natgillin/translations-raw huggingface dataset:
A II [E], AIII [E] = площите съответно на пикове II и III на проба [E], получени в 8.4.2,
A II [E], AIII [E] = the areas of peaks II and III respectively in the sample [E] obtained in 8.4.2,
R II, RIII = факторите на сигнала, изчислени в 9.1.1.
R II, RIII = the response factors calculated in 9.1.1.
Изчисляване на относителното време на задържане на пик III на проба [E]:
Calculation of the relative retention time of peak III in sample [E]:
RRT III [E] = относителното време на задържане на пик III на проба [E],
RRT III [E] = the relative retention time of peak III in sample [E],
RT III [E] = времето на задържане на пик III на проба [E], получено в 8.4.2,
RT III [E] = the retention time of peak III in sample [E] obtained in 8.4.2,
RT III [5] = времето на задържане на пик III на контролната проба [5], получено в 8.5.3.
RT III [5] = the retention time of peak III in control sample [5] obtained in 8.5.3.
Експериментите показаха, че има линейна връзка между относителното време на задържане на пик III, т.e.
Experiments have shown that there is a linear relation between the relative retention time of peak III, i.e.
RRTIII [E], и процента на прибавена суроватка на прах до 10 %
RRTIII [E] and the percentage of whey powder added up to 10 %
RRTIII [E] е < 1,000, когато съдържанието на суроватка е > 5 %,
The RRTIII [E] is < 1,000 when the whey content is > 5 %;
RRTIII [E] е ≥ 1,000, когато съдържанието на суроватка е ≤ 5 %.
The RRTIII [E] is ≥ 1,000 when the whey content is ≤ 5 %.
Допустимата неопределеност за стойностите на RRTIII е ± 0,002.
The uncertainty allowed for the values of RRTIII is ± 0,002.
Обикновено стойността на RRTIII [0] се отклонява малко от 1,034.
Normally the value of RRTIII [0] deviates little from 1,034.
В зависимост от състоянието на колоните стойността може да се доближава до 1,000, но трябва винаги да бъде по-голяма.
Depending on the condition of the columns, the value may approach 1,000, but it shall always be greater.
Изчисляване на процента на сирищна суроватка на прах в пробата:
Calculation of the percentage of rennet whey powder in the sample:
W = SIII[E] – [1,3 + (SIII[0] – 0, 9)]
W = SIII[E] – [1, 3 + (SIII[0] – 0,9)]
W = процент (m/m) сирищна суроватка в пробата [E];
W = the percentage m/m of rennet whey in the sample [E];
S III [E] = относителната площ на пик III на тестова проба [E], получена както в 9.1.2;
S III [E] = the relative area of peak III of test sample [E] obtained as in 9.1.2;
1,3 = представлява относителната средна площ на пик III, изразена в грамове сирищна суроватка за 100 g, определена в неподправено обезмаслено мляко на прах от различен произход.
1,3 = represents the relative average area of peak III expressed in grams of rennet whey per 100 g determined in non-adulterated skimmed milk powder of various origins.
Тази цифра бе получена експериментално;
This figure was obtained experimentally;
S III [0] = представлява относителната площ на пик III, която е равна на RIII × AIII [0].
S III [0] = represents the relative area of peak III which is equal to RIII × AIII [0].
Тези стойности са получени съответно в 9.1.1 и в 8.5.3;
These values are obtained in 9.1.1 and 8.5.3 respectively;
(S III [0] – 0,9) = представлява корекцията, която следва да бъде направена спрямо относителната средна площ 1,3, когато SIII [0] не е равно на 0,9.
(S III [0] – 0,9) = represents the correction to be made to the relative average area 1,3 when SIII [0] is not equal to 0,9.
За експеримента относителната средна площ на пик III на контролната проба [0] е 0,9.
Experimentally the relative average area of peak III of the control sample [0] is 0,9.
Точност на процедурата
Accuracy of the procedure
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или едно след друго от същия анализатор и при използване на същата апаратура върху идентичен тестов материал, не трябва да надвишава 0,2 % m/m.
The difference between the results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession by the same analyst using the same apparatus on identical test material shall not exceed 0,2 % m/m.
Разликата между два отделни и независими резултата, получени в две различни лаборатории върху идентичен тестов материал, не трябва да надвишава 0,4 % m/m.
The difference between two single and independent results, obtained in two different laboratories on identical test material shall not exceed 0,4 % m/m.
Приема се, че липсва суроватка, ако относителната площ на пик III, SIII [E], изразена в грамове сирищна суроватка за 100 g продукт, е ≤ 2,0 + (SIII [0] – 0,9),
Assume the absence of whey if the relative area of peak III, SIII [E] expressed in grams of rennet whey per 100 g of the product is ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)
е допустимата максимална стойност за относителната площ на пик III, като се вземат предвид относителната средна площ на пик III, т.e.
is the maximum value allowed for the relative area of peak III taking into account the relative average area of peak III, i.e. 1,3, the uncertainty due to variations in the composition of skimmed milk powder and the reproducibility of the method (9.3.2),
1,3, неопределеността поради вариациите в състава на обезмасленото мляко на прах и възпроизводимостта на метода (9.3.2),
is the correction to be made when the area SIII [0] is different from 0,9 (see point 9.2)
е корекцията, която следва да бъде направена, когато площта SIII [0] е различна от 0,9 (вж.
If the relative area of peak III, SIII [E] is > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) and the relative area of peak II, SII [E] ≤ 160, determine the rennet whey content as indicated in point 9.2.
9.2).
If the relative area of peak III, SIII [E] is > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) and the relative area of peak II, SII [E] ≤ 160, determine the total protein content (P %); then examine graphs 1 and 2.
Ако относителната площ на пик III, SIII [E], е > 2,0 + (SIII [0] – 0,9) и относителната площ на пик II, SII [E], ≤ 160, съдържанието на сирищна суроватка се определя, както е посочено в точка 9.2.
The data obtained after analysis of samples of unadulterated skimmed milk powders with a high total protein content have been assembled in graphs 1 and 2.
Ако относителната площ на пик III, SIII [E], е > 2,0 + (SIII [0] – 0,9) и относителната площ на пик II, SII [E], ≤ 160, се определя общото съдържание на протеин (P %); след това се изследват графики 1 и 2.
The continuous line represents the linear regression, the coefficients of which are calculated by the least squares method.
Данните, получени след анализа на пробите на неподправено обезмаслено мляко на прах с високо общо съдържание на протеин, са събрани в графики 1 и 2.
The dashed straight line fixes the upper limit of the relative area of peak III with a probability of not being exceeded in 90 % of cases.
Непрекъснатата линия представлява линейна регресия, чиито коефициенти са изчислени чрез метода на най-малките квадрати.
The equations for the dashed straight lines of graphs 1 and 2 are:
Пунктираната права линия определя горната граница на относителната площ на пик III с вероятност, че няма да се надвишава в 90 % от случаите.
(graph 1),
Уравненията за пунктираните прави линии на графики 1 и 2 са:
(graph 2),
(графика 1),
respectively where:
(графика 2),
is the relative area of peak III calculated either according to total protein content or according to the relative area of peak SII [E],
където съответно:
P % is the total protein content expressed as a percentage, by weight,
е относителната площ на пик III, изчислена или съобразно общото съдържание на протеин, или съобразно относителната площ на пик SII [E],
is the relative area of sample calculated in point 9.1.2.
P % е общото тегловно съдържание на протеин, изразено като процент,
These equations are equivalent to the figure of 1,3 mentioned in point 9.2.
е относителната площ на пробата, изчислена в точка 9.1.2.
The discrepancy (T1 and T2) between the relative area SIII [E] found and the relative area SIII is given by means of the following: T1 = SIII[E] – [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]T2 = SIII[E] – [(0,0123 SII[E] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)]
Тези уравнения са еквивалентни по стойност на 1,3, посочено в точка 9.2.
If T1 and/or T2
Разликата (T1 и T2) между установената относителна площ SIII [E] и относителната площ SIII се изразява чрез следното: T1 = SIII[E] – [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]T2 = SIII[E] – [(0,0123 SII[E] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)].
are zero or less, the presence of rennet whey cannot be determined.
Ако T1 и/или T2
If T1 and T2
са по-малки или равни на нула, не може да бъде определено присъствието на сирищна суроватка.
exceed zero, rennet whey is present.
Ако T1 и T2
The rennet whey content is calculated according to the following formula: W = T2 + 0,91
са по-големи от нула, има наличие на сирищна суроватка.
0,91 is the distance on the vertical axis between the continuous and dotted straight lines.
Съдържанието на сирищна суроватка се изчислява по следната формула: W = T2 + 0,91
Peak II
0,91 е разстоянието на вертикалната ос между непрекъснатата и пунктираната прави линии.
Skimmed milk powder
Пик II
total protein content (%)
Обезмаслено мляко на прах
Peak III
общо съдържание на протеин (%)
Appendix III
Пик III
DETERMINING RENNET WHEY SOLIDS IN SKIMMED MILK POWDER
Допълнение III
PURPOSE: DETECTING THE ADDITION OF RENNET WHEY SOLIDS TO SKIMMED MILK POWDER
ОПРЕДЕЛЯНЕ НА СУХО ВЕЩЕСТВО НА СИРИЩНА СУРОВАТКА В ОБЕЗМАСЛЕНО МЛЯКО НА ПРАХ
REFERENCES: INTERNATIONAL STANDARD ISO 707
ЦЕЛ: ОТКРИВАНЕ НА ПРИБАВЯНЕТО НА СУХО ВЕЩЕСТВО НА СИРИЩНА СУРОВАТКА КЪМ ОБЕЗМАСЛЕНО МЛЯКО НА ПРАХ
The content of rennet whey solids is defined as the percentage by mass as determined by caseinomacropeptide content by the procedure described.
ЗА СПРАВКА: МЕЖДУНАРОДЕН СТАНДАРТ ISO 707
Samples are analysed for caseinomacropeptide A by a reversed-phase high-performance liquid chromatography procedure (HPLC procedure).
Съдържанието на сухо вещество на сирищна суроватка се дефинира като масовата концентрация от казеиномакропептидното съдържание, определена чрез описаната процедура.
Evaluation of the result is obtained by reference to standard samples consisting of skimmed milk powder with and without a known percentage of whey powder.
Пробите се анализират за казеиномакропептид A с високоефективна течна хроматография с обърнати фази (процедура за HPLC).
Results higher than 1 % (m/m) show that rennet whey solids are present.
Оценката на резултата се получава чрез позоваване на стандартни проби, съдържащи обезмаслено мляко на прах със или без известен процент суроватка на прах.
Acetonitrile should be of spectroscopic or HPLC quality.
Резултатите, които са по-високи от 1 % (m/m), показват наличие на сухо вещество на сирищна суроватка.
Eluents A and B
Ацетонитрилът следва да бъде със спектроскопично качество или с HPLC-качество.
Eluent A: 150 ml of acetonitrile (CH3CN), 20 ml of isopropanol (CH3CHOHCH3), and 1,00 ml of trifluoroacetic acid (TFA, CF3COOH) are placed in a 1000 ml volumetric flask.
Елуенти A и Б
Make up to 1000 ml with water.
Eлуент A: 150 ml ацетонитрил (CH3CN), 20 ml изопропанол (CH3CHOHCH3) и 1,00 ml трифлуорооцетна киселина (TFA, CF3COOH) се поставят в 1000 ml измерителна колба.
Eluent B: 550 ml of acetonitrile, 20 ml of isopropanol and 1,00 ml of TFA are placed in a 1000 ml volumetric flask.
Долива се до 1000 ml с вода.
Conservation of the column
Елуент Б: 550 ml ацетонитрил, 20 ml изопропанол и 1,00 ml TFA се поставят в 1000 ml измерителна колба.
After the analyses the column is flushed with eluent B (via a gradient) and subsequently flushed with acetonitrile (via a gradient for 30 minutes).
Съхранение на колоната
The column is stored in acetonitrile.
След анализа колоната се изплаква с елуент Б (чрез градиент) и впоследствие се изплаква с ацетонитрил (чрез градиент за 30 минути).
Skimmed milk powder meeting the requirements for public storage (i.e. [0]).
Колоната се съхранява в ацетонитрил.
The same skimmed milk powder adulterated with 5 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [5]).
Обезмаслено мляко на прах, което изпълнява изискванията за публично складиране (т. e.
The same skimmed milk powder adulterated with 50 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [50])
[0]).
Graduated pipettes, allowing delivery of 10 ml (ISO 648, Class A, or ISO/R 835), or a dispensing system capable of delivering 10,0 ml in two minutes
Същото обезмаслено мляко на прах, подправено с 5 % (m/m) сирищна суроватка на прах със стандартен състав (т.e.
Binary gradient pumping system
[5]).
Injector, hand or automatic, with a 100 μl capacity
Същото обезмаслено мляко на прах, подправено с 50 % (m/m) сирищна суроватка на прах със стандартен състав (т.e.
Agilent Technologies Zorbax 300 SB-C3 column (length 25 cm, 0,46 cm internal diameter) or an equivalent wide-pore silica based reversed-phase column
[50]).
Variable wavelength UV detector, permitting measurements at 210 nm (if necessary, a higher wavelength up to 220 nm may be used) with a sensitivity of 0,02 Å
Градуирани капкомери, които позволяват подаване на 10 ml (ISO 648, клас A, или ISO/R 835), или система, която може да подаде 10,0 ml за две минути.
Integrator capable of setting the integration to common baseline or valley-to-valley
Бинарна помпена система за градиентна работа
Note: Operation of the column at room temperature is possible, provided that the room temperature does not fluctuate more than 1 °C, otherwise too much variation in the retention time of CMPA takes place.
Ръчен или автоматичен инжектор с капацитет 100 μl
Store the sample in conditions which preclude any deterioration or change in composition.
Колона Agilent Technologies Zorbax 300 SB-C3 (дължина 25 cm, 0,46 cm вътрешен диаметър) или еквивалентна широка кварцова колона с обърната фаза
Weigh 2,00 ± 0,001 g of test sample into a centrifuge tube (6.2) or suitable stoppered flask (50 ml).
UV детектор с променлива дължина на вълните, позволяващ измервания при 210 nm (ако е необходимо, може да бъде използвана по-голяма дължина на вълните до 220 nm), с чувствителност от 0,02 Å
Note: In the case of mixtures, weigh such an amount of the test sample that the defatted sample portion corresponds to 2,00 g.
Интегратор с възможност за настройка на интегрирането по обща базова линия или от впадина до впадина
Add 10,0 ml of the trichloroacetic acid solution of ca.
Забележка: Използването на колоната при стайна температура е възможно, при условие че стайната температура не се отклонява повече от 1 °C, в противен случай се получава прекалено голямо вариране във времето на задържане на CMPA.
25 °C (5.1) constantly over two minutes, while stirring vigorously with the aid of the magnetic stirrer (6.4).
Пробата се съхранява при условия, които изключват всякакво увреждане или промяна на състава.
Centrifuge (6.2) 2200 g for 10 minutes, or filter through paper (6.6), discarding the first 5 ml of filtrate
Претеглят се 2,00 ± 0,001 g от пробата за анализ в центрофужна епруветка (6.2) или подходяща запушена колба (50 ml).
The reversed-phase HPLC method excludes the possibility false-positive results due to the presence of acid buttermilk powder.
Забележка: Когато се анализират смеси, се претегля такова количество от тестовата проба, че обезмаслената част от пробата да съответства на 2,00 g.
Before the reversed phase HPLC-analysis is carried out, the gradient conditions should be optimised.
Прибавят се 10,0 ml разтвор на трихлорооцетна киселина с температура около 25 °C (5.1) постоянно за две минути, като същевременно се разбърква енергично с магнитната бъркалка (6.4).
A retention time of 26 ± 2 minutes for CMPA is optimal for gradient systems having a dead volume of about 6 ml (volume from the point where the solvents come together to the volume of the injector loop, inclusive).
Центрофугират се (6.2) 2200 g в продължение на 10 минути или се филтрират през хартия (6.6), като първите 5 ml филтрат се изхвърлят.
Gradient systems having a lower dead volume (e.g. 2 ml) should use 22 minutes as an optimal retention time
HPLC-методът с обърната фаза изключва възможността да има фалшиви положителни резултати, дължащи се на наличието на кисела мътеница на прах.
Take solutions of the standard samples (5.4) without and with 50 % rennet whey.
Преди извършването на HPLC анализа с обърната фаза условията на градиента следва да бъдат оптимизирани.
Inject 100 μl of supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus operating at the scouting gradient conditions given in Table 1.
Времето на задържане от 26 ± 2 минути за CMP Α е оптимално за системите с градиент с мъртъв обем от около 6 ml (обем от точката, в която разредителите се събират, до обема на пръстена на инжектора включително).
Table 1
Системите с градиент с по-малък мъртъв обем (напр.
Scouting gradient conditions for optimisation of the chromatography
2 ml) следва да използват 22 минути като оптимално време за задържане.
Time
Вземат се разтвори от стандартните проби (5.4) без и със 50 % сирищна суроватка.
Flow
100 μl супернатант или филтрат (8.3.3) се впръсква в апарата за HPLC, който функционира при условията на тестовия градиент, дадени в таблица 1.
Curve
Таблица 1
linear
Условия на тестовия градиент за оптимизиране на хроматографията
Comparison of the two chromatograms should reveal the location of the peak of CMPΑ.
Време
Using the formula given below, the initial solvent composition to be used for the normal gradient (see 8.4.3) can be calculated % B = 10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27 % B = 7,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 1,11
Дебит
Where:
Крива
RT cmpA : retention time of CMPΑ in the scouting gradient
линейна
10 : the initial % B of the scouting gradient
Сравнението на двете хроматограми следва да разкрива мястото на пика на GMPA.
2,5 : % B at midpoint minus % B at initial in the normal gradient
Чрез използване на формулата, дадена по-долу, може да бъде изчислен първоначалният състав на разредителя, който ще се използва за нормалния градиент (вж.
13,5 : midpoint time of the scouting gradient
8.4.3): % Б = 10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27 % Б = 7,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 1,11
26 : required retention time of CMPΑ
където:
6 : ratio of slopes of the scouting and normal gradient
RT cmpA : времето на задържане на CMPΑ в тестовия градиент
30 : % B at initial minus % B at 27 minutes in the scouting gradient
10 : първоначалният % Б на тестовия градиент
27 : run-time of the scouting gradient.
2,5 : % Б на половината време минус % Б първоначално в нормалния градиент
Take solutions of the test samples
13,5 : половината време на тестовия градиент
Inject 100 μl of accurately measured supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus operating at a flow rate of 1,0 ml of eluent solution (5.2) per minute.
26 : изисквано време на задържане на CMPΑ
The composition of the eluent of the start of the analysis is obtained from 8.4.2.
6 : съотношение на наклоните на тестовия и нормалния градиент
It is normally close to A:B = 76:24 (5.2).
30 : % Б първоначално минус % Б при 27 минути в тестовия градиент
Immediately after the injection a linear gradient is started, which results in a 5 % higher percentage of B after 27 minutes.
27 : време на преминаване на тестовия градиент.
Subsequently a linear gradient is started, which brings the eluent composition to 90 % B in five minutes.
Анализ на разтвори на тестовите проби
This composition is maintained for five minutes, after which the composition is changed, via a linear gradient in five minutes to the initial composition.
Впръскват се 100 μl точно измерен супернатант или филтрат (8.3.3) в апарата за HPLC, който работи при дебит 1,0 ml елуентен разтвор (5.2) в минута.
Depending on the internal volume of the pumping system, the next injection can be made 15 minutes after reaching the initial conditions.
Съставът на елуента в началото на анализа се получава съгласно 8.4.2.
Note 1.
Той обичайно е близък до A:Б = 76:24 (5.2).
The retention time of the CMPA should be 26 ± 2 minutes.
Непосредствено след впръскването се стартира линеен градиент, което води до 5 % по-висок процент на Б след 27 минути.
This can be achieved by varying the initial and end conditions of the first gradient.
След това се стартира линеен градиент, с който съставът на елуента става 90 % Б за пет минути.
However, the difference in the % B for the initial and end conditions of the first gradient shall remain 5 % B.
Този състав се поддържа пет минути, след което съставът се променя чрез линеен градиент за пет минути към първоначалния състав.
Note 2.
В зависимост от вътрешния обем на помпената система следващото впръскване може да бъде направено 15 минути след постигането на първоначалните условия.
The eluents should be degassed sufficiently and should also remain degassed.
Забележка 1.
This is essential for proper functioning of the gradient pumping system.
Времето на задържане на CMPA следва да бъде 26 ± 2 минути.
The standard deviation for the retention time of the CMPA peak should be smaller than 0,1 minutes (n = 10).
Това може да бъде постигнато чрез вариране на изходните и крайните условия на първия градиент.
Note 3.
Разликата обаче в % Б за изходните и крайните условия на първия градиент трябва да остане 5 % Б.
Every five samples the reference sample [5] should be injected and used to calculate a new response factor R. (9.1.1).
Забележка 2.
The results of the chromatographic analysis of the test sample (E) are obtained in the form of a chromatogram in which the CMPA peak is identified by its retention time of about 26 minutes
Елуентите следва да бъдат дегазирани в достатъчна степен и да се запазят такива.
The integrator (6.11.6) automatically calculates the peak height H of the CMPA peak.
Това е от основна важност за доброто функциониране на помпената система за градиента.
The baseline location should be checked in every chromatogram.
Стандартното отклонение за времето на задържане на пика CMPA трябва да бъде по-малко от 0,1 минути (n = 10).
The analysis or the integration should be repeated if the baseline was incorrectly located.
Забележка 3.
Note: If the CMPA peak is sufficiently separated from other peaks valley-to-valley baseline allocation should be used, otherwise use dropping perpendiculars to a common baseline, which should have starting point close to the CMPA peak (thus not at t = 0 min!).Use for the standard and the samples the same type integration type and check in case of common baseline its consistency for the samples and the standard.
Референтната проба [5] трябва да бъде впръсквана на всеки пет проби и използвана за изчисляване на нов фактор на сигнала R (9.1.1).
It is essential to examine the appearance of each chromatogram prior to quantitative interpretation, in order to detect any abnormalities due either to malfunctioning of the apparatus or the column, or to the origin and nature of the sample analysed.
Резултатите от хроматографския анализ на тестовата проба (E) се получават под формата на хроматограма, в която пикът CMPA се идентифицира чрез времето си на задържане от около 26 минути.
Apply exactly the procedure described from point 8.2 to point 8.4.4 to the standard samples (5.4.1 to 5.4.2).
Интеграторът (6.11.6) автоматично изчислява височината H на пика CMPA.
Use freshly prepared solutions, because CMP degrades in an 8 % trichloroacetic acid environment at room temperature.
Във всяка хроматограма следва да се проверява мястото на базовата линия.
At 4 °C the solution remains stable for 24 hours.
Анализът или интегрирането трябва да бъдат повторени, ако базовата линия е определена неправилно.
In the case of long series of analyses the use of a cooled sample tray in the automatic injector is desirable
Забележка: Ако пикът на CMPA е достатъчно отделен от други пикове, следва да се използва базовата линия от впадина до впадина; в противен случай се използват перпендикулярните проекции върху обща базова линия, която би трябвало да започва близо до пика на CMPA (следователно не при t = 0 min!).
Note: 8.4.2. may be omitted if the % B at initial conditions is known from previous analyses.
За стандартния разтвор и за пробите се използва един и същ тип интегриране, а при обща базова линия се проверява нейната съгласуваност за пробите и стандартния разтвор.
The chromatogram of the reference sample [5] should be analogous to Figure.