natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Nastříkněte 100 μl supernatantu nebo filtrátu (8.3.3) do zařízení na HPLC, které musí fungovat za podmínek referenčního gradientu uvedených v tabulce 1.
Note: In the case of mixtures, weigh such an amount of the test sample that the defatted sample portion corresponds to 2,00 g.
Tabulka 1
Add 10,0 ml of the trichloroacetic acid solution of ca.
Podmínky referenčního gradientu pro optimalizaci chromatografie
25 °C (5.1) constantly over two minutes, while stirring vigorously with the aid of the magnetic stirrer (6.4).
Doba
Centrifuge (6.2) 2200 g for 10 minutes, or filter through paper (6.6), discarding the first 5 ml of filtrate
Průtok
The reversed-phase HPLC method excludes the possibility false-positive results due to the presence of acid buttermilk powder.
Křivka
Before the reversed phase HPLC-analysis is carried out, the gradient conditions should be optimised.
přímka
A retention time of 26 ± 2 minutes for CMPA is optimal for gradient systems having a dead volume of about 6 ml (volume from the point where the solvents come together to the volume of the injector loop, inclusive).
Porovnání obou chromatogramů by mělo ukázat polohu píku CMPΑ.
Gradient systems having a lower dead volume (e.g. 2 ml) should use 22 minutes as an optimal retention time
Počáteční složení rozpouštědla, které je nutno použít pro normální gradient (viz 8.4.3), lze vypočítat podle tohoto vzorce: % B = 10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27 % B = 7,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 1,11
Take solutions of the standard samples (5.4) without and with 50 % rennet whey.
kde
Inject 100 μl of supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus operating at the scouting gradient conditions given in Table 1.
RT cmpA : retenční čas CMPΑ v referenčním gradientu
Table 1
10 : počáteční % B v referenčním gradientu
Scouting gradient conditions for optimisation of the chromatography
2,5 : % B ve středním bodu minus počáteční % B v normálním gradientu
Time
13,5 : čas odpovídající střednímu bodu referenčního gradientu
Flow
26 : požadovaný retenční čas CMPΑ
Curve
6 : poměr směrnic referenčního a normálního gradientu
linear
30 : % B v počátečním bodu minus % B po 27 minutách v referenčním gradientu
Comparison of the two chromatograms should reveal the location of the peak of CMPΑ.
27 : doba běhu referenčního gradientu
Using the formula given below, the initial solvent composition to be used for the normal gradient (see 8.4.3) can be calculated % B = 10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27 % B = 7,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 1,11
Nástřik roztoků zkušebních vzorků
Where:
Nastříkněte 100 μl přesně odměřeného supernatantu nebo filtrátu (8.3.3) do zařízení na HPLC s průtokem 1,0 ml elučního roztoku (5.2) za minutu.
RT cmpA : retention time of CMPΑ in the scouting gradient
Složení eluentu na začátku analýzy se získá z 8.4.2.
10 : the initial % B of the scouting gradient
Za normálních okolností se blíží poměru A:B = 76:24 (5.2).
2,5 : % B at midpoint minus % B at initial in the normal gradient
Okamžitě po nástřiku se spustí lineární gradient, což způsobí, že procento B se za 27 minut zvětší o 5 %.
13,5 : midpoint time of the scouting gradient
Potom se spustí lineární gradient, kterým složení eluentu dosáhne v pěti minutách 90 % B.
26 : required retention time of CMPΑ
Toto složení se udržuje po dobu pěti minut a po jejím uplynutí se pomocí lineárního gradientu složení opět změní během pěti minut na složení počáteční.
6 : ratio of slopes of the scouting and normal gradient
V závislosti na vnitřním objemu čerpacího systému může být další nástřik proveden 15 minut po dosažení původních podmínek.
30 : % B at initial minus % B at 27 minutes in the scouting gradient
Poznámka 1.
27 : run-time of the scouting gradient.
Retenční čas CMPA by měl být 26 ± 2 minuty.
Take solutions of the test samples
Toho lze dosáhnout změnou počátečních a konečných podmínek prvního gradientu.
Inject 100 μl of accurately measured supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus operating at a flow rate of 1,0 ml of eluent solution (5.2) per minute.
Rozdíl v % B mezi počátečními a konečnými podmínkami prvního gradientu však zůstává ve výši 5 % B.
The composition of the eluent of the start of the analysis is obtained from 8.4.2.
Poznámka 2.
It is normally close to A:B = 76:24 (5.2).
Eluenty je třeba dostatečně odplynit a uchovávat je odplyněné.
Immediately after the injection a linear gradient is started, which results in a 5 % higher percentage of B after 27 minutes.
Je to nezbytně nutné pro to, aby gradientový čerpací systém správně fungoval.
Subsequently a linear gradient is started, which brings the eluent composition to 90 % B in five minutes.
Směrodatná odchylka retenčního času píku CMPA musí být menší než 0,1 minuty (n = 10).
This composition is maintained for five minutes, after which the composition is changed, via a linear gradient in five minutes to the initial composition.
Poznámka 3.
Depending on the internal volume of the pumping system, the next injection can be made 15 minutes after reaching the initial conditions.
Na každých pět vzorků je třeba nastříknout referenční vzorek [5] a použít jej pro výpočet nového odezvového faktoru R (9.1.1).
Note 1.
Výsledky chromatografických analýz zkušebního vzorku (E) se získávají ve formě chromatogramu, na němž je pík CMPA určen svým retenčním časem přibližně v délce 26 minut.
The retention time of the CMPA should be 26 ± 2 minutes.
Výšku H píku CMPA automaticky vypočítává integrátor (6.11.6).
This can be achieved by varying the initial and end conditions of the first gradient.
Polohu základní linie je třeba kontrolovat na každém chromatogramu.
However, the difference in the % B for the initial and end conditions of the first gradient shall remain 5 % B.
Jestliže je základní linie nesprávně umístěna, analýzu nebo integraci je třeba zopakovat.
Note 2.
Poznámka: Je-li pík CMPA dostatečně oddělen od ostatních píků, mělo by se použít přiřazení základní linie mezi sedly.
The eluents should be degassed sufficiently and should also remain degassed.
V opačném případě použijte svislé kolmice ke společné základní linii, jejichž počáteční bod by měl být v blízkosti píku CMPA (tedy ne v čase t = 0 min!).
This is essential for proper functioning of the gradient pumping system.
Pro referenční standard a vzorky použijte stejný typ integrace a u společné základní linie zkontrolujte, zda je se vzorky a referenčním standardem konzistentní.
The standard deviation for the retention time of the CMPA peak should be smaller than 0,1 minutes (n = 10).
Před kvantitativní interpretací je nezbytné prozkoumat vzhled každého chromatogramu za účelem zjištění případných anomálií způsobených buď nesprávnou funkcí zařízení, nebo kolony, nebo původem a povahou analyzovaného vzorku.
Note 3.
U srovnávacích vzorků (5.4.1 až 5.4.2) se přesně použije postup popsaný v bodech 8.2 až 8.4.4.
Every five samples the reference sample [5] should be injected and used to calculate a new response factor R. (9.1.1).
Použijte čerstvě připravené roztoky, protože CMP se v prostředí 8 % kyseliny trichloroctové odbourává.
The results of the chromatographic analysis of the test sample (E) are obtained in the form of a chromatogram in which the CMPA peak is identified by its retention time of about 26 minutes
Při teplotě 4 °C zůstává roztok stálý po dobu 24 hodin.
The integrator (6.11.6) automatically calculates the peak height H of the CMPA peak.
V případě dlouhých analytických pokusů je žádoucí používat v automatickém nástřikovém zařízení chlazenou misku na vzorek.
The baseline location should be checked in every chromatogram.
Poznámka: Fáze 8.4.2 může být vynechána, jestliže je % B v počátečních podmínkách známo z předchozích analýz.
The analysis or the integration should be repeated if the baseline was incorrectly located.
Chromatogram referenčního vzorku (5) by měl být obdobný chromatogramu znázorněnému na obrázku 1.
Note: If the CMPA peak is sufficiently separated from other peaks valley-to-valley baseline allocation should be used, otherwise use dropping perpendiculars to a common baseline, which should have starting point close to the CMPA peak (thus not at t = 0 min!).Use for the standard and the samples the same type integration type and check in case of common baseline its consistency for the samples and the standard.
Na tomto obrázku jsou před píkem CMPA dva malé píky.
It is essential to examine the appearance of each chromatogram prior to quantitative interpretation, in order to detect any abnormalities due either to malfunctioning of the apparatus or the column, or to the origin and nature of the sample analysed.
Je nezbytně nutné dosáhnout podobné separace.
Apply exactly the procedure described from point 8.2 to point 8.4.4 to the standard samples (5.4.1 to 5.4.2).
Před chromatografickým stanovením vzorků nastříkněte 100 μl srovnávacího vzorku bez syřidlové syrovátky [0] (5.4.1).
Use freshly prepared solutions, because CMP degrades in an 8 % trichloroacetic acid environment at room temperature.
Chromatogram nesmí vykazovat pík v retenčním čase CMPA píku.
At 4 °C the solution remains stable for 24 hours.
Odezvové faktory R stanovte nastříknutím stejného objemu filtrátu (8.5.1), jakého bylo použito pro vzorky.
In the case of long series of analyses the use of a cooled sample tray in the automatic injector is desirable
Výpočet odezvového faktoru R:
Note: 8.4.2. may be omitted if the % B at initial conditions is known from previous analyses.
Pík CMPA: R = W/H
The chromatogram of the reference sample [5] should be analogous to Figure.
R = odezvový faktor píku CMPA
In this figure the CMPA peak is preceded by two small peaks.
H = výška píku CMPA
It is essential to obtain a similar separation.
W = množství syrovátky ve srovnávacím vzorku [5]
Prior to chromatographic determination of the samples inject 100 μl of the standard sample without rennet whey [0] (5.4.1)
Výpočet procenta sušené syřidlové syrovátky obsažené ve vzorku
The chromatogram should not show a peak at the retention time of the CMPA peak.
W(E) = hmotnostní procento syřidlové syrovátky ve vzorku [E]
Determine the response factors R by injecting the same volume of filtrate (8.5.1) as used for the samples.
R = odezvový faktor píku CMPA (9.1.1)
Calculation of the response factor R:
H(E) = výška píku CMPA vzorku (E)
CMPA peak: R = W/H
Pokud je W(E) vyšší než 1 % a rozdíl mezi retenčním časem a časem srovnávacího vzorku [5] menší než 0,2 minuty, pak je přítomnost sušiny ze syřidlové syrovátky prokázána.
R = the response factor of the CMPA peak
Nestanovena.
H = the height of the CMPA peak
Mezní hodnota 1 % obsahuje nejistotu z důvodu reprodukovatelnosti.
W(E) = the percentage (m/m) of rennet whey in the sample (E).
Přesnostní charakteristiky analytických metod.
H(E) = the height of the CMPA peak of the sample (E)
Stručný popis práce na společné studii.“
If W(E) is greater than 1 % and the difference between the retention time and that of the standard sample [5] is smaller than 0,2 minutes then rennet whey solids are present.
Doplňují se nové přílohy, které znějí:
Not determined.
PŘÍLOHA VI
Linearity
Metody analýzy másla v soukromém skladování
From 0 to 16 % of rennet whey a linear relationship should be obtained with a coefficient of correlation > 0,99.
Tukuprostá sušina (s výjimkou soli)
The 1 % limit includes the uncertainty due to reproducibility.
Sůl
Ni—4.6 standard
Metodu, která má být použita, musí schválit platební agentura.
Absorbance (220 nm)
PŘÍLOHA VII
time (Minutes)
Metody analýzy sušeného odstředěného mléka v soukromém skladování
International IDF Standard 135B/1991.
PŘÍLOHA VIII
Milk and milk products.
Metody analýzy sýrů v soukromém skladování
Precision characteristics of analytical methods.
Je nutné zaručit, že sýry vyráběné výhradně z ovčího mléka, kozího mléka či buvolího mléka, nebo ze směsi ovčího, kozího a buvolího mléka neobsahují kasein z kravského mléka, a za tímto účelem se použije metoda analýzy uvedená v dodatku.
Outline of collaborative study procedure.’
Přítomnost kaseinu z kravského mléka se považuje za prokázanou, pokud obsah kaseinu z kravského mléka v analyzovaném vzorku je stejný nebo vyšší v porovnání s obsahem v referenčním vzorku obsahujícím 1 % kravského mléka, který je uveden v dodatku.
the following Annexes are added:
Metody ke zjišťování kaseinu z kravského mléka v sýrech uvedených v odstavci 1 mohou být používány za těchto podmínek:
ANNEX VI
jejich detekční limit musí být nejvýše 0,5 %;
Methods of analysis of butter under private storage
jejich výsledky nesmí být falešně pozitivní;
Non Fat Solids (excluding salt)
musí umožňovat detekci kaseinu z kravského mléka s požadovanou citlivostí i po dlouhé době zrání, k čemuž může za běžných obchodních podmínek docházet.
Salt
Není-li jeden z výše uvedených požadavků splněn, použijí se metody uvedené v dodatku.
The method to be applied shall be approved by the paying agency.
Dodatek
ANNEX VII
METODA PRO ZJIŠŤOVÁNÍ KRAVSKÉHO MLÉKA A KASEINÁTŮ V SÝRECH Z OVČÍHO MLÉKA, KOZÍHO MLÉKA NEBO BUVOLÍHO MLÉKA, NEBO SMĚSÍ OVČÍHO, KOZÍHO A BUVOLÍHO MLÉKA
Methods of analysis of skimmed milk powder under private storage
PŘEDMĚT
ANNEX VIII
Zjišťování kravského mléka a kaseinátů v sýrech vyrobených z ovčího mléka, kozího mléka, buvolího mléka anebo ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka izoelektrickou fokusací γ-kaseinů po plasminolýze.
Methods of analysis of cheeses under private storage
OBLAST POUŽITÍ
The method of analysis laid down in the Appendix shall be used to ensure that cheese made exclusively from ewe's milk, goat's milk or buffalo milk or from a mixture of ewe's milk, goat's milk and buffalo milk does not contain cow's milk casein.
Metoda je vhodná pro citlivé a specifické zjišťování mléka a kaseinátu, též tepelně ošetřených, v čerstvých a zralých sýrech vyrobených z ovčího mléka, kozího mléka, buvolího mléka nebo ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka.
Cow's milk casein is considered to be present if the cow's milk casein content of the analysed sample is equal to or higher than the content of the reference sample containing 1 % cow's milk as laid down in the Appendix.
Není vhodná k odhalení falšování mléka a sýrů tepelně ošetřenými bílkovinnými koncentráty z hovězí syrovátky.
Methods for detecting cow's milk casein in cheeses referred to in paragraph 1 may be used provided that:
Izolace kaseinů ze sýra a referenčních standardů
the detection limit is maximum 0,5 % and
Rozpuštění izolovaných kaseinů a proteolýza plasminem (EC.3.4.21.7)
there are no false-positive results and
Izoelektrická fokusace plasminem ošetřených kaseinů za přítomnosti močoviny a vybarvení bílkovin
cow's milk casein is detectable with the required sensitivity even after long ripening periods, as may occur in usual commercial conditions.
Vyhodnocení vybarvených obrazců kaseinu γ3 a γ2 (důkaz přítomnosti kravského mléka) na základě porovnání obrazce získaného ze vzorku s obrazci získanými u téhož gelu z referenčních standardů obsahujících 0 % a 1 % kravského mléka.
If any of the above mentioned requirements is not met, the methods laid down in the Appendix shall be used.
Není-li stanoveno jinak, používají se pouze chemikálie čistoty p.a.
Appendix
Voda musí být redestilovaná nebo rovnocenné čistoty.
METHOD FOR THE DETECTION OF COW'S MILK AND CASEINATE IN CHEESES FROM EWE'S MILK, GOAT'S MILK OR BUFFALO MILK OR MIXTURES OF EWE'S MILK, GOAT'S MILK AND BUFFALO MILK
Poznámka: Následující údaje se vztahují na laboratorně připravované polyakrylamidové gely s obsahem močoviny o rozměrech 265 × 125 × 0,25 mm.
SCOPE
Pokud se použijí jiné rozměry nebo druhy gelu, může být nutné upravit podmínky separace.
Detection of cow's milk and caseinate in cheeses made from ewe's milk, goat's milk, buffalo milk or mixtures of ewe's, goat's and buffalo milk by isoelectric focusing of γ-caseins after plasminolysis.
Izoelektrická fokusace
FIELD OF APPLICATION
Chemikálie pro přípravu polyakrylamidových gelů s obsahem močoviny
The method is suitable for sensitive and specific detection of native and heat-treated cow's milk and caseinate in fresh and ripened cheeses made from ewe's milk, goat's milk, buffalo milk or mixtures of ewe's, goat's and buffalo milk.
Zásobní roztok gelu
It is not suitable for the detection of milk and cheese adulteration by heat-treated bovine whey protein concentrates.
Ve vodě rozpusťte:
Isolation of caseins from cheese and the reference standards
4,85 g akrylamidu
Dissolving of the isolated caseins and submitting to plasmin (EC.3.4.21.7) cleavage
0,15 g N, N′-methylen-bis-akrylamidu (BIS)
Isoelectric focusing of plasmin-treated caseins in the presence of urea and staining of proteins
48,05 g močoviny
Evaluation of stained γ3 and γ2 -casein patterns (evidence of cow's milk) by comparison of the pattern obtained from the sample with those obtained in the same gel from the reference standards containing 0 % and 1 % cow's milk.
15,00 g glycerolu (87 % hm.),
Unless otherwise indicated, analytical grade chemicals shall be used.
doplňte na 100 ml a uložte do chladničky v hnědé skleněné lahvi.
Water shall be double-distilled or of equivalent purity.
Poznámka: Místo uvedených množství neurotoxického akrylamidu lze použít komerčně dostupný, předem namíchaný roztok akrylamidu a BIS.
Note: The following details apply to laboratory prepared polyacrylamide gels containing urea, of dimensions 265 × 125 × 0,25 mm.
V případě, že koncentrace komerčního roztoku je 30 % hm./obj. akrylamidu a 0,8 % hm./obj.
Where other sizes and types of gel are used, the separation conditions may have to be adjusted.
BIS, pak uvedená množství (4,85 g akrylamidu a 0,15 g BIS) musí být nahrazena komerčním roztokem o objemu 16,2 ml.
Isoelectric focusing
Zásobní roztok lze skladovat nejdéle 10 dnů.
Reagents for production of the urea containing polyacrylamide gels
Pokud je jeho vodivost vyšší než 5 μS, je nutné provést jeho deionizaci promícháváním s 2 g Amberlitu MB-3 po dobu 30 minut a poté jej přefiltrovat přes 0,45μm membránu.
Stock gel solution
Roztok gelu
Dissolve:
Připravte roztok gelu smícháním přísad a amfolytů (*) se zásobním roztokem gelu (viz 4.1.1).
4,85 g acrylamide
9,0 ml zásobního roztoku
0,15 g N, N′-methylene-bis-acrylamide (BIS)
24 mg β-alaninu
48,05 g urea
500 μl amfolytu pH 3,5–9,5
15,00 g glycerol (87 % w/w),
250 μl amfolytu pH 5–7
in water and make up to 100 ml and store in a brown glass bottle in the refrigerator.
250 μl amfolytu pH 6–8
Note: A commercially available pre-blended acrylamide/BIS solution may be used in preference to the quoted fixed weights of the neurotoxic acrylamides.
Gelový roztok promíchejte a odplyňujte po dobu dvou až tří minut v ultrazvukové lázni nebo ve vakuu.
Where such a solution contains 30 % w/v acrylamide and 0,8 % w/v BIS, a volume of 16,2 ml shall be used for the formulation instead of the fixed weights.
Poznámka: Gelový roztok se musí připravit bezprostředně před naléváním (viz 6.2).
The shelf life of the stock solution is a maximum of 10 days; if its conductivity is more than 5 μS, de-ionize by stirring with 2 g Amberlite MB-3 for 30 minutes, then filter through a 0,45 μm membrane.
Roztoky katalyzátorů
Gel solution
N, N, N′, N′-tetramethylendiamin (Temed)
Prepare a gel solution by mixing additives and ampholytes (*) with the stock gel solution (see 4.1.1).
40 % hm./obj. roztoku persíranu amonného (PER)
9,0 ml stock solution
800 mg PER se rozpustí ve vodě a doplní se do 2 ml.
24 mg β-alanine
Poznámka: Vždy používejte čerstvě připravený roztok PER.
500 μl ampholyte pH 3,5-9,5
Kontaktní tekutina
250 μl ampholyte pH 5-7
Kerosin nebo kapalný parafin
250 μl ampholyte pH 6-8
Anodový roztok
Mix the gel solution and de-gas for two to three minutes in an ultrasonic bath or in vacuum.
Rozpusťte 5,77 g kyseliny fosforečné (85 % hm.) ve vodě a zřeďte na 100 ml.
Note: Prepare the gel solution immediately prior to pouring it (see 6.2).
Katodový roztok
Catalyst solutions
Rozpusťte 2,00 g hydroxidu sodného ve vodě a zřeďte vodou na 100 ml.
N, N, N′ N′ — tetramethylethylenediamine (Temed)
Příprava vzorku
40 % w/v ammonium persulphate (PER):
Chemikálie určené k izolaci bílkovin
Dissolve 800 mg PER in water and make up to 2 ml.
Zředěná kyselina octová (25,0 ml ledové kyseliny octové doplněné vodou do 100 ml).
Note: Always use freshly prepared PER solution.
Dichlormethan
Contact fluid
Aceton
Kerosene or liquid paraffin
Tlumivý roztok pro rozpuštění bílkovin
Anode solution
Ve vodě rozpusťte:
Dissolve 5,77 g phosphoric acid (85 % w/w) in water and dilute to 100 ml.
5,75 g glycerolu (87 % hm.)
Cathode solution
24,03 g močoviny
Dissolve 2,00 g sodium hydroxide in water and dilute to 100 ml with water.
250 mg dithiothreitolu
Sample preparation
a doplňte na 50 ml vodou.
Reagents for protein isolation
Poznámka: Skladujte v chladničce; maximální doba uskladnění je jeden týden.
Dilute acetic acid (25,0 ml of glacial acetic acid made up to 100 ml with water)
Chemikálie určené k plasminovému štěpení kaseinů
Dichloromethane
Tlumivý roztok uhličitanu amonného
Acetone
Titrujte molární roztok hydrogenuhličitanu amonného 0,2 mol/l (1,58 g/100 ml vody) obsahující 0,05 mol/l kyseliny ethylendiamintetraoctové (EDTA, 1,46 g/100 ml) roztokem uhličitanu amonného 0,2 mol/l (1,92 g/100 ml vody) obsahujícího 0,05 mol/l EDTA na pH 8.
Protein dissolving buffer
Hovězí plasmin (EC.
Dissolve
3.4.21.7), s aktivitou nejméně 5 U/ml.
5,75 g glycerol (87 % w/w)
Roztok kyseliny ε-aminokapronové určené k inhibici enzymu
24,03 g urea
Rozpusťte 2, 624 g kyseliny ε-aminokapronové (6-amino-n-hexankyseliny) ve 100 ml 40 % obj. ethanolu.
250 mg dithiothreitol,
Referenční standardy
in water and make up to 50 ml
Certifikované referenční standardy směsi ovčího a kozího odstředěného mléka vysráženého pomocí syřidla a s obsahem 0 % a 1 % kravského mléka lze získat od Ústavu pro referenční materiály a měření působícího při Komisi, B-2440, Geel, Belgie.
Note: Store in a refrigerator, maximum shelf-life one week.
Příprava laboratorních prozatímních standardů buvolího mléka vysráženého pomocí syřidla a s obsahem 0 % a 1 % kravského mléka
Reagents for plasmin cleavage of caseins
Odstředěné mléko se připraví odstředěním syrového buvolího nebo kravského mléka při teplotě 37 °C (2500 g, 20 minut).
Ammonium carbonate buffer
Po rychlém ochlazení zkumavky a jejího obsahu na 6 až 8 °C se úplně odstraní horní tuková vrstva.
Titrate a 0,2 mol/l ammonium hydrogencarbonate solution (1,58 g/100 ml water) containing 0,05 mol/l ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, 1,46 g/100 ml with a 0,2 mol/l ammonium carbonate solution (1,92 g/100 ml water) containing 0,05 mol/l EDTA to pH 8.
Pro přípravu 1 % standardu přidejte 5,00 ml odstředěného kravského mléka do 495 ml odstředěného buvolího mléka v kádince o obsahu 1 l.
Bovine plasmin (EC.
Hodnotu pH upravte na 6,4 přídavkem zředěné kyseliny mléčné (10 %, hm./obj.).
3.4.21.7), activity at least 5 U/ml
Teplotu upravte na 35 °C, přidejte 100 μl telecího syřidla (aktivita syřidla 1: 10000, cca 3000 U/ml) a míchejte po dobu 1 minuty.
ε-Aminocaproic acid solution for enzyme inhibition
Poté kádinku zakryjte hliníkovou fólií a nechte hodinu stát při teplotě 35 °C k utvoření sýřeniny.
Dissolve 2,624 g ε-aminocaproic acid (6 amino-n-hexanoic acid) in 100 ml of 40 % (v/v) ethanol.
Po utvoření sýřeniny se veškeré mléko vysrážené pomocí syřidla lyofilizuje, aniž by předtím byla provedena homogenizace nebo odebrání syrovátky.
Standards
Lyofilizované mléko se jemně rozemele na homogenní prášek.
Certified reference standards of a mixture of renneted ewe's and goat's skimmed milk containing 0 % and 1 % of cow's milk are available from the Commission's Institute for Reference Materials and Measurements, B-2440 Geel, Belgium
K přípravě referenčního standardu 0 % použijte stejný postup u čistého odstředěného buvolího mléka.
Preparation of laboratory interim-standards of buffalo's renneted milk containing 0 % and 1 % of cow's milk
Referenční standardy musí být skladovány při teplotě – 20 °C.
Skimmed milk is prepared by centrifuging of either buffalo or bovine raw bulk milk at 37 °C at 2500 g for 20 minutes.
Poznámka: Před přípravou referenčních standardů se doporučuje zkontrolovat čistotu buvolího mléka izoelektrickou fokusací kaseinů vystavených působení plasminu.
After cooling the tube and contents rapidly to 6 to 8 °C, the upper fat layer is removed completely.