natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Освен това се препоръчва нивата на ТОС в средата (т.е. преди добавянето на водораслите) да бъде под 2 mg/l (9).
A concentrated algal suspension should be fed to the Daphnia to minimise the volume of algal culture medium transferred to the test vessels.
Когато се изпитват химикали, съдържащи метали, е важно да се има предвид, че свойствата на средата за изпитване (например твърдост, капацитет за хелатообразуване) могат да влияят на токсичността на изпитвания химикал.
Concentration of the algae can be achieved by centrifugation followed by re-suspension in Daphnia culture medium.
Поради тази причина е желателно средата да бъде напълно определена.
Light
Обаче до момента единствените напълно определени среди, за които се знае, че са подходящи за дългосрочно отглеждане на Daphnia magna, са Elendt М4 и М7.
16 hours light at an intensity not exceeding 15-20 μE · m– 2 · s– 1 measured at the water surface of the vessel.
И двете среди съдържат хелатен агент EDTA.
For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 1000-1500 lux for cool white light corresponds close to the recommended light intensity 15-20 μE · m-2 · s-1.
Изследванията са показали (2), че видимата токсичност на кадмия е най-общо по-ниска, когато изпитването за размножаване се извършва в среди М4 и М7, в сравнение със среди, които не съдържат EDTA.
The temperature of the test media should be within the range 18-22 °C.
Следователно М4 иМ7 не се препоръчват за изпитване на химикали, които съдържат метали, и другите среди, съдържащи известни хелатни агенти, също трябва да се избягват.
However, for any one test, the temperature should not, if possible, vary by more than 2 °C within these limits (e.g. 18-20, 19-21 or 20-22 °C) as daily range.
За химикали, които съдържат метали може да е препоръчително да се използва алтернативна среда, като например възстановена твърда прясна вода по ASTM (9), която не съдържа EDTA.
It may be appropriate to use an additional test vessel for the purposes of temperature monitoring.
Тази комбинация от възстановена твърда прясна вода по ASTM и екстракти от водорасли (10) е подходяща за дългосрочно отглеждане на Daphnia magna (2).
Aeration
Концентрацията на разтворения кислород следва да е над 3 mg/l в началото и по време на изпитването.
The test vessels should not be aerated during the test.
Стойността на рН следва да е в обхват от 6 до 9 и обикновено следва да не варира с повече от 1,5 единици в никое от изпитванията.
Test design
Препоръчва се твърдост над 140 mg/1 (като CaCO3).
Range finding test
При изпитванията при тези нива и над тях е доказано, че репродуктивността е в съответствие с критериите за валидност (11) (12).
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example five test chemical concentrations and two replicates for each treatment and control.
Разтворите за изпитване с избраните концентрации обикновено се приготвят чрез разреждане на изходен разтвор.
Additional information, from tests with similar chemicals or from literature, on acute toxicity to Daphnia and/or other aquatic organisms may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the range-finding test.
Изходните разтвори за предпочитане се приготвят без използването на каквито и да било разтворители или диспергиращи средства, ако е възможно, чрез смесване или разбъркване на изпитвания химикал в среда за изпитване с използване на механични средства, като например разклащане, разбъркване или ултрасонификация, или други подходящи методи.
The duration of the range-finding test is 21 days or of a sufficient duration to reliably predict effect levels.
За предпочитане е системите за изпитване да се експонират на концентрации на изпитвания химикал, които ще се използват при изпитването, доколкото се изисква доказване на поддържането на стабилни концентрации на експозиция преди въвеждането на изпитваните организми.
At the end of the test, reproduction of the Daphnia is assessed.
Ако разтварянето на изпитвания химикал във вода е е трудно, трябва да бъдат следвани процедурите, описани в насоките на ОИСР за изпитване на трудни вещества (13).
The number of parents and the occurrence of offspring should be recorded.
Използването на разтворители или диспергиращи средства следва да се избягва, но в някои случаи може да се наложи, с цел да се получи изходен разтвор за дозиране с подходяща концентрация.
Definitive test
Към концентрациите на изпитване следва да бъдат включени допълнително една контрола на вода за разреждане с достатъчно повторения и, ако е неизбежно, контрола на разтворител с достатъчно повторения.
Normally there should be at least five test concentrations, bracketing effective concentration (e.g. ECx), and arranged in a geometric series with a separation factor preferably not exceeding 3,2 An appropriate number of replicates for each test concentration should be used (see paragraphs 24-25).
По време на изпитването следва да се използват само разтворители или диспергиращи средства, за които е проучено, че нямат статистически значимо влияние върху зависимата променлива, или че то е само минимално.
Justification should be provided if fewer than five concentrations are used.
Примери за подходящи разтворители (напр. ацетон, етанол, метанол, диметилформамид и триетиленгликол) и диспергиращи средства (напр.
Chemicals should not be tested above their solubility limit in test medium.
Cremophor RH 40, метилцелулоза 0,01 % и НСО-40) са дадени в (13).
Before conducting the experiment it is advisable to consider the statistical power of the tests design and using appropriate statistical methods (4).
Когато се използва разтворител или диспергиращо средство, неговата крайна концентрация не следва да е по-висока от 0,1 ml/l (36) и концентрацията следва да бъде една и съща във всички съдове за изпитване, с изключение на контролата на вода за разреждане.
In setting the range of concentrations, the following should be borne in mind:
Независимо от това, следва да се положат всички усилия концентрацията на разтворителя да бъде поддържана на минимално равнище.
When ECx for effects on reproduction is estimated, it is advisable that sufficient concentrations are used to define the ECx with an appropriate level of confidence.
Продължителност
Test concentrations used should preferably bracket the estimated ECx such that ECx is found by interpolation rather than extrapolation.
Родителските животни се отглеждат индивидуално, едно животно в един съд за изпитване, обикновено с 50-100 ml среда (за Daphnia magna може да е възможен по-малък обем, особено за по-малките дафнии например Ceriodaphnia dubia) за всеки съд, освен ако за изпитването е необходим проточен режим.
It is an advantage for the following statistical analysis to have more test concentrations (e.g. 10) and fewer replicates of each concentration (e.g. 5 thus holding the total number of vessels constant) and with 10 controls.
За да се постигнат изискванията на аналитичната процедура, използвана при определяне на концентрацията на изпитвани химикал, понякога може да са необходими по-големи обеми, въпреки че е допустимо и обединяването на повторенията за химически анализ.
When estimating the LOEC and/or NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that the reproductive output at that concentration is not significantly lower than that in the control.
Ако се използват обеми, по-големи от 100 ml, може да се наложи да се увеличи дажбата, подавана на Daphnia, за да се гарантира достатъчна наличност на храна и съответствие с критериите за валидност.
If this is not the case, the test should be repeated with a reduced lowest concentration.
Изпитвани животни
When estimating the LOEC and/or NOEC, the highest test concentration should be high enough so that the reproductive output at that concentration is significantly lower than that in the control.
За полустатичните изпитвания се използват най-малко 10 животни, разделени поотделно за всяка изпитвана концентрация, и най-малко 10 животни, разделени поотделно в контролните серии.
If this is not the case, the test should be repeated with an increased highest concentration unless the maximum required test concentration for chronic effects testing (i.e., 10 mg/l) was used as the highest test concentration in the initial test.
За проточните изпитвания е установено за уместно да се използват 40 животни, разделени на четири групи от 10 животни за всяка изпитвана концентрация (1).
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (e.g. at 10 mg/l), or when the test chemical is highly likely to be of low/ no toxicity based on lack of toxicity to other organisms and/or low/no uptake, the reproduction test may be performed as a limit test, using a test concentration of e.g.10 mg/l and the control.
Може да се използва по-малък брой изпитвани организми и се препоръчва минимум 20 животни за концентрация, разделени в две или повече повторения с равен брой животни (например четири повторения, като всяко съдържа пет дафнии).
Ten replicates should be used for both the treatment and the control groups.
Следва да се отбележи, че за изпитвания, при които животните са държани в групи, няма да бъде възможно да се изключи никакво поколение от статистическия анализ, ако е получена непреднамерена/случайна смъртност при родителите, когато размножаването е започнало, и следователно в тези случаи репродуктивната способност следва да се изразява като общ брой живо поколение, произлязло от родител, който е бил наличен в началото на изпитването.
When a limit test might need to be done in a flow-through system less replicates would be adequate.
Третиранията следва да се разпределят към съдовете за изпитването на случаен принцип и всяко последващо обработване на съдовете за изпитване следва да бъде извършено на случаен принцип.
A limit test will provide the opportunity to demonstrate that there is no statistically significant effect at the limit concentration, but if effects are recorded a full test will normally be required.
Неизпълнението на тези действия може да доведе до изместване, което може да се изтълкува погрешно като въздействие от концентрацията.
One test-medium control series and also, if relevant, one control series containing the solvent or dispersant should be run in addition to the test series.
По-специално, ако опитните единици се обработват по реда на третирането или концентрацията, тогава някой ефект, относим към времето, като умората на оператора или други грешки, може да доведе до по-големи въздействия при по-високи концентрации.
When used, the solvent or dispersant concentration should be the same as that used in the vessels containing the test chemical.
Нещо повече, ако е вероятно резултатите от изпитването да са повлияни от първоначално условие или от условие на околната среда при изпитването, такива като местонахождение в лабораторията, следва да се помисли за спиране на изпитването.
The appropriate number of replicates should be used (see paragraphs 23-24).
При полустатичните изпитвания храненето за предпочитане се прави дневно, но поне три пъти на седмица (т.е. съответстващи на подмяната на средата).
Generally in a well-run test, the coefficient of variation around the mean number of living offspring produced per parent animal in the control(s) should be ≤ 25 %, and this should be reported for test designs using individually held animals.
Евентуалното разреждане на концентрациите на експозиция от хранителна добавка следва да се вземе предвид и да се избягва в максимално възможна степен с добре концентрирани суспензии водорасли.
Test medium renewal
Отклоненията от това (например за проточните изпитвания) следва да бъдат протоколирани.
The frequency of medium renewal will depend on the stability of the test chemical, but should be at least three times per week.
По време на изпитването хранителният режим на родителските животни за предпочитане са живи клетки от морски водорасли от едно или повече от следните: Chlorella sp., Pseudokirchneriella subcapitata (предходно Selenastrum capricornutum) и Desmodesmus subspicatus (предходно Scenedesmus subspicatus).
If, from preliminary stability tests (see paragraph 7), the test chemical concentration is not stable (i.e. outside the range 80 - 120 % of nominal or falling below 80 % of the measured initial concentration) over the maximum renewal period (i.e. 3 days), consideration should be given to more frequent medium renewal, or to the use of a flow-through test.
Хранителният режим, който се прилага, следва да се основава на количеството органичен въглерод (С), осигурен за всяко родителско животно.
When the medium is renewed in semi-static tests, a second series of test vessels are prepared and the parent animals transferred to them by, for example, a glass pipette of suitable diameter.
Проучванията (14) показват, че за Daphnia magna нива на дажбата между 0,1 и 0,2 mg C/Daphnia/ден са достатъчни за получаването на изисквания брой живо поколение, за да се покрият критериите за валидност на изпитването.
The volume of medium transferred with the Daphnia should be minimised.
Дажбата може да се подава или при постоянна скорост по време на изпитването, или, ако е желателно, може да се използва по-ниска скорост в началото на изпитването, която може да се повиши по време на извършването на изпитването, за да се вземе предвид растежът на родителските животни.
The results of the observations made during the test should be recorded on data sheets (see examples in Appendixes 4 and 5).
В този случай дажбата все още остава в препоръчания обхват от 0,1 — 0,2 mg C/Daphnia/ден по всяко време.
If other measurements are required (see paragraph 44), additional observations may be required.
Ако за да се поддържа изискваното ниво на дажба (т.е. за удобство, тъй като измерването на въглерода изисква време) трябва да се използват заместващи измерители, такива като брой на клетките от морски водорасли или светлинна абсорбция, всяка лаборатория трябва да изготви собствена номограма, която свързва заместващия измерител със съдържанието на въглерод в културата от водорасли (вж. допълнение 3 за съвети за изготвянето на номограма).
Offspring
Номограмите следва да се проверяват поне веднъж годишно и по-често, ако условията за отглеждане на морските водорасли са се променили.
The offspring produced by each parent animal should preferably be removed and counted daily from the appearance of the first brood to prevent them consuming food intended for the parent.
Установено е, че светлинната абсорбция е по-добър заместител за съдържанието на въглерод, отколкото броят на клетките (15).
For the purpose of this test method it is only the number of living offspring that needs to be counted, but the presence of aborted eggs or dead offspring should be recorded.
За да се минимизира обемът на средата с отглеждани водорасли, прехвърляна в съдовете за изпитване, Daphnia следва да се хранят с концентрирана суспензия от водорасли.
Mortality
Концентрацията на водорасли може да се постигне чрез центрофугиране, последвано от повторно суспендиране в средата за отглеждане на Daphnia.
Mortality among the parent animals should be recorded preferably daily, or at least as frequently as offspring are counted.
Светлина
Other parameters
16 часа светлина при интензитет, непревишаващ 15-20 μE ߦ m– 2 ߦ s– 1, измерена на повърхността на водата на съда.
Although this test method is designed principally to assess effects on reproductive output, it is possible that other effects may also be sufficiently quantified to allow statistical analysis.
За уреди за измерване на светлината, калибрирани в lux, еквивалентният диапазон от 1000 — 1500 lux за студена бяла светлина съответства приблизително на препоръчвания интензитет на светлината от 15-20 μE·m– 2 · s– 1.
Reproductive output per surviving parent animal, i.e. number of living offspring produced during the test per surviving parent, may be recorded.
Температурата на средата за изпитване е в интервал от 18-22°C.
This may be compared with the main response variable (reproductive output per parent animal in the start of the test which did not inadvertently or accidentally die during the test).
Обаче за всяко отделно изпитване температурата следва да не варира, ако е възможно, с повече от 2 °C в рамките на тези ограничения (например 18-20, 19-21 или 20-22°C) като интервал за деня.
If parental mortality occurs in exposed replicates it should be considered whether or not the mortality follows a concentration-response pattern, e.g. if there is a significant regression of the response versus concentration of the test chemical with a positive slope (a statistical test like the Cochran-Armitage trend test may be used for this).
Може да е подходящо използването на допълнителни съдове за изпитване за целите на следенето на температурата.
If the mortality follows a concentration-response pattern, the parental mortality should be assigned as an effect of the test chemical and the replicates should not be excluded from the analysis of the test result.
Аериране
Growth measurements are highly desirable since they provide information on possible sublethal effects which may be useful in addition to reproduction measures alone; the measurement of the length of the parent animals (i.e. body length excluding the anal spine) at the end of the test is recommended.
По време на изпитването съдовете следва да не се проветряват.
Other parameters that can be measured or calculated include time to production of first brood (and subsequent broods), number and size of broods per animal, number of aborted broods, presence of male neonates (OECD, 2008) or ephippia and possibly the intrinsic rate of population increase (see Appendix 1 for definition and Appendix 7 for the identification of the sex of neonates).
Планиране на изпитването
Frequency of analytical determinations and measurements
Изпитване за определяне на обхват
Oxygen concentration, temperature, hardness and pH values should be measured at least once a week, in fresh and old media, in the control(s) and in the highest test chemical concentration.
Когато е необходимо, се провежда изпитване за определяне на обхвата, например за пет концентрации на изпитвания химикал и две повторения за всяко третиране и контрола.
During the test, the concentrations of test chemical are determined at regular intervals.
Допълнителна информация за остра токсичност за Daphnia и/или други водни организми, получена от изпитвания с аналогични химикали или от литературата, може също да бъде полезна при вземането на решение за обхвата на концентрациите, които да се използват при изпитването за определяне на обхвата.
In semi-static tests where the concentration of the test chemical is expected to remain within ± 20 per cent of the nominal (i.e. within the range 80 - 120 per cent- see paragraphs 6, 7 and 39), it is recommended that, as a minimum, the highest and lowest test concentrations be analysed when freshly prepared and at the time of renewal on one occasion during the first week of the test (i.e. analyses should be made on a sample from the same solution — when freshly prepared and at renewal).
Продължителността на изпитването за определяне на обхвата е 21 дни или с продължителност, която е достатъчна да се направят надеждни прогнози за нивата на въздействие.
These determinations should be repeated at least at weekly intervals thereafter.
В края на изпитването се оценява размножаването на Daphnia.
For tests where the concentration of the test chemical is not expected to remain within ± 20 per cent of the nominal, it is necessary to analyse all test concentrations, when freshly prepared and at renewal.
Броят на родителите и срещането на поколение трябва да бъдат записани.
However, for those tests where the measured initial concentration of the test chemical is not within ± 20 per cent of nominal but where sufficient evidence can be provided to show that the initial concentrations are repeatable and stable (i.e. within the range 80 - 120 per cent of initial concentrations), chemical determinations could be reduced in weeks 2 and 3 of the test to the highest and lowest test concentrations.
Окончателно изпитване
In all cases, determination of test chemical concentrations prior to renewal need only be performed on one replicate vessel at each test concentration.
Обикновено следва да са налични поне пет изпитвани концентрации, обграждащи ефективна концентрация (напр.
If a flow-through test is used, a similar sampling regime to that described for semi-static tests is appropriate (but measurement of ‘old’ solutions is not applicable in this case).
ECx) и подредени в геометрична прогресия с частно, което за предпочитане не превишава 3,2.
However, it may be advisable to increase the number of sampling occasions during the first week (e.g. three sets of measurements) to ensure that the test concentrations are remaining stable.
Трябва да се използва подходящ брой повторения за всяка изпитвана концентрация т (вж. точки 24-25).
In these types of test, the flow-rate of diluent and test chemical should be checked daily.
Трябва да се представи обосновка, ако са използвани по-малко от пет концентрации.
If there is evidence that the concentration of the chemical being tested has been satisfactorily maintained within ± 20 per cent of the nominal or measured initial concentration throughout the test, then results can be based on nominal or measured initial values.
Следва да не се изпитват химикали над тяхната граница на разтворимост в изпитваната среда.
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is greater than ± 20 per cent, results should be expressed in terms of the time-weighted mean (see guidance for calculation in Appendix 6).
Преди провеждане на опита е препоръчително да се разгледа статистическата мощност по плана за изпитването и използването на подходящи статистически методи (4).
The purpose of this test is to determine the effect of the test chemical on the reproductive output.
При определяне на обхвата от концентрации следва да се взема предвид следното:
The total number of living offspring per parent animal should be calculated for each test vessel (i.e. replicate).
когато се прави оценка на ECx за въздействие върху размножаването, се препоръчва да се използват концентрации, достатъчни за определяне на ECx с подходяща доверителна вероятност.
In addition, the reproduction can be calculated based on the production of living offspring by the surviving parent organism.
За предпочитане е използваните концентрации за изпитване да обграждат оценката за ECx, така че ECx да се получава чрез интерполация, а не чрез екстраполация.
However, the ecologically most relevant response variable is the total number of living offspring produced per parent animal which does not die accidentally [58] or inadvertently [59] during the test.
Преимущество за следващия статистически анализ е да има повече изпитвани концентрации (напр.
If the parent animal dies accidentally or inadvertently during the test, or turns out to be male, then the replicate is excluded from the analysis.
10) и по-малко повторения на всяка концентрация (напр.
The analysis will then be based on a reduced number of replicates.
5, като по този начин общият брой на съдовете остава постоянен) и с 10 контроли.
In summary, when LOEC and NOEC or ECx are being used to express the effects, it is recommended to calculate the effect on reproduction by the use of both response variables mentioned above i.e.
При оценяването на LOEC и/или NOEC най-ниската изпитвана концентрация трябва да е достатъчно ниска, така че репродуктивната способност при тази концентрация да не е значимо по-ниска от тази при контролата.
as the total number of living offspring produced per parent animal which does not die accidentally or inadvertently during the test and;
Ако случаят не е такъв, изпитването трябва да се повтори с намалена най-ниска концентрация.
as the number of living offspring produced per surviving parental animal;
При оценяването на LOEC и/или NOEC най-високата изпитвана концентрация трябва да е достатъчно висока, така че репродуктивната способност при тази концентрация да е значимо по-ниска от тази при контролата.
and then to use as the final result the lowest NOEC and LOEC or ECx value calculated by using either of these two response variables.