natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Koncentrationen af teststoffet skal ligge over 80 % af startkoncentrationen i et tidsrum, der svarer til testens varighed.
The concentrations of the test substance shall be maintained to within 80 % of the initial concentrations/throughout a time corresponding to the duration of the test.
skal der som værdi for startkoncentrationen anvendes den koncentration, som er målt ved testens begyndelse.
the initial concentration shall be taken as the concentration measured at the start of the test.
Koncentrationen bestemmes efter, at der opnået ligevægt.
The concentration shall be determined after a period of equilibration.
Det er velkendt, at en væsentlig mængde teststof vil være indeholdt i algebiomassen ved testens afslutning.
It is recognised that significant amounts of the test substance may be incorporated into the algal biomass during the period of the test.
Derfor burde både den del af teststoffet, der er indeholdt i biomassen, og den del, der er i opløsning (eller hvis det ikke er teknisk muligt, målt i vandsøjlen), tages i betragtning ved godtgørelse af, at ovennævnte kvalitetskriterier er opfyldt.
Therefore, for the purpose of demonstrating compliance with the above quality criteria, both the amount of the substance incorporated into the algal biomass and the substance in solution (or, if not technically possible measured in the water column) should be taken into account.
Da det kan volde betydelige tekniske problemer at bestemme teststofkoncentrationen i algebiomassen, kan opfyldelse af kvalitetskriterierne godtgøres ved, at der anvendes en testbeholder med den højeste stofkoncentration men uden alger, hvori koncentrationen i opløsningen (eller hvis det ikke er teknisk muligt, i vandsøjlen) måles ved testperiodens begyndelse og slutning.
However, as determination of the substance concentration in the algal biomass may pose significant technical problems, compliance with the quality criteria may be demonstrated by running a test vessel at the highest substance concentration but without algae and measuring concentrations in solution (or, if not technically possible in the water column) at the beginning and at the end of the test period.
BESKRIVELSE AF TESTPROCEDUREN
DESCRIPTION OF THE TEST PROCEDURE
De valgte testkoncentrationer fremstilles ved tilsætning af passende teststofmængder til algeforkulturer (se tillæg 1).
The chosen test concentrations are prepared by adding suitable aliquots to algal pre-cultures (see Appendix 1).
Stoffer testes normalt kun op til opløselighedsgrænsen.
Substances should normally only be tested up to the limit of solubility.
For visse stoffer (f.eks. stoffer, som er tungt opløselige i vand, som har en høj Pow-værdi, eller som danner en stabil dispersion og ikke en ægte opløsning) kan det accepteres, at der anvendes en testkoncentration, der et større end opløseligheden, så det sikres, at den højeste opløste/stabile koncentration er nået.
For some substances (e.g. substances having low solubility in water, or high Pow or those forming stable dispersion rather than true solution in water), it is acceptable to run a test concentration above the solubility limit of the substance to ensure that the maximum soluble stable concentration has been obtained.
Hvis der anvendes hjælpestoffer, skal alle testkoncentrationer indeholde samme mængde hjælpestof, og der anvendes en ekstra kontrolkultur, der udsættes for samme koncentration af hjælpestoffet, som der er anvendt i testserien.
When such auxiliary substances are used, all test concentrations should contain the same amount of auxiliary substances, and additional controls should be exposed to the same concentration of the auxiliary substance as that used in the test series.
I så fald justeres stamopløsningens pH til samme værdi som i det vand, der anvendes til fortynding, medmindre der er særlige grunde til at undlade dette.
In that case, the pH value of the stock solution should be adjusted to the pH value of the solution water unless there are specific reasons not to do so.
Testmedium
Test medium
Vandet skal være destilleret vand af god kvalitet eller deioniseret vand med en ledningsevne på mindre end 5 μS.cm-1.
The water should be good-quality distilled water, or deionised water with a conductivity less than 5 μS.cm-1.
Vanddestillationsapparater må ikke indeholde dele af kobber.
The apparatus for distillation of water must not contain any part made of copper.
Følgende medium anbefales.
The following medium is recommended.
Der fremstilles fire stamopløsninger ifølge nedenstående tabel.
Four stock solutions are prepared, according to the following table.
Stamopløsningerne steriliseres ved autoklavering eller membranfiltrering, hvorefter de opbevares ved 4 oC beskyttet mod lys.
The stock solutions are sterilised by membrane filtration or by autoclaving, and stored in the dark at 4 oC.
Stamopløsning nr. 4 må kun steriliseres ved membranfiltrering.
Stock solution No 4 should be sterilised only by membrane filtration.
Testopløsningernes endelige næringsstofkoncentration opnås ved fortynding af stamopløsningerne.
These stock solutions are diluted to achieve the final nutrient concentrations in the test solutions.
Koncentration i stamopløsning
Concentration in the stock solution
Slutkoncentration i testopløsning
Final concentration in the test solution
Sumopløsning 1: hovednæringsstoffer
Stock solution 1: macro-nutrients
MgCl2-6H2O
MgCl2.6H2O
CaCl2-2H2O
CaCl2.2H2O
Stamopløsning 2: Fe-EDTA
Stock solution 2: Fe-EDTA
Na2EDTA-2H2O
Na2EDTA.2H2O
Stamopløsning 3: sporstoffer
Stock solution 3: trace elements
3 × l0-3 mg/l
3 × 10-3 mg/l
Na2MoO4-2H2O
Na2MoO4.2H2O
7 × 10-3 mg/l
7 × 10-3mg/l
Stamopløsning 4: NaHCO3
Stock solution 4: NaHCO3
Når mediet er kommet i ligevægt med luft, er dets pH ca. 8.
The pH of the medium after equilibration with air is approximately 8.
Sædvanligt laboratorieudstyr.
Normal laboratory equipment.
Testkolber af passende volumen (f.eks. er 250 ml konisk kolbe passende til et testopløsningsvolumen på 100 ml).
test flasks of suitable volume (e.g. 250 ml conical flasks are suitable when the volume of the test solution is 100 ml).
Alle testkolber skal være identiske, både med hensyn til materiale og dimensioner.
All test flasks should be identical as regards to material and dimensions,
Dyrkningsappararur: kammer, hvori en temperatur mellem 21 og 25 oC kan holdes inden for ± 2 oC, og som har kontinuerlig ensartet belysning i området 400-700 nm.
culturing apparatus: cabinet or chamber in which a temperature in the range 21 oC to 25 oC can be maintained at ± 2 oC, and continuous uniform illumination provided in the spectral range 400 to 700 nm.
Vækstbetingelserne, herunder lysstyrken, anses for at have været tilfredsstillende, hvis kontrolkulturerne når op på den anbefalede væksthastighed.
If algae in control cultures have achieved the recommended growth rates, it can be assumed that the conditions for growth, including light intensity, have been adequate.
Det anbefales at anvende en lysintensitet, som er på 60-120 μE m-2.S-1 (35-70 × 1018 fotoner m-2.s-1), når den måles i området 400-700 nm med en egnet modtager.
It is recommended to use, at the average level of the test solutions, a light intensity in the range 60 to 120 μE.m- 2.s-1 (35 to 70 × 1018 photons.m- 2.s-1) when measured in the range 400 to 700 nm using an appropriate receptor.
For lysmåleudstyr, der er kalibreret i lux, er det tilsvarende passende niveau på 6000-10000 lux.
For light measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 6000 to 10000 lx is acceptable.
Denne lysintensitet kan opnås ved hjælp af 4-7 lysstofrør på 30 W af hvid standardtype (farvetemperatur ca. 4000 K) anbragt i en afstand af 35 cm fra algekulturen.
The light intensity could be obtained using four to seven 30 W fluorescent lamps of the universal white type (colour temperature of approximately 4300 K), at a distance of 0,35 m from the algal culture,
Målinger af celletætheden foretages ved direkte tælling af levende celler, f.eks. ved hjælp af et mikroskop med tællekammer.
Cell density measurements should be made using a direct counting method of living cells, e.g. a microscope with counting chambers.
Andre metoder (fotometri, turbidimetri m.fl.) kan dog benyttes, hvis de er tilstrækkelig følsomme og det påvises, at de korrelerer tilstrækkelig godt med celletætheden.
However, other procedures (photometry, turbidimetry, ...) may be used if sufficiently sensitive and if shown to be sufficiently well correlated with cell density.
Testorganismer
Test organisms
Det foreslås, at der anvendes en hurtigtvoksende grønalgeart, der er egnet til dyrkning og test.
It is suggested that the species of green algae used be a fast-growing species that is convenient for culturing and testing.
Følgende arter foretrækkes;
The following species are preferred:
Selenastrum capricornutum, f.eks. ATCC 22662 eller CCAP 278/4
Selenastrum capricornutum, e.g. ATCC 22662 or CCAP 278/4,
Scenedesmus subsptcatus, f.eks. 86.81 SAG.
Scenedesmus subspicatus, e.g. 86.81 SAG,
ATCC American Type Culture Collection (USA)
ATCC American Type Culture Collection (U.S.A.)
CCAP Culture Centre of Algae and Protozoa (UK)
CCAP Culture Centre of Algae and Protozoa (U.K.)
SAG Collection of algal culture (Göttingen, Tyskland)
SAG Collection of algal culture (Gottingen, F.R.G.)
Ved anvendelse af andre arter skal den benyttede stamme anføres i rapporten.
If other species are used, the strain should be reported.
Ved hjælp af indledende test bestemmes det koncentrationsområde, hvor der kan forventes at indtræde virkninger.
The concentration range in which effects are likely to occur is determined on the basis of results from range-finding tests.
De to mål for væksten (biomasse og væksthastighed) kan føre til vidt forskellige resultater for væksthæmning; de skal begge anvendes i de indledende test, så det sikres, at både EbC50 og ErC50 kan skønnes ud fra den kvotientrække, der vælges for koncentrationerne.
The two measures of growth (biomass and growth rate) may result in widely disparate measures of growth inhibition; both should be used in the range finding test to ensure that the geometric progression of concentrations will allow estimation of both the EbC50 and the ErC50.
Celletætheden ved forsøgets begyndelse
Initial cell density
Den anbefalede celletæthed i prøvekulturerne ved forsøgets begyndelse er ca. 104 celler/ml for Selenastrum capricornutum og Scenedesmus subspicatus.
It is recommended that the initial cell density in the test cultures be approximately 104 cells/ml for Selenastrum capricornutum and Scenedesmus subspicatus.
Ved anvendelse af andre arter skal biomasser være af samme størrelsesorden.
When other species are used the biomass should be comparable.
Koncentrationer af teststoffet
Concentrations of test substance
Til forsøget anvendes der mindst fem koncentrationer, der danner en kvotientrække med en kvotient på højst 2,2.
For the test, at least five concentrations are made up in a geometric series at a concentration ratio not exceeding 2,2.
Den laveste koncentration må ikke have nogen synlig virkning på algernes vækst.
The lowest concentration tested should have no observed effect on the growth of the algae.
Den højeste koncentration skal hæmme væksten med mindst 50 % i forhold til kontrolkulturen og helst standse væksten helt.
The highest concentration tested should inhibit growth by at least 50 % relative to the control and, preferably, stop growth completely.
Gentagelser og kontrolkulturer
Replicates and controls
Forsøgsplanen skal omfatte tredobbelt bestemmelse ved hver koncentration.
The test design should include three replicates at each test concentration.
Der medtages desuden tre kontrolkulturer uden teststof og i givet fald tre kontrolkulturer med hjælpestof.
Three controls without test substance are run and, if relevant, three controls containing the auxiliary substance are also run.
Hvis det er begrundet, kan forsøgsplanen ændres ved, at antallet af koncentrationer øges og antallet af bestemmelser pr. koncentration nedsættes.
If justified, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Der fremstilles testkulturer med den ønskede teststofkoncentration og den ønskede mængde algeinoculum ved tilsætning af stamopløsning af teststoffet til en passende mængde algeforkultur (se tillæg 1).
Test cultures containing the desired concentrations of test substance and the desired quantity of algal inoculum are prepared by adding aliquots of stock solutions of the test substance to suitable amounts of algal pre-cultures (see Appendix 1).
Testkolberne rystes og anbringes i dyrkningsapparaturet.
The culture flasks are shaken and placed in the culturing apparatus.
Algecellerne holdes i suspension ved rystning, omrøring eller gennembobling med luft, således at der bliver bedre luftudveksling og mindre pH-variationer i testopløsningerne.
The algal cells are kept in suspension by shaking, stirring or bubbling with air, in order to improve gas exchange and reduce pH variation in the test solutions.
Kulturerne holdes ved en temperatur mellem 21 og 25 oC, der holdes konstant inden for ± 2 oC.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 25 oC, controlled at ± 2 oC.
Celletætheden i hver kolbe bestemmes mindst tre gange, nemlig 24, 48 og 72 timer efter forsøgets begyndelse.
The cell density in each flask is determined at least at 24, 48 and 72 hours after the start of the test.
Når celletætheden måles på anden måde end ved direkte tælling, anvendes der filtreret algemedium med den pågældende teststofkoncentration til bestemmelse af baggrundsværdien.
Filtered algal medium containing the appropriate concentration of the test chemical is used to determine the background when using cell density measurements other than direct counting methods.
pH måles ved forsøgets begyndelse og efter 72 timer.
The pH is measured at the beginning of the test and at 72 hours.
Kontrolkulturernes pH må normalt ikke afvige med mere end 1,5 i løbet af forsøget.
The pH of the controls should not normally deviate by more than 1,5 units during the test.
Test af flygtige stoffer
Testing volatile substances
Der findes i dag ingen generelt accepteret metode til test af flygtige stoffer.
There is to date no generally accepted way to test volatile substances.
Hvis et stof vides at have tendens til at fordampe, kan der benyttes lukkede testkolber med ekstra luftrum over væsken.
When a substance is known to have a tendency to vaporise, closed test flasks with increased head-space may be used.
Muligheden for CO2-mangel skal tages i betragtning, når dette ekstra luftrum beregnes.
The possibility of shortage of CO2 should be considered when calculating the head-space of the closed flasks.
Der er foreslåer varianter af denne metode (se henvisning (4)).
Variations to this method have been proposed (see reference (4)).
Den mængde stof, der forbliver i opløsning, skal forsøges bestemt, og det tilrådes, at der udvises den største forsigtighed ved fortolkning af resultater af test, der er udført med flygtige kemikalier i lukkede kolber.
Attempts should be made to determine the amount of the substance which remains in solution, and extreme caution is advised when interpreting results of tests with volatile chemicals using closed systems.
Der kan under anvendelse af den i denne test anførte fremgangsmåde udføres en grænsetest med 100 mg/l til konstatering af, om EC50 er større end denne koncentration.
Using the procedures described in this method, a limit test may be performed at 100 mg per litre in order to demonstrate that the EC50 is greater than this concentration.
Grænsetesten udføres mindst som en tredobbeltbestemmelse og med kontrolkulturer af samme størrelse.
The limit test should be performed at least in triplicate, with the same number of controls.
Begge mål for væksten (biomasse og væksthastighed) benyttes i grænsetesten.
The two measures of growth (biomass and growth rate) should be used for the limit test.
Hvis biomassen eller væksthastigheden er mindst 25 % lavere i grænsetesten end i kontrolkulturen, må der gennemføres en komplet undersøgelse.
If, in a limit test, a mean decrease of 25 % or more is found in either biomass or growth rate between the limit test and the control, a full test should be carried out.
De to nedenstående metoder kan benyttes til bestemmelse af sammenhængen mellem koncentration og virkning.
Some substances can stimulate the growth at low concentrations.
Nogle stoffer kan virke vækstfremmende ved lave koncentrationer, Kun datapunkter, hvor hæmningen er mellem 0 og 100 %, tages i betragtning.
Only data points indicating inhibition between 0 and 100 % should be considered.
SAMMENLIGNING AF AREALER UNDER VÆKSTKURVERNE
COMPARISON OF AREAS UNDER THE GROWTH CURVES
Arealet mellem vækstkurverne og den vandrette linje N = No kan beregnes ved følgende formel:
The area between the growth curves and the horizontal line N = N0 may be calculated according to the formula:
A arealet
A area
antallet af celler pr. ml på tidspunktet t0 (testens begyndelse)
number of cells/ml at time t0 (beginning of the test),o,
antallet af celler pr. ml på tidspunktet t1
measured number of cells/ml at t1
antallet af celler pr. ml på tidspunktet tn
measured number of cells/ml at time
tidspunktet for første måling efter testens begyndelse
time of first measurement after beginning of test
tidspunktet for n'te måling efter testens begyndelse
time of nth measurement after beginning of test.
n det antal målinger, der er foretaget efter testens begyndelse.
n number of measurements taken after the beginning of the test.
Den procentvise hæmning af cellevæksten beregnes ved hver teststofkoncentration (IA) efter følgende formel:
The percentage inhibition of the cell growth at each test substance concentration (IA) is calculated according to the formula:
arealet mellem den vandrette linje N = No og vækstkurven for kontrolkulturen
area between the control growth curve and the horizontal line N = No.
arealet mellem den vandrette linje N = NO og vækstkurven ved koncentrationen t.
area between the growth curve at the concentration t and the horizontal line N = No.
Det er vigtigt, at den pågældende eksponeringstid anføres sammen med EbC50, f.eks. EbC50 (0-72 timer).
It is essential that the EbC50 is quoted with the appropriate exposure period, e.g. EbC50 (0-72h).
SAMMENLIGNING AF VÆKSTRATER (SPECIFIKKE VÆKSTHASTIGHEDER)
COMPARISON OF GROWTH RATES
Den gennemsnitlige specifikke væksthastighed (μ) for kulturer i den eksponentielle vækstfase kan beregnes ved
The average specific growth rate (μ) for exponentially growing cultures can be calculated as
hvor t0 er tidspunktet for forsøgets begyndelse.
where to is the time at the beginning of the test.
Alternativt kan den gennemsnitlige specifikke væksthastighed afledes af hældningen af regressionslinjen i en afbildning af ln N mod tiden.
Alternatively, the average specific growth rate may be derived from the slope of the regression line in a plot of ln N versus time.
Den procentvise hæmning af den gennemsnitlige specifikke væksthastighed beregnes for hver teststofkoncentration (Iμt) ved hjælp af følgende formel:
The percentage inhibition of specific growth rate at each test substance concentration (Iμt) is calculated according to the formula:
kontrolkulturens gennemsnitlige specifikke væksthastighed (= gennemsnitlige vækstrate)
mean control specific growth rate
den gennemsnitlige specifikke væksthastighed ved testkoncentrationen t.
mean specific growth rate for the test concentration t
Den procentvise nedsættelse i den gennemsnitlige specifikke væksthastighed ved hver teststofkoncentration i forhold til kontrolværdien afbildes mod logaritmen til koncentrationen.
The percentage reduction in average specific growth rate at each test substance concentration compared to the control value is plotted against the logarithm of the concentration.
kan aflæses af den fremkomne kurve.
The EC5o may be read from the resulting graph.
Som utvetydig betegnelse for den EC50-værdi, der er fundet ved denne beregningsmetode, foreslås det at benytte ErC50.
To denote unambiguously the EC50 derived by this method it is proposed to use the symbol ErC50.
Måletidspunkterne skal anføres, dvs. at betegnelsen bliver f.eks. ErC50 (0-72 timer), hvis værdierne vedrører tidspunkterne 0 og 72 timer.
The times of measurement must be indicated, e.g. if the value relates to times 0 and 72 hours, the symbol becomes ErC50 (0-72h).
Bemærk: Specifik væksthastighed er et logaritmisk udtryk, og små ændringer i vækstraten (= den specifikke væksthastighed) kan medføre store ændringer i biomassen.
Note: specific growth rate is a logarithmic term, and small changes in growth rate may lead to great changes in biomass.
Man kan derfor ikke sammenligne talværdierne for EbC og ErC direkte.
EbC and ErC values are therefore not numerically comparable.
BEREGNING AF NOEC-VÆRDIEN
CALCULATION OF THE NOEC
Den koncentration, hvor der ikke kan iagttages nogen virkning, (NOEC-værdien) bestemmes ved hjælp af en egnet statistisk metode til sammenligning af flere prøver (f.eks. variansanalyse eller Dunnetts test), som anvendes på de enkelte værdier af arealerne under vækstkurverne A (se 2.1) eller af de specifikke væksthastigheder μ (se 2.2).
The No Observed Effect Concentration is determined by a suitable statistical procedure for multisample comparison (e.g. analysis of variance and Dunnett's test), using the individual replicates values of the areas under the growth curves A (see point 2.1) or the specific growth rates μ (see point 2.2).
teststof: data for kemisk identifikation
test substance: chemical identification data,
testorganismer: oprindelse, laboratoriekultur, stammenummer og dyrkningsmetode
test organisms: origin, laboratory culture, strain number, method of cultivation,
testens begyndelses- og sluttidspunkt og dens varighed
date of the start and the end of the test and its duration,
temperatur
temperature,
mediets sammensætning
composition of medium,
dyrkningsapparatur
culturing apparatus,
opløsningernes pH ved testens begyndelse og afslutning (der redegøres for eventuelt iagttagne afvigelser på mere end 1,5)
pH of solutions at the start and end of the test (an explanation should be provided if pH deviations of more than 1,5 unit are observed),
hvilket vehikel og hvilken metode der er anvendt til opløsning af teststoffet, samt vehiklens koncentration i testopløsningeme
vehicle and method used for solubilising the test substance and concentration of the vehicle in the test solutions,
lysintensitet og -kvalitet
light intensity and quality,
testkoncentrationer (målte eller nominelle)
concentrations tested (measured or nominal).
resultater:
results:
celletæthed i hver kolbe ved hvert målepunkt, samt hvilken metode der er anvendt til måling af celletætheden
cell density for each flask at each measuring point and method for measuring cell density,
gennemsnitlige celletætheder
mean values of cell density,
vækstkurver
growth curves,
grafisk fremstilling af sammenhængen mellem koncentration og effekt
graphical presentation of the concentration effect relationship,
EC-værdier og beregningsmetode
EC values and method of calculation,
andre iagttagne effekter.
other observed effects.
Umweltbundesamt. Berlin, 1984, Verfahrensvorschlag »Hemmung der Zellvermehrung bei der Grünalge Scenedesmus subspicatus«, in: Rudolph/Boje: Okotoxikologie, ecomed, Landsberg, 1986.
Umweltbundesamt, Berlin, 1984, Verfahrensvorschlag ‘Hemmung der Zellvermehrung bei der Grünalge Scenedesmus subspicatus’, in: Rudolph/Boje: bkotoxikologie, ecomed, Landsberg, 1986.
ISO 8692 — Water Quality — Fresh water algal growth inhibition test with Scenedesmus subspicatus and Selenastrum capricornurum.
ISO 8692 — Water quality — Fresh water algal growth inhibition test with Scenedesmus subspicatus and Selenastrum capricornutum.
and M.Vighi — Chemosphere, 1981, vol. 10, 1123-1126.
and M.Vighi — Chemosphere, 1981, vol.10, 1123-1126.
Eksempel på fremgangsmåde ved dyrkning af alger
Example of a procedure for the culturing of algae
Formålet med dyrkning efter følgende fremgangsmåde er at fremskaffe algekulturer til toksicitetstest.
The purpose of culturing on the basis of the following procedure is to obtain algal cultures for toxicity tests.