natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Stof med flere bestanddele, UVCB-stoffer og blandinger:
Cysteine and lysine peptide solutions should be incubated in glass autosampler vials with the test chemical at 1:10 and 1:50 ratio respectively.
kendetegnet så vidt muligt ved f.eks. kemisk identitet (jf. ovenfor), renhed, kvantitativ forekomst og bestanddelenes relevante fysisk-kemiske egenskaber (jf. ovenfor) i det omfang, det er muligt
If a precipitate is observed immediately upon addition of the test chemical solution to the peptide solution, due to low aqueous solubility of the test chemical, in this case one cannot be sure how much test chemical remained in the solution to react with the peptide.
fysisk udseende, vandopløselighed og yderligere relevante fysisk-kemiske egenskaber i den udstrækning, det er muligt
Therefore, in such a case, a positive result could still be used, but a negative result is uncertain and should be interpreted with due care (see also provisions in paragraph 11 for the testing of chemicals not soluble up to a concentration of 100 mM).
molekylvægt eller tilsyneladende molekylvægt i tilfælde af blandinger/polymerer med kendt sammensætning eller andre oplysninger, der er relevante for undersøgelsens gennemførelse
The reaction solution should be left in the dark at 25 ± 2,5 °C for 24 ± 2 hours before running the HPLC analysis.
opbevaring og stabilitet i det omfang, det er muligt
Each test chemical should be analysed in triplicate for both peptides.
reference til historiske positive kontrolresultater, der udviser passende acceptkriterier for kørsel, hvis det er relevant.
Samples have to be visually inspected prior to HPLC analysis.
anvendt opløsningsmiddel/bærestof og forholdet mellem dets bestanddele, hvis det er relevant
If a precipitate or phase separation is observed, samples may be centrifuged at low speed (100-400 xg) to force precipitate to the bottom of the vial as a precaution since large amounts of precipitate may clog the HPLC tubing or columns.
kemisk identifikation, f.eks. IUPAC- eller CAS-navn(e), CAS-nummer/numre og/eller andre identifikatorer
If a precipitation or phase separation is observed after the incubation period, peptide depletion may be underestimated and a conclusion on the lack of reactivity cannot be drawn with sufficient confidence in case of a negative result.
fysisk udseende, molekylvægt og yderligere relevante fysisk-kemiske egenskaber ved brug af andre opløsningsmidler/bærestoffer end dem, der er nævnt i forsøgsmetoden, i det omfang, det er muligt
Preparation of the HPLC standard calibration curve
begrundelse for valg af opløsningsmiddel for de enkelte testkemikalier
A standard calibration curve should be generated for both the cysteine and the lysine peptides.
for acetonitril testresultater for indvirkningen på peptidstabilitet.
Peptide standards should be prepared in a solution of 20 % or 25 % acetonitrile:buffer using phosphate buffer (pH 7,5) for the cysteine peptide and ammonium acetate buffer (pH 10,2) for the lysine peptide.
Præparering af peptider, positiv kontrol og testkemikalie
Using serial dilution standards of the peptide stock solution (0,667 mM), 6 calibration solutions should be prepared to cover the range from 0,534 to 0,0167 mM.
karakterisering af peptidopløsninger (leverandør, parti, nøjagtig vægt af peptidet, tilsat mængde til stamopløsning)
A blank of the dilution buffer should also be included in the standard calibration curve.
karakterisering af den positive kontrolopløsning (nøjagtig vægt af det positive kontrolstof, tilsat mængde til testopløsningen)
Suitable calibration curves should have an r2 > 0,99.
karakterisering af opløsninger af testkemikaliet (nøjagtig vægt af testkemikaliet, tilsat mængde til testopløsningen).
HPLC preparation and analysis
Indstilling af HPLC-instrument og analyse
The suitability of the HPLC system should be verified before conducting the analysis.
type af HPLC-instrument, HPLC- og forkolonner, detektor, autosampler
Peptide depletion is monitored by HPLC coupled with an UV detector (photodiode array detector or fixed wavelength absorbance detector with 220 nm signal).
relevante parametre for HPLC-analysen såsom kolonnetemperatur, injektionsmængder, flow og gradient.
The appropriate column is installed in the HPLC system.
Systemets egnethed
The HPLC set-up described in the validated protocol uses a Zorbax SB-C-18 2,1 mm × 100 mm × 3,5 micron as preferred column.
topareal for peptid ved 220 nm for hver standard- og referencekontrol A-replikat
With this reversed-phase HPLC column, the entire system should be equilibrated at 30 °C with 50 % phase A (0,1 % (v/v) trifluoroacetic acid in water) and 50 % phase B (0,085 % (v/v) trifluoroacetic acid in acetonitrile) for at least 2 hours before running.
grafisk gengivelse af lineær kalibreringskurve og den indbettede r2
The HPLC analysis should be performed using a flow rate of 0,35 ml/min and a linear gradient from 10 % to 25 % acetonitrile over 10 minutes, followed by a rapid increase to 90 % acetonitrile to remove other materials.
peptidkoncentrationen for hvert referencekontrol A-replikat
Equal volumes of each standard, sample and control should be injected.
gennemsnitlig peptidkoncentration (mM) i de tre referencekontroller A, SD og CV
The column should be re-equilibrated under initial conditions for 7 minutes between injections.
peptidkoncentrationen for referencekontrollerne A og C.
If a different reversed-phase HPLC column is used, the set-up parameters described above may need to be adjusted to guarantee an appropriate elution and integration of the cysteine and lysine peptides, including the injection volume, which may vary according to the system used (typically in the range from 3-10 μl).
Analysesekvens
Importantly, if an alternative HPLC set-up is used, its equivalence to the validated set-up described above should be demonstrated (e.g. by testing the proficiency substances in Appendix 2).
For referencekontroller:
Absorbance is monitored at 220 nm.
topareal for peptid ved 220 nm for hvert B- og C-replikat
If a photodiode array detector is used, absorbance at 258 nm should also be recorded.
gennemsnitligt topareal for peptid ved 220 nm for de ni referencekontroller B og C i acetonitril, standardafvigelse og variationskoefficient (af hensyn til stabiliteten af referencekontrollerne i analyseperioden)
It should be noted that some supplies of acetonitrile could have a negative impact on peptide stability and this has to be assessed when a new batch of acetonitrile is used.
for hvert anvendt opløsningsmiddel toparealet for peptidet ved 220 nm for de tre relevante referencekontroller C (til beregning af den procentvise peptidnedbrydning)
The ratio of the 220 peak area and the 258 peak area can be used as an indicator of co-elution.
for hvert anvendt opløsningsmiddel peptidkoncentrationen (mM) for de tre relevante referencekontroller C
For each sample a ratio in the range of 90 % < mean [13] area ratio of control samples < 100 % would give a good indication that co-elution has not occurred.
for hvert anvendt opløsningsmiddel den gennemsnitlige peptidkoncentration (mM) for de tre relevante referencekontroller C, standardafvigelse og variationskoefficient.
There may be test chemicals which could promote the oxidation of the cysteine peptide.
For positiv kontrol:
The peak of the dimerised cysteine peptide may be visually monitored.
topareal for peptid ved 220 nm for hvert replikat
If dimerisation appears to have occurred, this should be noted as percent peptide depletion may be over-estimated leading to false positive predictions and/or assignment to a higher reactivity class (see paragraphs 29 and 30).
procentvis peptidnedbrydning for hvert replikat
HPLC analysis for the cysteine and lysine peptides can be performed concurrently (if two HPLC systems are available) or on separate days.
gennemsnitlig peptidnedbrydning for de tre replikater, standardafvigelse og variationskoefficient.
If analysis is conducted on separate days then all test chemical solutions should be freshly prepared for both assays on each day.
For hvert testkemikalie:
The analysis should be timed to assure that the injection of the first sample starts 22 to 26 hours after the test chemical was mixed with the peptide solution.
forekomst af co-eluering
For the HPLC set up used in the validation study and described in this test method, up to 26 analysis samples can be accommodated in a single HPLC run (see also paragraph 17).
beskrivelse af eventuelle andre relevante observationer, hvis det er relevant
An example of HPLC analysis sequence is provided in Appendix 3.
gennemsnitlig peptidnedbrydning for de tre replikater, standardafvigelse og variationskoefficient
Data evaluation
gennemsnitlige procentvise nedbrydningsværdier for cystein og lysin
The concentration of cysteine or lysine peptide is photometrically determined at 220 nm in each sample by measuring the peak area (area under the curve, AUC) of the appropriate peaks and by calculating the concentration of peptide using the linear calibration curve derived from the standards.
anvendt forudsigelsesmodel og DPRA-forudsigelser.
The percent peptide depletion is determined in each sample by measuring the peak area and dividing it by the mean peak area of the relevant reference controls C (see Appendix 3) according to the formula described below.
Kompetencetest
Percent peptide depletion
hvis det er relevant, den procedure, der anvendes til at påvise laboratoriets kompetence til at anvende forsøgsmetoden (f.eks. ved test af kompetencestoffer) eller til at påvise reproducerbare resultater af forsøgsmetoden over tid.
Peptide peak area in replicate injection
Diskussion af resultaterne
ean peptide peak area in reference controls C
diskussion af de resultater, der er opnået med DPRA-forsøgsmetoden
Acceptance criteria
diskussion af forsøgsmetodens resultater i forbindelse med en IATA, hvis der foreligger andre relevante oplysninger.
The following criteria should be met for a run to be considered valid:
Tilgængelig på: http://www.unece.org/trans/danger/publi/ghs/ghs_rev05/05files_e.html
the standard calibration curve should have an r2 > 0,99,
Series on Testing and Assessment, No.168, OECD, Paris.
the mean percent peptide depletion value of the three replicates for the positive control cinnamic aldehyde should be between 60,8 % and 100 % for the cysteine peptide and between 40,2 % and 69,0 % for the lysine peptide and the maximum standard deviation (SD) for the positive control replicates should be < 14,9 % for the percent cysteine depletion and < 11,6 % for the percent lysine depletion, and
Kapitel B.6 i dette bilag: Hudsensibilisering.
the mean peptide concentration of reference controls A should be 0,50 ± 0,05 mM and the coefficient of variation (CV) of peptide peak areas for the nine reference controls B and C in acetonitrile should be < 15,0 %.
Kapitel B.42 i dette bilag: Assay på lokale lymfeknuder:
If one or more of these criteria is not met the run should be repeated.
Kapitel B.50 i dette bilag: Hudsensibilisering: Assay på lokale lymfeknuder: DA.
The following criteria should be met for a test chemical's results to be considered valid:
Kapitel B.51 i dette bilag: Hudsensibilisering: Assay på lokale lymfekunder BrdU-ELISA
the maximum standard deviation for the test chemical replicates should be < 14,9 % for the percent cysteine depletion and < 11,6 % for the percent lysine depletion,
Tilgængelig på: https://eurl-ecvam.jrc.ec.europa.eu/eurl-ecvam-recommendations/eurl-ecvam-recommendation-on-the-direct-peptide-reactivity-assay-dpra
the mean peptide concentration of the three reference controls C in the appropriate solvent should be 0,50 ± 0,05 mM.
Tilgængelig på: http://ihcp.jrc.ec.europa.eu/our_labs/eurl-ecvam/eurl-ecvam-recommendations/eurl-ecvam-recommendation-on-the-direct-peptide-reactivity-assay-dpra
If these criteria are not met the data should be rejected and the run should be repeated for that specific test chemical.
Tilgængelig på: http://ecvam-dbalm.jrc.ec.europa.eu/
Prediction model
Tilgængelig på: www.fda.gov/downloads/drugs/guidancecomplianceregulatoryinformation/guidance/ucm070107.pdf — 138
The mean percent cysteine and percent lysine depletion value is calculated for each test chemical.
Den er et mål for forsøgsmetodens ydeevne og et af aspekterne af »relevans«.
Negative depletion is considered as “0” when calculating the mean.
Udtrykket benyttes ofte som synonym for »konkordans«, forstået som den andel af korrekte udfald, forsøgsmetoden fører til (21).
By using the cysteine 1:10/lysine 1:50 prediction model shown in Table 1, the threshold of 6,38 % average peptide depletion should be used to support the discrimination between skin sensitisers and non-sensitisers in the framework of an IATA.
Sekvens af begivenheder fra den kemiske struktur af et målkemikalie eller en gruppe af ensartede kemikalier gennem den molekylære udløsende begivenhed til et in vivo-resultat af interesse (2).
Application of the prediction model for assigning a test chemical to a reactivity class (i.e. low, moderate and high reactivity) may perhaps prove useful to inform potency assessment within the framework of an IATA.
Kalibreringskurve
Cysteine 1:10/lysine 1:50 prediction model [14]
Forholdet mellem den eksperimentelle responsværdi og den analytiske koncentration (også kaldet standardkurve) for et kendt stof.
Mean of cysteine and lysine % depletion
Variationskoefficient
Reactivity Class
Et mål for variation, der beregnes for en gruppe af replikationsdata ved at dividere standardafvigelsen med middelværdien.
DPRA Prediction [15]
Den kan ganges med 100 for at opnå en procentsats.
0 % ≤ mean % depletion ≤ 6,38 %
IATA (integreret tilgang til afprøvning og vurdering)
No or minimal reactivity
En struktureret tilgang, der bruges til identifikation af farer (potentiale), farebeskrivelse (styrke) og/eller sikkerhedsvurdering (potentiale/styrke og eksponering) af et kemikalie eller en gruppe af kemikalier, som på strategisk vis integrerer og vægter alle relevante data som grundlag for lovgivningsmæssige beslutninger om mulige farer og/eller risici og/eller behovet for yderligere målrettede og derfor færrest mulige test.
Negative
Molekylær udløsende begivenhed
6,38 % < mean % depletion ≤ 22,62 %
Kemikalieinduceret forstyrrelse af et biologisk system på molekylært niveau, der identificeres som startbegivenheden i AOP.
Low reactivity
En blanding eller opløsning, der er sammensat af to eller flere stoffer, hvori de ikke reagerer (1).
Positive
Et stof, der defineres af dets mængdemæssige sammensætning, hvori en hovedbestanddel udgør mindst 80 % (vægt/vægt).
22,62 % < mean % depletion ≤ 42,47 %
Stof med flere bestanddele
Moderate reactivity
Et stof, der defineres af dets mængdemæssige sammensætning, hvori flere end en hovedbestanddel er til stede i en koncentration på ≥ 10 % (vægt/vægt) og < 80 % (vægt/vægt).
42,47 % < mean % depletion ≤ 100 %
Et stof, der består af flere forskellige bestanddele, er resultatet af en fremstillingsproces.
High reactivity
Forskellen mellem en blanding og et stof med forskellige bestanddele er, at blandingen er fremstillet ved blanding af to eller flere stoffer uden kemisk reaktion.
There might be cases where the test chemical (the substance or one or several of the components of a multi-constituent substance or a mixture) absorbs significantly at 220 nm and has the same retention time of the peptide (co-elution).
Et stof, der består af flere forskellige bestanddele, er resultatet af en kemisk reaktion.
Co-elution may be resolved by slightly adjusting the HPLC set-up in order to further separate the elution time of the test chemical and the peptide.
Et replikat, som indeholder alle komponenterne fra et testsystem og er behandlet med et stof, som vides at inducere en positiv respons.
If an alternative HPLC set-up is used to try to resolve co-elution, its equivalence to the validated set-up should be demonstrated (e.g. by testing the proficiency substances in Appendix 2).
Referencekontrol
When co-elution occurs the peak of the peptide cannot be integrated and the calculation of the percent peptide depletion is not possible.
En ubehandlet prøve, som indeholder alle komponenterne fra et testsystem, herunder opløsningsmidlet eller bærestoffet, og som behandles sammen med de testkemikaliebehandlede prøver og andre kontrolprøver for at fastlægge basisresponsen for de prøver, som er behandlet med testkemikaliet opløst i det samme opløsningsmiddel eller bærestof.
If co-elution of such test chemicals occurs with both the cysteine and the lysine peptides then the analysis should be reported as “inconclusive”.
Relevans
In cases where co-elution occurs only with the lysine peptide, then the cysteine 1:10 prediction model reported in Table 2 can be used.
Beskrivelse af sammenhængen mellem testen og den pågældende virkning og dens meningsfuldhed og brugbarhed til et bestemt formål.
Cysteine 1:10 prediction model [16]
Det angives, i hvilket omfang testen måler eller forudsiger den pågældende biologiske virkning korrekt.
Cysteine (Cys) % depletion
Forsøgsmetodens nøjagtighed (konkordans) indgår i vurderingen af dens relevans (21).
Reactivity class
Den bedømmes ved beregning af reproducerbarhed inden for og mellem laboratorier og repeterbarhed inden for laboratorier (21).
DPRA prediction [17]
Reproducerbarhed
0 % ≤ Cys % depletion ≤ 13,89 %
Overensstemmelse mellem resultater af test af samme kemikalie med samme testprotokol (21).
13,89 % < Cys % depletion ≤ 23,09 %
Andelen af alle positive/aktive kemikalier, der klassificeres korrekt ved forsøgsmetoden.
23,09 % < Cys % depletion ≤ 98,24 %
Det er et mål for nøjagtigheden af en forsøgsmetode, som giver kategoriske resultater, og er et vigtigt kriterium ved vurderingen af en forsøgsmetodes relevans (21).
98,24 % < Cys % depletion ≤ 100 %
Andelen af alle negative/inaktive kemikalier, der klassificeres korrekt ved forsøgsmetoden.
There might be other cases where the overlap in retention time between the test chemical and either of the peptides is incomplete.
Det er et mål for nøjagtigheden af en forsøgsmetode, som giver kategoriske resultater, og er et vigtigt kriterium ved vurderingen af en forsøgsmetodes relevans (21).
In such cases percent peptide depletion values can be estimated and used in the cysteine 1:10/lysine 1:50 prediction model, however assignment of the test chemical to a reactivity class cannot be made with accuracy.
Grundstoffer og forbindelser heraf, naturlige eller industrielt fremstillede, indeholdende sådanne tilsætningsstoffer, som er nødvendige til bevarelse af stoffets stabilitet, og sådanne urenheder, som følger af fremstillingsprocessen, bortset fra opløsningsmidler, som kan udskilles, uden at det påvirker stoffets stabilitet eller ændrer dets sammensætning (1).
A single HPLC analysis for both the cysteine and the lysine peptide should be sufficient for a test chemical when the result is unequivocal.
Bestemmelse af instrumentets funktionsdygtighed (f.eks. følsomhed) ved analyse af en referencestandard, før analyse-batchen køres (22).
However, in cases of results close to the threshold used to discriminate between positive and negative results (i.e. borderline results), additional testing may be necessary.
Betegnelsen »testkemikalie« henviser til det, der bliver testet.
If situations where the mean percent depletion falls in the range of 3 % to 10 % for the cysteine 1:10/lysine 1:50 prediction model or the cysteine percent depletion falls in the range of 9 % to 17 % for the cysteine 1:10 prediction model, a second run should be considered, as well as a third one in case of discordant results between the first two runs.
Et system til klassificering af kemikalier (stoffer og blandinger) efter standardiserede typer og niveauer af fysisk fare, sundhedsfare og miljøfare med tilhørende kommunikationselementer såsom piktogrammer, signalord, risikosætninger, sikkerhedssætninger og sikkerhedsdatablade, således at oplysninger om kemikaliernes skadelige virkninger kan videreformidles med henblik på at beskytte mennesker (f.eks. arbejdsgivere, arbejdstagere, transportører, forbrugere og redningspersonel) og miljø (1).
The test report should include the following information
Stoffer med ukendt eller variabel sammensætning, komplekse reaktionsprodukter eller biologiske materialer.
Mono-constituent substance
Gyldig forsøgsmetode
Chemical identification, such as IUPAC or CAS name(s), CAS number(s), SMILES or InChI code, structural formula, and/or other identifiers;
En forsøgsmetode, der anses for at være tilstrækkeligt relevant og pålidelig til et bestemt formål, og som er baseret på videnskabeligt forsvarlige principper.
Physical appearance, water solubility, molecular weight, and additional relevant physicochemical properties, to the extent available;
En forsøgsmetode har aldrig absolut gyldighed, men kun i forbindelse med et bestemt formål (21).
Purity, chemical identity of impurities as appropriate and practically feasible, etc;
Før rutinemæssig brug af denne forsøgsmetode, bør laboratorierne godtgøre deres tekniske kompetence ved at opnå den forventede DPRA-forudsigelse på korrekt vis for de 10 kompetencestoffer, der anbefales i tabel 1, og ved at opnå cystein- og lysin-nedbrydningsværdier, der falder ind under de respektive referenceområder for 8 ud af de 10 kompetencestoffer for hvert peptid.
Storage conditions and stability to the extent available.
Disse kompetencestoffer er udvalgt således, at de repræsenterer responsområdet for hudsensibiliseringsfare.
Multi-constituent substance, UVCB and mixture:
Andre udvælgelseskriterier er, at stofferne er kommercielt tilgængelige, at der foreligger in vivo-referencedata af høj kvalitet og in vitro-data af høj kvalitet, der er genereret med DPRA, og at de blev anvendt i den EURL ECVAM-koordinerede valideringsundersøgelse til at påvise en vellykket gennemførelse af forsøgsmetoden i de laboratorier, der deltog i undersøgelsen.
Characterisation as far as possible by e.g. chemical identity (see above), purity, quantitative occurrence and relevant physicochemical properties (see above) of the constituents, to the extent available;
Anbefalede kompetencestoffer til dokumentation af teknisk kompetence i det direkte peptidreaktivitetsassay
Physical appearance, water solubility and additional relevant physicochemical properties, to the extent available;
Kompetencestoffer
Molecular weight or apparent molecular weight in case of mixtures/polymers of known compositions or other information relevant for the conduct of the study;
Fysisk form
Storage conditions and stability to the extent available;
In vivo-forudsigelse [1]
Reference to historical positive control results demonstrating suitable run acceptance criteria, if applicable.
DPRA-forudsigelse [2]
Solvent/vehicle used and ratio of its constituents, if applicable;
Interval [3] af procentvis cysteinpeptidnedbrydning
Chemical identification(s), such as IUPAC or CAS name(s), CAS number(s), and/or other identifiers;
Interval [3] af procentvis lysinpeptid nedbrydning
Physical appearance, molecular weight, and additional relevant physicochemical properties in the case other solvents / vehicles than those mentioned in the test method are used and to the extent available;
2,4-dinitrochlorbenzen
Justification for choice of solvent for each test chemical;
(ekstrem)
Preparation of peptides, positive control and test chemical
Oxazolon
Characterisation of peptide solutions (supplier, lot, exact weight of peptide, volume added for the stock solution);
Formaldehyd
Characterisation of positive control solution (exact weight of positive control substance, volume added for the test solution);
(stærk)
Characterisation of test chemical solutions (exact weight of test chemical, volume added for the test solution).
Benzylidenacetone
HPLC instrument setting and analysis
(moderat)
Type of HPLC instrument, HPLC and guard columns, detector, autosampler;
(svag)
Parameters relevant for the HPLC analysis such as column temperature, injection volumes, flow rate and gradient.
2,3-butanedion
System suitability
ethoxyacetophenon
Peptide concentration of each reference control A replicate;
Forudsigelser for in vivo-fare og (styrke) er baseret på LLNA-data (19).
Mean peptide concentration (mM) of the three reference controls A, SD and CV;
Man kan overveje en DPRA-forudsigelse inden for rammerne af en IATA og i overensstemmelse med bestemmelserne i punkt 9 og 11.
Analysis sequence