natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Zjišťování kravského mléka v sýrech vyrobených z ovčího mléka, kozího mléka, buvolího mléka nebo ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka se provádí prostřednictvím γ3- a γ2-kaseinů, jejichž izoelektrické body se nacházejí v rozmezí mezi pH 6,5 a pH 7,5 (obrázky 4a, b, obrázek 5).
Detection of cows’ milk in cheeses from ewes’ milk, goats’ milk and buffalos’ milk and mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk is done via the γ3- and γ2-caseins, whose isoelectric points range between pH 6,5 and pH 7,5 (Figures 4 a, b, Figure 5).
Detekční mez je nižší než 0,5 %.
The detection limit is less than 0,5 %.
Vizuální hodnocení
Visual estimation
Pro vizuální hodnocení množství kravského mléka se doporučuje upravit koncentraci vzorků a referenčních standardů s cílem dosáhnout u hovězích, kozích a/nebo buvolích γ2- a γ3-kaseinů (viz „γ2 E, G, B“ a „γ3 E, G, B“ na obrázcích 4a, b a obrázku 5) stejné úrovně intenzity.
For visual evaluation of the amount of bovine milk it is advisable to adjust the concentrations of samples and standards to obtain the same level of intensity of the ovine, caprine and/or buffalo γ2- and γ3-caseins (see ‘γ2 E,G,B’ and ‘γ3 E,G,B’ in Figures 4 a, b and Figure 5).
Pouze za těchto podmínek lze přímo posoudit množství kravského mléka (menší nebo větší než 1 % nebo ve výši 1 %) v analyzovaném vzorku porovnáním intenzity hovězích γ3- a γ2-kaseinů (viz „γ3 C“ a „γ2 C“ na obrázcích 4a, b a obrázku 5) s intenzitami kaseinů v referenčních standardech s obsahy 0 % a 1 % (ovčích, kozích), nebo prozatímních laboratorních standardech (buvolích).
After which the amount of bovine milk (less than, equal to or greater than 1 %) in the unknown sample can be judged directly by comparing the intensity of the bovine γ3- and γ2-caseins (see ‘γ3 C’ and ‘γ2 C’ in Figures 4a, b and Figure 5) to those of the 0 % and 1 % reference standards (ewe, goat) or, laboratory interim-standards (buffalo).
Denzitometrické hodnocení
Densitometric estimation
Pokud je to možné, použijte pro stanovení poměru mezi plochami píků hovězích γ2- a γ3-kaseinů a plochami píků ovčích, kozích a/nebo buvolích γ2- a γ3-kaseinů (viz obrázek 5) denzitometrii (5.19).
If available, apply densitometry (5.19) for the determination of the peak area ratio of bovine to ovine, caprine and/or buffalo γ2- and γ3-caseins (see Figure 5).
Tuto hodnotu porovnejte s poměrem ploch píků γ2- a γ3-kaseinů v 1 % referenčním standardu (ovčím, kozím) nebo prozatímním laboratorním standardu (buvolím) analyzovaných u téhož gelu.
Compare this value to γ2- and γ3-casein peak area ratio of the 1 % reference standard (ewe, goat) or laboratory interim-standard (buffalo) analysed on the same gel.
Poznámka: Tato metoda funguje uspokojivě, pokud existuje jasný pozitivní signál obou hovězích γ2- a γ3-kaseinů v 1 % referenčním standardu, avšak nikoli v 0 % referenčním standardu.
Note: The method is operating satisfactorily, if there is a clear positive signal for both bovine γ2- and γ3-caseins in the 1 % reference standard but not in the 0 % reference standard.
V opačném případě je nutné postup optimalizovat při přesném dodržení pokynů stanovených v dané metodě.
If not, optimize the procedure following the details of the method precisely.
Vzorek je považován za pozitivní, jestliže hodnoty obou hovězích γ2- a γ3-kaseinů nebo příslušných poměrů ploch píků jsou stejné nebo větší než hodnoty odpovídající 1 % referenčnímu standardu.
A sample is judged as being positive, if both bovine γ2- and γ3-caseins or the corresponding peak area ratios are equal to or greater than the level of the 1 % reference standard.
Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).
Milchwissenschaft 45, 708-711 (1990).
Addeo F., Nicolai M. A., Chianese L., Moio L., Spagna Musso S., Bocca A., Del Giovine L.: A control method to detect bovine milk in ewe and water buffalo cheese using immunoblotting.
Addeo F., Nicolai M.A., Chianese L., Moio L., Spagna Musso S., Bocca A., Del Giovine L.: A control method to detect bovine milk in ewe and water buffalo cheese using immunoblotting.
Milchwissenschaft 50, 83–85 (1995).
Milchwissenschaft 50, 83-85 (1995).
Krause I., Berner I, Klostermeyer H.: Sensitive detection of cow milk in ewe and goat milk and cheese by carrier ampholyte – and carrier ampholyte/immobilized pH gradient – isoelectric focusing of γ-caseins using plasmin as signal amplifier. in: Electrophoresis-Forum 89 (B. J. Radola, ed.) pp. 389–393, Bode-Verlag, München (1989).
Krause I., Berner I, Klostermeyer H.: Sensitive detection of cow milk in ewe and goat milk and cheese by carrier ampholyte — and carrier ampholyte/immobilized pH gradient — isoelectric focusing of γ-caseins using plasmin as signal amplifier. in: Electrophoresis-Forum 89 (B. J. Radola, ed.) pp 389-393, Bode-Verlag, München (1989).
Krause Ι., Belitz H.–D., Kaiser K.–P.: Nachweis von Kuhmilch in Schaf und Ziegenmilch bzw.
Krause Ι., Belitz H.-D., Kaiser K.-P.: Nachweis von Kuhmilch in Schaf and Ziegenmilch bzw.
-käse durch isoelektrische Fokussierung in harnstoffhaltigen Polyacrylamidgelen.
–käse durch isoelektrische Fokussierung in harnstoffhaltigen Polyacrylamidgelen.
Radola B. J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50–100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films.
Radola B.J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50-100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films.
Electrophoresis 1, 43–56 (1980).
Electrophoresis 1, 43-56 (1980).
Schematický výkres krycí fólie
Schematic drawing of the covering sheet
Distanční páska
Spacer tape
Polyesterová fólie
Polyester sheet
Kaseinová vrstva plovoucí mezi vodnou a organickou fází po odstředění
Casein layer floating between aqueous and organic phases after centrifugation
Vodná fáze
H2O-Phase
Methylenchloridová fáze
CH2Cl2-Phase
Sklápěcí technika pro odlévání ultratenkých polyakrylamidových gelů
Flapping technique for casting of ultrathin polyacrylamide gels
a = distanční páska (0,25 mm); b = krycí fólie (5.3); c, e = skleněné desky (5.1); d = gelový roztok (4.1.2); f = nosná fólie gelu (5.2)
a = spacer tape (0,25 mm); b = covering sheet (5.3); c, e = glass plates (5.1); d = gel solution (4.1.2); f = gel carrier sheet (5.2)
Obrázek 4
Figure 4a
Izoelektrická fokusace kaseinů ze sýrů z ovčího a kozího mléka, ošetřených plasminem, s různým obsahem kravského mléka
Isoelectric focusing of plasmin-treated caseins from ewes’ and goats’ milk cheese containing different amounts of cows’ milk.
% CM = procento kravského mléka, C = kravské, E = ovčí, G = kozí
% CM = percentage of cows’ milk, C = cow, E = ewe, G = goat
Na obrázku je znázorněna horní polovina gelu IEF.
Upper half of the IEF gel is shown.
Obrázek 4b
Figure 4b
Izoelektrická fokusace kaseinů ze sýrů vyrobených ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka, ošetřených plasminem, s různým obsahem kravského mléka
Isoelectric focusing of plasmin treated caseins from cheese made from mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk containing different amounts of cows’ milk.
% CM = procento kravského mléka; 1+ = vzorek s obsahem 1 % kravského mléka a s přídavkem čistého hovězího kaseinu ve středu dráhy.
% CM = percentage of cows’ milk; 1 + = sample containing 1 % of cows’ milk and spiked with pure bovine casein at the middle of the track.
C = kravské, E = ovčí, G = kozí, B = buvolí
C = cow, E = ewe, G = goat, B = buffalo.
Na obrázku je znázorněna celá separační vzdálenost gelu IEF.
Total separation distance of the IEF gel is shown.
Superpozice denzitogramů referenčních standardů (STD) a vzorků sýra vyrobeného ze směsi ovčího a kozího mléka, po izoelektrické fokusaci
Superposition of densitograms of standards (STD) and cheese samples made from a mixture of ewes’ and goats’ milk after isoelectric focusing
a, b = referenční standardy obsahující 0 a 1 % kravského mléka; c–g = vzorky sýra obsahujícího 0, 1, 2, 3 a 7 % kravského mléka.
a,b = standards containing 0 and 1 % of cows’ milk; c-g = cheese samples containing 0, 1, 2, 3 and 7 % of cows’ milk.
C = kravské, E = ovčí, G = kozí.
C = cow, E = ewe, G = goat.
Byla snímána horní polovina gelu IEF při λ = 634 nm.
Upper half of the IEF gel was scanned at λ = 634 nm.
Jako zvláště vhodné pro dosažení žádoucího rozdělení γ-kaseinů se ukázaly výrobky Ampholine® pH 3,5–9,5 (Pharmacia) a Resolyte® pH 5–7 a pH 6–8 (BDH, Merck).
The produce Ampholine® pH 3,5-9,5 (Pharmacia) and Resolyte® pH 5-7 and pH 6-8 (BDH, Merck) have proved particularly suitable for obtaining the required separation of γ-caseins.
Použití vzorku: Po předběžné fokusaci (krok 1) pipetou odměřte 18 µl vzorku a standardních roztoků do aplikátorů vzorku (10 × 5 mm), vložte na gel ve vzdálenosti 1 mm od sebe a 5 mm podélně od anody a jemně přitlačte.
Sample application: After pre-focusing (step 1), pipette 18 μl of the sample and standard solutions onto the sample applicators (10 × 5 mm), place them on the gel at 1 mm intervals from each other and 5 mm longitudinally from the anode and press lightly.
Fokusaci proveďte za výše uvedených podmínek a aplikátory vzorku opatrně vyjměte po 60 minutách fokusace vzorku.
Carry out focusing using the above conditions, carefully removing the sample applicators after the 60 minutes of sample focusing.
(Článek 7)
(Article 7)
REFERENČNÍ METODA PRO ZJIŠŤOVÁNÍ KOLIFORMNÍCH BAKTERIÍ V MÁSLE, SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE, KASEINU A KASEINÁTECH
REFERENCE METHOD FOR DETECTING COLIFORMS IN BUTTER, SKIMMED-MILK POWDER, CASEIN AND CASEINATES
PŘÍPRAVA VZORKŮ
PREPARATION OF SAMPLES
Norma ISO 8261.
ISO standard 8261
Norma ISO 4831.
ISO standard 4831
Do kultivační půdy se naočkují vzorky odpovídající 1g másla nebo 0,1g sušeného odstředěného mléka nebo kaseinu/kaseinátů.
Samples corresponding to 1 g of butter or 0,1 g of skimmed-milk powder or casein/caseinates are inoculated in the culture medium.
Pro každý vzorek se naočkují tři zkumavky.
Three tubes are inoculated per sample.
Jestliže 3 zkumavky dají 3 negativní výsledky, je výsledek „vyhovující“.
If the 3 tubes produce 3 negative results, the result is ‘compliant’
Jestliže 3 zkumavky dají 2 nebo 3 pozitivní výsledky, je výsledek „nevyhovující“.
If the 3 tubes produce 2 or 3 positive results, the result is ‘non-compliant’
Jestliže 3 zkumavky dají 2 negativní výsledky, provede se analýza dvakrát znovu (se dvěma zkumavkami).
If the 3 tubes produce 2 negative results, the analysis is redone twice (with two tubes)
Jestliže jsou oba výsledky negativní, je výsledek „vyhovující“.
If the 2 results are negative, the result is ‘compliant’
Je-li alespoň jeden výsledek pozitivní, je výsledek „nevyhovující“.
If at least 1 result is positive, the result is ‘non-compliant’.
(Článek 8)
(Article 8)
STANOVENÍ LAKTÓZY V KRMNÝCH SMĚSÍCH
DETERMINATION OF LACTOSE IN COMPOUND FEEDINGSTUFFS
Stanovení laktózy v krmných směsích.
Determination of lactose in compound feedingstuffs.
Obsah laktózy je definován jako hmotnostní procento stanovené popsaným postupem.
The content of lactose is defined as the percentage by mass as determined by the procedure described.
Obsah bezvodé laktózy se vyjadřuje v g na 100 g.
The anhydrous lactose content is expressed as g per 100 g.
Krmnou směs rekonstituujte s vodou.
The compound feedingstuff is reconstituted with water.
Do zředěného odváženého alikvotního dílu přidejte roztok podle Biggse, aby se z krmné směsi vysrážela tuková a bílkovinná frakce.
A ‘Biggs’ solution is added to a dilute weighed aliquot to precipitate out the fat and the protein component fractions of the compound feedingstuff.
Vzorek přefiltrujte (nebo odstřeďte) a filtrát (nebo supernatant) nastříkněte na katexovou HPLC kolonu v olovnaté formě, přičemž jako mobilní fázi použijte vodu čistoty pro HPLC.
The sample is filtered (or centrifuged) and the filtrate (or supernatant) is injected on a cation exchange HPLC column in the lead form using HPLC grade water as the mobile phase.
Vymytou laktózu zjistěte diferenčním refraktometrem.
The eluted lactose is detected by a differential refractometer.
Není-li stanoveno jinak, používejte pouze chemikálie čistoty p.a. a odplyněnou vodu čistoty pro HPLC.
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and degassed HPLC grade water.
D-laktóza-monohydrát ((C12H22)O11. H2O) může pohlcovat další vlhkost.
D-Lactose monohydrate ((C12H22)O11H2O) can take up additional moisture.
Před použitím stanovte skutečný obsah vody Karl-Fisherovou metodou, nebo nadbytečnou vlhkost odstraňte umístěním laktózy do pece zahřáté na 105 °C po dobu 8 hodin (tímto postupem laktóza neztrácí krystalickou vodu).
Before use measure the real amount of water by Karl-Fisher or remove the additional moisture by placing lactose in an oven at 105 °C for 8 hours (the lactose does not lose its crystal water by this treatment).
Koncentrovaný roztok podle Biggse/Szijarta
Concentrated Biggs/Szijarto solution
V odměrné baňce na 100 ml rozpusťte v asi 70 ml vody čistoty pro HPLC (6.8) 9,10 g dihydrátu octanu zinečnatého (Zn(CH3COO)2.2H2O) a 5,46 g monohydrátu kyseliny fosfowolframové (H3[P(W3O10)4.xH2O]).
Dissolve 9,10 g zinc acetate ehydrate (Zn(CH3COO)2.2H2O) and 5,46 g phosphotungstic acid monohydrate (H3[P(W3O10)4.xH2O]) in about 70 ml with HPLC grade water (6.8) in a 100 ml volumetric flask.
Přidejte 5,81 ml ledové kyseliny octové (CH3COOH).
Add 5,81 ml glacial acetic acid (CH3COOH).
Zřeďte vodou čistoty pro HPLC (6.8) na 100 ml a promíchejte.
Dilute to the 100 ml mark with HPLC grade water (6.8) water and mix.
Tento roztok lze skladovat při laboratorní teplotě po dobu jednoho roku.
The solution can be stored at room temperature for 1 year.
Zředěný roztok podle Biggse/Szijarta
Diluted Biggs/Szijarto solution
S použitím odměrné baňky zřeďte 25 ml koncentrovaného roztoku podle Biggse/Szijarta (5.3) na 500 ml vodou.
Dilute 25 ml concentrated Biggs/Szijarto solution (5.3) with water to 500 ml using a volumetric flask.
Tento roztok lze skladovat při laboratorní teplotě po dobu jednoho měsíce.
The solution can be stored at room temperature for 1 month.
Příprava vody čistoty pro HPLC
Preparation of HPLC grade water
Pomocí systému vakuové filtrace (6.8) přefiltrujte ultračistou vodu (6.9).
Filter the ultra pure water (6.8) by using the vacuum system filtration (6.9).
Pro zlepšení výkonu čerpadla a pro získání stabilní základní linie denně odplyňujte mobilní fázi volbou jedné z dostupných technik, např. probubláváním heliem, sonikací, vakuovým odplyňovacím systémem nebo odplyňovacím systémem, který je součástí chromatografu.
To improve the pump performance and to obtain a stable baseline, degas the mobile phase daily by selecting one of the available techniques such as sparging by helium, sonication, vacuum or in-line degassing system.
Poznámka: V zájmu prodloužení životnosti kolony je nezbytné, aby obsah oxidu uhličitého v eluentu byl co nejnižší a aby se zabránilo opakované absorpci.
Note: In order to prolong column life it is essential that the carbon dioxide content of the eluent is as low as possible and that re-uptake is prevented.
Obvyklé laboratorní vybavení, a zejména:
Usual laboratory equipment and, in particular, the following:
Ionexová HPLC kolona
HPLC ion exchange resin column
Náplň kolony: 8 % zesítěný polystyren-divinylbenzenový kopolymer s katexovými skupinami v olovnaté formě.
Column packing: 8 % cross-linked polystyrene-divinylbenzene copolymer functionalised with cation-exchange groups in the lead form.
Rozměry kolony: délka 300 mm, vnitřní průměr cca 8 mm.
Column dimensions: Length 300 mm, internal diameter ca. 8 mm.
Je možné použít i jiné průměry, avšak za předpokladu, že se odpovídajícím způsobem přizpůsobí průtok.
Use of other diameters is possible provided that the flow-rate is adjusted accordingly.
Předkolona kolona
Guard column
Předkolona je kombinací odděleného kationtového měniče (H+) a aniontového měniče (CO3-), z nichž každý je naplněn do kolon o rozměrech asi 30 mm x 4,6 mm (d x VP) (např. mikropředkolony v mikropředkolonovém držáku), jež jsou zapojeny do série nebo ve formě směsi obsahující AG 50 W–X4, zrnitost 400 (H+), a AG3–X4A, zrnitost 200–400 (OH-), v poměru 35:65 (% hm.) ručně naplněné v koloně o rozměrech asi 20 × 9 mm (d × VP).
The guard column is a combination of a separate cation exchanger (H+) and an anion exchanger (CO3-), each packed in columns of ca. 30 mm × 4,6 mm (L × ID) (e.g. micro-guard columns in a micro-guard holder) and connected in series or in the form of a mixed bed consisting of AG 50W-X4, -400 mesh (H+) and AG3-X4A, 200–400 mesh (OH-) in the ratio of 35:65 (m/m) manually packed in a column of ca. 20 × 9 mm (L × ID).
Termostat kolony
Column oven
Termostat schopný udržovat stálou teplotu 85 °C ± 1 °C.
Oven capable of maintaining a constant temperature of 85 °C ± 1 °C.
HPLC čerpadlo
HPLC pump
Čerpadlo schopné zajistit stálý průtok (kolísání < 0,5 %) při 0,2–1,0 m/min.
Pump capable of generating a constant flow-rate (< 0,5 % fluctuations) at 0,2-1,0 m/min.
Nástřikové zařízení pro HPLC
HPLC injection device
Automatické zařízení na odběr vzorků schopné nastřikovat 25 µl a s opakovatelností < 0,5 %.
Auto sampler capable of injecting 25 µL and having a repeatability < 0,5 %.
Alternativně se může použít ruční zařízení (požadavky jsou stejné jako na automatické zařízení pro odběr vzorků).
Alternatively a manual device may be used (same requirements as the auto sampler).
HPLC detektor
HPLC detector
Vysoce citlivý refraktometrický detektor o šumu < 5,10-9 jednotek RI.
Highly sensitive refractive index detector having a noise < 5,10-9 RI units.
Integrátor
Integrator
Software nebo vyhrazený integrátor pro získávání dat, zpracování a generování ploch píků a výšek píků, jež lze převést na koncentrace laktózy.
Software or a dedicated integrator to perform data acquisition, processing and generating peak areas and peak heights, which can be converted to lactose concentrations.
Čistička vody
Water purification unit
Systém, který je schopen poskytnout ultračistou vodu (typ 1) s odporem > 14 MΩ.cm.
System capable to provide ultra pure water (type 1) having a resistivity >14 MΩ.cm.
Filtrační jednotka na roztoky
Solvent filtration unit
Systém, který umožňuje filtrovat vodu pomocí membránového filtru s póry o velikosti 0,45 µm.
System that enables filtration of the water using 0,45 µm pore size membrane filter.
Poznámka: Mnoho čističek vody (6.8) obsahuje zabudovaný filtrační systém s póry o velikosti 0,45 nebo 0,2 µm.
Note: Many water purification units (6.8) have a built in 0,45 or 0,2 µm filtration.
Další filtraci lze vynechat, jestliže je tato voda použita přímo.
Additional filtration can be omitted if this water is directly used.
Váhy s možností odečtu po 0,1 mg.
Balance having a read-out of 0,1 mg.
Vodní lázeň
Water bath
Vodní lázeň s možností udržování teploty na 40 °C (±0,5 °C).
Water bath capable of maintaining a temperature at 40 °C (±0,5).
Odstředivka
Centrifuge
Odstředivka umožňující dosáhnout síly alespoň 3000 g u Eppendorfových zkumavek nebo u stejných nebo větších typů zkumavek.
Having a capacity of generating at least 3000 g for Eppendorf vials or equivalent or larger type of vials.
Odměrná baňka na 50 ml
Volumetric flask 50 mL
Objem 50 ml, třída A
Capacity of 50 mL, class A.
Poznámka: Baňky jiných objemů lze použít, zohlední-li se objemový faktor.
Note: Flasks of other capacity can be used by taking into account the volume factor.
Odměrná baňka na 100 ml
Volumetric flask 100 mL
Objem 100 ml, třída A
Capacity of 100 mL, class A.
Dělená pipeta
Graduated pipette
Dělená pipeta o objemu 10 ml
Graduated pipette of 10 mL
Poznámka: Alternativně lze použít ruční pipetor o objemu 5 ml dvojím přidáním objemu 5 ml činidla (5.).
Note: Alternatively, a handpipettor having a capacity of 5 mL can be used by adding twice a volume of 5 mL of reagent (5.3).
Je důležité, aby laboratoř obdržela vzorek odebraný v souladu s normou ISO 707/IDF 50, který je skutečně reprezentativní a který nebyl během přepravy nebo skladování poškozen ani změněn.
It is important that the laboratory receives a sample taken according to ISO 707/IDF 50, which is truly representative and has not been damaged during transport or storage.
PŘÍPRAVA STANDARDNÍHO ROZTOKU LAKTÓZY
PREPARATION OF LACTOSE STANDARD SOLUTION
Referenční standard 1
Standard 1
V odměrné baňce na 100 ml (5.2) rozpusťte s přesností na 0,1 mg odvážené množství asi 50 mg monohydrátu laktózy (6.14) a doplňte po značku vodou.
Dissolve an accurately (read-out at 0,1 mg) weighed amount of ca. 50 mg lactose monohydrate (5.2) in a volumetric flask of 100 mL (6.14) and make up to the mark with water.
Referenční standard 2
Standard 2
V odměrné baňce na 100 ml (5.2) rozpusťte s přesností na 0,1 mg odvážené množství asi 100 mg monohydrátu laktózy (6.14) a doplňte po značku vodou.
Dissolve an accurately (read-out at 0,1 mg) weighed amount of ca. 100 mg lactose monohydrate (5.2) in a volumetric flask of 100 mL (6.14) and make up to the mark with water.
Poznámka: Standardní roztoky lze skladovat nejdéle jeden týden při teplotě asi 5 °C.
Note: The standard solutions can be stored for maximal 1 week at ca. 5 °C.
PŘÍPRAVA ZKUŠEBNÍHO VZORKU
PREPARATION OF THE TEST SAMPLE
Rekonstituce vzorku
Reconstitution of the sample
Do baňky na 50 ml (6.13) odměřte asi 5 g prášku a váhu zaznamenejte s přesností na 1 mg (W1 (11)).
Weigh ca. 5 g of the powder into a flask of 50 mL (6.13) and note the weight at 1 mg accuracy (W1, (11)).
Přidejte 50 ml vody a zaznamenejte zvýšení hmotnosti (W2 (11)) s přesností na 0,01 g. Uzavřenou baňku umístěte na 30 minut do vodní lázně (6.11) a během této doby ji několikrát obraťte.
Add 50 mL of water and note the increase of the weight (W2 (11)) at 0,01 g accuracy. Place the closed flask in the water bath (6.11) for 30 min and invert it a few times during this period.
Poté ji nechte vychladnout na laboratorní teplotu.
Let it subsequently cool to room temperature.
Zpracování vzorku
Sample treatment
Asi 1 g tohoto roztoku odeberte do odměrné baňky na 50 ml (6.13), zaznamenejte hmotnost s přesností na 1 mg (W3 (11)), přidejte 20 ml vody a poté 10 ml zředěného činidla podle Biggse/Szijarta (5.4). Následně doplňte po značku vodou.
Take ca. 1 g of this solution and deposit it in a 50 mL volumetric flask (6.13), note the weight at 1 mg accuracy (W3 (11)), add 20 mL of water followed by the addition of 10 mL diluted Biggs/Szijarto reagent (5.4), make up to the mark with water.
Během prvních 30 minut baňku pětkrát opatrně obraťte.
Gently invert the flask 5 times during the first 30 min.
Po jedné hodině odeberte alikvotní díl a odstřeďujte (6.12) při 3000 g po dobu 10 minut (lze použít vyšší odstředivou sílu při odpovídajícím způsobem zkrácené době).
After 1 hour take an aliquot and centrifuge (6.12) at 3000 g for 10 min (higher g can be used at correspondingly shorter time).
Pro analýzu HPLC použijte alikvotní díl supernatantu.
Use an aliquot of the supernatant for HPLC analysis.
STANOVENÍ POMOCÍ HPLC
HPLC DETERMINATION
Předběžná příprava HPLC
Preliminary preparation of HPLC
Instalace kolony a předkolony
Installation of the column and pre-column
Instalujte předkolonu mimo termostat kolony (6.2) a kolonu (6.3) do termostatu.
Install the pre-column (6.2) outside the column oven (6.3) and the column (6.1) in the oven.
Poznámka: Není-li termostat vybaven kapilárou pro předehřátí eluentu, je nutné, aby eluent před vstupem do kolony prošel v termostatu asi 15 cm dlouhou nerezovou kapilárou (je nezbytně nutné, aby se eluent před vstupem do kolony zahřál, jinak dojde k rozšíření píku).
Note: If the oven does not contain tubing to preheat the eluent, it is necessary that the eluent passes ca. 15 cm stainless steel tubing in the oven before entering the column (it is absolutely necessary that the eluent has heated up before entering the column, otherwise peak broadening shall occur).
Detektor a počáteční průtok
Detector and initial flow
V zájmu získání stabilní základní linie spusťte detektor (6.6) alespoň 24 hodin před zahájením analýzy.
In order to get a stable baseline, turn on the detector (6.6) at least 24 h before starting the analysis.
Vnitřní teplotu detektoru nastavte na 35 °C.
Set the internal temperature of the detector at 35 °C.
Průtok nastavte na 0,2 ml/min (6.4) po dobu alespoň 20 minut a zároveň nastavte termostat kolony (6.3) na laboratorní teplotu.
Set the flow rate at 0,2 ml/min (6.4) for at least 20 min while the column oven (6.3) is set to room temperature.
Termostat kolony a konečný průtok
Column oven and final flow-rate