natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Отсъствие на сърдечна дейност: При нормално развиващ се ембрион на зеброво данио при температура от 26 ± 1 °C сърдечната дейност започва да се долавя след 48 часа (вж. допълнение 5, фигура 4).
is a massive proliferation of predominantly epidermal cells in the gastrulation phase of the embryo and their movement from the dorsal to the ventral side, by which entodermal cell layers are internalised in an invagination-like process and the yolk is incorporated into the embryo.
Записът на тази крайна точка изисква особено внимание, тъй като нередовната (хаотична) сърдечна дейност не следва да се записва като летална.
Flow-through test
Освен това доловима сърдечна дейност без циркулация в абдоминалната аорта се счита за нелетална.
A test with continued flow of test solutions through the test system during the duration of exposure.
При записа на тази крайна точка ембрионите, при които липсва сърдечна дейност, следва да се наблюдават под микроскоп при минимално увеличение 80X в продължение на поне една минута.
Internal Plate Control
Отсъствието на сърдечна дейност се записва след 48, 72 и 96 часа.
Internal control consisting of 4 wells filled with dilution water per 24-well plate to identify potential contamination of the plates by the manufacturer or by the researcher during the procedure, and any plate effect possibly influencing the outcome of the test (e.g. temperature gradient).
Процентът на излюпване във всички третирани и контролни групи следва да се записва от 48-ия час нататък и да се протоколира.
International Union of Pure and Applied Chemistry
Въпреки че излюпването не се използва като крайна точка за изчисляване на LC50, то осигурява експозиция на ембриона без потенциална бариерна функция на хориона, и в този смисъл може да помогне за интерпретацията на данните.
Maintenance water
Подробни описания на нормалното (35) и примери за ненормално развитие на ембриони на зеброво данио са представени в допълнния 3 и 5.
Water in which the husbandry of the adult fish is performed.
Аналитични измервания
Median Lethal Concentration (LC50)
В началото и в края на изпитването се измерват рН, общата твърдост и проводимостта в контролата(ите) и в най-високата концентрация на изпитвания химикал.
The concentration of a test chemical that is estimated to be lethal to 50 % of the test organisms within the test duration.
В системите с полустатично обновяване рН следва да се измерва преди и след обновяването на водата.
Semi-static renewal test
Концентрацията на разтворения кислород се измерва в края на изпитването в отрицателните контроли и в най-високата изпитвана концентрация с жизнеспособни ембриони, като тя следва да съответства на критериите за валидност на изпитването (вж. точка 8е).
A test with regular renewal of the test solutions after defined periods (e.g., every 24 hrs).
Ако съществуват опасения, че температурата в различните 24-гнездни плаки е различна, температура се измерва в три произволно избрани съда.
Simplified Molecular Input Line Entry Specification
За предпочитане е температурата да се записва непрекъснато по време на изпитването или, като минимум, всеки ден.
Somite
В статична система концентрацията на изпитвания химикал следва да се измерва, като минимум, в най-високите и най-ниските изпитвани концентрации, но за предпочитане във всички третирания в началото и в края на изпитването.
In the developing vertebrate embryo, somites are masses of mesoderm distributed laterally to the neural tube, which will eventually develop dermis (dermatome), skeletal muscle (myotome), and vertebrae (sclerotome).
В полустатичните (с обновяване) изпитвания, при които концентрацията на изпитвания химикал се очаква да остане в рамките на ± 20 % от номиналната стойност, се препоръчва като минимум да се анализират най-високите и най-ниските изпитвани концентрации, когато са прясно приготвени, и непосредствено преди обновяване.
Static test
За изпитвания, при които концентрацията на изпитвания химикал не се очаква да остане в рамките на ± 20 % от номиналната стойност, трябва да се анализират всички изпитвани концентрации, когато са прясно приготвени, и непосредствено преди обновяване.
A test in which test solutions remain unchanged throughout the duration of the test.
Ако обемът не е достатъчен за анализ, може да бъде от полза изпитваните разтвори да се обединят, или да се използват сурогатни камери от същия материал и със същото съотношение обем/повърхностна площ като това при 24-гнездните плаки.
Any substance or mixture tested using this test method
Силно се препоръчва резултатите да се основават на измерени концентрации.
Substances of unknown or variable composition, complex reaction products or biological materials
Когато концентрациите не се задържат в рамките на 80—120 % от номиналната концентрация, концентрациите с определено въздействие следва да бъдат изразени спрямо средната геометрична стойност на измерените концентрации; за повече информация вж. глава 5 от Ръководството на ОИСР с насоки за изпитване за токсичност във водна среда на трудни вещества и смеси (28).
MAINTENANCE, BREEDING AND TYPICAL CONDITIONS FOR ZEBRAFISH EMBRYO ACUTE TOXICITY TESTS
ГРАНИЧНО ИЗПИТВАНЕ
Zebrafish (Danio rerio)
Като се използват процедурите, описани в настоящия метод за изпитване, може да се направи гранично изпитване при 100 mg/l от изпитвания химикал или при неговата граница на разтворимост в средата за изпитване (в зависимост от това коя е по-ниска), за да се докаже, че LC50 е по-голяма от тази концентрация.
Origin of species
Граничното изпитване следва да се извърши с 20 ембриона в третиранията, положителната контрола и, ако е необходимо, в контролата на разтворител, и с 24 ембриона в отрицателната контрола.
India, Burma, Malakka, Sumatra
Ако процентът на леталитет при изпитваната концентрация надвишава смъртността в отрицателната контрола (или контролата на разтворител) с 10 %, следва да се извърши цялостно проучване.
Sexual dimorphism
Всички наблюдавани ефекти следва да бъдат записани.
Females: protruding belly, when carrying eggs
Ако при отрицателната контрола (или контролата на разтворител) смъртността надвишава 10 %, изпитването е невалидно и следва да се повтори.
Males: more slender, orange tint between blue longitudinal stripes (particularly evident at the anal fin)
В настоящото изпитване отделните гнезда се считат за независими повторения за целите на статистическия анализ.
Dry flake food (max.
Дяловете на ембрионите с поне един положителен резултат при апикалните наблюдения на 48-ия и/или 96-ия час се начертават срещу изпитваните концентрации.
3 % fish weight per day) 3 - 5 times daily; additionally brine shrimp (Artemia spec.) nauplii and/or small daphnids of appropriate size obtained from an uncontaminated source.
При изчисляването на наклоните на кривата, стойностите на LC50 и доверителните граници (95 %) следва да се прилагат подходящи статистически методи (38) и следва да се направи консултация с документа на ОИСР относно „Съвременни подходи за статистически анализ на данни за екотоксичност“ (39).
Feeding live food provides a source of environmental enrichment and therefore live food should be given wherever possible.
химична идентификация, като например наименование по IUPAC или CAS, CAS номер, код SMILES или InChI, структурна формула, чистота, химична идентичност на онечистванията, доколкото е целесъобразно и практически осъществимо, и т.н. (включително съдържание на органичен въглерод, ако е приложимо).
To guarantee for optimal water quality, excess food and faeces should be removed approx. one hour after feeding.
Изпитвани организми:
Approximate weight of adult fish
използвана процедура на изпитване (например полустатична с обновяване);
Females: 0,65 ± 0,13 g
времетраене на осветлението:
Males: 0,5 ± 0,1 g
план на изпитването (например брой на камерите за изпитване, видове контроли);
Maintenance of parental fish
качествени характеристики на водата за поддържане на рибите (например рН, твърдост, температура, проводимост, разтворен кислород);
Illumination
концентрация на разтворен кислород, рН, обща твърдост, температура и проводимост на изпитваните разтвори в началото и след 96 часа;
Fluorescent bulbs (wide spectrum); 10-20 μE/m2/s, 540-1080 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels); 12-16 hrs photoperiod
метод за приготвяне на изходните разтвори и разтворите за изпитване, както и честота на обновяване;
26 ± 1 °C
обосновка за използването на разтворител и обосновка за избора на разтворител, ако е различен от вода;
Water quality
номиналните изпитвани концентрации и резултатите от всички анализи за определяне на концентрацията на изпитвания химикал в съдовете за изпитване; следва да се отчете коефициентът на аналитичния добив на метода и границата на количественото определяне;
O2 ≥ 80 % saturation, hardness: e.g. ~30-300 mg/l CaCO3, NO3-: ≤ 48mg/l, NH4+ and NO2-: < 0,001 mg/l, residual chlorine < 10 μg/l, total organic chlorine < 25 ng/l, pH = 6,5 – 8,5
доказателства, че контролите изпълняват общите критерии за валидност по отношение на преживяването;
Further water quality criteria
процент на оплождане на хайверните зърна;
Particulate matter < 20 mg/l, total organic carbon < 2 mg/l, total organophosphorus pesticides < 50 ng/l, total organochlorine pesticides plus polychlorinated biphenyls < 50 ng/l
процент на излюпване в третираните и контролните групи.
Tank size for maintenance
максималната концентрация, при която не е настъпила смъртност през периода на изпитването;
e.g. 180 l, 1 fish/l
минималната концентрация, при която е отчетена 100-процентова смъртност през периода на изпитването;
Water purification
кумулативна смъртност за всяка концентрация в препоръчаните часове за наблюдение;
Permanent (charcoal filtered); other possibilities include combinations with semi-static renewal maintenance or flow-through system with continuous water renewal
стойности на LC50 след 96 часа (и като вариант след 48 часа) за смъртността с доверителни граници от 95 %, ако е възможно;
Recommended male to female ratio for breeding
графика на кривата концентрация-смъртност в края на изпитването;
2:1 (or mass spawning)
смъртност в контролите (отрицателни контроли, вътрешни контроли на плаките, както и използваните положителна контрола и всякаква контрола на разтворител);
Spawning tanks
данни за резултатите от всяко от четирите апикални наблюдения;
e.g. 4 l tanks equipped with steel grid bottom and plant dummy as spawning stimulant; external heating mats, or mass spawning within the maintenance tanks
проява и описание на морфологичните и физиологичните аномалии, ако има такива (вж. примерите, предоставени в допълнение 5, фигура 2);
Egg structure and appearance
инциденти в хода на изпитването, които биха могли да повлияят на резултатите;
Stable chorion (i.e. highly transparent, non-sticky, diameter ~ 0,8–1,5 mm)
статистически анализ и обработка на данните (пробит-анализ, модел на логистична регресия и средногеометричната стойност за LC50);
Spawning rate
наклон и доверителни граници на регресията на (трансформираната) крива концентрация-отклик.
A single mature female spawns at least 50-80 eggs per day.
Евентуално отклонение от метода за изпитване и съответните обяснения.
Depending on the strain, spawning rates may be considerably higher.
Дискусия и интерпретиране на резултатите.
The fertilisation rate should be ≥ 70 %.
OECD (2011) Validation Report (Phase 1) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II.
For first time spawning fish, fertilisation rates of the eggs may be lower in the first few spawns.
Series on Testing and Assessment No.
Static, semi-static renewal, flow-through, 26 ± 1 °C, 24 hrs conditioned test chambers (e.g. 24-well plates 2,5-5 ml per cavity)
157, OECD, Paris.
NORMAL ZEBRAFISH DEVELOPMENT AT 26 °C
OECD (2012) Validation Report (Phase 2) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II (Annexes).
Fig.
Series on Testing and Assessment No.
1: Selected stages of early zebrafish (Danio rerio) development: 0,2 – 1,75 hrs post-fertilisation (from Kimmel et al., 1995 (35)).
179, OECD, Paris.
The time sequence of normal development may be taken to diagnose both fertilisation and viability of eggs (see paragraph 26: Selection of fertilised eggs).
Belanger, S. E., Rawlings J. M. and Carr G. J. (2013) Use of Fish Embryo Toxicity Tests for the Prediction of Acute Fish Toxicity to Chemicals.
Fig.
Environmental Toxicology and Chemistry 32: 1768—1783.
2: Selected stages of late zebrafish (Danio rerio) development (de-chorionated embryo to optimise visibility): 22 – 48 hrs after fertilisation (from Kimmel et al., 1995 (35)).
Pharmacol.: 149 (2), 196—209
Fig.
Глава В.4 от настоящото приложение: Пълна биоразградимост.
3: Normal development of zebrafish (Danio rerio) embryos: (1) 0,75 hrs, 2-cell stage; (2) 1 hr, 4-cell stage; (3) 1,2 hrs, 8-cell stage; (4) 1,5 hrs, 16-cell stage; (5) 4,7 hrs, beginning epiboly; (6) 5,3 hrs, approx.
Глава В.29 от настоящото приложение: Пълна биоразградимост, CO2 в херметично затворени съдове.
50 % epiboly (from Braunbeck & Lammer 2006 (40)).
Глава В.48 от настоящото приложение: Краткосрочно изследване на размножаването при риби.
Layout of 24-well plates
Вж. допълнение 4a.
1-5 five test concentrations/chemical;
35, 4097-4102.
nC negative control (dilution water);
Достъпен на: [http://www.iso.org].
iC internal plate control (dilution water);
23, OECD, Paris.
pC positive control (3,4-DCA 4 mg/l);
Европейска Комисия (2007 г.), Препоръка на Комисията от 18 юни 2007 г. относно насоки за настаняване и грижи за животни, използвани за опитни и други научни цели (нотифицирано под номер С(2007) 2525) (текст от значение за ЕИП) [http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2007:197:0001:0089:BG:PDF]
sC solvent control.
Европейски съюз (2010 г.), Директива 2010/63/ЕС на Европейския парламент и на Съвета от 22 септември 2010 г. относно защитата на животните, използвани за научни цели.
Scheme of the zebrafish embryo acute toxicity test procedure (from left to right): production of eggs, collection of the eggs, pre-exposure immediately after fertilisation in glass vessels, selection of fertilised eggs with an inverted microscope or binocular and distribution of fertilised eggs into 24-well plates prepared with the respective test concentrations/controls, n = number of eggs required per test concentration/control (here 20), hpf = hours post-fertilisation.
Официален вестник на Европейския съюз ОВ L 276, 20.10.2010 г., стр.
Waste
33.
24 h pre-conditioning n fertilised eggs per test concentration/ control Selection of fertilised eggs & fertilisation rate determination Glass vessel with respective test concentrations/ controls at volumes to fully cover eggs
http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2010:276:0033:0079:BG:PDF
eggs per conc./ control
Глава В.2 от настоящото приложение: Daphnia sp., Изпитване за остра имобилизация.
Spawning unit
Series on Testing and Assessment No.
ATLAS OF LETHAL ENDPOINTS FOR THE ZEBRAFISH EMBRYO ACUTE TOXICITY TEST
OECD, Paris.
The following apical endpoints indicate acute toxicity and, consequently, death of the embryos: coagulation of the embryo, non-detachment of the tail, lack of somite formation and lack of heartbeat.
Detailed review paper „Fish embryo toxicity assays“.
The following micrographs have been selected to illustrate these endpoints.
UBA report under contract no.
Coagulation of the embryo:
20385422 German Federal Environment Agency, Berlin.
Under bright field illumination, coagulated zebrafish embryos show a variety of intransparent inclusions.
Апикална крайна точка
Figure 2
Причиняване на въздействие на равнище популация.
Lack of somite formation:
Бластула
Although retarded in development by approx.
Клетъчна формация около животинския полюс, която обхваща известна част от жълтъка.
10 hrs, the 24 hrs old zebrafish embryo in (a) shows well-developed somites (→), whereas the embryo in (b) does not show any sign of somite formation (→).
Вещество или смес
Although showing a pronounced yolk sac oedema (*), the 48 hrs old zebrafish embryo in (c) shows distinct formation of somites (→), whereas the 96 hrs old zebrafish embryo depicted in (d) does not show any sign of somite formation (→).
Епиболия
Note also the spinal curvature (scoliosis) and the pericardial oedema (*) in the embryo shown in (d).
е масивна пролиферация, касаеща основно епидермални клетки в стадия на гаструлация на ембриона и тяхното движение от дорзалната към вентралната страна, което служи за интернализиране на ентодермалните клетъчни слоеве чрез процес, напомнящ инвагинация, и инкорпориране на жълтъка в ембриона.
Bud in lateral view (a: →; 96 hrs old zebrafish embryo).
Проточно изпитване
Note also the lack of the eye bud (*).
Изпитване с постоянен поток на изпитвани разтвори през системата за изпитване по време на периода на експозицията.
Figure 4
Вътрешна контрола на плаката
Lack of heartbeat is, by definition, difficult to illustrate in a micrograph.
Вътрешна контрола, при която се използват 4 пълни с вода за разреждане гнезда на всяка 24-гнездна плака с цел установяване на потенциално замърсяване на плаката от производителя или от изследователя по време на процедурата, както и евентуално въздействие на плаката, което може да повлияе на резултата от изпитването (например температурен градиент).
Lack of heartbeat is indicated by non-convulsion of the heart (double arrow).
International Union of Pure and Applied Chemistry (Международен съюз по чиста и приложна химия).
Immobility of blood cells in, e.g. the aorta abdominalis (→ in insert) is not an indicator for lack of heartbeat.
Вода за поддържане
Note also the lack of somite formation in this embryo (*, homogenous rather than segmental appearance of muscular tissues).
Вода, в която се осъществява развъждането на полово зрелите риби.
The observation time to record an absence of heartbeat should be at least of one minute with a minimum magnification of 80×.
Медианна летална концентрация (LC50)
C.50 Sediment-free Myriophyllum spicatum toxicity test
Концентрация на изпитвания химикал, която се счита за летална при 50 % от изпитваните организми в хода на изпитването.
This test method is equivalent to OECD test guideline 238 (2014).
Полустатично изпитване с обновяване
It is designed to assess the toxicity of chemicals to Myriophyllum spicatum, a submersed aquatic dicotyledon, a species of the water milfoils family.
Изпитване с редовно обновяване на изпитваните разтвори след определени периоди (напр. на всеки 24 часа).
It is based on an ASTM existing test method (1) modified as a sediment-free test system (2) to estimate the intrinsic ecotoxicity of test chemicals (independent of the distribution-behaviour of the test chemical between water and sediment).
Спецификация за опростено линейно въвеждане на молекули
A test system without sediment has a low analytical complexity (only in the water phase) and the results can be analysed in parallel and/or comparison with those obtained in Lemna sp. test (3); in addition, the required sterile conditions allow to keep the effects of microorganisms and algae (chemical uptake/ degradation, etc.) as low as possible.
Сомит
This test does not replace other aquatic toxicity tests; it should rather complement them so that a more complete aquatic plant hazard and risk assessment is possible.
При развиващите се ембриони на гръбначните животни сомитите са мезодермални маси, разположени напречно на невралната тръба, от които в крайна сметка се развива дермата (дерматом), скелетната мускулатура (миотом) и гръбначният стълб (склеротом).
The test method has been validated by a ring-test (4).
Статично изпитване
Details of testing with renewal (semi-static) and without renewal (static) of the test solution are described.
Изпитване, при което изпитваните разтвори остават непроменени през целия период на изпитването.
Depending on the objectives of the test and the regulatory requirements, the use of semi-static method is recommended, e.g. for substances that are rapidly lost from solution as a result of volatilisation, adsorption, photodegradation, hydrolysis, precipitation or biodegradation.
Всяко вещество или смес, изпитвано(а) чрез използването на настоящия метод за изпитване.
Further guidance is given in (5).
Вещества с неизвестен или променлив състав, сложни продукти от реакции или биологични материали
This test method applies to substances, for which the test method has been validated, (see details in the ring-test report (4)) or to formulations, or known mixtures; if a mixture is tested, its constituents should be as far as possible identified and quantified.
ПОДДЪРЖАНЕ, РАЗМНОЖАВАНЕ И ТИПИЧНИ УСЛОВИЯ ЗА ПРОВЕЖДАНЕ НА ИЗПИТВАНИЯ ЗА ОСТРА ТОКСИЧНОСТ ПРИ ЕМБРИОНИ НА ЗЕБРОВО ДАНИО
The sediment-free Myriophyllum spicatum test method complements the water-sediment Myriophyllum spicatum Toxicity Test (6).
Зеброво данио (Danio rerio)
Before use of the test method for the testing of a mixture intended for a regulatory purpose, it should be considered whether, and if so why, it may provide adequate results for that purpose.
Произход на вида.
Continuously growing plant cultures of Myriophyllum spicatum (only in modified Andrews' medium, see Appendix 2) are allowed to grow as monocultures in different concentrations of the test chemical over a period of 14 days in a sediment-free test system.
Индия, Бирма, п-в Малака, Суматра
The objective of the test is to quantify chemical-related effects on vegetative growth over this period based on assessments of selected measurement variables.
Полов диморфизъм
Growth of shoot length, of lateral branches and roots as well as development of fresh and dry weight and increase of whorls are the measurement variables.
Женски: изпъкнал корем при носене на хайвера
In addition, account is taken of distinctive qualitative changes in test organisms, such as disfigurement or chlorosis and necrosis indicated by yellowing or white and brown colouring.
Мъжки: по-тънки, с оранжев нюанс между сини надлъжни ивици (особено очевидни на равнището на аналната перка)
To quantify chemical-related effects, growth in the test solutions is compared with that of the controls and the concentration bringing about a specified x % inhibition of growth is determined and expressed as the ECx; “x” can be any value depending on the regulatory requirements, e.g. EC10, EC20, EC50.
Суха храна във вид на люспи (максимум 3 % от теглото на рибата на ден) 3 до 5 пъти дневно; допълнително науплии от артемии (Artemia spec.) и/или малки водни бълхи с подходящ размер от незамърсен източник.
It should be noted that estimates of EC10 and EC20 values are only reliable and appropriate in tests where coefficients of variation in control plants fall below the effect level being estimated, i.e. coefficients of variation should be < 20 % for robust estimation of an EC20.
Храненето с жива храна осигурява източник за облагородяване на средата и следователно, когато е възможно, следва да се дава жива храна.
Both average specific growth rate (estimated from assessments of main shoot length and three additional measurement variables) and yield (estimated from the increase in main shoot length and three additional measurement variables) of untreated and treated plants should be determined.
За да се гарантира оптимално качество на водата, излишната храна и изпражненията следва да се отстраняват приблизително един час след хранене.
Specific growth rate (r) and yield (y) are subsequently used to determine the ErCx (e.g. ErC10, ErC20, ErC50) and EyCx (e.g. EyC10, EyC20, EyC50), respectively.
Приблизително тегло на полово зряла риба
In addition, the lowest observed effect concentration (LOEC) and the no observed effect concentration (NOEC) may be statistically determined.
Женски: 0,65 ±0,13 g
An analytical method, with adequate sensitivity for quantification of the test chemical in the test medium, should be available.
Мъжки: 0,5 ±0,1 g
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes the structural formula, purity and impurities, water solubility, stability in water and light, acid dissociation constant (pKa), partition coefficient octanol-water (Kow), vapour pressure and biodegradability.
Поддържане на възрастните риби
Water solubility and vapour pressure can be used to calculate Henry's Law constant, which will indicate if significant losses of the test chemical during the test period are likely.