natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Je možné použít i jiné nádoby vhodné pro uchovávání šňůr vajíček.
On day 28, the collembolans are extracted from the soil and counted.
S výjimkou mikrotitračních destiček by všechny zkušební nádoby a další aparatura, která přichází do styku se zkušebním systémem, měly být celé zhotoveny ze skla nebo z jiného chemicky inertního materiálu (např. z teflonu).
As a suitable food source, a sufficient amount, e.g. 2-10 mg, of granulated dried baker's yeast, commercially available for household use, is added to each container at the beginning of the test and after about 2 weeks.
Při zkoušce má být přednostně užito druhu Chironomus riparius.
At the end of the test, mortality and reproduction are assessed.
Lze užít rovněž druh C. yoshimatsui.
After 3 weeks (F. fimetaria) or 4 weeks (F. candida), collembolans are extracted from the test soil (see Appendix 4) and counted (12).
Vhodný je i druh C. dilutus, avšak hůře se s ním manipuluje a vyžaduje i delší trvání zkoušky.
A collembolan is recorded as dead if not present in the extraction.
Podrobnosti o kultivačních metodách pro druh C. riparius jsou uvedeny v dodatku 2.
The extraction and counting method should be validated.
Informace o kultivačních podmínkách jsou k dispozici také pro druhy C. dilutus (5) a C. yoshimatsui (14).
The validity includes extraction efficiency of juveniles greater than 95 %, e.g. by adding a known number to soil.
Identifikace druhu by měla být před zkouškou potvrzena, ale není vyžadována před každou zkouškou, pokud organismy pocházejí z domácí kultury.
Practical summary and timetable of the test procedure are described in Appendix 2.
Doporučuje se přednostně užívat připravený sediment (nazývaný rovněž rekonstituovaný, umělý nebo syntetický sediment).
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example, five test chemical concentrations of 0,1, 1,0, 10, 100, and 1000 mg/kg dry weight of soil and two replicates for each treatment and control.
Pokud se však použije přírodní sediment, je potřeba ho charakterizovat (alespoň pH a obsah organického uhlíku a doporučuje se i stanovení dalších parametrů, jako je poměr C/N a zrnitost) a měl by být prost veškerého znečištění a dalších organismů, které mohou larvám pakomárů konkurovat nebo je konzumovat.
Additional information, from tests with similar chemicals or from literature, on mortality or reproduction of Collembola may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the range-finding test.
Doporučuje se také sedimenty před zkouškou po dobu sedmi dnů kondicionovat za zkušebních podmínek.
The duration of the range-finding test is two weeks for F. fimetaria and 3 weeks for F. candida to ensure one clutch of juveniles has been produced.
Doporučuje se následující připravený sediment (1)(20)(21), popsaný v seznamu literatury (1):
At the end of the test, mortality and reproduction of the Collembola are assessed.
je důležité, aby byla ve formě prášku, jemně namletá (velikost částic ≤ 1 mm) a sušená výhradně na vzduchu;
The number of adults and the occurrence of juveniles should be recorded.
b.
At least two replicates for each test concentration treatment and six control replicates are recommended.
20 % (sušiny) kaolinitického jílu (pokud možno s více než 30 % kaolinitu);
The spacing factor may vary depending on the dose-response pattern.
c.
For determination of the NOEC/LOEC, at least five concentrations in a geometric series should be tested.
75–76 % (sušiny) křemenného písku (měl by převažovat jemný písek s více než 50 % částic velikosti 50 až 200 μm);
Four replicates for each test concentration treatment plus eight controls are recommended.
d. přidá se deionizovaná voda s cílem dosáhnout 30–50 % vlhkosti v konečné směsi;
A combined approach allows for determination of both the NOEC/LOEC and ECx.
e. přidá se chemicky čistý uhličitan vápenatý (CaCO3) pro úpravu pH konečné směsi sedimentu na pH 7,0 ± 0,5;
For this combined approach, eight treatment concentrations in a geometric series should be used.
f. obsah organického uhlíku v konečné směsi by měl být 2 % (± 0,5 %) a je třeba jej upravit použitím vhodného množství rašeliny a písku v souladu s písm. a) a c).
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using a test concentration of 1000 mg/kg and the control.
Rašelina, kaolinitický jíl a písek by měly pocházet ze známého zdroje.
A limit test will provide the opportunity to demonstrate that there is no statistically significant effect at the limit concentration.
Jednotlivé složky sedimentu by měly být kontrolovány z hlediska nepřítomnosti chemické kontaminace (např. těžké kovy, chlorované organické sloučeniny, organofosforové sloučeniny).
The reproductive output is the main endpoint (e.g. the number of juveniles produced per test vessel).
Příklad přípravy umělého sedimentu je popsán v dodatku 3.
The statistical analysis, e.g. ANOVA procedures, compares treatments by Student t-test, Dunnett's test, or Williams' test.
Přijatelné je i míchání suchých složek, pokud se prokáže, že po přidání vody nad sedimentem nedochází k separaci složek sedimentu (např. vyplavování částic rašeliny) a že rašelina nebo sediment jsou dostatečně kondicionovány.
95 % confidence intervals are calculated for individual treatment means.
Pro tuto zkoušku je vhodná jakákoli voda, která vyhovuje chemickým charakteristikám přípustné ředicí vody uvedeným v dodatcích 2 a 4.
The number of surviving adults in the untreated controls is a major validity criterion and should be documented.
Jakákoli vhodná voda, přírodní voda (povrchová nebo podzemní), rekonstituovaná voda (viz dodatek 2) nebo odchlorovaná vodovodní voda je přijatelná jako kultivační a zkušební voda, pokud v ní pakomáři přežijí po dobu kultivace a zkoušení bez známek stresu.
As in the range-finding test, all other harmful signs should be reported in the final report as well.
Na začátku zkoušky by se hodnota pH zkušební vody měla pohybovat mezi 6 a 9 a její celková tvrdost by neměla být vyšší než 400 mg/l CaCO3.
LCx and ECx
V případě, že je podezření na interakci mezi ionty způsobujícími tvrdost vody a zkoušenou chemickou látkou, měla by být použita voda nižší tvrdosti (proto není vhodné v této situaci používat Elendtovo médium M4).
ECx-values, including their associated lower and upper 95 % confidence limits for the parameter, are calculated using appropriate statistical methods (e.g. logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
V průběhu celé studie by měl být užíván stejný typ vody.
To compute the EC50 or any other ECx, the complete data set should be subjected to regression analysis.
Charakteristiky jakosti vody uvedené v dodatku 4 by měly být měřeny nejméně dvakrát ročně, nebo pokud existuje podezření, že mohlo dojít k podstatné změně těchto vlastností.
is usually estimated by probit analysis or similar analysis that takes into account the binomially distributed mortality data.
Zásobní roztoky – obohacená voda
Appropriate statistical methods should be used according to OECD Document 54 on the Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application (9).
a.
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Zkušební koncentrace se vypočtou na základě koncentrací ve vodním sloupci, tj. vodě nad sedimentem.
Normal distribution and variance homogeneity can be tested using an appropriate statistical test, e.g. the Shapiro-Wilk test and Levene test, respectively (p ≤ 0,05).
Zkušební roztoky zvolené koncentrace jsou obvykle připravovány ředěním zásobního roztoku.
One-way Analysis of Variance (ANOVA) and subsequent multi-comparison tests can be performed.
Zásobní roztoky by měly být připraveny rozpuštěním zkoušené chemické látky v ředicí vodě.
Multiple comparisons (e.g. Dunnett's test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test chemical concentrations (selection of the recommended test according to OECD Document 54 (9)).
V některých případech může být pro vytvoření zásobního roztoku o vhodné koncentraci nezbytné použití rozpouštědel nebo dispergátorů.
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) could be used to determine the NOEC and the LOEC.
Mezi vhodná rozpouštědla patří aceton, ethylenglykol-monoethylether, ethylenglykol-dimethylether, dimethylformamid a triethylenglykol.
the identity of the test chemical, batch, lot and CAS-number, purity;
Jako dispergátor mohou být použity Cremophor RH40, Tween 80, 0,01 % methylcelulosa a HCO-40.
physico-chemical properties of the test chemical (e.g. log Kow, water solubility, vapour pressure, Henry's constant (H) and preferably information on the fate of the test chemical in soil) if available;
b.
the formulation of the test chemical and the additives should be specified if not the pure chemical is tested;
Obohacené sedimenty zvolené koncentrace se obvykle připraví přidáním roztoku zkoušené chemické látky přímo do sedimentu.
identification of species and supplier of the test organisms, description of the breeding conditions and age range of test organisms;
Zásobní roztok zkoušené chemické látky rozpuštěné v deionizované vodě se smísí s připraveným sedimentem pomocí krouživé míchačky, míchačky krmiv nebo ručním smícháním.
detailed specification if natural soil is used (origin, history, particle size distribution, pH, organic matter content);
Je-li zkoušená chemická látka špatně rozpustná ve vodě, může být rozpuštěna v co nejmenším objemu vhodného organického rozpouštědla (např. hexanu, acetonu nebo chloroformu).
water holding capacity of the soil;
Tento roztok se pak smísí s 10 g jemného křemičitého písku na jednu zkušební nádobu.
description of the technique used to apply the test chemical to the soil;
Rozpouštědlo se nechá odpařit a mělo by být z písku zcela odstraněno;
pH and water content of the soil at the start and end of the test (control and each treatment);
písek se pak smísí s vhodným množstvím sedimentu.
detailed description of the extraction method and extraction efficiency;
K rozpuštění, dispergaci nebo emulgaci zkoušené chemické látky mohou být použita pouze činidla, která snadno vytěkají.
number of adults and their mortality (%) in each test vessel at the end of the test;
Uspořádání pro ECx, NOEC a limitní zkoušku jsou popsána níže.
all information and observations helpful for the interpretation of the results;
Uspořádání pro regresní analýzu
power of the actual test if hypothesis testing is done (9);
Zkouška by měla pokrývat účinnou koncentraci (ECx,) a rozsah koncentrací, při nichž dochází k účinku zkoušené chemické látky, který je předmětem zájmu, tak aby konečný ukazatel nebyl extrapolován mimo hranice získaných údajů.
deviations from procedures described in this Test Method and any unusual occurrences during the test;
Je třeba se vyhnout extrapolaci hluboko pod nejnižší koncentrací nebo přesahující nejvyšší koncentraci.
validity of the test;
Pro výběr vhodného rozsahu zkušebních koncentrací může být užitečná předběžná zkouška ke stanovení rozsahu koncentrací podle zkušební metody C.27 nebo C.28.
for NOEC, when estimated, the minimal detectable difference.
Pro stanovení ECx je požadováno nejméně pět koncentrací a osm opakování pro každou koncentraci.
Wiles JA and Krogh PH (1998) Testing with the collembolans I. viridis, F. candida and F. fimetaria.
Pro každou koncentraci by měly být použity dvě chovné klece (A a B).
In Handbook of soil invertebrate toxicity tests (ed.
Osm opakování se rozdělí do dvou skupin po čtyřech opakováních pro každou chovnou klec.
H Løkke and CAM Van Gestel), pp. 131-156.
Toto sloučení opakování je nezbytné vzhledem k počtu pakomárů, který je v kleci potřebný pro řádné posouzení reprodukce.
Chapter C.36 of this Annex, Predatory mite (Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer) reproduction test in soil.
Druhá generace však má opět osm opakování, jež pocházejí z exponovaných populací v chovných klecích.
Toxicity testing with the collembolans Folsomia fimetaria and Folsomia candida and the results of a ringtest.
Počet opakování při každé expozici lze snížit na šest (po třech pro každou chovnou klec), pokud se zvýší počet zkušebních koncentrací s různými odezvami.
Danish Environmental Protection Agency, Environmental Project No. 1256, pp. 66.
Zvýšení počtu opakování nebo zúžení rozsahu zkušebních koncentrací obvykle vede k zúžení intervalu spolehlivosti hodnoty ECx.
In Soil Zoology (Kevan D.K. McE., Ed).
Uspořádání odhadu NOEC
Butterworths, London, pp. 412-416
Pro stanovení NOEC se použije pět zkušebních koncentrací s nejméně osmi opakováními (po čtyřech pro každou chovnou klec, A a B) a faktor mezi koncentracemi by neměl být vyšší než 2.
Chemical is a substance or a mixture.
Počet opakování by měl být dostatečný, aby zajistil odpovídající statistickou významnost, s jakou má být rozeznán 20 % rozdíl oproti kontrolnímu vzorku na 5 % hladině významnosti (α = 0,05).
Main actions and timetable for performing a collembolan test
Pro rychlost vývoje, reprodukční schopnost a fertilitu je zpravidla vhodné použít analýzu rozptylu (ANOVA) s následným Dunnettovým nebo Williamsovým testem (22)(23)(24)(25).
Time (day)
Pro procento vylíhlých jedinců a poměr jejich pohlaví může být vhodný Cochranův-Armitageův test, Fisherův exaktní test (s Bonferroniho korekcí) nebo Mantelův-Haenszelův test.
Action
Může být provedena limitní zkouška (jedna zkušební koncentrace a kontrola (kontroly)), pokud nebyly zjištěny žádné účinky až po maximální koncentraci při volitelné předběžné zkoušce ke stanovení rozsahu koncentrací.
23 to – 26
Účelem limitní zkoušky je určit, že jakékoli toxické účinky zkoušené chemické látky se vyskytují při úrovních vyšších než zkoušený koncentrační limit.
Preparation of synchronous F. fimetaria culture
Pro zkoušku s vodou se doporučuje 100 mg/l a pro zkoušku se sedimentem 1000 mg/kg (sušiny).
Check pH of artificial soil and adjust accordingly
Obvykle je pro expozici i kontrolu zapotřebí alespoň osmi opakování.
9 to – 12
Počet opakování by měl být dostatečný, aby zajistil odpovídající statistickou významnost, s jakou má být rozeznán 20 % rozdíl oproti kontrolnímu vzorku na 5 % hladině významnosti (α = 0,05).
Preparation of synchronous F. candida culture
V případě spojité proměnné (např. rychlost vývoje) je t-test vhodnou statistickou metodou, pokud údaje splňují požadavky tohoto testu (normalita rozdělení, homogenní rozptyly).
2 to – 7
Pokud tyto požadavky splněny nejsou, lze použít t-test nestejných rozptylů nebo neparametrický test, jako je například Wilcoxonův-Mannův-Whitneyův test.
Pre-moist soil
Pro procento vylíhlých jedinců je vhodný Fisherův exaktní test.
Distribute juveniles into batches
Příprava systému voda-sediment (obohacení vody)
Prepare stock solutions and apply test chemical if solvent required
a.
stock solutions and apply test chemical if solid chemical, water soluble or surface application is required.
Do každé zkušební nádoby a krystalizační misky se přidá připravený sediment (viz odstavce 13–14 a dodatek 3) tak, aby tvořil vrstvu o hloubce nejméně 1,5 cm (v krystalizační misce může být poněkud nižší), avšak nejvýše 3 cm.
Measure soil pH and weigh the containers.
Přidá se voda (viz odstavec 15) tak, aby poměr hloubky vrstvy sedimentu a výšky vody nepřekročil 1:4.
Add food.
Po přípravě zkušebních nádob se systém sediment-voda před přidáním larev zkušebních organismů v prvním instaru první nebo druhé generace po dobu sedmi dnů mírně provzdušňuje (viz odstavec 14 a dodatek 3).
Introduce collembolans.
Systém sediment-voda v krystalizačních miskách se během zkoušky neprovzdušňuje, neboť nemusí podporovat přežití larev (šňůry vajíček se odeberou již před vylíhnutím).
Range-finding test F. fimetaria:
Bezprostředně poté se disk vyjme.
Definitive tests:
Mohou být vhodná i jiná zařízení.
Measure moisture content and replenish water and add 2-10 mg yeast
Příprava systému voda-sediment (obohacený sediment)
Definitive F. fimetaria test:
b.
Range-finding F. candida:
Obohacené sedimenty připravené podle odstavce 16.b se umístí do nádob a krystalizační misky a přidá se voda nad sediment tak, aby vznikl objemový poměr sedimentu a vody 1:4.
Definitive F. candida test:
Hloubka vrstvy sedimentu by se měla pohybovat v rozmezí od 1,5 do 3 cm (v krystalizační misce může být poněkud nižší).
Guidance on rearing and synchronisation of F. fimetaria and F. candida
Aby se zabránilo oddělení složek sedimentu a resuspenzi jemného materiálu v průběhu přidávání zkušební vody ve vodním sloupci, lze sediment přikrýt plastovým diskem, na který se voda nalije, a disk se bezprostředně poté vyjme.
The time and durations given in this guidance should be checked for each specific collembolan strain to ensure that timing will allow for sufficient synchronised juveniles.
Jakmile je obohacený sediment s vodou nad sedimentem připraven, je žádoucí umožnit průnik zkoušené chemické látky ze sedimentu do vodné fáze (4)(5)(7)(18).
Basically, the incidence of oviposition after the adults are transferred to fresh substrate and egg hatching determines the appropriate day for egg collection and collection of synchronous juveniles.
Vhodná doba k dosažení rovnováhy je specifická pro konkrétní sediment a chemickou látku a může se pohybovat v řádu hodin až dní, zřídka až pět týdnů.
It is recommended to have a permanent stock culture consisting of e.g. 50 containers/Petri dishes.
Vzhledem k tomu, že taková doba by umožnila rozklad mnoha chemických látek, nečeká se na dosažení rovnováhy, ale doporučuje se vyrovnávací doba v trvání 48 hodin.
The stock culture should be kept in a good feeding condition by weekly feeding, watering and removal of old food and carcasses.
Je-li však známo, že daná chemická látka má dlouhý poločas rozkladu v sedimentu (viz odstavec 8), lze dobu pro ustavení rovnováhy prodloužit.
Too few collembolans on the substrate may result in inhibition by more fungal growth.
Na konci této prodloužené doby pro ustavení rovnováhy by se měla změřit koncentrace zkoušené chemické látky ve vodě nad sedimentem, v kapilární vodě a v sedimentu, a to alespoň při nejvyšší koncentraci a při jedné nižší koncentraci (viz odstavec 38).
If the stock culture is used for egg production too often, the culture may get fatigue.
Tato analytická stanovení zkoušené chemické látky umožňují vypočítat hmotnostní bilanci a vyjádřit výsledky na základě naměřených koncentrací.
Signs of fatigue are dead adults and mould on the substrate.
Zkušební nádoby se přikryjí (například skleněnými destičkami).
The remaining eggs from the production of synchronous animals can be used to rejuvenate the culture.
Pokud je to nutné, v průběhu studie se hladina vody doplňuje na původní objem s cílem kompenzovat odpařování vody.
In a synchronous culture of F. fimetaria, males are distinguished from females primarily by size.
K tomuto účelu by měla být použita destilovaná nebo deionizovaná voda, aby se zabránilo hromadění solí.
Males are clearly smaller than females, and the walking speed of the males is faster than for females.
Krystalizační misky v chovných klecích se nezakrývají a mohou, ale nemusí být doplňovány, aby se nahradila ztráta vody během zkušební doby, neboť šňůry vajíček jsou ve styku s vodou pouze přibližně jeden den a misky se používají pouze během krátké fáze zkoušky.
Correct selection of the gender requires little practice and can be confirmed by microscopic inspection of the genital area (13).
Čtyři až pět dnů před přidáním larev v prvním instaru první generace by měly být z kultury odebrány shluky vajíček a měly by být umístěny do malých nádob do kultivačního média.
Preparation of culturing substrate
Lze použít starší médium ze zásobní kultury nebo čerstvě připravené médium.
The culturing substrate is plaster of Paris (calcium sulphate) with activated charcoal.
V každém případě by mělo být do kultivačního média přidáno malé množství potravy, např. několik kapek filtrátu z jemně mleté suspenze vločkového krmiva pro ryby (viz dodatek 2).
This provides a moist substrate, with the function of the charcoal being to absorb waste gases and excreta (14) (15).
Měly by se použít pouze čerstvě nakladené shluky vajíček.
Different forms of charcoal may be used to facilitate observations of the Collembola.
Za běžných okolností se larvy začínají líhnout několik dní po nakladení vajíček (2 až 3 dny u C. riparius při 20 °C a 1 až 4 dny u C. dilutus při 23 °C a C. yoshimatsui při 25 °C) a během larválního vývoje se vystřídají čtyři instary, z nichž každý trvá 4–8 dnů.
For example, powdered charcoal is used for F. candida and F. fimetaria (producing a black/grey plaster of Paris):
Při zkoušce se použijí larvy prvního instaru (nejvýše 48 h po vylíhnutí).
Substrate constituents:
Stadium instaru pakomárů lze případně zkontrolovat pomocí šířky hlavové kapsuly (7).
20 ml of activated charcoal
Dvacet larev v prvním instaru první generace se pomocí pipety bez špičky náhodně rozdělí do jednotlivých zkušebních nádob obsahujících systém sediment-voda.
200 ml of distilled water
Provzdušňování vody se při přidávání larev do zkušebních nádob ukončí a znovu by se mělo zahájit nejdříve po uplynutí 24 hodin od přidání larev (viz odstavec 32).
200 ml of plaster of Paris
Podle zvoleného uspořádání zkoušky (viz odstavce 19 a 20) je počet larev užitý na jednu koncentraci minimálně 120 pro stanovení ECx (6 opakování pro každou koncentraci) a 160 pro stanovení NOEC (8 opakování pro každou koncentraci).
50 g of activated pulverized charcoal
V uspořádání s obohaceným sedimentem expozice začíná přidáním larev.
260-300 ml of distilled water
Obohacení vody nad sedimentem
400 g plaster of Paris.
Po 24 hodinách od přidání larev v prvním instaru první generace se zkoušená chemická látka vmísí do sloupce vody nad sedimentem a znovu se zavede mírné provzdušňování (ohledně možných změn v uspořádání zkoušky viz odstavec 7).
The substrate mixture is allowed to set before use.
Pod hladinou vody se pomocí pipety aplikují malé objemy roztoků zkoušené chemické látky.
Breeding
Voda nad sedimentem se poté opatrně promíchá, aby se sediment nerozrušil.
Collembolans are held in containers such as Petri dishes (90 mm × 13 mm), with the bottom covered by a 0,5 cm layer of plaster /charcoal substrate.
Při uspořádání s obohacenou vodou expozice začíná obohacením vody (tj. jeden den po přidání larev).
They are cultured at 20 ± 1 °C at a light-dark cycle of 12-12 hours (400-800 Lux).
Sběr vylíhlých dospělců
Containers are kept moist at all times ensuring that the relative humidity of the air within the containers is 100 %.
Vylíhlí pakomáři první generace se nejméně jednou, lépe však dvakrát denně (viz odstavec 36) odebírají ze zkušebních nádob pomocí odsavače, exhaustoru nebo obdobného zařízení (viz dodatek 5).
This can be guaranteed by presence of free water within the porous plaster, but avoiding generating a water film on the plaster surface.
Zvláště je třeba dbát na to, aby se dospělci nepoškodili.
Water loss can be prevented by providing a humid ambient air.
Odebraní pakomáři ze čtyř zkušebních nádob v rámci jedné expozice se vypustí do chovné klece, ke které byli předtím přiděleni.
Any dead individuals should be removed from the containers, as should any mouldy food.
V den prvního vylíhnutí (samečka) se do krystalizačních misek pod hladinu vody pipetou přidá malé množství zkoušené chemické látky (uspořádání s obohacenou vodou).
To stimulate production of eggs it is necessary to transfer the adult animals to Petri dishes with newly prepared plaster of Paris/charcoal substrate.
Koncentrace zkoušené chemické látky v krystalizační misce je stejná jako v expozičních nádobách, které jsou přiděleny k dané konkrétní chovné kleci.
Granulated dried baker's yeast is used as the sole food supply for both F. candida and F. fimetaria.
Při uspořádání s obohaceným sedimentem se krystalizační misky připraví přibližně v den 11 po zahájení expozice (tj. po zavedení larev první generace) tak, aby mohly být během asi 48 hodin před vložením prvních šňůr vajíček uvedeny do rovnováhy.
Fresh food is provided once or twice a week, to avoid moulding.