natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Ústřice Crassostrea gigas uváděné na trh a pocházející z jednotky, jež byla v roce 2009 nebo 2010 z důvodu zvýšeného úhynu ústřic Crassostrea gigas předmětem opatření k zamezení šíření nákazy v souvislosti s virem OsHV-1 μvar:
Crassostrea gigas oysters that are placed on the market and originating from a compartment which has been subject to containment measures either in 2009 or 2010 due to increased mortalities in Crassostrea gigas oysters in connection with OsHV-1 μvar shall:
musí být doprovázeny veterinárním osvědčením vyplněným podle vzoru stanoveného v příloze II tohoto nařízení a vysvětlivek uvedených v příloze V nařízení (ES) č. 1251/2008, pokud jsou živočichové:
be accompanied by an animal health certificate completed in accordance with the model set out in Annex II to this Regulation and the explanatory notes set out in Annex V to Regulation (EC) No 1251/2008, if the animals:
určeni pro členské státy nebo jednotky, které zavedly program pro včasné zjištění viru OsHV-1 μvar a ve kterých nebyl virus OsHV-1 μvar zjištěn, a
are intended for Member States or compartments which have established a programme for the early detection of OsHV-1 μvar, and in which OsHV-1 μvar is not detected; and
určeni pro chov nebo sádkovací oblasti;
are intended for farming or relaying areas;
pocházejí z jednotky, kde byla na základě odběru vzorků a vyšetření provedených v souladu s částí A přílohy I prokázána nepřítomnost viru OsHV-1 μvar, a
originate from a compartment where the absence of OsHV-1 μVar is demonstrated by sampling and testing carried out in accordance with Part A of Annex I; and
splňují veterinární požadavky stanovené ve vzoru osvědčení uvedeném v písmeni a).
comply with the animal health requirements set out in the model certificate, referred to in point (a).
Program pro včasné zjištění viru OsHV-1 μvar uvedený v odst. 1 písm. a) bodu i) musí splňovat tyto požadavky:
A programme for the early detection of OsHV-1 μvar referred to in paragraph 1(a)(i) shall comply with the following requirements:
tento program musí být ohlášen Stálému výboru pro potravinový řetězec a zdraví zvířat;
the programme must be declared to the Standing Committee on the Food Chain and Animal Health;
toto ohlášení musí být v souladu s bodem 1, body 5.1, 5.2, 5.3, 5.5, a 5.9 a s body 6 a 7 vzorového formuláře stanoveného v příloze II rozhodnutí 2009/177/ES;
such declaration must be in conformity with point 1, points 5.1, 5.2, 5.3, 5.5, and 5.9, and points 6 and 7 of the model form set out in Annex II to Decision 2009/177/EC;
součástí programu musí být:
the programme must include:
odběr vzorků v souladu s částí A přílohy I,
sampling in accordance with Part A of Annex I;
vyšetření na výskyt viru OsHV-1 μvar v souladu s diagnostickými metodami stanovenými v části B přílohy I.
testing for the presence of OsHV-1 μvar in accordance with the diagnostic methods set out in Part B of Annex I.
Odstavec 1 se použije jeden týden od data zasedání Stálého výboru pro potravinový řetězec a zdraví zvířat, na kterém byl program uvedený v odst. 1 písm. a) bodu i) ohlášen.
Paragraph 1 shall apply one week from the date of the meeting of the Standing Committee on the Food Chain and Animal Health at which the programme referred to in paragraph 1(a)(i) was declared.
Informační stránky na internetu
Internet-based information page
Členské státy zpřístupní Komisi a ostatním členským státům:
Member States shall make available to the Commission and the other Member States:
seznam uzavřených oblastí vytvořených v souladu s čl. 2 odst. 2 a faktorů, ke kterým se při určování těchto oblastí přihlíželo, včetně popisu geografických hranic příslušné oblasti;
a list of containment areas and the factors that have been taken into account to define such areas, including a description of the geographical boundaries of the relevant area, established in accordance with Article 2(2);
seznam jednotek včetně popisu geografických hranic příslušné oblasti:
a list of compartments including a description of the geographical boundaries of the relevant area:
které byly v roce 2009 předmětem opatření k zamezení šíření nákazy z důvodu zvýšeného úhynu ústřic Crassostrea gigas v souvislosti s virem OsHV-1 μvar,
which have been subject to containment measures in 2009 due to increased mortalities in Crassostrea gigas oysters in connection with OsHV-1 μvar;
kde byla na základě vyšetření vzorků odebraných v uzavřené oblasti, jež bylo provedeno v souladu s částmi A a B přílohy I, prokázána nepřítomnost viru OsHV-1 μvar;
where the absence of OsHV-1 μvar has been demonstrated by a testing carried out in accordance with Parts A and B of Annex I in samples taken in the containment area;
ohlášení týkající se programů uvedených v čl. 5 odst. 2 včetně popisu geografických hranic příslušné oblasti.
declarations of programmes referred to in Article 5(2), including a description of the geographical boundaries of the relevant area.
Informace uvedené v odstavci 1 musí být aktualizovány a zpřístupněny na informačních stránkách na internetu vytvořených v souladu s článkem 10 rozhodnutí 2009/177/ES.
The information provided for in paragraph 1 shall be kept up-to-date and made available through the internet-based information pages established in accordance with Article 10 of Decision 2009/177/EC.
Do dne 1. října 2010 předloží členské státy Komisi zprávu o programech ohlášených v souladu s čl. 5 odst. 2.
By 1 October 2010 at the latest, Member States shall submit a report to the Commission on programmes declared in accordance with Article 5(2).
Zpráva odpovídá vzorovému formuláři uvedenému v příloze VI rozhodnutí 2009/177/ES.
The report shall be in conformity with the model form set out in Annex VI to Decision 2009/177/EC.
Použije se ode dne 15. března 2010 do dne 31. prosince 2010.
It shall apply from 15 March 2010 to 31 December 2010.
Odběr vzorků pro účely článku 2
Sampling for the purposes of Article 2
Vzorky stanovené v článku 2 představují alespoň 12 jedinců ústřic Crassostrea gigas.
Samples as provided for in Article 2 shall consist of at least 12 individuals of Crassostrea gigas oysters.
Vyberou se z jednotky, kde byl pozorován úhyn, a jedná se o slabé, rozevřené nebo právě uhynulé jedince (kteří se ještě nerozkládají).
When selecting those animals weak, gaping or freshly dead (not decomposed) individuals shall be sampled and they shall be collected from the compartment where the mortality is observed.
Odběr vzorků pro účely čl. 3 odst. 2 písm. b), čl. 5 odst. 1 písm. b) a čl. 5 odst. 2
Sampling for the purposes of Article 3(2)(b), 5(1)(b) and 5(2)
odběr vzorků pro účely čl. 3 odst. 2 písm. b) představuje:
Sampling for the purposes of Article 3(2)(b) shall consist of:
v případě larev z každé zásilky pět směsných vzorků o hmotnosti nejméně 50 mg celých živočichů odebraných mezi 4 a 8 dny po oplodnění, včetně skořápky,
in the case of larvae, five pools of at least 50 mg of whole animals collected between 4 and 8 days after fecundation including shell per consignment;
v případě mladých ústřic menších než 6 mm z každé zásilky 30 směsných vzorků o hmotnosti 300 mg celých živočichů včetně skořápky,
in the case of spat smaller than 6 mm, 30 pools of 300 mg of whole animals including shell per consignment;
v případě ústřic větších než 6 mm z každé zásilky 150 jedinců.
in the case of oysters bigger than 6 mm, 150 individuals per consignment.
Při výběru těchto živočichů musí být ve vzorku poměrně zastoupeny všechny části zásilky.
When selecting those animals, all parts of the consignment must be proportionally represented in the sample.
pokud jsou přítomni slabí, rozevření nebo právě uhynulí jedinci (kteří se ještě nerozkládají), vyberou se přednostně tito živočichové.
If weak, gaping or freshly dead (not decomposed) animals are present, primarily such animals shall be selected.
odběr vzorků pro účely čl. 5 odst. 2 představuje alespoň 150 jedinců ústřic Crassostrea gigas z každého místa odběru vzorků.
Sampling for the purposes of Article 5(2) shall consist of at least 150 individuals of Crassostrea gigas per sampling points.
Vzorky se odeberou ze všech hospodářství nebo chovných oblastí měkkýšů v členském státě nebo jednotce, na něž se program vztahuje.
All farms or mollusc farming areas in the Member State or compartment covered by the programme shall be sampled.
Odběr vzorků pro účely čl. 5 odst. 1 písm. b) představuje alespoň 150 jedinců ústřic Crassostrea gigas z každé jednotky.
Sampling for the purposes of Article 5(1)(b) shall consist of at least 150 individuals of Crassostrea gigas oysters per compartment.
Při výběru těchto živočichů se přihlíží k těmto kritériím:
When selecting those animals, the following criteria shall be taken into account:
Pokud tito živočichové nejsou přítomni, jsou mezi vybranými živočichy zdraví měkkýši mladší 12 měsíců,
If such animals are not present, the animals selected shall include healthy molluscs less than 12 months old.
pokud se vzorky odebírají v hospodářstvích, kde se k produkci používá více vodních zdrojů, musí vzorky zahrnovat živočichy ze všech vodních zdrojů tak, aby byly ve vzorku poměrně zastoupeny všechny části hospodářství,
When sampling in farms in which more than one water source is utilised for production, animals representing all water sources must be included for sampling in such a way that all parts of the farm are proportionally represented in the sample.
pokud se vzorky odebírají v chovných oblastech měkkýšů, obsahují vzorky živočichy z dostatečného počtu míst odběru vzorků (alespoň ze tří) tak, aby byly ve vzorku poměrně zastoupeny všechny části chovné oblasti měkkýšů, včetně míst přirozeného výskytu, která jsou součástí chovné oblasti měkkýšů.
When sampling in mollusc farming areas, animals from a sufficient number of sampling points, at least three sampling points, shall be included in the sample in such a way that all parts of the mollusc farming area are proportionally represented in the sample, including natural beds present in the mollusc farming area.
Hlavními faktory, ke kterým je třeba při výběru těchto míst odběru vzorků přihlédnout, jsou: předchozí zjištění výskytu viru OsHV-1 μvar v této oblasti, intenzita chovu, vodní toky, hloubka vody a způsob hospodaření;
The main factors to be considered for the selection of these sampling points are: previous detection of OsHV-1 μvar in the area, stocking density, water flows, bathymetry and management practices.
odběr vzorků stanovený v čl. 5 odst. 2 se provede během ročního období, kdy je prevalence viru OsHV-1 μvar v členském státě nebo jednotce prokazatelně nejvyšší.
The sampling provided for in Article 5(2) shall be carried out in the period of the year when prevalence of OsHV-1 μvar in the Member State or compartment is known to be maximal.
Pokud takové údaje nejsou k dispozici, odběr vzorků se provede bezprostředně po období, kdy teplota vody přesáhne 16 °C nebo v ročním období, kdy teplota běžně dosahuje svého ročního maxima;
When such data is not available, sampling shall be carried out just after the period when the water temperature exceeds 16 °C or at the time of the year when the temperature normally reaches its yearly maximum.
odběr vzorků stanovený v čl. 5 odst. 1 písm. b) se pokud možno provede v ročním období popsaném v písmeni c). Pokud se vzorky odebírají v jiném než uvedeném ročním období, musí být odebrané ústřice uchovávány po dobu postačující k zjištění viru OsHV-1 μvar za podmínek, jež jsou rovnocenné podmínkám popsaným v písmeni c), než se provedou vyšetření.
The sampling provided for in Article 5(1)(b) shall preferably be carried out in the period of the year described in point c. If samples are collected outside that period of the year, the sampled oysters must be maintained under conditions equivalent to those described in point c for a period suitable for the detection of OsHV-1 μvar, before being tested.
Diagnostické metody zjišťování viru OsHV-1 μvar
Diagnostic methods of detecting OsHV-1 μvar
Tento postup představuje standardní diagnostickou metodu, kterou je třeba použít pro zjištění a identifikaci viru OsHV-1 μvar prostřednictvím polymerázové řetězové reakce (dále jen „PCR“).
This procedure explains a standard diagnostic method to be used for OsHV-1 μvar detection and identification by Polymerase Chain Reaction (hereinafter PCR).
Umožňuje rozlišit viry OsHV-1 a OsHV-1 μvar.
It allows distinguishing between OsHV-1 and OsHV-1 μvar.
Pokud je to vhodné, mohou laboratoře za účelem optimalizace reakčních podmínek a přizpůsobení se svému vybavení a podmínkám upravit metody popsané v této příloze za předpokladu, že lze prokázat stejnou citlivost a specifičnost.
When appropriate, in order to optimise the reaction conditions and to suit the equipment and conditions in their own laboratory, the laboratories may apply modifications to the methods described in this Annex, provided that an equal sensitivity and specificity can be demonstrated.
Definice viru OsHV-1 μvar je uvedena v článku 1 tohoto nařízení.
OsHV-1 μvar is defined in Article 1 of this Regulation.
Vybavení a podmínky okolního prostředí
Equipment and environmental conditions
Diagnostický test pro zjištění a identifikaci viru OsHV-1 μvar prostřednictvím PCR vyžaduje takové vybavení a podmínky okolního prostředí, jaké se běžně používají při zkouškách PCR, a sice:
The diagnostic test used for OsHV-1 μvar detection and identification by PCR requires the equipment and environmental conditions classically used for PCR assays as follows:
uzavřenou digestoř vybavenou systémem produkujícím UV záření za účelem odstranění možné kontaminace během přípravy směsi PCR,
A closed hood equipped with an UV producing system to eliminate potential contaminations when preparing PCR mix.
dvě úplné sady pipet (2 μl, 20 μl, 200 μl a 1000 μl), jednu pro extrakci DNA a druhou pro přípravu směsi PCR,
Two complete sets of pipettes (2 μl; 20 μl; 200 μl and 1000 μl), the first one for DNA extraction, and the second one for PCR mix preparation.
tři různé pipety: jednu o objemu 2 μl pro rozdělování vzorků ve směsi PCR, jednu o objemu 20 μl pro odběr vzorků ethidiumbromidu a jednu o objemu 20 μl pro zavádění produktů PCR do agarózového gelu,
Three different pipettes: one pipette (2 μl) to dispense samples in PCR mix, one pipette (20 μl) for EB sampling and another pipette (20 μl) to load PCR products in agarose gels.
špičky pipet s filtrem (2 μl, 20 μl, 200 μl a 1000 μl) pro extrakci DNA, přípravu směsi PCR a rozdělování vzorků,
Filter pipette tips (2 μl; 20 μl; 200 μl and 1000 μl) for DNA extraction, PCR mix preparation and sample dispensing.
špičky pipet (20 μl) pro odběr ethidiumbromidu a pro zavádění amplifikačních produktů do agarózového gelu,
Pipette tips (20 μl) to collect EB and to load amplification products in agarose gel.
termocykler pro provádění amplifikací,
A thermal cycler to perform amplifications.
horizontální systém pro elektroforézu produktů PCR,
A horizontal electrophoresis system for PCR products electrophoresis.
UV tabulku pro pozorování produktů PCR po elektroforéze v agarózovém gelu,
An UV table to observe PCR products after agarose gel electrophoresis.
systém pro získání snímků gelů.
A system to acquire pictures of the gels.
Manipulující osoba musí mít během všech níže popsaných kroků na sobě laboratorní plášť a rukavice.
The manipulator must wear a lab coat and some gloves during all the different steps described bellow.
Plášť a rukavice se musí měnit, a to nejlépe po každém z těchto hlavních kroků: extrakce DNA, příprava směsi PCR, rozdělování vzorků, amplifikace a zavádění do gelu.
Lab coat and gloves must be changed preferably after each main step: DNA extraction, preparation of PCR mix, sample dispensing, amplification and gel loading.
Doporučuje se tyto jednotlivé kroky provádět v různých místnostech.
It is recommended to perform these different steps in different rooms.
Konkrétně amplifikace a zavádění do gelu/elektroforéza by měly probíhat v jiné místnosti než extrakce DNA, příprava směsi PCR a rozdělování DNA.
More particularly, amplification and gel loading/electrophoresis should take place in a room separate from DNA extraction, PCR mix preparation and DNA dispensing.
Živé nebo právě uhynulé ústřice (které se ještě nerozkládají), které mohou být předem zmraženy, se zpracují pro extrakci DNA.
Live or freshly dead (not decomposed) oysters, which can be previously frozen, are processed for DNA extraction.
Vzorky se zpracují odlišným způsobem v závislosti na jejich velikosti:
Samples are processed differently according to their size:
v případě larev se směsné vzorky o hmotnosti 50 mg celých živočichů (včetně skořápky) doplněné o 200 μl destilované vody rozdrtí a odstředí při 1000 g po dobu 1 minuty;
For larvae, pools of 50 mg of the whole animals (including the shell) completed with 200 μl of distilled water are crushed and centrifuged at 1000 g for 1 minute.
v případě mladých ústřic menších než 6 mm se směsné vzorky o hmotnosti 300 mg celých živočichů (včetně skořápky) doplněné o 1200 μl destilované vody rozdrtí a odstředí při 1000 g po dobu 1 minuty;
For spat smaller than or of 6 mm, pools of 300 mg of the whole animals (including the shell) completed with 1200 μl of distilled water are crushed and centrifuged at 1000 g for 1 minute.
v případě mladých ústřic o velikosti mezi 6 a 15 mm se všechny měkké tkáně každého živočicha rozdrtí samostatně;
For spat between 6 and 15 mm in size, all the soft tissues of each animal are crushed individually.
v případě živočichů o velikosti nad 15 mm se izolují části žáber a pláště.
For animals bigger than 15 mm, pieces of gills and mantle are isolated.
Extrakce DNA se provádí s použitím soupravy QIAamp® DNA Mini Kit (QIAGEN) a podle pokynů protokolu o zkouškách tkání.
DNA extraction is performed using the QIAamp® DNA Mini Kit (QIAGEN) and following the instructions for Tissue Test Protocol.
Další příprava vzorků se provádí v tomto pořadí:
The further sample preparation is performed in the following order:
Do zkumavky mikroodstředivky o objemu 1,5 ml se v případě vzorků uvedených v písmenech a) a b) umístí 100 μl supernatantu a v případě vzorků uvedených v písmenech c) a d) 50 mg tkání a přidá se 180 μl pufru ATL.
Place 100 μl of supernatant for samples referred to in (a) and (b) or 10 to 50 mg of tissues for samples referred to point (c) and (d) in a 1,5 ml microcentrifuge tube and add 180 μl of Buffer ATL.
Přidá se 20 μl proteinázy K, promíchá se na třepačce vortex a nechá se inkubovat při teplotě 56 °C, dokud se tkáň zcela nerozloží (přes noc).
Add 20 μl Proteinase K, mix by vortexing and incubate at 56 °C until the tissue is completely lysed (overnight).
Během inkubace se několikrát promíchá na třepačce vortex, aby se vzorek rozptýlil.
Vortex occasionally during incubation to disperse sample.
Zkumavka mikroodstředivky o objemu 1,5 ml se krátce odstředí, aby se z uzávěru odstranily kapky.
Briefly centrifuge the 1,5 ml microcentrifuge tube to remove drops from the lid.
Ke vzorku se přidá 200 μl pufru AL, míchá se na pulzní třepačce po dobu 15 s a nechá se inkubovat při teplotě 70 °C po dobu 10 minut.
Add 200 μl Buffer AL to the sample, mix by pulse-vortexing for 15 s and incubate at 70 °C for 10 minutes.
Ke vzorku se přidá 200 μl ethanolu (96–100 %) a míchá se na pulzní třepačce po dobu 15 s. Zkumavka mikroodstředivky o objemu 1,5 ml se krátce odstředí, aby se z uzávěru odstranily kapky.
Add 200 μl ethanol (96-100 %) to the sample, and mix by pulse-vortexing for 15 s. Briefly centrifuge the 1,5 ml microcentrifuge tube to remove drops from the lid.
Směs vytvořená podle kroku 4 se opatrně umístí do kolony QIAamp (do zkumavky o objemu 2 ml), aniž se zvlhčí okraj.
Carefully apply the mixture from step 4 to the QIAamp Spin Column (in a 2 ml collection tube) without wetting the rim.
Uzavře se a odstřeďuje při 10000 ot/min po dobu 1 minuty. Kolona QIAamp se umístí do čisté zkumavky o objemu 2 ml (která je obsahem soupravy) a zkumavka obsahující filtrát se odstraní.
Close the cap and centrifuge at 10000 rpm for 1 min. Place the QIAamp Spin Column in a clean 2 ml collection tube (provided in the kit) and discard the tube containing the filtrate.
Kolona QIAamp se opatrně otevře a přidá se 500 μl pufru AW1, aniž se zvlhčí okraj.
Carefully open the QIAamp Spin Column and add 500 μl Buffer AW1 without wetting the rim.
Uzavře se a odstřeďuje při 10000 ot/min po dobu 1 minuty. Kolona QIAamp se umístí do čisté zkumavky o objemu 2 ml (která je obsahem soupravy) a zkumavka obsahující filtrát se odstraní.
Close the cap and centrifuge at 10000 rpm for 1 min. Place the QIAamp Spin Column in a clean 2 ml collection tube (provided in the kit) and discard the collection tube containing the filtrate.
Kolona QIAamp se opatrně otevře a přidá se 500 μl pufru AW2, aniž se zvlhčí okraj.
Carefully open the QIAamp Spin Column and add 500 μl Buffer AW2 without wetting the rim.
Uzavře se a odstřeďuje při plné rychlosti (14000 ot/min) po dobu 3 minut.
Close the cap and centrifuge at full speed (14000 rpm) for 3 min.
(Nepovinné) Kolona QIAamp se umístí do nepoužité zkumavky o objemu 2 ml (která není obsahem soupravy) a zkumavka obsahující filtrát se odstraní.
(Optional) Place the QIAamp Spin Column in a new 2ml collection tube (not provided in the kit) and discard the collection tube containing the filtrate.
Uzavře se a odstřeďuje při plné rychlosti (14000 ot/min) po dobu 1 minuty.
Centrifuge at full speed (14000 rpm) for 1 min.
Kolona QIAamp se umístí do čisté zkumavky mikroodstředivky o objemu 1,5 ml (která není obsahem soupravy) a zkumavka obsahující filtrát se odstraní.
Place the QIAamp Spin Column in a clean 1,5 ml microcentrifuge tube (not provided in the kit) and discard the collection tube containing the filtrate.
Kolona QIAamp se opatrně otevře a přidá se 100 μl destilované vody.
Carefully open the QIAamp Spin Column and add 100 μl of distilled water.
Nechá se 5 minut inkubovat při laboratorní teplotě a odstřeďuje se při 10000 ot/min po dobu 1 minuty.
Incubate 5 minutes at room temperature and centrifuge at 10000 rpm for 1 min.
Kvalita a účinnost extrakce se sleduje pomocí spektrofotometru nebo po elektroforéze v agarózovém gelu (například měřením optické hustoty (260 nm)).
Control the quality and efficacy of the extraction (for example by measuring OD (260 nm) under spectrophotometer or after electrophoresis in agarose gel).
Vzorky se zředí tak, aby konečná koncentrace DNA činila 50–100 ng/μl.
Prepare dilution of your samples in order to have a final DNA concentration of 50-100 ng/μl.
Roztoky DNA se až do provedení analýzy PCR uchovávají při teplotě 4 °C.
DNA solutions are kept at 4 °C until PCR analyses are performed.
Pro extrakci DNA lze použít i jiné komerční soupravy za předpokladu, že průkazně poskytují podobné výsledky.
Other commercial kits may be used for the DNA extractions provided they have been demonstrated to give similar results.
Polymerázová řetězová reakce (PCR)
Polymerase Chain Reaction (PCR)
Reakční činidla
Reactives
pufr 10 X (s polymerázou Taq DNA),
10 X Buffer (furnished with the Taq DNA polymerase)
MgCl2 (s polymerázou DNA) (25 mM),
MgCl2 (furnished with the DNA polymerase) (25 mM)
polymeráza Taq DNA (Goldstar, Eurogentec) 5 U/μl,
Taq DNA Polymerase (Goldstar, Eurogentec) 5 U/μl
dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTT) Master Mix (20 mM), před použitím desetinásobně zředěný (na 2 mM),
dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTT) Master Mix (20mM) must be diluted 10 fold (at 2 mM) before use
d H2O (destilovaná H2O bez DNA a RNA).
d H2O (distilled H2O free of DNA and RNA)
Primery
Primers
Musí se použít tyto primery [1]:
The following primers [1] must be used:
CF (10 μM)
CF (10 μM)
CR (10 μM)
CR (10 μM)
Směs PCR
PCR mix
Směs PCR pro každou zkumavku je:
PCR mix for each tube is:
Objem na zkumavku
Volume per tube
Pufr (10 X)
Buffer (10 X)
polymeráza Taq (5 U/μl)
Taq polymérase (5U/μl)
49 μl této směsi PCR se umístí do každé zkumavky PCR,
49 μl of this PCR mix is dispensed in each PCR tube
do každé zkumavky se přidá 1 μl extrahované DNA (50–100 ng/μl).
1 μl of extracted DNA (50-100 ng/μl) is added to each tube
Použijí se dva typy kontrol:
Two types of control are used:
negativní kontroly se skládají z dH2O (1 μl na 49 μl směsi PCR).
Negative controls consist of dH2O (1 μl for 49 μl of PCR mix).
Cílem je zjistit možnou reaktivní kontaminaci nebo reaktivní pracovní prostředí.
They aim at detecting potential reactive contamination or working environment.