natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Ако има доказателство за значително увеличаване на броя на митотичните клетки в сравнение с контролите, вероятно указващо блокиране на митозата, тогава в момента на събирането клетките следва да се събират чрез центрофугиране и да се добавят обратно към културите, за да се избегне загубата на клетки, които са в митоза и са подложени на риск от хромозомни аберации.
All slides, including those of the positive and negative controls, should be independently coded before microscopic analysis for chromosomal aberrations.
Анализ
Since fixation procedures often result in a proportion of metaphase cells which have lost chromosomes, the cells scored should, therefore, contain a number of centromeres equal to the modal number +/- 2.
Всички предметни стъкла, включително и тези на положителните и отрицателните контроли, следва да се кодират независимо едно от друго преди микроскопския анализ за хромозомни аберации.
At least 300 well-spread metaphases should be scored per concentration and control to conclude a test chemical as clearly negative (see paragraph 45).
Процедурите по фиксиране често водят до загуба на хромозоми в част от клетките в метафаза и следователно преброените клетки следва да съдържат известен брой центромери, равен на модалния брой +/– 2.
The 300 cells should be equally divided among the replicates, when replicate cultures are used.
Следва да се преброят най-малко 300 добре разнесени метафази за всяка концентрация и контрола, за да се направи заключение, че даден изпитван химикал е ясно отрицателен (вж. точка 45).
When single cultures are used per concentration (see paragraph 21), at least 300 well spread metaphases should be scored in this single culture.
Когато се използват култури с повторения, посочените 300 клетки следва да бъдат разделени поравно между повторенията.
Scoring 300 cells has the advantage of increasing the statistical power of the test and in addition, zero values will be rarely observed (expected to be only 5 %) (44).
Когато се използва култура без повторение на концентрация (вж. точка 21), следва да се преброят най-малко 300 добре разнесени метафази в тази култура без повторение.
The number of metaphases scored can be reduced when high numbers of cells with chromosome aberrations are observed and the test chemical considered as clearly positive.
Преброяването на 300 клетки има предимството, че се увеличава статистическата мощност на теста и освен това рядко се наблюдават нулеви стойности (очаква се те да са само 5 %) (44).
Cells with structural chromosomal aberration(s) including and excluding gaps should be scored.
Броят на преброените метафази може да бъде намален, когато се наблюдава голям брой клетки с хромозомни аберации и изпитваният химикал се смята за ясно положителен.
Breaks and gaps are defined in Appendix 1 according to (45) (46).
Следва да се преброят клетките със структурна хромозомна аберация (или аберации) със и без празнини.
Chromatid- and chromosome-type aberrations should be recorded separately and classified by sub-types (breaks, exchanges).
Разкъсванията и празнините са определени в допълнение 1 съгласно (45) (46).
Procedures in use in the laboratory should ensure that analysis of chromosomal aberrations is performed by well-trained scorers and peer-reviewed if appropriate.
Хроматидният и хромозомният тип аберации следва да се отчитат поотделно и да се класифицират по подтипове (разкъсвания, обмени).
Although the purpose of the test is to detect structural chromosomal aberrations, it is important to record polyploidy and endoreduplication frequencies when these events are seen.
Процедурите, използвани в лабораториите, следва да гарантират, че анализът на хромозомните аберации се извършва от добре обучени преброители и че му е направена партньорска оценка, ако е подходящо.
(See paragraph 2).
Въпреки че целта на изпитването е да се открият структурни хромозомни аберации, от значение е да се регистрират честотите на полиплоидия и на ендоредупликация, когато се наблюдават тези събития.
Proficiency of the laboratory
(Вж. точка 2).
In order to establish sufficient experience with the test prior to using it for routine testing, the laboratory should have performed a series of experiments with reference positive chemicals acting via different mechanisms and various negative controls (using various solvents/vehicle).
Пригодност на лабораторията
These positive and negative control responses should be consistent with the literature.
За да се установи наличието на достатъчно опит по отношение на изпитването преди рутинното изпитване, лабораторията следва да е извършила поредица от опити с действащи чрез различни механизми положителни референтни химикали, чрез използване на различни отрицателни контроли (използване на различни разтворители/носител).
This is not applicable to laboratories that have experience, i.e. that have an historical data base available as defined in paragraph 37.
Положителният и отрицателният отклик при контролите следва да съответства на литературата.
A selection of positive control chemicals (see Table 1 in paragraph 26) should be investigated with short and long treatments in the absence of metabolic activation, and also with short treatment in the presence of metabolic activation, in order to demonstrate proficiency to detect clastogenic chemicals and determine the effectiveness of the metabolic activation system.
Това не се прилага за лаборатории, които разполагат с опит, т.е. които разполагат с налична база данни за предходни периоди, както е определено в точка 37.
A range of concentrations of the selected chemicals should be chosen so as to give reproducible and concentration-related increases above the background in order to demonstrate the sensitivity and dynamic range of the test system.
Подбрани химикали за положителни контроли (вж. таблица 1 в точка 26) следва да бъдат изследвани с краткосрочно и дългосрочно третиране в отсъствието на метаболитно активиране, и също така с краткосрочно третиране с метаболитно активиране, за доказване на пригодността за откриване на кластогенни химикали и за определяне на ефективността на системата за метаболитно активиране.
Historical control data
Следва да бъде избран обхват от концентрации на химикалите от подбора така, че да се получават възпроизводими и свързани с концентрацията увеличения над фоновите стойности с цел да се демонстрират чувствителността и динамичният обхват на системата за изпитване.
The laboratory should establish:
Данни за контролите за предходни периоди
A historical positive control range and distribution,
Лабораторията следва да установи:
A historical negative (untreated, solvent) control range and distribution.
Размах и разпределение при положителните контроли от предходни периоди,
When first acquiring data for an historical negative control distribution, concurrent negative controls should be consistent with published control data, where they exist.
Размах и разпределение при отрицателните (без третиране и за разтворител) контроли от предходни периоди.
As more experimental data are added to the control distribution, concurrent negative controls should ideally be within the 95 % control limits of that distribution (44) (47).
При първото придобиване на данни за разпределението при отрицателните контроли от предходни периоди паралелните отрицателни контроли следва да бъдат съобразени с публикуваните данни за контролите, когато такива са налице.
The laboratory's historical negative control database should initially be built with a minimum of 10 experiments but would preferably consist of at least 20 experiments conducted under comparable experimental conditions.
При добавяне на повече опитни данни към разпределението при контролите паралелните отрицателни контроли следва в идеалния случай да бъдат в рамките на граници за контрол 95 % на това разпределение (44) (47).
Laboratories should use quality control methods, such as control charts (e.g. C-charts or X-bar charts (48)), to identify how variable their positive and negative control data are, and to show that the methodology is ‘under control’ in their laboratory (44).
Базата данни с отрицателни контроли от предходни периоди на лабораторията следва първоначално да се създаде с минимум 10 опита, но е за предпочитане тя да се състои най-малко от 20 опита, проведени при сравними опитни условия.
Further recommendations on how to build and use the historical data (i.e. criteria for inclusion and exclusion of data in historical data and the acceptability criteria for a given experiment) can be found in the literature (47).
Лабораториите трябва да използват методи за контрол на качеството, като например контролни карти (напр.
Any changes to the experimental protocol should be considered in terms of their consistency with the laboratory's existing historical control databases.
C-карти или карти за средна стойност (X-bar) (48)), за определяне на варирането на данните им за положителните и отрицателните контроли, и за доказване, че методологията е „под контрол“ в техните лаборатории (44).
Any major inconsistencies should result in the establishment of a new historical control database.
В литературата (47) могат да се намерят допълнителни препоръки относно начина на създаване и използване на данни от предходни периоди (т.е. критерии за включване и изключване на данни в данните за предходни периоди и критериите за приемливост за даден опит).
Negative control data should consist of the incidence of cells with chromosome aberrations from a single culture or the sum of replicate cultures as described in paragraph 21.
Всички промени в опитния протокол следва да бъдат разглеждани от гледна точка на тяхната съгласуваност със съществуващите бази данни на дадената лаборатория за контролите за предходни периоди.
Concurrent negative controls should ideally be within the 95 % control limits of the distribution of the laboratory's historical negative control database (44) (47).
Всички значителни несъответствия следва да водят до създаването на нова база данни за контролите за предходни периоди.
Where concurrent negative control data fall outside the 95 % control limits they may be acceptable for inclusion in the historical control distribution as long as these data are not extreme outliers and there is evidence that the test system is ‘under control’ (see paragraph 37) and evidence of absence of technical or human failure.
Данните за отрицателните контроли следва да включват броя на клетките с хромозомни аберации при култури без повторение или сбора за културите с повторения, както е описано в точка 21.
Presentation of the results
Паралелните отрицателни контроли в идеалния случай следва да бъдат в рамките на граници за контрол 95 % от разпределението от базата данни на дадената лаборатория за отрицателните контроли за предходни периоди (44) (47).
The percentage of cells with structural chromosomal aberration(s) should be evaluated.
Когато данните за паралелните отрицателни контроли попадат извън 95 %-ните граници за контрол, те могат да бъдат приемливи за включване в разпределението при контролите от предходни периоди, при условие че тези данни не са екстремални стойности, силно различаващи се от нормалните, и има доказателства, че системата за изпитване е „под контрол“ (вж. точка 37), както и доказателства за липса на техническа или човешка грешка.
Chromatid- and chromosome-type aberrations classified by sub-types (breaks, exchanges) should be listed separately with their numbers and frequencies for experimental and control cultures.
Представяне на резултатите
Gaps are recorded and reported separately but not included in the total aberration frequency.
Следва да бъде оценен процентът на клетки със структурна хромозомна аберация (или аберации).
Percentage of polyploidy and/or endoreduplicated cells are reported when seen.
Хроматидният и хромозомният тип аберации, класифицирани по подтипове (разкъсвания, обмени), следва да бъдат изброени поотделно със съответния брой и честоти за опитните и контролните култури.
Concurrent measures of cytotoxicity for all treated, negative and positive control cultures in the main aberration experiment(s) should be recorded.
Празнините се записват и протоколират отделно, но не се включват в общата честота на аберациите.
Individual culture data should be provided.
Процентът на полиплоидия и/или ендоредуплицирани клетки се протоколира, ако е наблюдаван.
Additionally, all data should be summarised in tabular form.
Следва също да се протоколират паралелните измервания на цитотоксичността за всички третирани, отрицателни и положителни контролни култури в главния опит (или главните опити) за аберации.
Acceptability Criteria
Следва да се предоставят данни за отделните култури.
Acceptance of a test is based on the following criteria:
В допълнение към това всички данни следва да бъдат обобщени в табличен вид.
The concurrent negative control is considered acceptable for addition to the laboratory historical negative control database as described in paragraph 39.
Критерии за приемливост
Concurrent positive controls (see paragraph 26) should induce responses that are compatible with those generated in the historical positive control data base and produce a statistically significant increase compared with the concurrent negative control.
Приемливостта на дадено изпитване се основава на следните критерии:
Cell proliferation criteria in the solvent control should be fulfilled (paragraphs 17 and 18).
Паралелната отрицателна контрола се счита за приемлива за допълване към базата данни на дадената лаборатория за отрицателните контроли за предходни периоди, както е описано в точка 39.
All three experimental conditions were tested unless one resulted in positive results (see paragraph 28).
Паралелните положителни контроли (вж. точка 26) трябва да предизвикват отклици, които са съвместими с генерираните в базата данни за положителните контроли за предходни периоди, и да генерират статистически значимо увеличение в сравнение с паралелната отрицателна контрола.
Adequate number of cells and concentrations are analysable (paragraphs 31 and 21).
Критериите за клетъчна пролиферация в контролата на разтворител трябва да бъдат спазени (точки 17 и 18).
The criteria for the selection of top concentration are consistent with those described in paragraphs 22, 23 and 24.
Всичките три опитни условия са били подложени на изпитване, освен ако едно от тях е довело до положителни резултати (вж. точка 28).
Evaluation and interpretation of results
Достатъчен брой клетки и концентрации са годни за анализ (точки 31 и 21).
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered to be clearly positive if, in any of the experimental conditions examined (see paragraph 28):
Критериите за избор на най-високата концентрация са съвместими с описаните в точки 22, 23 и 24.
at least one of the test concentrations exhibits a statistically significant increase compared with the concurrent negative control,
Оценка и тълкуване на резултатите
the increase is dose-related when evaluated with an appropriate trend test,
При условие, че са изпълнени всички критерии за приемливост, изпитваният химикал се счита за ясно положителен, ако в някое от опитните условия (вж. точка 28):
any of the results are outside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits; see paragraph 39).
при най-малко една от изпитваните концентрации се наблюдава статистически значимо увеличение в сравнение с паралелната отрицателна контрола,
When all of these criteria are met, the test chemical is then considered able to induce chromosomal aberrations in cultured mammalian cells in this test system.
б. увеличението е свързано с дозата при оценка, извършена с подходящ трендов тест,
Recommendations for the most appropriate statistical methods can be found in the literature (49) (50) (51).
някой от резултатите е извън разпределението на данните за отрицателните контроли от предходни периоди (напр. на основата на разпределение на Поасон с граници за контрол 95 %; вж. точка 39).
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered clearly negative if, in all experimental conditions examined (see paragraph 28):
Ако са изпълнени всички тези критерии се смята, че изпитваният химикал може да предизвика хромозомни аберации в култивирани клетки от бозайници в тази система за изпитване.
none of the test concentrations exhibits a statistically significant increase compared with the concurrent negative control,
Препоръки за най-подходящите статистически методи могат да се намерят в литературните източници (49) (50) (51).
there is no concentration-related increase when evaluated with an appropriate trend test,
При условие, че са изпълнени всички критерии за приемливост, изпитваният химикал се счита за ясно отрицателен, ако във всички изследвани опитни условия (вж. точка 28):
all results are inside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits; see paragraph 39).
а. в никоя от изпитваните концентрации не се наблюдава статистически значимо увеличение в сравнение с паралелната отрицателна контрола,
The test chemical is then considered unable to induce chromosomal aberrations in cultured mammalian cells in this test system.
няма увеличение, свързано с дозата при оценка, извършена с подходящ трендов тест,
There is no requirement for verification of a clearly positive or negative response.
всички резултати са в рамките на разпределението на данните за отрицателните контроли от предходни периоди (напр. на основата на разпределение на Поасон с граници за контрол 95 %; вж. точка 39).
In case the response is neither clearly negative nor clearly positive as described above or in order to assist in establishing the biological relevance of a result, the data should be evaluated by expert judgement and/or further investigations.
Тогава се смята, че изпитваният химикал не може да предизвика хромозомни аберации в култивирани клетки от бозайници в тази система за изпитване.
Scoring additional cells (where appropriate) or performing a repeat experiment possibly using modified experimental conditions (e.g. concentration spacing, other metabolic activation conditions (i.e. S9 concentration or S9 origin)) could be useful.
Няма изискване за потвърждаване на ясно положителен или ясно отрицателен отклик.
In rare cases, even after further investigations, the data set will preclude making a conclusion of positive or negative results, and therefore the test chemical response will be concluded to be equivocal.
В случай че откликът не е нито ясно отрицателен, нито ясно положителен, както е описано по-горе, или с цел подпомагане на установяването на биологичната относимост на даден резултат, данните следва да се оценяват чрез експертна оценка и/или чрез допълнителни изследвания.
An increase in the number of polyploid cells may indicate that the test chemicals have the potential to inhibit mitotic processes and to induce numerical chromosomal aberrations (52).
Преброяването на допълнителни клетки (когато е уместно) или извършването на опит с повторение с възможност за използване на изменени опитни условия (напр. интервал на разполагане на концентрациите, други условия на метаболитно активиране (т.е. концентрация на S9 или произход на S9)) могат да се окажат полезни.
An increase in the number of cells with endoreduplicated chromosomes may indicate that the test chemicals have the potential to inhibit cell cycle progress (53) (54) (see paragraph 2).
В редки случаи дори след допълнителни изследвания наборът от данни не позволява стигането до заключение за положителни или отрицателни резултати и следователно за отклика на изпитвания химикал се заключава, че е неясeн.
Therefore, incidence of polyploid cells and cells with endoreduplicated chromosomes should be recorded separately.
Едно увеличение в броя на полиплоидните клетки може да показва, че изпитваните химикали имат потенциал да инхибират митотични процеси и да предизвикват бройни хромозомни аберации (52).
source, lot number, limit date for use, if available
Увеличението в броя на клетки с ендоредуплицирани хромозоми може да е показателно за това, че изпитваните химикали имат потенциала да инхибират развитието на клетъчния цикъл (53) (54) (вж. точка 2).
stability of the test chemical itself, if known;
Следователно броят на полиплоидните клетки и броят на клетките с ендоредуплицирани хромозоми следва да се записват поотделно.
solubility and stability of the test chemical in solvent, if known.
източник, номер на партидата, крайна дата за употреба, ако има такава
measurement of pH, osmolality and precipitate in the culture medium to which the test chemical was added, as appropriate.
стабилност на самия изпитван химикал, ако е известна;
Mono-constituent substance:
разтворимост и стабилност на изпитвания химикал в разтворител, ако са известни.
physical appearance, water solubility, and additional relevant physicochemical properties;
измерване на рН, осмолалитет и утайка в средата за отглеждане, към която е добавен изпитваният химикал, когато е уместно.
chemical identification, such as IUPAC or CAS name, CAS number, SMILES or InChI code, structural formula, purity, chemical identity of impurities as appropriate and practically feasible, etc.
Вещество с една съставка:
Multi-constituent substance, UVCBs and mixtures:
външен вид, разтворимост във вода и допълнителни относими физични и химични свойства;
characterised as far as possible by chemical identity (see above), quantitative occurrence and relevant physicochemical properties of the constituents.
химична идентификация, като например наименование по IUPAC или CAS, CAS номер, код SMILES или InChI, структурна формула, чистота, химична идентичност на онечистванията, доколкото е целесъобразно и практически осъществимо, и т.н.
Solvent:
Вещество с повече съставки, UVCB и смеси:
justification for choice of solvent.
определени, доколкото е възможно, с химичната си идентичност (вж. по-горе), количествения състав и относимите физични и химични свойства на съставките.
percentage of solvent in the final culture medium should also be indicated.
Разтворител:
Cells:
обосновка на избора на разтворител.
type and source of cells
следва също да бъде посочено и процентното съдържание на разтворителя в окончателната среда за отглеждане.
karyotype features and suitability of the cell type used;
Клетки:
absence of mycoplasma, for cell lines;
тип и източник на клетките
for cell lines, information on cell cycle length, doubling time or proliferation index;
кариотипни особености и пригодност на използвания тип клетки;
sex of blood donors, age and any relevant information on the donor, whole blood or separated lymphocytes, mitogen used;
за клетъчни линии — отсъствие на микоплазма;
number of passages, if available, for cell lines;
за клетъчни линии — информация за продължителността на клетъчния цикъл, времето за удвояване или индекса на пролиферация;
methods for maintenance of cell cultures, for cell lines;
пол на донорите на кръв, възраст и всякаква относима информация по отношение на донор, цяла кръв или изолирани лимфоцити, използван митоген;
modal number of chromosomes, for cell lines.
за клетъчни линии — брой пасажи, ако е наличен;
Test conditions:
за клетъчни линии — методи за поддържане на клетъчните култури;
identity of the metaphase-arresting chemical, its concentration and duration of cell exposure;
за клетъчни линии — модален брой на хромозомите.
concentration of test chemical expressed as final concentration in the culture medium (e.g. μg or mg/mL or mM of culture medium).
Условия на изпитване:
rationale for selection of concentrations and number of cultures including, e.g. cytotoxicity data and solubility limitations;
идентичност и концентрация на химикала, блокиращ метафазата, и времетраене на експозицията на клетките;
composition of media, CO2 concentration if applicable, humidity level;
концентрация на изпитвания химикал, изразена като крайна концентрация в средата за отглеждане (напр. μg или mg/ml или mM от среда за отглеждане).
concentration (and/or volume) of solvent and test chemical added in the culture medium;
обосновка за избора на концентрациите и броя на културите, в т.ч. напр. данни за цитотоксичността и ограничения, свързани с разтворимостта;
incubation temperature;
състав на средите, концентрация на CO2, ако е приложимо, влажност;
incubation time;