natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Скоростта на храненето следва да се избира така, че да се избягват бърз растеж и голямо увеличение на липидното съдържание.
Alternatively, if no significant amounts of the test substance are detected in control fish (i.e. fish from the stock population), the control fish from the test can be analysed for lipid content only and test substance analysis in the test group(s) (and the related uptake rate constant, depuration rate constant and BCF values) can be corrected for changes according to control group lipid content during the test [34].
При необходимост количеството храна се преизчислява, например веднъж седмично, с оглед запазване на същата скорост на храненето.
Dead or diseased fish should not be analysed for test substance or lipid concentration.
За целите на това изчисление теглото на рибата във всяка камера за изпитване се оценява на база на теглото на последно пробовзетата риба в тази камера.
An example of an acceptable sampling schedule is given in Appendix 4.
Рибата, останала в камерата, не се претегля.
Other schedules can readily be calculated using other assumed values of KOW to calculate the exposure time for 95 % uptake (refer to Appendix 5 for calculations).
Неконсумираната храна и изпражненията следва да се източват ежедневно от камерите за изпитване, малко след храненето (30 минути до един час).
Sampling should be continued during the uptake phase until a steady-state has been established (see Appendix 1, definitions and units) or the uptake phase is otherwise terminated (after 28 or 60 days, cf. paragraphs 37 and 38).
Камерите се поддържат колкото е възможно най-чисти по време на изпитването, така че концентрацията на органична материя да е възможно най-ниска (срв. точка 29), тъй като присъствието на органичен въглерод може да ограничи бионаличността на изпитваното вещество (12).
Before beginning the depuration phase, the fish should be transferred to clean vessels.
Понеже много от фуражите са получени от рибно месо, следва да се гарантира, че фуражът няма да окаже въздействие върху резултатите от изпитването или да предизвика неблагоприятни въздействия, напр. чрез съдържание на (следи от) пестициди, на тежки метали и/или на самото изпитвано вещество.
Sampling and sample preparation
Светлина и температура
Water samples should be obtained for analysis e.g. by siphoning through inert tubing from a central point in the test chamber.
Препоръчва се от 12 до 16 часа излагане на светлина в денонощието, а температурата (± 2 °C) трябва да е подходяща за изпитвания вид (срв. допълнение 3).
Neither filtration nor centrifuging appears always to separate the non-bioavailable fraction of the test substance from that which is bioavailable.
Типът и характеристиките на осветлението трябва да са познати.
If a separation technique is applied, a justification for, or validation of, the separation technique should always be provided in the test report given the bioavailability difficulties (25).
Трябва да се внимава относно възможната фототрансформация на изпитваното вещество при условията на облъчване на изследването.
Especially for highly hydrophobic substances (i.e. those substances with a log KOW > 5) (12) (26), where adsorption to the filter matrix or centrifugation containers could occur, samples should not be subjected to those treatments.
Използва се подходящо осветление, за да се избегне експозиция на рибата на неестествени фотопродукти.
Instead, measures should be taken to keep the tanks as clean as possible (cf. paragraph 46) and the content of total organic carbon should be monitored during both the uptake and depuration phases (cf. paragraph 53).
В някои случаи може да е подходяща употребата на екран, ограничаващ ултравиолетовите излъчвания под 290 nm.
To avoid possible issues with reduced bioavailability, sampling by solid phase microextraction techniques may be used for poorly soluble and highly hydrophobic substances.
Концентрации на изпитване
The sampled fish should be euthanised instantly, using the most appropriate and humane method (for whole fish measurements, no further processes than rinsing with water (cf. paragraph 28) and blot drying the fish should be done).
Изпитването първоначално е било планирано за неполярни органични вещества.
Weigh and measure total length [35].
За този тип вещество експозицията на рибата на единична концентрация се очаква да бъде достатъчна, тъй като не се очаква въздействие от концентрацията, въпреки че могат да бъдат необходими две концентрации за съответната правна рамка.
In each individual fish, the measured weight and length should be linked to the analysed substance concentration (and lipid content, if applicable), for example using a unique identifier code for each sampled fish.
Ако се изпитват вещества извън тази област, или са известни други признаци за възможна зависимост от концентрацията, изпитването трябва да се проведе с две или повече концентрации.
It is preferable to analyse fish and water immediately after sampling in order to prevent degradation or other losses and to calculate approximate uptake and depuration rate constants as the test proceeds.
Ако се изпитва само една концентрация, следва да бъде предоставена обосновка за използването на една концентрация (срв. точка 79).
Immediate analysis also avoids delay in determining when a plateau (steady-state) has been reached.
Също така, изпитваната концентрация следва да бъде толкова ниска, колкото е практически или технически възможно (т.е. да не е близо до границата на разтворимост).
Failing immediate analysis, the samples should be stored by an appropriate method.
В някои случаи може да се очаква, че биоконцентрацията на веществото зависи от водната концентрация (напр. за метали, при които поглъщането от рибите може да бъде поне частично регулирано).
Before the beginning of the study, information should be obtained on the proper method of storage for the particular test substance — for example, deep-freezing, holding at 4 °C, extraction, etc.
В такъв случай е необходимо изпитване на поне две, а за предпочитане повече концентрации (срв. точка 49), които са относими към околната среда.
The duration of storage should be selected to ensure that the substance has not degraded while in storage.
Също така за вещества, за които изпитваните концентрации трябва да бъдат в близост до границата на разтворимост по практически причини, се препоръчва изпитване на минимум две концентрации, тъй като това може да даде представа за надеждността на концентрациите на експозиция.
Quality of analytical method
Изборът на концентрации на изпитване следва да включва реалистичната концентрация от екологична гледна точка, както и концентрацията, която е относима към целта на специфичната оценка.
Since the whole procedure is governed essentially by the accuracy, precision and sensitivity of the analytical method used for the test substance, check experimentally that the accuracy, precision and reproducibility of the substance analysis, as well as recovery of the test substance from both water and fish are satisfactory for the particular method.
Концентрацията (концентрациите) на изпитваното вещество следва да бъдат избрани под неговото равнище на хроничните ефекти, или 1 % от острата му асимптотична LC50, в рамките на обхват, относим към околната среда, и поне един порядък над неговата граница на количествено определяне във вода чрез използвания метод за анализ.
This should be part of preliminary tests.
Най-високата допустима концентрация за изпитване може също да бъде определена чрез разделяне на острата 96 h LC50 на подходящо отношение остра/хронична (напр. подходящи отношения за някои вещества са около три, но някои са над 100).
Also, check that the test substance is not detectable in the dilution water used.
Ако се използва втора концентрация, тя следва да се различава от тази над нея с кратност десет.
If necessary, correct the values of test substance concentration in water and fish obtained from the test for the recoveries and background values of controls.
Ако това не е възможно поради критерия за токсичност (който ограничава най-горната концентрация за изпитване) и аналитичната граница (която ограничава най-ниската концентрация за изпитване), може да се използва кратност под десет, и трябва да бъде взето под внимание използване на изотопно белязано вещество (с най-голямата чистота, напр. за предпочитане > 98 %).
The fish and water samples should be handled throughout in such a manner as to minimise contamination and loss (e.g. resulting from adsorption by the sampling device).
Трябва да се внимава нито една от използваните концентрации да не е над границата на разтворимост на изпитваното вещество в изпитвателната среда.
Analysis of fish samples
Една контрола с вода за разреждане или, ако е относимо (срв. точки 30 и 31), една контрола, съдържаща разтворител, следва да бъде изпитана в допълнение към изпитваните серии.
If radiolabelled materials are used in the test, it is possible to analyse for total radiolabel (i.e. parent and metabolites) or the samples may be cleaned up so that the parent substance can be analysed separately.
Честота на измерванията на качеството на водата
If the BCF is to be based on the parent substance, the major metabolites should be characterised, as a minimum at the end of the uptake phase (cf. paragraph 6).
По време на изпитването разтвореният кислород, ТОС, рН и температурата следва да се измерват във всички съдове за изпитване и в съдовете с контроли.
Major metabolites are those representing ≥ 10 % of total residues in fish tissues, those representing ≥ 5 % at two consecutive sampling points, those showing increasing levels throughout the uptake phase, and those of known toxicological concern.
Общата твърдост и соленост (ако е относимо) се измерват в контролата (контролите) и в един съд.
If the BCF for the whole fish in terms of total radiolabelled residues is ≥ 500, it may be advisable — and for certain categories of substances such as pesticides strongly recommended — identifying and quantifying major metabolites.
Ако се изпитват две или повече концентрации, измерват се тези параметри, които са с по-висока (или с най-високата) концентрация.
Quantification of such metabolites may be required by some regulatory authorities.
Като минимум разтвореният кислород и солеността (ако е относимо) следва да се измерят три пъти — в началото, около средата и в края на периода на поглъщане — и веднъж седмично в периода на очистване.
If degradates representing ≥ 10 % of total radiolabelled residues in the fish tissue are identified and quantified, then it is also recommended to identify and quantify degradates in the test water.
ТОС следва да се измерва в началото на изпитването (24 часа и 48 часа преди началото на изпитването във фазата на поглъщане) преди добавянето на рибата и най-малко веднъж седмично по време както на фазата на поглъщане, така и на фазата на очистване.
Should this not be feasible, this should be explained in the report.
Температурата следва да се измерва ежедневно, рН — в началото и края на всеки период, а твърдостта — веднъж за всяко изпитване.
The concentration of the test substance should usually be determined for each weighed individual fish.
Желателно е температурата да се контролира непрекъснато поне в един съд.
If this is not possible, pooling of the samples on each sampling occasion may be done but pooling does restrict the statistical procedures which can be applied to the data, so an adequate number of fish to accommodate the desired pooling, statistical procedure and power should be included in the test.
Пробовземане и анализ на рибата и водата
References (27) and (28) may be used as an introduction to relevant pooling procedures.
График за пробовземане на рибата и водата
BCF should be expressed as normalised to a fish with a 5 % lipid content (based on wet weight) in addition to that derived directly from the study (cf .paragraph 21), unless it can be argued that the test substance does not accumulate primarily in lipids.
Проба от водата от камерите за изпитване за определяне на концентрацията на изпитваното вещество се взема преди добавянето на рибата и по време както на фазата на поглъщане, така и на фазата на очистване.
The lipid content of the fish should be determined on each sampling occasion if possible, preferably on the same extract as that produced for analysis for the test substance, since the lipids often have to be removed from the extract before it can be analysed chromatographically.
Водата трябва да се пробовзема преди хранене, едновременно с пробовземането на рибата.
However, analysis of test substances often requires specific extraction procedures which might be in contradiction to the test methods for lipid determination.
За осигуряване на стабилни концентрации след въвеждането на рибата може да бъде полезно по-често вземане на проби.
In this case (until suitable non-destructive instrumental methods are available), it is recommended to employ a different strategy to determine the fish lipid content (cf. paragraph 56).
Концентрациите на изпитваното вещество следва да бъдат определени по време на фазата на поглъщане, за да се провери съответствието с критериите за валидност (точка 24).
Suitable methods should be used for determination of lipid content (20).
Ако анализите на водните проби в началото на фазата на очистването показват, че изпитваното вещество не се открива, това може да се използва като обосновка да не се измерва водата за изпитването и контролата на вода за изпитваното вещество за останалата част от фазата на очистването.
The chloroform/methanol extraction technique (29) may be recommended as standard method (30), but the Smedes-method (31) is recommended as an alternative technique.
Рибите следва да бъдат пробовзети най-малко пет пъти през фазата на поглъщане и поне четири пъти през фазата на очистване за изпитваното вещество.
This latter method is characterised by a comparable efficiency of extraction, high accuracy, the use of less toxic organic solvents and ease of performance.
Тъй като при някои случаи ще бъде трудно да се пресметне една сравнително точна оценка на стойността на BCF на база на този брой на пробите (особено когато има показания за кинетика, различна от обикновеното поглъщане от първи порядък, или от кинетиката на очистването), може би е препоръчително да се вземат проби по-често и в двата периода (срв. допълнение 4).
Other methods for which accuracy compares favourably to the recommended methods could be used if properly justified.
Липидното съдържание се определя върху същия биологичен материал, който се използва за определяне на концентрацията на изпитваното вещество, поне в началото и в края на фазата на поглъщане и в края на фазата на очистване.
It is important to give details of the method used.
Ако това не е осъществимо, следва да се вземат проби от поне три отделни риби, за да се определи съдържанието на липиди за всяка от еднаквите три времеви точки.
Fish growth measurement
Броят на рибите за съд в началото на опита следва да бъде съответно коригиран [33].
At the start of the test, five to ten fish from the stock population need to be weighed individually and their total length measured.
Като алтернатива, ако не бъдат открити значими количества от изпитваното вещество в контролните риби (т.е. рибите от изходната популация), контролните риби от изпитването могат да се анализират само за липидно съдържание, а анализът на изпитваното вещество в изпитваната група (групи) (и свързаните с това стойности на константата на скоростта на поглъщане, константата на скоростта на очистване и BCF) може да се коригира за промени в зависимост от липидното съдържание в контролната група по време на изпитването [34].
These can be the same fish used for lipid analysis (cf. paragraph 56).
Мъртвите или болните риби не следва да се анализират за изпитваното вещество или за концентрацията на липиди.
The weight and length of fish used for each sampling event from both test and control groups should be measured before chemical or lipid analysis is conducted.
Пример за приемлив график за пробовземане е даден в допълнение 4.
The measurements of these sampled fish can be used to estimate the weight and length of fish remaining in the test and control tanks (cf. paragraph 45).
Лесно могат да се изчислят и други графици, с помощта на други допускания за стойности на KOW, за да се изчисли времето за експозиция за 95 % поглъщане (вж. допълнение 5 за изчисления).
Treatment of results
Вземането на проби следва да продължи по време на фазата на поглъщане, докато се установи стационарно състояние (вж. допълнение 1, Определения и мерни единици) или до прекратяването по друг начин на фазата на поглъщане (след 28 или 60 дни, срв. точки 37 и 38).
The uptake curve of the test substance should be obtained by plotting its concentration in/on fish (or specified tissues) in the uptake phase against time on arithmetic scales.
Преди началото на фазата на очистването рибата следва да се прехвърли в чисти съдове.
If the curve has reached a plateau, that is, become approximately asymptotic to the time axis, the steady-state BCF (BCFSS) should be calculated from:
Пробовземане и приготвяне на пробите
at steady-statemean
Следва да се получат водни проби за анализ, например чрез източване през инертни тръбички от централна точка в камерата за изпитване.
The development of Cf may be influenced by fish growth (cf. paragraphs 72 and 73).
Както изглежда, нито филтруването, нито центрофугирането разделят винаги фракцията от изпитваното вещество, която не е бионалична, от бионаличната фракция.
The mean exposure concentration (Cw) is influenced by variation over time.
Ако се прилага техника на разделяне, с оглед на трудностите, свързани с бионаличността, в протокола от изпитването следва винаги да се представя обосновка за техниката за разделянето или валидиране на тази техника (25).
It can be expected that a time-weighted average concentration is more relevant and precise for bioaccumulation studies, even if variation is within the appropriate validity range (cf. paragraph 24).
Особено за силно хидрофобни вещества (т.е. вещества с log KOW > 5) (12) (26), при които може да се получи адсорбция върху филтърната матрица или съдовете за центрофугиране, пробите следва да не се подлагат на тези третирания.
A time weighted average (TWA) water concentration can be calculated according to Appendix 5, section 1.
Вместо това следва да се вземат мерки за поддържане на съдовете възможно най-чисти (срв. точка 46) и общото съдържание на органичен въглерод следва да се контролира и през двете фази — на поглъщане и на очистване (срв. точка 53).
The kinetic bioconcentration factor (BCFK) should be determined as the ratio k1/k2, the two first order kinetic rate constants.
С цел да се избегнат евентуалните проблеми с намалената бионаличност, за малко разтворими и силно хидрофобни вещества за пробовземане могат да се използват техники с твърдофазна микроекстракция.
Rate constants k1 and k2 and BCFK can be derived by simultaneously fitting both the uptake and the depuration phase.
Пробовзетите риби следва да бъдат незабавно умъртвени чрез най-подходящия и хуманен метод (за измервания на цяла риба следва да не се извършват други процедури освен изплакване с вода (вж. точка 28) и изсушаване на рибата с помощта на попивателна хартия).
Alternatively, k1 and k2 can be determined sequentially (see Appendix 5 for a description and comparison of these methods).
Извършва се претегляне и измерване на цялата дължина [35].
The depuration rate constant (k2) may need correction for growth dilution (cf. paragraphs 72 and 73).
Измереното тегло и дължината на всяка отделна риба следва да бъдат свързани с концентрацията на анализираното вещество (и липидно съдържание, ако е приложимо), например с помощта на уникален идентификационен код за всяка пробовзета риба.
If the uptake and/or depuration curve is obviously not first order, then more complex models should be employed (see references in Appendix 5 and advice from a biostatistician and/or pharmacokineticist sought.
Желателно е рибата и водата да се анализират веднага след пробовземането, с цел да се избегне разграждането или други загуби, и да се изчислят приблизителни константи на скоростите на поглъщане и на очистване, докато продължава изпитването.
Fish weight/length data
Незабавните анализи също така избягват закъснението при определяне на достигането на плато (стационарно състояние).
Individual fish wet weights and total lengths for all sampling intervals are tabulated separately for test and control groups during the uptake (including stock population for start of uptake) and depuration phases.
Ако не се извършат незабавни анализи, пробите следва да се съхраняват чрез подходящ метод.
In each individual fish the measured weight and length should be linked to the analysed chemical concentration, for example using a unique identifier code for each sampled fish.
Преди началото на изследването следва да бъде получена информация относно подходящия метод за съхранение на конкретното изпитвано вещество — например дълбоко замразяване, съхранение при 4 °C, извличане и др.
Weight is the preferred measure of growth for the purposes of correcting kinetic BCF values for growth dilution (see paragraph 73 and Appendix 5 for the method used to correct data for growth dilution).
Продължителността на съхраняването трябва да бъде избрана така, че да се гарантира, че веществото не се е разградило по време на съхранението.
Growth-Dilution Correction and Lipid Normalisation
Качество на метода за анализ
Fish growth during the depuration phase can lower measured chemical concentrations in the fish with the effect that the overall depuration rate constant (k2) is greater than would arise from removal processes (e.g. respiration, metabolism, egestion) alone.
Понеже цялата процедура се обуславя по същество от точността, прецизността и чувствителността на метода за анализ, използван за изпитваното вещество, се проверява опитно дали точността, прецизността и възпроизводимостта на анализа на веществото, а също и аналитичният добив на изпитваното вещество от водата и рибата са задоволителни за конкретния метод.
Kinetic bioconcentration factors should be corrected for growth dilution.
Това следва да бъде част от предварителните изпитвания.
A BCFSS will also be influenced by growth, but no agreed procedure is available to correct a BCFSS for growth.
Също така се проверява дали изпитваното вещество не е откриваемо в използваната вода за разреждане.
In cases of significant growth, the BCFK, corrected for growth (BCFKg), should also be derived as it may be a more relevant measure of the bioconcentration factor.
Ако е необходимо, коригират се стойностите на концентрацията на изпитваното вещество във водата и рибата, получени при изпитването за стойностите на аналитичния добив и фоновите стойности на контролите.
Lipid contents of test fish (which are strongly associated with the bioaccumulation of hydrophobic substances) can vary enough in practice such that normalisation to a set fish lipid content (5 % w/w) is necessary to present both kinetic and steady-state bioconcentration factors in a meaningful way, unless it can be argued that the test substance does not primarily accumulate in lipid (e.g. some perfluorinated substances may bind to proteins).
С пробите вода и риба следва да се борави по начин, който намалява до минимум замърсяването и загубите (които, например, могат да се получат при адсорбция върху устройството за вземане на проба).
Equations and examples for these calculations can be found in Appendix 5.
Анализ на проби риба
To correct a kinetic BCF for growth dilution, the depuration rate constant should be corrected for growth.
Ако при изпитването се използват изотопно белязани материали, може да се анализира общото количество изотопно белязани материали (т.е. базово вещество и метаболити) или пробите може да се почистят така, че базовото съединение да може да се анализира отделно.
This growth-corrected depuration rate constant (k2g) is calculated by subtracting the growth rate constant (kg, as obtained from the measured weight data) from the overall depuration rate constant (k2).