natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Pro kvantifikaci účinků souvisejících s chemickou látkou se růst ve zkušebních roztocích porovnává s růstem kontrolních rostlin a stanoví se koncentrace způsobující stanovenou x % inhibici růstu a vyjádří se jako ECx; „x“ může být jakákoli hodnota v závislosti na právních požadavcích, např. EC10, EC20 a EC50.
Significant features of the test medium (e.g. presence of undissolved material, growth of algae, fungi and bacteria in the test vessel) should also be noted.
Měla by být stanovována průměrná specifická růstová rychlost (odhadnutá na základě posouzení délky výhonků, čerstvé hmotnosti výhonků a hmotnosti sušiny výhonků) a výtěžek (odhadnutý na základě nárůstu délky výhonků, čerstvé hmotnosti výhonků a hmotnosti sušiny výhonků) u neexponovaných a exponovaných rostlin.
In addition to determinations of main shoot length during the test, effects of the test chemical on three (or more) of the following measurement variables should be also assessed:
Na základě odhadů průměrných specifických růstových rychlostí a výtěžků se může, je-li to požadováno, statisticky určit nejnižší koncentrace s pozorovaným účinkem (LOEC) a koncentrace bez pozorovaných účinků (NOEC).
Total lateral branches length
Měla by být k dispozici analytická metoda s odpovídající citlivostí pro kvantifikaci chemických látek ve zkušebním médiu.
Total shoot length
Užitečnými informacemi o zkoušené chemické látce pro účely stanovení zkušebních podmínek mohou být strukturní vzorec, chemické složení v případě vícesložkových látek, UVCB, směsí či přípravků, čistota, rozpustnost ve vodě, stabilita ve vodě a na světle, kyselá disociační konstanta (pKa), rozdělovací koeficient oktanol/voda (Kow), Kd pro sedimenty (je-li k dispozici), tlak par a biologická rozložitelnost.
Total root length
Rozpustnost ve vodě a tlak par lze použít pro výpočet Henryho konstanty, která určí pravděpodobnost významných ztrát zkoušené chemické látky během doby zkoušky.
Fresh weight
Jsou-li pravděpodobné ztráty zkoušené chemické látky, měly by být kvantifikovány a následná opatření by měla být kvůli kontrole takových ztrát zdokumentována.
Dry weight
Jestliže nejsou informace o rozpustnosti a stabilitě zkoušené látky (látek) jisté, doporučuje se, aby byly tyto vlastnosti hodnoceny za podmínek zkoušky, tj. v růstovém médiu, při teplotě a režimu osvětlení, které mají být při zkoušce použity.
Number of whorls
Poznámka: Jestliže se zkoušejí peroxidující herbicidy závislé na světle, mělo by použité laboratorní osvětlení mít odpovídající zastoupení slunečního ultrafialového záření, které se vyskytuje v přírodním slunečním světle.
Note 1:
Hodnota pH by se měla měřit a ve zkušebním roztoku podle potřeby upravovat.
The observations made during the range-finding test could help in selecting relevant additional measurements among the six variables listed above.
Zvláště důležitá je kontrola pH zkušebního média, např. zkoušejí-li se kovy nebo chemické látky, které jsou hydrolyticky nestálé.
Note 2:
Další pokyny pro zkoušení chemických látek s fyzikálně-chemickými vlastnostmi, které činí jejich zkoušení obtížné, jsou uvedeny v pokynech OECD (11).
The determination of the fresh and dry weights (parameters iv and v) is highly desirable.
Aby byly výsledky platné, musí se střední celková délka výhonků a střední celková čerstvá hmotnost u kontrolních rostlin během expoziční fáze zkoušky přinejmenším zdvojnásobit.
Note 3:
Kontrolní rostliny navíc nesmí vykazovat žádné viditelné příznaky chlorózy a měly by být očividně prosté kontaminace jinými organismy, například řasami a/nebo vrstvou bakterií na rostlinách, na povrchu sedimentu a ve zkušebním médiu.
Due to the fact that sucrose and light (exposure of roots to light during the test) may have an influence on auxin (plant growth hormone) transport carriers, and that some chemicals may have an auxin-type mode of action, the inclusion of root endpoints (parameter iii) is questionable.
Střední variační koeficient pro výtěžek založený na měřeních čerstvé hmotnosti výhonků (tj. od zahájení zkoušky do jejího ukončení) v kontrolních kulturách se mezi opakováními neliší o více než 35 %.
Note 4:
Aby se ověřila funkčnost zkušebního postupu v průběhu času, měla by se referenční látka (látky), například 3,5-dichlorfenol použitý v mezilaboratorní porovnávací zkoušce (9), pravidelně zkoušet.
The ring test results show high coefficients of variation (> 60 %) for the total lateral branch length (parameter i).
Údaje z mezilaboratorní porovnávací zkoušky ukazují, že se střední hodnoty EC50 u 3,5 DCP pro různé proměnné odezvy pohybovaly mezi 4,7 a 6,1 mg/l (podrobnosti o předpokládaných intervalech spolehlivosti pro každou z těchto hodnot – viz zpráva o mezilaboratorní porovnávací zkoušce).
Total lateral branch length is in any case encompassed within the total shoot length measurement (parameter ii) which shows more acceptable coefficients of variation of < 30 %.
Doporučuje se zkoušet referenční chemickou látku nejméně dvakrát ročně nebo – pokud se zkoušení provádí méně často – souběžně s hlavními zkouškami toxicity.
Note 5:
Návod ohledně očekávaných hodnotu EC50 pro 3,5-DCP je uveden ve statistické zprávě o mezinárodní mezilaboratorní porovnávací zkoušce (9).
Resulting from the above considerations, the recommended main measurement endpoints are: total shoot length, fresh weight and dry weight (parameters ii, iv and v); parameter vi — number of whorls — is left to the experimenter's judgment.
Zkušební zařízení
Main shoot length and number of whorls have an advantage, in that they can be determined for each test and control vessel at the start, during, and at the end of the test by photography and image analysis, although a (sterile) ruler can also be used.
Zkouška by se měla provádět za řízených podmínek okolního prostředí, tj. v růstové komoře, růstové místnosti nebo laboratoři s regulovatelnou délkou dne, osvětlením a teplotou (vid oddíl Zkušební podmínky, odstavce 56–58).
Total lateral branches length, total root length (as a sum of all lateral branches or roots) and total shoot length (as a sum of main shoot length and total lateral branches length) can be measured with a ruler at the end of exposure.
Zásobní kultury by měly být uchovávány odděleně od zkušebních nádob.
The fresh and/or dry weight should be determined at the start of the test from a sample of the pre-culture representative of what is used to begin the test, and at the end of the test with the plant material from each test and control vessel.
Studie by měla být prováděna s použitím skleněných zkušebních nádob, např. akvárií nebo kádinek; obvykle se používají kádinky o objemu 2 l (přibližně 24 cm vysoké a o průměru 11 cm).
Total lateral branches length, total shoot length, total root length, fresh weight, dry weight and number of whorls may be determined as follows:
Vhodné však mohou být i jiné (tj. větší) nádoby, pokud hloubka vody je dostatečná, aby umožňovala neomezený růst a udržovala rostliny ponořené po celou dobu zkoušky.
The lateral branch length may be determined by measuring all lateral branches with a ruler at the end of exposure.
Plastové nebo skleněné květináče (o průměru přibližně 9 cm, výšce 8 cm a objemu 500 ml) mohou být použity jako nádrže pro nasazení rostlin do sedimentu.
The total lateral branches length is the sum of all lateral branches of each test and control vessel.
Alternativně lze použít skleněné kádinky a v některých případech se jim dává přednost (např. při zkoušení hydrofobních chemických látek nebo chemických látek s vysokým Kow).
The main shoot length may be determined by image analysis or using a ruler.
Volbu velikosti květináče/kádinky je třeba zvážit stejně jako volbu zkušebních nádob a uspořádání zkoušky, které bude upřednostněno (viz níže).
The total shoot length is the sum of the total lateral branches length and the main shoot length of each test and control vessel at the end of exposure.
Použije-li se uspořádání zkoušky A (jeden výhonek na květináč a tři květináče na nádobu), mohou být zapotřebí menší květináče nebo větší nádoby.
The root length may be determined by measuring all roots with a ruler at the end of exposure.
Použije-li se uspořádání zkoušky B (tři výhonky na květináč a jeden květináč na nádobu), měly by být přiměřené uvedené velikosti květináče a nádoby.
The total root length is the sum of all roots of each test and control vessel.
V každém případě by minimální hloubka vody nad povrchem sedimentu měla být 12 cm a poměr plochy povrchu sedimentu k objemu a plochy povrchu vody k objemu by se měl zaznamenat.
The fresh weight may be determined by weighing the test organisms at the end of exposure.
Obecné přístupy popsané v této zkušební metodě mohou být použity na zkoušení různých druhů vodních rostlin.
All plant material of each test and control vessel will be rinsed with distilled water, dabbed dry with cellulose paper.
Podmínky nastíněné v této zkušební metodě však byly uzpůsobeny pro zkoušení druhu stolístků Myriophyllum spicatum.
After this preparation the fresh weight will be determined by weighing.
Tento druh patří do čeledi dvouděložných rostlin, Haloragaceae.
The starting biomass (fresh weight) is determined on the basis of a sample of test organisms taken from the same batch used to inoculate the test vessels.
Myriophyllum spicatum (stolístek klasnatý) je zakořeněný druh rostoucí pod hladinou, který snáší nejrůznější podmínky a vyskytuje se jak ve stojatých, tak v tekoucích vodách.
After the preparations for the determination of the fresh weight the test organisms will be dried at 60 °C to a constant weight.
V obou případech by zdroj rostlin měl být zdokumentován a měla by být ověřena identita druhu.
If a static test design is used, the pH of each treatment should be measured at the beginning and at the end of the test.
Zásobní kultury by měly být udržovány za podmínek podobných zkušebním podmínkám, ačkoli ozářenost a teplota mohou být sníženy s cílem snížit četnost udržování kultury (např. pokud se na určité období neplánují žádné zkoušky s Myriophyllum).
The temperature of the medium in a surrogate vessel held under the same conditions in the growth chamber, incubator or room should be recorded at least daily (or continuously with a data logger).
Doporučuje se použít větší akvária a květináče, než jaké by byly použity ve zkouškách, aby se vytvořil prostor pro proliferaci.
During the test, the concentrations of the test chemical(s) are determined at appropriate intervals.
Složení sedimentu a vodních médií by mělo být stejné jako to, které by bylo použito pro zkoušky, ačkoli lze uplatnit alternativní metody fertilizace sedimentu (např. použití komerčních fertilizačních přípravků s pomalým uvolňováním).
In static tests, the minimum requirement is to determine the concentrations at the beginning and at the end of the test.
Zásobní rostliny by měly být očividně prosté kontaminace jakýmikoli jinými organismy včetně hlemýžďů, vláknitých řas, hub a hmyzu, např. vajíček nebo larev mola Paraponyx stratiotata a larev nebo dospělců nosatce Eubrychius velutus.
In semi-static tests where the concentrations of the test chemical(s) are not expected to remain within ± 20 % of the nominal concentration, it is necessary to analyse all freshly prepared test solutions and the same solutions at each renewal.
Ve všech případech se rostliny po přiměřenou dobu (např. > 2 týdny) před použitím ve zkoušce kultivují/aklimatizují za podmínek podobných podmínkám, které se použijí ve zkoušce, ale nemusí být nutně s nimi totožné.
Under some circumstances, e.g. when a preliminary test indicates that the test chemical has no toxic effects at concentrations up to 100 mg/l or up to its limit of solubility in the test medium or in case of a formulation up to its limit of dispersibility, a limit test involving a comparison of responses in a control group and one treatment group (100 mg/l or a concentration equal to the limit of solubility), may be undertaken.
Kvetoucí zásobní kultury by se ve zkoušce používat neměly, protože v době kvetení a po odkvětu rychlost vegetativního růstu obvykle klesá.
It is strongly recommended that this is supported by analysis of the exposure concentration.
Sedimenty
All previously described test conditions and validity criteria apply to a limit test, with the exception that the number of treatment replicates should be doubled.
Pro použití v této zkoušce se doporučuje následující, přísadami doplněný sediment založený na umělém sedimentu užitém v kapitole C.28 této přílohy (8).
Growth in the control and treatment group may be analysed using a statistical test to compare means, e.g. a Student's t-test.
20 % (sušiny) kaolinitického jílu (pokud možno s více než 30 % kaolinitu);
This test method describes two response variables.
75–76 % (sušiny) křemenného písku (měl by převažovat jemný písek s více než 50 % částic velikosti 50 až 200 μm);
Average specific growth rate
přidá se tekuté/vodné živné médium, tak aby konečná vsázka sedimentu obsahovala 200 mg chloridu amonného a 200 mg fosforečnanu sodného na kg suchého sedimentu a vlhkost konečné směsi byla v rozmezí 30 až 50 %;
This response variable is calculated on the basis of changes in the logarithms of main shoot length, and in addition, on the basis of changes in the logarithms of other measurement parameters, i.e. total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls over time (expressed per day) in the controls and each treatment group.
přidá se chemicky čistý uhličitan vápenatý (CaCO3) pro úpravu pH konečné směsi sedimentu na pH 7,0 ± 0,5.
Note: For the measurement parameter total lateral branches length and total root length a calculation of the average specific growth rate is not possible.
Rašelina, kaolinitický jíl a písek by měly pocházet ze známého zdroje a zdroj by měl být zdokumentován.
At the beginning of the test, the test organism has no lateral branches and no roots (based on the preparation from the pre-culture); starting from the value zero, the calculation of the average specific growth rate is not defined.
Je-li původ neznámý nebo vzbuzuje určité pochybnosti, měly by být jednotlivé složky kontrolovány z hlediska nepřítomnosti chemické kontaminace (např. těžké kovy, chlorované organické sloučeniny, organofosforové sloučeniny).
Yield
Suché složky sedimentu by se měly nejprve homogenně promísit a teprve potom se do sedimentu důkladně vmíchá vodný živný roztok.
This response variable is calculated on the basis of changes in main shoot length, and in addition, on the basis of changes in other measurement parameters — i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls, and other parameters if deemed useful — in the controls and in each treatment group until the end of the test.
Vlhký sediment by se měl připravit nejméně dva dny před použitím, aby se umožnilo důkladné prosáknutí rašeliny a zamezilo se vyplavení hydrofobních částic rašeliny na povrch, když je sediment překryt médiem; vlhký sediment může být před použitím skladován v temnu.
Toxicity estimates should be based on main shoot length and three additional measurement variables (i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls, see paragraph 37 and Notes 2, 4 and 5 to this paragraph), because some chemicals may affect other measurement variables much more than the main shoot length.
Pro provedení zkoušky se sediment přemístí do nádoby o vhodné velikosti, např.do květináče o průměru, který se vejde do skleněné nádoby (plocha povrchu sedimentu by měla pokrývat přibližně 70 % plochy povrchu nádoby nebo i více).
This effect would not be detected by calculating main shoot length only.
V případech, kdy má nádoba na dně otvory, kus filtračního papíru na dně nádoby pomůže udržet sediment v nádobě.
The average specific growth rate for a specific period is calculated as the logarithmic increase in the growth variables — main shoot length and three additional measurement variables (i.e. total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls) — using the formula below for each replicate of control and treatments:
Květináče se naplní sedimentem tak, že povrch sedimentu je zarovnaný s okrajem, pak se pokryje tenkou vrstvou (~ 2 až 3 mm) inertního materiálu, např. písku, jemného zahradnického štěrku (nebo rozdrceného korálu), aby se sediment udržel na místě.
average specific growth rate from time i to j
Pro kultivaci a zkoušení Myriophyllum spicatum se doporučuje Smartovo a Barkovo médium (12).
measurement variable in the test or control vessel at time i
Příprava tohoto média je popsána v dodatku 1.
measurement variable in the test or control vessel at time j
Pro optimální růst rostlin by pH médií (vodní fáze) na počátku zkoušky mělo být mezi 7,5 a 8,0.
t time period from i to j
Uspořádání experimentu
For each treatment group and control group, calculate a mean value for growth rate along with variance estimates.
Zkouška by měla zahrnovat nejméně 6 replik zkušebních nádob pro neexponovanou kontrolní skupinu a nejméně 4 repliky zkušebních nádob pro každou z nejméně pěti úrovní koncentrací.
The average specific growth rate should be calculated for the entire test period (time “i” in the above formula is the beginning of the test and time “j” is the end of the test).
Každá zkušební nádoba představuje repliku (opakování) obsahující tři výhonky.
For each test concentration and control, calculate a mean value for average specific growth rate along with the variance estimates.
Existují dvě možnosti pěstování tří výhonků v každé zkušební nádobě:
In addition, the section-by-section growth rate should be assessed in order to evaluate effects of the test chemical occurring during the exposure period (e.g. by inspecting log-transformed growth curves).
uspořádání zkoušky A: jeden výhonek na květináč a tři květináče na nádobu,
Percent inhibition of growth rate (Ir) may then be calculated for each test concentration (treatment group) according to the following formula:
uspořádání zkoušky A: tři výhonky na květináč a jeden květináč na nádobu,
% Ir percent inhibition in average specific growth rate
alternativní uspořádání zkoušky s jedním výhonkem na květináč na zkušební nádobu jsou přípustná, pokud je replika upravena tak, jak je požadováno pro dosažení požadovaných kritérií platnosti.
μC mean value for μ in the control
Jednotlivé zkušební nádoby by měly být náhodně přiděleny do exponovaných skupin.
μT mean value for μ in the treatment group
K minimalizaci vlivu prostorových rozdílů v intenzitě světla nebo v teplotě je potřeba zkušební nádoby ve zkušebním prostoru náhodně uspořádat.
Effects on yield are determined on the basis of the measurement variable main shoot length and three additional measurement variables (i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls) present in each test vessel at the start and at the end of the test.
Koncentrace zkoušené chemické látky a kontrolní skupiny
For fresh weight or dry weight, the starting biomass is determined on the basis of a sample of test organisms taken from the same batch used to inoculate the test vessels.
Koncentrace by zpravidla měly představovat geometrickou řadu; faktor mezi zkušebními koncentracemi by neměl překročit 3,2.
For each test concentration and control, calculate a mean value for yield along with variance estimates.
Předběžná znalost toxicity zkoušené chemické látky ze zkoušky pro stanovení rozsahu pomůže při volbě vhodných zkušebních koncentrací.
The mean percent inhibition in yield ( % Iy) may be calculated for each treatment group as follows:
Pro stanovení ECx by se zkušební koncentrace měly pohybovat pod a nad hodnotou ECx, aby se zajistila patřičná úroveň spolehlivosti.
% Iy percent reduction in yield
Použití více zkušebních koncentrací pomůže zlepšit interval spolehlivosti výsledné hodnoty ECx.
bC final biomass minus starting biomass for the control group
Pro stanovení LOEC/NOEC (volitelný ukazatel) by nejnižší zkušební koncentrace měla být dostatečně nízká, aby růst nebyl výrazně vyšší než růst kontrolních rostlin.
bT final biomass minus starting biomass in the treatment group
Dále by nejvyšší zkušební koncentrace měla být dostatečně vysoká, aby byl růst výrazně nižší než růst v kontrolní skupině.
Doubling time
Použití více replik zvýší statistickou významnost uspořádání koncentrace bez účinků / uspořádání ANOVA.
To determine the doubling time (Td) of main shoot length and adherence to this validity criterion (see paragraph 8), the following formula is used with data obtained from the control vessels:
V případech, kdy zkouška pro stanovení rozsahu naznačuje, že zkoušená chemická látka nemá žádné nepříznivé účinky při koncentracích až do 100 mg/l nebo až do meze své rozpustnosti ve zkušebním médiu nebo v případě přípravků až do meze jejich dispergovatelnosti, může se provést limitní zkouška k usnadnění porovnání odezvy v kontrolní skupině a odezvy v jedné exponované skupině – 100 mg/l nebo koncentrace rovná mezi rozpustnosti nebo 1000 mg/kg suchého sedimentu.
Td = ln 2/μ
Tato zkouška by se měla řídit obecnými zásadami standardní zkoušky závislosti odezvy na dávce s tou výjimkou, že se doporučuje zvýšit minimální počet replik na šest zkušebních nádob na kontrolní skupinu a koncentraci.
Where μ is the average specific growth rate determined as described in paragraphs 50-52.
Zkušební roztoky se obvykle připravují ředěním zásobního roztoku, připraveného rozpuštěním nebo dispergací zkoušené chemické látky do Smartova a Barkova média pomocí demineralizované (tj. destilované nebo deionizované) vody (viz dodatek 1).
Plotting concentration-response curves
Nejvyšší zkušební koncentrace by obvykle neměla překročit rozpustnost látky ve vodě nebo v případě přípravků dispergovatelnosti za zkušebních podmínek.
Concentration-response curves relating mean percentage inhibition of the response variable (Ir, or Iy calculated as shown in paragraph 53) and the log concentration of the test chemical should be plotted.
Pro zkoušené chemické látky s nízkou rozpustností ve vodě může být nezbytné připravit koncentrovaný zásobní roztok nebo disperzi látky pomocí organického rozpouštědla nebo dispergátoru, aby se usnadnilo přidávání přesných množství zkoušené chemické látky do zkušebního média, a napomohlo se tak její dispergaci a rozpuštění.
ECx estimation
Měla by být vynaložena maximální snaha taková rozpouštědla nebo dispergátory nepoužívat.
Estimates of the ECx should be based upon both average specific growth rate (ErCx) and yield (EyCx), each of which should in turn be based upon main shoot length, and possibly additional measurement variables (i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls).
Příkladem běžně používaných rozpouštědel, která nezpůsobují fytotoxicitu při koncentracích až do 100 μl/l, jsou aceton a dimethylformamid.
This is because there are chemicals that impact main shoot length and other measurement variables differently.
Použije-li se rozpouštědlo nebo dispergátor, jeho konečná koncentrace by se měla uvést v závěrečné zprávě a udržovat na minimální hodnotě (≤100 μl/l).
The desired toxicity parameters are therefore four ECx values for each inhibition level x calculated: ErCx (main shoot length); ErCx (i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight, or number of whorls); EyCx (main shoot length); and EyCx (i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls).
Za těchto okolností by všechny expozice a kontroly (s rozpouštědlem) měly obsahovat stejnou koncentraci rozpouštědla nebo dispergátoru.
It should be noted that ECx values calculated using these two response variables are not comparable and this difference is recognised when using the results of the test.
Do uspořádání zkoušky se zařadí také neexponované kontrolní repliky, které rozpouštědlo nebo dispergátor neobsahují.
ECx values based upon average specific growth rate (ErCx) will in most cases be higher than results based upon yield (EyCx) — if the test conditions of this test method are adhered to — due to the mathematical basis of the respective approaches.
Další pokyny k používání dispergátorů jsou uvedeny v pokynu OECD (11).
This difference should not be interpreted as a difference in sensitivity between the two response variables, simply the values are different mathematically.
Postup zkoušky se liší podle způsobu aplikace zkoušené chemické látky (tj. prostřednictvím vodní nebo sedimentové fáze).
Statistical procedures