natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Важно е, че както през фазата на поглъщане, така и при очистването, изпитваните и контролните групи следва да бъдат хранени с еквивалентни в хранително отношение хранителни режими.
Diet
Фаза на поглъщане с продължителност 7-14 дни по правило е достатъчна, въз основа на опита на разработилите метода (38) (39).
A commercially available fish food (floating and/or slow sinking pelletised diet) that is characterised in terms of at least protein and fat content is recommended.
Този обхват следва да сведе до минимум разходите за извършване на изпитването, като същевременно се гарантира достатъчна експозиция за повечето вещества.
The food should have a uniform pellet size to increase the efficiency of the feed exposure, i.e. the fish will eat more of the food instead of eating the larger pieces and missing the smaller ones.
В някои случаи обаче фазата на поглъщане може да бъде удължена (вж. точка 127).
The pellets should be appropriately sized for the size of the fish at the start of the test (e.g. pellet diameters roughly 0,6-0,85 mm for fish between 3 and 7 cm total length, and 0,85-1,2 mm for fish between 6 and 12 cm total length may be used).
По време на фазата на поглъщане концентрацията на веществото в рибата може да не достигне стационарно състояние, така че обработката на данни и резултатите от този метод обикновено се основават на кинетичен анализ на тъканни остатъци.
Pellet size may be adjusted depending on fish growth at the start of the depuration phase.
(Забележка: Уравненията за изчисляване на времето за достигане на стационарно състояние могат да се прилагат тук така, както в изпитването с експозиция по воден път — вж. допълнение 5).
An example of a suitable food composition, as commercially supplied, is given in Appendix 7.
Фазата на очистването започва, когато на рибите за първи път се дава хранителен режим без добавка, и обикновено е с продължителност до 28 дни или докато изпитваното вещество вече не може да бъде количествено определено в цели риби, в зависимост от това кое настъпва по-рано.
Test diets with total lipid content between 15 and 20 % (w/w) have commonly been used in the development of this method.
Фазата на очистването може да се съкрати или удължи спрямо срока от 28 дни, в зависимост от промяната във времето на измерените химични концентрации и размерите на рибите.
Fish food with such a high lipid concentration may not be available in some regions.
Настоящият метод позволява определянето на специфичния за веществото период на полуразграждане (t1/2 от константата за скоростта на очистване, k2), ефикасността на усвояването (абсорбцията в червата; a), кинетичния коефициент на биомултипликация от експозиция чрез хранителния режим (BMFK), коригирания за растеж кинетичен коефициент на биомултипликация от експозиция чрез хранителния режим (BMFKg), коригирания за липиди [45] кинетичен коефициент на биомултипликация от експозиция чрез хранителния режим (BMF KL) (и/или коригирания за растеж и за липиди кинетичен коефициент на биомултипликация от експозиция чрез хранителния режим, BMFKgL) за изпитваното вещество в рибите.
In such cases studies could be run with a lower lipid concentration in the food, and if necessary the feeding rate adjusted appropriately to maintain fish health (based on preliminary testing).
Както за метода с експозиция по воден път, увеличението на масата на рибата по време на изпитването ще доведе до намаляване на концентрацията на изпитваното вещество в рибата, чиято маса нараства, като по този начин ще се подцени (кинетичният) BCF, ако не бъде коригиран с растежа (срв. точки 162 и 163).
The total lipid content of the test group and control group diets needs to be measured and recorded before the start of the test and at the end of the uptake phase.
Освен това, ако се прецени, че стационарното състояние е постигнато във фазата на поглъщането, може да се изчисли ориентировъчен BMF в стационарно състояние.
Details provided by the commercial feed supplier of analysis for nutrients, moisture, fibre and ash, and if possible minerals and pesticide residues (e.g. “standard” priority pollutants), should be presented in the study report.
Налични са подходи, които правят възможно оценяването на кинетичния коефициент на биоконцентрация (BCFK) въз основа на данните, получени при изследването чрез хранителния режим (напр.
When spiking the food with test substance, all possible efforts should be made to ensure homogeneity throughout the test food.
(44) (45) (46) (47) (48).
The concentration of test substance in the food for the test group should be selected taking into account the sensitivity of the analytical technique, the test substance's toxicity (NOEC if known) and relevant physicochemical data.
Предимствата и недостатъците на такива подходи се обсъждат в допълнение 8.
If used, the reference substance should preferably be incorporated at a concentration around 10 % of that of the test substance (or in any case as low as is practicable), subject to analysis sensitivity (e.g. for hexachlorobenzene a concentration in the food of 1-100 μg/g has been found to be acceptable; cf. (47) for more information on assimilation efficiencies of HCB).
Изпитването е планирано главно за малко разтворими неполярни органични вещества, които следват приблизително кинетика на поглъщане и очистване от първи порядък в риби.
The test substance can be spiked to the fish food in several ways depending on its physical characteristics and solubility (see Appendix 7 for more details on spiking methods):
Ако се изпитва вещество, които не следва приблизително кинетика на поглъщане и очистване от първи порядък, следва да се прилагат по-сложни модели (вж. позоваванията в приложение 5) и следва да се потърси консултация от статистик в областта на биологията и/или специалист в областта на фармакокинетиката.
If the substance is soluble and stable in triglycerides, the substance should be dissolved in a small amount of fish oil or edible vegetable oil before mixing with fish food.
Обикновено BMF се определя чрез анализ на изпитваното вещество в цяла риба (на база мокро тегло).
In this instance, care should be taken to avoid producing a ration that is too high in lipid, taking into account the natural lipid content of the spiked feed, by adding the minimum known quantity of oil required to achieve distribution and homogeneity of the test substance in the food, or;
Ако е относимо към целите на проучването, могат да бъдат пробовзети специфични тъкани (напр. мускули, черен дроб), ако рибата е разделена на ядивни и неядивни части (вж. точка 21).
The food should be spiked using a suitable organic solvent, so long as homogeneity and bioavailability are not compromised (it is possible that (micro)crystals of the test substance may form in the food as a consequence of solvent evaporation and there is no easy way to prove this has not occurred; cf.
Освен това могат да се използват отстраняване и отделен анализ на стомашно-чревния тракт, за да се определи приносът към концентрациите в цялата риба за точките на пробовземане в края на фазата на поглъщане и в близост до началото на фазата на очистването, или като част от подход на масов баланс.
(49)), or;
Липидното съдържание на пробовзетите цели риби следва да се измерва така, че концентрациите да могат да бъдат коригирани за липиди, при отчитане на липидното съдържание както на хранителния режим, така и на рибите (вж. точки 56 и 57 и допълнение 7).
Non-viscous liquids should be added directly to fish food but they should be well mixed to promote homogeneity and facilitate good assimilation.
Теглото на пробовзетите отделни екземпляри следва да бъде измерено и записано, и да бъде свързано с анализираната химична концентрация за съответния отделен екземпляр (например като се протоколира чрез използване на уникален идентификационен код за всяка пробовзета риба), за целите на изчисляването на растежа, който може да настъпи по време на изпитването.
The technique for mixing should ensure homogeneity of the spiked feed.
Общата дължина на рибата също следва да се измери, когато това е възможно [46].
In few cases, e.g. less hydrophobic test substances more likely to desorb from the food, it may be necessary to coat prepared food pellets with a small quantity of corn/fish oil (see paragraph 142).
Данните за теглото също са необходими за оценяване на BCF с използване на данните от очистването от изпитването чрез хранителния режим.
In such cases, control food should be treated similarly and the final prepared feed used for lipid measurement.
Следва да е на разположение информация за изпитваното вещество, както е описана в точки 3 и 22.
If used, the results of the reference substance should be comparable with literature study data carried out under similar conditions with a comparable feeding rate (cf. paragraph 45) and reference substance-specific parameters should meet the relevant criteria in paragraph 113 (3rd, 4th and 5th points).
Метод за анализ на концентрациите на изпитваното вещество във вода обикновено не е необходим; изискват се методи с подходяща чувствителност за измерването на концентрациите в храната за риби и в тъканите на рибите.
If an oil or carrier solvent is used as a vehicle for the test substance, an equivalent amount of the same vehicle (excluding test substance) should be mixed with the control diet in order to maintain equivalency with the spiked diet.
Методът може да се използва за изпитване на повече от едно вещество в едно единствено изпитване.
The spiked diet should be stored under conditions that maintain stability of the test substance within the feed mix (e.g. refrigeration) and these conditions reported.
Независимо от това, изпитваните вещества трябва да са съвместими едно с друго, така че да не си взаимодействат или да изменят своята химична идентичност при добавяне в храната за риби.
Selection of fish species
Целта е измерените резултати за всяко вещество, изпитвано заедно с други, да не се различават значително от резултатите, които биха се получили, ако се проведат отделни изпитвания за всяко изпитвано вещество.
Fish species as specified for the aqueous exposure may be used (cf. paragraph 32 and Appendix 3).
Предварителната аналитична работа следва да установи аналитичния добив за всяко вещество от храна с множество добавки и от проба от рибна тъкан i) с висок аналитичен добив (напр. > 85 % от номиналния) и ii) с необходимата чувствителност за изпитване.
Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), carp (Cyprinus carpio) and fathead minnow (Pimephales promelas) have been commonly used in dietary bioaccumulation studies with organic substances before the publication of this TM.
Общата доза на веществата, изпитвани заедно, следва да е под комбинираната концентрация, която може да доведе до токсични ефекти (вж. точка 51).
The test species should have a feeding behaviour that results in rapid consumption of the administered food ration to ensure that any factor influencing the concentration of the test substance in food (e.g. leaching into the water and the possibility of aqueous exposure) is kept to a minimum.
Освен това, възможните неблагоприятни ефекти в рибата и потенциалът за ефекти от взаимодействия (например метаболитни ефекти), свързани с едновременно изпитване на множество вещества, трябва да се вземат под внимание при планирането на опита.
Fish within the recommended size/weight range (cf. Appendix 3) should be used.
Едновременното изпитване на вещества, които могат да съществуват в йонизирано състояние, трябва да се избягва.
Fish should not be so small as to hamper ease of analyses on an individual basis.
По отношение на експозицията, методът е подходящ и за сложни смеси (вж. точка 13, въпреки че при анализа се прилагат същите ограничения, каквито за всеки друг метод).
Species tested during a life-stage with rapid growth can complicate data interpretation, and high growth rates can influence the calculation of assimilation efficiency [48].
За да бъде валидно дадено изпитване се прилагат следните условия (вж. точка 24):
Holding of fish
Варирането на температурата на водата е по-малко от ± 2 °C в третираните или контролните групи
Acclimatisation, mortality and disease acceptance criteria are the same as for the aqueous exposure method prior to test conductance (cf. paragraphs 33-35).
Концентрацията на разтворения кислород не пада под 60 % от стойността на насищане при равновесие с атмосферния въздух;
Pre-study work and range-finding test
Концентрацията на изпитваното вещество в храната на рибата преди и в края на фазата на поглъщане е в рамките на обхват ± 20 % (въз основа на най-малко три проби от двете времеви точки)
Pre-study analytical work is necessary to demonstrate recovery of the substance from spiked food/spiked fish tissue.
Предварителната аналитична работа върху хранителния режим с добавката следва да докаже висока степен на хомогенност на веществото в храната; най-малко три концентрации на проби от веществото, взети в началото на изпитването, трябва да не се отклоняват с повече от ± 15 % от средната стойност
A range-finding test to select a suitable concentration in the food is not always necessary.
В храната без добавка или в тъканите от контролните риби концентрации на изпитваното вещество не се откриват или присъстват единствено като следи, за разлика от третираните проби
For the purposes of showing that no adverse effects are observed and evaluating the palatability of spiked diet, sensitivity of analytical method for fish tissue and food, and selection of suitable feeding rate and sampling intervals during depuration phase etc., preliminary feeding experiments may be undertaken but are not obligatory.
Смъртността или други неблагоприятни ефекти/болести в рибите както от контролната, така и от третираната група, следва да е по-малка от 10 % в края на изпитването; Ако изпитването се удължава на каквото и да е основание, неблагоприятните ефекти в двете групи са ≤ 5 % на месец и ≤ 30 % кумулативно.
A preliminary study may be valuable to estimate numbers of fish needed for sampling during the depuration phase.
Ако дадена лаборатория не е извършвала изследването преди това, или са направени съществени промени (например промяна на породата на рибите или доставчика, различни видове риби, значителна промяна в размера на рибите, в храна за риби или в метода за добавянето и др.), е целесъобразно да се проведе проучване на техническата компетентност, с използване на референтно вещество.
This can result in significant reduction in the number of fish used, especially for test substances that are particularly susceptible to metabolism.
Референтното вещество се използва най-вече за установяване дали техниката за добавяне в храната е подходяща, за да осигури максимална хомогенност и бионаличност на изпитваните вещества.
Conditions of exposure
Един пример, който се използва в случай на неполярни хидрофобни вещества, е хексахлоробензенът (HCB), но следва да бъдат взети предвид други вещества със съществуващи надеждни данни за поглъщането и биомултипликацията поради опасните свойства на HCB [47].
Uptake Phase duration
Ако се използва основна информация за референтното вещество, тя трябва да се представи в протокола от изпитването, включително наименование, чистота, номер по CAS, структура, данни за токсичност (при наличност), както за изпитваните вещества (вж. точки 3 и 22).ОПИСАНИЕ НА МЕТОДА
An uptake phase of 7-14 days is usually sufficient, during which one group of fish are fed the control diet and another group of fish the test diet daily at a fixed ration dependent on the species tested and the experimental conditions, e.g. between 1-2 % of body weight (wet weight) in the case of rainbow trout.
Материалите и апаратурата трябва да се използват както е описано в метода с експозиция по воден път (вж. точка 26).
If needed the uptake phase may be extended based on practical experience from previous studies or knowledge of the test substance's (or analogue's) uptake/depuration in fish.
Трябва да бъде използвана проточна система или статична система за изпитване с обновяване, която да осигурява достатъчен обем вода за разреждане до съдовете за изпитване.
The start of the test is defined as the time of first feeding with spiked food.
Дебитите следва да се записват.
An experimental day runs from the time of feeding to shortly before the time of next feeding (e.g. one hour).
Трябва да се използва вода за изпитване, както е описано в метода с експозиция по воден път (вж. точки 27-29).
Thus the first experimental day of uptake runs from the time of first feeding with spiked food and ends shortly before the second feeding with spiked food.
Средата за изпитване следва да се характеризира, както е описано, и нейното качество трябва да остава постоянно по време на изпитването.
In practice the uptake phase ends shortly before (e.g. one hour) the first feeding with unspiked test substance as the fish will continue to digest spiked food and absorb the test substance in the intervening 24 hours.
Съдържанието на природни частици, а също и общият органичен въглерод трябва да са възможно най-ниски (≤ 5 mg/l твърди частици; ≤ 2 mg/l общ органичен въглерод) преди започване на изпитването.
It is important to ensure that a sufficiently high (non-toxic) body burden of the test substance is achieved with respect to the analytical method, so that at least an order of magnitude decline can be measured during the depuration phase.
ТОС трябва да се измери само преди изпитването, като част от характеризирането на водата за изпитване (вж. точка 53).
In special cases an extended uptake phase (up to 28 days) may be used with additional sampling to gain an insight into uptake kinetics.
Хранителен режим
During uptake the concentration in the fish may not reach steady-state.
Препоръчва се предлагана в търговската мрежа храна за риби (хранителен режим с плаващи и/или бавно потъващи пелети), която е характеризирана по отношение най-малко на съдържание на белтъци и на мазнини.
Equations for estimating time to steady-state, as an indication of the likely duration needed to achieve appreciable fish concentrations, can be applied here as for the aqueous exposure test (cf. Appendix 5).
Храната следва да е с еднакъв размер на пелетите, за да се повиши ефикасността на експозицията чрез фуража, т.е. рибата ще консумира повече от храната, вместо да консумира по-големите парчета и да пропуска по-малките.
In some cases it may be known that uptake of substance in the fish over 7-14 days will be insufficient for the food concentration used to reach a high enough fish concentration to analyse at least an order of magnitude decline during depuration, either due to poor analytical sensitivity or to low assimilation efficiency.
Пелетите следва да са подходящо оразмерени в съответствие с размерите на рибата в началото на изпитването (например може да се използват пелети с диаметър около 0,6-0,85 mm за риби с обща дължина между 3 и 7 cm, и 0,85-1,2 mm за риби с обща дължина между 6 и 12 cm).
In such cases it may be advantageous to extend the initial feeding phase to longer than 14 days, or, especially for highly metabolisable substances, a higher dietary concentration should be considered.
Размерите на пелетите могат да бъдат коригирани в зависимост от растежа на рибите в началото на фазата на очистване.
However, care should be taken to keep the body burden during uptake below the (estimated) chronic no effect concentration (NOEC) in fish tissue (cf. paragraph 138).
Пример за подходящ състав на храната, доставяна от търговската мрежа, е даден в допълнение 7.
Depuration typically lasts for up to 28 days, beginning once the test group fish are fed pure, untreated diet after the uptake phase.
При разработването на настоящия метод са били широко използвани хранителни режими за изпитване с общо липидно съдържание между 15 и 20 % (w/w).
Depuration begins with the first feeding of “unspiked” food rather than straight after the last “spiked” food feeding as the fish will continue to digest the food and absorb the test substance in the intervening 24 hours, as noted in paragraph 126.
Храна за риби с толкова висока липидна концентрация може да не е налична в някои региони.
Hence the first sample in the depuration phase is taken shortly before the second feeding with unspiked diet.
В такива случаи изследванията могат да се проведат с по-ниска липидна концентрация в храната и при необходимост скоростта на хранене може да се коригира по подходящ начин за поддържане на здравето на рибите (въз основа на предварително изпитване).
This depuration period is designed to capture substances with a potential half-life of up to 14 days, which is consistent with that of bioaccumulative substances [49], so 28 days comprises two half-lives of such substances.
Общото съдържание на липиди в хранителния режим на изпитваната и на контролната група трябва да бъде измерено и записано преди началото на изпитването и в края на фазата на поглъщане.
In cases of very highly bioaccumulating substances it may be advantageous to extend the depuration phase (if indicated by preliminary testing).If a substance is depurated very slowly such that an exact half-life may not be determined in the depuration phase, the information may still be sufficient for assessment purposes to indicate a high level of bioaccumulation.
В протокола от изследването следва да бъдат представени подробни данни от доставчика на фуражи от търговската мрежа за анализа на хранителните елементи, влагата, влакнините и пепелното съдържание и, ако е възможно, минералите и пестицидните остатъци (напр. „стандартните“ приоритетни замърсители).
Conversely, if a substance is depurated so fast that a reliable time zero concentration (concentration at the end of uptake/start of depuration, C0,d) and k2 cannot be derived, a conservative estimate of k2 can be made (cf. Appendix 7).
При добавянето на изпитваното вещество в храната следва да се положат всички възможни усилия, за да се гарантира хомогенност навсякъде в храната за изпитването.
If analyses of fish at earlier intervals (e.g. 7 or 14 days) show that the substance has depurated below quantification levels before the full 28-day period, then subsequent sampling may be discontinued and the test terminated.
Концентрацията на изпитваното вещество в храната за групата за изпитване следва да се избира в зависимост от чувствителността на метода за анализ, токсичността на изпитваното вещество (NOEC, ако е известен) и относимите физични и химични данни.
In few cases no measurable uptake of the test substance may have occurred at the end of the uptake period (or with the second depuration sample).
Ако се използва референтно вещество, за предпочитане е то да бъде включено в концентрация около 10 % от тази на изпитваното вещество (или във всеки случай толкова ниска, колкото е практически възможно), в зависимост от чувствителността на анализа (напр. за хексахлоробензена е приета за приемлива концентрация в храната от 1-100 μg/g; вж.
If it can be demonstrated that: i) the validity criteria in paragraph 113 are fulfilled; and ii) lack of uptake is not due to some other shortcoming of the test (e.g. uptake duration not long enough, deficiency in food spiking technique leading to poor bioavailability, lack of sensitivity of the analytical method, fish not consuming food, etc.); it may be possible to terminate the study without the need to re-run it with a longer uptake duration.
(47) за повече информация относно ефикасността на усвояването на HCB).
If preliminary work has indicated that this may be the case, analysis of faeces, if possible, for undigested test substance may be advisable as part of a “mass balance” approach.
Изпитваното вещество може да се добави към храна за риби по няколко начина, в зависимост от неговите физични характеристики и разтворимост (вж. допълнение 7 за повече подробности относно методите за добавяне):
Similar to the aqueous exposure test, fish of similar weight and length should be selected, with the smallest fish being no less than two-thirds of the weight of the largest (cf. paragraphs 40-42).