natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Kapitel C.26 affattes således:
Excursion into concentration bands below or above these values is occasionally unavoidable and necessary, for example, when respiration is heavily suppressed and consequently very slow or if a particular activated sludge respires very quickly.
26 LEMNA SP.
This is acceptable provided the extended sections of the uptake graph are straight and their gradients do not change as they pass through the 2,0 mg/l or 7,0 mg/l O2 boundaries.
VÆKSTHÆMNINGSTEST
Any curved sections of the graph indicate that the measurement system is stabilising or the uptake rate is changing and should not be used for the calculation of respiration rates.
Denne testmetode svarer til OECD Test Guideline (TG) 221 (2006).
The oxygen uptake rate should be expressed in milligrammes per litre per hour (mg/lh) or milligrammes per gramme dry sludge per hour (mg/gh).
Den anvendes til at vurdere kemikaliers toksicitet for akvatiske ferskvandsplanter af slægten Lemna (andemad).
The oxygen consumption rate, R, in mg/lh, may be calculated or interpolated from the linear part of the recorded oxygen decrease graph according to Equation 1:
Den er baseret på eksisterende metoder (1)(2)(3)(4)(5)(6), men der er foretaget ændringer, som afspejler den senere tids forskning og drøftelser vedrørende en række vigtige punkter.
is the oxygen concentration at the beginning of the selected section of the linear phase (mg/l);
I denne testmetode beskrives toksicitetstestning med Lemna gibba og Lemna minor, der begge har været genstand for omfattende undersøgelser og er omhandlet i ovennævnte standarder.
is the time interval between these two measurements (min.).
Taksonomien for Lemna spp. er vanskelig, idet den kompliceres af, at der findes en bred vifte af fænotyper.
The specific respiration rate (Rs) is expressed as the amount of oxygen consumed per g dry weight of sludge per hour (mg/gh) according to Equation 2:
Genetisk variation i Lemnas respons på giftstoffer kan forekomme, men de aktuelt foreliggende oplysninger om denne kilde til variation er utilstrækkelige som grundlag for at anbefale en bestemt klon til brug i nærværende testmetode.
Rs= R/SS
Det skal bemærkes, at testen ikke udføres axenisk, men nogle af testprocessens trin er foranstaltninger, der skal holde kontamineringen med andre organismer nede på et minimum.
where SS is the concentration of suspended solids in the test mixture (g/l).
Der gives en nærmere beskrivelse af testning med udskiftning af testopløsningen (semistatisk test og gennemstrømningstest) og uden udskiftning (statisk).
The different indices of R which may be combined are:
Afhængigt af målsætningen for testen og myndighedernes krav anbefales det at overveje brug af den semistatiske metode og gennemstrømningsmetoden f.eks. til kemikalier, der hurtigt forlader opløsningen ved fordampning, fotonedbrydning, udfældning eller bionedbrydning.
S specific rate
Nærmere anvisninger er givet i (8).
T total respiration rate
Eksponentielt voksende plantekulturer af slægten Lemna dyrkes som monokultur ved forskellige koncentrationer af testkemikaliet i syv dage.
N rate due to nitrification respiration
Testens formål er at kvantificere kemikalierelaterede virkninger på den vegetative vækst i dette tidsrum, baseret på vurdering af udvalgte målevariable.
H rate due to heterotrophic respiration
Bladantallet er den primære målevariabel.
A rate due to abiotic processes
Der måles desuden mindst en anden målevariabel (totalt bladareal, tørvægt eller frisk vægt), da nogle kemikalier kan påvirke andre målevariable langt mere end bladantallet.
B rate based on blank assays (mean)
De kemikalierelaterede virkninger kvantificeres ved, at væksten i testopløsningerne sammenholdes med væksten i kontrollerne, hvorudfra man bestemmer den koncentration, som frembringer en bestemt hæmning på x % (f.eks. 50 %) af væksthastigheden, og som betegnes ECx (f.eks. EC50).
Calculation of oxygen uptake rate due to nitrification
Testens endepunkt er hæmning af væksten, der er udtrykt som den logaritmiske stigning i målevariablen (den gennemsnitlige specifikke væksthastighed) i eksponeringsperioden.
The relationship between total respiration (RT), nitrification respiration (RN) and heterotrophic respiration (RH) is given by Equation 3:
I denne metode anvendes udbytte som en supplerende responsvariabel, der kan være nødvendig for at efterkomme myndighedsbestemmelser i visse lande.
is the rate of oxygen uptake due to nitrification (mg/lh); R T
Udbyttet defineres som værdien af målevariablene ved eksponeringsperiodens slutning minus værdien af variablene ved eksponeringsperiodens start.
is the measured rate of oxygen uptake by the blank control (no ATU; FB) (mg/lh).
Der skal foreligge en tilstrækkeligt følsom analysemetode til kvantitativ bestemmelse af kemikaliet i testsubstratet.
is the measured rate of oxygen uptake of the blank control with added ATU (FN) (mg/lh).
Af oplysninger om testkemikaliet, der kan være nyttige ved fastsættelse af testbetingelserne, kan nævnes strukturformel, renhed, vandopløselighed, stabilitet i vand, lysstabilitet, pKa, Kow, damptryk og bionedbrydelighed.
This relationship is valid for blank values (RNB, RTB, RHB), abiotic controls (RNA, RTA, RHA) and assays with test chemicals (RNS, RTS, RHS) (mg/gh).
Vandopløseligheden og damptrykket kan bruges til at beregne Henrys konstant, som angiver, om der kan forventes væsentligt tab af testkemikalie i løbet af testperioden.
Specific respiration rates are calculated from:
Når regulering af testsubstratets pH er særlig vigtig, f.eks. ved testning af metaller eller hydrolytisk ustabile kemikalier, anbefales det at tilsætte en buffer til næringssubstratet (se punkt 21).
RHS= RH/SS
I (8) findes der yderligere vejledning i testning af kemikalier, hvis fysisk-kemisk egenskaber vanskeliggør testning.
If RN is insignificant (e.g. < 5 % of RT in blank controls) in a preliminary test, it may be assumed that the heterotrophic oxygen uptake equals the total uptake and that no nitrification is occurring.
For at testen er valid, skal fordoblingstiden for bladantallet i kontrollen være mindre end 2,5 dage (60 t.), tilnærmelsesvis svarende til en syvdobling på syv dage eller en gennemsnitlig specifik væksthastighed på 0,275 d– 1.
An alternative source of activated sludge would be needed if the tests were to consider effects on heterotrophic and nitrifying micro-organisms.
Med de testsubstrater og testbetingelser, der er beskrevet i denne testmetode, kan dette kriterium opfyldes ved at gennemføre testen under statiske betingelser (5).
A definitive test is performed if there is evidence of suppressed oxygen uptake rates with different test chemical concentrations.
Kriteriet forventes desuden at kunne opfyldes under semistatiske forhold og med gennemstrømning.
Calculation of percentage of inhibition
Beregningen af fordoblingstiden er vist i punkt 49.
The percentage inhibition, IT, of total oxygen consumption at each concentration of test chemical, is given by Equation 7:
Til kontrol af testmetoden kan der testes et eller flere referencekemikalier, f.eks. 3,5-dichlorphenol, som er anvendt i den internationale ringtest (7).
Similarly, the percentage inhibition of heterotrophic oxygen uptake, IH, at each concentration of test chemical, is given by Equation 8:
Det tilrådes, at testning af et referencekemikalie finder sted mindst to gange årligt eller, hvis testningsfrekvensen er lavere, sideløbende med toksicitetsbestemmelsen af et testkemikalie.
Finally, the inhibition of oxygen uptake due to nitrification, IN, at each concentration, is given by Equation 9:
Glasapparatur, der anvendes til dyrkning og testning, skal være renset for kemiske kontaminanter, der kan udvaskes i testsubstratet, og skal være sterilt.
Inhibition curves are plotted for each aeration period of 3 h or additionally after 30 min.
Testbeholderne skal være tilstrækkeligt vide til, at blade fra forskellige kolonier i kontrolbeholderne kan vokse uden at overlappe hinanden ved testens slutning.
The concentration of test chemical which inhibits the oxygen uptake by 50 % (EC50) should be calculated or interpolated from the graph.
Rødderne må gerne røre bunden af testbeholderen, men en mindste dybde på 20 mm og et mindste rumfang på 100 ml i hver testbeholder tilrådes.
If suitable data are available, the 95 % confidence limits of the EC50, the slope of the curve, and suitable values to mark the beginning of inhibition (for example, EC10 or EC20) and the end of the inhibition range (for example, EC80 or EC90) may be calculated or interpolated.
Valget af testbeholder er ikke afgørende, når blot disse krav er opfyldt.
It should be noted that in view of the variability often observed in the results, it may in many cases be sufficient to express the results additionally in order of magnitude, for example:
Bægerglas, krystallisationsskåle eller petriskåle af glas med passende mål har alle vist sig velegnede.
1 mg/l to 10 mg/l
Testbeholderne skal have låg, der nedsætter fordampning og utilsigtet kontaminering til et minimum og samtidig tillader det nødvendige luftskifte.
10 mg/l to 100 mg/l
Testbeholderne, og især disses låg, må ikke skygge eller ændre lysets spektrale sammensætning.
> 100mg/l
Kulturerne og testbeholderne må ikke opbevares sammen.
Interpretation of results
Dette opnås bedst ved, at vækstkamre, inkubatorer eller lokaler er separate.
ECx-values including their associated lower and upper 95 % confidence limits for the parameter are calculated using appropriate statistical methods (e.g. probit analysis, logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method or simple interpolation (11)).
Belysning og temperatur skal kunne reguleres og holdes på et konstant niveau (se punkt 35-36).
An ECx is obtained by inserting a value corresponding to x % of the control mean into the equation found.
Testorganisme
To compute the EC50 or any other ECx, the per-treatment means (x) should be subjected to regression analysis.
Som testorganisme anvendes i denne test enten Lemna gibba eller Lemna minor.
NOEC estimation
Tillæg 2 indeholder en kort beskrivelse af de arter af andemad, der er blevet anvendt til toksicitetstestning.
If a statistical analysis is intended to determine the NOEC, per-vessel statistics (individual vessels are considered as replicates) are necessary.
Plantemateriale kan fås fra en kultursamling, fra et andet laboratorium eller i felten.
Appropriate statistical methods should be used according to the OECD Document on Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data:
Er planterne indsamlet i felten, skal de opbevares i mindst otte uger i kultur i samme substrat, som benyttes til testningen, før de anvendes.
a Guidance to Application (11).
Indsamlingssteder for startkulturer i felten skal være fri for åbenlyse forureningskilder.
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed (smaller) hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Der skal anvendes monokulturer, som er fri for synlig kontaminering med andre organismer såsom alger og protozoer.
physico-chemical properties of the test chemical (e.g. log Kow, water solubility, vapour pressure, Henry's constant (H) and possible information on the fate of the test chemical e.g. adsorption to activated sludge);
Sunde planter af L. minor består af kolonier på mellem to og fem blade, mens sunde kolonier af L. gibba kan bestå af op til syv blade.
Test system
De testede planters kvalitet og ensartethed har stor indflydelse på testresultatet, hvorfor de bør udvælges nøje.
source, conditions of operation of the wastewater treatment plant and influent it receives, concentration, pre-treatment and maintenance of the activated sludge;
Der skal anvendes unge, hurtigtvoksende planter uden synlige forandringer eller misfarvning (chlorose).
test temperature, pH during the test and duration of the exposure phase(s);
Kulturer af god kvalitet er kendetegnet ved en høj andel af kolonier med mindst to blade.
Results
Et stort antal enkeltblade er tegn på miljøbelastning som f.eks. begrænset adgang til næringsstoffer, og plantemateriale fra sådanne kulturer bør ikke anvendes til testning.
specific oxygen consumption of the controls (mg O2/(g sludge × h);
For at undgå at skulle vedligeholde kulturerne så ofte (f.eks. når Lemna-test ikke påtænkes anvendt i en periode), kan kulturerne opbevares ved reduceret belysning og temperatur (4-10 °C).
and, if possible, 95 per cent confidence limits, possibly EC20, EC80;
En nærmere beskrivelse af dyrkningen er givet i tillæg 3.
possibly NOEC and the used statistical methods, if the EC50 cannot be determined;
Hvis der er tydelige tegn på kontaminering med alger eller andre organismer, kan det være nødvendigt at udtage en delprøve af Lemna-blade, som overfladesteriliseres og derefter overføres til frisk substrat (se tillæg 3).
results for total, and if appropriate, heterotrophic and nitrification inhibition;
I så fald kasseres resten af den kontaminerede kultur.
abiotic oxygen uptake in the physico-chemical control (if used);
Mindst syv dage før testning overføres et tilstrækkeligt antal kolonier aseptisk til frisk, sterilt substrat og dyrkes i 7-10 dage under testbetingelserne.
name of the reference chemical and results with this chemical;
Testmedium
all observations and deviations from the standard procedure, which could have influenced the result.
Der anbefales forskellige substrater til Lemna minor og Lemna gibba som beskrevet nedenfor.
Current approaches in the statistical analysis of ecotoxicity data:
Det må nøje overvejes, om der skal anvendes pH-buffer i testsubstratet (MOPS (4-morpholinpropansulfonsyre, CAS-Nr.: 1132-61-2) i L. minor-substrat og NaHCO3 i L. gibba-substrat), hvis det mistænkes for at kunne reagere med testkemikaliet og påvirke tegnene på dets toksicitet.
a guidance to application, Series on testing and assessment No. 54, ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
Steinberg-substrat (9) er ligeledes acceptabelt, når blot validitetskriterierne er opfyldt.
The following definitions are applicable to this test method.
Til dyrkning af og testning med L. minor anbefales en modificeret version af Lemna-næringssubstratet efter svensk standard (SIS).
Chemical means a substance or a mixture.
Sammensætningen af dette substrat er givet i tillæg 4.
ECx (Effect concentration for x % effect) is the concentration that causes an x % of an effect on test organisms within a given exposure period when compared with a control.
Til dyrkning af og testning med L. gibba anbefales næringssubstratet 20X-AAP, som er beskrevet i tillæg 4.
For example, an EC50 is a concentration estimated to cause an effect on a test end point in 50 % of an exposed population over a defined exposure period.
Testopløsninger
In this test, the concentration corresponding to the NOEC, has no statistically significant effect (p < 0,05) within a given exposure period when compared with the control.
Testopløsninger fremstilles sædvanligvis ved fortynding af en stamopløsning.
Fig.
Stamopløsningerne af testkemikaliet fremstilles normalt ved opløsning af kemikaliet i næringssubstrat.
1:
Den højeste testede koncentration af testkemikaliet skal sædvanligvis ikke være større end kemikaliets vandopløselighed under testbetingelserne.
Examples for measuring unit
Under sådanne omstændigheder vil eksponeringen skyldes andet materiale end det opløste materiale, og alt efter testkemikaliets egenskaber kan testkoncentrationerne være større end opløseligheden i vand.
1 activated sludge
For testkemikalier med lav vandopløselighed kan det være nødvendigt at fremstille en koncentreret stamopløsning eller -dispersion af kemikaliet ved hjælp af et organisk opløsnings- eller dispergeringsmiddel for at lette tilsætning af nøjagtige mængder testkemikalie til testsubstratet og medvirke til, at det dispergeres eller opløses.
2 synthetic medium
Brug af sådanne midler bør på enhver måde søges undgået.
3 test chemical
Brug af sådanne hjælpeopløsnings- og dispergeringsmidler må ikke medføre fytotoksisk virkning.
4 air
Som eksempler på almindeligt anvendte opløsningsmidler, der er uden fytotoksisk virkning i koncentrationer på op til 100 μl/l, kan nævnes acetone og dimethylformamid.
5 mixing vessel
Nærmere anvisninger kan findes i (8).
6 magnetic stirrer
Test- og kontrolgrupper
7 oxygen measuring cell
Det vil lette valget af passende testkemikaliekoncentrationer, hvis man på forhånd kender til teststoffets toksicitet for Lemna, f.eks. fra en test til bestemmelse af dosisinterval.
8 oxygen electrode
I den endelige toksicitetstest skal der normalt være mindst fem teststofkoncentrationer, der danner en geometrisk række.
9 oxygen measuring instrument
Kvotienten mellem testkoncentrationerne skal helst ikke være over 3,2, men kan dog være større, når koncentrationsresponskurven er flad.
10 recorder
Anvendes færre end fem koncentrationer, skal dette begrundes.
Fig.
Der skal anvendes mindst tre replikater for hver testkoncentration.
2:
Ved fastsættelse af området for testkoncentrationerne (i det indledende forsøg og/eller i den endelige toksicitetstest) skal følgende tages i betragtning:
Example of measuring unit, using a BOD bottle
En ECx-værdi skal ligge i det område, testkoncentrationerne dækker, for at den kan bestemmes med et tilstrækkeligt konfidensniveau.
1 Test vessel
Ved beregning af en EC50-værdi skal den højeste testkoncentration således være større end EC50-værdien.
2 oxygen electrode
Ligger EC50-værdien uden for testkoncentrationernes område, bliver de tilhørende konfidensintervaller store, så det kan blive umuligt at foretage en pålidelig vurdering af modellens statistiske fit.
3 oxygen measuring instrument
Hvis målet er at bestemme en LOEC-/NOEC-værdi, skal den laveste testkoncentration være så lav, at væksten ikke er væsentligt lavere end i kontrollen.
Fig.
Desuden skal den højeste testkoncentration være så høj, at væksten er væsentligt mindre end i kontrollen.
3:
Er det ikke tilfældet, må testen gentages med et andet koncentrationsområde (medmindre den højeste koncentration svarer til opløselighedsgrænsen eller til den maksimalt krævede grænsekoncentration, f.eks. 100 mg/l).
Example of inhibition curves
Hver test skal omfatte kontroller med samme næringssubstrat, samme antal blade og kolonier og samme miljøbetingelser og procedurer som testbeholderne, men uden testkemikalie.
X concentration of 3,5-dichlorophenol (mg/l)
Hvis der anvendes et opløsnings- eller dispergeringsmiddel, skal der indgå en ekstra kontrolbehandling med samme koncentration af opløsnings-/dispergeringsmiddel som i testbeholderne med testkemikalie.
Y inhibition (%)
Antallet af kontrolreplikater (og, i givet fald, prøver med opløsningsmiddel) skal mindst være lig antallet af beholdere for hver testkoncentration, og ideelt dobbelt så stort.
inhibition heterotrophic respiration using a nitrifying sludge
Hvis der ikke kræves bestemmelse af NOEC, kan testens design ændres, så der er flere forskellige koncentrationer og færre replikater for hver koncentration.
inhibition nitrification using a nitrifying sludge
Der skal dog være mindst tre replikater af kontrollerne.
Chapter C.26 is replaced by the following:
Eksponering
26 LEMNA SPECIES GROWTH INHIBITION TEST
Kolonier bestående af 2 til 4 synlige blade overføres fra podekulturen i vilkårlig rækkefølge til testbeholderne under aseptiske betingelser.
This test method is equivalent to OECD Test Guideline (TG) 221 (2006).
Hver testbeholder skal indeholde i alt 9 til 12 blade.
It is designed to assess the toxicity of chemicals to freshwater aquatic plants of the genus Lemna (duckweed).
Der skal være samme antal blade og kolonier i hver testbeholder.
It is based on existing methods (1)(2)(3)(4)(5)(6) but includes modifications of those methods to reflect recent research and consultation on a number of key issues.
Erfaringerne med brugen af metoden og oplysninger fra ringtest har vist, at tre replikater pr. behandling med 9 til 12 blade som startværdi i hver replikat er tilstrækkeligt til at påvise vækstforskelle mellem behandlingerne svarende til en hæmning på 4 til 7 %, beregnet som væksthastighed (10 til 15 %, beregnet som udbytte) (7).
This Test Method has been validated by an international ring-test (7).
Hvis en indledende stabilitetstest viser, at testkemikaliekoncentrationen ikke kan opretholdes (dvs. den målte koncentration kommer ned under 80 % af den målte startkoncentration) gennem hele testperioden (syv dage), anbefales et semistatisk testregime.
Although genetic variability in the response to toxicants can occur with Lemna, there are currently insufficient data on this source of variability to recommend a specific clone for use with this test method.
Dette gennemføres ved, at kolonierne eksponeres for friskfremstillede test- og kontrolopløsninger mindst to gange i løbet af testen (f.eks. på dag 3 og 5).
It should be noted that the test is not conducted axenically but steps are taken at stages during the test procedure to keep contamination by other organisms to a minimum.
Hyppigheden af eksponeringen for frisk substrat afhænger af testkemikaliets stabilitet.
Details of testing with renewal (semi-static and flow-through) and without renewal (static) of the test solution are described.
Meget ustabile eller flygtige kemikalier kan kræve hyppigere eksponering, for at koncentrationerne kan holdes tilnærmelsesvis konstante.
Depending on the objectives of the test and the regulatory requirements, it is recommended to consider the application of semi-static and flow through methods, e.g. for chemicals that are rapidly lost from solution as a result of volatilisation, photodegradation, precipitation or biodegradation.
I visse tilfælde kan det være nødvendigt at bruge en gennemstrømningsmetode (8)(10).
Further guidance is given in (8).
Eksponeringsscenariet ved påføring på bladene (spray) er ikke omhandlet i denne metode.
Exponentially growing plant cultures of the genus Lemna are allowed to grow as monocultures in different concentrations of the test chemical over a period of seven days.
Der henvises i stedet til (11).
The objective of the test is to quantify chemical-related effects on vegetative growth over this period based on assessments of selected measurement variables.
Inkubationsbetingelser
Frond number is the primary measurement variable.
Belysningen skal være konstant og komme fra lysstofrør med »warm« eller »cool white« lys med en styrke, der vælges i området 85-135 μE · m– 2 · s– 1, målt i det fotosyntetisk aktive spektrum (400-700 nm) i punkter med samme afstand fra lyskilden som bladene af Lemna (svarende til 6500-10000 lux).
At least one other measurement variable (total frond area, dry weight or fresh weight) is also measured, since some chemicals may affect other measurement variables much more than frond numbers.
Lysstyrken over testområdet må ikke afvige mere end ± 15 % fra den valgte lysstyrke.
To quantify chemical-related effects, growth in the test solutions is compared with that of the controls and the concentration bringing about a specified x % inhibition of growth (e.g. 50 %) is determined and expressed as the ECx (e.g. EC50)
Den anvendte metode til lysdetektion og -måling, specielt den anvendte type sensor, vil påvirke måleværdien.
The test endpoint is inhibition of growth, expressed as logarithmic increase in measurement variable (average specific growth rate) during the exposure period.
Sfæriske sensorer (som reagerer på lys fra alle vinkler over og under måleplanet) og cosinus-sensorer (som reagerer på lys fra alle vinkler over måleplanet) må foretrækkes frem for retningsbestemte sensorer og vil give højere aflæsninger fra en lyskilde bestående af mange punkter som den her beskrevne.
An additional response variable used in this Test Method is yield, which may be needed to fulfil specific regulatory requirements in some countries.
Temperaturen i testbeholderne skal være 24 °C ± 2 °C.
It is defined as measurement variables at the end of the exposure period minus the measurement variables at the start of the exposure period.
Dog vil en afvigelse på mere end 1,5 enhed ikke gøre testen ugyldig, hvis det kan dokumenteres, at validitetskriterierne er opfyldt.
An analytical method, with adequate sensitivity for quantification of the chemical in the test medium, should be available.