natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Tato zkouška je určena k posouzení účinků dlouhodobé expozice chemickým látkám na růst nedospělých ryb.
This test is designed to assess the effects of prolonged exposure to chemicals on the growth of juvenile fish.
Je založena na metodě pro posouzení účinků chemických látek na růst nedospělého pstruha duhového (Oncorynchus mykiss) při průtokových podmínkách, která byla vyvinuta v Evropské unii a testována v okružních testech (1, 3).
It is based on a method, developed and ring-tested (1)(2) within the European Union, for assessing the effects of chemicals on the growth of juvenile rainbow trout (Oncorynchus mykiss) under flow-through conditions.
Mohou být použity také jiné dobře popsané druhy.
Other well documented species may be used.
Byly například získány zkušenosti z růstových zkoušek s daniem pruhovaným (Danio rerio) (2, 4, 5) a halančíkem japonským (Oryzias latipes) (6, 7, 8).
For example, experience has been gained from growth tests with zebrafish (Danio rerio) (3)(4) and ricefish (medaka, Oryzias latipes) (5)(6)(7).
Viz také Obecný úvod, část C.
See also General introduction Part C.
Nejnižší koncentrace s pozorovanými účinky (Lowest Observed Effect Concentration, LOEC): nejnižší zkušební koncentrace zkoušené látky, při níž jsou u látky pozorovány významné účinky ve srovnání s kontrolou (na hladině spolehlivosti p < 0,05).
Lowest observed effect concentration (LOEC): is the lowest tested concentration of a test substance at which the substance is observed to have a significant effect (at p < 0,05) when compared with the control.
Všechny zkušební koncentrace vyšší než LOEC musí mít škodlivé účinky stejné nebo větší, než účinky pozorované při LOEC.
However, all test concentrations above the LOEC must have a harmful effect equal to or greater than those observed at the LOEC.
Koncentrace bez pozorovaných účinků (No Observed Effect Concentration, NOEC): zkušební koncentrace bezprostředně nižší než LOEC.
No observed effect concentration (NOEC): is the test concentration immediately below the LOEC.
ECx: pro tuto metodu koncentrace zkoušené látky, která vyvolává x % změnu rychlosti růstu ryb ve srovnání s kontrolami.
ECx: in this test method is the concentration of the test substance which causes a x % variation in growth rate of the fish when compared with controls.
Velikost násady: živá hmotnost ryb v jednotce objemu vody.
Loading rate: is the wet weight of fish per volume of water.
Hustota obsádky: počet ryb v jednotce objemu vody.
Stocking density: is the number of fish per volume of water.
Individuální specifická rychlost růstu ryby: vyjadřuje rychlost růstu jedince vycházející z jeho výchozí hmotnosti.
Individual fish specific growth rate: expresses the growth rate of one individual based on its initial weight.
Průměrná specifická rychlost růstu pro nádrž: vyjadřuje střední rychlost růstu populace v nádrži při určité koncentraci.
Tank-average specific growth rate: expresses the mean growth rate of a tank population at one concentration.
Pseudospecifická rychlost růstu: vyjadřuje rychlost růstu jednotlivce vycházející ze střední počáteční hmotnosti populace v nádrži.
Pseudo specific growth rate: expresses the individual growth rate compared to the mean initial weight of the tank population.
Nedospělé ryby v exponenciální fázi růstu se po zvážení umístí do zkušebních nádrží a vystaví se řadě subletálních koncentrací zkoušené látky přednostně za průtokových podmínek, nebo pokud to není možné, za vhodných semistatických podmínek (statické podmínky s obnovováním média).
Juvenile fish in exponential growth phase are placed, after being weighted, in test chambers and are exposed to a range of sublethal concentrations of the test substance dissolved in water preferably under flow-through, or, if not possible, under appropriate semi-static (static-renewal) conditions.
Zkouška trvá 28 dnů.
The test duration is 28 days.
Ryby se krmí denně.
Fish are fed daily.
Přísun potravy se řídí počáteční hmotností ryb a může být po 14 dnech nově vypočten.
The food ration is based on initial fish weights and may be recalculated after 14 days.
Na konci zkoušky se ryby opět zváží.
At the end of the test, the fish are weighed again.
Účinky na rychlost růstu se analyzují pomocí regresního modelu s cílem odhadnout koncentraci, která vyvolává x % změnu rychlosti růstu, tj. ECx (např. EC10, EC20, nebo EC30).
Effects on growth rates are analysed using a regression model in order to estimate the concentration that would cause a x % variation in growth rate, i.e. ECx (e.g. EC10, EC20, or EC30).
Údaje mohou být popřípadě porovnány s hodnotami pro kontrolní skupiny s cílem stanovit nejnižší koncentraci s pozorovanými účinky (LOEC), a tím i koncentraci bez pozorovaných účinků (NOEC).
Alternatively, the data may be compared with control values in order to determine the lowest observed effect concentration (LOEC) and hence the no observed effect concentration (NOEC).
Musí být předloženy výsledky zkoušky akutní toxicity (viz zkušební metoda C.1) provedené přednostně na druhu zvoleném pro tuto zkoušku.
Results of an acute toxicity test (see Test Method C. 1.) preferably performed with the species chosen for this test, should be available.
To znamená, že jsou známy rozpustnost zkoušené látky ve vodě a tlak jejích par a je k dispozici vhodná analytická metoda pro kvantitativní stanovení látky ve zkušebních roztocích, a to se známou a doloženou správností a známou mezí stanovitelnosti.
This implies that the water solubility and the vapour pressure of the test substance are known and a reliable analytical method is available for the quantification of the substance in the test solutions with known and reported accuracy and limit of detection is available.
Užitečnými informacemi jsou strukturní vzorec, čistota látky, její stálost ve vodě a na světle, pKa, Pov a výsledky zkoušky snadné biologické rozložitelnosti (viz zkušební metoda C.4).
Useful information includes the structural formula, purity of the substance, stability in water and light, pKa, Pow and results of a test for ready biodegradability (see Test Method C.4).
Má-li být zkouška platná, musí být splněny tyto podmínky:
For the test to be valid the following conditions apply:
mortalita v kontrolních skupinách nesmí být na konci zkoušky větší než 10 %,
the mortality in the control(s) must not exceed 10 % at the end of the test;
nárůst střední hodnoty hmotnosti ryb v kontrolní skupině (kontrolních skupinách) musí být dostatečný na to, aby umožnil rozeznat minimální významnou změnu rychlosti růstu.
the mean weight of fish in the control(s) must have increased enough to permit the detection of the minimum variation of growth rate considered as significant.
Okružní test (3) ukázal, že u pstruha duhového musí střední hmotnost ryb v kontrolních skupinách vzrůst alespoň o polovinu (tj. o 50 %) jejich počáteční hmotnosti za 28 dnů; např. počáteční hmotnost: 1 g/rybu (= 100 %), konečná hmotnost po 28 dnech: ≥ 1,5 g/rybu (≥ 150 %);
A ring-test (2) has shown that for rainbow trout the mean weight of fish in the controls must have increased by at least the half (i.e. 50 %) of their mean initial weight over 28 days; e.g. initial weight: 1 g/fish (= 100 %), final weight after 28 days: ≥ 1,5 g/fish (≥ 150 %);
koncentrace rozpuštěného kyslíku musí dosahovat alespoň 60 % hodnoty nasycení vzduchem (ASV) po celou dobu zkoušky,
the dissolved oxygen concentration must have been at least 60 % of the air saturation value (ASV) throughout the test;
teplota vody se po celou dobu zkoušky nesmí mezi zkušebními nádržemi lišit o více než ± 1 oC a měla by být udržována v rozpětí 2 oC v rozsahu teplot stanovených pro testovací druh (doplněk 1).
the water temperature must not differ by more than ± 1 oC between test chambers at any one time during the test and should be maintained within a range of 2 oC within the temperature ranges specified for the test species (Appendix 1).
Normální laboratorní vybavení a zejména:
Normal laboratory equipment and especially the following:
přístroj pro stanovení kyslíku a pH-metr,
oxygen and pH meters;
vybavení pro stanovení tvrdosti vody a alkality,
equipment for determination of water hardness and alkalinity;
vhodné zařízení pro regulaci teploty a pro její pokud možno nepřetržité sledování,
adequate apparatus for temperature control and preferably continuous monitoring;
nádrže z chemicky inertního materiálu o vhodném objemu vzhledem k doporučenému nasazování a obsádce (viz bod 1.8.5 a doplněk 1),
tanks made of chemically inert material and of suitable capacity in relation to the recommended loading and stocking density (see Section 1.8.5 and Appendix 1);
dostatečně přesné váhy (tj. vážící s přesností na ±0,5 %).
suitably accurate balance (i.e. accurate to ±0,5 %).
Jako zkušební voda může být použita jakákoli voda, v níž testovací druh dlouhodobě přežívá a roste.
Any water in which the test species shows suitable long-term survival and growth may be used as a test water.
Hodnota pH by měla být v rozmezí 6,5 až 8,5, avšak během zkoušky by se pH nemělo lišit o více než ±0,5.
The pH of the water should be within the range 6,5 to 8,5, but during a given test it should be within a range of ±0,5 pH units.
Doporučuje se tvrdost nad 140 mg/l (jako CaCO3).
Hardness above 140 mg/l (as CaCO3) is recommended.
S cílem zajistit, aby ředicí voda neměla nadměrný vliv na výsledek zkoušky (například v důsledku tvorby komplexů zkoušené látky), by měly být v určitých intervalech odebírány vzorky k analýze.
In order to ensure that the dilution water will not unduly influence the test result (for example by complexion of test substance), samples should be taken at intervals for analysis.
Je-li kvalita ředicí vody relativně konstantní, mělo by být stanovení těžkých kovů (např. Cu, Pb, Zn, Hg, Cd a Ni), hlavních aniontů a kationtů (např. Ca, Mg, Na, K, Cl, SO4), pesticidů (např. celkový obsah organických fosforových a chlorových pesticidů), celkový obsah organického uhlíku a suspendovaných látek provedeno např. každé tři měsíce.
Measurements of heavy metals (e.g. Cu, Pb, Zn, Hg, Cd and Ni), major anions and cations (e.g. Ca, Mg, Na, K, Cl and SO4), pesticides (e.g. total organophosphorus and total organochlorine pesticides), total organic carbon and suspended solids should be made, for example, every three months where a dilution water is known to be relatively constant in quality.
Je-li prokázáno, že kvalita vody je konstantní po dobu alespoň jednoho roku, mohou být stanovení méně častá a intervaly lze prodloužit (např. každých šest měsíců).
If water quality has been demonstrated to be constant over at least one year, determinations can be less frequent and intervals extended (e.g. every 6 months).
Některé chemické charakteristiky přijatelné ředicí vody jsou uvedeny v doplňku 2.
Some chemical characteristics of an acceptable dilution water are listed in Appendix 2.
Zkušební roztoky o zvolených koncentracích se připraví ředěním zásobního roztoku.
Test solutions of the chosen concentrations are prepared by dilution of a stock solution.
Zásobní roztok by měl být připraven přednostně jednoduchým mechanickým mícháním nebo protřepáváním zkoušené látky v ředicí vodě (např. mechanickým mícháním nebo pomocí ultrazvuku).
The stock solution should preferably be prepared by simply mixing or agitating the test substance in the diluition water by using mechanical means (e.g. stirring or ultrasonication).
Pro dosažení vhodné koncentrace zásobního roztoku mohou být použity syticí kolony.
Saturation columns (solubility columns) can be used for achieving a suitable concentrated stock solution.
Použití rozpouštědel nebo dispergátorů (solubilizačních činidel) může být v některých případech pro vytvoření zásobního roztoku o vhodné koncentraci nezbytné.
The use of solvents or dispersants (solubilising agents) may be required in some cases in order to produce a suitably concentrated stock solution.
Ke vhodným rozpouštědlům patří aceton, ethanol, methanol, dimethylsulfoxid, dimethylformamid a triethylenglykol.
Examples of suitable solvents are acetone, ethanol, methanol, dimethylsulfoxide, dimethylformamide and triethyleneglycol.
Ke vhodným dispergátorům patří Cremophor RH40, Tween 80, 0,01 % methylcelulosa a HCO-40.
Examples of suitable dispersants are Cremophor RH40, Tween 80, Methylcellulose 0,01 % and HCO-40.
Snadno biologicky rozložitelná činidla (např. aceton) nebo vysoce těkavé sloučeniny je třeba používat s rozvahou, neboť mohou způsobit problémy s růstem bakterií v průtokových zkouškách.
Care should be taken when using readily biodegradable agents (e.g. acetone) and/or highly volatile compounds as these can cause problems with bacterial built-up in flow-through tests.
Je-li použito solubilizační činidlo, nesmí mít významné účinky na růst ryb ani viditelné nepříznivé účinky na nedospělé ryby, což musí být prokázáno na kontrolní skupině vystavené pouze působení rozpouštědla.
When a solubilising agent is used it must have no significant effects on the fish growth nor visible adverse effects on the juvenile as revealed by a solvent-only control.
Při průtokových zkouškách je pro zajištění řady koncentrací nezbytný systém, který nepřetržitě dávkuje a ředí zásobní roztok zkoušené látky (např. dávkovací čerpadlo, zařízení pro proporcionální ředění, syticí systém).
For flow-through tests, a system which continually dispenses and dilutes a stock solution of the test substance (e.g. metering pump, proportional diluter, saturator system) is required to deliver a series of concentrations to the test chambers.
Průtok zásobních roztoků a ředicí vody by měl být v průběhu zkoušky kontrolován v určitých intervalech, nejlépe denně, a neměl by se v průběhu zkoušky měnit o více než 10 %.
The flow rates of stock solutions and dilution water should be checked at intervals, preferably daily, during the test and should not vary by more than 10 % throughout the test.
Okružní test (3) ukázal, že u pstruha duhového je výměna vody 6 litrů na gram ryb za den přijatelná (viz bod 1.8.2.2).
A ring-test (2) has shown that, for rainbow trout, a frequency of water removal during the test of six litres/g of fish/day is acceptable (see Section 1.8.2.2).
U semistatických zkoušek (s obnovováním média) bude četnost obnovování média záviset na stálosti zkoušené látky, avšak doporučuje se obnovovat vodu denně.
For semi-static (renewal) tests, the frequency of medium renewal will depend on the stability of the test substance, but a daily water renewal is recommended.
Není-li podle předběžných zkoušek stálosti (viz bod 1.4) koncentrace zkoušené látky mezi obnoveními média stálá, (tj. nepohybuje-li se v intervalu 80–120 % nominální koncentrace nebo klesá-li pod 80 % naměřené počáteční koncentrace), měla by být zváženo použití průtokové zkoušky.
If, from preliminary stability tests (see Section 1.4), the test substance concentration is not stable (i.e. outside the range 80-120 % of nominal or falling below 80 % of the measured initial concentration) over the renewal period, consideration should be given to the use of a flow-through test.
Doporučeným druhem pro tuto zkoušku je pstruh duhový (Oncorhynchus mykiss), neboť u něj bylo v okružních testech získáno nejvíce zkušeností (1, 3).
Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) is the recommended species for this test since most experience has been gained from ring-test with this species (1)(2).
Mohou však být použity jiné dobře popsané druhy, může však být nutné v tomto případě zkušební postup upravit, aby byly vytvořeny vhodné zkušební podmínky.
However, other well documented species can be used but the test procedure may have to be adapted to provide suitable test conditions.
Zkušenosti jsou například s daniem pruhovaným (Danio rerio) (4, 5) a halančíkem japonským (Oryzias latipes) (6, 7, 8).
For example, experience is also available with zebrafish (Danio rerio) (3)(4) and ricefish (medaka, Oryzias latipes) (5)(6)(7).
Testovací ryby by měly pocházet z jednoho chovu (přednostně ze stejného tření), který se alespoň dva týdny před zkouškou udržuje v podmínkách kvality vody a osvětlení, které jsou podobné podmínkám použitým ve zkoušce.
The test fish shall be selected from a population of a single stock, preferably from the same spawning, which has been held for at least two weeks prior to the test under conditions of water quality and illumination similar to those used in the test.
V průběhu chovu a v průběhu zkoušky by měly být krmeny množstvím potravy odpovídajícím minimálně 2 % tělesné hmotnosti za den a nejlépe 4 % tělesné hmotnosti za den.
They should be fed a minimum ration of 2 % body weight per day and preferably 4 % body weight per day throughout the holding period and during the test.
Po 48hodinové aklimatizaci se zaznamená mortalita a použijí se tato kritéria:
Following a 48 h setting-in period, mortalities are recorded and the following criteria applied:
mortalita od 5 do 10 % populace za sedm dnů: aklimatizace dalších sedm dnů; je-li mortalita během následujících sedmi dnů vyšší než 5 %, vymění se celá obsádka,
mortalities of between 5 % and 10 % of population: acclimation for seven additional days; if more than 5 % mortality during second seven days, reject the entire batch;
mortalita nižší než 5 % populace za sedm dnů: obsádka se přijme.
mortalities of less than 5 % of population in seven days: accept the batch.
USPOŘÁDÁNÍ ZKOUŠKY
TEST DESIGN
„Uspořádáním zkoušky“ se rozumí výběr počtu zkušebních koncentrací a jejich odstupňování, počet nádrží pro každou koncentraci a počet ryb v nádrži.
The ‘test design’ relates to the selection of the number and spacing of the test concentrations, the number of tanks at each concentration level and the number of fish per tank.
Uspořádání by mělo být v ideálním případě zvoleno s ohledem na:
Ideally, the test design should be chosen with regard to:
cíl studie,
the objective of the study;
metodu statistické analýzy, která bude použita,
the method of statistical analysis that will be used;
dostupnost a cenu prostředků pro experiment.
the availability and cost of experimental resources.
S cílem studie by měly být specifikovány pokud možno statistická významnost, s jakou má být daná velikost změny (např. změny rychlosti růstu) rozeznána, nebo přesnost, s jakou má být odhadnuta hodnota ECx (např. při x = 10, 20 nebo 30, pokud možno ne méně než 10).
The statement of the objective should, if possible, specify the statistical power at which a given size of difference (e.g. in growth rate) is required to be detected or, alternatively, the precision with which the ECx (e.g. with x = 10, 20, or 30, and preferably not less than 10) is required to be estimated.
Bez těchto údajů nelze stanovit přesně rozsah studie.
Without this, a firm prescription of the size of the study cannot be given.
Je důležité vzít na vědomí, že uspořádání, které je optimální (nejlépe využívá prostředky) při použití jedné metody statistické analýzy, není nezbytně optimální pro jinou metodu.
It is important to recognise that a design which is optimal (makes best use of resources) for use with one method of statistical analysis is not necessarily optimal for another.
Doporučené uspořádání pro odhad LOEC/NOEC tedy nebývá stejné jako uspořádání pro analýzu regresí.
The recommended design for the estimation of a LOEC/NOEC would not therefore be the same as that recommended for analysis by regression.
V mnoha případech se regresní analýze dává přednost před analýzou rozptylu, a to z důvodů diskutovaných Stephanem a Rogersem (9).
In most of cases, regression analysis is preferable to the analysis of variance, for reasons discussed by Stephan and Rogers (8).
Není-li však nalezen vhodný regresní modelfound (r2 < 0,9), měla by být použito stanovení NOEC/LOEC.
However, when no suitable regression model is found (r2 < 0,9) NOEC/LOEC should be used.
Uspořádání pro regresní analýzu
Design for analysis by regression
Pro uspořádání zkoušky, která má být analyzována regresí, jsou důležitá tato hlediska:
The important considerations in the design of a test to be analysed by regression are:
koncentrace použité ve zkoušce musí v každém případě pokrývat koncentraci vyvolávající účinek (např. EC10,20,30) a rozsah koncentrací, při nichž dochází k účinku, který je předmětem zájmu.
The effect concentration (e.g. EC10,20,30) and the concentration range over which the effect of the test substance is of interest, should necessarily be spanned by the concentrations included in the test.
Přesnost, s jakou mohou být odhadnuty koncentrace vyvolávající účinek, bude nejlepší, bude-li koncentrace vyvolávající účinek ležet uprostřed rozsahu zkušebních koncentrací.
The precision with which estimates of effect concentrations can be made, will be best when the effect concentration is in the middle of the range of concentrations tested.
Předběžné orientační zkoušky mohou být užitečné při výběru vhodných zkušebních koncentrací,
A preliminary range-finding test may be helpful in selecting appropriate test concentrations.
aby mohl být vytvořen uspokojivý statistický model, měla by zkouška zahrnovat alespoň jednu kontrolní nádrž a pět dalších nádrží o různých koncentracích.
To enable satisfactory statistical modelling, the test should include at least one control tank and five additional tanks at different concentrations.
Popřípadě by při použití solubilizačního činidla měla být vedle zkušebních skupin nasazena jedna kontrolní skupina vystavená koncentraci solubilizačního činidla použité při nejvyšší zkušební koncentraci (viz body 1.8.3 a 1.8.4),
Where appropriate, when a solubilising agent is used, one control containing the solubilising agent at the highest tested concentration should be run in addition to the test series (see Sections 1.8.3 and 1.8.4).
může být použita vhodná geometrická nebo logaritmická řada koncentrací (10) (viz doplněk 3).
An appropriate geometric series or logarithmic series (9) (see Appendix 3) may be used.
Upřednostňuje se logaritmické stupňování koncentrací,
Logarithmic spacing of test concentration is to be preferred.
je-li k dispozici více než šest nádrží, měly by být další nádrže použity buď pro duplicitní stanovení, nebo by měly být použity pro koncentrace rozložené v rozsahu koncentrací tak, aby se zmenšily rozestupy mezi koncentracemi.
If more than six tanks are available, the additional tanks should either be used to provide replication or distributed across the range of concentrations in order to enable closer spacing of the levels.
Obě použití lze doporučit stejnou měrou.
Either of these measures are equally desirable.
Uspořádání pro odhad NOEC/LOEC analýzou rozptylu (ANOVA)
Design for estimation of a NOEC/LOEC using Analysis of Variance (ANOVA) There should preferably be replicate tanks at each concentration, and statistical analysis should be at the tank level (10). Without replicate tanks, no allowance can be made for variability between tanks beyond that due to individual fish.
Pro každou koncentraci by měly být nejlépe k dispozici nádrže pro duplicitní stanovení a statistická analýza by měla být provedena na úrovni nádrže (11). Bez duplicitních nádrží není možné zohlednit jinou variabilitu mezi nádržemi, než jaká je důsledkem rozdílů mezi jednotlivými rybami.
However, experience has shown (11) that between-tank variability was very small compared with within-tank (i.e. between-fish) variability in the case examined.
Ve vyšetřovaném případě (12) se však ukázalo, že variabilita mezi nádržemi byla velmi malá ve srovnání s variabilitou v rámci nádrže (tj. mezi rybami). Relativně přijatelnou alternativou je tedy provedení statistické analýzy pro jednotlivé ryby.
Therefore a relatively acceptable alternative is to perform statistical analysis at the level of individual fish.
Zpravidla se použije alespoň pět zkušebních koncentrací tvořících geometrickou řadu s faktorem nepřekračujícím 3,2.
Conventionally, at least five test concentrations in a geometric series with a factor preferably not exceeding 3,2 are used.
Provádí-li se zkouška s duplicitními nádržemi, měl by být počet duplicitních kontrolních nádrží, a tedy i počet ryb, dvojnásobkem počtu použitého pro každou zkušební koncentraci, jenž by měl být pro všechny koncentrace stejný (13, 14, 15).
Generally, when tests are performed with replicate tanks, the number of replicate control tanks and therefore the number of fish should be the double of the number in each of the test concentrations, which should be of equal size (12)(13)(14).