natgillin/translations-raw huggingface dataset:
2 l Fe-EDTA roztoku
2 l Fe-EDTA solution
Média M4 a M7
and M7 media
Média M4 a M7 se připraví ze zásobního roztoku II, makroživin a vitaminů tímto způsobem:
and M7 media are prepared using stock solution II, the macro-nutrients and vitamin as follows:
Množství zásobního roztoku přidané za účelem přípravy média II (ml/l)
Amount of stock solution II added to prepare medium (ml/l)
Zásobní roztok II (obsahující kombinaci stopových prvků)
Stock solution II (combined trace elements)
Zásobní roztok makroživin (jednotlivá látka)
Macro nutrient stock solutions (single substance)
Kombinovaný vitaminový zásobní roztok
Combined Vitamin stock
Kombinovaný vitaminový zásobní roztok se připraví přidáním 3 vitaminů do 1 litru vody takto:
The combined vitamin stock solution is prepared by adding the 3 vitamin to 1 litre water, as shown below:
Thiamin-hydrochlorid
Thiamine hydrochloride
Kyanokobalamin (B12)
Cyanocobalamine (B12)
Biotin
Biotine
Kombinovaný vitaminový zásobní roztok se uchovává v malých zmrazených podílech.
The combined vitamin stock is stored frozen in small aliquots.
Vitaminy se přidají do média krátce před použitím.
Vitamins are added to the media shortly before use. N.B
Poznámka Vysrážení solí při přípravě kompletního média se zabrání přidáním podílů zásobních roztoků do přibližně 500–800 ml deionizované vody a objem se poté doplní na 1 litr.
to avoid precipitation of salts when preparing the complete media, add the aliquots of stock solutions to about 500-800 ml deionised water and then fill up to 1 litre. N.B
Poznámka Poprvé byly informace o médiu M4 uvedeny v práci Elendt, B. P. (1990).
the first publication of the M4 medium can be found in Elendt, B. P. (1990).
Protoplasma, 154, 25–33.
Protoplasma, 154, 25-33.
Voda vhodné čistoty, např. deionizovaná, destilovaná nebo čištěná reversní osmosou s vodivostí nepřesahující 10 μS/cm.
Water of suitable purity, e.g. deionised, distilled or reverse osmosis with conductivity preferably not exceeding 10 μS.cm-1.
Účelem této zkoušky je stanovit účinky látky na růst jednobuněčných zelených řas.
The purpose of this test is to determine the effects of a substance on the growth of a unicellular green algal species.
Relativně krátkodobými zkouškami (72 hodin) lze posoudit účinky na několik generací řas.
Relatively brief (72 hours) tests can assess effects over several generations.
Tato metoda může být upravena pro použití s několika druhy řas, přičemž musí být v protokolu o zkoušce uveden popis metody.
This method can be adapted for use with several unicellular algal species, in which case a description of the method used must be provided with the test report.
Použití metody je nejsnadnější v případě látek rozpustných ve vodě, které za podmínek zkoušky pravděpodobně zůstávají ve vodě.
This method is most easily applied to water-soluble substances which, under the conditions of the test, are likely to remain in the water.
Metodu lze použít pro látky, které přímo neovlivňují měření růstu řas.
The method can be used for substances that do not interfere directly with the measurement of algal growth.
Je žádoucí mít před započetím zkoušky k dispozici co nejúplnější data o rozpustnosti látky ve vodě, o tenzi par, chemické stálosti, disociačních konstantách a o biologické rozložitelnosti látky.
It is desirable to have, as far as possible, information on the water solubility, vapour pressure, chemical stability, dissociation constants and biodegradability of the substance before starting the test.
Další informace (např. strukturní vzorec, stupeň čistoty, druh a podíl významných nečistot v procentech, přítomnost a množství přísad a rozdělovací koeficient noktanol/voda) je třeba vzít v úvahu při plánování zkoušky i při interpretaci výsledků.
Additional information (for instance structural formula, degree of purity, nature and percentage of significant impurities, presence and amount of additives, and n-octanol/water partition coefficient) should be taken into consideration in both the planning of the test and interpretation of the results.
Hustota buněk: počet buněk na jeden mililitr.
Cell density: the number of cells per millilitre.
Růst: zvyšování hustoty buněk během doby trvání zkoušky.
Growth: the increase in cell density over the test period.
Růstová rychlost: nárůst hustoty buněk za jednotku času.
Growth rate: the increase in cell density per unit time.
EC50: v této metodě jde o koncentraci zkoušené látky, která má za následek 50 % snížení růstu (EbC50) nebo růstové rychlosti (ErC50) vzhledem ke kontrole.
in this method, that concentration of test substance which results in a 50 % reduction in either growth (EbC50) or growth rate (ErC50) relative to the control.
NOEC (no observed effect concentration): v této metodě jde o nejvyšší zkušební koncentraci, při níž není pozorováno žádné významné snížení růstu nebo růstové rychlosti ve srovnání s kontrolou.
NOEC (no observed effect concentration): in this method, the highest tested concentration at which no significant inhibition of growth is observed relative to the control.
Mohou se také vyjádřit v hmotnostních podílech Mohou se také vyjádřit v hmotnostních podílech (mg·kg–l).
They may also be expressed as weight by weight (mg./kg-1).
Zkoušky s referenčními látkami mohou být provedeny s cílem prokázat, že se reakce zkušebních druhů za laboratorních zkušebních podmínek podstatně nezměnila.
A reference substance may be tested as a means of demonstrating that under the laboratory test conditions the sensitivity of the test species has not changed significantly.
Při použití referenční látky musí být výsledky uvedeny do protokolu o zkoušce.
If a reference substance is used, the results should be given in the test report.
Jako referenční látka může být použit dichroman draselný, ale jeho barva může ovlivnit kvalitu a intenzitu světla dostupného buňkám a také spektrofotometrická měření, pokud se použijí.
Potassium dichromate can be used as a reference substance, but its colour may affect the light quality and intensity avai1able to the cells and also the spectrophotometric determinations if used.
Dichroman draselný byl použit v mezinárodních mezilaboratorních testech (viz položka seznamu literatury (3) a doplněk 2).
Potassium dichromate has been used in an international inter-laboratory test (see ref. (3) and Appendix 2).
Může být provedena limitní zkouška s koncentrací 100 mg/l s cílem prokázat, že LC50 je vyšší než tato koncentrace.
A limit test may be performed at 100 mg per litre in order to demonstrate that the EC50 is greater than this concentration.
Exponenciálně rostoucí kultury vybraných zelených řas jsou po několik generací vystaveny za definovaných podmínek různým koncentracím zkoušené látky.
Exponentially-growing cultures of selected green algae are exposed to various concentrations of the test substance over several generations under defined conditions.
Zkušební roztoky se kultivují 72 hodin, během nichž se alespoň každých 24 hodin měří hustota buněk v každém roztoku.
The test solutions are incubated for a period of 72 hours, during which the cell density in each solution is measured at least every 24 hours.
Stanoví se snížení růstu ve srovnání s kontrolní kulturou.
The inhibition of growth in relation to a control culture is determined.
Hustota buněk v kontrolních kulturách by se měla za 3 dny zvýšit alespoň šestnáctkrát.
The cell density in the control cultures should have increased by a factor of at least 16 within three days.
Koncentrace zkoušené látky nesmí po celou zkoušky klesnout pod 80 % původní hodnoty koncentrace.
The concentrations of the test substance shall be maintained to within 80 % of the initial concentrations/throughout a time corresponding to the duration of the test.
musí být počáteční koncentrace brána jako koncentrace naměřená v roztoku na začátku zkoušky.
the initial concentration shall be taken as the concentration measured at the start of the test.
Koncentrace se stanoví po určité době jejího ustálení.
The concentration shall be determined after a period of equilibration.
Je známo, že podstatná část zkoušené látky může být během zkoušky zabudována do biomasy řas.
It is recognised that significant amounts of the test substance may be incorporated into the algal biomass during the period of the test.
Proto by se za účelem prokázání dodržení kritérií jakosti mělo brát v úvahu jak množství látky zabudované do biomasy řas, tak látka v roztoku (nebo, není-li to technicky možné, ve vodním sloupci).
Therefore, for the purpose of demonstrating compliance with the above quality criteria, both the amount of the substance incorporated into the algal biomass and the substance in solution (or, if not technically possible measured in the water column) should be taken into account.
Protože však stanovení koncentrace látky v biomase řas může představovat technické obtíže, může být dodržení kritérií jakosti prokázáno zkouškou s nejvyšší koncentrací látky, ale bez řas, a měřením koncentrací v roztoku (nebo, není-li to technicky možné, ve vodním sloupci) na začátku a na konci zkoušky.
However, as determination of the substance concentration in the algal biomass may pose significant technical problems, compliance with the quality criteria may be demonstrated by running a test vessel at the highest substance concentration but without algae and measuring concentrations in solution (or, if not technically possible in the water column) at the beginning and at the end of the test period.
POPIS ZKUŠEBNÍHO POSTUPU
DESCRIPTION OF THE TEST PROCEDURE
Zvolené zkušební koncentrace se připraví přidáním vhodného alikvotního podílu k předkulturám řas (viz doplněk 1).
The chosen test concentrations are prepared by adding suitable aliquots to algal pre-cultures (see Appendix 1).
Látky se obvykle zkoušejí až do meze jejich rozpustnosti.
Substances should normally only be tested up to the limit of solubility.
U některých látek (např. u látek s nízkou rozpustností ve vodě nebo vysokou hodnotou Pow, nebo u látek, které ve vodě vytvářejí spíše stálé disperse než pravé roztoky) je možné provést zkoušku při koncentraci vyšší, než je mez rozpustnosti, aby bylo zajištěno, že je dosaženo maximální koncentrace odpovídající maximální rozpustnosti/stálosti.
For some substances (e.g. substances having low solubility in water, or high Pow or those forming stable dispersion rather than true solution in water), it is acceptable to run a test concentration above the solubility limit of the substance to ensure that the maximum soluble stable concentration has been obtained.
Použijí-li se takové pomocné látky, měly by všechny zkušební koncentrace obsahovat stejné množství těchto pomocných látek a stejné koncentraci pomocné látky jako ve zkušebních sériích by měly být exponovány další kontroly.
When such auxiliary substances are used, all test concentrations should contain the same amount of auxiliary substances, and additional controls should be exposed to the same concentration of the auxiliary substance as that used in the test series.
V takovém případě se upraví pH zásobního roztoku na pH vody k ředění, pokud proti tomu neexistuji specifické důvody.
In that case, the pH value of the stock solution should be adjusted to the pH value of the solution water unless there are specific reasons not to do so.
Zkušební médium
Test medium
Voda musí být kvalitní destilovaná nebo deionizovaná s vodivostí menší než 5 μS/cm.
The water should be good-quality distilled water, or deionised water with a conductivity less than 5 μS.cm-1.
Destilační přístroj nesmí obsahovat žádné měděné části.
The apparatus for distillation of water must not contain any part made of copper.
Je doporučeno toto médium:
The following medium is recommended.
Podle následující tabulky se připraví čtyři zásobní roztoky.
Four stock solutions are prepared, according to the following table.
Tyto roztoky se sterilizují membránovou filtrací nebo v autoklávu a skladují se v temnu při 4 oC.
The stock solutions are sterilised by membrane filtration or by autoclaving, and stored in the dark at 4 oC.
Zásobní roztok č. 4 by se měl sterilizovat pouze membránovou filtrací.
Stock solution No 4 should be sterilised only by membrane filtration.
Ředěním těchto roztoků se získají konečné živné koncentrace zkušebních roztoků.
These stock solutions are diluted to achieve the final nutrient concentrations in the test solutions.
Koncentrace v zásobním roztoku
Concentration in the stock solution
Konečná koncentrace ve zkušebním roztoku
Final concentration in the test solution
Zásobní roztok č. 1: makroživiny
Stock solution 1: macro-nutrients
6H2O
MgCl2.6H2O
12 mg/l
12mg/l
2H2O
CaCl2.2H2O
7H2O
MgSO4.7H2O
Zásobní roztok č. 2: Fe-EDTA
Stock solution 2: Fe-EDTA
6H2O
FeCl3.6H2O
2H2O
Na2EDTA.2H2O
100 mg/l mg
100 mg/l
Zásobní roztok č. 3: stopové prvky
Stock solution 3: trace elements
3 × 10–3 mg/l
3 × 10-3 mg/l
1,5 × 10–3 mg/l
1,5 × 10-3 mg/l
10–5 mg/l
10-5 mg/l
2H2O
Na2MoO4.2H2O
7 × 10–3 mg/l
7 × 10-3mg/l
Zásobní roztok č. 4: NaHCO3
Stock solution 4: NaHCO3
Po ustálení a po provzdušnění by mělo mít médium hodnotu pH přibližně 8.
The pH of the medium after equilibration with air is approximately 8.
Běžné laboratorní vybavení.
Normal laboratory equipment.
Kultivační baňky o vhodném objemu (např. Erlenmeyerovy baňky na 250 ml jsou vhodné v případě zkušebního roztoku o objemu 100 ml).
test flasks of suitable volume (e.g. 250 ml conical flasks are suitable when the volume of the test solution is 100 ml).
Všechny zkušební baňky by měly být identické, pokud jde o materiál a rozměry.
All test flasks should be identical as regards to material and dimensions,
Kultivační zařízení: místnost nebo komora, v nichž lze udržovat teplotu 21–25 oC ± 2 oC a stálé rovnoměrné osvětlení v rozsahu vlnových délek od 400 do 700 nm.
culturing apparatus: cabinet or chamber in which a temperature in the range 21 oC to 25 oC can be maintained at ± 2 oC, and continuous uniform illumination provided in the spectral range 400 to 700 nm.
Jestliže všechny řasy v kontrolních kulturách dosáhly doporučené růstové rychlosti, lze předpokládat, že podmínky pro jejich růst, včetně intenzity světla, jsou vyhovující.
If algae in control cultures have achieved the recommended growth rates, it can be assumed that the conditions for growth, including light intensity, have been adequate.
U zkušebních roztoků s průměrnými koncentracemi se doporučuje použít světelnou intenzitu od 60 do 120 μE· m–2/s (35 – 70 × 1018 fotonů m–2/s) při měření v rozsahu 400–700 nm vhodným detektorem.
It is recommended to use, at the average level of the test solutions, a light intensity in the range 60 to 120 μE.m- 2.s-1 (35 to 70 × 1018 photons.m- 2.s-1) when measured in the range 400 to 700 nm using an appropriate receptor.
Při měření intenzity luxmetry je přijatelný rozsah odpovídající 6000–10000 lx.
For light measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 6000 to 10000 lx is acceptable.
Této světelné intenzity lze dosáhnout umístěním čtyř až sedmi univerzálních bílých 30W zářivek (teplota chromatičnosti přibližně 4300 K) ve vzdálenosti 0,35 m od kultury řas.
The light intensity could be obtained using four to seven 30 W fluorescent lamps of the universal white type (colour temperature of approximately 4300 K), at a distance of 0,35 m from the algal culture,
Měření hustoty buněk by se mělo provádět přímým počítáním živých buněk, např. pod mikroskopem s počítacími komůrkami.
Cell density measurements should be made using a direct counting method of living cells, e.g. a microscope with counting chambers.
Za předpokladu dostatečné citlivosti a prokázané dobré korelace s buněčnou hustotou mohou být použity i jiné postupy (fotometrie, turbidimetrie…).
However, other procedures (photometry, turbidimetry, ...) may be used if sufficiently sensitive and if shown to be sufficiently well correlated with cell density.
Zkušební organismy
Test organisms
Je doporučeno použít rychle rostoucí druhy zelených řas vhodné pro kultivaci a zkoušení.
It is suggested that the species of green algae used be a fast-growing species that is convenient for culturing and testing.
Dává se přednost těmto druhům:
The following species are preferred:
Selenastrum capricornutum, např. ATCC 22662 nebo CCAP 278/4,
Selenastrum capricornutum, e.g. ATCC 22662 or CCAP 278/4,
Scenedesmus subspicatus, např. 86.81 SAG.
Scenedesmus subspicatus, e.g. 86.81 SAG,
ATCC American Type Culture Collection (USA).
ATCC American Type Culture Collection (U.S.A.)
CCAP Culture Centre of Algae and Protozoa (UK).
CCAP Culture Centre of Algae and Protozoa (U.K.)
SAG Collection of algal culture (Gottingen, DE).
SAG Collection of algal culture (Gottingen, F.R.G.)
Použití jiného druhu řas musí být uvedeno ve zprávě.
If other species are used, the strain should be reported.
Koncentrační rozmezí, ve kterém lze očekávat účinky, se určí na základě výsledků orientačních zkoušek.
The concentration range in which effects are likely to occur is determined on the basis of results from range-finding tests.
Dva parametry, jež jsou mírou růstu (biomasa a růstová rychlost), mohou poskytovat zcela rozdílné hodnoty snížení růstu; v orientační zkoušce by měly být použity oba parametry, aby bylo zajištěno, že geometrická řada koncentrací umožní odhadnout jak EbC50 and the ErC50.
The two measures of growth (biomass and growth rate) may result in widely disparate measures of growth inhibition; both should be used in the range finding test to ensure that the geometric progression of concentrations will allow estimation of both the EbC50 and the ErC50.
Počáteční hustota buněk
Initial cell density
Doporučuje se, aby byla počáteční hustota buněk řasy Selenastrum capricornutum a řasy Scenedesmus subspicatus ve zkušebních roztocích přibližně 104 buněk/ml.
It is recommended that the initial cell density in the test cultures be approximately 104 cells/ml for Selenastrum capricornutum and Scenedesmus subspicatus.
Použije-li se jiný druh řasy, měla by být biomasa srovnatelná.
When other species are used the biomass should be comparable.
Koncentrace zkoušené látky
Concentrations of test substance
Pro zkoušku se připraví geometrická řada nejméně pěti koncentrací lišících se od sebe vždy faktorem nepřekračujícím 2,2.
For the test, at least five concentrations are made up in a geometric series at a concentration ratio not exceeding 2,2.
Nejnižší zkušební koncentrace by neměla vykazovat žádný pozorovatelný účinek na růst řas.
The lowest concentration tested should have no observed effect on the growth of the algae.
Nejvyšší zkušební koncentrace by měla omezit růst ve srovnání s kontrolní zkouškou nejméně o 50 %, nejlépe by měla růst zcela zastavit.
The highest concentration tested should inhibit growth by at least 50 % relative to the control and, preferably, stop growth completely.
Opakování a kontroly
Replicates and controls
Plán zkoušky by měl zahrnovat tři opakování s každou zkušební koncentrací.
The test design should include three replicates at each test concentration.
Dále se provedou tři kontroly bez zkoušené látky, a je-li použita pomocná látka, též tři kontroly s touto látkou.
Three controls without test substance are run and, if relevant, three controls containing the auxiliary substance are also run.
Je-li pro to důvod, může být plán zkoušky upraven tak, že se použije více koncentračních úrovní a sníží se počet opakování zkoušky s každou koncentrací.
If justified, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Zkušební roztoky o požadované koncentraci zkoušené látky a požadovaném množství inokula řas se připraví přidáním alikvotních podílů zásobního roztoku zkoušené látky k vhodnému množství prekultury řas (viz doplněk 1).
Test cultures containing the desired concentrations of test substance and the desired quantity of algal inoculum are prepared by adding aliquots of stock solutions of the test substance to suitable amounts of algal pre-cultures (see Appendix 1).
Kultivační baňky se protřepou a umístí se do kultivačního zařízení.
The culture flasks are shaken and placed in the culturing apparatus.
Buňky řas se udržují v suspensi třepáním, mícháním nebo probubláváním vzduchem, aby se zlepšila výměna plynů a zmenšilo se kolísání pH ve zkušebních roztocích.
The algal cells are kept in suspension by shaking, stirring or bubbling with air, in order to improve gas exchange and reduce pH variation in the test solutions.
Kultury se udržují při teplotě 21–25 oC, udržované s přesností na ± 2 oC.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 25 oC, controlled at ± 2 oC.
Hustota buněk v každé baňce se stanoví nejméně po 24, 48 a 72 hodin po zahájení zkoušky.
The cell density in each flask is determined at least at 24, 48 and 72 hours after the start of the test.
Používá-li se měření hustoty buněk jiná metoda, než je jejich přímé počítání, použije se ke stanovení pozadí filtrované médium pro kultivaci řas obsahující odpovídající koncentraci zkoušené chemické látky.
Filtered algal medium containing the appropriate concentration of the test chemical is used to determine the background when using cell density measurements other than direct counting methods.
pH se měří na začátku zkoušky a po 72 hodinách.
The pH is measured at the beginning of the test and at 72 hours.
Hodnota pH by se neměla během zkoušky změnit víc než o 1,5.
The pH of the controls should not normally deviate by more than 1,5 units during the test.
Zkoušení těkavých látek
Testing volatile substances
V současné době neexistuje obecně přijatý způsob zkoušení těkavých látek.
There is to date no generally accepted way to test volatile substances.
Je-li o látce známo, že se snadno vypařuje, mohou být použity uzavřené kultivační nádoby se zvětšeným mrtvým objemem.
When a substance is known to have a tendency to vaporise, closed test flasks with increased head-space may be used.
Při plánování objemu horní části kultivačních baněk se musí zohlednit eventuální nedostatek CO2.
The possibility of shortage of CO2 should be considered when calculating the head-space of the closed flasks.
Byly navrženy varianty této metody (4).
Variations to this method have been proposed (see reference (4)).
Měl by být učiněn pokus stanovit množství zkoušené látky, které v roztoku zůstalo; při interpretaci výsledků zkoušek s těkavými látkami v uzavřených systémech je doporučeno postupovat mimořádně opatrně.
Attempts should be made to determine the amount of the substance which remains in solution, and extreme caution is advised when interpreting results of tests with volatile chemicals using closed systems.
S využitím postupů popsaných v této metodě může být provedena limitní zkouška s koncentrací 100 mg/l s cílem prokázat, že EC50 je vyšší než tato koncentrace.
Using the procedures described in this method, a limit test may be performed at 100 mg per litre in order to demonstrate that the EC50 is greater than this concentration.
Limitní zkouška se provede alespoň třikrát, se stejným počtem kontrol.
The limit test should be performed at least in triplicate, with the same number of controls.
V limitní zkoušce se stanoví oba parametry, jež jsou mírou růstu (biomasa a růstová rychlost).
The two measures of growth (biomass and growth rate) should be used for the limit test.
Zjistí-li se v limitní zkoušce pokles růstu biomasy nebo růstové rychlosti ve srovnání s kontrolami o 25 % nebo více, provede se úplná zkouška.
If, in a limit test, a mean decrease of 25 % or more is found in either biomass or growth rate between the limit test and the control, a full test should be carried out.
Naměřené hustoty buněk ve zkušební kultuře a v kontrolách se spolu s koncentracemi zkoušené látky a dobami měření shrnou do tabulky.
The measured cell density in the test cultures and controls are tabulated together with the concentrations of the test substance and the times of measurements.
Střední hodnota hustoty buněk pro každou zkušební koncentraci a pro kontroly se vynese proti času (0–72 hodin) a sestrojí se růstová křivka.
The mean value of the cell density for each test substance concentration and for the controls is plotted against time (0-72 h) to produce growth curves.
Vztah koncentrace/účinek se stanoví dvěma následujícími postupy.
To determine the concentration/effect relationship, the two following approaches should be used.