natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Stanovení mrtvého času t0
Therefore, stationary phases should have a minimal percentage of polar groups (16).
Mrtvý čas t0 je možné měřit použitím nezadržovaných organických látek (např. thiomočovina nebo formamid).
Commercial microparticulate reverse-phase packing or ready-packed columns can be used.
Přesnější mrtvý čas lze získat ze změřených retenčních časů nebo užitím souboru přibližně sedmi členů homologické řady (např. n-alkylmethylketonů) (17).
A guard column may be positioned between the injection system and the analytical column.
Retenční časy tR (nC + 1) se vynesou jako funkce tR (nC), kde nC je počet atomů uhlíku.
Mobile phase
Tak se získá přímka tR (nC + 1) = A tR (nC) + (1 – A)t0, kde A = k(nC + 1)/k(nC) je konstantní.
HPLC-grade methanol and distilled or de-ionised water are used to prepare the eluting solvent, which is degassed before use.
Mrtvý čas t0 se získá z úseku (1 – A)t0 a směrnice A.
Isocratic elution should be employed.
Regresní rovnice
Methanol/water ratios with minimum water content of 25 % should be used.
Dalším krokem je sestrojení korelační závislosti hodnot log k na log P pro vhodné referenční látky s hodnotami log P blízkými hodnotám očekávaným pro zkoušenou chemickou látku.
Typically a 3:1 (v/v) methanol-water mixture is satisfactory for eluting substances with a log P of 6 within an hour, at a flow rate of 1 ml/min.
V praxi se současně nastříkne 6 až 10 referenčních látek.
For substances with a log P above 6 it may be necessary to shorten the elution time (and those of the reference substances) by decreasing the polarity of the mobile phase or the column length.
Retenční časy se stanoví nejlépe pomocí zapisovacího integrátoru napojeného na detekční systém.
The test substance and the reference substances must be soluble in the mobile phase in sufficient concentration to allow their detection.
Odpovídající logaritmy kapacitních faktorů log k se vynesou jako funkce log P.
Additives may be used with the methanol-water mixture in exceptional cases only, since they will change the properties of the column.
Regresní rovnice se stanoví v pravidelných intervalech, alespoň jednou denně, aby bylo možno zohlednit případné změny činnosti kolony.
In these cases it must be confirmed that the retention time of the test and reference substances are not influenced.
STANOVENÍ POW ZKOUŠENÉ LÁTKY
If methanol-water is not appropriate, other organic solvent-water mixtures can be used, e.g. ethanol-water, acetonitrile-water or isopropyl alcohol (2-propanol)-water.
Zkoušená chemická látka se nastříkne v nejmenších detekovatelných množstvích.
The pH of the eluent is critical for ionisable substances.
Retenční čas se stanovuje zdvojeným měřením.
It should be within the operating pH range of the column, usually between 2 and 8.
Rozdělovací koeficient zkoušené látky se získá interpolací vypočítaného kapacitního faktoru na kalibračním grafu.
Buffering is recommended.
U velmi nízkých a velmi vysokých rozdělovacích koeficientů je nutná extrapolace.
Care must be taken to avoid salt precipitation and column deterioration which occur with some organic phase/buffer mixtures.
Zejména v těchto případech je třeba věnovat pozornost intervalům spolehlivosti regresní přímky.
HPLC measurements with silica-based stationary phases above pH 8 are not normally advisable since the use of an alkaline mobile phase may cause rapid deterioration in the performance of the column.
Jestliže je retenční čas vzorku mimo rozsah retenčních časů stanovených pro standardy, je třeba uvést mezní hodnotu.
Solutes
ÚDAJE A JEJICH PŘEDKLÁDÁNÍ
The test and reference substances must be sufficiently pure in order to assign the peaks in the chromatograms to the respective substances.
Závěrečná zpráva
Substances to be used for test or calibration purposes are dissolved in the mobile phase if possible.
V závěrečné zprávě musí být obsaženy následující údaje:
If a solvent other than the mobile phase is used to dissolve the test and reference substances, the mobile phase should be used for the final dilution prior to injection.
předběžný odhad rozdělovacího koeficientu, odhadnuté hodnoty a použitá metoda, jsou-li stanoveny;
Test conditions
byla-li použita výpočtová metoda, její úplný popis, včetně identifikace databáze a podrobné informace o výběru fragmentů,
The temperature during the measurement should not vary by more than ± 1 °C.
zkoušené a referenční látky:
Determination of dead time to
čistota, strukturní vzorec a číslo CAS,
The dead time t0 can be measured by using unretained organic substances (e.g. thiourea or formamide).
popis zařízení a pracovních podmínek:
A more precise dead time can be derived from the retention times measured or a set of approximately seven members of a homologous series (e.g. n-alkyl methyl ketones) (17).
analytická kolona, ochranná předkolona,
The retention times tR (nC + 1) are plotted against tR (nC), where nC is the number of carbon atoms.
mobilní fáze, detekční systém, teplotní rozsah, pH,
A straight line, tR (nC + 1) = A tR (nC) + (1 – A)t0, is obtained, where A, representing k(nC + 1)/k(nC), is constant.
eluční profily (chromatogramy),
The dead time t0 is obtained from the intercept (1 – A)t0 and the slope A.
mrtvý čas a metoda jeho měření,
Regression Equation
retenční data a hodnoty log Pow z literatury pro referenční látky použité ke kalibraci,
The next step is to plot a correlation log k versus log P for appropriate reference substances with log P values near the value expected for the test substance.
charakteristiky proložené regresní přímky (log k versus log Pow) a korelační koeficient přímky, včetně intervalů spolehlivosti,
In practice, from 6 to 10 reference substances are injected simultaneously.
průměrné retenční údaje a interpolovaná hodnota log Pow pro zkoušenou látku,
The retention times are determined, preferably on a recording integrator linked to the detection system.
v případě směsi:
The corresponding logarithms of the capacity factors, log k, are plotted as a function of log P. The regression equation is performed at regular intervals, at least once daily, so that account can be taken of possible changes in column performance.
chromatogram elučního profilu s uvedenými hraničními hodnotami,
DETERMINATION OF THE POW OF THE TEST SUBSTANCE
poměr hodnot log Pow k procentuálnímu podílu plochy píku log Pow,
The test substance is injected in the smallest detectable quantities.
výpočet použitím regresní přímky,
The retention time is determined in duplicate.
popřípadě vypočítané vážené průměrné hodnoty log Pow.
The partition coefficient of the test substance is obtained by interpolation of the calculated capacity factor on the calibration graph.
LITERATURA
For very low and very high partition coefficients extrapolation is necessary.
‚Harmonised Offshore Chemicals Notification Format (HOCFN) 1995‘, Oslo and Paris Conventions for the Prevention of Marine Pollution Programmes and Measures Committee (PRAM), Annex 10, Oviedo, 20–24 February 1995.
Especially in these cases attention must be given to the confidence limits of the regression line.
Dodatek
If the retention time of sample is outside the range of retention times obtained for the standards, a limit value should be quoted.
Metody výpočtu Pow
DATA AND REPORTING
Tento dodatek obsahuje krátký úvod k výpočtu Pow.
Test report
Další informace jsou uvedeny v učebnicích (1, 2).
The following must be included in the report:
Vypočítané hodnoty Pow se použijí pro:
if determined the preliminary estimate of the partition coefficient, the estimated values and the method used;
rozhodnutí, která experimentální metoda se použije:
and if a calculation method was used, its full description including identification of the data base and detailed information on the choice of fragments;
metoda Shake Flask (třepací lahev) pro log Pow mezi – 2 a 4; HPLC metoda pro log Pow mezi 0 a 6;
test and reference substances:
volbu podmínek použitých v HPLC (referenční látky, poměr metanol/voda);
purity, structural formula and CAS number,
prověření věrohodnosti hodnot získaných experimentálními metodami;
description of equipment and operating conditions:
zjištění odhadu v případě, kdy experimentální metody nelze použít.
analytical column, guard column,
Podstata výpočtových metod
mobile phase, means of detection, temperature range, pH;
Výpočtové metody navržené zde jsou založeny na teoretické fragmentaci molekuly na vhodné podstruktury, pro které jsou známy spolehlivé hodnoty přírůstků log Pow.
elution profiles (chromatograms);
Hodnota log Pow se vypočte jako součet hodnot pro příslušné fragmenty a korekčních členů pro intramolekulární interakce.
deadtime and how it was measured;
Seznamy fragmentových konstant a korekčních členů lze nalézt v literatuře (1, 2, 3, 4, 5, 6).
retention data and literature log Pow values for reference substances used in calibration;
Některé se pravidelně aktualizují (3).
details on fitted regression line (log k versus log Pow) and the correlation coefficient of the line including confidence intervals;
Spolehlivost vypočítaných hodnot
average retention data and interpolated log Pow value for the test substance;
Spolehlivost výpočtových metod obecně klesá s rostoucí složitostí studované chemické látky.
in case of a mixture:
V případě jednoduchých molekul s nízkou molekulovou hmotností a jednou nebo dvěma funkčními skupinami lze očekávat, že odchylky hodnot log Pow získaných různými fragmentačními metodami od naměřených hodnot budou v rozmezí od 0,1 do 0,3.
elution profile chromatogram with indicated cut-offs;
Rozpětí chyby bude záviset na spolehlivosti použitých fragmentových konstant, schopnosti zjistit intramolekulární interakce (např. vodíkové vazby) a správném použití korekčních členů.
log Pow values relative to area % of the log Pow peak;
π-metoda Fujity-Hansche
calculated weighted average log Pow values, when appropriate.
např.
Correlations between liquid chromatographic capacity ratio data on Lichrosorb RP-18 and partition coefficients in the octanol-water system.
π-metoda je primárně důležitá u aromatických látek. π-hodnoty pro velký počet substituentů lze nalézt v literatuře (4, 5).
J. Chromatography 247, 1.
Rekkerova metoda
15, 787.
Při použití Rekkerovy metody (8) se hodnota log Pow vypočítá podle vzorce:
Appendix
kde ai je číslo vyjadřující, kolikrát se daný fragment vyskytuje v molekule, a fi je přírůstek log Pow fragmentu.
POW calculation methods
Interakční členy je možné vyjádřit jako souhrnný násobek jediné konstanty Cm (tzv. ‚magické konstanty‘).
This appendix provides a short introduction to the calculation of Pow.
Fragmentové konstanty fi a Cm byly stanoveny ze seznamu 1054 experimentálních hodnot Pow pro 825 látek pomocí vícenásobné regresní analýzy (6, 8).
For further information the reader is referred to textbooks (1)(2).
Stanovení interakčních členů se provede podle stanovených pravidel (6, 8, 9).
Calculated values of Pow are used for:
Hansch-Leova metoda
deciding which experimental method to use:
Při použití Hansch-Leovy metody (4) se hodnota log Pow vypočítá podle vzorce:
Shake Flask method for log Pow between – 2 and 4 and HPLC method for log Pow between 0 and 6;
kde fi je fragmentová konstanta, Fj korekční člen (faktor), ai a bj odpovídající četnosti výskytu.
selecting conditions to be used in HPLC (reference substances, methanol/water ratio);
Seznamy atomových a skupinových fragmentových hodnot a korekčních členů Fj byly získány metodou pokusu a omylu z experimentálních hodnot Pow.
checking the plausibility of values obtained through experimental methods;
Korekční členy byly rozděleny do několika různých tříd (1, 4).
providing an estimate when experimental methods cannot be applied.
Byla vyvinuta sada programů, které berou v úvahu všechna pravidla a korekční členy (3).
Principle of calculation methods
KOMBINOVANÁ METODA
The calculation methods suggested here are based on the theoretical fragmentation of the molecule into suitable substructures for which reliable log Pow increments are known.
Výpočet log Pow složitých molekul lze značně zdokonalit, jestliže se molekula rozdělí do větších podstruktur, pro něž existují spolehlivé hodnoty log Pow pocházející buď z tabulek (3, 4), nebo z existujících měření.
The log Pow is obtained by summing the fragment values and the correction terms for intramolecular interactions.
Tyto fragmenty (např. heterocykly, antrachinon, azobenzen) lze poté kombinovat s Hanschovými π-hodnotami nebo s Rekkerovými či Leovými fragmentovými konstantami.
Lists of fragment constants and correction terms are available (1)(2)(3)(4)(5)(6).
Poznámky
Some are regularly updated (3).
Výpočetní metody lze použít pro částečně nebo úplně ionizované látky pouze tehdy, jsou-li zohledněny nezbytné korekční faktory.
Reliability of calculated values
Jestliže je možné předpokládat existenci intramolekulárních vodíkových vazeb, musí být přičteny odpovídající korekční členy (přibližně + 0,6 až + 1,0 log Pow) (1).
In general, the reliability of calculation methods decreases as the complexity of the substance under study increases.
Přítomnost takových vazeb mohou naznačit stereo modely nebo spektroskopické údaje.
In the case of simple molecules of low molecular weight and with one or two functional groups, a deviation of 0,1 to 0,3 log Pow units between the results of the different fragmentation methods and the measured values can be expected.
Může-li existovat několik tautomerních forem, měla by být jako základ pro výpočet použita nejpravděpodobnější forma.
The margin of error will depend on the reliability of the fragment constants used, the ability to recognise intramolecular interactions (e.g. hydrogen bonds) and the correct use of correction terms.
Pečlivě by měly být sledovány přepracované seznamy fragmentových konstant.
In the case of ionising substances the charge and degree of ionisation must be taken into consideration (10).
LITERATURA O VÝPOČTOVÝCH METODÁCH
Fujita-Hansch π-method
Kapitola C.3 se nahrazuje tímto:
The hydrophobic substituent constant, π, originally introduced by Fujita et al.
ZKOUŠKA INHIBICE RŮSTU SLADKOVODNÍCH ŘAS A SINIC
is defined as:
Tato zkušební metoda je rovnocenná Pokynu OECD pro zkoušení 201 (2006, příloha opravena v roce 2011).
where PhX is an aromatic derivative and PhH the parent substance.
Bylo potřebné rozšířit zkušební methodu tak, aby zahrnovala další druhy, a aktualizovat ji, aby splňovala požadavky na posouzení nebezpečnosti a klasifikaci chemických látek.
e.g.
Tato přepracovaná verze byla dokončena na základě rozsáhlých praktických zkušeností, vědeckého pokroku na poli studia toxicity řas a širokého uplatňování příslušných právních předpisů, k němuž došlo od přijetí původního znění.
The π-method is primarily of interest for aromatic substances. π-values for a large number of substituents are available (4)(5).
Použité definice jsou uvedeny v dodatku 1.
Rekker method
PODSTATA ZKOUŠKY
Using the Rekker method (8) the log Pow value is calculated as:
Účelem této zkoušky je stanovit účinek látky na růst sladkovodních mikrořas a/nebo sinic (Cyanophyta).
where ai is the number of times a given fragment occurs in the molecule and fi is the log Pow increment of the fragment.
Exponenciálně rostoucí zkušební organismy jsou vystaveny zkoušené chemické látce v sérii kultur obvykle po dobu 72 hodin.
The interaction terms can be expressed as an integral multiple of one single constant Cm (so-called “magic constant”).
Navzdory relativně krátké době trvání zkoušky lze posoudit účinky na několik generací.
The fragment constants fi and Cm have been determined from a list of 1054 experimental Pow values of 825 substances using multiple regression analysis (6)(8).
Systémovou odezvou je snížení růstu v řadě kultur řas (zkušebních jednotek) vystavených různým koncentracím zkoušené látky.
The determination of the interaction terms is carried out according to set rules (6)(8)(9).
Odezva se vyhodnocuje jako funkce expoziční koncentrace v porovnání s průměrným růstem neexponovaných kontrolních kultur použitých k opakování.
Hansch-Leo method
Pro úplné vyjádření odezvy systému na toxické účinky (optimální citlivost) se kultury ponechají exponenciálně růst bez omezení za podmínek dostatečné výživy a nepřetržitého osvětlení po dostatečnou dobu, aby bylo možné změřit snížení specifické růstové rychlosti.
Using the Hansch and Leo method (4), the log Pow value is calculated as:
Růst a inhibice (zpomalení) růstu se kvantifikují měřeními biomasy řas jako funkce času.
where fi is a fragment constant, Fj a correction term (factor), ai and bj the corresponding frequency of occurence.
Biomasa řas se definuje jako hmotnost sušiny na objem, např. mg řas/litr zkušebního roztoku.
Lists of atomic and group fragmental values and of correction terms Fj were derived by trial and error from experimental Pow values.
Ovšem hmotnost sušiny se měří obtížně, proto se používají náhradní parametry.
The correction terms have been divided into several different classes (1)(4).
Z těchto náhrad se nejčastěji používají počty buněk.
Sofware packages have been developed to take into account all the rules and correction terms (3).
Mezi další náhradní parametry patří buněčný objem, fluorescence, optická hustota atd. Je třeba znát přepočítávací faktor mezi naměřeným náhradním parametrem a biomasou.
COMBINED METHOD
Cílovým ukazatelem zkoušky je inhibice růstu vyjádřená jako logaritmické zvýšení biomasy (průměrná specifická růstová rychlost) během expoziční doby.
The calculation of log Pow of complex molecules can be considerably improved, if the molecule is dissected into larger substructures for which reliable log Pow values are available, either from tables (3)(4) or by existing measurements.
Z průměrných specifických růstových rychlostí zaznamenaných v řadě zkušebních roztoků se stanoví koncentrace způsobující stanovenou x % inhibici růstové rychlosti (např. 50 %) a vyjádří se jako ErCx (např. ErC50).
Such fragments (e.g. heterocycles, anthraquinone, azobenzene) can then be combined with the Hansch- π values or with Rekker or Leo fragment constants.
Další proměnnou odezvy použitou v této zkušební metodě je výtěžek, který může být nezbytný ke splnění specifických právních požadavků v některých zemích.
Remarks:
Je definován jako biomasa na konci expoziční doby minus biomasa na počátku expoziční doby.
The calculation methods are only applicable to partly or fully ionised substances when the necessary correction factors are taken into account.
Z výtěžku zaznamenaného v řadě zkušebních roztoků se vypočítá koncentrace způsobující stanovenou x % inhibici výtěžku (např. 50 %) a vyjádří se jako EyCx (např. EyC50).
If the existence of intramolecular hydrogen bonds can be assumed, the corresponding correction terms (approx. + 0,6 to + 1,0 log Pow units) must be added (1).
Kromě toho se může statisticky určit nejnižší koncentrace s pozorovaným účinkem (LOEC) a koncentrace bez pozorovaných účinků (NOEC).
Indications on the presence of such bonds can be obtained from stereo models or spectroscopic data.
INFORMACE O ZKOUŠENÉ LÁTCE
If several tautomeric forms are possible, the most likely form should be used as the basis of the calculation.
Informace o zkoušené chemické látce, které mohou být užitečné pro účely stanovení podmínek zkoušky, jsou strukturní vzorec, čistota, stálost na světle, stálost za podmínek zkoušky, vlastnosti světelné absorpce, pKa a výsledky studií transformace, včetně biologické rozložitelnosti ve vodě.
The revisions of lists of fragment constants should be followed carefully.
Měly by být známy rozpustnost zkoušené chemické látky ve vodě, její rozdělovací koeficient oktanol/voda (Pow) a tlak jejích par; měla by být k dispozici validovaná metoda kvantitativního stanovení látky ve zkušebních roztocích, a to s doloženou výtěžností a mezí detekce.
LITERATURE ON CALCULATION METHODS
VALIDITA ZKOUŠKY
Chapter C.3 is replaced by the following:
Má-li být zkouška platná, musí být splněna tato kritéria platnosti:
FRESHWATER ALGA AND CYANOBACTERIA, GROWTH INHIBITION TEST
Biomasa by se měla v kontrolních kulturách během 72 hodin trvání zkoušky zvýšit exponenciálně, a to nejméně na šestnáctinásobek.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 201 (2006, annex corrected in 2011).
To odpovídá specifické růstové rychlosti 0,92.den– 1.
The need to extend the test method to include additional species and update it to meet the requirements for hazard assessment and classification of chemicals has been identified.
U nejčastěji používaných druhů je růstová rychlost obvykle podstatně vyšší (viz dodatek 2).
This revision has been completed on the basis of extensive practical experience, scientific progress in the field of algal toxicity studies, and extensive regulatory use, which has occurred since the original adoption.
Může se stát, že se toto kritérium nesplní, pokud se používají druhy, které rostou pomaleji než druhy uvedené v seznamu v dodatku 2.
Definitions used are given in Appendix 1.
V takovém případě je třeba prodloužit dobu zkoušky, aby bylo dosaženo nejméně 16násobného nárůstu kontrolních kultur, přičemž růst musí být v průběhu zkoušky exponenciální.
PRINCIPLE OF THE TEST
Trvání zkoušky lze zkrátit až na minimální dobu 48 hodin, aby se během zkoušky udržel neomezený exponenciální růst, pokud bude dosaženo minimálního násobícího faktoru 16.
The purpose of this test is to determine the effects of a chemical on the growth of freshwater microalgae and/or cyanobacteria.
Střední variační koeficient pro specifické růstové rychlosti v jednotlivých obdobích (dny 0–1, 1–2 a 2–3 při 72hodinových zkouškách) v kontrolních kulturách (viz dodatek 1 odstavec ‚variační koeficient‘) nesmí překročit 35 %.
Exponentially growing test organisms are exposed to the test chemical in batch cultures over a period of normally 72 hours.
Výpočet specifické růstové rychlosti v jednotlivých obdobích je uveden v odstavci 49.
In spite of the relatively brief test duration, effects over several generations can be assessed.
Toto kritérium platí pro střední hodnotu variačních koeficientů vypočítaných pro opakované kontrolní kultury.
The system response is the reduction of growth in a series of algal cultures (test units) exposed to various concentrations of a test chemical.
Variační koeficient průměrných specifických růstových rychlostí během celého zkušebního období u kontrolních kultur replik nesmí překročit 7 % u zkoušek s Pseudokirchneriella subcapitata a Desmodesmus subspicatus.
The response is evaluated as a function of the exposure concentration in comparison with the average growth of replicate, unexposed control cultures.
U jiných, méně často zkoušených druhů by hodnota neměla překročit 10 %.
For full expression of the system response to toxic effects (optimal sensitivity), the cultures are allowed unrestricted exponential growth under nutrient sufficient conditions and continuous light for a sufficient period of time to measure reduction of the specific growth rate.
REFERENČNÍ CHEMICKÁ LÁTKA
Growth and growth inhibition are quantified from measurements of the algal biomass as a function of time.
Jako prostředek kontroly zkušebního postupu lze zkoušet referenční látku (látky), například 3,5-dichlorfenol použitý v mezinárodní kroužkové zkoušce (1).
Algal biomass is defined as the dry weight per volume, e.g. mg algae/litre test solution.
Dvojchroman draselný lze rovněž použít jako referenční látku pro zelené řasy.
However, dry weight is difficult to measure and therefore surrogate parameters are used.
Je žádoucí zkoušet referenční látku nejméně dvakrát ročně.
Of these surrogates, cell counts are most often used.
POUŽITELNOST ZKOUŠKY
Other surrogate parameters include cell volume, fluorescence, optical density, etc.
Tato metoda se nejsnáze používá pro látky rozpustné ve vodě, které za podmínek zkoušky pravděpodobně ve vodě zůstanou.
A conversion factor between the measured surrogate parameter and biomass should be known.
Pro zkoušení látek, které jsou těkavé, silně adsorbují, jsou zbarvené, mají nízkou rozpustnost ve vodě nebo látek, které mohou nepříznivě ovlivňovat dostupnost živin či minerálů ve zkušebním médiu, mohou být potřebné určité úpravy popsaného postupu (např. uzavřený systém, klimatizace zkušebních nádob).
The test endpoint is inhibition of growth, expressed as the logarithmic increase in biomass (average specific growth rate) during the exposure period.