natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Doporučuje se provést analýzu lahviček třikrát po uplynutí dostatečného počtu časových intervalů tak, aby bylo možno identifikovat desetidenní období rozkladu.
It is recommended that triplicate bottles be analysed after a sufficient number of time intervals such that the 10-d window may be identified.
Na konci zkoušky se rovněž analyzuje nejméně pět zkušebních lahviček (odstavec 15 písm. a)) ze sady a), b) a c) (viz odstavec 42) s cílem umožnit výpočet 95 % intervalů spolehlivosti pro průměrnou hodnotu biologického rozkladu v procentech.
Also at least five test bottles (paragraph 15-a) from sets (a), (b) and (c) (see paragraph 42) are analysed at the end of the test, to enable 95 % confidence intervals to be calculated for the mean percentage biodegradation value.
Inokulované médium
Inoculated medium
Inokulum se používá v koncentraci sušiny v aktivovaném kalu 4 mg/l.
The inoculum is used at a concentration of 4 mg/l activated sludge dry solids.
Dostatečně inokulované médium se připraví bezprostředně před použitím například přidáním 2 ml vhodně upraveného aktivovaného kalu (odstavce 27 až 32) na 2000 mg/l na 1 litr média s minerálními solemi (odstavec 19).
Prepare immediately before use sufficient inoculated medium by adding, for example, 2 ml suitably treated activated sludge (paragraphs 27 to 32) at 2000 mg/l to 1 litre of mineral salts medium (paragraph 19).
Při použití výstupu z druhého stupně čistírny odpadních vod se přidá až 100 ml odtoku (odstavec 33) do 900 ml média s minerálními solemi (odstavec 19) a zředí se médiem na 1 litr.
When secondary sewage effluent is to be used add up to 100 ml effluent (paragraph 33) to 900 ml mineral salts medium (paragraph 19) and dilute to 1 litre with medium.
Příprava lahviček
Preparation of bottles
Alikvotní díly inokulovaného média se rozdělí do duplikátních lahviček tak, aby se poměr mezi plynnou a kapalnou fází rovnal 1:2 (přidá se např. 107 ml do lahviček o kapacitě 160 ml).
Aliquots of inoculated medium are dispensed into replicate bottles to give a headspace to liquid ratio of 1:2 (e.g. add 107 ml to 160 ml-capacity bottles).
Lze použít i jiné poměry, ale je nutno dbát upozornění uvedeného v odstavci 11.
Other ratios may be used, but see the warning given in paragraph 11.
Při použití jednoho i druhého typu inokula je nutno zajistit, aby bylo inokulované médium odpovídajícím způsobem promícháno s cílem zajistit jeho rovnoměrné rozdělení do zkušebních lahviček.
When using either type of inoculum, care must be taken to ensure that the inoculated medium is adequately mixed to ensure that it is uniformly distributed to the test bottles.
Připraví se sady lahviček (odstavec 15a), které budou obsahovat:
Sets of bottles (paragraph 15a) are prepared to contain the following:
zkušební nádoby (označené FT), obsahující zkoušenou chemickou látku;
Test vessels (denoted FT) containing the test chemical;
nádoby pro slepé stanovení (označené FB) obsahující jen zkušební médium a inokulum; je nutné přidat rovněž veškeré chemické látky, rozpouštědla, činidla nebo filtry ze skelných vláken užívané k zavedení zkoušené chemické látky do zkušebních nádob;
Blank controls (denoted FB) containing only the test medium plus inoculum; any chemicals, solvents, agents or glass fibre filters used to introduce the test chemical into the test vessels must also be added;
nádoby pro kontrolu postupu (označené FC), obsahující referenční chemickou látku;
Vessels (denoted FC) for checking the procedure containing the reference chemical;
podle potřeby nádoby pro kontrolu možného inhibičního vlivu zkoušené chemické látky (označené FI) obsahující zkoušenou chemickou látku a referenční chemickou látku ve stejné koncentraci (odstavec 24) jako v lahvích FT (zkoušená látka) a FC, (referenční látka);
If needed, vessels (denoted FI) for checking a possible inhibitory effect of the test chemical containing both the test chemical and reference chemical at the same concentrations (paragraph 24) as in bottles FT and FC, respectively;
nádoby pro kontrolu případného biotického rozkladu (označeného FS), jako v bodě a) plus 50 mg/l HgCl2, nebo sterilizované jiným způsobem (např. v autoklávu).
Vessels (denoted FS) for checking a possible abiotic degradation as (a) plus 50 mg/l HgCl2 or sterilised by some other means (e.g. by autoclaving).
Ve vodě rozpustné zkoušené chemické látky a referenční chemické látky se přidají jako vodné zásobní roztoky (odstavce 22, 23 a 24) tak, aby výsledná koncentrace byla 10 až 20 mg C/l.
Water-soluble test chemicals and reference chemicals are added as aqueous stock solutions (paragraphs 22, 23 and 24) to give a concentration of 10 to 20 mg C/l.
Nerozpustné zkoušené chemické látky a nerozpustné referenční chemické látky se přidávají do lahviček celou řadou různých způsobů (viz odstavec 22a-e) v závislosti na povaze zkoušené látky, a to buď před přidáním inokulovaného média, nebo po něm v závislosti na metodě expozice zkoušené chemické látky.
Insoluble test chemicals and insoluble reference chemicals are added to bottles in a variety of ways (see paragraph 22a-e) according to the nature of the test chemical, either before or after addition of the inoculated medium, depending on the method of treatment of the test chemical.
Pokud se užije některý z postupů uvedených v odstavci 22a-e, bude se slepými lahvičkami FB (odstavec 42b) zacházeno podobným způsobem, avšak bez přidání zkoušené chemické látky nebo referenční chemické látky.
If one of the procedures given in paragraph 22a-e is used, then the blank bottles FB (paragraph 42b) should be treated in a similar fashion but excluding the test chemical or reference chemical.
Těkavé zkoušené chemické látky je třeba vstříknout do uzavřených lahviček (bod 47) s použitím injekční mikrostříkačky.
Volatile test chemicals should be injected into sealed bottles (paragraph 47) using a micro syringe.
Dávka se vypočítá ze vstříknutého objemu a z hustoty zkoušené chemické látky.
The dose is calculated from the volume injected and the density of the test chemical.
Potom se v případě potřeby do nádob přidá voda tak, aby objem kapaliny byl ve všech nádobách stejný.
Water should be added to vessels, where necessary, to give the same liquid volume in each vessel.
Poměr mezi plynnou a kapalnou fází (obvykle 1:2) a koncentrace zkoušené látky musí zajistit dostatečnou koncentraci kyslíku v plynné fázi pro úplný biologický rozklad.
It must be ensured that the headspace to liquid ratio (usually 1:2) and concentration of the test chemical are such that sufficient oxygen is available in the headspace to allow for complete biodegradation.
Všechny lahve se poté těsně uzavřou, například pryžovými septy z butylkaučuku a hliníkovými lemovacími uzávěry.
All bottles are then sealed for example, with butyl rubber septa and aluminium caps.
V této fázi jsou přidány těkavé zkoušené chemické látky (bod 45).
Volatile tests chemicals should be added at this stage (paragraph 45).
Pokud má být sledován pokles koncentrace DOC ve zkušebním roztoku a provedeny analýzy počáteční koncentrace IC v čase nula (sterilní kontroly, bod 42e) nebo jiné determinanty, příslušný vzorek se odstraní ze zkušební nádoby.
If the decrease in DOC concentration of the test solution is to be monitored and for time zero analyses to be performed for initial IC concentration (sterile controls, paragraph 42e) or other determinands, remove an appropriate sample from the test vessel.
Zkušební nádoba a její obsah jsou pak vyřazeny.
The test vessel and its contents are then discarded.
Těsně uzavřené lahvičky se umístí na orbitální třepačku (odstavec 15d) při rychlosti zajišťující dostatečné promíchání obsahu zkušebních nádob a v suspenzi (např. 150 až 200 otáček za minutu), a jsou inkubovány v temnu při teplotě 20 °C ± 1 °C.
The sealed bottles are placed on a rotary shaker (paragraph 15d), with a shaking rate sufficient to keep the bottle contents well mixed and in suspension (e.g. 150 to 200 rpm), and incubated in the dark at 20 °C, to be kept within ± 1 °C.
Vzorec odběru vzorků závisí na trvání lagové fáze a na kinetické rychlosti biologického rozkladu zkoušené chemické látky.
The pattern of sampling will depend on the lag period and kinetic rate of biodegradation of the test chemical.
Vybrané nádoby se analyzují v den vzorkování, ale nejméně jednou za týden nebo častěji (např. dvakrát týdně), jestliže se požaduje celková křivka biologické rozložitelnosti.
Bottles are sacrificed for analysis on the day of sampling, which should be at least weekly or more frequently (e.g. twice per week) if a complete degradation curve is required.
Z třepačky se odstraní potřebný počet opakovaných vzorků odpovídajících FT, FB a FC a pokud byly nasazeny také FI a FS (viz odstavec 42).
The requisite number of replicate bottles is taken from the shaker, representing FT, FB and FC and, if used FI and FS (see paragraph 42).
Zkouška musí obvykle probíhat 28 dní.
The test normally runs for 28d.
Zkouška může být ukončena před uplynutím 28 dní, jestliže z křivky biologické rozložitelnosti vyplývá, že prodlevy bylo dosaženo již dříve.
If the biodegradation curve indicates that a plateau has been attained before 28d, the test may be concluded earlier than 28d.
Odeberou se vzorky pro analýzu z pěti lahví rezervovaných pro 28. den zkoušky a výsledky se použijí k výpočtu mezí spolehlivosti nebo variačního koeficientu procenta biologického rozkladu.
Take samples from the five bottles reserved for the 28th day of the test for analysis and use the results to calculate the confidence limits or coefficient of variation of percentage biodegradation.
Z lahviček představujících kontrolní vzorky pro inhibici a abiotický rozklad nemusí být vzorky odebírány tak často jako z ostatních lahviček; postačí odběr v 1. den a v 28. den.
Bottles representing the checks for inhibition and for abiotic degradation need not be sampled as frequently as the other bottles; day 1 and day 28 would be sufficient.
Analýza anorganického uhlíku (IC)
Inorganic carbon (IC) analysis
Produkce CO2 v lahvičkách se stanoví měřením zvýšení koncentrace anorganického uhlíku (IC) v průběhu inkubace.
production in the bottles is determined by measuring the increase in the concentration of inorganic carbon (IC) during incubation.
Existují dvě doporučené metody stanovení množství IC vznikajícího během zkoušky, které jsou popsány bezprostředně níže.
There are two recommended methods available for measuring the amount of IC produced in the test, and these are described immediately below.
Tyto metody mohou poskytovat poněkud odlišné výsledky, a proto by během zkoušky měla být používána jen jedna z nich.
Since the methods can give slightly different results only one should be used in a test run.
Metoda a) se doporučuje v případě, že médium pravděpodobně obsahuje zbytky například skleněného filtračního papíru a/nebo nerozpustné zkoušené chemické látky.
Method (a) is recommended if the medium is likely to contain remnants of, for example, a glass-filter paper and/or insoluble test chemical.
Pokud není k dispozici analyzátor uhlíku, lze tuto analýzu provést pomocí plynového chromatografu.
This analysis can be performed using a gas chromatograph if a carbon analyser is not available.
Je důležité, aby láhve měly při analýze plynu v plynné fázi zkušební teplotu nebo se jí alespoň blížily.
It is important that the bottles should be at or close to the test temperature when the headspace gas is analysed.
Metoda b) může být jednodušší pro laboratoře, které užívají pro měření IC analyzátory uhlíku.
Method (b) can be easier for laboratories using carbon analysers to measure IC.
Je důležité, aby roztok hydroxidu sodného (odstavec 21), který slouží k přeměně CO2 na uhličitan, byl buď čerstvě připravený, nebo byl znám jeho obsah IC, aby jej bylo možno zohlednit při výpočtu výsledků zkoušek (viz odstavec 66-b).
It is important that the sodium hydroxide solution (paragraph 21) used to convert CO2 to carbonate is either freshly prepared or its IC content is known, so that this can be taken into account when calculating the test results (see paragraph 66-b.)
Metoda a):
Method (a):
okyselení na hodnotu pH < 3
acidification to pH < 3
Před analýzou každé šarže se analyzátor uhlíku kalibruje vhodným IC standardem (např. dusíkem s hmotnostním podílem CO2 1 %).
Before each batch of analyses, the IC analyser is calibrated using an appropriate IC standard (e.g. 1 % w/w CO2 in N2).
Septem se vstříkne do každé zkušební nádoby koncentrovaná kyselina fosforečná (odstavec 20), aby se hodnota pH média snížila na < 3 (přidá se například 1 ml kyseliny na každých 107 ml zkušebního média).
Concentrated orthophosphoric acid (paragraph 20) is injected through the septum of each bottle sampled to lower the pH of the medium to < 3 (e.g. add 1 ml to 107 ml test medium).
Potom se nádoby znovu umístí na třepačku.
The bottles are placed back on the shaker.
Po 1 h třepání při zkušební teplotě se nádoby sejmou z třepačky a z každé zkušební nádoby se odebere alikvotní podíl (např. 1 ml) plynné fáze a vstříkne se do analyzátoru uhlíku.
After shaking for one hour at the test temperature the bottles are removed from the shaker, aliquots (e.g. 1 ml) of gas are withdrawn from the headspace of each bottle and injected into the IC analyser.
Zaznamenají se naměřené koncentrace IC (v mg C na litr plynu).
The measured IC concentrations are recorded as mg C/l.
Podstata této metody spočívá v tom, že po okyselení na pH < 3 a po dosažení rovnováhy při 20 °C je rovnovážná konstanta pro distribuci CO2 mezi kapalnou a plynnou fází ve zkušebních nádobách rovna 1,0, pokud je měřena jako koncentrace (13).
The principle of this method is that after acidification to pH < 3 and equilibration at 20 °C, the equilibrium constant for the distribution of CO2 between the liquid and gaseous phases in the test bottles is 1,0 when measured as a concentration (13).
To by mělo být nejméně jednou ověřeno pro zkušební systém následujícím způsobem:
This should be demonstrated for the test system at least once as follows:
Připraví se zkušební nádoby obsahující roztok bezvodého uhličitanu sodného (Na2CO3) ve vodě prosté CO2 o koncentracích odpovídajících 5 a 10 mg IC na litr, přičemž voda prostá CO2 se připraví okyselením vody na pH 6,5 koncentrovanou kyselinou orthofosforečnou (odstavec 20), kterou se přes noc prohání vzduch prostý CO2 a nakonec se pH sníží přidáním zásady na neutrální hodnotu.
Set up bottles containing 5 and 10 mg/l as IC using a solution of anhydrous sodium carbonate (Na2 CO3) in CO2-free water prepared by acidifying water to pH 6,5 with concentrated ortho-phosphoric acid (paragraph 20), sparging overnight with CO2-free air and raising the pH to neutrality with alkali.
Zajistí se, aby poměr mezi plynnou a kapalnou fází byl stejný jako při vlastní zkoušce (např. 1:2).
Ensure that the ratio of the headspace volume to the liquid volume is the same as in the tests (e.g. 1:2).
Obsah v nádobách se okyselí a po dosažení rovnováhy, jak je uvedeno v odstavci 52, se stanoví koncentrace IC v plynné i kapalné fázi.
Acidify and equilibrate as described in paragraph 52, and measure the IC concentrations of both the headspace and liquid phases.
Ověří se, zda v rámci experimentální chyby jsou obě koncentrace stejné.
Check that the two concentrations are the same within experimental error.
V případě, že tomu tak není, experimentátor by měl uvedené postupy přehodnotit.
If they are not, the operator should review the procedures.
Tuto kontrolu distribuce IC mezi plynnou a kapalnou fází není nutné provádět vždy při provedení testu; lze ji provádět nejspíše při provádění kalibrace.
This check on the distribution of IC between liquid and gaseous phases need not be made every time the test is performed; it could presumably be made while performing the calibration.
Metoda b):
Method (b):
přeměna CO2 na uhličitany
conversion of CO2 to carbonate
Před analýzou každé šarže se analyzátor IC kalibruje na vhodný standard – například roztokem hydrogenuhličitanu sodného (NaHCO3) ve vodě prosté CO2 (viz odstavec 53) v koncentračním rozsahu IC od 0 mg/l do 20 mg/l.
Before each batch of analyses, the IC analyser is calibrated using an appropriate standard — for example, a solution of sodium bicarbonate (NaHCO3) in CO2 free water (see paragraph 53) in the range 0 to 20 mg/l as IC.
Jestliže jsou při všech odběrech vzorků požadovány absolutní slepé hodnoty IC, bude stanovení IC v roztoku NaOH požadováno při každém jeho použití.
If absolute blank IC values are required at all sampling occasions, IC determinations of the NaOH solution will be required each time it is used.
Nádoby se sejmou z třepačky a nechají se odsadit.
The bottles are removed from the shaker and allowed to settle.
Z každé nádoby se stříkačkou odebere vhodný objem kapalné fáze (např. od 50 μl do 1000 μl).
Suitable volumes (e.g. 50 to 1000 μl) of the liquid phase in each vessel are withdrawn by syringe.
Vzorky se vstříknou do analyzátoru IC a zaznamenají se koncentrace IC.
The samples are injected into the IC analyser and the concentrations of IC are recorded.
Je třeba zajistit, aby užívaný analyzátor byl řádně vybaven ke zpracování zásaditých vzorků vytvořených v rámci této metody.
It should be ensured that the analyser used is equipped properly to deal with the alkaline samples produced in this method.
Podstata této metody spočívá v tom, že po přídavku zásady a třepání je koncentrace IC v plynné fázi zanedbatelná.
The principle of this method is that after the addition of alkali and shaking, the concentration of IC in the headspace is negligible.
To by mělo být ověřeno pro zkušební systém nejméně jednou s použitím standardů IC, přidáním zásady a ustálením a změřením koncentrace IC v plynné i kapalné fázi (viz odstavec 53).
This should be checked for the test system at least once by using IC standards, adding alkali and equilibrating, and measuring the concentration of IC in both the headspace and liquid phases (see paragraph 53).
Koncentrace v plynné fázi by se měla blížit nule.
The concentration in the headspace should approach zero.
Tuto kontrolu na téměř kompletní absorpci CO2 není nutno provádět při každé zkoušce.
This check on the virtually complete absorption of CO2 need not be made every time the test is performed.
Výpočet výsledků
Calculating of results
Za předpokladu 100 % mineralizace zkoušené chemické látky na CO2 se teoretická produkce anorganického uhlíku (ThIC), která je větší než produkovaná slepým stanovením, rovná množství celkového organického uhlíku (TOC) přidaného do každé zkušební nádoby na začátku zkoušky, takže:
Assuming 100 % mineralisation of the test chemical to CO2, the ThIC in excess of that produced in the blank controls equals the TOC added to each test bottle at the start of the test, that is:
Celkový objem anorganického uhlíku (TIC) v každé zkušební nádobě je:
The total mass (mg) of inorganic carbon (TIC) in each bottle is:
mg C v kapalné fázi
mg C in the liquid
mg C v plynné fázi
mg C in the headspace
rovnice [1]
Equation [1]
objem kapaliny v láhvi (v litrech),
volume of liquid in the bottle (litre);
CL koncentrace IC v kapalné fázi (v mg uhlíku na 1 litr kapalné fáze),
CL concentration of IC in the liquid (mg/l as carbon);
VH objem plynné fáze (v litrech),
VH volume of the headspace (litre);
CL koncentrace IC v plynné fázi (v mg uhlíku na 1 litr plynné fáze).
CH concentration of IC in the headspace (mg/l as carbon).
Výpočet TIC pro tyto dvě analytické metody užívané ke stanovení IC při této zkoušce je popsán níže v odstavcích 60 a 61.
The calculations of TIC for the two analytical methods used for measuring IC in this test are described below in paragraphs 60 and 61.
Procento biologického rozkladu (% D) se pro každý případ vypočte podle:
Percentage biodegradation (% D) in each case is given by:
Rovnice [2]
Equation [2]
TIC ve zkušební nádobě v čase t v miligramech,
mg TIC in test bottle at time t;
průměrná hodnota TIC v nádobách pro slepé stanovení v čase t v miligramech,
mean mg TIC in blank bottles at time t;
TOC TOC původně přidaný do zkušební nádoby v miligramech.
TOC mg TOC added initially to the test vessel.
Procento biologického rozkladu % D se vypočte ve zkušebních nádobách (FT), referenčních nádobách (FC) a nádobách pro kontrolu inhibice z příslušného množství TIC produkovaného při každé době odběru vzorku (pokud byly zařazeny).
The percentage biodegradation % D is calculated for the test (FT), reference (FC) and, if included inhibition monitoring control (FI) bottles from the respective amounts of TIC produced up to each sampling time.
Jestliže došlo během zkušební doby k významnému vzrůstu TIC sterilních kontrol (FS), pak lze dospět k závěru, že došlo k abiotickému rozkladu zkoušené chemické látky a tuto skutečnost je třeba zohlednit ve výpočtu D v rovnici [2].
If there has been a significant increase in the TIC content of the sterile controls (FS) over the test period, then it may be concluded that abiotic degradation of the test chemical has occurred and this must be taken into account in the calculation of D in Equation [2].
Okyselení na hodnotu pH < 3
Acidification to pH < 3
Vzhledem k tomu, že okyselení na hodnotu pH < 3 a ustálení má za následek dosažení rovnováhy mezi koncentrací TIC v kapalné a plynné fázi, stačí měřit jen koncentraci IC v plynné fázi.
Since acidification to pH < 3 and equilibration results in the equalisation of the concentration of TIC in the liquid and gaseous phases, only the concentration of IC in the gas phase needs to be measured.
Proto je v rovnici [1] TIC
Thus, from Equation [1] TIC
, kde VB = je objem lahve se sérovým uzávěrem.
, where VB = volume of the serum bottle.
Přeměna CO2 na uhličitany
Conversion of CO2 to carbonate
Při této metodě se výpočty provádějí, jak je popsáno v rovnici [1], avšak zanedbatelný obsah IC v plynné fázi se nebere v úvahu, to znamená, že VH
In this method calculations are performed as in Equation [1], but the negligible amount of IC in the gaseous phase is ignored, that is VH
0, a TIC
0, and TIC
Vyjadřování výsledků
Expression of Results
Křivka biologického rozkladu se získá vynesením závislosti procenta biologického rozkladu D na čase inkubace, a pokud možno se vyznačí také lagová fáze, doba biologického rozkladu, 10denní období rozkladu a prodleva, tj. fáze, v níž bylo dosaženo maximálního rozkladu a v níž se vyrovnala křivka biologického rozkladu.
A biodegradation curve is obtained by plotting percentage biodegradation, D, against time of incubation and if possible, the lag phase, biodegradation phase, 10-d window and plateau phase, that is the phase in which the maximal degradation has been reached and the biodegradation curve has levelled out, are indicated.
Jestliže se pro dvě souběžná stanovení ve zkušebních nádobách FT (rozdíl menší než 20 %) získají srovnatelné výsledky, vynesou se do grafů průměrné hodnoty (viz dodatek 2, obr. 1); v opačném případě se vynesou křivky pro každou nádobu zvlášť.
If comparable results are obtained for parallel test vessels FT (< 20 % difference), a mean curve is plotted (see Appendix 2, Fig.1); if not, curves are plotted for each vessel.
Zjistí se průměrná hodnota biologického rozkladu v procentech v prodlevě nebo se odhadne nejvyšší hodnota (například když křivka v prodlevě klesá), ale je důležité stanovit, že v tomto druhém případě se nejedná o odlehlou hodnotu.
The mean value of the percentage biodegradation in the plateau phase is determined or the highest value is assessed (e.g. when the curve decreases in the plateau phase), but it is important to assess that in the latter case the value is not an outlier.
Tento maximální stupeň biologického rozkladu se v protokolu o zkoušce uvede jako „stupeň biologického rozkladu zkoušené chemické látky“.
Indicate this maximum level of biodegradation as “degree of biodegradation of the test chemical” in the test report.
Jestliže počet zkušebních nádob nebyl dostatečný pro odhad prodlevy, použijí se údaje změřené poslední den zkoušky a vypočte se průměrná hodnota.
If the number of test vessels was insufficient to indicate a plateau phase, the measured data of the last day of the test are used to calculate a mean value.
Tato poslední hodnota, průměr pěti opakovaných zkoušek, slouží jako indikátor přesnosti, s nímž bylo stanoveno procento biologického rozkladu.
This last value, the mean of five replicates, serves to indicate the precision with which the percentage biodegradation was determined.