natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Осветление
This will help indicate whether particular steps to control such losses should be taken.
Луминесцентни крушки (широк спектър); 10—20 μE/m2/s, 540—1080 lux, или 50—100 ft-c (заобикалящи равнища на осветеност в лабораторията); 12—16 часа фотопериод
Where information on the solubility and stability of the test chemical are uncertain, it is recommended that these be assessed under the conditions of the test, i.e. growth medium, temperature, lighting regime to be used in the test.
26 ± 1 °C
The pH control of the test medium is particularly important, e.g. when testing metals or substances which are hydrolytically unstable.
Качество на водата
Further guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to test is provided in a OECD Guidance Document (5).
O2 ≥80 % наситеност, твърдост: напр. ~30—300 mg/l CaCO3, NO3-: ≤48 mg/l, NH4+ и NO2-: <0,001 mg/l, остатъчен хлор <10 μg/l, общо органичен хлор <25 ng/l, pH = 6,5—8,5
For the test to be valid, the doubling time of main shoot length in the control must be less than 14 days.
Допълнителни критерии за качество на водата
Using the media and test conditions described in this test method, this criterion can be attained using a static or semi-static test regime.
Твърди частици <20 mg/l, общо органичен въглерод <2 mg/l, общо органофосфорни пестициди <50 ng/l, общо органохлорни пестициди плюс полихлорирани бифенили <50 ng/l
The mean coefficient of variation for yield based on measurements of shoot fresh weight (i.e. from test initiation to test termination) and the additional measurement variables (see paragraph 37) in the control cultures do not exceed 35 % between replicates.
Размер на контейнера за поддържане
More than 50 % of the replicates of the control group are kept sterile over the exposure period of 14 days, which means visibly free of contamination by other organisms such as algae, fungi and bacteria (clear solution).
напр.180 l, 1 риба/l
Note: Guidance on how to assess sterility is provided in the ring-test report (4).
Пречистване на вода
REFERENCE CHEMICAL
Постоянно (филтруване с активен въглен); други възможности включват комбинация между полустатично поддържане с обновяване или проточна система с непрекъснато обновяване на водата
Reference chemical(s), such as 3,5-dichlorophenol used in the ring test (4), may be tested as a mean of checking the test procedure; from the ring test data, the mean EC50-values of 3,5-DCP for the different response variables (see paragraphs 37-41 of this test method) are between 3,2 mg/l and 6,9 mg/l (see ring test report for details about confidence interval for these values).
Препоръчително съотношение между мъжките и женските риби за размножаване
It is advisable to test a reference chemical at least twice a year or, where testing is carried out at a lower frequency, in parallel to the determination of the toxicity of a test chemical.
2:1 (или масово хвърляне на хайвер)
All equipment in contact with the test media should be made of glass or other chemically inert material.
Аквариуми за хвърляне на хайвера
Glassware used for culturing and testing purposes should be cleaned of chemical contaminants that might leach into the test medium and should be sterile.
например 4-литрови аквариуми със стоманена решетка на дъното и изкуствени растения като стимул за хвърляне на хайвера; външни нагреватели или масово хвърляне на хайвера в аквариумите за поддържане
The test vessels should be long enough for the shoot in the control vessels to grow in the water phase without reaching the surface of the test medium at the end of the test.
Структура и външен вид на хайвера
Thick-walled borosilicate glass test tubes without lip, inner diameter approximately 20 mm, length approximately 250 mm, with aluminium caps are recommended.
Стабилен хорион (т.е. силно прозрачен, нелепкав, диаметър ~ 0,8—1,5 mm)
Since the modified Andrews' medium contains sucrose (which stimulates the growth of fungi and bacteria), the test solutions have to be prepared under sterile conditions.
Процент на хвърляне на хайвера
All liquids as well as equipment are sterilised before use.
Една полово зряла женска хвърля поне 50—80 хайверни зърна на ден.
Sterilisation is carried out via heated air treatment (210 °C) for 4 hours or autoclaving for 20 minutes at 121 °C.
В зависимост от породата процентът на хвърляне на хайвера може да бъде значително по-висок.
In addition, all flasks, dishes, bowls etc. and other equipment undergo flame treatment at a sterile workbench just prior to use.
Процентът на оплождане следва да е ≥70 %.
The cultures and test vessels should not be kept together.
При риби, които за първи път хвърлят хайвер, процентът на оплождане на хайвера при първите няколко хвърляния може да е по-нисък.
This is best achieved using separate environmental growth chambers, incubators, or rooms.
Статично, полустатично с обновяване, проточно, температура от 26 ± 1 °C, 24 часово аклиматизиране на камерите за изпитване (например 24-гнездни плаки с 2,5—5 ml на кухина)
Illumination and temperature should be controllable and maintained at a constant level.
НОРМАЛНО РАЗВИТИЕ НА ЕМБРИОНИ НА ЗЕБРОВО ДАНИО ПРИ 26°C
Test organism
Фиг. 1: Избрани ранни етапи на развитие на зеброво данио (Danio rerio): 0,2—1,75 часа след оплождане (от Kimmel и др.., 1995 г.
Myriophyllum spicatum — a submersed aquatic dicotyledon — is a species of the water milfoils family.
(35)).
Between June and August, inconspicuous pink-white flowers protrude above the water surface.
Времевата последователност на нормалното развитие може да се отчита за диагностициране както на оплождането, така и на жизнеспособността на хайверните зърна (вж. точка 26: Подбор на оплодени хайверни зърна).
The plants are rooted in the ground by a system of robust rhizomes and can be found in the entire northern hemisphere in eutrophic, however non-polluted and more calciferous still waters with muddy substrate.
Фиг. 2: Избрани късни етапи на развитие на зеброво данио (Danio rerio) (дехорионален ембрион за оптимизиране на видимостта): 22—48 часа след оплождането (от Kimmel и др.,1995 г.
Myriophyllum spicatum prefers fresh water, but is found in brackish water as well.
(35)).
For the sediment-free toxicity test, sterile plants are required.
Фиг. 3: Нормално развитие на ембриони на зеброво данио (Danio rerio): (1) 0,75 часа, 2-клетъчен етап; (2) 1 час, 4-клетъчен етап; (3) 1,2 часа, 8-клетъчен етап; (4) 1,5 часа, 16-клетъчен етап; (5) 4,7 часа, започва епиболия; (6) 5,3 часа, приблизително 50 % епиболия (от Braunbeck и Lammer 2006 г.
If the testing laboratory does not have regular cultures of Myriophyllum spicatum, sterile plant material may be obtained from another laboratory or (unsterile) plant material might be taken from the field or provided by a commercial supplier; if plants come from the field a taxonomic verification of the species should be envisaged.
(40)).
If collected from the field or provided by a commercial supplier, plants should be sterilised (1) and maintained in culture in the same medium as used for testing for a minimum of eight weeks prior to use.
Разположение на 24-гнездните плаки
Field sites used for collecting starting cultures have to be free of obvious sources of contamination.
1-5 пет концентрации на изпитване/химикал;
Great care should be taken to ensure that the correct species is obtained when collecting Myriophyllum spicatum from the field, especially in regions where it can hybridise with other Myriophyllum species.
nC отрицателна контрола (вода за разреждане);
If obtained from another laboratory they should be similarly maintained for a minimum of three weeks.
iC вътрешна контрола на плаката (вода за разреждане);
The source of plant material and the species used for testing should always be reported.
pC положителна контрола (3,4-DCA 4 mg/l);
The quality and uniformity of the plants used for the test will have a significant influence on the outcome of the test and should therefore be selected with care.
sC контрола на разтворител
Young, rapidly growing plants without visible lesions or discoloration (chlorosis) should be used.
Схема на процедурата на изпитване за остра токсичност при ембриони на зеброво данио (отляво надясно): получаване на хайверни зърна, събиране на хайверни зърна, предварителна експозиция веднага след оплождането в стъклени съдове, подбор на оплодени хайверни зърна с инвертен или бинокулярен микроскоп и разпределение на оплодените яйца в 24-гнездни плаки, подготвени със съответните концентрации на изпитване/контроли, n = брой на хайверните зърна, необходими за концентрацията на изпитване/контролата (тук 20), hpf = часове след оплождането.
Details about preparation of the test organism are given in Appendix 4.
хайв.зърна на конц./ контрола
Cultivation
24 h предв. подготовка n оплодени хайв. зърна на изпитвана концентрация/ контрола Отпадъци
To reduce the frequency of culture maintenance (e.g. when no Myriophyllum tests are planned for a period), cultures can be held under reduced illumination and temperature (50 μE m–2 s–1, 20 ± 2 °C).
Избор на оплодени хайверни зърна и определяне процента на оплождане Стъклен съд със съответни изпитвани концентрации/ контроли с обеми за пълно покриване на хайверните зърна Съд за хвърляне на хайвер
Details of culturing are given in Appendix 3.
АТЛАС НА ЛЕТАЛНИТЕ КРАЙНИ ТОЧКИ ЗА ИЗПИТВАНЕТО ЗА ОСТРА ТОКСИЧНОСТ ПРИ ЗЕБРОВО ДАНИО
At least 14 to 21 days before testing, sufficient test organisms are transferred aseptically into fresh sterile medium and cultured for 14 to 21 days under the conditions of the test as a pre culture.
Следните апикални крайни точки са показател за остра токсичност и вследствие на това смърт на ембрионите: коагулация на ембриона, неотделяне на опашката, отсъствие на образуване на сомити и отсъствие на сърдечна дейност.
Details for preparation of a pre-culture are given in Appendix 4.
За илюстрация на тези крайни точки са избрани следните микрографики.
Only one nutrient medium is recommended for Myriophyllum spicatum in a sediment-free test system, as described in Appendix 2.
Коагулация на ембриона
A modification of the Andrews' medium is recommended for culturing and testing with Myriophyllum spicatum as described in (1).
При наблюдаване в светло поле коагулираните ембриони на зебровото данио показват различни непрозрачни включения.
From five separately prepared nutrient stock solutions with addition of 3 % sucrose the modified Andrews' medium will be arranged.
Фиг. 2
Details about preparation of the medium are given in Appendix 2.
Отсъствие на образуване на сомити
A tenfold concentrated, modified Andrews' medium is needed for obtaining the test solutions (by dilution as appropriate).
Въпреки че е изостанал в развитието си с приблизително 10 часа, 24-часовият ембрион на зеброво данио в (а) показва добре развити сомити (→), докато ембрионът в (б) не показва никакви признаци на образуване на сомити (→).
The composition of this medium is given in Appendix 2.
Въпреки ясно изразения оток на жълтъчната торбичка (*) 48-часовият ембрион на зеброво данио във (в) показва отчетливо образуване на сомити (→), докато 96-часовият ембрион на зеброво данио, изобразен в (г), не показва никакви признаци на образуване на сомити (→).
Test solutions are usually prepared by dilution of a stock solution.
Да се отбележи също така гръбначното изкривяване (сколиоза) и перикардния оток (*) на ембриона в (г).
Stock solutions of the test chemical are normally prepared by dissolving the chemical in demineralised (i.e. distilled or deionised) water.
(а: →; ембрион на зеброво данио на 96 часа).
The addition of the nutrients will be achieved by using the tenfold concentrated, modified Andrews' medium.
Да се отбележи също така отсъствие на очна пъпка (*).
The stock solutions of the test chemical can be sterilised by autoclave at 121 °C for 20 minutes or by sterile filtration, provided that the sterilisation technique used does not denaturise the test chemical.
Фиг. 4
Test solutions can also be prepared in sterile demineralised water or medium, under sterile conditions.
Отсъствието на сърдечна дейност по дефиниция трудно се илюстрира с микрограф.
The thermo-stability and the adsorption on different surfaces should the taken into account in the selection of the sterilisation procedure of the stock solutions of the test chemical.
Има показания за отсъствие на сърдечна дейност при липса на сърдечни конвулсии (двойна стрелка).
Because of that, it is recommended that the stock solutions be prepared under sterile conditions, i.e. using sterile material for dissolving the test chemical under sterile conditions (e.g. flame sterilisation, laminar-flow hoods, etc.) into sterile water.
Неподвижността на кръвните клетки например в абдоминалната аорта (→ в подложката) не е индикатор за отсъствие на сърдечна дейност.
This technique of preparation of sterile stock solutions is valid for both substances and mixtures.
Да се отбележи също така отсъствието на образуване на сомити при този ембрион (*, хомогенен вместо сегментиран вид на мускулните тъкани).
The highest tested concentration of the test chemical should normally not exceed its water solubility under the test conditions.
Времето за наблюдение, необходимо за да се регистрира отсъствие на сърдечна дейност, следва да е поне една минута при минимално увеличение от 80×.
For test chemicals of low water solubility it may be necessary to prepare a concentrated stock solution or dispersion of the chemical using an organic solvent or dispersant in order to facilitate the addition of accurate quantities of the test chemical to the test medium and aid in its dispersion and dissolution.
В.50 Изпитване за токсичност без седименти при Myriophyllum spicatum
Every effort should be made to avoid the use of such materials.
Този метод за изпитване съответства на насоките за изпитване № 238 на ОИСР (2014 г.).
There should be no phytotoxicity resulting from the use of auxiliary solvents or dispersants.
Той е създаден с цел оценка на токсичността на химикалите върху Myriophyllum spicatum, подводно двусемеделно растение от семейство Haloragaceae.
For example, commonly used solvents which do not cause phytotoxicity at concentrations up to 100 μl/l, include acetone and dimethylformamide.
Той се основава на съществуващ метод за изпитване на ASTM (1), модифициран като система за изпитване без седименти (2) с цел оценка на присъщата екотоксичност на изпитваните химикали (независимо от начина, по който изпитваният химикал се разпределя между водата и седимента).
If a solvent or dispersant is used, its final concentration should be reported and kept to a minimum (≤ 100 μl/l), and all treatments and controls should contain the same concentration of solvent or dispersant.
Система за изпитване без седименти се характеризира с ниска степен на аналитична сложност (само във водната фаза) и резултатите могат да бъдат анализирани паралелно и/или в сравнение с тези, получени от изпитването при Lemna sp.
Further guidance on the use of dispersants is given in (5).
(3); в допълнение изискването за стерилни условия позволява въздействието на микроорганизмите и водораслите (поглъщане/разграждане на химикала и т.н.) да се поддържа на възможно най-ниско равнище.
Test and control groups
Това изпитване не замества други изпитвания за токсичност във водна среда; то следва по-скоро да ги допълва с цел да се постигне по-пълна оценка на опасностите и рисковете за водните растения.
Prior knowledge of the toxicity of the test chemical to Myriophyllum spicatum from a range-finding test will help in selecting suitable test concentrations.
Методът за изпитване е валидиран чрез кръгово изпитване (4).
In the definitive toxicity test, there should normally be five (like in the Lemna growth inhibition test, Chapter C.26 of this Annex) to seven test concentrations arranged in a geometric series; they should be chosen in order that the NOEC and EC50 values are bracketed by the concentration range (see below).
Описани са подробности от изпитването с обновяване (полустатично) на изпитвания разтвор и без обновяване (статично) на изпитвания разтвор.
Preferably the separation factor between test concentrations should not exceed 3,2; however, a larger value may be used where the concentration-response curve is flat.
В зависимост от целите на изпитването и регулаторните изисквания се препоръчва прилагането на полустатичния метод, например за вещества, които бързо се отстраняват от разтвора в резултат от изпарение, адсорбция, фоторазграждане, хидролиза, утаяване или биоразграждане.
Justification should be provided when fewer than five concentrations are used.
Допълнителни насоки са дадени в (5).
At least five replicates should be used at each test concentration.
Настоящият метод за изпитване се прилага за вещества, за които методът на изпитване е валидиран (вж. подробности в протокола от кръговото изпитване (4)) или за формулировки или известни смеси; при изпитване на смеси съставките им следва да бъдат в максимална степен идентифицирани и количествено определени.
In setting the range of test concentrations (for range-finding and/or for the definitive toxicity test), the following should be considered:
Методът за изпитване без седимент при Myriophyllum spicatum допълва изпитването за токсичност вода-седимент при Myriophyllum spicatum (6).
To determine an ECx, test concentrations should bracket the ECx value to ensure an appropriate level of confidence.
Преди използването на метода за изпитване на смес с регулаторна цел следва да се обмисли дали той може да предостави подходящи за целта резултати и ако да — защо.
For example, if estimating the EC50, the highest test concentration should be greater than the EC50 value.
Постоянно растящи растителни култури от вида Myriophyllum spicatum (само в модифицирана среда на Andrews, вж. допълнение 2) се отглеждат под формата на монокултури в различни концентрации на изпитвания химикал за срок от 14 дни в система за изпитване без седименти.
If the EC50 value lies outside of the range of test concentrations, associated confidence intervals will be large and a proper assessment of the statistical fit of the model may not be possible.
Целта на изпитването е да се определят количествено свързаните с химикала въздействия върху вегетативния растеж през този период въз основа на оценки на избрани измервани променливи.
If the aim is to estimate the LOEC/NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that growth is not significantly less than that of the control.
Измерваните променливи са ръстът на поника, страничните разклонения и корените, както и промените в свежото и сухото тегло и увеличението на броя на прешлените.
In addition, the highest test concentration should be high enough so that growth is significantly lower than that in the control.
В допълнение отличителни качествени изменения на изпитваните организми, като например деформиране, или хлороза и некроза, проявяващи се под формата на пожълтяване или бяло и кафяво оцветяване, също се вземат предвид.
If this is not the case, the test will have to be repeated using a different concentration range (unless the highest concentration is at the limit of solubility or the maximum required limit concentration, e.g. 100 mg/l).
С цел количествено определяне на свързани с химикала въздействия растежът в изпитваните разтвори се сравнява с този в контролите и концентрацията, при която се осъществява x % инхибиране на растежа, се определя и се изразява като ЕСх; „х“ може да бъде всяка стойност в зависимост от нормативните изисквания, например EC10, EC20, EC50.
Every test should include controls consisting of the same nutrient medium, test organism (choosing plant material as homogeneous as possible, fresh lateral branches from pre-cultures, shortened to 2,5 cm from base), environmental conditions and procedures as the test vessels but without the test chemical.
Следва да се отбележи, че оценките на EC10 и EC20 са надеждни и подходящи само за тестове, при които коефициентите на вариация в контролните растения падат под оценяваното равнище на въздействие, т.е. за устойчива оценка на EC20 коефициентите на вариация следва да бъдат < 20 %.
If an auxiliary solvent or dispersant is used, an additional control treatment with the solvent/dispersant present at the same concentration as that in the vessels with the test chemical should be included.
Следва да се определи както средната специфична скорост на растежа (прогнозирана въз основа на оценка на дължината на основния поник и три допълнителни измервани променливи) и добива (прогнозиран въз основа на увеличението на дължината на основния поник и три допълнителни измервани променливи) от нетретираните и третираните растения.
The number of replicate control vessels (and solvent vessels, if applicable) should be at least ten.
Специфичната скорост на растежа (r) и добива (y) впоследствие се използват за определяне съответно на ErCx (напр.
If determination of NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
ErC10, ErC20, ErC50) и EyCx (напр. EyC10, EyC20, EyC50).
However, in any case the number of control replicates should be at least ten.
В допълнение най-ниската концентрация, при която се наблюдава въздействие (LOEC), и концентрацията без наблюдавано въздействие (NOEC) могат да бъдат определени статистически.
Exposure
Следва да е наличен метод за анализ с достатъчна чувствителност за количествено определяне на изпитвания химикал в средата на изпитване.
Fresh lateral branches from pre-culture shortened to 2,5 cm from base are assigned randomly to the test vessels under aseptic conditions; each test vessel should contain one 2,5 cm lateral branch that should have an apical meristem on one end.
Информацията относно изпитвания химикал, която може да бъде полезна при установяване на условията на изпитване, включва структурната формула, чистотата и онечистванията, водоразтворимостта, стабилността във вода и на светлина, константата на киселинна дисоциация (рКа), коефициента на разпределение октанол-вода (Kow), парното налягане и биоразградимостта.
The chosen plant material should be the same quality in each test vessel.
Разтворимостта във вода и парното налягане може да се използват за изчисляване на константата по закона на Хенри, която ще покаже дали се очакват значителни загуби на изпитвания химикал през периода на изпитването.
A randomised design for location of the test vessels in the incubator is required to minimise the influence of spatial differences in light intensity or temperature.
Това ще помогне да се разбере дали следва да се предприемат определени стъпки за контролиране на тези загуби.
A blocked design or random repositioning of the vessels (or repositioning more frequently) when observations are made is also required.
Когато информацията за разтворимостта и стабилността на изпитвания химикал е несигурна, се препоръчва те да бъдат оценени в условията на изпитване, т.е. среда на растеж, температура, режим на осветеност, които ще бъдат използвани при изпитването.
If a preliminary stability test shows that the test chemical concentration cannot be maintained (i.e. the measured concentration falls below 80 % of the measured initial concentration) over the test duration (14 days), a semi-static test regime is recommended.
Контролът на рН в изпитваната среда е особено важен, например при изпитване на метали или вещества, които са неустойчиви на хидролиза.
In this case, the plants should be exposed to freshly prepared test and control solutions on at least one occasion during the test (e.g. day 7).
Допълнителни насоки за изпитване на химикали, чиито физични и химични свойства затрудняват тяхното изпитване, са дадени в ръководство на ОИСР с насоки (5).
The frequency of exposure to fresh medium will depend on the stability of the test chemical; a higher frequency may be needed to maintain near-constant concentrations of highly unstable or volatile chemicals.
За да бъде валидно изпитването, времето за удвояване на дължината на основния поник в контролата трябва да е под 14 дни.
The exposure scenario through a foliar application (spray) is not covered in this test method.