natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Supernatant fra leverhomogenat efter 9000 g centrifugering, dvs. ekstrakt fra rå lever.
structural chromosome damage expressed as breakage of single chromatids or breakage and reunion between chromatids.
S9-blanding
Chromosome-type aberration
Blanding af S9-leverfraktionen og andre medvirkende faktorer, som er nødvendige for at skabe metabolisk enzymaktivitet.
structural chromosome damage expressed as breakage, or breakage and reunion, of both chromatids at an identical site.
Opløsningsmiddelkontrol
Clastogen
Generelt begreb, der angiver de kontrolkulturer, som kun modtager det opløsningsmiddel, der anvendes til at opløse testkemikaliet.
any chemical which causes structural chromosomal aberrations in populations of cells or eukaryotic organisms.
Strukturel ændring
Concentrations
Ændring i kromosomstrukturen, som kan iagttages ved mikroskopi i celledelingens metafase i form af deletioner og fragmenter, intrachange og interchange.
refer to final concentrations of the test chemical in the culture medium.
Testkemikalie
Cytotoxicity
Ubehandlede kontroller
For the assays covered in this test method using cell lines, cytotoxicity is identified as a reduction in relative population doubling (RPD) or relative increase in cell count (RICC) of the treated cells as compared to the negative control (see paragraph 17 and Appendix 2).
Kulturer, der ikke modtager behandling (dvs. hverken testkemikalie eller opløsningsmiddel), men behandles sideløbende på samme måde som de kulturer, der modtager testkemikaliet.
For the assays covered in this test method using primary cultures of lymphocytes, cytotoxicity is identified as a reduction in mitotic index (MI) of the treated cells as compared to the negative control (see paragraph 18 and Appendix 2).
Tillæg 2
Endoreduplication
FORMLER TIL VURDERING AF CYTOTOKSICITET
a process in which after an S period of DNA replication, the nucleus does not go into mitosis but starts another S period.
Mitoseindeks (MI):
The result is chromosomes with 4, 8, 16…, chromatids.
Relativ forøgelse af celletal (RICC) eller relativ populationsfordobling (RPD) anbefales, da der ved begge metoder tages højde for den andel af cellepopulationen, som har delt sig.
Genotoxic
stigning i antal celler i behandlede kulturerslut – start
a general term encompassing all types of DNA or chromosome damage, including breaks, deletions, adducts, nucleotides modifications and linkages, rearrangements, gene mutations, chromosome aberrations, and aneuploidy.
stigning i antal celler i kontrolkulturerslut – start
Not all types of genotoxic effects result in mutations or stable chromosome damage.
antal populationsfordoblinger i behandlede kulturer
Mitotic index (MI)
antal populationsfordoblinger i kontrolkulturer
the ratio of cells in metaphase divided by the total number of cells observed in a population of cells; an indication of the degree of proliferation of that population.
hvor:
Mitosis
Populationsfordobling = [log (celleantal efter behandling ÷ oprindeligt celleantal)] ÷ log 2
division of the cell nucleus usually divided into prophase, prometaphase, metaphase, anaphase and telophase.
En RICC eller RPD på 53 % viser f.eks. 47 % cytotoksicitet/cytostase, og 55 % cytotoksicitet/cytostase målt ved MI betyder, at det faktiske MI er 45 % af kontrollen.
Mutagenic
Under alle omstændigheder bør antallet af celler inden behandling måles, og det samme gør sig gældende for behandlede og negative kontrolkulturer.
produces a heritable change of DNA base-pair sequences(s) in genes or of the structure of chromosomes (chromosome aberrations).
Selv om RCC (dvs. antal celler i behandlede kulturer/antal celler i kontrolkulturer) tidligere er blevet brugt som cytotoksicitetsparameter, anbefales dette ikke længere, da cytotoksiciteten kan undervurderes.
Numerical aberration
I de negative kontrolkulturer bør populationsfordobling være kompatibel med kravet om at tage prøver af celler efter behandlingen på et tidspunkt svarende til ca. 1,5 gange længden af den normale cellecyklus, og mitoseindekset bør være højt nok til at få et tilstrækkeligt antal celler i mitose og til at kunne beregne en reduktion på 50 % pålideligt.
a change in the number of chromosomes from the normal number characteristic of the cells utilised.
Del B, kapitel B.11, affattes således:
Polyploidy
Test for kromosomaberrationer i knoglemarv hos pattedyr
numerical chromosomal aberrations in cells or organisms involving entire set(s) of chromosomes, as opposed to an individual chromosome or chromosomes (aneuploidy).
Denne forsøgsmetode svarer til OECD-testvejledning (Test Guideline) 475 (2016).
p53 status
In vitro-testen for kromosomaberrationer hos pattedyr benyttes til at påvise, om et testkemikalie forårsager strukturelle kromosomafvigelser i knoglemarvceller hos dyr, normalt gnavere (2) (3) (4) (5).
p53 protein is involved in cell cycle regulation, apoptosis and DNA repair.
Der er to typer aberrationer af kromosomstrukturen, kromosomtypen og kromatidtypen.
Cells deficient in functional p53 protein, unable to arrest cell cycle or to eliminate damaged cells via apoptosis or other mechanisms (e.g. induction of DNA repair) related to p53 functions in response to DNA damage, should be theoretically more prone to gene mutations or chromosomal aberrations.
De fleste genotoksiske aberrationer er af kromatidtypen, men også aberrationer af kromosomtypen forekommer.
Relative Increase in Cell Counts (RICC)
Beskadigelse af kromosomer og lignende er årsag til mange genetiske sygdomme hos mennesker, og meget tyder på, at disse læsioner og lignende, som ændrer på onkogener og tumorsuppressorgener i somatiske celler, medvirker til induktion af kræft hos mennesker og i forsøgssystemet.
the increase in the number of cells in chemically-exposed cultures versus increase in non-treated cultures, a ratio expressed as a percentage.
Polyploidi (herunder endofordobling) kan opstå i kromosomaberrationsassays in vivo.
Relative Population Doubling (RPD)
Definitioner af den anvendte terminologi findes i tillæg 1.
supernatant of liver homogenate after 9000 g centrifugation, i.e. raw liver extract.
Der anvendes rutinemæssigt gnavere i denne test, men andre arter kan i visse tilfælde være hensigtsmæssige, såfremt det er videnskabeligt begrundet.
S9 mix
Knoglemarv er målvævet i denne test, da det er et væv med høj vaskularisation, der består af celler med kort cyklustid, som er lette at isolere og behandle.
mix of the S9 liver fraction and cofactors necessary for metabolic enzymes activity.
Den videnskabelige begrundelse for at bruge andre arter end rotter og mus bør anføres i rapporten.
Solvent control
Hvis der anvendes andre arter end gnavere, anbefales det at integrere målingen af kromosomaberrationer i knoglemarv i en anden passende toksicitetstest.
General term to define the control cultures receiving the solvent alone used to dissolve the test chemical.
Hvis der er grund til at tro, at testkemikaliet eller dets metabolit(ter) ikke vil nå frem til målvævet, er denne test ikke egnet.
Structural aberration
PRINCIPPET FOR FORSØGSMETODEN
a change in chromosome structure detectable by microscopic examination of the metaphase stage of cell division, observed as deletions and fragments, intrachanges or interchanges.
Dyrene eksponeres for testkemikaliet på passende vis og aflives humant et passende tidsrum efter eksponeringen.
Test chemical
Inden aflivningen behandles dyrene med et metafasestandsende stof (f.eks. colchicin eller colcemid).
Untreated controls
Der fremstilles derefter præparater af knoglemarvceller, som farves, og metafasecellerne undersøges for kromosomaberrationer.
cultures that receive no treatment (i.e. no test chemical nor solvent) but are processed concurrently in the same way as the cultures receiving the test chemical.
KONTROL AF LABORATORIETS KOMPETENCE
Appendix 2
Kompetenceundersøgelser
FORMULAS FOR CYTOTOXICITY ASSESSMENT
For at få tilstrækkelig erfaring med udførelsen af assayet, inden det anvendes til rutinetest, bør laboratoriet have påvist, at det kan frembringe de forventede resultater ud fra de offentliggjorte data (f.eks. (6)) for hyppigheden af kromosomaberrationer med mindst to positive kontrolkemikalier (herunder svag respons fremkaldt af lave doser af positive kontroller) som dem, der er anført i tabel 1, og med kompatible bærestof-/opløsningsmiddelkontroller (jf. punkt 22).
Mitotic index (MI):
Til disse forsøg bør der anvendes doser, der giver reproducerbare og dosisrelaterede stigninger og påviser testsystemets følsomhed og dynamiske interval i det relevante væv (knoglemarv) ved hjælp af den scoringsmetode, som skal anvendes i laboratoriet.
Number of mitotic cells
I løbet af kompetenceundersøgelserne bør laboratoriet fastlægge:
Increase in number of cells in treated culturesfinal-starting
et historisk positivt kontrolområde og en historisk positiv kontrolfordeling og
Increase in numbers of cells in control culturesfinal-starting
et historisk negativt kontrolområde og en historisk negativ kontrolfordeling.
No.of Population doublings in treated cultures
Når der første gang indhentes data til en historisk negativ kontrolfordeling, bør de samtidige negative kontroller stemme overens med offentliggjorte kontroldata, hvis sådanne findes.
No.of population doublings in control cultures
Efterhånden som der tilføjes flere forsøgsdata til den historiske kontrolfordeling, bør de samtidige negative kontroller ideelt set ligge inden for kontrolgrænsen på 95 % af denne fordeling.
where:
Laboratoriets historiske negative kontroldatabase bør være så statistisk robust, at laboratoriet kan vurdere fordelingen af deres negative kontroldata.
Population Doubling = [log (Post-treatment cell number ÷ Initial cell number)] ÷ log 2
Ifølge litteraturen kan det være nødvendigt at foretage mindst 10 forsøg, men det foretrækkes at foretage mindst 20 forsøg udført under sammenlignelige forsøgsbetingelser.
For example, a RICC, or a RPD of 53 % indicates 47 % cytotoxicity/cytostasis and 55 % cytotoxicity/cytostasis measured by MI means that the actual MI is 45 % of control.
Laboratorierne bør anvende kvalitetskontrolmetoder som f.eks. kontrolkort (f.eks. C-diagrammer eller X-søjlediagrammer (7)) til at identificere, hvor variable deres kontroldata er, samt vise, at metodologien er “under kontrol” i deres laboratorium.
In any case, the number of cells before treatment should be measured and the same for treated and negative control cultures.
Yderligere anbefalinger til, hvordan man opbygger og anvender de historiske data (dvs. kriterier for optagelse og udelukkelse af historiske data og acceptkriterier for et givent forsøg), kan findes i litteraturen (8).
While RCC (i.e. Number of cells in treated cultures/Number of cells in control cultures) had been used as cytotoxicity parameter in the past, is no longer recommended because it can underestimate cytotoxicity
Såfremt laboratoriet ikke gennemfører et tilstrækkeligt antal forsøg for at fastlægge en statistisk robust negativ kontrolfordeling (jf. punkt 11) under kompetenceundersøgelserne (beskrevet i punkt 9), kan det accepteres at opbygge fordelingen under de første rutinetest.
In the negative control cultures, population doubling should be compatible with the requirement to sample cells after treatment at a time equivalent to about 1,5 normal cell cycle length and mitotic index should be higher enough to get a sufficient number of cells in mitosis and to reliably calculate a 50 % reduction.
Denne fremgangsmåde bør følge anbefalingerne i litteraturen (8), og de negative kontrolresultater, der opnås i disse forsøg, bør stemme overens med de offentliggjorte negative kontroldata.
In Part B, Chapter B.11 is replaced by the following:
Der bør tages hensyn til eventuelle ændringer af forsøgsprotokollen med hensyn til, om de påvirker resultaterne på en måde, der stemmer overens med laboratoriets eksisterende historiske kontroldatabaser.
Mammalian Bone Marrow Chromosomal Aberration Test
Kun store uoverensstemmelser bør føre til, at der etableres en ny historisk kontroldatabase, hvor eksperter vurderer, at den adskiller sig fra den tidligere fordeling (jf. punkt 11).
This test method is equivalent to OECD test guideline 475 (2016).
Under genetableringen er der muligvis ikke behov for en fuldstændig negativ kontroldatabase for at give mulighed for at foretage en faktisk test, hvis laboratoriet kan påvise, at deres sideløbende negative kontrolværdier forbliver enten forenelige med deres tidligere database eller med de tilsvarende offentliggjorte data.
The mammalian in vivo bone marrow chromosomal aberration test is especially relevant for assessing genotoxicity because, although they may vary among species, factors of in vivo metabolism, pharmacokinetics and DNA-repair processes are active and contribute to the responses.
Negative kontroldata bør bestå af forekomsten af aberrationer i kromosomernes struktur (dog ikke gaps) hos hvert enkelt dyr.
An in vivo assay is also useful for further investigation of genotoxicity detected by an in vitro system.
Sideløbende negative kontroller bør ideelt set ligge inden for kontrolgrænsen på 95 % af fordelingen af laboratoriets historiske negative kontroldatabase.
The mammalian in vivo chromosomal aberration test is used for the detection of structural chromosome aberrations induced by test chemicals in bone marrow cells of animals, usually rodents (2) (3) (4) (5).
Såfremt data fra sideløbende negative kontroller falder uden for kontrolgrænsen på 95 %, kan de eventuelt optages i den historiske kontrolfordeling, så længe disse data ikke er ekstreme afvigende værdier, og der er dokumentation for, at testsystemet er “under kontrol” (jf. punkt 11) og for, at der ikke er begået tekniske eller menneskelige fejl.
Structural chromosomal aberrations may be of two types, chromosome or chromatid.
Valg af dyreart
While the majority of genotoxic chemical-induced aberrations are of the chromatid-type, chromosome-type aberrations also occur.
Der bør anvendes raske unge voksne dyr af sædvanligt benyttede laboratoriestammer.
Chromosomal damage and related events are the cause of many human genetic diseases and there is substantial evidence that, when these lesions and related events cause alterations in oncogenes and tumour suppressor genes, they are involved in cancer in humans and experimental systems.
Der anvendes sædvanligvis rotter, men mus kan også anvendes.
Polyploidy (including endoreduplication) could arise in chromosome aberration assays in vivo.
En hvilken som helst anden pattedyrsart kan anvendes, hvis dette begrundes videnskabeligt i rapporten.
However, an increase in polyploidy per se does not indicate aneugenic potential and can simply indicate cell cycle perturbation or cytotoxicity.
Miljø og fodringsbetingelser
An in vivo mammalian erythrocyte micronucleus test (Chapter B.12 of this Annex) or the in vitro mammalian cell micronucleus test (Chapter B.49 of this Annex) would be the in vivo and in vitro tests, respectively, recommended for the detection of aneuploidy.
Temperaturen i dyrerummet bør for gnavere være 22 °C (± 3 °C).
Definitions of terminology used are set out in Appendix 1.
Den relative luftfugtighed bør ideelt set være 50-60 %, dog mindst 40 % og helst ikke over 70 % bortset fra under rengøring af rummet.
Rodents are routinely used in this test, but other species may in some cases be appropriate if scientifically justified.
Som foder kan anvendes sædvanligt laboratoriefoder med ubegrænset adgang til drikkevand.
Bone marrow is the target tissue in this test since it is a highly vascularised tissue and it contains a population of rapidly cycling cells that can be readily isolated and processed.
Valget af føde kan påvirkes af behovet for at sikre en passende iblanding af et testkemikalie, når dette indgives ad denne vej.
The scientific justification for using species other than rats and mice should be provided in the report.
Gnavere bør opbevares i små grupper (højst fem dyr pr. bur) af samme køn og behandlingsgruppe, såfremt der ikke forventes aggressiv adfærd, fortrinsvist i solide gulvbure med passende miljøberigelse.
If species other than rodents are used, it is recommended that the measurement of bone marrow chromosomal aberration be integrated into another appropriate toxicity test.
Dyr bør kun opbevares individuelt, hvis dette er sagligt begrundet.
If there is evidence that the test chemical(s), or its metabolite(s), will not reach the target tissue, it may not be appropriate to use this test.
Klargøring af dyrene
PRINCIPLE OF THE TEST METHOD
Der anvendes normalt sunde unge voksne dyr (for gnavere ideelt set 6-10 uger gamle ved behandlingens start, selv om lidt ældre dyr også accepteres), som fordeles tilfældigt i kontrol- og behandlingsgrupperne.
Animals are exposed to the test chemical by an appropriate route of exposure and are humanely euthanised at an appropriate time after treatment.
De enkelte dyr identificeres unikt ved hjælp af en human og minimalt invasiv metode (f.eks. med ring, mærke, mikrochip eller biometrisk identifikation, men ikke øre- eller tåklipning) og akklimatiseres til laboratoriebetingelserne i mindst fem dage.
Prior to euthanasia, animals are treated with a metaphase-arresting agent (e.g. colchicine or colcemid).
Burene indrettes på en sådan måde, at de mulige følger af burets placering minimeres.
Chromosome preparations are then made from the bone marrow cells and stained, and metaphase cells are analysed for chromosomal aberrations.
Krydskontaminering af den positive kontrol og testkemikaliet bør undgås.
VERIFICATION OF LABORATORY PROFICIENCY
Ved undersøgelsens start bør variationen i dyrenes vægt være minimal og ikke overstige ± 20 % af gennemsnitsvægten for hvert køn.
Proficiency Investigations
Fremstilling af doser
In order to establish sufficient experience with the conduct of the assay prior to using it for routine testing, the laboratory should have demonstrated the ability to reproduce expected results from published data (e.g. (6)) for chromosomal aberration frequencies with a minimum of two positive control chemicals (including weak responses induced by low doses of positive controls), such as those listed in Table 1 and with compatible vehicle/solvent controls (see paragraph 22).
Faste testkemikalier opløses eller suspenderes i passende opløsningsmidler eller bærestoffer eller iblandes føde eller drikkevand før indgivelse i dyrene.
These experiments should use doses that give reproducible and dose related increases and demonstrate the sensitivity and dynamic range of the test system in the tissue of interest (bone marrow) and using the scoring method to be employed within the laboratory.
Flydende testkemikalier kan indgives direkte eller opløses før indgivelse.
This requirement is not applicable to laboratories that have experience, i.e. that have a historical database available as defined in paragraphs 10-14.
Til inhalationseksponering kan testkemikalier indgives som gas, damp eller en fast/flydende aerosol, afhængigt af deres fysisk-kemiske egenskaber.
Historical Control Data
Der bør anvendes friske præparater af testkemikaliet, medmindre stabilitetsdata påviser, at opbevaring er acceptabelt, og hensigtsmæssige opbevaringsbetingelser bør defineres.
During the course of the proficiency investigations, the laboratory should establish:
Opløsningsmiddel/bærestof
A historical positive control range and distribution, and
Opløsningsmidlet/bærestoffet må ikke have toksiske virkninger ved de benyttede doser og må ikke mistænkes for at reagere kemisk med testkemikaliet.
A historical negative control range and distribution.
Hvis der anvendes andre opløsningsmidler/bærestoffer end de velkendte, bør deres anvendelse understøttes af referencedata om deres kompatibilitet.
When first acquiring data for a historical negative control distribution, concurrent negative controls should be consistent with published control data, where they exist.
Det anbefales så vidt muligt først at overveje at anvende vandige opløsningsmidler/bærestoffer.
As more experimental data are added to the historical control distribution, concurrent negative controls should ideally be within the 95 % control limits of that distribution.
Eksempler på almindeligt anvendte kompatible opløsningsmidler/bærestoffer omfatter vand, fysiologisk saltvand, methylcelluloseopløsning, saltopløsning af carboxymethylcellulosenatrium, olivenolie og majsolie.
The laboratory's historical negative control database should be statistically robust to ensure the ability of the laboratory to assess the distribution of their negative control data.
I fravær af historiske eller offentliggjorte kontroldata, der viser, at et valgt atypisk opløsningsmiddel/bærestof ikke frembringer strukturelle aberrationer eller andre skadelige virkninger, bør der foretages en indledende undersøgelse for at fastlægge, om opløsningsmiddel-/bærestofkontrollen kan accepteres.
The literature suggests that a minimum of 10 experiments may be necessary but would preferably consist of at least 20 experiments conducted under comparable experimental conditions.
Positive kontroller
Laboratories should use quality control methods, such as control charts (e.g. C-charts or X-bar charts (7)), to identify how variable their data are, and to show that the methodology is ‘under control’ in their laboratory.
Hver test bør normalt omfatte en gruppe dyr, der behandles med et positivt kontrolkemikalie.
Further recommendations on how to build and use the historical data (i.e. criteria for inclusion and exclusion of data in historical data and the acceptability criteria for a given experiment) can be found in the literature (8).
Dette krav kan fraviges, hvis testlaboratoriet har påvist, at det er kompetent til at udføre testen og har fastlagt et historisk positivt kontrolområde.
Where the laboratory does not complete a sufficient number of experiments to establish a statistically robust negative control distribution (see paragraph 11) during the proficiency investigations (described in paragraph 9), it is acceptable that the distribution can be built during the first routine tests.
Såfremt der ikke indgår en sideløbende positiv kontrolgruppe, bør hvert enkelt forsøg omfatte scoringskontroller (fikserede og ufarvede objektglas).
This approach should follow the recommendations set out in the literature (8) and the negative control results obtained in these experiments should remain consistent with published negative control data.
Disse kan opnås ved i scoringen af undersøgelsen at inkludere passende referenceprøver, som er hentet og opbevaret fra et særskilt positivt og periodisk udført kontrolforsøg (f.eks. hver 6.-18. måned) i det laboratorium, hvor testen udføres, f.eks. under kompetencetest og derefter regelmæssigt, hvor det er nødvendigt.
Any changes to the experimental protocol should be considered in terms of their impact on the resulting data remaining consistent with the laboratory's existing historical control database.
Positive kontrolkemikalier bør frembringe en påviselig forøgelse af celler med strukturelle kromosomaberrationer over det spontane niveau.
Only major inconsistencies should result in the establishment of a new historical control database, where expert judgement determines that it differs from the previous distribution (see paragraph 11).
Der bør vælges sådanne doser i de positive kontrolprøver, at virkningerne er tydelige, uden dog at de kodede prøvers identitet umiddelbart afsløres for den, der bedømmer dem.
During the re-establishment, a full negative control database may not be needed to permit the conduct of an actual test, provided that the laboratory can demonstrate that their concurrent negative control values remain either consistent with their previous database or with the corresponding published data.
Det kan accepteres, at den positive kontrol administreres på anden vis end testkemikaliet ved hjælp af et andet behandlingsprogram, eller at prøveudtagningen kun forekommer på et bestemt tidspunkt.
Negative control data should consist of the incidence of structural chromosomal aberration (excluding gaps) in each animal.
Hvis det er hensigtsmæssigt, bør der anvendes kemisk beslægtede positive kontrolkemikalier.
Concurrent negative controls should ideally be within the 95 % control limits of the distribution of the laboratory's historical negative control database.