natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Da disse mitotiske celler løsrives nemt, kan de gå tabt, når mediet med teststoffet fjernes.
Because these mitotic cells are easily detached, they can be lost when the medium containing the test substance is removed.
Det er vigtigt at indsamle disse celler, når kulturerne vaskes, og at føre dem tilbage til kulturerne for ikke at miste celler, der er i mitose, og hvor der er risiko for dannelse af mikrokerner på høsttidspunktet.
Care should be taken to collect these when cultures are washed, and to return them to the cultures, to avoid losing cells that are in mitosis, and at risk for micronuclei, at the time of harvest.
Der benyttes dobbeltbestemmelse ved hver koncentration af teststof og for negative kontrolkulturer med opløsningsmiddel/bærestof.
Duplicate cultures should be used for each test substance concentration and for the vehicle/solvent and NC cultures.
Hvis det på grundlag af data fra tidligere laboratorieforsøg kan godtgøres, at forskellen mellem dobbeltbestemmelser er minimal, kan enkeltbestemmelse accepteres.
Where minimal variation between duplicate cultures can be demonstrated from historical laboratory data, it may be acceptable for single cultures to be used.
Benyttes der kun én kultur, anbefales det at øge antallet af koncentrationer til analyse.
If single cultures are used, it is recommended that an increased number of concentrations be analysed.
Cellehøst og præparering af objektglas
Cell harvest and slide preparation
Høst og præparering foregår særskilt for hver enkelt kultur.
Each culture is harvested and processed separately.
Præpareringen af celler kan bestå i hypotonisk behandling, men dette er ikke nødvendigt, hvis der opnås en tilstrækkelig spredning af cellerne på anden vis.
Cell preparation may involve hypotonic treatment, but this step is not necessary if adequate cell spreading is otherwise achieved.
Der kan anvendes forskellige teknikker til præparering af objektglas, forudsat at der fremstilles cellepræparater af høj kvalitet til bedømmelse.
Different techniques can be used in slide preparation provided that high-quality cell preparations for scoring are obtained.
Cellens cytoplasma anvendes til påvisning af mikrokerner og (ved cytokineseblokeringsmetoden) pålidelig identifikation af binukleære celler.
Cell cytoplasm should be retained to allow the detection of micronuclei and (in the cytokinesis-block method) reliable identification of binucleate cells.
Objektglassene kan farves ved hjælp af forskellige metoder, f.eks. med Giemsa- eller fluorescerende dna-specifikke farvestoffer (59).
The slides can be stained using various methods, such as Giemsa or fluorescent DNA specific dyes (59).
Alle objektglas, herunder kontrolprøver med opløsningsmiddel/bærestof, kodes uafhængigt inden mikroskoperingen.
All slides, including those of the solvent/vehicle and the controls, should be independently coded before the microscopic analysis.
Alternativt analyseres kodede prøver ved hjælp af et valideret system til automatisk flow-cytometri- eller billedanalyse.
Alternatively, coded samples can be analysed using a validated, automated flow cytometric or image analysis system.
I cytoB-behandlede kulturer analyseres mikrokerneforekomsten i mindst 2000 binukleære celler pr. koncentration (mindst 1000 binukleære celler pr. kultur, to kulturer pr. koncentration).
In cytoB-treated cultures, micronucleus frequencies should be analysed in at least 2000 binucleated cells per concentration (at least 1000 binucleated cells per culture; two cultures per concentration).
Benyttes der kun én kultur, bedømmes mindst 2000 binukleære celler pr. koncentration fra den pågældende kultur.
If single cultures are used, at least 2000 binucleated cells per concentration should be scored from that culture.
Hvis der er væsentligt færre end 1000 binukleære celler pr. kultur, eller færre end 2000, hvis der kun benyttes én kultur, til bedømmelse i hver koncentration, og hvis der ikke påvises en væsentlig forøgelse af antallet af mikrokerner, gentages testen med flere celler eller i mindre toksiske koncentrationer afhængigt af forholdene.
If substantially fewer than 1000 binucleate cells per culture, or 2000 if a single culture is used, are available for scoring at each concentration, and if a significant increase in micronuclei is not detected, the test should be repeated using more cells, or at less toxic concentrations, whichever is appropriate.
Det er vigtigt at undlade at bedømme binukleære celler med uregelmæssige former, eller hvor de to kerner har en meget forskellig størrelse, og binukleære celler må heller ikke forveksles med ujævnt udstrøgne multinukleære celler.
Care should be taken not to score binucleate cells with irregular shapes or where the two nuclei differ greatly in size; neither should binucleate cells be confused with poorly spread multi-nucleate cells.
Celler med mere end to hovedkerner analyseres ikke for forekomsten af mikrokerner, da mikrokerneforekomsten i forvejen kan være højere i disse celler (63) (64). Det er acceptabelt at bedømme mononukleære celler, hvis det påvises, at teststoffet griber ind i cytoB-aktiviteten.
Cells containing more than two main nuclei should not be analysed for micronuclei, as the baseline micronucleus frequency may be higher in these cells (63) (64) Scoring of mononucleate cells is acceptable if the test substance is shown to interfere with cytoB activity.
I cellelinjer, der ikke behandles med cytoB, bedømmes mikrokerneforekomsten i mindst 2000 celler pr. koncentration (mindst 1000 celler pr. kultur, to kulturer pr. koncentration).
In cell lines assayed without cytoB treatment, micronuclei should be scored in at least 2000 cells per concentration (at least 1000 cells per culture; two cultures per concentration).
Benyttes der kun én kultur pr. koncentration, bedømmes mindst 2000 celler fra den pågældende kultur.
Where only one culture per concentration is used, at least 2000 cells should be scored from that culture.
Når cytoB anvendes, bestemmes CBPI eller RI til vurdering af celleproliferationen (se tillæg 2) ud fra mindst 500 celler pr. kultur.
When cytoB is used, a CBPI or an RI should be determined to assess cell proliferation (see Appendix 2) using at least 500 cells per culture.
Ved behandling uden tilsætning af cytoB er det afgørende at dokumentere, at de celler, der bedømmes, har formeret sig, jf. punkt 24-27.
When treatments are performed in the absence of cytoB, it is essential to provide evidence that the cells being scored have proliferated, as discussed in Paragraphs 24-27.
Acceptkriterier
Acceptability criteria
Et laboratorium, der ønsker at udføre det MNvit-assay, der er beskrevet i denne TM, skal påvise, at det har kompetence til på pålidelig og nøjagtig vis at identificere kemikalier med kendt aneugen og klastogen aktivitet og med eller uden metabolisk aktivering såvel som kendte negative kemikalier på grundlag af referencekemikalierne i tillæg 3.
A laboratory proposing to use the MNvit assay described in this TM should demonstrate its ability to reliably and accurately detect chemicals of known aneugenic and clastogenic activity, with and without metabolic activation, as well as known negative chemicals, using the reference chemicals in Appendix 3.
Som dokumentation for dets kompetence til at udføre denne TM korrekt skal laboratoriet dokumentere, at kernedelingen af de celler, der bedømmes for mikrokernedannelse, er afsluttet, hvis testen udføres uden tilsætning af cytoB.
As evidence of its ability to perform this TM correctly, the laboratory should provide evidence that the cells being scored for micronucleus formation have completed one nuclear division if the test is performed without the use of cytoB.
Det anbefales at anvende kemikalierne i tillæg 3 som referencekemikalier.
The chemicals in Appendix 3 are recommended for use as reference chemicals.
Det er muligt at tilføje eller erstatte kemikalier, hvis deres aktivitet er kendt, og hvis de inducerer mikrokerner ved hjælp af de samme mekanismer, og hvis det påvises, at de er egnede for de kemikalier, som skal testes ved hjælp af MNvit-assayet.
Substitute or additional chemicals can be included if their activity is known and if they induce micronuclei by the same mechanisms of action, and if they are shown to be relevant to the chemicals that will be tested using the MNvit procedure.
Begrundelsen kan omfatte en valideringsundersøgelse af en bred vifte af stoffer eller en undersøgelse med fokus på et snævrere spektrum baseret på teststoffets kemiske gruppe eller de undersøgte skadevirkninger.
Justification could include a validation study employing a broad variety of substances or focused on a narrower spectrum based on the chemical class of the test substance or the mechanism of damage being studied.
Kontrolkulturer med opløsningsmiddel/bærestof og ubehandlede kulturer bør resultere i reproducerbart lave og konsistente mikrokerneforekomster (typisk 5-25 mikrokerner/1000 celler for de celletyper, der er identificeret i punkt 11).
Solvent/vehicle control and untreated cultures should give reproducibly low and consistent micronuclei frequencies (typically 5-25 micronuclei/1000 cells for the cell types identified in paragraph 11).
Andre celletyper kan have andre responsintervaller, der skal fastslås ved valideringen af deres anvendelse i MNvit-assayet.
Other cell types may have different ranges of responses which should be determined when validating them for use in the MNvit assay.
Data fra negative kontrolprøver med opløsningsmiddel og positive kontrolprøver anvendes til at fastslå historiske kontrolintervaller.
Data from negative, solvent, and PC should be used to establish historical control ranges.
Disse værdier indgår i vurderingen af, om de sideløbende negative/positive kontrolprøver opfylder kravene til forsøg.
These values should be used in deciding the adequacy of the concurrent NC/PC for an experiment.
Hvis der foreslås mindre ændringer til protokollen (f.eks. anvendelse af automatiserede i stedet for manuelle bedømmelsesteknikker, anvendelse af en ny celletype), skal ændringens effektivitet påvises, inden den modificerede protokol kan accepteres.
If minor changes to the protocol (e.g. use of automated instead of manual scoring techniques; use of a new cell type) are proposed for the assay, then the effectiveness of the change should be demonstrated before the modified protocol can be considered acceptable for use.
Det skal i denne forbindelse påvises, at det er muligt at identificere de vigtigste mekanismer for kromosomskade og gevinst eller tab, og at der kan opnås korrekte positive og negative resultater for den enkelte stofgruppe eller det brede spektrum af stoffer, der skal testes.
Demonstration of effectiveness includes demonstration that the major mechanisms of chromosome breakage and gain or loss can be detected, and that appropriate positive and negative results can be achieved for the class of the individual substance, or the broad range of substances, to be tested.
Behandling af resultater
Treatment of results
Ved cytokineseblokeringsmetoden tages der kun højde for forekomsten af binukleære celler med mikrokerner (uafhængigt af antallet af mikrokerner pr. celle) ved vurdering af induktionen af mikrokerner.
If the cytokinesis-block technique is used, only the frequencies of binucleate cells with micronuclei (independent of the number of micronuclei per cell) are used in the evaluation of micronucleus induction.
Det er ikke obligatorisk at bedømme antallet af celler med en, to eller flere mikrokerner, men det kan give nyttige oplysninger.
Scoring of the numbers of cells with one, two, or more micronuclei could provide useful information, but is not mandatory.
Der foretages sideløbende målinger af cytotoksicitet og/eller cytostase for alle behandlede kulturer samt kontrolkulturer med opløsningsmiddel/bærestof (58).
Concurrent measures of cytotoxicity and/or cytostasis for all treated and solvent/vehicle control cultures should be determined (58).
Ved cytokineseblokeringsmetoden udregnes CBPI eller RI for alle behandlede kulturer og kontrolkulturer som målinger af cellecyklusforsinkelse.
The CBPI or the RI should be calculated for all treated and control cultures as measurements of cell cycle delay when the cytokinesis-block method is used.
Hvis cytoB ikke anvendes, anvendes RPD-, RICC- eller PI-metoden (se tillæg 2).
In the absence of cytoB, the RPD or the RICC or PI should be used (see Appendix 2).
Desuden sammenfattes alle data i tabelform.
Additionally, all data should be summarised in tabular form.
Når kemikalier inducerer mikrokerne i MNvit-assayet, kan det skyldes, at de fremkalder kromosombrud, kromosomtab eller en kombination heraf.
Chemicals that induce micronuclei in the MNvit assay may do so because they induce chromosome breakage, chromosome loss, or a combination of the two.
Yderligere analyse med anvendelse af anti-kinetokor-antistof, centromeriske in situ-prober eller andre metoder kan anvendes til at bestemme, om induktionen af mikrokerner skyldes klastogen og/eller aneugen aktivitet.
Further analysis using anti-kinetochore antibodies, centromere specific in situ probes, or other methods may be used to determine whether the mechanism of micronucleus induction is due to clastogenic and/or aneugenic activity.
Evaluering og fortolkning af resultater
Evaluation and interpretation of results
Der er ingen krav om verifikation af et klart positivt eller negativt resultat ved hjælp af yderligere forsøg.
There is no requirement for verification by additional testing of a clear positive or negative response.
Tvetydige resultater kan afklares ved analyse af yderligere 1000 celler fra alle kulturerne for at undgå tab af blinding.
Equivocal results may be clarified by analysis of another 1000 cells from all the cultures to avoid loss of blinding.
Hvis denne tilgang ikke afklarer resultatet, udføres der yderligere test.
If this approach does not resolve the result, further testing should be performed.
Ved opfølgende forsøg bør det overvejes at ændre undersøgelsesparametrene og udvide eller indskrænke forsøgsbetingelserne i relevant omfang.
Modification of study parameters over an extended or narrowed range of conditions, as appropriate, should be considered in follow-up experiments.
Blandt de undersøgelsesparametre, der kan ændres på, er testkoncentrationernes spredning, tidsplanen for behandling og cellehøst og/eller metabolismeaktiveringen.
Study parameters that might be modified include the test concentration spacing, the timing of treatment and cell harvest, and/or the metabolic activation conditions.
Der findes en række kriterier for opnåelse af et positivt resultat, f.eks. en koncentrationsafhængig forøgelse eller en statistisk signifikant forøgelse af antallet af celler med mikrokerner.
There are several criteria for determining a positive result, such as a concentration-related increase or a statistically significant increase in the number of cells containing micronuclei.
Der bør i første række ses på resultaternes biologiske relevans.
The biological relevance of the results should be considered first.
Det kan være nyttigt at undersøge, om de observerede værdier ligger inden eller uden for det historiske kontrolinterval, ved vurderingen af responsets biologiske signifikans.
Consideration of whether the observed values are within or outside of the historical control range can provide guidance when evaluating the biological significance of the response.
Egnede statistiske metoder kan benyttes som hjælpemiddel ved evalueringen af testresultaterne (65).
Appropriate statistical methods may be used as an aid in evaluating the test results (65).
Dosis-responsforholdet skal imidlertid også indgå i bedømmelsen af de statistiske testresultater.
However, the results of statistical testing should be assessed with respect to dose-response relationship.
Reproducerbarhed og historiske data skal også tages i betragtning.
Reproducibility and historical data should also be taken into consideration.
De fleste forsøg giver klart positivt eller negativt resultat, men i nogle tilfælde giver dataene ikke mulighed for en endegyldig bedømmelse af teststoffets aktivitet.
Although most experiments will give clearly positive or negative results, in some cases the data set will preclude making a definite judgement about the activity of the test substance.
Resultatet kan stadig være tvetydigt eller tvivlsomt, uanset hvor mange gange forsøget gentages.
These equivocal or questionable responses may occur regardless of the number of times the experiment is repeated.
Et positivt resultat af MNvit-assayet viser, at teststoffet fremkalder kromosombrud eller kromosomtab i dyrkede celler fra pattedyr.
Positive results from the MNvit assay indicate that the test substance induces chromosome breakage or chromosome loss, in cultured mammalian cells.
Et negativt resultat viser, at teststoffet under testbetingelserne ikke fremkalder kromosombrud og/eller gevinst eller tab af kromosomer i dyrkede celler fra pattedyr.
Negative results indicate that, under the test conditions used, the test substance does not induce chromosome breaks and/or gain or loss in cultured mammalian cells.
Testrapporten skal som minimum omfatte følgende oplysninger, hvis de er relevante for undersøgelsens gennemførelse:
The test report should include at least the following information, if relevant to the conduct of the study:
Testkemikalie
Test chemical:
identifikationsoplysninger, CAS-nr. (Chemical Abstract Services Registry Number) og EF-nr.
identification data and Chemical Abstract Services Registry Number and EC Number;
fysiske egenskaber og renhedsgrad
physical nature and purity;
fysisk-kemiske egenskaber, som er relevante for undersøgelsen
physico-chemical properties relevant to the conduct of the study;
testkemikaliets reaktivitet med opløsningsmiddel/bærestof eller celledyrkningsmedium
reactivity of the test chemical with the solvent/vehicle or cell culture media;
Opløsningsmiddel/bærestof
Solvent/Vehicle:
begrundelse for valg af opløsningsmiddel/bærestof
justification for choice of solvent/vehicle;
teststoffets opløselighed og stabilitet i opløsningsmiddel/bærestof
solubility and stability of the test substance in solvent/vehicle;
Celler
Cells:
den valgte celletype og oprindelse
type and source of cells used;
den valgte celletypes egnethed
suitability of the cell type used;
eventuelt fravær af mykoplasma
absence of mycoplasma, if applicable;
oplysninger om cellecyklussens længde, fordoblingstid eller proliferationsindeks
information on cell cycle length, doubling time or proliferation index;
ved anvendelse af humane lymfocytter, bloddonorers køn, alder og antal, hvis det er relevant
where lymphocytes are used, sex, age and number of blood donors, if applicable;
ved anvendelse af humane lymfocytter, om fuldblod eller fraseparerede lymfocytter eksponeres
where lymphocytes are used, whether whole blood or separated lymphocytes are exposed;
eventuelt antal passager
number of passages, if applicable;
eventuelle metoder til opretholdelse af cellekulturer
methods for maintenance of cell cultures, if applicable;
normalt kromosomtal
modal number of chromosomes;
cellecyklussens normale længde (negativ kontrol)
normal (negative control) cell cycle time;
det cytokineseblokerende stofs (f.eks. cytoB) betegnelse og koncentration og længden af cellernes udsættelse for stoffet
identity of cytokinesis blocking substance (e.g. cytoB), if used, and its concentration and duration of cell exposure;
begrundelse for valg af koncentrationer og antal kulturer, herunder eventuelle cytotoksicitetsdata og opløselighedsbegrænsninger
rationale for selection of concentrations and number of cultures, including cytotoxicity data and solubility limitations, if available;
substratsammensætning og eventuel CO2-koncentration
composition of media, CO2 concentration, if applicable;
teststofkoncentrationer
concentrations of test substance;
koncentration (og/eller volumen) af tilsat bærestof og teststof
concentration (and/or volume) of vehicle and test substance added;
inkubationstemperatur og -periode
incubation temperature and time;
behandlingens varighed
duration of treatment;
høsttidspunkt efter behandling
harvest time after treatment;
celletæthed ved udsåning, hvis det er relevant
cell density at seeding, if applicable;
metabolismeaktiveringssystemets type og sammensætning, herunder acceptkriterier
type and composition of metabolic activation system, including acceptability criteria;
positive og negative kontrolprøver
positive control chemicals and negative controls;
anvendte metoder til præparering af objektglas og farvningsteknik
methods of slide preparation and staining technique used;
kriterier for identifikation af mikrokerner
criteria for micronucleus identification;
antal analyserede celler
numbers of cells analysed;
metoder til måling af cytotoksicitet
methods for the measurements of cytotoxicity;
eventuelle supplerende oplysninger vedrørende cytotoksicitet
any supplementary information relevant to cytotoxicity;
kriterier for bedømmelse af undersøgelsen som positiv, negativ eller tvetydig
criteria for considering studies as positive, negative, or equivocal;
anvendte statistiske analysemetoder
method(s) of statistical analysis used;
metoder som f.eks. anvendelse af kinetokor-antistof til bestemmelse af, om mikrokerner indeholder hele kromosomer eller kromosomfragmenter.
methods, such as use of kinetochore antibody, to characterise whether micronuclei contain whole or fragmented chromosomes, if applicable;
anvendt måling af cytotoksicitet, f.eks. CBPI eller RI ved anvendelse af cytokineseblokeringsmetoden, RICC, RPD eller PI, når cytokineseblokeringsmetoden ikke anvendes, andre relevante observationer, f.eks. cellekonfluens, apoptose, nekrose, antal metafaser, forekomst af binukleære celler
measurement of cytotoxicity used, e.g. CBPI or RI in the case of cytokinesis-block method; RICC, RPD or PI when cytokinesis-block methods are not used; other observations when applicable, e.g. cell confluency, apoptosis, necrosis, metaphase counting, frequency of binucleated cells;
tegn på udfældning
signs of precipitation;
data om pH og osmolalitet i behandlingsmediet, hvis disse værdier er målt
data on pH and osmolality of the treatment medium, if determined;
definition af acceptable celler til analyse
definition of acceptable cells for analysis;
fordeling af mono-, bi- og multinukleære celler ved anvendelse af en cytokineseblokeringsmetode
distribution of mono-, bi-, and multi-nucleated cells if a cytokinesis block method is used;
antal celler med mikrokerner, anført særskilt for hver behandlet kultur og kontrolkultur, og bestemmelse af, om de er indsamlet fra binukleære eller mononukleære celler, hvis det er relevant
number of cells with micronuclei given separately for each treated and control culture, and defining whether from binucleate or mononucleate cells, where appropriate;
koncentrations-responssammenhængen, når det er muligt
concentration-response relationship, where possible;
kemiske data (koncentrationer og opløsningsmidler) for sideløbende negative (opløsningsmiddel/bærestof) og positive kontrolprøver
concurrent negative (solvent/vehicle) and positive control chemical data (concentrations and solvents);
kemiske data for tidligere negative (opløsningsmiddel/bærestof) og positive kontrolprøver med angivelse af intervaller, gennemsnit, standardafvigelser og konfidensinterval (f.eks. 95 %)
historical negative (solvent/vehicle) and positive control chemical data, with ranges, means and standard deviation and confidence interval (e.g. 95 %);
statistisk analyse og eventuelle P-værdier.
statistical analysis; p-values if any;
Kirsch-Volders, M., Sofuni, T., Aardema, M., Albertini, S., Eastmond, D., Fenech, M., Ishidate, M. Jr., Kirchner, S., Lorge, E., Morita, T., Norppa, H., Surralles, J., Vanhauwaert, A. and Wakata, A. (2004), Corrigendum to »Report from the in vitro micronucleus assay working group«, Mutation Res., 564, 97-100.
Kirsch-Volders, M., Sofuni, T., Aardema, M., Albertini, S., Eastmond, D., Fenech, M., Ishidate, M. Jr., Kirchner, S., Lorge, E., Morita, T., Norppa, H., Surralles, J., Vanhauwaert, A. and Wakata, A. (2004), Corrigendum to “Report from the in vitro micronucleus assay working group”, Mutation Res., 564, 97-100.