natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Pokud se k aplikaci zkoušené chemické látky použije solubilizační činidlo, nemělo by mít žádný významný vliv na zkušební organismy, což se zjistí pomocí doplňující kontroly obsahující pouze rozpouštědlo.
Artificial sediment and reconstituted water should be used as media.
Uspořádáním zkoušky se rozumí výběr počtu zkušebních koncentrací a jejich odstupňování, počet nádob pro každou koncentraci a počet červů v každé nádrži.
Test vessels without the addition of the test chemical serve as controls.
Uspořádání pro odhad ECx, odhad NOEC a pro provedení limitní zkoušky jsou popsána v odstavcích 35, 36, 37 a 38.
The test chemical is spiked into the sediment in bulk for each concentration level in order to minimise variability between replicates of each concentration level, and the test organisms are subsequently introduced into the test vessels in which the sediment and water concentrations have been equilibrated (see paragraph 29).
Účinná koncentrace (např. EC50 EC25, EC10) a rozpětí koncentrací, ve kterém je účinek zkoušené chemické látky předmětem zájmu, by měly být zahrnuty mezi koncentracemi použitými ve zkoušce.
The test animals are exposed to the sediment-water systems for a period of 28 days.
Je třeba vyhnout se extrapolaci koncentrací mnohem nižších, než je nejnižší koncentrace ovlivňující zkušební organismy, nebo nad nejvyšší testovanou koncentrací.
In view of the low nutrient content of the artificial sediment, the sediment should be amended with a food source (see paragraphs 22 to 23, and Appendix 4) to ensure that the worms will grow and reproduce under control conditions.
Pokud se – ve výjimečných případech – taková extrapolace provede, je třeba v závěrečné zprávě uvést úplné vysvětlení.
In this way it is ensured that the test animals are exposed through the water and sediment as well as by their food.
Pokud se má odhadnout hodnota ECx, je třeba testovat alespoň pět koncentrací a minimálně tři opakování pro každou koncentraci.
The preferred endpoint of this type of study is the ECx (e.g. EC50, EC25, and EC10; effect concentration, affecting x % of the test organisms) for reproduction and biomass, respectively, compared to the control.
Doporučuje se šest opakování pro kontrolu, nebo kontrolu s rozpouštědlem (pokud se používá), aby se zlepšil odhad variability kontroly.
It should however be noted, that considering the high uncertainty of low ECx (e.g. EC10, EC25) with extremely high 95 %-confidence limits (e.g. (15)) and the statistical power calculated during hypothesis testing, the EC50 is regarded the most robust endpoint.
V každém případě je vhodné, aby se použily dostatečné zkušební koncentrace umožňující dobrý odhad modelu.
In addition, the No Observed Effect Concentration (NOEC), and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC) may be calculated for biomass, and reproduction, if the test design and the data support these calculations (see paragraphs 34 to 38).
Koeficient rozložení koncentrací by neměl být větší než dvě (výjimku lze učinit v případě, kdy má křivka závislosti odezvy na koncentraci malý sklon).
The purpose of the study, ECx or NOEC derivation, will determine the test design.
Počet opakování při každé expozici lze snížit, pokud se zvýší počet zkušebních koncentrací s odezvami v rozmezí 5–95 %.
REFERENCE TESTING
Zvýšení počtu opakování nebo zmenšení intervalů zkušebních koncentrací obvykle vede k zmenšení intervalu spolehlivosti zkoušky.
Performance of the control organisms is expected to demonstrate sufficiently the ability of a laboratory to perform the test, and if historical data are available, the repeatability of the test.
Pokud se mají odhadnout hodnoty LOEC/NOEC, mělo by se použít alespoň pět zkušebních koncentrací s alespoň čtyřmi opakováními (pro kontrolu nebo, pokud se používá, kontrolu s rozpouštědlem se doporučuje šest opakování, aby se zlepšil odhad variability kontroly) a koeficient rozložení by neměl být větší než dvě.
In addition, reference toxicity tests may be conducted in regular intervals using a reference toxicant to assess the sensitivity of the test organisms.
V dodatku 6 je uvedeno několik informací o statistické síle zjištěné během testování hypotézy v okružním testu této zkušební metody.
96 h reference toxicity tests in water only may satisfactorily demonstrate the sensitivity and condition of the test animals (4)(7).
Pokud se neočekávají žádné účinky až do koncentrace 1000 mg/kg suché hmotnosti sedimentu (např. na základě výsledků předběžné orientační zkoušky) nebo pokud bude testování při jediné koncentraci dostačující pro potvrzení hodnoty NOEC, která je předmětem zájmu, lze provést limitní zkoušku.
Information on the toxicity of pentachlorophenol (PCP) in complete tests (28 d exposure to spiked sediment) is included in Appendix 6, and in the report on the ring test of the Test Method (13).
Ve druhém zmiňovaném případě by mělo být v závěrečné zprávě uvedeno podrobné odůvodnění pro výběr limitní koncentrace.
The acute, water-only toxicity of PCP is described e.g. in (16).
Účelem limitní zkoušky je provést zkoušku při dostatečně vysoké koncentraci umožňující osobám s rozhodovací pravomocí vyloučit možné toxické účinky chemické látky a limit je stanoven v takové koncentraci, jejíž výskyt se v žádném případě nepředpokládá.
This information can be used for comparison of test organism sensitivity in reference tests with PCP as reference toxicant.
Doporučená koncentrace je 1000 mg/kg (hmotnosti sušiny).
Potassium chloride (KCl) or copper sulphate (CuSO4) have been recommended as reference toxicants with L. variegatus (4)(7).
Obvykle je pro expozici i kontroly zapotřebí alespoň šest opakování.
To date, establishment of quality criteria based on toxicity data for KCl is difficult due to lack of literature data for L. variegatus.
Podmínky expozice
Information on the toxicity of copper towards L. variegatus can be found in (17) to (21).
Zkouška se provádí s alespoň 10 jedinci v každém opakování použitém pro stanovení biologických parametrů.
For a test to be valid, the following requirements should be fulfilled:
Tento počet jedinců odpovídá přibližně 50–100 mg mokré biomasy.
A ring-test (13) has shown that for Lumbriculus variegatus, the average number of living worms per replicate in the controls should have increased by a factor of at least 1,8 at the end of exposure compared to the number of worms per replicate at the start of exposure.
Za předpokladu obsahu sušiny 17,1 % (48) to vede k přibližně 9–17 mg suché biomasy v každé nádobě.
The pH of the overlying water should be between 6 and 9 throughout the test.
V případě uměle vytvořeného sedimentu popsaného v odstavci 22 to odpovídá přibližně 43 g sedimentu (hmotnosti sušiny) na 10 jedinců při obsahu TOC 2,0 % suchého sedimentu.
The oxygen concentration in the overlying water should not be below 30 % of air saturation value (ASV) at test temperature during the test.
V případě, že se použije více než 10 jedinců na nádobu, by se mělo podle toho upravit množství sedimentu a vody nad sedimentem.
Static systems without renewal of the overlying water are recommended.
Organismy použité ve zkoušce by měly všechny pocházet ze stejného zdroje a mělo by se jednat o živočichy v podobném fyziologickém stavu (viz dodatek 5).
If the sediment-to-water ratio (see paragraph 15) is appropriate, gentle aeration will normally suffice to keep the water quality at acceptable levels for the test organisms (e.g. maximise dissolved oxygen levels, minimise build-up of excretory products).
Měli by se vybrat jedinci podobné velikosti (viz odstavec 39).
Semi-static or flow-through systems with intermittent or continuous renewal of overlying water should only be used in exceptional cases, since regular renewal of overlying water is expected to affect chemical equilibrium (e.g. losses of test chemical from the test system).
Doporučuje se zvážit před zkouškou dílčí vzorek sady či zásoby zkušebních organismů s cílem odhadnout střední hmotnost.
The exposure should be conducted in glass beakers of e.g. 250 ml measuring 6 cm in diameter.
Jedinci, kteří se použijí ve zkoušce, se vyjmou z kultury (podrobnosti viz dodatek 5).
Other suitable glass vessels may be used, but they should guarantee a suitable depth of overlying water and sediment.
Velcí (dospělí) jedinci, kteří nevykazují známky nedávné fisiparie, se přenesou do skleněných misek (např. Petriho misek) s čistou vodou.
Each vessel should receive a layer of approximately 1,5 – 3 cm of formulated sediment.
Poté se synchronizují způsobem popsaným dodatku 5.
The ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be 1:4.
Po období regenerace, které trvá 10 až 14 dní, by se měli ve zkoušce použít neporušení, úplní jedinci podobné velikosti, kteří po jemném mechanickém stimulu aktivně plavou nebo se plazí.
The vessels should be of suitable capacity in compliance with the loading rate, i.e. the number of test worms added per weight unit of sediment, (see also paragraph 39).
Pokud se zkušební podmínky liší od podmínek kultivace (např. teplotou, světelným režimem a vodou nad sedimentem), měla by být k adaptaci organismů na zkušební podmínky dostačující aklimatizační fáze v délce např. 24 h při teplotě, světelném režimu a s použitím stejné vody nad sedimentem jako ve zkoušce.
Test vessels and other apparatus that will come into contact with the test chemical should be made entirely of glass or other chemically inert material.
Adaptovaní máloštětinatci by se měli náhodně přiřadit do zkušebních nádob.
Care should be taken to avoid the use of materials, for all parts of the equipment that can dissolve, absorb test chemicals or leach other chemicals and have an adverse effect on the test animals.
Protože se potrava přidává do sedimentu před aplikací zkoušené chemické látky (nebo během ní), zkušební organismy se již v průběhu zkoušky dále nepřikrmují.
Polytetrafluoroethylene (PTFE), stainless steel and/or glass should be used for any equipment having contact with the test media.
Světlo a teplota
For organic chemicals known to adsorb to glass, silanised glass may be required.
Fotoperioda při kultivaci a během zkoušky je obvykle 16 hodin (3), (7).
In these situations the equipment will have to be discarded after use.
Intenzita osvětlení by se měla udržovat nízká (např. 100–500 lx), aby se imitovaly přirozené podmínky na povrchu sedimentu, a měla by se měřit alespoň jednou během období expozice.
Test species
Teplota by se měla udržovat na 20 ± 2 °C po celou dobu zkoušky.
The test species used in this type of study is the freshwater oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller).
V jednom daném dni měření by rozdíl teplot mezi zkušebními nádobami neměl být vyšší než ± 1 °C.
This species is tolerant to a wide range of sediment types, and is widely used for sediment toxicity and bioaccumulation testing [e.g. (3), (5), (7), (9), (13), (15), (16), (22), (23), (24), (25), (26), (27), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35)].
Zkušební nádoby by se měly umístit do zkušebního inkubátoru nebo do prostoru, kde se zkouška provádí, náhodným způsobem, např. aby se minimalizovalo zkreslení reprodukce v důsledku umístění nádob.
The origin of the test animals, the confirmation of species identity (e.g. (36)) as well as the culture conditions should be reported.
Provzdušňování
Identification of species is not required prior to every test if the organisms come from an in-house culture.
Voda nad sedimentem ve zkušebních nádobách by se měla jemně provzdušňovat (např. 2–4 bubliny za sekundu) pomocí Pasteurovy pipety umístěné přibližně 2 cm nad povrchem sedimentu, aby se minimalizovala perturbace sedimentu.
Culturing of the test organisms
Je třeba dbát na to, aby koncentrace rozpuštěného kyslíku neklesla pod 30 % hodnoty nasycení vzduchem (ASV).
In order to have a sufficient number of worms for conducting sediment toxicity tests, it is useful to keep the worms in permanent laboratory culture.
Dodávka vzduchu by měla být regulovaná, a je-li to nezbytné, upravována alespoň jednou denně během pracovních dnů.
Guidance for laboratory culture methods for Lumbriculus variegatus, and sources of starter cultures are given in Appendix 5.
Měření kvality vody
For details on culturing this species see references (3), (7), (27).
Ve vodě nad sedimentem by se měly měřit tyto parametry kvality vody:
To ensure that the tests are performed with animals of the same species, the establishment of single species cultures is strongly recommended.
alespoň v jedné zkušební nádobě každé úrovně koncentrace a jedné zkušební nádobě kontrol jednou týdně a na začátku a na konci období expozice;
Ensure that the cultures and especially the worms used in the tests are free from observable diseases and abnormalities.
Pokud je to možné, lze jako doplňující údaj zaznamenávat teplotu okolního média (vzduch v okolním prostředí nebo vodní lázeň), např. v hodinových intervalech;
Reconstituted water according to Chapter C.1 of this Annex (37) is recommended for use as overlying water in the tests;
Obsah rozpuštěného kyslíku:
it can also be used for the laboratory cultures of the worms (see Appendix 2 for preparation).
vyjádřen v mg/l a % ASV (hodnota nasycení vzduchem);
If required, natural water may be used.
Dodávka vzduchu:
The chosen water must be of a quality that will allow the growth and reproduction of the test species for the duration of the acclimation and test periods without showing any abnormal appearance or behaviour.
měla by se kontrolovat alespoň jednou denně v pracovních dnech a v případě potřeby upravit;
Lumbriculus variegatus has been demonstrated to survive, grow, and reproduce in this type of water (30), and maximum standardisation of test and culture conditions is provided.
Celková tvrdost vody:
If a reconstituted water is used, its composition should be reported, and the water should be characterised prior to use at least by pH, oxygen content, and hardness (expressed as mg CaCO3/l).
alespoň v jednom opakování kontrol a v jedné zkušební nádobě s nejvyšší koncentrací na začátku a na konci období expozice;
Analysis of the water for micropollutants prior to use might provide useful information (see, e.g., Appendix 3).
vyjádřená v mg/ml CaCO3;
The pH of the overlying water should be in the range of 6,0 to 9,0 (see paragraph 13).
Celkový obsah amoniaku:
If increased ammonia development is expected, it is considered useful to keep the pH between 6,0 and 8,0.
alespoň v jednom opakování kontrol a v jedné zkušební nádobě každé úrovně koncentrace na začátku období expozice a poté 3 × týdně;
For testing of e.g. weak organic acids, it is advisable to adjust the pH by buffering the water to be used in the test, as described e.g. by (16).
vyjádřen v mg/l NH4+ nebo NH3 nebo celkového amonného dusíku.
The total hardness of the water to be used in the test should be between 90 and 300 mg CaCO3 per liter for natural water.
Pokud měření parametrů kvality vody vyžaduje odebrání významných vzorků vody z nádob, může být vhodné použít samostatné nádoby pro měření kvality vody, aby se neměnil poměr objemu vody vůči sedimentu.
Appendix 3 summarises additional criteria for acceptable dilution water according to OECD Guideline No. 210 (38).
Biologická pozorování
Sediment
Během expozice by se měly ve zkušebních nádobách zrakem vyhodnotit jakékoli změny v chování zkušebních organismů (např. vyhýbání se sedimentu, pelety trusu viditelné na povrchu sedimentu) v porovnání s kontrolami.
Since uncontaminated natural sediments from a particular source may not be available throughout the year, and indigenous organisms as well as the presence of micropollutants can influence the test, a formulated sediment (also called reconstituted, artificial or synthetic sediment) should preferably be used.
Pozorování by se měla zaznamenat.
Use of a formulated sediment minimises variability of test conditions as well as introduction of indigenous fauna.
Na konci zkoušky se prohlédne každé opakování (doplňující nádoby určené k chemickým analýzám lze z této prohlídky vyloučit).
The following formulated sediment is based on the artificial sediment according to (6), (39) and (40).
Měla by se použít vhodná metoda pro získání všech jedinců ze zkušební nádoby.
It is recommended for use in this type of test ((6), (10), (30), (41), (42), (43)):
Je třeba dbát na to, aby se při odběru žádný jedinec neporanil.
4-5 % (dry weight) sphagnum peat;
Jednou z možných metod je prosít žížalice ze sedimentu.
it is important to use peat in powder form, degree of decomposition:
Lze k tomu použít síto z nerezové oceli o vhodné velikosti ok.
“medium”, finely ground (particle size ≤ 0,5 mm), and only air-dried.
Většina vody nad sedimentem se opatrně slije a zbývající sediment a voda se protřepou, aby vznikla řídká kaše, kterou lze přecedit přes síto.
20 ± 1 % (dry weight) kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %).
Procezenou řídkou kaši z nádoby každého opakování je možné procedit znovu, aby se zajistilo, že se zachytí všechny žížalice.
75-76 % (dry weight) quartz sand (fine sand, grain size: ≤ 2 mm, but > 50 % of the particles should be in the range of 50-200 μm).
Alternativním způsobem by mohlo být zahřátí sedimentu umístěním zkušebních nádob do vodní lázně o teplotě 50–60 °C.
Deionised water, 30–50 % of sediment dry weight, in addition to the dry sediment components.
Žížalice vylezou ze sedimentu a je možné je sebrat z povrchu sedimentu pomocí pipety se širokým ústím protažené plamenem.
Calcium carbonate of chemically pure quality (CaCO3) is added to adjust the pH of the final mixture of the sediment.
Dalším alternativním způsobem by mohlo být vytvoření řídké kaše sedimentu a nalití této kaše do mělké misky vhodné velikosti.
The total organic carbon content (TOC) of the final mixture should be 2 % (± 0,5 %) of sediment dry weight and should be adjusted by the use of appropriate amounts of peat and sand, according to (a) and (c).
Z tenké vrstvy řídké kaše lze zkušební organismy snadno vybrat pomocí ocelové jehly nebo hodinářské pinzety (použít raději jako vidličku než kleště, aby nedošlo k jejich poranění) a přemístit je do čisté vody.
Food, e.g. powdered leaves of Stinging Nettle (Urtica sp., in accordance with pharmacy standards, for human consumption), or a mixture of powdered leaves of Urtica sp. with alpha-cellulose (1:1), at 0,4 - 0,5 % of sediment d.w., in addition to the dry sediment components;
Žížalice se po vybrání z řídké kaše sedimentu promyjí zkušebním médiem a spočítají.
for details see Appendix 4.
Bez ohledu na použitý způsob by laboratoře měly prokázat, že jejich zaměstnanci jsou schopni získat v průměru nejméně 90 % organismů z celého sedimentu.
The source of peat, kaolin clay, food material, and sand should be known.
Například je možné přidat do kontrolního sedimentu nebo zkušebních sedimentů určitý počet zkušebních organismů a za 1 h stanovit počet jedinců, které personál ze sedimentu získá (7).
In addition to item g), Chapter C.27 of this Annex (6) lists alternative plant materials to be used as a source of nutrition:
Měl by se zaznamenat a vyhodnotit celkový počet živých a mrtvých jedinců v každém opakování.
dehydrated leaves of mulberry (Morus alba), white clover (Trifolium repens), spinach (Spinacia oleracea), or cereal grass.
Za mrtvé se považují tyto skupiny organismů:
The chosen food source should be added prior to or during spiking the sediment with the test chemical.
nevykazující žádnou reakci na jemný mechanický stimul;
The chosen food source should allow for at least acceptable reproduction in the controls.
vykazující známky rozkladu (v kombinaci s písmenem a));
Analysis of the artificial sediment or its constituents for micro-pollutants prior to use might provide useful information.
chybějící (počet).
An example for the preparation of the formulated sediment is described in Appendix 4.
Živé organismy lze navíc zařadit do jedné ze tří skupin:
Mixing of dry constituents is also acceptable if it is demonstrated that after addition of overlying water a separation of sediment constituents (e.g. floating of peat particles) does not occur, and that the peat or the sediment is sufficiently conditioned (see also paragraph 25 and Appendix 4).
velcí úplní jedinci (dospělí) bez regenerovaných částí těla;
The artificial sediment should be characterised at least by origin of the constituents, grain size distribution (percent sand, silt, and clay), total organic carbon content (TOC), water content, and pH.
úplní jedinci s regenerovanými, světle zbarvenými částmi těla (tj. s novou zadní částí, novou přední částí nebo s novou zadní i přední částí);
Measurement of redox potential is optional.
neúplní jedinci (tj. jedinci, kteří se nedávno rozdělili, a dosud jim nezregenerovaly části těla).
If required, e.g. for specific testing purposes, natural sediments from unpolluted sites may also serve as test and/or culture sediment (3).
Tato dodatečná pozorování nejsou povinná, ale lze je použít pro doplňující interpretaci biologických výsledků (například vysoký počet jedinců zařazených o skupiny c může naznačovat opoždění reprodukce nebo regenerace při dané expozici).
However, if natural sediment is used, it should be characterised at least by origin (collection site), pH and ammonia of the pore water, total organic carbon content (TOC) and nitrogen content, particle size distribution (percent sand, silt, and clay), and percent water content (7), and it should be free from any contamination and other organisms that might compete with, or prey on the test organisms.
Dále, pokud jsou zpozorovány nějaké rozdíly ve vzhledu (např. léze pokožky, edematózní části těla) mezi exponovanými a kontrolními jedinci, měly by se zaznamenat.
Measurement of redox potential and cation exchange capacity is optional.
Ihned po spočítání/vyhodnocení se živí jedinci nalezení v každém opakování přenesou do suchých, předem zvážených a označených misek vah (jedna pro každé opakování) a usmrtí pomocí kapky ethanolu na každou misku.
It is also recommended that, before it is spiked with the test chemical, the natural sediment be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test.
Misky vah se poté umístí do sušicí trouby s teplotou nastavenou na 100 ± 5 °C, aby přes noc vyschly, a poté se nechají zchladnout v desikátoru, následně se zváží a stanoví se hmotnost sušiny jedince (nejlépe v g, s přesností alespoň na 4 desetinná místa).
At the end of this conditioning period, the overlying water should be removed and discarded.
Kromě celkové hmotnosti sušiny je možné stanovit hmotnost sušiny bez anorganických částic způsobem popsaným v (49), aby se zohlednily anorganické složky pocházející z požitého sedimentu přítomného v trávicím traktu organismů.
The sediment to be used must be of a quality that will allow the survival and reproduction of the control organisms for the duration of the exposure period without showing any abnormal appearance or behaviour.
Biomasa se stanoví jako celková biomasa v každém opakování včetně dospělých a mladých jedinců.
The control worms should burrow in the sediment, and they should ingest the sediment.
Mrtví jedinci by se při stanovování biomasy v každém opakování neměli brát v úvahu.
Reproduction in the controls should at least be according to the validity criterion as described in paragraph 13.
Ověření koncentrací zkoušené chemické látky
The presence or absence of fecal pellets on the sediment surface, which indicate sediment ingestion by the worms, should be recorded and can be helpful for the interpretation of the test results with respect to exposure pathways.
Odběr vzorků
Additional information on sediment ingestion can be obtained by using methods described in (24), (25), (44), and (45), which specify sediment ingestion or particle selection in the test organisms.
Pro chemickou analýzu zkoušené chemické látky by se měly odebrat vzorky alespoň u nejvyšší koncentrace a nižší koncentrace, alespoň na konci fáze ustavování rovnováhy (před přidáním zkušebních organismů) a na konci zkoušky.
Manipulation procedures for natural sediments prior to use in the laboratory are described in (3), (7), and (12).
Pro analýzu by se měl odebrat nejméně vzorek celkového sedimentu a vody nad sedimentem.
The preparation and storage of the artificial sediment recommended to be used in the Lumbriculus test is described in Appendix 4.