natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Καθαρή ροβενιδίνη: υδροχλωρική 1,3-δις [4-χλωροβενζυλιδενο)αμινο]γουανιδίνη.
Pure robenidine: 1,3-bis [(4-chlorobenzylidene)amino]guanidine — hydrochloride.
Αρχικό πρότυπο διάλυμα ροβενιδίνης: 300 μg/ml
Robenidine stock standard solution: 300 μg/ml
Ζυγίζουμε 30 mg της πρότυπης ουσίας (3.9) με ακρίβεια 0,1 mg.
Weigh to the nearest 0,1 mg, 30 mg of robenidine standard substance (3.9).
Διαλύουμε σε οξινισμένη μεθανόλη (3.2) εντός βαθμονομημένης φιάλης των 100 ml, συμπληρώνουμε μέχρι τη χαραγή με τον ίδιο διαλύτη και αναμειγνύουμε.
Dissolve in acidified methanol (3.2) in a 100 ml graduated flask, make up to the mark with the same solvent and mix.
Περιτυλίσσουμε τη φιάλη με αλουμινόχαρτο και τη φυλάσσουμε σε σκοτεινό μέρος.
Wrap the flask with aluminium foil and store in a dark place.
Ενδιάμεσο πρότυπο διάλυμα ροβενιδίνης: 12 μg/ml
Robenidine intermediate standard solution: 12 μg/ml
Μεταφέρουμε 10,0 ml του αρχικού πρότυπου διαλύματος (3.9.1) εντός βαθμονομημένης φιάλης των 250 ml, συμπληρώνουμε μέχρι τη χαραγή με την κινητή φάση (3.8) και αναμειγνύουμε.
Transfer 10,0 ml of the stock standard solution (3.9.1) into a 250 ml graduated flask, make up to the mark with the mobile phase (3.8) and mix.
Μεταφέρουμε 5,0 ml 10,0 ml, 15,0 ml, 20,0 ml και 25,0 ml του ενδιάμεσου πρότυπου διαλύματος (3.9.2) σε βαθμονομημένες φιάλες των 50 ml.
Into a series of 50 ml calibrated flasks, transfer 5,0, 10,0, 15,0, 20,0 and 25,0 ml of the intermediate standard solution (3.9.2).
Συμπληρώνουμε μέχρι τη χαραγή με την κινητή φάση (3.8) και αναμειγνύουμε.
Make up to the mark with mobile phase (3.8) and mix.
Η συγκέντρωση των διαλυμάτων αυτών σε ροβενιδίνη είναι αντιστοίχως 1,2, 2,4, 3,6, 4,8 και 6,0 μg/ml.
These solutions correspond to 1,2, 2,4, 3,6, 4,8 and 6,0 μg/ml of robenidine respectively.
Νερό καθαρότητας ισοδύναμης με HPLC
Water equivalent to HPLC grade.
Υάλινη στήλη
Glass column.
Υάλινη στήλη φαιοκίτρινου χρώματος (όπως το χρώμα του ηλέκτρου), εφοδιασμένη με στρόφιγγα και με δεξαμενή χωρητικότητας 150 ml περίπου, εσωτερικής διαμέτρου 10-15 mm και μήκους 250 mm.
Constructed of amber glass fitted with a stopcock and a reservoir of approximately 150 ml capacity, internal diameter 10 to 15 mm, length 250 mm.
Συσκευή HPLC με ανιχνευτή υπεριώδους ακτινοβολίας μεταβλητού μήκους κύματος ή με αντιστοιχία διόδιων ως ανιχνευτή η οποία να λειτουργεί στην περιοχή 250-400 nm.
HPLC equipment with variable wavelength ultraviolet detector or diode array detector operating in the range of 250 to 400 nm.
Στήλη υγρής χρωματογραφίας διαστάσεων 300 mm × 4 mm, με πληρωτικό υλικό C18 πάχους 10 μm ή ισοδύναμη
Liquid chromatographic column: 300 mm x 4 mm, C18 10 μm packing or equivalent.
Ηθμός υαλοϊνών (Whatman GF/Α ή ισοδύναμος)
Glass fibre filter paper (Whatman GF/A or equivalent).
Διηθητικές μεμβράνες πάχους 0,22 μm
Membrane filters, 0,22 μm.
Διηθητικές μεμβράνες, 0,45 μm
Membrane filters, 0,45 μm.
Πρέπει να αναλυθεί τυφλό δείγμα ζωοτροφής για να διαπιστωθεί ότι δεν υπάρχει σε αυτό ούτε ροβενιδίνη ούτε άλλες παρεμποδίζουσες ουσίες.
A blank feed shall be analysed to check that neither robenidine nor interfering substances are present.
Για να εξακριβωθεί ο βαθμός ανάκτησης, πρέπει να αναλυθεί τυφλό δείγμα ζωοτροφής (5.1.1) το οποίο θα έχει προηγουμένως εμπλουτιστεί με ποσότητα ροβονιδίνης παραπλήσια εκείνης του δείγματος.
A recovery test shall be carried out by analysing the blank feed (5.1.1) which has been fortified by addition of a quantity of robenidine, similar to that present in the sample.
Για εμπλουτισμό μέχρι 60 mg/kg, μεταφέρουμε 3,0 ml του αρχικού πρότυπου διαλύματος (3.9.1) σε κωνική φιάλη των 250 ml.
To fortify at a level of 60 mg/kg, transfer 3,0 ml of the stock standard solution (3.9.1) to a 250 ml conical flask.
Εξατμίζουμε το διάλυμα υπό ρεύμα αζώτου μέχρις ότου απομείνουν περί τα 0,5 ml.
Evaporate the solution to ca. 0,5 ml in a stream of nitrogen.
Προσθέτουμε 15 g του τυφλού δείγματος, αναμειγνύουμε και αναμένουμε επί 10 λεπτά πριν προχωρήσουμε στην εκχύλιση (5.2).
Add 15 g of the blank feed, mix and wait for 10 minutes before proceeding with the extraction step (5.2).
Για τους σκοπούς αυτής της μεθόδου, το τυφλό δείγμα ζωοτροφής πρέπει να είναι παρόμοιου τύπου προς εκείνον του δείγματος και κατά την ανάλυση δεν πρέπει να ανιχνεύεται ροβενιδίνη.
For the purpose of this method, the blank feed shall be similar in type to that of the sample and on analysis robenidine shall not be detected.
Ζυγίζονται περί τα 15 g που παρασκευασθέντος δείγματος με προσέγγιση 0,01 g, εισάγονται σε κωνική φιάλη των 250 ml όπου και προστίθενται 100,0 ml οξινισμένης μεθανόλης (3.2).
Weigh to the nearest 0,01 g, approximately 15 g of the prepared sample.
Πωματίζεται η φιάλη και ανακινείται επί μία ώρα με τον αναδευτήρα (4.2).
Transfer to a 250 ml conical flask and add 100,0 ml of acidified methanol (3.2), stopper and shake for one hour on the shaker (4.2).
Το διάλυμα διηθείται μέσω διηθητικού χάρτη από ίνες υάλου (4.5) και το διήθημα συλλέγεται σε κωνική φιάλη των 150 ml.
Filter the solution through a glass fibre filter paper (4.5) and collect the whole filtrate in a 150 ml conical flask.
Προστίθενται 7,5 g από μοριακό κόσκινο (3.4), πωματίζεται η φιάλη και ανακινείται το περιεχόμενο επί 5 λεπτά.
Add 7,5 g molecular sieve (3.4), stopper and shake for five minutes. Filter immediately through a glass-fibre filter paper.
Το εν λόγω διάλυμα κρατιέται για το στάδιο καθαρισμού (5.3).
Retain this solution for the purification step (5.3).
Καθαρισμός
Purification
Προετοιμασία της στήλης οξειδίου και αργιλίου
Preparation of the aluminium-oxide column
Μικρό βύσμα υαλοβάμβακος τοποθετείται στο κάτω μέρος μιας υάλινης στήλης (4.1) και συμπιέζεται με τη βοήθεια υάλινης ράβδου.
Insert a small glass-wool plug into the lower end of a glass column (4.1) and tamp it down using a glass rod.
Ζυγίζονται 11,0 g του παρασκευασθέντος οξειδίου του αργιλίου (3.5) και μεταφέρονται στη στήλη.
Weigh out 11,0 g of the prepared aluminium oxide (3.5) and transfer to the column.
Λαμβάνεται φροντίδα ώστε κατά το στάδιο αυτό η έκθεση στον ατμοσφαιρικό αέρα να περιορισθεί στο ελάχιστο.
Care shall be taken to minimise the exposure to the atmosphere during this stage.
Χτυπάμε ελαφρά τη στήλη από το κάτω μέρος της ώστε να κατακαθίσει το οξείδιο του αργιλίου.
Gently tap the loaded column at its lower end to settle the aluminium oxide.
Καθαρισμός δείγματος
Sample purification
Με ένα σιφώνιο εισάγονται στη στήλη 5,0 ml από το εκχύλισμα που ελήφθη κατά το στάδιο 5.2. Φέρεται στο άκρο του σιφωνίου πλησίον του τοιχώματος της στήλης και το διάλυμα αφήνεται να απορροφηθεί από το οξείδιο του αργιλίου.
Transfer onto the column by pipette 5,0 ml of the sample extract prepared in (5.2) Rest the pipette tip close to the column wall and allow the solution to be absorbed onto the aluminium oxide.
Εκλούεται η ροβενιδίνη από τη στήλη με 100 ml μεθανόλης (3.1) σε ρυθμό ροής 2-3 ml/min και συλλέγεται το υγρό της έκλουσης σε σφαιρική φιάλη των 250 ml.
Elute the robenidine from the column using 100 ml methanol (3.1), at a flow rate of 2 to 3 ml/minute and collect the eluate in a 250 ml round bottomed flask.
Το διάλυμα μεθανόλης εξατμίζεται μέχρι πλήρους ξήρανσης σε θερμοκρασία 40 oC και υπό ελαττωμένη πίεση με τη βοήθεια περιστροφικού εξατμιστήρα υμενίου (4.3).
Evaporate the methanol solution to dryness under reduced pressure at 40 oC by means of a rotary film evaporator (4.3).
Το υπόλειμμα διαλύεται εκ νέου σε 3-4 ml κινητής φάσης (3.8) και μεταφέρεται ποσοτικά σε βαθμονομημένη φιάλη των 10 ml.
Re-dissolve the residue in 3 to 4 ml of mobile phase (3.8) and transfer quantitatively to a 10 ml graduated flask.
Η φιάλη εκπλύνεται επανειλημμένως με 1-2 ml κινητής φάσης κάθε φορά και τα υπολείμματα των εκπλύσεων μεταφέρονται στη βαθμονομημένη φιάλη.
Rinse the flask with several 1 to 2 ml portions of mobile phase and transfer these rinsings to the graduated flask.
Προστίθεται ο ίδιος διαλύτης στη βαθμονομημένη φιάλη μέχρι τη χαραγή και το περιεχόμενο της φιάλης αναμειγνύεται.
Make up to the mark with the same solvent and mix.
Παρακάτω, δίδονται ενδεικτικά ορισμένες κατάλληλες συνθήκες. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν και διαφορετικές συνθήκες εφόσον παρέχουν ισοδύναμα αποτελέσματα:
The following conditions are offered for guidance, other conditions may be used provided they yield equivalent results:
Στήλη υγρής χρωματογραφίας (4.4.1),
Liquid chromatographic column (4.4.1),
Κινητή φάση HPLC (3.8),
HPLC mobile phase (3.8),
Ρυθμός ροής: 1,5 έως 2 ml/min,
Flow rate: 1,5 to 2 ml/minute,
Μήκος κύματος ανίχνευσης: 317 nm,
Detector wavelength: 317 nm,
Όγκος εισαγόμενου δείγματος: 20-50 μl.
Injection volume: 20 to 50 μl.
Ελέγχεται η σταθερότητα της χρωματογραφικής διάταξης με επανειλημμένη εισαγωγή του διαλύματος αναφοράς (3.9.3) συγκέντρωσης 3,6 μg/ml έως ότου επιτευχθούν σταθερά ύψη κορυφών ή εμβαδά και σταθεροί χρόνοι κατακράτησης.
Check the stability of the chromatographic system, injecting the calibration solution (3.9.3) containing 3,6 μg/ml several times, until constant peak heights and retention times are achieved.
Εισάγεται κατ’ επανάληψη καθένα από τα διαλύματα αναφοράς (3.9.3) και μετρούνται τα ύψη των κορυφών (εμβαδά) για κάθε συγκέντρωση.
Inject each calibration solution (3.9.3) several times and measure the peak heights (areas) for each concentration.
Χαράσσεται η καμπύλη αναφοράς με τεταγμένες τις μέσες τιμές του ύψους των κορυφών ή τις μέσες τιμές των εμβαδών και με τετμημένες τις αντίστοιχες συγκεντρώσεις σε μg ανά ml.
Plot a calibration curve using the mean peak heights or areas of the calibration solutions as the ordinates and corresponding concentrations in μg per ml as abscissae.
Εισάγεται κατ’ επανάληψη στη στήλη το εκχύλισμα του δείγματος (5.3.2) σε όγκο ίσο με εκείνον που χρησιμοποιήθηκε για τα διαλύματα αναφοράς και προσδιορίζεται το μέσο ύψος κορυφής (εμβαδόν) των κορυφών που αντιστοιχούν στη ροβενιδίνη.
Inject the sample extract (5.3.2) several times, using the same volume as taken for the calibration solutions and determine the mean peak height (area) of the robenidine peaks.
Προσδιορίζεται η συγκέντρωση του διαλύματος του δείγματος σε μg/ml με βάση το μέσο ύψος (εμβαδόν) των κορυφών της ροβενιδίνης του διαλύματος του δείγματος με τη βοήθεια της καμπύλης αναφοράς (5.4.2).
From the mean height (area) of the robenidine peaks of the sample solution determine the concentration of the sample solution in μg/ml by reference to the calibration graph (5.4.2).
Η περιεκτικότητα του δείγματος σε ροβενιδίνη κατά βάρος (mg/kg) υπολογίζεται με βάση τον ακόλουθο τύπο:
The content of robenidine w (mg/kg) in the sample is given by the following formula:
c συγκέντρωση της ροβενιδίνης στο διάλυμα του δείγματος, σε μg/ml,
c robenidine concentration of the sample solution in μg/ml,
Η ταυτότητα της ανιχνευόμενης ουσίας μπορεί να επιβεβαιωθεί με συγχρωματογραφία ή με τη χρήση συστοιχίας διόδων ως ανιχνευτή με τον οποίο γίνεται σύγκριση των φασμάτων του εκχυλίσματος του δείγματος και του διαλύματος αναφοράς (3.9.3) συγκέντρωσης 6,0 μg/ml.
The identity of the analyte can be confirmed by co-chromatography, or by using a diode-array detector by which the spectra of the sample extract and the calibration solution (3.9.3) containing 6 μg/ml are compared.
Εκχύλισμα του δείγματος εμπλουτίζεται με προσθήκη κατάλληλης ποσότητας του διαλύματος αναφοράς (3.9.3).
A sample extract is fortified by addition of an appropriate amount of calibration solution (3.9.3).
Η ποσότητα της προστιθέμενης ροβενιδίνης πρέπει να είναι παραπλήσια προς την κατ’ εκτίμηση υπολογιζόμενη ποσότητα ροβενιδίνης στο εκχύλισμα του δείγματος.
The amount of added robenidine must be similar to the estimated amount of robenidine found in the sample extract.
Αν συνεκτιμηθούν τόσο η ποσότητα που προστέθηκε όσο και η αραίωση του εκχυλίσματος, πρέπει να σημειωθεί ενίσχυση μόνον της κορυφής που αντιστοιχεί στη ροβενιδίνη.
Only the height of the robenidine peak shall be enhanced after taking into account both the amount added and the dilution of the extract.
Το πλάτος της κορυφής, στα μισά του ύψους, δεν πρέπει να παρεκλίνει περισσότερο από 10 % του αρχικού πλάτους.
The peak width, at half of its maximum height, must be within approximately 10 % of the original width.
Για ανίχνευση με συστοιχία διόδων, το περιθώριο αυτό είναι ± 2 nm.
For diode-array detection, this is typically within approximately 2 nm;
Μεταξύ 250 και 400 nm, τα φάσματα του δείγματος και του προτύπου, καταγραφόμενα στο μέγιστο ύψος των κορυφών στο χρωματογράφημα, δεν πρέπει να διαφέρουν για τα τμήματα εκείνα του φάσματος που περικλείονται μεταξύ 10 και 100 % της σχετικής απορρόφησης.
between 250 and 400 nm, the sample and standard spectra recorded at the peak apex on the chromatogram, must not be different for those parts of the spectrum within the range 10 % to 100 % of relative absorbance.
Μεταξύ 250 και 400 nm, τα φάσματα στο ανερχόμενο τμήμα, στο μέγιστο ύψος και στο κατερχόμενο τμήμα της κορυφής του εκχυλίσματος του δείγματος δεν πρέπει να διαφέρουν το ένα από το άλλο για τα τμήματα εκείνα του φάσματος που περικλείονται μεταξύ 10 % και 100 % της σχετικής απορρόφησης.
between 250 and 400 nm, the spectra of the upslope, apex and downslope of the peak produced by the sample extract must not be different from each other for those parts of the spectrum within the range 10 % to 100 % of relative absorbance.
Η διαφορά μεταξύ των αποτελεσμάτων δύο παράλληλα διενεργούμενων ποσοτικών προσδιορισμών επί του ιδίου δείγματος δεν πρέπει να υπερβαίνει το 10 % του αποτελέσματος με την υψηλότερη τιμή, για περιεκτικότητα σε ροβενιδίνη μεγαλύτερη από 15 mg/kg.
The difference between the results of two parallel determinations carried out on the same sample must not exceed 10 % of the higher result for robenidine content higher than 15 mg/kg.
Για ένα εμπλουτισμένο τυφλό δείγμα, η ανάκτηση πρέπει να είναι τουλάχιστον 85 %.
For a fortified blank sample the recovery shall be at least 85 %.
Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν σε 12 εργαστήρια και κάθε δείγμα αναλύθηκε δύο φορές.
An EC collaborative study was arranged in which four samples of poultry and rabbit feed, in meal or pelleted form were analysed by 12 laboratories.
Η ανάλυση του κάθε δείγματος έγινε εις διπλούν.
Duplicate analyses were performed on each sample.
Ζωοτροφές για πουλερικά
The results are given in the table below:
Άλευρα
Meal
Σύμπηκτα
Pellet
Ανάκτηση [%]
Recovery [%]
τυπική απόκλιση επαναληψιμότητας
standard deviation of repeatability,
τυπική απόκλιση αναπαραγωγιμότητας
standard deviation of reproducibility,
ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΟΥ DICLAZURIL
DETERMINATION OF DICLAZURIL
(+)-4-χλωροφαινυλο[2,6-διχλωρο-4-(2,3,4,5-τετραϋδρο-3,5-διοξο-1,2,4-τριαζιν-2-υλο) φαινυλ]ακετονιτρίλιο
(+)-4-chlorphenyl [2,6-dichloro-4-(2,3,4,5-tetrahydro-3,5-dioxo-1,2,4-triazin-2-yl)phenyl] acetonitrile
Η μέθοδος επιτρέπει τον προσδιορισμό του diclazuril σε ζωοτροφές και προμείγματα.
The method makes it possible to determine the level of diclazuril in feed and premixtures.
Το όριο ανίχνευσης είναι 0,1 mg/kg, το όριο προσδιορισμού είναι 0,5 mg/kg.
The limit of detection is 0,1 mg/kg, the limit of quantification is 0,5 mg/kg.
Μετά από προσθήκη εσωτερικού προτύπου, το δείγμα εκχυλίζεται με οξινισμένη μεθανόλη.
After addition of an internal standard, the sample is extracted with acidified methanol.
Στις ζωοτροφές, κατάλληλη ποσότητα του εκχυλίσματος καθαρίζεται σε φυσίγγιο εκχύλισης στερεάς φάσης C18.
For feed, an aliquot of the extract is purified on a C18 solid phase extraction cartridge.
Το diclazuril εκλούεται από το φυσίγγιο με μείγμα οξινισμένης μεθανόλης και νερού.
Diclazuril is eluted from the cartridge with a mixture of acidified methanol and water.
Έπειτα από εξάτμιση, το υπόλειμμα διαλύεται σε DMF/νερό.
After evaporation, the residue is dissolved in DMF/water.
Στα προμείγματα, το εκχύλισμα εξατμίζεται και το υπόλειμμα διαλύεται σε DMF/νερό.
For premixtures, the extract is evaporated and the residue is dissolved in DMF/water.
Η περιεκτικότητα σε diclazuril προσδιορίζεται με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) ανάστροφης φάσης τριών διαλυμάτων βαθμωτής έκλουσης με χρήση ανιχνευτή UV.
The content of diclazuril is determined by ternary gradient reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) using a UV detector.
Νερό καθαρότητας ισοδύναμης με HPLC
Water, equivalent to HPLC-grade
Όξινο θειικό τετραβουτυλαμμώνιο (TBHS)
Tetrabutylammonium hydrogen sulphate (TBHS)
Ακετονιτρίλιο καθαρότητας ισοδύναμης με HPLC
Acetonitrile, equivalent to HPLC grade
Μεθανόλη καθαρότητας ισοδύναμης με HPLC
Methanol, equivalent to HPLC grade
Ν, Ν-διμεθυλοφορμαμίδιο (DMF)
N, N-dimethylformamide (DMF)
Υδροχλωρικό οξύ, ρ20 = 1,19 g/ml
Hydrochloric acid, ρ20 = 1,19 g/ml
Πρότυπη ουσία: diclazuril ΙΙ-24: (+)-4-χλωροφαινυλο[2,6-διχλωρο-4-(2,3,4,5τετραϋδρο-3,5-διοξο-1,2,4-τριαζιν-2-υλο) φαινυλ] ακετονιτρίλιο εγγυημένης καθαρότητας, E771.
Standard substance: diclazuril II-24: (+)-4-chlorphenyl [2,6-dichloro-4-(2,3,4,5-tetrahydro-3,5-dioxo-1,2,4-triazin-2-yl) phenyl] acetonitrile with guaranteed purity, E771
Αρχικό πρότυπο διάλυμα diclazuril, 500 μg/ml
Diclazuril stock standard solution, 500 μg/ml
Σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml ζυγίζονται με ακρίβεια 0,1 mg, 25 mg πρότυπης ουσίας diclazuril (3.8).
Weigh to the nearest 0,1 mg, 25 mg of diclazuril standard substance (3.8) in a 50 ml graduated flask.
Διαλύονται σε DMF (3.6), συμπληρώνονται μέχρι τη χαραγή με DMF (3.6) και αναμειγνύονται.
Dissolve in DMF (3.6), make up to the mark with DMF (3.6) and mix.
Η φιάλη περιτυλίσσεται με φύλλο αλουμινίου ή χρησιμοποιείται σκουρόχρωμη φιάλη και φυλάσσεται στο ψυγείο.
Wrap the flask with aluminium foil or use amber flask and store in the refrigerator.
Το διάλυμα αυτό είναι σταθερό για ένα μήνα σε θερμοκρασία ≤ 4 oC.
At a temperature of ≤ 4 oC the solution is stable for 1 month.
Πρότυπο διάλυμα diclazuril, 50 μg/ml
Diclazuril standard solution, 50 μg/ml
5,00 ml του αρχικού πρότυπου διαλύματος (3.8.1.) μεταφέρονται σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml, το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με DMF (3.6) και αναμειγνύεται.
Transfer 5,00 ml of the stock standard solution (3.8.1) into a 50 ml graduated flask, make up to the mark with DMF (3.6) and mix.
Ουσία εσωτερικού προτύπου: 2,6 διχλωρο-α-(4-χλωροφαινυλο)-4-(4,5 διυδρο-3,5-διοξο-1,2,4-τριαζιν-2(3Η)-υλο)α-μεθυλοβενζολο-ακετονιτρίλιο
Internal standard substance: 2,6 dichloro-α-(4-chlorophenyl)-4-(4,5 dihydro-3,5-dioxo-1,2,4-triazine-2 (3H) — yl) α-methylbenzene-acetonitrile
Αρχικό διάλυμα εσωτερικού προτύπου, 500 μg/ml.
Internal stock standard solution, 500 μg/ml
Σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml ζυγίζονται με ακρίβεια 0,1 mg, 25 mg ουσίας εσωτερικού προτύπου (3.9).
Weigh to the nearest 0,1 mg 25 mg of internal standard substance (3.9) in a 50 ml graduated flask.
Διάλυμα εσωτερικού προτύπου, 50 μg/ml.
Internal standard solution, 50 μg/ml
5,00 ml του αρχικού διαλύματος εσωτερικού προτύπου (3.9.1.) μεταφέρονται σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml, το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με DMF (3.6) και αναμειγνύεται.
Transfer 5,00 ml of the internal stock standard solution (3.9.1) into a 50 ml graduated flask, make up to the mark with DMF (3.6) and mix.
Διάλυμα εσωτερικού προτύπου για προμείγματα, p/1000 mg/ml
Internal standard solution for premixtures, p/1000 mg/ml
(p = ονομαστική περιεκτικότητα diclazuril στο πρόμειγμα σε mg/kg)
(p = nominal content of diclazuril in the premixture in mg/kg)
Σε ογκομετρική φιάλη των 100 ml ζυγίζονται με ακρίβεια 0,1 mg ρ/10 mg της ουσίας εσωτερικού προτύπου, διαλύονται σε DMF (3.6) σε λουτρό υπερήχων (4.6), το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με DMF και αναμειγνύεται.
Weigh to the nearest 0,1 mg p/10 mg of the internal standard substance in a 100 ml graduated flask, dissolve in DMF (3.6) in a ultrasonic bath (4.6), make up to the mark with DMF and mix.
Η φιάλη περιτυλίσσεται με φύλλο αλουμινίου ή χρησιμοποιείται σκουρόχρωμη φιάλη και φυλάσσεται στο ψυγείο.
Wrap the flask with aluminium foil or use amber flask and store in a refrigerator.
Διάλυμα βαθμονόμησης, 2 μg/ml.
Calibration solution, 2 μg/ml.
2,00 ml πρότυπου διαλύματος diclazuril (3.8.2) και 2,00 ml διαλύματος εσωτερικού προτύπου (3.9.2) μεταφέρονται με σιφώνιο σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml.
Pipet 2,00 ml diclazuril standard solution (3.8.2) and 2,00 ml internal standard solution (3.9.2) into a 50 ml graduated flask.
Προστίθενται 16 ml DMF (3.6), το διάλυμα συμπληρώνεται μέχρι τη χαραγή με νερό και αναμειγνύεται.
Add 16 ml DMF (3.6), make up to the mark with water and mix.
Στήλη εκχύλισης στερεάς φάσης C18, π.χ. Bond Elut, μέγεθος: 1 cc, προσροφητικό βάρος: 100 mg.
solid phase extraction cartridge, e.g. Bond Elut, size: 1 cc, sorbent weight: 100 mg.
Διαλύτης εκχύλισης: οξινισμένη μεθανόλη.
Extraction solvent: acidified methanol.
5,0 ml υδροχλωρικού οξέος (3.7) φέρονται με σιφώνιο σε 1000 ml μεθανόλης (3.5), και αναμειγνύονται.
Pipet 5,0 ml hydrochloric acid (3.7) into 1000 ml of methanol (3.5), and mix.
Κινητή φάση για HPLC
Mobile phase for HPLC
Υγρό έκλουσης A: διάλυμα οξικού αμμωνίου-όξινου θειικού τετραβουτυλαμμωνίου.
Eluent A: ammonium acetate — tetrabutylammonium hydrogen sulphate solution.
5 g οξικού αμμωνίου (3.2) και 3,4 g TBHS (3.3) διαλύονται σε 1000 ml νερού (3.1) και αναμειγνύονται.
Dissolve 5 g ammonium acetate (3.2) and 3,4 g TBHS (3.3) in 1000 ml water (3.1) and mix.
Υγρό έκλουσης Β: ακετονιτρίλιο (3.4).
Eluent B: acetonitrile (3.4).
Υγρό έκλουσης Γ: μεθανόλη (3.5).
Eluent C: methanol (3.5).
Μηχανικός αναδευτήρας
Mechanical shaker
Εξοπλισμός HPLC με σύστημα τριών διαλυτών βαθμωτής έκλουσης
Equipment for ternary gradient HPLC
Στήλη υγρής χρωματογραφίας, Hypersil ODS, 3 μm, 100 mm × 4,6 mm ή ισοδύναμη
Liquid chromatographic column, Hypersil ODS, 3 μm packing, 100 mm x 4,6 mm, or equivalent
Ανιχνευτής UV με δυνατότητα ρύθμισης σε διάφορα μήκη κύματος ή με διάταξη διόδων
UV detector with variable wavelength adjustment or diode array detector
Φίλτρο μεμβράνης, 0,45 μm
Membrane filter, 0,45 μm
Πολλαπλή κενού (vacuum manifold)
Vacuum manifold
Τυφλό
Blank feed
Πρέπει να διενεργείται ανάλυση τυφλού ώστε να ελέγχεται ότι δεν υπάρχει ούτε diclazuril ούτε κάποια άλλη παρεμποδίζουσα ουσία.
A blank feed shall be analysed to check that neither diclazuril nor interfering substances are present.
Το τυφλό δείγμα πρέπει να είναι παρόμοιου τύπου με εκείνον του δείγματος και δεν πρέπει να ανιχνεύονται σε αυτό diclazuril ή άλλες παρεμποδίζουσες ουσίες.
The blank feed shall be similar in type to that of the sample and on analysis diclazuril or interfering substances shall not be detected.
Δοκιμή ανάκτησης
Recovery test
Πρέπει να πραγματοποιείται δοκιμή ανάκτησης υποβάλλοντας σε ανάλυση τυφλό δείγμα εμπλουτισμένο με προσθήκη μιας ποσότητας diclazuril, παρόμοιας με εκείνη που υπάρχει στο δείγμα.
A recovery test shall be carried out by analysing the blank feed which has been fortified by addition of a quantity of diclazuril similar to that present in the sample.
Για εμπλουτισμό μέχρι 1 mg/kg, 0,1 ml του αρχικού πρότυπου διαλύματος (3.8.1) προστίθενται σε 50 g του τυφλού, αναμειγνύονται επισταμένως και αφήνονται για 10 λεπτά αναμειγνύοντας πάλι μερικές φορές πριν προχωρήσουμε στο στάδιο της εκχύλισης (5.2.)
To fortify at a level of 1 mg/kg add 0,1 ml of the stock standard solution (3.8.1) to 50 g of a blank feed, mix thoroughly and leave for 10 min. mixing again several times before proceeding (5.2).
Εναλλακτικά, εφόσον δεν υπάρχει διαθέσιμο τυφλό παρόμοιου τύπου με το δείγμα (βλ. παράγραφο 5.1.1), δοκιμή ανάκτησης μπορεί να γίνει μέσω της μεθόδου προσθήκης προτύπου.
Alternatively, if a blank feed similar in type to that of the sample is not available (see 5.1.1), a recovery test can be performed by means of the standard addition method.
Στην περίπτωση αυτή, το προς ανάλυση δείγμα εμπλουτίζεται με ποσότητα diclazuril παρόμοια με εκείνη που υπάρχει ήδη στο δείγμα.
In this case, the sample to be analysed is fortified with a quantity of diclazuril, similar to that already present in the sample.
Το δείγμα αυτό αναλύεται παράλληλα με το μη εμπλουτισμένο δείγμα και η ανάκτηση μπορεί να υπολογιστεί με αφαίρεση.
This sample is analysed, together with the unfortified sample and the recovery can be calculated by subtraction.
Ζυγίζονται με ακρίβεια 0,01 g περίπου 50 g του δείγματος.
Weigh to the nearest 0,01 g approximately 50 g of the sample.