natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Til fremstilling af sådanne substrater skal anvendes kemikalier af reagens- eller analysekvalitet og deioniseret vand.
The strains recommended are available in unialgal cultures from the following collections (in alphabetical order):
Sammensætning af AAP-substratet (US.
37073 Göttingen
EPA) og OECD TG 201-substratet.
Appearance and characteristics of recommended species
Komponent
Appearance
MgCl2 · 6(H2O)
Curved, twisted single cells
CaCl2 · 2(H2O)
Oval, mostly single cells
MgSO4 · 7(H2O)
Rods
FeCl3 · 6(H2O)
Chains of oval cells
EDTA · 2(H2O)
Size (L × W) μm
MnCl2 · 4(H2O)
Cell volume (μm3/cell)
CoCl2 · 6(H2O)
Cell dry weight (mg/cell)
CuCl2 · 2(H2O)
3-4 × 10- 8
Det molære forhold mellem EDTA og jern er lidt over 1.
1-2 × 10- 8
Derved undgås udfældning af jern, samtidig med at chelatering af tungmetalioner minimeres.
2-3 × 10- 9
I testen med diatoméen Navicula pelliculosa skal begge substrater suppleres med Na2SiO3 · 9H20 til en koncentration på 1,4 mg Si/l.
Growth rate [3] (day- 1)
Substratets pH opnås ved ligevægt mellem substratets carbonatsystem og partialtrykket af CO2 i atmosfærisk luft.
1,5 -1,7
En omtrentlig sammenhæng mellem pH ved 25 °C og den molære bicarbonatkoncentration er givet ved:
Specific Recommendations on Culturing and Handling of Recommended Test Species
Ved 15 mg NaHCO3/l er pHeq = 7,5 (U.S. EPA-substrat), og ved 50 mg NaHCO3/l er pHeq = 8,1 (OECD-substrat).
Pseudokirchneriella subcapitata and Desmodesmus subspicatus
Testsubstraternes sammensætning af grundstoffer
These green algae are generally easy to maintain in various culture media.
Grundstof
Information on suitable media is available from the culture collections.
Fremstilling af OECD-substrat
The cells are normally solitary, and cell density measurements can easily be performed using an electronic particle counter or microscope.
Næringsstof
Various growth media may be used for keeping a stock culture.
Koncentration i stamopløsning
It is particularly important to avoid allowing the batch culture to go past log phase growth when renewing, recovery is difficult at this point.
Stamopløsning 1:
Anabaena flos-aquae develops aggregates of nested chains of cells.
makronæringsstoffer
The size of these aggregates may vary with culturing conditions.
1,5 g/l
It may be necessary to break up these aggregates when microscope counting or an electronic particle counter is used for determination of biomass.
MgCl2 · 6H2O
Sonication of sub-samples may be used to break up chains to reduce count variability.
1,2 g/l
Longer sonication than required for breaking up chains into shorter lengths may destroy the cells.
CaCl2 · 2H2O
Sonication intensity and duration must be identical for each treatment.
1,8 g/l
Count enough fields on the hemocytometer (at least 400 cells) to help compensate for variability.
MgSO4 · 7H2O
This will improve reliability of microscopic density determinations.
0,16 g/l
An electronic particle counter can be used for determination of total cell volume of Anabaena after breaking up the cell chains by careful sonification.
Stamopløsning 2:
The sonification energy has to be adjusted to avoid disruption of the cells.
jern
Use a vortex mixer or similar appropriate method to make sure the algae suspension used to inoculate test vessels is well mixed and homogeneous.
FeCl3 · 6H2O
Test vessels should be placed on an orbital or reciprocate shaker table at about 150 revolutions per minute.
EDTA · 2H2O
Alternatively, intermittent agitation may be used to reduce the tendency of Anabaena to form clumps.
Stamopløsning 3:
If clumping occurs, care must be taken to achieve representative samples for biomass measurements.
sporstoffer
Vigorous agitation before sampling may be necessary to disintegrate algal clumps.
MnCl2 · 4H2O
Synechococcus leopoliensis grows as solitary rod-shaped cells.
CoCl2 · 6H2O
The cells are very small, which complicates the use of microscope counting for biomass measurements.
CuCl2 · 2H2O
Electronic particle counters equipped for counting particles down to a size of approximately 1 μm are useful.
MoO4 · 2H2O
In vitro fluorometric measurements are also applicable.
Stamopløsning 4:
Note that silicate is required in the medium.
bicarbonat
Navicula pelliculosa may form aggregates under certain growth conditions.
50 g/l
Due to production of lipids the algal cells sometimes tend to accumulate in the surface film.
SiO3 · 9H20
Under those circumstances special measures have to be taken when sub-samples are taken for biomass determination in order to obtain representative samples.
Stamopløsningen steriliseres ved membranfiltrering (middelporediameter 0,2 μm) eller autoklavering (120 °C, 15 min).
Vigorous shaking, e.g. using a vortex mixer may be required.
Opløsningerne opbevares i mørke ved 4 °C.
Measured with electronic particle counter
Stamopløsning 2 og 4 må ikke autoklaveres, men skal steriliseres ved membranfiltrering.
Calculated from size
Næringssubstrater fremstilles ved tilsætning af et passende volumen stamopløsning 1-4 til vand:
Most frequently observed growth rate in OECD medium at light intensity approx.
Til 500 ml steriliseret vand tilsættes der:
70 μE m- 2 s- 1 and 21 °C
10 ml stamopløsning 1
Appendix 3
1 ml stamopløsning 2
Growth Media
1 ml stamopløsning 3
One of the following two growth media may be used:
Der tilsættes steriliseret vand til 1000 ml.
Original medium of OECD TG 201, also according to ISO 8692
Giv substratet tid til at ækvilibrere med atmosfærens CO2, om nødvendigt ved nogle timers gennembobling med sterilfiltreret luft.
EPA medium AAP also according to ASTM.
Fremstilling af U.S.
When preparing these media, reagent or analytical-grade chemicals should be used and deionised water.
EPA-substrat
Composition of the AAP-medium (US.
1 ml af hver stamopløsning i 2.1–2.7 tilsættes til ca. 900 ml deioniseret eller destilleret vand og fortyndes derefter til 1 liter.
EPA) and the OECD TG 201 medium.
Stamopløsninger af makronæringsstoffer fremstilles ved opløsning af nedenstående i 500 ml deioniseret eller destilleret vand.
Component
Reagens 2.1, 2.2, 2.3 og 2.4 kan kombineres til en stamopløsning.
OECD
Stamopløsning af mikronæringsstoffer (se 3).
MgCl2·6(H2O)
SiO3 · 9H2O
CaCl2·2(H2O)
Se bemærkning 1.
MgSO4·7(H2O)
Bemærkning 1:
FeCl3·6(H2O)
Anvendes kun til diatomé-testarter.
EDTA·2(H2O)
Kan tilsættes direkte (202,4 mg) eller som stamopløsning til en endelig Si-koncentration i substratet på 20 mg/l.
MnCl2·4(H2O)
Stamopløsningen af mikronæringsstoffer fremstilles ved opløsning af nedenstående i 500 ml deioniseret eller destilleret vand:
CoCl2·6(H2O)
SeO4 · 5H2O
MoO4·2(H2O)
0,005 mg, se bemærkning 2.
CuCl2·2(H2O)
Bemærkning 2:
The molar ratio of EDTA to iron slightly exceeds unity.
Bruges kun i substrat til stamkulturer af diatoméarter.
This prevents iron precipitation and at the same time, chelation of heavy metal ions is minimised.
pH justeres til 7,5 ± 0,1 med 0,1 N eller 1,0 N NaOH eller HCl.
In test with the diatom Navicula pelliculosa both media must be supplemented with Na2SiO3 ·9H20 to obtain a concentration of 1,4 mg Si/l.
Substratet filtreres over i en steril beholder, enten gennem et 0,22 μm membranfilter, hvis der skal bruges partikeltæller, eller et 0,45 μm filter, hvis der ikke skal bruges partikeltæller.
The pH of the medium is obtained at equilibrium between the carbonate system of the medium and the partial pressure of CO2 in atmospheric air.
Substratet opbevares i mørke ved ca. 4 °C, til det skal bruges.
An approximate relationship between pH at 25 oC and the molar bicarbonate concentration is:
Tillæg 4
With 15 mg NaHCO3/l, pHeq = 7,5 (U.S. EPA medium) and with 50 mg NaHCO3/l, pHeq = 8,1 (OECD medium).
Eksempel på fremgangsmåde ved dyrkning af alger
Element composition of test media
Almindelige bemærkninger
Element
Formålet med dyrkningen efter følgende metode er at fremstille algekulturer til toksicitetstest.
Preparation of OECD medium
Det skal ved hjælp af egnede metoder sikres, at algekulturerne ikke er inficeret med bakterier.
Nutrient
Axeniske kulturer kan være ønskeligt, men der skal fremstilles og anvendes monokulturer af alger.
Concentration in stock solution
Alle operationer skal udføres med steril teknik for at undgå kontaminering med bakterier og andre alger.
Stock solution 1:
Udstyr og materialer
macro nutrients
Se under testmetode:
1,5 g/l
Apparatur
MgCl2·6H2O
Metode til fremstilling af algekulturer
1,2 g/l
Alle næringssalte i substratet fremstilles som koncentrerede stamopløsninger, der opbevares mørkt og koldt.
1,8 g/l
Substratet fremstilles ved, at den korrekte mængde stamopløsning sættes til destilleret vand, idet der udvises omhu for at undgå kontaminering.
0,16 g/l
Til faste substrater tilsættes 0,8 procent agar.
Stock solution 2:
Stamkulturerne er små algekulturer, som regelmæssigt overføres til frisk substrat, og som benyttes som udgangsmateriale til testen.
FeCl3·6H2O
Stamkulturerne dyrkes i koniske kolber med et egnet substrat (volumen ca. 100 ml).
100 mg/l
Ved overførslen overføres en mængde af den »gamle« kultur med sterile pipetter til en kolbe med frisk substrat, så startkoncentrationen for hurtigtvoksende arter er ca. 100 gange mindre end i den gamle kultur.
trace elements
Hvis denne kendes, kan man skønne, ved hvilken tæthed kulturen må overføres til et nyt substrat.
MnCl2·4H2O
Forkultur
3 mg/l
Forkulturen har til formål at give en passende algemængde til podning af testkulturerne.
CoCl2·6H2O
Forkulturer inkuberes under testbetingelserne og tages i anvendelse, medens væksten stadig er eksponentiel, normalt efter 2-4 dage.
1,5 mg/l
Algekulturer, der indeholder deforme eller abnorme celler, kasseres.
CuCl2·2H2O
Tillæg 5
0,01 mg/l
Dataanalyse ved ikke-lineær regression
MoO4·2H2O
Generelle betragtninger
7 mg/l
Responsen i algetest og andre test af mikrobiel vækst — vækst af biomasse — er i sig selv en kontinuert eller metrisk variabel — en proceshastighed, når væksthastigheden anvendes, og integralet af væksthastigheden med hensyn til tiden, når biomasse vælges.
Stock solution 4:
Begge henføres til den tilsvarende gennemsnitsrespons for ikke-eksponerede kontrolreplikater, der udviser maksimal respons ved de anvendte betingelser — med lys og temperatur som de primære bestemmende faktorer i algetesten.
bicarbonate
Systemet er distribueret eller homogent, og biomassen kan betragtes som en helhed uden hensyn til enkeltceller.
50 g/l
Variansfordelingen for den type respons, der ses i et sådant system, afhænger udelukkende af eksperimentelle faktorer (dette beskrives typisk ved, at fejlen er log-normalfordelt eller normalfordelt).
SiO3·9H20
Dette er modsat typiske bioassay-responser med kvantale data, hvor det dominerende bidrag til variansen ofte antages at være de enkelte organismers tolerance (der typisk er binomialfordelt).
Sterilise the stock solutions by membrane filtration (mean pore diameter 0,2 μm) or by autoclaving (120 °C, 15 min).
Responsen fra kontrollerne er her nulniveau eller baggrundsniveau.
Store the solutions in the dark at 4 °C.
I det ukomplicerede tilfælde aftager den normaliserede eller relative respons, r, monotont fra 1 (ingen hæmning) til 0 (100 procents hæmning).
Do not autoclave stock solutions 2 and 4, but sterilise them by membrane filtration.
Bemærk, at der til alle responser er knyttet en fejl, og at tilsyneladende negative hæmningsværdier ved beregningen kan tilskrives tilfældige fejl alene.
Prepare a growth medium by adding an appropriate volume of the stock solutions 1-4 to water:
Regressionsanalyse
Add to 500 ml of sterilised water:
Modeller
10 ml of stock solution 1
Med regressionsanalyse tilstræbes det at beskrive koncentrationsresponskurven som en matematisk regressionsfunktion Y = f (C) eller oftere F(Z), hvor Z = log C. Med den omvendte funktion C = f– 1 (Y) kan der beregnes ECx-værdier, herunder EC50, EC10 og EC20, med tilhørende 95 % konfidensgrænser.
1 ml of stock solution 2
Flere forskellige enkle matematiske funktioner har vist sig velegnede til at beskrive den koncentrationsresponssammenhæng, der optræder i væksthæmningstest med alger.
1 ml of stock solution 3
Af sådanne funktioner kan nævnes den logistiske ligning, den asymmetriske Weibull-ligning og log-normalfordelingsfunktionen, der alle er S-formede kurver, der asymptotisk går mod nul for C → 0, og mod en for C → uendeligt.
1 ml of stock solution 4
Anvendelse af modeller med kontinuerte tærskelfunktioner (f.eks. »the Kooijman model for inhibition of population growth« Kooijman et al. 1996) er for nylig blevet foreslået som et alternativ til asymptotiske modeller.
Make up to 1000 ml with sterilised water.
I denne model antages, at der ikke er nogen virkninger ved koncentrationer under en bestemt tærskel, EC0+, som estimeres ved at ekstrapolere responskoncentrationsforholdet til skæring med koncentrationsaksen ved hjælp af en simpel kontinuert funktion, der ikke er differentiabel i udgangspunktet.
Allow sufficient time for equilibrating the medium with the atmospheric CO2, if necessary by bubbling with sterile, filtered air for some hours.
Bemærk, at analysen kan bestå i en simpel minimering af summer af residualkvadrater (når variansen forudsættes konstant) eller af vægtede kvadrater, når der kompenseres for variansheterogenitet.
Preparation of U.S.
Fremgangsmåde
EPA medium
Fremgangsmåden kan sammenfattes således:
Add 1 ml of each stock solution in 2.1–2.7 to approximately 900 ml of deionised or distilled water and then dilute to 1 litre.
Der vælges en passende funktion, Y = f (C), som tilpasses til dataene ved ikke-lineær regression.
Macronutrient stock solutions are made by dissolving the following into 500 ml of deionised or distilled water.
Det må foretrækkes at anvende målinger fra hver enkelt kolbe frem for gennemsnitsværdier for replikaterne, da man derved får mest mulig information fra dataene.
Reagents 2.1, 2.2, 2.3, and 2.4 can be combined into one stock solution.
Den tilpassede kurve og de målte data afsættes, og det undersøges, om tilpasningen af kurven er tilfredsstillende.
SiO3·9H2O
Analyse af residualer kan være et særdeles nyttigt redskab til dette formål.
See Note 1.
Hvis den valgte funktion for koncentrationsresponssammenhængen ikke beskriver hele kurven eller en vigtig del af denne som f.eks. responsen i koncentrationslavpunktet, vælges en anden mulighed for kurvetilpasning — f.eks. en ikke-symmetrisk kurve som Weibul-funktionen i stedet for en symmetrisk.
Note 1:
Negativ hæmning kan være et problem ved brug af f.eks. log-normalfordelingsfunktionen, så der også her er brug for en alternativ regressionsfunktion.
Use for diatom test species only.
Det kan ikke anbefales at tildele en nulværdi eller en lille positiv værdi til sådanne negative værdier, da det forvrænger fejlfordelingen.
May be added directly (202,4 mg) or by way of stock solution to give 20 mg/l Si final concentration in medium.
Det kan være hensigtsmæssigt at foretage separate kurvetilpasninger, f.eks. på den del af kurven, hvor hæmningen er lille, for at beregne et estimat for EClow x-værdierne.
The micronutrient stock solution is made by dissolving the following into 500 ml of deionised or distilled water:
Af den tilpassede ligning beregnes (ved »omvendt beregning«, C = f– 1(Y)) karakteristiske punktestimater ECx, og som minimum rapporteres EC50-værdien og et eller to estimater for EClow x.
[Disodium (Ethylenedinitrilo) tetraacetate].
De praktiske erfaringer fra testene har vist, at algetesten sædvanligvis er tilstrækkelig præcis til at give et rimelig nøjagtigt estimat ved 10 % hæmning, hvis der er tilstrækkeligt med datapunkter — medmindre der ved lave koncentrationer optræder stimulation som konfunderende faktor.
SeO4·5H2O
Nøjagtigheden af et estimat for EC20 er ofte betydeligt bedre end af en EC10-værdi, da EC20 sædvanligvis ligger på den tilnærmelsesvis lineære del af den centrale del af koncentrationsresponskurven.
0,005 mg See Note 2.
Undertiden kan EC10 være vanskelig at fortolke på grund af vækststimulation.
Note 2:
Selv om EC10 således normalt fås med tilstrækkelig nøjagtighed, anbefales det således, at man desuden altid rapporterer EC20-værdien.
Use only in medium for stock cultures of diatom species.
Vægtningsfaktorer
Adjust pH to 7,5 ± 0,1 with 0,1 N or 1,0 N NaOH or HCl.
Den eksperimentelle varians er sædvanligvis ikke konstant, men indeholder typisk en proportional komponent, hvorfor rutinemæssig brug af vægtet regression vil være en fordel.
Filter the media into a sterile container through either a 0,22 μm membrane filter if a particle counter is to be used or a 0,45 μm filter if a particle counter is not to be used.
Vægtningsfaktorerne til en sådan analyse antages normalt at være omvendt proportionale med variansen:
Store medium in the dark at approximately 4 °C until use.
Mange regressionsprogrammer kan bruges til vægtet regressionsanalyse med vægtningsfaktorer angivet i en tabel.
Appendix 4
For nemheds skyld bør vægtningsfaktorerne normaliseres ved multiplikation med n/Σ wi (hvor n er antallet af datapunkter), således at deres sum bliver lig en.
Example of a procedure for the culturing of algae
Normalisering af respons
General observations
Medmindre denne fejl er ubetydelig, skal vægtningsfaktorerne i regressionen og konfidensgrænserne korrigeres for kovarians med kontrollen (Draper og Smith, 1981).
The purpose of culturing on the basis of the following procedure is to obtain algal cultures for toxicity tests.
Bemærk, at det er vigtigt med en høj præcision af estimatet for middelværdien af responsen i kontrollerne, for at den samlede varians af den relative respons kan blive minimeret.
Use suitable methods to ensure that the algal cultures are not infected with bacteria.
Denne varians kan angives således:
Axenic cultures may be desirable but unialgal cultures must be established and used.
(indeks i henviser til koncentrationsniveau i og indeks 0 til kontrollerne)
All operations must be carried out under sterile conditions in order to avoid contamination with bacteria and other algae.
Yi = Relativ respons = ri/r0 = 1 – I = f(Ci)
Equipment and materials
med variansen Var(Y i) = Var ( ri/r0) ≅ (∂ Yi / ∂ ri)2 · Var(ri) + ((∂ Yi/ ∂ r0)2 · Var(r0)
See under test method:
og, eftersom (∂ Yi/ ∂ ri) = 1/r0, og (∂ Y i/ ∂ r0) = ri/r02
Apparatus.
med normalfordelte data og replikaterne mi og m0:
Procedures for obtaining algal cultures
Var(ri ) = σ2/mi
Preparation of nutrient solutions (media):
bliver den totale varians af den relative respons Yi
All nutrient salts of the medium are prepared as concentrated stock solutions and stored dark and cold.
Fejlen på middelværdien for kontrollerne er omvendt proportional med kvadratroden af det antal replikater af kontrollerne, som gennemsnittet er beregnet af, og undertiden kan det være berettiget at medtage historiske data for på denne måde at mindske fejlen stærkt.
These solutions are sterilised by filtration or by autoclaving.
En alternativ metode er at undlade normalisering af dataene og i stedet tilpasse de absolutte responsværdier, også responsdata for kontrollerne, men herved indføres responsværdien for kontrollerne som en ekstra parameter, der skal indgå i tilpasningen ved ikke-lineær regression.
The medium is prepared by adding the correct amount of stock solution to sterile distilled water, taking care that no infection occurs.
Med en sædvanlig to-parameters regressionsligning kræver denne metode tilpasning af tre parametre og dermed flere datapunkter end ikke-lineær regression på data, der er normaliseret med en forud fastlagt respons for kontrollerne.
For solid medium 0,8 per cent of agar is added.
Omvendte konfidensintervaller
Stock culture:
Beregning af konfidensintervaller i ikke-lineær regression ved hjælp af omvendt estimation er ret kompliceret og hører ikke til standardvalgene i almindelige statistikprogrampakker.
The stock cultures are small algal cultures that are regularly transferred to fresh medium to act as initial test material.
Tilnærmede konfidensgrænser kan beregnes med standardprogrammer til ikke-lineær regression med re-parameterisering (Bruce og Versteeg, 1992), hvorved den matematiske ligning omskrives med de ønskede punktestimater, f.eks. med EC10 og EC50 som de parametre, der skal estimeres.
If the cultures are not used regularly they are streaked out on sloped agar tubes.
(Lad funktionen være I = f (α, β, koncentration), og benyt definitionsrelationerne f (α, β, EC10) = 0,1 og f (α, β, EC50 ) = 0,5 til at erstatte funktionen f (α, β, koncentration) med den ækvivalente funktion g (EC10, EC50, koncentration).
These are transferred to fresh medium at least once every two months.
En mere direkte beregning (Andersen et al., 1998) foretages ved at bibeholde den oprindelige ligning og bruge Taylor-udvikling omkring middelværdierne af ri og r0.
The stock cultures are grown in conical flasks containing the appropriate medium (volume about 100 ml).
På det seneste har »boot strap«-metoder vundet udbredelse.
When the algae are incubated at 20 °C with continuous illumination, a weekly transfer is required.
HENVISNINGER
During transfer an amount of “old” culture is transferred with sterile pipettes into a flask of fresh medium, so that with the fast-growing species the initial concentration is about 100 times smaller than in the old culture.
Kapitel C.11 affattes således:
The growth rate of a species can be determined from the growth curve.
AKTIVERET SLAM — RESPIRATIONSHÆMNINGSTEST (KULSTOF- OG AMMONIUMILTNING)
If this is known, it is possible to estimate the density at which the culture should be transferred to new medium.
Denne testmetode svarer til OECD Test Guideline (TG) 209 (2010).
This must be done before the culture reaches the death phase.
Den beskrevne testmetode er en metode til at bestemme virkningen af et kemikalie på mikroorganismer fra aktiveret slam (hovedsagelig bakterier) ved måling af respirationshastigheden (kulstof- og/eller ammoniumiltning) under fastsatte betingelser ved forskellige koncentrationer af testkemikaliet.
Pre-culture:
Denne testmetode er baseret på ETAD-testen (Ecological and Toxicological Association of the Dyestuffs Manufacturing industry) (1)( 2), på det tidligere OECD TG 209 (3) og på den reviderede ISO-standard 8192 (4).
The pre-culture is intended to give an amount of algae suitable for the inoculation of test cultures.
Formålet med metoden er at give en hurtig screening-metode til vurdering af virkningen af kemikalier på mikroorganismerne i det aktiverede slam i spildevandsanlæggets biologiske (aerobe) fase.
The pre-culture is incubated under the conditions of the test and used when still exponentially growing, normally after an incubation period of 2 to 4 days.
Resultatet af testen kan også indikere passende ikke-hæmmende koncentrationer af testkemikalier til anvendelse i bionedbrydelighedstest (f.eks. kapitel C.4 A-F, C.9, C.10, C12 og C.29 i dette bilag, OECD TG302C).
When the algal cultures contain deformed or abnormal cells, they must be discarded.
I dette tilfælde kan testen udføres som en screeningstest, som ligner en test til bestemmelse af dosisinterval eller en grænsetest (se punkt 39), hvor kun den samlede respiration tages i betragtning.
Appendix 5
Der må dog udvises omhu med at bruge disse oplysninger til test for let bionedbrydelighed (kapitel C.4 A-F og C.29 i dette bilag), hvor inokulumkoncentrationen er betydeligt lavere end den, der bruges i denne testmetode.
Data analysis by nonlinear regression
Fravær af hæmning i denne respirationshæmningstest indebærer ikke automatisk ikke-hæmmende betingelser i testen for let bionedbrydelighed i kapitel C.4 A-F eller C.29 i dette bilag.
General considerations
Generelt lader det til, at respirationshæmningstesten er blevet anvendt med succes, siden den blev offentliggjort, men der er i nogle tilfælde indberettet falske resultater, f.eks. (2)(4)(5).
The response in algal tests and other microbial growth tests — growth of biomass — is by nature a continuous or metric variable — a process rate if growth rate is used and its integral over time if biomass is selected.
Der forekommer undertiden tofasede koncentrationsrelaterede respirationskurver, forvrængede dosis/respons-kurver og uventet lave EC50-værdier (5).
Both are referenced to the corresponding mean response of replicate non-exposed controls showing maximum response for the conditions imposed — with light and temperature as primary determining factors in the algal test.