natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Komise požádala Evropský úřad pro bezpečnost potravin o poskytnutí vědeckého stanoviska, zda je vhodné zahrnout test FPA do přílohy C směrnice 64/432/EHS.
The Commission requested the European Food Safety Authority (EFSA) to provide a scientific opinion on the suitability of the FPA for inclusion in Annex C to Directive 64/432/EEC.
Komise dále požádala Evropský úřad pro bezpečnost potravin, aby posoudil vhodnost testu FPA a testů uvedených v článku 1 rozhodnutí 2004/226/ES pro účely osvědčování skotu pro obchod uvnitř Společenství.
In addition, the Commission asked EFSA to assess the suitability of the FPA and the tests listed in Article 1 of Decision 2004/226/EC for the purpose of certification of bovine animals for intra-Community trade.
Dne 11. prosince 2006 přijala Komise pro zdraví a dobré životní podmínky zvířat vědecké stanovisko k metodám diagnostiky brucelózy u skotu [3], ve kterém dospěla k závěru, že kromě SAT jsou diagnostické testy ke zjištění brucelózy skotu zahrnuté v příloze C směrnice 64/432/EHS vhodné, aby zůstaly zachovány jakožto standardní testy pro účely osvědčování jednotlivých kusů skotu pro obchod uvnitř Společenství.
On 11 December 2006, the Panel on animal health and welfare adopted a scientific opinion on brucellosis diagnostic methods for bovines [3], in which it concluded that, except the SAT, the diagnostic tests for bovine brucellosis, included in Annex C to Directive 64/432/EEC are suitable to remain as standard tests for the purpose of certification of individual bovine animals for intra-Community trade.
Nicméně, jelikož je test SAT testem před opuštěním stáda přímo předepsaným pro obchodování s dobytkem v čl. 6. odst. 2 písm. b) směrnice 64/432/ES, musí být v příloze C uvedené směrnice k dispozici technická specifikace.
However, as the SAT is the pre-movement test for trade in cattle directly prescribed in Article 6(2)(b) of Directive 64/432/EEC, a technical specification must be available in Annex C to that Directive.
Vědecké stanovisko ze dne 11. prosince 2006 navíc dospělo k závěru, že citlivost a specifičnost testu FPA jsou srovnatelné s těmi, jaké mají testy zahrnuté v příloze C směrnice 64/432/EHS a shledalo, že test je vhodný, aby byl zahrnut v uvedené příloze jakožto standardní test pro diagnostiku brucelózy u uvedených zvířat pro obchod uvnitř Společenství.
In addition, the scientific opinion of 11 December 2006 concluded that the sensitivity and specificity of the FPA are comparable to those of tests included in Annex C to Directive 64/432/EEC and was also found to be suitable for inclusion in that Annex as a standard test for brucellosis diagnosis in such animals for intra-Community trade.
Nedávno vyvinuté metody polymerázové řetězové reakce popsané v oddílu 1 písm. d) kapitoly 2.4.3 Příručky diagnostických testů a očkovacích látek pro suchozemská zvířata Světové organizace pro zdraví zvířat (OIE), šestém vydání z roku 2008 poskytují dodatečné prostředky k detekci a určení Brucelly spp., a proto by měly být zahrnuty v příloze C směrnice 64/432/EHS.
The recently developed polymerase chain reaction methods as described in Section 1(d) of Chapter 2.4.3 of the Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, Sixth Edition, 2008 of the OIE provide additional means of detection and identification of Brucella spp. and should therefore be included in Annex C to Directive 64/432/EEC.
Příloha C směrnice 64/432/EHS a rozhodnutí 2004/226/ES by proto měly být odpovídajícím způsobem změněny.
Annex C to Directive 64/432/EEC and Decision 2004/226/EC should therefore be amended accordingly.
Příloha C směrnice 64/432/EHS se nahrazuje přílohou tohoto rozhodnutí.
Annex C to Directive 64/432/EEC is replaced by the text in the Annex to this Decision.
Článek 1 rozhodnutí 2004/226/ES se nahrazuje tímto:
Article 1 of Decision 2004/226/EC is replaced by the following:
Test reakce vazby komplementu, test na brucelózu s pufrovaným brucelovým antigenem (test s bengálskou červení (RBT)), testy ELISA a test fluorescenční polarizace (FPA), prováděné v souladu s ustanoveními přílohy C směrnice 64/432/EHS se tímto schvalují pro účely osvědčování.“
The complement fixation test, the buffered Brucella antigen test (rose Bengal test (RBT)), the ELISA tests and the fluorescence polarisation assay (FPA) carried out in accordance with Annex C to Directive 64/432/EEC are hereby approved for certification purposes.’
V Bruselu dne 10. prosince 2008.
Done at Brussels, 10 December 2008.
Příloha C směrnice 64/432/EHS se nahrazuje tímto:
Annex C to Directive 64/432/EEC is replaced by the following:
IDENTIFIKACE PŮVODCE
IDENTIFICATION OF THE AGENT
Prokázání mikroorganismů s morfologií Brucelly na základě modifikovaného kyselého nebo imunospecifického barvení v materiálu z abortů, výtoků z pochvy nebo v mléce zakládá domněnku výskytu brucelózy, zvláště je-li podpořeno sérologickými testy.
The demonstration by modified acid-fast or immunospecific staining of organisms of Brucella morphology in abortion material, vaginal discharges or milk provides presumptive evidence of brucellosis, especially if supported by serological tests.
Metody polymerázové řetězové reakce (PCR) poskytují dodatečné prostředky detekce.
The polymerase chain reaction (PCR) methods provide additional means of detection.
Kdykoliv je to možné, měly by být brucely (Brucella spp.) izolovány pomocí běžných nebo selektivních médií, kultivací z děložního výtoku, potracených plodů, sekretů z vemene nebo z vybraných tkání, jako jsou mízní uzliny a samčí a samičí pohlavní orgány.
Whenever possible, Brucella spp. should be isolated using plain or selective media by culture from uterine discharges, aborted foetuses, udder secretions or selected tissues, such as lymph nodes and male and female reproductive organs.
Po izolaci by se měl příslušný druh nebo biovar identifikovat lýzou fágů a/nebo testy oxidativního metabolismu, kultivačními, biochemickými a sérologickými kritérii.
After isolation, the species and biovar shall be identified by phage lysis and/or oxidative metabolism tests, cultural, biochemical and serological criteria.
PCR je doplňková metoda biotypizace založená na specifických sekvencích genomu.
PCR can provide both a complementary and biotyping method based on specific genomic sequences.
Postupy a použitá média, jejich standardizace a výklad výsledků musí odpovídat ukazatelům, které jsou specifikovány v Příručce diagnostických testů a očkovacích látek pro suchozemská zvířata Světové organizace pro zdraví zvířat (OIE), šestém vydání z roku 2008, v kapitole 2.4.3 (brucelóza skotu), v kapitole 2.7.2 (brucelóza koz a ovcí) a v kapitole 2.8.5 (brucelóza prasat).
The techniques and media used, their standardisation and the interpretation of results must conform to that specified in the OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, Sixth Edition, 2008, Chapter 2.4.3 (bovine brucellosis), Chapter 2.7.2 (caprine and ovine brucellosis) and Chapter 2.8.5 (porcine brucellosis).
IMUNOLOGICKÉ TESTY
IMMUNOLOGICAL TESTS
Standardy
Standards
K přípravě všech antigenů použitých v testu s bengálskou červení (RBT), v séroaglutinačním testu (SAT), v testu reakce vazby komplementu (CFT) a v kroužkovém testu s mlékem (MRT) musí být použit Brucella abortus biovar 1 kmen Weybridge č. 99 nebo kmen USDA 1119-3.
The Brucella abortus biovar 1 Weybridge strain No 99 or USDA strain 1119-3 must be used for the preparation of all antigens used in the rose Bengal test (RBT), serum agglutination test (SAT), complement fixation test (CFT) and the milk ring test (MRT).
Standardním referenčním sérem pro testy RBT, SAT, CFT a MRT je mezinárodní referenční standardní sérum OIE (OIEISS), původně zvané druhé mezinárodní anti-Brucella abortus sérum WHO (ISAbS).
The standard reference serum for the RBT, SAT, CFT and MRT shall be the OIE international reference standard serum (OIEISS) formerly named WHO second international anti-Brucella abortus Serum (ISAbS).
Standardními referenčními séry pro enzymoimunoanalýzy (testy ELISA) jsou:
The standard reference sera for enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) shall be:
OIEISS,
the OIEISS,
slabě pozitivní standardní sérum OIE ELISA (OIEELISAWPSS),
the weak positive OIE ELISA standard serum (OIEELISAWPSS),
silně pozitivní standardní sérum OIE ELISA (OIEELISASPSS),
the strong positive OIE ELISA standard serum (OIEELISASPSS),
negativní standardní sérum OIE ELISA (OIEELISANSS).
the negative OIE ELISA standard serum (OIEELISANSS).
Standardními referenčními séry pro testy fluorescenční polarizace (FPA) jsou:
The standard reference sera for fluorescence polarisation assays (FPAs) shall be:
Standardní séra uvedená v bodech 2.1.3 a 2.1.4 jsou k dispozici v referenční laboratoři Společenství pro brucelózu nebo je lze získat od Veterinary Laboratories Agency (VLA), Weybridge, Spojené Království.
The standard sera listed in 2.1.3 and 2.1.4 are available from the Community reference laboratory for brucellosis or the Veterinary Laboratories Agency (VLA), Weybridge, United Kingdom.
Standardy OIEISS, OIEELISAWPSS, OIEELISASPSS a OIEELISANSS jsou primární mezinárodní standardy, ze kterých musí vycházet sekundární referenční národní standardní séra (‚pracovní standardy‘) pro každý z testů uvedený v bodu 2.1.1 v každém členském státě.
The OIEISS, the OIEELISAWPSS, the OIEELISASPSS and the OIEELISANSS are international primary standards from which secondary reference national standards serum (working standards) must be established for each test referred to in 2.1.1 in each Member State.
Enzymoimunoanalýzy (testy ELISA) nebo jiné aglutinační testy k detekci brucelózy skotu v séru nebo mléce
Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) or other binding assays for the detection of bovine brucellosis in serum or milk
Materiál a reakční činidla
Material and reagents
Je nutné, aby použitá metoda a výklad výsledků byly validovány v souladu s principy uvedenými v kapitole 1.1.4 Příručky diagnostických testů a očkovacích látek pro suchozemská zvířata Světové organizace pro zdraví zvířat (OIE), šesté vydání z roku 2008, a musí přinejmenším zahrnovat laboratorní a diagnostické studie.
The technique used and the interpretation of results must have been validated in accordance with the principles laid down in Chapter 1.1.4 of the OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, Sixth Edition, 2008, and must include at least laboratory and diagnostic studies.
Standardizace testu
Standardisation of the test
Standardizace postupu testu pro jednotlivé vzorky séra:
Standardisation of the test procedure for individual serum samples:
předředění 1/150 [1] u OIEISS nebo předředění 1 2 u OIEELISAWPSS nebo předředění 1/16 u OIEELISASPSS připravené v negativním séru (nebo ve směsi negativních sér) musí dát pozitivní reakci;
a 1/150 pre-dilution [1] of the OIEISS or a 1/2 pre-dilution of the OIEELISAWPSS or a 1/16 pre-dilution of the OIEELISASPSS made up in a negative serum (or in a negative pool of sera) must give a positive reaction;
předředění 1/600 u OIEISS nebo předředění 1/8 u OIEELISAWPSS nebo předředění 1/64 u OIEELISASPSS připravené v negativním séru (nebo ve směsi negativních sér) musí dát negativní reakci;
a 1/600 pre-dilution of the OIEISS or a 1/8 pre-dilution of the OIEELISAWPSS or a 1/64 pre-dilution of the OIEELISASPSS made up in a negative serum (or in a negative pool of sera) must give a negative reaction;
OIEELISANSS musí vždy dát negativní reakci.
the OIEELISANSS must always give a negative reaction.
Standardizace postupu testu pro vzorky směsného séra:
Standardisation of the test procedure for pooled serum samples:
předředění 1/150 u OIEISS nebo předředění 1 2 u OIEELISAWPSS nebo předředění 1/16 u OIEELISASPSS připravené v negativním séru (nebo ve směsi negativních sér) a znovu zředěné v negativním séru počtem vzorků tvořících směs musí dát pozitivní reakci;
a 1/150 pre-dilution of the OIEISS or a 1/2 pre-dilution of the OIEELISAWPSS or a 1/16 pre-dilution of the OIEELISASPSS made up in a negative serum (or in a negative pool of sera) and again diluted in negative sera by the number of samples making up the pool must give a positive reaction;
OIEELISANSS musí vždy dát negativní reakci;
the OIEELISANSS must always give a negative reaction;
test musí být schopný prokázat infekci u jednotlivého zvířete ze skupiny zvířat, od kterých byly vzorky séra smíchány do směsi.
the test must be adequate to detect evidence of infection in a single animal of the group of animals, of which samples of serum have been pooled.
Standardizace postupu testu pro vzorky směsi mléka nebo syrovátky:
Standardisation of the test procedure for pooled milk or whey samples:
předředění 1/1000 u OIEISS nebo předředění 1/16 u OIEELISAWPSS nebo předředění 1/125 u OIEELISASPSS připravené v negativním séru (nebo směsi negativních sér) a znovu zředěné 1/10 v negativním mléce musí dávat pozitivní reakci;
a 1/1000 pre-dilution of the OIEISS or a 1/16 pre-dilution of the OIEELISAWPSS or a 1/125 pre-dilution of the OIEELISASPSS made up in a negative serum (or in a negative pool of sera) and again diluted 1/10 in negative milk must give a positive reaction;
OIEELISANSS zředěná 1/10 v negativním mléce musí vždy dávat negativní reakci;
the OIEELISANSS diluted 1/10 in negative milk must always give a negative reaction;
test musí být schopný prokázat infekci u jednotlivého zvířete ze skupiny zvířat, od kterých byly vzorky mléka nebo syrovátky smíchány do směsi.
the test must be adequate to detect evidence of infection in a single animal of the group of animals, of which samples of milk or whey have been pooled.
Podmínky pro použití testů ELISA pro diagnostiku brucelózy skotu:
Conditions for use of the ELISAs for diagnosis of bovine brucellosis:
Při použití podmínek kalibrace pro testy ELISA stanovených v bodech 2.2.2.1 a 2.2.2.2 na vzorcích séra se diagnostická citlivost testu ELISA musí rovnat citlivosti RBT nebo CFT nebo být vyšší s přihlédnutím k epizootologické situaci, za které je test používán.
Using the calibrating conditions for ELISAs set out in point 2.2.2.1 and 2.2.2.2 on serum samples, the diagnostic sensitivity of ELISA shall be equal or greater than the RBT or CFT taking into account the epidemiological situation under which it is employed.
Při použití podmínek kalibrace pro test ELISA stanovených v bodu 2.2.2.3 na směsných vzorcích mléka se diagnostická citlivost testu ELISA musí rovnat citlivosti MRT nebo být vyšší s přihlédnutím nejen k epizootologické situaci, ale také k průměrným nebo vysokým počtům zvířat posuzovaných chovů.
Using the calibrating conditions for ELISA set out in point 2.2.2.3 on pooled milk samples, the diagnostic sensitivity of ELISA shall be equal or greater than the MRT taking into account not only the epidemiological situation but also the average and expected extreme husbandry systems.
Pokud se testy ELISA používají pro účely osvědčování v souladu s čl. 6 odst. 1 nebo pro stanovení a zachování statusu stáda v souladu s přílohou A kapitolou II bodem 10, musí se vkládání vzorků séra do směsi provádět takovým způsobem, aby výsledky testu měly nepochybný vztah k jednotlivému zvířeti zahrnutému ve směsném vzorku.
Where ELISAs are used for certification purposes in accordance with Article 6(1) or for the establishment and maintenance of a herd status in accordance with Annex A(II)(10), pooling of samples of serum must be carried out in such a way that the test results can be undoubtedly related to the individual animal included in the pool.
Případný potvrzovací test se musí provádět na vzorcích séra odebraných od jednotlivých zvířat.
Any confirmatory test must be carried out on samples of serum taken from individual animals.
Testy ELISA mohou být používány na vzorku mléka odebraného z mléka shromážděného z hospodářství s nejméně 30 % dojnic v laktaci.
The ELISAs may be used on a sample of milk taken from the milk collected from a farm with at least 30 % of dairy cows in milk.
Používá-li se uvedená metoda, musí být učiněna opatření pro zajištění toho, aby se vzorky nepochybně vztahovaly k jednotlivým zvířatům, od kterých mléko pochází.
If that method is used, measures must be taken to ensure that the samples taken for examination can be undoubtedly related to the individual animals from which the milk derived.
Test reakce vazby komplementu (CFT)
Complement fixation test (CFT)
Antigen představuje bakteriální suspenzi v solném roztoku s fenolem (NaCl 0,85 % (hmot./obj.) a fenol při 0,5 % (obj./obj.) nebo ve veronalovém pufru.
The antigen represents a bacterial suspension in phenol-saline (NaCl 0,85 % (m/v) and phenol at 0,5 % (v/v)) or in a veronal buffer.
Antigeny mohou být dodávány v koncentrovaném stavu za předpokladu, že faktor ředění, který má být použit, je uveden na etiketě lahvičky.
Antigens may be delivered in the concentrated state provided the dilution factor to be used is indicated on the bottle label.
Musí být skladován při teplotě 4 °C a nesmí zmrznout.
The antigen must be stored at 4 °C and not frozen.
Sérum se musí inaktivovat takto:
Serums must be inactivated as follows:
sérum skotu: 56 až 60 °C po dobu 30 až 50 minut,
bovine serum: 56 to 60 °C for 30 to 50 minutes,
sérum prasat: 60 °C po dobu 30 až 50 minut.
porcine serum: 60 °C for 30 to 50 minutes.
K provedení věrohodné reakce během postupu testu by se měla použít dávka komplementu vyšší, než je minimum potřebné k úplné hemolýze.
In order to carry out the genuine reaction within the test procedure, a complement dose higher than the minimum necessary for total haemolysis shall be used.
Při provádění testu reakce vazby komplementu musí být pokaždé provedeny tyto kontroly:
In carrying out the complement fixation test, the following controls must be made each time:
kontrola antikomplementárního účinku séra;
control of the anti-complementary effect of the serum;
kontrola antigenu;
control of the antigen;
kontrola senzibilizovaných červených krvinek;
control of sensitised red blood cells;
kontrola komplementu;
control of the complement;
kontrola citlivosti na počátku reakce pomocí pozitivního séra;
control using a positive serum of sensitivity at the start of the reaction;
kontrola specifičnosti reakce pomocí negativního séra.
control of the specificity of the reaction using a negative serum.
OIEISS obsahuje 1000 mezinárodních jednotek CFT (ICFTU) na 1 ml.
The OIEISS contains 1000 international CFT units (ICFTU) per ml.
Je-li danou metodou testováno OIEISS, udává se výsledek jako titr (tj. nejvyšší přímé ředění OIEISS, které dá 50 % hemolýzu, TOIEISS).
If the OIEISS is tested in a given method the result is given as a titre (i.e. highest direct dilution of the OIEISS giving 50 % haemolysis, TOIEISS).
Výsledek testu pro testované sérum udaný jako titr (TTESTSERUM) musí být vyjádřen v ICFTU na 1 ml.
The test result for the test serum given as titre (TTESTSERUM) must be expressed in ICFTU per ml.
Za účelem převodu vyjádření titru na ICFTU je možno faktor F nutný k převodu titru neznámého testovaného séra (TTESTSERUM), které se takovou metodou testuje, zjistit ze vzorce:
In order to convert the expression of a titre into ICFTU, the factor (F) necessary to convert a titre of an unknown test serum (TTESTSERUM) tested by that method into the ICFTU expression can be found from the formula:
a obsah mezinárodních jednotek CFT na ml séra v testu (ICFTUTESTSERUM) ze vzorce:
and the content of international CFT units per ml of test serum (ICFTUTESTSERUM) from the formula:
Výklad výsledků
Interpretation of results
Sérum obsahující 20 nebo více ICFTU na 1 ml se považuje za pozitivní.
A serum containing 20 or more ICFTU per ml shall be considered to be positive.
Kroužkový test mléka
Milk ring test (MRT)
Antigen představuje bakteriální suspenzi v solném roztoku s fenolem (NaCl 0,85 % (hmot./obj.) a fenol při 0,5 % (obj./obj.) a je barven hematoxylinem.
The antigen represents a bacterial suspension in phenol-saline (NaCl 0,85 % (m/v) and phenol at 0,5 % (v/v)) stained with haematoxylin.
Citlivost antigenu musí být standardizována ve vztahu k OIEISS takovým způsobem, že antigen vytváří pozitivní reakci s ředěním OIEISS 1/500 v negativním mléce, zatímco ředění 1/1000 musí být negativní.
The antigen sensitivity must be standardised in relation to the OIEISS in such a way that the antigen produces a positive reaction with a 1/500 dilution of the OIEISS in negative milk, while a 1/1000 dilution must be negative.
Kroužkový test musí být proveden na vzorcích představujících obsah každé konve mléka nebo obsah každé ze směsných nádrží z příslušného hospodářství.
The ring test must be made on samples representing the contents of each milk churn or the content of each bulk tank from the farm.
Vzorky mléka nesmí zmrznout, nesmí se zahřát a nesmí být vystaveny silným otřesům.
The milk samples must not have been frozen, heated or subjected to violent shaking.
Reakce se musí uskutečnit použitím jedné z těchto metod:
The reaction must be carried out using one of the following methods:
ve sloupci mléka o výšce nejméně 25 mm a objemu mléka 1 ml, ke kterému bylo přidáno buď 0,03 ml anebo 0,05 ml jednoho ze standardizovaných obarvených antigenů,
on a column of milk of at least 25 mm height and on a volume of milk of 1 ml to which either 0,03 ml or 0,05 ml of one of the standardised stained antigens has been added,
ve sloupci mléka o výšce nejméně 25 mm a objemu mléka 2 ml, ke kterému bylo přidáno 0,05 ml jednoho ze standardizovaných obarvených antigenů,
on a column of milk of at least 25 mm height and on a volume of milk of 2 ml to which 0,05 ml of one of the standardised stained antigens has been added,
v objemu mléka 8 ml, ke kterému bylo přidáno 0,08 ml jednoho ze standardizovaných obarvených antigenů.
on a volume of milk of 8 ml to which 0,08 ml of one of the standardised stained antigens has been added.
Směs mléka a antigenů musí být inkubována při teplotě 37 °C po dobu 60 minut souběžně s pozitivními a negativními pracovními standardy.
The mixture of milk and antigens must be incubated at 37 °C for 60 minutes, together with positive and negative working standards.
Citlivost testu zvyšuje ještě následná inkubace dobu 16 až 24 hodin při teplotě 4 °C.
A subsequent 16- to 24-hours incubation at 4 °C increases the sensitivity of the test.
Výklad výsledků
Interpretation of results:
negativní reakce: mléko zbarvené, smetana nezbarvená;
negative reaction: coloured milk, colourless cream;
pozitivní reakce:
positive reaction:
mléko a smetana mají stejné zbarvení nebo
identically coloured milk and cream, or
mléko nezbarvené a smetana zbarvená.
colourless milk and coloured cream.
Test na brucelózu s pufrovaným brucelovým antigenem (test s bengálskou červení (RBT))
Buffered Brucella antigen test (Rose Bengal test (RBT))
Antigen představuje bakteriální suspenzi v pufrovaném ředidle antigenu Brucelly s pufrem s pH 3,65 ± 0,05 při barvení bengálskou červení.
The antigen represents a bacterial suspension in buffered Brucella antigen diluent at a pH of 3,65 ± 0,05, stained by the use of rose Bengal dye.
Antigen má být dodáván připravený k použití a musí být skladován při teplotě 4 °C a nesmí zmrznout.
The antigen shall be delivered ready for use and must be stored at 4 °C and not frozen.
Antigen má být připraven bez ohledu na koncentraci buněk, avšak jeho citlivost musí být standardizována ve vztahu k OIEISS tak, že antigen vyvolá pozitivní reakci s ředěním séra 1/45 a negativní reakci s ředěním 1/55.
The antigen shall be prepared without reference to the cell concentration, but its sensitivity must be standardised in relation to the OIEISS in such a way that the antigen produces a positive reaction with a serum dilution of 1/45 and a negative reaction with a dilution of 1/55.
Test RBT se provádí tímto způsobem:
The RBT shall be carried out in the following manner:
sérum (20–30 μl) se smíchá se stejným objemem antigenu na bílé dlaždicové plotně nebo emailové plotně tak, aby se vytvořila zóna o průměru přibližně 2 cm.
serum (20-30 μl) is mixed with an equal volume of antigen on a white tile or enamel plate to produce a zone approximately 2 cm in diameter.
Směs se promíchává mírným pohybem po dobu 4 minut při teplotě okolního prostředí a při dobrém osvětlení se pozoruje aglutinace;
The mixture is rocked gently for four minutes at ambient temperature, and then observed in a good light for agglutination;