natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Je třeba dbát na to, aby byly rozdíly ve zkušebních podmínkách co nejmenší a nesouvisely automaticky s aplikací.
For testing at the time of weaning, see paragraph 32.
Mnohá měření chování včetně měření motorické aktivity mohou ovlivnit takové proměnné, jako je úroveň zvuku, velikost a tvar zkušební klece, teplota, relativní vlhkost, světelné podmínky, zápachy, použití chovné klece nebo nové, zkušební klece a odchylky v prostředí.
The test session should be long enough to demonstrate intra-session habituation for non-treated controls.
Motorické a smyslové funkce se podrobně vyšetřují nejméně jednou za období dospívání a jednou v období mladé dospělosti (např. 60.–70. postnatální den).
Use of motor activity to assess behavioural ontogeny is strongly recommended.
Zkoušení by se mělo provádět v dostatečném rozsahu, aby zajistilo dostatečný kvantitativní odběr vzorků smyslových podnětů (např. somatosenzorických, vestibulárních) a motorických aktivit (např. síla, koordinace).
If used as a test of behavioural ontogeny, then testing should utilise the same animals for all pre-weaning test sessions.
Jako několik příkladů zkoušek motorických a smyslových funkcí lze uvést vzpěrnou reakci extenzorů (46), reflex rovnováhy (47)(48), přivykání úlekové reakci na zvukový podnět (40)(49)(50)(51)(52)(53)(54) a evokované potenciály (55).
Testing should be frequent enough to assess the ontogeny of intra-session habituation (44).
Zkoušky učení a paměti
This may require three or more time periods prior to, and including the day of weaning (e.g. PND 13, 17, 21).
Zkouška asociativního učení a paměti se provádí po odstavení (např. 25. postnatální den ± 2 dny) a u mladých dospělých (60. postnatální den a starší).
Testing of the same animals, or littermates, should also occur at an adult age close to study termination (e.g. PND 60-70).
V obou těchto vývojových stadiích lze použít stejnou nebo odlišnou zkoušku (zkoušky).
Testing on additional days may be done as necessary.
Při volbě zkoušky (zkoušek) učení a paměti u odstavených mláďat a dospělých potkanů je povolena určitá pružnost.
Motor activity should be monitored by an automated activity recording apparatus which should be capable of detecting both increases and decreases in activity, (i.e. baseline activity as measured by the device should not be so low as to preclude detection of decreases, nor so high as to preclude detection of increases in activity).
Zkoušky by však měly být koncipovány tak, aby splňovaly dvě kritéria.
Each device should be tested by standard procedures to ensure, to the extent possible, reliability of operation across devices and across days.
Zaprvé, učení by mělo být posuzováno buď jako změna mezi několika opakovanými pokusy nebo sezeními zabývajícími se učením, nebo při zkouškách sestávajících z jediného pokusu s odkazem na určitou podmínku, která kontroluje neasociativní účinky zkušeností získaných výcvikem.
To the extent possible, treatment groups should be balanced across devices.
Zadruhé, zkoušky by kromě počátečního učení (nabytí) měly zahrnovat určité měření paměti (krátkodobé nebo dlouhodobé), ale toto měření paměti nelze zaznamenat bez měření osvojených prvků získaných při stejné zkoušce.
Each animal should be tested individually.
Jestliže zkouška (zkoušky) učení a paměti zjistí účinek zkoušené chemické látky, lze zvážit další zkoušky za účelem vyloučení jiné interpretace založené na změnách smyslových, motivačních a/nebo motorických schopností.
Treatment groups should be counter-balanced across test times to avoid confounding by circadian rhythms of activity.
Kromě obou výše uvedených kritérií se doporučuje, aby byla zkouška učení a paměti zvolena na základě prokázané citlivosti na třídu zkoumaných chemických látek, pokud jsou takové informace v literatuře dostupné.
Efforts should be made to ensure that variations in the test conditions are minimal and are not systematically related to treatment.
Pokud takové informace neexistují, lze pro splnění výše uvedených kritérií provést například tyto zkoušky:
Among the variables that can affect many measures of behaviour, including motor activity, are sound level, size and shape of the test cage, temperature, relative humidity, light conditions, odours, use of home cage or novel test cage and environmental distractions.
pasivní vyhýbání (43)(56)(57), test pracovní paměti (DMP) pro dospělé potkany (58) a mláďata potkanů (59), čichové podmiňování (43)(60), Morrisovo vodní bludiště (61)(62)(63), Bielovo bludiště nebo bludiště Cincinnati (64)(65), radiální bludiště (66), ‚T‘ bludiště (43) a osvojení a uchovávání pravidelných návyků (26)(67)(68).
Motor and sensory function should be examined in detail at least once for the adolescent period and once during the young adult period (e.g. PND 60-70).
V literatuře jsou popsány další zkoušky pro odstavená mláďata (26)(27) a dospělé potkany (19) (20).
Sufficient testing should be conducted to ensure an adequate quantitative sampling of sensory modalities (e.g. somato-sensory, vestibular) and motor functions (e.g. strength, coordination).
Pitva
A few examples of tests for motor and sensory function are extensor thrust response (46), righting reflex (47)(48), auditory startle habituation (40)(49)(50)(51)(52)(53)(54), and evoked potentials (55).
Matky lze po odstavení potomstva utratit.
Learning and memory tests
Neuropatologické hodnocení potomstva se provede vyšetřením tkání zvířat humánně usmrcených v 22. postnatální den nebo v dřívějším časovém bodě mezi 11. a 22. postnatálním dnem, jakož i při ukončení studie.
A test of associative learning and memory should be conducted post-weaning (e.g. 25 ± 2 days) and for young adults (PND 60 and older).
Zvířata usmrcená v 22. postnatální den nebo dříve lze fixovat ponořením do fixačního roztoku nebo perfuzí.
The same or separate test(s) may be used at these two stages of development.
Zvířata usmrcená při ukončení studie by měla být fixována perfuzí.
Some flexibility is allowed in the choice of test(s) for learning and memory in weanling and adult rats.
Všechny aspekty přípravy tkáňových vzorků, od perfuze zvířat, přes odebrání tkáňových vzorků, zpracování tkání a barvení preparátů by měly být vyváženě koncipovány tak, aby každá sada obsahovala reprezentativní vzorky z každé exponované skupiny.
However, the test(s) should be designed so as to fulfil two criteria.
Další pokyny týkající se neuropatologie lze nalézt v Pokynu OECD č. 20 (9), viz také (103).
First, learning should be assessed either as a change across several repeated learning trials or sessions, or, in tests involving a single trial, with reference to a condition that controls for non-associative effects of the training experience.
Zpracování tkáňových vzorků
Second, the test(s) should include some measure of memory (short-term or long-term) in addition to original learning (acquisition), but this measure of memory cannot be reported in the absence of a measure of acquisition obtained from the same test.
Všechny závažné abnormality zjevné v průběhu pitvy se zaznamenají.
If the test(s) of learning and memory reveal(s) an effect of the test chemical, additional tests to rule out alternative interpretations based on alterations in sensory, motivational, and/or motor capacities may be considered.
Odebrané tkáňové vzorky by měly reprezentovat všechny hlavní oblasti nervové soustavy.
In addition to the above two criteria, it is recommended that the test of learning and memory be chosen on the basis of its demonstrated sensitivity to the class of chemical under investigation, if such information is available in the literature.
Vzorky tkání by měly být ponechány ve vhodném fixativu a zpracovány podle standardizovaných zveřejněných histologických protokolů (69)(70)(71)(103).
In the absence of such information, examples of tests that could be made to meet the above criteria include:
U tkání centrální nervové soustavy a periferní nervové soustavy je přípustné zalití do parafinu, avšak je-li požadován větší stupeň rozlišení (např. u periferních nervů, pokud existuje podezření na periferální neuropatii a/nebo při morfometrické analýze periferních nervů), může být vhodná postfixace osmiem spolu se zalitím do pryskyřice.
passive avoidance (43)(56)(57), delayed-matching-to-position for the adult rat (58) and for the infant rat (59), olfactory conditioning (43)(60), Morris water maze (61)(62)(63), Biel or Cincinnati maze (64)(65), radial arm maze (66), T-maze (43), and acquisition and retention of schedule-controlled behaviour (26)(67)(68).
Účelem kvalitativního vyšetření je:
Maternal animals can be euthanised after weaning of the offspring.
zjistit oblasti nervové soustavy vykazující známky neuropatologických změn;
Neuropathological evaluation of the offspring will be conducted using tissues from animals humanely killed at PND 22 or at an earlier time point between PND 11 and PND 22, as well as at study termination.
zjistit typy neuropatologických změn vyplývajících z expozice zkoušené chemické látce;
For offspring killed through PND 22, brain tissues should be evaluated;
stanovit míru závažnosti těchto neuropatologických změn.
for animals killed at termination, both central nervous system (CNS) tissues and peripheral nervous system (PNS) tissues should be evaluated.
Reprezentativní histologické řezy tkáňových vzorků se mikroskopicky zkoumají za účelem prokázání neuropatologických změn, vyšetření provádí patolog s odpovídající kvalifikací.
Animals killed on PND 22 or earlier may be fixed either by immersion or perfusion.
Všem neuropatologickým změnám se přiřadí subjektivní stupeň vyjadřující jejich závažnost.
Animals killed at study termination should be fixed by perfusion.
Pro hodnocení řezů mozku zvířat, jež byla humánně usmrcena v 22. postnatální den nebo dříve, může být dostatečné barvení pomocí hematoxylinu a eosinu.
All aspects of the preparation of tissue samples, from the perfusion of animals, through the dissection of tissue samples, tissue processing, and staining of slides should employ a counterbalanced design such that each batch contains representative samples from each dose group.
U řezů tkání centrální nervové soustavy a periferní nervové soustavy zvířat usmrcených při ukončení studie se však doporučuje použít barviva na myelin (např. luxolová modř/kresylová violeť) a barvení stříbrem (např. podle Bielschowského nebo Bodiana).
Additional guidance on neuropathology can be found in OECD Guidance Document No 20(9), see also (103).
Na základě odborného úsudku patologa a druhu pozorovaných změn lze zvážit jiná barvení vhodná pro zjištění a charakterizaci konkrétních typů změn (např. gliální fibrilární acidický protein (GFAP) nebo lektinová histochemie pro posouzení gliálních a mikrogliálních změn (72), fluoro-jade pro zjišťování nekrózy (73)(74) nebo stříbrná barvení používaná při degeneraci nervové soustavy (75)).
Processing of tissue samples
Mělo by být prováděno morfometrické (kvantitativní) hodnocení, jelikož tyto údaje mohou pomoci při zjišťování účinků souvisejících s expozicí a jsou cenné pro interpretaci rozdílů v hmotnosti mozku nebo v morfologii souvisejících s expozicí.
All gross abnormalities apparent at the time of necropsy should be noted.
K tomu, aby bylo možno provést morfometrické hodnocení, je třeba odebrat a připravit nervovou tkáň.
Tissue samples taken should represent all major regions of the nervous system.
Morfometrická hodnocení mohou zahrnovat např. lineární nebo plošné měření konkrétních oblastí mozku (78).
The tissue samples should be retained in an appropriate fixative and processed according to standardised published histological protocols (69)(70)(71)(103).
Lineární nebo plošná měření vyžadují použití homologických řezů pečlivě vybraných na základě spolehlivých mikroskopických znaků (6).
Paraffin embedding is acceptable for tissues of the CNS and PNS, but the use of osmium in post-fixation, together with epoxy embedding, may be appropriate when a higher degree of resolution is required (e.g. for peripheral nerves when a peripheral neuropathy is suspected and/or for morphometric analysis of peripheral nerves).
Ke zjištění účinků expozice na parametry, jako je objem konkrétních neuroanatomických oblastí nebo počet buněk v těchto oblastech lze použít stereologii (79)(80)(81)(82)(83)(84).
Brain tissue collected for morphometric analysis should be embedded in appropriate media at all dose levels at the same time in order to avoid shrinkage artefacts that may be associated with prolonged storage in fixative (6).
Je důležité, aby řezy byly u všech zvířat prováděny ve stejné rovině.
The purposes of the qualitative examination are:
Z dospělých zvířat humánně usmrcených při ukončení studie se odeberou reprezentativní řezy páteřní míchy a periferní nervové soustavy.
to identify regions within the nervous system exhibiting evidence of neuropathological alterations;
Zkoumané oblasti by měly zahrnovat oko s očním nervem a sítnicí, míchu v oblasti cervikálního a lumbálního zesílení, dorzální a ventrální kořenová vlákna, n. ischiadicus – proximální část a n. tibialis – proximální část (v oblasti kolena) a n. tibialis z oblasti lýtkového svalu.
to identify types of neuropathological alterations resulting from exposure to the test chemical;
Řezy míchy a periferních nervů by měly zahrnovat jak příčné, tak i podélné řezy.
and
Neuropatologické hodnocení by mělo zahrnovat vyšetření na příznaky vývojových poškození nervové soustavy (6)(85)(86)(87)(88)(89), dále na buněčné změny (např. vakuolizace, degenerace a nekróza neuronů) a tkáňové změny (např. glióza, infiltrace leukocytů, tvorba cyst).
to determine the range of severity of the neuropathological alterations.
V této souvislosti je důležité odlišit účinky související s expozicí od běžných vývojových jevů, ke kterým, jak známo, dochází ve stadiu vývoje odpovídajícím době usmrcení (90).
Representative histological sections from the tissue samples should be examined microscopically by an appropriately trained pathologist for evidence of neuropathological alterations.
Významnými změnami, jež ukazují na vývojovou poruchu, jsou mimo jiné tyto:
All neuropathologic alterations should be assigned a subjective grade indicating severity.
změny v absolutní velikosti nebo tvaru čichových laloků, mozku nebo mozečku,
A hematoxylin and eosin stain may be sufficient for evaluating brain sections from animals humanely killed at PND 22, or earlier.
změny v relativní velikosti různých oblastí mozku, včetně zvětšené nebo zmenšené velikosti oblastí vyplývající ze ztráty nebo přetrvávání normálně přechodných populací buněk nebo z axonálních projekcí (např. vnější zárodečná vrstva mozečku, kalózní těleso),
However, a myelin stain (e.g. luxol fast blue/cresyl violet) and a silver stain (e.g. Bielschowsky's or Bodians stains) are recommended for sections of CNS and PNS tissues from animals killed at study termination.
změny v proliferaci, migraci a diferenciaci ověřené podle oblastí nadměrné apoptózy nebo nekrózy, klastrů nebo rozptýlených populací ektopických, dezorientovaných nebo malformovaných neuronů, nebo změny v relativní velikosti různých vrstev kortikálních struktur,
Subject to the professional judgement of the pathologist and the kind of alterations observed, other stains may be considered appropriate to identify and characterise particular types of alterations (e.g. glial fibrillary acidic protein (GFAP) or lectin histochemistry to assess glial and microglial alterations (72), fluoro-jade to detect necrosis (73)(74), or silver stains specific for neural degeneration (75)).
změny v myelinaci, včetně snížení celkové velikosti nebo odlišného zbarvení myelinových struktur,
Morphometric (quantitative) evaluation should be performed as these data may assist in the detection of a treatment-related effect and are valuable in the interpretation of treatment-related differences in brain weight or morphology (76)(77).
příznaky hydrocefalu, zejména zvětšení komor, stenóza cerebrálního akvaduktu a zúžení cerebrálních hemisfér.
Nervous tissue should be sampled and prepared to enable morphometric evaluation.
Analýza neuropatologických změn z hlediska vztahu dávka-odpověď
Morphometric evaluations may include e.g. linear or areal measurements of specific brain regions (78).
Pro kvalitativní a kvantitativní neuropatologické analýzy se doporučuje následující postup sestávající z postupných kroků.
Linear or areal measurements require the use of homologous sections carefully selected based on reliable microscopic landmarks (6).
Zaprvé, řezy ze skupiny, které byla podávána vysoká dávka, se porovnají s řezy z kontrolní skupiny.
Stereology may be used to identify treatment-related effects on parameters such as volume or cell number for specific neuroanatomic regions (79)(80)(81)(82)(83)(84).
Jestliže se u zvířat ze skupiny s vysokou dávkou nenajdou žádné příznaky neuropatologických změn, není žádná další analýza nutná.
The brains should be examined for any evidence of treatment-related neuropathological alterations and adequate samples should be taken from all major brain regions (e.g. olfactory bulbs, cerebral cortex, hippocampus, basal ganglia, thalamus, hypothalamus, midbrain (tectum, tegmentum, and cerebral peduncles), pons, medulla oblongata, cerebellum) to ensure a thorough examination.
Jestliže se ve skupině s vysokou dávkou najdou příznaky neuropatologických změn, vyšetří se zvířata ze skupin, kterým byla podávána střední a nízká dávka.
It is important that sections for all animals are taken in the same plane.
Jestliže je skupina s vysokou dávkou ukončena v důsledku úhynu nebo jiné zkreslující toxicity, měly by se analyzovat neuropatologické změny ve skupinách s vysokou a střední dávkou.
In adults humanely killed at study termination, representative sections of the spinal cord and the PNS should be sampled.
Existují-li jakékoli příznaky neurotoxicity ve skupinách s nižší dávkou, měla by být provedena neuropatologická analýza těchto skupin.
The areas examined should include the eye with optic nerve and retina, the spinal cord at the cervical and lumbar swellings, the dorsal and ventral root fibres, the proximal sciatic nerve, the proximal tibial nerve (at the knee), and the tibial nerve calf muscle branches.
Jestliže se při kvalitativním nebo kvantitativním vyšetření naleznou neuropatologické změny související s expozicí, měla by být stanovena závislost výskytu, četnost a stupeň závažnosti lézí nebo morfometrických změn na velikosti dávky, a to na základě hodnocení všech zvířat ze všech exponovaných skupin.
The spinal cord and peripheral nerve sections should include both cross or transverse and longitudinal sections.
Do tohoto hodnocení by měly být zařazeny všechny oblasti mozku, které vykazují příznaky neuropatologické změny.
Neuropathological evaluation should include an examination for indications of developmental damage to the nervous system (6)(85)(86)(87)(88)(89), in addition to the cellular alterations (e.g. neuronal vacuolation, degeneration, necrosis) and tissue changes (e.g. gliosis, leukocytic infiltration, cystic formation).
U každého typu lézí by měly být popsány typické znaky, podle nichž byl stanoven každý stupeň závažnosti, a uvedou se prvky sloužící k odlišení každého stupně od ostatních stupňů.
In this regard, it is important that treatment-related effects be distinguished from normal developmental events known to occur at a developmental stage corresponding to the time of sacrifice (90).
Zaznamená se četnost a stupeň závažnosti každého typu lézí a provede se statistická analýza za účelem zhodnocení vztahu dávka-odpověď.
Examples of significant alterations indicative of developmental insult include, but are not restricted to:
Doporučuje se použít kódované preparáty (91).
alterations in the gross size or shape of the olfactory bulbs, cerebrum or cerebellum;
ÚDAJE A ZPRÁVY
alterations in the relative size of various brain regions, including decreases or increases in the size of regions resulting from the loss or persistence of normally transient populations of cells or axonal projections (e.g. external germinal layer of cerebellum, corpus callosum);
Údaje
alterations in proliferation, migration, and differentiation, as indicated by areas of excessive apoptosis or necrosis, clusters or dispersed populations of ectopic, disoriented or malformed neurons or alterations in the relative size of various layers of cortical structures;
Výsledky se zaznamenávají individuálně a shrnou se do tabulek tak, aby byly u každé experimentální skupiny uvedeny typy změn a počet samic, potomstvo podle pohlaví a vrhy vykazující každý typ změny.
alterations in patterns of myelination, including an overall size reduction or altered staining of myelinated structures;
Pokud byla prováděna přímá postnatální expozice potomstva, uvede se způsob, trvání a doba expozice.
evidence of hydrocephalus, in particular enlargement of the ventricles, stenosis of the cerebral aqueduct and thinning of the cerebral hemispheres.
Hodnocení a interpretace výsledků
Analysis of the dose-response relationship of neuropathological alterations
Studie vývojové neurotoxicity bude obsahovat informace o účincích opakované expozice určité chemické látce během vývoje in utero a raně postnatálního vývoje.
The following stepwise procedure is recommended for the qualitative and quantitative neuropathological analyses.
Vzhledem k tomu, že důraz je kladen na ukazatele všeobecné toxicity i na ukazatele vývojové neurotoxicity, umožní výsledky této studie rozlišení mezi účinky na vývoj nervové soustavy vyskytujícími se za nepřítomnosti všeobecné toxicity u matek a mezi účinky vyvolanými pouze na úrovních, které jsou toxické i pro březí samice.
First, sections from the high dose group are compared with those of the control group.
V důsledku složitých vzájemných souvislostí mezi koncepcí studie, statistickou analýzou a biologickým významem údajů, bude odpovídající interpretace údajů o vývojové neurotoxicitě zahrnovat odborný posudek (107)(109).
If no evidence of neuropathological alterations is found in animals of the high dose group, no further analysis is required.
Při interpretaci výsledků zkoušek by měl být uplatněn přístup založený na existujících průkazných faktech (20)(92)(93)(94).
If evidence of neuropathological alterations is found in the high dose group, then animals from the intermediate and low dose groups are examined.
Měly by být prodiskutovány vzorce behaviorálních nebo morfologických nálezů, jsou-li přítomny, jakož i důkazy o závislosti odpovědi na dávce.
If the high dose group is terminated due to death or other confounding toxicity, the high and intermediate dose groups should be analysed for neuropathological alterations.
Tato charakterizace by měla zahrnovat údaje ze všech studií, které mají význam pro hodnocení vývojové neurotoxicity, včetně epidemiologických studií nebo případových studií u lidí a studií na pokusných zvířatech (např. toxikokinetické údaje, informace o vztahu struktura-účinek, údaje z jiných studií toxicity).
If there is any indication of neurotoxicity in lower dose groups, neuropathological analysis should be performed in those groups.
Patří sem i vztah mezi dávkami zkoušené chemické látky a přítomností či nepřítomností, četností a rozsahem jakýchkoli neurotoxických účinků na každé pohlaví (20)(95).
If any treatment-related neuropathological alterations are found in the qualitative or quantitative examination, the dose-dependence of the incidence, frequency and severity grade of the lesions or of the morphometric alterations should be determined, based on an evaluation of all animals from all dose groups.
Součástí hodnocení údajů by měla být diskuse biologického i statistického významu.
All regions of the brain that exhibit any evidence of neuropathologic alteration should be included in this evaluation.
Na statistickou analýzu je nutno pohlížet jako nástroj k řízení, a nikoli nástroj předurčující interpretaci údajů.
For each type of lesion, the characteristics used to define each severity grade should be described, indicating the features used to differentiate each grade.