natgillin/translations-raw huggingface dataset:
За предпочитане е съсредоточаване върху методи, които се нуждаят от входни параметри, за които данните ще бъдат лесно достъпни за веществата, изпитани съгласно изследването чрез хранителния режим, описано тук (напр. log KOW, тегло на рибите).
INFORMATION ON THE TEST CHEMICAL
Други методи, които изискват по-сложни входни параметри, могат да се прилагат, но може да изискват извършването на допълнителни измервания в изследването, или подробни познания за изпитваното вещество или вида риби, които може да не са широко достъпни.
Results of an acute toxicity test (see chapter C.2 of this Annex: Daphnia sp. acute immobilisation test) performed with Daphnia magna may be useful in selecting an appropriate range of test concentrations in the reproduction tests.
В допълнение, изборът на модел може да бъде повлиян от степента на валидиране и областта на приложимост (виж (11) за преглед и сравнение на различни методи).
The water solubility and the vapour pressure of the test chemical should be known and a reliable analytical method for the quantification of the chemical in the test solutions with reported recovery efficiency and limit of determination should be available.
Следва да се има предвид, че резултантната оценка за k1 и оценката за BCF са неопределени и може да се наложи да бъдат обработени в рамките на подход, основан на тежестта на доказателствата, заедно с получения BMF и параметрите на веществото (например размер на молекулата) за цялостна картина за потенциала за биоакумулация на веществото.
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes the structural formula, purity of the chemical, stability in light, stability under the conditions of the test, pKa, Pow and results of a test for ready biodegradability (see chapters C.4 (determination of ‘ready’ biodegradability), and C.29 (ready biodegradability — CO2 in sealed vessels) of this Annex).
Тълкуването и използването на тези параметри може да зависи от регулаторната рамка.
For a test to be valid, the following performance criteria should be met in the control(s):
Sijm D.T.H.M., Verberne M.E., de Jonge W.J., Pärt P. and Opperhuizen A. (1995), Allometry in the uptake of hydrophobic chemicals determined in vivo and in isolated perfused gills.
the mortality of the parent animals (female Daphnia) does not exceed 20 % at the end of the test;
В природата пътят, водещ до най-голяма експозиция във водна среда за силно хидрофобни вещества вероятно ще бъде чрез поглъщане и по този начин оценката за BCF не е строго представителна за потенциала за биоакумулация на такова вещество.
the mean number of living offspring produced per parent animal surviving at the end of the test is ≥ 60.
В Част В глава В.20 се заменя със следното:
Note: The same validity criterion (20 %) can be used for accidental and inadvertent parental mortality for the controls as well as for each of the test concentrations.
Изпитване за размножаване на Daphnia magna
Test vessels and other apparatus, which will come into contact with the test solutions, should be made entirely of glass or other chemically inert material.
Настоящият метод за изпитване е еквивалентен на насоките за изпитване на ОИСР (ТG) 211 (2012).
The test vessels will normally be glass beakers.
Насоките за изпитване на ОИСР периодично се преразглеждат в контекста на научния напредък.
In addition, some or all of the following equipment will be required:
Насоките за изпитване за размножаване 211 произхождат от Насоки за изпитване 202, част II, изпитване за размножаване на Daphnia sp.
oxygen meter (with microelectrode or other suitable equipment for measuring dissolved oxygen in low volume samples);
Като цяло е прието, че данните от изпитванията, проведени съгласно тази TG 202, могат да варират.
adequate apparatus for temperature control;
Това доведе до значителни усилия за идентифициране на причините за това вариране с цел създаване на по-добър метод за изпитване.
pH-meter;
Насоките за изпитване 211 се основават на резултатите от тези научноизследователски дейности, кръгови изпитвания и изследвания за валидиране 1992 (1), 1994 (2) и 2008 (3).
equipment for the determination of the hardness of water;
Основните разлики между първата (TG 202, 1984) и втората версия (TG 211, 1998) на насоките за изпитване за размножаване са:
equipment for the determination of the total organic carbon concentration (TOC) of water or equipment for the determination of the chemical oxygen demand (COD);
препоръчваният за използване вид е Daphnia magna;
adequate apparatus for the control of the lighting regime and measurement of light intensity.
продължителността на изпитването е 21 дни;
Test Organism
при полустатичните изпитвания броят на животните, които следва да се използват за всяка изпитвана концентрация, се намалява от най-малко 40, за предпочитане разделени на четири групи по 10 животни, до най-малко 10 животни, отглеждани индивидуално (въпреки че за проточните изпитвания могат да се използват различни планове);
The species to be used in the test is Daphnia magna Straus [57].Preferably, the clone should have been identified by genotyping.
бяха отправени по-специфични препоръки по отношение на средата за изпитване и условията на хранене.
Research (1) has shown that the reproductive performance of Clone A (which originated from IRCHA in France) (5) consistently meets the validity criterion of a mean of ≥ 60 living offspring per parent animal surviving when cultured under the conditions described in this test method.
Основните разлики между втората версия на насоките за изпитване за размножаване (TG 211, 1998) и настоящата версия са:
However, other clones are acceptable provided that the Daphnia culture is shown to meet the validity criteria for the test.
добавя се допълнение 7, за да се опишат процедурите за идентификация на пола на новороденото, ако се изисква.
At the start of the test, the animals should be less than 24 hours old and should not be first brood progeny.
В съответствие с предходните версии на настоящия метод за изпитване, съотношението между половете е незадължителна крайна точка;
They should be derived from a healthy stock (i.e. showing no signs of stress such as high mortality, presence of males and ephippia, delay in the production of the first brood, discoloured animals, etc.).
зависимата променлива брой на живото поколение, получено от едно преживяло родителско животно, е допълнена с допълнителна зависима променлива за размножаването на Daphnia, а именно общ брой живо поколение, получено в края на изпитването от един родител от родител Daphnia в началото на изпитването, като от анализа се изключва случайната и/или непреднамерена смъртност при родителите.
The stock animals should be maintained in culture conditions (light, temperature, medium, feeding and animals per unit volume) similar to those to be used in the test.
Целта на допълнителната зависима променлива е да приведе тази зависима променлива в съответствие с други методи за изпитване с размножаване при безгръбначни животни.
If the Daphnia culture medium to be used in the test is different from that used for routine Daphnia culture, it is good practice to include a pre-test acclimation period of normally about 3 weeks (i.e. one generation) to avoid stressing the parent animals.
Освен това, по отношение на тази зависима променлива е възможно при този метод за изпитване да се премахне източник на грешки, а именно влиянието на непреднамерената и/или случайната смъртност при родителите, ако това се случи по време на периода на експозиция.
Test medium
Както за подхода с ECx (напр.
It is recommended that a fully defined medium be used in this test.
ЕС 10 и ЕС50), така и за този с NOEC/LOEC, бяха включени допълнителни статистически насоки за планиране на изпитването и за обработка на резултатите.
This can avoid the use of additives (e.g. seaweed, soil extract), which are difficult to characterise, and therefore improves the opportunities for standardisation between laboratories.
Въвежда се гранично изпитване.
Elendt M4 (6) and M7 media (see Appendix 2) have been found to be suitable for this purpose.
Определенията, които са използвани, са дадени в допълнение 1.
However, other media (e.g. (7) (8)) are acceptable provided the performance of the Daphnia culture is shown to meet the validity criteria for the test.
Първоначалната цел на изпитването е оценяване въздействието на химикалите върху репродуктивната способност на Daphnia magna.
If media are used which include undefined additives, these additives should be specified clearly and information should be provided in the test report on composition, particularly with regard to carbon content as this may contribute to the diet provided.
За тази цел млади женски животни Daphnia (родителски животни) на възраст по-малко от 24 часа при започването на изпитването се експонират на изпитваното вещество, прибавено към водата в обхват от концентрации.
It is recommended that the total organic carbon (TOC) and/or chemical oxygen demand (COD) of the stock preparation of the organic additive be determined and an estimate of the resulting contribution to the TOC/COD in the test medium made.
Изпитването продължава 21 дни.
It is further recommended that TOC levels in the medium (i.e. before addition of the algae) be below 2 mg/l (9).
В края на изпитването се оценява общият брой получено живо поколение.
When testing chemicals containing metals, it is important to recognise that the properties of the test medium (e.g. hardness, chelating capacity) may have a bearing on the toxicity of the test chemical.
Репродуктивната способност на родителските животни може да се изрази по друг начин (например броя на живото поколение, произлязло от животно за един ден от първия ден, когато е наблюдавано поколение), но тези начини трябва да се отчетат като допълнение към общия брой живо поколение, получено в края на изпитването.
For this reason, a fully defined medium is desirable.
Поради особеното планиране на полустатичното изпитване в сравнение с други методи за изпитване за размножаване с безгръбначни, възможно е също да се отчита броят на живото поколение, произлязло от всяко отделно родителско животно.
However, at present, the only fully defined media which are known to be suitable for long-term culture of Daphnia magna are Elendt M4 and M7.
Това дава възможност, за разлика от други методи за изпитване за размножаване с безгръбначни, ако родителското животно умре случайно и/или непреднамерено през периода на изпитването, неговото поколение да може да бъде изключено от оценката на данните.
Both media contain the chelating agent EDTA.
Следователно, ако се появи смъртност при родителите в подложени на експозиция повторения, следва да се разгледа дали смъртността следва модел концентрация-отклик, например ако е налице значима регресия при отклика спрямо концентрацията на изпитвания химикал с положителен наклон (за това може да се използва статистически тест, подобен на трендовия тест на Кокрън-Армитидж).
Work has shown (2) that the ‘apparent toxicity’ of cadmium is generally lower when the reproduction test is performed in M4 and M7 media than in media containing no EDTA.
Ако смъртността не следва модел концентрация-отклик, тогава тези повторения с родителска смъртност следва да бъдат изключени от анализа на резултата от изпитването.
M4 and M7 are not, therefore, recommended for testing chemicals containing metals, and other media containing known chelating agents should also be avoided.
Ако смъртността следва модел концентрация-отклик, смъртността при родителите следва да бъде представена като ефект на изпитвания химикал и повторенията не следва да бъдат изключени от анализа.
For metal-containing chemicals it may be advisable to use an alternative medium such as, for example, ASTM reconstituted hard fresh water (9), which contains no EDTA.
Ако родителското животно умре по време на изпитването, т.е. случайно поради неправилно боравене или произшествие, или непреднамерено поради неизяснен инцидент, който не е свързан с въздействието на изпитвания химикал, или ако се окаже, че е мъжки индивид, тогава повторението се изключва от анализа (вж. повече в точка 51).
This combination of ASTM reconstituted hard fresh water and seaweed extract (10) is suitable for long-term culturing of Daphnia magna (2).
Токсичното въздействие на изпитвания химикал върху репродуктивната способност се изразява като ECx чрез изглаждането на данните към подходящ модел чрез нелинейна регресия, за да се оцени концентрацията, която би причинила съответно х % намаляване на репродуктивната способност, или алтернативно като стойност NOEC/LOEC (4).
The dissolved oxygen concentration should be above 3 mg/l at the beginning and during the test.
За предпочитане е изпитваните концентрации да са разположени от двете страни на най-ниската от използваните концентрации с определен ефект (напр.
The pH should be within the range 6 - 9, and normally it should not vary by more than 1,5 units in any one test.
EC10), което означава, че тази стойност се изчислява чрез интерполация, а не чрез екстраполация.
Hardness above 140 mg/l (as CaCO3) is recommended.
Преживяемостта на родителските животни и времето на появяване на първото поколение трябва да се протоколират.
Tests at this level and above have demonstrated reproductive performance in compliance with the validity criteria (11) (12).
Може също да се разгледат други свързани с химикали въздействия върху параметрите, като растеж (например дължина) и, възможно, вътрешна скорост на увеличаване на популацията (вж. точка 44).
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by dilution of a stock solution.
ИНФОРМАЦИЯ ЗА ИЗПИТВАНИЯ ХИМИКАЛ
Stock solutions should preferably be prepared, without using any solvents or dispersants if possible, by mixing or agitating the test chemical in test medium using mechanical means such as agitating, stirring or ultrasonication, or other appropriate methods.
Резултати от изпитването за остра токсичност (виж глава В.2 от настоящото приложение: изпитване за остра имобилизация с Daphnia sp.), извършен с Daphnia magna, може да е полезно при избиране на подходящ обхват от изпитвани концентрации при изпитвания за размножаване.
It is preferable to expose test systems to concentrations of the test chemical to be used in the study for as long as is required to demonstrate the maintenance of stable exposure concentrations prior to the introduction of test organisms.
Разтворимостта във вода и парното налягане на изпитвания химикал трябва да са известни и да е на разположение надежден аналитичен метод за количествено определяне на химикала в изпитваните разтвори с отчетени коефициент на аналитичния добив и граница на откриване.
If the test chemical is difficult to dissolve in water, procedures described in the OECD Guidance for handling difficult substances should be followed (13).
Информацията за изпитвания химикал, която може да се използва при установяването на условията за изпитване, включва структурната формула, чистотата на химикала, стабилността на светлина, стабилността при условията на изпитването, pKa, Powи резултатите от изпитването за пълна биоразградимост (вж.
The use of solvents or dispersants should be avoided, but may be necessary in some cases in order to produce a suitably concentrated stock solution for dosing.
Глава В.4. „Определяне на пряката биологична разградимост“, и Глава В.29, Лесна биоразградимост — CO2 в запечатани съдове) от настоящото приложение.
A dilution water control with adequate replicates and, if unavoidable, a solvent control with adequate replicates should be run in addition to the test concentrations.
За да бъде изпитването валидно, при контролата (контролите) следва да са изпълнени следните критерии:
Only solvents or dispersants that have been investigated to have no significant or only minimal effects on the response variable should be used in the test.
смъртността на родителските животни (женските Daphnia) не превишава 20 % в края на изпитването;
Examples of suitable solvents (e.g. acetone, ethanol, methanol, dimethylformamide and triethylene glycol) and dispersants (e.g. Cremophor RH40, methylcellulose 0,01 % and HCO-40) are given in (13).
средният брой живо поколение, произлязло от преживяло в края на изпитването родителско животно, е ≥ 60.
Where a solvent or dispersant is used, its final concentration should not be greater than 0,1 ml/l (13) and it should be the same concentration in all test vessels, except the dilution water control.
Забележка: Същия критерий за валидност (20 %) може да бъде използвани за случайна и непреднамерена смъртност при родителите за контролите, както и за всяка от изпитваните концентрации.
However, every effort should be made to keep the solvent concentration to a minimum.
Съдовете за изпитване и другите апарати, които ще бъдат в контакт с изпитваните разтвори, трябва да бъдат направени изцяло от стъкло или друг химически инертен материал.
Duration
Съдовете за изпитване обичайно са стъклени бехерови чаши.
Parent animals are maintained individually, one per test vessel, usually with 50 - 100 ml (for Daphnia magna, smaller volumes may be possible especially for smaller daphnids e.g. Ceriodaphnia dubia) of medium in each vessel, unless a flow-through test design is necessary for testing.
В допълнение ще се изискват някои или всички от следните уреди:
Larger volumes may sometimes be necessary to meet requirements of the analytical procedure used for determination of the test chemical concentration, although pooling of replicates for chemical analysis is also allowable.
устройство за измерване на съдържанието на кислород (с микроелектрод или друго подходящо оборудване за измерване на разтворения кислород в проби с малък обем),
If volumes greater than 100 ml are used, the ration given to the Daphnia may need to be increased to ensure adequate food availability and compliance with the validity criteria.
подходящ прибор за контрол на температурата;
Test animals
рН-метър;
For semi-static tests, at least 10 animals individually held at each test concentration and at least 10 animals individually held in the control series.
оборудване за определяне на твърдостта на водата;
For flow-through tests, 40 animals divided into four groups of 10 animals at each test concentration has been shown to be suitable (1).
оборудване за определяне на концентрацията на общ органичен въглерод (ТОС) във водата, или оборудване за определяне на химична потребност от кислород (COD);
A smaller number of test organisms may be used and a minimum of 20 animals per concentration divided into two or more replicates with an equal number of animals (e.g. four replicates each with five daphnids) is recommended.
адекватно оборудване за контрол на режима на светлина и за измерване на интензитета на светлината.
Note that for tests where animals are held in groups, it will not be possible to exclude any offspring from the statistical analysis if inadvertent/ accidental parental mortality occurs when the reproduction has begun, and hence in these cases the reproductive output should be expressed as total number of living offspring produced per parent present at the beginning of the test.
Изпитвани организми
Treatments should be allocated to the test vessels and all subsequent handling of the test vessels should be done in a random fashion.
Видът, който следва да се използва при изпитването, е Daphnia magna Straus [57].За предпочитане е клонът да е бил идентифициран чрез генотипа му.
Failure to do this may result in bias that could be construed as being a concentration effect.
Проучване (1) показва, че характеристиката за репродуктивността на клон А (от IRCHA във Франция) (5) последователно отговаря на критерия за валидност от средно ≥ 60 живо поколение на родителско животно, преживяло при отглеждане при условията, описани в този метод за изпитване.
In particular, if experimental units are handled in treatment or concentration order, then some time-related effect, such as operator fatigue or other error, could lead to greater effects at the higher concentrations.
Обаче други клонове са допустими, при условие че културата от Daphnia е показала, че отговаря на критериите за валидност на изпитването.
Furthermore, if the test results are likely to be affected by an initial or environmental condition of the test, such as position in the laboratory, then consideration should be given to blocking the test.
В началото на изпитването животните следва да са на възраст по-малко от 24 часа и не трябва да са първо поколение.
For semi-static tests, feeding should preferably be done daily, but at least three times per week (i.e. corresponding to media changes).
Те следва да са от една здрава изходна популация (т.е. такава, която не проявява признаци на стрес, като висока смъртност, наличие на мъжки и ефипиуми, забавяне в създаването на първото поколение, обезцветени животни и т.н.).
The possible dilution of the exposure concentrations by food addition should be taken into account and avoided as much as possible with well concentrated algae suspensions.
Изходната популация животни трябва да се поддържа в условия на отглеждане (светлина, температура, среда, хранене и животни на единица обем), подобни на тези, които ще се използват при изпитването.
Deviations from this (e.g. for flow-through tests) should be reported.
Ако средата на отглеждане на Daphnia, която ще се използва при изпитването, е различна от обичайно използваната за отглеждане на Daphnia, добра практика е преди изпитването да се включи период на аклиматизация от обикновено три седмици (т.е. едно поколение), за да се избегне подлагането на стрес на родителските животни.
During the test, the diet of the parent animals should preferably be living algal cells of one or more of the following: Chlorella sp., Pseudokirchneriella subcapitata (formerly Selenastrum capricornutum) and Desmodesmus subspicatus (formerly Scenedesmus subspicatus).
Среда за изпитване
The supplied diet should be based on the amount of organic carbon (C) provided to each parent animal.
Препоръчва се при това изпитване да се използва среда, която е изцяло определена.
Research (14) has shown that, for Daphnia magna, ration levels of between 0,1 and 0,2 mg C/Daphnia/day are sufficient for achieving the required number of living offspring to meet the test validity criteria.
Това може да предотврати употребата на добавки (например водорасли, екстракти от почвата), които са трудни за характеризиране, и по този начин да се подобри възможността за стандартизиране между лабораториите.
The ration can be supplied either at a constant rate throughout the period of the test, or, if desired, a lower rate can be used at the beginning and then increased during the test to take account of growth of the parent animals.
Създадени са подходящи за тази цел среди на Elendt М4 (6) и М7 (вж. приложение 2).
In this case, the ration should still remain within the recommended range of 0,1 - 0,2 mg C/Daphnia/day at all times.
Обаче са допустими и други среди (например (7) (8), при условие че бъде показано, че параметрите на културата Daphnia отговарят на критериите за валидност на изпитването.
If surrogate measures, such as algal cell number or light absorbance, are to be used to feed the required ration level (i.e. for convenience since measurement of carbon content is time consuming), each laboratory should produce its own nomograph relating the surrogate measure to carbon content of the algal culture (see Appendix 3 for advice on nomograph production).
Ако се използват среди, които включват неопределени добавки, тези добавки следва да се определят ясно и в протокола от изпитването следва да се предостави информация за състава, по-специално по отношение на съдържанието на въглерод, тъй като това може да има принос по към предоставения хранителен режим.
Nomographs should be checked at least annually and more frequently if algal culture conditions have changed.
Препоръчва се да бъдат определени общият органичен въглерод (ТОС) и/или химичната потребност от кислород (COD) на изходния препарат от органичната добавка и да се направи оценка на произтичащия принос към ТОС и COD в приготвената среда за изпитване.
Light absorbance has been found to be a better surrogate for carbon content than cell number (15).