natgillin/translations-raw huggingface dataset:
De anvendte testkoncentrationer bør fortrinsvis ligge omkring den anslåede ECX-værdi, således at ECX findes ved interpolering og ikke ekstrapolering.
The fish feed/test substance should be mixed overnight by slow tumbling (e.g. using a roto-rack mixer or by rotation if a rotary evaporator bulb is used).
Det vil være hensigtsmæssigt med flere testkoncentrationer i den efterfølgende statistiske analyse (f.eks. 10) og færre replikater af hver koncentration (f.eks. 5, således at det samlede antal beholdere holdes konstant) samt 10 kontroller.
The spiked diet should be stored under conditions that maintain stability of the test substance within the feed mix (e.g. refrigeration) until use.
Når LOEC og/eller NOEC anslås, bør den laveste testkoncentration være så lav, at formeringsevnen ved denne koncentration ikke er betydeligt lavere end i kontrollen.
Fish food preparation with a corn or fish oil vehicle
Hvis det ikke er tilfældet, bør testen gentages med en mindre laveste koncentration.
Solid test substances should be ground in a mortar to a fine powder.
Når LOEC og/eller NOEC anslås, bør den højeste testkoncentration være så høj, at formeringsevnen ved denne koncentration er signifikant lavere end i kontrollen.
Liquid test substances can be added directly to the corn or fish oil.
Hvis dette ikke er tilfældet, bør testen gentages med en højere højeste koncentration, medmindre der er anvendt den maksimale krævede koncentration til test af kroniske virkninger (dvs. 10 mg/l) som højeste testkoncentration i forprøven.
The test substance is dissolved in a known quantity of corn or fish oil (e.g. 5-15 ml).
Hvis der ikke observeres virkninger ved den højeste koncentration i forprøven (f.eks. ved 10 mg/l), eller når det er meget sandsynligt, at testkemikaliet har lav/ingen toksicitet på basis af manglende toksicitet for andre organismer og/eller ringe eller ingen optagelse, kan formeringstesten gennemføres som en grænsetest, hvor der anvendes en testkoncentration på f.eks. 10 mg/l.
The dosed oil is quantitatively transferred into a rotary evaporation bulb of suitable size.
Der bruges 10 replikater til både behandlings- og kontrolgruppen.
The flask used to prepare the dosed oil should be flushed with two small aliquots of oil and these added to the bulb to make sure all dissolved test substance is transferred.
Når det kan blive nødvendigt at foretage en grænsetest i et gennemstrømningssystem, kan antallet af replikater reduceres.
To ensure complete dissolution/dispersion in the oil (or if more than one test substance is being used in the study), a micro-stirrer is added, the flask stoppered and the mixture stirred rapidly overnight.
Med en grænsetest kan det påvises, at der ikke er nogen statistisk signifikant virkning ved grænsekoncentrationen, men hvis der registreres virkninger, vil det normalt være nødvendigt med en komplet undersøgelse.
An appropriate quantity of fish diet (usually in pellet form) for the test is added to the bulb, and the bulb's contents are mixed homogeneously by continuously turning the glass bulb for at least 30 minutes, but preferably overnight.
Foruden testserien bør der gennemføres en kontrolserie med testmedium og, hvis det er relevant, en kontrolserie med opløsnings- eller dispergeringsmiddel.
Thereafter, the spiked food is stored appropriately (e.g. refrigerated) to ensure test substance stability in the food until use.
Hvis der bruges opløsnings- eller dispergeringsmiddel, bør koncentrationen være den samme som koncentrationen i beholderne med testkemikaliet.
Fish food preparation with an organic solvent
Der bør anvendes et passende antal replikater (se punkt 23-24).
An appropriate quantity of test substance (by molar mass or specific radioactivity) sufficient to achieve the target dose is dissolved in a suitable organic solvent (e.g. cyclohexane or acetone; 10-40 ml, but a greater volume if necessary depending on the quantity of food to spike).
Almindeligvis vil variationskoefficienten for det gennemsnitlige antal afkom pr. forældredyr i kontrollen/kontrollerne i en vellykket test være ≤ 25 %, og dette skal rapporteres for testdesign, hvor dyrene har været holdt hver for sig.
Either an aliquot, or all (added portion wise), of this solution is mixed with the appropriate mass of fish food sufficient for the test to achieve the required nominal dose level.
Fornyelse af testmedium
The food/test substance can be mixed in a stainless steel mixing bowl and the freshly-dosed fish food left in the bowl in a laboratory hood for two days (stirred occasionally) to allow the excess solvent to evaporate, or mixed in a rotary evaporator bulb with continuous rotation.
Hvor ofte mediet fornys, afhænger af testkemikaliets stabilitet, men det bør ske mindst tre gange om ugen.
The excess solvent can be “blown” off under a stream of air or nitrogen if necessary.
Hvis man fra tidligere stabilitetstest (se punkt 7) ved, at koncentrationen af testkemikaliet ikke er stabil (dvs. uden for 80-120 % af den nominelle koncentration eller falder til under 80 % af den målte koncentration i forprøven) i løbet af den maksimale fornyelsesperiode (dvs. tre døgn), bør man overveje at skifte mediet hyppigere eller at gå over til en gennemstrømningstest.
Care should be taken to ensure that the test substance does not crystallise as the solvent is removed.
Når mediet fornys i semistatiske test, gøres en anden række af testkar klar, og forældredyrene flyttes derover, f.eks. ved hjælp af en glaspipette med en passende diameter.
The spiked diet should be stored under conditions (e.g. refrigeration) that maintain stability of the test substance within the feed mix until use.
Der bør overføres mindst muligt medium sammen med dafnierne.
CALCULATION OF ASSIMILATION EFFICIENCY AND BIOMAGNIFICATION FACTOR To calculate the assimilation efficiency, the overall depuration rate constant should first be estimated according to section 4 of Appendix 5 (using the “sequential method”, i.e. standard linear regression) using mean sample concentrations from the depuration phase.
Resultaterne af de observationer, der er foretaget under testen, bør registreres i dataark (se eksempler i tillæg 4 og 5).
The feeding rate constant, I, and uptake duration, t, are known parameters of the study.
Hvis der ønskes andre målinger (se punkt 44), kan det være nødvendigt med flere observationer.
Cfood, the mean measured concentration of the test substance in the food is a measured variable in the study.
Afkom
C0,d, the test substance concentration in the fish at the end of the uptake phase, is usually derived from the intercept of a plot of ln(concentration) vs. depuration day.
Det er bedst dagligt at fjerne og tælle afkom fra hvert forældredyr fra første dag, der ses yngel, for at hindre ynglen i at indtage den føde, der er tiltænkt forældredyret.
The substance assimilation efficiency (a, absorption of test substance across the gut) is calculated as: α C 0,d k 2 I C food 1 1 e k 2 t [Equation A7.1] where: C0,d derived concentration in fish at time zero of the depuration phase (mg kg– 1); k2 overall (not growth-corrected) depuration rate constant (day– 1), calculated according to equations in Appendix 5, Section 3; I food ingestion rate constant (g food g– 1 fish day– 1); Cfood concentration in food (mg kg– 1 food); t duration of the feeding period (day) However, the feeding rate, I, used in the calculation may need to be adjusted for fish growth to give an accurate assimilation efficiency, a.
I denne forsøgsmetode tælles kun antal levende afkom, men tilstedeværelsen af aborterede æg eller dødt afkom bør også registreres.
In a test where fish grow significantly during the uptake phase (in which no correction of feed quantities is made to maintain the set feeding rate), the effective feeding rate as the uptake phase progresses will be lower than that set, resulting in a higher 'real' assimilation efficiency.
Dødelighed
(Note this is not important for the overall calculation of BMF as the I terms effectively cancel out between Equation A7.1 and Equation A7.4).
Dødeligheden blandt forældredyrene bør noteres dagligt og mindst fald lige så ofte, som afkommet tælles.
The mean feeding rate corrected for growth dilution, Ig, can be derived in several ways, but a straightforward and rigorous one is to use the known growth rate constant (kg) to estimate the test fish weights at time points during the uptake phase, i.e.:
Andre parametre
Wf,0 ek g t
Selv om denne forsøgsmetode primært er udformet til at vurdere virkninger på formeringsevnen, kan andre virkninger også kvantificeres i tilstrækkelig grad til, at der kan fortages statistiske beregninger.
[Equation A7.2] where Wf(t) mean fish weight at uptake day t Wf,0
Det samlede antal afkom pr. overlevende forældredyr, dvs. antal levende afkom fra testen pr. overlevende forældredyr, kan registreres.
As the feeding rate was set based on Wf,0, the effective feeding rate for each day of uptake can be calculated using these two weight values.
Dette kan sammenlignes med den vigtigste responsvariabel (antal afkom pr. forældredyr ved testens begyndelse, der ikke ved en fejl eller utilsigtet døde i løbet af testen).
The growth-corrected feeding rate, Ig (g food g-1 fish day– 1), to use instead of I in cases of rapid growth during the uptake phase, can then be calculated as
Hvis der indtræffer forældredødelighed i eksponerede replikater, bør det overvejes, om dødeligheden følger et koncentration/respons-mønster, f.eks. hvis der er tale om en betydelig regression i respons i forhold til testkemikaliets koncentration med en positiv hældning (en statistisk test som Cochran-Armitage-trend testen kan anvendes hertil).
[Equation A7.3]
Hvis dødeligheden følger et koncentration/respons-mønster, bør forældredødeligheden tilskrives en følge af testkemikaliet, og replikaterne bør ikke udelukkes fra analysen af testresultaterne.
Once the assimilation efficiency has been obtained, the BMF can be calculated by multiplying it with the feeding rate constant I (or Ig, if used to calculate α) and dividing the product by the overall depuration rate constant k2:
Det er yderst ønskeligt at foretage vækstmålinger, da de giver oplysninger om mulige subletale virkninger, som kan være nyttige som supplement til målinger af reproduktion.
[Equation A7.4]
Det anbefales at måle forældredyrenes længde (dvs. kropslængden minus den anale spina) ved forsøgets afslutning.
The growth-corrected biomagnification factor should also be calculated in the same way, using the growth corrected depuration rate constant (as derived according to section 7 in Appendix 5).
Andre parametre kan måles eller beregnes såsom tiden til fremkomst af den første yngel (og efterfølgende yngel), antal under pr. dyr og deres størrelse, antal aborterede afkom, tilstedeværelse af nyfødte handyr (OECD, 2008) eller ephippier og muligvis den egentlige populationsstigning (se tillæg 1 for definition og tillæg 7 for identifikation af nyfødtes køn).
Again, if Ig has been used to calculate α, it should also be used here instead of I:
Hyppighed af analyser og målinger
[Equation A7.5]
Iltkoncentration, temperatur, hårdhedsgrad og pH-værdier bør som minimum måles hver uge i nye og gamle medier, i kontroller og i opløsninger med den højeste koncentration af testkemikaliet.
assimilation efficiency (absorption of test substance across the gut);
Mens forsøget løber, måles koncentrationen af testkemikaliet med regelmæssige intervaller.
overall (not growth-corrected) depuration rate constant (day– 1), calculated according to equations in Appendix 5, Section 3;
I semistatiske test, hvor koncentrationen af testkemikaliet forventes at forblive inden for ± 20 % af den nominelle koncentration (dvs. inden for 80-120 %, se punkt 6 og 7), anbefales det som et minimum at måle højeste og laveste testkoncentration ved fremstillingen og i forbindelse med udskiftning en gang i den første testuge (dvs. at analyser bør udføres på en prøve fra samme opløsning — nyfremstillet og ved udskiftning).
growth-corrected depuration rate constant (day– 1);
Disse målinger bør efterfølgende gentages mindst en gang om ugen.
food ingestion rate constant (g food g– 1 fish day– 1);
I forbindelse med test, hvor testkemikaliets koncentration ikke forventes at holde sig inden for ± 20 % af den nominelle koncentration, er det nødvendigt at analysere alle testkoncentrationer, når de er nyfremstillede og ved udskiftning.
The growth-corrected half-life (t1/2) is calculated as follows.
I de test, hvor testkemikaliets målte koncentration ved start ikke ligger inden for ± 20 % af den nominelle koncentration, men hvor der er tilstrækkelig dokumentation for, at koncentrationerne ved start kan gentages og er stabile (dvs. inden for 80-120 % af startkoncentrationerne), kan kemiske målinger i testens anden og tredje uge reduceres til den højeste og den laveste testkoncentration.
[Equation A7.6]
I alle tilfælde skal testkemikaliets koncentration før udskiftning kun bestemmes for en replikatbeholder for hver testkoncentration.
The substance assimilation efficiency from the diet can also be estimated if tissue residues are determined during the linear phase of the uptake phase (between days 1 and 3).
Anvendes der en gennemstrømningstest, er et analysesystem svarende til det, der er beskrevet for semistatiske test, hensigtsmæssigt (men i dette tilfælde måles “gamle” opløsninger ikke).
In this case the substance assimilation efficiency (α) can be determined as follows
I den første uge kan det være tilrådeligt at øge antallet af prøveudtagninger (f.eks. tre hold målinger) for at sikre, at testkoncentrationerne holder sig stabile.
[Equation A7.7]
I den type test bør gennemstrømningshastigheden for fortyndingsvæske og testkemikalie kontrolleres dagligt.
the concentration of test substance in the fish at time t (mg kg– 1 wet weight).
Hvis det kan konstateres, at koncentrationen af det kemikalie, der skal testes, har været holdt tilfredsstillende inden for ± 20 % af den nominelle eller målte startkoncentration under hele testen, kan resultaterne baseres på nominelle eller målte startværdier.
LIPID CORRECTION
Hvis afvigelsen fra den nominelle eller målte startkoncentration er større end ± 20 %, bør resultaterne udtrykkes som tidsvægtet gennemsnit (se vejledning om beregning i tillæg 6).
If lipid content was measured on the same fish as chemical analysis for all sampling intervals, then individual concentrations should be corrected on a lipid basis and the ln(concentration, lipid corrected) plotted against depuration (day) to give C0,d and k2.
Testens formål er at bestemme testkemikaliets virkninger på formeringsevnen.
Assimilation efficiency (Equation A7.1) can then be calculated on a lipid basis, using Cfood on a lipid basis (i.e. Cfood is multiplied by the mean lipid fraction of the food).
Det totale antal levende afkom pr. forældredyr bør beregnes for hver beholder (dvs. hver replikat).
Subsequent calculation using Equation A7.4 and Equation A7.5 will give the lipid-corrected (and growth-dilution corrected) BMF directly.
Desuden kan formeringen beregnes på grundlag af levende afkom efter den overlevende forældreorganisme.
Otherwise, the mean lipid fraction (w/w) in the fish and in the food are derived for both treatment and control groups (for food and control group fish this is usually from data measured at exposure start and end; for treatment group fish this is usually from data measured at end of exposure only).
Men den økologisk mest relevante responsvariabel er det samlede antal levende afkom pr. forældredyr, som ikke dør ved en fejl [58] eller utilsigtet [59] under testen.
In some studies, fish lipid content may increase markedly; in such cases it is more appropriate to use a mean test fish lipid concentration calculated from the measured values at the end of exposure and end of depuration.
Hvis forældredyret dør utilsigtet eller ved en fejl under forsøget eller viser sig at være af hankøn, udelukkes replikatet fra analysen.
In general, data from the treatment group only should be used to derive both of the lipid fractions.
Analysen vil så blive baseret på et reduceret antal replikater.
The lipid-correction factor (Lc) is calculated as:
Når LOEC og NOEC eller ECx bruges til at udtrykke virkningerne, anbefales det at beregne virkningen på formering ved hjælp af begge ovennævnte responsvariabler, dvs.
[Equation A7.8]
som det samlede antal levende afkom pr. forældredyr, der ikke dør utilsigtet eller ved en fejl under testen, og
where Lfish and Lfood are the mean lipid fractions in fish and food, respectively.
som antal levende afkom pr. overlevende forældredyr,
The lipid-correction factor is used to calculate the lipid-corrected biomagnification factor (BMFL):
og derefter som det endelige resultat bruge den laveste NOEC- og LOEC- eller ECx -værdi, der beregnes ved hjælp af en af disse to responsvariabler.
[Equation A7.9]
Før den statistiske analyse anvendes, f.eks. ANOVA-procedurer, sammenholdelse af behandlinger og kontroller ved hjælp af Student t-test, Dunnetts test, Williams' test eller stepdown Jonckheere-Terpstra test, anbefales det at overveje at transformere data for at opfylde kravene i den pågældende statistiske test.
EVALUATION OF DIFFERENCES BETWEEN MEASURED TIME ZERO CONCENTRATION (C0,M) AND DERIVED TIME ZERO CONCENTRATION (C0,D)
Som ikke-parametriske alternativer kan Dunns eller Mann-Whitneys test overvejes.
The measured time zero concentration (C0,m) and derived time zero concentration (C0,d) should be compared.
Normalfordeling og varianshomogenitet kan testes ved hjælp af en passende statistisk test, f.eks. Shapiro-Wilk og Levene test (p ≤ 0,05).
If they are very similar, then this supports the first order model used to derive the depuration parameters.
Der kan foretages en envejs-ANOVA-test og efterfølgende multisammenligningstest.
In some studies there may be a marked difference between the derived time zero value, C0,d, and the mean measured time zero concentration.
Multisammenligninger (f.eks. Dunnetts test) eller step-down trend test (f.eks. Williams' test eller en step-down Jonckheere-Terpstra-test) kan benyttes til at beregne, om der er signifikante forskelle (p ≤ 0,05) mellem kontrollerne og de forskellige testkemikaliekoncentrationer (valg af den anbefalede test ifølge OECD Guidance Document 54 (4)).
C0,m (see last bullet point of paragraph 159 of this test method).
Alternativt kan ikke-parametriske metoder (f.eks. Bonferroni-U-test ifølge Holm eller Jonckheere-Terpstras trend test) benyttes til at fastslå NOEC og LOEC.
If C0,d is very much lower than C0,m (C0,d << C0,m), the difference may suggest the presence of undigested spiked food in the gut.
Er der udført en grænsetest (sammenligning af kontrol og kun en behandlingsprøve), og forudsætningerne for parametriske testprocedurer (normalitet og homogenitet) er opfyldt, kan metrisk respons vurderes ved Student-testen (t-test).
This may be tested experimentally by conducting separate analysis on the excised gut if additional (whole fish) samples were taken and stored at the end of the uptake phase.
En t-test med ulige varians (Welch t-test) eller en ikke-parametrisk test, f.eks. Mann-Whitney-U-testen, kan bruges, hvis disse krav ikke er opfyldt.
Otherwise, if a statistically valid outlier test applied to the depuration phase linear regression indicates that the first sample point of depuration is erroneously elevated, carrying out the linear regression to derive k2 but omitting the first depuration concentration point may be appropriate.
For at fastslå, om der er signifikante forskelle mellem kontrollerne (kontrol og opløsningsmiddel-/dispergeringsmiddelkontrol), kan replikaterne af hver kontrol testes som beskrevet for grænsetesten.
In such cases, if the uncertainty in the linear regression is greatly decreased, and it is clear that approximately first order depuration kinetics were obeyed, it may be appropriate to use the resulting C0,d and k2 values in the assimilation efficiency calculation.
Hvis disse test ikke viser signifikante forskelle, kan alle replikater af kontrol og opløsningsmiddelkontrol pooles.
This should be fully justified in the report.
I modsat fald bør alle behandlinger sammenlignes med opløsningsmiddelkontrollen.
It is also possible that non-first order kinetics were operating in the depuration phase.
Testrapporten indeholder følgende:
If this is likely (i.e. the natural logarithm transformed data appear to follow a curve compared with the straight-line linear regression plot), then the calculations of k2 and C0,d are unlikely to be valid and the advice of a biostatician should be sought.
fysisk beskaffenhed og relevante fysisk-kemiske egenskaber
If C0,d is very much higher than the measured value (C0,d >> C0,m) this may indicate: that the substance was depurated very fast (i.e. sampling points approached the limit of quantification of the analytical method very early in the depuration phase, cf.
kemiske identifikationsdata, herunder renhed.
Section 6 below); that there was a deviation from first order depuration kinetics; that the linear regression to derive k2 and C0,d is flawed; or that a problem with the measured concentrations in the study occurred at some sampling time points.
klonen (om den er genotypebestemt), leverandør eller kilde (hvis kendt) og de anvendte dyrkningsbetingelser.
In such cases the linear regression plot should be scrutinised for evidence of samples at or near the limit of quantification, for outliers and for obvious curvature (suggestive of non-first order kinetics), and highlighted in the report.
Hvis en anden art end Daphnia magna anvendes, anføres og begrundes dette.
Any subsequent re-evaluation of the linear regression to improve estimated values should be described and justified.
den anvendte testprocedure (f.eks. semistatisk eller gennemstrømning, volumen, antal dafnier pr. liter)
If marked deviation from first order kinetics is observed, then the calculations of k2 and C0,d are unlikely to be valid and the advice of a biostatician should be sought.
lysperiode og lysintensitet
GUIDANCE FOR VERY FAST DEPURATING TEST SUBSTANCES
testdesign (f.eks. antal replikater, antal forældredyr pr. replikat)
As discussed in paragraph 129 of the test method, some substances may depurate so fast that a reliable time zero concentration, C0,d, and k2 cannot be derived because in samples very early in the depuration phase (i.e. from the second depuration sample onwards) the substance is effectively no longer measured (concentrations reported at the limit of quantification).
oplysninger om anvendt dyrkningsmedium
This situation was observed in the ring test carried out in support of this test method with benzo[a]pyrene, and has been documented in the validation report for the method.
eventuel tilsætning af organisk materiale, herunder sammensætning, kilde, fremstillingsmetode, stamopløsningers TOC/COD, vurdering af resulterende TOC/COD i testmediet
In such cases linear regression cannot be carried out reliably, and is likely to give an unrealistically high estimate of C0,d, resulting in an apparent assimilation efficiency much greater than 1.
detaljeret information om fodring, herunder mængde (i mg C/dafnie/døgn) og plan (f.eks. fodertype(r)), herunder algernes specifikke navn (art) og, hvis kendt, stamme og dyrkningsbetingelser
It is possible to calculate a conservative estimate of k2 and an “upper bound” BMF in these instances.
metode til fremstilling af stamopløsninger og hyppighed af fornyelse (evt. opløsningsmiddel eller dispergeringsmiddel og koncentration heraf bør opgives).
Using those data points of the depuration phase where a concentration was measured, up to and including the first “non-detect” concentration (concentration set at limit of quantification), a linear regression (using natural logarithm transformed concentration data against time) will give an estimate of k2.
resultater fra eventuelle forprøver vedrørende testkemikaliets stabilitet
For these sorts of cases this is likely only to involve two data points (e.g. sample days 1 and 2 of depuration) and then k2 can be estimated using Equation A5.22 in Appendix 5.