natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Cílový ukazatel popisuje obecný faktor, který bude jakožto cíl zkoušky změněn zkoušenou chemickou látkou vzhledem ke kontrole.
Where information on the solubility and stability of the test chemical are uncertain, it is recommended that these be assessed under the conditions of the test, i.e. growth medium, temperature, lighting regime to be used in the test.
Při této metodě je cílovým ukazatelem inhibice růstu, kterou lze vyjádřit různými proměnnými odezvy, jež jsou založeny na jedné či více proměnných měření.
The pH control of the test medium is particularly important, e.g. when testing metals or substances which are hydrolytically unstable.
Zkušební médium je úplné syntetické růstové médium, v němž rostou zkušební rostliny při expozici zkoušené chemické látce.
Further guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to test is provided in a OECD Guidance Document (5).
Zkoušená chemická látka se za normálních podmínek v zkušebním médiu rozpustí.
For the test to be valid, the doubling time of main shoot length in the control must be less than 14 days.
UVCB je látka s neznámým nebo proměnlivým složením, komplexní reakční produkt nebo biologický materiál.
Using the media and test conditions described in this test method, this criterion can be attained using a static or semi-static test regime.
Výtěžek je hodnota proměnné měření pro vyjádření biomasy na konci expoziční doby minus proměnná měření na počátku expoziční doby.
The mean coefficient of variation for yield based on measurements of shoot fresh weight (i.e. from test initiation to test termination) and the additional measurement variables (see paragraph 37) in the control cultures do not exceed 35 % between replicates.
Poznámka: Při exponenciálním růstu neexponovaného organismu budou proměnné odezvy založené na výtěžku během zkoušky klesat.
More than 50 % of the replicates of the control group are kept sterile over the exposure period of 14 days, which means visibly free of contamination by other organisms such as algae, fungi and bacteria (clear solution).
MODIFIKOVANÉ ANDREWSOVO MÉDIUM PRO ZÁSOBNÍ KULTURY A PŘEDKULTURY
Note: Guidance on how to assess sterility is provided in the ring-test report (4).
Andrewsovo médium potřebné pro zásobní kultury a předkultury se připraví z pěti samostatně připravených zásobních živných roztoků s přidáním 3 % sacharózy.
REFERENCE CHEMICAL
Tabulka 1
Reference chemical(s), such as 3,5-dichlorophenol used in the ring test (4), may be tested as a mean of checking the test procedure; from the ring test data, the mean EC50-values of 3,5-DCP for the different response variables (see paragraphs 37-41 of this test method) are between 3,2 mg/l and 6,9 mg/l (see ring test report for details about confidence interval for these values).
Složení Andrewsova živného roztoku: (norma ASTM E 1913-04)
It is advisable to test a reference chemical at least twice a year or, where testing is carried out at a lower frequency, in parallel to the determination of the toxicity of a test chemical.
Příprava zásobního živného roztoku
All equipment in contact with the test media should be made of glass or other chemically inert material.
Příprava živného roztoku
Glassware used for culturing and testing purposes should be cleaned of chemical contaminants that might leach into the test medium and should be sterile.
Zásobní roztok
The test vessels should be long enough for the shoot in the control vessels to grow in the water phase without reaching the surface of the test medium at the end of the test.
Počáteční hmotnost na 1000 ml
Thick-walled borosilicate glass test tubes without lip, inner diameter approximately 20 mm, length approximately 250 mm, with aluminium caps are recommended.
ml na 5 l živného roztoku
Since the modified Andrews' medium contains sucrose (which stimulates the growth of fungi and bacteria), the test solutions have to be prepared under sterile conditions.
Viz dále zásobní roztok 3.1
All liquids as well as equipment are sterilised before use.
Zásobní roztoky lze držet v chladničce po dobu 6 měsíců (při 5 až 10 °C).
Sterilisation is carried out via heated air treatment (210 °C) for 4 hours or autoclaving for 20 minutes at 121 °C.
Pouze zásobní roztok č. 5 má omezenou životnost (dva měsíce).
In addition, all flasks, dishes, bowls etc. and other equipment undergo flame treatment at a sterile workbench just prior to use.
Příprava zásobního roztoku 3.1 na přípravu zásobního roztoku 3
The cultures and test vessels should not be kept together.
Počáteční hmotnost v g/100 ml
This is best achieved using separate environmental growth chambers, incubators, or rooms.
Připravený zásobní roztok 3.1 (tabulka 2) se hluboce zmrazí v poměrných dílech přibližně po 11 ml (nejméně při – 18 °C).
Illumination and temperature should be controllable and maintained at a constant level.
Pro přípravu zásobního roztoku 3 se zásobní roztok 3.1 rozmrazí, 10 ml z něho se odlije do odměrné baňky o objemu 1 l a dolije se velmi čistá voda až po značku 1 l.
Myriophyllum spicatum — a submersed aquatic dicotyledon — is a species of the water milfoils family.
Pro získání Andrewsova modifikovaného média se přibližně 2500 ml velmi čisté vody nalije do odměrné baňky o objemu 5 l.
Between June and August, inconspicuous pink-white flowers protrude above the water surface.
Po přidání 50 ml každého zkušebního roztoku se odměrná baňka z 90 % naplní velmi čistou vodou a pH se upraví na 5,8.
The plants are rooted in the ground by a system of robust rhizomes and can be found in the entire northern hemisphere in eutrophic, however non-polluted and more calciferous still waters with muddy substrate.
Takto získaný živný roztok lze udržovat sterilní v chladničce (při 5 až 10 °C) po dobu tří měsíců.
Myriophyllum spicatum prefers fresh water, but is found in brackish water as well.
Modifikované Andrewsovo médium pro zkoušku toxicity bez sedimentu
For the sediment-free toxicity test, sterile plants are required.
Z pěti zásobních živných roztoků již popsaných v tabulkách 1 a 2 se připraví desetinásobně koncentrované modifikované Andrewsovo médium, které je požadováno pro získání živných roztoků, přidáním 30 % sacharózy.
If the testing laboratory does not have regular cultures of Myriophyllum spicatum, sterile plant material may be obtained from another laboratory or (unsterile) plant material might be taken from the field or provided by a commercial supplier; if plants come from the field a taxonomic verification of the species should be envisaged.
Provede se to tak, že přibližně 100 ml velmi čisté vody se nalije do odměrné baňky o objemu 1 l.
If collected from the field or provided by a commercial supplier, plants should be sterilised (1) and maintained in culture in the same medium as used for testing for a minimum of eight weeks prior to use.
Po přidání 100 ml každého ze zásobních roztoků se pH nastaví na 5,8.
Field sites used for collecting starting cultures have to be free of obvious sources of contamination.
Poté se přidá 30 % rozpuštěná sacharóza (300 g na 1000 ml); poté se do odměrné baňky dolije velmi čistá voda až po značku 1 l.
Great care should be taken to ensure that the correct species is obtained when collecting Myriophyllum spicatum from the field, especially in regions where it can hybridise with other Myriophyllum species.
Nakonec se živným roztokem naplní Schottovy baňky o objemu 0,5 l a autoklávují se při 121 °C po dobu 20 minut.
If obtained from another laboratory they should be similarly maintained for a minimum of three weeks.
Takto získaný desetinásobně koncentrovaný modifikovaný živný roztok lze udržovat sterilní v chladničce (při 5 až 10 °C) po dobu tří měsíců.
The source of plant material and the species used for testing should always be reported.
UCHOVÁVÁNÍ ZÁSOBNÍCH KULTUR
The quality and uniformity of the plants used for the test will have a significant influence on the outcome of the test and should therefore be selected with care.
V tomto dodatku 3 se popisuje zásobní kultura Myriophyllum spicatum L [1], vodní dvouděložné rostliny rostoucí pod hladinou, která je druhem stolístku z čeledi Haloragaceae.
Young, rapidly growing plants without visible lesions or discoloration (chlorosis) should be used.
Pro zásobní kulturu bez sedimentu v laboratorních podmínkách jsou zapotřebí sterilní rostliny.
Details about preparation of the test organism are given in Appendix 4.
Sterilní rostliny jsou dostupné z ekotoxikologické laboratoře německého Umweltbundesamt (Spolkový úřad pro životní prostředí, Německo).
Cultivation
Alternativně lze zkušební organismy připravit z nesterilních rostlin v souladu s normou ASTM E 1913-04.
To reduce the frequency of culture maintenance (e.g. when no Myriophyllum tests are planned for a period), cultures can be held under reduced illumination and temperature (50 μE m–2 s–1, 20 ± 2 °C).
Následuje postup pro kultivaci Myriophyllum sibiricum odebraných v terénu – výtah ze standardních pokynů ASTM:
Details of culturing are given in Appendix 3.
Jelikož modifikované Andrewsovo médium obsahuje sacharózu (která stimuluje růst hub a bakterií), musí se veškerá manipulace s materiálem a roztoky a kultivace provádět za sterilních podmínek.
At least 14 to 21 days before testing, sufficient test organisms are transferred aseptically into fresh sterile medium and cultured for 14 to 21 days under the conditions of the test as a pre culture.
Všechny baňky, misky, mísy atd. a jiné vybavení navíc těsně před použitím projdou úpravou plamenem na sterilním laboratorním stole.
Details for preparation of a pre-culture are given in Appendix 4.
Zásobní kultury je možné uchovávat při sníženém osvětlení a teplotě (50 μE m– 2 s– 1, 20 ± 2 °C) po delší dobu, bez potřeby je znovu zakládat.
Only one nutrient medium is recommended for Myriophyllum spicatum in a sediment-free test system, as described in Appendix 2.
Růstové médium pro Myriophyllum může být stejné jako médium použité pro zkoušení, ale pro zásobní kultury je možné použít jiná média bohatá na živiny.
A modification of the Andrews' medium is recommended for culturing and testing with Myriophyllum spicatum as described in (1).
Segmenty rostlin se axenicky (jednodruhově) rozdělí do několika Erlenmeyerových baněk o objemu 500 ml a/nebo Fernbachových baněk o objemu 2000 ml, do každé z nich se nalije přibližně 450, respektive 1000 ml modifikovaného Andrewsova média.
From five separately prepared nutrient stock solutions with addition of 3 % sucrose the modified Andrews' medium will be arranged.
Baňky se poté axenicky uzavřou celulózovou zátkou.
Details about preparation of the medium are given in Appendix 2.
Dále je zcela nezbytné důkladné ošetření náčiní plamenem na sterilním laboratorním stole těsné před použitím.
A tenfold concentrated, modified Andrews' medium is needed for obtaining the test solutions (by dilution as appropriate).
V závislosti na počtu a velikosti se rostliny přibližně každé tři týdny mají přemístit do čerstvého živného roztoku.
The composition of this medium is given in Appendix 2.
Pro tuto obnovenou kulturu lze použít vrcholky, jakož i segmenty střední části stonků.
Test solutions are usually prepared by dilution of a stock solution.
Počet a velikost přenesených rostlin (nebo segmentů rostlin) závisí na tom, kolik rostlin je potřeba.
Stock solutions of the test chemical are normally prepared by dissolving the chemical in demineralised (i.e. distilled or deionised) water.
Je například možné přemístit pět segmentů výhonku do jedné Fernbachovy baňky a tři segmenty výhonku do jedné Erlenmeyerovy baňky, každý o délce 5 cm.
The addition of the nutrients will be achieved by using the tenfold concentrated, modified Andrews' medium.
Veškeré zakořeněné, kvetoucí, mrtvé nebo jinak zjevně odlišné části se vyřadí.
The stock solutions of the test chemical can be sterilised by autoclave at 121 °C for 20 minutes or by sterile filtration, provided that the sterilisation technique used does not denaturise the test chemical.
Řezání rostlin pro zásobní kulturu a předkulturu po třech týdnech kultivace.
Test solutions can also be prepared in sterile demineralised water or medium, under sterile conditions.
odpad
The thermo-stability and the adsorption on different surfaces should the taken into account in the selection of the sterilisation procedure of the stock solutions of the test chemical.
předkultura
Because of that, it is recommended that the stock solutions be prepared under sterile conditions, i.e. using sterile material for dissolving the test chemical under sterile conditions (e.g. flame sterilisation, laminar-flow hoods, etc.) into sterile water.
zásobní kultura
This technique of preparation of sterile stock solutions is valid for both substances and mixtures.
Kultivace rostlin se má provádět v Erlenmeyerových baňkách o objemu 500 ml a Fernbachových baňkách o objemu 2000 l v chladicím inkubátoru při teplotě 20 ± 2 °C za nepřetržitého světla přibližně 100 až 150 μE m– 2 s– 1 nebo 6000 až 9000 luxů (vydávaného komorovým osvětlením barevné teploty „teplé bílé světlo“).
The highest tested concentration of the test chemical should normally not exceed its water solubility under the test conditions.
Kultivace rostlin v chladicím inkubátoru s komorovým osvětlením.
For test chemicals of low water solubility it may be necessary to prepare a concentrated stock solution or dispersion of the chemical using an organic solvent or dispersant in order to facilitate the addition of accurate quantities of the test chemical to the test medium and aid in its dispersion and dissolution.
Je třeba používat chemicky čisté (umyté kyselinou) a sterilní skleněné kultivační nádoby a dodržovat aseptické podmínky manipulace.
Every effort should be made to avoid the use of such materials.
V případě kontaminace zásobní kultury, např. řasami, houbami nebo bakteriemi, je třeba připravit novou kulturu nebo by pro obnovení dané kultury měla být použita zásobní kultura z jiné laboratoře.
There should be no phytotoxicity resulting from the use of auxiliary solvents or dispersants.
Carl von Linné (* 23. května 1707 v Råshultu u Älmhultu; † 10. ledna 1778 v Uppsale).
For example, commonly used solvents which do not cause phytotoxicity at concentrations up to 100 μl/l, include acetone and dimethylformamide.
UDRŽOVÁNÍ PŘEDKULTURY A PŘÍPRAVA ZKUŠEBNÍCH ORGANISMŮ PRO ZKOUŠENÍ
If a solvent or dispersant is used, its final concentration should be reported and kept to a minimum (≤ 100 μl/l), and all treatments and controls should contain the same concentration of solvent or dispersant.
Pro získání předkultury se výhonky ze zásobní kultury nařežou na segmenty, každý s dvěma přesleny; segmenty se vloží do Fernbachových baněk naplněných modifikovaným Andrewsovým médiem (s 3 % sacharózy).
Further guidance on the use of dispersants is given in (5).
Každá baňka může obsahovat až 50 segmentů výhonků.
Test and control groups
Je však třeba dbát na to, aby byly segmenty vitální a neměly žádné kořeny ani boční větve nebo jejich pupeny (viz obrázek 1 v dodatku 3).
Prior knowledge of the toxicity of the test chemical to Myriophyllum spicatum from a range-finding test will help in selecting suitable test concentrations.
Organismy v předkultuře se kultivují po 14 až 21 dnů za sterilních podmínek v komoře za podmínek prostředí se střídáním fází 16 hodin světla / 8 hodin tmy.
In the definitive toxicity test, there should normally be five (like in the Lemna growth inhibition test, Chapter C.26 of this Annex) to seven test concentrations arranged in a geometric series; they should be chosen in order that the NOEC and EC50 values are bracketed by the concentration range (see below).
Intenzita světla se zvolí v rozmezí 100 až 150 μE m– 2 s– 1.
Preferably the separation factor between test concentrations should not exceed 3,2; however, a larger value may be used where the concentration-response curve is flat.
Jelikož modifikované Andrewsovo médium obsahuje sacharózu (která stimuluje růst řas, hub a bakterií), musí se zkušební roztoky připravovat a kultivovat za sterilních podmínek.
Justification should be provided when fewer than five concentrations are used.
Sterilizace se provádí horkým vzduchem (210 °C) po dobu 4 hodin nebo v autoklávu po dobu 20 minut při teplotě 121 °C.
At least five replicates should be used at each test concentration.
Všechny baňky, misky, mísy atd. a jiné vybavení navíc těsně před použitím projdou úpravou plamenem na sterilním laboratorním stole.
In setting the range of test concentrations (for range-finding and/or for the definitive toxicity test), the following should be considered:
Výhonky se axenicky odstraní z baněk předkuktury, přičemž se vybere materiál, který je co nejvíce homogenní.
To determine an ECx, test concentrations should bracket the ECx value to ensure an appropriate level of confidence.
Pro každé zkoušení je zapotřebí nejméně 60 zkušebních organismů (zkoušení s osmi koncentracemi zkoušené chemické látky).
For example, if estimating the EC50, the highest test concentration should be greater than the EC50 value.
Pro zkoušení se z předkultur odeberou čerstvé boční větve, zkrátí se na 2,5 cm od báze (měřeno pravítkem) a přenesou se do kádinky se sterilním modifikovaným Andrewsovým roztokem.
If the EC50 value lies outside of the range of test concentrations, associated confidence intervals will be large and a proper assessment of the statistical fit of the model may not be possible.
Tyto čerstvé boční větve lze použít na zkoušku toxicity na Myriophyllum spicatum bez sedimentu.
If the aim is to estimate the LOEC/NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that growth is not significantly less than that of the control.
Řezání rostlin z předkultury na zkoušku toxicity na Myriophyllum spicatum bez sedimentu.
In addition, the highest test concentration should be high enough so that growth is significantly lower than that in the control.
čerstvé boční větve pro zkoušku
If this is not the case, the test will have to be repeated using a different concentration range (unless the highest concentration is at the limit of solubility or the maximum required limit concentration, e.g. 100 mg/l).
odpad nebo další kultivace
Every test should include controls consisting of the same nutrient medium, test organism (choosing plant material as homogeneous as possible, fresh lateral branches from pre-cultures, shortened to 2,5 cm from base), environmental conditions and procedures as the test vessels but without the test chemical.
C.51 Zkouška toxicity na Myriophyllum spicatum v systému voda-sediment
If an auxiliary solvent or dispersant is used, an additional control treatment with the solvent/dispersant present at the same concentration as that in the vessels with the test chemical should be included.
K dispozici jsou i zkušební metody pro ve vodě se vznášející jednoděložnou vodní rostlinu, druhy Lemna (1) a pro druhy řas (2).
If determination of NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Tyto metody se běžně používají k získávání údajů pro zkoumání rizik pro necílové druhy vodních rostlin, která jsou spojena s používáním zkoušených chemických látek, zejména látek s herbicidním působením.
However, in any case the number of control replicates should be at least ten.
V některých případech však mohou být požadovány údaje o dalších rostlinných druzích.
Exposure
V nedávno zveřejněných pokynech, které vzešly ze semináře Společností pro environmentální toxikologii a chemii (SETAC) o posuzování rizik pesticidů pro vodní rostliny (AMRAP), bylo navrženo, aby bylo možno požadovat údaje o zakořeněných vodních rostlinách vystavených chemickým látkám, přičemž o Lemna a řasách je známo, že nejsou na jejich mechanismus účinku citlivé, nebo pokud je předmětem zájmu rozdělení do sedimentu, jež vede k expozici prostřednictvím příjmu kořeny (3).
Fresh lateral branches from pre-culture shortened to 2,5 cm from base are assigned randomly to the test vessels under aseptic conditions; each test vessel should contain one 2,5 cm lateral branch that should have an apical meristem on one end.
Tento dokument popisuje zkušební metodu, která umožňuje posouzení účinků zkoušené chemické látky na zakořeněné vodní rostliny druhu Myriophyllum spicatum pěstované v systému voda-sediment.
A blocked design or random repositioning of the vessels (or repositioning more frequently) when observations are made is also required.
Tento zkušební systém však lze snadno přizpůsobit tak, aby umožňoval expozici prostřednictvím obohaceného sedimentu nebo expozici prostřednictvím vodní fáze v semistatických scénářích nebo scénářích s pulzním dávkováním, třebaže pro tyto scénáře ještě nebyla provedena formální mezilaboratorní porovnávací zkouška.
If a preliminary stability test shows that the test chemical concentration cannot be maintained (i.e. the measured concentration falls below 80 % of the measured initial concentration) over the test duration (14 days), a semi-static test regime is recommended.
Obecnou metodu lze kromě toho použít i na jiné druhy vodních rostlin zakořeněných, rostoucích pod i nad vodní hladinou, včetně jiných druhů Myriophyllum (např. Myriophyllum aquaticum) a Glyceria maxima (10).
In this case, the plants should be exposed to freshly prepared test and control solutions on at least one occasion during the test (e.g. day 7).
Pro alternativní druhy může být nezbytná úprava zkušebních podmínek, uspořádání a doby trvání zkoušky.
The frequency of exposure to fresh medium will depend on the stability of the test chemical; a higher frequency may be needed to maintain near-constant concentrations of highly unstable or volatile chemicals.
Více práce si vyžádá zejména definování vhodných postupů pro Myriophyllum aquaticum.
The exposure scenario through a foliar application (spray) is not covered in this test method.
Těmito možnostmi se tato zkušební metoda, která popisuje standardní přístup pro expozici Myriophyllum spicatum ve statickém systému prostřednictvím vodní fáze, podrobně nezabývá.
Warm and/or cool white fluorescent lighting should be used to provide light irradiance in the range of about of 100-150 μE m–2 s–1 when measured as a photosynthetically active radiation (400-700 nm) at points the same distance from the light source as the bottom of the test vessels (equivalent ca. 6000 to 9000 lux) and using a light-dark cycle of 16:8 h.
Stejně tak může být laboratorní zkouška na Myriophyllum požadována v rámci strategie vyššího stupně s cílem řešit obavy související s rizikem pro vodní rostliny.
The temperature in the test vessels should be 23 ± 2 °C.
Zkouška je určena k posouzení účinků souvisejících s chemickou látkou na vegetativní růst rostlin Myriophyllum rostoucích ve standardizovaných médiích (voda, sediment a živiny).
The test is terminated 14 days after the plants are transferred into the test vessels.
Za tímto účelem se vrcholky výhonků zdravých, nekvetoucích rostlin zasadí do standardizovaného umělého sedimentu spolu s doplňkovými živinami s cílem zajistit přiměřený růst rostlin, a poté se udržují ve Smartově a Barkově médiu (dodatek 1).
Measurements and analytical determinations
Alternativně lze expozici prostřednictvím sedimentu simulovat obohacením umělého sedimentu zkoušenou chemickou látkou a přesazením rostlin do tohoto obohaceného sedimentu.
The main shoot length of test organism appearing normal or abnormal needs to be determined at the beginning of the test, at least once during the 14-day exposure period and at test termination.
V obou případech se rostliny následně udržují po dobu 14 dnů za regulovaných podmínek okolního prostředí.
Note: As an alternative for those who do not have image analysis, if the workbench is sterilised prior to addition of plants to test vessels, a sterile ruler can also be used to measure the length of the main shoot at test initiation and during the test.
Účinky na růst se stanoví na základě kvantitativního hodnocení délky výhonků, čerstvé hmotnosti a hmotnosti sušiny a na základě kvalitativních pozorování příznaků jako chloróza, nekróza nebo deformace růstu.
Changes in plant development, e.g. in deformation in the shoots, appearance, indication of necrosis, chlorosis, break-up or loss of buoyancy and in root length and appearance, should be noted.