natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Vyhodnocení výsledku získaného u vzorků porovnáním se srovnávacími vzorky, které tvoří sušené odstředěné mléko s přídavkem nebo bez přídavku známého procenta sušené syrovátky.
Evaluation of the result obtained for the samples by reference to standard samples consisting of skimmed milk powder with or without the addition of a known percentage of whey powder.
Použitá voda musí být voda destilovaná nebo voda nejméně rovnocenné čistoty.
The water used shall be distilled water or water of at least equivalent purity.
Doplňte vodou na 1000 ml a homogenizujte.
Make up to 1000 ml with water and homogenise.
Poznámka: Lze použít jakýkoliv jiný promývací roztok, který má baktericidní účinek a který nezhoršuje rozlišovací účinnost kolony.
Note: Any other flushing solvent with a bactericidal effect which does not impair the columns' resolution efficiency may be used.
Sušené odstředěné mléko splňující požadavky tohoto nařízení (tj. [0]).
Skimmed milk powder meeting the requirements of this Regulation (i.e. [0])
Totéž sušené odstředěné mléko zfalšované přídavkem 5 % hm. sušené syřidlové syrovátky standardního složení (tj. [5]).
The same skimmed milk powder adulterated with 5 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [5])
Dávkovací systém schopný dodávat 20,0 ml vody při teplotě asi 50 °C
Dispensing system capable of delivering 20,0 ml water at ca.
Termostatická vodní lázeň nastavená na 25 ± 0,5 °C
50 °C
Zařízení na HPLC, které tvoří:
Thermostatic water bath, set at 25 ± 0,5 °C
Čerpadlo
HPLC equipment, consisting of:
Nástřikové zařízení – ruční nebo automatické – o objemu 15 až 30 μl
Pump
Dvě kolony TSK 2000-SW za sebou (délka 30 cm, vnitřní průměr 0,75 cm), nebo kolony s rovnocennou účinností (např. jedna kolona TSK 2000-SWxl, jedna kolona Agilent Technologies Zorbax GF 250) a jedna předkolona (3 cm × 0,3 cm) naplněná materiálem I 125 nebo jiným materiálem s rovnocennou účinností
Injector, hand or automatic, with a 15 to 30 μl capacity
Termostat kolony nastavený na 35 ± 1 °C
Two TSK 2000-SW columns in series (length 30 cm, internal diameter 0,75 cm) or equivalent columns (e.g. single TSK 2000-SWxl, single Agilent Technologies Zorbax GF 250) and a precolumn (3 cm × 0,3 cm) packed with I 125 or material of equivalent effectiveness
UV detektor s proměnnou vlnovou délkou umožňující měřit při 205 nm s citlivostí 0,008 Å.
Thermostatic column oven, set at 35 ± 1 °C
Integrátor schopný integrovat mezi sedly
Variable wavelength UV detector, permitting measurements at 205 nm with a sensitivity of 0,008 Å
Poznámka: Lze pracovat s kolonami udržovanými při laboratorní teplotě, avšak jejich rozlišovací schopnost je o trochu nižší.
Integrator capable of valley-to-valley integration
V tomto případě je třeba, aby výkyvy teploty v průběhu jednoho analytického pokusu byly menší než 5 °C.
Note: Working with columns kept at room temperature is possible, but their power of resolution is slightly lower.
Vzorky musí být odebírány postupem stanoveným v mezinárodní normě ISO 707.
In that case, the temperature should vary by less than ± 5 °C in any one range of analyses.
Členské státy však mohou používat jinou metodu odběru vzorků za předpokladu, že tato metoda odpovídá zásadám uvedené normy.
Samples shall be taken in accordance with the procedure laid down in International Standard ISO 707.
Vzorek skladujte takovým způsobem, aby nemohlo dojít ke znehodnocení nebo změně složení.
However, Member States may use another method of sampling provided that it complies with the principles of the abovementioned standard
Příprava zkušebního vzorku
Store the sample in conditions which preclude any deterioration or change in composition
Sušené mléko převeďte do nádobky, jejíž objem je asi dvakrát větší než objem prášku a která je opatřena vzduchotěsným víčkem.
Preparation of the test sample
Nádobku ihned uzavřete.
Transfer the milk powder into a container with a capacity of about twice the volume of the powder, fitted with an airtight lid.
Sušené mléko důkladně promíchejte opakovaným převracením nádobky.
Close the container immediately.
Zkušební dávka
Mix the milk powder well by means of repeated inversion of the container.
Do odstředivkové zkumavky (6.2) nebo vhodné baňky se zátkou na 50 ml navažte 2,000 ± 0,001 g zkušebního vzorku.
Test portion
Odstranění tuku a bílkovin
Weight 2,000 ± 0,001 g of test sample into a centrifuge tube (6.2) or a suitable stoppered flask (50 ml).
Ke zkušební dávce přidejte 20,0 ml teplé (50 °C) vody.
Removal of fat and proteins
Pětiminutovým třepáním na mechanické třepačce (6.3) se prášek rozpustí.
Add 20,0 ml of warm water (50 °C) to the test portion.
Zkumavku vložte do vodní lázně (6.10), dokud se její teplota neustálí na 25 °C.
Dissolve the powder by shaking for five minutes using a mechanical shaker (6.3).
Odstřeďujte (6.2) po dobu 10 minut při odstředivé síle 2200 g, nebo přefiltrujte přes papír (6.6) a prvních 5 ml filtrátu vyhoďte.
25 °C in two minutes, while stirring vigorously with the aid of the magnetic stirrer (6.4).
Chromatografické stanovení
Place the tube in a water bath (6.10) and leave for 60 minutes
Nastříkněte 15 až 30 μl přesně odměřeného supernatantu nebo filtrátu (8.3.3) do zařízení na HPLC (6.11) s průtokem 1,0 ml elučního roztoku (5.2) za minutu.
Centrifuge (6.2) for 10 minutes at 2200 g, or filter through paper (6.6), discarding the first 5 ml of filtrate
Nikdy v nich nenechávejte eluční roztok (5.2).
Chromatographic determination
Před každým přerušením na více než 24 hodin se kolony propláchnou vodou a potom se promývají roztokem (5.3) nejméně po dobu tří hodin při průtoku 0,2 ml za minutu.
Inject 15 to 30 μl of accurately measured supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus (6.11) operating at a flow rate of 1,0 ml of eluent solution (5.2) per minute
Výsledky chromatografické analýzy zkušebního vzorku [E] se získají ve formě chromatogramu, v němž je každý pík určen svým retenčním časem RT takto:
Note 1.
Pík II:
Another flow rate may be used, dependent of the internal diameter of the columns used or the instructions of the manufacturer of the column.
Druhý pík chromatogramu s RT asi 12,5 minuty
Note 2.
Pík III:
Rinse the columns with water during each interruption.
Třetí pík chromatogramu odpovídající CMP s RT 15,5 minuty
Never leave the eluent solution in them (5.2).
Retenční časy jednotlivých píků mohou být značně ovlivněny výběrem kolony (kolon).
Prior to any interruption of more than 24 hours, rinse the columns with water then wash them with solution (5.3) for at least three hours at a flow rate of 0,2 ml per minute.
Integrátor (6.11.6) automaticky vypočítává plochu A každého píku:
The results of chromatographic analysis of the test sample [E] are obtained in the form of chromatogram in which each peak is identified by its retention time RT as follows:
plocha píku II
Peak II:
plocha píku III
The second peak of the chromatogram having an RT of about 12,5 minutes.
Před kvantitativní interpretací je nezbytné prozkoumat vzhled každého chromatogramu za účelem zjištění případných anomálií způsobených buď nesprávnou funkcí zařízení, nebo kolon, nebo původem a povahou analyzovaného vzorku.
Peak III:
V případě pochybností analýzu zopakujte.
The third peak of the chromatogram, corresponding to the CMP, having an RT of 15,5 minutes.
Kalibrace
The choice of the column(s) can affect the retention times of the individual peaks considerably.
U srovnávacích vzorků (5.4) se přesně použije postup popsaný v bodech 8.2 až 8.4.2.
The integrator (6.11.6) automatically calculates the area A of each peak:
Použijte čerstvě připravené roztoky, protože CMP se v prostředí 8 % kyseliny trichloroctové odbourávají.
area of peak II,
Jejich obsah se při teplotě 30 °C snižuje odhadem o 0,2 % za hodinu.
area of peak III,
Před chromatografickým stanovením vzorků stabilizujte kolony opakovanými nástřiky roztoku (8.5.1) srovnávacího vzorku (5.4.2), dokud se plocha a retenční čas píku odpovídajícího CMP neustálí na konstantních hodnotách.
It is essential to examine the appearance of each chromatogram prior to quantitative interpretation, in order to detect any abnormalities due either to malfunctioning of the apparatus or the columns, or to the origin and nature of the sample analysed.
Stanovte odezvové faktory R nastříknutím stejného objemu filtrátů (8.5.1), jakého jste použili pro vzorky.
If in doubt, repeat the analysis.
VYJÁDŘENÍ VÝSLEDKŮ
Calibration
Metoda výpočtu a vzorce
Apply exactly the procedure described from point 8.2 to point 8.4.2 to the standard samples (5.4)
Výpočet odezvového faktoru R:
Use freshly prepared solutions, because CMP degrade in an 8 % trichloroacetic environment.
R II = odezvové faktory píků II
The loss is estimated at 0,2 % per hour at 30 °C.
A II [0] = plochy píků II srovnávacího vzorku [0] získané v 8.5.3
Prior to chromatographic determination of the samples, condition the columns by repeatedly injecting the standard sample (5.4.2) in solution (8.5.1) until the area and retention time of the peak corresponding to the CMP are constant
R III = odezvový faktor píku III
Determine the response factors R by injecting the same volume of filtrates (8.5.1) as used for the samples
A III [0] and AIII [5] = plochy píku III srovnávacích vzorků [0] a [5] získané v 8.5.3
EXPRESSION OF RESULTS
W = množství syrovátky ve srovnávacím vzorku [5], tj. 5
Method of calculation and formulae
Výpočet relativní plochy píků ve vzorku [E]
Calculation of the response factors R:
S II [E], SIII [E], SIV [E] = relativní plochy píků II, III a IV ve vzorku [E]
R II = the response factors of peaks II,
A II [E], AIII [E] = plochy píků II a III ve vzorku [E] získané v 8.4.2
A II [0] = the areas of peaks II of the standard sample [0] obtained in 8.5.3.
R II, RIII = odezvové faktory vypočtené v 9.1.1
R III = the response factor of peak III,
Výpočet relativního retenčního času píku III ve vzorku [E]:
A III [0] and AIII [5] = the areas of peak III in standard samples [0] and [5] respectively obtained in 8.5.3,
RRT III [E] = relativní retenční čas píku III ve vzorku [E]
W = the quantity of whey in standard sample [5], i.e. 5.
RT III [E] = relativní retenční čas píku III ve vzorku [E] získaný v 8.4.2
Calculation of the relative area of the peaks in the sample [E]
RT III [5] = relativní retenční čas píku III v kontrolním vzorku [5] získaný v 8.5.3
S II [E], SIII [E], SIV [E] = the relative areas of peaks II, III and IV respectively in the sample [E],
Pokusy ukazují, že mezi relativním retenčním časem píku III, tj.
A II [E], AIII [E] = the areas of peaks II and III respectively in the sample [E] obtained in 8.4.2,
RRTIII [E] a procentem přidané sušené syrovátky až do přídavku 10 % existuje lineární vztah
R II, RIII = the response factors calculated in 9.1.1.
při obsahu syrovátky > 5 % je RRTIII [E] < 1,000;
Calculation of the relative retention time of peak III in sample [E]:
při obsahu syrovátky ≤ 5 % je RRTIII [E] ≥ 1,000.
RRT III [E] = the relative retention time of peak III in sample [E],
Přípustná neurčitost pro hodnoty RRTIII je ± 0,002.
RT III [E] = the retention time of peak III in sample [E] obtained in 8.4.2,
Za normálních okolností se hodnota RRTIII [0] jen málo liší od 1,034.
RT III [5] = the retention time of peak III in control sample [5] obtained in 8.5.3.
Podle stavu kolon se může hodnota blížit 1,000, avšak vždy musí být vyšší než 1,000.
Experiments have shown that there is a linear relation between the relative retention time of peak III, i.e.
Výpočet procenta sušené syřidlové syrovátky obsažené ve vzorku:
RRTIII [E] and the percentage of whey powder added up to 10 %
W = SIII[E] – [1, 3 + (SIII[0] – 0, 9)]
The RRTIII [E] is < 1,000 when the whey content is > 5 %;
W = hmotnostní procento syřidlové syrovátky ve vzorku [E];
The RRTIII [E] is ≥ 1,000 when the whey content is ≤ 5 %.
S III [E] = relativní plocha píku III zkušebního vzorku [E] získaná podle 9.1.2;
The uncertainty allowed for the values of RRTIII is ± 0,002.
1,3 = představuje relativní průměrnou plochu píku III vyjádřenou v gramech syřidlové syrovátky na 100 g stanovené v nezfalšovaném sušeném odstředěném mléce různého původu.
Normally the value of RRTIII [0] deviates little from 1,034.
Toto číslo bylo získáno experimentálně
Depending on the condition of the columns, the value may approach 1,000, but it shall always be greater.
S III [0] = představuje relativní plochu píku III, která je rovna RIII × AIII[0].
Calculation of the percentage of rennet whey powder in the sample:
Tyto hodnoty se získají v 9.1.1 a 8.5.3;
W = SIII[E] – [1, 3 + (SIII[0] – 0,9)]
(S III [0] – 0,9) = představuje opravu, kterou je nutno provést na relativní průměrné ploše 1,3, jestliže SIII [0] není rovno 0,9.
W = the percentage m/m of rennet whey in the sample [E];
Experimentálně je relativní průměrná plocha píku III kontrolního vzorku [0] rovna 0,9.
S III [E] = the relative area of peak III of test sample [E] obtained as in 9.1.2;
Přesnost metody
1,3 = represents the relative average area of peak III expressed in grams of rennet whey per 100 g determined in non-adulterated skimmed milk powder of various origins.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního vzorku provedl současně nebo v těsném sledu jeden pracovník na stejném přístroji, by neměl překročit 0,2 % hm.
This figure was obtained experimentally;
Rozdíl mezi dvěma jednotlivými a nezávislými výsledky získanými ve dvou různých laboratořích u stejného zkušebního vzorku by neměl překročit 0,4 % hm.
S III [0] = represents the relative area of peak III which is equal to RIII × AIII [0].
Interpretace
These values are obtained in 9.1.1 and 8.5.3 respectively;
Lze předpokládat, že syrovátka není přítomna, je-li relativní plocha píku III SIII [E] vyjádřena v gramech syřidlové syrovátky na 100 g produktu, ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)
(S III [0] – 0,9) = represents the correction to be made to the relative average area 1,3 when SIII [0] is not equal to 0,9.
kde
Experimentally the relative average area of peak III of the control sample [0] is 0,9.
je maximální hodnota povolená pro relativní plochu píku III s přihlédnutím k relativní průměrné ploše píku III, tj. 1,3, k nejistotě z důvodu kolísání ve složení sušeného odstředěného mléka a k reprodukovatelnosti metody (9.3.2);
Accuracy of the procedure
je oprava, která musí být provedena, jestliže je plocha SIII [0] jiná než 0,9 (viz bod 9.2).
The difference between the results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession by the same analyst using the same apparatus on identical test material shall not exceed 0,2 % m/m.
Je-li relativní plocha píku III SIII [E] > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) a relativní plocha píku II SII [E] ≤ 160, stanovte obsah syřidlové syrovátky podle bodu 9.2.
The difference between two single and independent results, obtained in two different laboratories on identical test material shall not exceed 0,4 % m/m.
Je-li relativní plocha píku III SIII [E] > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) a relativní plocha píku II SII [E] ≤ 160, stanovte celkový obsah bílkovin (P %).
Interpretation
Potom prostudujte grafy 1 a 2.
Assume the absence of whey if the relative area of peak III, SIII [E] expressed in grams of rennet whey per 100 g of the product is ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)
Data získaná po analýze vzorků nezfalšovaného sušeného odstředěného mléka s vysokým celkovým obsahem bílkovin jsou zanesena do grafů 1 a 2.
where
Plná přímka představuje lineární regresi, jejíž koeficienty se vypočítají metodou nejmenších čtverců.
is the maximum value allowed for the relative area of peak III taking into account the relative average area of peak III, i.e. 1,3, the uncertainty due to variations in the composition of skimmed milk powder and the reproducibility of the method (9.3.2),
Čárkovaná přímka určuje horní mez relativní plochy píku III, a to s pravděpodobností, že nebude překročena v 90 % případů.
is the correction to be made when the area SIII [0] is different from 0,9 (see point 9.2)
Rovnice čárkovaných přímek v grafech 1 a 2 jsou:
If the relative area of peak III, SIII [E] is > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) and the relative area of peak II, SII [E] ≤ 160, determine the rennet whey content as indicated in point 9.2.
(graf 1)
If the relative area of peak III, SIII [E] is > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) and the relative area of peak II, SII [E] ≤ 160, determine the total protein content (P %); then examine graphs 1 and 2.
(graf 2)
The data obtained after analysis of samples of unadulterated skimmed milk powders with a high total protein content have been assembled in graphs 1 and 2.
kde:
The continuous line represents the linear regression, the coefficients of which are calculated by the least squares method.
je relativní plocha píku III vypočtená buď podle celkového obsahu bílkovin, nebo podle relativní plochy píku SII [E],
The dashed straight line fixes the upper limit of the relative area of peak III with a probability of not being exceeded in 90 % of cases.
P % je celkový obsah bílkovin vyjádřený jako procento hmotnosti,
The equations for the dashed straight lines of graphs 1 and 2 are:
je relativní plocha vzorku vypočtená v bodu 9.1.2.
(graph 1),
Tyto rovnice jsou rovnocenné číslu 1,3 uvedenému v bodu 9.2.
(graph 2),
Rozdíl (T1 a T2) mezi zjištěnou relativní plochou SIII [E] a relativní plochou SIII je dán těmito vztahy: T1 = SIII[E] – [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]T2 = SIII[E] – [(0,0123 SII[E] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)].
respectively where:
Jsou-li T1 a/nebo T2
is the relative area of peak III calculated either according to total protein content or according to the relative area of peak SII [E],
rovny nule nebo menší než nula, nelze obsah syřidlové syrovátky stanovit.
P % is the total protein content expressed as a percentage, by weight,
Jsou-li T1 a T2
is the relative area of sample calculated in point 9.1.2.
větší než nula, je syřidlová syrovátka přítomna.
These equations are equivalent to the figure of 1,3 mentioned in point 9.2.
Obsah syřidlové syrovátky se vypočítá podle vzorce: W = T2 + 0,91
The discrepancy (T1 and T2) between the relative area SIII [E] found and the relative area SIII is given by means of the following: T1 = SIII[E] – [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]T2 = SIII[E] – [(0,0123 SII[E] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)]
0,91 je vzdálenost na svislé ose mezi plnou a přerušovanou přímkou.
If T1 and/or T2
Pík II
are zero or less, the presence of rennet whey cannot be determined.
Sušené odstředěné mléko
If T1 and T2
celkový obsah bílkovin (%)
exceed zero, rennet whey is present.
Pík III
The rennet whey content is calculated according to the following formula: W = T2 + 0,91
Dodatek III
0,91 is the distance on the vertical axis between the continuous and dotted straight lines.
STANOVENÍ SUŠINY ZE SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE
Peak II
PŘEDMĚT: STANOVENÍ PŘÍDAVKU SUŠINY ZE SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY DO SUŠENÉHO ODSTŘEDĚNÉHO MLÉKA
Skimmed milk powder
NORMATIVNÍ ODKAZ: MEZINÁRODNÍ NORMA ISO 707
total protein content (%)
Obsah sušiny ze syřidlové syrovátky je definován jako hmotnostní procento stanovené popsaným postupem podle obsahu kaseinomakropeptidů.
Peak III
Vzorky jsou analyzovány na kaseinomakropeptidy A vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s obrácenými fázemi (metodou HPLC).
Appendix III
Eluenty A a B
The content of rennet whey solids is defined as the percentage by mass as determined by caseinomacropeptide content by the procedure described.
Uchování kolony
Samples are analysed for caseinomacropeptide A by a reversed-phase high-performance liquid chromatography procedure (HPLC procedure).
Po analýzách se kolona promyje eluentem B (spádem) a potom se propláchne acetonitrilem (spádem po dobu 30 minut).
Evaluation of the result is obtained by reference to standard samples consisting of skimmed milk powder with and without a known percentage of whey powder.
Kolona se uchovává v acetonitrilu.
Results higher than 1 % (m/m) show that rennet whey solids are present.
Sušené odstředěné mléko splňující požadavky stanovené pro veřejné skladování (tj. [0]).
Acetonitrile should be of spectroscopic or HPLC quality.
Totéž sušené odstředěné mléko zfalšované přídavkem 5 % hm. sušené syřidlové syrovátky standardního složení (tj. [5]).
Eluents A and B
Totéž sušené odstředěné mléko zfalšované přídavkem 50 % hm. sušené syřidlové syrovátky standardního složení (tj. [50]).
Eluent A: 150 ml of acetonitrile (CH3CN), 20 ml of isopropanol (CH3CHOHCH3), and 1,00 ml of trifluoroacetic acid (TFA, CF3COOH) are placed in a 1000 ml volumetric flask.
Dělené pipety umožňující dávkovat 10 ml (ISO 648, třída A, nebo ISO/R 835), nebo dávkovací systém schopný dodávat 10,0 ml za dvě minuty
Make up to 1000 ml with water.
Čerpadlo s binárním gradientem
Eluent B: 550 ml of acetonitrile, 20 ml of isopropanol and 1,00 ml of TFA are placed in a 1000 ml volumetric flask.
Nástřikové zařízení – ruční nebo automatické, o objemu 100 μl
Conservation of the column
Kolona Agilent Technologies Zorbax 300 SB-C3 (délka 25 cm, vnitřní průměr 0,46 cm), nebo jiná rovnocenná kolona pro obrácené fáze s velkými póry na bázi křemene
After the analyses the column is flushed with eluent B (via a gradient) and subsequently flushed with acetonitrile (via a gradient for 30 minutes).
UV detektor s proměnnou vlnovou délkou, který umožňuje provádět měření při 210 nm (v nutných případech je možné použít větší vlnové délky až do 220 nm) s citlivostí 0,02 Å.
The column is stored in acetonitrile.
Integrátor s možností nastavení integrace na obecnou základní linii nebo mezi sedly
Skimmed milk powder meeting the requirements for public storage (i.e. [0]).
Poznámka: Práce s kolonami udržovanými na teplotě místnosti je možná za předpokladu, že teplota nekolísá více než o 1 °C, jinak dochází k příliš velkým změnám retenčního času CMPA.
The same skimmed milk powder adulterated with 5 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [5]).
Vzorek skladujte takovým způsobem, aby nemohlo dojít ke znehodnocení nebo změně složení.
The same skimmed milk powder adulterated with 50 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [50])
Do odstředivkové zkumavky (6.2) nebo vhodné baňky se zátkou na 50 ml navažte 2,00 ± 0,001 g zkušebního vzorku.
Graduated pipettes, allowing delivery of 10 ml (ISO 648, Class A, or ISO/R 835), or a dispensing system capable of delivering 10,0 ml in two minutes
Poznámka: V případě směsí navažte takové množství zkušebního vzorku, aby tuku zbavená zkušební dávka odpovídala 2,00 g.
Binary gradient pumping system
Během dvou minut za stálého míchání magnetickou míchačkou (6.4) přidejte 10,0 ml roztoku kyseliny trichloroctové o teplotě asi 25 °C (5.1).
Injector, hand or automatic, with a 100 μl capacity
Odstřeďujte (6.2) po dobu 10 minut při odstředivé síle 2200 g, nebo přefiltrujte přes papír (6.6) a prvních 5 ml filtrátu vyhoďte.
Agilent Technologies Zorbax 300 SB-C3 column (length 25 cm, 0,46 cm internal diameter) or an equivalent wide-pore silica based reversed-phase column
Metoda HPLC s obrácenými fázemi vylučuje možnost falešně pozitivních výsledků díky přítomnosti sušeného kysaného podmáslí.
Variable wavelength UV detector, permitting measurements at 210 nm (if necessary, a higher wavelength up to 220 nm may be used) with a sensitivity of 0,02 Å
Před provedením analýzy HPLC s obrácenými fázemi je třeba optimalizovat podmínky gradientu.
Integrator capable of setting the integration to common baseline or valley-to-valley
Pro gradientové systémy s mrtvým objemem asi 6 ml (objem od bodu, kde se stékají rozpouštědla k objemu nástřikové smyčky včetně) je optimální retenční čas v délce 26 minut ± 2 minuty pro CMPΑ.
Note: Operation of the column at room temperature is possible, provided that the room temperature does not fluctuate more than 1 °C, otherwise too much variation in the retention time of CMPA takes place.
Pro gradientové systémy s menším mrtvým objemem (např. 2 ml) je optimální retenční čas 22 minut.
Store the sample in conditions which preclude any deterioration or change in composition.
Vezměte roztoky srovnávacích vzorků (5.4) s obsahem 50 % syřidlové syrovátky a bez obsahu této syrovátky.
Weigh 2,00 ± 0,001 g of test sample into a centrifuge tube (6.2) or suitable stoppered flask (50 ml).