natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Níže uvedené tabulky ukazují příklad složení typických řad kalibračních roztoků; v závislosti na typu a citlivosti použitého spektrofotometru však může být nutno zvolit jiné koncentrace.
The tables below show, by way of example, the compositions of typical ranges of calibration solutions; depending, however, on the type and sensitivity of spectrophotometer used it may be necessary to select other concentrations.
pracovní standardní roztok (3.7.1) (1 ml = 100 μg Fe) v ml
ml working standard solution (3.7.1) (1 ml = 100 μg Fe)
HCl (3.2) v ml
ml HCl (3.2)
+ 10 ml roztoku chloridu lanthanitého (3.11) a doplní se vodou po značku.
+ 10 ml of lanthanum chloride solution (3.11) and make up to 100 ml with water
pracovní standardní roztok (3.8.1) (1 ml = 10 μg Cu) v ml
ml working standard solution (3.8.1) (1 ml = 10 μg Cu)
pracovní standardní roztok (3.9.1) (1 ml = 10 μg Mn) v ml
ml working standard solution (3.9.1) (1 ml = 10 μg Mn)
pracovní standardní roztok (3.10.1) (1 ml = 10 μg Zn) v ml
ml working standard solution (3.10.1) (1 ml = 10 μg Zn)
Příprava roztoku pro zkoušku
Preparation of solution for analysis
Při stanovení mědi lze použít přímo roztok připravený podle bodu 5.1.1.
For the determination of copper, the solution prepared from point 5.1.1 can normally be used directly.
Pokud je nutné jeho koncentraci naředit na úroveň kalibračních roztoků, odpipetuje se alikvotní část roztoku do 100 ml odměrné baňky a doplní se po značku kyselinou chlorovodíkovou 0,5 mol/l (3.3).
If necessary to bring its concentration within the range of the calibration solutions, an aliquot portion may be pipetted into a 100 ml volumetric flask and made up to the mark with 0,5 mol/litre hydrochloric acid (3.3).
Při stanovení železa, manganu a zinku se odpipetujte alikvotní část roztoku připraveného podle bodu 5.1.1 do 100 ml odměrné baňky, přidá se 10 ml roztoku chloridu lanthanitého (3.11) a doplní se po značku kyselinou chlorovodíkovou 0,5 mol/l (3.3) (viz rovněž bod 8 Poznámka).
For the determination of iron, manganese and zinc, pipette an aliquot portion of the solution prepared from point 5.1.1 into a 100 ml volumetric flask, add 10 ml of lanthanum chloride solution (3.11) and make up to the mark with 0,5 mol/litre hydrochloric acid (3.3) (see also point 8 ‘Observation’).
Slepá zkouška
Blank experiment
Slepá zkouška musí zahrnovat všechny předepsané kroky postupu, ale vlastní vzorek se nepoužije.
The blank experiment must include all the prescribed steps of the procedure except that the sample material is omitted.
„0“ kalibrační roztok nemůže být použit jako slepá zkouška.
The calibration solution ‘0’ must not be used as the blank.
Měření atomové absorpce
Measurement of the atomic absorption
Atomová absorpce kalibračních roztoků a zkoušeného roztoku se změří s použitím oxidačního plamene vzduch-acetylen při následujících vlnových délkách:
Measure the atomic absorption of the calibration solutions and of the solution to be analysed using an oxidising air-acetylene flame at the following wavelengths:
Každé měření se provede čtyřikrát.
Carry out each measurement four times.
Minerální krmiva
Mineral feed
Pokud vzorek neobsahuje organickou hmotu, nemusí se spalovat.
If the sample contains no organic matter, prior ashing is unnecessary.
Příprava se provádí podle druhého odstavce bodu 5.1.1.1.
Proceed as described in point 5.1.1.1 starting from the second paragraph.
Nemusí se provádět ani odpařování s kyselinou fluorovodíkovou.
Evaporation with hydrofluoric acid may be omitted.
Koncentrace příslušného stopového prvku v roztoku se vypočte z kalibrační křivky a výsledek se vyjádří v miligramech stopového prvku na kilogram vzorku (ppm).
Using a calibration curve, calculate the trace element concentration in the solution to be analysed and express the result in milligrams of trace element per kilogram of sample (ppm).
5 mg/kg v absolutní hodnotě u obsahů příslušného stopového prvku do 50 mg/kg,
5 mg/kg, in absolute value, for contents of the trace element concerned up to 50 mg/kg,
10 % z vyššího výsledku u obsahů příslušného stopového prvku od 50 do 100 mg/kg,
10 % of the higher result for contents of the trace element concerned from 50 and up to 100 mg/kg,
10 mg/kg v absolutní hodnotě u obsahů příslušného stopového prvku od 100 do 200 mg/kg,
10 mg/kg, in absolute value, for contents of the trace element concerned from 100 and up to 200 mg/kg,
5 % z vyššího výsledku u obsahů příslušného stopového prvku nad 200 mg/kg.
5 % of the higher result for contents of the trace element concerned above 200 mg/kg.
Přítomnost velkého množství fosfátů může ovlivňovat stanovení železa, manganu a zinku.
The presence of large quantities of phosphates may interfere with the determination of iron, manganese and zinc.
Proto musí být přidáván roztoku chloridu lanthanitého (3.11).
Such interference must be corrected by addition of lanthanum chloride solution (3.11).
Pokud je váhový poměr (Ca + Mg)/P ve vzorku > 2, nemusí se do roztoku pro zkoušku ani do kalibračních roztoků přidávat roztok chloridu lanthanitého (3.11).
If, however, in the sample the weight ratio Ca + Mg/P is > 2, addition of lanthanum chloride solution (3.11) to the solution for analysis and to the calibration solutions may be omitted.
STANOVENÍ OBSAHU HALOFUGINONU
DETERMINATION OF HALOFUGINONE
DL-trans-7-brom-6-chlor-3-[3-(3-hydroxy-2-piperidyl)acetonyl]-quinazolin-4-(3H)-1-hydrobromid
DL-trans-7-bromo-6-chloro-3- [3-(3-hydroxy-2-piperidyl)acetonyl]-quinazolin-4-(3H)-one hydrobromide
Tato metoda umožňuje stanovení obsahu halofuginonu v krmivech.
The method makes it possible to determine the level of halofuginone in feed.
Mez kvantifikace je 1 mg/kg.
The limit of quantification is 1 mg/kg.
Obsah halofuginonu se stanoví jako volná báze po extrakci horkou vodou do ethylacetátu a následně se rozdělí jako hydrochlorid do vodného kyselého roztoku.
After treatment with hot water, halofuginone is extracted as the free base into ethyl acetate and subsequently partitioned as the hydrochloride into an aqueous acid solution.
Extrakt se přečistí na ionexové chromatografické koloně.
The extract is purified by ion-exchange chromatography.
Obsah halofuginonu se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí.
The content of halofuginone is determined by reversed-phase high performance liquid chromatography (HPLC) using an UV detector.
Acetonitril, pro HPLC.
Acetonitrile, equivalent to HPLC grade.
Amberlit XAD-2 ionexová pryskyřice.
Amberlite XAD-2 resin.
Octan amonný.
Ammonium acetate.
Ethylacetát.
Ethyl acetate.
Kyselina octová, ledová.
Acetic acid, glacial.
Halofuginon, standardní látka (DL-trans-7-brom-6-chlor-3-[3-(3-hydroxy-2-piperidyl)acetonyl]-quinazolin-4-(3H)-1-hydrobromid, E 764).
Halofuginone standard substance (DL-trans-7-brome-6-chloro-3-[3-hydroxy-2-piperidyl)acetonyl] quinazoline-4-(3H)-one hydrobromide, E 764).
Halofuginon, standardní zásobní roztok, 100 μg/ml
Halofuginone stock standard solution, 100 μg/ml
Do 500 ml odměrné baňky se naváží 50 mg halofuginonu (3.6) s přesností na 0,1 mg, rozpustí se v tlumivém roztoku octanu amonného (3.18), doplní po značku tlumivým roztokem a promíchá.
Weight to the nearest 0,1 mg, 50 mg of halofuginone (3.6) in a 500 ml graduated flask, dissolve in ammonium acetate buffer solution (3.18), make up to the mark with the buffer solution and mix.
Tento roztok je stálý tři týdny při teplotě 5 oC, je-li skladován ve tmě.
This solution is stable for three weeks at 5 oC if stored in the dark.
Kalibrační roztoky
Calibration solutions
Do řady 100 ml odměrných baněk se odpipetuje 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 a 6,0 ml standardního zásobního roztoku (3.6.1).
Into a series of 100 ml graduated flasks transfer 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 and 6,0 ml of the stock standard solution (3.6.1).
Doplní se po značku mobilní fází (3.21) a promíchá.
Make up to the mark with mobile phase (3.21) and mix.
Roztoky mají koncentrace halofuginonu 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 a 6,0 μg/ml.
These solutions have concentrations of 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 and 6,0 μg/ml of halofuginone respectively.
Tyto roztoky se připravují čerstvé před použitím.
These solutions must be freshly prepared before use.
Kyselina chlorovodíková (ρ20 přibližně 1,16 g/ml).
Hydrochloric acid (ρ20 approximately 1,16 g/ml).
Dusičnan stříbrný.
Silver nitrate.
Askorbát sodný.
Sodium ascorbate.
Uhličitan sodný.
Sodium carbonate.
EDTA (disodná sůl kyseliny ethylendiaminotetraoctové).
EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid, disodium salt).
Voda, pro HPLC.
Water, equivalent to HPLC grade.
Uhličitan sodný, roztok, c = 10 g/100 ml.
Sodium carbonate solution, c = 10 g/100 ml.
Uhličitan sodný, roztok, saturovaný chloridem sodným, c = 5 g/100 ml.
Sodium chloride-saturated sodium carbonate solution, c = 5 g/100 ml.
50 g uhličitanu sodného (3.11) se rozpustí ve vodě, doplní se na 1000 ml a přidává se chlorid sodný (3.12), až k nasycení roztoku.
Dissolve 50 g of sodium carbonate (3.11) in water, dilute to 1 litre and add sodium chloride (3.12) until the solution is saturated.
Kyselina chlorovodíková, přibližně 0,1 mol/l.
Hydrochloric acid, approximately 0,1 mol/l.
10 ml HCl (3.7) se zředí vodou na 1000 ml.
Dilute 10 ml of HCI (3.7) with water to 1 litre.
Tlumivý roztok octanu amonného, přibližně 0,25 mol/l.
Ammonium acetate buffer solution, approximately 0,25 mol/l.
19,3 g octanu amonného (3.3) a 30 ml kyseliny octové (3.5) se rozpustí ve vodě (3.14) a zředí se na 1000 ml.
Dissolve 19,3 g of ammonium acetate (3.3) and 30 ml of acetic acid (3.5) in water (3.14) and dilute to 1 1itre.
Ionexová pryskyřice Amberlit XAD-2 – příprava.
Amberlite XAD-2 resin preparation.
Přiměřené množství amberlitu (3.2) se promývá ve vodě, až se odstraní všechny chloridové ionty, což se prokáže zkouškou pomocí dusičnanu stříbrného (3.20) na odstraňované vodní fázi.
Wash an appropriate quantity of Amberlite (3.2) with water until all chloride ions have been removed, as indicated by a silver nitrate (3.20) test performed on the discarded aqueous phase.
Pak se pryskyřice promyje 50 ml methanolu (3.8), který se odstraní, a pryskyřice se uloží pod čerstvý methanol.
Then wash the resin with 50 ml of methanol (3.8), discard the methanol and store the resin under fresh methanol.
Dusičnan stříbrný, roztok přibližně 0,1 mol/l.
Silver nitrate solution, approximately 0,1 mol/l.
0,17 g dusičnanu stříbrného (3.9) se rozpustí v 10 ml vody.
Dissolve 0,17 g of silver nitrate (3.9) in 10 ml of water.
Mobilní fáze HPLC.
HPLC Mobile phase.
Přefiltruje se filtrem 0,22 μm (4.8) a roztok se odplyní (např. tím, že se vystaví ultrazvuku po dobu 10 minut).
Filter through a 0,22 μm filter (4.8) and degas the solution (e.g. by ultrasonification for 10 minutes).
Tento roztok je stálý jeden měsíc, je-li skladován ve tmě a v uzavřené nádobě.
This solution is stable for one month, if stored in the dark in a closed container.
Ultrazvuková lázeň.
Ultrasonic bath
Rotační odparka.
Rotary film evaporator
Odstředivka.
Centrifuge
Zařízení HPLC s ultrafialovým detektorem s nastavitelnou vlnovou délkou nebo s detektorem diodového pole.
HPLC equipment with variable wavelength ultraviolet detector or diode-array detector
Kolona pro kapalinovou chromatografii, 300 mm × 4 mm, C18, náplň 10 μm, nebo obdobná kolona.
Liquid chromatographic column, 300 mm x 4 mm, C18, 10 μm packaging, or an equivalent column
Skleněné kolony (300 mm × 10 mm) opatřené filtrem z křemičitého skla a uzavíracím kohoutem.
Glass column (300 mm x 10 mm) fitted with a sintered-glass filter and a stopcock
Filtry ze skleněných vláken, průměr 150 mm.
Glass-fibre filters, diameter 150 mm
Membránové filtry, 0,45 μm.
Membrane filters, 0,45 μm
Membránové filtry, 0,22 μm.
Membrane filters, 0,22 μm
Halofuginon jako volná báze je nestálý v alkalických roztocích a v roztocích ethylacetátu.
Halofuginone as the free base is unstable in alkaline and ethyl acetate solutions.
Nesmí zůstat v roztoku ethylacetátu déle než 30 minut.
It shall not remain in ethyl acetate for more than 30 minutes.
Slepý vzorek krmiva se předem podrobí zkoušce pro kontrolu, zda neobsahuje halofuginon nebo jiné rušivé látky.
A blank feed shall be analysed to check that neither halofuginone nor interfering substances are present.
Provede se zkouška na výtěžnost u slepého vzorku krmiva, které bylo obohaceno přidáním takového množství halofuginonu, které odpovídá jeho obsahu ve vzorku.
A recovery test shall be carried out by analysing the blank feed which has been fortified by addition of a quantity of halofuginone, similar to that present in the sample.
Pro obohacení na úroveň 3 mg/kg se přidá 300 μl standardního zásobního roztoku (3.6.1) k 10 g slepého vzorku krmiva, promíchá se a vyčká 10 minut, potom se pokračuje v extrakčním postupu (5.2).
To fortify at a level of 3 mg/kg, add 300 μl of the stock standard solution (3.6.1) to 10 g of the blank feed, mix and wait for 10 minutes before proceeding with the extraction step (5.2).
Pro účely této metody je slepý vzorek krmiva podobného druhu jako vzorek a při zkoušce není zjištěn halofuginon.
for the purpose of this method, the blank feed shall be similar in type to that of the sample and on analysis halofuginone shall not be detected.
Do odstředivkové zkumavky o obsahu 200 ml se naváží 10 g upraveného vzorku s přesností na 0,1 g, přidá se 0,5 g askorbátu sodného (3.10), 0,5 g EDTA (3.13) a 20 ml vody a promíchá se.
Weigh to the nearest 0,1 g, 10 g of the prepared sample, into a 200 ml centrifuge tube, add 0,5 g of sodium ascorbate (3.10), 0,5 g of EDTA (3.13) and 20 ml of water and mix.
Zkumavka se umístí na 5 minut do vodní lázně (80 oC).
Place the tube for 5 minutes in a water bath (80 oC).
Po vychladnutí na laboratorní teplotu se přidá 20 ml roztoku uhličitanu sodného (3.15) a promíchá se.
After cooling down to room temperature, add 20 ml of sodium carbonate solution (3.15) and mix.
Ihned se přidá 100 ml ethylacetátu (3.4) a ručně se 15 sekund intenzivně třepe.
Add immediately 100 ml of ethyl acetate (3.4) and shake vigorously by hand for 15 seconds.
Pak se zkumavka s uvolněnou zátkou umístí na tři minuty do ultrazvukové lázně (4.1).
Then place the tube for three minutes in the ultrasonic bath (4.1) and loosen the stopper.
Odstředí se dvě minuty a ethylacetátová fáze se odlije přes filtr ze skleněných vláken (4.6) do 500 ml separační nálevky.
Centrifuge for two minutes and decant the ethyl acetate phase through a glass fibre filter (4.6), into a 500 ml separating funnel.
Extrakce vzorku se opakuje s dalšími 100 ml ethylacetátu.
Repeat the extraction of the sample with a second portion of 100 ml of ethyl acetate.
Kombinované extrakty se promývají jednu minutu 50 ml roztoku uhličitanu sodného saturovaného chloridem sodným (3.16) a poté se vodná vrstva odstraní.
Wash the combined extracts for one minute with 50 ml of sodium chloride saturated sodium carbonate solution (3.16) and discard the aqueous layer.
Organická vrstva se extrahuje po dobu jedné minuty 50 ml kyseliny chlorovodíkové (3.17).
Extract the organic layer for 1 min. with 50 ml of hydrochloric acid (3.17).
Spodní kyselinová vrstva se vypustí do 250 ml separační nálevky.
Run the lower acid layer into a 250 ml separating funnel.
Organická vrstva se znovu extrahuje 1,5 minuty s dalšími 50 ml kyseliny chlorovodíkové a kyselinová vrstva se spojí s prvním extraktem.
Re-extract the organic layer for 1,5 minutes with a further 50 ml of hydrochlorid acid and combine with the first extract.
Spojené kyselinové extrakty se třepou přibližně 10 sekund s 10 ml ethylacetátu (3.4).
Wash the combined acid extracts by swirling for approximately 10 seconds with 10 ml of ethyl acetate (3.4).
Vodná vrstva se kvantitativně převede do 250 ml baňky s kulatým dnem a organická fáze se odstraní.
Quantitatively transfer the aqueous layer into a 250 ml round-bottomed flask and discard the organic phase.
Pomocí rotační odparky (4.2) se z kyselého roztoku odpaří všechen zbývající ethylacetát.
Evaporate all the remaining ethyl acetate from the acid solution using a rotary film evaporator (4.2).
Teplota vodní lázně nesmí přesáhnout 40 oC.
The temperature of the water bath must not exceed 40 oC.
Ve vakuu přibližně 25 mbar se všechen zbývající ethylacetát odstraní během 5 minut při teplotě 38 oC.
Under a vacuum of approximately 25 mbar all of the residual ethyl acetate will be removed within 5 minutes at 38 oC.
Přečištění
Clean up
Příprava amberlitové kolony
Preparation of the Amberlite column
Pro každý extrakt vzorku se připraví kolona s XAD-2.
An XAD-2 column is prepared for each sample extract.
Do skleněné kolony (4.5) se přenese 10 g připraveného amberlitu (3.19) spolu s methanolem (3.8).
Transfer 10 g of prepared Amberlite (3.19) into a glass column (4.5) with methanol (3.8).
Na horní konec pryskyřicové kolony se vloží malá zátka ze skelné vaty.
Add a small plug of glass-wool to the top of the resin bed.
Methanol z kolony se odstraní a kolona se promyje 100 ml vody. Přívod vody se zastaví, jakmile tekutina dosáhne horního konce pryskyřicové kolony.
Drain the methanol from the column and wash the resin with 100 ml of water, stopping the flow as the liquid reaches the top of the resin bed.
Před použitím se kolona nechá 10 minut ekvilibrovat.
Allow the column to equilibrate for 10 minutes before use.
Kolona nesmí nikdy vyschnout.
Never allow the column to run dry.
Přečištění vzorku
Sample clean up
Extrakt (5.2) se kvantitativně převede na horní část připravené amberlitové kolony (5.3.1) a eluuje se, přičemž se eluát odstraňuje.
Transfer the extract (5.2) quantitatively to the top of the prepared Amberlite column (5.3.1) and elute, discarding the eluate.
Rychlost promývání nesmí přesáhnout 20 ml/min.
The rate of elution must not exceed 20 ml/min.
Baňka s kulatým dnem se vypláchne 20 ml kyseliny chlorovodíkové (3.17) a tato tekutina se použije k promytí pryskyřicové kolony.
Rinse the round-bottomed flask with 20 ml of hydrochlorid acid (3.17) and use this to wash the resin column.
Zbytek kyselého roztoku se z kolony odstraní proudem vzduchu.
Blow through any remaining acid solution with a stream of air.
Promývací roztok se také odstraní.
Discard the washings.
Na kolonu se přidá 100 ml methanolu (3.8) a vypustí se asi 5–10 ml eluátu do 250 ml baňky s kulatým dnem.
Add 100 ml of methanol (3.8) to the column and allow 5 to 10 ml to elute, collecting the eluate in a 250 ml round-bottomed flask.
Zbývající methanol se nechá 10 minut ustát na koloně a potom se pokračuje v promývání rychlostí, která nepřesáhne 20 ml/min. Eluát se shromažďuje v téže baňce s kulatým dnem.
Leave the remaining methanol for 10 minutes to equilibrate with the resin and continue the elution at a rate not exceeding 20 ml/min. collecting the eluate in the same round-bottomed flask.
Methanol se odpaří na rotační odparce (4.2), teplota vodní lázně nesmí přesáhnout 40 oC.
Evaporate the methanol on the rotary film evaporator (4.2), the temperature of the water bath must not exceed 40 oC.
Odparek se pomocí mobilní fáze (3.21) kvantitativně převede do 10 ml odměrné baňky.
Transfer the residue quantitatively into a 10 ml calibrated flask using the mobile phase (3.21).
Doplní se mobilní fází po značku a promíchá.
Make up to the mark with mobile phase and mix.
Alikvotní část se filtruje membránovým filtrem (4.7).
An aliquot is filtered through a membrane filter (4.7).
Tento roztok se uschová pro stanovení HPLC (5.4).
Reserve this solution for the HPLC determination (5.4).
Následující podmínky jsou doporučené, lze použít i jiné podmínky, pokud zajišťují srovnatelné výsledky:
The following conditions are offered for guidance, other conditions may be used provided they yield equivalent results.
Kolona pro kapalinovou chromatografii (4.4.1).
Liquid chromatographic column (4.4.1)
HPLC mobilní fáze (3.21).
HPLC Mobile phase (3.21)
Průtok: 1,5–2 ml/min.
Flow rate: 1,5 to 2 ml/min.
Detekční vlnová délka: 243 nm.
Detection wavelength: 243 nm
Objem nástřiku: 40–100 μl.
Injection volume: 40 to 100 μl.
Stálost chromatografického systému se kontroluje opakovaným nástřikem kalibračního roztoku (3.6.2), který obsahuje 3,0 μg/ml halofuginonu. Opakuje se několikrát, až se dosáhne konstantní výšky (plochy) píků a konstantních retenčních časů.
Check the stability of the chromatographic system, injecting the calibration solution (3.6.2) containing 3,0 μg/ml several times, until constant peak heights (or areas) and retention times are achieved.
Provede se několikrát nástřik každého kalibračního roztoku (3.6.2) a změří se výšky (plochy) píků pro každou koncentraci.
Inject each calibration solution (3.6.2) several times and measure the peak heights (areas) for each concentration.
Kalibrační křivka se vytvoří vynesením průměrných hodnot výšek nebo ploch píků kalibračních roztoků proti příslušným koncentracím v μg/ml.
Plot a calibration graph using the mean peak heights or areas of the calibration solutions as the ordinates and the corresponding concentrations in μg/ml as the abscissae.
Roztok vzorku
Sample solution
Provede se několikrát nástřik roztoku vzorku (5.3.2), přičemž se použije stejný objem jako pro kalibrační roztoky a zjistí se průměrná hodnota výšky (plochy) halofuginonových píků.
Inject the sample extract (5.3.2) several times, using the same volume as taken for the calibration solutions and determine the mean peak height (area) of the halofuginone peaks.
Koncentrace halofunginonu v roztoku vzorku v μg/ml se stanoví podle průměrné hodnoty výšky (plochy) halofuginonových píků v roztoku vzorku porovnáním s kalibrační křivkou (5.4.2).
Determine the concentration of the sample solution in μg/ml, from the mean height (area) of the halofuginone peaks of the sample solution by reference to the calibration graph (5.4.2).
Obsah halofuginonu (w) v mg/kg ve vzorku se vypočítá podle následujícího vzorce:
The content of halofuginone w (mg/kg) of the sample is given by the following formula:
c koncentrace halofuginonu v roztoku vzorku v μg/ml
c halofuginone concentration of the sample solution in μg/ml,
m hmotnost navážky vzorku v gramech.
m weight of the test portion in grams.
Ověření výsledků
Validation of the results
Identita analytu může být potvrzena opakovaným stanovením s přídavkem (co-chromatography) nebo využitím detektoru diodového pole, přičemž se porovnávají spektra extraktu vzorku a kalibračního roztoku (3.6.2) obsahujícího 6,0 μg/ml halofuginonu.
The identity of the analyte can be confirmed by co-chromatography, or by using a diode-array detector by which the spectra of the sample extract and the calibration solution (3.6.2) containing 6,0 μg/ml are compared.
Opakované stanovení s přídavkem (co-chromatography)
Co-chromatography
K extraktu vzorku se přidá vhodné množství kalibračního roztoku (3.6.2).
A sample extract is fortified by addition of an appropriate amount of a calibration solution (3.6.2).
Množství přidaného halofuginonu musí odpovídat odhadovanému obsahu halofuginonu v extraktu vzorku.
The amount of added halofuginone must be similar to the estimated amount of halofuginone found in the sample extract.
Přídavek se projeví pouze zvýšením píku halofuginonu, a to úměrně k přidanému množství a ředění extraktu.
Only the height of the halofuginone peak shall be enhanced after taking into account both the amount added and the dilution of the extract.
Šířka píku v polovině maximální výšky se může odchylovat od šířky původního píku nejvýše o ±10 %.
The peak width, at half of its maximum height, must be within ± 10 % of the original width.
Detektor diodového pole
Diode-array detection
Výsledky jsou posuzovány podle následujících kritérií:
The results are evaluated according to the following criteria:
při vlnové délce maximální absorpce vzorku i standardu musí být záznam spektra zaznamenaný ve vrcholu píku na chromatogramu stejný s přesností danou rozlišovací schopností detekčního systému.
the wavelength of maximum absorption of the sample and of the standard spectra, recorded at the peak apex on the chromatogram, must be the same within a margin determined by the resolving power of the detection system.
Pro detektor diodového pole se udává ±2 nm;
For diode-array detection, this is typically within ± 2 nm;