natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Zvířata se třetí nebo čtvrtý den po prvním omytí znovu omyjí roztokem antibiotik a použijí se do 3 dnů po druhém omytí, kdy se jejich stratum corneum po odstranění srsti zregeneruje.
Animals are washed with antibiotics again on the third or fourth day after the first wash and are used within three days of the second wash, when the stratum corneum has recovered from the hair removal.
Příprava terčíků kůže
Preparation of the skin discs
Zvířata se humánně usmrtí ve stáří 28–30 dní; toto stáří je kritické.
Animals are humanely killed when 28-30 days old; this age is critical.
Z každého zvířete se poté odstraní hřbetní a boční kůže a nadbytečný tuk se z kůže opatrně seškrábne.
The dorso-lateral skin of each animal is then removed and stripped of excess subcutaneous fat by carefully peeling it away from the skin.
Odeberou se terčíky kůže o průměru přibližně 20 mm.
Skin discs, with a diameter of approximately 20 mm each, are removed.
Kůže může být před použitím terčíků uchovávána, je-li prokázáno, že pozitivní a negativní kontrolní údaje jsou ekvivalentní údajům získaným s kůží čerstvou.
The skin may be stored before disks are used where it is shown that positive and negative control data are equivalent to that obtained with fresh skin.
Každý terčík kůže se přeloží přes jeden z konců teflonové (PTFE) trubičky tak, aby epidermis byla v kontaktu s trubičkou.
Each skin disc is placed over one of the ends of a PTFE (polytetrafluoroethylene) tube, ensuring that the epidermal surface is in contact with the tube.
Přes konec trubičky se těsně přetáhne pryžový O-kroužek, aby byla kůže upevněna, a přebytek tkáně se ořízne.
A rubber ‘O’ ring is press-fitted over the end of the tube to hold the skin in place and excess tissue is trimmed away.
Rozměry trubičky a O-kroužku jsou uvedeny na obrázku 2.
Tube and ‘O’ ring dimensions are shown in Figure 2.
Pryžový O-kroužek na teflonové trubičce se poté pečlivě utěsní ke konci teflonové trubičky vrstvou vazelíny.
The rubber ‘O’ ring is then carefully sealed to the end of the PTFE tube with petroleum jelly.
Trubička držená pomocí pružinové svorky se umístí do receptorové komory obsahující roztok síranu hořečnatého (154 mM) (obrázek 1).
The tube is supported by a spring clip inside a receptor chamber containing MgSO4 solution (154 mM) (Figure 1).
Terčík kůže musí být úplně ponořen do roztoku MgSO4.
The skin disc should be fully submerged in the MgSO4 solution.
Z jedné kůže potkana může být získáno 10 až 15 terčíků kůže.
As many as 10-15 skin discs can be obtained from a single rat skin.
Pro každou zvířecí kůži je před započetím zkoušky změřen elektrický odpor dvou terčíků kůže jako postup kontroly jakosti.
Before testing begins, the electrical resistance of two skin discs is measured as a quality control procedure for each animal skin.
Pro oba terčíky by měla být naměřena hodnota odporu větší než 10 kΩ, mají-li být pro tuto zkoušku použity ostatní terčíky.
Both discs should give resistance values greater than 10 kΩ for the remainder of the discs to be used for the test.
Pokud je hodnota odporu nižší než 10 kΩ, musí být ostatní terčíky z dotyčné kůže ze zkoušek vyřazeny.
If the resistance value is less than 10 kΩ, the remaining discs from that skin should be discarded.
Aplikace zkoušených a kontrolních látek
Application of the test and control substances
Pro každou studii by měly být provedeny souběžné pozitivní a negativní kontroly k zajištění dostatečné účinnosti daného experimentálního modelu.
Concurrent positive and negative controls should be used for each study to ensure adequate performance of the experimental model.
Měly by k tomu být použity terčíky kůže z téhož zvířete.
Skin discs from a single animal should be used.
Navrženými látkami pro pozitivní kontrolu je 10 M kyselina chlorovodíková a pro negativní kontrolu destilovaná voda.
The suggested positive and negative control substances are 10 M hydrochloric acid and distilled water, respectively.
Kapalná zkoušená látka (150 μL) se aplikuje stejnoměrně na epidermis uvnitř trubičky.
Liquid test substances (150 μL) are applied uniformly to the epidermal surface inside the tube.
Při zkoušení pevných materiálů se použije dostatečné množství tak, aby byla rovnoměrně pokryta celá epidermis.
When testing solid materials, a sufficient amount of the solid is applied evenly to the disc to ensure that the whole surface of the epidermis is covered.
Poté se na povrch pevné látky přidá deionizovaná voda (150 μL) a trubička se lehce protřepe.
Deionised water (150 μL) is added on top of the solid and the tube is gently agitated.
K zajištění maximálního styku látky s kůží může být nutné zahřát pevnou látku až na 30 oC, aby se zkoušená látka roztavila či změkla, nebo ji rozemlít na zrnitý materiál či prášek.
In order to achieve maximum contact with the skin, solids may need to be warmed to 30 oC to melt or soften the test substance, or ground to produce a granular material or powder.
Pro každou zkoušenou a kontrolní látku se použijí tři terčíky kůže.
Three skin discs are used for each test and control substance.
Zkoušená látka se aplikuje po dobu 24 hodin při 20–23 oC.
Test substances are applied for 24 hours at 20-23 oC.
Zkoušená látka se zcela odstraní proudem tekoucí vody o teplotě nejvýše 30 oC.
The test substance is removed by washing with a jet of tap water at up to 30 oC until no further material can be removed.
Měření TER Impedance kůže se měří jako TER.
TER measurements
TER se měří nízkonapěťovým impedančním Wheatstoneovým můstkem pro střídavý proud (13).
The skin impedance is measured as TER is measured by using a low-voltage, alternating current Wheatstone databridge (13).
Všeobecné specifikace můstku: provozní napětí 1 až 3 V, sinusový nebo pravoúhlý tvar kmitů střídavého proudu frekvence 50–1000 Hz a rozsah měření nejméně 0,1–30 kΩ.
General specifications of the bridge are 1-3 Volt operating voltage, a sinus or rectangular shaped alternating current of 50 – 1000 Hz, and a measuring range of at least 0,1 – 30 kΩ.
Můstek použitý ve validační studii měří induktanci, kapacitanci a odpor až do hodnot 2000 H, 2000 μF, a 2 MΩ, při frekvencích 100 Hz nebo 1 kHz, za použití sériových nebo paralelních hodnot.
The databridge used in the validation study measureds inductance, capacitance and resistance up to values of 2000 H, 2000 μF, and 2 MΩ, respectively at frequencies of 100 Hz or 1 kHz, using series or parallel values.
Pro účely měření TER v rámci zkoušky leptavých účinků se zaznamenávají hodnoty odporu při frekvenci 100 Hz a za použití sériových hodnot.
For the purposes of the TER corrosivity assay measurements are recorded in resistance, at a frequency of 100 Hz and using series values.
Před měřením elektrického odporu se povrchové napětí kůže sníží přidáním dostatečného objemu 70 % ethanolu tak, aby byla epidermis zakryta.
Prior to measuring the electrical resistance, the surface tension of the skin is reduced by adding a sufficient volume of 70 % ethanol to cover the epidermis.
Po několika sekundách se ethanol z trubice vylije a tkáň se zvlhčí přidáním 3 ml roztoku síranu hořečnatého (154 mM).
After a few seconds, the ethanol is removed from the tube and the tissue is then hydrated by the addition of 3 mL MgSO4 solution (154 mM).
Elektrody můstku se umístí na obě strany terčíku kůže za účelem odečtu odporu v kΩ/terčík kůže (obrázek 1).
The databridge electrodes are placed on either side of the skin disc to measure the resistance in kΩ/skin disc (Figure 1).
Rozměry elektrod a délky exponovaných částí elektrod pod krokosvorkou jsou uvedeny na obrázku 2.
Electrode dimensions and the length of the electrode exposed below the crocodile clips are shown in Figure 2.
Svorka vnitřní elektrody je během měření odporu opřena o horní konec teflonové trubičky, aby bylo zajištěno, že se délka části elektrody ponořené v roztoku síranu hořečnatého nemění.
The clip attached to the inner electrode is rested on the top of the PTFE tube during resistance measurement to ensure that a consistent length of electrode is submerged in the MgSO4 solution.
Vnější elektroda je umístěna uvnitř receptorové komory tak, aby spočívala na dně komory.
The outer electrode is positioned inside the receptor chamber so that it rests on the bottom of the chamber.
Vzdálenost mezi pružinovou svorkou a dnem teflonové trubičky se udržuje konstantní (obrázek 2), neboť tato vzdálenost má vliv na naměřené hodnoty odporu.
The distance between the spring clip and the bottom of the PTFE tube is maintained as a constant (Figure 2), because this distance affects the resistance value obtained.
Proto by vzdálenost mezi vnitřní elektrodou a terčíkem kůže měla být konstantní a minimální (1–2 mm).
Consequently, the distance between the inner electrode and the skin disc should be constant and minimal (1-2 mm).
Je-li naměřená hodnota vyšší než 20 kΩ, může to být způsobeno zbytky vrstvy zkoušené látky na epidermální straně terčíku kůže.
If the measured resistance value is greater than 20 kΩ, this may be due to the remains of the test substance coating the epidermal surface of the skin disc.
O odstranění této vrstvy se lze pokusit např. tím, že se teflonová trubička zakryje palcem v rukavici a 10 sekund se protřepává. Roztok síranu hořečnatého se odstraní a měření se opakuje s čerstvým síranem hořečnatým.
Further removal of this coating can be attempted, for example, by sealing the PTFE tube with a gloved thumb and shaking it for approximately 10 seconds; the MgSO4 solution is discarded and the resistance measurement is repeated with fresh MgSO4.
Vlastnosti a rozměry zkušebního přístroje a použitý experimentální postup mohou ovlivnit naměřené hodnoty TER.
The properties and dimensions of the test apparatus and the experimental procedure used may influence the TER values obtained.
Prahová hodnota 5 kΩ pro leptavé účinky byla odvozena na základě údajů zjištěných se specifickým přístrojem a postupem popsanými v této metodě.
The 5 kΩ corrosive threshold was developed from data obtained with the specific apparatus and procedure described in this method.
Pokud se změní podmínky zkoušky nebo je použit jiný přístroj, mohou platit jiné prahové a kontrolní hodnoty.
Different threshold and control values may apply if the test conditions are altered or a different apparatus is used.
Proto je nutné kalibrovat metodu a prahové hodnoty odporu zkoušením řady referenčních standardních materiálů vybraných z chemických látek použitých ve validační studii (4, 5), nebo z tříd chemických látek podobných zkoušeným látkám.
Therefore, it is necessary to calibrate the methodology and resistance threshold values by testing a series of reference standards chosen from the chemicals used in the validation study (4)(5), or from similar chemical classes to the chemicals being investigated.
Soubor vhodných referenčních chemických látek je uveden v tabulce 1.
A set of suitable reference chemicals is shown in Table 1.
Metody stanovení vázání barviva
Dye binding methods
Expozice kůže některým nežíravým materiálům může snížit odpor pod hraniční hodnotu 5 kΩ, v důsledku čehož je umožněn průnik iontů přes stratum corneum a snižuje se elektrický odpor (5).
Exposure of certain non-corrosive materials can result in a reduction of resistance below the cut-off of 5 kΩ allowing the passage of ions through the stratum corneum, thereby reducing the electrical resistance (5).
Např. neutrální organické látky a povrchově aktivní chemické látky (včetně detergentů, emulgátorů a jiných povrchově aktivních látek) mohou vést k odstranění kožních lipidů, čímž se bariéra stane pro ionty průchodnější.
For example, neutral organics and chemicals that have surface-active properties (including detergents, emulsifiers and other surfactants) can remove skin lipids making the barrier more permeable to ions.
Proto pokud jsou při absenci zjevného poškození hodnoty TER zkoušených látek okolo 5 kΩ nebo jsou nižší než 5 kΩ, mělo by být provedeno posouzení průniku barviva na kontrolních a upravených tkáních ke zjištění, zda jsou naměřené hodnoty TER výsledkem zvýšené permeability kůže, nebo poleptání kůže (3, 5).
Thus, if the TER values of test substances are less than or around 5 kΩ in the absence of visual damage, an assessment of dye penetration should be carried out on the control and treated tissues to determine if the TER values obtained were the result of increased skin permeability, or skin corrosion (3)(5).
V případě poleptání kůže, kdy stratum corneum je porušeno, barvivo sulforhodamin B při aplikaci na kůži rychle proniká a zbarvuje podložní tkáň.
In case of the latter where the stratum corneum is disrupted, the dye sulforhodamine B, when applied to the skin surface rapidly penetrates and stains the underlying tissue.
Toto konkrétní barvivo je stabilní v prostředí širokého rozsahu chemických látek a nemá na něj vliv níže popsaný extrakční postup.
This particular dye is stable to a wide range of chemicals and is not affected by the extraction procedure described below.
Aplikace a odstranění barviva sulforhodaminu B
Sulforhodamine B dye application and removal
Po měření TER se roztok síranu hořečnatého vylije z trubičky a kůže se pečlivě přezkoumá, zda není zjevně poškozena.
Following TER assessment, the magnesium sulfate is discarded from the tube and the skin is carefully examined for obvious damage. If there is no obvious major damage, Sulforhodamine B dye (Acid Red 52; C.I.
Pokud zjevné velké poškození není patrné, aplikuje se na epidermální stranu každého terčíku kůže po dobu 2 hodin 150 μL 10 % roztoku (m/V) barviva sulforhodaminu B (Acid Red 52; C.I. 45100; č. EINECS 222-529-8; č. CAS 3520-42-1) v destilované vodě.
45100; EINECS Number 222-529-8; CAS number 3520-42-1), 150 μL of a 10 % (w/v) dilution in distilled water, is applied to the epidermal surface of each skin disc for two hours.
Terčíky kůže se poté přibližně 10 sekund omývají tekoucí vodou o nejvýše pokojové teplotě, aby se odstranilo veškeré volné barvivo.
These skin discs are then washed with tap water at up to room temperature for approximately 10 seconds to remove any excess/unbound dye.
Všechny terčíky kůže se opatrně sejmou z teflonové trubičky a umístí se do lahvičky (např. 20mililitrové skleněné lahvičky pro scintilační spektrometrii) obsahující deionizovanou vodu (8 ml).
Each skin disc is carefully removed from the PTFE tube and placed in a vial (e.g. a 20 mL glass scintillation vial) containing deionised water (8 mL). The vials are agitated gently for five minutes to remove any additional unbound dye.
Lahvičky se lehce 5 minut protřepávají, aby se odstranilo další volné barvivo. Tato metoda oplachování se poté zopakuje a pak se terčíky kůže vyjmou a vloží do lahviček obsahujících 5 ml 30 % roztoku (m/V) natrium-dodecyl-sulfátu (SDS) v destilované vodě a inkubují se přes noc při 60 oC.
This rinsing procedure is then repeated, after which the skin discs are removed and placed into vials containing 5 ml of 30 % (w/v) sodium dodecyl sulphate (SDS) in distilled water and are incubated overnight at 60 oC.
Po inkubaci se všechny terčíky kůže vyjmou a zlikvidují a zbylý roztok se odstředí 8 minut při 21 oC (při relativní odstředivé síle ~175 × g).
After incubation, each skin disc is removed and discarded and the remaining solution is centrifuged for eight minutes at 21 oC (relative centrifugal force ~175 × g). A 1 ml sample of the supernatant is diluted 1 in 5 (v/v) [i.e.
1 ml vzorku supernatantu se poté zředí 4 ml 30 % (m/V) roztoku SDS v destilované vodě.
1 mL + 4 mL] with 30 % (w/v) SDS in distilled water.
Absorbance (A) roztoku se měří přibližně při 565 nm.
The optical density (OD) of the solution is measured at 565 nm.
Výpočet obsahu barviva
Calculation of dye content
Obsah barviva sulforhodaminu B na terčík kůže se vypočte z hodnot absorbance A (5) (molární absorpční koeficient sulforhodaminu B při 565 nm = 8,7 × 104; molekulová hmotnost = 580).
The sulforhodamine B dye content per disc is calculated from the OD values (5) (sulforhodamine B dye molar extinction coefficient at 565 nm = 8,7 × 104; molecular weight = 580).
Obsah barviva sulforhodaminu B se vypočte pro každý terčík kůže využitím vhodné kalibrační křivky a poté se vypočte jeho střední hodnota.
The dye content is determined for each skin disc by the use of an appropriate calibration curve and a mean dye content is then calculated for the replicates.
Hodnoty odporu (kΩ) a případně hodnoty středního obsahu barviva (μg/terčík) pro zkoušený materiál a také pro pozitivní a negativní kontroly by měly být uvedeny ve formě tabulky (údaje z jednotlivých pokusů a jejich střední hodnoty spolu s jejich ± směrodatnou odchylkou), včetně údajů o duplicitních nebo opakovaných experimentech, a jejich jednotlivé a střední hodnoty.
Resistance values (kΩ) and mean dye content values (μg/disc), where appropriate, for the test material, as well as for positive and negative controls should be reported in tabular form (individual trial data and means ± S.D.), including data for replicates/repeat experiments, mean and individual values.
Střední hodnoty výsledků TER jsou přijatelné, pokud hodnoty pro paralelní pozitivní a negativní kontroly spadají do přijatelného rozmezí dané metody v dotyčné zkušební laboratoři.
The mean TER results are accepted if the concurrent positive and negative control values fall within the acceptable ranges for the method in the testing laboratory.
Pro popsanou metodiku a přístroje jsou přijatelné hodnoty rozmezí odporu uvedeny v následující tabulce:
The acceptable resistance ranges for the methodology and apparatus described above are given in the following table:
Kontrolní vzorek
Control
Rozmezí odporu (kΩ)
Resistance range (kΩ)
pozitivní
Positive
kyselina chlorovodíková
Hydrochloric acid
negativní
Negative
destilovaná voda
Distilled water
Střední hodnoty výsledků vázání barviva jsou přijatelné, pokud hodnoty pro paralelní kontroly spadají do přijatelného rozmezí metody.
The mean dye binding results are accepted on condition that concurrent control values fall within the acceptable ranges for the method.
Pro popsanou metodiku a přístroje jsou pro uvedení kontrolní látky doporučeny tyto přijatelné hodnoty rozmezí obsahu barviva:
Suggested acceptable dye content ranges for the control substances for the methodology and apparatus described above are given below:
Rozmezí obsahu barviva (μg/terčík kůže)
Dye content range (μg/disc)
Zkoušená látka je pokládána za neleptající kůži (nežíravou):
The test substance is considered to be non-corrosive to skin:
je-li střední hodnota TER změřená pro dotyčnou zkoušenou látku větší než 5 kΩ, nebo
if the mean TER value obtained for the test substance is greater than 5 kΩ; or
je-li střední hodnota TER menší nebo rovna 5 kΩ a
the mean TER value is less than or equal to 5 kΩ; and
terčík kůže nevykazuje žádné zjevné poškození a
the skin disc is showing no obvious damage, and
střední obsah barviva v terčíku kůže je podstatně nižší než střední obsah barviva v terčíku kůže získaný souběžně při použití 10M HCl jako pozitivní kontroly.
the mean disc dye content is well below the mean disc dye content of the 10M HCl positive control obtained concurrently.
Zkoušená látka je pokládána za leptající kůži (žíravou):
The test substance is considered to be corrosive to skin:
je-li střední hodnota TER menší nebo rovna 5 kΩ a terčík kůže je zjevně poškozen, nebo
if the mean TER value is less than or equal to 5 kΩ and the skin disk is obviously damaged; or
terčík kůže není zjevně poškozen, ale
the skin disc is showing no obvious damage, but
střední obsah barviva v terčíku kůže je větší nebo roven střednímu obsahu barviva v terčíku kůže získanému souběžně při použití 10M HCl jakožto pozitivní kontroly.
the mean disc dye content is greater than or equal to the mean disc dye content of the 10M HCl positive control obtained concurrently.
Zkoušené a kontrolní látky:
Test and control substances:
chemický název (názvy), např. název podle IUPAC nebo CAS a číslo CAS, je-li známo,
chemical name(s) such as IUPAC or CAS name and CAS number, if known,
čistota a složení látky nebo přípravku (v hmotnostních procentech) a fyzikální vlastnosti,
purity and composition of the substance or preparation (in percentage(s) by weight) and physical natur,
fyzikálně-chemické vlastnosti, např. fyzikální stav, pH, stabilita, rozpustnost ve vodě, které jsou relevantní pro provedení studie,
physico-chemical properties such as physical state, pH, stability, water solubility, relevant to the conduct of the study,
případná úprava zkoušených/kontrolních látek před zkouškou (např. zahřátí, rozemletí),
treatment of the test/control substances prior to testing, if applicable (e.g. warming, grinding),
stabilita, je-li známa.
stability, if known.
použitý kmen a pohlaví,
strain and sex used,
stáří zvířat použitých jako dárcovská zvířata,
age of the animals when used as donor animals,
zdroj, podmínky přechovávání, výživa atd.,
source, housing condition, diet, etc,
podrobnosti přípravy kůže.
details of the skin preparation.
kalibrační křivky zkušebního přístroje,
calibration curves for test apparatus,
kalibrační křivky pro zkoušku účinnosti vázání barviva,
calibration curves for dye binding test performance,
podrobnosti zkušebního postupu pro měření TER,
details of the test procedure used for TER measurements,
případně podrobnosti zkušebního postupu pro stanovení vázání barviva,
details of the test procedure used for the dye binding assessment; if appropriate,
popis případných modifikací zkušebních postupů,
description of any modification of the test procedures,
popis použitých kritérií pro vyhodnocení.
description of evaluation criteria used.
údaje změřených hodnot TER a případně obsahu vázaného barviva pro jednotlivá zvířata a jednotlivé vzorky kůže, zpracované ve formě tabulky,
tabulation of data from the TER and dye binding assay (if appropriate) for individual animals and individual skin samples;
popis jakýchkoli pozorovaných účinků.
description of any effects observed.
OECD (2001) Harmonised Integrated Classification System for Human Health and Environmental Hazards of Chemical Substances and Mixtures.
OECD, (2001) Harmonised Integrated Classification System for Human Health and Environmental Hazards of Chemical Substances and Mixtures.
Zkušební metoda B.4 Akutní toxicita: dráždivé a leptavé účinky na kůži.
Testing Method B.4. Acute Toxicity: Dermal Irritation/Corrosion.
Botham, P.A., Chamberlain, M., Barratt, M.D., Curren, R.D., Esdaile, D.J., Gardner, J.R., Gordon, V.C., Hildebrand, B., Lewis, R.W., Liebsch, M., Logemann, P., Osborne, R., Ponec, M., Regnier, J.F., Steiling, W., Walker, A.P., and Balls, M. (1995). A prevalidation study on in vitro skin corrosivity testing.
Botham, P.A., Chamberlain, M., Barratt, M.D., Curren, R.D., Esdaile, D.J., Gardner, J.R., Gordon, V.C., Hildebrand, B., Lewis, R.W., Liebsch, M., Logemann, P., Osborne, R., Ponec, M., Regnier, J.F., Steiling, W., Walker, A.P., and Balls, M., (1995) A prevalidation study on in vitro skin corrosivity testing.
ATLA 23, 219–255.
ATLA 23, p. 219-255.
Barratt, M.D., Brantom, P.G., Fentem, J.H., Gerner, I., Walker, A.P., and Worth, A.P.
Barratt, M.D., Brantom, P.G., Fentem, J.H., Gerner, I., Walker, A.P., and Worth, A.P.
Selection and distribution of the test chemicals.
Selection and distribution of the test chemicals. Toxicology.
Toxic. in Vitro 12, 471–482.
In Vitro 12, p. 471-482.
Fentem, J.H., Archer, G.E.B., Balls, M., Botham, P.A., Curren, R.D., Earl, L.K., Esdaile, D.J., Holzhütter, H.-G., and Liebsch, M. (1998). The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin corrosivity.
Fentem, J.H., Archer, G.E.B., Balls, M., Botham, P.A., Curren, R.D., Earl, L.K., Esdaile, D.J., Holzhütter, H.-G., and Liebsch, M., (1998) The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin corrosivity.
Results and evaluation by the Management Team.
Results and evaluation by the Management Team. Toxicology.
Toxic. in Vitro 12, 483–524.
In Vitro 12, p. 483- 524.
OECD (1996). Final Report of the OECD Workshop on Harmonization of Validation and Acceptance Criteria for Alternative Toxicological Test Methods, 62pp.
OECD, (1996) Final Report of the OECD Workshop on Harmonisation of Validation and Acceptance Criteria for Alternative Toxicological Test Methods, p. 62.
Balls, M., Blaauboer, B.J., Fentem.
Balls, M., Blaauboer, B.J., Fentem.