natgillin/translations-raw huggingface dataset:
D., Spielmann, H., and Zucco, F. (1995). Practical aspects of the validation of toxicity test procedures.
D., Spielmann, H., and Zucco, F., (1995) Practical aspects of the validation of toxicity test procedures.
ATLA 23, 129–147.
ATLA 23, p. 129-147.
ICCVAM (Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods). (1997). Validation and Regulatory Acceptance of Toxicological Test Methods. NIH Publication No.
ICCVAM, (Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods)., (1997) Validation and Regulatory Acceptance of Toxicological Test Methods.
ECVAM (1998). ECVAM News & Views.
ECVAM, (1998) ECVAM News & Views.
ATLA 26, 275–280.
ATLA 26, 275-280.
ICCVAM (Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods). (2002). ICCVAM evaluation of EpiDermTM, EPISKINTM (EPI-200), and the Rat Skin Transcutaneous Electrical Resistance (TER) assay: In Vitro test methods for assessing dermal corrosivity potential of chemicals. NIH Publication No.
ICCVAM (Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods)., (2002) ICCVAM evaluation of EpiDermTM, EPISKINTM (EPI-200), and the Rat Skin Transcutaneous Electrical Resistance (TER) assay: In Vitro test methods for assessing dermal corrosivity potential of chemicals.
OECD (2002) Extended Expert Consultation Meeting on The In Vitro Skin Corrosion Test Guideline Proposal, Berlin, 1st -2nd November 2001, Secretariat's Final Summary Report, 27th March 2002, OECD ENV/EHS, available upon request from the Secretariat.
OECD (2002) Extended Expert Consultation Meeting on The In Vitro Skin Corrosion Test Guideline Proposal, Berlin, 1st–2nd November 2001, Secretariat's Final Summary Report, 27th March 2002, OECD ENV/EHS, available upon request from the Secretariat.
Oliver, G.J.A., Pemberton, M.A., and Rhodes, C. (1986). An in vitro skin corrosivity test -modificationsand validation.
Oliver, G.J.A., Pemberton, M.A., and Rhodes, C., (1986) An in vitro skin corrosivity test -modificationsand validation.
Botham, P.A., Hall, T.J., Dennett, R., McCall, J.C., Basketter, D.A., Whittle, E., Cheeseman, M., Esdaile, D.J., and Gardner, J. (1992).
Botham, P.A., Hall, T.J., Dennett, R., McCall, J.C., Basketter, D.A., Whittle, E., Cheeseman, M., Esdaile, D.J., and Gardner, J., (1992) The skin corrosivity test in vitro: results of an interlaboratory trial.
(1991). Rat Strain and Stock Comparisons Using a Functional Observational Battery: Baseline Values and Effects of amitraz.
Toxic.
Toxic. in Vitro 6, 191–194.
In Vitro 6, p. 191-194.
Worth AP, Fentem JH, Balls M, Botham PA, Curren RD, Earl LK, Esdaile DJ, Liebsch M (1998). An Evaluation of the Proposed OECD Testing Strategy for Skin Corrosion.
Worth A.P., Fentem J.H., Balls, M., Botham, P.A., Curren, R.D., Earl, L.K., Esdaile D.J., Liebsch, M., (1998) An Evaluation of the Proposed OECD Testing Strategy for Skin Corrosion.
ATLA 26: 709–720.
ATLA 26, p. 709-720
Basketter, D.A., Chamberlain, M., Griffiths, H.A., Rowson, M., Whittle, E., York, M. (1997). The classification of skin irritants by human patch test.
Basketter, D.A., Chamberlain, M., Griffiths, H.A., Rowson, M., Whittle, E., York, M., (1997) The classification of skin irritants by human patch test.
Oliver G.J.A, Pemberton M.A and Rhodes C. (1988). An In Vitro model for identifying skin-corrosive chemicals.
Oliver G.J.A, Pemberton M.A and Rhodes C., (1988) An In Vitro model for identifying skin-corrosive chemicals.
I. Initial Validation.
I. Initial Validation.
Toxic. in Vitro.
Toxicology In Vitro.
Přístroj pro zkoušku TER na kůži potkana
Apparatus for the rat skin TER assay
vnitřní (silná) elektroda
inner (thick) electrode
krokosvorka
crocodile clip
vnější (tenká) elektroda
outer (thin) electrode
teflonová trubička
PTFE tube
pružinová svorka
spring clip
receptorová komora (trubička) k jednorázovému použití
receptor chamber (disposable tube)
roztok síranu hořečnatého (154 mM)
magnesium sulphate (154 mM)
epidermální strana terčíku kůže
epidermis of skin disc
dermální strana terčíku kůže
dermis of skin disc
pryžový O-kroužek
rubber 'O' ring
Rozměry teflonové a receptorové trubičky a použitých elektrod
Dimensions of the polytetrafluoroethylene (PFTE) and receptor tubes and electrodes used
krokosvorka
Crocodile clip
Kritické faktory přístroje uvedeného výše:
Critical factors of the apparatus shown above:
vnitřní průměr teflonové trubičky,
the inner diameter of the PTFE tube,
taková délka elektrod vzhledem k teflonové trubičce a receptorové trubičce, aby se elektrody nedotýkaly terčíku kůže a aby standardní délka elektrody byla ve styku s roztokem MgSO4,
the length of the electrodes relative to the PTFE tube and receptor tube, such that the skin disc is not touched by the electrodes and that a standard length of electrode is in contact with the MgSO4 solution,
objem roztoku MgSO4 v receptorové trubičce musí vzhledem k hladině v teflonové trubičce dávat takovou výšku kapaliny, jak je znázorněno na obrázku 1,
the amount of MgSO4 solution in the receptor tube should give a depth of liquid, relative to the level in the PFTE tube, as shown in Figure 1,
terčík kůže musí být k teflonové trubičce připevněn tak, aby elektrický odpor představoval skutečnou míru vlastností kůže.
the skin disk should be fixed well enough to the PFTE tube, such that the electrical resistance is a true measure of the skin properties.
Tato zkušební metoda je rovnocenná metodě OECD TG 431 (2004).
This testing method is equivalent to the OECD TG 431 (2004).
Poleptáním kůže se rozumí nevratné poškození tkáně kůže po aplikaci zkoušeného materiálu (definované globálně harmonizovaným systémem klasifikace a označování látek a přípravků (GHS)) (1).
Skin corrosion refers to the production of irreversible tissue damage in the skin following the application of a test material [as defined by the Globally Harmonised System for the Classification and Labelling of Chemical Substances and Mixtures (GHS)] (1).
Tato zkušební metoda nevyžaduje použití živých zvířat ani zvířecí tkáně pro stanovení leptavých účinků na kůži.
This Testing Method does not require the use of live animals or animal tissue for the assessment of skin Corrosivity.
Snaha o omezení bolesti a utrpení pokusných zvířat spojené s tímto postupem vedla k takové revizi zkušební metody B.4, která umožňuje stanovit poleptání kůže alternativními metodami in vitro, vylučujícími bolest a utrpení zvířat.
Concern for the pain and suffering involved with this procedure has been addressed in the revision of testing method B.4 that allows for the determination of skin corrosion by using alternative, in vitro, methods, avoiding pain and suffering of animals.
Poté byla provedena řádná validační studie metod in vitro (6, 7, 8) pro posuzování leptavých účinků na kůži (4, 5).
Following this, a formal, validation study of in vitro methods for assessing skin corrosion (4)(5) was conducted (6)(7)(8).
Závěr z těchto studií a z dalších publikací (9) vedl k doporučení, že pro posouzení leptavých účinků na kůži in vivo by mohly být použity tyto zkoušky (9, 10, 11, 12, 13): zkouška pomocí modelu lidské kůže (tato metoda) a zkouška transkutánního elektrického odporu (viz zkušební metoda B.40).
The outcome of these studies and other published literature (9) led to the recommendation that the following tests could be used for the assessment of the in vivo skin corrosivity (10)(11)12)(13): the human skin model test (this method) and the transcutaneous electrical resistance test (see testing method B.40).
Validační studie uvádějí, že zkoušky s využitím modelů lidské kůže (3, 4, 5, 9) již umožňují spolehlivě rozlišovat mezi známými látkami kůži leptajícími (žíravými) a neleptajícími (nežíravými).
Validation studies have reported that tests employing human skin models (3)(4)(5)(9) are able to reliably discriminate between known skin corrosives and non-corrosives.
Zkušební postup může rovněž umožnit rozlišení mezi látkami způsobujícími vážné a méně vážné poleptání kůže.
The test protocol may also provide an indication of the distinction between severe and less severe skin corrosives.
Dále umožňuje identifikaci neleptavých (nežíravých) látek a směsí, pokud je doložena důkazními stanoveními založenými na dalších dostupných údajích (např. pH, vztahy mezi strukturou a aktivitou, údaje o vlivu na lidi nebo na zvířata) (1, 2, 13, 14).
It further allows the identification of non-corrosive substances and mixtures when supported by a weight of evidence determination using other existing information (e.g. pH, structure-activity relationships, human and/or animal data) (1)(2)(13)(14).
Zkouška obvykle neskýtá odpovídající údaje o dráždivých účincích na kůži ani neumožňuje rozčleňovat žíravé látky na podskupiny, jak to umožňuje globálně harmonizovaný systém klasifikace (GHS) (1).
It does not normally provide adequate information on skin irritation, nor does it allow the subcategorisation of corrosive substances as permitted in the Globally Harmonised Classification System (GHS) (1).
Úplné vyhodnocení lokálních účinků na kůži po jednotlivých kožních expozicích se doporučuje provádět strategií postupného zkoušení, jak je uvedeno ve zkušební metodě B.4 (2) a jak je stanoveno globálně harmonizovaným systémem (GHS) (1).
For a full evaluation of local skin effects after single dermal exposure, it is recommended to follow the sequential testing strategy as appended to testing method B.4 (2) and provided in the Globally Harmonised System (GHS) (1).
Životaschopnost buněk: parametr, kterým se měří celková aktivita buněčné populace (např. schopnost buněčných mitochondriálních dehydrogenas redukovat vitální barvivo MMT) a který v závislosti na měřeném jevu a na použitém uspořádání zkoušky koreluje s celkovým počtem a/nebo životaschopností buněk.
Cell viability: parameter measuring total activity of a cell population (e.g. ability of cellular mitochondrial dehidrogenases to reduce the vital dye MTT), which, depending on the end point measured and the test design used, correlates with the total number and/or vitality of the cells.
nežíravý
Not Corrosive
Zkoušený materiál je aplikován na trojrozměrný model lidské kůže sestávající se přinejmenším z rekonstruované epidermis a funkční rohovité vrstvy (stratum corneum).
The test material is applied topically to a three-dimensional human skin model, comprising at least a reconstructed epidermis with a functional stratum corneum.
Materiály s leptavými účinky jsou identifikovány schopností způsobit při specifikované expoziční době pokles životaschopnosti buněk (stanovený např. použitím zkoušky redukce MTT) pod definovanou prahovou úroveň.
Corrosive materials are identified by their ability to produce a decrease in cell viability (as determined, for example, by using the MTT reduction assay (15)) below defined threshold levels at specified exposure periods.
Podstata stanovení pomocí modelu lidské kůže je založena na hypotéze, že chemické látky s leptavými účinky jsou ty, jež jsou schopny proniknout rohovitou vrstvou (stratum corneum) difuzí nebo erozí a jsou cytotoxické pro buňky v hlubších buněčných vrstvách.
The principle of the human skin model assay is based on the hypothesis that corrosive chemicals are able to penetrate the stratum corneum by diffusion or erosion, and are cytotoxic to the underlying cell layers.
Modely lidské kůže
Human skin models
Modely lidské kůže lze vyrobit nebo získat komerčně (např. modely EpiDermTM a EPISKINTM) (16, 17, 18, 19) nebo je lze připravit či vyrobit ve zkušební laboratoři (20, 21).
Human skin models can be constructed or obtained commercially (e.g. the EpiDermTM and EPISKINTM models) (16)(17)(18)(19) or be developed or constructed in the testing laboratory (20)(21).
Zohledňuje se, že používání lidské kůže podléhá vnitrostátním a mezinárodním etickým ohledům a podmínkám.
It is recognised that the use of human skin is subject to national and international ethical considerations and conditions.
Jakýkoli nový model by měl být validován (přinejmenším v rozsahu uvedeném v bodu 1.4.1.1.2).
Any new model should be validated (at least to the extent described under 1.4.1.1.2).
Modely lidské kůže použité pro tuto zkoušku musí splňovat následující podmínky:
Human skin models used for this test must comply with the following:
Všeobecné podmínky modelu
General model conditions:
K sestavení epitelu se musí použít lidské keratinocyty.
Human keratinocytes should be used to construct the epithelium.
Pod funkční rohovitou vrstvou (stratum corneum) musí být více vrstev životaschopných epitelových buněk.
Multiple layers of viable epithelial cells should be present under a functional stratum corneum.
Model kůže může mít také jako složku stromální vrstvu.
The skin model may also have a stromal component layer.
Stratum corneum musí být vícevrstvé s nezbytným profilem lipidů, umožňující funkci robustní překážky odolávající rychlému pronikání cytotoxických značkovacích látek.
Stratum corneum should be multi-layered with the necessary lipid profile to produce a functional barrier with robustness to resist rapid penetration of cytotoxic markers.
Izolační vlastnosti modelu musí předcházet pronikání materiálu okolo stratum corneum do životaschopných tkání.
The containment properties of the model should prevent passage of material around the stratum corneum to the viable tissue.
Proniknutí zkoušených chemických látek okolo stratum corneum by vedlo k chybnému modelování expozice kůže.
Passage of test chemicals around the stratum corneum will lead to poor modeling of the exposure to skin.
Model kůže nesmí být kontaminován bakteriálně (mj. mykoplasmaty) ani houbami a plísněmi.
The skin model should be free of contamination with bacteria (including mycoplasma) or fungi.
Podmínky funkčního modelu
Functional model conditions:
Rozsah životaschopnosti je obvykle kvantifikován pomocí MTT nebo jiných metabolicky přeměněných vitálních barviv.
The magnitude of viability is usually quantified by using MTT or the other metabolically converted vital dyes.
V těchto případech by absorbance (A) extrahovaného (solubilizovaného) barviva negativní kontrolní tkáně měla být nejméně 20násobně vyšší než absorbance extrakčního rozpouštědla samotného (22).
In these cases the optical density (OD) of the extracted (solubilised) dye from the negative control tissue should be at least 20 fold greater than the OD of the extraction solvent alone (for an overview, see (22)).
Negativní kontrolní tkáň musí být stabilní v kultuře (musí vést k podobným výsledkům měření životachopnosti) po dobu trvání expoziční doby zkoušky.
The negative control tissue should be stable in culture (provide similar viability measurements) for the duration of the test exposure period.
Stratum corneum musí být dostatečně odolné, aby odolalo rychlému proniknutí některých cytotoxických značkovacích chemických látek (např. 1 % Triton X-100).
The stratum corneum should be sufficiently robust to resist the rapid penetration of certain cytotoxic marker chemicals (e.g. 1 % Triton X-100).
Tuto vlastnost lze odhadnout pomocí expoziční doby nutné ke snížení životaschopnosti buněk o 50 % (ET50) (např. pro modely EpiDermTM a EPISKINTM je tato doba > 2 hodiny).
This property can be estimated by the exposure time required to reduce cell viability by 50 % (ET50) (e.g. for the EpiDermTM and EPISKINTM models this is > 2 hours).
Pro tkáň by měla být prokázána reprodukovatelnost v čase a přednostně i mezilaboratorně.
The tissue should demonstrate reproductivity over time and preferably between laboratories.
Kromě toho musí umožnit predikci leptavých účinků referenčních chemických látek (viz tabulka 1), pokud je vybrána ve zvoleném zkušebním postupu.
Moreover it should be capable of predicting the corrosive potential of the reference chemicals (see Table 1) when used in the testing protocol selected.
Pro každý experiment (expoziční dobu), včetně kontrolních, se použijí dvě repliky tkáně.
Two tissue replicates are used for each treatment (exposure time), including controls.
U kapalných materiálů musí být aplikováno dostatečné množství zkoušené látky, aby rovnoměrně pokrylo povrch kůže: musí být použito nejméně 25 μL/cm2.
For liquid materials, sufficient test substance must be applied to uniformly cover the skin surface: a minimum of 25 μL/cm2 should be used.
U pevných materiálů musí být aplikováno dostatečné množství zkoušené látky, aby rovnoměrně pokrylo kůži, a zkoušená látka by měla být ovlhčena deionizovanou nebo destilovanou vodou, aby byl zajištěn dobrý styk s kůží; pevné látky by měly být podle potřeby před aplikací rozemlety na prášek.
For solid materials, sufficient test substance must be applied evenly to cover the skin, and it should be moistened with deionised or distilled water to ensure good contact with the skin. Where appropriate, solids should be ground to a powder before application.
Aplikační metoda musí být pro zkoušenou látku vhodná (5).
The application method should be appropriate for the test substance (see e.g. reference 5).
Po uplynutí expoziční doby musí být zkoušený materiál z povrchu kůže pečlivě spláchnut vhodným pufrem, nebo 0,9 % roztokem NaCl.
At the end of the exposure period, the test material must be carefully washed from the skin surface with an appropriate buffer, or0,9 % NaCl.
Navrženými látkami pro pozitivní kontrolu jsou ledová kyselina octová nebo 8N KOH.
The suggested positive control substances are glacial acetic acid or 8N KOH.
Navrženými látkami pro negativní kontrolu jsou 0,9 % roztok NaCl nebo voda.
The suggested negative controls are 0,9 % NaCl or water.
Měření životaschopnosti buněk
Cell viability measurements
K měření životaschopnosti buněk lze používat pouze validované kvantitativní metody.
Only quantitative, validated, methods can be used to measure cell viability.
Míra životaschopnosti musí být slučitelná s využíváním v třírozměrném modelu tkáně.
Furthermore, the measure of viability must be compatible with use in a three-dimensional tissue construct.
Nespecifické vázání barviva nesmí rušit měření životaschopnosti.
Non-specific dye binding must not interfere with the viability measurement.
Proto nejsou vhodná barviva vážící proteiny a barviva nepodléhající metabolické konverzi (např. neutrální červeň).
Protein binding dyes and those which do not undergo metabolic conversion (e.g. neutral red) are therefore not appropriate.
Nejčastěji se používá stanovení redukce MTT (2-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-3,5-difenyl-2H-tetrazolium-bromid, thiazolylová modř: č. EINECS 206-069-5, č. CAS 298-93-1)), pro niž bylo prokázáno, že poskytuje správné a reprodukovatelné výsledky (5), ale lze používat i jiné.
The most frequently used assay is MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, Thiazolyl blue: EINECS number 206-069-5, CAS number 298-93-1)) reduction, which has been shown to give accurate and reproducible results (5) but others may be used.
Vzorek kůže se umístí do roztoku MTT o vhodné koncentraci (např. 0,3 až 1,0 mg/ml) při vhodné inkubační teplotě na dobu 3 hodin.
The skin sample is placed in an MTT solution of appropriate concentration (e.g. 0,3-1 mg/mL) at appropriate incubation temperature for three hours.
Vzniklá sraženina modrého formazanu se poté extrahuje rozpouštědlem (isopropylalkoholem) a koncentrace formazanu se stanoví měřením absorbance A při vlnové délce 545 až 595 nm.
The precipitated blue formazan product is then extracted using a solvent (isopropanol), and the concentration of the formazan is measured by determining the OD at wavelength between 540 and 595 nm.
Chemický účinek zkoušeného materiálu na vitální barvivo může imitovat účinek buněčného metabolismu, čímž může dojít k nesprávnému odhadu životaschopnosti.
Chemical action by the test material on the vital dye may mimic that of cellular metabolism leading to a false estimate of viability.
Bylo pozorováno, že k tomu dochází, nebyl-li zkoušený materiál z kůže úplně odstraněn oplachováním (9).
This has been shown to happen when such a test material is not completely removed from the skin by rinsing (9).
Jestliže zkoušený materiál působí přímo na vitální barvivo, musí být dodatečně zkontrolováno, zda zkoušené látky neruší stanovení životaschopnosti, a případně výsledky korigovat (9, 23).
If the test material directly acts on the vital dye, additional controls should be used to detect and correct for the test substances interference with the viability measurement (9)(23).
Hodnoty absorbance A pro každou tkáň a vypočtené hodnoty životaschopnosti buněk v procentech pro zkoušený materiál a pro pozitivní a negativní kontroly by měly být uvedeny ve formě tabulky, včetně údajů o duplicitních nebo opakovaných experimentech, středních a jednotlivých hodnot.
For each tissue, OD values and calculated percentage cell viability data for the test material, positive and negative controls, should be reported in tabular form, including data from replicate repeat experiments as appropriate, mean and individual values.
Hodnoty absorbance A dosažené pro každý zkoušený vzorek lze použít k výpočtu relativní životaschopnosti v procentech vzhledem k negativní kontrole, která je dohodou stanovena na úroveň 100 %.
The OD values obtained for each test sample can be used to calculate a percentage viability relative to the negative control, which is arbitrarily set at 100 %.
Hraniční procentuální podíl životaschopnosti buněk, kterým se rozlišují žíravé zkoušené materiály od nežíravých (nebo kterým se rozlišují různé třídy leptavých účinků), nebo statistické postupy použité k vyhodnocení výsledků a k identifikaci žíravých materiálů musí být jasně definovány a zdokumentovány, a musí být prokázána jejich vhodnost.
The cut-off percentage cell viability value distinguishing corrosive from non-corrosive test materials (or discriminating between different, corrosive classes), or the statistical procedure(s) used to evaluate the results and identify corrosive materials, must be clearly defined and documented, and be shown to be appropriate.
Obecně jsou tyto hraniční hodnoty stanoveny během optimalizace zkoušky, testovány během předvalidační fáze a potvrzeny validační studií.
In general, these cut-off values are established during test optimisation, tested during a prevalidation phase, and confirmed in a validation study.
Predikce leptavých účinků (žíravosti) je ve spojení s modelem EpiDermTM například dána takto (9):
As an example, the prediction of Corrosivity associated with the EpiDermTM model is (9):
jestliže po 3 minutách expozice je životaschopnost nižší než 50 %, nebo
if the viability after three minutes exposure is less than 50 %; or
jestliže po 3 minutách expozice je životaschopnost vyšší nebo rovna 50 % a životaschopnost po 1 hodině expozice je nižší než 15 %.
if the viability after three minutes exposure is greater than or equal to 50 % and the viability after 1 hour exposure is less than 15 %.
jestliže po 3 minutách expozice je životaschopnost vyšší nebo rovna 50 % a životaschopnost po 1 hodině expozice je vyšší nebo rovna 15 %.
if the viability after three minutes exposure is greater than or equal to 50 % and the viability after 1 hour exposure is greater than or equal to 15 %.
Zkoušené a kontrolní látky:
Test and control substance:
chemický název (názvy), např. název podle IUPAC nebo CAS a číslo CAS, je-li známo,
chemical names(s) such as IUPAC or CAS name and CAS number, if known,
čistota a složení látky nebo přípravku (v hmotnostních procentech),
purity and composition of the substance or preparation (in percentage(s) by weight),
fyzikálně-chemické vlastnosti, např. fyzikální stav, pH, stabilita, rozpustnost ve vodě, které jsou relevantní pro provedení studie,
physico-chemical properties such as physical state, pH, stability, water solubility relevant to the conduct of the study,
Zdůvodnění modelu kůže a použitého postupu.
Justification of the skin model and protocol used.
použitý buněčný systém,
cell system used,
kalibrační údaje pro měřicí zařízení použité pro měření životaschopnosti buněk (např. spektrofotometr),
calibration information for measuring device used for measuring cell viability (e.g. Spectrophotometer),
úplné podkladové údaje pro konkrétní použitý model kůže včetně jeho validity,
complete supporting information for the specific skin model used including its validity,
podrobnosti použitého zkušebního postupu,
details of the test procedure used,
použité zkušební dávky,
test doses used,