natgillin/translations-raw huggingface dataset:
V peletách z pupkové části bramboru a částí stonku se mohou se vyskytnout doprovodné populace fluoreskujících buněk s atypickou morfologií a křížově reagující saprofytické bakterie s velikostí a morfologií podobnou C. m. subsp. sepedonicus, ačkoli mnohem méně často než u IF testu.
Background populations of fluorescing cells with atypical morphology and cross reacting saprophytic bacteria with size and morphology similar to C. m. subsp. sepedonicus may occur, although much less frequent than in the IF test, in potato heel end core and stem segment pellets.
V úvahu bereme pouze fluoreskující buňky s typickou velikostí a morfologií, viz 5.3.2.
Consider only fluorescing cells with typical size and morphology, see in 5.3.2.
Interpretace výsledku testu FISH:
Interpretation of the FISH test result:
Výsledky FISH testu jsou platné, pokud jsou při použití FITC filtru jasně zeleně fluoreskující buňky s velikostí a morfologií typickou pro C. m. subsp. sepedonicus a při použití rhodaminového filtru jasně červeně fluoreskující buňky pozorovány ve všech pozitivních kontrolách a nejsou pozorovány v žádných negativních kontrolách.
Valid FISH test results are obtained if bright green fluorescent cells of size and morphology typical of C. m. subsp. sepedonicus are observed using the FITC filter and if bright red fluorescent cells using the rhodamine filter in all positive controls and not in any of the negative controls.
Vzorky, které obsahují alespoň 5 × 103 typických buněk na 1 ml resuspendované pelety, se považují za pravděpodobně infikované Cms.
Samples with at least 5 × 103 typical cells per ml of resuspended pellet are considered potentially contaminated.
Nutné je další testování.
Further testing is required.
Vzorky, které obsahují méně než 5 × 103 typických buněk na 1 ml resuspendované pelety, se považují za negativní.
Samples with less than 5 × 103 typical cells per ml of resuspended pellet are considered negative.
Výsledek FISH testu je negativní, pokud při použití rhodaminového filtru nejsou pozorovány jasně červeně fluoreskující buňky s velikostí a morfologií typickou pro C. m. subsp. sepedonicus, jestliže jsou tyto typické jasně červeně fluoreskující buňky při použití rhodaminového filtru pozorovány v pozitivních kontrolách.
The FISH test is negative if bright red fluorescent cells with size and morphology typical of C. m. subsp. sepedonicus are not observed using the rhodamine filter, provided that typical bright red fluorescent cells are observed in the positive control preparations when using the rhodamine filter.
Použije-li se PCR test jako hlavní screeningový test a je pozitivní, musí být jako druhý povinný screeningový test proveden IF test.
When the PCR test is used as the principal screening test and found to be positive, the IF test must be performed as a second compulsory screening test.
Pokud se PCR test používá jako druhý screeningový test a je pozitivní, je pro dokončení diagnózy nutné další testování podle postupového diagramu.
When the PCR test is used as the second screening test and found to be positive, further testing according to the flow scheme is required to complete the diagnosis.
Využití této metody v celém rozsahu jako hlavního screeningového testu se doporučuje jen tehdy, je-li požadována specializovaná expertíza.
Full exploitation of this method as principal screening test is only recommended when specialised expertise has been acquired.
Předběžné testování touto metodou by mělo umožnit reprodukovatelné zjištění 103 až 104 buněk C. m. subsp. sepedonicus na 1 ml přidaných do vzorku extraktů, které byly předtím testovány s negativním výsledkem.
Preliminary testing with this method should permit reproducible detection of 103 to 104 cells of C. m. subsp. sepedonicus per ml added to sample extracts which previously tested negative.
Pro dosažení maximální citlivosti a přesnosti ve všech laboratořích můžou být vyžadovány optimalizační pokusy.
Optimisation experiments may be required to achieve maximum levels of sensitivity and specificity in all laboratories.
Používejte validovaná PCR činidla a protokoly.
Use validated PCR reagents and protocols.
Dávejte přednost metodě s interní kontrolou.
Preferably select a method with an internal control.
Používejte vhodná bezpečnostní opatření, abyste zabránili kontaminaci vzorku cílovou DNA.
Use appropriate precautions to avoid contamination of sample with target DNA.
PCR test by měli provádět zkušení laboranti v laboratořích specializovaných na molekulární biologii, aby se minimalizovala možnost kontaminace cílovou DNA.
The PCR test should be performed by experienced technicians, in dedicated molecular biology laboratories, in order to minimise the possibility of contamination with target DNA.
S negativními kontrolami (u průběhu extrakce DNA a PCR) by se mělo vždy zacházet jako s konečnými vzorky, aby bylo jasné, jestli došlo k přenosu DNA.
Negative controls (for DNA extraction and PCR procedures) should always be handled as final samples in the procedure, to make evident whether any carry over of DNA has occurred.
PRC test by měl zahrnovat následující negativní kontroly:
The following negative controls should be included in the PCR test:
extraktu ze vzorku, který byl předtím testován na C. m. subsp. sepedonicus s negativním výsledkem,
sample extract that previously tested negative for C. m. subsp. Sepedonicus,
kontroly pufru používaného pro extrakci bakterie a DNA ze vzorku,
buffer controls used for extracting the bacterium and the DNA from the sample,
reakční směs PCR.
PCR-reaction mix.
Měly by být zahrnuty následující pozitivní kontroly:
The following positive controls should be included:
alikvotní části resuspendovaných pelet, k nimž byl přidán C. m. subsp. sepedonicus (příprava viz dodatek 2),
aliquots of resuspended pellets to which C. m. subsp. sepedonicus has been added (preparation see Appendix 2),
suspenze 106 buněk na 1 ml C. m. subsp. sepedonicus ve vodě z virulentního izolátu (např. NCPPB 2140 nebo NCPPB 4053),
a suspension of 106 cells per ml of C. m. subsp. sepedonicus in water from a virulent isolate (e.g. NCPPB 2140 or NCPPB 4053),
pokud možno používejte při provádění PCR testu také DNA extrahovanou z pozitivních kontrolních vzorků.
if possible also use DNA extracted from positive control samples in the PCR test.
Abyste zabránili možné kontaminaci, připravte pozitivní kontroly v odděleném prostředí než vzorky, které budou testovány.
To avoid potential contamination prepare positive controls in a separate environment from samples to be tested.
Extrakty ze vzorků by měly být pokud možno bez zeminy.
Sample extracts should be as free as possible from soil.
V případě použití PCR testu je potřeba připravit extrakty z umytých brambor.
It could therefore in certain cases advisible to prepare extractions from washed potatoes if PCR protocols are to be used.
Metody purifikace DNA
DNA purification methods
Používejte výše popsané pozitivní a negativní kontrolní vzorky.
Use positive and negative control samples as described above.
Připravte kontrolní materiál stejným způsobem jako vzorek (vzorky).
Prepare control material in an identical manner as the sample(s).
K purifikaci cílové DNA z komplexních substrátů vzorků jsou k dispozici různé metody odstraňující inhibitory PCR dispozici a jiných enzymatických reakcí a koncentrující cílovou DNA v extraktu vzorku.
A variety of methods are available for purification of target DNA from complex sample substrates, thus removing inhibitors of PCR and other enzymatic reactions and concentrating target DNA in the sample extract.
Následující metoda byla optimalizována pro použití s validovanou metodou PCR, uvedenou v dodatku 6.
The following method has been optimised for use with the validated PCR method shown in Appendix 6.
Metoda podle Pastrika (2000)
6.1.(a) Method according to Pastrik (2000)
Napipetujte 220 µl lýzového pufru (100 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl [pH 8,0], 1 mM EDTA [pH 8,0]) do mikrozkumavky o objemu 1,5 ml.
Pipette 220 µl of lysis buffer (100 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl [pH 8,0], 1 mM EDTA [pH 8,0]) into a 1,5 ml Eppendorf tube.
Přidejte 100 µl vzorkového extrakt ze vzorku a umístěte do termobloku nebo vodní lázně o teplotě 95 °C na dobu 10 minut.
Add 100 µl sample extract and place in a heating block or waterbath at 95 °C for 10 minutes.
Vložte mikrozkumavku na 5 min. do ledu.
Put tube on ice for five minutes.
Přidejte 80 µl zásobního roztoku lyzozymu (50 mg lyzozymu na 1 ml v 10 mM Tris HCl, pH 8,0) a inkubujte při teplotě 37 °C po dobu 30 minut.
Add 80 µl Lysozyme stock solution (50 mg lysozyme per ml in 10 mM Tris HCl, pH 8,0) and incubate at 37 °C for 30 minutes.
Přidejte 220 µl Easy DNA® roztok A (Invitrogen), dobře promíchejte třepáním a inkubujte při teplotě 65 °C po dobu 30 minut.
Add 220 µl of Easy DNA® solution A (Invitrogen), mix well by vortexing and incubate at 65 °C for 30 minutes.
Přidejte 100 µl Easy DNA® roztok B (Invitrogen), silně míchejte třepáním, až usazenina sama poteče do mikrozkumavky a vzorek začne být stejnoměrně viskózní.
Add 100 µl of Easy DNA® solution B (Invitrogen), vortex vigorously until the precipitate runs freely in the tube and the sample is uniformly viscous.
Přidejte 500 µl chloroformu a míchejte třepáním, až se viskozita sníží a směs se stane homogenní.
Add 500 µl of chloroform and vortex until the viscosity decreases and the mixture is homogeneous.
Odstřeďujte na 15000 g po dobu 20 minut při 4 °C pro oddělení fází a vytvoření mezifáze.
Centrifuge at 15000 g for 20 minutes at 4 °C to separate phases and form the interphase.
Přeneste horní fázi do čisté mikrozkumavky.
Transfer the upper phase into a fresh Eppendorf tube.
Přidejte 1 ml 100 % etanolu (–20 °C), krátce promíchejte třepáním a inkubujte na ledu po dobu 10 minut.
Add 1 ml of 100 % ethanol (–20 °C) vortex briefly and incubate on ice for 10 minutes.
Odstřeďujte na 15000 g po dobu 20 minut při 4 °C a odstraňte z pelety etanol.
Centrifuge at 15000 g for 20 minutes at 4 °C and remove ethanol from pellet.
Přidejte 500 µl 80 % etanolu (–20 °C) a promíchejte převracením mikrozkumavky.
Add 500 µl 80 % ethanol (–20 °C) and mix by inverting the tube.
Odstřeďujte na 15000 g po dobu 10 minut při 4 °C, peletu zachovejte a odstraňte etanol.
Centrifuge at 15000 g for 10 minutes at 4 °C, save the pellet and remove ethanol.
Nechte peletu uschnout na vzduchu nebo v DNA speed vac.
Allow the pellet to dry in air or in a DNA speed vac.
Resuspendujte peletu v 100 µl sterilní vody (UPW) a nechte stát nejméně 20 minut při pokojové teplotě.
Resuspend the pellet in 100 µl sterile UPW and leave at room temperature for at least 20 minutes.
Skladujte při teplotě –20 °C až do upotřebení při PCR.
Store at –20 °C until required for PCR.
Jakoukoli bílou usazeninu odstraňte odstředěním a pro PCR použijte 5 µl supernatantu obsahujícího DNA. 6.1b) Jiné metody
Spin down any white precipitate by centrifugation and use 5 µl of the supernatant containing DNA for the PCR.
Jiné metody extrakce DNA (např. Qiagen DNeasy Plant Kit) by se mohly použít, pokud by se prokázalo, že jsou při purifikaci DNA z kontrolních vzorků obsahujících 103 až 104 patogenních buněk na 1 ml stejně efektivní.
6.1.(b) Other methods Other DNA extraction methods (e.g. Qiagen DNeasy Plant Kit) could be applied providing that they are proven to be equally as effective in purifying DNA from control samples containing 103 to 104 pathogen cells per ml.
PCR
PCR
Připravte testované vzorky a kontroly pro PCR podle validovaného protokolu (dodatek 6).
Prepare test and control templates for PCR according to the validated protocol (Appendix 6).
Připravte jeden desetinný roztok vzorku DNA (1:10 ve sterilní vodě).
Prepare one decimal dilution of sample DNA extract (1:10 in UPW).
Připravte příslušnou reakční směs pro PCR v prostředí, kde nehrozí kontaminace, podle zveřejněného protokolu (dodatek 6).
Prepare the appropriate PCR reaction mix in a contamination-free environment according to the published protocol (Appendix 6).
Validovaný protokol PCR je multiplexová reakce, která zahrnuje také interní kontrolu PCR.
The validated PCR protocol is a multiplex reaction that also incorporates an internal PCR control.
Přidejte do sterilních PCR mikrozkumavek 5 µl extraktu DNA na 25 µl PCR reakce.
Add 5 µl of DNA extract per 25 µl PCR reaction in sterile PCR tubes.
Zahrňte negativní kontrolní vzorek obsahující pouze reakční směs PCR a přidejte stejnou sterilní vodu UPW, která byla použita do směsi PCR namísto vzorku.
Incorporate a negative control sample containing only PCR reaction mix and add the same source of UPW as used in the PCR mix in place of sample.
Umístěte PCR mikrozkumavky do stejného termocykleru, který byl použit při počátečním testování, a proveďte vhodně optimalizovaný program PCR (dodatek 6).
Place tubes in the same thermal cycler which was used in preliminary testing and run the appropriately optimised PCR programme (Appendix 6).
Analýza produktu PCR
Analysis of the PCR product
Rozdělte amplikony PCR elektroforézou v agarózovém gelu.
Resolve PCR amplicons by agarose gel electrophoresis.
Naneste nejméně 12 µl amplifikované reakční směsi DNA z každého vzorku smíchané s 3 µl nanášecího pufru (dodatek 6) do 2,0 % (w/v) agarózového gelu v Tris-acetát-EDTA (TAE) pufru (dodatek 6) při 5–8 V na cm.
Run at least 12 µl of amplified DNA reaction mixture from each sample mixed with 3 µl loading buffer (Appendix 6) in 2,0 % (w/v) agarose gels in tris-acetate-EDTA (TAE) buffer (Appendix 6) at 5 to 8 V per cm.
Používejte vhodný marker DNA, např. 100 bp ladder.
Use an appropriate DNA marker, e.g. 100 bp ladder.
Detekujte proužky DNA barvením v ethidium bromidu (0,5 mg na l) po dobu 30–45 minut, za použití vhodných bezpečnostních opatření pro zacházení s tímto mutagenem.
Reveal DNA bands by staining in ethidium bromide (0,5 mg per L) for 30 to 45 min taking appropriate precautions for handling this mutagen.
V obarveném a UV (krátké vlnové délky, např. 302 nm) prosvíceném gelu hledejte amplifikované produkty PCR o očekávané velikosti a výsledek zdokumentujte.
Observe stained gel under short wave UV transillumination (e.g. λ = 302 nm) for amplified PCR products of the expected size (Appendix 6) and document.
U všech nových nálezů/případů zkontrolujte pravost amplikonu PCR provedením restrikční enzymové analýzy ve zbývajícím vzorku amplifikované DNA inkubací při optimální teplotě a době s vhodným restrikčním enzymem a pufrem (viz dodatek 6).
For all new findings/cases verify authenticity of the PCR amplicon by performing restriction enzyme analysis on a sample of the remaining amplified DNA by incubating at the optimum temperature and time with an appropriate enzyme and buffer (see Appendix 6).
Rozdělte naštěpené fragmenty elektroforézou vagarózovém gelu a pozorujte charakteristický vzor restrikčního fragmentu pod UV prosvícením po obarvení ethidiumbromidem a porovnejte s neštěpenou a štěpenou pozitivní kontrolou.
Resolve the digested fragments by agarose gel electrophoresis as before and observe characteristic restriction fragment pattern under UV transillumination after ethidium bromide staining and compare with the undigested and digested positive control.
Interpretace výsledku PCR testu:
Interpretation of the PCR test result:
PCR test je negativní, pokud amplikon typický pro C. m. subsp. sepedonicus očekávané velikosti nebyl zjištěn v daném vzorku, ale byl zjištěn ve všech pozitivních kontrolních vzorcích (v případě vícenásobné PCR s rostlinnými interními kontrolními primery: druhý produkt PCR očekávané velikosti musí být amplifikován s daným vzorkem).
The PCR test is negative if the C. m. subsp. sepedonicus-specific PCR amplicon of expected size is not detected for the sample in question but is detected for all positive control samples (in case of multiplex PCR with plant specific internal control primers: a second PCR-product of expected size must be amplified with the sample in question).
PCR test je pozitivní, pokud byl zjištěn amplikon typický pro C. m. subsp. sepedonicus očekávané velikosti a vzoru (pokud se požaduje), za předpokladu, že nebyl amplifikován žádným z negativních kontrolních vzorků.
The PCR test is positive if the C. m. subsp. sepedonicus-specific PCR amplicon of expected size and restriction pattern (when required) is detected, providing that it is not amplified from any of the negative control samples.
Spolehlivého potvrzení pozitivního výsledku lze dosáhnout také opakováním testu s druhou sadou PCR primerů (oddíl 9.3).
Reliable confirmation of a positive result can also be obtained by repeating the test with a second set of PCR primers (section 9.3).
Lze mít podezření na inhibici PCR, pokud byl očekávaný amplikon získán z pozitivního kontrolního vzorku obsahujícího C. m. subsp. sepedonicus ve vodě, ale z pozitivní kontroly s C. m. subsp. sepedonicus v bramborovém extraktu byly negativní.
Inhibition of the PCR may be suspected if the expected amplicon is obtained from the positive control sample containing C. m. subsp. sepedonicus in water but negative results are obtained from positive controls with C. m. subsp. sepedonicus in potato extract.
Ve vícenásobných protokolech PCR s interními kontrolami PCR k inhibici reakce došlo, pokud nebyl získán žádný z obou amplikonů.
In multiplex PCR protocols with internal PCR controls, inhibition of the reaction is indicated when neither of the two amplicons are obtained.
Lze mít podezření na kontaminaci, pokud byl očekávaný amplikon získán z jedné nebo více negativních zkoušek.
Contamination may be suspected if the expected amplicon is obtained from one or more of the negative controls.
BIOTEST
BIOASSAY TEST
Předběžné testování touto metodou by mělo umožnit reprodukovatelné zjištění 103 až 104 jednotek C. m. subsp. sepedonicus tvořících kolonie na l ml přidaný k extraktům ze vzorku, které původně byly testovány s negativním výsledkem (příprava viz dodatek 2).
Preliminary testing with this method should permit reproducible detection of 103 to 104 colony-forming units of C. m. subsp. sepedonicus per ml added to sample extracts that previously tested negative (preparation see Appendix 2).
Nejvyšší citlivost zjištění lze očekávat při použití čerstvě připraveného extraktu ze vzorku a optimálních růstových podmínkách.
Highest sensitivity of detection can be expected when using freshly prepared sample extract and optimal growth conditions.
Metodu však lze úspěšně použít i na extrakty, které byly uchovávány v glycerolu při teplotě –68 až –86 °C.
However, the method can be successfully applied to extracts that have been stored under glycerol at –68 to –86 °C.
Některé odrůdy lilku vejcoplodého poskytují vynikající selektivní obohacující médium pro růst C. m. subsp. sepedonicus dokonce v případě nepřítomnosti příznaků a poskytují také vynikající základní konfirmační test.
Some varieties of eggplant provide an excellent selective enrichment medium for the growth of C. m. subsp. sepedonicus even in the absence of symptoms and also provide an excellent confirmatory host test.
Pro omezení nebezpečí falešně negativních výsledků testů by měly být vytvořeny optimální růstové podmínky.
Growth conditions should be optimal to reduce the risk of false negative test results.
Podrobnosti o pěstování viz dodatek 8.
For cultural details, see Appendix 8.
Rozdělte celý zbytek testované resuspendované pelety z oddílu 3.1.6 nebo 3.2.5 mezi rostliny lilku jednou z níže uvedených metod (7.3 nebo 7.4).
Distribute the whole of the remaining test aliquot of the resuspended pellet from section 3.1.6 or 3.2.5 between eggplants by one of the methods given below (7.3 or 7.4).
Používejte pouze rostliny ve fázi 2–3 listů do úplného rozvinutí třetího pravého listu.
Use only plants at leaf stage two to three up to full expansion of the third true leaf.
Abyste zajistili úplné využití resuspendované pelety i efektivní inokulaci, bude pro níže popsané postupy potřeba 15–25 lilků na vzorek.
In order to ensure complete utilisation of the resuspended pellet as well as effective inoculation the procedures outlined below will require 15 to 25 eggplants per sample.
Před inokulací 1 až 2 dny nezalévejte, aby se snížilo vnitřní napětí buněk.
Do not water eggplants for one to two days prior to inoculation to reduce turgor pressure.
Inokulace zářezem
Slit inoculation
Držte rostlinu mezi dvěma prsty a pipetou přeneste na stonek mezi děložními lístky a prvním pravým listem kapku (přibližně 5–10 µl) suspendované pelety.
Holding the plant between two fingers, pipette a drop (approximately 5 to 10 µl) of the suspended pellet on the stem between the cotyledons and the first leaf.
Pomocí sterilního skalpelu proveďte šikmý zářez dlouhý asi 1,0 cm a hluboký přibližně jako 2/3 průměru stonku, řez začněte od peletové kapky.
Using a sterile scalpel, make a diagonal slit, about 1,0 cm long and approximately 2/3 of the stem thickness deep, starting the cut from the pellet drop.
Zakryjte zářez sterilní vazelínou z injekční stříkačky.
Seal the cut with sterile vaseline from a syringe.
Inokulace injekční stříkačkou
Syringe inoculation
Stonky lilku inokulujte těsně nad děložními lístky pomocí injekční stříkačky s podkožní jehlou (ne méně než 23 G).
Inoculate the eggplant stems just above the cotyledons using a syringe fitted with a hypodermic needle (not less than 23 G).
Vzorek rozdělte mezi rostliny lilku.
Distribute the sample between the eggplants.
Jako pozitivní kontroly inokulujte 5 rostlin vodní suspenzí 105 až 106 buněk na 1 ml známé kultury C. m. subsp. sepedonicus a pokud možno s i pletivem z přirozeně infikovaných hlíz bramboru (viz oddíl 4) stejnou inokulační metodou (7.3 nebo 7.4).
As the positive controls, inoculate 5 plants with an aqueous suspension of 105 to 106 cells per ml of a known culture of C. m. subsp. sepedonicus and, where possible, with naturally infected tuber tissue (see section 4) by the same inoculation method (7.3 or 7.4).
Jako negativní kontrolu inokulujte 5 rostlin sterilním peletovým pufrem stejnou inokulační metodou (7.3 nebo 7.4).
As the negative control, inoculate 5 plants with sterile pellet buffer by the same inoculation method (7.3 or 7.4).
Inkubujte rostliny v karanténě po dobu až 4 týdnů při teplotě 18–24 °C.
Incubate plants in quarantine facilities for up to four weeks at 18 to 24 °C.
Inkubujte rostliny za dostatečného osvětlení a vysoké vlhkosti (70–80 %) a zalévejte je tak, aby nedošlo k nasávání vody nebo vadnutí kvůli nedostatku vody.
Incubate plants with sufficient light and high humidity (70 to 80 %) and water to prevent water logging or wilting through water deficiency.
Buňky C. m. subsp. sepedonicus odumírají při teplotách nad 30 °C a optimální teplota je 21 °C.
sepedonicus cells are killed at temperatures above 30 °C and the optimum temperature is 21 °C.
Abyste zamezili kontaminaci, inkubujte rostliny pro pozitivní kontroly a negativní kontroly ve skleníku nebo růstové komoře na jasně oddělených policích, anebo při nedostatku místa zajistěte přísné oddělení mezi zacházením s nimi.
To avoid contamination incubate positive control and negative control plants on clearly separated benches in a glasshouse or growth chamber or, in case space is limited, ensure strict separation between treatments.
Pokud musí být rostliny pro různé vzorky inkubovány blízko sebe, oddělte je vhodnými přepážkami.
If plants for different samples must be incubated close together, separate them with appropriate screens.
Při hnojení, zalévání, kontrole a jiné manipulaci věnujte maximální pozornost tomu, aby nedošlo ke kontaminaci.
When fertilising, watering, inspecting and any other manipulations take great care to avoid cross-contamination.
Je nezbytné, aby skleníky i růstové komory byly chráněny před veškerým hmyzem, protože by mohl přenášet bakterie z jednoho vzorku na druhý.
It is essential to keep glasshouses and growth chambers free of all insect pests since they may transmit the bacterium from sample to sample.
Pravidelně počínaje 8. dnem prověřujte přítomnost příznaků.
Examine regularly for symptoms starting after a week.
Počítejte rostliny vykazující příznaky.
Count the number of plants showing symptoms.
subsp. sepedonicus působí u lilku vejcoplodého vadnutí listů, které může začít jako okrajová nebo mezižilková ochablost.
subsp. sepedonicus causes leaf wilting in eggplants which may commence as a marginal or interveinal flaccidity.