natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Mnoho testovacích kmenů má řadu vlastností, díky nimž jsou citlivější na detekci mutací, včetně responsivních sekvencí DNA na reverzních místech, zvýšené permeability buněk pro velké molekuly a eliminaci reparačních systémů DNA nebo zlepšení reparačních procesů DNA náchylných k chybám.
Many of the test strains have several features that make them more sensitive for the detection of mutations including responsive DNA sequences at the reversion sites, increased cell permeability to large molecules and elimination of DNA repair systems or enhancement of error-prone DNA repair processes.
Specifičnost testovacích kmenů může poskytnout některé užitečné informace o typech mutací, jež jsou indukovány genotoxickými činiteli.
The specificity of the test strains can provide some useful information on the types of mutations that are induced by genotoxic agents.
Pro zkoušky na reverzní mutací s bakteriemi je k dispozici velmi rozsáhlá databáze výsledků pro širokou škálu struktur a dále byly vyvinuty dobře vyzkoušené metody zkoušení chemických látek, včetně těkavých sloučenin, s různými fyzikálně-chemickými vlastnostmi.
A very large data base of results for a wide variety of structures is available for bacterial reverse mutation tests and well-established methodologies have been developed for testing chemicals with different physico-chemical properties, including volatile compounds.
Zkouška na reverzní mutace: s bakteriemi Salmonella typhimurium nebo Escherichia coli slouží k detekci mutací v kmeni vyžadujícím aminokyseliny (histidin resp. tryptofan), přičemž vzniká kmen nezávislý na vnějším přísunu aminokyseliny.
A reverse mutation test in either Salmonella typhimurium or Escherichia coli detects mutation in an amino-acid requiring strain (histidine or tryptophan, respectively) to produce a strain independent of an outside supply of amino-acid.
Mutageny substituce párů bází: činitele, jež způsobují změny v bázích DNA.
Base pair substitution mutagens are agents that cause a base change in DNA.
Při zkoušce reverzních mutací se mohou tyto změny vyskytnout na místě původní mutace nebo jiném místě bakteriálního genomu.
In a reversion test this change may occur at the site of the original mutation, or at a second site in the bacterial genome.
Posunové mutageny: činitele, jež způsobují adici nebo deleci jednoho nebo více párů bází DNA a posunují tak čtecí rámec RNA.
Frameshift mutagens are agents that cause the addition or deletion of one or more base pairs in the DNA, thus changing the reading frame in the RNA.
VÝCHOZÍ ÚVAHY
INITIAL CONSIDERATIONS
Při zkouškách na reverzní mutace s bakteriemi se využívají prokaryotické buňky, které se liší od buněk savců faktory, jako jsou příjem, metabolismus, chromozomová struktura a reparační procesy DNA.
The bacterial reverse mutation test utilises prokaryotic cells, which differ from mammalian cells in such factors as uptake, metabolism, chromosome structure and DNA repair processes.
Metabolické aktivační systémy in vitro nemohou zcela napodobit podmínky in vivo u savců.
In vitro metabolic activation systems cannot mimic entirely the mammalian in vivo conditions.
Zkouška tedy neposkytuje přímou informaci o mutagenním a karcinogenním potenciálu látky pro savce.
The test therefore does not provide direct information on the mutagenic and carcinogenic potency of a substance in mammals.
Zkouška na reverzní mutace s bakteriemi je zpravidla využívána pro počáteční vyšetření genotoxické aktivity, a zejména aktivity vyvolávající bodové mutace.
The bacterial reverse mutation test is commonly employed as an initial screen for genotoxic activity and, in particular, for point mutation-inducing activity.
Z rozsáhlé databáze vyplývá, že mnoho chemických látek, které jsou v této zkoušce pozitivní, vykazuje mutagenní aktivitu i v jiných zkouškách.
An extensive database has demonstrated that many chemicals that are positive in this test also exhibit mutagenic activity in other tests.
Existují příklady mutagenních činitelů, které nejsou detekovány touto zkouškou. Příčiny těchto skutečností lze spatřovat ve specifické povaze detekovaného konečného jevu, v rozdílech v metabolické aktivaci nebo v rozdílech v biologické dostupnosti.
There are examples of mutagenic agents, which are not detected by this test; reasons for these shortcomings can be ascribed to the specific nature of the endpoint detected, differences in metabolic activation, or differences in bioavailability.
Na druhé straně faktory, které zvyšují citlivost zkoušky na reverzní mutace na bakteriích, mohou vést k nadhodnocení mutagenní aktivity.
On the other hand, factors, which enhance the sensitivity of the bacterial reverse mutation test can lead to an overestimation of mutagenic activity.
Zkouška na reverzní mutace s bakteriemi nemusí být vhodná pro určité třídy chemických látek, například vysoce baktericidní sloučeniny (např. určitá antibiotika) a pro chemické látky, o nichž se předpokládá (nebo o nichž se ví), že specificky zasahují do replikačního systému buněk savců (např. některé inhibitory topoisomerasy a některé analogy nukleosidů).
The bacterial reverse mutation test may not be appropriate for the evaluation of certain classes of chemicals, for example highly bactericidal compounds (e.g. certain antibiotics) and those which are thought (or known) to interfere specifically with the mammalian cell replication system (e.g. some topoisomerase inhibitors and some nucleoside analogues).
V takových případech mohou být vhodnější zkoušky mutagenity u savců.
In such cases, mammalian mutation tests may be more appropriate.
Přestože mnoho sloučenin, pro něž je tato zkouška pozitivní, je karcinogenní pro savce, není korelace absolutní.
Although many compounds that are positive in this test are mammalian carcinogens, the correlation is not absolute.
Závisí na chemické třídě a existuje mnoho karcinogenů, jež nejsou detekovány touto zkouškou, neboť působí jinými, negenotoxickými mechanismy, nebo mechanismy, které v bakteriálních buňkách neexistují.
It is dependent on chemical class and there are carcinogens that are not detected by this test because they act through other, non-genotoxic, mechanisms or mechanisms absent in bacterial cells.
Suspenze bakteriálních buněk jsou vystaveny zkoušené látce, a to za přítomnosti vnějšího metabolického aktivačního systému a bez něho.
Suspensions of bacterial cells are exposed to the test substance in the presence and in the absence of an exogenous metabolic activation system.
Ve standardním miskovém testu se suspenze smíchají s vrchním agarem a ihned se nanesou na minimální půdu.
In the plate incorporation method, these suspensions are mixed with an overlay agar and plated immediately onto minimal medium.
V preinkubační metodě se zkoušená směs inkubuje a poté se před nanesením na minimální půdu smíchá s vrchním agarem.
In the preincubation method, the treatment mixture is incubated and then mixed with an overlay agar before plating onto minimal medium.
Při obou technikách se po dvou nebo třech dnech inkubace spočítají kolonie revertantů a provede se srovnání s počtem kolonií spontánních revertantů na kontrolní misce s rozpouštědlem.
For both techniques, after two or three days of incubation, revertant colonies are counted and compared to the number of spontaneous revertant colonies on solvent control plates.
Je popsáno několik postupů provedení zkoušky na reverzní mutace s bakteriemi.
Several procedures for performing the bacterial reverse mutation test have been described.
Mezi běžně používané patří standardní miskový test (1, 2, 3, 4), preinkubační metoda (2, 3, 5, 6, 7, 8), fluktuační test (9, 10) a suspenzní metoda (11).
Among those commonly used are the plate incorporation method (1)(2)(3)(4), the preincubation method (2)(3)(5)(6)(7)(8), the fluctuation method (9)(10), and the suspension method (11).
Metody pro zkoušení plynů a par jsou popsány (12).
Modifications for the testing of gases or vapours have been described (12).
Zde popsané postupy se týkají hlavně standardního miskového testu a preinkubačních metod.
The procedures described in the method pertain primarily to the plate incorporation and preincubation methods.
Každá z nich je přijatelná pro provádění experimentů jak s metabolickou aktivací, tak bez ní.
Either of them is acceptable for conducting experiments both with and without metabolic activation.
Některé látky lze účinněji detekovat za použití preinkubační metody.
Some substances may be detected more efficiently using the preincubation method.
Tyto látky patří do chemických tříd, do nichž patří mezi jiným krátké alifatické nitrosaminy, dvojvazné kovy, aldehydy, azobarviva a diazoniové sloučeniny, pyrrolizidinové alkaloidy, allylové sloučeniny a nitrosloučeniny (3).
These substances belong to chemical classes that include short chain aliphatic nitrosamines, divalent metals, aldehydes, azo-dyes and diazo compounds, pyrollizidine alkaloids, allyl compounds and nitro compounds (3).
Přitom se připouští, že určité třídy mutagenů nelze vždy detekovat standardními postupy, jako je standardní miskový test nebo preinkubační metoda.
It is also recognised that certain classes of mutagens are not always detected using standard procedures such as the plate incorporation method or preincubation method.
Měly by být považovány za „zvláštní případy“ a k jejich detekci se důrazně doporučuje použít alternativní postupy.
These should be regarded as ‘special cases’ and it is strongly recommended that alternative procedures should be used for their detection.
Je možné identifikovat tyto „zvláštní případy“ (společně s příklady postupů jejich detekce): azobarviva a diazoniové sloučeniny (3, 5, 6, 13), plyny a těkavé chemické látky (12, 14, 15, 16) a glykosidy (17, 18).
The following ‘special cases’ could be identified (together with examples of procedures that could be used for their detection): azo-dyes and diazo compounds (3)(5)(6)(13), gases and volatile chemicals (12)(14)(15)(16) and glycosides (17)(18).
Odchylka od standardního postupu musí být vědecky zdůvodněna.
A deviation from the standard procedure needs to be scientifically justified.
Čerstvé kultury bakterií by měly být kultivovány do pozdní exponenciální fáze nebo do časné stacionární fáze růstu (přibližně 109 buněk na ml).
Fresh cultures of bacteria should be grown up to the late exponential or early stationary phase of growth (approximately 109 cells per ml).
Buňky v pozdní stacionární fázi by neměly být použity.
Cultures in late stationary phase should not be used.
Je důležité, aby měly použité bakterie vysoký titr životaschopných bakterií.
It is essential that the cultures used in the experiment contain a high titre of viable bacteria.
Titr může být prokázán buď na základě dosavadních kontrolních údajů o růstové křivce, nebo pro každou zkoušku stanovením počtu životaschopných buněk na miskách.
The titre may be demonstrated either from historical control data on growth curves, or in each assay through the determination of viable cell numbers by a plating experiment.
Doporučená inkubační teplota je 37 oC.
The recommended incubation temperature is 37 oC.
Mělo by být použito alespoň pět kmenů bakterií.
At least five strains of bacteria should be used.
Mezi nimi by měly být čtyři kmeny S. typhimurium (TA 1535; TA 1537 nebo TA97a nebo TA97; TA98; TA100), jejichž odpověď se ukázala v různých laboratořích jako spolehlivá a reprodukovatelná.
These should include four strains of S. typhimurium (TA 1535; TA 1537 or TA97a or TA97; TA98; and TA100) that have been shown to be reliable and reproducibly responsive between laboratories.
Tyto čtyři kmeny S. typhimurium mají pár bází GC na primárním reverzním místě a je známo, že jejich prostřednictvím nelze detekovat určité oxidační mutageny, činitele způsobující překřížení vláken DNA a hydraziny.
These four S. typhimurium strains have GC base pairs at the primary reversion site and it is known that may not detect certain oxidising mutagens, cross-linking agents and hydrazines.
Tyto látky mohou být detekovány kmeny E. coli WP2 strains nebo S. typhimurium TA102 (19), které mají na primárním reverzním místě pár bází AT.
Such substances may be detected by E. coli WP2 strains or S. typhimurium TA102 (19), which have an AT base pair at the primary reversion site.
Doporučená kombinace kmenů je tedy tato:
Therefore the recommended combination of strains is:
typhimurium TA1535,
typhimurium TA1535, and
typhimurium TA1537 nebo TA97 nebo TA97a,
typhimurium TA1537 or TA97 or TA97a, and
typhimurium TA98,
typhimurium TA98, and
typhimurium TA100 a
typhimurium TA100, and
coli WP2 uvrA, nebo E. coli WP2 uvrA (pKM101), nebo S. typhimurium TA102.
coli WP2 uvrA, or E. coli WP2 uvrA (pKM101), or S. typhimurium TA102.
Pro detekci mutagenů způsobujících překřížení vláken DNA může být vhodnější zařadit TA102 nebo přidat kmen E. coli (např. E. coli WP2 nebo E. coli WP2 (pKM101)).
In order to detect cross-linking mutagens it may be preferable to include TA102 or to add a DNA repair-proficient strain of E. coli [e.g. E. coli WP2 or E. coli WP2 (pKM101)]
Měly by být použity zavedené postupy přípravy kmenové kultury, verifikace markeru a skladování.
Established procedures for stock culture preparation, marker verification and storage should be used.
Potřeba aminokyseliny pro růst by měla být prokázána pro každou zmrazenou kmenovou kulturu (histidin pro kmeny S. typhimurium a tryptofan pro E. coli).
The amino-acid requirement for growth should be demonstrated for each frozen stock culture preparation (histidine for S. typhimurium strains, and tryptophan for E. coli strains).
Podobně by měly být kontrolovány jiné fenotypové charakteristiky, jmenovitě podle potřeby přítomnost nebo nepřítomnost R-faktoru plasmidů (tj. ampicilinová rezistence u kmenů TA98, TA100 a TA97a nebo TA97, WP2 uvrA a WP2 uvrA (pKM101) a ampicilinová a tetracyklinová rezistence u kmene TA102); přítomnost charakteristických mutací (tj. rfa mutací u S. typhimurium citlivostí na krystalovou violeť a uvrA mutace u E. coli nebo uvrB mutací u S. typhimurium, citlivostí na ultrafialové světlo) (2)(3).
Other phenotypic characteristics should be similarly checked, namely: the presence or absence of R-factor plasmids where appropriate [i.e. ampicillin resistance in strains TA98, TA100 and TA97a or TA97, WP2 uvrA and WP2 uvrA (pKM101), and ampicillin + tetracycline resistance in strain TA102]; the presence of characteristic mutations (i.e. rfa mutation in S. typhimurium through sensitivity to crystal violet, and uvrA mutation in E. coli or uvrB mutation in S. typhimurium, through sensitivity to ultraviolet light) (2)(3).
Kmeny by měly rovněž dávat počty kolonií spontánních revertantů na misce v rozmezí četností očekávaných na základě dosavadních údajů laboratorních kontrol a nejlépe v rozmezí uvedeném v literatuře.
The strains should also yield spontaneous revertant colony plate counts within the frequency ranges expected from the laboratory's historical control data and preferably within the range reported in the literature.
Médium
Medium
Použije se vhodný minimální agar (např. obsahující minimální půdu E (Vogel-Bonner) a glukosu) a vrchní agar obsahující histidin a biotin nebo tryptofan umožňující několik buněčných dělení (1, 2, 9).
An appropriate minimal agar (e.g. containing Vogel-Bonner minimal medium E and glucose), and an overlay agar containing histidine and biotin or tryptophan to allow for a few cell divisions, is used (1)(2)(9).
Bakterie by měly být vystaveny zkoušené látce, a to s vhodným systémem metabolické aktivace a bez něho.
Bacteria should be exposed to the test substance both in the presence and absence of an appropriate metabolic activation system.
Nejčastěji používaným systémem je kofaktorem doplněná postmitochondriální frakce (S9) připravená z jater hlodavců ošetřených prostředkem indukujícím enzymy, jako je Aroclor 1254 (1, 2) nebo fenobarbitonu a β-naftoflavonu (18, 20, 21).
The most commonly used system is a cofactor-supplemented post-mitochondrial fraction (S9) prepared from the livers of rodents treated with enzyme-inducing agents such as Aroclor 1254 (1)(2) or a combination of Phenobarbitone and ß-naphthoflavone (18)(20)(21).
Postmitochondriální frakce je obvykle používána v koncentracích v rozmezí 5 až 30 % obj. ve směsi S9.
The post-mitochondrial fraction is usually used at concentrations in the range from 5 to 30 % v/v in the S9-mix.
Volba a podmínky metabolického aktivačního systému může záviset na třídě zkoušené chemické látky.
The choice and condition of a metabolic activation system may depend upon the class of chemical being tested.
V některých případech může být vhodné použít více než jednu koncentraci postmitochondriální frakce.
In some cases, it may be appropriate to utilise more than one concentration of post-mitochondrial fraction.
U azobarviv a diazoniových sloučenin může být vhodnější použití redukčního metabolického aktivačního systému (6, 13).
For azo-dyes and diazo-compounds, using a reductive metabolic activation system may be more appropriate (6)(13).
Pevné zkoušené látky by měly být před aplikací na bakterie rozpuštěny nebo suspendovány ve vhodných rozpouštědlech nebo vehikulech a popřípadě zředěny.
Solid test substances should be dissolved or suspended in appropriate solvents or vehicles and diluted if appropriate prior to treatment of the bacteria.
Měly by být použity čerstvě připravené zkoušené chemické látky, pokud údaje o stálosti neprokazují možnost skladování.
Fresh preparations should be employed unless stability data demonstrate the acceptability of storage.
Rozpouštědlo/vehikulum by mělo být mimo podezření, že reaguje se zkoušenou látkou, a mělo by být slučitelné s přežitím bakterií a s aktivitou S9 (22).
The solvent/vehicle should not be suspected of chemical reaction with the test substance and should be compatible with the survival of the bacteria and the S9 activity (22).
Zkušební kmeny (viz 1.5.1.1)
Test strains (see 1.5.1.1)
Mezi kritéria, která mají být zohledněna při stanovení nejvyššího množství zkoušené látky patří cytotoxicita a rozpustnost v konečné směsi pro aplikaci.
Amongst the criteria to be taken into consideration when determining the highest amount of the test substance to be used are the cytotoxicity and the solubility in the final treatment mixture.
Může být užitečné stanovit toxicitu a nerozpustnost v předběžných experimentech.
It may be useful to determine toxicity and insolubility in a preliminary experiment.
Cytotoxicita může být detekována snížením počtu kolonií revertantů, vymizením nebo zeslabením bakteriálního podkladu nebo snížením stupně přežití exponovaných kultur.
Cytotoxicity may be detected by a reduction in the number of revertant colonies, a clearing or diminution of the background lawn, or the degree of survival of treated cultures.
Cytotoxicita látky se může změnit v přítomnosti metabolických aktivačních systémů.
The cytotoxicity of a substance may be altered in the presence of metabolic activation systems.
Nerozpustnost by měla být posouzena na základě viditelného srážení v konečné směsi za skutečných zkušebních podmínek.
Insolubility should be assessed as precipitation in the final mixture under the actual test conditions and evident to the unaided eye.
Doporučená maximální zkušební koncentrace pro rozpustné necytotoxické látky je 5 mg/misku nebo 5 μl/misku.
The recommended maximum test concentration for soluble non-cytotoxic substances is 5 mg/plate or 5 μl/plate.
U necytotoxických látek nerozpustných při koncentracích 5 mg/misku nebo 5 μl/misku by měla být jedna nebo více zkušebních koncentrací takových, aby látky byly v konečné směsi pro aplikaci nerozpustné.
For non-cytotoxic substances that are not soluble at 5 mg/plate or 5 μl/plate, one or more concentrations tested should be insoluble in the final treatment mixture.
Zkoušené látky, které jsou cytotoxické již při koncentracích nižších než 5 mg/misku nebo 5 μl/misku, by měly být zkoušeny až do cytotoxické koncentrace.
Test substances that are cytotoxic already below 5 mg/plate or 5 μl/plate should be tested up to a cytotoxic concentration.
Mělo by být použito alespoň pět různých analyzovatelných koncentrací zkoušené látky, přičemž při prvním experimentu by měly být intervaly mezi zkušebními body rovny přibližně polovině dílku logaritmické stupnice (tj. √10).
At least five different analysable concentrations of the test substance should be used with approximately half log (i.e. √10) intervals between test points for an initial experiment.
Menší intervaly jsou vhodné v případě, kdy se vyšetřuje křivka závislosti odpovědi na koncentraci.
Smaller intervals may be appropriate when a concentration-response is being investigated.
Zkoušení koncentrací vyšších než 5 mg/misku nebo 5 μl/misku může být zváženo při hodnocení látek obsahujících významné množství potenciálně mutagenních nečistot.
Testing above the concentration of 5 mg/plate or 5 μl/plate may be considered when evaluating substances containing substantial amounts of potentially mutagenic impurities.
Součástí každého stanovení by měly být kmenově specifické pozitivní a negativní (rozpouštědlo nebo vehikulum) kontroly s metabolickou aktivací a bez ní.
Concurrent strain-specific positive and negative (solvent or vehicle) controls, both with and without metabolic activation, should be included in each assay.
Pro pozitivní kontrolu by měly být vybrány koncentrace dokládající účinnost každé zkoušky.
Positive control concentrations that demonstrate the effective performance of each assay should be selected.
V případě zkoušek s použitím metabolického aktivačního systému by měla být látka(látky) pro pozitivní kontrolu vybrána(vybrány) na základě typu použitého kmene bakterií.
For assays employing a metabolic activation system, the positive control reference substance(s) should be selected on the basis of the type of bacteria strains used.
Příkladem vhodné pozitivní kontroly u zkoušky s metabolickou aktivací jsou tyto látky: Látka
The following substances are examples of suitable positive controls for assays with metabolic activation:
Číslo CAS
CA numbers
Kmen
Names
7,12-dimethylbenzo[a]anthracen
9,10-dimethylanthracene
benzo[a]pyren
7,12-dimethylbenz[a]anthracene
210-330-9 cyklofosfamid
2-aminoanthracene
cyklofosfamid monohydrát
cyclophosphamide
Tato látka je vhodnou pozitivní kontrolou pro metodu redukční metabolické aktivace: Látka
The following substance is a suitable positive control for the reductive metabolic activation method:
2-aminoanthracen by neměl být použit jako jediný indikátor účinnosti směsi S9.
2-Aminoanthracene should not be used as the sole indicator of the efficacy of the S9-mix.
Při použití 2-aminoanthracenu by měla být každá šarže S9 charakterizována mutagenem, který vyžaduje metabolickou aktivaci mikrosomálními enzymy, například benzo[a]pyren nebo 7,12-dimethylbenzo[a]anthracen.
If 2-aminoanthracene is used, each batch of S9 should also be characterised with a mutagen that requires metabolic activation by microsomal enzymes, e.g. benzo[a]pyrene, dimethylbenzanthracene.
Příkladem kmenověspecifické pozitivní kontroly u zkoušky bez vnější metabolické aktivace jsou tyto látky: Látka
The following substances are examples of strain-specific positive controls for assays performed without exogenous metabolic activation system:
azid sodný
Strain
a TA100
Sodium azide
2-nitrofluoren
TA 1535 and TA 100
TA1537, TA97 a TA97a
9-aminoacridine
kumenhydroperoxid
TA 1537, TA 97 and TA 97a
TA1537, TA97 a TA97a
ICR 191
a TA102
Mitomycin C
1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidin
uvrA and TA102
WP2, WP2 uvrA a WP2 uvrA (pKM101)
N-ethyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine
α[(5-nitro-2-furyl)methyliden]furan-2-acetamid (AF2)
WP2, WP2uvrA and WP2uvrA(pKM101)
WP2, WP2 uvrA a WP2 uvrA (pKM101)
4-nitroquinoline-1-oxide
kmeny obsahující plasmidy
plasmid-containing strains
Pro pozitivní kontrolu mohou být použity jiné vhodné referenční látky.
Other appropriate positive control reference substances may be used.
Měly by být použity negativní kontroly skládající se ze samotného rozpouštědla nebo vehikula, bez zkoušené látky, zpracované jinak stejným způsobem jako exponované skupiny.
Negative controls, consisting of solvent or vehicle alone, without test substance, and otherwise treated in the same way as the treatment groups, should be included.