natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Zvláštní podmínky pro statický systém s obnovováním média
Stressful conditions/activities should be avoided such as loud and/or incessant noise, tapping on aquaria, vibrations in the aquaria, excessive activity in the laboratory, and rapid changes in environmental media (light availability, temperature, pH, DO, water flow rates, etc.)
Reprezentativní chemické analýzy před a po obnovení média by měly být zaznamenány
If tadpoles do not develop to stage 51 within 17 days after fertilisation, excessive stress should be considered as a potential culprit.
Úrovně amoniaku by měly být měřeny bezprostředně před obnovením média
Larval Culture and Feeding
Všechny parametry kvality vody uvedené v tabulce 1 dodatku 1 by měly být měřeny bezprostředně před obnovením média
Tadpoles are fed with e.g. the commercial tadpole feed used in the validation studies (see also appendix 1) throughout the pre-exposure period (after Nieuwkoop and Faber (NF) stage 45/46 (8)) and during the entire test period of 21 days, or other diet that has demonstrated to allow equal performance of the Amphibian Metamorphosis Assay.
Období mezi obnoveními by nemělo být delší než 72 hodin
The feeding regime during the pre-exposure period should be carefully adjusted to meet the demands of the developing tadpoles.
Vhodný krmný plán (50 % denní dávky potravy tvoří komerčně dostupné krmivo pro pulce)
That is, small portions of food should be provided to the newly hatched tadpoles several times per day (at least twice).
Validita zkoušky
Excess food should be avoided in order i) to maintain water quality and ii) to prevent the clogging of gill filters with food particles and detritus.
Aby bylo možné považovat zkoušku za přijatelnou/platnou, musí být splněny tyto požadavky:
For the tadpole feed used in the validation studies, the daily food rations should be increased along with tadpole growth to approximately 30 mg/animal/day shortly before test initiation.
Experiment při zkoušce, která z hlediska činnosti štítné žlázy byla shledána jako negativní, je považován za platný za těchto podmínek:
This commercially available feed has been shown in the validation studies to support proper growth and development of X. laevis tadpoles, and is a fine particulate that stays suspended in the water column for a long period of time and is subject to washing out with the flow.
Při každé dané expozici (včetně kontrolních skupin) nesmí mortalita přesáhnout 10 %.
Therefore, the total daily amount of food should be divided into smaller portions and fed at least twice daily.
Při každém daném opakování nesmí mortalita postihnout více než tři pulce, jinak je toto opakování považováno za zpochybněné.
For this feed the feeding regime is outlined in Table 1.
Alespoň dvě úrovně expozice se všemi čtyřmi nezpochybněnými opakováními musí být dostupné pro analýzu.
Feeding rates should be recorded.
Alespoň dvě úrovně expozice bez zjevné toxicity musí dostupné pro analýzu.
It can be fed dry or as a stock solution prepared in dilution water.
Platný experiment při zkoušce, která z hlediska činnosti štítné žlázy byla shledána jako pozitivní:
Such a stock solution should be freshly prepared every other day and stored at 4 °C when not in use.
Může dojít k mortalitě nejvýše u dvou pulců/opakování v kontrolní skupině.
Feeding regime with commercial tadpole feed used in the validation studies for X. laevis tadpolesduring the in-life portion of the AMA in flow-through conditions
Rozhodovací logika pro provádění zkoušky metamorfózy obojživelníků.
Study Day
Pro zkoušku metamorfózy obojživelníků byla vypracována rozhodovací logika s cílem poskytnout logickou pomoc při provádění a interpretaci výsledků této biologické zkoušky (viz vývojový diagram na obrázku 3).
Food ration (mg feed/animal/day)
Logika rozhodování v podstatě spočívá ve vážení ukazatelů, přičemž pokročilý vývoj, asynchronní vývoj a histopatologie štítné žlázy jsou považovány za závažné, a opožděný vývoj, délka těla od tlamy po kloaku a tělesná hmotnost ve vlhkém stavu, tj. parametry, které potenciálně mohou být ovlivněny obecnou toxicitou, jsou považovány za méně závažné.
Analytical Chemistry
Urychlený vývoj (určený pomocí stadia vývoje, délky od tlamy po kloaku a délky zadní končetiny)
Prior to conducting a study, the stability of the test chemical should be evaluated using existing information on its solubility, degradability and volatility.
Je známo, že urychlený vývoj nastává pouze v důsledku účinků, které souvisí s hormonem štítné žlázy.
Test solutions from each replicate tank at each concentration should be sampled for analytical chemistry analyses at test initiation (day 0), and weekly during the test for a minimum of four samples.
Může se jednat o účinky na periferních tkáních, jako je přímá interakce s receptorem tyreoidálních hormonů (např. T4), nebo účinky, které mění hladiny cirkulujících hormonů štítné žlázy.
It is also recommended that each test concentration be analysed during system preparation, prior to test initiation, to verify system performance.
V každém z těchto případů je to považováno za dostatečný důkaz toho, že chemická látka ovlivňuje činnost štítné žlázy.
In addition, it is recommended that stock solutions be analysed when they are changed, especially if the volume of the stock solution does not provide adequate amounts of chemical to span the duration of routine sampling periods.
Urychlený vývoj se hodnotí jedním ze dvou způsobů.
In the case of chemicals which cannot be detected at some or all of the concentrations used in a test, stock solutions should be measured and system flow rates recorded in order to calculate nominal concentrations.
Zaprvé lze hodnotit obecné stadium vývoje pomocí standardizované metody podrobně popsané ve studii Nieuwkoopa a Fabera (8).
Chemical Delivery
Zadruhé lze kvantifikovat specifické morfologické rysy, jako je délka zadní končetiny, v den 7 a 21, což pozitivně souvisí s agonistickými účinky na receptor tyreoidálních hormonů.
The method used to introduce the test chemical to the system can vary depending on its physicochemical properties.
Pokud se vyskytnou statisticky významné pokroky ve vývoji nebo v délce zadních končetin, pak ze zkoušky vyplývá, že chemická látka ovlivňuje činnost štítné žlázy.
Water soluble chemicals can be dissolved in aliquots of test water at a concentration which allows delivery at the target test concentration in a flow-through system.
Hodnocení pokusných organismů na přítomnost zrychleného vývoje v porovnání s kontrolní populací bude vycházet z výsledků statistických analýz zaměřených na tyto čtyři ukazatele:
Chemicals which are liquid at room temperature and sparingly soluble in water can be introduced using liquid:liquid saturator methods.
délka zadní končetiny (normalizovaná podle délky od tlamy po kloaku) v den 7 studie,
Chemicals which are solid at room temperature and are sparingly soluble in water can be introduced using glass wool column saturators (7).
délka zadní končetiny (normalizovaná podle délky od tlamy po kloaku) v den 21 studie,
The preference is to use a carrier-free test system, however different test chemicals will possess varied physicochemical properties that will likely require different approaches for preparation of chemical exposure water.
stadium vývoje v den 7 studie,
It is preferred that effort be made to avoid solvents or carriers because:
stadium vývoje v den 21 studie.
certain solvents themselves may result in toxicity and/or undesirable or unexpected endocrinological responses, ii) testing chemicals above their water solubility (as can frequently occur through the use of solvents) can result in inaccurate determinations of effective concentrations, and iii) the use of solvents in longer-term tests can result in a significant degree of “biofilming” associated with microbial activity.
Statistické analýzy délky zadní končetiny je třeba provádět na základě měření délky levé zadní končetiny.
For difficult to test chemicals, a solvent may be employed as a last resort, and the OECD Guidance Document on aquatic toxicity testing of difficult substances and mixtures should be consulted (4) to determine the best method.
Délka zadní končetiny se normalizuje stanovením poměru mezi délkou zadní končetiny a délkou těla od tlamy po kloaku jedince.
Solvents which have been found to be effective for aquatic toxicity testing include acetone, ethanol, methanol, dimethyl formamide and triethylene glycol.
Střední hodnoty z těchto normalizovaných hodnot u každé úrovně expozice se poté porovnají.
In case a solvent carrier is used, solvent concentrations should be below the chronic No Observed Effect Concentration (NOEC);
Zrychlení vývoje je pak indikováno významným zvýšením (normalizované) střední hodnoty délky zadní končetiny ve skupině exponované chemické látce v porovnání s kontrolní skupinou v den 7 studie a/nebo v den 21 studie (viz dodatek 3).
the OECD Guidance Document recommends a maximum of 100 μl/l;
Statistické analýzy stadia vývoje je třeba provádět na základě určení vývojových stadií podle morfologických kritérií popsaných Nieuwkoopem a Faberem (8).
a recent review recommends that solvent concentrations as low as 20 μl/l of dilution water be used (12).
Zrychlení vývoje je indikováno, pokud se multikvantovou analýzou zjistí významné zvýšení hodnot stadií vývoje ve skupině exponované chemické látce v porovnání s kontrolní skupinou v den 7 studie a/nebo v den 21 studie.
If solvent carriers are used, appropriate solvent controls should be evaluated in addition to non-solvent controls (clean water).
Významný účinek na kterýkoli ze čtyř výše uvedených ukazatelů je v této zkušební metodě pro zkoušku metamorfózy obojživelníků považován za dostatečný pro potvrzení urychleného vývoje.
If it is not possible to administer a chemical via the water, either because of physicochemical characteristics (low solubility) or limited chemical availability, introducing it via the diet may be considered.
To znamená, že významné účinky na délku zadní končetiny v určitém čase nevyžadují potvrzení významnými účinky na délku zadní končetiny v alternativním časovém bodu ani významnými účinky na stadium vývoje v tomto určitém čase.
Preliminary work has been conducted on dietary exposures;
A naopak, významné účinky na stadium vývoje v určitém čase nevyžadují potvrzení významnými účinky na stadium vývoje v alternativním časovém bodu ani významnými účinky na délku zadní končetiny v tomto určitém čase.
however, this route of exposure is not commonly used.
Váha důkazů pro urychlený vývoj nicméně vzroste, jsou-li zjištěny významné účinky na více než jeden ukazatel.
The choice of method should be documented and analytically verified.
Asynchronní vývoj (určený pomocí kritérií stadia vývoje)
Establishing the High Test Concentration
Pro asynchronní vývoj je typické narušení relativního načasování morfogeneze nebo vývoj různých tkání u jednotlivých pulců.
For the purposes of this test, the high test concentration should be set by the solubility limit of the test chemical;
Není-li možné jasně stanovit stadium vývoje organismu pomocí souboru morfologických ukazatelů, které jsou pro kterékoli dané stadium typické, ukazuje to na to, že tkáně se v průběhu metamorfózy vyvíjejí asynchronně.
the maximum tolerated concentration (MTC) for acutely toxic chemicals;
Asynchronní vývoj je jedním z indikátorů činnosti štítné žlázy.
or 100 mg/l, whichever is lowest.
Jedinými známými druhy působení, jež způsobují asynchronní vývoj, jsou buď účinky chemických látek na periferní působení hormonu štítné žlázy a/nebo metabolismus hormonu štítné žlázy ve vyvíjejících se tkáních, např. který lze pozorovat u inhibitorů deiodinasy.
The MTC is defined as the highest test concentration of the chemical which results in less than 10 % acute mortality.
Hodnocení pokusných zvířat na přítomnost asynchronního vývoje v porovnání s kontrolní populací bude založeno na makroskopickém morfologickém posouzení pokusných zvířat v den 7 studie a v den 21 studie.
Using this approach assumes that there are existing empirical acute mortality data from which the MTC can be estimated.
Popis normálního vývoje Xenopus laevis u Nieuwkoopa a Fabera (8) poskytuje rámec pro identifikaci postupu normální přestavby tkání.
Although the use of regression models may be the most technically sound approach to estimating the MTC, a useful approximation of the MTC can be derived from existing acute data by using 1/3 of the acute LC50 value.
Termínem ‚asynchronní vývoj‘ se označují zvláště ty odchylky v makroskopickém morfologickém vývoji pulců, které znemožňují s konečnou platností určit stadium vývoje podle kritérií Nieuwkoopa a Fabera (8), jelikož klíčové morfologické znaky vykazují význačné rysy různých stadií.
However, acute toxicity data may be lacking for the species on test.
Jak vyplývá z pojmu ‚asynchronní vývoj‘, měly by být zohledněny pouze případy vykazující odchylky v průběhu přestavby určitých tkání v porovnání s průběhem přestavby jiných tkání.
If species specific acute toxicity data are not available, then a 96-hour LC50 test can be completed with tadpoles that are representative (i.e., same stage) of those on test in the AMA.
U některých klasických fenotypů dochází k pozdnímu vývinu nebo nevyvinutí předních končetin, a to i přes normální nebo pokročilý vývoj zadních končetin a ocasních tkání, nebo k předčasné resorpci žaber v porovnání se stadiem morfogeneze zadních končetin a resorpce ocasu.
Optionally, if data from other aquatic species are available (e.g. LC50 studies in fish or other amphibian species), then professional judgment may be used to estimate a likely MTC based on inter-species extrapolation.
U pokusného organismu se zaznamená, že vykazuje asynchronní vývoj, pokud nemůže být přiřazen ke stadiu, protože nesplňuje většinu kritérií vývojových znaků pro dané stadium podle Nieuwkoopa a Fabera (8), nebo pokud dojde k extrémnímu zpoždění nebo urychlení jednoho nebo více klíčových rysů (např. ocas je zcela resorbován, avšak přední končetiny se nevyvinuly).
Alternatively, if the chemical is not acutely toxic and is soluble above 100 mg/l, then 100 mg/l should be considered the highest test concentration (HTC), as this concentration is typically considered “practically non-toxic.”
Toto posouzení se provádí kvalitativně a měl by se vyšetřit celý soubor vývojových znaků uváděných Nieuwkoopem a Faberem (8).
Although not the recommended procedure, static renewal methods may be used where flow-through methods are inadequate to achieve the MTC.
Není však nutné zaznamenávat stav vývoje různých vývojových znaků pozorovaných zvířat.
If static renewal methods are used, then the stability of the test chemical concentration should be documented and remain within the performance criteria limits.
Zvířata, o nichž se zaznamená, že vykazují asynchronní vývoj, se nezařadí do stadia vývoje podle Nieuwkoopa a Fabera (8).
Twenty-four hour renewal periods are recommended.
Rozhodujícím kritériem pro určení případů abnormálního morfologického vývoje jako ‚asynchronního vývoje‘ je tedy to, že je narušeno relativní načasování přestavby tkání a morfogeneze tkání, zatímco morfologie dotčených tkání není zjevně abnormální.
Renewal periods exceeding 72 hours are not acceptable.
Příkladem pro ilustraci této interpretace makroskopických morfologických abnormalit je to, že zaostalá morfogeneze zadních končetin v porovnání s vývojem jiných tkání bude splňovat kritérium ‚asynchronního vývoje‘, naproti tomu případy vykazující chybějící zadní končetiny, jejich abnormální počet (např. ektrodaktylie, polydaktylie) nebo jiné zjevné malformace končetin by za ‚asynchronní vývoj‘ považovány být neměly.
Additionally, water quality parameters (e.g. DO, temperature, pH, etc.) should be measured at the end of each renewal period, immediately prior to renewal.
V této souvislosti by hlavní morfologické znaky, které je třeba hodnotit z hlediska jejich koordinovaného morfologického pokroku, měly zahrnovat morfogenezi zadních končetin, morfogenezi předních končetin, vývin předních končetin, stadium resorpce ocasu (zejména resorpce konce ocasu) a morfologii hlavy (např. velikost žaber a stadium resorpce žaber, morfologii dolní čelisti, protruzi Meckelovy chrupavky).
Test Concentration Range
V závislosti na způsobu chemického působení se mohou vyskytnout různé makroskopické morfologické fenotypy.
There is a required minimum of three test concentrations and a clean water control (and vehicle control if necessary).
U některých klasických fenotypů dochází k pozdnímu vývinu nebo nevyvinutí předních končetin, a to i přes normální nebo pokročilý vývoj zadních končetin a ocasních tkání, k předčasné resorpci žaber v porovnání s přetvořením zadních končetin a ocasu.
The minimum test concentration differential between the highest and lowest should be about one order of magnitude.
Histopatologie
The maximum dose separation is 0,1 and the minimum is 0,33.
Pokud chemická látka nezpůsobuje zjevnou toxicitu a neurychluje vývoj nebo nezpůsobuje asynchronní vývoj, pak se histopatologie štítné žlázy hodnotí podle příslušného Metodického dokumentu OECD (9).
Test Initiation and Conduct
Zaostávání ve vývoji v nepřítomnosti toxicity je silným indikátorem antityreoidálního působení, avšak analýza stadií vývoje je méně citlivá a méně diagnosticky významná než histopatologická analýza štítné žlázy.
The exposure should be initiated when a sufficient number of tadpoles in the pre-exposure stock population have reached developmental stage 51, according to Nieuwkoop and Faber (8), and which are less than or equal to 17 days of age post fertilisation.
Proto je v tomto případě nezbytné provádět histopatologické analýzy štítné žlázy.
For selection of test animals, healthy and normal looking tadpoles of the stock population should be pooled in a single vessel containing an appropriate volume of dilution water.
Účinky na histologii štítné žlázy byly prokázány v nepřítomnosti vývojových účinků.
For developmental stage determination, tadpoles should be individually removed from the pooling tank using a small net or strainer and transferred to a transparent measurement chamber (e.g. 100 mm Petri dish) containing dilution water.
Dojde-li ke změnám v tyreoidální histopatologii, je chemická látka považována za ovlivňující činnost štítné žlázy.
For stage determination, it is preferred not to use anaesthesia, however one may individually anaesthetise the tadpoles using 100 mg/l tricaine methanesulfonate (e.g. MS-222), appropriately buffered with sodium bicarbonate (pH 7,0), before handling.
Pokud na štítných žlázách není zpozorován opožděný vývoj nebo histologické léze, má se za to, že chemická látka neovlivňuje činnost štítné žlázy.
If used, methodology for appropriately using e.g. MS-222 for anaesthesia should be obtained from experienced laboratories and reported with the test results.
Zdůvodnění toto rozhodnutí je takové, že štítná žláza je ovlivňována hormonem TSH a jakákoli chemická látka, která dostatečně změní cirkulující tyreoidální hormon tak, že se změní sekrece TSH, povede k histopatologickým změnám na štítné žláze.
Animals should be carefully handled during this transfer in order to minimise handling stress and to avoid any injury.
Cirkulaci tyreoidálních hormonů mohou změnit různé způsoby a mechanismy působení.
The developmental stage of the animals is determined using a binocular dissection microscope.
Hladina tyreoidálních hormonů tedy sice je indikativní pro účinek související se štítnou žlázou, avšak nepostačuje pro určení, který způsob nebo mechanismus působení s touto reakcí souvisí.
To reduce the ultimate variability in developmental stage, it is important that this staging be conducted as accurately as possible.
Z hlediska základních statistických metod není tento ukazatel vhodný, a proto určení účinku souvisejícího s expozicí chemické látce musí být provedeno prostřednictvím znaleckého posudku patologa.
According to Nieuwkoop and Faber (8), the primary developmental landmark for selecting stage 51 organisms is hind limb morphology.
Opožděný vývoj (určený pomocí stadia vývoje, délky zadních končetin, tělesné hmotnosti, délky od tlamy po kloaku)
The morphological characteristics of the hind limbs should be examined under the microscope.
K opožděnému vývoji může dojít působením antityreoidálních mechanismů a prostřednictvím nepřímé toxicity.
While the complete Nieuwkoop and Faber (8) guide should be consulted for comprehensive information on staging tadpoles, one can reliably determine stage using prominent morphological landmarks.
Mírná zpoždění ve vývoji spolu se zjevnými znaky toxicity pravděpodobně ukazují na nespecifikovaný toxický účinek.
The following table can be used to simplify and standardise the staging process throughout the study by identifying those prominent morphological landmarks associated with different stages, assuming that development is normal.
Hodnocení netyreoidální toxicity je podstatným prvkem zkoušky, který má snížit pravděpodobnost chybných pozitivních výsledků.
Prominent morphological staging landmarks based on Neuwkoop and Faber guidance
Nadměrná mortalita očividně znamená, že působí jiné toxické mechanismy.
Prominent Morphological Landmarks
Podobně i mírné zpomalení růstu, určené podle hmotnosti ve vlhkém stavu a/nebo podle délky těla od tlamy po kloaku, rovněž naznačuje netyreoidální toxicitu.
Developmental Stage
Zjevný rychlejší růst je obvykle zaznamenán v případě chemických látek, které negativně ovlivňují normální růst.
Hindlimb
Z přítomnosti větších zvířat tedy nutně nevyplývá netyreoidální toxicita.
Forelimb
Při určování tyreoidální toxicity by se však nikdy nemělo vycházet pouze z růstu.
Craniofacial structure
Růst spolu se stadiem vývoje a histopatologií štítné žlázy by měl být spíše používán k určení tyreoidálního působení.
Olfactory nerve morphology
Při určování zjevné toxicity by měly být posuzovány i jiné ukazatele včetně edémů, krvácejících lézí, letargie, snížené spotřeby potravy, chybného/změněného plavání atd. Pokud všechny zkušební koncentrace vykazují zjevnou toxicitu, měla by zkoušená chemická látka před stanovením, zda potenciálně ovlivňuje či neovlivňuje činnost štítné žlázy, být přehodnocena na nižší zkušební koncentrace.
Tail length
Statisticky významná zpoždění ve vývoji a zároveň nepřítomnost jiných příznaků zjevné toxicity ukazují na to, že chemická látka ovlivňuje činnost štítné žlázy (je antagonistická).
For test initiation, all tadpoles should be at stage 51.
V nepřítomnosti statisticky silných odezev může být tento výsledek podpořen výsledky histopatologie štítné žlázy.
The most prominent morphological staging landmark for that stage is hind limb morphology, which is demonstrated in Figure 1.
Statistické analýzy
Hind limb morphology of a stage 51 X. laevis tadpole
Pro všechny spojité kvantitativní ukazatele (délka zadních končetin, délka těla od tlamy po kloaku, hmotnost ve vlhkém stavu), které odpovídají monotónní závislosti dávka-odezva, by se ke stanovení významného účinku expozice měl použít test sestupného trendu Jonckheere-Terpstry.
In addition to the developmental stage selection, an optional size selection of the experimental animals may be used.
Pro kontinuální ukazatele, které nejsou v souladu s monotónní závislostí dávka-odezva, by údaje měly být posouzeny z hlediska normality rozdělení (pokud možno Shapiro-Wilkovým nebo Anderson-Darlingovým testem) a homogenity rozptylu (pokud možno Levenovým testem).
For this purpose, the whole body length (not SVL) should be measured at day 0 for a sub-sample of approximately 20 NF stage 51 tadpoles.
Oba testy se provádějí na základě reziduálních hodnot získaných z jednostranné analýzy rozptylu (ANOVA).
After calculation of the mean whole body length for this group of animals, minimum and maximum limits for the whole body length of experimental animals can be set by allowing a range of the mean value ± 3 mm (mean values of whole body length range between 24,0 and 28,1 mm for stage 51 tadpoles).
Místo těchto formálních testů na normalitu rozdělení a homogenitu rozptylu lze použit odborný posudek, ovšem formální testy se upřednostňují.
However, developmental staging is the primary parameter in determining the readiness of each test animal.