Double distilled water or water of equivalent quality must be used (conductivity < 10 μS/cm).
Πρότυπη ουσία: θρυπτοφάνη (καθαρότητα/περιεκτικότητα ≥ 99 %) ξηρανθείσα υπό κενό υπεράνω πεντοξειδίου του φωσφόρου.
Standard substance: tryptophan (purity/content ≥ 99 %) dried under vacuum over phosphorous pentoxide.
Ουσία εσωτερικού προτύπου: α-μεθυλο-θρυπτοφάνη (καθαρότητα/περιεκτικότητα ≥ 99 %), ξηρανθείσα υπό κενό υπεράνω πεντοξειδίου του φωσφόρου.
Internal standard substance: α-methyl-tryptophan (purity/content ≥ 99 %), dried under vacuum over phosphorous pentoxide.
Οκταένυδρο υδροξείδιο του βαρίου [πρέπει να λαμβάνεται πρόνοια ώστε το Ba(OH)2 .8 H2O να μην εκτίθεται υπερβολικά στον αέρα για την αποφυγή σχηματισμού BaCO3, πράγμα το οποίο μπορεί να προκαλέσει προβλήματα στον προσδιορισμό] (βλέπε παρατήρηση 9.3).
Barium hydroxide octa-hydrate (care shall be taken not to expose the Ba(OH)2 .8 H2O excessively to air in order to avoid formation of BaCO3, which could disturb the determination) (see observation 9.3).
Ορθοφωσφορικό οξύ, w (w/w) = 85 %.
Ortho-phosphoric acid, w (w/w) = 85 %.
Υδροχλωρικό οξύ, ρ201,19 g/ml.
Hydrochloric acid, ρ201,19 g/ml.
Μεθανόλη, καθαρότητας ισοδύναμης με HPLC
Methanol, equivalent to HPLC grade.
40,0 g NaOH (3.5) διαλύονται σε νερό και το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρις όγκου 1 λίτρου με νερό (3.1).
Dissolve 40,0 g NaOH (3.5) in water and make up to 1 litre with water (3.1).
Υδροχλωρικό οξύ, c = 6 mol/l:
Hydrochloric acid, c = 6 mol/l:
Λαμβάνονται 492 ml HCl (3.7) και συμπληρώνονται μέχρις όγκου 1 λίτρου με νερό.
Take 492 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Υδροχλωρικό οξύ, c = 1 mol/l:
Hydrochloric acid, c = 1 mol/l:
Λαμβάνονται 82 ml HCl (3.7) και συμπληρώνονται μέχρις όγκου 1 λίτρου με νερό.
Take 82 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Υδροχλωρικό οξύ, c= 0,1 mol/l:
Hydrochloric acid, c = 0,1 mol/l:
Λαμβάνονται 8,2 ml HCl (3.7) και συμπληρώνονται μέχρις όγκου 1 λίτρου με νερό.
Take 8,2 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Ορθοφωσφορικό οξύ, c = 0,5 mol/l:
Ortho-phosphoric acid, c = 0,5 mol/l:
Λαμβάνονται 34 ml ορθοφωσφορικού οξέος (3.6) και συμπληρώνονται μέχρις όγκου 1 λίτρου με νερό (3.1).
Take 34 ml ortho-phosphoric acid (3.6) and make up to 1 litre with water (3.1).
Πυκνό διάλυμα θρυπτοφάνης (3.2), c = 2,50 μmol/ml:
Concentrated solution of tryptophan (3.2), c = 2,50 μmol/ml:
Σε ογκομετρική φιάλη 500 ml διαλύονται 0,2553 g θρυπτοφάνης (3.2) σε υδροχλωρικό οξύ (3.13) και συμπληρώνονται μέχρι τη χαραγή με υδροχλωρικό οξύ (3.13).
In a 500 ml volumetric flask dissolve 0,2553 g tryptophan (3.2) in hydrochloric acid (3.13) and make up to the mark with hydrochloric acid (3.13).
Αποθηκεύεται στους - 18 oC για τέσσερις εβδομάδες το πολύ.
Store at - 18 oC for a maximum of 4 weeks.
Πυκνό διάλυμα εσωτερικού προτύπου, c = 2,50 μmol/ml:
Concentrated internal standard solution, c = 2,50 μmol/ml:
Σε ογκομετρική φιάλη 500 ml διαλύονται 0,2728 g α-μεθυλο-θρυπτοφάνης (3.3) σε υδροχλωρικό οξύ (3.13) και το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με υδροχλωρικό οξύ (3.13).
In a 500 ml volumetric flask dissolve 0,2728 g α-methyl-tryptophan (3.3) in hydrochloric acid (3.13) and make up to the mark with hydrochloric acid (3.13).
Πρότυπο διάλυμα βαθμονόμησης θρυπτοφάνης και εσωτερικού προτύπου:
Calibration standard solution of tryptophan and internal standard:
Λαμβάνονται 2,00 ml πυκνού διαλύματος θρυπτοφάνης (3.15), και 2,00 ml πυκνού διαλύματος εσωτερικού προτύπου (α-μεθυλο-θρυπτοφάνη) (3.16).
Take 2,00 ml concentrated solution of tryptophan (3.15), and 2,00 ml of concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Αραιώνονται με νερό (3.1) και μεθανόλη (3.8) μέχρι περίπου τον ίδιο όγκο και την ίδια περίπου συγκέντρωση μεθανόλης (10-30 %) όπως και το τελικό υδρόλυμα.
Dilute with water (3.1) and methanol (3.8) to approximately the same volume and to approximately the same concentration of methanol (10 %-30 %) as the finished hydrolysate.
Το διάλυμα παρασκευάζεται για άμεση χρήση.
This solution must be prepared freshly before use.
Κατά τη διάρκεια της παρασκευής, προστατεύεται από το άμεσο ηλιακό φως.
Protect from direct sunlight during preparation.
1,1,1-τριχλωρο-2-μεθυλο-2-προπανόλη.
1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol.
Αιθανολαμίνη w (w/w) > 98 %.
Ethanolamine w (w/w) > 98 %.
Διάλυμα 1 g 1,1,1-τριχλωρο-2-μεθυλο-2-προπανόλης (3.19) σε 100 ml μεθανόλης (3.8).
Solution of 1 g 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol (3.19) in 100 ml methanol (3.8).
Κινητή φάση για HPLC: 3,00 g οξικό οξύ (3.18) + 900 ml νερό (3.1) +50,0 ml διάλυμα (3.21) 1,1,1-τριχλωρο-2-μεθυλο-2-προπανόλης (3.19) σε μεθανόλη (3.8) (1g/100ml).
Mobile phase for HPLC: 3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1g/100ml).
Το pH ρυθμίζεται στο 5,00 με αιθανολαμίνη (3.20).
Adjust pH to 5,00 using ethanolamine (3.20).
Συμπληρώνεται μέχρι τα 1000 ml με νερό (3.1).
Make up to 1000 ml with water (3.1).
Εξοπλισμός HPLC με φασματοφθορισμομετρικό ανιχνευτή.
HPLC equipment with a spectrofluorometric detector.
Υγρή χρωματογραφική στήλη, 125 mm × 4 mm, C18, 3 μm πλήρωση, ή ισοδύναμη.
Liquid chromatographic column, 125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing, or equivalent.
pH-μετρο.
pH-meter.
Φιάλη πολυπροπυλενίου, χωρητικότητας 125 ml, ευρύλαιμη και με βιδωτό πώμα.
Polypropylene flask, capacity 125 ml, with wide neck and screw cap.
Φίλτρο μεμβράνης, 0,45 μm.
Membrane filter, 0,45 μm.
Αυτόκλειστο, 110 (± 2) oC, 1,4 (±0,1) bar.
Autoclave, 110 (± 2) oC, 1,4 (±0,1) bar.
Αναμείκτης vortex.
Vortex mixer.
Παρασκευή δειγμάτων
Preparation of samples
Δείγματα με υψηλή περιεκτικότητα σε λίπος πρέπει να εκχυλίζονται με πετρελαϊκό αιθέρα (3.9) πριν από την άλεση.
Samples with high fat content shall be extracted with light petroleum (3.9) prior to grinding.
Προσδιορισμός ελεύθερης θρυπτοφάνης (εκχύλισμα)
Determination of free tryptophan (extract)
Σε κωνική φιάλη, ζυγίζεται με προσέγγιση 1 mg κατάλληλη ποσότητα (1-5 g) του παρασκευασθέντος δείγματος (5.1).
Weigh to the nearest 1 mg an appropriate amount (1-5 g) of the prepared sample (5.1), into a conical flask.
Προστίθενται 100,0 ml υδροχλωρικό οξύ, (3.13) και 5,00 ml πυκνό διάλυμα εσωτερικού προτύπου (3.16).
Add 100,0 ml hydrochloric acid, (3.13) and 5,00 ml concentrated internal standard solution (3.16).
Το σύνολο ανακινείται ή αναμειγνύεται επί 60 min χρησιμοποιώντας μηχανικό τάρακτρο ή μαγνητικό αναδευτήρα (4.7).
Shake or mix for 60 min. using a mechanical shaker or a magnetic stirrer (4.7).
Το ίζημα αφήνεται να κατακαθίσει και 10,0 ml του υπερκείμενου διαλύματος μεταφέρονται με σιφώνιο σε ποτήρι ζέσεως.
Allow the sediment to settle and pipette 10,0 ml of the supernatant solution into a beaker.
Προστίθενται 5 ml ορθο-φωσφορικού οξέος (3.14).
Add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Το pH ρυθμίζεται στο 3 χρησιμοποιώντας υδροξείδιο του νατρίου (3.10).
Adjust the pH to 3 using sodium hydroxide (3.10).
Προστίθεται ικανή ποσότητα μεθανόλης (3.8) ώστε να ληφθεί συγκέντρωση μεταξύ 10 και 30 % μεθανόλης στον τελικό όγκο.
Add sufficient methanol (3.8) to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Το διάλυμα μεταφέρεται σε ογκομετρική φιάλη καταλλήλου όγκου και αραιώνεται με νερό στον όγκο που απαιτείται για τη χρωματογραφία [περίπου ο ίδιος όγκος με το πρότυπο διάλυμα βαθμονόμησης (3.17)].
Transfer to a volumetric flask of appropriate volume and dilute with water to a volume necessary for the chromatography (approx. the same volume as the calibration standard solution (3.17)).
Μερικά ml του διαλύματος διηθούνται μέσω φίλτρου μεμβράνης 0,45 μm (4.5) πριν εγχυθούν στη στήλη HPLC.
Filter a few ml of the solution through a 0,45 μm membrane filter (4.5) before injection on the HPLC column.
Το πρότυπο διάλυμα και τα εκχυλίσματα προστατεύονται από το άμεσο ηλιακό φως.
Protect standard solution and extracts against direct sunlight.
Εάν δεν είναι δυνατή η ανάλυση των εκχυλισμάτων την ίδια ημέρα, τα εκχυλίσματα μπορούν να φυλαχθούν στους 5 oC για τρεις ημέρες το πολύ.
If it is not possible to analyse the extracts the same day, the extracts may be stored at 5 oC for a maximum of 3 days.
Προσδιορισμός της συνολικής θρυπτοφάνης (υδρόλυμα)
Determination of total tryptophan (hydrolysate)
Στην πολυπροπυλενική φιάλη (4.4) ζυγίζονται με προσέγγιση 0,2 mg από 0,1 έως 1 g του παρασκευασθέντος δείγματος (5.1).
Weigh to the nearest 0,2 mg from 0,1 to 1 g of the prepared sample (5.1) into the polypropylene flask (4.4).
Η ζυγισθείσα ποσότητα δείγματος πρέπει να έχει περιεκτικότητα σε άζωτο περίπου 10 mg.
The weighed sample portion shall have a nitrogen content of about 10 mg.
Προστίθενται 8,4 g οκταένυδρο υδροξείδιο του βαρίου (3.4) και 10 ml νερό.
Add 8,4 g barium hydroxide octa-hydrate (3.4) and 10 ml water.
Το σύνολο αναμειγνύεται σε αναμείκτη vortex (4.8) ή μαγνητικό αναδευτήρα (4.7).
Mix on a vortex mixer (4.8) or magnetic stirrer (4.7).
Ο επικαλυμμένος με τεφλόν μαγνήτης αφήνεται στο μείγμα.
Leave the teflon coated magnet in the mixture.
Τα τοιχώματα του δοχείου εκπλύνονται προς τα κάτω με 4 ml νερό.
Wash down the walls of the vessel with 4 ml water.
Τοποθετείται το βιδωτό πώμα και η φιάλη κλείνεται χαλαρά.
Put on the screw cap and close the flask loosely.
Πριν ανοιχθεί το αυτόκλειστο, η θερμοκρασία μειώνεται λίγο κάτω από τους 100 oC.
Before opening the autoclave reduce the temperature to just under 100 oC.
Για την αποφυγή κρυστάλλωσης του Ba(OH)2 .8 H2O, προστίθενται στο θερμό μείγμα 30 ml νερό με θερμοκρασία δωματίου.
In order to avoid crystallisation of Ba(OH)2 · 8 H2O, add to the warm mixture 30 ml water which is at room temperature.
Το σύνολο ανακινείται ή αναδεύεται ήπια.
Shake or stir gently.
Προστίθενται 2,00 ml πυκνό διάλυμα εσωτερικού προτύπου (α-μεθυλο-θρυπτοφάνης) (3.16).
Add 2,00 ml concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Τα δοχεία ψύχονται σε λουτρό νερού/πάγου για 15 λεπτά.
Cool the vessels on water/ice bath for 15 minutes.
Στη συνέχεια προστίθενται 5 ml ορθοφωσφορικού οξέος (3.14).
Then, add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Το δοχείο διατηρείται στο λουτρό ψύξης και εξουδετερώνεται με HCl (3.11) με ταυτόχρονη ανάδευση και το pH ρυθμίζεται στο 3,0 με HCl (3.12).
Keep the vessel in the cooling bath and neutralise with HCl (3.11) whilst stirring and adjust the pH to 3,0 using HCl (3.12).
Προστίθεται ικανή ποσότητα μεθανόλης ώστε να ληφθεί συγκέντρωση μεταξύ 10 και 30 % μεθανόλης στον τελικό όγκο.
Add sufficient methanol to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Κατάλληλη ποσότητα μεταφέρεται σε ογκομετρική φιάλη και αραιώνεται με νερό στον καθορισμένο όγκο που απαιτείται για τη χρωματογραφία (π.χ. 100 ml).
Transfer to a volumetric flask of appropriate volume and dilute with water to the defined volume necessary for the chromatography (for example 100 ml).
Η προσθήκη μεθανόλης δεν πρέπει να προκαλεί καθίζηση.
The addition of methanol shall not cause precipitation.
Το πρότυπο διάλυμα και τα υδρολύματα προστατεύονται από το άμεσο ηλιακό φως.
Protect standard solution and hydrolysates against direct sunlight.
Εάν δεν είναι εφικτή η ανάλυση των υδρολυμάτων την ίδια ημέρα, τότε αυτά μπορούν να φυλαχθούν στους 5 oC για τρεις ημέρες το πολύ.
If it is not possible to analyse the hydrolysates the same day, they may be stored at 5 oC for a maximum of 3 days.
Προσδιορισμός με HPLC
HPLC determination
Μπορούν να χρησιμοποιηθούν και άλλες συνθήκες, υπό την προϋπόθεση ότι παρέχουν ισοδύναμα αποτελέσματα (βλέπε επίσης τις παρατηρήσεις 9.1 και 9.2):
The following conditions for isocratic elution are offered for guidance; other conditions may be used, provided they yield equivalent results (see also observations 9.1 and 9.2):
Υγρή χρωματογραφική στήλη (4.2):
Liquid chromatographic column (4.2):
125 mm × 4 mm, C18, 3 μm πλήρωση, ή ισοδύναμη
125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing or equivalent
Θερμοκρασία στήλης:
Column temperature:
θερμοκρασία δωματίου
Room temperature
Κινητή φάση (3.22):
Mobile phase (3.22):
3,00 g οξικό οξύ (3.18) + 900 ml νερό (3.1) +50,0 ml διάλυμα (3.21) 1,1,1-τριχλωρο-2- μεθυλο-2-προπανόλης (3.19) σε μεθανόλη (3.8) (1g/100ml).
3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2- methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1 g/100 ml).
Συμπληρώνεται μέχρι τα 1000 ml με νερό (3.1)
Make up to 1000 ml with water (3.1)
Ρυθμός ροής:
Flow rate:
Συνολικός χρόνος ροής:
Total run time:
περίπου 34 min
approx. 34 min.
Μήκος κύματος ανίχνευσης:
Detection wavelength:
διέγερση: 280 nm, εκπομπή: 356 nm.
excitation: 280 nm, emission: 356 nm.
Όγκος έγχυσης
Injection volume
Η ποσότητα της θρυπτοφάνης (X), σε g ανά 100 g δείγματος, υπολογίζεται ως εξής.
The amount of tryptophane (X), in g per 100g sample, is calculated as follows:
A εμβαδόν κορυφής εσωτερικού προτύπου, πρότυπο διάλυμα βαθμονόμησης (3.17)
A peak area of internal standard, calibration standard solution (3.17)
B εμβαδόν κορυφής θρυπτοφάνης, εκχύλισμα (5.2) ή υδρόλυμα (5.3)
B peak area of tryptophan, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
όγκος σε ml (2 ml) πυκνού διαλύματος θρυπτοφάνης (3.15) που προστίθεται στο διάλυμα βαθμονόμησης (3.17)
volume in ml (2 ml) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to the calibration solution (3.17)
c συγκέντρωση σε μmol/ml = 2,50 πυκνού διαλύματος θρυπτοφάνης (3.15) που προστίθεται στο διάλυμα βαθμονόμησης (3.17)
c concentration in μmol/ml (= 2,50) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to calibration solution (3.17)
όγκος σε ml του πυκνού διαλύματος εσωτερικού προτύπου (3.16) που προστίθεται στην εκχύλιση (5.2) = 5,00 ml ή στο υδρόλυμα (5.3) = 2,00 ml
volume in ml of concentrated internal standard solution (3.16) added at the extraction (5.2) (= 5,00 ml) or to the hydrolysate (5.3) (= 2,00 ml)
C εμβαδόν κορυφής εσωτερικού προτύπου, εκχύλισμα (5.2) ή υδρόλυμα (5.3)
C peak area of internal standard, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
D εμβαδόν κορυφής θρυπτοφάνης, πρότυπο διάλυμα βαθμονόμησης (3.17)
D peak area of tryptophan, calibration standard solution (3.17)
όγκος σε ml (= 2,00 ml) πυκνού διαλύματος εσωτερικού προτύπου (3.16) που προστίθεται στο πρότυπο διάλυμα βαθμονόμησης (3.17)
volume in ml (= 2,00 ml) of concentrated internal standard solution (3.16) added to calibration standard solution (3.17)
m βάρος δείγματος σε g (διορθωμένο στο αρχικό βάρος εφόσον έχει ξηρανθεί ή/και απολιπανθεί)
m sample weight in g (corrected to original weight if dried and/or defatted)
M μοριακό βάρος θρυπτοφάνης (= 204,23 g/mol)
M molar weight of tryptophan (= 204,23 g/mol)
Η διαφορά μεταξύ των αποτελεσμάτων δύο παράλληλα διενεργούμενων προσδιορισμών που γίνονται στο ίδιο δείγμα δεν πρέπει να υπερβαίνει το 10 % σε σχέση με την υψηλότερη τιμή.
The difference between the results of two parallel determinations carried out on the same sample must not exceed 10 % relative to the highest result.
Αποτελέσματα διεργαστηριακής μελέτης
Results of a collaborative study
Πραγματοποιήθηκε διεργαστηριακή κοινοτική μελέτη (4η διασύγκριση) στην οποία τρία δείγματα αναλύθηκαν από μέχρι δώδεκα εργαστήρια για την πιστοποίηση της μεθόδου υδρόλυσης.
An EC collaborative study (4th intercomparison) was arranged in which three samples were analysed by up to 12 laboratories to certify the method for hydrolysis.
Σε κάθε δείγμα έγιναν πέντε επαναληπτικές αναλύσεις.
Replicate (5) analyses were performed on each sample.
Τα αποτελέσματα δίδονται στον ακόλουθο πίνακα
The results are given in the following table:
Ζωοτροφή χοίρων
Pig feed
Ζωοτροφή χοίρων με συμπλήρωμα L-θρυπτοφάνης
Pig feed supplemented with L-tryptophan
Δείγμα 3
Sample 3
Συμπύκνωμα ζωοτροφής για χοίρους
Feed concentrate for pigs
Μέσος όρος [g/kg]
Mean [g/kg]
CVr [%] 1,9 1,6
CVr [%]
L αριθμός υποβληθέντων εργαστηριακών αποτελεσμάτων
L number of laboratories submitting results
n αριθμός μεμονωμένων αποτελεσμάτων που διατηρούνται απαλείφοντας τις ακραίες τιμές (προσδιορίζονται με τη δοκιμή ακραίων τιμών Cochran, Dixon)
n number of single results retained eliminating outliers (identified by Cochran, Dixon outlier test)
τυπική απόκλιση επαναληψιμότητας
standard deviation of repeatability
τυπική απόκλιση αναπαραγωγιμότητας
standard deviation of reproducibility
r επαναληψιμότητα
r repeatability
R αναπαραγωγιμότητα
R reproducibility
συντελεστής μεταβολής της επαναληψιμότητας, %
coefficient of variation of repeatability, %
συντελεστής διακύμανσης αναπαραγωγιμότητας, %
coefficient of variation of reproducibility, %
Πραγματοποιήθηκε μια άλλη κοινοτική μελέτη (3η διασύγκριση) στην οποία δύο δείγματα αναλύθηκαν από μέχρι δεκατρία εργαστήρια για την πιστοποίηση της μεθόδου υδρόλυσης.
Another EC collaborative study (3rd intercomparison) was arranged in which two samples were analysed by up to 13 laboratories to certify the method for extraction of free tryptophan.
Δείγμα 4
Sample 4
Μείγμα σίτου και σόγιας
Wheat and soya mixture
Δείγμα 5
Sample 5
Μείγμα σίτου και σόγιας (= δείγμα 4) με προσθήκη θρυπτοφάνης (0,457g/kg)
Wheat and soya mixture (= sample 4) with added tryptophan (0,457g/kg1)
n αριθμός μεμονωμένων αποτελεσμάτων που διατηρούνται απαλείφοντας τις ακραίες τιμές (προσδιορίζονται με τη δοκιμή ακραίων τιμών Cochran, Dixon)
n number of single results retained after eliminating outliers (identified by Cochran, Dixon outlier test)
Πραγματοποιήθηκε μια άλλη κοινοτική μελέτη διασύγκρισης στην οποία αναλύθηκαν τέσσερα δείγματα από μέχρι επτά εργαστήρια με σκοπό την πιστοποίηση θρυπτοφάνης για υδρόλυση.
Another EC intercomparison study was arranged in which four samples were analysed by up to 7 laboratories with the aim of a tryptophan certification for hydrolysis.
Τα αποτελέσματα δίνονται κατωτέρω.
The results are given below.
Αναμεμειγμένη ζωοτροφή χοίρων
Mixed pig feed
Ιχθυάλευρο με χαμηλά λιπαρά
Low fat fish meal
Σογιάλευρο
Soybean meal
Με ειδικές χρωματογραφικές συνθήκες μπορεί να επιτευχθεί καλύτερος διαχωρισμός μεταξύ θρυπτοφάνης και α-μεθυλο-θρυπτοφάνης.
Following special chromatographic conditions may give better separation between tryptophan and α-methyl-tryptophan.
Ισοκρατική έκλουση που ακολουθείται από καθαρισμό της διαβαθμισμένης στήλης:
Isocratic elution followed by gradient column cleaning:
Υγρή χρωματογραφική στήλη:
Liquid chromatographic column:
125 mm × 4 mm, C18, 5 μm πλήρωση, ή ισοδύναμη
125 mm x 4 mm, C18, 5 μm packing or equivalent
Κινητή φάση:
Mobile phase:
A: 0,01 mol/l KH2PO4/μεθανόλη, 95+5 (V+V).
0,01 mol/l KH2PO4/méthanol, 95+5 (V+V).
Πρόγραμμα βαθμίδων:
Gradient program:
περίπου 33 λεπτά
approx. 33 min.
Η χρωματογραφία διαφοροποιείται ανάλογα με τον τύπο HPLC και το χρησιμοποιούμενο υλικό πλήρωσης στήλης.
The chromatography will vary according to the type of HPLC and column packing material used.
Το επιλεγόμενο σύστημα πρέπει να μπορεί να επιτυγχάνει διαχωρισμό βασικής γραμμής μεταξύ θρυπτοφάνης και εσωτερικού προτύπου.
The chosen system must be capable of giving baseline separation between the tryptophan and the internal standard.
Περαιτέρω, παίζει σημαντικό ρόλο τα προϊόντα αποδόμησης να διαχωρίζονται σωστά από τη θρυπτοφάνη και το εσωτερικό πρότυπο.
Moreover it is important that degradation products are well separated from the tryptophan and the internal standard.
Πρέπει να χρησιμοποιούνται υδρολύματα χωρίς εσωτερικό πρότυπο για να ελέγχεται η βασική γραμμή υπό το εσωτερικό πρότυπο για προσμείξεις.
Hydrolysates without internal standard shall be run in order to check the base line under the internal standard for impurities.