natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Ако случаят не е такъв, изпитването трябва да се повтори с повишена най-висока концентрация, освен ако максималната изисквана концентрация на изпитване при изпитвания за хронични ефекти (т.е., 10 mg/l) е използвана като най-високата концентрация на изпитване при първоначалното изпитване.
Before employing the statistical analysis, e.g. ANOVA procedures, comparison of treatments to the control by Student t-test, Dunnett's test, Williams' test, or stepdown Jonckheere-Terpstra test, it is recommended to consider transformation of data if needed for meeting the requirements of the particular statistical test.
Ако при изпитване за определяне на обхвата не се наблюдават ефекти при най-високата концентрация (напр. при 10 mg/l), или когато изпитваният химикал е много вероятно да проявява слаба/нулева токсичност въз основа на отсъствието на токсичност за други организми, и/или малко/нулево поглъщане, изпитването за размножаване може да се извършва като гранично изпитване с пределна концентрация за изпитване например 10 mg/l и контрола.
As non-parametric alternatives one can consider Dunn's or Mann-Whitney's tests.
Както за групите за третиране, така и за контролните групи трябва да бъдат използвани по десет повторения.
95 % confidence intervals are calculated for individual treatment means.
Когато е възможно да е необходимо гранично изпитване при проточна система, може да е достатъчен по-малък брой повторения.
The number of surviving parents in the untreated controls is a validity criterion, and should be documented and reported.
Гранично изпитване ще предостави възможност да се демонстрира, че няма статистически значимо въздействие при пределната концентрация, но ако бъдат отчетени статистически значими въздействия, обикновено ще се изисква цялостно изпитване.
Also all other detrimental effects, e.g. abnormal behavior and toxicological significant findings, should be reported in the final report as well.
Допълнително към изпитваната серия следва да се стартира една серия с контрола на средата за изпитване и, ако е относимо, също и една серия с контрола, съдържаща разтворителя или диспергиращото средство.
ECx
Когато се използва такава серия, концентрацията на разтворителя или на диспергиращото вещество следва да е същата като използваната в съдовете, съдържащи изпитвания химикал.
ECx-values, including their associated lower and upper confidence limits, are calculated using appropriate statistical methods (e.g. logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
Следва да се използва подходящ брой повторения (вж. точки 23-24).
To compute the EC10, EC50 or any other ECx, the complete data set should be subjected to regression analysis.
Най-общо, при добре проведено изпитване коефициентът на вариация около средния брой живо поколение, произлязло от едно родителско животно в контролата(ите), следва да бъде ≤ 25 и това следва да се се протоколира при планиране на изпитвания, при които се използват самостоятелно отглеждани животни.
NOEC/LOEC
Обновяване на средата за изпитване
If a statistical analysis is intended to determine the NOEC/LOEC appropriate statistical methods should be used according to OECD Document 54 on the Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application (4).
Честотата на обновяването на средата зависи от устойчивостта на изпитвания химикал, но следва да бъде поне три пъти на седмица.
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Ако от предварителните изпитвания за стабилност (вж. точка 7) концентрацията на изпитвания химикал не е стабилна (т.е. се намира извън обхвата от 80 — 120 % от номиналната или спада под 80 % от измерената първоначална концентрация) през максималния период на обновяване (т.е.
Normal distribution and variance homogeneity can be tested using an appropriate statistical test, e.g. the Shapiro-Wilk test and Levene test, respectively (p≤ 0,05).
3 дни), следва да се разгледа възможност за по-често обновяване на средата или за използване на проточно изпитване.
One-way ANOVA and subsequent multi-comparison tests can be performed.
Когато средата се обновява при полустатичните изпитвания, се подготвя втора серия от съдове за изпитване и родителските животни се прехвърлят в тях, например чрез стъклена пипета с подходящ диаметър.
Multiple comparisons (e.g. Dunnett's test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test, or stepdown Jonckheere-Terpstra test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test chemical concentrations (selection of the recommended test according to OECD Guidance Document 54 (4)).
Количеството прехвърлена среда с Daphnia следва да се сведе до минимум.
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) could be used to determine the NOEC and the LOEC.
Резултатите от наблюденията, направени по време на изпитването, се записват в таблици (вж. примерите в допълнения 4 и 5).
If a limit test (comparison of control and one treatment only) has been performed and the prerequisites of parametric test procedures (normality, homogeneity) are fulfilled, metric responses can be evaluated by the Student test (t-test).
Ако се изискват други измервания (вж. точка 44), могат да се изискват допълнителни наблюдения.
An unequal-variance t-test (such as Welch test) or a non-parametric test such as the Mann-Whitney-U-test may be used, if these requirements are not fulfilled.
Поколение
To determine significant differences between the controls (control and solvent or dispersant control), the replicates of each control can be tested as described for the limit test.
За да не консумира храната, предназначена за родителското животно, предпочита се поколението, произлязло от всяко родителско животно, да се отстранява и всекидневно да се преброява, считано от появяването на първото поколение.
If these tests do not detect significant differences, all control and solvent control replicates may be pooled.
За целите на този метод за изпитване е необходимо да се преброява само живото поколение, но наличието на недоразвити яйца или мъртво поколение следва да бъде протоколирано.
Otherwise all treatments should be compared with the solvent control.
Смъртност
The test report includes the following:
За предпочитане е смъртността между родителските животни да се записва всеки ден, или най-малко с честота, равна на честотата на преброяване на поколението.
physical nature and relevant physicochemical properties;
Други параметри
chemical identification data, including purity.
Въпреки че този метод за изпитване принципно е планиран да оценява въздействието върху репродуктивната способност, е възможно да се определят количествено в достатъчна степен и други въздействия, за да се позволи статистически анализ.
the clone (whether it has been genetically typed), supplier or source (if known) and the culture conditions used.
Репродуктивната способност, изразена на едно преживяло родителско животно, т.е. броят живо поколение, произлязло от едно преживяло родителско животно по време на изпитването, може да се запише.
If a different species to Daphnia magna is used, this should be reported and justified.
Това може да се сравни с основната зависима променлива (репродуктивната способност, изразена на едно преживяло родителско животно в началото на изпитването, което не е умъртвено непреднамерено или случайно по време на изпитването).
test procedure used (e.g. semi-static or flow-through, volume, loading in number of Daphnia per litre);
Ако се появи смъртност при родителите в подложени на експозиция повторения, следва да се разгледа дали смъртността следва модел концентрация-отклик, например ако е налице значима регресия при отклика спрямо концентрацията на изпитвания химикал с положителен наклон (за това може да се използва статистически тест, подобен на трендовия тест на Кокрън-Армитидж).
photoperiod and light intensity;
Ако смъртността следва модел концентрация-отклик, смъртността при родителите следва да бъде представена като ефект на изпитвания химикал и повторенията не следва да бъдат изключени от анализа на резултата от изпитването.
test design (e.g. number of replicates, number of parents per replicate);
Особено желателно е измерване на растежа, тъй като чрез него се набира информация за възможни сублетални въздействия, която може да е полезна, в допълнение към измерването само на репродуктивността; препоръчва се в края на изпитването да се измери дължината на родителските животни (т.е. дължината на тялото, като се изключи апикалният шип).
details of culture medium used;
Други параметри, които могат да се измерват или изчисляват, включват време за получаване на първото поколение (и следващите), брой и размер на животните от поколението, на животно, брой на неразвитото поколение, наличие на мъжки новородени (ОИСР, 2008 г.) или ефипиуми и, възможно, вътрешна скорост на нарастване на популацията (вж. допълнение 1 за определение и допълнение 7 за определяне на пола на новородените).
if used, additions of organic material including the composition, source, method of preparation, TOC/COD of stock preparations, estimation of resulting TOC/COD in test medium;
Честота на аналитичните определяния и измервания
detailed information on feeding, including amount (in mg C/daphnia/day) and schedule (e.g. type of food(s), including, for algae the specific name (species) and, if known, the strain, the culture conditions);
Поне веднъж в седмицата следва да се измерват стойностите на концентрацията на кислород, температурата, твърдостта и рН, в прясна и стара среда, в контролата(ите) и при най-високата концентрация на изпитвания химикал.
method of preparation of stock solutions and frequency of renewal (the solvent or dispersant and its concentration should be given, when used).
По време на изпитването концентрациите на изпитвания химикал се определят на равни интервали.
results from any preliminary studies on the stability of the test chemical;
При полустатичните изпитвания, където концентрацията на изпитвания химикал се очаква да остане в рамките на ± 20 % от номиналната (т.е. в обхвата 80-120 % — вж. точки 6, 7 и 39), се препоръчва да се анализират като минимум, най-високата и най-ниската концентрации на изпитване — прясно приготвени и при обновяването — веднъж през първата седмица на изпитването (т.е. прави се анализ на проба от същия разтвор — прясно приготвен и при обновяването).
the nominal test concentrations and the results of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels (see example data sheets in Appendix 5); the recovery efficiency of the method and the limit of determination should also be reported; water quality within the test vessels (i.e. pH, temperature and dissolved oxygen concentration, and TOC and/or COD and hardness where applicable) (see example data sheet in Appendix 4);
След това тези определяния се повтарят на интервали от поне една седмица.
the full record of the production of living offspring during the test by each parent animal (see example data sheet in Appendix 4);
За изпитвания, при които концентрацията на изпитвания химикал не се очаква да остане в рамките на ± 20 % от номиналната, е необходимо да се анализират всички концентрации на изпитване, прясно приготвени и при обновяването.
the number of deaths among the parent animals and the day on which they occurred (see example data sheet in Appendix 4);
Обаче при изпитванията, при които измерената начална концентрация на изпитвания химикал не е в рамките на ± 20 % от номиналната, но за които може да се предоставят достатъчно доказателства, показващи, че началните концентрации са повторяеми и стабилни (т.е., в диапазона 80—120 % от началната концентрация), химичните определяния могат да бъдат намалени през седмица 2 и 3 от изпитването до най-високата и най-ниската изпитвана концентрация.
the coefficient of variation for control reproductive output (based on total number of living offspring per parent animal alive at the end of the test);
Във всички случаи определянето на концентрациите на изпитвания химикал преди обновяването е необходимо да се извършва само за един съд с повторение, за всяка изпитвана концентрация.
plot of total number of living offspring produced per parent animal in each replicate excluding any parent animal which may have accidentally or inadvertently died during the test vs. concentration of the test chemical;
Ако се използва проточно изпитване, подходящ е режим за взимане на проби, подобен на описания при полустатичните изпитвания, но измерванията на „старите“ разтвори в този случай не са приложими.
as appropriate plot of total number of living offspring produced per surviving parent animal in each replicate vs. concentration of the test chemical
Препоръчително е обаче да се увеличи броят на вземането на проби през първата седмица (например три набора от измервания), за да се гарантира, че изпитваните концентрации остават стабилни.
where appropriate the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC) for reproduction, including a description of the statistical procedures used and an indication of what size of effect could be expected to be detected (a power analysis can be performed before the start of the experiment to provide this) and the No Observed Effect Concentration (NOEC) for reproduction; information on which response variable that has been used for calculating the LOEC and NOEC value (either as total living offspring per maternal organism which did not die accidentally or inadvertently during the test or as total number of living offspring per surviving maternal organism), where appropriate, the LOEC or NOEC for mortality of the parent animals should also be reported;
При тези видове изпитване дебитът на разредителя и изпитвания химикал трябва да се проверяват ежедневно.
where appropriate, the ECx for reproduction and confidence intervals (e.g. 90 % or 95 %) and a graph of the fitted model used for its calculation, the slope of the concentration-response curve and its standard error;
Ако има доказателство, че през цялото време на изпитването концентрацията на химикала, който се изпитва, е била задоволително поддържана в рамките на ± 20 % от номиналната или измерената първоначална концентрация, резултатите могат да бъдат базирани на номиналната или на измерената първоначална стойност.
other observed biological effects or measurements: report any other biological effects which were observed or measured (e.g. growth of parent animals) including any appropriate justification;
Ако отклонението от номиналната или измерената първоначална концентрация е по-голямо от ± 20 процента, резултатите следва да се изразяват чрез среднопретеглената във времето стойност (вж. указания за изчислението в допълнение 6).
an explanation for any deviation from the test method.
Целта на настоящото изпитване е да се определи въздействието на изпитвания химикал върху репродуктивната способност.
OECD (2000), Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures, Environmental Health and Safety Publications, Series on Testing and Assessment No. 23.
Общият брой живо поколение за едно родителско животно следва да се изчислява за всеки съд за изпитване (т.е. повторение).
For the purposes of this test method the following definitions are used:
Освен това репродуктивността може да се изчисли въз основа на произвеждането на живо поколение от преживелия родителски организъм.
Accidental mortality
Въпреки това най-относимата от екологична гледна точка зависима променлива е общият брой живо поколение, произлязло от едно родителско животно, което не е умъртвено случайно [58] или непреднамерено [59] по време на изпитването.
non chemical related mortality caused by an accidental incidence (i.e. known cause).
Ако родителското животно умре случайно или непреднамерено по време на изпитването, или се окаже мъжки индивид, повторението се изключва от анализа.
a substance or mixture.
Анализът тогава ще се основава на намален брой повторения.
the concentration of the test chemical dissolved in water that results in a x per cent reduction in reproduction of Daphnia within a stated exposure period.
Като обобщение, когато за изразяване на ефектите се използват LOEC и NOEC или ECx, препоръчително е да се изчисли ефектът върху репродуктивността, като се използват и двете зависими променливи, посочени по-горе, а именно
Inadvertent mortality
като общия брой живо поколение, произлязло от едно родителско животно, което не е умряло случайно или непреднамерено по време на изпитването, и;
non chemical related mortality with no known cause.
като броя на живото поколение, произлязло от едно преживяло родителско животно;
Intrinsic rate of population increase
и след това като окончателен резултат да се използва най-ниската стойност на LOEC и NOEC или ECx, изчислена с помощта на тези две зависими променливи.
a measure of population growth which integrates reproductive output and age-specific mortality (1) (2) (3).
Преди прилагането на статистическия анализ, например ANOVA процедури, сравнение на третиранията с контролите чрез t-тест на Стюдънт, тест на Дънет, тест на Уйлямс или тест на Йонкхере-Терпстра със стъпка назад, се препоръчва да се вземе предвид преобразуване на данните, ако това е необходимо за изпълнение на изискванията на определения статистически тест.
In steady state populations it will be zero.
Като непараметрични алтернативи може да се обмисли тест на Дън или тест на Ман-Уитни.
For growing populations it will be positive and for shrinking populations it will be negative.
За индивидуалните средни от третиране се изчисляват доверителни интервали от 95 %.
Clearly the latter is not sustainable and ultimately will lead to extinction.
Броят на преживелите родителски животни в нетретираните контроли е критерий за валидност и трябва да бъде документиран и протоколиран.
Limit of detection
Също така всички други вредни въздействия, например необичайно поведение и токсикологично значими констатации, следва да се протоколират също и в окончателния протокол,.
the lowest concentration that can be detected but not quantified.
ECx
Limit of determination
Стойностите на ECx, включително свързаните с тях долни и горни доверителни граници, се изчисляват с помощта на подходящи статистически методи (например логистична функция или функция на Вейбул, метод на Спирмън-Карбър с изключване на данни, или обикновена интерполация).
the lowest concentration that can be measured quantitatively.
За изчисляване на EC10, EC50 или всяка друга стойност ECx, пълният набор от данни следва да бъде подложен на регресионен анализ.
Lowest Observed Effect Concentration (LOEC)
NOEC/LOEC
the lowest tested concentration at which the chemical is observed to have a statistically significant effect on reproduction and parent mortality (at p < 0,05) when compared with the control, within a stated exposure period.
Ако статистическия анализ е предназначен за определяне на NOEC/LOEC, трябва да се използват подходящи статистически методи съгласно документ на ОИСР № 54 „Съвременни подходи за статистически анализ на данни за екотоксичност: ръководство за прилагане“ (4).
However, all test concentrations above the LOEC should have a harmful effect equal to or greater than those observed at the LOEC.
По принцип неблагоприятните въздействия на изпитвания химикал в сравнение с контролата се проучват чрез тестване на едностранна хипотеза при p ≤ 0,05.
When these two conditions cannot be satisfied, a full explanation should be given for how the LOEC (and hence the NOEC) has been selected.
Нормалното разпределение и хомогенността на дисперсията могат да бъдат тествани с помощта на подходящ статистически тест, напр. съответно тест на Шапиро-Уилк и тест на Левин (p ≤ 0,05).
an animal is recorded as dead when it is immobile, i.e. when it is not able to swim, or if there is no observed movement of appendages or postabdomen, within 15 seconds after gentle agitation of the test container.
Може да бъде извършен еднофакторен ANOVA с последващи множествени сравнения.
(If another definition is used, this should be reported together with its reference).
Гранично изпитване Ако е извършено гранично изпитване (сравнение на контрола и само на едно третиране) и са изпълнени критериите за използване на параметрични тестови процедури (нормалност, хомогенност), метричните отклици могат да бъдат оценени чрез тест на Стюдънт (t-тест).
No Observed Effect Concentration (NOEC)
Ако тези изисквания не са изпълнени, може да се използва t-тест за нееднаква дисперсия (t-тест на Уелч) или непараметричен тест, напр.
the test concentration immediately below the LOEC, which when compared with the control, has no statistically significant effect (p < 0,05), within a stated exposure period.
U-тест на Ман-Уитни.
the young Daphnia produced by the parent animals in the course of the test.
За установяване на значими разлики между контролите (контрола и контрола на разтворител или на диспергиращо средство), повторенията на всяка контрола могат да се изпитват, както е описано при граничното изпитване.
Parent Animals
Ако при тези изпитвания не бъдат установени значими разлики, всички повторения на контроли и контроли на разтворител могат да бъдат обединени.
those female Daphnia present at the start of the test and of which the reproductive output is the object of study.
В противен случай всички третирания следва да бъдат сравнявани с контролата на разтворител.
Reproductive output
Протоколът от изпитването включва следното:
the number of living offspring produced by parental animals within the test period
физическа природа и относими физични и химични свойства;
any substance or mixture tested using this test method.
данни за химичната идентификация, включително чистота.
LITERATURE
клон (да се уточни, ако е определен геномът му), доставчик или източник (ако е известен) и прилаганите условия за отглеждане.
PREPARATION OF FULLY DEFINED ELENDT M7 AND M4 MEDIA
Ако се използват вид, различен от Daphnia magna, това следва да се протоколира и обоснове.
Acclimation to Elendt M7 and M4 media
използваната при изпитването процедура (т.е. полустатична или проточна, обем, зареждане в брой Daphnia за литър);
Some laboratories have experienced difficulty in directly transferring Daphnia to M4 (1) and M7 media.
период на излагане на светлина и интензитет на светлината;
However, some success has been achieved with gradual acclimation, i.e. moving from own medium to 30 % Elendt, then to 60 % Elendt and then to 100 % Elendt.
план на изпитването (напр. брой повторения, брой родители в едно повторение);
The acclimation periods may need to be as long as one month.
подробности за използваната среда за отглеждане;
Preparation
ако са използвани, добавки от органични материали, включително състав, източник, метод на приготвяне, TOC/COD на изходния препарат, оценка на получената стойност на TOC/COD в средата за изпитване;
Trace elements
подробна информация за храненето, включително количеството (в mg C/daphnia/ден) и график (например вида на храната(ите), включително характерното наименование (вид) на водораслите и, ако са известни, щамът, условията на отглеждане);
Separate stock solutions (I) of individual trace elements are first prepared in water of suitable purity, e.g. deionised, distilled or reverse osmosis.
метод на приготвяне на изходните разтвори и честотата на обновяване (ако се използват разтворител или диспергиращо средство, те следва да се посочат, както и тяхната концентрация).
From these different stock solutions (I) a second single stock solution (II) is prepared, which contains all trace elements (combined solution), i.e:
резултатите от всички предварителни проучвания върху стабилността на изпитвания химикал;
Stock solution(s) I
номиналните изпитвани концентрации и резултатите от всички анализи за определяне на концентрацията на изпитвания химикал в съдовете за изпитване (вж. примерни таблици с данни в допълнение 5); следва да се протоколират също коефициентът на аналитичния добив на метода и границата на определяне;
(single substance)
качество на водата в съдовете за изпитване (т.е. рН, температура и концентрация на разтворения кислород и ТОС и/или COD, и твърдост, където е необходимо) (вж. примерна таблица с данни в допълнение 4);
Amount added to water