natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Nelze-li tyto dvě podmínky splnit, musí být podrobně vysvětleno, jak byla zvolena hodnota LOEC (a tedy i NOEC).
expressed as mg/l NH4+ or NH3 or total ammonia-N.
Koncentrace bez pozorovaných účinků (NOEC) je zkušební koncentrace bezprostředně nižší než LOEC, která při srovnání s kontrolou nemá pro danou dobu expozice statisticky významný účinek (při p ≤ 0,05).
If measurement of water quality parameters requires removal of significant water samples from the vessels, it may be advisable to set up separate vessels for water quality measurements so as not to alter the water-to-sediment volume ratio.
Rozdělovací koeficient oktanol-voda (Kow; někdy se vyjadřuje jako Pow) je poměr rozpustnosti chemické látky v n-oktanolu a vodě v rovnovážném stavu a vyjadřuje lipofilitu chemické látky (kapitola A.24 této přílohy).
Biological observations
Hodnota Kow nebo logaritmus Kow (log Kow) se používá jako ukazatel možné bioakumulace dané chemické látky vodními organismy.
During the exposure, the test vessels should be observed in order to assess visually any behavioural differences in the worms (e.g. sediment avoidance, fecal pellets visible on the sediment surface) compared with the controls.
Rozdělovací koeficient organický uhlík/voda (Koc) je rovnovážný poměr mezi koncentrací chemické látky v/na frakci organického uhlíku v sedimentu a koncentrací chemické látky ve vodě.
Observations should be recorded.
Voda nad sedimentem je voda nacházející se nad sedimentem ve zkušební nádobě.
At the end of the test, each replicate is examined (additional vessels designated for chemical analyses may be excluded from examination).
Intersticiální voda nebo kapilární voda je voda zabírající prostor mezi sedimentem a částicemi půdy.
An appropriate method should be used to recover all worms from the test vessel.
Sediment se známým přídavkem chemické látky (spiked sediment) je sediment, do něhož byla přidána zkoušená chemická látka.
Care should be taken that all worms are recovered uninjured.
SLOŽENÍ DOPORUČENÉ REKONSTITUOVANÉ VODY
One possible method is sieving the worms from the sediment.
(převzato z kapitoly C.1 této přílohy (1))
A stainless steel mesh of appropriate mesh size can be used.
Roztok chloridu vápenatého:
Most of the overlying water is carefully decanted, and the remaining sediment and water is agitated to result in a slurry, which can be passed through the sieve.
Rozpustí se 11,76 g CaCl2 · 2H2O v deionizované vodě;
Using a 500 μm mesh, most of the sediment particles will pass the sieve very quickly;
doplní se do 1 l deionizovanou vodou.
however, sieving should be done quickly, in order to prevent the worms from crawling into or through the mesh.
Roztok síranu hořečnatého:
Using a 250 μm mesh will prevent the worms from crawling into or through the mesh;
Rozpustí se 4,93 g MgSO4 · 7H2O v deionizované vodě;
however, care should be taken that as little as possible of the sediment particles is retained on the mesh.
Roztok hydrogenuhličitanu sodného:
The sieved slurry of each replicate vessel may be passed through the sieve a second time in order to ensure that all worms are recovered.
Rozpustí se 2,59 g NaHCO3 v deionizované vodě;
An alternative method could be warming of the sediment by placing the test vessels in a water bath at 50 – 60 °C;
Roztok chloridu draselného:
the worms will leave the sediment and can be collected from the sediment surface by use of a fire-polished wide-mouth pipette.
Rozpustí se 0,23 g KCl v deionizované vodě;
Another alternative method could be to produce a sediment slurry and pour this slurry onto a shallow pan of suitable size.
Všechny chemické látky musí být čistoty p. a.
From the shallow layer of slurry the worms can be picked up by a steel needle or watchmakers' tweezers (to be used rather like a fork than forceps to avoid injuring the worms) and transferred to clean water.
Vodivost destilované nebo deionizované vody nesmí překročit 10 μScm– 1.
After separating the worms from the sediment slurry, these are rinsed in test medium and counted.
25 ml každého z roztoků (a) až (d) se smíchá a celkový objem se doplní do 1 l deionizovanou vodou.
Independently of the method used, laboratories should demonstrate that their personnel are able to recover an average of at least 90 % of the organisms from whole sediment.
Celkové množství iontů vápníku a hořčíku v těchto roztocích činí 2,5 mmol/l.
For example, a certain number of test organisms could be added to control sediment or test sediments, and recovery could be determined after 1 h (7).
Mg je 4: 1 a iontů Na: K je 10: 1;
The total number of living and dead individuals per replicate should be recorded and assessed.
kyselinová (neutralizační) kapacita KS4.3 tohoto roztoku je 0,8 mmol/l.
The following groups of worms are considered to be dead:
Vodu nad sedimentem je třeba provzdušňovat, až dosáhne saturace kyslíkem; pak se skladuje přibližně dva dny bez dalšího provzdušňování před použitím.
there is no reaction after a gentle mechanical stimulus
LITERATURA
there are signs of decomposition (in combination with “a”)
Kapitola C.1 této přílohy, Zkouška akutní toxicity pro ryby.
number of missing worms
Fyzikálně-chemické parametry přijatelné ředicí vody
Additionally, the living worms can be assigned to one of three groups:
(převzato z OECD (1992) (1))
large complete worms (adults) without regenerated body regions
Koncentrace
complete worms with regenerated, lighter-coloured body regions (i.e., with new posterior part, with new anterior part, or with both new posterior and anterior parts)
Pevné částice
incomplete worms (i.e., recently fragmented worms with non-regenerated body regions)
Celkový obsah organického uhlíku
These additional observations are not mandatory, but can be used for additional interpretation of the biological results (for example, a high number of worms assigned to group c may indicate a delay of reproduction or regeneration in a given treatment).
Neionizovaný amoniak
Additionally, if any differences in appearance (e.g. lesions of the integument, oedematous body sections) are observed between treated and control worms, these should be recorded.
< 1 μg/l
Immediately after counting/assessment, the living worms found in each replicate are transferred to dried, pre-weighed and labelled weigh pans (one per replicate), and killed using a drop of ethanol per weigh pan.
Zbytkový chlor
The weigh pans are placed in a drying oven at 100 ± 5 °C to dry overnight, after which they are weighed after cooling in a desiccator, and worm dry weight is determined (preferably in g, at least 4 post-decimal digits).
< 10 μg/l
In addition to the total dry weight, the ash-free dry weight may be determined as described in (49) in order to account for inorganic components originating from ingested sediment present in the alimentary tract of the worms.
Celkové organofosforové pesticidy
The biomass is determined as total biomass per replicate including adult and young worms.
< 50 ng/l
Dead worms should not be taken into account for the determination of biomass per replicate.
Celkové organochlorové pesticidy, polychlorované bifenyly
Verification of test chemical concentrations
Celkový organický chlor
Sampling
< 25 ng/l
Samples for chemical analysis of the test chemical should be taken at least of the highest concentration and a lower one, at least at the end of the equilibration phase (before adding the test organisms), and at the end of the test.
Doporučený umělý sediment – pokyny k přípravě a uchovávání
At least the bulk sediment and the overlying water should be sampled for analysis.
Složky sedimentu
At least two samples should be taken per matrix and treatment on each sampling date.
Složka
One of the duplicate samples may be stored as a reserve (to be analysed e.g. in the event that initial analysis falls outside the ± 20 % range from the nominal concentration).
Vlastnosti
In case of specific chemical properties, e.g. if rapid degradation of the test chemical is expected, the analytical schedule may be refined (e.g. more frequent sampling, analysis of more concentration levels) on the basis of expert judgment.
% sušiny sedimentu
Samples may then be taken on intermediate sampling dates (e.g. on day seven after start of exposure).
Rašelina
The overlying water should be sampled by carefully decanting or siphoning off the overlying water so as to minimise perturbation of the sediment.
Sfagnová rašelina, stupeň rozkladu:
The volume of the samples should be recorded.
‚střední‘, na vzduchu sušená, žádné viditelné zbytky rostlin, jemně mletá (velikost částic ≤ 0,5 mm)
After the overlying water has been removed, the sediment should be homogenised and transferred to a suitable container.
Křemenný písek
The weight of the wet sediment sample is recorded.
≤ 2 mm, ale > 50 % částic by mělo být v rozpětí 50–200 μm
For example, approximately 200 ml of wet sediment can be filled into 250 ml centrifugation beakers.
75–76
Thereafter the samples should be centrifuged without filtration to isolate the porewater, e.g. at 10000 ± 600 × g for 30 - 60 min at a temperature not exceeding the temperature used in the test.
Kaolinitický jíl
After centrifugation, the supernatant is decanted or pipetted taking care that no sediment particles are introduced, and the volume is recorded.
Obsah kaolinitu ≥ 30 %
The weight of the remaining sediment pellet is recorded.
Zdroj potravy
It may facilitate the estimation of the mass balance or recovery of the test chemical in the water-sediment system, if the sediment dry weight is determined at each sampling date.
0,4–0,5 %
In some cases it might not be possible to analyse concentrations in the pore water as the sample size is too small.
Organický uhlík
Failing immediate analysis, all samples should be stored by an appropriate method, e.g. under the storage conditions recommended for minimum degradation of the particular test chemical (e.g., environmental samples are commonly stored at – 18 °C in the dark).
upraven přidáním rašeliny a písku
Obtain information on the proper storage conditions for the particular test chemical — for example, duration and temperature of storage, extraction procedures, etc. — before beginning the study.
Uhličitan vápenatý
Analytical method
CaCO3, práškový, chemicky čistý, v přídavku do suchého sedimentu
Since the whole procedure is governed essentially by the accuracy, precision and sensitivity of the analytical method used for the test chemical, check experimentally that the precision and reproducibility of the chemical analysis, as well as the recovery of the test chemical from water and sediment samples are satisfactory for the particular method at least at the lowest and highest test concentrations.
Deionizovaná voda
Also, check that the test chemical is not detectable in the control chambers in concentrations higher than the limit of quantification.
Vodivost ≤ 10 μS/cm, v přídavku do suchého sedimentu
If necessary, correct the nominal concentrations for the recoveries of quality control spikes (e.g. where recovery is outside 80 - 120 % of spiked amount).
30–50
Handle all samples throughout the test in such a manner so as to minimise contamination and loss (e.g. resulting from adsorption of the test chemical on the sampling device).
Příprava
The recovery of test chemical, the limit of quantification, and the limit of detection in sediment and water should be recorded and reported.
Příprava
The main mandatory response variables of the test to be evaluated statistically are the biomass and the total number of worms per replicate.
Rašelina se usuší na vzduchu a rozemele na jemný prášek.
Optionally, reproduction (as increase of worm numbers) and growth (as increase of dry biomass) could be also evaluated.
Připraví se suspenze požadovaného množství rašelinného prášku v deionizované vodě s použitím vysoce výkonného homogenizačního zařízení. pH této suspenze se pomocí CaCO3 upraví na 5,5 ± 0,5.
In this case, an estimate of the dry weight of the worms at start of exposure should be obtained e.g. by measurement of the dry weight of a representative sub-sample of the batch of synchronised worms to be used for the test.
Suspenze se stabilizuje po dobu nejméně dvou dní za mírného promíchávání při 20 ± 2 °C za účelem ustálení pH a vytvoření stabilní mikrobiální složky.
Although mortality is not an endpoint of this test, mortalities should be evaluated as far as possible.
Poté se opět změří pH, které by mělo být 6,0 ± 0,5.
In order to estimate mortalities, the number of worms that do not react to a gentle mechanical stimulus or showed signs of decomposition, and the missing worms should be considered dead.
Následně se suspenze rašeliny smísí s ostatními složkami (písek a jíl) a s deionizovanou vodou s cílem získat homogenní sediment s obsahem vody v rozmezí 30–50 % sušiny sedimentu.
Mortalities should at least be recorded and considered when interpreting the test results.
Znovu se změří pH konečné směsi a v případě nutnosti se opět upraví pomocí CaCO3 na hodnotu 6,5 až 7,5.
Effect concentrations should be expressed in mg/kg sediment dry weight.
Jestliže se však očekává vývin amoniaku, může být užitečné udržet pH sedimentu pod 7,0 (např. mezi 6,0 a 6,5).
If the recovery of test chemical measured in the sediment, or in sediment and overlying water at start of exposure, is between 80 and 120 % of the nominal concentrations, the effect concentrations (ECx, NOEC, LOEC) may be expressed based on nominal concentrations.
Odeberou se vzorky sedimentu pro stanovení obsahu sušiny a obsahu organického uhlíku.
If recovery deviates from the nominal concentrations by more than ± 20 % of the nominal concentrations, the effect concentrations (ECx, NOEC, LOEC) should be based on the initially measured concentrations at the beginning of the exposure, e.g. taking into account the mass balance of the test chemical in the test system (see paragraph 30).
Pokud se předpokládá vznik amoniaku, je možné uměle vytvořený sediment stabilizovat po dobu sedmi dnů za stejných podmínek, jaké převažují v následující zkoušce (např. poměr sediment-voda 1:4, výška vrstvy sedimentu stejná jako ve zkušebních nádobách) před přidáním zkoušené chemické látky, tj. sediment by se měl přelít vodou, která by se měla provzdušňovat.
In these cases, additional information can be obtained from analysis of stock and/or application solutions in order to confirm that the test sediments were prepared correctly.
Na konci doby kondicionování se překrývající voda odebere a vylije.
ECx-values for the parameters described in paragraph 60 are calculated using appropriate statistical methods (e.g. probit analysis, logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
Poté se do sedimentu vmíchá křemenný písek s přidanou zkoušenou chemickou látkou pro každou úroveň expozice, sediment se rozdělí do zkušebních nádob jednotlivých opakování a přelije se zkušební vodou.
Guidance on statistical evaluation is given in (15) and (50).
Nádoby se pak inkubují za stejných podmínek, jaké budou převládat v následné zkoušce.
To compute the EC50 or any other ECx, the per-treatment means ( X
Voda nad sedimentem musí být provzdušněna.
If a statistical analysis is intended to determine the NOEC/LOEC, per-vessel statistics (individual vessels are considered replicates) are necessary.
Aby se zajistilo, že potrava rovněž obsahuje zkoušenou chemickou látku, měl by se zdroj potravy smísit se sedimentem nejpozději v den přidání zkoušené chemické látky do sedimentu.
Examples are given in the following paragraphs.
Skladování
Guidance on selection of appropriate statistical methods is given in (15) and (50).
Suché složky pro přípravu umělého sedimentu lze skladovat na suchém a chladném místě při pokojové teplotě.
Normal distribution of data can be tested e.g. with the Kolmogorov-Smirnov goodness-of-fit test, the Range-to-standard-deviation ratio test (R/s-test) or the Shapiro-Wilk test, (two-sided, p ≤ 0,05).
Připravený sediment s přidanou zkoušenou chemickou látkou by se měl okamžitě použít ve zkoušce.
Cochran's test, Levene test or Bartlett's test, (two-sided, p ≤ 0,05) may be used to test variance homogeneity.
Vzorky sedimentu s přidanou zkoušenou chemickou látkou lze uchovávat za podmínek doporučených pro konkrétní zkoušenou chemickou látku až do provedení analýzy.
If the prerequisites of parametric test procedures (normality, variance homogeneity) are fulfilled, One-way Analysis of Variance (ANOVA) and subsequent multi-comparison tests can be performed.
Metody kultivace Lumbriculus variegatus
Pairwise comparisons (e.g. Dunnett's t-test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test item concentrations.
Druh Lumbriculus variegatus (MÜLLER), čeleď Lumbriculidae (žížalicovití), třída Oligochaeta (máloštětinatci) žije ve sladkovodních sedimentech a je široce používán v ekotoxikologických zkouškách.
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) should be used to determine the NOEC and the LOEC.
Lze jej snadno kultivovat v laboratorních podmínkách.
If a limit test (comparison of control and one treatment only) has been performed and the prerequisites of parametric test procedures (normality, homogeneity) are fulfilled, metric responses (total worm number, and biomass as worm dry weight) can be evaluated by the Student test (t-test).
V následujícím textu je uveden přehled kultivačních metod.
The unequal-variance t-test (Welch t-test) or a non parametric test, such as the Mann-Whitney-U-test may be used, if these requirements are not fulfilled.
Metody kultivace
Some information on the statistical power found during hypothesis testing in the ring test of the method is given in Appendix 6.
Kultivační podmínky pro Lumbriculus variegatus jsou podrobně uvedeny ve Phipps a kol.
To determine significant differences between the controls (control and solvent control), the replicates of each control can be tested as described for the limit test.
Krátký souhrn těchto podmínek je uveden dále.
If these tests do not detect significant differences, all control and solvent control replicates may be pooled.
Hlavní výhodou L. variegatus je jeho rychlá reprodukce vedoucí k rychlému nárůstu biomasy v populacích kultivovaných v laboratoři (např. (1), (3), (4), (5)).
Otherwise all treatments should be compared with the solvent control.
Zkušební organismy lze kultivovat ve velkých akváriích (57–80 l) při teplotě 23 °C s fotoperiodou 16 h světlo:8 hodin tma (100–1000 lx) s použitím každodenně obměňované přírodní vody (45–50 l na akvárium).
The results should be interpreted with caution if there were deviations from this test method, and where measured concentrations of test concentrations occur at levels close to the detection limit of the analytical method used.
Substrát se připraví tak, že se nařežou ručníky z neběleného hnědého papíru na proužky, které se pak mohou míchat s kultivační vodou po dobu několika vteřin, čímž se získá papírový substrát s malými kousky.
Any deviations from this test method must be noted.
Tento substrát pak lze přímo použít v akváriu s kulturou Lumbriculus pokrytím plochy dna nádrže nebo je lze skladovat zmražené v deionizované vodě pro pozdější použití.
The test report should include at least the following information:
Nový substrát v nádrži obvykle vydrží přibližně dva měsíce.
chemical identification data (common name, chemical name, structural formula, CAS number, etc.) including purity and analytical method for quantification of test chemical; source of the test chemical, identity and concentration of any solvent used.
Každá kultura se zahajuje na počtu 500–1000 jedinců a krmí se 10 ml suspenze obsahující 6 g krmiva pro mladé lososovité ryby třikrát týdně za obnovovacích nebo průtokových podmínek.
any information available on the physical nature and physical-chemical properties as obtained prior to start of the test, (e.g. water solubility, vapour pressure, partition coefficient in soil (or in sediment if available), log Kow, stability in water, etc.);
Statické nebo semistatické kultury by měly dostat méně potravy, aby se zabránilo růstu bakterií a hub.
scientific name, source, any pre-treatment, acclimation, culture conditions, etc..
Za těchto podmínek se počet jedinců v kultuře obvykle zdvojnásobí za přibližně 10 až 14 dnů.
test procedure used (e.g. static, semi-static or flow-through);
Jinak lze Lumbriculus variegatus rovněž kultivovat v systému složeném z vrstvy křemenného písku, jaký se používá pro umělý sediment, (hloubka 1–2 cm) a rekonstituované vody.
test design (e.g. number, material and size of test chambers, water volume per vessel, sediment mass and volume per vessel, (for flow-through or semi-static procedures: water volume replacement rate), any aeration used before and during the test, number of replicates, number of worms per replicate at start of exposure, number of test concentrations, length of conditioning, equilibration and exposure periods, sampling frequency);
Skleněné nebo nerezové nádoby o výšce 12 až 20 cm lze použít jako kultivační nádoby.
depth of sediment and overlying water;
Voda nad sedimentem by se měla jemně provzdušňovat (např. 2 bubliny za sekundu) pomocí Pasteurovy pipety umístěné přibližně 2 cm nad povrchem sedimentu.
method of test chemical pre-treatment and spiking/application;
Aby se zabránilo hromadění např. amoniaku, měla by se voda nad sedimentem měnit pomocí průtokového systému nebo alespoň jednou týdně ručně.
the nominal test concentrations, details about the sampling for chemical analysis, and the analytical methods by which concentrations of the test chemical were obtained;
Máloštětinatce lze chovat při pokojové teplotě s fotoperiodou 16 hodin světla (o intenzitě 100–1000 lx) a 8 hodin tmy.
sediment characteristics as described in paragraphs 24 - 25, and any other measurements made;
V semistatické kultuře (výměna vody jednou týdně) se krmí krmivem TetraMin dvakrát týdně (např. 0,6–0,8 mg na jeden cm2 povrchu sedimentu), které lze aplikovat jako suspenzi 50 mg TetraMin na jeden ml deionizované vody.
preparation of formulated sediment;
Lumbriculus variegatus lze z kultur odebrat např. přenesením substrátu v síti s malými oky nebo přenesením organismů pomocí skleněné pipety s širokou špičkou (přibližně o průměru 5 mm) protažené plamenem do zvláštní kádinky.
preparation of the test water (if reconstituted water is used) and characteristics (oxygen concentration, pH, conductivity, hardness, and any other measurements made) before the start of the test;
Jestliže je substrát rovněž přemístěn do této kádinky, ponechá se kádinka obsahující organismy a substrát přes noc za podmínek průtokové kultivace, čímž se z kádinky vyplaví substrát, zatímco organismy zůstanou na dně nádoby.
detailed information on feeding including type of food, preparation, amount and feeding regimen;
Poté je lze přenést do nově připravených kultivačních nádrží nebo dále zpracovat pro účely zkoušky, jak je popsáno v (3) a (4) nebo v následujícím textu.
light intensity and photoperiod(s);
Při použití L. variegatus ve zkouškách sedimentu je nutné velmi kriticky pohlížet na jeho způsob rozmnožování (architomie čili morfalaxe, např. (6)).
methods used for determination of all biological parameters (e.g. sampling, inspection, weighing of test organisms) and all abiotic parameters (e.g. water and sediment quality parameters);
Toto nepohlavní rozmnožování vede ke vzniku dvou fragmentů, které po určitou dobu nepřijímají potravu, dokud nedojde k regeneraci hlavové nebo ocasní části (např. (7), (8)).
volumes and/or weights of all samples for chemical analysis;
To znamená, že k expozici L. variegatus požíráním kontaminovaného sedimentu nedochází kontinuálně.
detailed information on the treatment of all samples for chemical analysis, including details of preparation, storage, spiking procedures, extraction, and analytical procedures (and precision) for the test chemical, and recoveries of the test chemical.
Proto je třeba provést synchronizaci, aby se minimalizovalo nekontrolované rozmnožování a regenerace a následné velké odchylky ve výsledcích zkoušky.
water quality within the test vessels (pH, temperature, dissolved oxygen concentration, hardness, ammonia concentrations, and any other measurements made);