natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Dunns test eller Mann-Whitney-test
The time until re-introduction should not exceed one hour since otherwise the cue of the spawning substrate may induce individual mating and spawning at an unusual time.
Tamhane-Dunnett-test på indlejret ANOVA
If a situation needs a later introduction of the spawning tray, this should be done at least 9 hours after start of the illumination.
Variansstabiliserende transformation?
At this late time of the day, spawning is not induced any longer.
Bestem, om dosis/respons-forholdet er monotont
Spawning substrate for fathead minnow
Replikatgennemsnit ikke normale eller ikke homogene
Two or three combined plastic/ceramic/glass or stainless steel spawning tiles and trays are placed in each of the test chamber (e.g., 80 mm length of grey semi-circular guttering sitting on a lipped tray of 130mm length) (see picture).
Step-down Jonckheere-test
Properly seasoned PVC or ceramic tiles have demonstrated to be appropriate for a spawning substrate (Thorpe et al, 2007).
Step-down trend test på replikatgennemsnit
It is recommended that the tiles are abraded to improve adhesion.
AMPHIBIAN METAMORPHOSIS ASSAY
The tray should also be screened to prevent fish from access to the fallen eggs unless the egg adhesion efficiency has been demonstrated for the spawning substrate used.
Denne testmetode svarer til OECD Test Guideline (TG) 231 (2009).
The base is designed to contain any eggs that do not adhere to the tile surface and would therefore fall to the bottom of the tank (or those eggs laid directly onto the flat plastic base).
Behovet for at udvikle og validere et assay, der kan opspore kemikalier, som er aktive i hvirveldyrarters skjoldbruskkirtelsystem, udspringer af bekymringer for, at kemikaliekoncentrationer i miljøet kan være til skade for både mennesker og dyre- og planteliv.
All spawning substrates should be leached for a minimum of 12 hours, in dilution water, before use.
I 1998 indledte OECD en højt prioriteret aktivitet, der havde til formål at revidere de eksisterende TG'er og udvikle nye TG'er for screening og test af potentielle hormonforstyrrende stoffer.
Appendix 5A
Et element i aktiviteten var at udvikle en TG for screening af kemikalier, som påvirker hvirvelløse dyrearters skjoldbruskkirtelsystem.
Assessment of secondary sex characteristics in fathead minnow for the detection of certain endocrine active chemicals
Der er stillet forslag om såvel en styrkelse af testen for toksicitet ved gentagen dosering (28 dage, oral) hos gnavere (kapitel B.7 i dette bilag) som en metamorfoseundersøgelse hos amfibier, Amphibian Metamorphosis Assay (AMA).
Overview
Den forbedrede metode B.7 gennemgik validering, og der er forelagt en revideret testmetode.
Potentially important characteristics of physical appearance in adult fathead minnows in endocrine disrupter testing include body colour (i.e. light/dark), coloration patterns (i.e. presence or absence of vertical bands), body shape (i.e. shape of head and pectoral region, distension of abdomen), and specialized secondary sex characteristics (i.e. number and size of nuptial tubercles, size of dorsal pad and ovipositor).
Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) gennemgik et omfattende valideringsprogram, der omfattede undersøgelser inden for og mellem laboratorier, og hvor assayets relevans og pålidelighed blev påvist (1, 2).
Nuptial tubercles are located on the head (dorsal pad) of reproductively-active male fathead minnows, and are usually arranged in a bilaterally-symmetric pattern (Jensen et al.
Efterfølgende foretog et panel af uafhængige eksperter et peer-review af valideringen af assayet (3).
2001).
Testmetoden er resultatet af erfaringerne fra valideringsundersøgelserne med henblik på påvisning af thyreoideaaktive kemikalier og af arbejde udført andre steder i OECD-medlemslandene.
Control females and juvenile males and females exhibit no tubercle development (Jensen et al.
Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) er et screeningassay, som har til formål at foretage en empirisk afdækning af kemikalier, der kan forstyrre hypothalamus-hypofyse-thyreoideaaksens normale funktion (HPT-aksen).
2001).
AMA er en generel model for hvirveldyr, i det omfang det er baseret på HPT-aksens bevarede strukturer og funktioner.
There can be up to eight individual tubercles around the eyes and between the nares of the males.
Det er et vigtigt assay, fordi padders metamorfose viser en velundersøgt thyreoideaafhængig proces, der reagerer på kemikalier, som påvirker HPT-aksen, og det er det eneste eksisterende assay, der påviser aktivitet i skjoldbruskkirtlen hos et dyr under morfologisk udvikling.
The greatest numbers and largest tubercles are located in two parallel lines immediately below the nares and above the mouth.
Det generelle forsøgsdesign betyder, at 51 Xenopus laevis-haletudser eksponeres for minimum tre forskellige koncentrationer af et testkemikalie og en fortyndingsvandkontrol i 21 dage.
In many fish there are groups of tubercles below the lower jaw;
Der foretages fire replikater af hver testbehandling.
those closest to the mouth generally occur as a single pair, while the more ventral set can be comprised of up to four tubercles.
Larvetætheden ved testens start er 20 haletudser pr. testbeholder for alle behandlingsgrupper.
The actual numbers of tubercles is seldom more than 30 (range, 18-28; Jensen et al.
De observationsmæssige endepunkter er baglemslængde, længde fra snude til gat, udviklingstrin, vådvægt, histologisk undersøgelse af skjoldbruskkirtlen og daglige observationer af dødelighed.
2001).
Testarter
The predominant tubercles (in terms of numbers) are present as a single, relatively round structure, with the height approximately equivalent to the radius.
Xenopus laevis dyrkes rutinemæssigt i laboratorier over hele verden og kan let fås fra kommercielle leverandører.
Most reproductively-active males also have, at least some, tubercles which are enlarged and pronounced such that they are indistinguishable as individual structures.
Reproduktion kan let induceres hos denne art hele året ved hjælp af injektioner med humant choriongonadotropin (hCG), og de deraf følgende larver kan rutinemæssigt opdrættes i et stort antal til valgte udviklingsstadier, så det er muligt at bruge stadiespecifikke testprotokoller.
Some types of endocrine-disrupting chemicals can cause the abnormal occurrence of certain secondary sex characteristics in the opposite sex;
Larver, der benyttes i assayet, skal helst komme fra internt opdrættede voksne individer.
for example, androgen receptor agonists, such as 17β-methyltestosterone or 17β-trenbolone, can cause female fathead minnows to develop nuptial tubercles (Smith 1974; Ankley et al.
Med henblik på akklimatisering kan æg eller embryoner alternativt sendes til det laboratorium, der udfører testen, selv om dette ikke er den foretrukne fremgangsmåde.
2001; 2003), while oestrogen receptor agonists may decrease number or size of nuptial tubercles in males (Miles-Richardson et al.
Forsendelsen af larver til brug i testen accepteres ikke.
1999; Harries et al.
Udstyr og diverse artikler
2000).
Følgende udstyr og artikler er nødvendige til udførelsen af dette assay:
Below is a description of the characterization of nuptial tubercles in fathead minnows based on procedures used at the U.S. Environmental Protection Agency lab in Duluth, MN.
eksponeringssystem (se beskrivelse nedenfor)
Specific products and/or equipment can be substituted with comparable materials available.
akvarier af glas eller rustfrit stål (se beskrivelse nedenfor)
Viewing is best accomplished using an illuminated magnifying glass or 3X illuminated dissection scope.
ynglebeholdere
View fish dorsally and anterior forward (head toward viewer).
temperaturkontrolapparater (f.eks. varme- eller køleanordninger (justerbar til 22 ° ± 1 °C))
Place fish in small Petri dish (e.g., 100 mm in diameter), anterior forward, and ventral down.
termometer
Focus viewfinder to allow identification of tubercles.
binokulært dissektionsmikroskop
Gently and slowly roll fish from side to side to identify tubercle areas.
digitalkamera med en opløsning på mindst 4 megapixel og mikrofunktion
Count and score tubercles.
billeddigitaliseringssoftware
Repeat the observation on the ventral head surface by placing the fish dorsal anterior forward in the Petri dish.
petriskål (f.eks. 100 × 15 mm) eller gennemsigtigt plastkammer af tilsvarende størrelse
Observations should be completed within 2 min for each fish.
analysevægt til måling med tre decimaler (mg)
Tubercle Counting and Rating
apparat til måling af opløst ilt
Six specific areas have been identified for assessment of tubercle presence and development in adult fathead minnows.
pH-meter
A template was developed to map the location and quantity of tubercles present (see end of this Appendix).
lysintensitetsmåler til måling i lux-enheder
The number of tubercles is recorded and their size can be quantitatively ranked as:
diverse glasudstyr og værktøjer til laboratoriebrug
0- absence, 1-present, 2-enlarged and 3-pronounced for each organism (Fig.
justerbare pipetter (10-5000 μl) eller blandede pipetter af tilsvarende størrelser
1).
testkemikalie i tilstrækkelige mængder til at foretage undersøgelsen, helst fra en batch
Rate 0- absence of any tubercle.
analyseinstrumenter, der er egnede til det testede kemikalie, eller kontraktlige analysetjenester.
Rating 1-present, is identified as any tubercle having a single point whose height is nearly equivalent to its radius (diameter).
Kemisk testbarhed
Rating 2- enlarged, is identified by tissue resembling an asterisk in appearance, usually having a large radial base with grooves or furrows emerging from the centre.
AMA er baseret på en vandig eksponeringsprotokol, hvorved testkemikaliet indføres i testkamrene via et gennemstrømningssystem.
Tubercle height is often more jagged but can be somewhat rounded at times.
Gennemstrømningsmetoder medfører imidlertid begrænsninger af, hvilke typer kemikalier der kan testes, hvilket bestemmes af kemikaliets fysisk-kemiske egenskaber.
Rating 3- pronounced, is usually quite large and rounded with less definition in structure.
Før denne protokol benyttes, bør der derfor indhentes relevante basisoplysninger om kemikaliet for at afgøre testbarheden, og OECD's Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures (4) bør konsulteres.
At times these tubercles will run together forming a single mass along an individual or combination of areas (B, C and D, described below).
Kendetegn, der viser, at det kan være vanskeligt at teste kemikaliet i vandige systemer, omfatter:
Coloration and design are similar to rating 2 but at times are fairly indiscriminate.
høje octanol/vandfordelingskoefficienter (log Kow), høj flygtighed, hydrolysefølsomhed og fotolysefølsomhed under omgivelseslysforhold i laboratoriet.
Using this rating system generally will result in overall tubercle scores of < 50 in a normal control male possessing a tubercle count of 18 to 20 (Jensen et al.
Andre faktorer kan også være relevante for at fastslå testbarheden og bør bestemmes i hvert enkelt tilfælde.
2001).
Hvis det ikke er muligt at foretage en vellykket test for kemikaliet ved hjælp af et gennemstrømningstestsystem, kan der benyttes et system med statisk udskiftning.
The actual number of tubercles in some fish may be greater than the template boxes (Appendix A) for a particular rating area.
Hvis ingen af systemerne egner sig til testkemikaliet, testes der som standard ikke ved hjælp af denne protokol.
If this happens, additional rating numbers may be marked within, to the right or to the left of the box.
Eksponeringssystem
The template therefore does not need to display symmetry.
Når det er muligt, foretrækkes et gennemstrømningsfortyndersystem frem for et system med statisk udskiftning.
An additional technique for mapping tubercles which are paired or joined vertically along the horizontal plane of the mouth could be done by double-marking two tubercle rating points in a single box.
Hvis en af testkemikaliernes fysiske og/eller kemiske egenskaber ikke er egnet til et gennemstrømningsfortyndersystem, kan et alternativt eksponeringssystem (f.eks. statisk udskiftning) benyttes.
Mapping regions:
De af systemets komponenter, der har vandkontakt, bør være af glas, rustfrit stål og/eller polytetrafluorethylen.
A Tubercles located around eye.
Egnet plast kan dog bruges, hvis det ikke skader undersøgelsen.
Mapped dorsal to ventral around anterior rim of eye.
Eksponeringsbeholderne bør være akvarier af glas eller rustfrit stål udstyret med standrør, som giver et beholdervolumen på ca. 4,0-10,0 l og en vanddybde på minimum 10-15 cm.
Commonly multiple in mature control males, not present in control females, generally paired (one near each eye) or single in females exposed to androgens.
Systemet bør kunne bære alle eksponeringskoncentrationer og en kontrol med fire replikater pr. behandling.
B Tubercles located between nares, (sensory canal pores).
Gennemstrømningshastigheden i hver beholder bør være konstant i forhold til både opretholdelsen af biologiske vilkår og kemisk eksponering (f.eks. 25 ml/min).
Normally in pairs for control males at more elevated levels (2- enlarged or 3- pronounced) of development.
Behandlingsbeholderne placeres vilkårligt i eksponeringssystemet med henblik på at reducere potentielle virkninger af placeringen, bl.a. mindre variationer i temperatur, lysintensitet osv.
Not present in control females with some occurrence and development in females exposed to androgens.
Der anvendes fluorescerende lys for at give en lysperiode på 12 timers lys:
C Tubercles located immediately anterior to nares, parallel to mouth.
12 timers mørke ved en intensitet på 600-2000 lux (lumen/m2) ved vandoverfladen.
Generally enlarged or pronounced in mature control males.
Vandtemperaturen holdes på 22 ° ± 1 °C, pH opretholdes mellem 6,5 og 8,5, og koncentrationen af opløst ilt (DO) > 3,5 mg/l (> 40 % af luftmætningen) i hver testbeholder.
Present or enlarged in less developed males or androgen-treated females.
I bilag 1 skitseres de forsøgsbetingelser, hvorunder protokollen udføres.
D Tubercles located parallel along mouth line.
For yderligere oplysninger om fastsættelse af gennemstrømningseksponeringssystemer og/eller systemer med statisk udskiftning henvises til ASTM Standard Guide for Conducting Acute Toxicity Tests on Test Materials with Fishes, Macroinvertebrates, and Amphibians (5) og generelle toksikologiske test i vand.
Generally rated developed in control males.
Vandkvalitet
Absent in control females but present in androgen-exposed females.
Der kan anvendes lokalt tilgængeligt vand (f.eks. kildevand eller trækulsfiltreret ledningsvand), som muliggør normal vækst og udvikling af X. laevis-haletudser.
E Tubercles located on lower jaw, close to mouth, usually small and commonly in pairs.
Da den lokale vandkvalitet kan variere betydeligt fra det ene område til det andet, bør vandkvaliteten analyseres, især hvis der ikke foreligger historiske data om, hvorvidt vandet kan bruges til at opdrætte Xenopus.
Varying in control or treated males, and treated females.
Man skal være særligt opmærksom på, at vandet ikke indeholder kobber, chlorin og chloraminer, som alle er giftige for frøer og haletudser.
F Tubercles located ventral to E. Commonly small and paired.
Det anbefales yderligere at analysere vandet for baggrundsværdier af fluor, perchlorater og chlorat (biprodukter ved desinficering af drikkevand), da alle disse anioner er iodtransportstoffer fra skjoldbruskkirtlen, og høje niveauer af hver af disse anioner kan forstyrre undersøgelsens resultat.
Present in control males and androgen-exposed females.
Der foretages analyser før påbegyndelse af testen, og testvandet må normalt ikke indeholde disse anioner.
Tubercle Template
Iodidkoncentration i testvandet
Numerical Rating
For at få skjoldbruskkirtlen til at syntetisere TH skal der være tilstrækkeligt iodid tilgængelig for larverne gennem en kombination af vandige kilder og kostkilder.
resent
I øjeblikket er der ingen empirisk afledte retningslinjer for minimale iodidkoncentrationer.
Date
Iodidtilgængelighed kan dog påvirke skjoldbruskkirtelsystemets modtagelighed for thyreoideaaktive agenser og er kendt for at modulere skjoldbruskkirtlens basale aktivitet, et aspekt, som fortjener opmærksomhed ved fortolkning af resultaterne fra den histopatologiske undersøgelse af skjoldbruskkirtlen.
nlarged
Derfor anføres målte vandige iodidkoncentrationer fra testvandet.
Total Score
På grundlag af de tilgængelige data fra valideringsundersøgelserne har protokollen vist sig at fungere godt, når iodidkoncentrationerne (I–) i testvandet lå mellem 0,5 og 10 μg/l.
ronounced
Ideelt bør minimumsiodidkoncentrationen i testvandet ligge på 0,5 μg/l.
Appendix 5B
Hvis testvandet rekonstitueres på grundlag af deioniseret vand, tilsættes iodet ved en minimumskoncentration på 0,5 μg/l.
Assessment of secondary sex characteristics in medaka for the detection of certain endocrine active chemicals
En eventuel tilsætning af iod eller andre salte til testvandet anføres i rapporten.
Below is a description of the measurement of papillary processes, which are the secondary sex characteristics in medaka (Oryzias latipes).
Opbevaring af dyrene
After the excision of the liver (Appendix 6), the carcass is placed into a conical tube containing about 10 ml of 10 % neutral buffered formalin (upside: head, downside: tail).
Pasning af voksne og avl
If the gonad is fixed in a solution other than 10 % neutral buffered formalin, make a transverse cut across the carcass between anterior region of anal fin and anus using razor, taking care not to harm the gonopore and gonad itself (Fig.
Pasning af voksne og avl udføres i overensstemmelse med standardretningslinjer, og læseren henvises til yderligere oplysninger i standardvejledningen for udførelse af Frog Embryo Teratogenesis Assay (FETAX) (6).
3).
Disse standardretningslinjer omfatter et eksempel på relevante pasnings- og avlsmetoder, men en streng overholdelse er ikke påkrævet.
Place the cranial side of the fish body into the fixative solution to preserve the gonad, and the tail side of the fish body into the 10 % neutral buffered formalin as described above.
For at inducere avl injiceres (3-5) par voksne hunner og hanner med humant choriongonadotropin (hCG).
After placing the fish body into 10 % neutral buffered formalin, grasp the anterior region of the anal fin with tweezers and fold it for about 30 seconds to keep the anal fin open.
Hunner og hanner injiceres med henholdsvis ca. 800 IU-1000 IU og 600 IU-800 IU hCG opløst i en 0,6-0,9 % saltvandsopløsning.
When grasping the anal fin with tweezers, grasp a few fin rays in the anterior region with care not to scratch the papillary processes.
Ynglende par opbevares uforstyrrede og under statiske betingelser i store beholdere for at fremme amplexus.
After keeping the anal fin open for about 30 seconds, store the fish body in 10 % neutral buffered formalin at room temperature until the measurement of the papillary processes (measurement should be conducted after fixing for at least 24 hours).
Bunden af hver ynglebeholder bør have en falsk bund af rustfrit stål eller plastvæv, så æggemasserne kan falde ned i beholderens bund.
Measurement
Frøer, som injiceres sidst på eftermiddagen, vil normalt lægge de fleste af deres æg midt på den følgende formiddag.
After fixing the fish body in the 10 % neutral buffered formalin for at least 24 hours, pick up the fish carcass from the conical tube and wipe the formalin on the filter paper (or paper towel).
Efter at en tilstrækkelig mængde æg er frigivet og befrugtet, fjernes de voksne dyr fra ynglebeholderne.
Place the fish abdomen side up.
Pasning og udvælgelse af larver
Then cut the anal fin using small dissection scissors carefully (it is preferable to cut the anal fin with small amount of pterygiophore).
Efter at de voksne er fjernet fra ynglebeholderne, indsamles æggene og vurderes med henblik på levedygtighed ved hjælp af en repræsentativ delmængde af embryoner fra alle ynglebeholdere.
Grasp the anterior region of the severed anal fin with tweezers and put it on a glass slide with a several drops of water.
Den eller de bedste gydninger (2-3 anbefales for at vurdere kvaliteten af gydningerne) udtages baseret på embryonernes levedygtighed og tilstedeværelsen af et tilstrækkeligt antal (minimum 1500) embryoner.
Then cover the anal fin with a cover glass.
Alle organismer, der anvendes i en undersøgelse, bør stamme fra en enkelt gydning (dvs. at gydningerne ikke bør sammenblandes).
Be careful not to scratch the papillary processes when grasping the anal fin with tweezers.
Embryonerne overføres til en stor flad skål, og alle åbenlyst døde eller abnorme æg (se definition i (5)) fjernes ved hjælp af en pipette eller øjendråbetæller.
Count the number of the joint plate with papillary processes using the counter under a biological microscope (upright microscope or inverted microscope).
De sunde embryoner fra hver af de tre gydninger overføres til tre separate udklækningsbeholdere.
The papillary processes are recognized when a small formation of processes is visible on the posterior margin of joint plate.
Fire dage efter at være blevet placeret i udklækningsbeholderne udvælges den bedste gydning baseret på levedygtighed og udklækningssucces, og larverne overføres til et passende antal opdrætsbeholdere ved 22 ° ± 1 °C.
Write the number of joint plate with papillary processes in each fin ray to the worksheet (e.g. first fin ray: 0, second fin ray: 10, third fin ray: 12, etc.) and enter the sum of this number on the Excel spreadsheet by individual fish.
Endvidere flyttes nogle ekstra larver til ekstra beholdere til brug som erstatninger i tilfælde af dødelighed i opdrætsbeholderne i den første uge.
If necessary, take a photograph of the anal fin and count the number of joint plate with papillary processes on the photograph.
Denne fremgangsmåde sikrer en konsistent populationstæthed og mindsker dermed de udviklingsmæssige afvigelser inden for kohorten af en enkelt gydning.
After the measurement, put the anal fin into the conical tube described in (1) and store it.
Alle opdrætsbeholdere suges rene dagligt.
Fig.1.
Af forsigtighedshensyn foretrækkes vinyl- eller nitrilhandsker frem for latexhandsker.
Diagram showing sexual difference in shape and size of the anal fin.
Hver dag fjernes døde individer, og erstatningslarver udsættes for at opretholde populationstætheden i den første uge.
A, male;
Fodring foretages mindst to gange om dagen.
B, female.
I præeksponeringsfasen akklimatiseres haletudserne til de faktiske eksponeringsbetingelser, bl.a. fodertype, temperatur, lys-/mørkecyklus og dyrkningsmedium.
Fig.2.A.
Det anbefales derfor, at det samme dyrknings-/fortyndingsvand bruges i præeksponeringsfasen og i eksponeringsfasen.
Processes on joint plates of anal fin-ray.
Hvis haletudserne holdes i et statisk dyrkningssystem i præeksponeringsfasen, udskiftes dyrkningsmediet helt mindst hver anden uge.
J.P., joint plate;
Sammenklumpning forårsaget af høj larvetæthed i præeksponeringsperioden bør undgås, fordi sådanne virkninger i høj grad kan påvirke haletudsernes udvikling i den efterfølgende testfase.
A.S., axial space;
Derfor bør opdrætningstætheden ikke overstige omkring fire haletudser/l dyrkningsmedium (statisk eksponeringssystem) eller 10 haletudser/l dyrkningsmedium (med en gennemstrømningshastighed på f.eks. 50 ml/min. i præeksponerings- eller dyrkningssystemet).
P., process.
Under disse betingelser bør haletudserne udvikle sig fra stadium 45/46 til stadium 51 på 12 dage.
B, Distal extremity of fin-ray.
Repræsentative haletudser fra denne stampopulation kontrolleres dagligt med henblik på udviklingsstadium for at anslå et rette tidspunkt for indledning af eksponeringen.
Actinotrichia (Act.) are on the tip.
Det bør sikres, at stress og traumer for haletudserne minimeres, især under flytning, rensning af akvarier og håndtering af larver.
Fig.3.
Belastende betingelser/aktiviteter bør undgås, såsom høj og/eller uophørlig støj, bankning på akvariet, vibrationer i akvariet, for høj aktivitet i laboratoriet og hurtige ændringer i miljømedier (lystilgængelighed, temperatur, pH, DO, vandgennemstrømningshastighed osv.).
Photograph of fish body showing the cut site when the gonad is fixed in the fixing solution other than 10 % neutral buffered formalin.