natgillin/translations-raw huggingface dataset:
n-εξάνιο (χρωματογραφικής καθαρότητας)
n-hexane (for chromatography)
Ισοπροπανόλη
Isopropanol
Υδατικό διάλυμα ισοπροπανόλης 1:1 (κ.ό.)
Isopropanol, 1/1 (v/v) aqueous solution
Παγκρεατική λιπάση.
Pancreatic lipase.
Ρυθμιστικό διάλυμα τρις-υδροξυ-μεθυλαμινομεθανίου: υδατικό διάλυμα 1 Μ, του οποίου το pH ρυθμίζεται στην τιμή 8 (ποτενσιομετρικός έλεγχος) με πυκνό HCI (1:1 κ.ό.)
Buffer solution of trishydroxymethylaminomethane: 1 M aqueous solution adjusted to pH 8 (potentiometric control) by conc. HCl (1/1 v/v)
Χολικό νάτριο ενζυματικής καθαρότητας, υδατικό διάλυμα 0,1 % (το διάλυμα αυτό πρέπει να χρησιμοποιείται εντός 15 ημερών από την παρασκευή του)
Enzyme-quality sodium cholate, 0,1 % aqueous solution (this solution must be used within two weeks of its preparation)
Χλωριούχο ασβέστιο, υδατικό διάλυμα 22 %
Calcium chloride, 22 % aqueous solution
Διαιθυλαιθέρας για χρωματογραφία
Diethyl ether for chromatography
Διαλύτης ανάπτυξης: μείγμα η-εξανίου και διαιθυλαιθέρα 87:13 (κ.ό.)
Developer solvent: mixture of n-hexane/diethyl ether (87:13 v:v)
Υδροξείδιο του νατρίου, διάλυμα 12 % κ.β.
Sodium hydroxide, 12 % by weight solution
Φαινολοφθαλεΐνη, διάλυμα 1 % σε αιθανόλη
Phenolphthalein, 1 % solution in ethanol
Φέρον αέριο: υδρογόνο ή ήλιο για αέρια χρωματογραφία
Carrier gas: hydrogen or helium, for gas chromatography
Βοηθητικά αέρια: – υδρογόνο, καθαρότητας τουλάχιστον 99 %, απαλλαγμένο υγρασίας και οργανικών ουσιών – και αέρας της ίδιας καθαρότητας, για αέρια χρωματογραφία
Auxiliary gases: hydrogen, 99 % minimum purity, free from moisture and organic substances, and air, for gas chromatography, of the same purity
Είναι δυνατόν να χρησιμοποιηθούν και άλλα αντιδραστήρια σιλυλίωσης, όπως π.χ. δις-τριμεθυλοσιλυλοτριφθορακεταμίδιο + 1 % τριμεθυλοχλωροσιλάνιο, αραιωμένα με ίσο όγκο άνυδρης πυριδίνης.)
Other silylation reagents may be used, particularly bis-trimethylsilyl trifluoracetamide + 1 % trimethylchlorosilane, diluted with an identical volume of anhydrous pyridine.)
Ουσίες αναφοράς: καθαρά μονογλυκερίδια ή μείγματα μονογλυκεριδίων γνωστής εκατοστιαίας σύστασης, ανάλογης με τη σύσταση του δείγματος.
Reference samples: pure monoglycerides or monoglyceride mixtures with a known percentage composition similar to that of the sample.
ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ
METHOD
Τα έλαια με περιεκτικότητα σε ελεύθερα οξέα κάτω του 3 % δεν χρειάζεται να εξουδετερώνονται πριν από τη χρωματογραφία σε στήλη silica gel.
Oils with a free acidity of less than 3 % do not need to be neutralised before chromatography on a silica gel column.
Τα έλαια των οποίων η περιεκτικότητα σε ελεύθερα οξέα υπερβαίνει το 3 % πρέπει να εξουδετερώνονται σύμφωνα με το σημείο 5.1.1.1.
Oils with a free acidity of more than 3 % must be neutralised as per point 5.1.1.1.
Στη διαχωριστική χοάνη των 1000 ml (3.13) φέρονται 50 g ελαίου και 200 ml n-εξανίου.
Pour 50 g of oil and 200 ml n-hexane into the 1000 ml funnel (3.13).
Το σύνολο αναδεύεται ζωηρά επί ένα λεπτό, προστίθενται 100 ml απεσταγμένου νερού, αναδεύεται πάλι και αφήνεται σε ηρεμία.
Add 100 ml of distilled water, shake again and leave to stand.
Το εξανικό διάλυμα του εξουδετερωμένου ελαίου εκπλύνεται με διαδοχικές δόσεις 50-60 ml διαλύματος ισοπροπανόλης σε νερό 1:1 (κ.ό.) (4.4) μέχρι να εξαφανιστεί το ρόδινο χρώμα της φαινολοφθαλεΐνης.
Wash the hexane solution of the neutralised oil with successive portions of 50-60 ml of the 1/1 (v/v) isopropanol/water solution (4.4) until the pink colouration of the phenolphthalein disappears.
Μετά το τέλος της εργασίας αυτής, η οξύτητα του ελαίου πρέπει να είναι μικρότερη από 0,5 %.
After that procedure is completed, the acidity of the oil should be less than 0,5 %.
Σε φιάλη Erlenmeyer των 25 ml (3.1) φέρεται 1,0 g του ανωτέρω παρασκευάσματος ελαίου και διαλύεται σε 10 ml μείγματος ανάπτυξης (4.10).
Put 1,0 g of the oil prepared as above into a 25 ml Erlenmeyer flask (3.1) and dissolve in 10 ml of developer mixture (4.10).
Το διάλυμα αφήνεται σε ηρεμία τουλάχιστον επί 15 λεπτά πριν από τη χρωματογραφία σε στήλη silica gel.
Leave the solution to stand for at least 15 minutes before silica gel column chromatography.
Εάν το διάλυμα είναι θολό, φυγοκεντρείται ώστε να εξασφαλιστούν άριστες συνθήκες για τη χρωματογραφία.
If the solution is cloudy centrifuge it to ensure optimum conditions for chromatography.
(Μπορούν να χρησιμοποιηθούν έτοιμες φύσιγγες silica gel SPE των 500 mg).
(Ready-to-use 500 mg silica gel SPE cartridges can be used).
Ετοιμασία της χρωματογραφικής στήλης
Preparation of the chromatography column
Προστίθενται στη στήλη (3.3) περίπου 30 ml διαλύτη ανάπτυξης (4.10). Με τη βοήθεια γυάλινης ράβδου εισάγεται στο κατώτερο τμήμα της ένα τεμάχιο βάμβακα και πιέζεται για να αφαιρεθεί ο αέρας.
Pour about 30 ml of the developer solvent (4.10) into the column (3.3), insert a piece of cotton into the bottom part of the column using a glass rod; press to eliminate the air.
Σε ποτήρι ζέσεως παρασκευάζεται εναιώρημα 25 g silica gel (4.1) σε περίπου 80 ml διαλύτη ανάπτυξης και προστίθεται στη στήλη με τη βοήθεια διαχωριστικής χοάνης. Εξακριβώνεται ότι έχει εισέλθει στη στήλη το σύνολο του silica gel.
In a beaker prepare a suspension of 25 g of silica gel (4.1) in about 80 ml of developer solvent and pour it into the column using a funnel.
Μετά από έκπλυση με τον διαλύτη ανάπτυξης (4.10), ανοίγεται η στρόφιγγα της στήλης και το υγρό αφήνεται να εκρεύσει έως ότου η στάθμη του να βρίσκεται περίπου 2 mm πάνω από το silica gel.
Check that all the silica gel is in the column; wash with developer solvent (4.10), open the stopcock and allow the liquid to reach a level about 2 mm above the level of the silica gel.
Χρωματογραφία στήλης
Column chromatography
Σε φιάλη Erlenmeyer των 25 ml (3.1), ζυγίζεται ακριβώς 1,0 g δείγματος που έχει παρασκευαστεί σύμφωνα με το σημείο 5.1.
Weigh accurately 1,0 g of sample prepared as in point 5.1 into a 25 ml Erlenmeyer flask (3.1).
Το δείγμα διαλύεται σε 10 ml διαλύτη ανάπτυξης (4.10).
Dissolve the sample in 10 ml of developer solvent (4.10).
Ανοίγεται η στρόφιγγα και το διάλυμα του δείγματος αφήνεται να εκρεύσει έως ότου η στάθμη του εξισωθεί με τη στάθμη του silica gel.
Open the stopcock and pour the sample solution until it reaches the level of the silica gel.
Ακολουθεί ανάπτυξη με 150 ml διαλύματος ανάπτυξης.
Develop with 150 ml of the developer solvent.
Η ταχύτητα ροής ρυθμίζεται σε 2 ml/min (έτσι ώστε τα 150 ml να εκρεύσουν από τη στήλη εντός 60-70 λεπτών περίπου).
Adjust the flow rate to 2 ml/min (so that 150 ml enters the column in about 60-70 minutes).
Το έκλουσμα συλλέγεται σε προζυγισμένη σφαιρική φιάλη των 250 ml.
Recover the eluate in a previously weighed 250 ml flask.
Εξατμίζεται ο διαλύτης υπό κενό και απομακρύνονται τα τελευταία ίχνη του με διαβίβαση ρεύματος αζώτου. Ζυγίζεται η σφαιρική φιάλη και υπολογίζεται το εκχύλισμα που συλλέχθηκε.
Evaporate the solvent under vacuum and remove the final traces of the solvent under a nitrogen current.
[Σε περίπτωση χρήσης έτοιμων φυσίγγων silica gel SPE, ακολουθείται η εξής διαδικασία:
Weigh the flask and calculate the recovered extract.
Μετά την ετοιμασία των φυσίγγων με 3 ml n-εξανίου, προστίθεται σε αυτές 1 ml διαλύματος (5.1.2).
(If ready-to-use silica gel SPE cartridges are used use the following method: Put 1 ml of solution (5.1.2) into the prepared cartridges with 3 ml of n-hexane.
Μετά τη διήθηση του διαλύματος, ακολουθεί ανάπτυξη με 4 ml μείγματος η-εξανίου και διαιθυλαιθέρα 9:1 (κ.ό.).
After percolating the solution develop with 4 ml of n-hexane/diethyl ether 9/1 (v/v).
Το έκλουσμα συλλέγεται σε σωλήνα των 10 ml και συμπυκνώνεται μέχρι ξηρού με διαβίβαση ρεύματος αζώτου.
Recover the eluate in a 10 ml tube and evaporate to dry in a nitrogen current.
Το ξηρό υπόλειμμα υφίσταται την επίδραση παγκρεατικής λιπάσης (5.2).
Expose the dry residue to pancreatic lipase (5.2).
Είναι θεμελιώδους σημασίας η εξακρίβωση της σύστασης σε λιπαρά οξέα πριν και μετά τη διέλευση από τη φύσιγγα SPE].
(It is essential to check the fatty acid composition before and after crossing the SPE cartridge.)
Υδρόλυση με παγκρεατική λιπάση
Hydrolysis by pancreatic lipase
Στον σωλήνα φυγοκέντρου ζυγίζεται 0,1 g ελαίου που έχει παρασκευαστεί σύμφωνα με το σημείο 5.1.
Weigh into the centrifuge tube 0.1 g of the oil prepared as in point 5.1.
Προστίθενται 2 ml ρυθμιστικού διαλύματος (4.6), 0,5 ml διαλύματος χολικού νατρίου (4.7) και 0,2 ml διαλύματος χλωριούχου ασβεστίου με καλή ανάδευση μετά από κάθε προσθήκη.
Add 2 ml of buffer solution (4.6), 0,5 ml of the sodium cholate solution (4.7) and 0,2 ml of the calcium chloride solution, stirring well after each addition.
Κλείνεται ο σωλήνας με το εσμυρισμένο πώμα και τοποθετείται στον θερμοστάτη στους 40 ± 0,5 °C.
Close the tube with the groundglass stopper and place in the thermostat at 40 + 0,5 °C.
Προστίθεται 1 ml διαιθυλαιθέρα, ο σωλήνας πωματίζεται και το αιθερικό διάλυμα ανακινείται ζωηρά, φυγοκεντρείται και μεταφέρεται με μικροσύριγγα σε καθαρό και στεγνό σωλήνα.
Add 1 ml of diethyl ether, stopper and shake vigorously, then centrifuge and transfer the ether solution into a clean, dry tube using a microsyringe.
Παρασκευή των σιλυλοπαραγώγων και προετοιμασία της αέριας χρωματογραφίας
Preparation of the silanised derivatives and gas chromatography
Σε σωλήνα με κωνικό πυθμένα των 10 ml φέρονται με μικροσύριγγα 100 μl διαλύματος (5.2.3).
With a microsyringe insert 100 μl of solution (5.2.3) into a 10 ml conical-bottomed tube.
Απομακρύνεται ο διαλύτης με τη διαβίβαση ελαφρού ρεύματος, αζώτου, προστίθενται 200 μl αντιδραστηρίου σιλυλίωσης (4.15) και ο σωλήνας πωματίζεται και αφήνεται σε ηρεμία επί 20 λεπτά.
Remove the solvent under a slight nitrogen current, add 200 μl of silanisation reagent (4.15), stopper the tube and leave to stand for 20 minutes.
Μετά από 20 λεπτά, προστίθενται 1 έως 5 ml n-εξανίου (ανάλογα με τις συνθήκες χρωματογραφίας): το διάλυμα που προκύπτει είναι έτοιμο για αέρια χρωματογραφία.
After 20 minutes, add 1 to 5 ml of n-hexane (depending on the chromatography conditions): the resulting solution is ready for gas chromatography.
Οι συνθήκες εργασίας είναι οι ακόλουθες:
Operating conditions:
θερμοκρασία του συστήματος έγχυσης (“on column”) μικρότερη από το σημείο ζέσεως του διαλύτη (68 °C),
Injector temperature (on-column injector) lower than solvent boiling point (68 °C);
θερμοκρασία του ανιχνευτή: 350 °C,
Detector temperature: 350 °C;
θερμοκρασία της στήλης: προγραμματισμός της θερμοκρασίας του κλιβάνου: 60 °C επί 1 λεπτό, αύξηση 15 °C ανά λεπτό μέχρι τους 180 °C και έπειτα 5 °C ανά λεπτό μέχρι τους 340 °C, κατόπιν 340 °C επί 13 λεπτά,
Column temperature: programming of furnace temperature: 60 °C for 1 minute, increasing by 15 °C per minute up to 180 °C, then by 5 °C per minute up to 340 °C, then 340 °C for 13 minutes;
φέρον αέριο: υδρογόνο ή ήλιο, ρυθμισμένο στην κατάλληλη γραμμική ταχύτητα, ώστε να επιτευχθεί η διαχωριστική ικανότητα που αποτυπώνεται στο σχήμα 1.
Carrier gas: hydrogen or helium, set at a linear velocity sufficient to obtain the resolution reflected in Figure 1.
Κάθε τεχνικός οφείλει να τις βελτιστοποιεί για να επιτύχει την επιθυμητή διαχωριστική ικανότητα.
Operators will have to optimise them to obtain the desired resolution.
Η κορυφή που αντιστοιχεί στην 2-μονοπαλμιτίνη πρέπει να έχει ελάχιστο ύψος 10 % της κλίμακας του καταγραφέα.),
The peak corresponding to 2-glyceryl monopalmitate must have a minimum height equal to 10 % of the recorder scale.)
εγχεόμενη ποσότητα ουσίας: 0,5-1 μl του n-εξανικού διαλύματος (5 ml) (5.3.3).
Quantity of substance injected: 0,5-1 μl of the n-hexane solution (5 ml) (5.3.3).
Ταυτοποίηση των κορυφών
Identification of the peaks
Τα επιμέρους μονογλυκερίδια ταυτοποιούνται βάσει των λαμβανόμενων χρόνων κατακράτησης και με σύγκριση με τους χρόνους κατακράτησης προτύπων μειγμάτων μονογλυκεριδίων, που αναλύθηκαν στις ίδιες συνθήκες.
The individual monoglycerides are identified from their retention times and by comparison with those obtained for standard monoglyceride mixtures under the same conditions.
Ποσοτικός προσδιορισμός
Quantitative evaluation
Το εμβαδόν κάθε κορυφής υπολογίζεται με ηλεκτρονικό ολοκληρωτή.
The area of each peak is calculated using an electronic integrator.
Η εκατοστιαία αναλογία 2-μονοπαλμιτίνης υπολογίζεται από τον λόγο του εμβαδού της αντίστοιχης κορυφής προς το άθροισμα των εμβαδών των κορυφών όλων των μονογλυκεριδίων (βλέπε σχήμα 2), σύμφωνα με τον τύπο:
The percentage of glyceryl monopalmitate is calculated from the ratio between the area of the corresponding peak and the areas of the peaks of all the monoglycerides (see Figure 2) using the formula:
το εμβαδόν της κορυφής που αντιστοιχεί στη 2-μονοπαλμιτίνη,
area of the peak corresponding to glyceryl monopalmitate
ΣΑ το άθροισμα των εμβαδών όλων των κορυφών που αντιστοιχούν σε μονογλυκερίδια.
ΣA sum of the areas of all the monoglyceride peaks
Το αποτέλεσμα πρέπει να εκφράζεται με ένα δεκαδικό ψηφίο.
The result must be to one decimal place.
ΕΚΘΕΣΗ ΤΗΣ ΑΝΑΛΥΣΗΣ
ANALYSIS REPORT
Στην έκθεση της ανάλυσης θα πρέπει να αναφέρονται τα εξής:
The analysis report must specify:
παραπομπή στη παρούσα μέθοδο,
reference to this method,
κάθε στοιχείο απαραίτητο για την πλήρη ταυτοποίηση του δείγματος,
all the information needed for a full identification of the sample,
το αποτέλεσμα της ανάλυσης,
the analysis result,
κάθε παρέκκλιση από την παρούσα μέθοδο, ανεξαρτήτως του εάν έχει αποφασιστεί από τα ενδιαφερόμενα μέρη ή οφείλεται σε άλλους λόγους,
any deviation from the method, whether as the result of a decision by the parties concerned or for another reason,
στοιχεία ταυτότητας του εργαστηρίου, ημερομηνία της ανάλυσης και υπογραφή των υπευθύνων γι’ αυτή.
details to identify the laboratory, the date of the analysis and the signatures of those responsible for the analysis.
Χρωματογράφημα των προϊόντων της αντίδρασης σιλυλίωσης που προέκυψαν από την επίδραση λιπάσης σε εξευγενισμένο ελαιόλαδο, στο οποίο είχε προστεθεί 20 % εστεροποιημένο έλαιο (100 %)
Chromatogram of the products of the silanisation reaction obtained by the action of lipase on a refined olive oil with 20 % esterified oil added (100 %)
Χρωματογράφημα:
Chromatogram of:
μη εστεροποιημένου ελαιόλαδου, μετά από την επίδραση λιπάσης και από σιλυλίωση· στις συνθήκες αυτές (τριχοειδής στήλη 8-12 m), το κλάσμα των κηρών εκλούεται ταυτόχρονα με το κλάσμα των διγλυκεριδίων ή λίγο αργότερα.
unesterified olive oil, after lipase; after silanisation; under these conditions (8-12 m capillary column) the wax fraction is eluted at the same time as the diglyceride fraction or slightly afterwards.
Μετά την επίδραση της λιπάσης, η περιεκτικότητα σε τριγλυκερίδια δεν θα πρέπει να υπερβαίνει το 15 %
After lipase, the triglyceride content should not exceed 15 %
1 Ελεύθερα λιπαρά οξέα
1 Free fatty acids
2 Μονογλυκερίδια
2 Monoglycerides
3 Διγλυκερίδια
3 Diglycerides
4 Τριγλυκερίδια
4 Triglycerides
2-μονοπαλμιτίνη
2-monopalmitine
Τριγλυκερίδιο C54
Triglyceride C54
εστεροποιημένου ελαίου, μετά από την επίδραση λιπάσης και από σιλυλίωση· στις συνθήκες αυτές (τριχοειδής στήλη 8-12 m), το κλάσμα των κηρών εκλούεται ταυτόχρονα με το κλάσμα των διγλυκεριδίων ή λίγο αργότερα.
unesterified oil after lipase; after silanisation; under these conditions (8-12 m capillary column) the wax fraction is eluted at the same time as the diglyceride fraction or slightly afterwards.
Μετά την επίδραση της λιπάσης, η περιεκτικότητα σε τριγλυκερίδια δεν θα πρέπει να υπερβαίνει το 15 %.
After lipase, the triglyceride content should not exceed 15 %.
Τριγλυκερίδιο C54
triglyceride
ΠΑΡΑΣΚΕΥΗ ΤΗΣ ΛΙΠΑΣΗΣ
PREPARATION OF THE LIPASE
Στο εμπόριο κυκλοφορούν λιπάσες ικανοποιητικής δραστικότητας.
Lipases with satisfactory activity are commercially available.
Είναι επίσης δυνατή η εργαστηριακή παρασκευή τους ως εξής:
They can also be prepared in the laboratory in the following manner:
Ο πολτός αυτός αναδεύεται επί 4-6 ώρες με 2,5 λίτρα άνυδρης ακετόνης και κατόπιν φυγοκεντρείται.
Stir the paste with 2,5 litres of anhydrous acetone for 4-6 hours, then centrifuge.
Το υπόλειμμα εκχυλίζεται τρεις φορές ακόμα με τον ίδιο όγκο άνυδρης ακετόνης και, έπειτα, δύο φορές με μείγμα ακετόνης και διαιθυλαιθέρα 1:1 (κ.ό.) και δύο φορές με διαιθυλαιθέρα.
Extract the residue three more times with the same volume of anhydrous acetone, then twice with an acetone/diethyl ether mixture (1/1 v/v) and twice with diethyl ether.
Το υπόλειμμα ξηραίνεται υπό κενό επί 48 ώρες για να ληφθεί σταθερή σκόνη, η οποία διατηρείται για μεγάλο χρονικό διάστημα στο ψυγείο, προφυλαγμένη από την υγρασία.
Vacuum-dry the residue for 48 hours to obtain a stable powder which can be stored for a long time in a refrigerator away from moisture.
ΕΛΕΓΧΟΣ ΤΗΣ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑΣ ΤΗΣ ΛΙΠΑΣΗΣ
MONITORING LIPASE ACTIVITY
Παρασκευάζεται γαλάκτωμα ελαιολάδου ως εξής:
Prepare an olive oil emulsion as follows:
Αναδεύεται σε αναμικτήρα επί 10 λεπτά μείγμα 165 ml διαλύματος αραβικού κόμμεως 100 g/l, 15 g θρυμματισμένου πάγου και 20 ml εξουδετερωμένου ελαιολάδου.
In a mixer stir for 10 minutes a mixture of 165 ml of a 100 g/l gum arabic solution, 15 g of crushed ice and 20 ml of a previously neutralised olive oil.
Σε ποτήρι ζέσεως των 50 ml εισάγονται διαδοχικά 10 ml του εν λόγω γαλακτώματος, 0,3 ml διαλύματος χολικού νατρίου 0,2 g/ml και 20 ml απεσταγμένου νερού.
Pour 10 ml of the emulsion into a 50 ml beaker, then 0,3 ml of a 0,2 g/ml sodium cholate solution and then 20 ml of distilled water.
Το ποτήρι τοποθετείται σε θερμοστάτη, ρυθμισμένο στους 37 °C, και εισάγονται τα ηλεκτρόδια του πεχάμετρου και ο ελικοειδής αναδευτήρας.
Put the beaker in a thermostat set at 37 °C; introduce the electrodes of the pH meter and the screw agitator.
Προστίθεται στάγδην, με προχοΐδα, διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 0,1 N μέχρι να επιτευχθεί pH 8,3.
Using a burette, add a 0,1 N sodium hydroxide solution drop by drop until a pH of 8,3 is obtained.
Προστίθεται μια ποσότητα αιωρήματος σκόνης λιπάσης σε νερό (0,1 g/ml λιπάσης).
Add an aliquot of the lipase powder suspension in water (0,1 g/ml of lipase).
Όταν η ένδειξη του πεχάμετρου είναι 8,3, τίθεται σε λειτουργία το χρονόμετρο και προστίθεται στάγδην διάλυμα υδροξειδίου νατρίου με το ρυθμό που απαιτείται για να διατηρηθεί το pH στην τιμή 8,3.
As soon as the pH meter reads 8,3, start the chronometer and add the sodium hydroxide solution drop by drop at a rate which maintains the pH at 8,3.
Σημειώνεται ανά λεπτό ο όγκος διαλύματος που καταναλώνεται.
Note every minute the volume of solution consumed.
Σχεδιάζεται γραφική παράσταση των δεδομένων σε ορθογώνιο σύστημα αξόνων, με τετμημένη τους χρόνους και τεταγμένη τα ml αλκαλικού διαλύματος 0,1 N που καταναλώθηκαν για να διατηρηθεί το pH σταθερό.
Record the data on an x/y graph with the time on the x-axis and millilitres of 0,1 N alkaline solution consumed to keep a constant pH on the y-axis.
Πρέπει να προκύπτει γραμμική καμπύλη.
A linear graph should be obtained.
Η δραστικότητα της λιπάσης, μετρούμενη σε μονάδες λιπάσης ανά mg, παρέχεται από τον ακόλουθο τύπο:
Lipase activity, expressed in lipase units per mg, is given by the following formula:
A η δραστικότητα σε μονάδες λιπάσης/mg,
A is activity in lipase units/mg
V τα χιλιοστόλιτρα διαλύματος υδροξειδίου του νατρίου 0,1 N που καταναλώνονται ανά λεπτό (υπολογιζόμενα από την καμπύλη),
V is the number of millilitres of 0,1 N sodium hydroxide solution per minute (calculated on the basis of the graph)
N η κανονικότητα του διαλύματος υδροξειδίου του νατρίου,
N is the titre of the sodium hydroxide solution
m η μάζα της ελεγχόμενης λιπάσης, σε mg.
m is the mass in mg of the test lipase.
Ως μονάδα λιπάσης ορίζεται η ποσότητα του ενζύμου που ελευθερώνει 10 μικρογραμμοϊσοδύναμα οξέος ανά λεπτό.».
A lipase unit is defined as the quantity of enzyme which releases 10 micro-equivalents of acid per minute.’;
Στο παράρτημα Χ“Α”, το σημείο 6.2 αντικαθίσταται από το ακόλουθο κείμενο:
in Annex XA, point 6.2 is replaced by the following:
Οι μεθυλεστέρες παρασκευάζονται σύμφωνα με τη μέθοδο Β του παραρτήματος Χ“Β”.
The methyl esters are prepared using procedure B set out in Annex XB.
Οι λιπαρές ουσίες των οποίων η περιεκτικότητα σε ελεύθερα οξέα υπερβαίνει το 3 % πρέπει να εξουδετερώνονται προηγουμένως σύμφωνα με το σημείο 5.1.1 του παραρτήματος VII.».
Fatty substances having a free acidity over 3 % must first be neutralised in accordance with point 5.1.1 of Annex VII.’
Διαφορά ECN42-HPLC και ECN42
Difference: ECN42 (HPLC) and ECN42
(θεωρητικός υπολογισμός)
(theoretical calculation)
Τριχοειδή στήλη από γυαλί ή τετηγμένο διοξείδιο του πυριτίου, μήκους 8 έως 12 m, εσωτερικής διαμέτρου 0,25 έως 0,32 mm, επικαλυμμένη εσωτερικά με υγρή φάση, ομοιόμορφου πάχους 0,10 έως 0,30 μm (Κατάλληλη υγρή φάση του εμπορίου, τύπου SE 52 ή SE 54.)
Glass or fused silica capillary column 8 to 12 m long and with an internal diameter of 0,25 to 0,32 mm, with liquid phase, with a uniform film thickness between 0,10 and 0,30 μm. (There are liquid phases suitable for the purpose of type SE-52 or SE-54 available on the market.)
Πρότυπο διάλυμα λαυρικού αραχιδεστέρα 0,1 % (m/V) σε εξάνιο (εσωτερικό πρότυπο) (Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί παλμιτικός παλμιτεστέρας ή μυριστικός στεατεστέρας.)
Standard solution of lauryl arachidate, at 0,1 % (m/v) in hexane (internal standard). (It is also possible to use palmityl palmitate or myristyl stearate.)
Η δραστικότητα της χρησιμοποιούμενης λιπάσης πρέπει να κυμαίνεται μεταξύ 2,0 και 10 μονάδων λιπάσης ανά mg.
It must have an activity of between 2,0 and 10 lipase units per mg.
(Στο εμπόριο κυκλοφορούν παγκρεατικές λιπάσες με δραστικότητα 2,0 έως 10 μονάδων ανά mg ενζύμου.)
(Pancreatic lipases with an activity of between 2 and 10 units per mg enzyme are commercially available.)
Αντιδραστήριο σιλυλίωσης: μείγμα πυριδίνης-εξαμεθυλοδισιλαζανίου-τριμεθυλοχλωροσιλανίου 9:3:1 (κ.ό.)
Silanisation reagent: mixture of pyridine/hexamethyldisilazane, trimethylchlorosilane 9/3/1 (v/v/v).
(Στο εμπόριο κυκλοφορούν έτοιμα διαλύματα.
(Ready-to-use solutions are commercially available.
Ο χρόνος κατακράτησης του τριγλυκεριδίου C54 πρέπει να είναι 40 ± 5 λεπτά (βλέπε σχήμα 2).
The retention time of the C54 triglyceride must be 40 ± 5 minutes (see Figure 2).
(Οι ανωτέρω συνθήκες εργασίας προτείνονται ενδεικτικά.
(The operating conditions indicated above are indicative.
Ψύχονται 5 kg νωπού παγκρέατος χοίρου στους 0 °C.
Cool to 0 °C 5 kg of fresh pig’s pancreas.
Το πάγκρεας απαλλάσσεται από το στερεό λίπος και τον συνδετικό ιστό που το περιβάλλουν και αλέθεται σε μικροτεμαχιστή με λεπίδες μέχρι να ληφθεί ρευστός πολτός.
Remove the surrounding solid fat and the connective tissue and grind to a liquid paste in a blender.
Στιγμαστερόλη
Stigmasterol
β-Σιτοστερόλη
Betasitosterol
δ-7-Στιγμαστενόλη
Delta-7-stigmastenol
Προστίθενται 100 ml ισοπροπανόλης και ποσότητα διαλύματος υδροξειδίου του νατρίου 12 % (4.11) η οποία αντιστοιχεί στην περιεκτικότητα του ελαίου σε ελεύθερα λιπαρά οξέα, προσαυξημένη κατά 5 %.
Add 100 ml of isopropanol and a quantity of 12 % sodium hydroxide solution (4.11) equivalent to the free acidity of the oil plus 5 %. Shake vigorously for one minute.
Μετά το διαχωρισμό, απορρίπτεται η κατώτερη στιβάδα που περιέχει τους σάπωνες και απομακρύνονται οι πιθανές ενδιάμεσες στιβάδες (βλέννες και αδιάλυτες ουσίες).
After decanting, remove the lower layer containing the soaps. Remove any intermediate layers (mucilage and insoluble substances).
Απομακρύνεται το μεγαλύτερο μέρος του εξανίου με απόσταξη υπό κενό (χρησιμοποιείται π.χ. περιστροφικός εξατμιστήρας) και το έλαιο μεταγγίζεται σε σφαιρική φιάλη των 100 ml (3.5) και ξηραίνεται υπό κενό μέχρι να απομακρυνθεί τελείως ο διαλύτης.
Remove most of the hexane by vacuum distillation (use a rotary evaporator, for example) and transfer the oil into a 100 ml flask (3.5). Dry the oil in vacuum until the solvent is completely removed.
Προστίθενται 20 mg λιπάσης, το σύνολο αναδεύεται επιμελώς (χωρίς να διαβραχεί το πώμα) και τοποθετείται στον θερμοστάτη επί 2 λεπτά ακριβώς.
Add 20 mg of lipase, shake carefully (avoid wetting the stopper) and place the tube in the thermostat for exactly two minutes.
Στη συνέχεια ο σωλήνας αποσύρεται, ανακινείται ζωηρά επί 1 λεπτό ακριβώς και αφήνεται να ψυχθεί.
Then remove it, shake vigorously for exactly 1 minute and leave to cool.
Αφού ψυχθεί, προστίθεται νερό σε αναλογία 2 % της ληφθείσας ποσότητας silica gel.
After cooling, add 2 % water in relation to the quantity of sampled silica gel. Shake well to homogenise the slurry.