natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Двете измервания се използват за изчисляване на in vitro балова оценка за дразнещото действие (ИВБОДД), която се използва за in vitro категоризиране според класификацията по степен на опасност от дразнещо действие за прогнозиране на потенциала in vivo за дразнещо действие върху очите на изпитвания химикал (вж. критериите за решение в точка 48).
However, the use of corneas from young animals (i.e., 6 to 12 months old) is permissible since there are some advantages, such as increased availability, a narrow age range, and decreased hazards related to potential worker exposure to Bovine Spongiform Encephalopathy (15).
За метода за изпитване НПГР се използва изолирана роговица от очите на прясно заклан едър рогат добитък.
As further evaluation of the effect of corneal size or thickness on responsiveness to corrosive and irritant chemicals would be useful, users are encouraged to report the estimated age and/or weight of the animals providing the corneas used in a study.
Непрозрачността на роговицата се измерва количествено чрез количеството светлина, преминало през роговицата.
Collection and Transport of Eyes to the Laboratory
Пропускливостта се измерва количествено като количеството оцветител натриев флуоресцеин, което преминава през цялата дебелина на роговицата, отчетено в средата в задното отделение.
Eyes are collected by slaughterhouse employees.
Изпитваните химикали се прилагат върху епителната повърхност на роговицата чрез добавяне в предното отделение на държателя за роговицата.
To minimise mechanical and other types of damage to the eyes, the eyes should be enucleated as soon as possible after death and cooled immediately after enucleation and during transport.
В Допълнение 4 са дадени описание и схема на държател за роговицата, използван за метода за изпитване НПГР.
To prevent exposure of the eyes to potentially irritant chemicals, the slaughterhouse employees should not use detergent when rinsing the head of the animal.
Държатели за роговица могат да се набавят от различни източници на пазара или да се изработят.
Eyes should be immersed completely in cooled Hanks' Balanced Salt Solution (HBSS) in a suitably sized container, and transported to the laboratory in such a manner as to minimise deterioration and/or bacterial contamination.
Източник и възраст на говеждите очи и избор на животински вид
Because the eyes are collected during the slaughter process, they might be exposed to blood and other biological materials, including bacteria and other microorganisms.
Едрият рогат добитък, който се изпраща за клане, обикновено се използва за консумация от човека или за други търговски цели.
Therefore, it is important to ensure that the risk of contamination is minimised (e.g., by keeping the container containing the eyes on wet ice during collection and transportation and by adding antibiotics to the HBSS used to store the eyes during transport [e.g. penicillin at 100 IU/ml and streptomycin at 100 μg/ml]).
Като източник на роговица за целите на метода за изпитване НПГР се използват само здрави животни, смятани за подходящи за включване в хранителната верига на човека.
The time interval between collection of the eyes and use of corneas in the BCOP test method should be minimised (typically collected and used on the same day) and should be demonstrated to not compromise the assay results.
Тъй като едрият рогат добитък може да бъде с различно тегло според породата, възрастта и пола, няма изискване за препоръчително тегло на животните при клане.
These results are based on the selection criteria for the eyes, as well as the positive and negative control responses.
Когато се използват очи от различни по възраст животни, могат да се получат разлики в размерите на роговицата.
All eyes used in the assay should be from the same group of eyes collected on a specific day.
Роговицата на едър рогат добитък на възраст над осем години обикновено е с хоризонтален диаметър > 30,5 mm и дебелина в средата на роговицата (CCT) ≥ 1100 μm, докато роговица с хоризонтален диаметър < 28,5 mm и CCT < 900 μm обикновено се получава от едър рогат добитък на възраст под пет години (14).
Selection Criteria for Eyes Used in the BCOP Test Method
Поради това обикновено не се използват очи от едър рогат добитък на възраст над 60 месеца.
The eyes, once they arrive at the laboratory, are carefully examined for defects including increased opacity, scratches, and neovascularisation.
Обичайно е да не се използват очи от едър рогат добитък на възраст под 12 месеца, тъй като тогава те все още са в развитие и дебелината и диаметърът на роговицата са значително по-малки от протоколираните за очи от възрастен добитък.
Only corneas from eyes free of such defects are to be used.
Все пак се допуска да се използва роговица от млади животни (т.е. на възраст от 6 до 12 месеца), тъй като това дава някои предимства, като по-лесно набавяне, по-малък възрастов диапазон и намалена опасност, свързана с потенциална експозиция на работещите на спонгиформна енцефалопатия по говедата (15).
The quality of each cornea is also evaluated at later steps in the assay.
Тъй като ще бъде от полза оценката на ефекта от размерите или дебелината на роговицата върху реагирането спрямо химикали с корозивно и дразнещо действие да продължи, потребителите се насърчават да протоколират предполагаемата възраст и/или тегло на животните, от които се доставя използваната в изследването роговица.
Corneas that have opacity greater than seven opacity units or equivalent for the opacitometer and cornea holders used after an initial one hour equilibration period are to be discarded (NOTE: the opacitometer should be calibrated with opacity standards that are used to establish the opacity units, see Appendix 4).
Събиране и транспортиране на очите до лабораторията
Each treatment group (test chemical, concurrent negative and positive controls) consists of a minimum of three eyes.
Очите се събират от работещите в кланицата.
Three corneas should be used for the negative control corneas in the BCOP test method.
За минимизиране на механичните и други типове увреждания на очите, очите следва да бъдат извадени възможно най-бързо след умъртвяването и охладени незабавно след изваждането и по време на транспортирането.
Since all corneas are excised from the whole globe, and mounted in the corneal chambers, there is potential for artifacts from handling upon individual corneal opacity and permeability values (including negative control).
За да се избегне излагането на очите на въздействието на химикали с потенциално дразнещо действие, работещите в кланицата не трябва да използват детергенти при миенето на главите на животните.
Furthermore, the opacity and permeability values from the negative control corneas are used to correct the test chemical-treated and positive control-treated corneal opacity and permeability values in the IVIS calculations.
Очите следва да бъдат изцяло потопени в охладен балансиран солен разтвор на Ханкс (HBSS) в съд с подходящи размери и транспортирани до лабораторията по начин, по който се свежда до минимум развалянето и/или бактериалното замърсяване.
Preparation of the Eyes
Тъй като очите се вземат по време на кланичния процес, те може да са експонирани на кръв и други биологични материали, включително бактерии и други микроорганизми.
Corneas, free of defects, are dissected with a 2 to 3 mm rim of sclera remaining to assist in subsequent handling, with care taken to avoid damage to the corneal epithelium and endothelium.
Поради това е важно да се осигури свеждане до минимум на риска от замърсяване [напр. като съдът с очите се държи върху мокър лед по време на пробовземането и транспортирането, и чрез добавяне на антибиотици към HBSS, в който се съхраняват очите при транспортирането (напр.
Isolated corneas are mounted in specially designed corneal holders that consist of anterior and posterior compartments, which interface with the epithelial and endothelial sides of the cornea, respectively.
100 IU/ml пеницилин и 100 mg/ml стрептомицин)].
Both chambers are filled to excess with pre-warmed phenol red free Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) (posterior chamber first), ensuring that no bubbles are formed.
Интервалът от време между пробовземането на очите и използването на роговицата за метода за изпитване НПГР следва да бъде сведен до минимум (обикновено пробовземането и използването става в рамките на един и същ ден) и следва да се докаже, че не компрометира резултатите от изследването.
The device is then equilibrated at 32 ± 1 °C for at least one hour to allow the corneas to equilibrate with the medium and to achieve normal metabolic activity, to the extent possible (the approximate temperature of the corneal surface in vivo is 32 °C).
Тези резултати се базират на критериите за подбор за очите, както и на отклика на положителната и отрицателната контрола.
Following the equilibration period, fresh pre-warmed phenol red free EMEM is added to both chambers and baseline opacity readings are taken for each cornea.
Всички очи, използвани в изследването, следва да бъдат от една и съща група очи, пробовзета през даден ден.
Any corneas that show macroscopic tissue damage (e.g, scratches, pigmentation, neovascularisation) or an opacity greater than seven opacity units or equivalent for the opacitometer and cornea holders used are discarded.
Критерии за подбор за очи, използвани в метода за изпитване НПГР
A minimum of three corneas are selected as negative (or solvent) control corneas.
След пристигане в лабораторията очите се оглеждат внимателно за дефекти, включително за увеличена непрозрачност, драскотини и неоваскуларизация.
The remaining corneas are then distributed into treatment and positive control groups.
Използват се само роговици от очи без такива дефекти.
Because the heat capacity of water is higher than that of air, water provides more stable temperature conditions for incubation.
Качеството на всяка роговица се оценява също и на по-късните етапи в изследването.
Therefore, the use a water bath for maintaining the corneal holder and its contents at 32 ± 1 °C is recommended.
Роговици, чиято непрозрачност надвишава седем единици за непрозрачност или стойност, еквивалентна за използваните измервателно устройство за непрозрачност и държатели за роговица, след първоначален период от един час за достигане на равновесие, следва да бъдат изхвърлени (БЕЛЕЖКА: измервателното устройство за непрозрачност следва да бъде калибрирано с еталони за непрозрачност, използвани за установяването на единиците за непрозрачност, вж. допълнение 4).
However, air incubators might also be used, assuming precaution to maintain temperature stability (e.g. by pre-warming of holders and media).
Всяка третирана група (изпитван химикал, паралелни отрицателна и положителна контроли) се състои от минимум три очи.
Application of the Test Chemical
За отрицателната контролa в метода за изпитване НПГР следва да се използват три роговици.
Two different treatment protocols are used, one for liquids and surfactants (solids or liquids), and one for non-surfactant solids.
Тъй като всички роговици са изрязани от цялата очна ябълка и поставени в отделенията за роговица, съществува вероятност стойностите за непрозрачност и пропускливост за отделните роговици (включително отрицателната контрола) да бъдат повлияни в резултат на човешката намеса при манипулациите.
Liquids are tested undiluted.
Освен това стойностите за непрозрачност и пропускливост от роговиците от отрицателната контрола се използват за коригиране на стойностите за непрозрачност и пропускливост на роговицата от третираната с химикала проба и от положителната контрола при изчисляването на ИВБОДД.
Semi-solids, creams, and waxes are typically tested as liquids.
Приготвяне на очите
Neat surfactant substances are tested at a concentration of 10 % w/v in a 0,9 % sodium chloride solution, distilled water, or other solvent that has been demonstrated to have no adverse effects on the test system.
Върху свободна от дефекти роговица се прави разрез, така че от склерата да остане пръстен от 2 до 3 мм за улесняване на последващите манипулации, като се внимава да се избягва увреждане на епитела и ендотела на роговицата.
Appropriate justification should be provided for alternative dilution concentrations.
Изолираните роговици се поставят в специално изработени държатели за роговица, които се състоят от предно и задно отделение, които са съответно откъм епителната и ендотелната страна на роговицата.
Mixtures containing surfactants may be tested undiluted or diluted to an appropriate concentration depending on the relevant exposure scenario in vivo.
Двете отделения са пълни до преливане с предварително затоплена среда ЕМЕМ (Eagle's Minimum Essential Medium) без фенолово червено (първо задното отделение), като се внимава да няма мехури.
Appropriate justification should be provided for the concentration tested.
След това устройството се уравновесява при 32 ± 1 °C в продължение на най-малко един час, за да може роговицата да достигне равновесие със средата и да се достигне до нормална метаболитна активност в степента, в която това е възможно (приблизителната температура на повърхността на роговицата in vivo е 32 °C).
Corneas are exposed to liquids and surfactants for 10 minutes.
След периода на достигане на равновесие, в двете отделения се добавя прясна предварително затоплена среда ЕМЕМ без фенолово червено и се отчитат базовите стойности за непрозрачността за всяка роговица.
Use of other exposure times should be accompanied by adequate scientific rationale.
Роговиците с макроскопични тъканни увреждания (напр. драскотини, пигментация, неоваскуларизация) или непрозрачност > седем единици или стойност, еквивалентна за използваните измервателно устройство за непрозрачност и държатели за роговица, се изхвърлят.
Please see Appendix 1 for a definition of surfactant and surfactant-containing mixture.
Най-малко три роговици се избират за отрицателна контрола (или контрола на разтворител).
Non-surfactant solids are typically tested as solutions or suspensions at 20 % w/v concentration in a 0,9 % sodium chloride solution, distilled water, or other solvent that has been demonstrated to have no adverse effects on the test system.
Останалите роговици се разпределят на групи за третиране и положителни контролни групи.
In certain circumstances and with proper scientific justification, solids may also be tested neat by direct application onto the corneal surface using the open chamber method (see paragraph 32).
Тъй като топлинният капацитет на водата е по-висок от този на въздуха, водата осигурява по-стабилни температурни условия за инкубация.
Corneas are exposed to solids for four hours, but as with liquids and surfactants, alternative exposure times may be used with appropriate scientific rationale.
Поради това се препоръчва да се използва водна баня за поддържане на температура от 32 ± 1°C на държателя и неговото съдържание.
Different treatment methods can be used, depending on the physical nature and chemical characteristics (e.g. solids, liquids, viscous vs. non-viscous liquids) of the test chemical.
От друга страна, могат да се използват и въздушни инкубатори, като се вземат необходимите мерки температурата да се поддържа стабилна (напр. като се затоплят предварително държателят и средата).
The critical factor is ensuring that the test chemical adequately covers the epithelial surface and that it is adequately removed during the rinsing steps.
Прилагане на изпитвания химикал
A closed-chamber method is typically used for non-viscous to slightly viscous liquid test chemicals, while an open-chamber method is typically used for semi-viscous and viscous liquid test chemicals and for neat solids.
Използват се два различни протокола за третиране — един за течности и повърхностноактивни вещества (твърди или течни) и един за твърди вещества, различни от повърхностноактивни.
In the closed-chamber method, sufficient test chemical (750 μl) to cover the epithelial side of the cornea is introduced into the anterior chamber through the dosing holes on the top surface of the chamber, and the holes are subsequently sealed with the chamber plugs during the exposure.
Течностите се изпитват неразредени.
It is important to ensure that each cornea is exposed to a test chemical for the appropriate time interval.
Полутвърди вещества, кремообразни вещества и парафини обикновено се изпитват във вид на течности.
In the open-chamber method, the window-locking ring and glass window from the anterior chamber are removed prior to treatment.
Повърхностноактивните вещества в чист вид се изпитват при концентрации от 10 % w/v в 0,9 % разтвор на натриев хлорид, дестилирана вода или друг разтворител, за който е доказано, че не влияе неблагоприятно върху системата за изпитване.
The control or test chemical (750 μl, or enough test chemical to completely cover the cornea) is applied directly to the epithelial surface of the cornea using a micro-pipet.
За използване на други концентрации на разреждане следва да се предостави подходяща обосновка.
If a test chemical is difficult to pipet, the test chemical can be pressure-loaded into a positive displacement pipet to aid in dosing.
Смеси, съдържащи повърхностноактивни вещества, могат да се изпитват неразредени или разредени до подходяща концентрация в зависимост от относимия сценарий на експозиция in vivo.
The pipet tip of the positive displacement pipet is inserted into the dispensing tip of the syringe so that the material can be loaded into the displacement tip under pressure.
За изпитваната концентрация следва да се предостави подходяща обосновка.
Simultaneously, the syringe plunger is depressed as the pipet piston is drawn upwards.
Роговицата се експонира на течностите или повърхностноактивните вещества в продължение на 10 минути.
If air bubbles appear in the pipet tip, the test chemical is removed (expelled) and the process repeated until the tip is filled without air bubbles.
Използването на друга продължителност на експозицията следва да бъде придружено от подходяща научна обосновка.
If necessary, a normal syringe (without a needle) can be used since it permits measuring an accurate volume of test chemical and an easier application to the epithelial surface of the cornea.
Моля, вижте допълнение 1 за определение за повърхностноактивно вещество и смес, съдържаща повърхностноактивно вещество.
After dosing, the glass window is replaced on the anterior chamber to recreate a closed system.
Твърдите вещества, различни от повърхностноактивни вещества, обикновено се изпитват във вид на разтвори или суспензии при концентрация 20 % w/v в 0,9 % разтвор на натриев хлорид, дестилирана вода или друг разтворител, за който е доказано, че не влияе неблагоприятно върху системата за изпитване.
Post-Exposure Incubation
При някои обстоятелства и подходяща научна обосновка твърдите вещества могат да се изпитват и в чист вид чрез пряко прилагане върху повърхността на роговицата, като се използва методът с отворено отделение (вж. точка 32).
After the exposure period, the test chemical, the negative control, or the positive control chemical is removed from the anterior chamber and the epithelium washed at least three times (or until no visual evidence of test chemical can be observed) with EMEM (containing phenol red).
Роговицата се експонира на твърдите вещества в продължение на четири часа, но както и при течностите и повърхностноактивните вещества, при подходяща научна обосновка може да се приложи и друга продължителност на експозицията.
Phenol red- containing medium is used for rinsing since a colour change in the phenol red may be monitored to determine the effectiveness of rinsing acidic or alkaline test chemicals.
В зависимост от физичната природа и химичните характеристики на изпитвания химикал могат да се използват различни методи на третиране (напр. твърди вещества, течности, вискозни спрямо невискозни течности).
The corneas are washed more than three times if the phenol red is still discoloured (yellow or purple), or the test chemical is still visible.
Критичният фактор е да се осигури изпитваният химикал да покрива в достатъчна степен епителната повърхност и да бъде подходящо отстранен при етапите на измиване.
Once the medium is free of test chemical, the corneas are given a final rinse with EMEM (without phenol red).
Когато изпитваните химикали са невискозни или слабо вискозни течности, обикновено се използва методът със затворено отделение, а когато изпитваните химикали са полувискозни и вискозни течности и твърди вещества в чист вид, обикновено се използва методът с отворено отделение.
The EMEM (without phenol red) is used as a final rinse to ensure removal of the phenol red from the anterior chamber prior to the opacity measurement.
При метода със затворено отделение през отворите за дозиране върху горната повърхност в предното отделение се въвежда достатъчно количество от изпитвания химикал (750 μl), така че да покрие епителната страна на роговицата, след което по време на експозицията отворите се затварят със запушалките на отделението.
The anterior chamber is then refilled with fresh EMEM without phenol red.
Важно е да се осигури всяка роговица да се експонира на изпитвания химикал в продължение на съответния период от време.
For liquids or surfactants, after rinsing, the corneas are incubated for an additional two hours at 32 ± 1 °C.
При метода с отворено отделение пръстенът за затваряне на прозореца и стъкленият прозорец от предното отделение се отстраняват преди третирането.
Longer post-exposure time may be useful in certain circumstances and could be considered on a case-by-case basis.
Контролата или изпитваният химикал (750 μl или количество от изпитвания химикал, което е достатъчно да покрие напълно роговицата) се прилагат непосредствено върху епителната повърхност на роговицата, като се използва микропипета.
Corneas treated with solids are rinsed thoroughly at the end of the four-hour exposure period, but do not require further incubation.
Ако при даден изпитван химикал използването на пипета е затруднено, той може да се зареди под налягане в пипета с позитивно изтласкване за улесняване на дозирането.
At the end of the post-exposure incubation period for liquids and surfactants and at the end of the four-hour exposure period for non-surfactant solids, the opacity and permeability of each cornea are recorded.
Накрайникът на пипетата с позитивно изтласкване се поставя в накрайника на спринцовката по такъв начин, че материалът да може да бъде зареден под налягане в изтласкващия накрайник.
Also, each cornea is observed visually and pertinent observations recorded (e.g., tissue peeling, residual test chemical, non-uniform opacity patterns).
Едновременно с това буталото на спринцовката се натиска, докато буталото на пипетата се изтегля нагоре.
These observations could be important as they may be reflected by variations in the opacitometer readings.
Ако на върха на пипетата се появят мехурчета въздух, изпитваният химикал се изважда (изтласква) и процесът се повтаря до запълване на накрайника без въздушни мехури.
Control Chemicals
Ако е необходимо, може да се използва нормална спринцовка (без игла), тъй като тя позволява точно измерване на обема на изпитвания химикал и по-лесното му прилагане върху епителната повърхност на роговицата.
Concurrent negative or solvent/vehicle controls and positive controls are included in each experiment.
След дозирането стъкленият прозорец се поставя отново на предното отделение, за да се затвори системата.
When testing a liquid substance at 100 %, a concurrent negative control (e.g. 0,9 % sodium chloride solution or distilled water) is included in the BCOP test method so that nonspecific changes in the test system can be detected and to provide a baseline for the assay endpoints.
Инкубация след експозиция
It also ensures that the assay conditions do not inappropriately result in an irritant response.
След изтичане на времето за експозиция изпитваният химикал, отрицателната контрола или химикалът за положителна контрола се отстранява от предното отделение и епителът се измива с EMEM (с фенолово червено) най-малко три пъти (или докато не останат видими следи от изпитвания химикал).
When testing a diluted liquid, surfactant, or solid, a concurrent solvent/vehicle control group is included in the BCOP test method so that nonspecific changes in the test system can be detected and to provide a baseline for the assay endpoints.