natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Vaginu lze vyšetřit odpovídajícím způsobem (viz odstavec 9).
Once removed from the body, uterine handling should be sufficiently rapid to avoid desiccation of the tissues.
Dále může být provedeno morfometrické měření endometriálního epitelu za účelem kvantitativního srovnání.
Loss of weight due to desiccation becomes more important with small tissues such as the uterus (23).
Údaje o studii by měly zahrnovat:
If ovaries are present, the ovaries are removed at the oviduct avoiding loss of luminal fluid from the uterine horn.
počet zvířat na začátku studie,
If the animal has been ovariectomised, the stubs should be examined for the presence of any ovarian tissue.
počet a identifikaci zvířat nalezených uhynulých nebo zvířat utracených během zkoušky z humánních důvodů a datum a čas každého úmrtí nebo humánního usmrcení,
Excess fat and connective tissue should be trimmed away.
počet a identifikaci zvířat vykazujících příznaky toxicity a popis zjištěných příznaků toxicity, včetně doby nástupu, doby trvání a závažnosti toxických účinků, a
The vagina is removed from the uterus just below the cervix so that the cervix remains with the uterine body as shown in Figure 2.
počet a identifikaci zvířat vykazujících léze a popis typu lézí.
Each uterus should be transferred to a uniquely marked and weighed container (e.g. a petri-dish or plastic weight boat) with continuing care to avoid desiccation before weighing (e.g. filter paper slightly dampened with saline may be placed in the container).
U jednotlivých zvířat by měly být zaznamenány údaje o tělesné hmotnosti, hmotnosti dělohy ve vlhkém stavu a hmotnosti dělohy ve vysušeném stavu.
The uterus with luminal fluid will be weighed to the nearest 0,1 mg (wet uterine weight).
Jednotné statistické analýzy agonistních látek by měly být použity ke stanovení toho, zda podávání zkoušené chemické látky vedlo ke statisticky významnému (p < 0,05) zvýšení hmotnosti dělohy.
Each uterus will then be individually processed to remove the luminal fluid.
Měly by být provedeny vhodné statistické analýzy za účelem zjištění, zda v souvislosti s aplikací došlo ke změnám hmotnosti dělohy ve vlhkém a ve vysušeném stavu.
Both uterine horns will be pierced or cut longitudinally.
Údaje lze například hodnotit pomocí metody analýzy kovariance (ANCOVA), kdy kovariátou (doprovodnou proměnnou) bude tělesná hmotnost při pitvě.
The uterus will be placed on lightly moistened filter paper (e.g. Whatman No 3) and gently pressed with a second piece of lightly moistened filter paper to completely remove the luminal fluid.
Před analýzou údajů lze provést logaritmickou transformaci údajů o děloze stabilizující rozptyl.
The uterus without the luminal contents will be weighed to the nearest 0,1 mg (blotted uterine weight).
Pro provedení párových srovnání každé exponované skupiny s kontrolními skupinami, kterým bylo podáváno vehikulum, a pro výpočet intervalů spolehlivosti je vhodné použít Dunnettova a Hsuova testu.
The uterus weight at termination can be used to ensure that the appropriate age in the immature intact rat was not exceeded, however, the historical data of the rat strain used by the laboratory are decisive in this respect (see paragraph 56 for interpretation of the results).
Pro zjištění případných odlehlých hodnot a posouzení homogenity rozptylů lze použít metodu Studentised residual plots.
Optional investigations
Tyto postupy byly použity ve validačním programu OECD za použití postupu PROC GLM v systému statistické analýzy (SAS Institute, Cary, NC), verze 8 (6)(7).
After weighing, the uterus may be fixed in 10 % neutral buffered formalin to be examined histopathologically after Haematoxylin & Eosin (HE)-staining.
Závěrečná zpráva musí obsahovat:
The vagina may be investigated accordingly (see paragraph 9).
Zkušební zařízení:
In addition, morphometric measurement of endometrial epithelium may be done for quantitative comparison.
odpovědní pracovníci a jejich odpovědnost v rámci studie,
Study data should include:
údaje z výchozí zkoušky s pozitivní kontrolní látkou a údaje z pravidelných pozitivních kontrol (viz odstavce 26 a 27).
the number of animals at the start of the assay,
charakterizace zkoušených chemických látek,
the number and identity of animals found dead during the assay or killed for humane reasons and the date and time of any death or humane kill,
fyzikální povaha a tam, kde je to podstatné, fyzikálně-chemické vlastnosti,
the number and identity of animals showing signs of toxicity, and a description of the signs of toxicity observed, including time of onset, duration, and severity of any toxic effects, and
metoda a frekvence přípravy roztoků,
the number and identity of animals showing any lesions and a description of the type of lesions.
veškeré získané údaje o stálosti,
Individual animal data should be recorded for the body weights, the wet uterine weight, and the blotted uterine weight.
veškeré analýzy roztoků použitých k aplikaci
One-tailed statistical analyses for agonists should be used to determine whether the administration of a test chemical resulted in a statistically significant (p < 0,05) increase in the uterine weight.
Vehikulum:
Appropriate statistical analyses should be carried out to test for treatment related changes in blotted and wet uterine weight.
charakterizace vehikula použitého při zkoušce (povaha, dodavatel a šarže),
For example, the data may be evaluated by an analysis of covariance (ANCOVA) approach with body weight at necropsy as the co-variable.
zdůvodnění výběru vehikula (pokud není použita voda).
A variance-stabilising logarithmic transformation may be carried out on the uterine data prior to the data analysis.
druh a kmen a zdůvodnění jejich výběru,
Dunnett and Hsu's test are appropriate for making pair wise comparisons of each dosed group to vehicle controls and to calculate the confidence intervals.
dodavatel a konkrétní dodavatelské zařízení,
Studentised residual plots can be used to detect possible outliers and to assess homogeneity of variances.
věk při dodání s datem narození,
These procedures were applied in the OECD validation programme using the PROC GLM in the Statistical Analysis System (SAS Institute, Cary, NC), version 8 (6)(7).
v případě nezralých zvířat, zda byla dodána s matkou nebo adoptivní matkou, či nikoli, a datum odstavení,
A final report shall include:
podrobnosti o postupu aklimatizace zvířat,
Testing facility:
počet zvířat v každé kleci,
Responsible personnel and their study responsibilities
podrobnosti a metoda identifikace jednotlivých zvířat a skupin.
Data from the Baseline Positive Control Test and periodic positive control data (see paragraphs 26 and 27)
Podmínky zkoušky:
Characterisation of test chemicals
podrobnosti o procesu náhodného výběru (tj. použitá metoda),
Physical nature and where relevant physicochemical properties
zdůvodnění výběru úrovní dávek,
Method and frequency of preparation of dilutions
podrobnosti o složení zkoušené chemické látky, její dosažené koncentrace, stabilita a homogenita,
Any data generated on stability
podrobnosti o podávání zkoušené chemické látky a zdůvodnění volby způsobu expozice,
Any analyses of dosing solutions
strava (název, typ, dodavatel, obsah a úroveň fytoestrogenů, je-li známa),
Vehicle:
zdroj vody (např. vodovodní voda nebo filtrovaná voda) a dodávka (potrubím z velké nádrže, v lahvích apod.),
Characterisation of test vehicle (nature, supplier and lot)
stelivo (název, typ, dodavatel, obsah),
Justification of choice of vehicle (if other than water)
záznam o podmínkách chovu v kleci, interval osvětlení, teplota a vlhkost v místnosti, úklid místnosti,
Species and strain and justification for their choice
podrobný popis postupů pitvy a vážení dělohy,
Supplier and specific supplier facility
popis statistických postupů.
Age on supply with birth date
Výsledky:
If immature animals, whether or not supplied with dam or foster dam and date of weaning
U jednotlivých zvířat:
Details of animal acclimatisation procedure
všechny denní tělesné hmotnosti jednotlivých zvířat (od přidělení do skupin až do pitvy) (s přesností na 0,1 g),
Number of animals per cage
věk každého zvířete (ve dnech, den narození se počítá jako den 0) při zahájení podávání zkoušené chemické látky,
Detail and method of individual animal and group identification
datum a čas podání každé dávky,
Assay Conditions:
vypočtený objem a velikost podávaných dávek a pozorování ztrát látky během podávání nebo po podání,
Details of randomisation process (i.e. method used)
denní záznamy o stavu zvířete, včetně významných příznaků a pozorování,
Rationale for dose selection
předpokládaná příčina smrti (pokud byla zvířata během studie nalezena ve stavu agónie nebo uhynulá),
Details of test chemical formulation, its achieved concentrations, stability and homogeneity
datum a čas humánního usmrcení s časovým intervalem od posledního podání dávky,
Details of test chemical administration and rationale for the choice of exposure route
hmotnost dělohy ve vlhkém stavu (s přesností na 0,1 mg) a jakékoli zjištěné ztráty luminální tekutiny během sekce a přípravy na vážení,
Diet (name, type, supplier, content, and, if known, phyto-oestrogen levels)
hmotnost dělohy ve vysušeném stavu (s přesností na 0,1 mg).
Water source (e.g. tap water or filtered water) and supply (by tubing from a large container, in bottles, etc.)
U každé skupiny zvířat:
Bedding (name, type, supplier, content)
průměrná denní tělesná hmotnost (s přesností na 0,1 g) a směrodatná odchylka (od přiřazení ke skupinám až do pitvy),
Record of caging conditions, lighting interval, room temperature and humidity, room cleaning
průměrná hmotnost vlhké dělohy a průměrná hmotnost usušené dělohy (s přesností na 0,1 mg) a směrodatné odchylky,
Detailed description of necropsy and uterine weighing procedures
denní spotřeba potravy, je-li měřena (vypočítaná jako gramy spotřebované potravy na každé zvíře),
Description of statistical procedures
výsledky statistických analýz srovnávajících hmotnosti dělohy ve vlhkém a ve vysušeném stavu u experimentálních skupin se stejnými měřeními v kontrolních skupinách s vehikulem,
Results
výsledky statistické analýzy srovnávající celkovou tělesnou hmotnost a přírůstek tělesné hmotnosti experimentálních skupin se stejnými měřeními v kontrolních skupinách s vehikulem.
For individual animals:
Shrnutí důležitých aspektů zkušební metody, které mohou sloužit jako vodítko
All daily individual body weights (from allocation into groups through necropsy) (to the nearest 0,1 g)
Potkan
Age of each animal (in days counting day of birth as day 0) when administration of test chemical begins
Myši
Date and time of each dose administration
Zvířata
Calculated volume and dosage administered and observations of any dosage losses during or after administration
Kmen
Daily record of status of animal, including relevant symptoms and observations
Běžně užívaný kmen laboratorních hlodavců
Suspected cause of death (if found during study in moribund state or dead)
Počet zvířat
Date and time of humane killing with time interval to last dosing
Nejméně 6 zvířat v každé exponované skupině
Wet uterine weight (to the nearest 0,1 mg) and any observations of luminal fluid losses during dissection and preparation for weighing
Počet skupin
Blotted uterine weight (to the nearest 0,1 mg)
Nejméně 2 zkušební skupiny (viz pokyny v odstavci 33) a 1 skupina negativní kontroly
For each group of animals:
Pokyny týkající se skupin pozitivní kontroly viz odstavec 26 a 27)
Mean daily body weights (to the nearest 0,1 g) and standard deviations (from allocation into groups through necropsy)
v místnosti pro zvířata
Mean wet uterine weights and mean blotted uterine weights (to the nearest 0,1 mg) and standard deviations
22 °C ± 3 °C
If measured, daily food consumption (calculated as grams of food consumed per animal)
Relativní vlhkost
The results of statistical analyses comparing both the wet and blotted uterine weights of treated groups relative to the same measures in the vehicle control groups.
50–60 %, nejméně 30 % a nejvýše 70 %
The results of statistical analysis comparing the total body weight and the body weight gain of treated groups relative to the same measures in the vehicle control groups.
Denní střídání osvětlení
Summary of the important guidance facts of the test method
12 hodin světla, 12 hodin tmy
Rat
Strava a pitná voda
Mice
Chov
Animals
Jednotlivě nebo ve skupinách až do tří zvířat (u nezralých zvířat se doporučuje chov v sociálních skupinách)
Strain
Strava a stelivo
Commonly used laboratory rodent strain
Doporučuje se nízká úroveň fytoestrogenů ve stravě a stelivu
Number of animals
Postup
A minimum of 6 animals per dose group
Metoda
Number of groups
Metoda s nezralými zvířaty bez odstranění vaječníků (upřednostňovaná metoda)
A minimum of 2 test groups (see paragraph 33 for guidance) and a negative control group
Metoda s dospělými samicemi s odstraněnými vaječníky
For guidance on positive control groups see paragraphs 26 and 27
Věk podávání dávek u nezralých zvířat
T° in animal room
Nejdříve v 18. postnatální den.
22 °C ± 3 °C
Podávání by mělo být ukončeno před 25. postnatálním dnem.
Relative humidity
V rámci stávající zkušební metody není relevantní.
50-60 % and not below 30 % or above 70 %
Věk odstranění vaječníků
Daily lighting sequence
až 8. týden věku.
12 hours light, 12 hours dark
Věk podávání dávek u zvířat s odstraněnými vaječníky
Diet and drinking water
Mezi odstraněním vaječníků a 1. dnem podávání by mělo uplynout nejméně 14 dnů.
Housing
Mezi odstraněním vaječníků a 1. dnem podávání by mělo uplynout nejméně 7 dnů.
Individually or in groups of up to three animals (social group housing is recommended for immature animals)
Rozdíly v tělesné hmotnosti by měly být minimální a od střední hmotnosti by se měly lišit nejvýše o ± 20 %.
Diet and bedding
Dávkování
Low level of phyto-oestrogens recommended in diet and bedding
Způsob podání
Protocol
Orální sondou nebo subkutánní injekcí.
Method
Četnost podávání
Immature non-ovariectomised method (the preferred one).
Jedna denní dávka
Ovariectomised adult female method
Objem látky pro sondu nebo injekci
Age of dosing for immature animals
≤ 5 ml na 1 kg tělesné hmotnosti (nebo až 10 ml na 1 kg tělesné hmotnosti v případě vodného roztoku) (ve 2 injekcích při subkutánním způsobu)
PND 18 at the earliest.
Trvání podávání
Dosing should be completed prior to PND 25
3 po sobě jdoucí dny u modelu s nezralými
Not relevant under the scope of the current test method.
Nejméně 3 po sobě jdoucí dny u modelu s odstraněnými vaječníky
Age of ovariectomy
7 po sobě jdoucích dnů u modelu s odstraněnými vaječníky
Between 6 and 8 weeks of age.
Doba pitvy
Age of dosing for ovariectomised animals
Přibližně 24 hodin po poslední dávce
A minimum of 14 days should elapse between ovariectomy and the 1st day of administration.
Pozitivní reakce
A minimum of 7 days should elapse between ovariectomy and the 1st day of administration.
Statisticky významné zvýšení střední hmotnosti dělohy (ve vlhkém a/nebo ve vysušeném stavu)
Body weight variation should be minimal and not exceed ± 20 % of the mean weight.
Referenční estrogen
Dosing
lfa-ethinylestradiol
Route of administration
POKYNY PRO INTERPRETACI A PLATNOST VÝSLEDKŮ
Oral gavage or subcutaneous injection
Obecně by zkouška estrogenity měla být považována za pozitivní, jestliže existuje statisticky významné zvýšení hmotnosti dělohy (p < 0,05) přinejmenším při vysoké úrovni dávky v porovnání s kontrolní skupinou vystavenou pouze působení rozpouštědla.
Frequency of administration
Pozitivní výsledek je dále podpořen prokázáním biologicky přijatelného vztahu mezi dávkou a velikostí odezvy s přihlédnutím k tomu, že tvar křivky dávka-odpověď může ovlivnit překrývající se estrogenní a antiestrogenní působení zkoušené chemické látky.
Single daily dose
Musí se dbát na to, aby nebyla překročena maximální tolerovaná dávka, aby bylo možno provést smysluplnou interpretaci údajů.
Volume amount for gavage and injection
V této souvislosti je třeba pečlivě posoudit snížení tělesné hmotnosti, klinické příznaky a jakékoli další nálezy.
≤ 5 ml/kg body weight (or up to 10 ml/kg body weight in case of aqueous solutions) (in 2 injection sites for subcutaneous route)
Důležitým faktorem pro přijetí údajů získaných při uterotrofní biologické zkoušce jsou hmotnosti dělohy v kontrolní skupině s vehikulem.
Duration of administration
Vysoké kontrolní hodnoty mohou zpochybnit citlivost biologické zkoušky a schopnost odhalit velmi slabé agonisty estrogenu.
3 consecutive days for immature model
Literární rešerše a údaje získané při validaci uterotrofní biologické zkoušky naznačují, že k případům vysokých kontrolních hodnot dochází spontánně, zejména u nezralých zvířat (2)(3)(6)(9).
Minimum of 3 consecutive days for the OVX model
Jelikož hmotnost dělohy nezralých potkanů závisí na mnoha proměnných, jako je kmen nebo tělesná hmotnost, nelze pro hmotnost dělohy s konečnou platností stanovit žádnou horní hranici.
7 consecutive days for the OVX model
Jako určité vodítko může posloužit, že pokud jsou hmotnosti dělohy ve vysušeném stavu u nezralých potkanů v kontrolní skupině v rozmezí 40 až 45 mg, měly by být výsledky považovány za podezřelé, a hmotnosti dělohy vyšší než 45 mg mohou vést k provedení nové zkoušky.
Time of necropsy
Toto však musí být zváženo v každém jednotlivém případě (3)(6)(8).
Approximately 24 hours after the last dose
Při zkouškách s dospělými potkany neúplné odstranění vaječníků ponechá vaječníkovou tkáň, která může produkovat endogenní estrogen a brzdit návrat hmotnosti dělohy do původního stavu.
Positive response
Hmotnosti dělohy ve vysušeném stavu u zvířat z kontrolní skupiny s vehikulem, které jsou nižší než 0,09 % tělesné hmotnosti pro nezralé samice potkana a nižší než 0,04 % tělesné hmotnosti pro mladé dospělé samice s odstraněnými vaječníky, podle všeho znamenají přijatelné výsledky [viz tabulka 31 (2)].
Statistically significant increase of the mean uterus weight (wet and/or blotted)
Jestliže jsou hmotnosti dělohy v kontrolní skupině vyšší než tyto hodnoty, měly by být přezkoumány různé faktory včetně věku zvířat, řádného odstranění vaječníků, obsahu fytoestrogenů ve stravě atd. a negativní výsledky zkoušky (žádné příznaky estrogenní aktivity) by měly být používány s obezřetností.
Reference oestrogen
V laboratoři by měly být uchovávány historické údaje o kontrolních skupinách s vehikulem.
ethinyl estradiol
V laboratoři by rovněž měly být uchovávány historické údaje o reakcích na pozitivní referenční estrogeny, jako je 17-alfa-ethinylestradiol.
GUIDANCE FOR THE INTERPRETATION AND ACCEPTANCE OF THE RESULTS
Laboratoře též mohou zkoušet reakce na známé slabé agonisty estrogenů.
In general, a test for oestrogenicity should be considered positive if there is a statistically significant increase in uterine weight (p < 0,05) at least at the high dose level as compared to the solvent control group.
Všechny tyto údaje je možné porovnat s dostupnými údaji (2)(3)(4)(5)(6)(7)(8), aby bylo zaručeno, že metody používané laboratoří zajišťují dostatečnou citlivost.
A positive result is further supported by the demonstration of a biologically plausible relationship between the dose and the magnitude of the response, bearing in mind that overlapping oestrogenic and antioestrogenic activities of the test chemical may affect the shape of the dose-response curve.
Hmotnosti děloh ve vysušeném stavu v průběhu validační studie OECD vykazovaly menší variabilitu než hmotnosti děloh ve vlhkém stavu (6)(7).
Care must be taken in order not to exceed the maximum tolerated dose to allow a meaningful interpretation of the data.
Výrazná reakce při kterémkoli měření by však ukazovala na to, že zkoušená chemická látka je z hlediska estrogenního působení pozitivní.
Reduction of body weight, clinical signs and other findings should be thoroughly assessed in this respect.
Uterotrofní reakce není zcela estrogenního původu, avšak pozitivní výsledek uterotrofní biologické zkoušky by obecně měl být interpretován jako důkaz estrogenního potenciálu in vivo a měl by normálně vyvolat kroky směřující k dalšímu vyjasnění (viz odstavec 9 a ‚OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals‘, příloha 2).
An important consideration for the acceptance of the data from the Uterotrophic Bioassay is the uterine weights of the vehicle control group.
Schematický diagram ukazující chirurgické odstranění vaječníků
High control values may compromise the responsiveness of the bioassay and the ability to detect very weak oestrogen agonists.
Vaječník
Literature reviews and the data generated during the validation of the Uterotrophic Bioassay suggest that instances of high control means do occur spontaneously, particularly in immature animals (2)(3)(6)(9).
Vejcovod
As the uterine weight of immature rats depends on many variables like strain or body weight, no definitive upper limit for the uterine weight can be given.
Zde oddělit
As a guide, if blotted uterine weights in immature control rats are comprised between 40 and 45 mg, results should be considered as suspicious and uterine weights above 45 mg may lead to rerun the test.
Děloha
However, this needs to be considered on a case by case basis (3)(6)(8).
Vyříznutí
When testing in adult rats incomplete ovariectomy will leave ovarian tissue that can produce endogenous oestrogen and retard the regression of the uterine weight.
Mesometrium, vaskulatura a tukový polštář nejsou znázorněny
Blotted vehicle control uterine weights less than 0,09 % of body weight for immature female rats and less than 0,04 % for ovariectomised young adult females appear to yield acceptable results (see Table 31 (2)).
Postup začíná otevřením dorzo-laterální stěny břišní ve středním bodě mezi spodním okrajem žeber a hřebenem kosti kyčelní, několik milimetrů vedle bočního okraje bederního svalu.
If the control uterine weights are greater than these numbers, various factors should be scrutinised including the age of the animals, proper ovariectomy, dietary phyto-oestrogens, and so on, and a negative assay result (no indication for oestrogenic activity) should be used with caution.
Uvnitř břišní dutiny by měly být umístěny vaječníky.
Historical data for vehicle control groups should be maintained in the laboratory.
Na aseptickém poli se vaječníky poté fyzicky oddělí od břišní dutiny, mezi vaječník a dělohu se umístí podvaz za účelem kontroly krvácení a vaječník se nad podvazem oddělí řezem ve spojení vejcovodu s každým děložním rohem.
Historical data for responses to positive reference oestrogens, such as 17a-ethinyl estradiol, should also be maintained in the laboratory.
Po ujištění, že nepřetrvává žádné výrazné krvácení, se břišní stěna uzavře suturou a kůže se uzavře např. klipy nebo suturou.
Laboratories may also test the response to known weak oestrogen agonists.
Zvířatům by mělo být umožněno zotavení a návrat hmotnosti dělohy do původního stavu po dobu nejméně 14 dnů před použitím.
All these data can be compared to available data (2)(3)(4)(5)(6)(7)(8) to ensure that the laboratory's methods yield sufficient sensitivity.
Obrázek 2
The blotted uterine weights showed less variability in the course of the OECD validation study than the wet uterine weights (6)(7).
Odstranění a zpracování děložních tkání pro měření hmotnosti
However, a significant response in either measure would indicate that the test chemical is positive for oestrogenic activity.
HMOTNOST DĚLOHY
The uterotrophic response is not entirely of oestrogenic origin, however, a positive result of the Uterotrophic Bioassay should generally be interpreted as evidence for oestrogenic potential in vivo, and should normally initiate actions for further clarification (see paragraph 9 and the “OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals”, Annex 2).
Linie oddělení při pitvě
Schematic diagram showing the surgical removal of the ovaries
Postup začíná otevřením břišní stěny ve srůstu stydké kosti.
Ovary
Poté se od dorzální břišní stěny oddělí každý z vaječníků, jsou-li přítomny, a roh dělohy.
Oviduct
Od ventrální a laterální strany dělohy a vaginy se oddělí močový měchýř a močovody.
Cut here
Odděluje se fibrózní adheze mezi rektem a vaginou, dokud nelze identifikovat spojení poševního vchodu s perineální kůží.
Uterus
Děloha a vagina se oddělí od těla naříznutím poševní stěny těsně nad spojením mezi perineální kůží, jak je ukázáno na obrázku.
Incision