natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Biologický význam odezvy v podobě produkce VTG po inhibici estrogenu/aromatázy byl potvrzen a široce zdokumentován (8)(9).
If required, the number of eggs in an egg rope can be estimated non-destructively by using the ring count method (detailed in 32 and 33).
Je však možné, že tvorba VTG u samiček může být ovlivněna také obecnou toxicitou a toxickými účinky jiného než endokrinního charakteru.
Analytical measurements
Několik metod měření bylo úspěšně vyvinuto a standardizováno pro běžné použití za účelem stanovení hladiny VTG ve vzorcích krve, jater, celého těla nebo homogenátu hlavy/ocasu.
Concentration of the test chemical
Je tomu tak v případě dania pruhovaného, koljušky tříostné a halančíka japonského a také u částečně validovaného druhu jelečka velkohlavého;
As a minimum, samples of the overlying water, pore water and the sediment should be analysed at the start of exposure (in case of water spiking preferably one hour after application) and at the end of the test, at the highest concentration and a lower one.
k dispozici jsou metody enzymové imunosorpční analýzy (ELISA) specifické pro jednotlivé druhy, které pro stanovení hladiny VTG využívají imunochemie (5)(10)(11)(12)(13)(14)(15)(16).
This applies to vessels from both generations.
U halančíka japonského a dania pruhovaného je dobrá korelace mezi úrovněmi VTG měřenými z krevní plazmy, jater a vzorků homogenátů, ačkoli homogenáty často vykazují poněkud nižší hodnoty VTG než plazma (17)(18)(19).
From the crystallising dishes in the breeding cage only the overlying water is analysed, since this is what the egg ropes come into contact with (for the spiked sediment design an analytical confirmation of the sediment concentration may be considered).
Doporučené postupy pro odběr vzorků pro účely analýzy VTG jsou uvedeny v dodatku 5.
Further measurements of sediment, pore water or overlying water during the test may be conducted if deemed necessary.
Změna ve fenotypovém poměru pohlaví je ukazatel, který vyjadřuje změnu pohlaví.
These determinations of test chemical concentration inform on the behaviour/partitioning of the test chemical in the water-sediment system.
Poměr pohlaví vyvíjejících se ryb mohou v zásadě ovlivnit estrogeny, antiestrogeny, androgeny, antiandrogeny a chemické látky inhibující steroidogenezi (20).
Sampling of sediment and pore water at the start and during the test (see paragraph 39) requires additional test vessels to perform analytical determinations.
Bylo prokázáno, že u dania pruhovaného je tato změna po expozici chemickým látkám typu estrogenů pohlaví částečně zvratná (21), zatímco změna pohlaví po expozici chemickým látkám typu androgenů je změna pohlaví trvalá (30).
Measurements in sediment in the spiked water design might not be necessary if the partitioning of the test chemical between water and sediment has been clearly determined in a water/sediment study under comparable conditions (e.g. sediment to water ratio, type of application, organic carbon content of sediment), or if measured concentrations in the overlying water are shown to remain within 80 to 120 % of the nominal or measured initial concentrations..
Pohlaví jsou definována jako samečci, samičky, intersexuálové (s oocyty i spermatogernetickými buňkami v jedné gonádě) nebo nediferencované a u jednotlivých ryb se určují histologickým vyšetřením gonád.
When intermediate measurements are made (e.g. at day 7 and/or 14) and if the analysis needs large samples which cannot be taken from test vessels without influencing the test system, analytical determinations should be performed on samples from additional test vessels treated in the same way (including the presence of test organisms) but not used for biological observations.
Pokyny jsou obsaženy v dodatku 7 a v pokynu OECD k diagnostice histopatologie pohlavních žláz ryb v souvislosti s endokrinním systémem (22).
Centrifugation at e.g. 10000 g at 4 °C for 30 min is the recommended procedure to isolate interstitial (= pore) water.
Genetické pohlaví se vyšetřuje prostřednictvím genetických markerů, pokud existují u daných druhů ryb.
However, if the test chemical is demonstrated not to adsorb to filters, filtration may also be acceptable.
U halančíka japonského lze samičí chromozomy XX nebo samčí chromozomy XY zjistit pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR) nebo lze analyzovat geny vázané v DM doméně chromozomu Y (DMY) (DMY negativní nebo pozitivní), jak je popsáno v položkách seznamu literatury (23)(24).
In some cases it might not be possible to analyse concentrations in the pore water as the sample volume may be too small.
Pro určení genetického pohlaví u koljušky tříostné existuje ekvivalentní metoda PCR, popsaná v dodatku 10.
Physical-chemical parameters
Pokud lze genetické pohlaví v jednotlivých případech spojit s fenotypovým pohlavím, průkaznost zkoušky se zvýší, a proto by u druhů se zdokumentovanými markery genetického pohlaví mělo být genetické pohlaví určeno.
pH, dissolved oxygen in the test water and temperature of the water in the test vessels and crystallising dishes should be measured in an appropriate manner (see paragraph 10).
Dva klíčové endokrinní ukazatele, VTG a poměr pohlaví, mohou v kombinaci prokázat endokrinní účinky chemické látky (tabulka 1).
Hardness and ammonia should be measured in the controls and in one test vessel and crystallising dish at the highest concentration at the start and the end of the test.
Poměr pohlaví je biologický marker významný z hlediska populace (25)(26) a u některých dobře definovaných účinků mohou být výsledky zkoušky FSDT, bude-li to regulační agentura považovat za vhodné, použity pro účely posouzení nebezpečí a rizik.
The purpose of this life-cycle test is to determine the effect of the test chemical on the reproduction and, for two generations, the development rate and the total number of fully emerged and alive male and female midges.
Mechanismy účinků jsou v současnosti estrogeny, androgeny a inhibitory steroidogeneze.
For the emergence ratio data of males and females should be pooled.
Reakce endokrinních ukazatelů na různé mechanismy účinků chemických látek
If there are no statistically significant differences between the sensitivities in the development rate of the separate sexes, male and female results may be pooled for statistical analysis.
↑= vzrůstající, ↓= klesající, — = nebylo zkoumáno
Effect concentrations expressed as concentrations in the overlaying water (for spiked water) or in the sediment (for spiked sediment), are usually calculated based on measured concentrations at the beginning of the exposure (see paragraph 38).
Odkazy
Therefore, for spiked water, the concentrations typically measured at the beginning of the exposure in the overlying water of the vessels for both generations and those of the crystallising dishes are averaged for each treatment.
Slabý agonista estrogenu
For spiked sediment, the concentrations typically measured at the beginning of the exposure in the vessels for both generations (and optionally those of the crystallising dishes) are averaged for each treatment.
↑ ♀ nebo ↑ nedif
To compute a point estimate, i.e. an ECx, the per-vessel and per-breeding cage statistics may be used as true replicates.
Silný agonista estrogenu
In calculating a confidence interval for any ECx the variability among vessels should be taken into account, or it should be shown that this variability is so small that it can be ignored.
↑ ♀ nebo ↑ nedif, žádný ♂
When the model is fitted by Least Squares, a transformation should be applied to the per-vessel statistics in order to improve the homogeneity of variance.
Antagonista estrogenu
However, ECx values should be calculated after the response is transformed back to the original value (31).
↑ ♀ nebo ↑ nedif
When the statistical analysis aims at determining the NOEC by hypothesis testing, the variability among vessels needs to be taken into account, which is guaranteed by using ANOVA methods (e.g. Williams' and Dunnett's test procedures).
Agonista androgenu
Williams' test would be appropriate when a monotonic dose-response is expected in theory and Dunnett's test would be appropriate where the monotonicity hypothesis does not hold.
↑♂, žádný ♀
Alternatively, more robust tests (27) can be appropriate in situations where there are violations of the usual ANOVA assumptions (31).
Antagonista androgenu
Emergence ratio
↑ intersex.
Emergence ratios are quantal data, and can be analysed by the Cochran-Armitage test applied in a step-down manner where a monotonic dose-response is expected and these data are consistent with this expectation.
Inhibitor aromatázy
If not, a Fisher's exact or Mantel-Haentzal test with Bonferroni-Holm adjusted p-values can be used.
Zkouška FSDT nepokrývá reprodukční životní stadium ryb a chemické látky, u nichž existuje podezření, že ovlivňují reprodukci při nižších koncentracích, než při jakých ovlivňují pohlavní vývoj, by měly být zkoumány ve zkoušce, která zahrnuje reprodukci.
If there is evidence of greater variability between replicates within the same concentration than a binomial distribution would indicate (often referenced to as “extra-binomial” variation), then a robust Cochran-Armitage or Fisher exact test such as proposed in (27), should be used.
Definice pro účely této zkušební metody jsou uvedeny v dodatku 1.
The sum of live midges (males plus females) emerged per vessel, ne, is determined and divided by the number of larvae introduced, na:
Zkouška FSDT in vivo je určena k zjištění chemických látek s androgenními a estrogenními vlastnostmi a rovněž chemických látek s antiandrogenními, antiestrogenními vlastnostmi a vlastnostmi způsobujících inhibici steroidogeneze.
ER emergence ratio
Validační fáze zkoušky FSDT (fáze 1 a 2) zahrnovala estrogenní, androgenní chemické látky a inhibitory steroidogeneze.
number of live midges emerged per vessel
Účinky antagonistů estrogenů a antagonistů androgenů ve zkoušce FSDT lze dohledat v tabulce 1, avšak tyto účinky jsou v současnosti méně zdokumentovány.
number of larvae introduced per vessel (normally 20)
Při této zkoušce jsou ryby, počínaje čerstvě oplodněnými jikrami až po ryby s ukončenou diferenciací pohlaví, vystaveny nejméně třem koncentracím zkoušené chemické látky rozpuštěné ve vodě.
When ne is larger than na (i.e. when unintentionally more than the foreseen number of larvae where introduced) na should be made equal to ne.
Zkušební podmínky by měly být průtokové, pokud to není nemožné z důvodu nedostupnosti nebo povahy (tj. omezené rozpustnosti) zkoušené chemické látky.
An alternative approach that is most appropriate for large sample sizes, when there is extra binomial variance, is to treat the emergence ratio as a continuous response and use procedures consistent with these ER data.
Zkouška začíná nasazením čerstvě oplodněných jiker (před rýhováním blastuly) do zkušebních komor.
A large sample size is defined here as the number emerged and the number not emerging both exceeding five, on a per replicate (vessel) basis.
Obsádka komor je pro každý druh popsána v odstavci 27.
To apply ANOVA methods, values of ER should first be transformed by the arcsin-sqrt transformation or Tukey-Freeman transformation to obtain an approximate normal distribution and to equalise variances.
U validovaných druhů ryb, halančíka japonského, koljušky tříostné a dania pruhovaného, se zkouška ukončí 60. den po vylíhnutí.
The Cochran-Armitage, Fisher's exact (Bonferroni), or Mantel-Haentzal tests can be applied when using the absolute frequencies.
Po ukončení zkoušky se všechny ryby humánně usmrtí.
The arcsin-sqrt transformation is applied by taking the inverse sine (sine– 1) of the square root of ER.
Z každé ryby se odebere biologický vzorek (krevní plazma, játra nebo homogenát hlavy/ocasu) pro analýzu VTG a zbytek se fixuje pro histologické hodnocení pohlavních žláz s cílem určit fenotypové pohlaví;
For emergence ratios, ECx-values are calculated using regression analysis (e.g. probit, logit or Weibull models (28)).
volitelně lze provést histopatologii (např. určení stadia gonád, míru výskytu intersexuálů).
If regression analysis fails (e.g. when there are less than two partial responses), other non-parametric methods such as moving average or simple interpolation can be used.
U druhů s příslušnými markery (dodatky 9 a 10) se odebere biologický vzorek (řitní nebo hřbetní ploutev) pro určení genetického pohlaví.
Development rate
Měly by být dostupné výsledky zkoušky akutní toxicity [např. zkušební metody C.14 (34) a OECD TG 210 (1)], přednostně provedené s druhy zvolenými pro tuto zkoušku.
Mean development time represents the mean time span between the introduction of larvae (day 0 of the test) and the emergence of the experimental cohort of midges (for calculation of the true development time, the age of larvae at the time of introduction should be considered).
To znamená, že je známa rozpustnost zkoušené látky ve vodě a tlak jejích par a je k dispozici spolehlivá analytická metoda pro stanovení množství látky ve zkušebních komorách, a to se známou a doloženou přesností a známou mezí stanovitelnosti.
The development rate (unit: 1/day) is the reciprocal of the development time and represents that portion of larval development which takes place per day.
Dalšími užitečnými informacemi jsou strukturní vzorec, čistota chemické látky, její stálost ve vodě a na světle, pKa, Pov a výsledky zkoušky snadné biologické rozložitelnosti (zkušební metoda C.4) (35).
Development rate is preferred for the evaluation of these sediment toxicity studies as its variance is lower, and it is more homogeneous and closer to a normal distribution compared to the development time.
Kritéria přijatelnosti zkoušky
Hence, more powerful parametric test procedures may be used with development rate unlike development time.
koncentrace rozpuštěného kyslíku by po celou dobu zkoušky měla činit nejméně 60 % hodnoty nasycení vzduchem (ASV),
For development rate as a continuous response, ECx-values can be estimated by regression analysis (e.g. (29) (30)).
teplota vody ve zkušebních komorách by se v kterémkoli čase během doby expozice neměla lišit o více než ± 1,5 °C a měla by být udržována v teplotních rozmezích stanovených pro jednotlivé zkušební druhy (dodatek 2),
A NOEC for the mean development rate can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
kritéria přijatelnosti týkající se růstu a poměru pohlaví při ukončení zkoušky jsou založena na údajích z kontrolních skupin (sloučené kontrolní skupiny s rozpouštědlem a s vodou; pokud se významně neliší, pak pouze kontroly s rozpouštědlem):
The mean development rate per vessel ( x
Halančík japonský
) is calculated according to:
Koljuška tříostná
mean development rate per vessel
Růst
i index of inspection interval
Živá hmotnost ryby (po osušení do sucha)
m maximum number of inspection intervals
Délka (standardní délka)
number of midges emerged in the inspection interval i
>20 mm
total number of midges emerged at the end of experiment (= Σfi)
>14 mm
development rate of the midges emerged in interval i
poměr pohlaví (% samečků nebo samiček)
day i
pokud je užito rozpouštědla, nemělo by mít statisticky významný účinek na přežití a nemělo by způsobovat žádné poruchy endokrinního systému nebo mít jiné nepříznivé účinky na raná životní stadia, což bylo potvrzeno kontrolou s rozpouštědlem.
inspection day (days since introduction of the larvae)
Je-li zjištěno nedodržení kritérií přijatelnosti zkoušky, měly by být zváženy důsledky z hlediska spolehlivosti zkušebních údajů a tyto úvahy by měly být zahrnuty do zpráv.
length of inspection interval i (days, usually 1 day)
Zkušební komory
Sex ratio
Lze použít komory ze skla, nerezové oceli nebo z jiného chemicky inertního materiálu.
Sex ratios are quantal data and should therefore be evaluated by means of a Fisher's exact test or other appropriate methods.
Rozměry komor by měly být dostatečně velké, aby umožňovaly dodržení kritérií obsádky, která jsou uvedena níže.
The natural sex ratio of C. riparius is one, i.e. males and females are equally abundant.
Je žádoucí, aby komory byly umístěny ve zkušebním prostoru náhodně.
For both generations the sex ratio data should be treated identically.
Pro zcela náhodné uspořádání se upřednostňuje náhodně blokové uspořádání, při kterém je každá koncentrace přítomna v každém bloku.
Since the maximum number of midges per vessel (i.e. 20) is too low for a meaningful statistical analysis, the total number of fully emerged and alive midges for each gender is summed over all vessels of one treatment.
Zkušební komory by měly být chráněny před nežádoucími rušivými vlivy.
These untransformed data are tested against the (solvent) control or pooled control data in a 2 × 2 contingency table.
Doporučené druhy ryb jsou uvedeny v dodatku 2.
Reproduction, as fecundity, is calculated as the number of egg ropes per female.
Podrobnosti o chovu matečných ryb za uspokojivých podmínek lze nalézt v dokumentu OECD TG 210 (1).
Fertility of the egg ropes is used to quantify the number of fertile egg ropes per female.
Matečné ryby je třeba krmit jednou nebo dvakrát denně vhodným krmivem.
The total number of fertile egg ropes produced in a breeding cage is divided by the total number of alive and undamaged females added to that cage.
Chov embryí a plůdků
A NOEC for fertility can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Embrya a plůdky mohou být uvnitř hlavní nádrže nejprve exponovány v menších nádobách ze skla nebo nerezové oceli s pletivovými stěnami nebo konci, aby nádobami mohla proudit zkoušená chemická látka.
The test report should provide the following information:
Nevířivého průtoku nádobami lze dosáhnout jejich zavěšením do ramen, pomocí nichž lze pohybovat nádobami nahoru a dolů, přičemž organismy zůstanou stále ponořeny.
physical nature and physical-chemical properties (water solubility, vapour pressure, log Kow, partition coefficient in soil (or in sediment if available), stability in water and sediment etc.);
Jsou-li k odchovu jiker v hlavní nádrži použity nádoby, mřížky nebo pletiva, měly by být po vylíhnutí plůdků odstraněny, pokud ovšem nemají být ponechány k zamezení úniku ryb.
chemical identification data (common name, chemical name, structural formula, CAS number, etc.) including purity and analytical method for the quantification of the test chemical.
Je-li třeba plůdky přemístit, neměly by být vystaveny vzduchu a k jejich vyjmutí z nádob by se neměly používat síťky.
test organisms used:
Načasování přemístění se liší podle druhu a přemístění nemusí být vždy nutné.
information on how the egg masses and larvae were handled;
Pro tuto zkoušku je vhodná jakákoli voda, ve které zkušební druhy z kontrolních skupin přežívají alespoň tak, jako ve vodě popsané v dodatku 3.
information on handling of the emerged adults of the 1st generation with the help of an exhauster etc (see Appendix 5)
Aby bylo zajištěno, že voda neovlivní výsledky zkoušky (například reakcí se zkoušenou chemickou látkou) nebo nebude mít nepříznivý vliv na stav matečných ryb, měly by být v pravidelných intervalech odebírány vzorky na analýzu.
age of the test organisms at the time of insertion into the test vessels of the 1st and 2nd generation.
Je-li kvalita ředicí vody relativně stálá, měl by se měřit celkový obsah organického uhlíku, vodivost, pH a suspendované látky, například každé tři měsíce.
sediment used, i.e. natural or formulated (artificial) sediment;
Podrobnosti o chemické analýze a odběru vody jsou uvedeny v odstavci 34.
location and description of sediment sampling site, including, if possible, contamination history;
Je-li to proveditelné, měl by být použit průtokový systém.
sediment characteristics:
Pro zjištění řady koncentrací při průtokových zkouškách je nezbytný systém, který nepřetržitě dávkuje a ředí zásobní roztok zkoušené chemické látky (např. dávkovací čerpadlo, zařízení pro poměrné ředění a syticí systém).
pH, organic carbon content, C/N ratio and granulometry (if appropriate).
Průtok zásobních roztoků a ředicí vody by měl být při zkoušce v určitých intervalech kontrolován a v jejím průběhu by se neměl měnit o více než 10 %.
formulated sediment:
Jako vhodný byl shledán průtok odpovídající výměně alespoň pětinásobku objemu nádrže za 24 hodin (1).
preparation, ingredients and characteristics (organic carbon content, pH, moisture, etc. measured at the start of the test);
Mělo by se dbát na to, aby nebyly použity trubky z plastu nebo jiné materiály, z nichž některé mohou obsahovat biologicky aktivní látky nebo mohou zkoušenou chemickou látku adsorbovat.
preparation of the test water (if reconstituted water is used) and characteristics (oxygen concentration, pH, hardness, etc. measured at the start of the test);
Zásobní roztok by měl být připraven pokud možno bez použití rozpouštědel jednoduchým mechanickým mícháním zkoušené chemické látky v ředicí vodě nebo jejím protřepáváním (např. mechanickým čeřením nebo pomocí ultrazvuku).
depth of sediment and overlaying water for the test vessels and crystallising dishes;
Je-li zkoušená chemická látka obtížně rozpustná ve vodě, měl by se použít postup popsaný v pokynu OECD ke zkouškám toxicity složitých látek a směsí pro vodní organismy (36).
volume of overlying and pore water;
Rozpouštědla by se používat neměla, ale v některých případech mohou být pro vytvoření zásobního roztoku o vhodné koncentraci nezbytná.
weight of wet sediment with and without pore water for the test vessels and the crystallising dishes;
Příklady vhodných rozpouštědel lze nalézt v seznamu literatury (36).
test vessels (material and size);
Semistatické zkušební podmínky by používány být neměly, pokud pro to nebudou naléhavé důvody související se zkoušenou chemickou látkou (např. stálost, omezená dostupnost, vysoké náklady nebo nebezpečnost).
crystallising dishes (material and size);
Podmínky expozice
breeding cages (material and size)
Sběr jiker a délka expozice
method of preparation of stock solutions and test concentrations for the test vessels and crystallising dishes;
Aby nedošlo ke geneticky podmíněnému zkreslení, odeberou se jikry nejméně od třech chovných párů nebo skupin, smíchají se a pro zahájení zkoušky se náhodně vyberou.
application of the test chemical into the test vessels and crystallising dishes:
V případě koljušky tříostné je popis umělého oplodnění uveden v dodatku 11.
test concentrations, number of replicates and solvents if needed;
Zkouška se zahájí co nejdříve po oplodnění jiker, embrya se ponoří do zkušebních roztoků nejlépe ještě před započetím rýhování blastuly nebo co nejdříve po tomto stadiu, avšak nejpozději 12 h po oplodnění.
incubation conditions for the test vessels:
Zkouška by měla pokračovat až do dokončení pohlavní diferenciace v kontrolní skupině (60 dní po vylíhnutí u halančíka japonského, koljušky tříostné a dania pruhovaného).
temperature, light cycle and intensity, aeration (bubbles per second);
Zatížení
incubation conditions for the breeding cages and the crystallising dishes:
Počet oplodněných jiker na počátku zkoušky by měl být nejméně 120 pro každou koncentraci, rozdělených mezi alespoň 4 opakování (přijatelné je přidělení ke kontrolním skupinám podle druhé odmocniny).
temperature, light cycle and intensity;
Jikry by měly být (pomocí statistických tabulek pro randomizaci) náhodně rozděleny mezi varianty expozice.
incubation conditions for the egg ropes in the micro plates (or other vessels):
Velikost násady (pro definici viz dodatek 1) by měla být tak nízká, aby bez přímého provzdušňování nádrží bylo možné udržet koncentrace rozpuštěného kyslíku alespoň na 60 % hodnoty ASV.
temperature, light cycle and intensity:
U průtokových zkoušek se doporučuje nasazování nepřevyšující 0,5 g/l za 24 hodin a v žádném okamžiku nepřekračující 5 g/l roztoku.
detailed information on feeding including type of food, preparation, amount and feeding regime.
Nejpozději 28 dnů po oplodnění by počet ryb v jednotlivých opakováních měl být upraven tak, aby každé opakování obsahovalo pokud možno stejný počet ryb.
nominal test concentrations, measured test concentrations and the results of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels and crystallising dishes;