natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Opsaml en prøve af havvand i en grundigt rengjort beholder, og transporter den til laboratoriet, helst inden for 1-2 dage efter opsamlingen.
The samples are placed on ice until centrifugation at 4 °C at 50000 g for 30 min.
Under transporten må prøvens temperatur ikke være nævneværdigt højere end forsøgstemperaturen.
Use a pipette to dispense portions of 20 to 50 μl (note the amount) supernatant into at least two tubes by dipping the tip of the pipette below the fat layer on the surface and carefully sucking up the supernatant without fat- or pellet fractions.
Identificer prøvetagningsstedet nøjagtigt og beskriv det med hensyn til forurenings- og næringsmæssig status.
Place on ice during use
Især for kystvand medtages i denne karakterisering et heterotroft kimtal og bestemmelse af koncentrationerne af opløst nitrat, ammonium og fosfat.
Homogenisation buffer:50 mM Tris-HCl pH 7,4;
prøvetagningsdybde
TRIS-ULTRA PURE (ICN)Protease inhibitor cocktail:
prøvens udseende — uklar osv.
From Sigma (for mammalian tissue) Product number P 8340.
temperatur på opsamlingstidspunktet
Guidance for quantification of head & tail homogenate vitellogenin in zebrafish (Danio rerio) (modified from Holbech et al., 2001). other procedures using homologous antibodies and standards can be used
frist mellem prøvetagning og brug i testen.
Purified zebrafish vitellogenin standard [1] is serially diluted to 0,2, 0,5, 1, 2, 5, 10 and 20 ng/ml in dilution buffer (**) and samples are diluted at least 200 times (to prevent matrix effect) in dilution buffer and applied to the plates.
Hvis det konstateres, at DOC-indholdet i havvandsprøven er højt (punkt 8), anbefales det, at havvandet ældes i ca. en uge før brug.
An assay control is applied in duplicate.
Æld ved opbevaring under aerobe betingelser ved testtemperatur og i mørke eller diffus belysning.
150 μl are applied to each well.
Oprethold om nødvendigt aerobe betingelser ved forsigtig beluftning.
Standards are applied in duplicate and samples in triplicate.
Under ældning reduceres indholdet af let nedbrydeligt organisk materiale.
Incubate over night at 4 °C on a shaker.
I ringtesten (3) blev der ikke påvist forskel mellem ældede og frisk opsamlede havvandsprøvers nedbrydningspotentiale.
The plates are washed 5 times with washing buffer (*)
Inden brug forbehandles havvandet for at fjerne grove partikler, f.eks. ved filtrering gennem et nylonfilter eller groft papirfilter (ikke membran- eller GF-C-filtre) eller ved sedimentering og dekantering.
HRP coupled to a dextran chain (e.g. AMDEX A/S, Denmark) and conjugated antibodies are diluted in washing buffer;
Den anvendte fremgangsmåde skal registreres.
Actual dilution differs by batch and age.
Stamopløsninger til uorganiske næringsstoffer
The plates are washed 5 times with washing buffer (*) and the bottom of the plates is carefully cleaned with ethanol.
Fremstil følgende stamopløsninger ud fra reagenser af analysekvalitet:
150 μl TMB plus (***) are applied to each well.
Kaliumdihydrogenorthophosphat, KH2PO4
Protect the plate against light with tinfoil, and watch the colour development on a shaker.
Dikaliumhydrogenorthophosphat, K2HPO4
When the standard curve is fully developed the enzyme activity is stopped by adding 150 μl 0,2 M H2SO4 to each well.
Dinatriumhydrogenorthophosphatdihydrat, Na2HPO4 · 2H2O
The absorbance is measured at 450 nm (e.g. on a Molecular Devices Thermomax plate reader).
Ammoniumchlorid, NH4Cl
Data are analysed on the associated software (e.g. Softmax).
Opløs i destilleret vand, og fortynd til 1 liter
Washing buffer:
Calciumchlorid, CaCl2
PBS-stock (****)
Magnesiumsulfatheptahydrat, MgSO4 · 7H2O
Adjust pH to 7,3 and fill to 5 l with millipore H2O.
Jern(III)chloridhexahydrat, FeCl3 · 6H2O
Store at 4 °C.
Udfældning i opløsning d) kan forebygges ved at tilsætte en dråbe koncentreret HCl eller 0,4 g ethylendiamintetraeddikesyre (EDTA, dinatriumsalt) pr. liter.
Dilution buffer:
Hvis der dannes bundfald i en stamopløsning, udskiftes den med en frisklavet opløsning.
PBS-Stock (****)
Fremstilling af testmedium
Adjust pH to 7,3 and fill to 1 l with millipore H2O.
Tilsæt 1 ml af hver af de ovennævnte stamopløsninger pr. liter forbehandlet havvand.
TMB plus is a “ready-to-use” substrate produced by KemEnTec (Denmark).
Tilsæt ikke et specifikt inokulum ud over de mikroorganismer, som allerede er til stede i havvandet.
It is sensitive to light.
Bestem (valgfrit) antallet af kolonidannende heterotrofer i havvandstestmediet (og helst også i de oprindelige havvandsprøver), f.eks. ved pladetælling ved hjælp af marin agar.
PBS stock
Dette er specielt ønskeligt for prøver fra kystområder eller forurenede steder.
HPO4 · 2H2O
Kontroller den heterotrofe mikrobielle aktivitet i havvandet ved at foretage en test med referencestoffet.
Adjust pH to 6,8 and fill with millipore H2O to 2 l.
Klargøring af kolber
Store at room temperature.
Sørg for, at alt glasudstyr er pinligt rent, ikke nødvendigvis sterilt (f.eks. ved at bruge alkoholisk saltsyre), skyllet og tørret før brug for at undgå forurening med restprodukter fra tidligere test.
Battelle AP4.6.04 (1,18 mg/ml (AAA)), purified according to:
Kolberne skal også rengøres før første brug.
Guidance for the preparation of tissue sections for sex determination and staging of gonads
Vurder teststoffer i to kolber samtidig sammen med en enkelt kolbe til referencestoffet.
The purpose of this section is to describe the procedures that occur prior to the evaluation of histological sections.
Foretag en dobbelt blindtest uden hverken test- eller referencestof for at bestemme analytiske blindheder.
Other procedures that result in similar sex determination and gonadal staging can be used.
Opløs teststofferne i testmediet — de kan med fordel tilsættes via en koncentreret stamopløsning — for at give de ønskede startkoncentrationer på normalt 5-40 mg DOC/l.
With a few exceptions, these procedures are similar for Japanese medaka (JMD) and zebrafish (ZF).
Test referencestoffet på normal vis ved en startkoncentration svarende til 20 mg DOC/l.
Euthanasia, Necropsy, and Tissue Fixation
Hvis der anvendes stamopløsninger af test- og/eller referencestoffer, skal det sikres, at saltindholdet af havvandsmediet ikke ændres væsentligt.
Objectives:
Hvis der kan forventes toksiske virkninger, eller hvis de ikke kan udelukkes, kan det være tilrådeligt at inkludere et dobbelt inhiberingsforsøg i testdesignet.
Provide for the humane sacrifice of fish.
Tilsæt test- og referencestoffer i den samme beholder, idet referencestoffets koncentration normalt skal være den samme som i kontroltesten (dvs. 20 mg DOC/l) med henblik på sammenligning.
Obtain necessary body weights and measurements.
Fordel passende mængder testopløsninger i Erlenmeyerkolber (op til omkring halvdelen af kolbens volumen er en passende mængde), og dæk hver kolbe løst (med f.eks. aluminiumsfolie), som muliggør gasudveksling mellem kolben og den omgivende luft.
Evaluate secondary sex characteristics.
Anbring beholderne på rysteapparatet og ryst kontinuerligt ved en forsigtig hastighed (f.eks. 100 rpm) under testen.
Fixation of the gonads.
Sørg for, at luften er fri for toksiske materialer.
Fish should be sacrificed immediately prior to necropsy.
Hvis der er mistanke om abiotisk nedbrydning eller tabsmekanismer, såsom hydrolyse (kun et problem med specifik analyse), fordampning eller adsorption, anbefales det at foretage et fysisk-kemisk kontrolforsøg.
Using the small dip net, a fish is removed from the experimental chamber and transported to the necropsy area in the transport container.
Dette kan gøres ved at tilsætte kviksølv(II)chlorid (HgCl2) [10] (50-100 mg/l) til beholdere med teststof for at standse mikrobiel aktivitet.
The fish is placed in the euthanasia solution.
Kolbe 1 og 2 indeholder teststof (testsuspension)
For Japanese medaka the abdomen is opened via a carefully made incision that extends along the ventral midline from the pectoral girdle to a point just cranial to the anus.
Kolbe 3 og 4 indeholder kun havvand (blind)
Using the small forceps and small scissors, the liver is carefully removed.
Kolbe 5 indeholder referencestof (procedurekontrol)
Specimen for VTG analysis are placed in eppendorf tubes and immediately frozen in liquid nitrogen.
Kolbe 6 indeholder test- og referencestof (toksicitetskontrol) — valgfri
The carcass including the gonads is placed into a pre-labelled plastic tissue cassette, which is transferred into Davidson's or Bouin's fixative.
Kolbe 7 indeholder teststof og steriliserende stof (abiotisk steril kontrol) — valgfri
The volume of fixative should be at least 10 times the approximated volume of the tissues.
DOC-analyse
The fixative container is gently agitated for five seconds to dislodge air bubbles from the cassette.
Udtag prøver til DOC-analyse med passende intervaller i løbet af testen (tillæg 1).
All tissues remain in Davidson's fixative overnight, followed by transfer to individual containers of 10 % neutral buffered formalin the next day.
Udtag altid prøver ved testens begyndelse (dag 0) og på dag 60.
Containers with cassettes are gently agitated for 5 seconds to ensure adequate penetration of formalin into cassettes.
Mindst fem prøver i alt er nødvendige for at beskrive nedbrydningens tidsforløb.
Tissues remain in Bouins fixative for 24 h, followed by transfer to 70 % ethanol.
En fast tidsplan for prøvetagningen kan ikke angives, da bionedbrydningshastigheden varierer.
Tissue Processing
Udfør dobbeltbestemmelse af DOC på hver prøve.
Dehydrate tissue for adequate penetration of paraffin.
Den nødvendige mængde prøver afhænger af analysemetoden (specifik analyse), af den anvendte kulstofanalysator og af fremgangsmåden (membranfiltrering eller centrifugering), der er valgt til prøvebehandling før kulstofbestemmelsen (punkt 25 og 26).
Impregnate the tissue with paraffin to maintain tissue integrity and create a firm surface for microtomy.
Før prøveudtagningen sikres det, at testmediet er blandet godt, og at materiale, der eventuelt sidder fast på kolbens sider, er opløst eller opslæmmet.
Labelled tissue cassettes are removed from formalin/ethanol storage and the cassettes are placed in the processing basket(s).
Membranfiltrer eller centrifuger umiddelbart efter prøveudtagningen.
The processing basket is loaded in the tissue processor.
Opbevar om nødvendigt de filtrerede eller centrifugerede prøver ved 2-4 °C i op til 48 timer eller ved under – 18 °C i længere perioder (hvis det er kendt, at stoffet forbliver upåvirket, foretages forsuring til pH 2 før opbevaring).
The processing schedule is selected.
Nogle membranfiltre er behandlet med overfladeaktive stoffer, så de bliver mere hydrofile og kan udlede betydelige mængder opløst kulstof.
Embedding
Klargør disse filtre ved at koge dem i deioniseret vand i tre på hinanden følgende perioder à en time.
Objective:
Efter kogning opbevares filtrene i deioniseret vand.
Properly orient the specimen in solidified paraffin for microtomy.
De første 20 ml af filtratet kasseres.
The basket(s) of cassettes is/are removed from the processor and immersed in the paraffin-filled front chamber of the embedding station thermal console or the cassettes are moved to a separate paraffin heater.
Centrifugering af prøverne kan vælges som alternativ til membranfiltrering.
The first cassette to be embedded is removed from the front chamber of the thermal console or the paraffin heater.
Centrifuger ved 40000 m.s– 2 (~ 4000 g) i 15 minutter, helst i en afkølet centrifuge.
The cassette lid is removed and discarded, and the cassette label is checked against the animal records to resolve potential discrepancies prior to embedding.
Differentiering af det totale organiske kulstofindhold (TOC) i forhold til DOC (TOC/DOC) ved centrifugering ser ikke ud til at fungere ved meget lave koncentrationer, da enten ikke alle bakterier fjernes, eller noget af kulstoffet i bakteriernes cytoplasma genopløses.
An appropriately sized embedding mould is selected.
Ved højere testkoncentrationer (> 10 mg C pr. liter) ser centrifugeringsfejlen ud til at være forholdsvis lille.
The mould is held under the spout of the dispensing console and filled with molten paraffin.
Prøveudtagningsfrekvens
The specimen is removed from the cassette and placed in the molten paraffin in the mould.
Hvis der foretages analyser umiddelbart efter prøveudtagning, vurderes det næste prøveudtagningstidspunkt ved at se på resultatet af den analytiske bestemmelse.
This is repeated with 4-8 specimens for each paraffin mould.
Hvis der opbevares prøver (punkt 24) til analyse på et senere tidspunkt, udtages flere prøver end det krævede minimumsantal på fem.
The position of individual fish is marked by putting fish no 1 in 180 degrees to fish 2-4/8.
Hvis der observeres et plateau på nedbrydningskurven før dag 60, afsluttes testen.
Additional paraffin is added to cover the specimen.
Hvis nedbrydningen tydeligvis er startet senest på dag 60, men ikke har nået et plateau, udvides forsøget i en periode mere.
The mould with the cassette base is placed on the cooling plate of the cryo console.
Registrer analyseresultaterne på det vedføjede resultatskema (tillæg 2) og beregn bionedbrydningsværdierne for både test- og referencestoffer ud fra ligningen:
After the paraffin has solidified, the block (i.e., the hardened paraffin containing the tissues and the cassette base) is removed from the mould.
nedbrydning i procent DOC eller specifik stoffjernelse på tidspunkt t,
Microtomy
startkoncentration af DOC eller specifikt stof i testmediet
Cut and mount histological sections for staining.
koncentration af DOC eller specifikt stof i testmediet på tidspunkt t
The initial phase of microtomy termed “facing” is conducted as follows:
startkoncentration af DOC eller specifikt stof i blindtesten
The paraffin block is placed in the chuck of the microtome.
koncentration af DOC eller specifikt stof i blindtesten på tidspunkt t.
The chuck is advanced by rotating the microtome wheel and thick sections are cut from the paraffin surface of the block until the knife reaches the embedded tissues.
Angiv nedbrydning som procent DOC-fjernelse (fuldstændig nedbrydning) eller specifik stoffjernelse (primær nedbrydning) på tidspunkt t. Beregn DOC-koncentrationer til nærmeste 0,1 mg pr. liter, og rund gennemsnit af Dt-værdier op til nærmeste hele procent.
The section thickness on the microtome is set between 3 - 5 microns.
Illustrer nedbrydningsforløbet grafisk i et diagram som vist i figuren i »Validitet og fortolkning af resultater«.
The chuck is advanced and multiple sections are cut from the block to remove any artefacts created on the cut surface of the tissue during rough trimming.
Hvis der er tilstrækkelige data, beregnes lag-fasen (tL) og tiden til at nå 50 % fjernelse fra afslutningen af lag-fasen (t50) på grundlag af kurven.
The block can be removed from the chuck and placed facedown on ice to soak the tissue.
Testrapporten skal indeholde følgende oplysninger:
The next phase of microtomy is final sectioning and mounting of tissue sections on slides.
fysisk form og, når det er relevant, fysisk-kemiske egenskaber
If the block has been placed on ice, the block is removed from the ice and replaced in the chuck of the microtome.
identifikationsdata.
With the section thickness on the microtome set to 3 - 5 microns, the chuck is advanced by rotating the microtome wheel.
forurenings- og næringsstatus (kimtal, nitrat, ammonium og eventuelt fosfat)
Sections are cut from the block until a “ribbon” containing at least one acceptable section including the gonads has been produced.
prøvens karakteristika (dato for prøvetagning, dybde, udseende, temperatur, saltindhold, DOC (valgfrit), frist mellem opsamling og brug i testen
(As necessary during sectioning, the block may be removed from the chuck, placed on ice to soak the tissue, and replaced in the chuck.)
(eventuelt) anvendt metode til ældning af havvandet
The sections are floated flat on the surface of the water in the water bath.
anvendt metode til forbehandling (filtrering/sedimentering) af havvandet
An attempt is made to obtain at least one section that contains no wrinkles and has no air bubbles trapped beneath it.
angivelse af den anvendte metode til DOC-bestemmelse
A microscope slide is immersed beneath the best section, which is lifted out of the water using the slide.
anvendt metode til specifik analyse (valgfrit)
This process is referred to as “mounting” the section on the slide.
anvendt metode til bestemmelse af antallet af heterotrofer i havvandet (pladetællingsmetode eller alternativ fremgangsmåde) (valgfrit)
Three sections are prepared for a set of fish.
andre anvendte metoder (valgfrit) til at karakterisere havvandet (ATP-målinger osv.).
The second and third sections are taken at 50 micron intervals following the first section.
analysedata registreret på et resultatskema (tillæg 2)
If the fish are not embedded with their gonads in the same sectioning level, more sections are to be made to ensure that at least six sections including the gonads are obtained from each fish.
forløbet af nedbrydningstesten grafisk fremstillet i et diagram, som viser lag-fase (tL), hældning og tid (med start fra afslutningen af lag-fasen) til at nå 50 % fjernelse (t50).
With a slide-marking pen, the block number from which the slide was produced is recorded on the slide.
Lag-fasen kan anslås grafisk som vist i figuren i afsnittet »Validitet og fortolkning af resultater« eller kan med fordel tages som den tid, det kræver at nå 10 % nedbrydning
The slide is placed in a staining rack.
procent nedbrydning målt efter 60 dage eller ved testens afslutning.
The block is removed from the chuck and placed facedown for storage.
De resultater, der opnås med referencestoffer, f.eks. natriumbenzoat, natriumacetat and anilin, bør være sammenlignelige med resultater opnået i ringtesten (3) (se afsnittet »Referencestoffer«, punkt 7).
Permanently seal mounted and stained tissues.
Hvis de resultater, som opnås med referencestoffer, er atypiske, gentages testen med en anden havvandsprøve.
Permanently identify stained sections in a manner that allows complete traceability.
Skønt det måske ikke altid er lige enkelt at fortolke resultaterne af inhiberingstest på grund af teststoffets DOC-bidrag, er en væsentlig reduktion af den samlede DOC-fjernelseshastighed sammenlignet med kontrollen et positivt tegn på toksiske virkninger.
Staining
På grund af de relativt høje testkoncentrationer, der anvendes sammenlignet med de fleste naturlige systemer (og som følge heraf et ugunstigt forhold mellem koncentrationer af teststoffer og andre kulstofkilder), skal metoden betragtes som en foreløbig test, der kan bruges til at vise, om et stof er let bionedbrydeligt eller ej.
Slides are air-dried overnight before staining.
Ikke-parametriske test
Cover slipping
Denne metode er en havvandsvariant af closed bottle-testen (5) og blev afsluttet som resultat af en ringtest afholdt for Europa-Kommissionen af Vandkvalitetsinstituttet (3).
Cover slips can be applied manually or automatically.
I lighed med den tilknyttede marine rystekolbemetode skal resultaterne af denne test ikke opfattes som tegn på let bionedbrydelighed, men skal bruges specifikt til at opnå information om stoffers bionedbrydelighed i havmiljøer.
A slide is dipped in xylene or TissueClear, and the excess xylene/TissueClear is gently knocked off the slide.
En forud fastsat mængde teststof opløses i testmediet i en koncentration på normalt 2-10 mg af teststoffet pr. liter (en eller flere koncentrationer kan bruges).
Approximately 0,1 ml of mounting medium is applied near the end of the slide opposite to the frosted end or on the cover slip.
Opløsningen opbevares i en fyldt lukket kolbe i mørke i et konstant temperaturbad eller -kammer, som holdes på ± 1 °C inden for et interval på 15-20 °C.
The cover slip is tilted at a shallow angle as it is applied to the slide.
I de tilfælde, hvor undersøgelsens formål er at simulere situationer i miljøet, kan testene udføres over dette normale temperaturområde, forudsat at der foretages passende justeringer af temperaturstyringen.
Labelling
Nedbrydningen følges gennem 28 dage ved iltanalyse.
Each slide label should contain the following information.
Ringtesten viste, at hvis testen blev forlænget ud over 28 dage, kunne der i de fleste tilfælde ikke indsamles nyttig information på grund af alvorlige forstyrrelser.
Laboratory name
Blindværdierne for biologisk iltforbrug (BOD) var særdeles høje, formentlig på grund af vægvækst forårsaget af manglende omrøring og nitrifikation.
Specimen No./Slide No.
Den anbefalede varighed er således 28 dage, men hvis blindværdien for BOD forbliver inden for 30 %-grænsen (punkt 15 og 40), kan testen forlænges.
Chemical/Treatment group
Brugen af COD er mindre tilfredsstillende, eftersom nogle af stofferne ikke iltes fuldstændigt i COD-testen.
Statistical Flow Chart for vitellogenin analysis
Stoffets opløselighed bør være mindst 2 mg/l, om end mindre opløselige stoffer og også flygtige stoffer i princippet kunne testes (f.eks. ved hjælp af ultralydbehandling).
Dunnett test
Oplysninger om stoffets toksicitet over for bakterier, f.eks. som målt i kortvarige respirationshastighedstest (4), kan være til nytte ved valg af passende testkoncentrationer og kan være afgørende for en korrekt fortolkning af lave værdier for bionedbrydning.
variances stabilising transform?
Sådanne oplysninger er dog ikke altid tilstrækkelige til at fortolke de resultater, der fås i bionedbrydningstesten, og fremgangsmåden, som er beskrevet i punkt 27, er mere egnet.
Variances unequal Variances equal No Yes
F.eks. kan anilin, natriumacetat eller natriumbenzoat bruges til dette formål.
Yes Step-down trend test on replicate means
Disse stoffer på mindst 60 % (af deres ThOD) skal nedbrydes inden for et rimeligt kort tidsrum, ellers anbefales det, at testen gentages under anvendelse af en anden havvandsprøve.
<=3 reps per conc
I Europa-Kommissionens ringtest, hvor der blev udtaget havvandsprøver forskellige steder og på forskellige tidspunkter på året, var lag-fasen (tL) og tiden til at nå 50 % nedbrydning (t50) eksklusive lag-fasen, henholdsvis 0-2 dage og 1-4 dage for natriumbenzoat.
Normalising transform?
For anilin var tL- og t50-værdierne henholdsvis 0-7 og 2-12 dage.
Nested ANOVA not normal
REPRODUCERBARHED
Nested ANOVA normal Monotone
Metodernes reproducerbarhed blev fastslået i Europa-Kommissionens ringtest (3).
Drop water control
Sædvanligt laboratorieudstyr og:
Dunn test
250-300 ml BOD-kolber med glasprop eller 250 ml kolbe med smal hals og glaslåg kan anvendes
Step-down Jonckheere or Williams' test
flere kolber (2-3-4 l) med litermærker til forberedelse af forsøget og til opfyldning af BOD-kolberne
Rep means not normal or not homogenous
vandbad eller kammer med konstant temperatur til opbevaring af kolberne ved konstant temperatur (± 1 °C) i mørke
Rep means not normally distributed
udstyr til analyse af opløst ilt
Combine controls, retains subgroups
membranfiltre, 0,2-0,45 μm (valgfrit)
Compare controls using Wilcoxon or T-test.
udstyr til specifik analyse (valgfrit).
Do controls differ?
Opsaml en prøve af havvand i en grundigt rengjort beholder, og transporter den til laboratoriet, helst inden for 1-2 dage efter opsamlingen.
Both solvent and non-solvent control are present
Under transporten må prøvens temperatur ikke være nævneværdigt højere end testtemperaturen.
Statistical Flow Chart for sex ratio analysis
Identificer prøvetagningsstedet nøjagtigt, og beskriv det med hensyn til forurenings- og næringsstatus.
Apply step-down Jonckheere-Terpstra test (+) to determine NOEC
Især for kystvand og forurenet farvand medtages i denne karakterisering et heterotroft kimtal og bestemmelse af koncentrationer af opløst nitrat, ammonium og fosfat.
Dunn or Mann-Whitney U-test w/Bonferroni-Holm adjustment to determine NOEC
prøvens udseende — uklarhed osv.
Use Dunnett test if homogenous variances (*), Tamhane-Dunnett (T3) test otherwise, to determine NOEC
opløst organisk kulstof (DOC)
Are data normally distributed?
Såfremt det konstateres, at prøvens DOC-indhold er højt, eller hvis man mener, at blindværdien for BOD efter 28 dage vil være højere end 30 % af referencekemikaliernes, anbefales det, at havvandet ældes i ca. en uge før brug.
Are data consistent with monotone dose-response?