natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Για την εξασφάλιση της πλήρους χρήσης του αναδιαλυμένου διαλύματος καθώς και της αποτελεσματικής μόλυνσης, απαιτούνται 15-25 φυτά μελιτζάνας ανά δείγμα για τις διαδικασίες που περιγράφονται παρακάτω.
In order to ensure complete utilisation of the resuspended pellet as well as effective inoculation the procedures outlined below will require 15 to 25 eggplants per sample.
Τα φυτά μελιτζάνας δεν ποτίζονται για 1 έως 2 ημέρες πριν από τη μόλυνση προκειμένου να μειωθεί η πίεση σπαργής.
Do not water eggplants for one to two days prior to inoculation to reduce turgor pressure.
Μόλυνση σχισμής
Slit inoculation
Το φυτό συγκρατείται μεταξύ δύο δακτύλων και μια σταγόνα (περίπου 5-10 µl) του αιωρήματος του ιζήματος τοποθετείται με σιφώνιο επί του στελέχους, μεταξύ των κοτυληδόνων και του πρώτου φύλλου.
Holding the plant between two fingers, pipette a drop (approximately 5 to 10 µl) of the suspended pellet on the stem between the cotyledons and the first leaf.
Με ένα αποστειρωμένο νυστέρι, πραγματοποιείται στο στέλεχος μια διαγώνια τομή, μήκους 1,0 cm και βάθους ίσου προς τα 2/3 περίπου της διαμέτρου του στελέχους, αρχίζοντας από τη σταγόνα του ιζήματος.
Using a sterile scalpel, make a diagonal slit, about 1,0 cm long and approximately 2/3 of the stem thickness deep, starting the cut from the pellet drop.
Η τομή καλύπτεται με αποστειρωμένη βαζελίνη από μια σύριγγα.
Seal the cut with sterile vaseline from a syringe.
Μόλυνση με σύριγγα
Syringe inoculation
Τα στελέχη των φυτών μελιτζάνας μολύνονται ακριβώς πάνω από τις κοτυληδόνες με μια σύριγγα με υποδερμική βελόνα (τουλάχιστον 23 G).
Inoculate the eggplant stems just above the cotyledons using a syringe fitted with a hypodermic needle (not less than 23 G).
Το δείγμα κατανέμεται μεταξύ των φυτών μελιτζάνας.
Distribute the sample between the eggplants.
Ως θετικοί μάρτυρες, μολύνονται 5 φυτά με υδατικό αιώρημα 105 έως 106 κυττάρων ανά ml γνωστής καλλιέργειας του C. m. subsp. sepedonicus και, όπου είναι δυνατόν, με φυσικώς μολυσμένους ιστούς κονδύλων (βλέπε ενότητα 4) με την ίδια μέθοδο μόλυνσης (7.3 ή 7.4).
As the positive controls, inoculate 5 plants with an aqueous suspension of 105 to 106 cells per ml of a known culture of C. m. subsp. sepedonicus and, where possible, with naturally infected tuber tissue (see section 4) by the same inoculation method (7.3 or 7.4).
Ως αρνητικοί μάρτυρες, μολύνονται 5 φυτά με αποστειρωμένο ρυθμιστικό διάλυμα ιζήματος με την ίδια μέθοδο μόλυνσης (7.3 ή 7.4).
As the negative control, inoculate 5 plants with sterile pellet buffer by the same inoculation method (7.3 or 7.4).
Τα φυτά επωάζονται σε εγκαταστάσεις καραντίνας για χρονικό διάστημα μέχρι 4 εβδομάδων σε θερμοκρασία 18-24 °C.
Incubate plants in quarantine facilities for up to four weeks at 18 to 24 °C.
Τα φυτά επωάζονται με επαρκές φως και υψηλή υγρασία (70-80 %) και ποτίζονται για την αποφυγή υπεράρδευσης ή μάρανσης λόγω έλλειψης νερού.
Incubate plants with sufficient light and high humidity (70 to 80 %) and water to prevent water logging or wilting through water deficiency.
Τα κύτταρα του C. m. ssp. sepedonicus νεκρώνονται σε θερμοκρασίες άνω των 30 °C και η βέλτιστη θερμοκρασία είναι 21 °C.
sepedonicus cells are killed at temperatures above 30 °C and the optimum temperature is 21 °C.
Για την αποφυγή της επιμόλυνσης, επωάζονται τα φυτά θετικών και αρνητικών μαρτύρων σε σαφώς διαχωρισμένους πάγκους σε θερμοκήπιο ή θάλαμο ανάπτυξης ή, εάν ο χώρος είναι περιορισμένος, εξασφαλίζεται ο αυστηρός διαχωρισμός μεταξύ των χειρισμών.
To avoid contamination incubate positive control and negative control plants on clearly separated benches in a glasshouse or growth chamber or, in case space is limited, ensure strict separation between treatments.
Εάν πρέπει να επωασθούν φυτά για διαφορετικά δείγματα το ένα κοντά στο άλλο, διαχωρίζονται με κατάλληλα παραπετάσματα.
If plants for different samples must be incubated close together, separate them with appropriate screens.
Κατά τη λίπανση, το πότισμα, την επιθεώρηση και οιουσδήποτε άλλους χειρισμούς πρέπει να δίδεται εξαιρετική προσοχή ώστε να αποφεύγεται τυχόν επιμόλυνση.
When fertilising, watering, inspecting and any other manipulations take great care to avoid cross-contamination.
Είναι σημαντικό να διατηρούνται τα θερμοκήπια και οι θάλαμοι ανάπτυξης απαλλαγμένα από όλα τα έντομα εχθρούς καθώς μπορεί να μεταδίδουν το βακτήριο από δείγμα σε δείγμα.
It is essential to keep glasshouses and growth chambers free of all insect pests since they may transmit the bacterium from sample to sample.
Ελέγχονται τακτικά για συμπτώματα μετά από μία εβδομάδα.
Examine regularly for symptoms starting after a week.
Μετράται ο αριθμός των φυτών που παρουσιάζουν συμπτώματα.
Count the number of plants showing symptoms.
Στα φυτά μελιτζάνας, το C. m. subsp. sepedonicus προκαλεί μαρασμό των φύλλων, ο οποίος μπορεί να αρχίσει ως περιμετρική ή μεσονεύρια έλλειψη σπαργής.
subsp. sepedonicus causes leaf wilting in eggplants which may commence as a marginal or interveinal flaccidity.
Οι μαραμένοι ιστοί ενδέχεται να είναι αρχικά βαθυπράσινοι ή μωσαϊκόμορφοι, αλλά στη συνέχεια γίνονται χλωρωτικοί πριν νεκρωθούν.
Wilted tissue may initially appear dark green or mottled but turns paler before becoming necrotic.
Συχνά, οι μαραμένοι ιστοί μεταξύ των νευρώσεων έχουν λιπώδη και βρεγμένη εμφάνιση.
Interveinal wilts often have a greasy water-soaked appearance.
Η περίμετρος των νεκρωτικών ιστών είναι συχνά έντονα κίτρινη.
Necrotic tissue often has a bright yellow margin.
Τα φυτά δεν νεκρώνονται πάντοτε· όσο μεγαλύτερη είναι η περίοδος πριν την εμφάνιση των συμπτωμάτων, τόσο μεγαλύτερη είναι η πιθανότητα επιβίωσης.
Plants are not necessarily killed; the longer the period before symptoms develop, the greater the chance of survival.
Τα φυτά είναι δυνατόν να επιζήσουν της μόλυνσης.
Plants may outgrow the infection.
Τα νεαρά φυτά μελιτζάνας είναι πολύ πιο ευαίσθητα σε χαμηλούς πληθυσμούς του C. m. subsp. sepedonicus από τα ηλικιωμένα φυτά και εξ’αυτού προκύπτει η αναγκαιότης χρησιμοποίησης φυτών που είναι στο στάδιο των 3 πραγματικών φύλλων ή λίγο πριν απ’ αυτό.
Young eggplants are much more susceptible to low populations of C. m. subsp. sepedonicus than are older plants, hence the necessity to use plants at or just before leaf stage 3.
Μαρασμοί μπορεί επίσης να προκαλούνται από πληθυσμούς άλλων βακτηρίων ή μυκήτων που υπάρχουν στο ίζημα ιστών κονδύλων.
Wilts may also be induced by populations of other bacteria or fungi present in the tuber tissue pellet.
Αυτά περιλαμβάνουν τα Ralstonia solanacearum, Erwinia carotovora subsp. carotovora και E. carotovora subsp. atroseptica, Erwinia chrysanthemi, Phoma exigua var. foveata, καθώς και μεγάλοι πληθυσμοί σαπροφυτικών βακτηρίων.
These include Ralstonia solanacearum, Erwinia carotovora subsp. carotovora and E. carotovora subsp. atroseptica, Erwinia chrysanthemi, Phoma exigua var. foveata, as well as large populations of saprophytic bacteria.
Ιδιαίτερα το Erwinia chrysanthemi μπορεί να προκαλέσει συμπτώματα των φύλλων και μάρανση που είναι σε μεγάλο βαθμό όμοια με τα συμπτώματα του C. m.ssp. sepedonicus.
In particular Erwinia chrysanthemi can cause leaf symptoms and wilt that is very similar to symptoms of C. m. sepedonicus.
Η μόνη διαφορά είναι η μελάνωση των στελεχών στην περίπτωση των μολύνσεων από το Erwinia chrysanthemi.
The only difference is blackening of the stems in case in Erwinia chrysanthemi infections.
Άλλοι μαρασμοί μπορεί να διακριθούν από εκείνους που προκαλούνται από το C. m. subsp. sepedonicus λόγω του ότι μαραίνονται γρήγορα ολόκληρα φύλλα ή ολόκληρα φυτά.
Other wilts can be distinguished from those caused by C. m. subsp. sepedonicus since whole leaves or whole plants wilt rapidly.
Είναι επίσης δυνατόν να παρασκευασθεί μια χρώση κατά Gram: η εν λόγω δοκιμή θα διαφοροποιήσει το C. m. subsp. sepedonicus από το Erwinia spp.
Also a Gram stain can be prepared: this test will differentiate C. m. subsp. sepedonicus from Erwinia spp.
Μόλις παρατηρηθούν συμπτώματα στα φυτά μελιτζάνας, πρέπει να πραγματοποιηθεί εκ νέου απομόνωση, χρησιμοποιώντας τα τμήματα του μαραμένου ιστού των φύλλων ή του ιστού των στελεχών των φυτών (βλέπε 3.1.3 για τη διαβροχή των ιστών).
As soon as symptoms in eggplants are observed reisolation should be performed, using sections of wilted leaf tissue or stem tissue from plants (see 3.1. 3 for tissue maceration).
Η επιφάνεια των φύλλων και των στελεχών των φυτών μελιτζάνας απολυμαίνεται με σφουγγάρι εμποτισμένο με 70 % αιθανόλη.
Surface disinfect the eggplant leaves and stems by wiping with 70 % ethanol.
Πραγματοποιείται δοκιμή IF ή PCR στον χυμό των φυτών μελιτζάνας και απομονώνεται σε κατάλληλο (εκλεκτικό) υπόστρωμα (βλέπε ενότητα 8).
Perform an IF test or PCR on the eggplant sap and isolate on to suitable (selective) media (see section 8).
Μπορεί επίσης να παρασκευασθεί μια χρώση κατά Gram (προσάρτημα 9).
A Gram stain (Appendix 9) may also be prepared.
Ταυτοποιούνται οι καθαρισμένες καλλιέργειες του πιθανού C. m. subsp. sepedonicus και επιβεβαιώνεται η παθογένεια (βλέπε ενότητες 9 και 10).
Identify purified cultures of presumptive C. m. subsp. sepedonicus and confirm pathogenicity (see section 9 and 10).
Υπό ορισμένες συνθήκες, ιδίως δε όταν οι συνθήκες ανάπτυξης δεν είναι άριστες, είναι δυνατόν για το C. m. subsp. sepedonicus να υπάρχει ως λανθάνουσα μόλυνση στα φυτά μελιτζάνας ακόμη και μετά από επώαση 4 εβδομάδων.
Under certain circumstances, in particular where growing conditions are not optimal, it may be possible for C. m. subsp. sepedonicus to exist as a latent infection within eggplants even after incubation periods up to 4 weeks.
Εάν δεν παρατηρηθούν συμπτώματα μετά από 4 εβδομάδες, πραγματοποιείται δοκιμή IF/PCR σε σύνθετο δείγμα τμημάτων στελεχών μήκους 1 cm από κάθε φυτό δοκιμής που έχουν ληφθεί πάνω από το σημείο μόλυνσης.
If no symptoms are observed after 4 weeks perform IF/PCR on a composite sample of 1 cm stem sections of each test plant taken above the inoculation site.
Εάν η δοκιμή είναι θετική, πρέπει να πραγματοποιηθεί εκ νέου απομόνωση σε κατάλληλο (εκλεκτικό) υπόστρωμα σύμφωνα με τη διαδικασία που περιγράφεται στην ενότητα 8.
If the test is positive reisolation on suitable (selective) media should be performed following the procedure under section 8.
Ταυτοποιούνται οι καθαρισμένες καλλιέργειες πιθανού C. m. subsp. sepedonicus και επιβεβαιώνεται η παθογένεια (βλέπε ενότητες 9 και 10).
Identify purified cultures of presumptive C. m. subsp. sepedonicus and confirm pathogenicity (section 9 and 10).
Ερμηνεία των αποτελεσμάτων της βιοδοκιμής
Interpretation of the bioassay test result.
Τα αποτελέσματα της βιοδοκιμής είναι έγκυρα όταν τα φυτά του θετικού μάρτυρα εμφανίζουν τυπικά συμπτώματα, τα βακτήρια είναι δυνατόν να απομονωθούν εκ νέου από τα εν λόγω φυτά και δεν εντοπίζονται συμπτώματα στους αρνητικούς μάρτυρες.
Valid Bioassay test results are obtained when plants of the positive control show typical symptoms, the bacteria can be reisolated from these plants and no symptoms are found on the negative controls.
Η βιοδοκιμή είναι αρνητική εάν τα φυτά της δοκιμής δεν έχουν προσβληθεί από το C. m. subsp. sepedonicus και εάν το C. m. subsp. sepedonicus ανιχνεύεται στους θετικούς μάρτυρες.
The bioassay test is negative if test plants are not infected by C. m. subsp. sepedonicus, and provided that C. m. subsp. sepedonicus is detected in positive controls.
Η βιοδοκιμή είναι θετική εάν τα φυτά δοκιμής είναι προσβεβλημένα από το C. m. subsp. sepedonicus.
The bioassay test is positive if the test plants are infected by C. m. subsp. sepedonicus.
ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΤΟΥ C. M. SUBSP.
ISOLATION OF C. M. SUBSP.
Η διάγνωση ολοκληρώνεται μόνον εάν το C. m. subsp. sepedonicus έχει απομονωθεί, στη συνέχεια ταυτοποιηθεί (βλέπε ενότητα 9) και επιβεβαιωθεί μέσω δοκιμής παθογένειας (ενότητα 10).
Diagnosis is only completed if C. m. subsp. sepedonicus is isolated, subsequently identified (see section 9). and confirmed by a pathogenicity test (section 10).
Μολονότι το C. m. subsp. sepedonicus είναι απαιτητικός οργανισμός, είναι δυνατόν να απομονωθεί από ιστούς που παρουσιάζουν συμπτώματα.
Although C. m. subsp. sepedonicus is a fastidious organism, it can be isolated from symptomatic tissue.
Ωστόσο, το βακτήριο αυτό μπορεί να καλυφθεί από ταχέως αναπτυσσόμενα σαπροφυτικά βακτήρια και, για το λόγο αυτό, είναι δύσκολη η απομόνωση απευθείας από το ίζημα ιστών κονδύλου ή στελέχους (ενότητα 3.1.6 ή 3.2.5).
However, it may be outgrown by rapidly growing saprophytic bacteria and, therefore, isolations directly from the tuber or stem tissue pellet (section 3.1.6 or 3.2.5) is difficult.
Με εκλεκτικό υπόστρωμα και την κατάλληλη αραίωση του αναδιαλυμένου ιζήματος από τους κώνους που έχουν αφαιρεθεί από τα σημεία πρόσφυσης των στολονίων της πατάτας ή τα στελέχη είναι δυνατή η άμεση απομόνωση του C. m. subsp. sepedonicus.
With selective medium and appropriate dilution of the resuspended pellet from the heel end cores or stems of potatoes direct isolation of C. m. subsp. sepedonicus may be possible.
Οι απομονώσεις πραγματοποιούνται από όλα τα τμήματα συμπτωματικών κονδύλων ή στελεχών πατάτας καθώς και από φυτά μελιτζάνας στα οποία δεν παρατηρήθηκαν συμπτώματα αλλά η δοκιμή IF/PCR σύνθετου δείγματος είχε θετικά αποτελέσματα (βλέπε ενότητα 7.10).
Isolations shall be made from all symptomatic potato tubers or stem segments and from eggplants were no symptoms are observed but IF/PCR test from the composite sample was positive (see section 7.10).
Όταν είναι απαραίτητο, η διαλυτοποίηση των στελεχών των φυτών μελιτζάνας πρέπει να γίνεται όπως περιγράφεται στην ενότητα 3.1.3.
Maceration of eggplants stems when necessary should be carried out as described in section 3.1.3.
Ως θετικοί μάρτυρες, παρασκευάζονται δεκαδικές αραιώσεις από αιώρημα 106 cfu ανά ml του C. m. subsp. sepedonicus (π.χ. NCPPB 4053 ή PD 406).
As positive controls, prepare decimal dilutions from a suspension of 106 cfu per ml of C. m. subsp. sepedonicus (e.g. NCPPB 4053 or PD 406).
Για την αποφυγή ενδεχόμενης επιμόλυνσης, παρασκευάζονται θετικοί μάρτυρες πλήρως διαχωρισμένοι από τα δείγματα προς δοκιμή.
To avoid any possibility of contamination, prepare positive controls totally separated from samples to be tested.
Η καταλληλότητα κάθε νέας παρτίδας εκλεκτικού υποστρώματος όσον αφορά την ανάπτυξη του παθογόνου πρέπει να ελέγχεται πριν χρησιμοποιηθεί για τον έλεγχο των συνήθων δειγμάτων.
For each newly prepared batch of a selective medium its suitability for growth of the pathogen should be tested before it is used to test routine samples.
Εκλεκτική απομόνωση επί στερεού υποστρώματος
Selective plating
Από 100 µl κατάλληλης ποσότητας δείγματος αναδιαλυμένου ιζήματος πατάτας ή χυμού φυτών μελιτζάνας παρασκευάζονται 10πλές αραιώσεις σε ρυθμιστικό διάλυμα ιζήματος (προσάρτημα 3).
From a 100 µl aliquot from a resuspended potato pellet sample or eggplant sap make 10-fold dilutions in pellet buffer (Appendix 3).
Η απομόνωση από μη αραιωμένο ίζημα πατάτας αποτυγχάνει συνήθως λόγω της συνήθειας απαιτητικής ανάπτυξης του Cms και του ανταγωνισμού από τα σαπρόφυτα.
Isolation from undiluted potato pellet usually fails due to the fastidious growth habit of Cms and competition by saprophytes.
Λόγω του ότι το βακτήριο υπάρχει συνήθως σε μεγάλους πληθυσμούς στους προσβεβλημένους ιστούς, τα σαπρόφυτα μπορούν συνήθως να αραιωθούν ενώ το παθογόνο παραμένει.
Since the bacterium is usually present in high populations in infected tissues, the saprophytes can usually be diluted out, whilst the pathogen remains.
Για το λόγο αυτό, συνιστάται να εξαπλωθούν, χρησιμοποιώντας εξαπλωτήρες [ράβδοι χόκεϋ (hockey sticks)] και την τεχνική εξάπλωσης σε τρυβλία (spread plate), 100 µl από κάθε δείγμα, σε αραιώσεις 1/100 έως 1/10000, σε υπόστρωμα MTNA ή NCP-88 (προσάρτημα 5) (εάν χρησιμοποιούνται τρυβλία petri διαμέτρου 90 mm – προσαρμόζεται ο όγκος για εναλλακτικά μεγέθη τρυβλίων).
It is therefore recommended to spread 100 µl from each of the samples, 1/100 up to 1/10000 dilutions onto MTNA medium or NCP-88 medium (Appendix 5) (if using 90 mm diameter petri dishes- adjust volume for alternative dish sizes), using spreaders (hockey sticks) and the spread plate technique.
Μια εναλλακτική στρατηγική είναι η εξάπλωση της αρχικής ποσότητας 100 µl ιζήματος πατάτας επί ενός πρώτου τρυβλίου agar με έναν εξαπλωτήρα. Στη συνέχεια μεταφέρεται ο εξαπλωτήρας σε ένα δεύτερο τρυβλίο agar, εξαπλώνοντας οιοδήποτε υπόλειμμα έχει μείνει στον εξαπλωτήρα· η διαδικασία αυτή επαναλαμβάνεται, τέλος, σε ένα τρίτο τρυβλίο, δίδοντας κατ’ αυτόν τον τρόπο αποτέλεσμα αραιώσεως επί του υποστρώματος μέσω του εξαπλωτήρα.
An alternative strategy is to spread out the initial 100 µl potato pellet aliquot onto a first agar plate with a spreader and then remove the spreader to a second agar plate, streaking out any residue left on the spreader; finally repeat this with a third plate, thus giving a dilution plating effect via the spreader.
Οι πλάκες επωάζονται στο σκοτάδι στους 21-23 °C.
Incubate plates in the dark at 21 to 23 °C.
Οι αρχικές εξετάσεις των τρυβλίων, συμπεριλαμβανομένων, όσον αφορά τα τρυβλία των μαρτύρων, των μετρήσεων των αποικιών που είναι όμοιες με το C. m. subsp. sepedonicus, πραγματοποιούνται μετά από 3 ημέρες, ενώ περαιτέρω μετρήσεις γίνονται μετά από 5, 7 και τελικά 10 ημέρες.
Initial examinations of the plates including, by reference to the control plates, counts of any C. m. subsp. sepedonicus like colonies are made after 3 days, with further counts after 5, 7, eventually 10 days.
Καθαρισμός ύποπτων αποικιών
Purification of suspicious colonies
Η υποκαλλιέργεια αποικιών που μοιάζουν με C. m. subsp. sepedonicus πρέπει να διεξάγεται σε υπόστρωμα YGM για μόλυνση φυτών μελιτζάνας ή/και ακόλουθη ταυτοποίηση· αυτό πρέπει να γίνει προτού μεγαλώσει υπερβολικά η ανάπτυξη στα τρυβλία, δηλαδή κατά προτίμηση μετά από 3-5 ημέρες.
Subculturing of C. m. subsp. sepedonicus-like colonies should be carried out onto YGM media for eggplant inoculation and/or subsequent identification; this should be done before the plates become too overgrown i.e. preferably after three to five days.
Οι αποικίες που μοιάζουν με εκείνες του C. m. subsp. sepedonicus διασπείρονται γραμμωτά σε ένα από τα ακόλουθα θρεπτικά υλικά (η σύνθεση των υποστρωμάτων δίδεται στο προσάρτημα 5):
Streak C. m. subsp. sepedonicus –like colonies on to one of the following media: (formulae are given in Appendix 5):
nutrient dextrose agar (μόνον για υποκαλλιέργεια),
nutrient dextrose agar (for use in subculturing only),
Επωάζουμε στους 21 °C -24 °C μέχρι 10 ημέρες.
Incubate at 21 °C to 24 °C for up to 10 days.
Το C. m. subsp. sepedonicus αναπτύσσεται αργά, συνήθως παράγοντας αποικίες χρώματος κρεμ, υπερυψωμένες, μεγέθους μύτης καρφίτσας μετά από δέκα ημέρες.
subsp. sepedonicus is slow-growing, usually producing pin-point, cream, domed colonies within 10 days.
(Φωτογραφίες τυπικών αποικιών του C. m. subsp. sepedonicus, βλέπε ιστοχώρο: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Photos of typical colonies of C. m. subsp. sepedonicus (see web site http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Επαναδιασπείρονται γραμμωτά για να εξασφαλιστεί η καθαρότητα.
Re-streak to establish purity.
Οι ρυθμοί ανάπτυξης βελτιώνονται με υποκαλλιέργειες.
Growth rates are improved with subculture.
Οι τυπικές αποικίες είναι χρώματος κρεμ-λευκού ή ελεφαντίνου, ενδεχομένως κίτρινου, στρογγυλές, λείες, υπερυψωμένες, θολωτές, βλεννώδεις-ρευστές, με πλήρη περίμετρο και με διάμετρο 1-3 mm συνήθως.
Typical colonies are creamy-white or ivory, occasionally yellow, rounded, smooth, raised, convex-domed, mucoid-fluidal, with entire edges and usually 1 to 3 mm in diameter.
Μια απλή χρώση κατά Gram (προσάρτημα 9) μπορεί να συμβάλει στην επιλογή των αποικιών για τη διενέργεια περαιτέρω δοκιμών.
A simple Gram stain (Appendix 9) may help to select colonies for further testing.
Ταυτοποιούνται οι πιθανές καλλιέργειες (βλέπε ενότητα 9) και πραγματοποιείται δοκιμή παθογένειας (βλέπε ενότητα 10).
Identify presumptive cultures (see section 9) and perform a pathogenicity test (see section 10).
ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΣΗ
IDENTIFICATION
Ταυτοποιούνται οι καθαρές καλλιέργειες των πιθανών απομονώσεων του C. m. subsp. sepedonicus χρησιμοποιώντας τουλάχιστον δύο από τις ακόλουθες δοκιμές που βασίζονται σε διαφορετικές βιολογικές αρχές.
Identify pure cultures of presumptive C. m. subsp. sepedonicus isolates using at least two of the following tests based on different biological principles.
Για κάθε δοκιμή που πραγματοποιείται, συμπεριλαμβάνονται γνωστά στελέχη αναφοράς όπου ενδείκνυται.
Include known reference strains where appropriate for each test performed.
Θρεπτικές και ενζυματικές δοκιμές ταυτοποίησης
Nutritional and enzymatic identification tests
Προσδιορίζονται οι ακόλουθες φαινοτυπικές ιδιότητες που παρουσιάζει ή όχι εν γένει το C. m. subsp. sepedonicus, σύμφωνα με τις μεθόδους των Lelliott και Stead (1987), Klement et al.
Determine the following phenotypic properties which are universally present or absent in C. m. subsp. sepedonicus, according to the methods of Lelliott and Stead (1987), Klement et al.
Όλα τα υποστρώματα πρέπει να επωάζονται στους 21 °C και να εξετάζονται ύστερα από έξι ημέρες.
All media should be incubated at 21 °C and examined after six days.
Εάν το βακτήριο δεν έχει αναπτυχθεί, η επώαση συνεχίζεται για 20 ημέρες συνολικά.
If no growth has occurred, incubate for up to 20 days.
Όλες οι δοκιμές πρέπει να περιλαμβάνουν ένα γνωστό στέλεχος του C. m. subsp. sepedonicus ως μάρτυρα.
All tests must include a known C. m. subsp.sepedonicus control.
Οι θρεπτικές και φυσιολογικές δοκιμές πρέπει να διενεργούνται με μόλυσμα από υποκαλλιέργειες σε nutrient agar.
Nutritional and physiological tests must be made using inocula from nutrient agar subcultures.
Οι μορφολογικές συγκρίσεις πρέπει να γίνονται από καλλιέργειες σε nutrient dextrose agar.
Morphological comparisons must be made from nutrient dextrose agar cultures.
Αναμενόμενο αποτέλεσμα
Expected result
Δοκιμή οξείδωσης/ζύμωσης (O/F)
Oxidation/Fermentation (O/F) test
Αδρανές ή ασθενώς οξειδωτικό
Inert or weakly oxidative
Ενεργότητα οξειδάσης
Oxidase activity
Ανάπτυξη στους 37 °C
Growth at 37 °C
Ενεργότητα ουρεάσης
Urease activity
Υδρόλυση αισκουλίνης
Aesculin hydrolysis
Υδρόλυση αμύλου
Starch hydrolysis
ή ασθενής
or weak
Ανοχή σε 7 % NaCl
Tolerance of 7 % NaCl
Παραγωγή ινδόλης
Indole production
Δραστηριότητα καταλάσης
Catalase activity
Παραγωγή H2S
production
Χρησιμοποίηση κιτρικών ιόντων
Citrate utilization
Υγροποίηση ζελατίνης
Gelatin liquefaction
Παραγωγή οξέος από γλυκερίνη
Acid glycerol
Παραγωγή οξέος από λακτόζη
Acid from lactose
Παραγωγή οξέος από ραμνόζη
Acid from rhamnose
Παραγωγή οξέος από σαλικίνη
Acid from salicin
Χρώση κατά Gram (προσάρτημα 9)
Gram stain (Appendix 9)
Δοκιμή IF
IF-test
Παρασκευάζεται αιώρημα περίπου 106 κυττάρων ανά ml σε ρυθμιστικό διάλυμα IF (προσάρτημα 3).
Prepare a suspension of approximately 106 cells per ml in IF buffer (Appendix 3).
Παρασκευάζεται σειρά διπλών αραιώσεων κατάλληλου αντιορρού.
Prepare a 2-fold dilution series of an appropriate antiserum.
Εφαρμόζουμε τη διαδικασία IF (ενότητα 4).
Apply the IF procedure (section 4).
Επιτυγχάνεται θετική δοκιμή IF εάν ο τίτλος IF της καλλιέργειας είναι ισοδύναμος με αυτόν του θετικού μάρτυρα.
A positive IF test is achieved if the IF titre of the culture is equivalent to that of the positive control.
Παρασκευάζεται αιώρημα περίπου 106 κυττάρων ανά ml σε υπέρ καθαρό νερό (UPW).
Prepare a suspension of approximately 106 cells per ml in ultra pure water (UPW).
Θερμαίνονται 100 µl του αιωρήματος κυττάρων σε κλειστούς σωλήνες σε θερμικό μπλοκ ή αναβράζον υδατόλουτρο στους 100 °C για 4 λεπτά.
Heat 100 µl of the cell suspension in closed tubes in a heating block or boiling waterbath at 100 °C for four minutes.
Εφαρμόζονται οι κατάλληλες διαδικασίες PCR για να ενισχυθούν τα ειδικά αμπλικόνια του C. m. subsp. sepedonicus (π.χ. Pastrik, 2000· βλέπε προσάρτημα 4· Li και de Boer, 1995· Mills et al., 1997· Pastrik και Rainey, 1999·
Apply appropriate PCR procedures to amplify C. m. subsp. sepedonicus specific amplicons (e. g. Pastrik, 2000; see Appendix 4; Li and de Boer, 1995; Mills et al., 1997; Pastrik and Rainey, 1999; Schaad et al., 1999.