natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Hvis et dosis/respons-forhold blev bestemt ved lineær regressionsanalyse, bør en signifikant r2 (determinationskoefficient) og/eller hældning findes ved regressionsanalyse, inden ECx bestemmes ved at indsætte en værdi, der svarer til x % af kontrolgennemsnittet, i den ligning, der er fundet ved regressionsanalyse.
The worms are inspected under a stereomicroscope and any that do not contain eggs are discarded.
95 % konfidensgrænser beregnes ifølge Fieller (nævnt i Finney (21)) eller andre moderne passende metoder.
Care is taken to remove and discard any mites or springtails that might have infected the cultures.
Alternativt modelleres responsen som en procentdel eller andel af modelparametre, hvilket fortolkes som kontrollernes gennemsnitsrespons.
Healthy worms not used for the test are returned to the stock culture.
I disse tilfælde kan den normale (logistiske, Weibull-) sigmoidkurve ofte let tilpasses til resultaterne ved hjælp af den probabilistiske regressionsmetode (21).
Preparation of test concentrations
I disse tilfælde skal vægtningsfunktionen justeres for metrisk respons, jf. Christensen (36).
Test chemical soluble in water
Hvis der er konstateret hormese, bør den probabilistiske analyse erstattes af en logistisk funktion med fire parametre eller Weibull-funktion tilpasset med den ikke-lineære regressionsmetode (36).
A solution of the test chemical is prepared in deionised water in a quantity sufficient for all replicates of one test concentration.
Hvis et passende dosis/respons-forhold ikke kan tilpasses til dataene, kan der bruges andre metoder til at bestemme ECx, og værdiens konfidensgrænser, f.eks. glidende gennemsnit i henhold til Thompson (22) og Trimmed Spearman-Karber-metoden (23).
It is recommended to use an appropriate quantity of water to reach the required moisture content, i.e. 40 to 60 % of the maximum WHC (see paragraph 13).
Testrapporten skal indeholde følgende oplysninger:
Each solution of test chemical is mixed thoroughly with one batch of pre-moistened soil before being introduced into the test vessel.
fysiske egenskaber og, når det er relevant, relevante fysisk-kemiske egenskaber (f.eks. opløselighed i vand, damptryk)
Test chemical insoluble in water
kemisk identifikation af testkemikaliet ifølge IUPAC-nomenklaturen, CAS-nummer, parti, batch, strukturformel og renhed
For chemicals insoluble in water but soluble in organic solvents, the test chemical can be dissolved in the smallest possible volume of a suitable vehicle (e.g. acetone).
prøvens udløbsdato.
Only volatile solvents should be used.
anvendte testdyr:
The vehicle is sprayed on or mixed with a small amount, for example 2,5 g, of fine quartz sand.
art, videnskabeligt navn, herkomst af organismer og dyrkningsbetingelser.
The vehicle is eliminated by evaporation under a fume hood for at least one hour.
bestanddele og klargøring af den syntetiske jord
This mixture of quartz sand and test chemical is added to the pre-moistened soil and thoroughly mixed after adding an appropriate amount of de-ionised water to obtain the moisture required.
tilsætningsmetode for testkemikaliet
The final mixture is introduced into the test vessels.
beskrivelse af testbetingelserne, herunder temperatur, fugtindhold, pH osv.
For chemicals that are poorly soluble in water and organic solvents, the equivalent of 2,5 g of finely ground quartz sand per test vessel is mixed with the quantity of test chemical to obtain the desired test concentration.
fuldstændig beskrivelse af forsøgsdesign og fremgangsmåder.
This mixture of quartz sand and test chemical is added to the pre-moistened soil and thoroughly mixed after adding an appropriate amount of de-ionised water to obtain the required moisture content.
Testresultater:
The final mixture is divided between the test vessels.
dødelighed for voksne orme efter to uger og antal unger ved afslutningen af testen til bestemmelse af dosisinterval
The procedure is repeated for each test concentration and an appropriate control is also prepared.
dødelighed for voksne orme efter tre ugers eksponering og fuld fortegnelse over afkom ved afslutningen af den endelige test
Chemicals should not normally be tested at concentrations higher than 1000 mg/kg dry mass of soil.
eventuelle observerede fysiske eller patologiske symptomer og adfærdsændringer hos testorganismerne
Testing at higher concentrations may however be required in accordance with the objectives of a specific test.
, NOEC og/eller ECx (f.eks. EC50, EC10) for formering, hvis nogle af værdierne er udtrykt med konfidensintervaller, og en graf for den tilpassede model, der blev benyttet til beregning heraf, samt alle oplysninger og bemærkninger, som kan være til hjælp ved fortolkning af resultaterne.
PERFORMANCE OF THE TESTS
Afvigelser fra de procedurer, der er beskrevet i denne testmetode, og eventuelle usædvanlige hændelser under testen.
Test groups and controls
Kapitel C.8 i dette bilag, Toksicitet for regnorme.
For each test concentration, an amount of test soil corresponding to 20 g dry weight is placed into the test vessel (see paragraphs 19-21).
Del 2:
Controls, without the test chemical, are also prepared.
I forbindelse med denne testmetode anvendes følgende definitioner:
Food is added to each vessel in accordance with procedures described in paragraph 29.
I denne test udtrykkes effektkoncentrationerne som en masse af testkemikalie pr. tørmasse testjord.
Ten worms are randomly allocated to each test vessel.
(ikke-dødelig koncentration) er den koncentration af et testkemikalie, der ikke dræber nogen af de eksponerede testorganismer inden for et givet tidsrum.
The worms are carefully transferred into each test vessel and placed on the surface of the soil using, for example, jeweller's tweezers, hooks or loops.
I denne test udtrykkes LC0 som en masse af testkemikalie pr. tørmasse testjord.
The number of replicates for test concentrations and for controls depends on the test design used (see paragraph 34).
(dødelig koncentration 50 %) er den koncentration af et testkemikalie, der dræber 50 % af de eksponerede testorganismer inden for et givet tidsrum.
The test vessels are positioned randomly in the test incubator and these positions are re-randomised weekly.
I denne test udtrykkes LC50 som en masse af testkemikalie pr. tørmasse testjord.
If a vehicle is used for application of the test chemical, one control series containing quartz sand sprayed or mixed with solvent should be run in addition to the test series.
(dødelig koncentration 100 %) er den koncentration af et testkemikalie, der dræber 100 % af de eksponerede testorganismer inden for et givet tidsrum.
The solvent or dispersant concentration should be the same as that used in the test vessels containing the test chemical.
I denne test udtrykkes LC100 som en masse af testkemikalie pr. tørmasse testjord.
A control series containing additional quartz sand (2,5 g per vessel) should be run for chemicals requiring administration in accordance with the procedures described in paragraph 21.
LOEC (laveste koncentration med observeret effekt, Lowest Observed Effect Concentration) er den laveste testkemikaliekoncentration, som ved sammenligning med kontrollen har en statistisk signifikant effekt (p < 0,05).
The test temperature is 20 ± 2 °C.
I denne test udtrykkes LOEC som en masse testkemikalie pr. tørmasse testjord.
To discourage worms from escaping from the soil, the test is carried out under controlled light-dark cycles (preferably 16 hours light and 8 hours dark) with illumination of 400 to 800 lux in the area of the test vessels.
Alle testkoncentrationer over LOEC bør normalt udvise en effekt, der er statistisk forskellig fra kontrollen.
In order to check the soil humidity, the vessels are weighed at the beginning of the test and thereafter once a week.
Eventuelle afvigelser fra ovenstående i forbindelse med identifikation af LOEC skal begrundes i testrapporten.
Weight loss is replenished by the addition of an appropriate amount of deionised water.
NOEC (nuleffektkoncentration, No Observed Effect Concentration) er den højeste testkemikaliekoncentration umiddelbart under LOEC, hvor der ikke observeres nogen virkning.
It should be noted that loss of water can be reduced by maintaining a high air-humidity (> 80 %) in the test incubator.
Reproduktionsrate er det gennemsnitlige antal unger, der er produceret pr. antal voksne individer i løbet af testperioden.
The moisture content and the pH, should be measured at the beginning and the end of both the range-finding test and the definitive test.
Bestemmelse af den maksimale vandholdende evne
Measurements should be made in control and treated (all concentrations) soil samples prepared and maintained in the same way as the test cultures but not containing worms.
Bestemmelse af den syntetiske jords vandholdende evne
Food should only be added to these soil samples at the start of the test to facilitate microbial activity.
Følgende metode har vist sig at være hensigtsmæssig.
The amount of food added should be the same as that added to the test cultures.
Den er beskrevet i bilag C til ISO DIS 11268-2.
It is not necessary to add further food to these vessels during the test.
Der opsamles en bestemt mængde (f.eks. 5 g) testjordsubstrat ved hjælp af en egnet anordning (sneglebor el.lign.).
Feeding
Bunden af røret dækkes med et stykke filterpapir, og røret placeres herefter — efter påfyldning af vand — på et stativ i et vandbad.
A food capable of maintaining the enchytraeid population can be used.
Røret sænkes gradvist, indtil vandstanden står over jordhøjde.
Rolled oats, preferably autoclaved before use to avoid microbial contamination (heating is also appropriate), have been found to be a suitable feeding material.
Det står herefter i vandet i omkring tre timer.
Food is first provided by mixing 50 mg of ground rolled oats with the soil in each vessel before introducing the worms.
Da ikke alt vand, som absorberes af jordens kapillærer, kan bindes, drænes jordprøven i to timer ved at anbringe røret på et leje af meget vådt fintformalet kvartssand i en lukket beholder (for at forhindre udtørring).
Thereafter, food is supplied weekly up to Day 21.
Prøven vejes herefter tørret til en konstant masse ved 105 °C.
Feeding is not carried out on Day 28 since the adults have been removed at this stage and the juvenile worms need relatively little additional food beyond this point.
Den vandholdende evne (WHC) kan derefter beregnes som følger:
Feeding during the test comprises 25 mg of ground rolled oats per vessel placed carefully on the surface of the soil so as to avoid injuring the worms.
WHCi % af tørmasse
In order to reduce fungal growth, the oats flakes should be buried in the soil by covering with small amounts of soil.
Hvor:
If food remains uneaten the ration should be reduced.
S vandmættet substrat + rørmasse + filtrerpapirmasse
Design for the range-finding test
T tara (rørmasse + filtrerpapirmasse)
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example, five test chemical concentrations of 0,1, 1,0, 10, 100, and 1000 mg/kg (dry weight of soil).
D tørmasse af substrat
One replicate for each treatment and control is sufficient.
KILDER:
The duration of the range-finding test is two weeks.
Bestemmelse af jordens pH
At the end of the test, mortality of the worms is assessed.
Følgende metode til bestemmelse af en jordprøves pH er baseret på beskrivelsen i ISO 10390 (Soil Quality — Determination of pH).
A worm is recorded as dead if it has no reaction to a mechanical stimulus at the anterior end.
En bestemt mængde jord tørres ved stuetemperatur i mindst 12 timer.
Additional information to mortality may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the definitive test.
En suspension af jorden (indeholdende mindst 5 gram jord) fremstilles herefter i fem gange sin mængde af enten 1 M kaliumchlorid (KCl) i analysekvalitet eller en 0,01 M opløsning af calciumchlorid (CaCl2) i analysekvalitet.
Changes in adult behaviour (e.g. the inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and morphology (e.g. the presence of open wounds) should therefore also be recorded along with the presence of any juveniles.
Suspensionen omrystes derefter grundigt i fem minutter.
The latter can be determined using the staining method described in Appendix 6.
Efter omrystning henstår suspensionen i mindst to timer, men ikke over 24 timer.
The LC50 can be approximately determined by calculating the geometrical mean of mortality data.
Væskefasens pH måles herefter ved hjælp af et pH-meter, der er kalibreret før hver måling i en passende serie bufferopløsninger (f.eks. pH 4,0 og 7,0).
In setting the concentration range for the definitive test, effects on the reproduction are assumed to be lower than the LC50 by a factor of up to 10.
Dyrkningsbetingelser for Enchytraeus Sp.
However, this is an empirical relation ship and in any specific case it might be different.
Enchytraeider af arten Enchytraeus albidus (og andre Enchytraeus-arter) kan dyrkes i store plastkasser (f.eks. 30 × 60 × 10 cm) fyldt med en 1:1 blanding af syntetisk jord og naturlig, uforurenet havejord.
Additional observations made in the range-finding test such as the occurrence of juveniles can help refine the test chemical concentration range to be used for the definitive test.
Kompostmateriale skal undgås, da det kan indeholde toksiske kemikalier, f.eks. tungmetaller.
In order for an accurate determination of the LC50 performing the test using at least four replicates each of the test chemical concentration and an adequate number of concentrations to cause at least four statistically significantly different mean responses at these concentrations) is recommended.
Fauna fjernes fra jorden inden brug (f.eks. ved dybfrysning).
A similar number of the concentrations and replicates for the controls are used when they are applicable.
Et substrat, som udelukkende består af syntetisk jord, kan også bruges, men reproduktionen kan være lavere end den, der opnås med blandet jordsubstrat.
Design for the definitive reproduction test
Det substrat, der bruges til dyrkning, skal have en pH på 6,0 ± 0,5.
Three designs are proposed based on recommendations arising from a ring test (2)
Kulturen opbevares i mørke ved en temperatur på 15-20 °C ± 2 °C.
For determination of the NOEC, at least five concentrations in a geometric series should be tested.
Temperaturer på over 23 °C skal undgås.
Four replicates for each test concentration plus eight controls are recommended.
Jorden bør være fugtig, men ikke våd.
The concentrations should be spaced by a factor not exceeding 1,8.
Det korrekte fugtindhold i jorden er opnået, når små vanddråber viser sig mellem fingrene, når jorden presses forsigtigt sammen.
For determination of the ECx (e.g. EC10, EC50), at least five concentrations should be tested and the concentrations should bracket ECx in order to enable ECx interpolation and not extrapolation At least four replicates for each test concentration and four control replicates are recommended.
Iltfattige betingelser skal undgås, ved at sikre at låg på dyrkningsbeholdere tillader passende gasudveksling med atmosfæren.
The spacing factor may vary, i.e. less than or equal to 1,8 in the expected effect range and above 1,8 at the higher and lower concentrations.
Jorden skal brydes omhyggeligt hver uge for at fremme beluftning.
A combined approach allows for determination of both the NOEC and ECx.
Ormene kan fodres med valsede havregryn.
Eight treatment concentrations in a geometric series should be used.
Havregrynene opbevares i lukkede beholdere og autoklaveres eller opvarmes inden brug for at undgå infektion med melmider (f.eks. Glyzyphagus sp., Astigmata, Acarina) eller rovmider (f.eks. Hypoaspis (Cosmolaelaps) miles, Gamasida, Acarina).
Four replicates for each treatment plus eight controls are recommended.
Efter varmebehandling formales foderet, så det nemt kan strøs ud på jordoverfladen.
Ten adult worms per test vessel should be used (see paragraph 23).
Fra tid til anden kan de valsede havregryn suppleres med vitaminer, mælk og torskelevertran.
Food is added to the test vessels at the beginning of the test and then once a week (see paragraph 29) up to and including Day 21.
Andre egnede foderkilder er bagegær og fiskefoderet »TetraMin«.
On Day 21 the soil samples are carefully hand searched and living adult worms are observed and counted and changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and in morphology (e.g. open wounds) are recorded.
Fodring finder sted ca. to gange om ugen.
All adult worms are then removed from the test vessels and the test soil.
En passende mængde valsede havregryn strøs ud på jordoverfladen eller iblandes omhyggeligt i substratet, når jorden brydes for at fremme beluftning.
The test soil containing any cocoons that had been produced are incubated for three additional weeks under the same test conditions except that feeding takes place only on Day 35 (i.e. 25 mg ground rolled oats per vessel).
Den absolutte mængde uddelt foder afhænger af antallet af orme i substratet.
After six weeks, the newly hatched worms are counted.
Som hovedregel øges mængden af foder, hvis alt foderet er spist inden for en dag efter fodring.
The method based on Bengal red staining (see Appendix 6) is recommended although other wet (but not heat) extraction and floatation techniques (see Appendix 6) have also proved suitable (4)(10)(11)(20).
Omvendt reduceres mængden af foder, hvis der stadig er foder på overfladen på tidspunktet for den anden fodring (en uge senere).
Bengal red staining is recommended because wet extraction from a soil substrate can be hampered by turbidity caused by suspended clay particles.
Foder med svampevækst fjernes og erstattes.
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using 1000 mg/kg in order to demonstrate that the NOEC for reproduction is greater than this value.
Efter tre måneder flyttes ormene til et frisk fremstillet substrat.
Summary and timetable for the test
Dyrkningsbetingelserne anses for tilfredsstillende, hvis ormene:
The steps of the test can be summarised as follows:
ikke forsøger at forlade jordsubstratet, b) bevæger sig hurtigt gennem jorden, c) har en blank overflade uden fastsiddende jordpartikler, d) er mere eller mindre hvide, e) forekommer i forskellige aldre i kulturerne og f) formerer sig løbende.
Time
Gennemførelse af test med andre Enchytraeus-arter
Day –7 or earlier
Valg af fiskeart
Prepare artificial soil (mixing of dry constituents)
Der kan bruges andre arter end E. albidus, men testmetoden og validitetskriterierne skal tilpasses i overensstemmelse hermed.
Day –5
Eftersom mange Enchytraeus-arter er umiddelbart tilgængelige og let kan holdes i laboratoriet, er det vigtigste kriterium for at vælge andre arter end E. albidus økologisk relevans og desuden sammenlignelig følsomhed.
Check pH of artificial soil
Eksempler på egnede alternative arter
Measure max WHC of soil
I de senere år er denne art ofte blevet anvendt i økotoksikologiske undersøgelser på grund af ukompliceret formering og testning.
Day –5 to –3
Den er dog lille, og det gør den vanskeligere at håndtere end E. albidus (især på trin forud for brug af farvningsfremgangsmåden).
Sort worms for acclimatisation
Det er ikke med sikkerhed dokumenteret, at E. crypticus findes i det fri, og den er kun blevet beskrevet fra dyrkede regnormebestande.
Day — 3 to 0
Dens økologiske behov kendes derfor ikke.
Acclimatise worms for at least 24 hours
Navnet dækker sandsynligvis over en gruppe nært beslægtede arter, som det er morfologisk vanskeligt at skelne imellem.
Day –1
Det frarådes at bruge denne art til testning, før de individer, der bruges i en test, kan identificeres som arter.
Pre-moisten artificial soil and distribute into batches
E. buchholzi findes sædvanligvis i enge og forstyrrede områder, f.eks. vejkanter.
Day 0
Denne art var oprindeligt kendt som E. »minutus«, men er for nylig blevet beskrevet (1).
Prepare stock solutions
Den blev først fundet af U. Graefe (Hamburg) i en eng tæt på St. Peter-Ording (Schleswig-Holstein, Tyskland).
Apply test chemical
E. luxuriosus er ca. halvt så stor som E. albidus, men større end de andre arter, der er beskrevet her;
Weigh test substrate into test vessels
den kan derfor være et godt alternativ til E. albidus.
Mix in food
Der har indtil nu været beretninger om denne art i mineraljord i Tyskland og Spanien, hvor den er almindelig, men normalt ikke særligt hyppigt forekommende.
Introduce worms
Sammenlignet med andre små arter af denne slægt er den forholdsvis let at identificere.
Measure soil pH and moisture content
Man ved intet om dens adfærd i laboratorietest eller dens følsomhed over for kemikalier.
Day 7
Den har dog vist sig at være let at dyrke (E. Belotti, personlig samtale).
Check soil moisture content
Dyrkningsbetingelser
Feed
Alle førnævnte Enchytraeus-arter kan dyrkes i samme substrater som E. albidus.
Day 14
Deres mindre størrelse betyder, at dyrkningsbeholderne kan være mindre, og at der kan bruges samme foder, men at rationsstørrelsen skal justeres.
Determine adult mortality
Disse arters livscyklus er kortere end E. albidus' livscyklus, og de skal fodres oftere.
Estimate number of juveniles
Testbetingelserne er generelt de samme som dem, der gælder for E. albidus, bortset fra at:
Day 21
testbeholderne kan (men skal ikke nødvendigvis) være mindre
Observe adult behaviour
varigheden af formeringstesten kan (men skal ikke nødvendigvis) være kortere, dvs. fire i stedet for seks uger;
Remove adults
varigheden af den indledende test bør dog ikke ændres
Day 28
brug af farvningsfremgangsmåden i lyset af ungernes begrænsede størrelse på det kraftigste anbefales til tælling
No feeding
Detaljeret beskrivelse af ekstraktionsteknikker
Count juvenile worms
Bengal Rose-farvning
Treatment of results
Denne metode, der oprindeligt blev udviklet inden for limnisk økologi (1), blev først foreslået til tælling af unger af enchytraeider i Enchytraeidae-formeringstesten af W. de Coen (Universiteit Gent, Belgien).
Although an overview is given in Appendix 7, no definitive statistical guidance for analysing test results is given in this test method.
En ændret version (Bengal Rose blandet med formaldehyd i stedet for ethanol) blev udviklet uafhængigt af RIVM Bilthoven (2)(3).
In the range finding test, the main endpoint is mortality.
Ved afslutningen af den endelige test (dvs. efter seks uger) overføres jorden i testbeholderne til en lav beholder.
Changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and morphology (e.g. open wounds) of the adult worms should however also be recorded along with the presence of any juveniles.
En Bellaplast-beholder eller et fremkalderkar med ribbet bund er velegnet til dette formål, sidstnævnte fordi »ribberne« begrænser ormenes bevægelse i observationsområdet.
Probit analysis (21) or logistic regression should normally be applied to determine the LC50.
Ungerne fikseres med ethanol (ca. 5 ml pr. replikat).
However, in cases where this method of analysis is unsuitable (e.g., if less then three concentrations with partial kills are available), alternative methods can be used.
Beholderne fyldes derefter med vand til et lag på 1-2 cm.
These methods could include moving averages (22), the trimmed Spearman-Karber method (23) or simple interpolation (e.g., geometrical mean of LC0 and LC100, as computed by the square root of LC0 multiplied by LC100).
Et par dråber (200 til 300 μl) Bengal Rose (1 % opløsning i ethanol) tilsættes (0,5 % eosin er et alternativ), og de to komponenter blandes grundigt.
In the definitive test, test endpoint is fecundity (i.e. number of juveniles produced).
Efter 12 timer får ormene en rødlig farve og bør være nemme at tælle, fordi de ligger på substratets overflade.
However, as in the range-finding test, all other harmful signs should be recorded in the final report.
Alternativt kan substratet/alkoholblandingen skylles gennem en sigte (maskestørrelse: 0,250 mm), inden ormene tælles.
The statistical analysis requires the arithmetic mean and the standard deviation per treatment and per control for reproduction to be calculated.