natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Υπερήχηση και διαύγαση, διατηρώντας το υπερκείμενο σε κάθε στάδιο, τρεις φορές συνολικά.
Sonicate and clarify, storing the supernatant at each stage, a total of three times.
Τα υπερκείμενα συγκεντρώνονται και φυγοκεντρούνται στις 24000 rpm (100,000 g) επί 120 λεπτά στους +4 °C πάνω από ένα στρώμα 5 ml 40 % σουκρόζης (β/ο σε PBS) χρησιμοποιώντας σωλήνες φυγόκεντρου Becχλμ.ann των 30 ml και κινητήρα SW 28.
Pool the supernatants and centrifuge at 24000 rpm (100,000 g) for 120 minutes at +4 °C over a 5 ml cushion of 40 % sucrose (w/v in PBS) using 30 ml Beckmann centrifuge tubes and an SW 28 rotor.
Το υπερκείμενο απορρίπτεται, οι σωλήνες στεγνώνονται εντελώς και το ίζημα επαναιωρείται σε PBS με υπερήχηση.
Discard the supernatant, drain the tubes thoroughly and re-suspend the pellet in PBS by sonication.
Το αντιγόνο διατηρείται σε επιμέρους δόσεις στους –20 °C.
Store the antigen in aliquots at –20 °C.
Τιτλοδότηση του αντιγόνου BTV για Elisa:
Titration of BTV ELISA antigen:
Αντιγόνο καταρροϊκού πυρετού του προβάτου για Elisa τιτλοδοτείται με την έμμεση Elisa.
Bluetongue ELISA antigen is titrated by the indirect ELISA.
Διπλασιαζόμενες αραιώσεις του αντιγόνου τιτλοδοτούνται εναντίον μιας σταθερής αραίωσης (1/100) του μονοκλωνικού αντισώματος 3-17-Α3.
Twofold dilutions of antigen are titrated against a constant dilution (1/100) monoclonal antibody 3-17-A3.
Ο κανόνας εκτέλεσης είναι ο ακόλουθος:
The protocol is as follows:
Τιτλοδοτείται αραίωση 1/20 αντιγόνου BTV σε PBS κατά μήκος του τρυβλίου μικροτιτλοδότησης σε σειρά διπλασιαζόμενης αραίωσης (50 μl/κοιλότητα) χρησιμοποιώντας σιφώνιο πολλών διαύλων.
Titrate a 1:20 dilution of BTV antigen in PBS across the microtitre plate in a twofold dilution series (50 μl/well) using a multichannel pipette.
Επώαση επί μία ώρα στους 37 °C πάνω σε περιστροφικό αναδευτήρα.
Incubate for one hour at 37 °C on an orbital shaker.
Τα τρυβλία εκπλύονται τρεις φορές με PBS.
Wash plates three times with PBS.
Προστίθενται 50 μl μονοκλωνικού αντισώματος 3-17-Α3 (αραιωμένου κατά 1/100) σε κάθε κοιλότητα του τρυβλίου μικροτιτλοδότησης.
Add 50 μl of monoclonal antibody 3-17-A3 (diluted 1/100) to each well of the microtitre plate.
Προστίθενται 50 μl αντιγλοβουλίνης ποντικού από κόνικλο συνεζευγμένη με υπεροξειδάση αγριοραπανιού, αραιωμένη σε μία προτιτλοδοτημένη βέλτιστη συγκέντρωση, σε κάθε κοιλότητα του τρυβλίου μικροτιτλοδότησης.
Add 50 μl of rabbit anti-mouse globulin conjugated to horseradish peroxidase, diluted to a pre-titrated optimal concentration, to each well of the microtitre plate.
Προστίθεται χρωμογόνο και υπόστρωμα όπως περιγράφηκε προηγούμενα.
Add substrate and chromogen as described previously.
Η αντίδραση διακόπτεται μετά από 10 λεπτά με την προσθήκη ενός γραμμομορίου θειικού οξέος (50 μl/κοιλότητα).
Stop the reaction after 10 minutes by the addition of 1 Molar sulphuric acid (50 μl/well).
Κατά την ανταγωνιστική μέθοδο, το μονοκλωνικό αντίσωμα πρέπει να βρίσκεται σε περίσσεια, για αυτό επιλέγεται μια αραίωση του αντιγόνου που βρίσκεται πάνω στην καμπύλη τιτλοδότησης (όχι στην περιοχή οριζοντιοποίησης) που δίνει περίπου 0,8 OD από 10 λεπτά.
In the competitive assay, the monoclonal antibody must be in excess, therefore a dilution of antigen is chosen which falls on the titration curve (not on the plateau region) which gives approximately 0,8 OD after 10 minutes.
Η δοκιμή ανοσοδιάχυσης σε πήγμα αγαρόζης πρέπει να εκτελείται σύμφωνα με την ακόλουθη πρότυπη διαδικασία:
The agar gel immuno-diffusion test shall be carried out according to the following protocol:
Αντιγόνο:
Antigen:
Παρασκευάζεται κατακαθιζόμενο αντιγόνο σε κάθε σύστημα κυτταροκαλλιέργειας που υποστηρίζει τον ταχύ πολλαπλασιασμό ενός στελέχους αναφοράς του ιού του καταρροϊκού πυρετού του προβάτου.
Precipitating antigen is prepared in any cell culture system that supports the rapid multiplication of a reference strain of bluetongue virus.
Συνιστώνται κύτταρα Vero ή ΒΗΚ.
BHK or Vero cells are recommended.
Το αντιγόνο υπάρχει στο υπερκείμενο υγρό στο τέλος της καλλιέργειας του ιού, αλλά απαιτείται 50 έως 100πλάσια συγκέντρωσης για να είναι αποτελεσματικό. Αυτό μπορεί να επιτευχθεί με κάθε τυποποιημένη διαδικασία συμπύκνωσης πρωτεΐνης·
Antigen is present in the supernatant fluid at the end of virus growth but requires 50 to 100-fold concentration to be effective.
ιός μέσα στο αντιγόνο μπορεί να αδρανοποιηθεί με την προσθήκη 0,3 % (ο/ο) β-προπιολακτόνης.
This may be achieved by any standard protein concentration procedure; virus in the antigen may be inactivated by the addition of 0,3 % (v/v) beta-propiolactone.
Γνωστός θετικός ορός αναφοράς:
Known positive control serum:
Χρησιμοποιώντας τον ορό και αντιγόνο παγκόσμιας αναφοράς, παράγεται ένας ορός εθνικού τύπου, τυποποιημένος στη βέλτιστη αναλογία έναντι του ορού παγκόσμιας αναφοράς, λυοφιλιμένος και χρησιμοποιούμενος όπως ο γνωστός ορός αναφοράς σε κάθε δοκιμή.
Using the international reference serum and antigen a national standard serum is produced, standardised for optimal proportion against the international reference serum, freeze-dried and used as the known control serum in each test.
Δοκιμαστικός ορός
Test serum
Διαδικασία 1 % αγαρόζη παρασκευασμένη σε ρυθμιστικό διάλυμα βορικού οξέος ή βαρβιτολικού νατρίου pH 8,5 με 9,0, εκχύεται σε τρυβλία με ελάχιστο βάθος 3,0 mm. Ένα σχέδιο δοκιμής επτά κοιλοτήτων ελεύθερων υγρασίας, η καθεμία με διάμετρο 5,0 mm, κόβεται μέσα στο άγαρ.
Procedure 1 % agarose prepared in borate or sodium barbitol buffer, pH 8,5 to 9,0, is poured into a petri dish to a minimum depth of 3,0 mm. A test pattern of seven moisture-free wells, each 5,0 mm in diameter, is cut in the agar.
Η διάταξη δοκιμής αποτελείται από μία κεντρική κοιλότητα και έξι κοιλότητες σε κυκλική διάταξη γύρω από αυτήν, ακτίνας 3 εκατοστών.
The pattern consists of one centre well and six wells arranged round it in a circle of radius 3 cm.
Η κεντρική κοιλότητα γεμίζει με το πρότυπο αντιγόνο.
The central well is filled with the standard antigen.
Οι περιφερειακές κοιλότητες 2, 4 και 6 πληρούνται με γνωστό θετικό ορό, οι κοιλότητες 1, 3 και 5 πληρούνται με δοκιμαστικό ορό.
Peripheral wells 2, 4 and 6 are filled with known positive serum, wells 1, 3 and 5 are filled with test sera.
Το σύστημα επωάζεται έως 72 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου σε κλειστό υγρό θάλαμο.
The system is incubated for up to 72 hours at room temperature in a closed humid chamber.
Ερμηνεία Ένας ορός υπό δοκιμή είναι θετικός όταν σχηματίζει μια ειδική γραμμή ιζήματος με το αντιγόνο και όταν σχηματίζει πλήρη γραμμή ταυτοποίησης με τον ορό ελέγχου.
Interpretation A test serum is positive if it forms a specific precipitin line with the antigen and forms a complete line of identity with the control serum.
Επιζωοτική αιμορραγική νόσος
Epizootic haemorrhagic disease (EHD)
Παρασκευάζεται κατακαθιζόμενο αντιγόνο σε κάθε σύστημα κυτταροκαλλιέργειας που υποστηρίζει τον ταχύ πολλαπλασιασμό του κατάλληλου ορότυπου (-ων) του ιού της επιζωοτικής αιμορραγικής νόσου.
Precipitating antigen is prepared in any cell culture system that supports the rapid multiplication of the appropriate serotype(s) of epizootic haemorrhagic disease virus.
Λοιμώδης ρινοτραχειίτιδα (IBR) / μολυσματική φλυκταινώδης αιδιοκολπίτιδα βοοειδών (IVV)
Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) / infectious pustular vulvo-vaginitis (IPV)
Η δοκιμή αδρανοποίησης ορού πρέπει να εκτελείται σύμφωνα με την ακόλουθη πρότυπη διαδικασία:
The serum neutralisation test shall be carried out according to the following protocol:
Ορός Όλοι οι οροί αδρανοποιούνται με θέρμανση στους 56 °C επί 30 λεπτά πριν χρησιμοποιηθούν.
Serum All sera are heat-inactivated at 56 °C for 30 minutes before use.
Διαδικασία Η δοκιμή ουδετεροποίησης σταθερού ιού-μεταβλητού ορού σε τρυβλία μικροτιτλοδότησης χρειάζεται MDBK ή άλλα ευαίσθητα κύτταρα.
Procedure The constant virus-varying serum neutralisation test on microtitre plates employs MDBK or other susceptible cells.
Η φυλή του Κολοράντο, Οξφόρδης ή οποιαδήποτε άλλη φυλή αναφοράς του ιού χρησιμοποιείται σε 100 TCID50 ανά 0,025 ml· δείγματα αδρανοποιημένου, μη αραιωμένου ορού αναμειγνύονται με ίσο όγκο (0,025 ml) αιωρήματος ιού.
The Colorado, Oxford or any other reference strain of the virus is used at 100 TCID50 per 0,025 ml; inactivated undiluted serum samples are mixed with an equal volume (0,025 ml) of virus suspension.
Τα μείγματα ιού/ορού επωάζονται επί 24 ώρες στους 37 °C στα τρυβλία μικροτιτλοδότησης πριν προστεθούν τα κύτταρα MDBK.
The virus/serum mixtures are incubated for 24 hours at 37 °C in the microtitre plates before the MDBK cells are added.
Τα κύτταρα χρησιμοποιούνται σε συγκέντρωση τέτοια, ώστε να σχηματίζεται μία πλήρης μονοκυτταρική στοιβάδα ύστερα από 24 ώρες.
Cells are used at a concentration which forms a complete monolayer after 24 hours.
Έλεγχοι δοκιμή μολυσματικότητας ιού, ii) έλεγχοι τοξικότητας ορού, iii) έλεγχοι μη εμβολιασμένης κυτταροκαλλιέργειας, iv) αντιοροί αναφοράς.
Controls (i) virus infectivity assay, (ii) serum toxicity controls, (iii) uninoculated cell culture controls, (iv) reference antisera.
Ερμηνεία Τα αποτελέσματα της δοκιμής ουδετεροποίησης και ο τίτλος του ιού που χρησιμοποιείται στη δοκιμή καταγράφονται μετά από επώαση τριών έως έξι ημερών στους 37 °C.
Interpretation The results of the neutralisation test and the titre of the virus used in the test are recorded after three to six days incubation at 37 °C.
Οι τίτλοι ορού θεωρούνται αρνητικοί εάν δεν υπάρξει ουδετεροποίηση σε διάλυμα 1/2 (μη αραιωμένου ορού).
Serum titres are considered negative if there is no neutralisation at a dilution of 1/2 (undiluted serum).
Κάθε άλλη δοκιμή που αναγνωρίζεται βάσει της απόφασης 2004/558/ΕΚ [10].Αφθώδης πυρετός (FMD)
Any other test recognised in the framework of Decision 2004/558/EC [10].Foot-and-mouth disease (FMD)
Η συλλογή οισοφαγικών/φαρυγγικών δειγμάτων και η δοκιμή πρέπει να εκτελούνται σύμφωνα με την ακόλουθη πρότυπη διαδικασία:
Collecting oesophageal/pharyngeal samples and testing shall be carried out according to the following protocol:
Αντιδραστήρια Πριν από τη δειγματοληψία, παρασκευάζεται μέσο μεταφοράς.
Reagents Prior to sampling, transport medium is prepared.
Όγκοι 2 ml διανέμονται σε τόσα δοχεία συλλογής όσα και τα ζώα δειγματοληψίας.
Two ml volumes are dispensed in as many containers as there are animals to be sampled.
Τα χρησιμοποιούμενα δοχεία πρέπει να αντέχουν στην ψύξη με στερεό CO2 ή υγρό άζωτο.
The containers used must withstand freezing over solid CO2 or liquid nitrogen.
Τα δείγματα λαμβάνονται χρησιμοποιώντας ένα ειδικά σχεδιασμένο συλλέκτη σιέλου ή «probang».
Samples are obtained by the use of a specially-designed sputum collector or ’probang’.
Για να ληφθεί ένα δείγμα, το κύπελλο του probang διέρχεται μέσα από το στόμα, πάνω από τη ράχη της γλώσσας και προς τα κάτω, μέσα στο πάνω τμήμα του οισοφάγου.
To obtain a sample the probang cup is passed through the mouth, over the dorsum of the tongue and down into the upper part of the oesophagus.
Καταβάλλεται προσπάθεια να αποξεσθεί το επιφανειακό επιθήλιο του πάνω οισοφάγου και φάρυγγα με κινήσεις κατευθυνόμενες εγκαρσίως και επιμήκως.
Attempts are made to scrape the surface epithelium of the upper oesophagus and pharynx by movements directed laterally and dorsally.
Κατόπιν το probang αποσύρεται, προτιμότερα αφού το ζώο καταπιεί.
The probang is then withdrawn, if possible after the animal has swallowed.
Το κύπελλο πρέπει να είναι γεμάτο και να περιέχει ένα μείγμα βλέννας, σιέλου, οισοφαγικού υγρού και κυτταρικών υπολειμμάτων.
The cup must be full and contain a mixture of mucus, saliva, oesophageal fluid and cellular debris.
Πρέπει να λαμβάνεται μέριμνα να εξασφαλίζεται ότι κάθε δείγμα περιέχει ορισμένο ορατό κυτταρικό υλικό.
Care must be taken to ensure that each specimen contains some visible cellular material.
Πρέπει να αποφεύγεται ο αδέξιος χειρισμός που προκαλεί αιμορραγία.
Very rough handling which causes bleeding must be avoided.
Τα δείγματα μερικών ζώων μπορεί να είναι σοβαρά μολυσμένα με περιεχόμενα μηρυκασμού.
Samples from some animals may be heavily contaminated with ruminal contents.
Τέτοια δείγματα πρέπει να απορρίπτονται και το στόμα των ζώων να ξεπλένεται με νερό, ή κατά προτίμηση φυσιολογικό ορό (αλατούχο διάλυμα), πριν επαναληφθεί η δειγματοληψία.
Such samples must be discarded and the mouth of the animal flushed with water, or preferably physiological saline, before repeat sampling.
Μεταχείριση των δειγμάτων Κάθε δείγμα που συλλέγεται στο κύπελλο του probang εξετάζεται ποιοτικά και 2 ml προστίθενται σε ίσο όγκο μέσου μεταφοράς σε δοχείο που μπορεί να αντέξει σε ψύξη.
Treatmentof samples: Each sample collected in the probang cup is examined for quality and 2 ml added to an equal volume of transport medium in a container which can withstand freezing.
Τα δοχεία συλλογής κλείνονται σφιχτά, σφραγίζονται, απολυμαίνονται και καταχωρούνται με ετικέτες.
The containers are tightly closed, sealed, disinfected and labelled.
Τα δείγματα διατηρούνται δροσερά (+4 °C) και εξετάζονται μέσα σε τρεις έως τέσσερις ώρες ή τοποθετούνται πάνω σε ξηρό πάγο (–69 °C) ή υγρό άζωτο και διατηρούνται παγωμένα μέχρι να εξεταστούν.
The samples are kept cool (+4 °C) and examined within three to four hours or placed over dry ice (-69 °C) or liquid nitrogen and kept frozen until examined.
Από ζώο σε ζώο το probang απολυμαίνεται και πλένεται τρεις φορές με καθαρό νερό.
Between animals the probang is disinfected and washed in three changes of clean water.
Δοκιμή για ιό FMD Τα δείγματα επωάζονται σε καλλιέργειες πρωτογενών κυττάρων θυρεοειδούς βοοειδούς χρησιμοποιώντας τουλάχιστον τρεις σωλήνες ανά δείγμα.
Testing for FMD virus: Samples are inoculated into cultures of primary bovine thyroid cell cultures using at least three tubes per sample.
Επιτρέπεται να χρησιμοποιούνται και άλλα ευαίσθητα κύτταρα π.χ. πρωτογενή κύτταρα νεφρού βοοειδών ή χοίρων, αλλά πρέπει να λαμβάνεται υπόψη ότι για ορισμένα στελέχη του ιού του αφθώδους πυρετού είναι λιγότερο ευαίσθητα.
Other susceptible cells such as primary bovine or porcine kidney cells can be used but it must be kept in mind that for some strains of FMD virus they are less sensitive.
Οι σωλήνες επωάζονται στους 37 °C σε συσκευή περιστροφής και εξετάζονται καθημερινά επί 48 ώρες ως προς κυτοπαθολογικό σύμπτωμα (ΚΠΣ).
The tubes are incubated at 37 °C on a roller apparatus and examined daily for 48 hours for the presence of a cytopathic effect (CPE).
Εάν αποδειχθούν αρνητικές, οι καλλιέργειες περνούνται χωρίς δοκιμή σε νέες καλλιέργειες και επανεξετάζονται επί 48 ώρες.
If negative, cultures are blind passaged onto new cultures and re-examined for 48 hours.
Η εξειδίκευση κάθε ΚΠΣ πρέπει να επιβεβαιώνεται.
The specificity of any CPE must be confirmed.
Συνιστώμενα μέσα μεταφοράς:
Recommended transport media:
Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού οξέος 0,08 Μ, pH 7,2 περιέχον 0,01 % αλβουμίνης ορού βοοειδών, 0,002 % ερυθρού φαινόλης και αντιβιοτικά.
0,08M phosphate buffer pH 7,2 containing 0,01 % bovine serum albumin, 0,002 % phenol red and antibiotics.
Μέσο ιστοκαλλιέργειας (π.χ. Eagle's ΜΕΜ) περιέχον ρυθμιστικό διάλυμα HEPES 0,04 Μ, 0,01 % αλβουμίνη ορού βοοειδών και αντιβιοτικά, pH 7,2.
Tissue culture medium (such as Eagle's MEM) containing 0,04 M Hepes buffer, 0,01 % bovine serum albumin and antibiotics, pH 7,2.
Πρέπει να προστεθούν αντιβιοτικά (ανά ml τελικό) στο μέσο μεταφοράς π.χ.: πενικιλλίνη 1000 IU, θειική νεομυκίνη 100 IU, θειική πολυμυξίνη Β 50 IU, μυκοστατίνη 100 IU.
Antibiotics (per ml final) must be added to the transport medium such as penicillin1000 IU, neomycin sulphate100 IU, polymyxin B sulphate50 IU, mycostatin100 IU.
Η δοκιμή ουδετεροποίησης ιού πρέπει να εκτελεσθεί σύμφωνα με την ακόλουθη πρότυπη διαδικασία:
The virus neutralisation test shall be carried out according to the following protocol:
Αντιδραστήρια Παρασκευάζεται προς αποθήκευση αντιγόνο ΙΑΠ σε κυτταροκαλλιέργειες ή πάνω σε γλώσσες κατοικίδιων βοοειδών και διατηρείται στους –70 °C ή χαμηλότερα ή στους –20 °C μετά από προσθήκη γλυκερίνης 50 %.
Reagents Stock FMDV antigen is prepared in cell cultures or on cattle tongues and stored at -70 °C or less or at -20 °C after the addition of 50 % glycerol.
Αυτό είναι το αποθηκευμένο αντιγόνο.
This is the stock antigen.
Ο ιός του αφθώδους πυρετού είναι σταθερός υπό τις συνθήκες αυτές και οι τίτλοι λίγο μεταβάλλονται για μία περίοδο μηνών.
FMDV is stable under these conditions and titres vary little over a period of months.
Διαδικασία Η δοκιμή εκτελείται σε τρυβλία μικροτιτλοδότησης βαθμού ιστοκαλλιέργειας, επίπεδου πυθμένα, χρησιμοποιώντας ευαίσθητα κύτταρα όπως IBRS-2, ΒΗΚ-21 ή κύτταρα νεφρού μοσχαριού.
Procedure The test is carried out in flat-bottomed tissue culture grade microtitre plates using susceptible cells such as IB-RS-2, BHK-21 or calf kidney cells.
Οροί για δοκιμή αραιώνονται στο 1/4 με μέσο κυτταροκαλλιέργειας απηλλαγμένο ορού με την προσθήκη 100 IU/ml νεομυκίνης ή άλλων κατάλληλων αντιβιοτικών.
Sera for the test are diluted 1/4 in serum-free cell culture medium with the addition of 100 IU/ml neomycin or other suitable antibiotics.
Οι οροί αδρανοποιούνται στους 56 °C επί 30 λεπτά και ποσότητες των 0,05 ml χρησιμοποιούνται για την παρασκευή μίας διπλής σειράς σε τρυβλία μικροτιτλοδότησης χρησιμοποιώντας επαναληπτικές αραιώσεις των 0,05 ml.
Sera are inactivated at 56 °C for 30 minutes and 0.05 ml amounts are used to prepare a twofold series on microtitre plates using 0,05 ml diluting loops.
Κατόπιν προστίθεται σε κάθε κοιλότητα προτιτλοδοτημένος ιός επίσης αραιωμένος με μέσο καλλιέργειας απηλλαγμένο ορού και περιέχον 100 TCID50/0,05 ml.
Pre-titrated virus also diluted in serum-free culture medium and containing 100 TCID50/0.05 ml is then added to each well.
Ακολουθώντας επώαση στους 37 °C επί μία ώρα για να επέλθει ουδετεροποίηση, προστίθενται σε κάθε κοιλότητα 0,05 ml κυττάρων αιώρησης περιέχοντα 0,5-1,0 × 106 κύτταρα ανά 1 ml σε μέσο κυτταροκαλλιέργειας περιέχον ορό απηλλαγμένο αντισώματος αφθώδους πυρετού και τα τρυβλία σφραγίζονται.
Following incubation at 37 °C for one hour to allow neutralisation to take place, 0,05 ml of suspension cells containing 0,5 to 1.0 × 106 cells per 1 ml in cell culture medium containing serum free of FMD antibody is added to each well and the plates are sealed.
Τα τρυβλία επωάζονται σε 37 °C.
Plates are incubated at 37 °C.
Οι μονοκυτταρικές στοιβάδες είναι κανονικά σύγχρονες μέσα σε 24 ώρες.
Monolayers are normally confluent within 24 hours.
Το ΚΠΣ έχει συνήθως εξελιχθεί αρκετά σε 48 ώρες για μια μικροσκοπική ανάγνωση της δοκιμής.
CPE is usually sufficiently advanced at 48 hours for a microscopic reading of the test.
Κατά το χρόνο αυτόν μπορεί να γίνει μία τελική μικροσκοπική ανάγνωση ή τα τρυβλία μπορούν να στερεωθούν και να χρωματισθούν για μακροσκοπική ανάγνωση, για παράδειγμα χρησιμοποιώντας αλατούχο διάλυμα φορμόλης 10 % και κυανό του μεθυλενίου 0,05 %.
At this time a final microscopic reading may be made or the plates may be fixed and stained for macroscopic reading, for instance using 10 % formol-saline and 0,05 % methylene blue.
Έλεγχοι Οι έλεγχοι σε κάθε δοκιμή περιλαμβάνουν ομόλογο αντιορό γνωστού τίτλου, ένα κυτταρικό έλεγχο, έναν έλεγχο τοξικότητας ορού, έναν έλεγχο μέσου και μια τιτλοδότηση ιού από την οποία υπολογίζεται η πραγματική ποσότητα ιού στη δοκιμή.
Controls Controls in each test include homologous antiserum of known titre, a cell control, a serum toxicity control, a medium control, and a virus titration from which the actual amount of virus in the test is calculated.
Ερμηνεία Κοιλότητες με ένδειξη ΚΠΣ θεωρούνται μολυσμένες και οι τίτλοι ουδετεροποίησης εκφράζονται ως το αμοιβαίο της τελικής αραίωσης του ορού παρόντος στα μείγματα ορού/ιού στο 50 % τελικό σημείο, υπολογιζόμενο σύμφωνα με τη μέθοδο Spearman-Karber.
Interpretation Wells with evidence of CPE are considered to be infected and neutralisation titres are expressed as the reciprocal of the final dilution of serum present in the serum/virus mixtures at the 50 % end point estimated according to the Spearman-Karber method.
Οι δοκιμές θεωρούνται έγκυρες όταν η πραγματική ποσότητα του ιού που χρησιμοποιείται ανά κοιλότητα στη δοκιμή είναι μεταξύ 101,5 και 102,5 TCID50 και όταν ο τίτλος του ορού αναφοράς βρίσκεται μέσα στο διπλάσιο του αναμενόμενου τίτλου του, υπολογιζόμενου από την πορεία των αποτελεσμάτων προηγουμένων τιτλοδοτήσεων.
Tests are considered to be valid when the actual amount of virus used per well in the test is between 101,5 and 102,5 TCID50 and when the titre of the reference serum is within twofold of its expected titre, estimated from the mode of previous titrations.
Όταν οι έλεγχοι βρίσκονται εκτός των ορίων αυτών, οι δοκιμές επαναλαμβάνονται.
When the controls are outside these limits the tests are repeated.
Τίτλος τελικού σημείου 1/11 ή λιγότερο θεωρείται αρνητικός.
An end point titre of 1/11 or less is taken as negative.
Η ανίχνευση και ποσοτική αξιολόγηση αντισώματος με Elisa πρέπει να εκτελείται σύμφωνα με την ακόλουθη πρότυπη διαδικασία:
The detection and quantification of antibody by ELISA shall be carried out according to the following protocol:
Αντιδραστήρια Αντιορός κουνελιού στο αντιγόνο 146S 7 τύπων ιού αφθώδους πυρετού (ΙΑΠ) χρησιμοποιούμενος σε προκαθορισμένη βέλτιστη συγκέντρωση σε ρυθμιστικό διάλυμα ανθρακικού/διττανθρακικού, pH 9,6.
Reagents Rabbit antisera to 146S antigen of seven types of foot-and-mouth disease virus (FMDV) used at a predetermined optimum concentration in carbonate/bicarbonate buffer, pH 9,6.
Τα αντιγόνα παρασκευάζονται από επιλεγμένες στελέχη του ιού ανεπτυγμένες πάνω σε μονοκυτταρική στοιβάδα κυττάρων ΒΗΚ-21.
Antigens are prepared from selected strains of virus grown on monolayers of BHK-21 cells.
Χρησιμοποιούνται τα ακαθάριστα υπερκείμενα και προτιτλοδοτούνται σύμφωνα σε την πρότυπη διαδικασία, αλλά χωρίς ορό, ώστε να δώσουν μια αραίωση, η οποία, μετά την προσθήκη ίσου όγκου PBST (αλατούχο ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού περιέχον 0,05 % Tween-20 και δείκτη ερυθρό φαινόλης), θα έδινε μία τιμή οπτικής πυκνότητας μεταξύ 1,2 και 1,5.
The unpurified supernatants are used and pretitrated according to the protocol but without serum, to give a dilution which after the addition of an equal volume of PBST (phosphate buffered saline containing 0,05 % Tween-20 and phenol red indicator) would give an optical density reading of between 1,2 and 1,5.
Οι ιοί μπορούν να χρησιμοποιηθούν αδρανοποιημένοι.
The viruses can be used inactivated.
Το PBST χρησιμοποιείται ως αραιωτικό.
PBST is used as a diluent.
Παρασκευάζεται αντιορός ινδικού χοιριδίου με εμβολιασμό ινδικών χοιριδίων με αντιγόνο 146S κάθε οροτύπου.
Guinea-pig antisera are prepared by inoculating guinea pigs with 146S antigen of each serotype.
Παρασκευάζεται μία προκαθορισμένη βέλτιστη συγκέντρωση σε PBST περιέχοντας 10 % φυσιολογικό ορό βοοειδούς και 5 % φυσιολογικό ορό κουνελιού.
A predetermined optimum concentration is prepared in PBST containing 10 % normal bovine serum and 5 % normal rabbit serum.
Χρησιμοποιείται ανοσογλοβουλίνη αντιινδικού χοιριδίου από κουνέλι συζευγμένο με υπεροξειδάση αγριοραπανιού σε προκαθορισμένη βέλτιστη συγκέντρωση σε PBST περιέχοντας 10 % φυσιολογικό ορό βοοειδούς και 5 % φυσιολογικό ορό κουνελιού.
Rabbit anti-guinea-pig immunoglobulin conjugated to horseradish peroxidase is used at a predetermined optimum concentration in PBST containing 10 % normal bovine serum and 5 % normal rabbit serum.
Οι δοκιμαστικοί οροί αραιώνονται σε PBST.
Test sera are diluted in PBST.
Τρυβλία για Elisa καλύπτονται με 50 ml ορού κουνελιού κατά του ιού και αφήνονται μέχρι την επομένη σε υγρό θάλαμο σε θερμοκρασία δωματίου.
ELISA plates are coated with 50 μl of rabbit antiviral sera overnight in a humidity chamber at room temperature.
Παρασκευάζονται πενήντα μικρολίτρα διπλής, διπλασιαζόμενης σειράς κάθε δοκιμαστικού ορού ξεκινώντας κατά 1/4 σε τρυβλία πολλαπλών κοιλοτήτων, πυθμένα σχήματος U (τρυβλία-φορέας).
Fifty microlitres of a duplicate, twofold series of each test serum starting at 1/4 are prepared in U-bottomed multiwell plates (carrier plates).
Προστίθενται σε κάθε κοιλότητα πενήντα μικρολίτρα σταθερής δόσης αντιγόνου και αφήνονται τα μείγματα κατά τη διάρκεια της νύχτας στους 4 °C.
Fifty microlitres of a constant dose of antigen are added to each well and the mixtures are left overnight at 4 °C.
Η προσθήκη αντιγόνου περιορίζει την έναρξη της διάλυσης του ορού σε 1/8.
The addition of the antigen reduces the starting serum dilution to 1/8.