natgillin/translations-raw huggingface dataset:
1 ml af denne opløsning pipetteres (5.3) over i en 100 ml målekolbe (5.6), og der fyldes op til mærket med methanol (4.2.1).
Pipette 1 ml (5.3) of this solution into a 10 ml volumetric flask (5.6) and make up to the mark with methanol (4.2.1) in order to obtain a 0,15 mM tryptamine concentration
1 ml af denne opløsning pipetteres (5.3) over i en 10 ml målekolbe (5.6), hvorefter der tilsættes 100 μl (5.7) 0,15 mM tryptaminopløsning (7.1) og fyldes op til mærket med methanol (4.2.1).
Preparation of the test sample solution
Der blandes ved at vende kolben på hovedet flere gange.
Weigh 1,000 ± 0,001 g of the SMP sample into a 25 ml beaker (5.2).
Bemærkning: Standardanalyseopløsningen skal opbevares ved 4 °C indtil HPLC-analysen.
Add 10 ml of distilled water at 40 °C ± 1 °C by a pipette (5.3) and stir with a magnetic stirrer (5.4) for 30 minutes in order to dissolve any lumps
Forberedelse af derivateringsreagenset
Pipette 0,2 ml (5.5) of the reconstituted milk into a 10 ml volumetric flask (5.6), add 100 μl of the 0,15 mM tryptamine solution (7.1) using a syringe (5.7) and make up to the volume with methanol (4.2.1).
25,0 ± 0,1 mg OPA (4.3.4) afvejes i en 10 ml målekolbe (5.6), hvorefter der tilsættes 0,5 ml (5.5) methanol (4.2.1) og blandes omhyggeligt for at opløse OPA.
Mix carefully by inversion and sonicate (5.8) for 15 min
Der fyldes op til mærket med borsyreopløsning (4.3.2) og tilsættes 20 μl 2-mercaptoethanol (4.3.3) med en sprøjte (5.7).
Centrifuge (5.9) at 27000 g × g for 10 minutes and collect the supernatant in a glass vial (5.10)
Bemærkning: Derivateringsreagenset skal opbevares ved 4 °C i et brunt prøveglas.
Note: Test sample solution should be stored at 4 °C until the HPLC analysis is performed.
Det er holdbart i en uge.
Preparation of the external standard solution
Bestemmelse ved HPLC
Weigh 55,4 mg PEDP (4.1) into a 50 ml volumetric flask (5.6) and add about 25 ml of chloroform (4.2.2) using a graduated cylinder (5.11).
Elueringsvæsker (4.4)
Heat the stoppered flask to 50 °C ± 1 °C and mix carefully till the PEDP dissolves.
Væske A: 0,3 mM natriumdihydrogenphosphat- og 3 mM natriumacetatopløsning (indstillet til pH 6,5 ± 0,1 med eddikesyre): metanol: tetrahydrofuran = 558:440:2 (v/v/v)
Cool the flask to 20 °C, make up to the volume with methanol (4.2.1) and mix by inversion
Væske B: methanol
Pipette 1 ml (5.3) of this solution into a 100 ml volumetric flask (5.6) and make up to the volume with methanol (4.2.1).
Foreslået elueringsgradient:
Pipette 1 ml (5.3) of this solution into a 10 ml volumetric flask (5.6), add 100 μl (5.7) of 0,15 mM tryptamine solution (7.1) and make up to the volume with methanol (4.2.1).
Tid (min.)
Mix by inversion
Væske A (%)
Note: Reference sample solution should be stored at 4 °C until the HPLC analysis is performed.
Væske B (%)
Preparation of the derivatising reagent
Gennemstrømningshastighed (ml/min.)
Weigh 25,0 ± 0,1 mg of OPA (4.3.4) into a 10 ml volumetric flask (5.6), add 0,5 ml (5.5) of methanol (4.2.1) and mix carefully to dissolve the OPA.
Start
Make up to the mark with boric acid solution (4.3.2) and add 20 μl of 2-mercaptoethanol (4.3.3) by syringe (5.7).
0Bemærkning: Elueringsgradienten vil kunne skulle ændres lidt for at opnå den opløsning, der er vist i figur 1.
Note: The derivatising reagent should be stored at 4 °C in a brown glass vial and is stable for one week.
Kolonnetemperatur: 30 °C.
Determination by HPLC
Injektionsvolumen: 50 μl derivateringsreagens og 50 μl prøveopløsning.
Elution solvents (4.4)
Kolonneligevægt
Solvent A: Solution of 0,3 mM sodium dihydrogen phosphate and 3 mM sodium acetate solution (adjusted to pH 6,5 ± 0,1 with acetic acid): methanol: tetrahydrofuran = 558:440:2 (v/v/v)
Ved daglig opstart af systemet gennemskylles kolonnen med 100 % væske B i 15 min., hvorefter der indstilles A: 40:60 og bringes i ligevægt ved 1 ml/min. i 15 min.
Solvent B: methanol
Der foretages en blindprøve ved injektion af methanol (4.2.1).
Suggested eluting gradient:
Bemærkning: Forud for opbevaring over længere tid gennemskylles kolonnen med methanol: chloroform = 80: 20 (v/v) i 30 min.
Time (min)
Indholdet af PS + PE i analyseprøven bestemmes.
Solvent A (%)
Rækken af kromatografianalyser gennemføres under overholdelse af et konstant tidsforhold mellem de enkelte analyserunder for at opnå konstante retentionstider.
Solvent B (%)
Den eksterne standardopløsning (7.3) indsprøjtes for hver 5.-10. analyseopløsning for at beregne responsfaktoren.
Flow rate (ml/min)
Bemærkning: Søljen skal renses ved gennemskylning med 100 % væske B (7.5.1) i mindst 30 min. for hver 20.-25. analyserunde.
Initial
Integrationsmåde
0Note: The eluting gradient may require slight modification in order to achieve the resolution shown in figure 1.
PEDP-top
Column temperature: 30 °C.
PEDP elueres som en enkelt top.
Injection volume: 50 μl derivatising reagent and 50 μl sample solution
Toparealet bestemmes ved dal-til-dal-integration.
Column equilibration
Tryptamin-top
Starting up the system on a daily basis, flush the column with 100 % solvent B for 15 minutes, then set at A:B = 40:60 and equilibrate at 1 ml/min for 15 minutes.
Tryptamin elueres som en enkelt top (figur 1).
Perform a blank run by injecting methanol (4.2.1).
Toparealet bestemmes ved dal-til-dal-integration.
Note: Before long-term storage flush the column with methanol: chloroform = 80:20 (v/v) for 30 minutes.
Grupper af PS- og PE-toppe
Determine the PS + PE content in the test sample
Under de beskrevne betingelser (figur 1) elueres PS som to delvis uopløste hovedtoppe efter en mindre top.
Perform the sequence of the chromatographic analyses keeping constant the run-to-run time in order to obtain constant retention times.
PE elueres som 3 delvis uopløste hovedtoppe.
Inject the external standard solution (7.3) every 5-10 test sample solutions in order to calculate the response factor
Hele arealet for hver samling af toppe bestemmes ved at sætte basislinjen som rapporteret i figur 1.
Note: The column shall be cleaned by flushing with 100 % solvent B (7.5.1) for at least 30 minutes every 20-25 runs.
BEREGNING OG ANGIVELSE AF RESULTATER
Integration mode
Indholdet af PS og PE i analyseprøven beregnes således:
PEDP peak
hvor:
PEDP is eluted as a single peak.
C = indhold af PS eller PE (mg/100 g pulver) i analyseprøven
Determine the peak area by valley-to- valley integration.
A 1 = topareal af PEDP i standardprøveopløsningen (7.3)
Tryptamine peak
A 2 = topareal af PS eller PE i analyseopløsningen (7.2)
Tryptamine is eluted as a single peak (Figure 1).
T 1 = topareal af tryptamin i standardprøveopløsningen (7.3)
Determine the peak area by valley-to-valley integration.
T 2 = topareal af tryptamin i analyseprøveopløsningen (7.2).
PS and PE peaks groups
METODENS NØJAGTIGHED
Under the described conditions (Figure 1), PS elutes as two main partially unresolved peaks preceded by a minor peak.
Bemærkning: Værdierne for repeterbarhed blev beregnet efter den internationale IDF-standard (*).
PE elutes as three main partially unresolved peaks.
Repeterbarhed
Determine the whole area of each peak cluster setting the baseline as reported in Figure 1.
Den relative standardafvigelse for repeterbarheden, som er et udtryk for variationen i uafhængige analyseresultater, der er opnået af samme person under anvendelse af samme apparatur på samme betingelser på samme analyseprøve inden for et kort tidsinterval, må ikke overstige 2 %.
CALCULATION AND EXPRESSION OF RESULTS
Hvis der opnås to bestemmelser under disse betingelser, bør den relative forskel mellem de to resultater ikke overstige 6 % af det aritmetiske gennemsnit af resultaterne.
PS and PE content in the test sample shall be calculated as follows:
Reproducerbarhed
where:
Hvis to bestemmelser foretages af laboranter i forskellige laboratorier under anvendelse af forskelligt apparatur på forskellige betingelser for analyse og samme analyseprøve, må den relative forskel mellem de to resultater ikke overstige 11 % af det aritmetiske gennemsnit af resultaterne.
C = PS or PE content (mg/100 g powder) in the test sample
LITTERATURHENVISNINGER
A 1 = PEDP peak area of the standard sample solution (7.3)
Figur 1
A 2 = PS or PE peak area of the test sample solution (7.2)
HPLC-mønster for OPA-derivater af phosphatidylserin (PS) og phosphatidylethanolamin (PE) i methanolekstrakt af rekonstitueret skummetmælkspulver.
T 1 = Tryptamine peak area of the standard sample solution (7.3)
Integrationsmåde for toppene af PS, PE og tryptamin (intern standard) rapporteres.
T 2 = Tryptamine peak area of the test sample solution (7.2).
Fluorescens (arbitrære enheder)
ACCURACY OF THE METHOD
Tillæg II
Note: The values for repeatability were calculated according to the IDF International Standard (*).
PÅVISNING AF LØBEVALLE I SKUMMETMÆLKSPULVER TIL OFFENTLIG OPLAGRING VED HJÆLP AF HØJTRYKSVÆSKEKROMATOGRAFISK BESTEMMELSE AF KASEINMAKROPEPTIDINDHOLDET (HPLC-METODE)
Repeatability
Med denne metode kan det ved bestemmelse af kaseinmakropeptider påvises, om der er løbevalle til stede i skummetmælkspulver.
If two determinations are obtained under these conditions, the relative difference between the two results should not be greater than 6 % of the arithmetic mean of the results.
HENVISNING
Reproducibility
International Standard ISO 707 — Mælk og mejeriprodukter — Vejledning i prøveudtagning.
If two determinations are obtained by operators in different laboratories using different apparatus under different conditions for the analysis on the same test sample, the relative difference between the two results should not be greater than 11 % of the arithmetic mean of the results.
Indholdet af løbevalletørstof defineres som indholdet udtrykt i vægtprocent ved bestemmelse af indholdet af kaseinmakropeptider ved den beskrevne fremgangsmåde.
REFERENCES
PRINCIP
Resmini P., Pellegrino L., Hogenboom J.A., Sadini V., Rampilli M., ‘Detection of buttermilk solids in skimmilk powder by HPLC quantification of aminophospholipids’.
Opløsning af skummetmælkspulveret, fjernelse af fedtstoffer og proteiner ved hjælp af trichloreddikesyre efterfulgt af centrifugering eller filtrering
Figure 1
Bestemmelse af mængden af kaseinmakropeptider (CMP) i supernatanten ved HPLCA
HPLC pattern of OPA-derivatives of phosphatidylserine (PS) and phosphatidylethanolamine (PE) in methanol extract of reconstituted skim-milk powder.
Vurdering af resultatet i forhold til standardprøver af skummetmælkspulver, som ikke indeholder eller er tilsat en kendt mængde vallepulver.
Integration mode for the peaks of PS, PE and tryptamine (internal standard) is reported
Der anvendes destilleret vand eller vand af mindst tilsvarende renhed.
Fluorescence (arbitrary units)
Trichloreddikesyreopløsning
Appendix II
240 g trichloreddikesyre (CCl3COOH) opløses i vand og fortyndes til 1000 ml.
DETECTION OF RENNET WHEY IN SKIMMED MILK POWDER FOR PUBLIC STORAGE BY DETERMINATION OF CASEINOMACROPEPTIDES HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
Opløsningen skal forblive klar og farveløs.
SCOPE AND FIELD OF APPLICATION
Elueringsvæske med pH 6,0
This method allows detection of rennet whey in skimmed milk powder intended for public storage by determination of the caseinomacropeptides.
1,74 g kaliumhydrogenphosphat (K2HPO4), 12,37 g kaliumdihydrogenphosphat (KH2PO4) og 21,41 g natriumsulfat (Na2SO4) opløses i ca. 700 ml vand.
REFERENCE
Om nødvendigt indstilles pH til 6,0 ved hjælp af fortyndet phosphorsyre eller en kaliumhydroxidopløsning.
International Standard ISO 707 - Milk and Milk Products - Guidance on sampling.
Der fyldes op til 1000 ml med vand og blandes.
The content of rennet whey solids is defined as the percentage by mass as determined by the caseinomacropeptide content by the procedure described.
Bemærkning: Elueringsvæskens sammensætning kan opdateres for at efterkomme standarderne eller anbefalinger fra fabrikanten af kolonnepakningsmaterialet.
PRINCIPLE
Før brugen filtreres elueringsvæsken gennem et membranfilter med porestørrelse 0,45 μm.
Reconstitution of the skimmed milk powder, removal of fat and proteins with trichloroacetic acid, followed by centrifugation or filtration;
Opløsning til skylning af kolonnerne
Determination of the quantity of caseinomacropeptides (CMP) in the supernatant by high-performance liquid chromatography (HPLC);
En volumendel acetonitril (CH3CN) blandes med ni volumendele vand.
Evaluation of the result obtained for the samples by reference to standard samples consisting of skimmed milk powder with or without the addition of a known percentage of whey powder.
Før brugen filtreres opløsningen gennem et membranfilter med porestørrelse 0,45 μm.
The water used shall be distilled water or water of at least equivalent purity.
Bemærkning: Der kan til skylning anvendes andre opløsninger, der har baktericid virkning, og som ikke ændrer kolonnernes adskillelsesevne.
Trichloroacetic acid solution
Standardprøver
Dissolve 240 g of trichloroacetic acid (CCl3COOH) in water and make up to 1000 ml.
Skummetmælkspulver, der opfylder kravene i denne forordning, benævnt [0].
The solution should be clear and colourless.
Samme pulver tilsat 5 % (m/m) løbevallepulver med normal sammensætning, benævnt [5].
Eluent solution, pH 6,0
Analysevægt
Dissolve 1,74 g of dipotassium hydrogen phosphate (K2HPO4), 12,37 g of potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4) and 21,41 g of sodium sulphate (Na2SO4) in about 700 ml of water.
Centrifuge, der kan præstere en centrifugalkraft på 2200 g, med tilhørende lukkede centrifugeglas på ca. 50 ml.
Adjust, if necessary, to pH 6,0, using a solution of phosphoric acid or potassium hydroxide.
Mekanisk rysteapparat
Make up to 1000 ml with water and homogenise.
Glastragte med diameter på ca. 7 cm
Note: The composition of the eluent can be updated to comply with the certificate of the standards or the recommendations of the manufacturer of the column packing material.
Filtrerpapir, mellemfint, med diameter på ca. 12,5 cm
Filter the eluent solution, prior to use, through a membrane filter with a 0,45 μm pore diameter.
Filtreringsudstyr af glas med tilhørende membranfiltre med porestørrelse 0,45 μm
Flushing solvent
Målepipetter på 10 ml (ISO 648, klasse A, eller ISO/R 835) eller et dispenseringssystem, som muliggør gennemløb af 10,0 ml på 2 min.
Mix one volume acetonitrile (CH3CN) with nine volumes water.
Dispenseringssystem, som muliggør gennemløb af 20,0 ml vand ved ca. 50 °C
Filter the mixture prior to use through a membrane filter with a 0,45 μm pore diameter.
Termostatstyret vandbad indstillet på 25 ± 0,5 °C
Note: Any other flushing solvent with a bactericidal effect which does not impair the columns' resolution efficiency may be used.
HPLC-udstyr bestående af:
Standard samples
Pumpe
Skimmed milk powder meeting the requirements of this Regulation (i.e. [0])
Manuel eller automatisk injektionsenhed på 15-30 μl
The same skimmed milk powder adulterated with 5 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [5])
To serieforbundne kolonner, TSK 2000 SW (længde 30 cm, indvendig diameter 0,75 cm) eller kolonner af tilsvarende effektivitet (f.eks. single TSK 2000-SWxl, single Agilent Technologies Zorbax GF 250), og en forkolonne (3 cm × 0,3 cm) pakket med I 125 eller et lige så effektivt materiale
Analytical balance
Termostatstyret kolonneovn indstillet på 35 ± 1 °C
Optional centrifuge capable of attaining a centrifugal force of 2200 g, fitted with stoppered or capped centrifuge tubes of about 50 ml capacity
UV-detektor med variabel bølgelængde, hvormed der ved 205 nm kan måles med en følsomhed på 0,008 Å
Mechanical shaker
Integrator, der kan integrere over de enkelte toppe
Glass funnels, diameter about 7 cm
Bemærkning: Der kan arbejdes med kolonner ved stuetemperatur, men adskillelsesevnen bliver i så fald lidt mindre.
Filter papers, medium filtration, diameter about 12,5 cm
Temperatursvingningerne gennem en analyserække må her ikke overstige ± 5 °C.
Glass filtration equipment with 0,45 μm pore diameter membrane filter
Prøveudtagningen sker efter metoden i den internationale standard ISO 707.
Graduated pipettes allowing delivery of 10 ml (ISO 648, Class A, or ISO/R 835) or a dispensing system capable of delivering 10,0 ml in two minutes
Medlemsstaterne kan dog anvende en anden metode til prøveudtagning, hvis den følger principperne i ovennævnte standard.
Dispensing system capable of delivering 20,0 ml water at ca.
Prøven opbevares under sådanne forhold, at der hverken kan ske ødelæggelse eller ændring af sammensætningen.
50 °C
Forberedelse af prøven
Thermostatic water bath, set at 25 ± 0,5 °C
Pulveret overføres til en beholder, der er cirka dobbelt så stor som pulverets volumen, og som har et lufttæt låg.
HPLC equipment, consisting of:
Beholderen lukkes straks.
Pump
Mælkepulveret blandes omhyggeligt ved, at beholderen vendes flere gange rundt.
Injector, hand or automatic, with a 15 to 30 μl capacity
Analyseprøve
Two TSK 2000-SW columns in series (length 30 cm, internal diameter 0,75 cm) or equivalent columns (e.g. single TSK 2000-SWxl, single Agilent Technologies Zorbax GF 250) and a precolumn (3 cm × 0,3 cm) packed with I 125 or material of equivalent effectiveness
I et centrifugeglas (6.2) eller en tilproppet kolbe (50 ml) afvejes 2,000 ± 0,001 g analyseprøve.
Thermostatic column oven, set at 35 ± 1 °C
Fjernelse af fedtstoffer og proteiner
Variable wavelength UV detector, permitting measurements at 205 nm with a sensitivity of 0,008 Å
Der sættes 20,0 ml 50 °C varmt vand til analyseprøven.
Integrator capable of valley-to-valley integration
Pulveret opløses ved omrøring i 5 min. med et rysteapparat (6.3).
Note: Working with columns kept at room temperature is possible, but their power of resolution is slightly lower.
Reagensglasset anbringes i vandbadet (6.10), og det afventes, at der indtræder en ligevægt ved 25 °C.
In that case, the temperature should vary by less than ± 5 °C in any one range of analyses.
I løbet af 2 min. tilsættes 10,0 ml trichloreddikesyreopløsning (5.1) på 25 °C under kraftig omrøring med magnetomrøreren (6.4).
Samples shall be taken in accordance with the procedure laid down in International Standard ISO 707.
Reagensglasset anbringes i vandbadet (6.10), hvori det henstår i 60 minutter.
However, Member States may use another method of sampling provided that it complies with the principles of the abovementioned standard
Der centrifugeres (6.2) ved 2200 g i 10 min. eller filtreres gennem papirfilter (6.6), idet de første 5 ml filtrat bortkastes.
Store the sample in conditions which preclude any deterioration or change in composition
Kromatografisk bestemmelse
Preparation of the test sample
Af supernatanten eller filtratet (8.3.3) indsprøjtes en nøjagtigt afmålt mængde på mellem 15 og 30 μl i HPLC-apparatet (6.11) under en gennemstrømningshastighed på 1,0 ml elueringsvæske (5.2) pr. minut.
Transfer the milk powder into a container with a capacity of about twice the volume of the powder, fitted with an airtight lid.
Den må aldrig efterlades med elueringsvæske (5.2) i.
Close the container immediately.
Skal kolonnerne stå ubenyttede hen i mere end 24 timer, skylles de først med vand og dernæst med opløsning (5.3) i mindst 3 timer med en gennemløbshastighed på 0,2 ml pr. minut.
Mix the milk powder well by means of repeated inversion of the container.
Resultaterne af kromatograferingen af analyseprøven [E] foreligger i form af et kromatogram, hvor hver top identificeres ved sin retentionstid, RT, nemlig:
Test portion
Top II:
Weight 2,000 ± 0,001 g of test sample into a centrifuge tube (6.2) or a suitable stoppered flask (50 ml).
kromatogrammets anden top, hvis retentionstid er ca. 12,5 min.
Removal of fat and proteins
Top III:
Add 20,0 ml of warm water (50 °C) to the test portion.
kromatogrammets tredje top, der svarer til CMP, og hvis retentionstid er 15,5 min.
Dissolve the powder by shaking for five minutes using a mechanical shaker (6.3).
arealet af top II
25 °C in two minutes, while stirring vigorously with the aid of the magnetic stirrer (6.4).
arealet af top III
Place the tube in a water bath (6.10) and leave for 60 minutes
For at afsløre eventuelle afvigelser enten som følge af, at apparaturet eller kolonnerne ikke har fungeret tilfredsstillende, eller på grund af den analyserede prøves oprindelse eller art må alle kromatogrammer bedømmes visuelt, før en kvantitativ tolkning påbegyndes.
Centrifuge (6.2) for 10 minutes at 2200 g, or filter through paper (6.6), discarding the first 5 ml of filtrate
I tvivlstilfælde gentages analysen.
Chromatographic determination
Kalibrering
Inject 15 to 30 μl of accurately measured supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus (6.11) operating at a flow rate of 1,0 ml of eluent solution (5.2) per minute
Med standardprøverne (5.4) følges den i punkt 8.2 til 8.4.2 beskrevne fremgangsmåde nøje.
Note 1.
Der benyttes frisk fremstillede opløsninger, da CMP nedbrydes i 8 % trichloreddikesyreopløsning.
Another flow rate may be used, dependent of the internal diameter of the columns used or the instructions of the manufacturer of the column.
Indholdet heraf falder med ca. 0,2 % pr. time ved 30 °C.
Note 2.
Indholdet heraf falder med ca. 0,2 % pr. time ved 30 °C.
Rinse the columns with water during each interruption.
Før kromatografering af prøverne konditioneres kolonnerne ved gentagen indsprøjtning af opløsningen (8.5.1) af standardprøven (5.4.2), indtil den top, der svarer til CMP, har konstant areal og retentionstid.
Never leave the eluent solution in them (5.2).
Kalibreringsfaktorerne R bestemmes ved at indsprøjte filtrat (8.5.1) i samme mængde som prøverne.
Prior to any interruption of more than 24 hours, rinse the columns with water then wash them with solution (5.3) for at least three hours at a flow rate of 0,2 ml per minute.
ANGIVELSE AF RESULTATER
The results of chromatographic analysis of the test sample [E] are obtained in the form of chromatogram in which each peak is identified by its retention time RT as follows:
Beregningsmetode og formler
Peak II:
Beregning af responsfaktorerne R
The second peak of the chromatogram having an RT of about 12,5 minutes.
R II = responsfaktoren for top II
Peak III:
A II [0] = det areal af top II for standardprøven [0], som er fremkommet under 8.5.3
The third peak of the chromatogram, corresponding to the CMP, having an RT of 15,5 minutes.
R III = responsfaktoren for top III
The choice of the column(s) can affect the retention times of the individual peaks considerably.
A III [0] and AIII [5] = de arealer af top III for henholdsvis standardprøve [0] og [5], som er fremkommet under 8.5.3
The integrator (6.11.6) automatically calculates the area A of each peak:
W = indholdet af valle i standardprøven [5], nemlig 5
area of peak II,
Beregning af de relative toparealer for prøven [E]
area of peak III,
S II [E], SIII [E], SIV [E] = de relative arealer af henholdsvis top II, III og IV for prøven [E]
It is essential to examine the appearance of each chromatogram prior to quantitative interpretation, in order to detect any abnormalities due either to malfunctioning of the apparatus or the columns, or to the origin and nature of the sample analysed.
A II [E], AIII [E] = de arealer af henholdsvis top II og III for prøven [E], som er fremkommet under 8.4.2
If in doubt, repeat the analysis.
R II, RIII = de under 9.1.1 beregnede responsfaktorer
Calibration
Beregningen af de relative retentionstider for top III for prøven [E]
Apply exactly the procedure described from point 8.2 to point 8.4.2 to the standard samples (5.4)
RRT III [E] = den relative retentionstid for top III for prøven [E]
Use freshly prepared solutions, because CMP degrade in an 8 % trichloroacetic environment.
RT III [E] = retentionstiden for top III for prøven [E], som er fremkommet under 8.4.2
The loss is estimated at 0,2 % per hour at 30 °C.
RT III [5] = retentionstiden for top III for standardprøven [5], som er fremkommet under 8.5.3
Prior to chromatographic determination of the samples, condition the columns by repeatedly injecting the standard sample (5.4.2) in solution (8.5.1) until the area and retention time of the peak corresponding to the CMP are constant
ved et indhold på > 5 % er RRTIII [E] < 1,000
Determine the response factors R by injecting the same volume of filtrates (8.5.1) as used for the samples
ved et indhold på ≤ 5 % er RRTIII [E] ≥ 1,000.
EXPRESSION OF RESULTS
Den tilladte usikkerhed på RRTIII er ± 0,002.
Method of calculation and formulae