natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Analýza se poté provede se zmenšeným počtem paralelních nádob.
This adds to the uncertainty in using a model to predict an uptake rate constant for a different type of substance, in addition to test-specific considerations like species, temperature, etc.
Souhrnně vyjádřeno, jsou-li pro vyjádření účinků použity LOEC a NOEC nebo ECx, doporučuje se vypočítat účinek na reprodukci s použitím obou proměnných odezvy uvedených výše, tj.
A review of available techniques (11) highlighted that no one method is “more correct” than the others.
jako celkový počet živých potomků pocházejících z jednoho rodičovského organismu, který během zkoušky náhodně nebo bezděčně neuhynul, a
Therefore, a clear justification should be given for the model used.
jako počet živých potomků pocházejících z jednoho přeživšího rodičovského organismu;
Where several methods are available for which the use can be justified, it may be prudent to present several estimates of k1 (and so BCF) or a range of k1 values (and BCF) according to several uptake estimation methods.
a poté jako konečný výsledek použít nejnižší hodnotu NOEC a LOEC nebo ECx vypočítanou pomocí jednoho z těchto dvou proměnných účinků.
However, given the differences in model types and datasets used to develop them, taking a mean value from estimates derived in different ways would not be appropriate.
Před provedením statistické analýzy, např. postupů ANOVA, porovnání zkušební skupiny s kontrolními skupinami pomocí Studentova t-testu, Dunnettova testu, Williamsova testu nebo Jonckheerova-Terpstrova testu sestupného trendu se doporučuje zvážit transformaci údajů, je-li to nezbytné pro splnění požadavků daného statistického testu.
Some researchers have postulated that BCF estimates of this sort require a bioavailability correction to account for a substance's adsorption to dissolved organic carbon (DOC) under aqueous exposure conditions, to bring the estimate in line with results from aqueous exposure studies (e.g. (13) (14)).
Jako neparametrické alternativy lze zvážit Dunnův nebo Mannův-Whitneyův test.
Howeverl this correction may not be appropriate given the low levels of DOC required in an aqueous exposure study for a ‘worst case’ estimate (i.e. ratio of bioavailable substance to substance as measured in solution).
Normalitu rozdělení a homogenitu rozptylu lze prověřit vhodným statistickým testem, např. Shapirovým-Wilkovým testem, případně Leveneovým testem (p ≤ 0,05).
For highly hydrophobic substances uptake at the gill may become limited by the rate of passive diffusion near the gill surface; in this case it is possible that the correction may be accounting for this effect rather than what it was designed for.
Je možné provést jednocestnou analýzu ANOVA a následné mnohonásobné srovnávací testy.
It is advised to focus on methods that require inputs for which data will be readily available for substances tested according to the dietary study described here (i.e. log KOW, fish weight).
Pro výpočet, zda existují významné rozdíly (p ≤ 0,05) mezi kontrolními skupinami a různými koncentracemi zkoušené chemické látky, je možné použít mnohonásobné srovnávání (např. Dunnettův test) nebo testy sestupného trendu (např. Williamsův test nebo Jonckheerův-Terpstrův test sestupného trendu) (výběr doporučeného testu se provede podle dokumentu OECD č. 54 (4)).
Other methods that require more complex inputs may be applied, but may need additional measurements in the test or detailed knowledge on the test substance or fish species that may not be widely available.
Nebo lze k určení NOEC a LOEC použít neparametrické metody (např. Bonferroniho U-test podle Holma nebo Jonckheerovu-Terpstrovu zkoušku trendu).
In addition, choice of model may be influenced by the level of validation and applicability domain (see (11) for a review and comparison of different methods).
Byla-li provedena limitní zkouška (porovnání kontrolní skupiny a pouze jedné exponované skupiny) a jsou-li splněny podmínky pro parametrické zkušební postupy (normalita rozdělení, homogenita rozptylu), je možné hodnotit spojité proměnné pomocí Studentova testu (t-testu).
It should be borne in mind that the resulting k1 estimate, and estimated BCF, are uncertain and may need to be treated in a weight-of-evidence approach along with the derived BMF and substance parameters (e.g. molecular size) for an overall picture of a substance's bioaccumulation potential.
Pokud tyto požadavky nejsou splněny, lze použít t-test nestejných rozptylů (např. Welchův test) nebo neparametrický test, např. Mannův-Whitneyův U-test.
Interpretation and use of these parameters may depend on the regulatory framework.
Pro určení významných rozdílů mezi kontrolními skupinami (kontrolní a kontrolní s rozpouštědlem nebo dispergátorem) je možné každou kontrolní skupinu podrobit opakovaným zkouškám, jak bylo popsáno u limitní zkoušky.
Sijm D.T.H.M., Verberne M.E., de Jonge W.J., Pärt P. and Opperhuizen A. (1995), Allometry in the uptake of hydrophobic chemicals determined in vivo and in isolated perfused gills.
Pokud tyto zkoušky neodhalí významné rozdíly, údaje ze všech opakování s kontrolou a kontrolou s rozpouštědlem je možné sloučit.
In the wild the route leading to greatest exposure in aqueous environments is likely to be through ingestion for very hydrophobic substances and so an estimated BCF is not strictly representative of such a substance's bioaccumulation potential.
V opačném případě by všechny expozice měly být porovnány s kontrolou s rozpouštědlem.
In Part C, Chapter C.20 is replaced by the following:
Závěrečná zpráva obsahuje následující informace:
Daphnia magna Reproduction Test
fyzikální povaha a podstatné fyzikálně-chemické vlastnosti,
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 211 (2012).
údaje o chemické identifikaci včetně údaje o čistotě.
OECD test guidelines are periodically reviewed in the light of scientific progress.
klon (byl-li geneticky popsán), dodavatel nebo zdroj (je-li znám) a použité kultivační podmínky.
The reproduction test guideline 211 originates from test guideline 202, Part II, Daphnia sp. reproduction test (1984).
Byl-li použit jiný druh než Daphnia magna, musí to být uvedeno a zdůvodněno.
It had generally been acknowledged that data from tests performed according to that TG 202 could be variable.
použitý zkušební postup (např. semistatická nebo průtoková metoda, objem, velikost obsádky v počtu dafnií na litr),
This led to considerable effort being devoted to the identification of the reasons for this variability with the aim of producing a better test method.
fotoperioda a intenzita světla,
Test guideline 211 is based on the outcome of these research activities, ring-tests and validation studies performed in 1992 (1), 1994 (2) and 2008 (3).
uspořádání zkoušky (např. počet opakování, počet rodičovských organismů na jedno opakování (paralelní nádobu)),
The main differences between the initial version (TG 202, 1984), and second version (TG 211, 1998) of the reproduction test guideline are:
podrobnosti o použitém kultivačním médiu,
the recommended species to be used is Daphnia magna;
přidané organické materiály, byly-li použity, včetně složení, zdroje, metody přípravy, TOC/COD výchozích preparátů, odhad výsledného TOC/COD ve zkušebním médiu,
the test duration is 21 days;
podrobné informace o krmení, zejména množství (v mg C na dafnii za den) a harmonogram (např. typ krmiva, včetně specifického názvu (druhu) u řas a kmene, je-li znám, a kultivační podmínky),
for semi-static tests, the number of animals to be used at each test concentration has been reduced from at least 40, preferably divided into four groups of 10 animals, to at least 10 animals held individually (although different designs can be used for flow-through tests);
metoda přípravy zásobních roztoků a četnost obnovování (jsou-li použity, uvedou se rozpouštědlo nebo dispergátor a jejich koncentrace).
more specific recommendations have been made with regard to test medium and feeding conditions.
výsledky případných předběžných studií stability zkoušené chemické látky,
the main differences between the second version of the reproduction test guideline (TG 211, 1998) and this version are:
úplný záznam o produkci živých potomků během zkoušky na každý rodičovský organismus (viz příklad formuláře pro přehled údajů v dodatku 3),
appendix 7 has been added to describe procedures for the identification of neonate sex if required.
počet uhynulých rodičovských organismů a den, kdy k úhynu došlo (viz příklad formuláře pro přehled údajů v dodatku 4),
In line with previous versions of this test method sex ratio is an optional endpoint;
variační koeficient reprodukční schopnosti kontrolních skupin (založený na celkovém počtu živých potomků na rodičovský organismus, přeživší do konce zkoušky),
the response variable number of living offspring produced per surviving parental animal has been supplemented with an additional response variable for Daphnia reproduction, i.e. the total number of living offspring produced at the end of the test per parent daphnia at the start of the test excluding from the analysis parental accidental and/or inadvertent mortality.
křivka závislosti celkového počtu živých potomků pocházejících z jednoho rodičovského organismu v každé paralelní nádobě, kromě rodičovských organismů, které případně náhodně nebo bezděčně uhynuly během zkoušky, na koncentraci zkoušené chemické látky,
The purpose of the added response variable is to align this response variable with other reproduction test methods on invertebrates.
případně křivka závislosti celkového počtu živých potomků pocházejících z jednoho přeživšího rodičovského organismu v každé paralelní nádobě na koncentraci zkoušené chemické látky,
Furthermore, in relation to this response variable, it is possible, in this test method, to remove a source of error, namely the effect of inadvertent and/or accidental parental mortality, should that occur during the exposure period.
je-li k dispozici, nejnižší koncentrace s pozorovanými účinky (LOEC) na reprodukci, včetně popisu použitých statistických metod a údaje o velikosti účinku, jehož detekci lze předpokládat (k získání tohoto údaje je možné před začátkem experimentu provést analýzu výkonu), a koncentrace bez pozorovaných účinků (NOEC) na reprodukci; informace o tom, která proměnná odezvy byla použita pro výpočet hodnot LOEC a NOEC (buď jako celkový počet živých potomků na rodičovský organismus, který během zkoušky náhodně nebo bezděčně neuhynul, anebo jako celkový počet živých potomků na přeživší rodičovský organismus), a je-li k dispozici, uvede se LOEC/NOEC pro mortalitu rodičovských organismů,
additional statistical guidance for test design and for treatment of results has been included both for ECx (e.g. EC10 or EC50) and for NOEC/LOEC approach.
je-li k dispozici, ECx pro reprodukci a interval spolehlivosti (např. 90 % nebo 95 %), dále graf křivky modelu použitého pro její výpočet, směrnice křivky závislosti koncentrace-reakce a její směrodatná odchylka,
a limit test is introduced.
jiné pozorované biologické účinky a jiná měření: uvedou se jakékoli jiné biologické účinky, které byly pozorovány nebo změřeny (např. růst rodičovských organismů), včetně přiměřeného zdůvodnění,
Definitions used are given in Appendix 1.
zdůvodnění jakékoli odchylky od této zkušební metody.
The primary objective of the test is to assess the effect of chemicals on the reproductive output of Daphnia magna.
OECD (2000), Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures, Environmental Health and Safety Publications, Series on Testing and Assessment No.
To this end, young female Daphnia (the parent animals), aged less than 24 hours at the start of the test, are exposed to the test chemical added to water at a range of concentrations.
Pro účely této zkušební metody se použijí tyto definice:
The test duration is 21 days.
Náhodná mortalita
At the end of the test, the total number of living offspring produced is assessed.
mortalita, která nesouvisí s chemickou látkou a je vyvolána nahodilými okolnostmi (tj. známou příčinou).
Reproductive output of the parent animals can be expressed in other ways (e.g. number of living offspring produced per animal per day from the first day offspring were observed) but these should be reported in addition to the total number of living offspring produced at the end of the test.
koncentrace zkoušené chemické látky rozpuštěné ve vodě, která pro danou expoziční dobu vede k x % snížení reprodukce dafnií.
This enables that, contrary to other invertebrate reproduction test methods, if the parent animal dies accidentally and/or inadvertently during the test period, its offspring production can be excluded from data assessment.
míra růstu populace, v níž je zahrnuta reprodukční schopnost a mortalita související s věkem (1) (2) (3).
If the parent animal dies during the test i.e. accidentally from mishandling or accident, or inadvertently due to unexplained incident not related to the effect of the test chemical or turns out to be male, then the replicate is excluded from the analysis (see more in paragraph 51).
V rovnovážném stavu bude nulový.
The toxic effect of the test chemical on reproductive output is expressed as ECx by fitting the data to an appropriate model by non-linear regression to estimate the concentration that would cause x % reduction in reproductive output, respectively, or alternatively as the NOEC/LOEC value (4).
Pro rostoucí populaci bude kladná a pro snižující se populaci bude záporná.
The test concentrations should preferably bracket the lowest of the used effect concentrations (e.g. EC10) which means that this value is calculated by interpolation and not extrapolation.
Je zřejmé, že při záporném růstu nelze druh zachovat a nakonec dojde k jeho vyhynutí.
The survival of the parent animals and time to production of first brood should also be reported.
Mez detekovatelnosti
Other chemical-related effects on parameters such as growth (e.g. length), and possibly intrinsic rate of population increase, can also be examined (see paragraph 44).
nejnižší koncentrace, v níž lze látku detekovat, nikoli však stanovit.
INFORMATION ON THE TEST CHEMICAL
Mez stanovitelnosti
Results of an acute toxicity test (see chapter C.2 of this Annex: Daphnia sp. acute immobilisation test) performed with Daphnia magna may be useful in selecting an appropriate range of test concentrations in the reproduction tests.
nejnižší koncentrace, v níž lze látku kvantitativně naměřit.
The water solubility and the vapour pressure of the test chemical should be known and a reliable analytical method for the quantification of the chemical in the test solutions with reported recovery efficiency and limit of determination should be available.
Nejnižší koncentrace s pozorovanými účinky (lowest observed effect concentration, LOEC)
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes the structural formula, purity of the chemical, stability in light, stability under the conditions of the test, pKa, Pow and results of a test for ready biodegradability (see chapters C.4 (determination of ‘ready’ biodegradability), and C.29 (ready biodegradability — CO2 in sealed vessels) of this Annex).
nejnižší zkušební koncentrace, při níž je pro danou expoziční dobu pozorován statisticky významný účinek chemické látky na reprodukci a na mortalitu rodičovských organismů (při p < 0,05) ve srovnání s kontrolou.
For a test to be valid, the following performance criteria should be met in the control(s):
Všechny zkušební koncentrace vyšší než LOEC musí však mít stejné nebo závažnější škodlivé účinky, než jsou účinky pozorované při koncentraci LOEC.
the mortality of the parent animals (female Daphnia) does not exceed 20 % at the end of the test;
Nelze-li tyto dvě podmínky splnit, mělo by být podrobně vysvětleno, jak byla LOEC (a tedy i NOEC) zvolena.
the mean number of living offspring produced per parent animal surviving at the end of the test is ≥ 60.
organismus se zaznamená jako mrtvý, je-li nepohyblivý, tj. není-li schopen plavat nebo není-li u končetin nebo zadečku pozorován pohyb do 15 sekund po lehkém zatřepání zkušební nádobou.
Note: The same validity criterion (20 %) can be used for accidental and inadvertent parental mortality for the controls as well as for each of the test concentrations.
(Použije-li se jiná definice, měla by být uvedena společně s odkazem na literaturu.)
Test vessels and other apparatus, which will come into contact with the test solutions, should be made entirely of glass or other chemically inert material.
Koncentrace bez pozorovaných účinků (no observed effect concentration, NOEC)
The test vessels will normally be glass beakers.
zkušební koncentrace bezprostředně nižší než LOEC, která při srovnání s kontrolní skupinou nemá pro danou expoziční dobu statisticky významný účinek (při p < 0,05).
In addition, some or all of the following equipment will be required:
mladé dafnie pocházející z rodičovských organismů v průběhu zkoušky.
oxygen meter (with microelectrode or other suitable equipment for measuring dissolved oxygen in low volume samples);
Rodičovské organismy
adequate apparatus for temperature control;
dafnie samičího pohlaví, které jsou přítomné na začátku zkoušky, a jejich reprodukční schopnost je předmětem studie
pH-meter;
Reprodukční schopnost
equipment for the determination of the hardness of water;
počet živých potomků pocházejících z rodičovských organismů za dobu zkoušky.
equipment for the determination of the total organic carbon concentration (TOC) of water or equipment for the determination of the chemical oxygen demand (COD);
jakákoli chemická substance nebo směs zkoušená touto zkušební metodou.
adequate apparatus for the control of the lighting regime and measurement of light intensity.
LITERATURA
Test Organism
PŘÍPRAVA PŘESNĚ DEFINOVANÝCH ELENDTOVÝCH MÉDIÍ M7 A M4
The species to be used in the test is Daphnia magna Straus [57].Preferably, the clone should have been identified by genotyping.
Aklimatizace na Elendtova média M7 a M4
Research (1) has shown that the reproductive performance of Clone A (which originated from IRCHA in France) (5) consistently meets the validity criterion of a mean of ≥ 60 living offspring per parent animal surviving when cultured under the conditions described in this test method.
Některé laboratoře narazily na obtíže při přímém přenosu dafnií do médií M4 (1) a M7.
However, other clones are acceptable provided that the Daphnia culture is shown to meet the validity criteria for the test.
Určitého úspěchu však bylo dosaženo postupnou aklimatizací, tj. s přenesením z vlastního média do 30 % Elendtova média, poté do 60 % Elendtova média a nakonec do 100 % Elendtova média.
At the start of the test, the animals should be less than 24 hours old and should not be first brood progeny.
Délky dob aklimatizace mohou být až jeden měsíc.
They should be derived from a healthy stock (i.e. showing no signs of stress such as high mortality, presence of males and ephippia, delay in the production of the first brood, discoloured animals, etc.).
Příprava
The stock animals should be maintained in culture conditions (light, temperature, medium, feeding and animals per unit volume) similar to those to be used in the test.
Z těchto oddělených zásobních roztoků (I) se připraví jeden zásobní roztok (II) obsahující všechny stopové prvky (směsný roztok), tj.:
It is recommended that a fully defined medium be used in this test.
Zásobní roztok (roztoky) I
This can avoid the use of additives (e.g. seaweed, soil extract), which are difficult to characterise, and therefore improves the opportunities for standardisation between laboratories.
(jednotlivá látka)
Elendt M4 (6) and M7 media (see Appendix 2) have been found to be suitable for this purpose.
Množství přidané do vody
However, other media (e.g. (7) (8)) are acceptable provided the performance of the Daphnia culture is shown to meet the validity criteria for the test.
Koncentrace (vzhledem k médiu M4)
If media are used which include undefined additives, these additives should be specified clearly and information should be provided in the test report on composition, particularly with regard to carbon content as this may contribute to the diet provided.
Kombinovaný zásobní roztok II se připraví přidáním následujícího množství zásobního roztoku I do vody
It is recommended that the total organic carbon (TOC) and/or chemical oxygen demand (COD) of the stock preparation of the organic additive be determined and an estimate of the resulting contribution to the TOC/COD in the test medium made.
staré
It is further recommended that TOC levels in the medium (i.e. before addition of the algae) be below 2 mg/l (9).
MoO4 · 2 H2O
When testing chemicals containing metals, it is important to recognise that the properties of the test medium (e.g. hardness, chelating capacity) may have a bearing on the toxicity of the test chemical.
Jak roztok Na2EDTA, tak roztok FeSO4 se připraví samostatně, spojí se a ihned se autoklávují.
For this reason, a fully defined medium is desirable.
Získají se:
However, at present, the only fully defined media which are known to be suitable for long-term culture of Daphnia magna are Elendt M4 and M7.
Roztok Fe-EDTA.
Both media contain the chelating agent EDTA.
Média M4 a M7
Work has shown (2) that the ‘apparent toxicity’ of cadmium is generally lower when the reproduction test is performed in M4 and M7 media than in media containing no EDTA.
Média M4 a M7 se připraví ze zásobního roztoku II, makroživin a vitaminů tímto způsobem:
M4 and M7 are not, therefore, recommended for testing chemicals containing metals, and other media containing known chelating agents should also be avoided.
Množství zásobního roztoku přidané za účelem přípravy média
For metal-containing chemicals it may be advisable to use an alternative medium such as, for example, ASTM reconstituted hard fresh water (9), which contains no EDTA.
Zásobní roztok II
This combination of ASTM reconstituted hard fresh water and seaweed extract (10) is suitable for long-term culturing of Daphnia magna (2).
(obsahující kombinaci stopových prvků)
The dissolved oxygen concentration should be above 3 mg/l at the beginning and during the test.
Zásobní roztok makroživin (jednotlivá látka)
The pH should be within the range 6 - 9, and normally it should not vary by more than 1,5 units in any one test.
Kombinovaný vitaminový zásobní roztok
Hardness above 140 mg/l (as CaCO3) is recommended.
Kombinovaný vitaminový zásobní roztok se připraví přidáním 3 vitaminů do 1 litru vody takto:
Tests at this level and above have demonstrated reproductive performance in compliance with the validity criteria (11) (12).
Thiaminhydrochlorid
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by dilution of a stock solution.
Kyanokobalamin (B12)
Stock solutions should preferably be prepared, without using any solvents or dispersants if possible, by mixing or agitating the test chemical in test medium using mechanical means such as agitating, stirring or ultrasonication, or other appropriate methods.
Biotin
It is preferable to expose test systems to concentrations of the test chemical to be used in the study for as long as is required to demonstrate the maintenance of stable exposure concentrations prior to the introduction of test organisms.
Kombinovaný vitaminový zásobní roztok se uskladňuje zmrazený v malých stejnoměrných dílech.
If the test chemical is difficult to dissolve in water, procedures described in the OECD Guidance for handling difficult substances should be followed (13).
Vitaminy se do média přidávají krátce před použitím.
The use of solvents or dispersants should be avoided, but may be necessary in some cases in order to produce a suitably concentrated stock solution for dosing.
Aby nedošlo při přípravě kompletního média k vysrážení solí, přidají se díly zásobních roztoků do asi 500–800 ml deionizované vody a objem se poté doplní na 1 litr.
A dilution water control with adequate replicates and, if unavoidable, a solvent control with adequate replicates should be run in addition to the test concentrations.
Poprvé byly informace o médiu M4 uvedeny v práci Elendt, B. P. (1990).
Only solvents or dispersants that have been investigated to have no significant or only minimal effects on the response variable should be used in the test.