natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Animalske eller vegetabilske olier og fedtstoffer, der indeholder betydelige mængder cholesterol, kan vise en top, der har næsten samme retentionstid som cholestanol.
Animal or vegetable oils and fats containing appreciable quantities of cholesterol may show a peak having a retention time close to cholestanol.
Hvis det forekommer, skal sterolfraktionen analyseres to gange med og uden intern standard.
If this occurs, the sterol fraction will have to be analysed in duplicate with and without internal standard.
Tilsæt 50 ml 2 N-opløsning af kaliumhydroxid i ethanol (punkt 4.2) og pimpsten, påsæt refluxsvaleren, og opvarm til svag kogning, indtil forsæbningen sker (opløsningen bliver klar).
Add 50 ml of 2 N ethanolic potassium hydroxide solution (point 4.2) and some pumice, fit the reflux condenser and heat to gentle boiling until saponification takes place (the solution becomes clear).
Opvarmningen fortsættes i endnu 20 minutter. Derefter tilsættes 50 ml destilleret vand fra den øverste del af svaleren, svaleren tages af, og kolben afkøles til ca. 30 °C.
Continue heating for a further 20 minutes, then add 50 ml of distilled water from the top of the condenser, detach the condenser and cool the flask to approximately 30 °C.
Overfør kolbens indhold kvantitativt til en 500 ml-skilletragt (punkt 3.2), idet der skylles flere gange med destilleret vand (50 ml).
Transfer the contents of the flask quantitatively into a 500 ml separating funnel (point 3.2) using several portions of distilled water (50 ml).
Tilsæt ca. 80 ml ethylether (punkt 4.10), og ryst kraftigt i ca. 60 sekunder, idet presset regelmæssigt frigives ved at vende skilletragten på hovedet og åbne stophanen.
Add approximately 80 ml of ethyl ether (point 4.10), shake vigorously for approximately 60 seconds, periodically releasing the pressure by inverting the separating funnel and opening the stopcock.
Lad skilletragten henstå, indtil fuldstændig separation af de to faser er opnået (note 2).
Allow standing until there is complete separation of the two phases (Note 2).
Aftap derefter så meget af sæbeopløsningen som muligt i en anden skilletragt.
Then draw off the soap solution as completely as possible into a second separating funnel.
Foretag endnu to ekstraktioner på den vandige/alkoholholdige fase på samme måde, idet der bruges 60 til 70 ml ethylether (punkt 4.10).
Perform two further extractions on the water-alcohol phase in the same way using 60 to 70 ml of ethyl ether (point 4.10).
Note 2: Eventuel emulsion kan ødelægges ved tilsætning af små mængder ethanol (punkt 4.11).
Note 2: Any emulsion can be destroyed by adding small quantities of ethanol (point 4.11).
De tre etherekstrakter samles i en enkelt skilletragt, der indeholder 50 ml vand.
Combine the three ether extracts in one separating funnel containing 50 ml of water.
Vask med vand (50 ml), indtil vaskevandet ikke længere bliver lyserødt, når der tilsættes en dråbe af phenolphthaleinopløsningen (punkt 4.21).
Continue to wash with water (50 ml) until the wash water no longer gives a pink colour on the addition of a drop of phenolphthalein solution (point 4.21).
Når vaskevandet er hældt af, filtreres på vandfrit natriumsulfat (punkt 4.5) ned i en på forhånd vejet 250 ml kolbe, idet tragt og filter vaskes med små mængder ethylether (punkt 4.10).
When the wash water has been removed, filter on anhydrous sodium sulphate (point 4.5) into a previously weighed 250 ml flask, washing the funnel and filter with small quantities of ethyl ether (point 4.10).
Opløsningen inddampes ved destillation i en rotationsfordamper ved 30 °C under vakuum.
Evaporate the solvent by distillation on a rotary evaporator at 30 °C under vacuum.
Tilsæt 5 ml acetone, og fjern det flygtige opløsningsmiddel fuldstændigt i en svag luftstrøm.
Add 5 ml of acetone and remove the volatile solvent completely in a gentle current of air.
Tør reststoffet i ovnen ved 103 ± 2 °C i 15 minutter. Afkøl i en ekssikkator, og afvej til nærmeste 0,1 mg.
Dry the residue in the oven at 103±2 °C for 15 min. Cool in desiccators and weigh to the nearest 0,1 mg.
Separation af sterol- og triterpendialkoholfraktionen (erytrodiol + uvaol)
Separation of the sterol and triterpene dialcohols fraction (erythrodiol + uvaol)
Fremstilling af basiske plader til tyndtlagskromatografi.
Preparation of the basic thin layer chromatography plates.
Kiselgelpladerne (punkt 4.6) nedsænkes ca. 4 cm i 0,2 N-opløsningen af kaliumhydroxid i ethanol (punkt 4.5) i 10 sekunder. Derefter får de lov at tørre i et stinkskab i to timer og sættes til sidst i en ovn ved 100 °C i en time.
Immerse the silica gel plates (point 4.6) about 4 cm in the 0,2 N ethanolic potassium hydroxide solution (point 4.5) for 10 seconds, then allow to dry in a fume cupboard for two hours and finally place in an oven at 100 °C for one hour.
Pladerne tages ud af ovnen og opbevares i en ekssikkator med calciumchlorid (punkt 3.13), indtil de skal bruges (plader, der er behandlet på denne måde, skal anvendes inden 15 dage). Note 3: Når basiske kiselgelplader benyttes til at separere sterolfraktionen, er det ikke nødvendigt at behandle den ikkeforsæbelige fraktion med aluminiumoxid. På denne måde holdes alle sure forbindelser (fedtsyrer og andre) tilbage på basislinjen, og sterolbåndet er klart adskilt fra de alifatiske og triterpene alkoholers bånd.
Remove from the oven and keep in a calcium chloride desiccator (point 3.13) until required for use (plates treated in this way must be used within 15 days).
Sæt låg på kammeret, og lad det henstå således et køligt sted i mindst en halv time, så der opnås ligevægt mellem væske og damp. Strimler af filtrerpapir, der dypper ned i eluenten, kan anbringes på kammerets indre overflader.
In this way all compounds of an acid nature (fatty acids and others) are retained on the spotting line and the sterols band is clearly separated from the aliphatic and triterpene alcohols band.
Note 4: Kromatografiblandingen udskiftes for hver test for at opnå fuldstændig reproducerbare elueringsbetingelser.
Note 4:
Alternativt kan en opløsning på 50:50 (V/V) n-hexan/ethylether anvendes.
The developing mixture needs to be replaced for every test, in order to achieve perfectly reproducible elution conditions, alternative solvent 50:50 (V/V) n-hexane/ethyl ether may be used.
Fremstil en ca. 5 %-opløsning af de ikkeforsæbelige stoffer (punkt 5.1.5) i ethylacetat (punkt 4.12). Med 100 μl-mikrosprøjten afsættes 0,3 ml af opløsningen på en smal og ensartet streg nederst (ca. 2 cm) på kromatografipladen (punkt 5.2.1).
Prepare an approximately 5 % solution of the unsaponifiable (point 5.1.5) in ethyl acetate (point 4.12) and, using the 100 μl microsyringe, depose 0,3 ml of the solution on a narrow and uniform streak on the lower end (2 cm) of the chromatographic plate (point 5.2.1).
På linje med stregen afsættes 2 til 3 μl af referenceopløsningen (punkt 4.13), så sterol- og triterpendialkoholbåndet kan identificeres efter eluering.
In line with the streak, place 2 to 3 μl of the material reference solution (point 4.13), so that the sterol and triterpene dialcohols band can be identified after developing.
Anbring pladen i kromatografikammeret, som er forberedt som angivet i 5.2.2.
Place the plate in the developing chamber prepared as specified in point 5.2.2.
Omgivelsestemperaturen bør holdes mellem 15 og 20 °C (note 5).
The ambient temperature should be maintained between 15 and 20 °C (Note 5).
Kammeret lukkes straks med låget, og der elueres, indtil opløsningsmiddelfronten er ca. 1 cm fra pladens øverste kant.
Immediately close the chamber with the cover and allow eluting until the solvent front reaches approximately 1 cm from the upper edge of the plate.
Tag derefter pladen ud af kromatografikammeret, og lad opløsningsmidlet fordampe i en strøm af varm luft eller ved at lade pladen stå en kort tid i et stinkskab.
Remove the plate from the developing chamber and evaporate the solvent in a flow of hot air or by leaving the plate for a short while, under a hood.
Note 5: Højere temperatur kan forringe separationen.
Note 5: Higher temperature could worsen the separation.
Pladen sprøjtes let og ensartet med 2,7-dichlorfluorosceinopløsningen (punkt 4.14), hvorefter den henstår til tørring.
Spray the plate lightly and uniformly with the 2,7-dichlorofluorescein solution (point 4.14) and then leave to dry.
Når pladen observeres under ultraviolet lys, kan sterol- og triterpendialkoholbåndet identificeres ved, at det er på linje med de pletter, der er afsat ved hjælp af referenceopløsningen (punkt 4.13).
When the plate is observed under ultraviolet light, the sterols and triterpene dialcohols bands can be identified through being aligned with the spots obtained from the reference solution (point 4.13).
Båndets grænser langs fluorescenckanterne markeres med en sort blyant (se tyndtlagskromatografipladen i figur 3).
Mark the limits of the bands along the edges of the fluorescence with a black pencil (see TLC plate figure 3).
Med en metalspatel skrabes kiselgelen i det markerede område af.
By using a metal spatula, scrape off the silica gel of the marked area.
Det fjernede materiale pulveriseres fint og hældes i filtertragten (punkt 3.7).
Place the finely comminuted material removed into the filter funnel (point 3.7).
Tilsæt 10 ml varm ethylacetat, bland det omhyggeligt med metalspatelen, og filtrer under vakuum; filtratet opsamles i den koniske kolbe (punkt 3.8), der er sat på filtertragten.
Add 10 ml of hot ethyl acetate (point 4.12), mix carefully with the metal spatula and filter under vacuum, collecting the filtrate in the conical flask (point 3.8.) attached to the filter funnel.
Reststoffet i kolben vaskes tre gange med ethylether (punkt 4.3) (ca. 10 ml hver gang), idet filtratet opsamles i den samme kolbe, der er påsat filtertragten. Filtratet inddampes til et rumfang af 4 til 5 ml. Den tilbageværende opløsning overføres til det på forhånd vejede 10 ml-reagensglas (punkt 3.9).
Wash the residue in the flask three times with ethyl ether (point 4.3) (approximately 10 ml each time), collecting the filtrate in the same flask attached to the funnel, evaporate the filtrate to a volume of 4 to 5 ml, transfer the residual solution to the previously weighed 10 ml test tube (point 3.9), evaporate to dryness by mild heating, in a gentle flow of nitrogen, make up again using a few drops of acetone (point 4.8), evaporate again to dryness,
Inddamp til tørhed ved let opvarmning i en svag strøm af nitrogen, fyld op med et par dråber acetone (punkt 4.8), og inddamp igen til tørhed. Reststoffet i reagensglasset skal bestå af sterol- og triterpendialkoholfraktionen.
The residue contained in the test tube must consist of the sterol and triterpene dialchols fractions.
Fremstilling af trimethylsilylethere
Preparation of the trimethylsilyl ethers.
Tilsæt silyleringsreagenset (punkt 4.25) (note 6) i forholdet 50 μl for hvert milligram steroler og triterpendialkoholer til reagensglasset med sterol- og triterpenfraktionen, idet enhver optagelse af fugt undgås (note 7).
Add the silylation reagent (point 4.25) (Note 6), in the ratio of 50 μl for every milligram of sterols and triterpene dialcohols, in the test tube containing the sterol and triterpene fraction, avoiding any uptake of moisture (Note 7).
Opløsninger klar til brug fås i handelen.
Ready for use solutions are available commercially.
Man kan også få andre silyleringsreagenser, som f.eks. bis-trimethylsilyltrifluoracetamid + 1 % trimethylchlorsilan, som skal fortyndes med et lige så stort rumfang vandfri pyridin.
Other silylation reagents, such as, for example, bistrimethylsilyl trifluor acetamide + 1 % trimethylchlorosilane, which has to be diluted with an equal volume of anhydrous pyridine, are also available.
Pyridin kan erstattes med samme mængde acetonitril.
Pyridine can be replaced by the same amount of acetonitrile.
Reagensglasset tilproppes og rystes omhyggeligt (uden at vende bunden i vejret på det), indtil forbindelserne er fuldstændig opløst.
Stopper the test tube, shake carefully (without overturning) until the compounds are completely dissolved.
Lad henstå i mindst 15 minutter ved omgivelsestemperatur, og centrifuger derefter i et par minutter.
Leave to stand for at least 15 minutes at ambient temperature and then centrifuge for a few minutes.
Den klare opløsning er parat til gaskromatografisk analyse.
The clear solution is ready for gas chromatographic analysis.
Den lette opalisering, som kan fremkomme, er normal og giver ikke anledning til interferens.
The slight opalescence, which may form, is normal and does not cause any anomaly.
Hvis der dannes hvide fnug eller fremkommer en lyserød farve, er det tegn på tilstedeværelsen af fugt eller svækkelse af reagenset.
The formation of a white flock or the appearance of a pink colour is indicative of the presence of moisture or deterioration of the reagent.
Hvis det forekommer, skal testen gentages (kun hvis hexamethyldisilazan/trimethylchlorsilan anvendes).
If this occurs, the test must be repeated (only if hexamethyldisilazane/trimethylchlorosilane is used).
Gaskromatografisk analyse.
Gas chromatographic analysis.
Forberedende operationer, konditionering af kolonnen.
Preliminary operations, capillary column conditioning.
Kolonnen (punkt 3.11) monteres i gaskromatografen, idet indløbsenden forbindes med splitinjektoren, og udløbsenden forbindes med detektoren.
Fit the column (point 3.11) in the gas chromatograph, by attaching the inlet end to the split injector and the outlet end to the detector.
Der foretages en generel kontrol af gaskromatografen (lækager fra gaskredsløbene, detektorens effektivitet, splittersystemets og registreringssystemets effektivitet osv.)
Carry out general checks on the gas chromatograph unit (leaks from the gas circuits, detector efficiency, efficiency of the splitting system and recording system, etc.).
Hvis kolonnen skal bruges for første gang, anbefales det, at den underkastes en konditionering. Man lader en svag gasstrøm passere gennem kolonnen og tænder så for gaskromatografienheden. Derefter begynder man gradvis at varme op til en temperatur på mindst 20 °C over driftstemperaturen (note 8).
If the column is being used for the first time, it is recommended that it be subjected to conditioning: passing a gentle flow of gas through the column itself, then switch on the gas chromatography unit and begin a gradual heating, up to a temperature of at least 20 °C above the operating temperature (Note 8).
Denne temperatur opretholdes i mindst to timer. Derefter sættes hele enheden i driftstilstand (justering af gasstrømme og splittersystem, antændelse af flammen, forbindelse til computeren, justering af kolonnekammerets, detektorens og injektorens temperatur osv.), og dernæst registreres signalet med en følsomhed, der er mindst to gange større end den, man agter at anvende til analysen.
Hold this temperature for at least two hours, then place the entire unit in operating mode (adjustment of gas flows and splitting, ignition of the flame, connection with the computing system, adjustment of the column, detector and injector temperature, etc.) and then record the signal with a sensitivity at least two times greater than that one intended for the analysis.
Basislinjens forløb skal være lige uden toppe af nogen art, og den må ikke glide.
The course of the base line must be linear, without peaks of any kind, and must not show drift.
Negativ glidning af en lige linje tyder på lækage fra kolonnens forbindelser. Positiv glidning tyder på utilstrækkelig konditionering af kolonnen.
A negative straight-line drift indicates leakage from the column connections; a positive drift indicates inadequate conditioning of the column.
Konditioneringstemperaturen skal altid være mindst 20 °C lavere end den maksimumstemperatur, der er angivet for den anvendte stationære fase.
The conditioning temperature must always be at least 20 °C less than the maximum temperature specified for the stationary phase used.
Valg af driftsbetingelser.
Choice of operating conditions.
Følgende driftsbetingelser anvendes:
The operating conditions are as follows:
kolonnetemperatur: 260 ± 5 °C
Column temperature: 260 ± 5 °C;
injektortemperatur: 280-300 °C
Injector temperature: 280-300 °C;
detektortemperatur: 280-300 °C
Detector temperature: 280-300 °C;
bæregassens lineære hastighed: helium 20-35 cm/s, hydrogen 30-50 cm/s
Linear velocity of the carrier gas: helium 20 to 35 cm/s; hydrogen 30 to 50 cm/s;
splitterforhold: fra 1:50 til 1:100
Splitting ratio: from 1:50 to 1:100;
instrumentets følsomhed: fra 4 til 16 gange den minimale dæmpning
Instrument sensitivity: from 4 to 16 times the minimum attenuation;
registreringsfølsomhed: 1-2 mV fuld skala
Recording sensitivity: 1 to 2 mV full scale;
indsprøjtet mængde: 0,5-1 μl TMSE-opløsning.
Amount of substance injected: 0,5 to 1 μl of TMSE solution.
Disse betingelser kan ændres afhængigt af kolonnens og gaskromatografens egenskaber, så man opnår kromatogrammer, der opfylder følgende krav:
These conditions may be changed according to the characteristics of the column and gas chromatograph, so as to obtain chromatograms, which meet the following requirements:
Retentionstiden for ß-sitosteroltoppen bør være 20 ± 5 minutter.
The retention time for the ß-sitosterol peak should be at 20 ± 5 min;
Campesteroltoppen bør være: for olivenolie (gennemsnitsindhold 3 %) 20 ± 5 % af fuld skala; for sojaolie (gennemsnitsindhold 20 %) 80 ± 10 % af fuld skala.
The campesterol peak should be: for olive oil (mean content 3 %) 20 ± 5 % of full scale; for soybean oil (average content 20 %) 80 ± 10 % of full scale;
Alle tilstedeværende steroler skal adskilles.
All the present sterols must be separated.
Desuden skal toppene også være fuldstændig opløst, dvs. hver tops spor skal gå tilbage til basislinjen, før sporet går op til den næste top.
In addition to being separated the peaks, they must also be completely resolved, i.e. the peak trace should return to the base line before leaving for the next peak.
Ufuldstændig opløsning kan dog tolereres, såfremt toppen ved RRT (relativ retentionstid) 1,02 (Sitostanol) kan bestemmes kvantitativt ved brug af den vinkelrette linje.
Incomplete resolution is, however, tolerated, provided that the peak at RRT 1,02 (Sitostanol) can be quantified using the perpendicular.
Analytisk fremgangsmåde
Analytical procedure
Med 10 μl-mikrosprøjten optages 1 μl hexan, derefter trækkes først 0,5 μl luft og derefter 0,5 til 1 μl af prøveopløsningen op.
By using the 10 μl microsyringe, take 1 μl of hexane, draw in 0,5 μl of air and then 0,5 to 1 μl of the sample solution.
Stemplet trækkes længere ud, så kanylen tømmes.
Raise the plunger of the syringe further, so the needle is emptied.
Kanylen trykkes gennem injektorens membran, og efter 1-2 sekunder injiceres hurtigt; derefter fjernes kanylen langsomt efter ca. 5 sekunder.
Push the needle through the membrane of the injector and after one to two seconds, inject rapidly, and then slowly remove the needle after around five seconds.
Der kan også anvendes en automatisk injektor.
An automatic injector can be used as well.
Registreringen fortsættes, indtil de tilstedeværende triterpendialkoholers TMSE er fuldstændig elueret.
Carry out the recording until the TMSE of the present triterpene dialcohols are completely eluted.
Basislinjen skal fortsat opfylde kravene (punkt 5.4.1.2).
The base line must continue to meet the requirements (point 5.4.1.2).
Identifikation af toppe
Peak identification
De enkelte toppe identificeres ud fra retentionstiderne og ved sammenligning med blandinger af sterol- og triterpendialkohol-TMSE, der er analyseret under de samme betingelser (se tillægget).
Identify individual peaks on the basis of retention times and by comparison with the mixture of sterol and triterpene dialcohols TMSE, analysed under the same conditions (see Appendix).
Sterolerne og triterpendialkoholerne elueres i følgende rækkefølge: cholesterol, brassicasterol, ergosterol, 24-methylen-cholesterol, campesterol, campestanol, stigmasterol, Δ7-campesterol, Δ5,23-stigmastadienol, clerosterol, ß-sistosterol, sitostanol, Δ5-avenasterol, Δ5,24-stigmastadienol, Δ7-stigmastenol, Δ7-avenasterol, erytrodiol og uvaol.
The sterols and triterpene dialcohols are eluted in the following order: cholesterol, brassicasterol, ergosterol, 24-methylen-cholesterol, campesterol, campestanol, stigmasterol, Δ7-campesterol, Δ5,23-stigmastadienol, clerosterol, ß-sistosterol, sitostanol, Δ5-avenasterol, Δ5,24-stigmastadienol, Δ7-stigmastenol, Δ7-avenasterol, erythrodiol and uvaol.
Retentionstiderne for β-sitosterol for SE 52- og SE 54-kolonner er vist i tabel 1.
The retention times for ß-sitosterol, for SE-52 and SE-54 columns, are shown in Table 1.
Figur 1 og 2 viser typiske kromatogrammer for bestemte olier.
Figures 1 and 2 show typical chromatograms for some oils.
Kvantitativ vurdering
Quantitative evaluation.
Arealerne for α-cholestanol- samt sterol- og triterpendialkoholtoppene beregnes ved hjælp af computeren.
Calculate the areas of the α-cholestanol and the sterol and triterpene dialcohols peaks by using the computing system.
Der ses bort fra toppene for forbindelser, der ikke er blandt dem, der er opregnet i tabel 1 (ergosterol skal ikke beregnes).
Ignore peaks for any compound which are not included (ergosterol must not be calculated) among those listed in Table 1.
Responsfaktoren for α-cholestanol antages at være lig med 1.
The response factor for α-cholestanol should be considered equal to 1.
Koncentrationen af hver enkelt sterol beregnes i mg/kg fedtstof som følger:
Calculate the concentration of each individual sterol, in mg/kg of fatty material, as follows:
toparealet for sterol x i computerenheder
peak area for sterol x, in computing system counts;
toparealet for α-cholestanol i computerenheder
area of the α-cholestanol peak, in computing system counts;
massen af tilsat α-cholestanol i milligram
mass of added α-cholestanol, in milligrams;
m massen af den prøve, der bruges til bestemmelsen, i gram.
m mass of the sample used for determination, in grams.
RAPPORTERING AF RESULTATERNE
EXPRESSION OF THE RESULTS
De individuelle sterolkoncentrationer angives som mg/kg fedtstof og deres sum som "steroler i alt".
Report individual sterol concentrations as mg/kg of fatty material and their sum as "total sterols".
Sammensætningen af hver af de individuelle steroler samt af erytrodiol og uvaol angives med en decimal.
The composition of each of the individual sterols and of the erythrodiol and uvaol should be expressed to one decimal point.
Den samlede sterolsammensætning udtrykkes uden decimaler.
Total sterol composition must be expressed without any decimal point.
Den procentvise andel af de individuelle steroler beregnes på grundlag af forholdet mellem arealet af den tilsvarende top og summen af toparealet for steroler samt erytrodiol og uvaol.
Calculate the percentage of each individual sterol from the ratio of the relevant peak area to the total peak area for sterols and erythrodiol and uvaol:
toparealet for x
peak area for x;
ΣA summen af toparealet for steroler
ΣA total peak area for sterols;
Tilsyneladende β-sitosterol: Δ5-23-stigmastadienol + clerosterol + β-sitosterol + sitostanol + Δ5-avenasterol + Δ5-24-stigmastadienol.
Apparent β-sitosterol: Δ5-23-stigmastadienol + clerosterol + β-sitosterol + sitostanol + Δ5-avenasterol + Δ5-24-stigmastadienol.
Den procentvise andel af erytrodiol og uvaol beregnes:
Calculate the percentage of erythrodiol and uvaol:
Erytrodiol
Erythrodiol
ΣA samlet areal for sterol i computerenheder
ΣA sum area for sterol in computing system counts;
Er areal af erytrodiol i computerenheder
Er area of Erythrodiol in computing system counts;
Uv areal af uvaol i computerenheder
Uv area of Uvaol in computing system counts;
Bestemmelse af gassens lineære hastighed
Determination of the linear speed of the gas
Med gaskromatografen indstillet på normale driftsbetingelser injiceres 1 til 3 μl methan (eller propan), og man måler den tid, det tager for gassen at passere gennem kolonnen fra tidspunktet for injektionen til det tidspunkt, hvor toppen fremkommer (tM).
With the gas chromatograph set to normal operating conditions, inject 1 to 3 μl of methane (or propane) and measure the time taken by the gas to pass through the column, from the time of injection to the time at which the peak appears (tM).