natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Jelikož však k1 a k2 jsou konstanty, k odvození hodnoty BCFK není nutné dosáhnout rovnovážného stavu.
Test chemical is any substance or mixture tested using this test method.
Na základě těchto prvních rovnic prvního řádu jsou v tomto dodatku 5 uvedeny všeobecné výpočty nezbytné pro bioakumulační metody expozice jak ve vodním prostředí, tak v potravě.
Chapter A.8 of this Annex, Partition Coefficient (n-octanol/water): Shake Flask Method
Metoda postupného stanovení hodnoty k2 (oddíl 4) je důležitá pro zkoušku expozice v potravě, neboť je nutná jak pro výpočet účinnosti asimilace, tak pro výpočet BMF.
SOME CHEMICAL CHARACTERISTICS OF AN ACCEPTABLE DILUTION WATER
Výpočty, které jsou specifické pro studii potravy, jsou podrobně popsány v dodatku 7.
Component
PŘEDPOVĚĎ DÉLKY FÁZE PŘÍJMU
Limit concentration
Před provedením zkoušky lze získat odhad hodnoty k2 a odtud lze získat dobu nezbytnou pro dosažení rovnovážného stavu z empirických vztahů mezi k2 a rozdělovacím koeficientem n-oktanol/voda (KOW) nebo mezi k1 a BCF.
Particulate matter
Je však třeba si uvědomit, že rovnice v tomto oddíle platí pouze v případě, že se příjem a vylučování řídí kinetikou prvního řádu.
5 mg/l
Pokud tomu tak zjevně není a je-li žádoucí mít předpovědi fáze příjmu, doporučuje se konzultovat biostatistika a/nebo farmakokinetika.
Total organic carbon
Odhad hodnoty k2 (jednotka/den) lze získat několikerým způsobem.
2 mg/l
Mohly by být například nejprve použity tyto empirické vztahy [1]:
Un-ionised ammonia
(r2 = 0,95) [(3); Rovnice A5.5]
1 μg/l
[Rovnice A5.6]
Residual chlorine
kde k1 = 520 × W– 0,32 (u látek s hodnotou log KOW > 3)
10 μg/l
(r2 = 0,85) [(4); Rovnice A5.7]
Total organophosphorous pesticides
aBCF
50 ng/l
(r2 = 0,90) [(5); Rovnice A5.8]
Total organochlorine pesticides plus polychlorinated biphenyls
W = střední hodnota hmotnosti exponovaných ryb (v gramech živé hmotnosti) na konci fáze příjmu / začátku fáze vylučování [2]
Total organic chlorine
Jiné související vztahy viz (6).
25 ng/l
Při odhadu hodnoty k2 může být výhodné použít složitější modely, například pokud je pravděpodobné, že může dojít k výraznému metabolismu (7) (8).
Aluminium
Čím je však model složitější, tím obezřetněji je třeba přistupovat k interpretaci předpovědí.
Arsenic
Například, přítomnost nitroskupin by mohla indikovat rychlý metabolismus, ale není tomu tak vždy.
Chromium
Uživatel by proto při plánování studie měl zvážit výsledky prediktivní metody s ohledem na chemickou strukturu a na jakékoli jiné důležité informace (například předběžné studie).
Cobalt
Dobu potřebnou pro dosažení určitého procenta rovnovážného stavu lze s použitím odhadu k2 získat z obecné kinetické rovnice popisující příjem a vylučování (s kinetikou prvního řádu), za předpokladu, že růst a metabolismus jsou zanedbatelné.
Copper
Dojde-li během studie k výraznému růstu, nebudou níže popsané odhady spolehlivé.
Iron
V takových případech je lepší použít hodnotu upravenou o růst, k2 g, jak je popsáno dále (viz oddíl 7 tohoto dodatku).
Lead
[Rovnice A5.9]
Nickel
nebo, je-li Cw konstantní:
Zinc
[Rovnice A5.10]
Cadmium
Jestliže se blíží dosažení rovnovážného stavu (t → ∞), lze rovnici A5.10 zjednodušit (srov. (9) (10)) a získáme:
100 ng/l
[Rovnice A5.11]
Mercury
[Rovnice A5.12]
Silver
BCF × Cw se pak blíží koncentraci v rybách v rovnovážném stavu (Cf-SS).
FISH SPECIES RECOMMENDED FOR TESTING
[Poznámka: stejný postup lze použít při odhadování BMF v rovnovážném stavu v rámci zkoušky expozice v potravě.
Recommended species
V tomto případě se hodnota BCF ve shora uvedené rovnici nahradí BMF a hodnota Cw se nahradí Cfood, koncentrací v potravě.]
Recommended range of test temperature (°C)
Rovnice A5.10 může být přepsána na rovnici:
Recommended total length of test animal (cm) [2]
[Rovnice A5.13]
(Hamilton-Buchanan) Zebra-fish
[Rovnice A5.14]
(Rafinesque) Fathead minnow
Pomocí rovnice A5.14 je možné předpovědět dobu potřebnou pro dosažení určitého procenta rovnovážného stavu, když hodnota k2 je předem odhadnuta za použití rovnice A5.5 nebo rovnice A5.6.
(Linnaeus) Common carp
Je pravidlem, že statisticky optimální délka fáze příjmu pro získání statisticky přijatelných údajů (BCFK) je doba potřebná k tomu, aby křivka sestrojená vynesením logaritmu koncentrace zkoušené látky v rybách proti času v lineárním měřítku dosáhla alespoň 50 % rovnovážného stavu (tj. 0,69/k2), ale ne více než 95 % rovnovážného stavu (tj. 3,0/k2) (11).
(Temminck and Schlegel) Ricefish
V případě, že akumulace překročí hodnotu 95 % rovnovážného stavu, je proveditelný výpočet BCFSS.
(Peters) Guppy
Doba potřebná pro dosažení 80 % rovnovážného stavu činí (za použití rovnice A5.14):
(Rafinesque) Bluegill
[Rovnice A5.15]
(Walbaum) Rainbow trout
Podobně doba potřebná pro dosažení 95 % rovnovážného stavu je:
18 — 20
logk2 = 1,47 – 0,414 4
Various estuarine and marine species have less widely been used, for example:
k2 = 0,652 den– 1
Spot
Alternativně výraz:
Silverside
[Rovnice A5.18]
Shiner perch
může být eventuálně použit pro výpočet doby potřebné k dosažení efektivního rovnovážného stavu (teSS) (12).
English sole
V případě zkoušené látky s hodnotou log KOW = 4 to vede k výsledku:
Staghorn sculpin
PŘEDPOVĚĎ DÉLKY FÁZE VYLUČOVÁNÍ
Three-spined stickleback
Předpověď doby potřebné ke snížení obsahu určitého procenta původní koncentrace v těle lze rovněž získat z obecné rovnice vyjadřující příjem a vylučování (za předpokladu kinetiky prvního řádu, viz rovnice A5.9 (1) (13).
Sea bass
Ve fázi vylučování se má za to, že hodnota Cw (nebo Cfood v případě studie potravy) je nulová.
Bleak
Rovnice může pak být zjednodušena na rovnici:
The freshwater fish listed in the table above are easy to rear and/or are widely available throughout the year, whereas the availability of marine and estuarine species is partially confined to the respective countries.
[Rovnice A5.20]
They are capable of being bred and cultivated either in fish farms or in the laboratory, under disease- and parasite-controlled conditions, so that the test animal will be healthy and of known parentage.
kde Cf,0 je koncentrace na počátku fáze vylučování.
These fish are available in many parts of the world.
50 % vyloučení bude dosaženo v čase t50:
It should be noted that in the test itself weight is preferred as the measure for size and growth rate constant derivations.
Podobně 95 % vyloučení bude dosaženo v čase:
It is however recognised that length is a more practical measure if fish have to be selected by sight at the beginning of an experiment (i.e. from the stock population).
Je-li pro první fázi zvoleno dosažení 80 % příjmu (1,6/ k2) a pro fázi vylučování je zvoleno dosažení 95 % úbytku (3,0/ k2), pak je délka fáze vylučování přibližně dvojnásobkem délky fáze příjmu.
This length range is indicated in the Testing Methods for New Chemical Substances etc. based on the Japan's Chemical Substances Control Law (CSCL).
Nelze ztrácet ze zřetele, že odhady jsou založeny na předpokladu, že procesy příjmu a vylučování se budou řídit kinetikou prvního řádu.
Theoretical example of a sampling schedule for a full aqueous exposure bioconcentration test of a substance with log KOW = 4.
Nejedná-li se zjevně o kinetiku prvního řádu, nejsou tyto odhady platné.
Fish Sampling Sample time schedule
METODA POSTUPNÉHO STANOVENÍ: STANOVENÍ RYCHLOSTNÍ KONSTANTY VYLUČOVÁNÍ (ÚBYTKU) K2
No. of water samples [1]
U většiny údajů týkajících se biokoncentrace se předpokládá, že jsou „dostatečně“ dobře popsány jednoduchým dvoukompartmentovým nebo dvouparametrovým modelem, jak je patrné z přímky, která je aproximací bodů pro koncentrace v rybách (na logaritmické škále) během fáze vylučování.
No. of fish per sample [1] Minimal required frequency (days) [2] Additional sampling (days) [2] Uptake phase
Je třeba si povšimnout, že odchylky od přímky mohou znamenat složitější model vylučování, než je kinetika prvního řádu.
(3 [6]) 2 0,3 2
Pro analýzu typů vylučování, které se odchylují od kinetiky prvního řádu, mohou být použity grafické metody.
8 5,9
Směrnice regresní přímky je odhadovaná hodnota rychlostní konstanty vylučování k2 [3].
TOTAL
Z úseku lze snadno vypočítat průměrnou koncentraci v rybách na začátku fáze vylučování (C0,d; která se rovná průměrné koncentraci v rybách na konci fáze příjmu) (včetně rozpětí chyby) [3] Ve většině programů, které umožňují provádět lineární regresi, jsou uváděny také směrodatné chyby a interval spolehlivosti (CI) odhadů, např. v programu Microsoft Excel s použitím souboru nástrojů Data Analysis.
Theoretical example of sampling schedule for dietary bioaccumulation test of substance following 10 day uptake and 42 day depuration phases.
[Rovnice A5.21]
Sampling event
Pro výpočet hodnoty k2, jsou-li k dispozici pouze dva odběry vzorků (jako při minimalizovaném uspořádání), nahraďte průměrné koncentrace v této rovnici
Sample time schedule
[Rovnice A5.22]
No. food samples
kde ln (Cf1) a ln (Cf2) jsou přirozené logaritmy koncentrací v čase t1 resp. v čase t2, přičemž t2 a t1 jsou časy, kdy byly tyto dva vzorky odebrány, vzhledem k začátku vylučování [4].5.
No. fish per sample
METODA POSTUPNÉHO STANOVENÍ: STANOVENÍ RYCHLOSTNÍ KONSTANTY PŘÍJMU K1 (POUZE PRO METODU EXPOZICE VE VODNÍM PROSTŘEDÍ)
Day of phase
K nalezení hodnoty k1 založené na souboru po sobě jdoucích údajů o koncentracích ve fázi příjmu použijte počítačový program pro vyjádření tohoto modelu:
Additional fish samples?
[Rovnice A5.23]
Test Group
kde hodnota k2 je dána předchozím výpočtem, Cf(t) je koncentrace v rybách v čase t a Cw(t) koncentrace ve vodě v čase t.
Control Group
Pro výpočet hodnoty k1, jsou-li k dispozici pouze dva odběry vzorků (jako při minimalizovaném uspořádání), se použije tento vzorec:
Uptake phase
[Rovnice A5.24]
3 — test group
Jestliže se ukáže, že metodou postupného stanovení byl získán špatný odhad hodnoty k1, měla by se pro výpočet k1 a k2 použít metoda současného stanovení (viz následující oddíl 6).
3 — control group [7]
Výsledné směrnice by opět měly být při vizuální kontrole dobré shody porovnány s naměřenými údaji vynesenými do grafu.
Yes [10]
Je-li shoda stále špatná, může to znamenat, že se nejedná o kinetiku prvního řádu a měly by se použít jiné, složitější modely.
Depuration phase
METODA SOUČASNÉHO STANOVENÍ PRO VÝPOČET RYCHLOSTNÍCH KONSTANT PŘÍJMU A VYLUČOVÁNÍ (ÚBYTKU) (POUZE PRO METODU EXPOZICE VE VODNÍM PROSTŘEDÍ)
Note on phase and sampling timings: The uptake phase begins with the first feeding of spiked diet.
Pomocí počítačových programů lze nalézt hodnoty k1 a k2 založené na souboru po sobě jdoucích údajů o koncentracích a na modelu:
An experimental day runs from one feeding until shortly before the next, 24 hours later.
[Rovnice A5.25]
The first sampling event (1 in the table) should be taken shortly before the first feeding (e.g. one hour).
[Rovnice A5.26]
Sampling during a study should ideally be carried out shortly before the following day's feeding (i.e. about 23 hours after the sample day's feeding).
tc čas na konci fáze příjmu.
The uptake phase ends shortly before the first feeding with unspiked diet, when the depuration phase begins (test group fish are likely to be still digesting spiked feed in the intervening 24 hours after the last spiked diet feeding).
Tímto postupem se přímo získají směrodatné chyby pro odhady hodnot k1 a k12.
This means that the end of uptake sample should be taken shortly before the first feeding with unspiked diet and the first depuration phase sample should be taken about 23 hours after the first feeding with unspiked feed.
Jestliže se ukáže, že touto metodou byl získán špatný odhad hodnoty k1, měl by se pro výpočet k1 a k2 použít postup současného stanovení.
Values in brackets are numbers of samples (water, fish) to be taken if additional sampling is carried out.
Proložený model by opět měl být vizuální kontrolou dobré shody porovnán s naměřenými údaji vynesenými do grafu a výsledné odhady parametrů k1 a k k2 a výsledný BCF a jejich směrodatné chyby a/nebo intervaly nejistoty by měly být porovnány z hlediska různých druhů shody.
Pre-test estimate of k2 for log KOW of 4,0 is 0,652 days– 1.
Je-li shoda malá, může to znamenat, že se nejedná o kinetiku prvního řádu a měly by se použít jiné, složitější modely.
The total duration of the experiment is set to 3 × tSS = 3 × 4,6 days, i.e. 14 days.
V tomto oddíle se popisuje standardní postup úpravy o růst ryb během zkoušky (tzv. „ředění růstem“), která je platná pouze tehdy, jedná-li se o kinetiku prvního řádu.
For the estimation of tSS refer to Appendix 5.
Stejný postup se provádí zvlášť pro údaje z fáze příjmu a z fáze vylučování.
Sample water after a minimum of 3 “chamber-volumes” has been delivered.
Běžnými statistickými postupy se pomocí metody nejmenších čtverců vypočítá lineární závislost ln (hmotnost ryb) na čase (den)a ln (1/hmotnost) na čase (den) pro každou skupinu (exponované a kontrolní skupiny a jednotlivé údaje, nikoli denní střední hodnoty) za celou dobu studie a za fáze příjmu a vylučování.
These fish are sampled from the stock population.
[Rovnice A5.29]
If greater precision or metabolism studies are necessary that require more fish, these should be sampled particularly at the end of the uptake and depuration phases (cf. paragraph 40).
koncentrace v rybách s normalizovanými lipidy (mg/kg živé hmotnosti)
At least 3 additional fish may be required for lipid content analysis if it is not possible to use the same fish sampled for substance concentrations at the start of the test, the end of the uptake phase and the end of the depuration phase.
frakce lipidů (na základě živé hmotnosti)
Note it should be possible in many cases to use the 3 control fish alone (cf. paragraph 56).
koncentrace zkoušené látky v rybách (mg/kg živé hmotnosti)
3 samples of feed from both control and test groups analysed for test substance concentrations and for lipid content.
Pokud analýza lipidů nebyla provedena u všech ryb ve vzorku, použije se k normalizaci BCF střední hodnota obsahu lipidů.
Fish are sampled from the stock population as near to the start of the study as possible; at least 3 fish from the stock population at test start should be sampled for lipid content.
Pro úpravu BCF v rovnovážném stavu by měla být použita střední hodnota zaznamenaná na konci fáze příjmu ve zkušební skupině.
(Optional) sampling early in the uptake phase provides data to calculate dietary assimilation of test substance that can be compared with the assimilation efficiency calculated from the depuration phase data.
Pokud jde o normalizaci kinetického BCF, existují některé případy, kdy se vyžaduje jiný postup, například pokud se obsah lipidů během fáze příjmu nebo vylučování zřetelně změnil.
5 extra fish may be sampled for tissue-specific analysis.
Každopádně by se však mělo rutinně používat množství potravy, které minimalizuje dramatické změny obsahu lipidů.
Note it should be possible in many cases to use the 3 control fish alone (cf. paragraphs 56 and 153).
[Rovnice A5.30]
GENERAL CALCULATIONS
(kinetický BCF s normalizovanými lipidy (l/kg)
Introduction
kinetický BCF (l/kg)
Prediction of the duration of the uptake phase
Kapitola C.20 této přílohy, Zkouška toxicity pro reprodukci Daphnia magna.
Prediction of the duration of the depuration phase
, Influence of partition coefficient of lipophilic compounds on bioconcentration kinetics with fish.
Sequential method: determination of depuration (loss) rate constant k2
Wat.
Sequential method: determination of uptake rate constant k1 (aqueous exposure method only)
22: 701-707.
Growth dilution correction for kinetic BCF and BMF
Jako u každého empirického vztahu i zde by se mělo ověřit, zda zkoušená látka spadá do oblasti použitelnosti daného vztahu.
Lipid normalisation to 5 % lipid content (aqueous exposure method only)
Hmotnost ryb na konci fáze příjmu lze odhadnout z údajů v dřívějších studiích nebo na základě znalosti pravděpodobného růstu daného zkušebního druhu z typické hmotnosti při zahájení zkoušky během typické délky fáze příjmu (např. 28 dnů).
The general fish aquatic bioaccumulation model can be described in terms of uptake and loss processes, ignoring uptake with food.
Ve většině programů, které umožňují provádět lineární regresi, jsou uváděny také směrodatné chyby a interval spolehlivosti (CI) odhadů, např. v programu Microsoft Excel s použitím souboru nástrojů Data Analysis.
The differential equation (dCf/dt) describing the rate of change in fish concentration (mg·kg– 1·day– 1) is given by (1):
Na rozdíl od metody lineární regrese se pomocí tohoto vzorce nezíská směrodatná chyba hodnoty k2.
[Equation A5.1]
Na rozdíl od postupu linearizace se pomocí této metody obvykle nezíská směrodatná chyba nebo interval spolehlivosti odhadované hodnoty k1.
Where
Je třeba si uvědomit, že nejistota při odhadu hodnoty k2 není v bioakumulačním modelu používána správně, je-li tento model při stanovení k1 v rámci metody postupného stanovení v podstatě považován za konstantní.
First order rate constant for uptake into fish (l·kg– 1·day– 1).
Výsledná nejistota BCF při uplatnění metod současného a postupného stanovení bude proto různá.
First order rate constant for depuration from fish (day– 1).
Dodatek 6
First order rate constant for fish growth (‘growth dilution’) (day– 1)
ODDÍL ROVNIC PRO ZKOUŠKU EXPOZICE VE VODNÍM PROSTŘEDÍ: MINIMALIZOVANÉ USPOŘÁDÁNÍ ZKOUŠKY
First order rate constant for metabolic transformation (day– 1)
Je-li měření koncentrace látky v tkáních (Cf1) prováděno v době, kdy expozice končí (t1), a koncentrace v tkáni (Cf2) se změří znovu po uplynutí doby (t2), lze odhadnout rychlostní konstantu vylučování (k2) pomocí rovnice A5.22 z dodatku 5.
First order rate constant for faecal egestion (day– 1)
Hodnota BCFSS při minimalizovaném uspořádání je rovna BCF vypočtenému na konci fáze příjmu za předpokladu, že bylo dosaženo rovnovážného stavu.
It should be noted that the ln-transformation of the water concentration is suitable when exponential decay between renewal periods is expected, e.g. in a semi-static test design.
To však lze pouze předpokládat, neboť počet odběrů vzorků není dostatečný, aby bylo možno rovnost prokázat.
In a flow through system, ln-transformation of exposure concentrations may not be needed.
[Rovnice A6.2]
If TWA water concentrations are derived, they should be reported and used in subsequent calculations.
koncentrace v rybách v předpokládaném rovnovážném stavu na konci fáze příjmu (mg/kg živé hmotnosti)
In a standard fish BCF test uptake and depuration can be described in terms of two first order kinetic processes.
koncentrace ve vodě v předpokládaném rovnovážném stavu na konci fáze příjmu (mg/l).
Rate of uptake = k1 × Cw
Dodatek 7
[Equation A5.2]
ODDÍL ROVNIC PRO ZKOUŠKU EXPOZICE V POTRAVĚ
Overall loss rate = (k2 + kg + km + ke) × Cf
Příklad poměru složek ve vhodné rybí komerční potravě
[Equation A5.3]
Příklad způsobu obohacování potravy
At steady-state, assuming growth and metabolism are negligible (i.e. the values for kg and km cannot be distinguished from zero), the rate of uptake equals the rate of depuration, and so combining Equation A5.2 and Equation A5.3 gives the following relationship:
Výpočet účinnosti asimilace a obohacovacího faktoru
[Equation A5.4]
Úprava o lipidy
Concentration in fish at steady-state (mg kg– 1 wet weight).
Hodnocení rozdílů mezi naměřenou koncentrací v čase nula (C0,m) a odvozenou koncentrací v čase nula (C0,d)
Concentration in water at steady-state (mg l– 1).
Pokyny pro velmi rychle se vylučující zkoušené látky
The ratio of k1/k2 is known as the kinetic BCF (BCFK) and should be equal to the steady-state BCF (BCFSS) obtained from the ratio of the steady-state concentration in fish to that in water, but deviations may occur if steady-state was uncertain or if corrections for growth have been applied to the kinetic BCF.
PŘÍKLAD POMĚRU SLOŽEK VE VHODNÉ KOMERČNÍ RYBÍ POTRAVĚ
However, as k1 and k2 are constants, steady-state does not need to be reached to derive a BCFK.
Hlavní složka
Based on these first order equations, this Appendix 5 includes the general calculations necessary for both aqueous and dietary exposure bioaccumulation methods.
rybí moučka
However, sections 5, 6 and 8 are only relevant for the aqueous exposure method but are included here as they are “general” techniques.
hrubý protein (dusíkaté látky)
The sequential (sections 4 and 5) and simultaneous (section 6) methods allow the calculation of uptake and depuration constants which are used to derive kinetic BCFs.
hrubý tuk
The sequential method for determining k2 (section 4) is important for the dietary method as it is needed to calculate both assimilation efficiency and BMF.
hrubá vláknina
Appendix 7 details the calculations that are specific to the dietary method.
Vlhkost
PREDICTION OF THE DURATION OF THE UPTAKE PHASE
Popel
Before performing the test, an estimate of k2 and hence some percentage of the time needed to reach steady-state may be obtained from empirical relationships between k2 and the n-octanol/water partition coefficient (KOW) or k1 and BCF.
PŘÍKLADY ZPŮSOBŮ OBOHACOVÁNÍ POTRAVY
It should be realised, however, that the equations in this section only apply when uptake and depuration follow first-order kinetics.
Všeobecně
If this is clearly not the case it is advised to seek advice from a biostatistician and/or pharmacokineticist, if predictions of the uptake phase are desirable.
Potrava pro kontrolní skupinu by se měla připravovat přesně stejným způsobem jako obohacená potrava, ale bez zkoušené látky.
An estimate of k2 (day– 1) may be obtained by several methods.
Během zkoušky potravy by se měly odebrat k analýze tři vzorky potravy v den 0 a na konci fáze příjmu za účelem stanovení obsahu zkoušené látky v potravě.
[Equation A5.6]
Příprava rybí potravy s kapalnou zkoušenou látkou (v čistém stavu)
Where k1 = 520 × W– 0,32 (for substances with a log KOW > 3)
Stanoví se cílová, nominální zkušební koncentrace v exponované rybí potravě, např. 500 μg zkoušené látky/g potravy.
(r2=0,85)[(4); Equation A5.7]
Přiměřené množství (podle molární hmotnosti nebo podle specifické radioaktivity) čisté chemické látky se přidá do známé hmotnosti rybí potravy ve skleněné nádobě nebo v baňce rotační odparky.
AndBCF
Hmotnost rybí potravy by měla být dostatečná s ohledem na délku fáze příjmu (přičemž se vezme v úvahu potřeba zvýšit množství při každém krmení v důsledku růstu ryb).
(r2=0,90)[(5); Equation A5.8]
Rybí krmivo/zkoušená látka by se měly přes noc promísit pomalým převracením (např. pomocí RRM nebo rotací, použije-li se baňka rotační odparky).
W = mean treated fish weight (grams wet weight) at the end of uptake/start of depuration [2]
Obohacená potrava by se až do použití měla uchovávat za podmínek, kdy zůstane zachována stabilita zkoušené látky v krmném mixu (např. v chladničce).
For other related relationships see (6).
Příprava rybí potravy s kukuřičným olejem nebo s rybím tukem jako vehikulem
It may be advantageous to employ more complicated models in the estimation of k2 if, for example, it is likely that significant metabolism may occur (7) (8).
Pevné zkoušené látky by se měly rozmělnit v hmoždíři na jemný prášek.
However as the complexity of the model increases, greater care should be taken with the interpretation of the predictions.
Dávkovaný olej se kvantitativně přenese do rotační odparky vhodné velikosti.
The time to reach a certain percentage of steady-state may be obtained, by applying the k2-estimate, from the general kinetic equation describing uptake and depuration (first-order kinetics), assuming growth and metabolism is negligible.
Baňka použitá pro přípravu dávkovaného oleje by se měla propláchnout dvěma malými díly oleje a ty se přidají do baňky rotační odparky, aby se zajistilo, že bude přenesena veškerá rozpuštěná zkoušená látka.
If substantial growth occurs during the study, the estimations described below will not be reliable.
Aby se zajistilo úplné rozpuštění/disperze v oleji (nebo pokud se ve studii používá více než jedna zkoušená látka), přidá se mikromíchačka, baňka se uzavře zátkou a směs se nechá přes noc rychle míchat.
In such cases, it is better to use the growth corrected k2g as described later (see Section 7 of this Appendix):
Obohacená potrava se poté vhodně uskladní (např. v chladničce), aby se zajistila stabilita zkoušené látky v potravě až do použití.
or, if Cw is constant: