natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Ако измерването на концентрацията на веществото в тъкани (Cf1) се извършва в момента, в който експозицията приключва (t1) и концентрацията в тъканите (Cf2) се измерва отново след изтичането на определен период от време (t2), константата на скоростта на очистване (k2) се изчислява, като се използва уравнение A5.22 от допълнение 5.
The flask used to prepare the dosed oil should be flushed with two small aliquots of oil and these added to the bulb to make sure all dissolved test substance is transferred.
След това константата на скоростта на поглъщане k1 може да се определи по алгебричен път, като се използва уравнение A5.23 от допълнение 5 (където Cf е равно на Cf1 и t е равно на t1) (1).
To ensure complete dissolution/dispersion in the oil (or if more than one test substance is being used in the study), a micro-stirrer is added, the flask stoppered and the mixture stirred rapidly overnight.
По този начин кинетичният коефициент на биоконцентрация за плана със свеждане до минимум на експозицията (определен като BCFKm, за да се разграничава от кинетичните коефициенти на биоконцентрация, определени с помощта на други методи) е:
An appropriate quantity of fish diet (usually in pellet form) for the test is added to the bulb, and the bulb's contents are mixed homogeneously by continuously turning the glass bulb for at least 30 minutes, but preferably overnight.
[Уравнение A6.2]
Thereafter, the spiked food is stored appropriately (e.g. refrigerated) to ensure test substance stability in the food until use.
Концентрациите или резултатите следва да бъдат коригирани за понижаване на концентрацията в резултат от растеж и нормализирани към съдържание на липиди в рибите, равно на 5 %, както е описано в допълнение 5.
Fish food preparation with an organic solvent
BCFSS при свеждане до минимум на експозицията се изчислява в края на фазата на поглъщане, като се се допуска, че е достигнато стационарно състояние.
An appropriate quantity of test substance (by molar mass or specific radioactivity) sufficient to achieve the target dose is dissolved in a suitable organic solvent (e.g. cyclohexane or acetone; 10-40 ml, but a greater volume if necessary depending on the quantity of food to spike).
Това може само да бъде допуснато, тъй като броят на точките на пробовземане не е достатъчен за доказването му.
Either an aliquot, or all (added portion wise), of this solution is mixed with the appropriate mass of fish food sufficient for the test to achieve the required nominal dose level.
минимизиранBCFSS
The food/test substance can be mixed in a stainless steel mixing bowl and the freshly-dosed fish food left in the bowl in a laboratory hood for two days (stirred occasionally) to allow the excess solvent to evaporate, or mixed in a rotary evaporator bulb with continuous rotation.
[Уравнение A6.2]
The excess solvent can be “blown” off under a stream of air or nitrogen if necessary.
Концентрация в риби при допускане за стационарно състояние в края на поглъщането (mg·kg– 1 мокро тегло).
Care should be taken to ensure that the test substance does not crystallise as the solvent is removed.
Концентрация във вода при допускане за стационарно състояние в края на поглъщането (mg l– 1).
The spiked diet should be stored under conditions (e.g. refrigeration) that maintain stability of the test substance within the feed mix until use.
Допълнение 7
CALCULATION OF ASSIMILATION EFFICIENCY AND BIOMAGNIFICATION FACTOR To calculate the assimilation efficiency, the overall depuration rate constant should first be estimated according to section 4 of Appendix 5 (using the “sequential method”, i.e. standard linear regression) using mean sample concentrations from the depuration phase.
УРАВНЕНИЯ ЗА ИЗПИТВАНЕТО С ЕКСПОЗИЦИЯ ЧРЕЗ ХРАНИТЕЛНИЯ РЕЖИМ:
The feeding rate constant, I, and uptake duration, t, are known parameters of the study.
Пример за количество на съставките в подходяща налична в търговската мрежа храна за риби
Cfood, the mean measured concentration of the test substance in the food is a measured variable in the study.
Примери за техники на добавяне на вещество в храната
C0,d, the test substance concentration in the fish at the end of the uptake phase, is usually derived from the intercept of a plot of ln(concentration) vs. depuration day.
Изчисляване на ефикасността на усвояването и на коефициента на биомултипликация
The substance assimilation efficiency (a, absorption of test substance across the gut) is calculated as: α C 0,d k 2 I C food 1 1 e k 2 t [Equation A7.1] where: C0,d derived concentration in fish at time zero of the depuration phase (mg kg– 1); k2 overall (not growth-corrected) depuration rate constant (day– 1), calculated according to equations in Appendix 5, Section 3; I food ingestion rate constant (g food g– 1 fish day– 1); Cfood concentration in food (mg kg– 1 food); t duration of the feeding period (day) However, the feeding rate, I, used in the calculation may need to be adjusted for fish growth to give an accurate assimilation efficiency, a.
Корекция за липиди
In a test where fish grow significantly during the uptake phase (in which no correction of feed quantities is made to maintain the set feeding rate), the effective feeding rate as the uptake phase progresses will be lower than that set, resulting in a higher 'real' assimilation efficiency.
Оценка на разликите между измерената концентрация във времева точка нула (C0,m) и получената концентрация във времева точка нула (C0,d)
(Note this is not important for the overall calculation of BMF as the I terms effectively cancel out between Equation A7.1 and Equation A7.4).
Насоки за изпитвани вещества с много бързо очистване
The mean feeding rate corrected for growth dilution, Ig, can be derived in several ways, but a straightforward and rigorous one is to use the known growth rate constant (kg) to estimate the test fish weights at time points during the uptake phase, i.e.:
ПРИМЕР ЗА КОЛИЧЕСТВО НА СЪСТАВКИТЕ В ПОДХОДЯЩА НАЛИЧНА В ТЪРГОВСКАТА МРЕЖА ХРАНА ЗА РИБИ
Wf,0 ek g t
Основна съставка
[Equation A7.2] where Wf(t) mean fish weight at uptake day t Wf,0
рибно брашно
As the feeding rate was set based on Wf,0, the effective feeding rate for each day of uptake can be calculated using these two weight values.
Суров белтък
The growth-corrected feeding rate, Ig (g food g-1 fish day– 1), to use instead of I in cases of rapid growth during the uptake phase, can then be calculated as
Сурови мазнини
[Equation A7.3]
Сурови влакнини
Once the assimilation efficiency has been obtained, the BMF can be calculated by multiplying it with the feeding rate constant I (or Ig, if used to calculate α) and dividing the product by the overall depuration rate constant k2:
Влажност
[Equation A7.4]
Пепелно съдържание
The growth-corrected biomagnification factor should also be calculated in the same way, using the growth corrected depuration rate constant (as derived according to section 7 in Appendix 5).
ПРИМЕРИ ЗА ТЕХНИКИ НА ДОБАВЯНЕ НА ВЕЩЕСТВО В ХРАНАТА
Again, if Ig has been used to calculate α, it should also be used here instead of I:
Общи положения
[Equation A7.5]
Контролните хранителни режими следва да бъдат приготвяни по съвсем същия начин като хранителния режим с добавка, но в отсъствие на изпитваното вещество.
assimilation efficiency (absorption of test substance across the gut);
За проверка на концентрацията на третирания хранителен режим следва да бъдат извлечени с подходящ метод за извличане в три повторения проби от дозираната храна, и следва да бъде измерена концентрацията или радиоактивността на изпитваното вещество в извлеците.
overall (not growth-corrected) depuration rate constant (day– 1), calculated according to equations in Appendix 5, Section 3;
Следва да бъдат доказани високи аналитични добиви (> 85 %) с малко вариране между пробите (три концентрации на веществото, измерени в проби, взети в началото на изпитването, не трябва да се отклоняват с повече от ± 15 % от средната стойност).
growth-corrected depuration rate constant (day– 1);
По време на изпитването чрез хранителния режим, три проби от хранителния режим за анализ следва да бъдат събрани в ден 0 и в края на фазата на поглъщане за определяне на съдържанието на изпитваното вещество в хранителния режим.
food ingestion rate constant (g food g– 1 fish day– 1);
Приготвяне на храна за риби с течен материал за изпитване (чист)
The growth-corrected half-life (t1/2) is calculated as follows.
Целевата номинална изпитвана концентрация в третираната храна за риби се определя например на 500 μg изпитвано вещество/g храна.
[Equation A7.6]
Подходящото количество (по моларна маса или специфична радиоактивност) чисто изпитвано вещество се добавя към известна маса храна за риби в стъклен буркан или колба за ротационен изпарител.
The substance assimilation efficiency from the diet can also be estimated if tissue residues are determined during the linear phase of the uptake phase (between days 1 and 3).
Масата на храната за риби следва да бъде достатъчна за продължителността на фазата на поглъщане (като се вземе предвид необходимостта от увеличаване на количествата на всяко подаване на храна поради растежа на рибите).
In this case the substance assimilation efficiency (α) can be determined as follows
Храната за риби/изпитваното вещество се смесват за една нощ чрез бавно обръщане в барабан (например чрез използване на смесител „Roto-Rack“ или чрез въртене, ако се използва колбата за ротационен изпарител).
[Equation A7.7]
Хранителният режим с добавка трябва да се съхранява при условия, които запазват стабилността на изпитваното вещество в рамките на фуражния микс (например с охлаждане) до използването.
the concentration of test substance in the fish at time t (mg kg– 1 wet weight).
Приготвяне на храна за риби с носител царевично или рибено масло
LIPID CORRECTION
Твърдите изпитвани вещества следва да бъдат стрити в хаван до фин прах.
If lipid content was measured on the same fish as chemical analysis for all sampling intervals, then individual concentrations should be corrected on a lipid basis and the ln(concentration, lipid corrected) plotted against depuration (day) to give C0,d and k2.
Течните вещества за изпитването могат да се добавят директно в царевичното или рибеното масло.
Assimilation efficiency (Equation A7.1) can then be calculated on a lipid basis, using Cfood on a lipid basis (i.e. Cfood is multiplied by the mean lipid fraction of the food).
Изпитваното вещество се разтваря в определено количество царевично или рибно масло (напр.
Subsequent calculation using Equation A7.4 and Equation A7.5 will give the lipid-corrected (and growth-dilution corrected) BMF directly.
5-15 ml).
Otherwise, the mean lipid fraction (w/w) in the fish and in the food are derived for both treatment and control groups (for food and control group fish this is usually from data measured at exposure start and end; for treatment group fish this is usually from data measured at end of exposure only).
Дозираното масло се прехвърля количествено в колба за ротационен изпарител с подходящ размер.
In some studies, fish lipid content may increase markedly; in such cases it is more appropriate to use a mean test fish lipid concentration calculated from the measured values at the end of exposure and end of depuration.
Флаконът, използван за приготвяне на дозираното масло, трябва да се изплакне с две малки аликвотни части от масло и те следва да се добавят към колбата, за да се гарантира, че е прехвърлено цялото количество разтворено изпитвано вещество.
In general, data from the treatment group only should be used to derive both of the lipid fractions.
За да се осигури пълно разтваряне/диспергиране в маслото (или ако в изследването се използва повече от едно изпитвано вещество) се добавя микро-бъркалка, колбата се запушва и сместа се разбърква бързо през нощта.
The lipid-correction factor (Lc) is calculated as:
Подходящо количество хранителен режим за риби за изпитването (обикновено във форма на пелети) се добавя към колбата и съдържанието на колбата се хомогенизира чрез непрекъснато обръщане на колбата в продължение най-малко на 30 минути, но за предпочитане през нощта.
[Equation A7.8]
След това храната с добавка се съхранява по подходящ начин (напр. с охлаждане), за да се гарантира стабилността на изпитваното вещество в храната, докато тя бъде използвана.
where Lfish and Lfood are the mean lipid fractions in fish and food, respectively.
Приготвяне на храна за риби с органичен разтворител
The lipid-correction factor is used to calculate the lipid-corrected biomagnification factor (BMFL):
Подходящо количество от изпитваното вещество (по моларна маса или специфична радиоактивност), достатъчно за достигането на прицелната доза, се разтваря в подходящ органичен разтворител (напр. циклохексан или ацетон; 10-40 ml, но при необходимост и в по-голям обем, в зависимост от количеството храна, към която трябва да се добави добавката).
[Equation A7.9]
Аликвотна част или цялото количество (добавяно на порции) от този разтвор се смесва с подходяща маса храна за риби, достатъчна при изпитването да се достигне изискваното номинално ниво на доза.
EVALUATION OF DIFFERENCES BETWEEN MEASURED TIME ZERO CONCENTRATION (C0,M) AND DERIVED TIME ZERO CONCENTRATION (C0,D)
Храната/изпитвано вещество могат да бъдат смесени в смесителна купа от неръждаема стомана и прясно дозираната храна за риби може да се остави в купата в лабораторна камина в продължение на два дни (като се разбърква от време на време), за да се позволи на излишъка от разтворителя да се изпари, или се смесват чрез непрекъсната ротация в колба за ротационен изпарител.
The measured time zero concentration (C0,m) and derived time zero concentration (C0,d) should be compared.
При необходимост излишъкът от разтворител може да бъде „издухан“ със струя въздух или азот.
If they are very similar, then this supports the first order model used to derive the depuration parameters.
Трябва да се вземат мерки, за да се гарантира, че изпитваното вещество не образува кристали при отстраняването на разтворителя.
In some studies there may be a marked difference between the derived time zero value, C0,d, and the mean measured time zero concentration.
Хранителният режим с добавка трябва да се съхранява при условия, които запазват стабилността на изпитваното вещество в рамките на фуражния микс до използването (например с охлаждане).
C0,m (see last bullet point of paragraph 159 of this test method).
ИЗЧИСЛЯВАНЕ НА ЕФИКАСНОСТТА НА УСВОЯВАНЕТО И НА КОЕФИЦИЕНТА НА БИОМУЛТИПЛИКАЦИЯ
If C0,d is very much lower than C0,m (C0,d << C0,m), the difference may suggest the presence of undigested spiked food in the gut.
За изчисляване на ефикасността на усвояването първо трябва да бъде оценена общата константа на скоростта на очистването, в съответствие с раздел 4 от допълнение 5 (с използване на „последователния метод“, т.е. стандартна линейна регресия), като се използват средните концентрации на пробите от фазата на очистването.
This may be tested experimentally by conducting separate analysis on the excised gut if additional (whole fish) samples were taken and stored at the end of the uptake phase.
Константата на скоростта на хранене, I, и продължителността на поглъщането, t, са известни параметри за изследването.
Otherwise, if a statistically valid outlier test applied to the depuration phase linear regression indicates that the first sample point of depuration is erroneously elevated, carrying out the linear regression to derive k2 but omitting the first depuration concentration point may be appropriate.
Измерената средна концентрация на изпитваното вещество в храната, Cfood, е измервана променлива при изпитването.
In such cases, if the uncertainty in the linear regression is greatly decreased, and it is clear that approximately first order depuration kinetics were obeyed, it may be appropriate to use the resulting C0,d and k2 values in the assimilation efficiency calculation.
C 0,d
This should be fully justified in the report.
k 2
It is also possible that non-first order kinetics were operating in the depuration phase.
C food
If this is likely (i.e. the natural logarithm transformed data appear to follow a curve compared with the straight-line linear regression plot), then the calculations of k2 and C0,d are unlikely to be valid and the advice of a biostatician should be sought.
k 2 t [Уравнение A7.1] където:
If C0,d is very much higher than the measured value (C0,d >> C0,m) this may indicate: that the substance was depurated very fast (i.e. sampling points approached the limit of quantification of the analytical method very early in the depuration phase, cf.
C0,d получената концентрация в рибите във времева точка нула от фазата на очистване (mg kg– 1);
Section 6 below); that there was a deviation from first order depuration kinetics; that the linear regression to derive k2 and C0,d is flawed; or that a problem with the measured concentrations in the study occurred at some sampling time points.
(Следва да се отбележи, че това не е важно за общото изчисляване на BMF, тъй като членовете I в действителност се съкращават между уравнения A7.1 и A7.4).
In such cases the linear regression plot should be scrutinised for evidence of samples at or near the limit of quantification, for outliers and for obvious curvature (suggestive of non-first order kinetics), and highlighted in the report.
Средната скорост на хранене, коригирана за понижаване на концентрацията в резултат от растеж, Ig, може да бъде получена по няколко начина, но лесен и строг начин е да се използва известната константа на скоростта на растежа (kg) с цел да се определят теглата на изпитваните риби в определени времеви точки от фазата на поглъщане, т.е.: Wf t Wf,0 ek g t [Уравнение A7.2] където Wf(t) средно тегло на рибата в деня t от фазата на поглъщане Wf,0 средно тегло на рибата в началото на опита По този начин може да се оцени (поне) средното тегло в последния ден от експозицията (Wf,end-of-uptake).
Any subsequent re-evaluation of the linear regression to improve estimated values should be described and justified.
Тъй като скоростта на храненето е основана на Wf,0, действителната скорост на храненето за всеки ден от поглъщането може да бъде изчислена с помощта на тези две стойности за теглото.
If marked deviation from first order kinetics is observed, then the calculations of k2 and C0,d are unlikely to be valid and the advice of a biostatician should be sought.
След това скоростта на хранене, коригирана за растеж, Ig, (g храна g– 1 риба ден– 1), която да се използва вместо I в случаи на бърз растеж през фазата на поглъщане, може да бъде изчислена като I g I W f,0 W f,end-of-uptake [Уравнение A7.3] След получаването на ефикасността на усвояването може да се изчисли BMF, като се умножи тя по константата на скоростта на поглъщане I (или Ig, ако се използва за изчисляване на α) и произведението се раздели на общата константа на скоростта на очистването k2: BMF I α k 2 [Уравнение A7.4]
GUIDANCE FOR VERY FAST DEPURATING TEST SUBSTANCES
Коригираният за растеж коефициент на биомултипликация също следва да се изчислява по същия начин, с използване на коригираната за растеж константа на скоростта на очистване (получена съгласно раздел 7 от допълнение 5).
As discussed in paragraph 129 of the test method, some substances may depurate so fast that a reliable time zero concentration, C0,d, and k2 cannot be derived because in samples very early in the depuration phase (i.e. from the second depuration sample onwards) the substance is effectively no longer measured (concentrations reported at the limit of quantification).
Отново, ако за да се изчисли α е използван Ig, той следва да се използва също и тук вместо I:
This situation was observed in the ring test carried out in support of this test method with benzo[a]pyrene, and has been documented in the validation report for the method.
[Уравнение A7.5]
In such cases linear regression cannot be carried out reliably, and is likely to give an unrealistically high estimate of C0,d, resulting in an apparent assimilation efficiency much greater than 1.
ефикасност на усвояването (абсорбция на изпитваното вещество в червата);
It is possible to calculate a conservative estimate of k2 and an “upper bound” BMF in these instances.
обща (която не е коригирана за растеж) константа на скоростта на очистване (ден– 1), изчислена съгласно уравненията в допълнение 5, раздел 3;
Using those data points of the depuration phase where a concentration was measured, up to and including the first “non-detect” concentration (concentration set at limit of quantification), a linear regression (using natural logarithm transformed concentration data against time) will give an estimate of k2.
коригирана за растеж константа на скоростта на очистване (ден– 1);
For these sorts of cases this is likely only to involve two data points (e.g. sample days 1 and 2 of depuration) and then k2 can be estimated using Equation A5.22 in Appendix 5.
константа на скоростта на поглъщане на храна (g храна g– 1 риба ден– 1);
This k2 estimate can be used to estimate an assimilation efficiency according to equation A7.1, substituting the C0,d value in the equation with the measured time zero concentration (C0,m) in cases where C0,d is clearly estimated to be much higher than could have been achievable in the test.
Коригираният за растеж период на полуразграждане (t1/2) се изчислява, както следва.
If C0,m was not measureable, then the limit of detection in fish tissue should be used.
[Уравнение A7.6]
If, in some cases, this gives a value of α > 1, then the assimilation efficiency is assumed to 1 as a “worst case”.
Ефикасността на усвояване на веществото от хранителния режим също може да се оцени, ако са определени остатъци в тъканите по време на етапа с линейна зависимост от фазата на поглъщане (между дни 1 и 3).
The maximum BMFK can then be estimated using Equation A7.4, and should be quoted as a “much less than” (<<) value.
В този случай ефикасността на усвояване на веществото (α) може да се определи, както следва:
For example, for a study carried out with a feeding rate of 3 % and a depuration half-life less than 3 days, and a “worst case” α of 1, the BMFK is likely to be below about 0,13.
[Уравнение A7.7]
Given the purpose of this estimation and the fact that values will be conservative in nature, it is not necessary to correct them for growth dilution or fish and food lipid content.
концентрация на изпитваното вещество в рибата във време t (mg kg– 1 мокро тегло).
In some regions it may only be possible to obtain fish food with a lipid concentration that falls far short of this upper limit.
КОРЕКЦИЯ ЗА ЛИПИДИ
In such cases studies should be run with the lower lipid concentration in the food as supplied, and the feeding rate adjusted appropriately to maintain fish health.
Ако съдържанието на липиди е измерено в същите риби, които са използвани за химичен анализ, във всички интервали на пробовземане, индивидуалните концентрации следва да бъдат коригирани на база липиди и ln(концентрация, коригирана за липиди), начертана спрямо (ден от) очистването, за получаване на C0,d и k2.
Diet lipids should not be artificially increased by the addition of excess oil.
След това може да се изчисли ефикасността на усвояване (Уравнение A7.1) на база липиди, използвайки Cfood на база липиди (т.е.
Appendix 8
Cfood се умножава по средната липидна фракция в храната).
APPROACHES TO ESTIMATE TENTATIVE BCFS FROM DATA COLLECTED IN THE DIETARY EXPOSURE STUDY
Последващо изчисление с използване на уравнения A7.4 и A7.5 ще даде директно BMF, коригиран за липиди (и за понижаване на концентрацията в резултат от растеж).
The dietary method is included in this test method for the bioaccumulation testing of substances that cannot in practice be tested using the aqueous exposure method.
В противен случай се получават средните липидни фракции (w/w) в рибата и в храната, както за третираната, така и за контролната група (за храната и за контролната група риби това обикновено е от данните, измерени в началото и края на експозицията; за третираната група риби това обикновено е от данните, измерени само в края на експозицията).
The aqueous exposure method gives a bioconcentration factor, whereas the dietary method leads directly to information on feeding biomagnification potential.