natgillin/translations-raw huggingface dataset:
blokující pufr: fyziologický roztok pufrovaný fosforečnanem (PBS) obsahující 0,3 % VKHO negativního séra dospělého skotu, 0,1 % (v/v) Tween-20 (dodávaného ve formě polyoxyethylene sorbiton monolaurát syrupu) v PBS;
Blocking buffer: phosphate buffered saline (PBS) containing 0,3 % BTV negative adult bovine serum, 0,1 % (v/v) Tween-20 (supplied as polyoxyethylene sorbiton monolaurate syrup) in PBS.
monoklonální protilátka: 3-17-A3 (dodávaná ve formě hybridomu supernatantu tkáňové kultury) zaměřená proti skupinově specifickému polypeptidu VP7, skladovaná při teplotě –20 °C nebo lyofilizovaná, ředěná před použitím blokujícím pufrem v poměru 1:100;
Monoclonal antibody: 3-17-A3 (supplied as hybridoma tissue-culture supernatant) directed against the group-specific polypeptide VP7, stored at -20 °C or freeze-dried and diluted 1/100 with blocking buffer before use.
konjugát: králičí protimyší globulin (adsorbovaný a eluovaný) konjugovaný na křenovou peroxidasu a uchovávaný v temnu při teplotě 4 °C;
Conjugate: rabbit anti-mouse globulin (adsorbed and eluted) conjugated to horseradish peroxidase and kept in the dark at 4 °C.
(S OPD zacházejte opatrně – používejte gumové rukavice – možný mutagen);
(Handle OPD with care - wear rubber gloves - suspected mutagen).
jednomolární kyselina sírová: 26,6 ml kyseliny přidané do 473,4 ml destilované vody.
1 Molar sulphuric acid: 26,6 ml of acid added to 473,4 ml of distilled water.
(Pamatujte, že kyselina se musí přidávat do vody, nikdy voda do kyseliny);
(Remember Acid must be added to water, never water to acid.)
kruhová třepačka;
Orbital shaker.
Analyzátor destiček ELISA (odečet je možné provádět i vizuálně).
ELISA plate reader (the test may be read visually).
Uspořádání testu
Test format
Cc: kontrola konjugátu (žádné sérum / žádná monoklonální protilátka); C++: silná pozitivní kontrola séra; C+: slabá pozitivní kontrola séra; C–: negativní kontrola séra; Cm: kontrola monoklonální protilátky (žádné sérum).
Cc: conjugate control (no serum/ no monoclonal antibody); C++: strong positive serum control; C+: weak positive serum control; C-: negative serum control; Cm: monoclonal antibody control (no serum).
DODATEK 1
APPENDIX 1:
Uspořádání při kapkovém ředění (1:5) formát (40 sér/destička)
Spot dilution (1:5) format (40 sera/plate)
Testované sérum
Test Sera
DODATEK 2
APPENDIX 2:
Uspořádání při titraci séra (10 sér/destička)
Serum titration format (10 sera/plate)
Protokol testu:
Test protocol:
Kontrola konjugátu (Cc) jamky 1A a 1B jsou určené pro slepou zkoušku za použití antigenu VKHO a konjugátu.
Conjugate control (Cc) Wells 1A and 1B are a blank control consisting of BTV antigen and conjugate.
Je možno ji použít ke kalibraci snímače ELISA.
This may be used to blank the ELISA reader.
Kontrola mab (Cm) sloupce 1 a 2, řady G a H jsou jamky určené pro kontrolu monoklonální protilátky a obsahují antigen VKHO, monoklonální protilátku a konjugát.
Mab control (Cm) Columns 1 and 2, rows G and H are the monoclonal antibody control and contain BTV antigen, monoclonal antibody and conjugate.
Tyto jamky představují maximální zabarvení.
These wells represent maximum colour.
Průměr hodnot optické hustoty z této kontroly odpovídá inhibiční hodnotě 0 %.
The mean of the optical density readings from this control represents the 0 % inhibition value.
Pozitivní kontrola (C++, C+) sloupce 1 a 2, řady C-D-E-F.
Positive control (C++, C+) Columns 1 and 2, rows C-D-E-F.
Tyto jamky obsahují antigen VKHO, silné a slabé pozitivní antisérum VKHO, mab a konjugát.
These wells contain BTV antigen, BTV strong and weak positive antiserum respectively, Mab and conjugate.
Negativní kontrola (C–) jamky 2A a 2B obsahují negativní kontrolu, která sestává z VKHO antigenu, VKHO negativního antiséra, mab a konjugátu.
Negative control (C-) Wells 2A and 2B are the negative controls, which contain BTV antigen, BTV negative antiserum, Mab and conjugate.
Testovaná séra pro rozsáhlé sérologické průzkumy a rychlý screening mohou být séra testována v jednom zředění 1:5 (dodatek 1).
Test sera For large-scale serological surveys and rapid screening, sera may be tested at a single dilution of 1:5 (Appendix 1).
Nařeďte antigen VKHO na předtitrovanou koncentraci v PBS, krátce protřepejte v ultrazvukové třepačce, aby se rozptýlil agregovaný virus (není-li tento přístroj k dispozici, důkladně protřepejte v pipetě) a přidejte 50 μl do všech jamek destičky ELISA.
Dilute BTV antigen to pre-titrated concentration in PBS, sonicate briefly to disperse aggregated virus (if sonicator is not available, pipette vigorously) and add 50 μl to all wells of the ELISA plate.
Oklepněte strany destičky, aby se antigen rozptýlil.
Tap sides of plate to disperse antigen.
Inkubujte při 37 °C po dobu 60 minut na kruhové třepačce.
Incubate at 37 °C for 60 minutes on an orbital shaker.
Třikrát destičky promyjte, a to tak, že jamky propláchnete nesterilním PBS, a poté je osušíte pomocí savého papíru.
Wash plates three times by flooding and emptying the wells with non-sterile PBS and blot dry on absorbent paper.
Kontrolní jamky: do jamek Cc přidejte 100 μl blokujícího pufru.
Control wells: Add 100 μl of blocking buffer to Cc wells.
Do příslušných jamek C–, C+ a C++ přidejte 50 μl pozitivního a negativního kontrolního séra ve zředění 1:5 (10 μl séra +40 μl blokujícího pufru).
Add 50 ul of positive and negative control sera, at a dilution of 1:5 (10 μ l sera + 40 μl blocking buffer), to respective wells C-, C+ and C++.
Do kontrolních jamek přidejte k mab 50 μl blokujícího pufru.
Add 50μl blocking buffer to Mab control wells.
Metoda bodové titrace: do jamek ve sloupcích 3 až 12 přidejte zředění každého testovaného séra v tlumicím roztoku 1:5 (10 µl séra +40 µl tlumicího roztoku), aby se jejich objem zdvojnásobil.
Spot titration method: Add a 1:5 dilution of each test serum in blocking buffer to duplicate wells of columns 3 to 12 (10 μl sera +40 μl blocking buffer),
Metoda titrace séra: ve všech osmi jamkách jednotlivých sloupců 3 až 12 připravte dvojitou sérii roztoků každého testovaného vzorku (1:5 až 1:640) v blokujícím pufru.
Serum titration method: Prepare a two-fold dilution series of each test sample (1:5 to 1:640) in blocking buffer across eight wells of single columns 3 to 12.
Ihned po přidání testovaných sér nařeďte mab v blokujícím pufru v poměru 1:100 a přidejte 50 μl do všech jamek destičky kromě slepé kontroly.
Immediately after the addition of the test sera, dilute Mab 1:100 in blocking buffer and add 50 μl to all wells of the plate except for the blank control.
Promyjte destičky třikrát pomocí PBS, poté je osušte savým papírem.
Wash three times with PBS and blot dry.
Nařeďte králičí anti-myší koncentrát v blokujícím pufru v poměru 1:5000 a přidejte 50 μl do všech jamek destičky.
Dilute rabbit anti-mouse concentrate to 1/5000 in blocking buffer and add 50 μl to all wells of the plate.
Nechte roztát OPD a těsně před použitím přidejte 5 μl 30 % peroxidu vodíku ke každým 10 ml OPD.
Thaw the O-Phenylenediamine dihydrochloride (OPD) and immediately before use add 5 μl of 30 % hydrogen peroxide to each 10 ml of OPD.
Do všech jamek destičky přidejte 50 μl.
Add 50 μl to all wells of the plate.
Vyčkejte asi 10 minut, než dojde k barevné reakci, a poté ji zastavte jednomolární kyselinou sírovou (50 μl na jamku).
Allow colour to develop for approximately 10 minutes and stop the reaction with 1 Molar sulphuric acid (50 μl per well).
K barevné reakci by mělo dojít v kontrolních jamkách mab a v jamkách obsahujících séra bez protilátek proti VKHO.
Colour should develop in the Mab control wells and in those wells containing sera with no antibody to BTV.
Destičky odečítejte buď vizuálně, nebo pomocí spektrofotometrického analyzátoru.
Examine and record the plates either visually or using a spectrophotometric reader.
Analýza výsledků:
Analysis of results:
Za použití příslušného softwarového nástroje se vytisknou hodnoty optické denzity (OD) a procentní inhibiční hodnoty (PI) testovaných a kontrolních sér vycházející ze střední hodnoty zaznamenané v kontrolních jamkách s antigenem.
Using the software package print out the optical density (OD) values, and the percentage inhibition (PI) for test and control sera based on the mean value recorded in the antigen control wells.
Údaje vyjádřené jako hodnoty OD a PI se použijí ke stanovení, zda byl test proveden v rámci přípustných mezí.
The date expressed as OD and PI values are used to determine whether the test has performed within acceptable limits.
Není-li k dispozici softwarový nástroj, vytiskněte hodnoty OD za použití tiskárny ELISA.
If a computer software package is not available print out the OD values using the ELISA printer.
Vypočtěte střední hodnotu OD kontrolních jamek s antigenem, která představuje hodnotu 100 %.
Calculate the mean OD value for the antigen control wells, which is equivalent to the 100 % value.
Určete 50 % hodnotu OD a ručně vypočtěte pozitivitu a negativitu každého vzorku.
Determine the 50 % OD value and manually calculate the positivity and negativity of each sample.
Procentní inhibiční hodnota (PI) = 100 – (OD každé testové kontroly / střední hodnota OD jamek Cm) × 100.
Percentage inhibition (PI) value = 100 – (OD of each test control/Mean OD of Cm) × 100.
Zdvojené jamky s negativním kontrolním sérem a zdvojené slepé jamky musí vykazovat hodnoty PI mezi +25 % a –25 %, resp. mezi +95 % a +105 %.
The duplicate negative control serum wells and the duplicate blank wells must record PI values between +25 % and –25 %, and between +95 % and +105 %, respectively.
Hodnoty mimo toto rozmezí destičku nevyřazují, ale svědčí o tom, že se vyvíjí barva pozadí.
Failure to be within these limits does not invalidate the plate but does suggest that background colour is developing.
Silná a slabá pozitivní kontrolní séra musí vykazovat hodnoty PI mezi +81 % a +100 %, resp. mezi +51 % a +80 %.
The strong and weak positive control sera must record PI values between +81 % and +100 %, and between +51 % and +80 %, respectively.
Diagnostický práh pro testovaná séra je 50 % (PI 50 % nebo OD 50 %).
The diagnostic threshold for test sera is 50 % (PI 50 % or OD 50 %).
Vzorky vykazující hodnoty PI > 50 % se zaznamenají jako negativní.
Samples recording PI values >50 % are recorded negative.
Vzorky vykazující hodnoty PI mimo rozmezí pro zdvojené jamky (nad mezními hodnotami nebo pod nimi) se považují za nejisté. Takové vzorky mohou být znovu testovány bodovým testem a/nebo titrací.
Samples that record PI values above and below the threshold for the duplicate wells are considered doubtful; such samples may be re-tested in the spot test and/or titration.
Pozitivní vzorky lze také titrovat za účelem zjištění stupně pozitivity.
Positive samples may also be titrated to provide an indication of the degree of positivity.
Vizuální vyhodnocení: pozitivní a negativní vzorky jsou snadno rozeznatelné zrakem; slabě pozitivní nebo silně negativní vzorky lze zrakem interpretovat obtížněji.
Visual reading: Positive and negative samples are easily discernible by eye; weakly positive or strong negative samples may be more difficult to interpret by eye.
Příprava VKHO ELISA antigenu:
Preparation of BTV ELISA antigen:
Promyjte 40–60 Rouxových lahví se souvislým porostem buněk BHK-21 třikrát Eagleho médiem bez séra a infikujte sérotypem 1 viru katarální horečky ovcí v Eagleho médiu bez séra.
Wash 40-60 roux of confluent BHK-21 cells three times with serum-free Eagle's medium and infect with bluetongue virus serotype 1 in serum-free Eagle's medium.
Inkubujte při teplotě 37 °C a denně vyšetřujte na cytopatický efekt (CPE).
Incubate at 37 °C and examine daily for cytopathic effect (CPE).
Jakmile k CPE dojde u 90–100 % buněk v každé Roux láhvi, lze virus získat protřepáním, kterým se uvolní buňky ulpívající na skle.
When CPE are complete in 90 % to 100 % of the cell sheet of each roux, harvest the virus by shaking any still-attached cells from the glass.
Odstřeďte při 2000 až 3000 otáčkách za minutu, až buňky vytvoří peletu.
Centrifuge at 2000 to 3000 rpm to pellet the cells.
Odstraňte supernatant a resuspendujte buňky přibližně ve 30 ml PBS obsahujícího 1 % „Sarkosylu“ a 2 ml fenylmethylsulfonylfluoridu (lysis pufr).
Discard the supernatant and re-suspend the cells in approximately 30 ml of PBS containing 1 % ‘Sarkosyl’ and 2 ml phenylmethylsulphonyl fluoride (lysis buffer).
To může vést k tvorbě gelu a ke zmírnění tohoto efektu je možné přidat více lysis pufru.
This may cause the cells to form a gel and more lysis buffer may be added to reduce this effect.
(Pozor: fenylmethylsulfonylfluorid má škodlivé účinky - je třeba s ním zacházet s maximální opatrností.)
(NB: phenylmethylsulphonyl fluoride is harmful - handle with extreme caution.)
Po dobu 60 sekund rozrušujte buňky ultrazvukovou sondou při amplitudě 30 mikronů.
Disrupt the cells for 60 seconds using an ultrasonic probe at an amplitude of 30 microns.
Po dobu deseti minut odstřeďujte při 10000 otáčkách za minutu.
Centrifuge at 10000 rpm for 10 minutes.
Supernatant uchovávejte při teplotě +4 °C a zbývající buněčnou peletu resuspendujte v 10 až 20 ml lysis pufru.
Store the supernatant at +4 °C and re-suspend the remaining cell pellet in 10 to 20 ml of lysis buffer.
Třikrát protřepejte v ultrazvukové třepačce a vyčeřte, supernatant z každého stadia uchovejte.
Sonicate and clarify, storing the supernatant at each stage, a total of three times.
Slijte supernatanty a odstřeďujte při 24000 otáčkách za minutu (100,000 g) po dobu 120 minut při teplotě +4 °C přes 5ml polštář 40 % sacharosy (w/v v PBS) s použitím 30ml Beckmannových odstřeďovacích zkumavek a rotoru SW 28.
Pool the supernatants and centrifuge at 24000 rpm (100,000 g) for 120 minutes at +4 °C over a 5 ml cushion of 40 % sucrose (w/v in PBS) using 30 ml Beckmann centrifuge tubes and an SW 28 rotor.
Odstraňte supernatant, důkladně vyprázdněte zkumavky a resuspendujte peletu v PBS působením ultrazvukových vibrací.
Discard the supernatant, drain the tubes thoroughly and re-suspend the pellet in PBS by sonication.
Antigen skladujte rozdělený na poměrné části při teplotě –20 °C.
Store the antigen in aliquots at –20 °C.
Titrace VKHO ELISA antigenu:
Titration of BTV ELISA antigen:
ELISA antigen katarální horečky ovcí se titruje nepřímou metodou ELISA.
Bluetongue ELISA antigen is titrated by the indirect ELISA.
Dvojnásobná zředění antigenu se titrují proti konstantnímu zředění (1:100) monoklonální protilátky 3-17-A3.
Twofold dilutions of antigen are titrated against a constant dilution (1/100) monoclonal antibody 3-17-A3.
Protokol je tento:
The protocol is as follows:
VKHO antigen zředěný v PBS v poměru 1:20 titrujte na celé mikrotitrační destičce v sériích dvojnásobných zředění (50 μl na jamku) pomocí mnohokanálové pipety.
Titrate a 1:20 dilution of BTV antigen in PBS across the microtitre plate in a twofold dilution series (50 μl/well) using a multichannel pipette.
Inkubujte po dobu jedné hodiny při teplotě 37 °C na kruhové třepačce.
Incubate for one hour at 37 °C on an orbital shaker.
Destičky třikrát promyjte PBS.
Wash plates three times with PBS.
Přidejte 50 μl monoklonální protilátky 3-17-A3 (zředěné v poměru 1:100) do každé jamky mikrotitrační destičky.
Add 50 μl of monoclonal antibody 3-17-A3 (diluted 1/100) to each well of the microtitre plate.
Do každé jamky mikrotitrační destičky přidejte 50 μl králičího anti-myšího globulinu konjugovaného na křenovou peroxidasu, ředěného na optimální koncentraci na základě předtitrace.
Add 50 μl of rabbit anti-mouse globulin conjugated to horseradish peroxidase, diluted to a pre-titrated optimal concentration, to each well of the microtitre plate.
Přidejte substrát a chromogen, jak je uvedeno výše.
Add substrate and chromogen as described previously.
Po deseti minutách reakci zastavte přidáním jednomolární kyseliny sírové (50 μl na jamku).
Stop the reaction after 10 minutes by the addition of 1 Molar sulphuric acid (50 μl/well).
Při kompetitivním testu musí být nadbytek monoklonální protilátky, proto se volí takové zředění antigenu, které leží na titrační křivce (nikoli v oblasti základny), při kterém má OD hodnotu přibližně 0,8 po deseti minutách.
In the competitive assay, the monoclonal antibody must be in excess, therefore a dilution of antigen is chosen which falls on the titration curve (not on the plateau region) which gives approximately 0,8 OD after 10 minutes.
Imunodifúzní test v agarovém gelu se provádí podle následujícího protokolu:
The agar gel immuno-diffusion test shall be carried out according to the following protocol:
Antigen pro precipitaci se připraví v jakémkoli systému buněčné kultury, který podporuje rychlé množení referenčního kmene viru katarální horečky ovcí.
Precipitating antigen is prepared in any cell culture system that supports the rapid multiplication of a reference strain of bluetongue virus.
Doporučují se buňky BHK nebo Vero.
BHK or Vero cells are recommended.
Antigen je přítomen v supernatantní tekutině na konci pomnožování viru, musí však mít 50-100násobnout koncentraci, aby byl účinný.
Antigen is present in the supernatant fluid at the end of virus growth but requires 50 to 100-fold concentration to be effective.
Toho lze dosáhnout pomocí jakéhokoli standardního postupu koncentrace proteinu; virus v antigenu je možno inaktivovat přidáním 0,3 % (v/v) beta-propiolaktonu.
This may be achieved by any standard protein concentration procedure; virus in the antigen may be inactivated by the addition of 0,3 % (v/v) beta-propiolactone.
Známé pozitivní kontrolní sérum
Known positive control serum:
Z mezinárodního referenčního séra a antigenu se připraví národní standardní sérum, standardizuje se tak, aby bylo v optimálním poměru vůči mezinárodnímu referenčnímu séru, lyofilizuje se a použije se v každém testu jako známé kontrolní sérum.
Using the international reference serum and antigen a national standard serum is produced, standardised for optimal proportion against the international reference serum, freeze-dried and used as the known control serum in each test.
Testované sérum
Test serum
Postup na Petriho misku se nalije 1 % agarosa připravená v boratovém nebo sodiumbarbitolovém pufru, s pH 8,5 až 9,0, a to tak, aby minimální tloušťka byla 3,0 mm. V agaru se za účelem testu vykrojí sedm suchých jamek, každá o průměru 5,0 mm, které tvoří testovaný vzorek.
Procedure 1 % agarose prepared in borate or sodium barbitol buffer, pH 8,5 to 9,0, is poured into a petri dish to a minimum depth of 3,0 mm. A test pattern of seven moisture-free wells, each 5,0 mm in diameter, is cut in the agar.
Schéma sestává z jedné středové jamky a šesti jamek rozmístěných kolem středové jamky v kruhu o poloměru 3 cm.
The pattern consists of one centre well and six wells arranged round it in a circle of radius 3 cm.
Středová jamka se naplní standardním antigenem.
The central well is filled with the standard antigen.
Okrajové jamky 2, 4 a 6 se naplní známým pozitivním sérem, jamky 1, 3 a 5 se naplní testovanými séry.
Peripheral wells 2, 4 and 6 are filled with known positive serum, wells 1, 3 and 5 are filled with test sera.
Systém se inkubuje po dobu až 72 hodin při pokojové teplotě v uzavřené vlhké komoře.
The system is incubated for up to 72 hours at room temperature in a closed humid chamber.
Interpretace testované sérum je pozitivní, pokud s antigenem tvoří specifickou precipitační linii a s kontrolním sérem úplnou linii identity.
Interpretation A test serum is positive if it forms a specific precipitin line with the antigen and forms a complete line of identity with the control serum.
Epizootické hemoragické onemocnění
Epizootic haemorrhagic disease (EHD)
Antigen pro precipitaci se připraví v jakémkoli systému buněčné kultury, který podporuje rychlé množení vhodného sérotypu / vhodných sérotypů viru epizootického hemoragického onemocnění.
Precipitating antigen is prepared in any cell culture system that supports the rapid multiplication of the appropriate serotype(s) of epizootic haemorrhagic disease virus.
Infekční bovinní rhinotracheitida / infekční pustulární vulvovaginitida
Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) / infectious pustular vulvo-vaginitis (IPV)
Sérumneutralizační test se provádí podle následujícího protokolu:
The serum neutralisation test shall be carried out according to the following protocol:
Sérum všechna séra se před použitím inaktivují žárem po dobu 30 minut při teplotě 56 °C.
Serum All sera are heat-inactivated at 56 °C for 30 minutes before use.
Postup sérumneutralizační test na mikrotitračních destičkách, při němž se používá konstantní množství viru a různá zředění séra, využívá MDBK nebo jiné vnímavé buňky.
Procedure The constant virus-varying serum neutralisation test on microtitre plates employs MDBK or other susceptible cells.
Používá se kmen Colorado, Oxford nebo jiný referenční kmen viru v množství 100 TKID50 na 0,025 ml. Vzorky inaktivovaného neředěného séra se smíchají se stejným objemem (0,025 ml) virové suspenze.
The Colorado, Oxford or any other reference strain of the virus is used at 100 TCID50 per 0,025 ml; inactivated undiluted serum samples are mixed with an equal volume (0,025 ml) of virus suspension.
Směsi viru a séra se před přidáním MDBK buněk inkubují po dobu 24 hodin při teplotě 37 °C na mikrotitračních destičkách.
The virus/serum mixtures are incubated for 24 hours at 37 °C in the microtitre plates before the MDBK cells are added.
Buňky se používají v koncentraci, která vytvoří úplnou jednoduchou vrstvu po 24 hodinách.
Cells are used at a concentration which forms a complete monolayer after 24 hours.
Kontroly i) test infekčnosti viru, ii) kontroly toxicity séra, iii) neinokulované kontrolní buněčné kultury, iv) referenční antiséra.
Controls (i) virus infectivity assay, (ii) serum toxicity controls, (iii) uninoculated cell culture controls, (iv) reference antisera.
Interpretace výsledky neutralizačního testu a titr viru použitého v tomto testu se zaznamenají po třech až šesti dnech inkubace při teplotě 37 °C.
Interpretation The results of the neutralisation test and the titre of the virus used in the test are recorded after three to six days incubation at 37 °C.
Titry séra se považují za negativní, nedojde-li k neutralizaci při zředění 1:2 (neředěné sérum).
Serum titres are considered negative if there is no neutralisation at a dilution of 1/2 (undiluted serum).
Jakýkoli jiný test uznávaný v rámci rozhodnutí 2004/558/ES [10].Slintavka a kulhavka
Any other test recognised in the framework of Decision 2004/558/EC [10].Foot-and-mouth disease (FMD)
Sběr jícno/hltanových vzorků a vyšetřování se provádí podle následujícího protokolu:
Collecting oesophageal/pharyngeal samples and testing shall be carried out according to the following protocol:
Činidla před odběrem vzorků se připraví transportní médium.
Reagents Prior to sampling, transport medium is prepared.
Do každé nádobky, jejichž celkový počet odpovídá počtu zvířat k odběru vzorků, se připraví po dvou ml média.
Two ml volumes are dispensed in as many containers as there are animals to be sampled.
Použité nádobky musí snést zmrazení pomocí CO2 nebo tekutého dusíku.
The containers used must withstand freezing over solid CO2 or liquid nitrogen.
Vzorky získáme za pomoci speciálně sestrojeného lapače sputa neboli „probangu“.
Samples are obtained by the use of a specially-designed sputum collector or ’probang’.
Za účelem získání vzorku se miska probangu zavede dutinou ústní přes hřbet jazyka a dále do horní části jícnu.
To obtain a sample the probang cup is passed through the mouth, over the dorsum of the tongue and down into the upper part of the oesophagus.
Pokusíme se seškrábnout povrchový epitel horní části jícnu a hltanu laterálními a dorsálními pohyby lapače.
Attempts are made to scrape the surface epithelium of the upper oesophagus and pharynx by movements directed laterally and dorsally.
Probang následně vytáhneme, nejlépe poté, co zvíře polkne.
The probang is then withdrawn, if possible after the animal has swallowed.
Miska musí být plná a musí obsahovat směs hlenu, slin, esofageální (jícnové) tekutiny a buněčné drti.
The cup must be full and contain a mixture of mucus, saliva, oesophageal fluid and cellular debris.
Je třeba dbát na to, aby každý vzorek obsahoval viditelný buněčný materiál.
Care must be taken to ensure that each specimen contains some visible cellular material.