natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For at lade de testede alger tilpasse sig til testbetingelserne og sikre, at algerne er i den eksponentielle vækstfase, når de benyttes til podning af testopløsningerne, fremstilles en podekultur i testsubstratet 2-4 dage, før testen begynder.
In order to adapt the test alga to the test conditions and ensure that the algae are in the exponential growth phase when used to inoculate the test solutions, an inoculum culture in the test medium is prepared 2-4 days before start of the test.
Mængden af algebiomasse skal tilpasses, så der bliver eksponentiel vækst i podekulturen, indtil testen begynder.
The algal biomass should be adjusted in order to allow exponential growth to prevail in the inoculum culture until the test starts.
Podekulturen skal inkuberes under samme betingelser som testkulturerne.
The inoculum culture shall be incubated under the same conditions as the test cultures.
Stigningen i biomasse i podekulturen skal måles for at sikre, at væksten er inden for normalområdet for den pågældende teststamme under dyrkningsbetingelserne.
Measure the increase in biomass in the inoculum culture to ensure that growth is within the normal range for the test strain under the culturing conditions.
Et eksempel på fremgangsmåden ved dyrkning af alger er beskrevet i tillæg 3.
An example of the procedure for algal culturing is described in Appendix 3.
For at undgå synkrone celledelinger under testen kan et ekstra formeringstrin af podekulturen være nødvendigt.
To avoid synchronous cell divisions during the test, a second propagation step of the inoculum culture may be required.
Fremstilling af testopløsninger
Preparation of test solutions
Alle testopløsninger skal indeholde samme koncentration af næringssubstrat og initial biomasse af testalger.
All test solutions must contain the same concentrations of growth medium and initial biomass of test algae.
Testopløsningerne af de valgte koncentrationer fremstilles sædvanligvis ved, at en stamopløsning af teststoffet opblandes med vækstmedium og podekultur.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by mixing a stock solution of the test substance with growth medium and inoculum culture.
Stamopløsningerne fremstilles normalt ved opløsning af teststoffet i testsubstrat.
Stock solutions are normally prepared by dissolving the substance in test medium.
Opløsningsmidler, f.eks. acetone, t-butylalkohol og dimethylformamid, kan bruges som bæremedier, når tungtopløselige stoffer skal tilsættes testsubstratet (2) (3).
Solvents, e.g. acetone, t-butyl alcohol and dimethyl formamide, may be used as carriers to add substances of low water solubility to the test medium (2)(3).
Opløsningsmidlets koncentration må ikke være over 100 µl/l, og det skal tilsættes i samme koncentration til alle kulturer (også kontrollerne) i testserien.
The solvent concentration should not exceed 100 µl/l, and the same concentration of solvent should be added to all cultures (including controls) in the test series.
Inkubation
Incubation
Testbeholderne lukkes med luftgennemtrængelige propper.
Cap the test vessels with air-permeable stoppers.
Testbeholderne omrystes og anbringes i dyrkningsapparatet.
The vessels are shaken and placed in the culturing apparatus.
Under testen skal algerne holdes opslæmmet og CO2-overførslen lettes.
During the test it is necessary to keep the algae in suspension and to facilitate transfer of CO2.
Kontinuerlig omrystning eller omrøring er derfor nødvendig.
To this end, constant shaking or stirring should be used.
Kulturerne skal være reguleret til en temperatur i området 21 til 24 °C, og den fastsatte temperatur skal holdes inden for ±2 °C.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 24 °C, controlled at ±2 °C.
Til andre arter end de i tillæg 1 anførte, f.eks. tropiske arter, kan højere temperaturer være hensigtsmæssigt, forudsat at validitetskriterierne kan opfyldes.
For species other than those listed in Appendix 1, e.g. tropical species, higher temperatures may be appropriate, providing that the validity criteria can be fulfilled.
Det anbefales at placere kolberne i tilfældig orden og dagligt bytte rundt på dem i inkubatoren.
It is recommended to place the flasks randomly and to reposition them daily in the incubator.
Kontrolsubstratets pH må højst stige med 1,5 enheder under testen.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
For metaller og forbindelser, der kun er delvis ioniseret ved pH-værdier omkring testens pH, kan det være nødvendigt at begrænse pH-afvigelsen for at få reproducerbare og veldefinerede resultater.. Begrænsning af afvigelsen til < 0,5 pH-enhed er teknisk mulig og kan opnås ved at sikre tilstrækkelig CO2-masseoverførsel fra den omgivende luft til testopløsningen, f.eks. ved at øge omrystningshastigheden.
A drift of < 0,5 pH units is technically feasible and can be achieved by ensuring an adequate CO2 mass transfer rate from the surrounding air to the test solution, e.g. by increasing the shaking rate.
En anden mulighed er at nedsætte CO2-behovet ved enten at reducere den initiale biomasse eller testens varighed.
Another possibility is to reduce the demand for CO2 by reducing the initial biomass or the test duration.
Den overflade, som kulturerne inkuberes på, skal have kontinuerlig, ensartet fluorescerende belysning, f.eks. af typen »cool-white« eller »daylight«.
The surface where the cultures are incubated should receive continuous, uniform fluorescent illumination e.g. of ‘cool-white’ or ‘daylight’ type.
Forskellige stammer af alger og cyanobakterier har forskelligt lysbehov.
Strains of algae and cyanobacteria vary in their light requirements.
Der skal vælges en passende lysintensitet i forhold til den anvendte organisme.
The light intensity should be selected to suit the test organism used.
Til de anbefalede arter af grønalger skal lysintensiteten i testopløsningernes niveau vælges i området 60-120 µE·m–2·s–1, målt i det fotosyntetisk effektive bølgelængdeområde 400-700 nm med en egnet detektor.
For the recommended species of green algae, the light intensity at the level of the test solutions shall be selected from the range of 60-120 µE·m–2·s–1 when measured in the photosynthetically effective wavelength range of 400-700 nm using an appropriate receptor.
Visse arter, navnlig Anabaena flos-aquae, vokser godt ved lavere lysintensitet og kan tage skade af højere intensitet.
Some species, in particular Anabaena flos-aquae, grow well at lower light intensities and may be damaged at high intensities.
Til sådanne arter bør vælges en gennemsnitlig lysintensitet i området 40-60 µE·m–2·s–1.
For such species an average light intensity in the range 40-60 µE·m–2·s–1 should be selected.
(For lysmåleinstrumenter kalibreret i lux vil den anbefalede lysintensitet på 60-120 µE·m–2·s–1 med cool-white-lys tilnærmelsesvis svare til området 4440-8880 lux.)
(For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 4440-8880 lux for cool white light corresponds approximately to the recommended light intensity 60-120 µE·m–2·s–1).
Lysintensiteten må ikke afvige mere end ±15 % fra den gennemsnitlige lysintensitet i hele inkubationsområdet.
The light intensity shall not vary more than ±15 % from the average light intensity over the incubation area.
Forsøgets varighed
Test duration
Testens varighed er normalt 72 timer.
The test duration is normally 72 hours.
Kortere eller længere varighed kan dog anvendes, forudsat at alle validitetskriterierne i punkt 1.7 kan opfyldes.
However, shorter or longer test durations may be used, provided that all validity criteria in section 1.7 can be met.
Målinger og analytiske bestemmelser
Measurements and analytical determinations
Algebiomassen i hver kolbe bestemmes mindst én gang dagligt i hele testperioden.
The algal biomass in each flask is determined at least daily during the test period.
Hvis målingerne foretages på små volumener, der er udtaget af testopløsningen med pipette, bør disse ikke erstattes.
If measurements are made on small volumes removed from the test solution by pipette, these should not be replaced.
Måling af biomasse foretages enten ved manuel celletælling i mikroskop eller med en elektronisk partikeltæller (i celletal og/eller biovolumen).
Measurement of biomass is done by manual cell counting by microscope or an electronic particle counter (by cell counts and/or biovolume).
Andre teknikker kan anvendes, f.eks. flowcytometri, in vitro eller in vivo chlorophyl-fluorescens (6) (7) eller optisk densitet, forudsat at der kan påvises tilfredsstillende korrelation med biomasse i hele det biomasseområde, der forekommer under testen.
Alternative techniques, e.g. flow cytometry, in vitro or in vivo chlorophyll fluorescence (6)(7), or optical density can be used providing a satisfactory correlation with biomass can be demonstrated over the range of biomass occurring in the test.
Opløsningernes pH skal måles ved testens start og slutning.
The pH of the solutions shall be measured at the beginning and at the end of the test.
Hvis der foreligger en analysemetode til bestemmelse af teststoffet i det anvendte koncentrationsområde, skal testopløsningerne analyseres til efterprøvning af intialkoncentrationerne og af, at eksponeringskoncentrationerne overholdes under testen.
Provided an analytical procedure for determination of the test substance in the concentration range used is available, the test solutions should be analysed to verify the initial concentrations and maintenance of the exposure concentrations during the test.
Hvis eksponeringskoncentrationerne under testen forventes at afvige mindre end 20 % fra de nominelle værdier, kan det være tilstrækkeligt at bestemme en høj og en lav teststofkoncentration og en koncentration omkring den forventede EC50 ved testens begyndelse og slutning.
Analysis of the concentration of the test substance at the start and end of the test of a low and high test concentration, and a concentration around the expected EC50 may be sufficient where it is likely that exposure concentrations will vary less than 20 % from nominal values during the test.
Når koncentrationen ikke kan forventes at holde sig inden for 80-120 % af den nominelle værdi, anbefales analytisk bestemmelse af alle testkoncentrationer ved testens begyndelse og slutning.
Analysis of all test concentrations at the start and end of the test is recommended where concentrations are unlikely to remain within 80-120 % of nominal.
Til flygtige, ustabile eller stærkt adsorberende stoffer anbefales det at udtage supplerende prøver til analyse med 24 timers mellemrum i hele eksponeringsperioden for bedre at bestemme tabet af teststof.
For volatile, unstable or strongly adsorbing test substances, additional sampling for analysis at 24 hour intervals during the exposure period is recommended in order to better define loss of the test substance.
For sådanne stoffer vil ekstra replikater være nødvendige.
For these substances, extra replicates will be needed.
I alle tilfælde behøver teststofkoncentrationen kun bestemmes på én replikat testbeholder ved hver testkoncentration (eller på indholdet af de poolede beholdere for hver replikat).
In all cases, determination of test substance concentrations need only be performed on one replicate vessel at each test concentration (or on the contents of the vessels pooled by replicate).
Testmedier, der er fremstillet specielt til analyse af eksponeringskoncentrationerne under testen, skal behandles på samme måde som dem, der anvendes til testning, dvs. podes med alger og inkuberes ved identiske betingelser.
Test media prepared specifically for analysis of exposure concentrations during the test should be treated identically to those used for testing, i.e. they should be inoculated with algae and incubated under identical conditions.
Hvis koncentrationen af opløst teststof kræves analyseret, kan det være nødvendigt at separere algerne fra substratet.
If analysis of the dissolved test substance concentration is required, it may be necessary to separate algae from the medium.
Separationen skal fortrinsvis ske ved centrifugering med lav g-kraft, tilstrækkelig til at få algerne til at bundfælde.
Separation should preferably be made by centrifugation at a low g-force, sufficient to settle the algae.
Hvis det kan konstateres, at prøvestofkoncentrationen har været holdt tilfredsstillende inden for ±20 % af den nominelle eller målte begyndelseskoncentration under hele testen, kan analysen af resultaterne baseres på nominelle eller målte startværdier.
If there is evidence that the concentration of the substance being tested has been satisfactorily maintained within ±20 % of the nominal or measured initial concentration throughout the test, analysis of the results can be based on nominal or measured initial values.
Er afvigelsen fra den nominelle eller målte initialkoncentration større end ±20 %, skal analysen af resultaterne baseres på den geometriske middelkoncentration under eksponeringen eller på modeller, der beskriver faldet i teststofkoncentrationen (3) (8).
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is greater than ±20 %, analysis of the results should be based on geometric mean concentration during exposure or on models describing the decline of the concentration of test substance (3)(8).
Algevæksthæmning er et mere dynamisk testsystem end de fleste andre korttidstest for akvatisk toksicitet.
The alga growth inhibition test is a more dynamic test system than most other short-term aquatic toxicity tests.
De faktiske eksponeringskoncentrationer kan derfor være vanskelige at fastlægge, navnlig for adsorberende stoffer, der testes ved lav koncentration.
As a consequence, the actual exposure concentrations may be difficult to define, especially for adsorbing substances tested at low concentrations.
I sådanne tilfælde er stoffets forsvinden fra opløsningen ved adsorption til den voksende algebiomasse ikke ensbetydende med, at det forsvinder fra testsystemet.
In such cases, disappearance of the substance from solution by adsorption to the increasing algal biomass does not mean that it is lost from the test system.
Ved analysen af testresultatet skal det kontrolleres, om et fald i teststofkoncentrationen under testen ledsages af et fald i væksthæmningen.
When the result of the test is analysed, it should be checked whether a decrease in concentration of the test substance in the course of the test is accompanied by a decrease in growth inhibition.
Hvis det er tilfældet, kan det overvejes at benytte en egnet model, der beskriver faldet i teststofkoncentrationen (8).
If this is the case, application of a suitable model describing the decline of the concentration of test substance (8) may be considered.
Hvis ikke, kan det være hensigtsmæssigt at basere analysen af resultaterne på de initiale (nominelle eller målte) koncentrationer.
If not, it may be appropriate to base the analysis of the results on the initial (nominal or measured) concentrations.
Andre observationer
Other observations
Der skal foretages mikroskopisk undersøgelse for at verificere, at podekulturen fremtræder normal og sund, og konstatere, om algernes udseende er unormalt ved testens slutning (som en mulig følge af eksponeringen for teststoffet).
Microscopic observation should be performed to verify a normal and healthy appearance of the inoculum culture and to observe any abnormal appearance of the algae (as may be caused by exposure to the test substance) at the end of the test.
Under visse omstændigheder, f.eks. når en indledende test viser, at teststoffet er uden toksiske virkninger i koncentrationer på op til 100 mg·l–1, dog ikke over stoffets opløselighed i testsubstratet, kan der udføres en grænsetest, hvor reaktionen i en kontrolgruppe sammenholdes med reaktionen i én behandlingsgruppe (100 mg·l–1 eller en koncentration lig med opløseligheden).
Under some circumstances, e.g. when a preliminary test indicates that the test substance has no toxic effects at concentrations up to 100 mg·l–1 or up to its limit of solubility in the test medium (whichever is the lower), a limit test involving a comparison of responses in a control group and one treatment group (100 mg·l–1 or a concentration equal to the limit of solubility), may be undertaken.
Det anbefales kraftigt, at dette understøttes ved analyse af eksponeringskoncentrationen.
It is strongly recommended that this be supported by analysis of the exposure concentration.
Alle de beskrevne testbetingelser og validitetskriterier gælder for grænsetesten, bortset fra, at antallet af behandlingsreplikater skal være mindst seks.
All previously described test conditions and validity criteria apply to a limit test, with the exception that the number of treatment replicates should be at least six.
Responsvariablerne i kontrol- og behandlingsgruppen kan analyseres med en statistisk test til sammenligning af middelværdier, f.eks. Students t-test.
The response variables in the control and treatment group may be analysed using a statistical test to compare means, e.g. a Student'’t's t-test.
Er variansen i de to grupper uens, skal der anvendes en t-test justeret for forskel i varians.
If variances of the two groups are unequal, a t-test adjusted for unequal variances should be performed.
Modifikation i tilfælde af stærkt farvede stoffer
Modification for strongly coloured substances
Belysningen (lysintensiteten) skal ligge i den højeste ende af det interval, der forskrives i testmetoden, dvs. 120 µE·m–2·s–1 eller højere.
The irradiation (light intensity) should be in the highest end of the range prescribed in this Testing Method: 120µE m-2 s-1 or higher.
Lysvejen forkortes ved at reducere testopløsningernes volumen (til intervallet 5-25 ml).
The light path should be shortened by reduction of the volume of the test solutions (in the range of 5-25 ml).
Der sørges for tilstrækkelig omrøring (f.eks. ved moderat rystning), for at algerne kan blive udsat for stærk belysning ved kulturoverfladen.
Sufficient agitation (for example by moderate shaking) should be performed in order to obtain a high frequency of exposure of the algae to high irradiation at the surface of the culture.
OPTEGNING AF VÆKSTKURVER
PLOTTING GROWTH CURVES
Biomassen i testbeholderne kan angives i enheder svarende til den til målingen anvendte surrogatparameter (f.eks. celletal eller fluorescens).
The biomass in the test vessels may be expressed in units of the surrogate parameter used for measurement (e.g. cell number, fluorescence).
Der opstilles en tabel over den beregnede biomassekoncentration i testkulturer og kontroller sammen med teststofkoncentrationer og måletidspunkter, målt med en mindste opløsning på hele timer, og derudfra optegnes vækstkurverne.
Tabulate the estimated biomass concentration in test cultures and controls together with the concentrations of test material and the times of measurement, recorded with a resolution of at least whole hours, to produce plots of growth curves.
Både logaritmisk og lineær afbildning kan være nyttig på dette første trin, men logaritmisk afbildning er obligatorisk og giver sædvanligvis en bedre fremstilling af variationerne i vækstmønsteret i løbet af testperioden.
Both logarithmic scales and linear scales can be useful at this first stage, but logarithmic scales are mandatory and generally give a better presentation of variations in growth pattern during the test period.
Bemærk, at eksponentiel vækst frembringer en ret linje, når den afbildes på en logaritmisk skala, og at linjens hældning angiver den specifikke væksthastighed.
Note that exponential growth produces a straight line when plotted on a logarithmic scale, and that the inclination of the line (slope) indicates the specific growth rate.
Ud fra kurverne undersøges det, om kontrolkulturerne vokser eksponentielt med den forventede hastighed igennem hele testen.
Using the plots, examine whether control cultures grow exponentially at the expected rate throughout the test.
Alle datapunkter og kurvernes udseende kontrolleres kritisk, og rådata og de anvendte metoder gås efter for eventuelle fejl.
Critically examine all data points and the appearance of the graphs, and check raw data and procedures for possible errors.
Navnlig kontrolleres alle datapunkter, der synes at afvige med en systematisk fejl.
Check in particular any data point that seems to deviate by a systematic error.
Det er indlysende, at hvis metodefejl kan konstateres og/eller må anses for stærkt sandsynlige, må det pågældende punkt markeres som afvigende og udelades af den efterfølgende statistiske analyse.
If it is obvious that procedural mistakes can be identified and/or considered highly likely, the specific data point is marked as an outlier and not included in subsequent statistical analysis.
(En algekoncentration på nul i den ene af tre replikate testbeholdere kan tyde på, at beholderen enten ikke er blevet podet korrekt eller ikke har været tilstrækkelig rengjort.)
(A zero algal concentration in one out of two or three replicate vessels may indicate the vessel was not inoculated correctly, or was improperly cleaned).
Begrundelsen for at afvise et datapunkt som afvigende skal klart angives i testrapporten.
Reasons for rejection of a data point as an outlier must be clearly stated in the test report.
Som begrundelse godtages kun (sjældne) metodefejl, ikke blot ringe præcision.
Accepted reasons are only (rare) procedural mistakes and not just bad precision.
Til identifikation af afvigende værdier har statistiske metoder kun begrænset værdi ved problemer af denne art og kan ikke erstatte en faglig vurdering.
Statistical procedures for outlier identification are of limited use for this type of problem and cannot replace expert judgement.
Afvigende værdier (mærket som sådanne) skal helst bibeholdes blandt de datapunkter, der vises ved efterfølgende fremstilling af data i grafer eller tabeller.
Outliers (marked as such) should preferably be retained among the data points shown in any subsequent graphical or tabular data presentation.
RESPONSVARIABLER
RESPONSE VARIABLES
Testens formål er at bestemme teststoffets virkninger på væksten af alger.
The purpose of the test is to determine the effects of the test substance on the growth of algae.
I nærværende testmetode beskrives to responsvariabler, da præferencer og myndighedskrav er forskellige i medlemsstaterne.
This Testing Method describes two response variables, as member countries have different preferences and regulatory needs.
For at testresultaterne skal kunne godtages i alle medlemsstater, skal virkningerne vurderes ved hjælp af begge de nedenfor beskrevne responsvariabler a) og b).
In order for the test results to be acceptable in all member countries, the effects should be evaluated using both response variables (a) and (b) described below.
gennemsnitlig specifik væksthastighed: Denne responsvariabel beregnes på grundlag af den logaritmiske stigning i biomasse i løbet af testperioden, angivet pr. døgn.
Average specific growth rate: this response variable is calculated on the basis of the logarithmic increase of biomass during the test period, expressed per day.
udbytte: Denne responsvariabel er biomassen ved testens slutning minus biomassen ved testens start.
Yield: this response variable is the biomass at the end of the test minus the starting biomass.
Når denne metode anvendes i forbindelse med EU-lovgivningen, skal resultaterne beregnes på grundlag af den gennemsnitlige specifikke væksthastighed, af de grunde, der er anført nedenfor.
For the application of this method within the EU regulatory framework, calculation of results should be based on an average specific growth rate for the reasons described below.
Det skal bemærkes, at toksicitetsværdier beregnet ved hjælp af disse to responsvariabler ikke er sammenlignelige, og at forskellen mellem dem må holdes for øje ved anvendelse af testens resultater.
It should be noted that toxicity values calculated by using these two response variables are not comparable and this difference must be recognised when using the results of the test.