natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Zkušební chemická látka špatně rozpustná ve vodě a organických rozpouštědlech
Each worm culture is started with 500 – 1000 worms, and fed a 10 ml suspension containing 6 g of trout starter food 3 times per week under renewal or flow-through conditions.
V případě chemických látek, které jsou špatně rozpustné ve vodě a v organických rozpouštědlech, se ekvivalentní množství 2,5 g jemně mletého křemenného písku na zkušební nádobu (například 10 g jemného křemenného písku na čtyři opakování) smíchá s příslušným množstvím zkoušené chemické látky, aby se získala požadovaná zkušební koncentrace.
Static or semi-static cultures should receive lower feeding rates to prevent bacterial and fungal growth. .
Celkový obsah písku v substrátu je pak třeba korigovat na toto množství.
Under these conditions the number of individuals in the culture generally doubles in approximately 10 to 14 d.
Tato směs křemenného písku a zkoušené chemické látky se přidá do navlhčené půdy a důkladně se promísí s příslušným množstvím deionizované vody, aby bylo dosaženo požadované vlhkosti.
Alternatively Lumbriculus variegatus can also be cultured in a system consisting of a layer of quartz sand as used for the artificial sediment (1 - 2 cm depth), and reconstituted water.
Pro každou kontrolní a exponovanou nádobu se doporučuje deset dospělých samiček na 20 g sušiny umělé půdy.
Glass or stainless steel containers with a height of 12 to 20 cm can be used as culture vessels.
Zkušební organismy je třeba vložit během dvou hodin po přípravě konečného zkušebního substrátu (tj. po aplikaci zkoušené látky).
The water body should be gently aerated (e.g. 2 bubbles per second) via a pasteur pipette positioned approx.
Po přidání roztočů do půdy se jim dodá krmivo a změří se počáteční hmotnost každé zkušební nádoby, která se použije jako reference při sledování obsahu vlhkosti v půdě během zkoušky, jak je popsáno v odstavci 24.
2 cm above the sediment surface.
Zkušební nádoby se pak zakryjí, jak je popsáno v odstavci 8, a umístí se do zkušební komory.
To avoid accumulation e.g. of ammonia, the overlying water should be exchanged using a flow-through system, or, at least once a week, manually.
Pro každou z metod aplikace zkoušené chemické látky popsaných v odstavcích 15 až 18 se připraví příslušné kontrolní nádoby.
The oligochaetes can be held at room temperature with a photo period of 16 hours light (intensity 100 – 1000 lx) and 8 hours dark.
Tam, kde je to potřebné, se tak do kontrolních vzorků přidají organická rozpouštědla, křemenný písek nebo jiné nosiče v koncentracích/množstvích jako u exponovaných nádob.
In the semi-static culture (water renewal once per week), the worms are fed with TetraMin twice a week (e.g. 0,6 - 0,8 mg per cm2 of sediment surface), which can be applied as a suspension of 50 mg TetraMin per ml de-ionized water.
Tam, kde se pro přidání zkoušené chemické látky použije rozpouštědlo nebo jiný nosič, by se rovněž měla připravit dodatečná kontrola bez nosiče nebo zkoušené chemické látky a zkoušet v případě, že toxicita rozpouštědla není známá (viz odstavec 17).
Lumbriculus variegatus can be removed from the cultures e.g. by transferring substrate with a fine mesh net, or organisms using a fire polished wide mouth (approximately 5 mm diameter) glass pipette, to a separate beaker.
Zkušební teplota by měla být 20 ± 2 °C.
If substrate is co-transferred to this beaker, the beaker containing worms and substrate is left overnight under flow-through conditions, which will remove the substrate from the beaker, while the worms remain at the bottom of the vessel.
Teplota by se měla zaznamenávat alespoň jednou za den a podle potřeby upravit.
They can then be introduced to newly prepared culture tanks, or processed further for the test as outlined in (3) and (4), or in the following.
Zkouška se provádí za podmínek řízených cyklů světlo-tma (přednostně 16 hodin světla a 8 hodin tmy) s osvětlením 400 až 800 luxů v blízkosti zkušebních nádob.
An issue to be regarded critically when using L. variegatus in sediment tests is its reproduction mode (architomy or morphallaxis, e.g. (6)).
Z důvodů srovnatelnosti jsou tyto podmínky stejné jako u jiných ekotoxikologických zkoušek půdy (např. (15)).
This asexual reproduction results in two fragments, which do not feed for a certain period until the head or tail part is regenerated (e.g., (7), (8)).
Výměnu plynů je třeba zajistit provzdušňováním zkušebních nádob alespoň dvakrát za týden v případě, že se používají šroubovací víka.
This means that in L. variegatus exposure via ingestion of contaminated sediment does not take place continuously.
Jestliže se používají kryty z gázy, je třeba věnovat zvláštní pozornost udržování obsahu vlhkosti v půdě (viz odstavce 8 a 24).
Therefore, a synchronisation should be performed to minimise uncontrolled reproduction and regeneration, and subsequent high variation in test results.
Obsah vody v půdním substrátu ve zkušebních nádobách se během zkoušky udržuje vážením a podle potřeby pravidelným přidáváním vody do zkušebních nádob (např. jednou za týden).
Such variation can occur, when some individuals, which have fragmented and therefore do not feed for a certain time period, are less exposed to the test chemical than other individuals, which do not fragment during the test (9), (10), (11).
Obsah vlhkosti by se během zkoušky neměl od počáteční hodnoty lišit o více než 10 %.
10 to 14 days before the start of exposure, the worms should be artificially fragmented (synchronisation).
Ukázalo se, že vhodným zdrojem krmiva jsou sýrohubi zhoubní (Tyrophagus putrescentiae (Schrank, 1781)).
Large (adult) worms, which preferably do not show signs of recent morphallaxis should be selected for synchronisation.
Vhodní mohou být rovněž malí chvostoskoci (např. mláďata Folsomia candida Willem, 1902 nebo Onychiurus fimatus (19, 20), roupice (např. Enchytraeus crypticus Westheide a Graefe, 1992) nebo hlístice (např. Turbatrix silusiae de Man, 1913)) (21).
These worms can be placed onto a glass slide in a drop of culture water, and dissected in the median body region with a scalpel.
Doporučuje se krmivo před použitím ve zkoušce kontrolovat.
Care should be taken that the posterior ends are of similar size.
Druh a množství krmiva by měly zaručit adekvátní počet mláďat, aby byla splněna kritéria platnosti (odstavec 6).
The posterior ends should then be left to regenerate new heads in a culture vessel containing the same substrate as used in the culture and reconstituted water until the start of exposure.
Při výběru kořisti je třeba brát v úvahu režim působení zkoušené látky (např. akaricid může být pro potravinové roztoče rovněž toxický, viz odstavec 26).
Regeneration of new heads is indicated when the synchronised worms are burrowing in the substrate (presence of regenerated heads may be confirmed by inspecting a representative subsample under a binocular microscope).
Krmivo se dodává ad libitum (tj. pokaždé malé množství (špička špachtle)).
The test organisms are thereafter expected to be in a similar physiological state.
Pro tento účel je rovněž možné použít odsávač se slabým sáním, jak je navrženo ve zkoušce s chvostoskoky, nebo jemný štěteček.
This means, that when reproduction by morphallaxis occurs in synchronised worms during the test, virtually all animals are expected to be equally exposed to the spiked sediment.
Postačující obvykle bude podávat krmivo na začátku zkoušky a dvakrát až třikrát týdně.
Feeding of the synchronised worms should be done once as soon as the worms are starting to burrow in the substrate, or 7 d after dissection.
Jestliže se ukáže, že zkoušená látka je pro organismy sloužící jako krmivo toxická, je třeba zvážit zvýšenou rychlost krmení anebo alternativní zdroj krmiva.
The feeding regimen should be comparable to the regular cultures, but it may be advisable to feed the synchronised worms with the same food source as is to be used in the test.
Předchozí znalost toxicity zkoušené chemické látky by měla pomoci při výběru vhodných zkušebních koncentrací, např. z orientačních studií.
The worms should be held at test temperature, at 20 ± 2 °C.
V případě potřeby se provede orientační zkouška s pěti koncentracemi zkoušené chemické látky v rozpětí 0,1–1000 mg/kg sušiny půdy, s alespoň jedním opakováním pro exponované a kontrolní nádoby.
After regenerating, intact complete worms, which are actively swimming or crawling upon a gentle mechanical stimulus, should be used for the test.
Orientační zkouška trvá 14 dní; pak se stanoví mortalita dospělých roztočů a počet mláďat.
Injuries or autotomy in the worms should be prevented, e.g. by using pipettes with fire polished edges, or stainless steel dental picks for handling these worms.
Rozpětí koncentrací se v hlavní zkoušce přednostně zvolí tak, aby zahrnovalo koncentrace, při nichž je počet mláďat ovlivněn, zatímco přežití mateřské generace ovlivněno není.
Sources of starter cultures for Lumbriculus variegatus (addresses in the U.S. adopted from (4))
Extrapolace hluboko pod nejnižší koncentraci ovlivňující zkušební organismy nebo vysoko nad nejvyšší zkoušenou koncentraci by se měla provádět pouze ve výjimečných případech a v takovém případě je třeba uvést úplné vysvětlení v závěrečné zprávě.
U.S.A.
Zkoušky dávka-odezva
Department of Fisheries and Wildlife
Jsou navrženy tři uspořádání zkoušky na základě doporučení vyplývajících z jiného okružního testu (zkouška toxicity pro reprodukci s roupicovitými (22)).
No. 13 Natural Resources Building
Všeobecná vhodnost všech těchto návrhů byla potvrzena závěry validace u H. aculeifer.
Summary of the ring test results
K určení ECx (např. EC10, EC50) by mělo být zkoušeno dvanáct koncentrací.
“Sediment Toxicity Test with Lumbriculus variegatus”
Jestliže v orientační zkoušce nejsou pozorovány žádné účinky při nejvyšší koncentraci (tj. 1000 mg/kg sušiny půdy), může být hlavní zkouška toxicity pro reprodukci provedena jako limitní zkouška s použitím zkoušené koncentrace 1000 mg/kg sušiny půdy.
Results of individual ring test runs:
Limitní zkouška poskytne možnost prokázat, že hodnota NOEC nebo EC10 u reprodukce je větší než mezní koncentrace, přičemž je minimalizován počet roztočů použitých při zkoušce.
Mean worm numbers in the controls and solvent controls at the end of the test;
Všechny pozorované rozdíly mezi chováním a morfologií roztočů v kontrolních a exponovaných nádobách je třeba zaznamenat.
SD = standard deviation;
V den 14 se přeživší roztoči vyjmou z půdy pomocí tepelné/světelné extrakce nebo jiné vhodné metody (viz dodatek 5).
CV = coefficient of variation
Odděleně se spočítá počet mláďat (tj. larvy, protonymfy a deutonymfy) a dospělých jedinců.
mean worm number in the controls
Všichni dospělí roztoči v tuto chvíli nenalezení se zaznamenají jako mrtví, přičemž se předpokládá, že takoví roztoči uhynuli a rozložili se před vyhodnocením.
mean worm number in the solvent controls
Účinnost extrakce se musí potvrdit jednou nebo dvakrát ročně na kontrolních vzorcích se známými počty dospělých a mláďat.
interlaboratory mean
Účinnost by měla být vyšší než 90 % v průměru kombinovaném pro všechna vývojová stádia (viz dodatek 5).
Mean total dry weights of worms per replicate in the controls and solvent controls at the end of the test;
Počty dospělých a mláďat se pro účinnost neupravují.
CV = coeff. of variation
Informace o statistických metodách, které je možné použít pro analyzování výsledků zkoušek, jsou uvedeny v odstavcích 36 až 41.
total dry weight of worms per replicate (controls)
Kromě toho je třeba brát v úvahu dokument OECD č. 54 ‚Současné přístupy ve statistické analýze údajů o ekotoxicitě: Pokyny pro aplikaci‘ (Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application) (31).
total dry weight of worms per replicate (solvent controls)
Hlavní cílovým ukazatelem je reprodukční schopnost, v tomto případě počet zplozených mláďat na zkušební nádobu určenou k opakování (s vloženými 10 dospělými samičkami).
Toxicity of PCP:
Pro statistickou analýzu je třeba spočítat u exponovaných a kontrolních nádob aritmetický průměr (X) a rozptyl (s2) reprodukční schopnosti.
Summary of endpoints in the ring test;
X a s2 se použijí pro postupy ANOVA, jako je např. Studentův t-test, Dunnettův test nebo Williamsův test a rovněž pro výpočet 95 % intervalů spolehlivosti.
interlaboratory means for EC50, NOEC and LOEC;
Tento hlavní cílový ukazatel je rovnocenný plodnosti měřené jako počet živých mláďat zplozených během zkoušky dělený počtem rodičovských samiček vložených na začátku zkoušky.
minimum detectable difference from the control values during hypothesis testing;
Počet přeživších samiček v neexponovaných kontrolních vzorcích je hlavním kritériem platnosti a musí být dokumentován.
used as a measure of statistical power.
Stejně jako při orientační zkoušce je třeba i v závěrečné zprávě z hlavního testu zaznamenat další škodlivé znaky.
biological parameter
Hodnoty ECx, včetně s nimi spojené dolní a horní 95 % meze spolehlivosti pro parametr popsaný v odstavci 34, se vypočítají použitím vhodných statistických metod (např. probitové analýzy, logistické nebo Weibullovy funkce, upravené Spearman-Karberovy metody nebo jednoduché interpolace).
Inter- laboratory mean (mg/kg)
Pro výpočet EC50 nebo jakékoli jiné ECx je třeba průměry pro exponované vzorky (X) podrobit regresní analýze.
Inter- laboratory factor
Normální rozložení dat lze testovat použitím např. Kolmogorov-Smirnovova testu dobré shody, testu poměru rozpětí ke směrodatné odchylce (R/s-test) nebo Shapiro-Wilkova testu (dvoustranný, p ≤ 0,05).
geometr. mean (mg/kg)
Byla-li provedena limitní zkouška (porovnání kontrolní skupiny a pouze jedné exponované skupiny) a jsou-li splněny podmínky pro parametrické zkušební postupy (normalita rozdělení, homogenita rozptylu), je možné hodnotit spojité proměnné pomocí Studentova testu (t-testu).
total number of worms
Závěrečná zpráva by měla obsahovat minimálně tyto údaje:
total dry weight of worms
identita zkoušené chemické látky, název, šarže, dávka a číslo CAS, čistota,
mortality/survival
fyzikálně-chemické vlastnosti zkoušené chemické látky (např. log Kow, rozpustnost ve vodě, tlak par, Henryho konstanta (H) a informace o osudu zkoušené chemické látky v půdě).
reproduction (increase of number of worms per replicate)
identifikace a dodavatel zkušebních organismů, popis kultivačních podmínek,
growth (biomass increase per replicate)
věkové rozpětí zkušebních organismů.
C.36 PREDATORY MITE (HYPOASPIS (GEOLAELAPS) ACULEIFER) REPRODUCTION TEST IN SOIL
podrobná specifikace, jestliže se používá přírodní půda (původ, historie, rozložení velikosti částic, pH, obsah organické hmoty a klasifikace půdy, jestliže je dostupná),
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 226 (2008).
velikost zkušebních nádob a hmotnost sušiny zkušební půdy na nádobu,
This test method is designed to be used for assessing the effects of chemicals in soil on the reproductive output of the soil mite species Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer Canestrini (Acari: Laelapidae), hence allowing for the estimation of the inhibition of the specific population growth rate (1,2).
pH a obsah vody v půdě na začátku a během zkoušky (kontrolní vzorek a všechny exponované vzorky),
Reproductive output here means the number of juveniles at the end of the testing period.
podrobný popis extrakční metody a účinnost extrakce.
H. aculeifer represents an additional trophic level to the species for which test methods are already available.
Výsledky zkoušek
A reproduction test without discrimination and quantification of the different stages of the reproductive cycle is considered adequate for the purpose of this test method.
počet nedospělých jedinců zjištěných v každé zkušební nádobě na konci zkoušky,
For chemicalsubstances with another exposure scenario than via the soil other approaches might be appropriate (3).
počet dospělých samiček a mortalita dospělých jedinců ( %) v každé zkušební nádobě na konci zkoušky,
Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer is considered to be a relevant representative of soil fauna and predatory mites in particular.
popis zjevných symptomů nebo výrazných změn v chování,
It is worldwide distributed (5) and can easily be collected and reared in the laboratory.
souhrn statistického zpracování (ECx anebo NOEC ), včetně 95 % mezí spolehlivosti, a popis metody výpočtu,
A summary on the biology of H. aculeifer is provided in Appendix 7.
graf vztahu koncentrace-odezva,
Background information on the ecology of the mite species and the use in ecotoxicological testing is available (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10), (11), (12).
odchylky od postupů popsaných v této zkušební metodě a jakékoli neobvyklé jevy během zkoušky.
Adult females are exposed to a range of concentrations of the test chemical mixed into the soil.
Kapitola C.8 této přílohy – Zkouška toxicity pro reprodukci žížal.
The test is started with 10 adult females per replicate vessel.
Kapitola C.32 této přílohy – Zkouška toxicity pro reprodukci roupicovitých.
Males are not introduced in the test, because experience has shown that females mate immediately or shortly after hatching from the deutonymph stage, if males are present.
Diet-dependent female choice for males with ‚good genes‘ in a soil predatory mite.
In addition, inclusion of males would prolong the test in a way that the demanding discrimination of age stages would become necessary.
Pro tuto zkušební metodu jsou použitelné následující definice (v této zkoušce se všechny koncentrace vyvolávající účinek vyjádří v hmotnosti zkoušené chemické látky vztažené na jednotku suché hmotnosti zkušební půdy).
Thus, mating itself is not part of the test.
Chemická látka je látka nebo směs.
The females are introduced into the test 28-35 days after the start of the egg laying period in the synchronisation (see Appendix 4), as the females can then be considered as already mated and having passed the pre-oviposition stage.
LOEC (Lowest Observed Effect Concentration) je zkratkou pro nejnižší koncentraci s pozorovanými účinky, což je nejnižší koncentrace zkoušené chemické látky, která má pro danou expoziční dobu statisticky významný účinek (na hladině spolehlivosti p < 0,05) ve srovnání s kontrolami.
At 20 °C the test ends at day 14 after introducing the females (day 0), which allows the first control offspring to reach the deutonymph stage (see Appendix 4).
ECx (účinná koncentrace pro x % účinek) je koncentrace, která má x % účinek na zkušební organismy během dané expoziční doby ve srovnání s kontrolou.
For the main measured variable, the number of juveniles per test vessels and additionally the number of surviving females are determined.
Zkoušená chemická látka je jakákoli látka nebo směs zkoušená použitím této zkušební metody.
The reproductive output of the mites exposed to the test chemical is compared to that of the controls in order to determine the ECx (e.g. EC10, EC50) or the no observed effect concentration (NOEC) (see Appendix 1 for definitions), depending on the experimental design (see paragraph 29).
Následující metoda stanovení maximální retenční vodní kapacity půdy je považována za vhodnou.
An overview of the test schedule is given in Appendix 8.
Je popsána v příloze C ISO DIS 11268-2 (Kvalita půdy – Účinky znečišťujících látek na žížaly (Eisenia fetida).
The water solubility, the log Kow, the soil water partition coefficient and the vapour pressure of the test chemical should preferably be known.
Část 2: Stanovení účinků na reprodukci (23)).
Additional information on the fate of the test chemical in soil, such as the rates of biotic and abiotic degradation, is desirable.
Dno trubky se zakryje kusem filtračního papíru, trubka se naplní vodou a umístí na stojan ve vodní lázni.
The following criteria should be satisfied in the untreated controls for a test result to be considered valid:
Kvalita půdy – Stanovení pH (16).
Mean adult female mortality should not exceed 20 % at the end of the test;
Chov dravých roztočů druhu Hypoaspis (Geolaelaps ) aculeifer, potravinoví roztoči a synchronizace kultury
The mean number of juveniles per replicate (with 10 adult females introduced) should be at least 50 at the end of the test;
Chov druhu Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer:
The coefficient of variation calculated for the number of juvenile mites per replicate should not be higher than 30 % at the end of the definitive test.
Kultury mohou být udržovány v plastových nádobách nebo sklenicích naplněných směsí pálené sádry a mletého dřevěného uhlí (9:1).
The ECx and/or NOEC of a reference chemical must be determined to provide assurance that the laboratory test conditions are adequate and to verify that the response of the test organisms did not change over time.
Sádru je možné udržovat vlhkou přidáním několika kapek destilované nebo deionizované vody podle potřeby.
Dimethoate (CAS 60-51-5) is a suitable reference chemical that has shown to affect population size (4).
Teplota chovu je optimálně mezi 20 ± 2 °C, režim světlo/tma není pro tento druh důležitý.
Boric acid (CAS 10043-35-3) may be used as an alternative reference chemical.
Kořistí mohou být roztoči druhu Typrophagus putrescentiae nebo Caloglyphus (s potravinovými roztoči se musí zacházet opatrně, neboť by u člověka mohli způsobit alergickou reakci), ale hlístice, roupicovití a chvostoskoci jsou rovněž vhodní jako kořist.
Less experience has been gained with this chemical.
Jejich zdroj je třeba zaznamenat.
Two design options are possible:
Vývoj populace může být zahájen s jednou samičkou, protože samečci se vyvíjejí z neoplodněných vajíček.
The reference chemical can be tested in parallel to the determination of the toxicity of each test chemical at one concentration, which has to be demonstrated beforehand in a dose response study to result in an effect of > 50 % reduction of offspring.
Generace se široce překrývají.
In this case, the number of replicates should be the same as that in the controls (see paragraph 29).
Samička může žít alespoň 100 dní a může během svého života naklást přibližně 100 vajíček.
Alternatively, the reference chemical is tested 1 - 2 times a year in a dose-response test.
Při chovné teplotě 20 °C se toho dosáhne takto:
Depending on the design chosen, the number of concentrations and replicates and the spacing factor differ (see paragraph 29), but a response of 10 - 90 % effect should be achieved (spacing factor of 1,8).
Samičky se přemístí do čisté chovné nádoby a přidá se dostatek krmiva
The EC50 for dimethoate based on the number of juveniles should fall in the range between 3,0 and 7,0 mg a.s./kg soil (dw).
Dva až tři dny se samičky ponechají pro nakladení vajíček, pak se vyjmou.
Based on the results obtained with boric acid so far, the EC50 based on the number of juveniles should fall in the range between 100 and 500 mg/kg dw soil.
Dospělé samičky se odeberou pro zkoušku mezi 28. a 35. dnem od začátku jejich umístění do čistých chovných nádob.
Test vessels and equipment
Vývoj roztočů pokračuje přibližně podle modelu popsaného níže při 20 °C (obrázek):
Screw lids are preferred and in that case, the vessels could be aerated twice a week.
vajíčko 5 dní, larva 2 dny, protonymfa 5 dní, deutonymfa 7 dní, období před kladením vajíček u samiček 2 dny.
Alternatively, covers that permit direct gaseous exchange between the substrate and the atmosphere (e.g. gauze) can be used.
Pak jsou roztoči dospělí.
Since moisture content must be kept high enough during the test, it is essential to control the weight of each experimental vessel during the test and replenish water if necessary.
Obrázek
This may be especially important if no screw lids are available.
Vývoj roztočů druhu Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer při 20 °C.
If a non-transparent test vessel is used, the cover should be made of material that allows for access to light (e.g. by means of a perforated transparent cover) whilst preventing the mites from escaping.
(odebrání = samičky použité pro zkoušku)
The size and type of the test vessel depends on the extraction method (see Appendix 5 for details).