natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Хранителен режим за изпитването и хранене
During the depuration phase, four to six sampling points are recommended (e.g. 1, 3, 7, 14 and 28 days).
През периода на аклиматизация рибите следва да бъдат хранени с подходящ хранителен режим, както е описано по-горе (точка 117).
Optionally, an additional sampling point may be included after 1-3 days' uptake to estimate assimilation efficiency from the linear phase of uptake for the fish while still near the beginning of the exposure period.
Ако изпитването се провежда при проточни условия, потокът трябва да бъде спрян по време на храненето на рибите.
Two main deviations from the schedule exist: i) if an extended uptake phase is employed for the purposes of investigating uptake kinetics, there will be additional sampling points during the uptake phase and so additional fish will need to be included (cf. paragraph 126); ii) if the study has been terminated at the end of the uptake phase owning to no measurable uptake (cf. paragraph 131).
По време на изпитването хранителният режим за изпитваната група следва да се придържа към описания по-горе (точки 116-121).
Individual fish that are sampled should be weighed (and their total length measured) to allow growth rate constants to be determined.
Изборът на прицелната концентрация на добавката следва да отчита вкусовите качества на храната (така че рибите да не избягват храната), в допълнение към разглеждането на специфичните за веществото фактори, аналитичната чувствителност, очакваната концентрация в хранителния режим при условия на околната среда и нивата на хроничната токсичност/погълнатото вещество в тялото.
Concentrations of the substance in specific fish tissue (edible and non-edible portions) can also be measured at the end of uptake and selected depuration times.
Номиналната концентрация на добавката на изпитваното вещество трябва да бъде документирана в протокола.
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
Въз основа на опита, концентрации на добавка в обхвата 1-1000 μg/g предоставят практичен работен обхват за изпитвани вещества, които не проявяват специфичен токсичен механизъм.
For the periodic use of a reference substance (cf. paragraph 25), it is preferable that concentrations are measured in the test group at the end of uptake and at all depuration times specified for the test substance (whole fish); concentrations need only be analysed in the control group at end of uptake (whole fish).
За вещества, които действат чрез неспецифичен механизъм, нивата на остатъци в тъканите не трябва да превишават 5 μmol/g липиди, тъй като остатъците над това ниво вероятно предизвикват хроничните ефекти (19) (48) (50) [50].
In certain circumstances (for example if analysis techniques for test substance and reference substance are incompatible, such that additional fish would be needed to follow the sampling schedule) another approach may be used as follows to minimise the number of additional fish required.
За други вещества трябва да се вземат мерки да няма неблагоприятни въздействия от натрупаната експозиция (вж. точка 127).
Concentrations of the reference substance are measured during depuration only on days 1, 3 and two further sampling points, selected such that reliable estimations of time zero concentration (C0,d) and k2 can be made for the reference substance.
Това се отнася особено за случаите, когато повече от едно от вещества се изпитват едновременно (вж. точка 112).
If possible the lipid content of the individual fish should be determined on each sampling occasion, or at least at the start and end of the uptake phase and at the end of the depuration phase.
Подходящото количество изпитвано вещество може да се добави към храната за риби по един от три начина, както е описано в точка 119 и допълнение 7.
(cf. paragraphs 56 and 67).
Методите и процедурите за добавяне към фуража следва да бъдат документирани в протокола.
Depending on the analytical method (refer to paragraph 67 and to Appendix 4), it may be possible to use the same fish for both lipid content and test substance concentration determination.
Нетретираната храна се подава на контролните риби, като тя съдържа еквивалентно количество масло без добавка като носител, ако е използвано такова във фуража с добавка при фазата на поглъщане, или се обработва с „чист“ разтворител, ако за приготвянето на хранителния режим за изпитваната група като носител е използван разтворител.
This is preferred on the grounds of minimising fish numbers.
Третираните и нетретираните хранителни режими следва да бъдат измерени аналитично поне в три повторения за концентрация на изпитваното вещество преди началото на фазата на поглъщане и в края на тази фаза.
However, should this not be possible, the same approach as described in the aqueous exposure method can be used (see paragraph 56 for these alternative lipid measurement options).
След експозиция на третирания фураж (фаза на поглъщане), на рибите (и от двете групи) се подава нетретирана храна (фаза на очистване).
The method used to quantify the lipid content should be documented in the report.
На рибите се подава фиксирана дажба (в зависимост от вида; например около 1-2 % от мокрото телесно тегло на ден в случай на дъгова пъстърва).
Quality of the analytical method
Точната скорост на хранене, определена по време на опита, следва да бъде документирана.
Experimental checks should be conducted to ensure the specificity, accuracy, precision and reproducibility of the substance-specific analytical technique, as well as recoveries of the test substance from both food and fish.
Първоначалното хранене следва да се основава на измерванията по график на теглото в изходната популация непосредствено преди началото на изпитването.
At the start of the test a sample of fish from the stock population need to be weighed (and their total length measured).
Количеството фураж следва да се коригира въз основа на мокрото тегло на пробовзетите риби при всяко вземане на проби, за да се отчита растежът по време на опита.
These fish should be sampled shortly before the first spiked feeding (e.g. one hour), and assigned to experimental day 0.
Теглото и дължините на рибите в съдовете за изпитване и контролните съдове могат да бъдат оценени въз основа на теглото и общите дължини на рибите, използвани при всяко вземане на проби; не се претеглят или измерват рибите, останали в съдовете за изпитване и контролните съдове.
The number of fish for this sample should be at least the same as that for the samples during the test.
Важно е да се запази същата определена скорост на хранене по време на целия опит.
Some of these can be the same fish used for lipid analysis before the start of the uptake phase (cf. paragraph 153).
Храненето следва да се наблюдава, за да е сигурно, че рибите очевидно консумират цялото количество подадена храна с оглед да се гарантира, че в изчисленията се използват подходящите скорости на поглъщане.
At each sampling interval fish are first weighed and their length measured.
Предварителните опити с хранене или предходният опит следва да бъдат взети под внимание при избора на скорост на хранене, която ще гарантира, че се консумира цялото подавано веднъж дневно количество храна.
In each individual fish the measured weight (and length) should be linked to the analysed chemical concentration (and lipid content, if applicable), for example using a unique identifier code for each sampled fish.
В случай, че храната последователно се оставя неконсумирана, може да е препоръчително дозата да се разпредели върху допълнителен период на хранене във всеки ден от опита (напр. замяна на храненето веднъж дневно с хранене с половината количество два пъти дневно).
The measurements of these sampled fish can be used to estimate the weight (and length) of fish remaining in the test and control tanks.
Ако това е необходимо, второто хранене следва да се извършва в определено време и да е планирано така, че максималният възможен период от време да е преди пробовземане на риби (напр. времето за второто хранене се определя в рамките на първата половина от деня на опита).
Experimental Evaluation
Въпреки че като цяло рибите бързо консумират храната, важно е да се гарантира, че веществото остава адсорбирано върху храната.
Observations of mortality should be performed and recorded daily.
Следва да се положат усилия за избягване на диспергирането на изпитваното вещество във вода от храната, като по този начин рибата се експонира на действието на концентрации по воден път на изпитваното вещество, в допълнение към хранителния режим.
Additional observations for adverse effects should be performed, for example for abnormal behaviour or pigmentation, and recorded.
Това може да се постигне чрез отстраняване на неконсумираната храна (и фекалии) от съдовете за изпитване и контролните съдове в рамките на един час след хранене, но за предпочитане в рамките на 30 минути.
Fish are considered dead if there is no respiratory movement and no reaction to a slight mechanical stimulus can be detected.
В допълнение, може да бъде използвана една система, в която водата се почиства редовно през филтър с активен въглен, за да се абсорбира евентуален „разтворен“ замърсител.
Any dead or clearly moribund fish should be removed.
Проточните системи могат да помогнат за бързо отмиване на хранителните частици и разтворените вещества [51].
Test results are used to derive the depuration rate constant (k2) as a function of the total wet weight of the fish.
В някои случаи за разрешаването на този проблем може да помогне леко модифицирана техника за приготвяне на храни с добавка (вж. точка 119).
Growth rate constant, kg, based on mean increase in fish weight is calculated and used to produce the growth-corrected depuration rate constant, k2g, if appropriate.
Светлина и температура
In addition, the assimilation efficiency (a; absorption from the gut), the kinetic biomagnification factor (BMFK) (if necessary growth corrected, BMFKg), its lipid-corrected value (BMFKL or BMFKgL, if corrected for growth dilution) and feeding rate should be reported.
Както при метода с експозиция по воден път (вж. точка 48), препоръчва се от 12 до 16 часа излагане на светлина, а температурата (± 2 °C) трябва да е подходяща за изпитвания вид (срв. допълнение 3).
Also, if an estimate of the time to steady-state in the uptake phase can be made (e.g. 95 % of steady-state or t95 = 3,0/k2), an estimate of the steady-state BMF (BMFSS) can be included (cf. paragraphs 105 and 106, and Appendix 5) if the t95 value indicates that steady-state conditions may have been reached.
Типът и характеристиките на осветлението трябва да са познати и да се документират.
The same lipid correction should be applied to this BMFSS as to the kinetically-derived BMF (BMFK) to give a lipid-corrected value, BMFSSL (note that no agreed procedure is available to correct a steady-state BMF for growth dilution).
Следва да се използва една контролна група, като на рибите се подава същата дажба като на изпитваната група, но без изпитваното вещество във фуража.
Formulae and example calculations are presented in Appendix 7.
Ако за добавянето в храната на изпитваната група като носител е използвано масло или разтворител, храната на контролната група следва да се обработи по напълно идентичен начин, но в отсъствие на изпитваното вещество, така че хранителните режими на изпитваната група и контролната група да са еквивалентни (вж. точки 121 и 139).
Approaches are available that make it feasible to estimate a kinetic bioconcentration factor (BCFK) from data generated in the dietary study.
Условията, описани в метода с експозиция по воден път, се прилага и тук, с изключение на това, че TOC трябва да се измери само преди изпитването като част от характеризирането на водата за изпитване (вж. точка 53).
This is discussed in Appendix 8.
Пробовземане и анализ на рибата и хранителния режим
Individual fish wet weights and lengths for all time periods are tabulated separately for test and control groups for all sampling days during the uptake phase (stock population for start of uptake; control group and test group for end of uptake and, if conducted, the early phase (e.g. day 1-3 of uptake) and depuration phase (e.g. days 1, 2, 4, 7, 14, 28, for control and test group).
Анализ на проби хранителния режим
Weight is the preferred measure of growth for growth dilution correction purposes.
Проби от хранителните режими за изпитване и от контролните хранителни режими следва да бъдат анализирани поне в три повторения за съдържание на изпитваното вещество и на липиди най-малко преди началото на фазата на поглъщане и в края на тази фаза.
See below (paragraphs 162 and 163) and Appendix 5 for the method(s) used to correct data for growth dilution.
Методите на анализ и процедурите за осигуряване на хомогенност на хранителния режим трябва да бъдат включени в протокола.
Test substance concentration in fish data
Пробите следва да се анализират за изпитваното вещество чрез установения и валидиран метод.
Individual fish test substance residue measurements (or pooled fish samples if individual fish measurements are not possible), expressed in terms of wet weight concentration (w/w), are tabulated for test and control fish for individual sample times.
Следва да се проведе предварително изследване, за да се установи границата на количествено определяне, процент на аналитичен добив, преченията и аналитичното вариране в съответната матрична проба.
If lipid analysis has been conducted on each sampled fish then individual lipid-corrected concentrations, in terms of lipid concentration (w/w lipid), can be derived and tabulated.
Ако се изпитва изотопно белязан материал, следва да се разгледат съображения, подобни на тези при метода с експозиция по воден път, като анализът на водата се заменя с анализ на фуража (вж. точка 65).
Test substance residue measurements in individual fish (or pooled fish samples if individual fish measurements are not possible, cf. paragraph 66) for the depuration period are converted to their natural logarithms and plotted versus time (day).
Анализ на риби
If a visual inspection of the plot shows obvious outliers, a statistically valid outlier test may be applied to remove spurious data points as well as documented justification for their omission.
При всяко пробовземане на риби се вземат 5-10 индивида от експонираните и контролните риби (в някои случаи броят на контролните риби може да бъде намален; вж. точка 134).
A linear least squares correlation is calculated for the ln(concentration) vs. depuration (day) data.
Пробовземанията следва да са по едно и също време за всеки ден от опита (по отношение на времето за хранене), и следва да бъдат планирани във времето така, че вероятността за останала в червата храна по време на фазата на поглъщане и началото на фазата на очистването да е сведена до минимум, за да се предотвратят недостоверните приноси към общите концентрации на изпитваното вещество (т.е. пробовзетите риби следва да бъдат отстранени в края на даден ден от опита, като се има предвид, че денят от опита започва с момента на хранене и приключва по време на следващото хранене, приблизително 24 часа по-късно.
The slope and intercept of the line are reported as the overall depuration rate constant (k2) and natural logarithm of the derived time zero concentration (C0,d) (cf. Appendix 5 and Appendix 7 for further details).
Очистването започва с първото хранене с храна без добавка; вж. точка 128).
Should this not be possible because concentrations fall below the limit of quantification for the second depuration sample, a conservative estimate of k2 can be made (cf. Appendix 7).
Първата проба от фазата на очистване (взета непосредствено преди второто хранене с храна без добавка) е важно, тъй като екстраполация обратно един ден от това измерване се използва, за да се изчисли концентрацията във времева точка нула (C0,d, концентрацията в рибата в края на поглъщането/началото на очистването).
The variances in the slope and intercept of the line are calculated using standard statistical procedures and the 90 % (or 95 %) confidence intervals around these results evaluated and presented.
Като вариант, стомашно-чревният тракт на рибата може да бъде отстранен и анализиран отделно в края на поглъщането и в дни 1 и 3 от очистването.
The mean measured fish concentration for the final day of uptake (measured time zero concentration, C0,m) is also calculated and compared with the derived value C0,d.
При всяко пробовземане рибите следва да бъдат отстранени от двата съда от изпитването и да се обработват по същия начин, както е описано в метода с експозиция по воден път (вж. точки 61-63).
In case the derived value is lower than the measured value, the difference may suggest the presence of undigested spiked food in the gut.
Концентрациите на изпитваното вещество в цялата риба (мокро тегло) се измерват най-малко в края на фазата на поглъщане и по време на фазата на очистване както в контролните, така и в изпитваните групи.
If the derived value is very much higher than the measured value, this may be an indication that the value derived from the depuration data linear regression is erroneous and should be re-evaluated (see Appendix 7).
По време на фазата на очистване се препоръчват четири до шест точки за пробовземане (напр.
Depuration rate and biomagnification factor
1, 3, 7, 14 и 28 дни).
To calculate the biomagnification factor from the data, first the assimilation efficiency (absorption of test substance across the gut, α) should be obtained.
Като вариант може да бъде включена допълнителна точка за пробовземане след 1-3 дни поглъщане, за да се оцени ефикасността на усвояването от линейната фаза на поглъщане за рибата, докато все още е близо до началото на периода на експозиция.
To do this, equation A7.1 in Appendix 7 should be used, requiring the derived concentration in fish at time zero of the depuration phase (C0,d), (overall) depuration rate constant (k2), concentration in the food (Cfood), food ingestion rate constant (I) and duration of the uptake period (t) to be known.
Съществуват две основни отклонения от графика: i) ако се използва удължена фаза на поглъщане за целите на проучването на кинетиката на поглъщането, ще има допълнителни точки за пробовземане по време на фазата на поглъщане и следователно ще е необходимо включването на допълнителни риби (вж. точка 126); ii) ако изпитването е било прекратено в края на фазата на поглъщане поради отсъствие на измеримо поглъщане (вж. точка 131).
The slope and intercept of the linear relationship between ln(concentration) and depuration time are reported as the overall depuration rate constant (k2 = slope) and time zero concentration (C0,d = eintercept), as above.
Отделните пробовзети риби следва да се претеглят (и да се измери тяхната обща дължина) за да се даде възможност да се определят константите на скоростта на растеж.
The derived values should be checked for biological plausibility (e.g. assimilation efficiency as a fraction is not greater than 1).
Концентрациите на веществото в специфични тъкани от риби (ядивните и неядивните части) могат също да бъдат измерени в края на поглъщането и в избрани времена от очистването.
is calculated by dividing the mass of food by the mass of fish fed each day (if fed at 2 % of body weight, (I) will be 0,02).
Ако се изпитва изотопно белязан материал, следва да се разгледат съображения, подобни на тези при метода с експозиция по воден път, като анализът на водата се заменя с анализ на фуража (вж. точка 65).
However, the feeding rate used in the calculation may need to be adjusted for fish growth (this can be done using the known growth rate constant to estimate the fish weight at each time-point during the uptake phase; cf. Appendix 7).
При периодичното използване на референтно вещество (вж. точка 25) за предпочитане е концентрациите да се измерват в изпитваната група в края на поглъщането и във всички определени за изпитваното вещество (цяла риба) времена от очистването; концентрациите трябва се анализират само в контролната група в края на поглъщането (цяла риба).
In cases where k2 and C0,d cannot be derived because, for example, concentrations fell below the limit of detection for the second depuration sample, a conservative estimate of k2 and an “upper bound” BMFk can be made (cf. Appendix 7).
При определени обстоятелства (например ако техниките за анализ за изпитваното вещество и референтното вещество са несъвместими, така че да са необходими допълнителни риби, за да се следва графикът за пробовземане) може да се използва друг подход, както следва, за да се сведе до минимум броят на изискуемите допълнителни риби.
Once the assimilation efficiency (α) is obtained, the biomagnification factor can be calculated by multiplying α by the ingestion rate constant (I) and dividing by the (overall) depuration rate constant (k2).
Концентрациите на референтното вещество се измерват по време на очистването само през дни 1, 3 и две следващи точки на пробовземане, избрани така, че да могат да се направят надеждни оценки за концентрацията във времева точка нула (C0,d) и за k2 за референтното вещество.
The growth-corrected biomagnification factor is calculated in the same way but using the growth-corrected depuration rate constant (k2g; cf. paragraphs 162 and 163.
Ако е възможно, липидното съдържание на отделните риби се определя при всяко пробовземане, или поне в началото и в края на фазата на поглъщане и в края на фазата на очистване.
An alternative estimate of the assimilation efficiency can be derived if tissue analysis was performed on fish sampled in the early, linear phase of the uptake phase; cf. paragraph 151 and Appendix 7.
(вж. точки 56 и 67).
This value represents an independent estimate of assimilation efficiency for an essentially unexposed organism (i.e. the fish are near the beginning of the uptake phase).
В зависимост от метода за анализ (вж. точка 67 и допълнение 4), може да е възможно използването на една и съща риба както за съдържанието на липиди, така и за определяне на концентрацията на изпитваното вещество.
The assimilation efficiency estimated from depuration data is usually used to derive the BMF.
Това се предпочита въз основа на свеждането до минимум на броя риби.
Lipid Correction and Growth-Dilution Correction
Все пак, ако това не е възможно, може да бъде използван същият подход като описания в метода с експозиция по воден път (вж. точка 56 за тези алтернативни варианти за измерване на липидите).
Fish growth during the depuration phase can lower measured chemical concentrations in the fish with the effect that the overall depuration rate constant, k2, is greater than would arise from removal processes (e.g. metabolism, egestion) alone (cf. paragraph 72).
Методът, използван за количествено определяне на съдържанието на липиди, следва да бъде документиран в протокола.
Lipid contents of test fish (which are strongly associated with the bioaccumulation of hydrophobic substances) and lipid contents of food can vary enough in practice such that their correction is necessary to present biomagnification factors in a meaningful way.
Качество на метода за анализ
The biomagnification factor should be corrected for growth dilution (as is the kinetic BCF in the aqueous exposure method) and corrected for the lipid content of the food relative to that of the fish (the lipid-correction factor).
Следва да бъдат извършени опитни проверки, за да се гарантира специфичността, точността, прецизността и възпроизводимостта на специфичната за веществото техника за анализ, както и аналитичният добив на изпитваното вещество както от храната, така и от рибите.
Equations and examples for these calculations can be found in Appendix 5 and Appendix 7, respectively.
В началото на изпитването е необходимо да бъде претеглена проба от риби от изходната популация (и следва да бъде измерена тяхната обща дължина).
To correct for growth dilution, the growth-corrected depuration rate constant (k2g) should be calculated (see Appendix 5 for equations).
Тези риби трябва да бъдат пробовзети малко време преди първото подаване на храна с добавка (напр. един час), и да се разпределят в опитен ден 0.
This growth-corrected depuration rate constant (k2g) is then used to calculate the growth-corrected biomagnification factor, as in paragraph 73.