natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Hodnota pH půdy by se neměla upravovat, jestliže se zkoušejí kyselé nebo bazické chemické látky.
It has, however, been found to be easy to culture (E. Belotti, personal communication).
Obsah vlhkosti by se měl v průběhu zkoušky kontrolovat pravidelným vážením nádob (viz odstavec 26 a 30).
Breeding conditions
V této zkoušce se používá druh Eisenia fetida nebo Eisenia andrei (1, 2).
All the Enchytraeus-species mentioned above can be cultured in the same substrates used for E. albidus.
K zahájení zkoušky jsou potřeba dospělé žížaly ve stáří dvou měsíců až jednoho roku a s opaskem.
Their smaller size means that the culture vessels can be smaller and that, while the same food can be used, the ration size must be adjusted.
Žížaly by se měly vybrat ze synchronizované kultury s relativně homogenní věkovou strukturou (dodatek 4).
The life-cycle of these species is shorter than for E. albidus and feeding should be carried out more frequently.
Stáří jedinců ve zkušební skupině by se nemělo lišit o více než 4 týdny.
The test conditions are generally the same as those applying to E. albidus, except that:
Vybrané žížaly by se měly aklimatizovat alespoň po dobu jednoho dne v umělém půdním substrátu takového typu, který se použije ve zkoušce.
the size of the test vessel can (but need not) be smaller;
Během tohoto období by se měly žížaly krmit stejnou potravou, jaká se bude používat ve zkoušce (viz odstavce 31 až 33).
the duration of the reproduction test can (but need not) be shorter, i.e. four instead of six weeks;
Na začátku zkoušky by se měly individuálně zvážit skupiny po 10 žížalách a náhodně přiřadit do zkušebních nádob.
however, the duration of the Range-Finding Test should not be changed;
Před vážením se žížaly omyjí (deionizovanou vodou) a přebytečná voda se odstraní krátkým umístěním žížal na filtrační papír.
in view of the small size of the juvenile worms the use of the staining method is strongly recommended for counting;
Mokrá hmotnost jednotlivých žížal by se měla pohybovat mezi 250 a 600 mg.
the validity criterion relating to “number of juveniles per test vessel in the control” should be changed to “50”.
Lze použít dvě metody aplikace zkoušené chemické látky:
Appendix 6
zamíchání zkoušené chemické látky do půdy (viz odstavce 19–21) nebo její aplikace na povrch půdy (viz odstavce 22–24).
Detailed description of extraction techniques
Rozpouštědla použitá k ošetření půdy zkoušenou chemickou látkou by se měla zvolit na základě jejich nízké toxicity pro žížaly a v uspořádání zkoušky musí být zahrnuta příslušná kontrola s rozpouštědlem (viz odstavec 27).
At the end of the Definitive Test (i.e. after six weeks), the soil in the test vessels is transferred to a shallow container.
K usnadnění přípravy zkušebního roztoku může být nutné pomocné rozpouštědlo.
5 ml per replicate).
Před umístěním do zkušební nádoby se roztok důkladně smíchá s půdním substrátem.
A few drops (200 to 300 μl) of Bengal red (1 % solution in ethanol) are added (0,5 % eosin is an alternative) and the two components are mixed carefully.
Zkoušená chemická látka se rozpustí v malém objemu vhodného organického rozpouštědla (např. acetonu) a poté se nastříká na malé množství jemného křemenného písku nebo se s ním smísí.
After 12 hours, the worms should be stained a reddish colour and should be easy to count because they will be lying on the substrate surface.
Poté se rozpouštědlo odstraní odpařováním v digestoři po dobu alespoň několika minut.
Alternatively, the substrate/alcohol mixture can be washed through a sieve (mesh size: 0,250 mm) before counting the worms.
Ošetřený písek se poté důkladně smísí s předem zvlhčenou umělou půdou.
Using this procedure, the kaolinite, peat, and some of the sand will be washed out and the reddish coloured worms will be easier to see and count.
Zkoušená chemická látka nerozpustná ve vodě a organických rozpouštědlech
The wet extraction should be started immediately the test finishes.
Připraví se směs obsahující 10 g jemně mletého průmyslového křemenného písku s množstvím zkoušené chemické látky nutným k dosažení zkušební koncentrace v půdě.
The soil from each test vessel is placed into plastic sieves with a mesh size of approximately 1 mm.
Směs se poté důkladně promísí s předem zvlhčenou umělou půdou.
The sieves are then suspended in plastic bowls without touching the bottom.
Aplikace zkoušené chemické látky na povrch půdy
At the end of the extraction period the sieves are removed and the water (except for a small amount) is slowly decanted, taking care not to disturb the sediment at the bottom of the bowls.
Půda se ošetří po přidání žížal.
The plastic bowls are then shaken slightly to suspend the sediment in the overlying water.
Zkušební nádoby se nejprve naplní zvlhčeným půdním substrátem a zvážené žížaly se umístí na povrch.
The water is transferred to a petri dish and, after the soil particles have settled), the enchytraeids can be identified, removed and counted using a stereomicroscope and soft steel forceps.
Zdravé žížaly se obvykle okamžitě zavrtají do substrátu, tudíž všichni jedinci, kteří na povrchu zůstanou po 15 minutách, se považují za poškozené a musí se nahradit.
Flotation
Pokud se nějaké žížaly nahrazují, měli by se noví jedinci a nahrazovaní jedinci zvážit, aby byla na začátku zkoušky známa celková živá hmotnost exponované skupiny žížal a celková hmotnost nádoby se žížalami.
A method based on flotation has been described in a note by R. Kuperman (4).
Aplikuje se zkoušená chemická látka.
After fixing the contents of a test vessel with ethanol, the soil is flooded with Ludox (AM-30 colloidal silica, 30 wt. % suspension in water) up to 10 to 15 mm above the soil surface.
Neměla by se do půdy přidávat dříve než za půl hodiny po umístění žížal (nebo pokud se žížaly nacházejí na povrchu půdy), aby se zabránilo přímé expozici zkoušené chemické látce kontaktem s kůží.
After thoroughly mixing the soil with the flotation agent for 2 – 3 minutes, the juvenile worms floating on the surface can easily be counted.
Pokud je zkoušená chemická látka pesticid, může být vhodné aplikovat ji na povrch půdy postřikem.
SETAC 19th Annual Meeting, Charlotte, USA.
Zkoušená chemická látka by se měla aplikovat na povrch půdy pokud možno rovnoměrně rozprašovačem a za použití laboratorních vah, s cílem simulovat aplikaci postřikem na poli.
Abstract Book No.
Před aplikací by se mělo víko zkušební nádoby sejmout a nahradit vložkou, která chrání stěny nádoby před postřikem.
PMP069, p.
Vložka může být vyrobena ze zkušební nádoby s odstraněným dnem.
157.
Aplikace by se měla provádět při teplotě pohybující se v rozmezí 20 ± 2 °C a u vodných roztoků, emulzí nebo disperzí při aplikační dávce vody v rozmezí 600 a 800 μl/m2.
Appendix 7
Dávkování je třeba ověřit pomocí vhodné kalibrační techniky.
Overview of the statistical assessment of data (NOEC determination)
Speciální formy, jako jsou granule nebo moření semen, by se měly aplikovat způsobem odpovídajícím zemědělskému použití.
Dunnett's Test
Zkušební nádoby by se měly nechat nezakryté po dobu jedné hodiny, aby se mohl případný těkavý roztok spojený s aplikací zkoušené chemické látky vypařit.
William Test Transform data
Je třeba zajistit, aby během této doby neunikla ze zkušebních nádob žádná žížala.
Yes Yes
Doporučuje se nasazovat 10 žížal na 500–600 g suché hmotnosti umělé půdy (tj. 50–60 g půdy na jednu žížalu).
Yes Yes No
Pokud se použije větší množství půdy, například při zkouškách pesticidů se speciálním způsobem aplikace, jako je moření semen, měl by se udržet příděl 50–60 g půdy na jednu žížalu zvýšením počtu žížal.
Exclude control without solvent
Pro každou kontrolní nádobu a nádobu s ošetřenou půdou se připraví deset žížal.
Are both controls equal?
Žížaly se omyjí vodou, otřou a poté se na krátkou dobu umístí na savý papír, aby se odvedla přebytečná voda.
U-Test
Aby při rozdělování žížal do zkušebních nádob nedošlo k systematickým chybám, měla by se stanovit homogenita populace individuálním zvážením 20 žížal vybraných náhodně z populace, ze které budou pocházet žížaly použité k provedení zkoušky.
Are both controls equal? t-Test
Po zajištění homogenity se vyberou skupiny žížal, zváží se a randomizací (tj. náhodně) se přidělí do jednotlivých zkušebních nádob.
Bonferroni — U-Test
Po přidání pokusných žížal by se měla zvážit hmotnost každé zkušební nádoby, aby se získala hodnota počáteční hmotnosti, kterou lze použít jako výchozí bod pro sledování obsahu vlhkosti v půdě v průběhu zkoušky, jak je popsáno v odstavci 30.
Jonckheere-Terpstra Test Shirley Test
Zkušební nádoby se poté zakryjí způsobem popsaným v odstavci 9 a umístí se do zkušební komory.
Dunn's Test
Pro každou z metod aplikace zkoušené chemické látky popsaných v odstavci 18 až 24 se připraví odpovídající kontroly.
Both controls might be pooled
Je třeba dodržovat popsané příslušné postupy přípravy kontrol s výjimkou, že není přidána zkoušená chemická látka.
Additional solvent control?
V odpovídajících případech se tedy aplikují organická rozpouštědla, křemenný písek či jiné nosiče i na kontroly v koncentracích/množstvích odpovídajících těm, které byly použity k ošetření půdy.
Statistical testing not recommended
Pokud se ke zkoušené chemické látce přidává rozpouštědlo nebo jiný nosič, měla by se rovněž připravit a otestovat další kontrola bez nosiče či zkoušené chemické látky, aby se zajistilo, že nosič nemá na žádný vliv výsledek.
At least four replicates per treatment?
Zkouška se provádí při řízených cyklech osvětlení-tmy (pokud možno 16 hodin světlo a 8 hodin tma) s intenzitou osvětlení v místě se zkušebními nádobami o hodnotě 400 až 800 luxů.
No success
Zkušební nádoby se během zkoušky neprovzdušňují, ale konstrukce vík zkušebních nádob by měla umožňovat výměnu plynů a zároveň omezovat vypařování vlhkosti (viz odstavec 9).
Data:
Obsah vody v půdním substrátu ve zkušebních nádobách se během zkoušky udržuje a sleduje opakovaným pravidelným vážením zkušebních nádob (bez vík).
Variation homogenous?
Ztráty se doplňují podle potřeby deionizovanou vodou.
Distribution normal?
Obsah vody by se neměl lišit o více než 10 % od hodnoty na začátku zkoušky.
Start
Za přijatelnou se považuje jakákoli potrava o takové kvalitě, která je prokazatelně vhodná alespoň k udržení hmotnosti žížal během zkoušky.
Non-parametric Tests Parametric Tests
Zkušenosti ukázaly, že vhodnou potravou jsou ovesné vločky a kravský či koňský hnůj.
C.33.
Je třeba provádět kontroly zajišťující, že krávy či koně, od kterých se hnůj získává, nejsou léčeni či ošetřováni chemickými látkami, například látkami podporujícími růst, nematocidy či podobnými veterinárními přípravky, které by mohly žížaly během zkoušky nepříznivě ovlivnit.
EARTHWORM REPRODUCTION TEST (EISENIA FETIDA/ EISENIA ANDREI )
Doporučuje se používat osobně odebraný kravský hnůj, neboť zkušenosti ukázaly, že komerčně dostupný kravský hnůj používaný jako zahradní hnojivo může mít na žížaly nežádoucí účinky.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 222 (2004).
Hnůj by se měl před použitím nechat vyschnout na vzduchu, jemně rozemlít a pasterizovat.
It is designed to be used for assessing the effects of chemicals in soil on the reproductive output (and other sub-lethal end points) of the earthworm species Eisenia fetida (Savigny 1826) or Eisenia andrei (Andre 1963) (1)(2).
Každá čerstvá dávka potravy by se měla před použitím ve zkoušce podat netestované kultuře žížal, aby se ověřilo, že je vhodné kvality.
The test has been ring-tested (3).
Růst a tvorba zámotků by se neměla snížit v porovnání s žížalami chovanými v substrátu, který neobsahuje novou dávku potravy (podmínky popsané ve zkušební metodě C.8(4)).
A test method for the earthworm acute toxicity test exists (4).
Potrava se poprvé podá jeden den po přidání žížal a aplikaci zkoušené chemické látky do půdy.
A number of other international and national guidelines for earthworm acute and chronic tests have been published (5)(6)(7)(8).
Přibližně 5 g potravy se rozptýlí na povrch půdy v každé nádobě a zvlhčí se deionizovanou vodou (asi 5 až 6 ml na jednu nádobu).
Eisenia fetida /Eisenia andrei are considered to be a one of representatives of soil fauna and earthworms in particular.
Poté se potrava podává jednou týdně během 4týdenního zkušebního období.
Background information on the ecology of earthworms and their use in ecotoxicological testing is available (7)(9)(10)(11)(12).
Pokud není veškerá potrava zkonzumována, měla by se její porce zmenšit, aby nedošlo k růstu hub nebo zplesnivění.
Adult worms are exposed to a range of concentrations of the test chemical either mixed into the soil or, in case of pesticides, applied into or onto the soil using procedures consistent with the use pattern of the chemical.
den zkoušky se z půdy odeberou dospělí jedinci.
The method of application is specific to the purpose of the test.
Poté se do každé zkušební nádoby přidá dalších 5 g potravy.
The range of test concentrations is selected to encompass those likely to cause both sub-lethal and lethal effects over a period of eight weeks.
Během zbývajících 4 týdnů zkoušky se již neprovádí žádné další krmení.
Mortality and growth effects on the adult worms are determined after 4 weeks of exposure.
Výběr zkušebních koncentrací
The adults are then removed from the soil and effects on reproduction assessed after a further 4 weeks by counting the number of offspring present in the soil.
Při výběru vhodných zkušebních koncentrací by měly pomoci předchozí znalosti toxicity zkoušené chemické látky, např. ze zkoušky akutní toxicity (4) a/nebo z orientačních studií.
The reproductive output of the worms exposed to the test chemical is compared to that of the control(s) in order to determine the (i) no observed effect concentration (NOEC) and/or (ii) ECx (e.g. EC10, EC50) by using a regression model to estimate the concentration that would cause a x % reduction in reproductive output.
Pokud je to nutné, provede se orientační zkouška, např. s pěti zkušebními koncentracemi 0,1, 1,0, 10, 100 a 1000 mg/kg (suché hmotnosti půdy).
The test concentrations should bracket the ECx (e.g. EC10, EC50) so that the ECx then comes from interpolation rather than extrapolation (see Appendix 1 for definitions).
Orientační zkouška trvá dva týdny a na jejím konci se vyhodnotí mortalita.
The following information relating to the test chemical should be available to assist in the design of appropriate test procedures:
Uspořádání experimentu
water solubility;
Hodnota NOEC bude pravděpodobně vyžadována regulačními orgány v dohledné budoucnosti.
vapour pressure;
V důsledku statistických a ekologických úvah může v blízké budoucnosti dojít k více rozšířenému používání hodnoty ECx Proto jsou navržena tři uspořádání, a to na základě doporučení vycházejících z okružního testu zkušební metody reprodukce roupic (17).
and information on fate and behaviour in the environment, where possible (e.g. rate of photolysis and rate of hydrolysis where relevant to application patterns).
Při určování rozpětí koncentrací je třeba brát v úvahu následující:
This test method is applicable to all chemicals irrespective of their water solubility.
Ke stanovení hodnoty NOEC by se mělo testovat alespoň pět/dvanáct koncentrací v geometrických posloupnostech.
The test method is not applicable to volatile chemicals, defined here as chemicals for which Henry's constant or the air/water partition coefficient is greater than one, or to chemicals with vapour pressures exceeding 0,0133 Pa at 25 °C.
Koncentrace by měly být rozloženy s faktorem nepřekračujícím 2,0.
No allowance is made in this test method for possible degradation of the test chemical over the period of the test.
Ke stanovení hodnoty ECx (např. EC10, EC50) se doporučuje použít dostačující počet koncentrací, aby vedl k alespoň čtyřem statisticky významným různým průměrným odezvám při těchto koncentracích.
Consequently it cannot be assumed that exposure concentrations will be maintained at initial values throughout the test.
Doporučují se alespoň dvě opakování pro každou zkoušenou koncentraci a šest kontrolních opakování.
Chemical analysis of the test chemical at the start and the end of the test is recommended in that case.
Doba trvání zkoušky a měření
The NOEC and/or the ECx of a reference chemical must be determined to provide assurance that the laboratory test conditions are adequate and to verify that the response of the test organisms does not change statistically over time.
den se provede pozorování živých dospělých žížal a spočítají se.
It is advisable to test a reference chemical at least once a year or, when testing is carried out at a lower frequency, in parallel to the determination of the toxicity of a test chemical.
Rovněž se zaznamená jakékoli neobvyklé chování (např. neschopnost zavrtat se do půdy; nehybně ležící jedinci) a morfologické změny (např. otevřené rány).
Carbendazim or benomyl are suitable reference chemicals that have been shown to affect reproduction (3).
Všechny dospělé žížaly se poté odeberou ze zkušebních nádob a zváží se.
Significant effects should be observed between (a) 1 and 5 mg active ingredient (a.i.)/kg dry mass or (b) 250-500 g/ha or 25-50 mg/m2.
Vyhledávání dospělých jedinců může usnadnit přemístění půdy se žížalami na čistý tác před hodnocením.
The following criteria should be satisfied in the controls for a test result to be considered valid:
Žížaly odebrané z půdy by se měly před vážením omýt (deionizovanou vodou) a přebytečná voda odstranit krátkým umístěním žížal na filtrační papír.
each replicate (containing 10 adults) to have produced ≥ 30 juveniles by the end of the test;
Všechny žížaly, které v tuto dobu nebudou nalezeny, se zaznamenají jako uhynulé, neboť se předpokládá, že takové žížaly uhynuly a rozložily se ještě před hodnocením.
the coefficient of variation of reproduction to be ≤ 30 %;
Pokud se půda přemisťovala z nádob, vrátí se zpět (bez dospělých žížal, ale se zámotky, které vytvořily).
adult mortality over the initial 4 weeks of the test to be ≤ 10 %.
Poté se půda inkubuje po další čtyři týdny za stejných zkušebních podmínek s jedinou výjimkou, že krmení proběhne pouze jednou, na začátku této fáze zkoušky (viz odstavec 33).
The justification should be included in the report.
Na konci druhého 4týdenního období se pomocí postupů popsaných v dodatku 5 určí počet nedospělých jedinců, kteří se vylíhli ze zámotků ve zkušební půdě, a počet zámotků.
Test containers made of glass or other chemically inert material of about one to two litres capacity should be used.
Během celého období zkoušky by se měly rovněž zaznamenávat všechny známky poranění či poškození žížal.
The containers should have a cross-sectional area of approximately 200 cm2 so that a moist substrate depth of about 5-6 cm is achieved when 500 to 600 g dry mass of substrate is added.
Pokud při nejvyšší koncentraci v orientační zkoušce (tj. 1000 mg/kg) nejsou pozorovány žádné účinky, provede se zkouška reprodukce jako limitní zkouška s použitím zkušební koncentrace 1000 mg/kg.
The design of the container cover should permit gaseous exchange between the substrate and the atmosphere and access to light (e.g. by means of a perforated transparent cover) whilst preventing the worms from escaping.
Limitní zkouška umožní prokázat, že hodnota NOEC pro reprodukci je větší než limitní koncentrace, a zároveň se minimalizuje počet žížal použitých ve zkoušce.
If the amount of test substrate used is substantially more than 500 to 600 g per test container the number of worms should be increased proportionately.
Mělo by se provést osm opakování s exponovanou půdou a osm s kontrolou.
water bath.
Přestože v dodatku 6 je uveden přehled statistických metod, nejsou u této zkušební metody uvedeny žádné závazné pokyny pro statistickou analýzu výsledků zkoušky.
An artificial soil is used in this test (5)(7) with the following composition (based on dry weights, dried to a constant weight at 105 °C):
Základním cílovým ukazatelem je mortalita.
10 per cent sphagnum peat (as close to pH 5,5 to 6,0 as possible, no visible plant remains, finely ground, dried to measured moisture content);
Měly by se však zaznamenat také změny chování (např. neschopnost zavrtat se do půdy; nehybně ležící jedinci nalepení na skleněnou stěnu nádoby) a morfologické změny (např. otevřené rány) dospělých žížal a rovněž přítomnost nedospělých jedinců.
20 per cent kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 per cent);
Ke stanovení hodnoty LC50 se obvykle používá probitová analýza (18) nebo logistická regrese.
0,3 to 1,0 % calcium carbonate (CaCO3, pulverised, analysis grade) to obtain an initial pH of 6,0 ± 0,5.
Nicméně v případech, kdy je tato metoda analýzy nevhodná (např. jsou k dispozici méně než tři koncentrace s usmrcením pouze části skupiny), lze použít alternativní metody.
70 % air-dried quartz sand (depending on the amount of CaCO3 needed), predominantly fine sand with more than 50 % of the particles between 50 and 200 microns.
Mezi tyto metody by mohly patřit klouzavé průměry (19), upravená Spearman-Karberova metoda (20) nebo jednoduchá interpolace (např. geometrický průměr LC0 a LC100 vypočítaný jako druhá odmocnina součinu LC0 a LC100).
The amount of CaCO3 required will depend on the components of the soil substrate including food, and should be determined by measurements of soil sub-samples immediately before the test. pH is measured in a mixed sample in a 1 M solution of potassium chloride (KCl) or a 0,01 M solution of calcium chloride (CaCl2) (13).
Dalším cílovým ukazatelem je plodnost (např. počet vyprodukovaných nedospělých jedinců).
The organic carbon content of the artificial soil may be reduced, e.g. by lowering the peat content to 4-5 % and increasing the sand content accordingly.
V rámci statistické analýzy se spočítá aritmetický průměr x
It has been demonstrated that Eisenia fetida can comply with the validity criteria on reproduction when tested in field soils with lower organic carbon content (e.g. 2,7 %) (14), and there is experience that this can also be achieved in artificial soil with 5 % peat.
a směrodatná odchylka u každého ošetření zkoušenou látkou a každé kontroly.
Therefore, it is not necessary before using such a soil in a definitive test to demonstrate the suitability of the artificial soil for allowing the test to comply with the validity criteria unless the peat content is lowered more than specified above.
Pokud byla provedena analýza rozptylu, je možné nahradit směrodatnou odchylku s a stupně volnosti df odhadem sdruženého rozptylu získaným z ANOVA a jeho stupni volnosti – za předpokladu, že rozptyl nezávisí na koncentraci.
Note 3:
Pokud se sdružení dat pro negativní kontrolu a kontrolu s rozpouštědlem jeví jako rozumnější než testování oproti jedné z nich, mělo by se otestovat, zda se významně neliší (k určení vhodného testu nahlédněte do odstavce 47 a dodatku 6).
When using natural soil in additional (e.g. higher tier) testing the suitability of the soil and achieving the test validity criteria should also be demonstrated.
Taková transformace by však měla vycházet spíše ze zkušeností s historickými daty než ze zkoumaných dat.
The dry constituents of the soil are mixed thoroughly (e.g. in a large-scale laboratory mixer) in a well ventilated area.
U homogenních dat by se měly provést mnohonásobné t-testy, jako je Williamsův test (α = 0,05, jednostranný) (21, 22) nebo v určitých případech Dunnettův test (23, 24).
Before starting the test, the dry artificial soil is moistened by adding enough de-ionised water to obtain approximately half of the final water content, that being 40 % to 60 % of the maximum water holding capacity (corresponding to 50 ± 10 % moisture dry mass).
Existují-li odchylky od homoskedasticity, může být rozumné důkladněji prozkoumat možný dopad na rozptyly, aby bylo možno rozhodnout, zda lze t-testy použít, aniž by se podstatně snížila vypovídací schopnost testu (25).
This will produce a substrate that has no standing or free water when it is compressed in the hand.