natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Deres voksne og reproduktive tilstand gør det muligt klart at skelne mellem kønnene og dermed foretage en kønsrelateret analyse af hvert endepunkt og sikrer, at de er følsomme over for eksogene kemikalier.
It is a straight-line measure, not measured over the curve of the body (www.fishbase.org)
Ved testens afslutning bekræftes kønnet ved undersøgelse af kønskirtlerne i makroskop efter åbning af abdomen gennem bugen med en saks.
Description of the different lengths used
Tillæg 2 indeholder en oversigt over de relevante betingelser for bioassayet.
Standard length
Assayet indledes normalt med fisk udtaget fra en bestand i gydningstilstand; der må ikke bruges senescerende dyr.
Fork length
Retningslinjer for fiskens alder og reproduktive tilstand findes i afsnittet om valg af fisk.
Total length
Assayet udføres med tre eksponeringskoncentrationer af kemikaliet samt en vandkontrol og om nødvendigt en opløsningsmiddelkontrol.
Chemical: a substance or a mixture
Der bruges to beholdere eller replikater pr. behandling ved zebrafisk (hver beholder indeholder fem hanner og fem hunner).
ECx: (Effect concentration for x % effect) is the concentration that causes an x % of an effect on test organisms within a given exposure period when compared with a control.
Der bruges fire beholdere eller replikater pr. behandling ved tykhovedet elritse (hver beholder indeholder to hanner og fire hunner).
For example, an EC50 is a concentration estimated to cause an effect on a test end point in 50 % of an exposed population over a defined exposure period.
Det sker med henblik på tilpasning til tykhovedet elritse-hannens territoriale adfærd og for samtidig at sikre tilstrækkelig power i assayet.
Lowest observed effect concentration (LOEC) is the lowest tested concentration of a test chemical at which the chemical is observed to have a statistically significant effect (at p < 0,05) when compared with the control.
Der bruges fire beholdere eller replikater pr. behandling ved japansk risfisk (hver beholder indeholder tre hanner og tre hunner).
Appendixes 5 and 6 provide guidance.
Eksponeringen varer 21 dage, og prøveudtagningen af fisk sker på eksponeringens dag 21.
No observed effect concentration (NOEC) is the test concentration immediately below the LOEC, which when compared with the control, has no statistically significant effect (p < 0,05), within a stated exposure period.
Den kvantitative frugtbarhed overvåges dagligt.
Test chemical: Any substance or mixture tested using this test method
Ved prøveudtagningen på dag 21 aflives alle dyr på en human måde.
UVCB: substances of unknown or variable composition, complex reaction products or biological materials.
Sekundære kønskarakteristika måles hos tykhovedet elritse og japansk risfisk (se tillæg 5A og tillæg 5B); der tages blodprøver til bestemmelse af VTG hos zebrafisk og tykhovedet elritse; alternativt kan hoved/hale indsamles til bestemmelse af VTG hos zebrafisk (tillæg 6); der indsamles lever med henblik på analyse af VTG hos japansk risfisk (tillæg 6); kønskirtlerne fikseres enten hele eller dissekerede med henblik på eventuel histopatologisk evaluering (22).
IUPAC: International Union of Pure and Applied Chemistry.
KRITERIER FOR ACCEPT AF TEST
SMILES: Simplified Molecular Input Line Entry Specification.
Følgende betingelser skal være opfyldt, for at testens resultater kan godkendes:
TEST CONDITIONS, DURATION AND SURVIVAL CRITERIA FOR RECOMMENDED SPECIES
Dødeligheden i vandkontrollerne (eller opløsningsmiddelkontrollerne) må ikke overstige 10 % ved afslutningen af eksponeringsperioden.
Key:
Koncentrationen af opløst ilt skal gennem hele eksponeringsperioden have været mindst 60 % af luftmætningsværdien (ASV).
SPECIES
Vandtemperaturen må ikke på noget tidspunkt i eksponeringsperioden variere med mere end ± 1,5 °C mellem testbeholderne og må ikke afvige med mere end 2 °C fra de temperaturintervaller, der er specificeret for de arter, der anvendes i testen (tillæg 2).
TEST CONDITIONS
Der skal være dokumentation for, at koncentrationerne af testkemikaliet i opløsning på tilfredsstillende måde er holdt inden for ± 20 % af gennemsnittet af de målte værdier.
RECOMMENDED DURATION OF TEST
Der skal være dokumentation for, at fisken aktivt gyder i alle replikater før eksponering for kemikaliet og i kontrolreplikater under testen.
Typical minimum mean total length of control fish at the end of the study (mm) [1]
Normalt laboratorieudstyr og i særdeleshed følgende:
SURVIVAL OF CONTROLS (minimum)
a. ilt- og pH-måleudstyr
Temperature (°C)
b. udstyr til bestemmelse af vandets hårdhed og alkalinitet
Salinity (0/00)
c. egnet apparatur til temperaturkontrol og fortrinsvis kontinuerlig overvågning
Photoperiod (hrs)
d. beholdere fremstillet af et kemisk inert materiale og med passende kapacitet i forhold til den anbefalede belastningsgrad og bestandtæthed (se tillæg 2)
Hatching success
e. gydningssubstrat til tykhovedet elritse og zebrafisk; de nødvendige oplysninger findes i tillæg 4.
Post-hatch success
f. vægt med tilstrækkelig nøjagtighed (dvs. nøjagtighed på ± 0,5 mg).
Freshwater:
Som testvand kan anvendes vand af enhver beskaffenhed, hvori den art, der anvendes i testen, udviser passende langtidsoverlevelse og vækst.
12 - 16 [3]
Målinger af tungmetaller (f.eks. Cu, Pb, Zn, Hg, Cd og Ni), de vigtigste anioner og kationer (f.eks. Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl- og SO42-), pesticider (f.eks. samlet mængde phosphor- og chlorholdige organiske pesticider), samlet mængde organisk kulstof og opslæmmede faststoffer skal foretages, f.eks. hver tredje måned, såfremt man ved, at fortyndingsvandet har en relativt konstant kvalitet.
12 - 16 [4]
Hvis vandkvaliteten påviseligt har været konstant over mindst et år, kan analyserne foretages mindre hyppigt og med større intervaller (f.eks. hver sjette måned).
30 days post-hatch
I tillæg 3 er anført nogle kemiske karakteristika for acceptabelt fortyndingsvand.
Japanese Ricefish or Medaka
Stamopløsningen bør fortrinsvis fremstilles ved mekanisk opblanding eller omrystning af testkemikaliet i fortyndingsvandet (f.eks. ved omrøring eller ultralydbehandling).
Estuarine and Marine:
Saturation colums (solubility columns) kan anvendes til fremstilling af en passende koncentreret stamopløsning.
22 - 25
Hvis det er nødvendigt med et opløsningsmiddel, skal der anvendes en parallel opløsningsmiddelkontrol med samme opløsningsmiddelkoncentration som kemikaliebehandlingerne.
28 days
Ved kemikalier, der er vanskelige at teste, kan et opløsningsmiddel være den teknisk bedste løsning; nærmere oplysninger findes i OECD Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures (23).
Typical minimum mean total length is not a validity criterion but deviations below the figure indicated should be carefully examined in relation to the sensitivity of the test.
Valget af opløsningsmiddel afgøres af stoffets eller blandingens kemiske egenskaber.
The minimum mean total length is derived from a selection of data available at the current time.
En gennemgang for nylig (24) fremhævede dog yderligere bekymringer i forbindelse med brug af opløsningsmidler til test af hormonforstyrrelser.
Brood stock must be held at the same temperature as that to be used for the eggs.
Der anvendes et testsystem med gennemstrømning.
Darkness for larvae until one week after hatching except when they are being inspected, then subdued lighting throughout test (12-16 hour photoperiod) (4).
Et sådan system doserer og fortynder kontinuerligt en stamopløsning af testkemikaliet (f.eks. udmålingspumpe, proportionalfortynder, mætningssystem), så der afgives en serie af koncentrationer til testbeholderne.
For any given test conditions, light regime should be constant.
Stamopløsningernes og fortyndingsvandets strømningshastigheder skal i løbet af testen kontrolleres regelmæssigt, fortrinsvis dagligt, og må ikke variere mere end 10 % gennem hele testforløbet.
For any given test this shall be performed to ± 2 0/00.
Der skal udvises forsigtighed, så brugen af plastslanger eller andre materialer af lavere kvalitet undgås, da nogle af dem kan indeholde biologisk aktive kemikalier.
FEEDING AND HANDLING GUIDANCE FOR BROOD AND TEST ANIMALS OF RECOMMENDED SPECIES
Ved valg af materiale til gennemstrømningssystemet bør der tages højde for den eventuelle adsorption af testkemikaliet til dette materiale.
FBS frozen brine shrimps; adults Artemia sp
Testfisk udvælges fra en laboratoriepopulation, fortrinsvis fra en enkelt bestand, som i mindst to uger forud for testen akklimatiseres under vandkvalitets- og lysbetingelser, som svarer til de i testen anvendte.
BSN brine shrimp nauplii; newly hatched
Det er vigtigt, at belastningsgraden og bestandtætheden (definitioner i tillæg 1) er passende for den fiskeart, der bruges i testen (se tillæg 2).
BSN48 brine shrimp nauplii; 48 hours old
dødelighed på over 10 % af populationen efter syv dage: hele fiskegruppen forkastes
FOOD [1]
dødelighed på mellem 5 og 10 % af populationen: akklimatiseringen fortsættes i endnu syv dage; hvis der er mere end 5 % dødelighed i løbet af de følgende syv dage, kasseres hele fiskegruppen
POST-HATCH TRANSFER TIME
dødelighed på mindre end 5 % af populationen på syv dage: fiskegruppen accepteres.
TIME TO FIRST FEEDING
Fiskene må ikke behandles for sygdomme i akklimatiseringsperioden, i præeksponeringsperioden eller i eksponeringsperioden.
Brood fish
Præeksponering og valg af fisk
Newly-hatched larvae
Der anbefales en præeksponeringsperiode på 1-2 uger, hvor dyrene anbringes i beholdere svarende til dem, der anvendes i den egentlige test.
Juveniles
Fisk fodres ad libitum gennem hele opbevaringsperioden og i eksponeringsfasen.
Type
Eksponeringsfasen indledes med seksuelt dimorfe voksne fisk fra en laboratoriepopulation af kønsmodne dyr (f.eks. med tydelige synlige sekundære kønskarakteristika hos tykhovedet elritse og japansk risfisk), som er aktivt gydende.
Frequency
Som generel vejledning (og ikke isoleret ud fra observationen af en given fiskegruppes faktiske reproduktive tilstand) bør tykhovedet elritse være ca. 20 (±2) uger gamle, forudsat at de har været dyrket ved 25 ±2 °C i hele deres levetid.
trout food
Japanske risfisk bør være ca. 16 (±2) uger gamle, forudsat at de har været dyrket ved 25 ±2 °C i hele deres levetid.
None [2]
Zebrafisk bør være ca. 16 (±2) uger gamle, forudsat at de har været dyrket ved 26 ±2 °C i hele deres levetid.
trout starter BSN
Ægproduktion bør vurderes dagligt i præeksponeringsfasen.
2-4 feeds per day
Det anbefales, at gydningen observeres i alle replikatbeholdere forud for optagelse i assayets eksponeringsfase.
14-16 days post-hatch or at swim-up (not essential)
TESTDESIGN
19 days post hatch or at swim-up
Dataene kan analyseres for at bestemme statistisk signifikante forskelle mellem behandlings- og kontrolresponser.
BSN
Disse analyser bruges i højere grad til at vurdere, om der er brug for yderligere længerevarende test af kemikaliets skadelige virkninger (navnlig overlevelse, udvikling, vækst og reproduktion), end til risikovurdering (25).
BSN48, flake food
Når der bruges zebrafisk, udtages der på eksperimentets dag 21 hanner og hunner fra hvert behandlingsniveau (fem hanner og fem hunner i hver af de to replikater) og fra kontrollen/kontrollerne med henblik på måling af vitellogenin.
2-3 times a day
Når der bruges japansk risfisk, udtages der på eksperimentets dag 21 hanner og hunner fra hvert behandlingsniveau (tre hanner og tre hunner i hver af de fire replikater) og fra kontrollen/kontrollerne med henblik på måling af vitellogenin og sekundære kønskarakteristika.
once hatching is 90 %
Når der bruges tykhovedet elritse, udtages der på eksponeringens dag 21 hanner og hunner (to hanner og fire hunner i hver af de fire replikater) og fra kontrollen/kontrollerne med henblik på måling af vitellogenin og sekundære kønskarakteristika.
2 day post hatch
Udvælgelse af testkoncentration
Commercial larvae food, protozoa [3], protein [4]
I denne test fastsættes den højeste testkoncentration til den maksimalt tolererede koncentration (MTC) bestemt ud fra test til bestemmelse af dosisinterval eller andre toksicitetsdata eller 10 mg/l eller den maksimale opløselighed i vand, alt efter hvilken der er lavest.
BSN48, flake food,
MTC defineres som kemikaliets højeste testkoncentration, der resulterer i en dødelighed på under 10 %.
BSN once daily; flake food twice daily
Brugen af denne tilgang forudsætter, at der foreligger eksisterende empiriske data om akut toksicitet eller andre toksicitetsdata, som kan danne grundlag for et skøn over MTC.
2 days post hatch
Det kan være unøjagtigt og kræver normalt en vis faglig vurdering at anslå MTC.
flake food
Der skal benyttes tre testkoncentrationer med en afstandsfaktor, som ikke overstiger 10, og en fortyndingsvandkontrol (og om nødvendigt en opløsningsmiddelkontrol).
BSN, flake food (or protozoa or rotifers)
Det anbefales at benytte en afstandsfaktor på mellem 3,2 og 10.
BSN48, flake food (or rotifers)
Udvælgelse og vejning af testfisk
BSN once daily; flake food twice daily or flake food and rotifers once daily
Det er vigtigt at minimere variationen i fiskenes vægt ved assayets begyndelse.
not applicable
Egnede størrelser for de forskellige fiskearter, der anbefales til brug i denne test, er angivet i tillæg 2.
6-7 days post spawn
For hele gruppen af fisk, der bruges i testen, gælder det, at området for han- og hunfisks individuelle vægt ved testens begyndelse om muligt bør holdes inden for ± 20 % af gennemsnitsvægten for det relevante køn.
Cyprinodon varieqatus
Det anbefales at veje en delprøve af fiskebestanden inden testen for at beregne gennemsnitsvægten.
2-3 feeds per day
Testens varighed er 21 dage efter en præeksponeringsperiode.
1 day post hatch/swim-up
Den anbefalede præeksponeringsperiode er 1-2 uger.
Food should be given to satiation.
Fiskene fodres ad libitum med et passende foder (tillæg 2) og tilstrækkeligt ofte til at bevare kropstilstanden.
Surplus food and faeces should be removed, as necessary to avoid accumulation of waste
Som hovedregel kan den daglige ration opdeles i to eller tre lige store portioner til flere fodringer om dagen med mindst tre timers interval.
filtered from mixed culture
En større ration kan accepteres, navnlig i weekender.
granules from fermentation process.
Fiskene bør ikke fodres i 12 timer inden prøveudtagning/makroskopisk undersøgelse.
STATISTICAL GUIDANCE FOR NOEC DETERMINATION
Fiskefoder evalueres for tilstedeværelse af forurenende stoffer som chlorholdige organiske pesticider, polycykliske aromatiske kulbrinter (PAH) og polychlorerede biphenyler (PCB).
General
Foder med et højt niveau af fytoøstrogener, som ville kompromittere assayets respons på en kendt østrogenagonist (f.eks. østradiol-17b), bør undgås.
The replicate tank is the unit of analysis.
Foderrester og fækalt materiale skal fjernes fra testbeholderne mindst to gange om ugen f.eks. ved omhyggelig rengøring af bunden i hver enkelt beholder ved hjælp af en sifon.
Thus, for continuous measurements, such as size, the replicate mean or median should be calculated and these replicate values are the data for analysis.
Inden eksponeringsperioden påbegyndes, kontrolleres det, at kemikalietilførselssystemet fungerer korrekt.
The power of the tests used should be demonstrated, preferably based on an adequate historical database for each lab.
Alle de nødvendige analysemetoder skal være fastlagt, herunder tilstrækkeligt kendskab til kemikaliets stabilitet i testsystemet.
The size effect that can be detected with 75-80 % power should be provided for each endpoint with the statistical test to be used.
Under testen bestemmes koncentrationerne af testkemikalie regelmæssigt som følger: Gennemstrømningshastigheden for fortyndingsmidlet og giftstofstamopløsningen kontrolleres fortrinsvis dagligt, men som minimum to gange om ugen, og må ikke udvise en variation på mere end 10 % gennem hele testperioden.
The databases available at the time of development of this test method establish the power possible under the recommended statistical procedures.
Det anbefales, at de faktiske testkemikaliekoncentrationer måles i alle beholdere ved testens begyndelse og efterfølgende ugentligt.
An individual lab should demonstrate its ability to meet this power requirement either by conducting its own power analysis or by demonstrating that the Coefficient of Variation (CV) for each response does not exceed the 90th percentile of CVs used in developing the TG.
Det anbefales, at resultaterne baseres på målte koncentrationer.
Table 1 provides these CVs.
Det kan være nødvendigt at centrifugere eller filtrere prøverne (f.eks. med et filter med en porestørrelse på 0,45 μm).
90th Percentile CVs for selected Freshwater Species
Fiskene undersøges dagligt i testperioden, eventuel dødelighed registreres, og den døde fisk fjernes så hurtigt som muligt.
For almost all statistical tests used to evaluate laboratory toxicology studies, the comparisons of interest are of treatment groups to control.
Døde fisk erstattes hverken i kontrol- eller testbeholderne.
For that reason, it is not appropriate to require a significant ANOVA F-test before using Dunnett's or Williams' test or a significant Kruskal-Wallis test before using the Jonckheere-Terpstra, Mann-Whitney, or Dunn test (Hochberg and Tamhane 1987, Hsu 1996, Dunnett 1955, 1964, Williams 1971, 1972, 1975, 1977, Robertson et al.
Enhver unormal adfærd (i forhold til kontrollerne) registreres; det kan omfatte tegn på generel toksicitet, herunder hyperventilation, ukoordineret svømning, tab af ligevægt og atypisk ubevægelighed eller fouragering.
Similarly, the step-down Williams and Jonckheere-Terpstra tests using a 0,05 significance level at every step preserve an overall 5 % false positive rate and that rate and the power of the tests are adversely affected by using the F- or Kruskal-Wallis test as a gatekeeper.
Yderligere ydre abnormaliteter (f.eks. blødning, misfarvning) registreres.
Mann-Whitney and Dunn's test have to be adjusted for multiplicity and the Bonferroni-Holm adjustment is advised.
Sådanne tegn på toksicitet bør overvejes nøje i forbindelse med fortolkningen af data, da de kan være et tegn på koncentrationer, hvor biomarkører for hormonforstyrrelser ikke er pålidelige.
A thorough discussion of most of the recommendations on hypothesis testing and verification of assumptions underlying these tests is given in OECD (2006), which also contains an extensive bibliography.
Sådanne adfærdsmæssige observationer kan også være nyttige kvalitative oplysninger som udgangspunkt for eventuelle fremtidige krav til test med fisk.
Treatment of Controls when a Solvent is Used
Eksempelvis er der observeret territorial aggressivitet hos normale hanner eller maskuliniserede hunner hos tykhovedet elritse under androgen eksponering; hos zebrafisk reduceres eller hindres den karakteristiske parrings- eller gydningsadfærd efter daggry ved østrogen eller antiandrogen eksponering.
If a solvent is used, then both a dilution water control and a solvent control should be included.
Fordi visse aspekter af udseendet (primært farven) kan ændre sig hurtigt ved håndtering, er det vigtigt, at kvalitative observationer foretages, inden dyrene fjernes fra testsystemet.
The two controls should be compared for each response and combined for statistical analysis if no significant difference is found between the controls.
Tidligere erfaringer med tykhovedet elritse tyder på, at visse hormonforstyrrende kemikalier i første omgang kan forårsage ændringer i følgende ydre karakteristika: kropsfarve (lys eller mørk), farvemønstre (lodrette bånd) og kropsform (hoved- og brystområde).
Otherwise, the solvent control should be used for NOEC determination or ECx estimation and the water control is not used.
Derfor bør fiskenes fysiske udseende observeres i løbet af testen og ved afslutningen af undersøgelsen.
See restriction in the validity criteria (Paragraph 7)
Frugtbarhed
For length, weight, proportion of egg hatch or larval mortality or abnormal larvae, and first or last day of hatch or swim-up, a T-test or Mann-Whitney test should be used to compare the dilution water- control and the solvent control at the 0,05 significance level, ignoring all treatment groups.
Daglige kvantitative observationer af gydning bør registreres pr. replikat.
The results of these tests should be reported.
Æg fjernes dagligt fra testkamrene.
Individual fish length and weight values can be normally or log-normally distributed.
Gydningssubstrater anbringes i testkammeret for tykhovedet elritse og zebrafisk for at sikre, at fiskene kan gyde under normale forhold.
In either case, the replicate mean values tend to be normally distributed by virtue of the Central Limit Theorem and confirmed from data from well over 100 ELS studies of three freshwater species.
Tillæg 4 indeholder nærmere oplysninger om anbefalede gydningssubstrater til zebrafisk (tillæg 4A) og tykhovedet elritse (tillæg 4B).
Alternatively, where the data or historical databases suggest a log-normal distribution for individual fish size values, the replicate mean logarithm of the individual fish values can be calculated and the data for analysis can then be the anti-logs of these replicate mean logarithms.
Det anses ikke for nødvendigt at anvende gydningssubstrat til japansk risfisk.
Data should be evaluated for consistency with a normal distribution and variance homogeneity.
Human aflivning af fisk
For this purpose, the residuals from an ANOVA model with concentration as the single explanatory class variable should be used.
På dag 21, dvs. ved eksponeringens afslutning, aflives fiskene med passende mængder tricain (tricainmethansulfonat), metacain, MS-222 (CAS 886-86-2), 100-500 mg/l bufret med 300 mg/l NaHCO3 (natriumbicarbonat, CAS 144-55-8) for at reducere irritation af slimhinderne; blod eller væv udtages derefter med henblik på bestemmelse af VTG som forklaret i punktet om vitellogenin.
Visual determination from scatterplots and histograms or stem-and-leaf plots can be used.
Observation af sekundære kønskarakteristika
Alternatively, a formal test such as the Shapiro-Wilk or Anderson-Darling can be used.
Visse hormonforstyrrende kemikalier kan forårsage ændringer i specialiserede sekundære kønskarakteristika (antal legevorter hos tykhovedet elritse-hanner, papillære strukturer hos japansk risfisk-hanner).
Consistency with variance homogeneity can be assessed from a visual examination of the same scatter plot or formally from Levene's test.
Kemikalier med visse virkemåder kan navnlig forårsage abnormal forekomst af sekundære kønskarakteristika hos dyr af det modsatte køn; eksempelvis kan androgene receptoragonister, som trenbolon, methyltestosteron og dihydrotestosteron, få tykhovedet elritse-hunner til at udvikle fremtrædende legevorter eller japansk risfisk-hunner til at udvikle papillære strukturer (11, 20, 21).
Only parametric tests (e.g. Williams, Dunnett) need be evaluated for normality or variance homogeneity.
Det er også blevet beskrevet, at østrogenreceptoragonister kan reducere antallet af legevorter og størrelsen af nakkefremspringet hos voksne hanner af arten tykhovedet elritse (26, 27).
Attention should be paid to possible outliers and their effect on analysis.
Sådanne makroskopiske morfologiske observationer kan også være nyttige kvalitative og kvantitative oplysninger som udgangspunkt for eventuelle fremtidige krav til test med fisk.
Tukey's outlier test and visual inspection of the same plots of residuals described above can be used.
Antallet og størrelsen af legevorter hos tykhovedet elritse og papillære strukturer hos japansk risfisk kan kvantificeres direkte eller mere praktisk hos præserverede dyr.
It should be recalled that observations are entire replicates, so omitting an outlier from analysis should be done only after careful consideration.
Anbefalede fremgangsmåder til evaluering af sekundære kønskarakteristika hos tykhovedet elritse og japansk risfisk findes i henholdsvis tillæg 5A og tillæg 5B.
The statistical tests that make use of the characteristics of the experimental design and biological expectation are step-down trend tests, such as Williams and Jonckheere-Terpstra.
Blod indsamles fra halearterien/-venen med et hepariniseret mikrohæmatokrit-kapillærrør eller alternativt ved hjertepunktur med en kanyle.
These tests assume a monotone concentration-response and the data should be assessed for consistency with that assumption.