natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Rychlost vývoje je z hlediska hodnocení těchto studií toxicity sedimentů upřednostňována před dobou vývoje vzhledem ke své nižší variabilitě, vyšší homogenitě a vyšší blízkosti normálnímu rozdělení.
The latter requires a comparison of treatment responses with the appropriate control responses using statistical tests.
Mohou být tudíž použity silnější parametrické zkušební postupy pro rychlost vývoje než pro dobu vývoje.
It should be noted that in the spiked water scenario, in case of fast degrading chemicals, the later life stages of each generation (e.g. pupal phase) might be exposed to a considerably lower concentration level in the overlying water than the 1st instar larvae.
Pro rychlost vývoje jako kontinuální odezvu lze hodnoty ECx stanovit odhadem pomocí regresní analýzy (např. (29)(30)).
If this is a concern, and a comparable exposure level for each life stage is needed, the following amendments of the test method might be considered:
Hodnotu NOEC pro střední rychlost vývoje lze stanovit metodami analýzy ANOVA, např. Williamsovým nebo Dunnettovým testem.
parallel runs with spiking at different life stages, or
Jelikož se samečci líhnou dříve než samičky, tj. mají vyšší rychlost vývoje, má smysl kromě celkové rychlosti vývoje pakomárů vypočítat i rychlost vývoje pro každé pohlaví zvlášť.
repeated spiking (or overlying water renewal) of the test system during both test phases (1st and 2nd generation), whereby the spiking (renewal) intervals should be adjusted to the fate characteristics of the test chemical.
Pro účely statistických testů se má za to, že počet pakomárů pozorovaných v den pozorování x se vylíhl uprostřed časového intervalu mezi dnem x a dnem x – l (l = délka intervalu mezi pozorováními, obvykle 1 den).
Such amendments are only feasible in the spiked water scenario, but not in the sediment spiked scenario.
Střední rychlost vývoje v nádobě ( x
The water solubility of the test chemical, its vapour pressure and log Kow, measured or calculated partitioning into sediment and stability in water and sediment should be known.
) se vypočte podle vzorce:
A reliable analytical method for the quantification of the test chemical in overlying water, pore water and sediment with known and reported accuracy and limit of detection should be available.
střední rychlost vývoje v nádobě,
Useful information includes the structural formula and purity of the test chemical.
i index intervalu mezi pozorováními,
Chemical fate of the test chemical (e.g. dissipation, abiotic and biotic degradation, etc.) is also useful.
m počet všech intervalů mezi pozorováními,
Further guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to perform the test is provided in (16).
počet vylíhlých jedinců během daného intervalu i mezi pozorováními,
Reference chemicals may be tested periodically as a means of assuring that the sensitivity of the laboratory population has not changed.
počet vylíhlých jedinců celkem na konci pokusu (Σfi)
As with daphnids it would be sufficient to perform a 48-h acute test (following 17).
rychlost vývoje pakomárů vylíhlých v intervalu i;
However, until a validated acute guideline is available a chronic test according to Chapter C.28 of this Annex may be considered.
den pozorování (ve dnech od zavedení larev),
Examples of reference toxicants used successfully in ring-tests and validation studies are:
délka intervalu i mezi pozorováními (ve dnech, obvykle 1 den).
lindane, trifluralin, pentachlorophenol, cadmium chloride and potassium chloride.
Poměr pohlaví
(1) (3) (6) (7) (18).
Poměry pohlaví jsou kvantitativní proměnné, a měly by proto být hodnoceny pomocí Fisherova exaktního testu nebo jiných vhodných metod.
For the test to be valid the following conditions apply:
Poměr pohlaví u C. riparius v přírodě činí jedna, tj. samečci a samičky se vyskytují ve stejných počtech.
the mean emergence in the control treatment should be at least 70 % at the end of the exposure period for both generations (1) (7);
U obou generací by s údaji o poměru pohlaví mělo být zacházeno stejným způsobem.
for C. riparius and C. yoshimatsui, 85 % of the total emerged adult midges from the control treatment in both generations should occur between 12 and 23 days after the insertion of the first instar larvae into the vessels;
Jelikož maximální počet pakomárů v nádobě (tj. 20) je příliš nízký pro smysluplnou statistickou analýzu, sloučí se celkový počet plně vylíhlých, živých pakomárů každého pohlaví ze všech nádob při jedné expozici.
for C. dilutus, a period of 20 to 65 days is acceptable;
Tyto netransformované údaje se podrobí testu oproti kontrole (s rozpouštědlem) nebo oproti sloučeným kontrolním údajům v kontingenční tabulce 2 × 2.
the mean sex ratio of fully emerged and alive adults (as female or male fraction) in the control treatment of both generations should be at least 0,4, but not exceed 0,6; for each breeding cage the number of egg ropes in the controls of the 1st generation should be at least 0,6 per female added to the breeding cage;
Reprodukce, vyjádřená jako reprodukční schopnost, se vypočítá jako počet šňůr vajíček na jednu samičku.
the fraction of fertile egg ropes in each breeding cage of the controls of the 1st generation should be at least 0,6; at the end of the exposure period for both generations, pH and the dissolved oxygen concentration should be measured in each vessel.
Konkrétněji se celkový počet šňůr vajíček nakladených v chovné kleci vydělí celkovým počtem živých a nepoškozených samiček nasazených do této klece.
The oxygen concentration should be at least 60 % of the air saturation value (ASV [9]), and the pH of overlying water should be between 6 and 9 in all test vessels;
Hodnotu NOEC pro reprodukční schopnost lze stanovit metodami analýzy ANOVA, např. Williamsovým nebo Dunnettovým testem.
the water temperature should not differ by more than ± 1,0 °C.
Fertility šňůr vajíček se užívá ke kvantifikaci počtu plodných šňůr vajíček na jednu samičku.
Test vessels and breeding cages
Konkrétněji se celkový počet plodných šňůr vajíček nakladených v chovné kleci vydělí celkovým počtem živých a nepoškozených samiček nasazených do této klece.
The larvae are exposed in 600 ml glass beakers measuring ca.
Hodnotu NOEC pro fertilitu lze stanovit metodami analýzy ANOVA, např. Williamsovým nebo Dunnettovým testem.
8,5 cm in diameter (see Appendix 5).
Závěrečná zpráva by měla obsahovat tyto údaje:
Other vessels are suitable, but they should guarantee a suitable depth of overlying water and sediment.
fyzikální povahu a fyzikálně-chemické vlastnosti (rozpustnost ve vodě, tlak par, log Kow, rozdělovací koeficient v půdě (případně v sedimentu), stabilita ve vodě a v sedimentu atd.),
The sediment surface should be sufficient to provide 2 to 3 cm2 per larvae.
chemické identifikační údaje (obecný název, chemický název, strukturní vzorec, číslo CAS atd.) včetně čistoty a analytické metody pro kvantitativní stanovení zkoušené chemické látky.
The ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be ca.
užité zkušební organismy:
1:4.
informace, jak bylo nakládáno se shluky vajíček a s larvami,
Breeding cages (minimum 30 cm in all three dimensions) with a gauze (mesh size ca.
informace o nakládání s vylíhlými dospělci první generace pomocí exhaustoru atd. (viz dodatek 5),
1 mm) on the top and one side of the cage as a minimum should be used (see Appendix 5).
stáří zkušebních organismů v době nasazení první a druhé generace do zkušebních nádob.
In each cage a 2 l crystallising dish, containing test water and sediment, is placed for oviposition.
použitý sediment, tj. přírodní nebo připravený (umělý) sediment,
Also for the crystallising dish, the ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be around 1:4.
u přírodního sedimentu:
After egg ropes are collected from the crystallising dish they are placed into a 12-well microtiter plate (one rope per well containing at least 2,5 ml water from the spiked crystallising dish) after which the plates are covered with a lid to prevent significant evaporation.
lokalita a popis místa odběru sedimentu, pokud možno včetně dřívější kontaminace;
Other vessels suitable for keeping the egg ropes may also be used.
charakteristika sedimentu:
With the exception of the microtiter plates, all test vessels and other apparatus that will come into contact with the test system should be made entirely of glass or other chemically inert material (e.g. Polytetrafluoroethylene).
pH, obsah organického uhlíku, poměr C/N a zrnitost (je-li to vhodné),
The species to be used in the test is preferably Chironomus riparius.
u připraveného sedimentu:
C. yoshimatsui may also be used.
příprava, složky a charakteristiky (obsah organického uhlíku, pH, vlhkost atd., měřeno na začátku zkoušky),
C. dilutus is also suitable but more difficult to handle and requires a longer test period.
příprava zkušební vody (pokud se používá rekonstituovaná voda) a její charakteristiky (koncentrace kyslíku, pH, tvrdost atd. na začátku zkoušky),
Details of culturing methods are given in Appendix 2 for C. riparius.
hloubka sedimentu a výška vody nad sedimentem ve zkušebních nádobách a v krystalizačních miskách,
Information on culture conditions are also available for C. dilutus (5) and C. yoshimatsui (14).
zkušební nádoby (materiál a rozměry),
Identification of the species should be confirmed before testing but is not required prior to every test if the organisms come from an in-house culture.
krystalizační misky (materiál a rozměry),
Formulated sediment (also called reconstituted, artificial or synthetic sediment) should preferably be used.
chovné klece (materiál a rozměry),
However, if natural sediment is used, it should be characterised (at least pH, organic carbon content, determination of other parameters such as C/N ratio and granulometry are also recommended) and should be free from any contamination and other organisms that may compete with, or consume chironomid larvae.
metoda přípravy zásobních roztoků a zkušebních koncentrací ve zkušebních nádobách a v krystalizačních miskách,
It is also recommended, before testing, that sediments are conditioned for seven days under test conditions.
aplikace zkoušené chemické látky do zkušebních nádob a krystalizačních misek:
The following formulated sediment, as described in (1), is recommended (1) (20) (21):
zkušební koncentrace, počet opakování a rozpouštědla, jsou-li nutná,
4-5 % (dry weight) peat:
inkubační podmínky ve zkušebních nádobách:
as close to pH 5,5 to 6,0 as possible;
teplota, cyklus a intenzita osvětlení, provzdušňování (bublin za sekundu),
it is important to use peat in powder form, finely ground (particle size ≤ 1 mm) and only air dried;
inkubační podmínky v chovných klecích a v krystalizačních miskách:
20 % (dry weight) kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %);
teplota, cyklus a intenzita osvětlení,
75-76 % (dry weight) quartz sand (fine sand should predominate with more than 50 per cent of the particles between 50 and 200 μm);
inkubační podmínky pro šňůry vajíček v mikrotitračních destičkách (nebo v jiných nádobách):
Deionised water is added to obtain moisture of the final mixture in the range of 30–50 %;
teplota, cyklus a intenzita osvětlení,
Calcium carbonate of chemically pure quality (CaCO3) is added adjust the pH of the final mixture of the sediment to 7,0 ± 0,5;
podrobné informace o krmení včetně typu krmiva, přípravy, množství a režimu krmení.
Organic carbon content of the final mixture should be 2 % (± 0,5 %) and is to be adjusted by the use of appropriate amounts of peat and sand, according to (a) and (c).
nominální zkušební koncentrace, naměřené zkušební koncentrace a výsledky všech analýz pro stanovení koncentrace zkoušené chemické látky ve zkušebních nádobách a v krystalizačních miskách,
The source of peat, kaolin clay and sand should be known.
kvalita vody ve zkušebních nádobách a v krystalizačních miskách, tj. pH, teplota, rozpuštěný kyslík, tvrdost a obsah amoniaku,
The sediment components should be checked for the absence of chemical contamination (e.g. heavy metals, organochlorine compounds, organophosphorous compounds).
případné nahrazování odpařené zkušební vody ve zkušebních nádobách,
An example for the preparation of the formulated sediment is described in Appendix 3.
počet vylíhlých samečků a samiček pakomárů v první a druhé generaci na nádobu za den,
Mixing of dry constituents is also acceptable if it is demonstrated that after addition of overlying water a separation of sediment constituents (e.g. floating of peat particles) does not occur, and that the peat or the sediment is sufficiently conditioned.
poměr pohlaví plně vylíhlých, živých pakomárů v první a druhé generaci při každé expozici,
Any water which conforms to the chemical characteristics of acceptable dilution water as listed in Appendices 2 and 4 is suitable as test water.
počet larev první a druhé generace, z nichž se nevylíhli pakomáři, na nádobu,
Any suitable water, natural water (surface or ground water), reconstituted water (see Appendix 2) or dechlorinated tap water are acceptable as culturing water and test water, if chironomids will survive in it for the duration of the culturing and testing without showing signs of stress.
procento vylíhlých jedinců na opakování a zkušební koncentraci (sloučený počet samečků a samiček pakomárů) v první a druhé generaci,
At the start of the test, the pH of the test water should be between 6 and 9 and the total hardness not higher than 400 mg/l as CaCO3.
střední rychlost vývoje plně vylíhlých, živých pakomárů na opakování a aplikované množství (zvlášť pro každé pohlaví a také sloučený počet samečků a samiček pakomárů) v první a druhé generaci,
However, if there is an interaction suspected between hardness ions and the test chemical, lower hardness water should be used (and thus, Elendt Medium M4 should not be used in this situation).
počet šňůr vajíček vložených do krystalizačních misek na chovnou klec za den,
The same type of water should be used throughout the entire study.
charakteristika každé šňůry vajíček (velikost, tvar a fertilita);
The water quality characteristics listed in Appendix 4 should be measured at least twice a year or when it is suspected that these characteristics may have changed significantly.
reprodukční schopnost – celkový počet šňůr vajíček na celkový počet samiček nasazených do chovné klece,
Stock solutions — Spiked water
fertilita – celkový počet plodných šňůr vajíček na celkový počet samiček nasazených do chovné klece,
a.
odhady ukazatelů toxicity, např. ECx (a související intervaly spolehlivosti), NOEC a statistické metody použité k jejímu stanovení,
Test concentrations are calculated on the basis of water column concentrations, i.e. the water overlying the sediment.
Kapitola C.28 této přílohy, Test toxicity na Chironomidae v systému sediment-voda za použití obohacené vody.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by dilution of a stock solution.
Kapitola C.27 této přílohy, Test toxicity na Chironomidae v systému sediment-voda za použití obohaceného sedimentu.
Stock solutions should preferably be prepared by dissolving the test chemical in test water.
J.
The use of solvents or dispersants may be required in some cases in order to produce a suitably concentrated stock solution.
Amer.
Examples of suitable solvents are acetone, ethylene glycol monoethyl ether, ethylene glycol dimethylether, dimethylformamide and triethylene glycol.
OECD (2006) Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application, OECD Series on Testing and Assessment No.
Dispersants which may be used are Cremophor RH40, Tween 80, methylcellulose 0,01 % and HCO-40.
54, pp.
The solubilising agent concentration in the final test medium should be minimal (i.e. ≤ 0,1 ml/l) and should be the same in all treatments.
146, ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
When a solubilising agent is used, it should have no significant effects on survival as revealed by a solvent control in comparison with a negative (water) control.
Připravený sediment nebo rekonstituovaný, umělý nebo syntetický sediment je směs materiálů užitá k napodobení fyzických složek přírodního sedimentu.
However, every effort should be made to avoid the use of such materials.
Voda nad sedimentem je voda nacházející se nad sedimentem ve zkušební nádobě.
Stock solutions — Spiked sediment
Intersticiální voda nebo kapilární voda je voda zaujímající prostor mezi sedimentem a částicemi půdy.
b.
Obohacená voda je zkušební voda, do níž byla přidána zkoušená chemická látka.
Spiked sediments of the chosen concentration are usually prepared by addition of a solution of the test chemical directly to the sediment.
Doporučení pro kultivaci kultury Chironomus riparius
A stock solution of the test chemical dissolved in deionised water is mixed with the formulated sediment by rolling mill, feed mixer or hand mixing.
Larvy rodu Chironomus lze chovat v krystalizačních miskách nebo ve větších nádobách.
If poorly soluble in water, the test chemical can be dissolved in as small a volume as possible of a suitable organic solvent (e.g. hexane, acetone or chloroform).
Jemný křemičitý písek se rozprostře po dně nádoby v tenké vrstvě silné 5 až 10 mm.
This solution is then mixed with 10 g of fine quartz sand for each test vessel.
Bylo prokázáno, že substrátem vhodným jako podklad je také křemelina (např. Merck, čl.
The solvent is allowed to evaporate and it should be totally removed from sand;
8117; dostačující je tenčí vrstva silná jen několik málo mm).
the sand is then mixed with the suitable amount of sediment.
Následně se přidá několikacentimetrová vrstva vhodné vody.
Only agents which volatilise readily can be used to solubilise, disperse or emulsify the test chemical.
Objem vody by se měl podle potřeby doplňovat s cílem nahradit ztráty vzniklé odpařováním a zabránit vysychání.
It should be born in mind that the sand provided by the test chemical and sand mixture, should be taken into account when preparing the sediment (i.e. the sediment should thus be prepared with less sand).
Vodu lze v případě potřeby vyměnit.
If necessary, subsamples can be analysed to determine degree of homogeneity.
Je třeba zajistit mírné provzdušňování.
The test design relates to the selection of the number and spacing of the test concentrations, the number of vessels at each concentration, the number of larvae per vessel, the number of crystallising dishes and breeding cages.
Nádoby, v nichž jsou larvy chovány, by měly být umístěny ve vhodné kleci, která zabrání úniku líhnoucích se dospělců.
Designs for ECx, NOEC and a limit test are described below.
Tato klec by měla být dostatečně velká, aby umožňovala rojení vylíhlých dospělců, jinak by nemuselo dojít k páření (minimální rozměry jsou přibližně 30 × 30 × 30 cm).
Design for analysis by regression
Klece by měly být umístěny při pokojové teplotě nebo v místnosti s konstantní teplotou 20 ± 2 °C s fotoperiodou 16 hodin světlo (intenzita osvětlení přibližně 1000 luxů) a 8 hodin tma.
The effect concentration (ECx) and the concentration range over which the effect of the test chemical is of interest, should be spanned by the test, such that the endpoint is not extrapolated outside the bounds of the data generated.
Bylo zjištěno, že vzdušná vlhkost nižší než 60 % RH může bránit rozmnožování.
Extrapolation much below the lowest or above the highest concentration should be avoided.
Lze použít jakoukoli vhodnou přírodní nebo syntetickou vodu.
A preliminary range-finding test according to Test Methods C.27 or C.28 may be helpful for selecting a suitable range of test concentrations.
Zpravidla se používá studniční voda, odchlorovaná vodovodní voda a umělá média (např. Elendtovo médium ‚M4‘ nebo ‚M7‘, viz níže).
For an ECx approach, at least five concentrations and eight replicates for each concentration are required.
Vodu je třeba před použitím provzdušnit.
For each concentration two breeding cages should be used (A and B).
Je-li to nutné, lze kultivační vodu obnovit opatrným odlitím nebo odčerpáním použité vody z kultivačních nádob tak, aby nedošlo k poškození schránek larev.
The eight replicates are divided into two groups of four replicates to serve each breeding cage.
Krmení larev
This merger of replicates is necessary due to the number of midges needed in the cage for sound reproduction assessments.
Larvy rodu Chironomus by se měly krmit vločkovým krmivem pro ryby (TetraMin®, Tetra Phyll® nebo jiná podobná značka patentovaného krmiva pro ryby) v množství přibližně 250 mg na nádobu a den.
However, the 2nd generation has eight replicates again, which are initiated from the exposed populations in the breeding cages.
Potravu lze aplikovat v podobě suchého mletého prášku nebo v podobě suspenze ve vodě:
The factor between concentrations should not be greater than two (an exception could be made in cases when the dose response curve has a shallow slope).
1,0 g vločkového krmiva se přidá do 20 ml ředicí vody a vytvoří se homogenní směs.
The number of replicates at each treatment can be reduced to six (three for each breeding case) if the number of test concentrations with different responses is increased.
Tento přípravek lze podávat v množství přibližně 5 ml na nádobu a den (před použitím protřepat).
Increasing the number of replicates or reducing the size of the test concentration intervals tends to lead to narrower confidence intervals around the ECX.
Starším larvám lze přidat více krmiva.
Design for estimation of a NOEC
Krmení se upraví podle kvality vody.
For a NOEC approach, five test concentrations with at least eight replicates (4 for each breeding cage, A and B) should be used and the factor between concentrations should not be greater than two.
V případě, že se kultivační médium ‚zakalí‘, je třeba krmnou dávku snížit.
The number of replicates should be sufficient to ensure adequate statistical power to detect a 20 % difference from the control at the 5 % level of significance (α = 0,05).
Přidávání potravy je nutno pečlivě sledovat.
For the development rate, fecundity and fertility an analysis of variance (ANOVA) is usually appropriate, followed by Dunnett's test or Williams' test (22-25).
Příliš malé množství krmiva způsobí, že larvy opouštějí sediment a vznášejí se ve vodním sloupci, a naopak příliš mnoho krmiva způsobí zvýšenou mikrobiální činnost a pokles koncentrace kyslíku.
For the emergence ratio and sex ratio the Cochran-Armitage, Fisher's exact (with Bonferroni correction), or Mantel-Haentzal tests may be appropriate.
Obojí může způsobit zpomalení růstu.
A limit test may be performed (one test concentration and control(s)) if no effects are observed in the optional preliminary range-finding test up to a maximum concentration.
Do nových kultivačních nádob mohou být přidány i buňky zelených řas (např. Scenedesmus subspicatus, Chlorella vulgaris).
The purpose of the limit test is to indicate that any toxic effects of the test chemical are found at levels greater than the limit concentration tested.
Krmení vylíhlých dospělců
For water, 100 mg/l and for sediment 1000 mg/kg (dry weight) are suggested.
Někteří experimentátoři navrhují, že jako potrava vylíhlých dospělců může sloužit vata namočená do nasyceného roztoku sacharózy.
Usually, at least eight replicates for both the treatment and control are necessary.
Dospělci se začnou v chovných nádobách líhnout při teplotě 20 ± 2 °C přibližně po 13–15 dnech.
Adequate statistical power to detect a 20 % difference from the control at the 5 % level of significance (α = 0,05) should be demonstrated.
Samečky lze snadno odlišit podle vějířovitých tykadel a štíhlého trupu.
With metric responses (e.g. development rate), the t-test is a suitable statistical method if data meet the requirements of this test (normality, homogeneous variances).
Shluky vajíček
An unequal-variance t-test or a non-parametric test, such as the Wilcoxon-Mann-Whitney test may be used, if these requirements are not fulfilled.
Jakmile se v chovné kleci nacházejí dospělci, je třeba třikrát týdně kontrolovat všechny reprodukční nádoby, zda se v nich nenacházejí shluky vajíček spojené rosolovitou hmotou.
With the emergence ratio, Fisher's exact test is appropriate.