natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Test-koncentrationerne bør ligge omkring de laveste af de anvendte effektkoncentrationer (f.eks. EC10), hvilket betyder, at denne værdi er beregnet ved interpolering og ikke ekstrapolering.
The dependent variable (fish concentration) can be fitted with or without ln transformation, and the resulting BCF uncertainty can be evaluated.
Forældregenerationens overlevelse og tiden indtil den første yngel bør også rapporteres.
As a strong correlation exists between the two parameters k1 and k2 if estimated simultaneously, it may be advisable first to calculate k2 from the depuration data only (see above); k2 in most cases can be estimated from the depuration curve with relatively high precision. k1 can be subsequently calculated from the uptake data using non-linear regression [6].
Andre effekter af kemikaliet på parametre såsom vækst (f.eks. længde) og eventuelt den reelle populationsforøgelse kan også undersøges (se punkt 44).
It is advised to use the same data transformation when fitting sequentially.
OPLYSNINGER OM TESTKEMIKALIET
Visual inspection of the resulting slopes when plotted against the measured sample point data can be used to assess goodness of fit.
Resultater fra test af akut toksicitet (jf. kapitel C.2 i dette bilag: Daphnia sp., akut immobilisationstest) udført med Daphnia magna kan være nyttig med hensyn til at vælge en passende række testkoncentrationer i formeringstestene.
If it turns out that this method has given a poor estimate for k1 then the simultaneous approach to calculate k1 and k2 can be applied.
Testkemikaliets vandopløselighed og damptryk skal være kendt, og til kvantitativ bestemmelse af testkemikaliet i prøveopløsningerne skal der foreligge en pålidelig analysemetode med dokumenteret genfindingsgrad og kvantificeringsgrænse.
Again, the fitted model should be compared against the plotted measured data for visual inspection of goodness of fit and the resulting parameter estimates for k1, k2 and resulting BCF and their standard errors and/or confidence intervals should be compared between different types of fit.
Data for testkemikaliet, som kan være nyttige for at fastslå testbetingelserne, inkluderer strukturformel, stoffets renhed, lysstabilitet, stabilitet i testforløbet, pKa, Pow og resultater af test for spontan bionedbrydelighed (se kapitel C.4 (bestemmelse af “spontan” bionedbrydelighed) og C.29 (spontan bionedbrydelighed — CO2 i forseglede beholdere) i dette tillæg).
If the goodness of fit is poor this may be an indication that first order kinetics does not apply and other more complex models should be employed.
Hvis en test skal være gyldig, skal kontrollen/kontrollerne opfylde følgende resultatkrav:
One of the most common complications is fish growth during the test.
Forældregenerationens dødelighed (hundafnier) må ikke overstige 20 % ved testens afslutning.
7.
Det gennemsnitlige antal levende afkom pr. overlevende forældre-hundafnie ved testens afslutning er ≥ 60.
GROWTH DILUTION CORRECTION FOR KINETIC BCF AND BMF
Bemærk: Samme validitetskriterium (20 %) kan bruges for utilsigtet dødelighed/dødelighed ved en fejl blandt forældregenerationen til kontrollerne og til hver testkoncentration.
This section describes a standard method for correction due to fish growth during the test (so called ‘growth dilution’) which is only valid when first order kinetics applies.
Testbeholdere og andet apparatur, der kommer i berøring med testopløsningerne, bør være udført helt i glas eller andet kemisk inaktivt materiale.
In case there are indications that first order kinetics do not apply, it is advised to seek advice from a biostatistician for a proper correction of growth dilution or to use the mass based approach described below.
Testkarrene vil almindeligvis være af glas.
In some cases this method for correcting growth dilution is subject to a lack of precision or sometimes does not work (for example for very slowly depurating substances tested in fast growing fish the derived depuration rate constant corrected for growth dilution, k2g, may be very small and so the error in the two rate constants used to derive it become critical, and in some cases kg estimates may be larger than k2).
Yderligere nødvendigt apparatur kan være følgende:
In such cases an alternative approach (i.e. mass approach), which also works when first order growth kinetics have not been obeyed, can be used which avoids the need for the correction.
iltmålingsapparatur (med mikroelektrode eller andet passende udstyr til måling af opløst ilt i små prøvevolumener)
This approach is outlined at the end of this section.
egnet apparatur til temperaturregulering
Growth rate constant subtraction method for growth correction For the standard method all individual weight and length data are converted to natural logarithms and ln(weight) or ln(1/weight) is plotted vs. time (day), separately for treatment and control groups.
pH-meter
The same process is carried out for the data from the uptake and depuration phases separately.
apparatur til måling af vands hårdhedsgrad
Generally for growth dilution correction it is more appropriate to use the weight data from the whole study to derive the growth rate constant (kg), but statistically significant differences between the growth rate constants derived for the uptake phase and depuration phase may indicate that the depuration phase rate constant should be used.
apparatur til måling af totalkoncentrationen af organisk kulstof (TOC) i vand eller apparatur til bestemmelse af det kemiske iltbehov (COD)
Overall growth rates from aqueous studies for test and control groups can be used to check for any treatment related effects.
passende apparatur til kontrol af lysregime og måling af lysintensitet.
A linear least squares correlation is calculated for the ln(fish weight) vs. day (and for ln(1/weight) vs. day) for each group (test(s) and control groups, individual data, not daily mean values) for the whole study, uptake and depuration phases using standard statistical procedures.
Testorganisme
The variances in the slopes of the lines are calculated and used to evaluate the statistical significance (p = 0,05) of the difference in the slopes (growth rate constants) using the student t-test (or ANOVA if more than one concentration is tested).
Den art, der skal benyttes i testen, er Daphnia magna Straus [57].
Weight data are generally preferred for growth correction purposes.
En genotypebestemmelse som identifikation af arten vil være at foretrække.
Length data, treated in the same way, may be useful to compare control and test groups for treatment related effects.
Undersøgelser 1) har vist, at formeringsevnen af Klon A (som stammer fra IRCHA i Frankrig) (5) er stabil med hensyn til det relevante validitetskriterium med sit gennemsnit på ≥ 60 levende afkom pr. forældredafnie, der overlever ved de dyrkningsbetingelser, som er beskrevet i denne forsøgsmetode.
If there is no statistically significant difference in the weight data analysis, the test and control data may be pooled and an overall fish growth rate constant for the study (kg) calculated as the overall slope of the linear correlation.
Ved testens begyndelse bør dyrene være yngre end 24 timer og må ikke være det først udrugede afkom.
The rate constant from each treated group should then be used for growth dilution correction purposes of that group.
Dyrene bør hidrøre fra en sund bestand (dvs. fri for tegn på stress som høj dødelighed, tilstedeværelse af hanner og ephippia, forsinket frembringelse af første kuld, misfarvede dyr osv.).
If statistical differences between the uptake and depuration phase rate constants were noted, depuration phase derived rate constants should be used.
Det anbefales at anvende et veldefineret medium i denne test.
The growth rate constant derived for a dietary study is used in Equation A7.5 to calculate the growth corrected BMFKg (cf.
Derved undgås brugen af additiver (f.eks. tang og udtræk af jord), som er vanskeligt at karakterisere, og derved forbedres muligheden for standardisering laboratorierne imellem.
Appendix 7).
Medierne Elendt M4 (6) og M7 (se tillæg 2) er fundet velegnede til dette formål.
Mass based method for growth correction
Andre medier (f.eks. (7) (8)) er imidlertid acceptable, hvis det kan påvises, at dafniekulturen opfylder validitetskriterierne for testen.
An alternative to the above “growth rate constant subtraction method” that avoids the need to correct for growth can be used as follows.
Hvis der anvendes medier, som indeholder udefinerede tilsætningsstoffer, skal disse klart specificeres, og der skal fremskaffes oplysninger til testrapporten om sammensætning, særligt med hensyn til kulstofindhold, da det kan optræde som tilskud til foderet.
The principle is to use depuration data on a mass basis per whole fish rather than on a concentration basis.
Det anbefales at fastlægge det totale organiske kulstof (TOC) og/eller kemiske iltkrav (COD) til det organiske additiv i stamopløsningen, og at der foretages en vurdering af det medfølgende tilskud til TOC/COD i testmediet.
Convert depuration phase tissue concentrations (mass of test substance/unit mass of fish) into mass of test substance/fish: match concentrations and individual fish weights in tabular form (e.g. using a computer spreadsheet) and multiply each concentration by the total fish weight for that measurement to give a set of mass test substance/fish for all depuration phase samples.
Det anbefales yderligere, at niveauet af TOC i mediet (før tilsætning af alger) er under 2 mg/l (9).
Plot the resulting natural logarithm of substance mass data against time for the experiment (depuration phase) as would be done normally.
Det er vigtigt at gøre sig klart i forbindelse med undersøgelse af kemikalier, der indeholder metaller, at testmediets egenskaber (f.eks. hårdhed og cheleringskapacitet) kan have indflydelse på testkemikaliets toksicitet.
For the aqueous exposure method, derive the uptake rate constant routinely (see sections 4 and 6) note that the “normal” k2 value should be used in the curve fitting equations for k1) and derive the depuration rate constant from the above data.
Af den grund er et fuldt ud defineret medium ønskeligt.
Because the resulting value for the depuration rate constant is independent of growth as it has been derived on a mass basis per whole fish, it should be denoted as k2g and not k2.
For tiden er de eneste fuldt ud definerede medier, som er egnede til langtidskulturer med Daphnia magna, Elendt M4 og M7.
LIPID NORMALISATION TO 5 % LIPID CONTENT (AQUEOUS EXPOSURE METHOD ONLY) BCF results (kinetic and steady-state) from aqueous exposure tests should also be reported relative to a default fish lipid content of 5 % wet weight, unless it can be argued that the test substance does not primarily accumulate in lipid (e.g. some perfluorinated substances may bind to proteins).
Begge indeholder EDTA som cheleringsmiddel.
Fish concentration data, or the BCF, need to be converted to a 5 % lipid content wet weight basis.
Det er blevet påvist (2), at cadmiums “tilsyneladende toksicitet” generelt er lavere, når formeringstesten udføres med M4 og M7 end med medier uden EDTA.
If the same fish were used for measuring substance concentrations and lipid contents at all sampling points, this requires each individual measured concentration in the fish to be corrected for that fish's lipid content.
Af den grund er M4 og M7 ikke at anbefale, når der skal undersøges kemikalier indeholdende metaller, ligesom andre medier, som er kendt for at indeholde chelerende stoffer, ligeledes bør undgås.
C f,L
Til kemikalier, der indeholder metaller, tilrådes brug af andre medier som f.eks. hårdt ferskvand tilsat ASTM (9), som ikke indeholder EDTA.
C f
Denne kombination af hårdt ferskvand tilsat ASTM og algeekstrakt (10) er egnet til langsigtet dyrkning af Daphnia magna (2).
[Equation A5.29]
En hårdhed på over 140 mg/l (målt som CaCO3) anbefales.
lipid-normalised concentration in fish (mg kg– 1 wet weight)
Test på dette niveau og derover har vist formeringsevne, der er i overensstemmelse med validitetskriterierne (11)(12).
lipid fraction (based on wet weight)
Testopløsninger med de valgte koncentrationer fremstilles almindeligvis ved fortynding af en stamopløsning.
concentration of test substance in fish (mg kg– 1 wet weight)
Stamopløsninger bør fortrinsvis fremstilles, om muligt uden brug af opløsningsmidler eller dispergeringsmidler, ved at blande eller omryste testkemikaliet i testmediet ved mekanisk omrystning, omrøring eller ultralydbehandling.
If lipid analysis was not conducted on all sampled fish, a mean lipid value is used to normalise the BCF.
Det er mest hensigtsmæssigt at udsætte testsystemer for de koncentrationer af testkemikaliet, der skal bruges i testen, så længe det er nødvendigt for at dokumentere stabile eksponeringskoncentrationer før indførelsen af testorganismer.
For the steady-state BCF, the mean value recorded at the end of the uptake phase in the treatment group should be used.
Hvis testkemikaliet er vanskeligt at opløse i vand, bør de procedurer, der er beskrevet i OECD's vejledning om håndtering af vanskelige stoffer, følges (13).
For the normalisation of a kinetic BCF there may be some cases where a different approach is warranted, for example if the lipid content changed markedly during the uptake or depuration phase.
Anvendelse af opløsningsmidler eller dispergeringsmidler bør undgås, men kan i nogle tilfælde være nødvendig for at fremstille en stamopløsning med en passende koncentration til dosering.
However a feeding rate that minimises dramatic changes in lipid content should be used anyway routinely.
Ud over testkoncentrationerne bør en fortyndingsvandkontrol og, om nødvendigt, en opløsningsmiddelkontrol med passende replikater køres.
[Equation A5.30]
Kun opløsningsmidler eller dispergeringsmoder, som påviseligt ikke har betydelig eller kun minimal indvirkning på responsvariablen, bør anvendes i testen.
lipid-normalised kinetic BCF (L kg– 1)
Eksempler på egnede opløsningsmidler (f.eks. acetone, ethanol, methanol, dimethylformamid og triethylenglycol) og dispergeringsmidler (f.eks. Cremophor RH40, methylcellulose 0,01 % og HCO-40) findes i (13).
mean lipid fraction (based on wet weight)
Hvis der anvendes et opløsnings- eller dispergeringsmiddel, bør dets slutkoncentration ikke overstige 0,1 ml/l (13), og der bør være samme koncentration i alle testbeholdere, bortset fra ved fortyndingsvandkontrollen.
kinetic BCF (L kg– 1)
Det bør dog tilstræbes at holde koncentrationen af opløsningsmiddel på et minimum.
Chapter C.20 of this Annex, Daphnia magna Reproduction Test.
Varighed
, Influence of partition coefficient of lipophilic compounds on bioconcentration kinetics with fish.
Forældredyrene holdes individuelt, et pr. testbeholder, sædvanligvis med 50-100 ml medium (for Daphnia magna er mindre mængder en mulighed, især for mindre dafnier såsom Ceriodaphnia dubia) i hver beholder, medmindre der er behov for et gennemstrømningstestdesign til testen.
Wat.
Af hensyn til målinger af koncentrationen af testkemikaliet kan større volumener være nødvendige for at opfylde kravene til analyseproceduren; det er dog tilladt at foretage den kemiske analyse på en pulje af replikater.
Res. 22: 701-707.
Hvis der anvendes større mængder end 100 ml, kan det være nødvendigt at øge fødemængden for at sikre, at dafnierne har nok foder, og sikre overensstemmelse med validitetskriterierne.
As with every empirical relationship, it should be verified that the test substance falls within the applicability domain of the relationship
Forsøgsdyr
The weight of fish at the end of the uptake phase can be estimated from previous study data or knowledge of the test species' likely increase in size from a typical test starting weight over a typical uptake duration (e.g. 28 days).
Ved semistatiske test skal der være mindst 10 dyr, hver holdt separat, for hver testkoncentration og mindst 10 dyr, hver holdt separat, i kontrolserien.
In most programs that allow a linear regression, also standard errors and confidence interval (CI) of the estimates are given, e.g. in Microsoft Excel using the Data Analysis tool pack.
Det har ved gennemstrømningstest vist sig passende med 40 dyr opdelt i grupper med 10 dyr for hver testkoncentration (1).
In contrast with the linear regression method, using this formula will not yield a standard error for k2.
Man kan anvende et mindre antal testorganismer, og der anbefales da et minimum på 20 dyr pr. koncentration opdelt i to eller flere replikater med et tilsvarende antal dyr (f.eks. fire replikater med hver fem dafnier).
In contrast with a linear fitting procedure, this method will usually not yield a standard error or confidence interval for the estimated k1.
Det skal bemærkes, at ved test, hvor dyrene holdes gruppevis, vil det ikke være muligt at udelukke afkom fra den statistiske analyse, hvis der forekommer utilsigtet dødelighed/dødelighed ved en fejl blandt forældredyrene, efter at formeringen er påbegyndt, og i disse tilfælde bør formeringsevnen derfor udtrykkes som det totale antal levende afkom pr. forældredyr, der er til stede ved testens begyndelse.
It should be realised that the uncertainty in the k2 estimate is not used properly in the bioaccumulation model when this is essentially regarded as constant when fitting k1 in the sequential fit method.
Tilsætning til testbeholderne og de efterfølgende håndteringer af dem bør foretages på en randomiseret måde.
The resulting BCF uncertainty will therefore be different between the simultaneous and sequential fitting methods.
Hvis dette ikke gøres, risikerer man systematiske fejl, der kan opfattes som en koncentrationsrelateret virkning.
Appendix 6
Hvis undersøgelsesenheder håndteres efter behandling eller koncentration, kan en vis tidsrelateret virkning, som f.eks. persontræthed eller anden fejlmulighed, få større effekt ved de højere koncentrationer.
EQUATION SECTION FOR AQUEOUS EXPOSURE TEST: MINIMISED TEST DESIGN
Hvis testresultaterne desuden kan tænkes at være påvirket af begivenheder ved testens start eller af omgivelserne, som f.eks. beholdernes placering i laboratoriet, bør man overveje at dele testen op i grupper.
If a measurement of the concentration of the substance in tissues (Cf1) is made at the time that exposure ends (t1) and the concentration in tissue (Cf2) is measured again after a period of time has elapsed (t2), the depuration rate constant (k2) can be estimated using Equation A5.22 from Appendix 5.
I semistatiske test bør fordring foretages dagligt eller mindst tre gange ugentligt (dvs. svarende til udskiftning af medium).
The uptake rate constant, k1, can then be determined algebraically using Equation A5.23 from Appendix 5 (where Cf equals Cf1 and t equals t1) (1).
Der bør tages hensyn til eventuel fortynding af eksponeringskoncentrationerne på grund af tilsætning af foder.
The kinetic bioconcentration factor for the minimised design (designated as BCFKm to distinguish it from kinetic bioconcentration factors determined using other methods) is thus:
Dette bør i videst muligt omfang undgås ved hjælp af koncentrerede algesuspensioner.
[Equation A6.1]
Afvigelser fra dette (f.eks. ved gennemstrømningstest) skal rapporteres.
Concentrations or results should be corrected for growth dilution and normalised to a fish lipid content of 5 %, as is described in Appendix 5.
Under testen bør forældredyr fortrinsvis fodres med levende algeceller af en eller flere af følgende: Chlorella sp., Pseudokirchneriella subcapitata (tidligere Selenastrum capricornutum) og Desmodesmus subspicatus (tidligere Scenedesmus subspicatus).
The minimised BCFSS is the BCF calculated at the end of the uptake phase, assuming that steady-state has been reached.
Det tilførte foder bør baseres på mængden af organisk kulstof (C) for hvert forældredyr.
This can only be assumed, as the number of sampling points is not sufficient for proving this.
Undersøgelser (14) har vist, at det for Daphnia magna er tilstrækkeligt med fodermængder i størrelsesordenen 0,1 til 0,2 mg C/Daphnia/døgn for at opnå det krævede antal levende afkom og opfylde validitetskriterierne.
minimisedBCFSS
Hvis erstatningsmålinger, som f.eks. antal algeceller eller lysabsorption anvendes (for nemheds skyld, da måling af kulstofindhold er tidskrævende), bør hvert laboratorium fremstille et nomogram, som sammenholder erstatningsmålingen med kulstofindholdet i algekulturen (se tillæg 3 for rådgivning om konstruktion af nomogram).
Concentration in water at assumed steady-state at end of uptake (mg l– 1).
For lysmåleinstrumenter kalibreret i lux svarer en tilsvarende lysintensitet på 1000-1500 lux med cool white-lys til den anbefalede lysintensitet på 15-20 μE·m– 2·s– 1.
Evaluation of differences between measured time zero concentration (C0,m) and derived time zero concentration (C0,d)
Testmediets temperatur skal ligge på mellem 18 og 22 °C.
Guidance for very fast depurating test substances
I det enkelte forsøg bør temperaturen om muligt dog ikke variere mere end 2 °C dagligt (f.eks. 18-20, 19-21 eller 20-22 °C).
EXAMPLE OF CONSTITUENT QUANTITIES OF A SUITABLE COMMERCIAL FISH FOOD
Det kan være hensigtsmæssigt at anvende en testbeholder mere til brug for overvågning af temperaturen.
Major constituent
Luftning
Fish meal
Testbeholderne må ikke gennemluftes under testen.
Crude Protein
Testdesign
Crude fat
Forprøve til bestemmelse af intervaller
Crude Fibre
Når det er nødvendigt, udføres der en forprøve for at bestemme dosisinterval med f.eks. fem testkemikaliekoncentrationer og to replikater for hver behandling og kontrol.
Moisture
Yderligere oplysninger fra test med lignende kemikalier eller fra litteraturen om akut toksicitet for dafnier og/eller andre organismer, der lever i vand, kan også være nyttige for fastlæggelsen af de koncentrationsintervaller, der skal anvendes til forprøven.
Ash
Forprøvens varighed er 21 dage eller tilstrækkelig lang til, at virkninger kan forudsiges pålideligt.
FOOD SPIKING TECHNIQUE EXAMPLES
Ved testens afslutning vurderes dafniernes reproduktion.
General Points
Antallet af forældredyr og forekomsten af afkom bør registreres.
Control diets should be prepared in exactly the same way as the spiked diet, but with an absence of test substance.
Endelig test
To check the concentration of the treated diet, triplicate samples of the dosed food should be extracted with a suitable extraction method and the test substance concentration or radioactivity in the extracts measured.
Normalt bør der være mindst fem testkoncentrationer omkring effektiv koncentration (f.eks. ECX) arrangeret i en geometrisk række med en adskillelsesfaktor, som ikke bør overstige 3,2, og der bør bruges et passende antal replikater for hver testkoncentration (se punkt 24-25).
High analytical recoveries (> 85 %) with low variation between samples (three sample concentrations for the substance taken at test start should not vary more than ± 15 % from the mean) should be demonstrated.
Begrundelse skal anføres, hvis der anvendes færre end fem koncentrationer.
During the dietary test, three diet samples for analysis should be collected on day 0 and at the end of the uptake phase for the determination of the test substance content in the diet.
Kemikalier bør ikke testes i koncentrationer, der overstiger deres opløselighed i testmedium.
Fish food preparation with a liquid test material (neat)
Før et forsøg anbefales det at overveje testmodellens statistiske power og benytte passende statistiske metoder (4).
A target, nominal test concentration in the treated fish food is set, for example 500 μg test substance/g food.
I fastlæggelsen af koncentrationsintervallet bør følgende tages i betragtning:
The appropriate quantity (by molar mass or specific radioactivity) of neat test substance is added to a known mass of fish food in a glass jar or rotary evaporator bulb.
Når ECX for indvirkning på formeringsevnen anslås, er det tilrådeligt at anvende tilstrækkeligt mange koncentrationer til, at ECX kan defineres med passende sikkerhed.
The mass of fish food should be sufficient for the duration of the uptake phase (taking into account the need for increasing quantities at each feed owing to fish growth).