natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Přidejte do baňky 1,0 ml roztoku vnitřního standardu (4.3.1.1, má-li být stanoven sitosterol, a 4.3.1.2, má-li být stanoven stigmasterol).
Add 1,0 ml of internal standard solution (4.3.1.1) to the flask if sitosterol is to be determined, or (4.3.1.2) if stigmasterol is to be determined.
Důkladně promíchejte.
Mix thoroughly.
Obsah baňky kvantitativně převeďte do dělicí nálevky na 500 ml (3.2). Baňku postupně vypláchněte 50 ml vody a 250 ml diethyletheru (4.4).
Transfer the contents of the flask quantitatively into a 500 ml separating funnel (3.2), washing the flask in turn with 50 ml water and 250 ml diethyl ether (4.4).
Obsah dělicí nálevky důkladně protřepávejte po dobu 2 minut a počkejte, dokud se neoddělí jednotlivé fáze.
Shake the separating funnel vigorously for two minutes and allow the phases to separate.
Spodní vodnou vrstvu vypusťte a etherovou vrstvu čtyřikrát po sobě promyjte alikvotními, 100 ml díly vody.
Run off the lower aqueous layer and wash the ether layer by shaking with four successive 100 ml aliquots of water
Poznámka 2: Má-li se zabránit tvorbě emulze, je nezbytně nutné provést první dvě promytí vodou jemně (deset převrácení nálevky).
Note 2: To avoid formation of an emulsion, it is essential that the first two water washes are carried out gently (10 inversions).
Třetí promytí lze provést důkladným protřepáváním po dobu 30 vteřin. Pokud se vytvoří emulze, je možné ji rozpustit přidáním 5–10 ml ethanolu.
The third wash can be shaken vigorously for 30 seconds.
V případě, že se ethanol přidá, je nutné provést další dvě důkladná promytí vodou.
If an emulsion is formed it can be destroyed by the addition of 5-10 ml of ethanol. If ethanol is added it is essential to carry out a further two vigorous water washes.
Čirou, mýdla zbavenou etherovou vrstvu nechte projít přes skleněnou kolonu (3.5) naplněnou 30 g bezvodého síranu sodného (4.5).
Pass the clear, soap-free ether layer through a glass column (3.5) containing 30 g anhydrous sodium sulphate (4.5).
Ether odeberte do baňky na 250 ml (3.3).
Collect the ether in a 250 ml flask (3.3).
Přidejte jeden varný kamínek a obsah nechte odpařit téměř do sucha ve vodní lázni nebo v izotermním plášti. Dbejte přitom na to, abyste zachytili odpadní rozpouštědla.
Add one anti-bumping granule and evaporate to near dryness in a waterbath or isomantle, taking care to collect the waste solvents.
Poznámka 3: Jestliže se extrakty vzorků odpařují do sucha při příliš vysoké teplotě, může dojít ke ztrátám na sterolu.
Note 3: If sample extracts are taken to complete dryness at too high temperature sterol losses may occur.
Příprava trimethylsilyletherů
Preparation of trimethyl silyl ethers
Převeďte etherový roztok zbývající v baňce do reakční nádobky na 2 ml (3.7) se 2 ml diethyletheru a odstraňte ether proudem dusíku.
Transfer the ether solution remaining in the flask to a 2 ml reaction vial (3.7) with 2 ml diethyl ether and remove the ether using a stream of nitrogen.
Promyjte baňku dvěma dalšími 2 ml alikvotními dávkami diethyletheru s tím, že tekutinu pokaždé převedete do reakční nádobky a ether odstraníte proudem dusíku.
Wash the flask with two further 2 ml aliquots of diethyl ether, transferring to the vial and removing the ether with nitrogen each time
Proveďte silylaci vzorku přidáním 1 ml TRI-SILu (4.6).
Silylate the sample by addition of 1 ml TRI-SIL (4.6).
Uzavřete nádobku a důkladně ji protřepejte, aby se obsah rozpustil.
Close the vial and shake vigorously to dissolve.
Nerozpustí-li se úplně, zahřejte nádobku na 65–70 °C.
If dissolution is incomplete, warm to 65-70 °C.
Nechte ji nejméně 5 minut odstát a teprve poté její obsah nastříknete do plynového chromatografu.
Allow to stand for at least five minutes before injecting into the gas-chromatograph.
Silylaci standardů proveďte stejným způsobem jako silylaci vzorků.
Silylate standards in the same way as samples.
Silylaci směsi pro rozlišovací zkoušku (4.10) proveďte stejným způsobem jako silylaci vzorků.
Silylate the resolution test mixture (4.10) in the same way as samples
Poznámka 4: Silylace musí být provedena v bezvodém prostředí.
Note 4: Silylation must be effected in a water-free environment.
Neúplná silylace betulinu je indikována druhým píkem v blízkosti píku betulinu.
Incomplete silylation of betulin is indicated by a second peak close to that of betulin.
Pokud je během silylace přítomen ethanol, pak tuto sylilaci ruší.
The presence of ethanol at the silylation stage will interfere with silylation.
Ethanol může být přítomen v důsledku nedostatečného promývání ve fázi extrakce.
This may result from inadequate washing at the extraction stage.
Pokud tento problém přetrvává, může být během fáze extrakce provedeno páté promytí s důkladným protřepáváním po dobu 30 vteřin.
If this problem persists, a fifth wash may be introduced at the extraction stage, shaking vigorously for 30 seconds.
Analýza plynovou chromatografií
Gas-chromatographic analysis
Volba provozních podmínek
Choice of operating conditions
Připravte plynový chromatograf podle návodu výrobce.
Set up the gas-chromatograph according to the manufacturer’s instructions.
Směrné provozní podmínky jsou tyto:
The guideline operating conditions are as follows:
teplota kolony: 265 °C
column temperature: 265 °C
teplota nástřikového zařízení: 265 °C
injector temperature: 265 °C
teplota detektoru: 300 °C
detector temperature: 300 °C
průtok nosného plynu: 0,6 ml/min
carrier gas flow rate: 0,6 ml/min.
tlak vodíku: 84 kPa
hydrogen pressure: 84 kPa
tlak vzduchu: 155 kPa
air pressure: 155 kPa
rozdělení nástřiku: 10:1 až 50:1; poměr rozdělení musí být optimalizován podle návodu výrobce a linearity odezvy detektoru a poté ověřen v rozmezí dotčených koncentrací.
sample split: 10:1 to 50:1; the split ratio must be optimised in accordance with the manufacturer’s instructions and linearity of detector response, then validated over the concentration range of interest.
Poznámka 5: Je nesmírně důležité pravidelně čistit vložku do nástřikového prostoru (tzv. liner).
Note 5: It is especially important that the injection liner is regularly cleared.
množství nastříknuté látky: 1 μl roztoku TMSE.
amount of substance injected: 1 μl of TMSE solution.
Počkejte, dokud systém nedosáhne rovnováhy, a teprve po dostatečně stabilní reakci zahajte analýzu.
Allow the system to equilibrate and obtain a satisfactory stable response before commencing any analysis.
Tyto podmínky je třeba měnit podle charakteristických vlastností kolony a plynového chromatografu tak, aby získané chromatogramy splňovaly tyto požadavky:
These conditions must be varied in the light of column and gas-chromatograph characteristics so as to obtain chromatograms which meet the following requirements:
pík sitosterolu musí být dostatečně odlišen od píku lanosterolu.
the sitosterol peak must be adequately resolved from lanosterol.
Obrázek 1 znázorňuje typický chromatogram, který je třeba získat ze silylované směsi pro rozlišovací zkoušku (4.10),
Figure 1 shows a typical chromatogram which should be obtained from a silylated resolution test mixture (4.10),
relativní retenční časy následujících sterolů se musí blížit těmto hodnotám:
the relative retention times of the following sterols should be approximately:
betulin: 2,5,
betulin: 2,5
retenční čas betulinu musí být přibližně 24 minut.
the retention time for betulin should be approximately 24 minutes.
Analytický postup
Analytical procedure
Nastříkněte 1 μl roztoku silylovaného standardu (stigmasterolu nebo sitosterolu) a upravte kalibrační parametry integrátoru.
Inject 1 μl of silylated standard solution (stigmasterol or sitosterol) and adjust the integrator calibration parameters.
Nastříkněte další 1 μl roztoku silylovaného standardu, aby bylo možné stanovit odezvové faktory ve vztahu k betulinu.
Inject a further 1 μl of silylated standard solution to determine the response factors with reference to betulin.
Nastříkněte 1 μl roztoku silylovaného vzorku a změřte plochy píků.
Inject 1 μl of silylated sample solution and measure peak areas.
Nástřik standardů musí být proveden před každým chromatografickým cyklem a po každém takovém cyklu.
Each chromatographic run must be bracketed by an injection of standards.
Za normálních okolností by měl každý takto ohraničený cyklus zahrnovat šest nástřiků vzorku.
As a guide, six injections of sample should be included in each bracketed run.
Poznámka 6: Do integrace píku stigmasterolu je třeba zahrnout chvosty uvedené v bodech 1, 2 a 3 na obrázku 2b.
Note 6: Integration of the stigmasterol peak should include any tailing as defined by points 1, 2 and 3 in Figure 2b.
Integrace píku sitosterolu by měla zahrnovat plochu píku 22-dihydro-β-sitosterolu (stigmastanolu), který se vymývá okamžitě po sitosterolu (viz obrázek 3b) při vyhodnocování celkového sitosterolu.
Integration of the sitosterol peak should include the area of the 22 dihydro-β-sitosterol (stigmastanol) peak which elutes immediately after sitosterol (see Figure 3b) when evaluating total sitosterol.
Stanoví se plocha píků sterolu a píků betulinu v obou standardech na začátku a na konci každého pokusu a vypočte se R1:
Determine the area of the sterol peaks and betulin peaks in both standards bracketing a batch, and calculate R1:
= (průměrná plocha píku sterolu ve standardu)/(průměrná plocha píku betulinu ve standardu)
= (average area of the sterol peak in the standard)/(average area of the betulin peak in the standard)
Stanoví se plocha píku sterolu (stigmasterolu a sitosterolu) a píku betulinu ve vzorku a vypočte seR2:
Determine the area of the sterol peak (stigmasterol and sitosterol) and betulin peak in the sample and calculate R2:
= (plocha píku sterolu ve vzorku)/(plocha píku betulinu ve vzorku)
= (area of the sterol peak in the sample)/(area of the betulin peak in the sample)
obsah sterolu ve standardu (mg), obsažený v 1 ml standardního roztoku (4.8.1 nebo 4.9.1)
sterol content of the standard (mg) contained in 1 ml of standard solution (4.8.1 or 4.9.1)
hmotnost vzorku (g) (5.2.1)
weight of sample (g) (5.2.1)
P čistota standardního sterolu (4.8 nebo 4.9)
P purity of standard sterol (4.8 or 4.9)
Obsah sterolu ve vzorku (mg/kg) = ((R2)/(R1)) × ((W1)/(W2)) × P × 10
Sterol content of the sample (mg/kg) = ((R2) / (R1)) × ((W1) / (W2)) × P × 10.
Stigmasterol
Stigmasterol
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedl v co nejkratším časovém odstupu jeden pracovník na stejném přístroji, by neměl překročit 19,3 mg/kg.
The difference between the results of two determinations carried out within the shortest feasible time interval, by one operator using the same apparatus on identical test material, may not exceed 19,3 mg/kg.
Sitosterol
Sitosterol
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedl v co nejkratším časovém odstupu jeden pracovník na stejném přístroji, by neměl překročit 23,0 mg/kg.
The difference between the results of two determinations carried out within the shortest feasible time interval, by one operator using the same apparatus on identical test material, may not exceed 23,0 mg/kg.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedli pracovníci v různých laboratořích na různých přístrojích, by neměl překročit 31,9 mg/kg.
The difference between the results of two determinations carried out by operators in different laboratories, using different apparatus on identical test material, may not exceed 31,9 mg/kg.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedli pracovníci v různých laboratořích na různých přístrojích, by neměl překročit 8,7 %, vztaženo ke střední hodnotě stanovení.
The difference between the results of two determinations carried out by operators in different laboratories, using different apparatus on identical test material, may not exceed 8,7 % relative to the mean of the determination.
Údaje o shodnosti byly získány na základě pokusu z roku 1992, kterého se zúčastnilo osm laboratoří a ve kterém bylo v případě stigmasterolu použito šest vzorků (tří slepých duplikátů) a v případě sitosterolu šest vzorků (tří slepých duplikátů).
The precision data were determined from an experiment conducted in 1992 involving eight laboratories and six samples (three blind duplicates) for stigmasterol and six samples (three blind duplicates) for sitosterol.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedl v co nejkratším časovém odstupu jeden pracovník na stejném přístroji, by neměl překročit 10,2 mg/kg.
The difference between the results of two determinations carried out within the shortest feasible time interval, by one operator using the same apparatus on identical test material, may not exceed 10,2 mg/kg.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedl v co nejkratším časovém odstupu jeden pracovník na stejném přístroji, by neměl překročit 3,6 %, vztaženo ke střední hodnotě stanovení.
The difference between the results of two determinations carried out within the shortest feasible time interval, by one operator using the same apparatus on identical test material, may not exceed 3,6 % relative to the mean of the determinations.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedli pracovníci v různých laboratořích na různých přístrojích, by neměl překročit 25,3 mg/kg.
The difference between the results of two determinations carried out by operators in different laboratories, using different apparatus on identical test material, may not exceed 25,3 mg/kg.
Rozdíl mezi výsledky dvou stanovení, která u stejného zkušebního materiálu provedli pracovníci v různých laboratořích na různých přístrojích, by neměl překročit 8,9 %, vztaženo ke střední hodnotě stanovení.
The difference between the results of two determinations carried out by operators in different laboratories, using different apparatus on identical test material, may not exceed 8,9 % relative to the mean of the determinations.
Údaje o shodnosti byly získány na základě pokusu z roku 1991, kterého se zúčastnilo devět laboratoří a ve kterém bylo v případě stigmasterolu použito šest vzorků (tří slepých duplikátů) a v případě sitosterolu šest vzorků (tří slepých duplikátů).
The precision data were determined from an experiment conducted in 1991 involving nine laboratories and six samples (three blind duplicates) for stigmasterol and six samples (three blind duplicates) for sitosterol.
Dávkování stigmasterolu je 150 g stigmasterolu o čistotě nejméně 95 % na tunu másla, tj. 142,5 mg/kg, nebo 170 g stigmasterolu o čistotě nejméně 85 % na tunu másla, tj. 144,5 mg/kg.
The incorporation rate for stigmasterol is 150 g of at least 95 % pure stigmasterol per tonne of butter, i.e. 142,5 mg/kg, or 170 g of at least 85 % pure stigmasterol per tonne of butter, i.e. 144,5 mg/kg.
115,8 mg/kg (95 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 95 %),
115,8 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
117,7 mg/kg (95 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 85 %),
117,7 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol),
80,1 mg/kg (70 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 95 %),
80,1 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
81,5 mg/kg (70 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 85 %).
81,5 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol).
Koncentrace stopovací látky ve vzorku s výsledkem o nejnižší hodnotě se použije interpolací mezi 115,8 mg/kg a 80,1 mg/kg nebo 117,7 mg/kg a 81,5 mg/kg.
The tracer concentration of the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation respectively between 115,8 mg/kg and 80,1 mg/kg or 117,7 mg/kg and 81,5 mg/kg.
Dávkování sitosterolu je 600 g sitosterolu o čistotě nejméně 90 % na tunu másla, tj. 540 mg/kg.
The incorporation rate for sitosterol is 600 g of at least 90 % pure sitosterol per tonne of butter, i.e. 540 mg/kg
482,6 mg/kg (95 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 90 %),
482,6 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol),
347,6 mg/kg (70 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 90 %).
347,6 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol).
Koncentrace stopovací látky ve vzorku s výsledkem o nejnižší hodnotě se použije interpolací mezi 482,6 mg/kg a 347,6 mg/kg.
The tracer concentration of the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation between 482,6 mg/kg and 347,6 mg/kg.
Dávkování stigmasterolu je 150 g stigmasterolu o čistotě nejméně 95 % na tunu zahuštěného másla, tj. 142,5 mg/kg, nebo 170 g stigmasterolu o čistotě nejméně 85 % na tunu zahuštěného másla, tj. 144,5 mg/kg.
The incorporation rate for stigmasterol is 150 g of at least 95 % pure stigmasterol per tonne of concentrated butter, i.e. 142,5 mg/kg; or 170 g of at least 85 % pure stigmasterol per tonne of concentrated butter, i.e. 144,5 mg/kg
118,5 mg/kg (95 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 95 %),
118,5 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
120,4 mg/kg (95 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 85 %),
120,4 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol),
82,9 mg/kg (70 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 95 %),
82,9 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 95 % pure stigmasterol),
84,3 mg/kg (70 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 85 %).
84,3 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 85 % pure stigmasterol).
Koncentrace stopovací látky ve vzorku s výsledkem o nejnižší hodnotě se použije interpolací mezi 118,5 mg/kg a 82,9 mg/kg nebo 120,4 mg/kg a 84,3 mg/kg.
The tracer concentration of the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation respectively between 118,5 mg/kg and 82,9 mg/kg or 120,4 mg/kg and 84,3 mg/kg.
Dávkování sitosterolu je 600 g sitosterolu o čistotě nejméně 90 % na tunu zahuštěného másla, tj. 540 mg/kg.
The incorporation rate for sitosterol is 600 g of at least 90 % pure sitosterol per tonne of concentrated butter, i.e. 540 mg/kg
480,9 mg/kg (95 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 90 %),
480,9 mg/kg (95 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol),
345,9 mg/kg (70 % minimálního dávkování stigmasterolu o čistotě 90 %).
345,9 mg/kg (70 % of the minimum incorporation rate for 90 % pure sitosterol).
Koncentrace stopovací látky ve vzorku s výsledkem o nejnižší hodnotě se použije interpolací mezi 480,9 mg/kg a 345,9 mg/kg.
The tracer concentration in the sample giving the lowest result is used in conjunction with interpolation between 480,9 mg/kg and 345,9 mg/kg.
Chromatogram směsi pro rozlišovaci zkoušku
Chromatogram of resolution test mixture
Vhodnějši je úplné rozlišení, tj. zápis píku lanosterolu se musí vrátit na základní linii dříve než začne růst pík sitosrerolu. Neúplné rozlišení se však toleruje.
Complete resolution is preferable, i.e. the peak trace for lanosterol should return to baseline before leaving for the sitosterol peak although incomplete resolution is tolerable.
Odezva detektoru FID
FID Detector response
Čas (min)
Time (mins)
Poznámka: Integrace píku.stigmasterolu musi zahrnout všechny chvosty uvedené v bodech 1, 2 a 3.
Note: Integration of the stigmasterol peak should include any tailing as defined by points 1, 2 and 3.
Obrázek 2a
Figure 2a
Obrázek 2b
Figure 2b
Standard stigmasterolu
Stigmasterol standard
Vzorek másla denaturovaného stigmasterolem
Butter sample denatured with stigmasterol
Odezva detektoru FID
FID detector response
Betulin (vnitřni standard)
Betulin (internal standard)
0Čas (min)
(mins)
Poznámka: β-sitosterol často obsahuje nečistotu (identifikovanou jako stigmastanol), která se vymývá okamžitě po β-sitosterolu.
Note: β-sitosterol often contains an impurity (identified as stigmastanol) which elutes immediately after β-sitosterol.
Plochy těchto dvou píků musí být při vyhodnocování celkového přítomného β-sitosterolu sečteny.
The areas of these two peaks should be summed when evaluating the total β-sitosterol present.
Obrázek 3a
Figure 3b
Standard β-sitosterolu
Sitosterol standard
Vzorek másla denaturovaného β-sitosterolem
Butter sample denatured with β-Sitosterol
(Článek 6)
(Article 6)
REFERENČNÍ METODA PRO ZJIŠŤOVÁNÍ KRAVSKÉHO MLÉKA A KASEINÁTŮ V SÝRECH Z OVČÍHO MLÉKA, KOZÍHO MLÉKA NEBO BUVOLÍHO MLÉKA, NEBO SMĚSÍ OVČÍHO, KOZÍHO A BUVOLÍHO MLÉKA
REFERENCE METHOD FOR THE DETECTION OF COWS’ MILK AND CASEINATE IN CHEESES FROM EWES’ MILK, GOATS’ MILK OR BUFFALOS’ MILK OR MIXTURES OF EWES’, GOATS’ AND BUFFALOS’ MILK
Zjišťování kravského mléka a kaseinátů v sýrech vyrobených z ovčího mléka, kozího mléka, buvolího mléka anebo ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka izoelektrickou fokusací γ-kaseinů po plasminolýze.
Detection of cows’ milk and caseinate in cheeses made from ewes’ milk, goats’ milk, buffalos’ milk or mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk by isoelectric focusing of γ-caseins after plasminolysis.
Metoda je vhodná pro citlivé a specifické zjišťování mléka a kaseinátu, též tepelně ošetřených, v čerstvých a zralých sýrech vyrobených z ovčího mléka, kozího mléka, buvolího mléka nebo ze směsí ovčího, kozího a buvolího mléka.
The method is suitable for sensitive and specific detection of native and heat-treated cows’ milk and caseinate in fresh and ripened cheeses made from ewes’ milk, goats’ milk, buffalos’ milk or mixtures of ewes’, goats’ and buffalos’ milk.
Není vhodná k odhalení falšování mléka a sýrů tepelně ošetřenými bílkovinnými koncentráty z hovězí syrovátky.
It is not suitable for the detection of milk and cheese adulteration by heat-treated bovine whey protein concentrates.
PODSTATA METODY
PRINCIPLE OF THE METHOD
Izolace kaseinů ze sýra a referenčních standardů
Isolation of caseins from cheese and the reference standards
Rozpuštění izolovaných kaseinů a proteolýza plasminem (EC.3.4.21.7)
Dissolving of the isolated caseins and submitting to plasmin (EC.3.4.21.7) cleavage
Izoelektrická fokusace plasminem ošetřených kaseinů za přítomnosti močoviny a vybarvení bílkovin
Isoelectric focusing of plasmin-treated caseins in the presence of urea and staining of proteins
Vyhodnocení vybarvených obrazců kaseinu γ3 a γ2 (důkaz přítomnosti kravského mléka) na základě porovnání obrazce získaného ze vzorku s obrazci získanými u téhož gelu z referenčních standardů obsahujících 0 % a 1 % kravského mléka
Evaluation of stained γ3 and γ2-casein patterns (evidence of cows’ milk) by comparison of the pattern obtained from the sample with those obtained in the same gel from the reference standards containing 0 % and 1 % cows’ milk.
Není-li stanoveno jinak, používají se pouze chemikálie čistoty p.a.
Unless otherwise indicated, analytical grade chemicals must be used.
Voda musí být redestilovaná nebo rovnocenné čistoty.
Water must be double-distilled or of equivalent purity.
Poznámka: Následující údaje se vztahují na laboratorně připravované polyakrylamidové gely s obsahem močoviny o rozměrech 265 × 125 × 0,25 mm. Pokud se použijí jiné rozměry nebo druhy gelu, může být nutné upravit podmínky separace.
Note: The following details apply to laboratory prepared polyacrylamide gels containing urea, of dimensions 265 × 125 × 0,25 mm. Where other sizes and types of gel are used, the separation conditions may have to be adjusted.
Isoelektrická fokusace
Isoelectric focusing
Chemikálie pro přípravu polyakrylamidových gelů s obsahem močoviny
Reagents for production of the urea containing polyacrylamide gels
Zásobní roztok gelu
Stock gel solution
Ve vodě rozpusťte:
Dissolve:
4,85g akrylamidu
4,85 g acrylamide
0,15g N, N'-methylen-bis-akrylamidu (BIS)
0,15 g N, N'-methylene-bis-acrylamide (BIS)
48,05g močoviny
48,05 g urea
15,00g glycerolu (87 % hm.),
15,00 g glycerol (87 % w/w),
doplňte na 100 ml a uložte do chladničky v hnědé skleněné lahvi.
in water and make up to 100 ml and store in a brown glass bottle in the refrigerator.
Poznámka: Místo uvedených množství neurotoxického akrylamidu lze použít komerčně dostupný, předem namíchaný roztok akrylamidu a BIS.
Note: A commercially available preblended acrylamide/BIS solution can be used in preference to the quoted fixed weights of the neurotoxic acrylamides.