natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Капва се 1 ml (5.3) от този разтвор в 10 ml мерителна колба (5.6), добавят се 100 μl (5.7) от 0,15 mM триптаминов разтвор (7.1) и обемът се долива с метанол (4.2.1).
Pipette 1 ml (5.3) of this solution into a 10 ml volumetric flask (5.6), add 100 μl (5.7) of 0,15 mM tryptamine solution (7.1) and make up to the volume with methanol (4.2.1).
Разбърква се с преобръщане.
Mix by inversion
Забележка: Разтворът на стандартната проба следва да се съхранява при 4 °C, докато се извърши HPLC-анализ.
Note: Reference sample solution should be stored at 4 °C until the HPLC analysis is performed.
Подготовка на дериватизиращия реагент
Preparation of the derivatising reagent
В 10 ml мерителна колба (5.6) се отмерват 25,0 ± 0,1 mg OPA (4.3.4), добавя се 0,5 ml (5.5) метанол (4.2.1) и се разбърква внимателно, за да се разтвори OPA.
Weigh 25,0 ± 0,1 mg of OPA (4.3.4) into a 10 ml volumetric flask (5.6), add 0,5 ml (5.5) of methanol (4.2.1) and mix carefully to dissolve the OPA.
Долива се до белега с разтвор на борна киселина (4.3.2) и се добавят 20 μl от 2-меркаптоетанол (4.3.3) със спринцовка (5.7).
Make up to the mark with boric acid solution (4.3.2) and add 20 μl of 2-mercaptoethanol (4.3.3) by syringe (5.7).
Забележка: Дериватизиращият реагент следва да се съхранява при 4 °C в тъмен флакон; той е годен една седмица.
Note: The derivatising reagent should be stored at 4 °C in a brown glass vial and is stable for one week.
Елуиращи разтворители (4.4)
Elution solvents (4.4)
Разтворител А: Разтвор на 0,3 mM натриев дихидроген фосфат и разтвор на 3 mM натриев ацетат (регулиран до pH 6,5 ± 0,1 с оцетна киселина): метанол: тетрахидрофуран = 558:440:2 (v/v/v)
Solvent A: Solution of 0,3 mM sodium dihydrogen phosphate and 3 mM sodium acetate solution (adjusted to pH 6,5 ± 0,1 with acetic acid): methanol: tetrahydrofuran = 558:440:2 (v/v/v)
Разтворител Б: метанол
Solvent B: methanol
Предложен елуиращ градиент:
Suggested eluting gradient:
Разтворител А (%)
Solvent A (%)
Разтворител Б (%)
Solvent B (%)
Дебит (ml/min)
Flow rate (ml/min)
Първоначално
Initial
0Забележка: Елуиращият градиент може да изисква лека модификация, с оглед да се постигне разделянето, показано на фигура 1.
0Note: The eluting gradient may require slight modification in order to achieve the resolution shown in figure 1.
Температура на колоната: 30 °C.
Column temperature: 30 °C.
Обем на впръскване: 50 μl дериватизиращ реагент и 50 μl разтвор на пробата
Injection volume: 50 μl derivatising reagent and 50 μl sample solution
Балансиране на колоната
Column equilibration
При ежедневното пускане на системата колоната се промива със 100 % разтворител Б за 15 минути, след това се настройва на A:Б = 40:60 и се балансира при 1 ml/min за 15 минути.
Starting up the system on a daily basis, flush the column with 100 % solvent B for 15 minutes, then set at A:B = 40:60 and equilibrate at 1 ml/min for 15 minutes.
Чрез впръскването на метанол (4.2.1) се извършва празна серия.
Perform a blank run by injecting methanol (4.2.1).
Забележка: Преди дългосрочно съхранение колоната се промива с метанол: хлороформ = 80:20 (v/v) в продължение на 30 минути.
Note: Before long-term storage flush the column with methanol: chloroform = 80:20 (v/v) for 30 minutes.
Определяне на съдържанието на PS + PE в тестовата проба
Determine the PS + PE content in the test sample
Извършва се последователността от хроматографски анализи, като времето от серия до серия се поддържа константно с оглед да се получат константни времена на задържане.
Perform the sequence of the chromatographic analyses keeping constant the run-to-run time in order to obtain constant retention times.
Външният стандартен разтвор (7.3) се впръсква на всеки 5—10 разтвора на тестовите проби, за да може да се оцени факторът на сигнала.
Inject the external standard solution (7.3) every 5-10 test sample solutions in order to calculate the response factor
Забележка: Колоната трябва да бъде почиствана чрез промиване със 100 % разтворител Б (7.5.1) за най-малко 30 минути на всеки 20—25 серии.
Note: The column shall be cleaned by flushing with 100 % solvent B (7.5.1) for at least 30 minutes every 20-25 runs.
Метод на интегриране
Integration mode
Пик на PEDP
PEDP peak
PEDP се елуира като един отделен пик.
PEDP is eluted as a single peak.
Площта на пика се определя чрез интегриране от впадина до впадина.
Determine the peak area by valley-to- valley integration.
Пик на триптамина
Tryptamine peak
Триптаминът се елуира като един отделен пик (фигура 1).
Tryptamine is eluted as a single peak (Figure 1).
Площта на пика се определя чрез интегриране от впадина до впадина.
Determine the peak area by valley-to-valley integration.
Групи на пикове PS и PE
PS and PE peaks groups
При описаните условия (фигура 1) PS се елуира като два основни частично неразделени пика, предшествани от по-малък пик.
Under the described conditions (Figure 1), PS elutes as two main partially unresolved peaks preceded by a minor peak.
PE се елуира като три основни частично неразделени пика.
PE elutes as three main partially unresolved peaks.
Определя се цялата площ на всяка група пикове, като се очертава базовата линия, както е показано на фигура 1.
Determine the whole area of each peak cluster setting the baseline as reported in Figure 1.
Съдържанието на PS и PE в тестовата проба се изчислява, както следва:
PS and PE content in the test sample shall be calculated as follows:
C = съдържанието на PS или PE (mg/100 g прах) в тестовата проба
C = PS or PE content (mg/100 g powder) in the test sample
А 1 = площ на пика на PEDP в разтвора на стандартната проба (7.3)
A 1 = PEDP peak area of the standard sample solution (7.3)
А 2 = площ на пика на PS или PE в разтвора на тестовата проба (7.2)
A 2 = PS or PE peak area of the test sample solution (7.2)
Т 1 = площ на пика на триптамин в разтвора на стандартната проба (7.3)
T 1 = Tryptamine peak area of the standard sample solution (7.3)
Т 2 = площ на пика на триптамин в разтвора на тестовата проба (7.2).
T 2 = Tryptamine peak area of the test sample solution (7.2).
ТОЧНОСТ НА ПРОЦЕДУРАТА
ACCURACY OF THE METHOD
Забележка: Стойностите за повторяемост бяха изчислени в съответствие с международен стандарт IDF (*).
Note: The values for repeatability were calculated according to the IDF International Standard (*).
Относителното стандартно отклонение на повторяемостта, което изразява варирането на резултатите от независим аналитичен анализ, получени от същия оператор чрез използване на същата апаратура и при същите условия върху същия тестов материал и в кратък период от време, не трябва да надвишава относителната стойност от 2 %.
The relative standard deviation of the repeatability, which expresses the variability of independent analytical results obtained by the same operator using the same apparatus under the same conditions on the same test sample and in a short interval of time, should not exceed 2 % relative.
Ако при тези условия са получени две определяния, относителната разлика между двата резултата не трябва да бъде по-голяма от 6 % от средноаритметичната стойност на резултатите.
If two determinations are obtained under these conditions, the relative difference between the two results should not be greater than 6 % of the arithmetic mean of the results.
Ако са направени две определяния от оператори в различни лаборатории чрез използване на различна апаратура, при различни условия за анализа на същия тестов материал, относителната разлика между двата резултата не трябва да бъде по-голяма от 11 % от средноаритметичната стойност на резултатите.
If two determinations are obtained by operators in different laboratories using different apparatus under different conditions for the analysis on the same test sample, the relative difference between the two results should not be greater than 11 % of the arithmetic mean of the results.
ЗА СПРАВКА
REFERENCES
Resmini P., Pellegrino L., Hogenboom J.A., Sadini V., Rampilli M., ‘Detection of buttermilk solids in skimmilk powder by HPLC quantification of aminophospholipids’ (Откриване на сухо вещество на мътеница в обезмаслено мляко на прах чрез HPLC-определяне на количеството на аминофосфолипиди).
Resmini P., Pellegrino L., Hogenboom J.A., Sadini V., Rampilli M., ‘Detection of buttermilk solids in skimmilk powder by HPLC quantification of aminophospholipids’.
HPLC-модели на OPA-производни на фосфатидилсерин (PS) и фосфатидилетаноламин (РЕ) в метанолов екстракт от възстановено обезмаслено мляко на прах.
HPLC pattern of OPA-derivatives of phosphatidylserine (PS) and phosphatidylethanolamine (PE) in methanol extract of reconstituted skim-milk powder.
Представен е методът на интегриране за пиковете на PS, РЕ и триптамин (вътрешен стандарт)
Integration mode for the peaks of PS, PE and tryptamine (internal standard) is reported
Флуоресценция (в произволни единици)
Fluorescence (arbitrary units)
ОТКРИВАНЕ НА СИРИЩНА СУРОВАТКА В ОБЕЗМАСЛЕНО МЛЯКО НА ПРАХ, ПРЕДНАЗНАЧЕНО ЗА ОБЩЕСТВЕНО СКЛАДИРАНЕ, ЧРЕЗ ОПРЕДЕЛЯНЕТО НА КАЗЕИНОМАКРОПЕПТИДИ ЧРЕЗ ВИСОКОЕФЕКТИВНА ТЕЧНА ХРОМАТОГРАФИЯ (HPLC)
DETECTION OF RENNET WHEY IN SKIMMED MILK POWDER FOR PUBLIC STORAGE BY DETERMINATION OF CASEINOMACROPEPTIDES HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
Този метод позволява откриването на сирищна суроватка в обезмаслено мляко на прах, предназначено за публично складиране, чрез определянето на казеиномакропептиди.
This method allows detection of rennet whey in skimmed milk powder intended for public storage by determination of the caseinomacropeptides.
ЗА СПРАВКА
REFERENCE
Международен стандарт ISO 707 — Мляко и млечни продукти.
International Standard ISO 707 - Milk and Milk Products - Guidance on sampling.
Указания за вземане на проби
The content of rennet whey solids is defined as the percentage by mass as determined by the caseinomacropeptide content by the procedure described.
Съдържанието на сухо вещество на сирищна суроватка се дефинира като процент от масата, както е определено от казеиномакропептидното съдържание чрез описаната процедура.
PRINCIPLE
ПРИНЦИП
Reconstitution of the skimmed milk powder, removal of fat and proteins with trichloroacetic acid, followed by centrifugation or filtration;
Възстановяване на обезмасленото мляко на прах, отстраняване на мазнините и протеините с трихлорооцетна киселина, последвано от центрофугиране или филтриране.
Determination of the quantity of caseinomacropeptides (CMP) in the supernatant by high-performance liquid chromatography (HPLC);
Определяне на количеството казеиномакропептиди (CMP) в супернатанта чрез високоефективна течна хроматография (HPLC).
Evaluation of the result obtained for the samples by reference to standard samples consisting of skimmed milk powder with or without the addition of a known percentage of whey powder.
Оценка на получения резултат за пробите чрез позоваване на стандартните проби, съдържащи обезмаслено мляко на прах със или без прибавяне на известен процент суроватка на прах.
The water used shall be distilled water or water of at least equivalent purity.
Използваната вода трябва да е дестилирана или да е с еквивалентна степен на чистота.
Trichloroacetic acid solution
Разтвор на трихлорооцетна киселина
Dissolve 240 g of trichloroacetic acid (CCl3COOH) in water and make up to 1000 ml.
240 g трихлорооцетна киселина (CCl3COOH) се разтварят във вода и се долива до 1000 ml.
The solution should be clear and colourless.
Разтворът трябва да бъде прозрачен и безцветен.
Eluent solution, pH 6,0
Елуентен разтвор, pH 6,0
Dissolve 1,74 g of dipotassium hydrogen phosphate (K2HPO4), 12,37 g of potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4) and 21,41 g of sodium sulphate (Na2SO4) in about 700 ml of water.
1,74 g дикалиев хидроген фосфат (K2HPO4), 12,37 g калиев дихидроген фосфат (KH2PO4) и 21,41 g натриев сулфат (Na2SO4) се разтварят в около 700 ml вода.
Adjust, if necessary, to pH 6,0, using a solution of phosphoric acid or potassium hydroxide.
Регулира се, ако е необходимо, до pH 6,0, като се използва разтвор на фосфорна киселина или калиев хидроксид.
Make up to 1000 ml with water and homogenise.
Долива се до 1000 ml с вода и се хомогенизира.
Note: The composition of the eluent can be updated to comply with the certificate of the standards or the recommendations of the manufacturer of the column packing material.
Забележка: Съставът на елуента може да се актуализира така, че да съответства със сертификата на стандартите или с препоръките на производителя на пълнежа на колоната.
Filter the eluent solution, prior to use, through a membrane filter with a 0,45 μm pore diameter.
Елуентният разтвор се филтрира, преди да се използва, през мембранен филтър с 0,45 μm диаметър на порите.
Flushing solvent
Промиващ разтворител
Mix one volume acetonitrile (CH3CN) with nine volumes water.
Един обем ацетонитрил (CH3CN) се смесва с девет обема вода.
Filter the mixture prior to use through a membrane filter with a 0,45 μm pore diameter.
Преди да се използва, сместа се филтрира през мембранен филтър с 0,45 μm диаметър на порите.
Note: Any other flushing solvent with a bactericidal effect which does not impair the columns' resolution efficiency may be used.
Забележка: Може да бъде използван всеки друг промиващ разтворител с бактерициден ефект, който не уврежда ефективността на разделянето в колоната.
Standard samples
Стандартни проби
Skimmed milk powder meeting the requirements of this Regulation (i.e. [0])
Обезмаслено мляко на прах, което изпълнява изискванията на настоящия регламент (т.e.
The same skimmed milk powder adulterated with 5 % (m/m) rennet-type whey powder of standard composition (i.e. [5])
[0])
Analytical balance
Същото обезмаслено мляко на прах, подправено с 5 % (m/m) сирищна суроватка на прах със стандартен състав (т.e.
Optional centrifuge capable of attaining a centrifugal force of 2200 g, fitted with stoppered or capped centrifuge tubes of about 50 ml capacity
[5]).
Mechanical shaker
Аналитични везни
Glass funnels, diameter about 7 cm
Незадължително: центрофуга, която може да достигне центробежна сила от 2000 g, снабдена със запушени центрофужни епруветки с капацитет около 50 ml
Filter papers, medium filtration, diameter about 12,5 cm
Механичен шейкър
Glass filtration equipment with 0,45 μm pore diameter membrane filter
Стъклени фунии с диаметър около 7 cm
Graduated pipettes allowing delivery of 10 ml (ISO 648, Class A, or ISO/R 835) or a dispensing system capable of delivering 10,0 ml in two minutes
Филтърна хартия, средно филтриране, диаметър около 12,5 cm
Dispensing system capable of delivering 20,0 ml water at ca.
Стъклено оборудване за филтриране с мембранен филтър с диаметър на порите 0,45 μm
50 °C
Градуирани пипети, които позволяват подаване на 10 ml (ISO 648, клас A, или ISO/R 835), или система, която може да подаде 10,0 ml за две минути
Thermostatic water bath, set at 25 ± 0,5 °C
Система за подаване, която може да подаде 20,0 ml вода при приблизително 50 °C
HPLC equipment, consisting of:
Термостатна водна баня, регулирана на 25 ± 0,5 °C
Pump
Оборудване за HPLC, състоящо се от:
Injector, hand or automatic, with a 15 to 30 μl capacity
Помпа
Two TSK 2000-SW columns in series (length 30 cm, internal diameter 0,75 cm) or equivalent columns (e.g. single TSK 2000-SWxl, single Agilent Technologies Zorbax GF 250) and a precolumn (3 cm × 0,3 cm) packed with I 125 or material of equivalent effectiveness
Инжектор, ръчен или автоматичен, с капацитет от 15 до 30 μl
Thermostatic column oven, set at 35 ± 1 °C
Две последователно свързани колони TSK 2000-SW (дължина 30 cm, вътрешен диаметър 0,75 cm) или еквивалентни колони (например единична TSK 2000-SWxl, единична Agilent Technologies Zorbax GF 250) и предколона (3 cm × 0,3 cm), запълнена с I 125 или материал с еквивалентна ефективност
Variable wavelength UV detector, permitting measurements at 205 nm with a sensitivity of 0,008 Å
Термостатична колонна пещ, програмирана на 35 ± 1 °C
Integrator capable of valley-to-valley integration
UV детектор с променлива дължина на вълните, позволяващ измервания при 205 nm, с чувствителност от 0,008 Å
Note: Working with columns kept at room temperature is possible, but their power of resolution is slightly lower.
Интегратор с възможност за интеграция от впадина до впадина
In that case, the temperature should vary by less than ± 5 °C in any one range of analyses.
Забележка: Възможно е да се работи с колони, държани при стайна температура, но тяхната ефективност на разделяне е малко по-ниска.
Samples shall be taken in accordance with the procedure laid down in International Standard ISO 707.
В този случай в рамките на една аналитична серия температурата би следвало да варира с по-малко от ± 5 °C.
However, Member States may use another method of sampling provided that it complies with the principles of the abovementioned standard
Пробите се вземат в съответствие с процедурата, определена в Международен стандарт ISO 707.
Store the sample in conditions which preclude any deterioration or change in composition
Държавите членки обаче може да използват друг метод за вземане на проби, при условие че той е в съответствие с принципите на гореупоменатия стандарт.
Preparation of the test sample
Пробата се съхранява при условия, които изключват всякакво увреждане или промяна на състава.
Transfer the milk powder into a container with a capacity of about twice the volume of the powder, fitted with an airtight lid.
Подготовка на тестовата проба
Close the container immediately.
Млякото на прах се прехвърля в съд, снабден с уплътнен капак, и с вместимост, която е около два пъти обема на праха.
Mix the milk powder well by means of repeated inversion of the container.
Съдът се затваря веднага.
Test portion
Млечният прах се смесва добре чрез многократно обръщане на съда.
Weight 2,000 ± 0,001 g of test sample into a centrifuge tube (6.2) or a suitable stoppered flask (50 ml).
Маса на пробата за анализ
Removal of fat and proteins
Претеглят се 2,000 ± 0,001 g от пробата за анализ в центрофужна епруветка (6.2) или подходяща запушена колба (50 ml).
Add 20,0 ml of warm water (50 °C) to the test portion.
Отстраняване на мазнината и протеините
Dissolve the powder by shaking for five minutes using a mechanical shaker (6.3).
Към тестовата доза се прибавят 20,0 ml топла вода (50 °C).
Place the tube into the water bath (6.10) and allow to equilibrate to 25 °C
Прахът се разтваря чрез разклащане за пет минути при използването на механичен шейкър (6.3).
Add 10,0 ml of the trichloroacetic acid solution (5.1) of ca.
Епруветката се поставя във водната баня (6.10) и се оставя да се темперира до 25 °C.
25 °C in two minutes, while stirring vigorously with the aid of the magnetic stirrer (6.4).
Прибавят се 10,0 ml разтвор на трихлорооцетна киселина (5.1.) с температура около 25 °C за две минути, като същевременно се разбърква енергично с магнитната бъркалка (6.4).
Place the tube in a water bath (6.10) and leave for 60 minutes
Епруветката се поставя във водната баня (6.10) и се оставя за 60 минути.
Centrifuge (6.2) for 10 minutes at 2200 g, or filter through paper (6.6), discarding the first 5 ml of filtrate
Центрофугира се (6.2) в продължение на 10 минути при 2200 g или се филтрира през хартия (6.6), като се изхвърлят първите 5 ml филтрат.
Chromatographic determination
Хроматографски анализ
Inject 15 to 30 μl of accurately measured supernatant or filtrate (8.3.3) into the HPLC apparatus (6.11) operating at a flow rate of 1,0 ml of eluent solution (5.2) per minute
От 15 до 30 μl точно измерен супернатант или филтрат (8.3.3) се впръскват в апарат за HPLC (6.11), който работи при дебит 1,0 ml елуентен разтвор (5.2) на минута.
Note 1.
Забележка 1: Може да се използва и друг дебит в зависимост от вътрешния диаметър на използваните колони или указанията на производителя на колоните.
Another flow rate may be used, dependent of the internal diameter of the columns used or the instructions of the manufacturer of the column.
Забележка 2: Колоните се изплакват с вода при всяко прекъсване.
Note 2.
Елуентният разтвор (5.2) никога не се оставя в тях.
Rinse the columns with water during each interruption.
Преди всяко прекъсване за повече от 24 часа колоните се изплакват с вода, след това се измиват с разтвор (5.3) за най-малко три часа при дебит 0,2 ml на минута.
Never leave the eluent solution in them (5.2).
Резултатите от хроматографския анализ на тестовата проба [E] се получават под формата на хроматограма, в която всеки пик е показан чрез времето му на задържане RT, както следва:
Prior to any interruption of more than 24 hours, rinse the columns with water then wash them with solution (5.3) for at least three hours at a flow rate of 0,2 ml per minute.
Пик II:
The results of chromatographic analysis of the test sample [E] are obtained in the form of chromatogram in which each peak is identified by its retention time RT as follows:
Вторият пик на хроматограмата с RT от около 12,5 минути.
Peak II:
Пик III:
The second peak of the chromatogram having an RT of about 12,5 minutes.
Третият пик на хроматограмата, съответстващ на CMP, с RT от 15,5 минути.
Peak III:
Изборът на колоните може съществено да повлияе на времето на задържане на отделните пикове.
The third peak of the chromatogram, corresponding to the CMP, having an RT of 15,5 minutes.
Интеграторът (6.11.6) автоматично изчислява площта A на всеки пик:
The choice of the column(s) can affect the retention times of the individual peaks considerably.
площ на пик II,
The integrator (6.11.6) automatically calculates the area A of each peak:
площ на пик III.
area of peak II,
Съществено е да се изследва вида на всяка хроматограма преди количественото тълкуване, за да се открият всякакви отклонения, които се дължат или на неправилното функциониране на апаратурата, или на колоните, или на произхода и естеството на анализираната проба.
area of peak III,
Анализът се повтаря, ако има съмнения.
It is essential to examine the appearance of each chromatogram prior to quantitative interpretation, in order to detect any abnormalities due either to malfunctioning of the apparatus or the columns, or to the origin and nature of the sample analysed.
Калибриране
If in doubt, repeat the analysis.
Процедурата, описана в точки 8.2—8.4.2, се прилага с точност за стандартните проби (5.4).
Calibration
Използват се прясно приготвени разтвори, тъй като CMP се разрушават в 8 %-на трихлорооцетна среда.
Apply exactly the procedure described from point 8.2 to point 8.4.2 to the standard samples (5.4)
Загубата се оценява на 0,2 % на час при 30 °C.
Use freshly prepared solutions, because CMP degrade in an 8 % trichloroacetic environment.
Преди хроматографския анализ на пробите колоните се подготвят чрез многократно впръскване на стандартната проба (5.4.2) в разтвора (8.5.1), докато площта и времето на задържане на пика, съответстващ на CMP, станат постоянни.
The loss is estimated at 0,2 % per hour at 30 °C.
Определят се факторите на сигнала R чрез впръскване на същия обем филтрати (8.5.1), какъвто е използван за пробите.
Prior to chromatographic determination of the samples, condition the columns by repeatedly injecting the standard sample (5.4.2) in solution (8.5.1) until the area and retention time of the peak corresponding to the CMP are constant
ИЗРАЗЯВАНЕ НА РЕЗУЛТАТИТЕ
Determine the response factors R by injecting the same volume of filtrates (8.5.1) as used for the samples
Метод на изчисление и формули
EXPRESSION OF RESULTS
Изчисляване на факторите на сигнала R:
Method of calculation and formulae
R II = факторите на сигнала на пиковете II,
Calculation of the response factors R:
A II [0] = площите на пиковете II на стандартната проба [0], получени в 8.5.3.
R II = the response factors of peaks II,
R III = Факторът на сигнала на пик III,
A II [0] = the areas of peaks II of the standard sample [0] obtained in 8.5.3.
A III [0] и AIII [5] = площите на пиковете III на стандартните проби [0] и [5], получени съответно в 8.5.3,
R III = the response factor of peak III,
W = количеството суроватка в стандартната проба [5], т.e.
A III [0] and AIII [5] = the areas of peak III in standard samples [0] and [5] respectively obtained in 8.5.3,
5.
W = the quantity of whey in standard sample [5], i.e. 5.
Изчисляване на относителната площ на пиковете в пробата [E]
Calculation of the relative area of the peaks in the sample [E]
S II [E], SIII [E], SIV [E] = относителните площи, съответно на пикове II, III и IV на пробата [E],
S II [E], SIII [E], SIV [E] = the relative areas of peaks II, III and IV respectively in the sample [E],