natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Chemikálie určené k barvení bílkovin
For the preparation of the 1 % standard add 5,00 ml of bovine skimmed milk to a 495 ml of buffalo's skimmed milk in a 1 l beaker, adjust the pH to 6,4 by the addition of dilute lactic acid (10 % w/v).
Fixativ
Adjust the temperature to 35 °C and add 100 μl of calf rennet (rennet activity 1: 10000, c.
Rozpusťte 150 g kyseliny trichloroctové ve vodě a doplňte na 1000 ml.
3000 U/ml), stir for 1 minute and then leave the beaker covered with an aluminium foil at 35 °C for one hour to allow formation of the curd.
Odbarvovací roztok
After the curd has formed, the whole renneted milk is freeze-dried without prior homogenization or draining of the whey.
Zřeďte 500 ml methanolu a 200 ml ledové kyseliny octové destilovanou vodou na 2000 ml.
After freeze-drying it is finely ground to produce a homogeneous powder.
Poznámka: Odbarvovací roztok se připravuje každý den čerstvý; lze jej připravit smícháním stejných objemů zásobního roztoku 50 % (obj.) methanolu a zásobního roztoku 20 % (obj.) ledové kyseliny octové.
For the preparation of the 0 % standard, carry out the same procedure using genuine buffalo skimmed milk.
Barvicí roztoky
The standards shall be stored at – 20 °C.
Barvicí roztok (zásobní roztok 1)
Note: It is advisable to check the purity of the buffalo milk by isoelectric focusing of the plasmin-treated caseins before preparation of the standards.
V 1000 ml 90 % obj. methanolu rozpusťte pomocí magnetické míchačky (asi 45 minut) 3,0 g brilantní modři Coomassie G-250 (C.
Reagents for protein staining
I.
Fixative
42655) a roztok přefiltrujte přes dva středně husté skládané filtry.
Dissolve 150 g trichloroacetic acid in water and make up to 1000 ml.
Barvicí roztok (zásobní roztok 2)
Destaining solution
V 1000 ml 20 % obj. kyseliny octové rozpusťte 5,0 g síranu měďnatého, pentahydrátu.
Dilute 500 ml methanol and 200 ml glacial acetic acid to 2000 ml with distilled water.
Barvicí roztok (pracovní roztok)
Note: Prepare the destaining solution fresh every day; it can be prepared by mixing equal volumes of stock solutions of 50 % (v/v) methanol and 20 % (v/v) glacial acetic acid.
Bezprostředně před barvením smíchejte 125 ml obou zásobních roztoků (4.11.1 a 4.11.2).
Staining solutions
Poznámka: Barvicí roztok je třeba použít v den přípravy.
Staining solution (stock solution 1)
PŘÍSTROJE A POMŮCKY
Dissolve 3,0 g Coomassie Brilliant Blue G-250 (C.I. 42655) in 1000 ml 90 % (v/v) methanol using a magnetic stirrer (approximately 45 minutes), filter through two medium-speed folded filters.
Skleněné desky (265 x 125 x 4 mm), pryžový váleček (o šířce 15 cm), nivelační stolek.
Staining solution (stock solution 2)
Nosná fólie gelu (265 × 125 mm)
Dissolve 5,0 g copper sulphate pentahydrate in 1000 ml 20 % (v/v) acetic acid.
Krycí fólie (280 × 125 mm).
Staining solution (working solution)
Na každý dlouhý okraj nalepte pruh lepicí pásky (280 × 6 × 0,25 mm) (viz obrázek 1).
Mix together 125 ml of each of the stock solutions (4.11.1, 4.11.2) immediately prior to staining.
Elektrofokusační komora s chladicí deskou (např. 265 × 125 mm) a vhodný napájecí zdroj (≥ 2,5 kV) nebo automatické elektroforetické zařízení
Note: The staining solution should be prepared on the day that it is used.
Cirkulační kryostat s regulací teploty ve výši 12 ± 0,5 °C
EQUIPMENT
Odstředivka nastavitelná na 3000 g
Glass plates (265 × 125 × 4 mm); rubber roller (width 15 cm); levelling table
Elektrodové proužky (o délce ≥ 265 mm)
Gel carrier sheet (265 × 125 mm)
Plastové kapací nádobky na anodový a katodový roztok
Covering sheet (280 × 125 mm).
Aplikátory vzorku (10 × 5 mm, z viskózy nebo filtračního papíru s nízkou adsorpcí bílkovin)
Stick on strip of adhesive tape (280 × 6 × 0,25 mm) to each long edge (see Figure 1)
Odbarvovací a barvicí misky (např. misky na nástroje 280 × 150 mm) z nerezové oceli nebo skleněné
Electrofocusing chamber with cooling plate (e.g. 265 × 125 mm) and suitable power supply (≥ 2,5 kV) or automatic electrophoresis device
Nastavitelný tyčový homogenizátor s průměrem tyče 10 mm a rychlostí 8000 až 20000 ot/min
Circulation cryostat, thermostatically controlled at 12 ± 0,5 °C
Svářečka fólií
Centrifuge, adjustable to 3000 g
Mikropipety na 25 μl
Electrode strips (≥ 265 mm long)
Vakuová odstředivka nebo lyofilizátor
Plastic dropping bottles for the anode and cathode solutions
Termostatem řízená vodní lázeň, nastavitelná na 35 a 40 ± 1 °C s třepačkou
Sample applicators (10 × 5 mm, viscose or low protein-adsorption filter paper)
Densitometrické zařízení umožňující měření na vlnové délce λ = 634 nm
Stainless steel or glass staining and destaining dishes (e.g. 280 × 150 mm instrument trays)
Izolace kaseinů
Adjustable rod homogenizer (10 mm shaft diameter), rpm range 8000 to 20000
Do odstředivkové kyvety na 100 ml navažte množství sýra nebo referenčního standardu odpovídající 5 g sušiny, přidejte 60 ml destilované vody a obsah homogenizujte tyčovým homogenizátorem (8000 až 10000 ot/min).
Film welder
Upravte pH na 4,6 zředěnou kyselinou octovou (4.5.1) a odstřeďujte (5 minut, 3000 g).
25 μl micropipettes
Dekantujte tuk a syrovátku a zbytek homogenizujte při 20000 ot/min se 40 ml destilované vody s hodnotou pH upravenou na 4,5 zředěnou kyselinou octovou (4.5.1).
Vacuum concentrator or freeze-dryer
Přidejte 20 ml dichlormethanu (4.5.2) a znovu homogenizujte a odstřeďuje (5 minut, 3000 g).
Thermostatically controlled water bath adjustable to 35 and 40 ± 1 °C with shaker
Špachtlí vyjměte kaseinovou vrstvu, která se nachází mezi vodnou a organickou fází (viz obrázek 2), a obě fáze dekantujte.
Densitometer equipment reading at λ = 634 nm
Kasein se znovu homogenizuje se 40 ml destilované vody (viz výše) a 20 ml dichlormethanu (4.5.2) a odstředí se.
Isolation of caseins
Tento postup opakujte, dokud obě extrakční fáze nejsou bezbarvé (dvakrát až třikrát).
Weigh the amount equivalent to 5 g dry mass of cheese or the reference standards into a 100 ml centrifuge tube, add 60 ml distilled water and homogenize with a rod homogenizer (8000 to 10000 rpm).
Bílkovinný zbytek homogenizujte s 50 ml acetonu (4.5.3) a přefiltrujte přes středně hustý skládaný papírový filtr.
Adjust to pH 4,6 with dil. acetic acid (4.5.1) and centrifuge (5 minutes, 3000 g).
Zbytek promyjte dvěma samostatnými 25 ml dávkami acetonu a nechte vysušit na vzduchu nebo v proudu dusíku.
Decant the fat and whey, homogenize the residue at 20000 rpm in 40 ml distilled water adjusted to pH 4,5 with dil. acetic acid (4.5.1), add 20 ml dichloromethane (4.5.2), homogenize again and centrifuge (5 minutes, 3000 g).
Potom jemně rozmělněte v třecí misce.
Remove the casein layer that lies between the aqueous and organic phases (see Figure 2) with a spatula and decant off both phases.
Poznámka: Suché bílkovinné extrakty se musí uchovávat při teplotě – 20 °C.
Rehomogenise the casein in 40 ml distilled water (see above) and 20 ml dichloromethane (4.5.2) and centrifuge.
Přeměna β-kaseinů na γ-kaseiny působením plasminu
Repeat this procedure until both extraction phases are colourless (two to three times).
Rozptylte 25 mg izolovaných kaseinů (6.1.1) v 0,5 ml tlumivého roztoku uhličitanu amonného (4.7.1) a směs 20 minut homogenizujte, např. ultrazvukem.
Homogenize the protein residue with 50 ml acetone (4.5.3) and filter through a medium-speed folded filter paper.
Směs zahřejte na 40 °C a přidejte 10 μl plasminu (4.7.2), promíchejte a inkubujte 1 hodinu při teplotě 40 °C za stálého třepání.
Wash the residue on the filter with two separate 25 ml portions of acetone each time and allow to dry in the air or a stream of nitrogen, then pulverize finely in a mortar.
Pro inhibici enzymu přidejte 20 μl roztoku kyseliny ε-aminokapronové (4.7.3).
Note: Dry casein isolates should be kept at –20 °C.
Poté přidejte 200 mg pevné močoviny a 2 mg dithiothreitolu.
Plasmin cleavage of β-caseins to intensify γ-caseins
Poznámka: Pro získání lepší symetrie fokusovaných kaseinových pásů se doporučuje po přidání kyseliny ε-aminokapronové roztok lyofilizovat a poté zbytky rozpustit v 0,5 ml tlumivého roztoku pro rozpouštění bílkovin (4.6).
Disperse 25 mg of isolated caseins (6.1.1) in 0,5 ml ammonium carbonate buffer (4.7.1) and homogenize for 20 minutes by e.g. using ultrasonic treatment.
Příprava polyakrylamidových gelů s obsahem močoviny
Heat to 40 °C and add 10 μl plasmin (4.7.2), mix and incubate for one hour at 40 °C with continuous shaking.
Na skleněnou desku (5.1) válečkem naneste nosnou fólii gelu (5.2) s pomocí několika kapek vody a přebytečnou vodu odsajte papírovým ubrouskem nebo kapesníčkem.
To inhibit the enzyme add 20 μl ε-aminoproic acid solution (4.7.3), then add 200 mg of solid urea and 2 mg of dithiothreitol.
Stejným způsobem válečkem naneste druhou, krycí fólii (5.3) s distančními vložkami (0,25 mm) na jinou skleněnou desku.
Note: To obtain more symmetry in the focused casein bands it is advisable to freeze-dry the solution after adding the ε-aminocaproic acid and then dissolving the residues in 0,5 ml protein dissolving buffer (4.6).
Tuto druhou desku uložte vodorovně na nivelační stolek.
Preparation of the urea containing polyacrylamide gels
K připravenému odplyněnému roztoku gelu (4.1.2) přidejte 10 μl Temedu (4.1.3.1), protřepejte a přidejte 10 μl roztoku PER (4.1.3.2); důkladně promíchejte a okamžitě nalijte rovnoměrně na střed krycí fólie.
With the aid of a few drops of water roll the gel carrier sheet (5.2) onto a glass plate (5.1), removing any extraneous water with paper towel or tissue.
Jeden okraj nosné desky gelu (stranou s fólií směrem dolů) přiložte k desce s krycí fólií a pomalu pokládejte tak, aby se mezi fóliemi vytvořila pravidelně rozprostřená tenká vrstva gelu bez bublin (obrázek 3).
Roll the cover sheet (5.3) with spacers (0,25 mm) onto another glass plate in the same way.
Pomocí tenké špachtle nosnou desku gelu opatrně přitiskněte po celé délce a položte na ni tři další skleněné desky, aby ji zatížily.
Lay the plate horizontally on a levelling table.
Po skončení polymerace (asi po 60 minutách) spolu s krycí fólií sejměte gel zpolymerovaný na nosné fólii gelu tak, že skleněné desky nakloníte.
Add 10 μl Temed (4.1.3.1) to the prepared and de-aerated gel solution (4.1.2), stir and add 10 μl PER-solution (4.1.3.2), mix thoroughly and immediately pour out evenly onto the centre of the cover sheet.
Zadní stranu nosné fólie pečlivě očistěte, aby se odstranily zbytky gelu a močoviny.
Place one edge of the gel carrier plate (sheet side down) on the cover sheet plate and lower it slowly so that a gel film forms between the sheets and spreads out regularly and free of bubbles (Figure 3).
„Gelový sendvič“ zavařte do tenké fólie a uložte do chladničky (nejdéle na šest týdnů).
Carefully lower the gel carrier plate completely using a thin spatula and place three more glass plates on top of it to act as weights.
Poznámka: Krycí fólii s distančními vložkami lze použít znovu.
After polymerization is complete (about 60 minutes) remove the gel polymerized onto the gel carrier sheet along with the cover sheet by tipping the glass plates.
Polyakrylamidový gel může být rozřezán na menší části; je to vhodné v případě omezeného počtu vzorků nebo v případě použití automatického elektroforetického zařízení (dva gely o rozměrech 4,5 × 5 cm).
Clean the reverse of the carrier sheet carefully to remove gel residues and urea.
Izoelektrická fokusace
Weld the gel sandwich into a film tube and store in a refrigerator (maximum six weeks).
Nastavte kryostat na 12 °C.
Note: The cover sheet with the spacers can be re-used.
Zadní stranu nosné fólie gelu otřete kerosinem a poté na střed chladicího bloku kápněte několik kapek kerosinu (4.2).
The polyacrylamide gel can be cut to smaller sizes, recommended when there are few samples or if an automatic electrophoresis device is used (two gels, size 4,5 × 5 cm).
Opatrně přiložte „gelový sendvič“ nosnou fólií obrácený dolů, aby se vytlačily všechny vzduchové bubliny.
lsoelectric focusing
Přebytečný kerosin otřete a sejměte krycí fólii.
Set the cooling thermostat to 12 °C.
Elektrodové proužky napusťte elektrodovými roztoky (4.3, 4.4), seřízněte na délku gelu a uložte na místo (vzdálenost elektrod 9,5 cm).
Wipe off the reverse of the gel carrier sheet with kerosene, then drip a few drops of kerosene (4.2) onto the centre of the cooling block.
Podmínky izoelektrické fokusace
Then roll the gel sandwich, carrier side down, onto it, taking care to avoid bubbles.
Rozměry gelu 265 × 125 × 0,25 mm
Wipe off any excess kerosene and remove the cover sheet.
Fáze
Soak the electrode strips with the electrode solutions (4.3, 4.4), cut to gel length and place in the positions provided (distance of electrodes 9,5 cm).
Napětí
Conditions for isoelectric focusing:
Proud
Gel size 265 × 125 × 0,25 mm
Příkon
Step
Volty/hodiny
Voltage
Předběžná fokusace
Current
max.
Power
konstantní 4
Volt-hours
Fokusace vzorku
Pre-focusing
Konečná fokusace
maximum
Teplota
Final focusing
Fokusace
Note: If thickness or width of the gels are changed, the values for current and power have to be suitably adjusted (e.g. double the values for electric current and power if a 265 × 125 × 0,5 mm gel is used).
Aplikátor vzorku ve fázi 2 vložte při 0 Vh.
Example of a voltage programme for an automatic electrophoresis device (2 gels of 5,0 × 4,5 cm), electrodes without strips applied directly to the gel
Aplikátor vzorku ve fázi 2 odstraňte při 30 Vh.
Temp.
Barvení bílkovin
Focusing
Fixace bílkovin
Place sample applicator in step 2 at 0 Vh.
Okamžitě po vypnutí napájení se odstraní elektrodové proužky a gel se ihned vloží do barvicí/odbarvovací misky naplněné 200 ml fixatéru (4.9).
Remove sample applicator in step 2 at 30 Vh.
Gel v ní ponechte 15 minut za stálého třepání.
Protein staining
Praní a barvení gelové desky
Protein fixation
Odbarvení gelové desky
Remove the electrode strips immediately after turning off the power and put the gel immediately into a staining/destaining dish filled with 200 ml fixative (4.9); leave for 15 minutes, shaking continuously.
Barvicí roztok dekantujte a gelovou desku dvakrát promývejte po dobu 30 sekund vždy ve 100 ml odbarvovacího roztoku (4.10).
Washing and staining the gel plate
Poté 15 minut protřepávejte s 200 ml odbarvovacího roztoku; fázi odbarvování opakujte nejméně dvakrát až třikrát, dokud není pozadí čiré a bezbarvé.
Thoroughly drain off the fixative and wash the gel plate twice for 30 seconds each time with 100 ml destaining solution (4.10).
Gelovou desku potom promyjte destilovanou vodou (2 × 2 minuty) a nechte uschnout na vzduchu (2 až 3 hodiny) nebo usušte vysoušečem vlasů (10 až 15 minut).
Pour off the destaining solution and fill the dish with 250 ml staining solution (4.11.3); allow to stain for 45 minutes with gentle shaking.
Poznámka 1: Fixaci, promývání, barvení a odbarvování provádějte při teplotě 20 °C.
Destaining the gel plate
Vyšší teploty nepoužívejte.
Pour off the staining solution, wash the gel plate twice using a 100 ml destaining solution (4.10) each time, then shake with 200 ml destaining solution for 15 minutes and repeat the destaining step at least two or three times until the background is clear and uncoloured.
Poznámka 2: Pokud upřednostňujete citlivější obarvení stříbrem (např. Silver Staining Kit, Protein, Pharmacia Biotech, kód č. 17-1150-01), musí být kaseinové vzorky ošetřené plasminem zředěny v poměru 5 mg/ml.
Then rinse the gel plate with distilled water (2 × 2 minutes) and dry in the air (2 to 3 hours) or with a hairdryer (10 to 15 minutes).
HODNOCENÍ
Note 1: Carry out fixing, washing, staining and destaining at 20 °C.
Hodnocení se provádí porovnáním proteinových obrazců zkoumaného vzorku s obrazci referenčních standardů u stejného gelu.
Do not use elevated temperatures.
Zjišťování kravského mléka v sýrech vyrobených z ovčího mléka, kozího mléka, buvolího mléka nebo ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka se provádí prostřednictvím γ3- a γ2-kaseinů, jejichž izoelektrické body se nacházejí v rozmezí mezi pH 6,5 a pH 7,5 (obrázky 4a, b, obrázek 5).
Note 2: If more sensitive silver staining (e.g. Silver Staining Kit, Protein, Pharmacia Biotech, Code No 17-1150-01) is preferred, plasmin-treated casein samples have to be diluted to 5 mg/ml.
Vizuální hodnocení
Evaluation is performed by comparing the protein patterns of the unknown sample with reference standards on the same gel.
Pouze za těchto podmínek lze přímo posoudit množství kravského mléka (menší nebo větší než 1 % nebo ve výši 1 %) v analyzovaném vzorku porovnáním intenzity hovězích γ3- a γ2-kaseinů (viz „γ3 C“ a „γ2 C“ na obrázcích 4 a, b a obrázku 5) s intenzitami kaseinů v referenčních standardech s obsahy 0 % a 1 % (ovčích, kozích), nebo prozatímních laboratorních standardech (buvolích).
The detection limit is less than 0,5 %.
Poznámka: Tato metoda funguje uspokojivě, pokud existuje jasný pozitivní signál obou hovězích γ2- a γ3-kaseinů v 1 % referenčním standardu, avšak nikoli v 0 % referenčním standardu.
Densitometric estimation
V opačném případě je nutné postup optimalizovat při přesném dodržení pokynů stanovených v dané metodě.
If available, apply densitometry (5.19) for the determination of the peak area ratio of bovine to ovine, caprine and/or buffalo γ2- and γ3-caseins (see Figure 5).
Vzorek je považován za pozitivní, jestliže hodnoty obou hovězích γ2- a γ3-kaseinů nebo příslušných poměrů ploch píků jsou stejné nebo větší než hodnoty odpovídající 1 % referenčnímu standardu.
Compare this value to γ2- and γ3-casein peak area ratio of the 1 % reference standard (ewe, goat) or laboratory interim-standard (buffalo) analysed on the same gel.
Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).
Note: The method is operating satisfactorily, if there is a clear positive signal for both bovine γ2- and γ3-caseins in the 1 % reference standard but not in the 0 % reference standard.
Milchwissenschaft 50, 83–85 (1995).
If not, optimize the procedure following the details of the method precisely.
Electrophoresis 1, 43–56 (1980).
A sample is judged as being positive, if both bovine γ2- and γ3-caseins or the corresponding peak area ratios are equal to or greater than the level of the 1 % reference standard.
Schematický výkres krycí fólie
Addeo F., Moio L., Chianese L., Stingo C., Resmini P., Berner I, Krause I., Di Luccia A., Bocca A.: Use of plasmin to increase the sensitivity of the detection of bovine milk in ovine and/or caprine cheese by gel isoelectric focusing of γ2-caseins.
Polyesterová fólie
Milchwissenschaft 45, 708-711 (1990).
Distanční páska
Addeo F., Nicolai M.A., Chianese L., Moio L., Spagna Musso S., Bocca A., Del Giovine L.: A control method to detect bovine milk in ewe and water buffalo cheese using immunoblotting.
Obrázek 2
Milchwissenschaft 50, 83-85 (1995).
Kaseinová vrstva plovoucí mezi vodnou a organickou fází po odstředění
Krause I., Berner I, Klostermeyer H.: Sensitive detection of cow milk in ewe and goat milk and cheese by carrier ampholyte — and carrier ampholyte/immobilized pH gradient — isoelectric focusing of γ-caseins using plasmin as signal amplifier. in: Electrophoresis-Forum 89 (B. J. Radola, ed.) pp 389-393, Bode-Verlag, München (1989).
Vodná fáze
-käse durch isoelektrische Fokussierung in harnstoffhaltigen Polyacrylamidgelen.
Kasein
Radola B.J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50-100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films.
Methylenchloridová fáze
Electrophoresis 1, 43-56 (1980).
Obrázek 3
Schematic drawing of the covering sheet
Sklápěcí technika pro odlévání ultratenkých polyakrylamidových gelů
Polyester sheet
a = distanční páska (0,25 mm); b = krycí fólie (5.3); c, e = skleněné desky (5.1); d = gelový roztok (4.1.2); f = nosná fólie gelu (5.2).
Spacer tape
Obrázek 4a
Figure 2
Izoelektrická fokusace kaseinů ze sýrů z ovčího a kozího mléka, ošetřených plasminem, s různým obsahem kravského mléka
Casein layer floating between aqueous and organic phases after centrifugation
% CM = procento kravského mléka, C = kravské, E = ovčí, G = kozí
H2O-Phase
Na obrázku je znázorněna horní polovina gelu IEF.
Casein
Obrázek 4b
CH2Cl2-Phase
Izoelektrická fokusace kaseinů ze sýrů vyrobených ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka, ošetřených plasminem, s různým obsahem kravského mléka
Figure 3
Na obrázku je znázorněna celá separační vzdálenost gelu IEF.
Figure 4a
Obrázek 5
Isoelectric focusing of plasmin-treated caseins from ewe's and goat's milk cheese containing different amounts of cow's milk.
Superpozice denzitogramů referenčních standardů (STD) a vzorků sýra vyrobeného ze směsi ovčího a kozího mléka, po izoelektrické fokusaci
% CM = percentage of cow's milk, C = cow, E = ewe, G = goat
Byla snímána horní polovina gelu IEF při λ = 634 nm.
Upper half of the IEF gel is shown.
Použití vzorku: Po předběžné fokusaci (krok 1) pipetou odměřte 18 μl vzorku a standardních roztoků do aplikátorů vzorku (10 × 5 mm), vložte na gel ve vzdálenosti 1 mm od sebe a 5 mm podélně od anody a jemně přitlačte.
Figure 4b
Fokusaci proveďte za výše uvedených podmínek a aplikátory vzorku opatrně vyjměte po 60 minutách fokusace vzorku.
Isoelectric focusing of plasmin treated caseins from cheese made from mixtures of ewe's, goat's and buffalo milk containing different amounts of cow's milk.
PŘÍLOHA IX
% CM = percentage of cow's milk; 1 + = sample containing 1 % of cow's milk and spiked with pure bovine casein at the middle of the track.
Hodnocení analýz
C = cow, E = ewe, G = goat, B = buffalo.
Zajištění jakosti
Total separation distance of the IEF gel is shown.
Analýzy provádějí laboratoře určené v souladu s článkem 12 nařízení (ES) č. 882/2004 (*) nebo určené příslušnými orgány členského státu.
Figure 5
Odběr vzorků a námitky proti výsledkům analýzy
Superposition of densitograms of standards (STD) and cheese samples made from a mixture of ewe's and goat's milk after isoelectric focusing.
Odběr vzorků se provádí v souladu s příslušným nařízením pro posuzovaný výrobek.
a,b = standards containing 0 and 1 % of cow's milk; c-g = cheese samples containing 0, 1, 2, 3 and 7 % of cow's milk.
Neexistují-li žádná ustanovení pro odběr vzorku, použijí se ustanovení uvedená v normě ISO 707„Mléko a mléčné výrobky – Směrnice pro odběr vzorků“,
C = cow, E = ewe, G = goat.
Laboratorní zprávy o výsledcích analýz obsahují dostatečné údaje, které umožní hodnocení výsledků v souladu s dodatkem.
Upper half of the IEF gel was scanned at λ = 634 nm.
Pro analýzy stanovené v právních předpisech Unie se odebírají duplicitní vzorky.
Sample application: After pre-focusing (step 1), pipette 18 μl of the sample and standard solutions onto the sample applicators (10 × 5 mm), place them on the gel at 1 mm intervals from each other and 5 mm longitudinally from the anode and press lightly.
Pokud dojde ke sporu ohledně výsledků, platební agentury musí nechat znovu provést nezbytnou analýzu dotyčného produktu a náklady hradí strana, která spor prohraje.
Carry out focusing using the above conditions, carefully removing the sample applicators after the 60 minutes of sample focusing.
Výše uvedená analýza se provede za předpokladu, že zapečetěné duplicitní vzorky produktu jsou k dispozici a byly řádně uloženy u příslušného orgánu.
ANNEX IX
Výrobce zašle platební agentuře žádost k provedení analýzy do sedmi pracovních dnů od sdělení výsledků první analýzy.
Evaluation of the analyses
Platební agentura provede analýzu do 21 dnů od obdržení žádosti.
Quality assurance
Výsledek opravného prostředku se považuje za konečný.
Analyses shall be performed by laboratories designated in accordance with Article 12 of Regulation (EC) No 882/2004 (**) or designated by the competent authorities of the Member State.
Jestliže výrobce do pěti pracovních dnů po odběru vzorků prokáže, že postup při odběru vzorků nebyl správný, odběr vzorků se v rámci možností zopakuje.
Sampling and disputes over the results of analysis
Pokud odběr vzorků zopakovat nelze, je šarže přijata.
Sampling shall be carried out in accordance with the relevant regulation for the product under consideration.
Zhodnocení splnění zákonem stanovené mezní hodnoty s ohledem na šarži
If no sampling provisions are expressly provided for, then the provisions laid down in ISO 707, Milk and milk products – Guidance on sampling, shall be used.
Podstata metody
Laboratory reports of the results of the analysis shall contain sufficient information to allow an evaluation of the results to be carried out in accordance with the Appendix.