natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Forskellen mellem resultaterne af to bestemmelser af det samme prøvemateriale, der foretages i forskellige laboratorier med forskelligt udstyr, må ikke overstige 25,3 mg/kg.
The difference between the results of two determinations carried out by operators in different laboratories, using different apparatus on identical test material, may not exceed 25,3 mg/kg.
Forskellen mellem resultaterne af to bestemmelser af det samme prøvemateriale, der foretages i forskellige laboratorier med forskelligt udstyr, må ikke være større end 8,9 % af gennemsnittet af resultaterne.
The difference between the results of two determinations carried out by operators in different laboratories, using different apparatus on identical test material, may not exceed 8,9 % relative to the mean of the determinations.
Præcisionsdataene er fastlagt på grundlag af et eksperiment, som i 1991 blev foretaget med ni laboratorier og seks prøver (blindbestemmelse med tre dobbeltprøver) for stigmasterol samt seks prøver (blindbestemmelse med tre dobbeltprøver) for sitosterol.
The precision data were determined from an experiment conducted in 1991 involving nine laboratories and six samples (three blind duplicates) for stigmasterol and six samples (three blind duplicates) for sitosterol.
Der iblandes 150 g mindst 95 % ren stigmasterol pr. t smør, dvs. 142,5 mg/kg, eller 170 g mindst 85 % ren stigmasterol pr. t smør, dvs. 144,5 mg/kg.
The incorporation rate for stigmasterol is 150 g of at least 95 % pure stigmasterol per tonne of butter, i.e. 142,5 mg/kg, or 170 g of at least 85 % pure stigmasterol per tonne of butter, i.e. 144,5 mg/kg.
115,8 mg/kg (95 % af den mindste iblanding for 95 % ren stigmasterol)
115,8 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
117,7 mg/kg (95 % af den mindste iblanding for 85 % ren stigmasterol)
117,7 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol),
80,1 mg/kg (70 % af den mindste iblanding for 95 % ren stigmasterol)
80,1 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
81,5 mg/kg (70 % af den mindste iblanding for 85 % ren stigmasterol).
81,5 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol).
Koncentrationen af røbestoffet i den prøve, der giver det laveste resultat, benyttes sammen med interpolering mellem 115,8 mg/kg og 80,1 mg/kg eller mellem 117,7 mg/kg og 81,5 mg/kg.
The tracer concentration of the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation respectively between 115,8 mg/kg and 80,1 mg/kg or 117,7 mg/kg and 81,5 mg/kg.
Der iblandes 600 g mindst 90 % ren sitosterol pr. t smør, dvs. 540 mg/kg.
The incorporation rate for sitosterol is 600 g of at least 90 % pure sitosterol per tonne of butter, i.e. 540 mg/kg
482,6 mg/kg (95 % af den mindste iblanding for 90 % ren sitosterol)
482,6 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol),
347,6 mg/kg (70 % af den mindste iblanding for 90 % ren sitosterol).
347,6 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol).
Koncentrationen af røbestoffet i den prøve, der giver det laveste resultat, benyttes sammen med interpolering mellem 482,6 mg/kg og 347,6 mg/kg.
The tracer concentration of the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation between 482,6 mg/kg and 347,6 mg/kg.
Der iblandes 150 g mindst 95 % ren stigmasterol pr. t koncentreret smør, dvs. 142,5 mg/kg eller 170 g mindst 85 % ren stigmasterol pr. t koncentreret smør, dvs. 144,5 mg/kg.
The incorporation rate for stigmasterol is 150 g of at least 95 % pure stigmasterol per tonne of concentrated butter, i.e. 142,5 mg/kg; or 170 g of at least 85 % pure stigmasterol per tonne of concentrated butter, i.e. 144,5 mg/kg
118,5 mg/kg (95 % af den mindste iblanding for 95 % ren stigmasterol)
118,5 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
120,4 mg/kg (95 % af den mindste iblanding for 85 % ren stigmasterol)
120,4 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol),
82,9 mg/kg (70 % af den mindste iblanding for 95 % ren stigmasterol)
82,9 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
84,3 mg/kg (70 % af den mindste iblanding for 85 % ren stigmasterol).
84,3 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol).
Koncentrationen af røbestoffet i den prøve, der giver det laveste resultat, benyttes sammen med interpolering mellem 118,5 mg/kg og 82,9 mg/kg eller mellem 120,4 mg/kg og 84,3 mg/kg.
The tracer concentration of the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation respectively between 118,5 mg/kg and 82,9 mg/kg or 120,4 mg/kg and 84,3 mg/kg.
Der iblandes 600 g mindst 90 % ren sitosterol pr. t koncentreret smør, dvs. 540 mg/kg.
The incorporation rate for sitosterol is 600 g of at least 90 % pure sitosterol per tonne of concentrated butter, i.e. 540 mg/kg
480,9 mg/kg (95 % af den mindste iblanding for 90 % ren sitosterol)
480,9 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol),
345,9 mg/kg (70 % af den mindste iblanding for 90 % ren sitosterol).
345,9 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol).
Koncentrationen af røbestoffet i den prøve, der giver det laveste resultat, benyttes sammen med interpolering mellem 480,9 mg/kg og 345,9 mg/kg.
The tracer concentration in the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation between 480,9 mg/kg and 345,9 mg/kg.
Kromatogram af opløsning til kontrol af adskillelsesevne
Chromatogram of resolution test mixture
Det er bedst, hvis toppene er fuldstændig adskilt, dvs. At toppen for lanosterol går helt ned til basislinjen, før sitosteroltoppen begynder. En vis overlapning kan dog accepteres.
Complete resolution is preferable, i.e. the peak trace for lanosterol should return to baseline before leaving for the sitosterol peak although incomplete resolution is tolerable.
Flammeioniseringsdetektorrespons
FID Detector response
Tid (i min.)
Time (mins)
Bemœrk: Integration af stigmasteroltoppen skal også omfatte en eventuel hale som afgrænset af punkt 1, 2 og 3.
Note: Integration of the stigmasterol peak should include any tailing as defined by points 1, 2 and 3.
Figur 2a
Figure 2a
Figur 2b
Figure 2b
Stigmasterolstandardopløsning
Stigmasterol standard
Smørprøve denatureret med stigmasterol
Butter sample denatured with stigmasterol
FID-detektorrespons
FID detector response
Betulin (intern standard)
Betulin (internal standard)
(I min.)
(mins)
Bemœrk: β-sitosterol indeholder ofte et fremmedstof (stigmastanol), som eluerer umiddelbart efter β-sitosterol.
Note: β-sitosterol often contains an impurity (identified as stigmastanol) which elutes immediately after β-sitosterol.
Det samlede indhold af β-sitosterol findes ved at lægge disse to toppes arealer sammen.
The areas of these two peaks should be summed when evaluating the total β-sitosterol present.
β-sitosterolstandardopløsning
Sitosterol standard
Smørprøve denatureret med β-sitosterol
Butter sample denatured with β-Sitosterol
REFERENCEMETODE TIL PÅVISNING AF KOMÆLK OG KOMÆLKSKASEINAT I OST FREMSTILLET AF FÅRE-, GEDE- ELLER BØFFELMÆLK ELLER AF BLANDINGER AF FÅRE-, GEDE- OG BØFFELMÆLK
REFERENCE METHOD FOR THE DETECTION OF COWS’ MILK AND CASEINATE IN CHEESES FROM EWES’ MILK, GOATS’ MILK OR BUFFALOS’ MILK OR MIXTURES OF EWES’, GOATS’ AND BUFFALOS’ MILK
Påvisning af komælk og komælkskaseinat i ost fremstillet af fåre-, gede- eller bøffelmælk eller af blandinger af fåre-, gede- og bøffelmælk ved isoelektrisk fokusering af γ-kaseiner efter plasminolyse.
Detection of cows’ milk and caseinate in cheeses made from ewes’ milk, goats’ milk, buffalos’ milk or mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk by isoelectric focusing of γ-caseins after plasminolysis.
Metoden er egnet til følsom og specifik påvisning af rå og varmebehandlet komælk og komælkskaseinat i frisk og modnet ost fremstillet af fåre-, gede- eller bøffelmælk eller af blandinger af fåre-, gede- og bøffelmælk.
The method is suitable for sensitive and specific detection of native and heat-treated cows’ milk and caseinate in fresh and ripened cheeses made from ewes’ milk, goats’ milk, buffalos’ milk or mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk.
Den er ikke egnet til påvisning af, om mælk og ost er forfalsket med varmebehandlede kovalleproteinkoncentrater.
It is not suitable for the detection of milk and cheese adulteration by heat-treated bovine whey protein concentrates.
PRINCIP
PRINCIPLE OF THE METHOD
Isolering af kaseiner fra ost og referenceopløsninger
Isolation of caseins from cheese and the reference standards
Opløsning af isolerede kaseiner, som derefter underkastes plasminspaltning (EC.3.4.21.7).
Dissolving of the isolated caseins and submitting to plasmin (EC.3.4.21.7) cleavage
Isoelektrisk fokusering af de plasminbehandlede kaseiner i tilstedeværelse af urea og farvning af proteinerne.
Isoelectric focusing of plasmin-treated caseins in the presence of urea and staining of proteins
Vurdering af de farvede γ3- og γ2-kaseinmønstre (tegn på komælk) ved sammenligning af mønstret fra prøven med dem, der fremkom i samme gel fra referenceopløsninger med 0 % og 1 % komælk.
Evaluation of stained γ3 and γ2-casein patterns (evidence of cows’ milk) by comparison of the pattern obtained from the sample with those obtained in the same gel from the reference standards containing 0 % and 1 % cows’ milk.
Medmindre andet er angivet, skal der anvendes kemikalier af analysekvalitet.
Unless otherwise indicated, analytical grade chemicals must be used.
Vandet skal være dobbeltdestilleret eller af tilsvarende renhed.
Water must be double-distilled or of equivalent purity.
Bemærkning: Nedenstående detaljer gælder for laboratoriefremstillede polyacrylamidgeler, der indeholder urea, af størrelsen 265 × 125 × 0,25 mm. Hvis der bruges gel af en anden størrelse eller type, skal separationsbetingelserne måske justeres.
Note: The following details apply to laboratory prepared polyacrylamide gels containing urea, of dimensions 265 × 125 × 0,25 mm. Where other sizes and types of gel are used, the separation conditions may have to be adjusted.
Isoelektrisk fokusering
Isoelectric focusing
Reagenser til fremstilling af polyacrylamider, der indeholder urea
Reagents for production of the urea containing polyacrylamide gels
Stamopløsning
Stock gel solution
,85 g acrylamid
4,85 g acrylamide
0,15 g N, N'-metylen-bis-acrylamid (BIS)
0,15 g N, N'-methylene-bis-acrylamide (BIS)
15,00 g glycerol (87 % w/w)
15,00 g glycerol (87 % w/w),
opløses i vand, og der fyldes op til 100 ml. Opbevares i brun glasflaske i køleskab.
in water and make up to 100 ml and store in a brown glass bottle in the refrigerator.
Bemærkning: En forblandet acrylamid/BIS-opløsning, der fås i handelen, kan anvendes frem for de angivne vægte af neurotoksiske acrylamider.
Note: A commercially available preblended acrylamide/BIS solution can be used in preference to the quoted fixed weights of the neurotoxic acrylamides.
Hvis en sådan opløsning indeholder 30 % w/v acrylamid og 0,8 % w/v BIS, skal der bruges et volumen på 16,2 ml i formuleringen i stedet for de angivne vægte.
Where such a solution contains 30 % w/v acrylamide and 0,8 % w/v BIS, a volume of 16,2 ml must be used for the formulation instead of the fixed weights.
Stamopløsningens holdbarhed er højst 10 døgn. Hvis dens ledningsevne er over 5 μS, afioniseres den ved omrøring med 2 g Amberlite MB-3 i 30 minutter og filtreres derefter gennem en 0,45 μm membran.
The shelf life of the stock solution is a maximum of 10 days; if its conductivity is more than 5 μS, de-ionize by stirring with 2 g Amberlite MB-3 for 30 minutes, then filter through a 0,45 μm membrane.
Gelopløsning
Gel solution
Der laves en gelopløsning ved blanding af additiver og amfolytter med stamopløsningen (4.1.1).
Prepare a gel solution by mixing additives and ampholytes with the stock gel solution (see 4.1.1).
9,0 ml stamopløsning
9,0 ml stock solution
24 mg β-alanin
24 mg β-alanine
500 μl amfolyt pH 3,5-9,5 [1]
500 μl ampholyte pH 3,5-9,5 [1]
250 μl amfolyt pH 5-7 [1] Produkterne Ampholine® pH 3,5-9,5 (Pharmacia) og Resolyte® pH 5-7 og pH 6-8 (BDH, Merck) har vist sig særligt velegnede til at opnå den ønskede separation af γ-kaseiner.
250 μl ampholyte pH 5-7 [1] The produce Ampholine® pH 3,5-9,5 (Pharmacia) and Resolyte® pH 5-7 and pH 6-8 (BDH, Merck) have proved particularly suitable for obtaining the required separation of γ-caseins.
250 μl amfolyt pH 6-8 [1] Produkterne Ampholine® pH 3,5-9,5 (Pharmacia) og Resolyte® pH 5-7 og pH 6-8 (BDH, Merck) har vist sig særligt velegnede til at opnå den ønskede separation af γ-kaseiner.
250 μl ampholyte pH 6-8 [1] The produce Ampholine® pH 3,5-9,5 (Pharmacia) and Resolyte® pH 5-7 and pH 6-8 (BDH, Merck) have proved particularly suitable for obtaining the required separation of γ-caseins.
Gelopløsningen blandes og afgasses i 2-3 minutter i et ultralydsbad eller i vakuum.
Mix the gel solution and de-gas for two to three minutes in an ultrasonic bath or in vacuum.
Bemærkning: Gelopløsningen laves straks før ophældningen (6.2).
Note: Prepare the gel solution immediately prior to pouring it (see 6.2).
Katalysatoropløsninger
Catalyst solutions
N, N, N'N'-tetrametylendiamin (TEMED)
N, N, N' N' — tetramethylethylenediamine (Temed)
40 % w/v ammoniumpersulfat (PER)
40 % w/v ammonium persulphate (PER):
800 mg PER opløses i vand, og der fyldes op til 2 ml.
Dissolve 800 mg PER in water and make up to 2 ml.
Bemærkning: Der skal altid bruges frisklavet PER-opløsning.
Note: Always use freshly prepared PER solution.
Kontaktvæske
Contact fluid
Petroleum eller flydende paraffin.
Kerosene or liquid paraffin
Anodeopløsning
Anode solution
5,77 g fosforsyre (85 % w/w) opløses i vand og fortyndes til 100 ml med vand.
Dissolve 5,77 g phosphoric acid (85 % w/w) in water and dilute to 100 ml.
Katodeopløsning
Cathode solution
2,00 natriumhydroxid opløses i vand og fortyndes til 100 ml med vand.
Dissolve 2,00 g sodium hydroxide in water and dilute to 100 ml with water.
Forberedelse af prøven
Sample preparation
Reagenser til proteinisolering
Reagents for protein isolation
Fortyndet eddikesyre (25,0 ml iseddike fortyndet til 100 ml ved vand).
Dilute acetic acid (25,0 ml of glacial acetic acid made up to 100 ml with water)
Proteinopløsende buffer
Protein dissolving buffer
Dissolve:
Dissolve
250 mg dithiothreitol
250 mg dithiothreitol,
opløses i vand, og der fyldes op til 50 ml.
in water and make up to 50 ml
Bemærkning: Opbevares i køleskab — holdbarhed 1 uge.
Note: Store in a refrigerator, maximum shelf-life one week.
Reagenser til plasminspaltning af kaseiner
Reagents for plasmin cleavage of caseins
Ammoniumcarbonatbuffer
Ammonium carbonate buffer
En 0,2 mol/l ammoniumhydrogencarbonatopløsning (1,58 g/100 ml vand) med 0,05 mol/l ethylendiamintetra-eddikesyre (EDTA, 1,46 g/100 ml) titreres med en 0,2 mol/l ammoniumcarbonatopløsning (1,92 g/100 ml vand) med 0,05 mol/l EDTA til pH 8.
Titrate a 0,2 mol/l ammonium hydrogencarbonate solution (1,58 g/100 ml water) containing 0,05 mol/l ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, 1,46 g/100 ml with a 0,2 mol/l ammonium carbonate solution (1,92 g/100 ml water) containing 0,05 mol/l EDTA to ph 8.
Bovin plasmin (EC.
Bovine plasmin (EC.
3.4.21.7), aktivitet mindst 5 U/ml
3.4.21.7), activity at least 5 U/ml
ε-Aminocapronsyre til enzymhæmning
ε-Aminocaproic acid solution for enzyme inhibition
2,624 g ε-aminocapronsyre (6-amino-n-heksanonsyre) opløses i 100 ml 40 % (v/v) ethanol.
Dissolve 2,624 g ε-aminocaproic acid (6 amino-n-hexanoic acid) in 100 ml of 40 % (v/v) ethanol.
Standardopløsninger
Standards
Godkendte referenceopløsninger af en blanding af løbebehandlet skummet fåre- og gedemælk indeholdende 0 % og 1 % komælk kan fås hos Kommissionen, Instituttet for Referencemålinger og -Materialer, B-2440 Geel, Belgien.
Certified reference standards of a mixture of renneted ewes’ and goats’ skimmed milk containing 0 % and 1 % of cows’ milk are available from the Commission’s Institute for Reference Materials and Measurements, B-2440 Geel, Belgium
Fremstilling af midlertidige laboratoriestandardopløsninger af løbebehandlet bøffelmælk indeholdende 0 % og 1 % komælk.
Preparation of laboratory interim-standards of buffalos’ renneted milk containing 0 % and 1 % of cows’ milk
Skummetmælken fremstilles ved centrifugering af bøffelmælk eller rå tankkomælk ved 37 °C ved 2500 g i 20 minutter.
Skimmed milk is prepared by centrifuging of either buffalo or bovine raw bulk milk at 37 °C at 2500 g for 20 minutes.
Efter hurtig afkøling af glas og indhold til 6-8 °C fjernes det øverste fedtlag fuldstændigt.
After cooling the tube and contents rapidly to 6 to 8 °C, the upper fat layer is removed completely.
Til fremstilling af 1 %-standardopløsningen tilsættes 5,00 ml skummet komælk til 495 ml skummet bøffelmælk i et 1 l bæger. pH-værdien justeres til 6,4 ved tilsætning af fortyndet mælkesyre (10 % w/v).
For the preparation of the 1 % standard add 5,00 ml of bovine skimmed milk to a 495 ml of buffalos’ skimmed milk in a 1 l beaker, adjust the pH to 6,4 by the addition of dilute lactic acid (10 % w/v).
Temperaturen justeres til 35 °C, og 100 μl kalveløbe tilsættes (løbeaktivitet: 1:10000, ca. 3000 U/ml). Der omrøres i et minut, hvorefter opløsningen henstår tildækket med alufolie ved 35 °C i en time, så ostemassen kan dannes.
Adjust the temperature to 35 °C and add 100 μl of calf rennet (rennet activity 1: 10000, c. 3000 U/ml), stir for 1 minute and then leave the beaker covered with an aluminium foil at 35 °C for one hour to allow formation of the curd.
Når ostemassen er dannet, frysetørres al den løbebehandlede sødmælk uden forudgående homogenisering eller afdræning af vallen.
After the curd has formed, the whole renneted milk is freeze-dried without prior homogenization or draining of the whey.
Efter frysetørringen formales produktet, så der fremkommer et homogent pulver.
After freeze-drying it is finely ground to produce a homogeneous powder.
Til fremstilling af 0 %-standardopløsningen følges samme metode med brug af skummet bøffelmælk.
For the preparation of the 0 % standard, carry out the same procedure using genuine buffalo skimmed milk.
Standardopløsningerne skal opbevares ved –20 °C.
The standards must be stored at –20 °C.
Bemærkning: Det kan tilrådes at kontrollere bøffelmælkens renhed ved isoelektrisk fokusering af de plasminbehandlede kaseinater, inden standardopløsningerne fremstilles.
Note: It is advisable to check the purity of the buffalos’ milk by isoelectric focusing of the plasmin-treated caseins before preparation of the standards.
Reagenser til proteinfarvning
Reagents for protein staining
Fikservæske
Fixative
150 g trichloreddikesyre opløses i vand, og der fyldes op til 1000 ml.
Dissolve 150 g trichloroacetic acid in water and make up to 1000 ml.
Affarvningsopløsning
Destaining solution
500 ml methanol og 200 ml iseddike fortyndes til 2000 ml med destilleret vand. Bemærkning: Affarvningsopløsningen frisklaves hver dag.
Dilute 500 ml methanol and 200 ml glacial acetic acid to 2000 ml with distilled water.
Den kan fremstilles ved at blande lige store mængder stamopløsninger af 50 % (v/v) methanol og 20 % (v/v) iseddike.
Note: Prepare the destaining solution fresh every day; it can be prepared by mixing equal volumes of stock solutions of 50 % (v/v) methanol and 20 % (v/v) glacial acetic acid.
Farvningsopløsninger
Staining solutions
Farvningsopløsning (stamopløsning 1)
Staining solution (stock solution 1)
Farvningsopløsning (stamopløsning 2)
Staining solution (stock solution 2)
5,0 g kobbersulfatpentahydrat opløses i 1000 ml 20 % (v/v) eddikesyre.
Dissolve 5,0 g copper sulphate pentahydrate in 1000 ml 20 % (v/v) acetic acid.
Farvningsopløsning (arbejdsopløsning)
Staining solution (working solution)
125 ml af hver af stamopløsningerne (4.11.1, 4.11.2) sammenblandes umiddelbart før farvningen.
Mix together 125 ml of each of the stock solutions (4.11.1, 4.11.2) immediately prior to staining.
Bemærkning: Farvningsopløsningen bør laves samme dag, den skal bruges.
Note: The staining solution should be prepared on the day that it is used.
Glasplader (265 × 125 × 4 mm), gummirulle (bredde 15 cm) og vandret flade
Glass plates (265 × 125 × 4 mm); rubber roller (width 15 cm); levelling table
Gelbærefolie (265 × 125 mm)
Gel carrier sheet (265 × 125 mm)
Dækfolie (280 × 125 mm).
Covering sheet (280 × 125 mm).
Der anbringes en strimmel klæbebånd (280 × 6 × 0,25 mm) på hver langside (jf. figur 1)
Stick on strip of adhesive tape (280 × 6 × 0,25 mm) to each long edge (see Figure 1)
Elektrofokuseringskammer med køleplade (f.eks. 265 × 125 mm) og egnet spændingskilde (≥ 2,5 kV) eller automatisk elektroforeseapparat
Electrofocusing chamber with cooling plate (e.g. 265 × 125 mm) and suitable power supply (≥ 2,5 kV) or automatic electrophoresis device
Cirkulationskryostat, termostatstyret ved 12 ± 0,5 °C
Circulation cryostat, thermostatically controlled at 12 ± 0,5 °C
Centrifuge, justerbar til 3000 g
Centrifuge, adjustable to 3000 g
Elektrodestrimler (længde ≥ 265 mm)
Electrode strips (≥ 265 mm long)
Plastdråbetæller til anode- og katodeopløsninger
Plastic dropping bottles for the anode and cathode solutions
Analyseprøveapplikatorer (10 × 5 mm, viskose- eller lavproteinabsorberingsfilterpapir)
Sample applicators (10 × 5 mm, viscose or low protein-adsorption filter paper)
Saks, skalpel og pincetter af rustfrit stål
Stainless steel scissors, scalpels and tweezers
Farvnings- og affarvningsskåle (f.eks. 280 × 150 mm instrumentbakker) af rustfrit stål eller glas
Stainless steel or glass staining and destaining dishes (e.g. 280 × 150 mm instrument trays)
Justerbar stanghomogenisator (10 mm diameter), skala 8000-20000 rpm
Adjustable rod homogenizer (10 mm shaft diameter), rpm range 8000 to 20000
Ultralydsbad
Ultrasonic bath
Filmsvejser
Film welder
25 μl mikropipetter
25 μl micropipettes
Vakuumkoncentrator eller frysetørrer
Vacuum concentrator or freeze-dryer
Termostatstyret vandbad, der kan indstilles til 35 og 40 ± 1 °C, med rysteaggregat
Thermostatically controlled water bath adjustable to 35 and 40 ± 1 °C with shaker
Densitometerudstyr med aflæsning ved λ = 634 nm.
Densitometer equipment reading at λ = 634 nm
Isolering af kaseiner
Isolation of caseins
En mængde svarende til 5 g tør ostemasse eller standardopløsninger afvejes i et 100 ml centrifugeglas.
Weigh the amount equivalent to 5 g dry mass of cheese or the reference standards into a 100 ml centrifuge tube, add 60 ml distilled water and homogenize with a rod homogenizer (8000 to 10000 rpm).
Der tilsættes 60 ml destilleret vand og homogeniseres med en stanghomogenisator (8000-10000 rpm). pH-værdien justeres til 4,6 med fortyndet eddikesyre (4.5.1), og der centrifugeres (5 minutter — 3000 g).
Adjust to pH 4,6 with dil. acetic acid (4.5.1) and centrifuge (5 minutes, 3000 g).
Fedtet og vallen afhældes, restindholdet homogeniseres i 40 ml destilleret vand (pH-værdien justeret til 4,5 med fortyndet eddikesyre (4.5.1)) ved 20000 rpm. Der tilsættes 20 ml dichlormethan (4.5.2), homogeniseres igen og centrifugeres (5 minutter — 3000 g).
Decant the fat and whey, homogenize the residue at 20000 rpm in 40 ml distilled water adjusted to pH 4,5 with dil. acetic acid (4.5.1), add 20 ml dichloromethane (4.5.2), homogenize again and centrifuge (5 minutes, 3000 g).
Kaseinlaget, der flyder mellem den vandige og den organiske fase (jf. figur 2), fjernes med en spatel, og begge faser afhældes.
Remove the casein layer that lies between the aqueous and organic phases (see Figure 2) with a spatula and decant off both phases.
Kaseinet homogeniseres igen i 40 ml destilleret vand (som ovenfor) og 20 ml dichlormethan (4.5.2), og der centrifugeres.
Rehomogenize the casein in 40 ml distilled water (see above) and 20 ml dichloromethane (4.5.2) and centrifuge.
Dette gentages, indtil begge ekstraktionsfaser er farveløse (2-3 gange).
Repeat this procedure until both extraction phases are colourless (two to three times).
Proteinresterne homogeniseres med 50 ml acetone (4.5.3) og filtreres gennem et middelhastigheds-foldefilterpapir.
Homogenize the protein residue with 50 ml acetone (4.5.3) and filter through a medium-speed folded filter paper.