natgillin/translations-raw huggingface dataset:
kumulativ dødelighed
Therefore, for spiked water, the concentrations typically measured at the beginning of the exposure in the overlying water of the vessels for both generations and those of the crystallising dishes are averaged for each treatment.
antal sunde fisk ved afslutning af testen
For spiked sediment, the concentrations typically measured at the beginning of the exposure in the vessels for both generations (and optionally those of the crystallising dishes) are averaged for each treatment.
begyndelses- og sluttidspunkt for klækning
To compute a point estimate, i.e. an ECx, the per-vessel and per-breeding cage statistics may be used as true replicates.
længde og vægt af overlevende dyr
In calculating a confidence interval for any ECx the variability among vessels should be taken into account, or it should be shown that this variability is so small that it can be ignored.
antal deforme larver
When the model is fitted by Least Squares, a transformation should be applied to the per-vessel statistics in order to improve the homogeneity of variance.
antal fisk, der opfører sig abnormt.
However, ECx values should be calculated after the response is transformed back to the original value (31).
Prøveudtagning af fisk
When the statistical analysis aims at determining the NOEC by hypothesis testing, the variability among vessels needs to be taken into account, which is guaranteed by using ANOVA methods (e.g. Williams' and Dunnett's test procedures).
Prøver af fisk udtages ved testens afslutning.
Williams' test would be appropriate when a monotonic dose-response is expected in theory and Dunnett's test would be appropriate where the monotonicity hypothesis does not hold.
Fiskeprøver aflives med f.eks. MS-222 (100-500 mg pr. l med en buffer af 200 mg NaHCO3 pr. l) eller FA-100 (4-allyl-2-methoxyphenol: eugenol) og individuelt målt og vejet som vådvægt (duppet tør) eller bedøvet, hvis der skal tages en blodprøve (se punkt 49).
Alternatively, more robust tests (27) can be appropriate in situations where there are violations of the usual ANOVA assumptions (31).
Prøveudtagning til VTG-analyse og kønsbestemmelse gennem histologisk vurdering
Emergence ratio
Der udtages prøver af alle fisk, som klargøres med henblik på analyse af køn og VTG.
Emergence ratios are quantal data, and can be analysed by the Cochran-Armitage test applied in a step-down manner where a monotonic dose-response is expected and these data are consistent with this expectation.
Der foretages en histologisk analyse af alle fisk for at bestemme køn.
If not, a Fisher's exact or Mantel-Haentzal test with Bonferroni-Holm adjusted p-values can be used.
Til VTG-målinger accepteres delprøver på mindst 16 fisk fra hvert replikat.
If there is evidence of greater variability between replicates within the same concentration than a binomial distribution would indicate (often referenced to as “extra-binomial” variation), then a robust Cochran-Armitage or Fisher exact test such as proposed in (27), should be used.
Der analyseres flere fisk med henblik på VTG, hvis resultaterne af delprøverne viser sig at være uklare.
The sum of live midges (males plus females) emerged per vessel, ne, is determined and divided by the number of larvae introduced, na:
Prøveudtagningsproceduren for VTG og kønsbestemmelse afhænger af VTG-analysemetoden:
ER emergence ratio
Hoved-hale-homogenatmetode til VTG-analyse
number of live midges emerged per vessel
Fisken aflives.
number of larvae introduced per vessel (normally 20)
Hoved og hale af hver fisk skilles fra fiskens krop ved hjælp af en skalpel med snit lagt lige bag brystfinnerne og lige bag rygfinnen (se figur 1).
When ne is larger than na (i.e. when unintentionally more than the foreseen number of larvae where introduced) na should be made equal to ne.
Hoved- og haledelen fra hver fisk samles, vejes og nummereres individuelt, fryses i flydende kvælstof og opbevares ved – 70 °C eller derunder med henblik på VTG-analyse.
An alternative approach that is most appropriate for large sample sizes, when there is extra binomial variance, is to treat the emergence ratio as a continuous response and use procedures consistent with these ER data.
Fiskens kropsdel nummereres og fikseres i et egnet fikseringsmiddel med henblik på histologisk vurdering (22).
A large sample size is defined here as the number emerged and the number not emerging both exceeding five, on a per replicate (vessel) basis.
Ved hjælp af denne metode vurderes VTG og histopatologi for hvert individ, og en mulig ændring i VTG-niveau kan således knyttes til fiskens fænotypiske køn eller fiskens genetiske køn (japansk risfisk og trepigget hundestejle).
To apply ANOVA methods, values of ER should first be transformed by the arcsin-sqrt transformation or Tukey-Freeman transformation to obtain an approximate normal distribution and to equalise variances.
Yderligere oplysninger kan ses i vejledning til homogenisering (tillæg 5) og vejledning til kvantitativ bestemmelse af VTG (tillæg 6).
The Cochran-Armitage, Fisher's exact (Bonferroni), or Mantel-Haentzal tests can be applied when using the absolute frequencies.
Lever-homogenatmetode til VTG-analyse
The arcsin-sqrt transformation is applied by taking the inverse sine (sine– 1) of the square root of ER.
Leveren skæres ud og opbevares ved – 70 °C eller derunder.
For emergence ratios, ECx-values are calculated using regression analysis (e.g. probit, logit or Weibull models (28)).
Anbefalede procedurer for udskæring af lever og forbehandling kan ses i OECD TG 229 (37) eller kapitel C.37 i dette bilag (38).
If regression analysis fails (e.g. when there are less than two partial responses), other non-parametric methods such as moving average or simple interpolation can be used.
Leverne homogeniseres herefter hver for sig som beskrevet i OECD TG 229 eller kapitel C.37 i dette bilag.
Development rate
Den udtagne supernatant bruges til at måle VTG med en homolog ELISA-teknik (se et eksempel på kvantitativ bestemmelse for zebrafisk i bilag 6 eller OECD TG 229 (37) for japansk risfisk).
Mean development time represents the mean time span between the introduction of larvae (day 0 of the test) and the emergence of the experimental cohort of midges (for calculation of the true development time, the age of larvae at the time of introduction should be considered).
Ifølge denne metode er det også muligt at få individuelle fiskedata om både VTG og kønskirtelhistologi.
The development rate (unit: 1/day) is the reciprocal of the development time and represents that portion of larval development which takes place per day.
Blodplasmametode til VTG-analyse
Development rate is preferred for the evaluation of these sediment toxicity studies as its variance is lower, and it is more homogeneous and closer to a normal distribution compared to the development time.
Blod udtages fra den bedøvede fisk ved hjertepunktur, snit i halevene eller hale og centrifugeres ved 4 °C med henblik på udtagning af plasma.
Hence, more powerful parametric test procedures may be used with development rate unlike development time.
Plasmaet opbevares ved – 70 °C eller herunder indtil brug.
For development rate as a continuous response, ECx-values can be estimated by regression analysis (e.g. (29) (30)).
Fisken aflives og fikseres til histologisk undersøgelse.
A NOEC for the mean development rate can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Både plasmaprøver og fisk nummereres individuelt for at sammenholde VTG-niveauer med fiskens køn.
Since males emerge earlier than females, i.e. have a higher development rate, it makes sense to calculate the development rate for each gender separately in addition to that for the total midges.
Sådan udskæres en fisk med henblik på måling af VTG i hoved-/halehomogenat og histologisk vurdering af midterpartiet.
For statistical testing, the number of midges observed on inspection day x are assumed to be emerged at the mean of the time interval between day x and day x – l (l = length of the inspection interval, usually 1 day).
Genetisk kønsbestemmelse
The mean development rate per vessel ( x
En biologisk prøve til bestemmelse af det genetiske køn udtages fra hver enkelt fisk hos arter, der har de relevante markører.
) is calculated according to:
For japansk risfisk udtages gatfinne eller rygfinne.
mean development rate per vessel
Tillæg 9 indeholder en detaljeret beskrivelse, bl.a. udtagning af vævsprøver og kønsbestemmelse ved en PCR-metode.
i index of inspection interval
For den trepiggede hundestejle findes der ligeledes en beskrivelse af udtagning af vævsprøver og en kønsbestemmelsesmetode ved hjælp af PCR i tillæg 10.
m maximum number of inspection intervals
VTG-måling
number of midges emerged in the inspection interval i
Målingen af VTG baseres på en kvantitativ analytisk valideret metode.
total number of midges emerged at the end of experiment (= Σfi)
Der skal foreligge oplysninger om variabiliteten inden for testen og mellem test i den metode, som et givet laboratorium benytter.
development rate of the midges emerged in interval i
Kilden til variabilitet i og mellem laboratorier er (højst sandsynligt) baseret på fiskepopulationens forskellige udviklingsstadier.
day i
I betragtning af variabiliteten i VTG-målingen bør NOEC baseret på dette endepunkt alene behandles med stor forsigtighed.
inspection day (days since introduction of the larvae)
Der findes forskellige metoder til at vurdere VTG-produktion hos de fiskearter, som behandles i dette assay.
length of inspection interval i (days, usually 1 day)
En måleteknik, som både er relativt følsom og specifik, er bestemmelsen af proteinkoncentrationer via enzymbundet immunosorbent assay (ELISA).
Sex ratio
Homologe antistoffer (fremstillet mod VTG i samme art) og de fleste vigtige homologe standarder bør anvendes.
Sex ratios are quantal data and should therefore be evaluated by means of a Fisher's exact test or other appropriate methods.
Kønsbestemmelse
The natural sex ratio of C. riparius is one, i.e. males and females are equally abundant.
Afhængigt af VTG-prøveudtagningsproceduren anbringes hele fisken eller det resterende midterparti af hver fisk i en på forhånd mærket behandlingskassette og fikseres i et egnet fikseringsmiddel med henblik på histologisk bestemmelse af køn (også valgfrit for vurdering af stadieinddeling af kønskirtler).
For both generations the sex ratio data should be treated identically.
Vejledning om fiksering og indlejring kan fås i tillæg 7 og i OECD Guidance Document on the Diagnosis of Endocrine-Related Histopathology of Fish Gonads (22).
Since the maximum number of midges per vessel (i.e. 20) is too low for a meaningful statistical analysis, the total number of fully emerged and alive midges for each gender is summed over all vessels of one treatment.
Efter behandling indlejres fisken i paraffinblokke.
These untransformed data are tested against the (solvent) control or pooled control data in a 2 × 2 contingency table.
Individerne anbringes på langs i hver paraffinblok.
Reproduction, as fecundity, is calculated as the number of egg ropes per female.
Der udtages mindst seks længdesnit (3-5 μm i tykkelse) i et frontalplan, der indeholder kønskirtelvæv fra begge kønskirtler fra hvert individ.
More specific, the total number of egg ropes produced in a breeding cage is divided by the total number of alive and undamaged females added to that cage.
Intervallet mellem disse snit skal være ca. 50 μm for hanner og 250 μm for hunner.
A NOEC for fecundity can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Eftersom hver blok ofte vil indeholde hanner og hunner (hvis der er indlejret mere end et individ i hver blok), skal intervallet mellem snit fra disse blokke være ca. 50 μm, indtil der er opnået mindst seks snit af kønskirtlerne fra hver han.
Fertility of the egg ropes is used to quantify the number of fertile egg ropes per female.
Derefter kan intervallet mellem snit øges til ca. 250 μm for hunnerne.
The total number of fertile egg ropes produced in a breeding cage is divided by the total number of alive and undamaged females added to that cage.
Snittene farves med hematoxylin and eosin og undersøges ved lysmikroskopi med fokus på køn (han, hun, interkønnet eller udifferentieret).
A NOEC for fertility can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Interkønnet defineres som tilstedeværelse af mere end en oocyt i testes pr. seks analyserede snit eller spermatogene celler (ja/nej) i ovarierne.
The test report should provide the following information:
Histopatologisk undersøgelse og stadieinddeling af ovarier er valgfri, men hvis den foretages, analyseres resultaterne statistisk og registreres.
physical nature and physical-chemical properties (water solubility, vapour pressure, log Kow, partition coefficient in soil (or in sediment if available), stability in water and sediment etc.);
Det skal bemærkes, at nogle fiskearter naturligt mangler et fuldt udviklet par kønskirtler, og at der måske kun er en kønskirtel til stede (f.eks. japansk risfisk og undertiden zebrafisk).
chemical identification data (common name, chemical name, structural formula, CAS number, etc.) including purity and analytical method for the quantification of the test chemical.
Alle disse observationer registreres.
test organisms used:
Genetisk kønsbestemmelse hos individuelle japanske risfisk er baseret på tilstedeværelse eller fravær af risfiskens hankønsbestemmende gen, DMY, der sidder på Y-kromosomet.
information on how the egg masses and larvae were handled;
Risfiskens genotypiske køn kan identificeres ved at sekventere DMY-genet fra DNA ekstraheret fra f.eks. et stykke gatfinne eller rygfinne.
information on handling of the emerged adults of the 1st generation with the help of an exhauster etc (see Appendix 5)
Tilstedeværelsen af DMY viser et XY-(han)individ uanset fænotype, mens fraværet af DMY viser et XX-(hun)individ) uanset fænotype (23).
age of the test organisms at the time of insertion into the test vessels of the 1st and 2nd generation.
Vejledning i fremstilling af vævspræparater og PCR-metoden er anført i bilag 9.
sediment used, i.e. natural or formulated (artificial) sediment;
Forekomsten af interkøn (se definition i tillæg 1) registreres.
location and description of sediment sampling site, including, if possible, contamination history;
Sekundære kønskarakteristika
sediment characteristics:
Sekundære kønskarakteristika er hormonstyret hos arter som japansk risfisk.
pH, organic carbon content, C/N ratio and granulometry (if appropriate).
Derfor foretages observationer af fiskens fysiske udseende, hvis det er muligt, ved eksponeringens afslutning.
formulated sediment:
Hos japansk risfisk er papillardannelsen på den bageste del af gatfinnen, hos hunner androgenfølsom.
preparation, ingredients and characteristics (organic carbon content, pH, moisture, etc. measured at the start of the test);
Det er vigtigt, at endepunktet bestemmes af den stærkest mulige, valide statistiske test.
depth of sediment and overlaying water for the test vessels and crystallising dishes;
Replikatet er forsøgsenheden, men variabiliteten mellem replikater bør medtages i den statistiske test.
volume of overlying and pore water;
Der findes et beslutningsflowdiagram i tillæg 8, som kan hjælpe med at afgøre, hvilken statistisk test som det vil være mest hensigtsmæssigt at bruge baseret på kendetegnene ved de data, der opnås fra testen.
weight of wet sediment with and without pore water for the test vessels and the crystallising dishes;
Det statistiske signifikansniveau er 0,05 for alle omfattede endepunkter.
test vessels (material and size);
Kønsandele og genetisk køn
crystallising dishes (material and size);
Kønsandelene analyseres for en signifikant effekt (NOEC/LOEC-metoden) af eksponering efter Jonckheere-Terpstra (trend test), hvis der er tale om en monoton dosisrespons.
breeding cages (material and size)
Hvis der ikke påvises monotoni, anvendes en parvis test:
method of preparation of stock solutions and test concentrations for the test vessels and crystallising dishes;
Brug Tamhane-Dunnett, hvis der forekommer heterogen varians.
test concentrations, number of replicates and solvents if needed;
Ellers brug en eksakt Mann-Whitney-test med Bonferroni-Holm-justering.
incubation conditions for the test vessels:
Et flowdiagram med beskrivelse af statistikker for kønsandele er anført i tillæg 8.
temperature, light cycle and intensity, aeration (bubbles per second);
Kønsandelene præsenteres i tabeller som koncentrationsandele ± standardafvigelser for hanner, hunner, interkønnede og udifferentierede.
incubation conditions for the breeding cages and the crystallising dishes:
Eksempler kan ses i FSDT Phase 2 validation report (42).
incubation conditions for the egg ropes in the micro plates (or other vessels):
Genetisk køn registreres som en procentdel af fænotypisk kønsveksling for hanner, hunner, interkønnede og udifferentierede.
temperature, light cycle and intensity:
VTG-koncentrationer
detailed information on feeding including type of food, preparation, amount and feeding regime.
VTG-koncentrationer analyseres for signifikant effekt (NOEC-/LOEC-metode) af eksponeringen.
nominal test concentrations, measured test concentrations and the results of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels and crystallising dishes;
Dunnett-testen foretrækkes frem for t-testen med Bonferroni-korrektion.
water quality within the test vessels and crystallising dishes, i.e. pH, temperature, dissolved oxygen, hardness and ammonia;
Hvis der benyttes en Bonferroni-korrektion, foretrækkes Bonferroni-Holm-korrektionen.
replacement of evaporated test water for the test vessels, if any;
Der bør være mulighed for log-transformation af VTG for at opnå normalitet og varianshomogenitet.
number of emerged male and female midges per vessel and per day for the 1st and 2nd generation;
Statistisk signifikans for fænotypiske hunner og fænotypiske hanner fremhæves.
number of egg ropes deposited in the crystallising dishes per breeding cage and day;
Testkemikalie: faktiske koncentrationer
characteristics of each egg rope (size, shape and fertility);
De faktiske koncentrationer af testkemikaliet i kamrene analyseres i frekvenser og beskrives i punkt 34.
fecundity — total number of egg ropes per total number of females added to the breeding cage;
Resultaterne registreres i tabeller som gennemsnitskoncentration ± standardafvigelse på grundlag af replikat og på grundlag af koncentration med fremhævede oplysninger om antal prøver og resultater, der afviger fra den gennemsnitlige behandlingskoncentration ± 20 %.
fertility — total number of fertile egg ropes per total number of females added to the breeding cage;
Eksempler kan ses i FSDT Phase 2 validation report (42).
estimates of toxic endpoints e.g. ECx (and associated confidence intervals), NOEC and the statistical methods used for its determination;
Hvor den målte koncentration af testkemikaliet i testopløsningen ligger nær analysemetodens detektionsgrænse, skal resultaterne tolkes med forsigtighed.
Chapter C.28 of this Annex, Sediment-water chironomid toxicity test using spiked water.
de nominelle testkoncentrationer, gennemsnit af de målte værdier og standardafvigelser i testbeholderne og metoden, hvorved de er opnået (den anvendte analysemetode anføres i et bilag) samt dokumentation for, at målingerne refererer til testkemikaliets faktiske koncentrationer i opløsning
Chapter C.27 of this Annex, Sediment-water chironomid toxicity test using spiked sediment.
vandkvaliteten i testbeholderne:
J. Amer.
detaljerede oplysninger om fodring (f.eks. foderets type og kilde, fodermængde og fodringshyppighed samt analyser for kontaminanter (f.eks. PCB'er, PAH'er og organiske chlorpesticider), hvis det er relevant.
OECD (2006), Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data:
Dokumentation for, at kontrollerne opfyldte validitetskriterierne:
a Guidance to Application, OECD Series on Testing and Assessment No. 54, 146 pp., ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
Resultater, der afviger fra godkendelseskriterierne (i kontrollerne), fremhæves.
Formulated sediment or reconstituted, artificial or synthetic sediment is a mixture of materials used to mimic the physical components of natural sediment.
Resultaterne præsenteres som gennemsnitsværdier ± standardafvigelser eller standardfejl.
Overlying water is the water placed over sediment in the test vessel.
Statistikkerne registreres som minimum som NOEC og LOEC og konfidensintervaller.
Interstitial water or pore water is the water occupying space between sediment and soil particles.
Det statistiske flowdiagram (tillæg 8) skal følges.
Spiked water is the test water to which test chemical has been added.
Sumpter, 1996, »Inhibition of testicular growth in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) exposed to estrogenic alkylphenolic chemicals«, Environmental Toxicology and Chemistry 15, s. 194-202.
Recommendations for culture of Chironomus riparius
J.P. Sumpter, og S. Jobling, 1995, »Vitellogenesis As A Biomarker for Estrogenic Contamination of the Aquatic Environment«, Environmental Health Perspectives 103, s. 173-178.
Chironomus larvae may be reared in crystallising dishes or larger containers.
Hutchinson, S. Maddix og H. Trip (1999), »An in vivo testing system for endocrine disruptors in fish early life stages using induction of vitellogenin«, Environmental Toxicology and Chemistry 18, s. 337-347.
Fine quartz sand is spread in a thin layer of about 5 to 10 mm deep over the bottom of the container.
L. Andersen, P. Bjerregaard og B. Korsgaard ( 2003), »Vitellogenin induction and brain aromatase activity in adult male and female zebrafish exposed to endocrine disrupters«, Fish Physiology and Biochemistry 28, s. 319-321.
Suitable water is then added to a depth of several cm.
Petersen (2003), »Gonad development and vitellogenin production in zebrafish (Danio rerio) exposed to ethinylestradiol and methyltestosterone«, Aquatic Toxicology 65, s. 397-411.
Water levels should be topped up as necessary to replace evaporative loss, and prevent desiccation.
Tyler (2002), »Utility of a juvenile fathead minnow screening assay for detecting (anti-)estrogenic substances«, Environmental Toxicology and Chemistry 21, s. 319-326.
Water can be replaced if necessary.
Wang (2007), »Toxicity of the aromatase inhibitor letrozole to Japanese medaka (Oryzias latipes) eggs, larvae and breeding adults«, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 145, s. 533-541.
Gentle aeration should be provided.
LeBlanc, and C.V.Sullivan (1999), »Fathead minnow (Pimephales promelas) vitellogenin: purification, characterization and quantitative immunoassay for the detection of estrogenic compounds«, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 123, s. 113-125.
The larval rearing vessels should be held in a suitable cage which will prevent escape of the emerging adults.
Porcher (2002), »Development and validation of an enzyme-linked immunosorbent assay to measure vitellogenin in the zebrafish (Danio rerio)«, Environmental Toxicology and Chemistry 21, s. 1699-1708.
The cage should be sufficiently large to allow swarming of emerged adults, otherwise copulation may not occur (minimum is ca.
Hatano, H. Mizukami, M. Yamashita, R. Sakakibara og E. Tamiya (2002), »Development and application of a monoclonal antibody-based sandwich ELISA for quantification of Japanese medaka (Oryzias latipes) vitellogenin«, Comparative Biochemistry and Physiology C-Toxicology & Pharmacology 132, s. 161-169.
30 × 30 × 30 cm).
Bengtsson (2004), »The juvenile three-spined stickleback (Gasterosteus aculeatus L.) as a model organism for endocrine disruption — II — kidney hypertrophy, vitellogenin and spiggin induction«, Aquatic Toxicology 70, s. 311-326.
Cages should be held at room temperature or in a constant environment room at 20 ± 2 °C with a photo period of 16 hour light (intensity ca.
N. Tatarazako, M. Koshio, H. Hori, M. Morita og T. Iguchi (2004), »Validation of an enzyme-linked immunosorbent assay method for vitellogenin in the medaka«, Journal of Health Science 50, s. 301-308.
1000 lux), 8 hours dark.