natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Μεταγγίζεται ποσοτικά σε ογκομετρική φιάλη 50 ml. Το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή της φιάλης με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24) και αναμειγνύεται.
Transfer quantitatively to a 50 ml graduated flask and make up to the mark with citrate buffer (3.24) and mix.
Αποθηκεύεται σε θερμοκρασία κάτω των 5 oC για 3 μήνες το πολύ.
Store below 5 oC for not more than 3 months.
Βλέπε επίσης παρατηρήσεις 9.1
See also observation 9.1.
Διάλυμα βαθμονόμησης πρότυπων αμινοξέων για χρήση με υδρολύματα το οποίο παρασκευάζεται σύμφωνα με την παράγραφο 5.3.3.1 και για χρήση με εκχυλίσματα (5.2).
Calibration solution of standard amino acids for use with hydrolysates prepared according to paragraph 5.3.3.1 and for use with extracts (5.2).
Το διάλυμα βαθμονόμησης παρασκευάζεται σύμφωνα με την παράγραφο 3.27.4 αλλά παραλείποντας το χλωριούχο νάτριο.
The calibration solution is prepared according to 3.27.4 but omitting sodium chloride.
Σφαιρική φιάλη 100 ή 250 ml που φέρει κάθετο ψυκτήρα.
100 or 250 ml round bottomed flask fitted with a reflux condenser.
Φιάλη από βοροπυριτικό γυαλί 100 ml με βιδωτό πώμα με επένδυση από καουτσούκ/τεφλόν (π.χ. Duran, Schott) για χρήση σε ξηραντήρα.
100 ml borosilicate glass bottle with screw cap with rubber/teflon liner (e.g. Duran, Schott) for use in the oven.
Ξηραντήρας με δυναμικό αερισμό και ρυθμιστή θερμοκρασίας ακρίβειας υψηλότερης από ±2 oC.
Oven with forced ventilation and a temperature regulator with an accuracy better than ± 2 oC.
pH-μετρο (με ακρίβεια τριών δεκαδικών ψηφίων).
pH-meter (three decimal places).
Φίλτρο μεμβράνης (0,22 μm).
Membrane filter (0,22 μm).
Μηχανή φυγοκέντρησης.
Centrifuge.
Περιστροφικός εξατμιστής κενού.
Rotary vacuum evaporator.
Συσκευή μηχανικής ανακίνησης ή μαγνητικός αναδευτήρας
Mechanical shaker or magnetic stirrer.
Αναλυτής αμινοξέων ή εξοπλισμός HPLC με ιοντοανταλλακτική στήλη, συσκευή για νινυδρίνη, παραγώγιση μετά τη στήλη και φωτομετρικό ανιχνευτή.
Amino acid analyser or HPLC equipment with ion exchange column, device for ninhydrin, post column derivatisation and photometric detector.
Πραγματοποιείται πλήρωση της στήλης με θειούχες ρητίνες πολυστυρένιου, κατάλληλες για το διαχωρισμό των αμινοξέων μεταξύ τους και για το διαχωρισμό από άλλα υλικά θετικά στη νινυδρίνη.
The column is filled with sulfonated polystyrene resins capable of separating the amino acids from each other and from other ninhydrin-positive materials.
Η ροή μέσα στους κλάδους με το ρυθμιστικό διάλυμα και τη νινυδρίνη εξασφαλίζεται με αντλίες σταθερότητας ροής ±0,5 % κατά την περίοδο που καλύπτει τόσο την εκτέλεση της πρότυπης βαθμονόμησης όσο και την ανάλυση του δείγματος.
The flow in the buffer and ninhydrin lines is provided by pumps having a flow stability of ±0,5 % in the period covering both the standard calibration run and the analysis of the sample.
Με ορισμένους αναλυτές αμινοξέων είναι δυνατόν να χρησιμοποιηθούν διαδικασίες υδρόλυσης όπου το υδρόλυμα έχει συγκέντρωση νατρίου c = 0,8 mol/l και περιέχει όλο το μυρμηκικό οξύ που απομένει μετά το στάδιο της οξείδωσης.
With some amino acid analysers hydrolysis procedures can be used in which the hydrolysate has a sodium concentration of c = 0,8 mol/l and contains all the residual formic acid from the oxidation step.
Άλλοι πάλι δεν εξασφαλίζουν τον ικανοποιητικό διαχωρισμό ορισμένων αμινοξέων αν το υδρόλυμα περιέχει περίσσεια μυρμηκικού οξέος ή/και έχει υψηλές συγκεντρώσεις ιόντων νατρίου.
Others do not give a satisfactory separation of certain amino acids if the hydrolysate contains excess formic acid and/or high sodium ion concentrations.
Σε αυτή την περίπτωση, μειώνεται ο όγκος των οξέων με εξάτμιση σε περίπου 5 ml μετά την υδρόλυση και πριν από τη ρύθμιση του pH.
In this case the volume of acid is reduced by evaporation to approx. 5 ml after the hydrolysis and prior to pH adjustment.
Η εξάτμιση πρέπει να εκτελείται υπό κενό και σε ανώτατη θερμοκρασία 40 oC.
The evaporation shall be performed under vacuum at 40 o C maximum.
Παρασκευή του δείγματος
Preparation of the sample
Το δείγμα αλέθεται ώστε να διέρχεται από κόσκινο με διάμετρο οπών 0,5 mm.
The sample is ground to pass through a 0,5 mm sieve.
Δείγματα με υψηλή υγρασία πρέπει είτε να ξηραίνονται με αέρα σε θερμοκρασία μη υπερβαίνουσα τους 50 oC ή να ξηραίνονται με ψύξη πριν από την άλεση.
Samples high in moisture must be either air-dried at a temperature not exceeding 50 oC or freeze dried prior to grinding.
Δείγματα με υψηλή περιεκτικότητα σε λίπος πρέπει να εκχυλίζονται με πετρελαϊκό αιθέρα (3.12) πριν από την άλεση.
Samples with a high fat content shall be extracted with light petroleum (3.12) prior to grinding.
Προσδιορισμός ελεύθερων αμινοξέων σε ζωοτροφές και προμείγματα
Determination of free amino acids in feed and premixtures
Σε κωνική φιάλη ζυγίζεται με προσέγγιση 0,2 mg κατάλληλη ποσότητα (1-5 g) του παρασκευασθέντος δείγματος (5.1). Προστίθενται 100,0 ml μείγματος εκχύλισης (3.21).
Weigh to the nearest 0,2 mg an appropriate amount (1-5 g) of the prepared sample (5.1), into a conical flask and add 100,0 ml of extraction mixture (3.21).
Το σύνολο ανακινείται ή αναμειγνύεται επί 60 λεπτά χρησιμοποιώντας μηχανικό τάρακτρο ή μαγνητικό αναδευτήρα (4.8).
Shake the mixture for 60 min. using a mechanical shaker or a magnetic stirrer (4.8).
Το ίζημα αφήνεται να κατακαθίσει και 10,0 ml του υπερκείμενου διαλύματος μεταφέρονται με σιφώνιο σε ποτήρι ζέσεως 100 ml.
Allow the sediment to settle and pipette 10,0 ml of the supernatant solution into a 100 ml beaker.
Προστίθενται 5,0 ml διαλύματος σουλφοσαλικυλικού οξέος (3.22), αναδεύοντας με τη βοήθεια μαγνητικού αναδευτήρα για 5 λεπτά. Το υπερκείμενο διάλυμα υποβάλλεται σε διήθηση ή φυγοκέντρηση για την απομάκρυνση τυχόν ιζήματος.
Add 5,0 ml of sulfosalicylic acid solution (3.22), with stirring and continue to stir with the aid of magnetic stirrer for 5 min. Filter or centrifuge the supernatant in order to remove any precipitate.
Τοποθετούνται 10,0 ml του διαλύματος που προκύπτει σε ποτήρι ζέσεως 100 ml και ρυθμίζεται το pH στο 2,20 χρησιμοποιώντας διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου (3.18). Το διάλυμα μεταφέρεται σε ογκομετρική φιάλη κατάλληλου όγκου χρησιμοποιώντας διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24), και το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή της φιάλης με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24).
Place 10,0 ml of the resulting solution into a 100 ml beaker and adjust the pH to 2,20 using sodium hydroxide solution (3.18), transfer to a volumetric flask of appropriate volume using citrate buffer (3.24), and make up to the mark with the buffer solution (3.24).
Αν χρησιμοποιείται εσωτερικό πρότυπο, προστίθεται 1,00 ml εσωτερικού προτύπου (3.27.3) ανά 100 ml τελικού διαλύματος και το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24).
If an internal standard is being used add 1,00 ml of internal standard (3.27.3) for each 100 ml final solution and make up to the mark with the buffer solution (3.24).
Ακολουθεί χρωματογράφηση σύμφωνα με την παράγραφο 5.4.
Proceed to the chromatography step according to paragraph 5.4.
Εάν τα εκχυλίσματα δεν εξεταστούν την ίδια ημέρα, πρέπει να φυλαχθούν σε θερμοκρασία κάτω των 5 oC.
If the extracts are not being examined the same day, they must be stored below 5 oC.
Προσδιορισμός των συνολικών αμινοξέων
Determination of total amino acids
Οξείδωση
Oxidation
Ζυγίζονται με προσέγγιση 0,2 mg από 0,1 έως 1 g του παρασκευασθέντος δείγματος (5.1) σε:
Weigh to the nearest 0,2 mg from 0,1 to 1 g of the prepared sample (5.1) into:
σφαιρική φιάλη 100 ml (4.1) για ανοικτή υδρόλυση (5.3.2.3), ή
a 100 ml round-bottomed flask (4.1) for open hydrolysis (5.3.2.3) or,
σφαιρική φιάλη 250 ml (4.1) αν απαιτείται χαμηλή συγκέντρωση νατρίου (5.3.3.1), ή
a 250 ml round-bottomed flask (4.1) if a low sodium concentration is required (5.3.3.1) or,
φιάλη 100 ml με βιδωτό πώμα (4.2), για κλειστή υδρόλυση (5.3.2.4).
a 100 ml bottle fitted with a screw cap (4.2), for closed hydrolysis (5.3.2.4).
Η ζυγισθείσα ποσότητα δείγματος πρέπει να έχει περιεκτικότητα σε άζωτο περίπου 10 mg και περιεκτικότητα σε υγρασία όχι μεγαλύτερη των 100 mg.
The weighed sample portion must have a nitrogen content of about 10 mg and a moisture content not exceeding 100 mg.
Η φιάλη ψύχεται μέσα σε λουτρό νερού-πάγου στους 0 oC, προστίθενται 5 ml μείγματος οξείδωσης (3.23) και αναμειγνύεται χρησιμοποιώντας γυάλινη σπαθίδα με κυρτή άκρη. Η φιάλη μαζί με τη σπαθίδα σφραγίζεται με αεροστεγή μεμβράνη.
Place the flask/bottle in an ice-water bath and cool to 0 oC, add 5 ml of oxidation mixture (3.23) and mix using a glass spatula with a bent tip.
Τα λουτρό νερού/πάγου που περιέχει τη σφραγισμένη φιάλη τοποθετείται σε ψυγείο στους 0 oC και αφήνεται για 16 ώρες.
Seal the flask/bottle containing the spatula with an air-tight film, place the ice-water bath containing the sealed container in a refrigerator at 0 oC and leave for 16 hours.
Μετά τις 16 ώρες, η φιάλη εξάγεται από το ψυγείο και η περίσσεια του οξειδωτικού αντιδραστηρίου αποσυντίθεται προσθέτοντας 0,84 g διθειώδους νατρίου (3.4).
After 16 hours remove from the refrigerator and decompose the excess oxidation reagent by the addition of 0,84 g of sodium disulphite (3.4).
Ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.2.1.
Proceed to 5.3.2.1.
Υδρόλυση
Hydrolysis
Υδρόλυση οξειδωμένων δειγμάτων
Hydrolysis of oxidised samples
Στο οξειδωμένο δείγμα που παρασκευάστηκε σύμφωνα με την παράγραφο 5.3.1 προστίθενται 25 ml μείγματος υδρόλυσης (3.20), φροντίζοντας να εκπλυθούν τυχόν κατάλοιπα δείγματος που παραμένουν στα τοιχώματα του δοχείου και στη σπαθίδα.
To the oxidised sample prepared according to 5.3.1 add 25 ml of hydrolysis mixture (3.20) taking care to wash down any sample residue adhering to the sides of the vessel and the spatula.
Ανάλογα με τη διαδικασία υδρόλυσης που χρησιμοποιείται, ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.2.3 ή 5.3.2.4.
Depending on the hydrolysis procedure being used, proceed according to 5.3.2.3 or 5.3.2.4.
Υδρόλυση μη οξειδωμένων δειγμάτων
Hydrolysis of unoxidised samples
Ζυγίζονται, είτε σε μια σφαιρική φιάλη 100 ml ή 250 ml (4.1) είτε σε μια φιάλη 100 ml με βιδωτό πώμα (4.2), με προσέγγιση 0,2 mg, από 0,1 έως 1 g του δείγματος που παρασκευάστηκε (5.1).
Weigh into either a 100 ml or a 250 ml round-bottom flask (4.1) or a 100 ml bottle fitted with a screw cap (4.2), to the nearest 0,2 mg, from 0,1 to 1 g of the prepared sample (5.1).
Η ζυγισθείσα ποσότητα δείγματος πρέπει να έχει περιεκτικότητα σε άζωτο περίπου 10 mg.
The weighed sample portion must have a nitrogen content of about 10 mg.
Προστίθενται προσεκτικά 25 ml μείγματος υδρόλυσης (3.20) και αναμειγνύονται με το δείγμα.
Add carefully 25 ml of hydrolysis mixture (3.20) and mix with the sample.
Ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.2.3 ή 5.3.2.4.
Proceed according to either 5.3.2.3 or 5.3.2.4.
Ανοικτή υδρόλυση
Open hydrolysis
Προστίθενται 3 γυάλινες σφαίρες στο μείγμα της φιάλης (το οποίο παρασκευάστηκε σύμφωνα με την παράγραφο 5.3.2.1 ή 5.3.2.2) και θερμαίνεται στο σημείο βρασμού με συνεχή παραγωγή φυσαλίδων υπό αναρροή για 23 ώρες.
Add 3 glass beads to the mixture in the flask (prepared in accordance with 5.3.2.1 or 5.3.2.2) and boil with continuous bubbling under reflux for 23 hours.
Όταν ολοκληρωθεί η υδρόλυση, ο ψυκτήρας εκπλύνεται με 5 ml διαλύματος κιτρικού οξέος (3.24).
On completion of hydrolysis, wash the condenser down with 5 ml of citrate buffer (3.24).
Η φιάλη αποσυνδέεται και ψύχεται σε λουτρό πάγου.
Disconnect the flask and cool it in an ice bath.
Ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.3.
Proceed according to 5.3.3.
Κλειστή υδρόλυση
Closed Hydrolysis
Η φιάλη με το μείγμα που παρασκευάστηκε σύμφωνα με την παράγραφο 5.3.2.1 ή 5.3.2.2 τοποθετείται σε ξηραντήρα (4.3) στους 110 oC.
Place the bottle containing the mixture prepared in accordance with 5.3.2.1 or 5.3.2.2 in an oven (4.3) at 110 oC.
Κατά την πρώτη ώρα της ξήρανσης, για να αποφευχθεί η υπερβολική αύξηση της πίεσης (λόγω της έκλυσης αέριων ουσιών) και τυχόν έκρηξη, το βιδωτό πώμα τοποθετείται πάνω στο στόμιο του δοχείου.
During the first hour in order to prevent a build up of pressure (due to the evolution of gaseous substances) and to avoid explosion, place the screw cap over the top of the vessel.
Η φιάλη δεν πρέπει να σφραγισθεί με το βιδωτό πώμα.
Do not close the vessel with the cap.
Μετά από μία ώρα, η φιάλη σφραγίζεται με το πώμα και αφήνεται στον ξηραντήρα (4.3) για 23 ώρες.
After one hour close the vessel with the cap and leave in the oven (4.3) for 23 hours.
Όταν ολοκληρωθεί η υδρόλυση, η φιάλη εξάγεται από τον ξηραντήρα, ξεβιδώνεται προσεκτικά το πώμα και η φιάλη τοποθετείται σε λουτρό νερού/πάγου.
On completion of hydrolysis, remove the bottle from the oven, carefully open the cap of the bottle and place the bottle in an ice-water bath.
Αφήστε να ψυχθεί.
Leave to cool.
Ανάλογα με τη διαδικασία που χρησιμοποιείται για τη ρύθμιση του pH (5.3.3), το περιεχόμενο της φιάλης μεταγγίζεται ποσοτικά σε ένα ποτήρι ζέσεως 250 ml ή μια σφαιρική φιάλη 250 ml, χρησιμοποιώντας διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24).
Depending on the procedure for pH adjustment (5.3.3), quantitatively transfer the contents of the bottle to a 250 ml beaker or a 250 ml round-bottom flask, using citrate buffer (3.24).
Ρύθμιση του pH Ανάλογα με την ανοχή του αναλυτή αμινοξέων στο νάτριο (4.9), για τη ρύθμιση του pH ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.3.1 ή 5.3.3.2.
Adjustment of pH
Κρίνεται σκόπιμο να χρησιμοποιηθεί αρχικό πρότυπο διάλυμα του εσωτερικού προτύπου (3.27.3), όταν χρησιμοποιούνται αναλυτές αμινοξέων που απαιτούν χαμηλή συγκέντρωση νατρίου (εφόσον πρέπει να μειωθεί ο όγκος του όξινου διαλύματος).
It is advisable to use an internal stock standard solution (3.27.3) when amino acid analysers requiring a low sodium concentration are employed (when the acid volume has to be reduced).
Σε αυτή την περίπτωση προστίθενται 2,00 ml αρχικού πρότυπου διαλύματος του εσωτερικού προτύπου (3.27.3) στο υδρόλυμα πριν από την εξάτμιση.
In this case add 2,00 ml of the internal stock standard solution (3.27.3) to the hydrolysate before the evaporation.
Προστίθενται 2 σταγόνες 1-οκτανόλης (3.15) στο υδρόλυμα το οποίο παρασκευάστηκε σύμφωνα με την παράγραφο 5.3.2.3 ή 5.3.2.4.
Add 2 drops of 1-octanol (3.15) to the hydrolysate obtained in accordance with paragraph 5.3.2.3 or 5.3.2.4.
Χρησιμοποιώντας έναν περιστροφικό εξατμιστή κενού (4.7), ο όγκος μειώνεται σε 5-10 ml, υπό κενό, στους 40 oC.
Using a rotary evaporator (4.7) reduce the volume to 5-10 ml under vacuum at 40 oC.
Αν ο όγκος μειωθεί κατά λάθος κάτω των 5 ml, το υδρόλυμα πρέπει να απορριφθεί και η ανάλυση να γίνει από την αρχή.
If the volume is accidentally reduced to less than 5 ml the hydrolysate must be discarded and the analysis recommenced.
Το pH ρυθμίζεται στο 2,20 με διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου (3.18) και ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.4.
Adjust the pH to 2,20 with sodium hydroxide solution (3.18) and proceed to paragraph 5.3.4.
Για όλους τους υπόλοιπους αναλυτές αμινοξέων (4.9)
For all other Amino Acid Analysers (4.9)
Λαμβάνονται τα υδρολύματα που παρασκευάστηκαν σύμφωνα με την παράγραφο 5.3.2.3 ή 5.3.2.4 και υποβάλλονται σε μερική εξουδετέρωση, προσθέτοντας προσεκτικά και με ταυτόχρονη ανάδευση 17 ml διαλύματος υδροξειδίου του νατρίου (3.17), διατηρώντας τη θερμοκρασία κάτω από τους 40 oC.
Take the hydrolysates obtained in accordance with 5.3.2.3 or 5.3.2.4 and partly neutralise them by carefully adding with stirring, 17 ml of sodium hydroxide solution (3.17), ensuring that the temperature is kept below 40 oC.
Το pH ρυθμίζεται στο 2,20 σε θερμοκρασία δωματίου, χρησιμοποιώντας διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου (3.17) και, τέλος, διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου (3.18).
Adjust the pH to 2,20 at room temperature using sodium hydroxide solution (3.17) and finally sodium hydroxide solution (3.18).
Ακολουθείται η διαδικασία της παραγράφου 5.3.4.
Proceed to 5.3.4.
Διάλυμα δείγματος για χρωματογράφηση
Sample solution for chromatography
Το υδρόλυμα με το ρυθμισμένο pH (5.3.3.1 ή 5.3.3.2) μεταγγίζεται ποσοτικά με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24) σε ογκομετρική φιάλη 200 ml και το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24).
Quantitatively transfer the pH adjusted hydrolysate (5.3.3.1 or 5.3.3.2) with citrate buffer (3.24) to a 200 ml graduated flask, and make up to the mark with buffer (3.24).
Αν δεν έχει χρησιμοποιηθεί ήδη εσωτερικό πρότυπο, προστίθενται 2,00 ml εσωτερικού προτύπου (3.27.3) και το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24).
If an internal standard has not already been used, add 2,00 ml of internal standard (3.27.3) and make up to the mark with citrate buffer (3.24).
Το διάλυμα αναμειγνύεται πολύ καλά.
Mix thoroughly.
Ακολουθεί χρωματογράφηση σύμφωνα με την παράγραφο 5.4.
Proceed to the chromatography step (5.4).
Εάν τα εκχυλίσματα δεν εξεταστούν την ίδια ημέρα, πρέπει να φυλαχθούν σε θερμοκρασία κάτω των 5 oC.
If the sample solutions are not being examined the same day they must be stored below 5 oC.
Χρωματογράφηση
Chromatography
Πριν από τη χρωματογράφηση, το εκχύλισμα (5.2) ή το υδρόλυμα (5.3.4) ρυθμίζεται σε θερμοκρασία δωματίου.
Before chromatography bring the extract (5.2) or hydrolysate (5.3.4) to room temperature.
Το μείγμα αναμειγνύεται καλά και διηθείται κατάλληλη ποσότητα με φίλτρο μεμβράνης 0,22 μm (4.5).
Shake the mixture and filter a suitable amount through a 0,22 μm membrane filter (4.5).
Το διαυγές διάλυμα που προκύπτει υποβάλλεται σε χρωματογράφηση ιοντοανταλλαγής, χρησιμοποιώντας αναλυτή αμινοξέων (4.9).
The resulting clear solution is subjected to ion exchange chromatography, using an amino acid analyser (4.9).
Η έγχυση μπορεί να εκτελεστεί διά χειρός ή αυτόματα.
The injection may be performed manually or automatically.
Είναι σημαντικό να προστεθεί η ίδια ποσότητα διαλύματος ±0,5 % στη στήλη για την ανάλυση των προτύπων και των δειγμάτων, εκτός αν χρησιμοποιείται εσωτερικό πρότυπο, και οι αναλογίες νατρίου/αμινοξέα στα πρότυπα διαλύματα και στα διαλύματα δείγματος να είναι παρόμοιες, όσο αυτό είναι πρακτικά δυνατόν.
It is important that the same quantity of solution ±0,5 % is added to the column for the analysis of standards and samples except when an internal standard is used, and that the sodium:amino acid ratios in the standard and sample solutions are as similar as is practicable.
Σε γενικές γραμμές, η συχνότητα των κύκλων βαθμονόμησης εξαρτάται από τη σταθερότητα του αντιδραστηρίου νινυδρίνης και από το αναλυτικό σύστημα.
In general the frequency of calibration runs depends on the stability of the ninhydrin reagent and the analytical system.
Το πρότυπο ή το δείγμα αραιώνεται με διάλυμα κιτρικού οξέος (3.24), προκειμένου η περιοχή μεγίστων του προτύπου να αντιστοιχεί σε 30-200 % της περιοχής μεγίστων των αμινοξέων του δείγματος.
The standard or sample is diluted with citrate buffer (3.24) to give a peak area of the standard of 30 %-200 % of the sample amino acid peak area.
Η χρωματογράφηση αμινοξέων διαφοροποιείται ελαφρώς ανάλογα με τον τύπο του αναλυτή και τη ρητίνη που χρησιμοποιείται.
The chromatography of amino acids will vary slightly according to the type of analyser employed and resin used.
Το επιλεγμένο σύστημα πρέπει να είναι σε θέση να διαχωρίζει τα αμινοξέα μεταξύ τους, καθώς και από άλλα υλικά θετικά στη νινυδρίνη.
The chosen system must be capable of separating the amino acids from each other and from the ninhydrin-positive materials.
Εντός του εύρους λειτουργίας του χρωματογραφικού συστήματος πρέπει να εμφανιστεί μια γραμμική απόκριση στις μεταβολές των ποσοτήτων των αμινοξέων που προστίθενται στη στήλη.
In the range of operation the chromatographic system must give a linear response to changes in the amounts of amino acids added to the column.
Κατά τη χρωματογράφηση, η αναλογία ύψους ελαχίστων/μεγίστων που αναφέρεται παρακάτω ισχύει όταν αναλύεται ένα ισομοριακό διάλυμα (των υπό προσδιορισμό αμινοξέων).
During the chromatography step the valley:peak height ratios mentioned below apply, when an equimolar solution (of the amino acids being determined) is analysed.
Το εν λόγω ισομοριακό διάλυμα πρέπει να περιέχει τουλάχιστον 30 % της μέγιστης ποσότητας κάθε αμινοξέως που μπορεί να μετρηθεί με ακρίβεια με το σύστημα του αναλυτή αμινοξέων (4.9).
This equimolar solution must contain at least 30 % of the maximum load of each amino acid which can be accurately measured with the amino acid analyser system (4.9).
Για όλα τα υπόλοιπα αμινοξέα, ο διαχωρισμός πρέπει να είναι καλύτερος από 1:10.
For all other amino acids the separation must be better than 1:10.
Το σύστημα πρέπει να εξασφαλίζει τον διαχωρισμό της λυσίνης από «τεχνητά σφάλματα λυσίνης» και από την ορνιθίνη.
The system must ensure that lysine is separated from ‘lysine artifacts’ and ornithine.
Το εμβαδόν των κορυφών του δείγματος και του προτύπου μετράται για κάθε επιμέρους αμινοξύ και η ποσότητα (X), σε g αμινοξέως ανά kg δείγματος, υπολογίζεται με τον τύπου.
The area of the sample and standard peaks is measured for each individual amino acid and the amount (X), in g amino acid per kg sample, is calculated as follows:
Αν χρησιμοποιείται εσωτερικό πρότυπο, ο τύπος πολλαπλασιάζεται επί: D
If an internal standard is used multiply by: D
A εμβαδόν κορυφής, υδρόλυμα ή εκχύλισμα
A peak area, hydrolysate or extract
B εμβαδόν κορυφής, εσωτερικό πρότυπο
B peak area, calibration standard solution
C εμβαδόν κορυφής, εσωτερικό πρότυπο σε υδρόλυμα ή εκχύλισμα
C peak area, internal standard in hydrolysate or extract
D εμβαδόν κορυφής, εσωτερικό πρότυπο, πρότυπο διάλυμα βαθμονόμησης
D peak area, internal standard, calibration standard solution
M μοριακό βάρος του υπό προσδιορισμό αμινοξέως
M molar weight of the amino acid being determined
c συγκέντρωση προτύπου σε μmol/ml
c concentration of standard in μmol/ml
m βάρος δείγματος (g) (διορθωμένο στο αρχικό βάρος αν είναι αποξηραμένο ή απολιπωμένο)
m sample weight (g) (corrected to original weight if dried or defatted)
V ml συνολικού υδρολύματος (5.3.4) ή ml του υπολογιζόμενου συνολικού όγκου αραίωσης του εκχυλίσματος (6.1)
V ml total hydrolysate (5.3.4) or ml calculated total dilution volume of extract (6.1)
Η κυστίνη και η κυστεΐνη προσδιορίζονται και οι δύο ως κυστεϊνικό οξύ σε υδρολύματα οξειδωμένου δείγματος, υπολογίζονται όμως ως κυστίνη (C6H12N2O4S2, M 240,30 g/mol) χρησιμοποιώντας την τιμή M 120,15 g/mol (= 0,5 × 240,30 g/mol).
Cystine and cysteine are both determined as cysteic acid in hydrolysates of oxidised sample, but calculated as cystine (C6H12N2O4S2, M 240,30 g/mol) by using M 120,15 g/mol (= 0,5 x 240,30 g/mol).
Η μεθειονίνη προσδιορίζεται ως σουλφόνη μεθειονίνης σε υδρολύματα οξειδωμένου δείγματος, υπολογίζεται όμως ως μεθειονίνη χρησιμοποιώντας την τιμή M = 149,21 g/mol για τη μεθειονίνη.
Methionine is determined as methionine sulphone in hydrolysates of oxidised sample, but calculated as methionine by using M of methionine: 149,21 g/mol.
Η προστιθέμενη ελεύθερη μεθειονίνη προσδιορίζεται έπειτα από εκχύλιση ως μεθειονίνη. Για τον υπολογισμό, χρησιμοποιείται η ίδια τιμή M.
Added free methionine is determined after extraction as methionine, for the calculation the same M is used.
Ο ολικός μετά την αραίωση όγκος των εκχυλισμάτων (F) για τον προσδιορισμό των ελεύθερων αμινοξέων (5.2) υπολογίζεται ως εξής:
The total dilution volume of extracts (F) for determination of free amino acids (5.2) is calculated as follows:
V όγκος του τελικού εκχυλίσματος
V Volume of final extract
Αξιολόγηση της μεθόδου
Evaluation of the method
Η μέθοδος δοκιμάστηκε σε διεθνή διεργαστηριακή σύγκριση που έγινε το 1990 χρησιμοποιώντας τέσσερις διαφορετικές ζωοτροφές (αναμεμειγμένη ζωοτροφή χοίρων, φύραμα πουλερικών, συμπύκνωμα πρωτεΐνης, προμείγματα).
The method has been tested in an intercomparison made at international level in 1990 using four different feed (mixed pig feed, broiler compound, protein concentrate, premixture).
Τα αποτελέσματα, μετά την αφαίρεση των εκτός κλίμακας αποκλίσεων, της μέσης και της σταθερής απόκλισης δίδονται στους πίνακες που ακολουθούν:
The results, after elimination of outliers, of mean and standard deviation are given in the tables in this point:
Μέσοι όροι σε g/kg
Means in g/kg
n Αριθμός συμμετασχόντων εργαστηρίων.
n Number of participating laboratories.
Υλικό αναφοράς
Reference material
Αμινοξύ
Amino Acid
Κυστ(ε)ίνη
Cyst(e)ine
Αναμεμειγμένη ζωοτροφή χοίρων
Mixed Pig Feed
Φύραμα πουλερικών
Broiler Compound
Συμπύκνωμα πρωτεΐνης
Protein Concentrate
Πρόμειγμα
Premixture