natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Използването на средата и на условията на изпитване, описани в настоящия метод на изпитване, позволяват постигането на този критерий с помощта на статичен или полустатичен режим на изпитване.
Warm and/or cool white fluorescent lighting should be used to provide light irradiance in the range of about of 100-150 μE m–2 s–1 when measured as a photosynthetically active radiation (400-700 nm) at points the same distance from the light source as the bottom of the test vessels (equivalent ca. 6000 to 9000 lux) and using a light-dark cycle of 16:8 h.
Средната стойност на коефициента на вариация на добива, въз основа на измервания на свежото тегло на поника (т.е. от началото до края на изпитването), и допълнителните измервани променливи (вж. точка 37) в контролните култури не надвишават 35 % между повторенията.
The method of light detection and measurement, in particular the type of sensor, will affect the measured value.
Повече от 50 % от повторенията на контролната група се съхраняват в стерилна среда през 14-дневния срок на експозицията, което означава без видимо замърсяване с други организми като водорасли, гъбички и бактерии (бистър разтвор).
Spherical sensors (which respond to light from all angles above and below the plane of measurement) and “cosine” sensors (which respond to light from all angles above the plane of measurement) are preferred to unidirectional sensors, and will give higher readings for a multi-point light source of the type described here.
Забележка: Насоки за това как да се направи оценка на стерилността се предоставят в протокола от кръговото изпитване (4).
The temperature in the test vessels should be 23 ± 2 °C.
РЕФЕРЕНТЕН ХИМИКАЛ
Additional care is needed on pH drift in special cases such as when testing unstable chemicals or metals; the pH should remain in a range of 6-9.
Референтните химикали, като 3,5-дихлорофенола, използвани в кръговото изпитване (4), могат да се изпитват за проверка на процедурата на изпитване; данните от кръговото изпитване показват, че средните стойности на ЕС50 за 3,5-дихлорфенола при различните зависими променливи (вж. точки 37—41 от настоящия метод на изпитване) са между 3,2 и 6,9 mg/l (вж. протокола от кръговото изпитване за подробности относно доверителния интервал за тези стойности).
See (5) for further guidance.
Желателно е референтният химикал да се изпитва най-малко два пъти годишно или, когато изпитването се извършва по-рядко, да се извършва едновременно с определянето на токсичността на изпитвания химикал.
The test is terminated 14 days after the plants are transferred into the test vessels.
Цялото оборудване в контакт със средата на изпитване следва да е направено от стъкло или друг химически инертен материал.
Measurements and analytical determinations
Стъклените съдове, използвани за отглеждане на култури и за изпитване, следва да бъдат почистени от химични замърсители, които биха могли да проникнат в средата на изпитване, както и да бъдат стерилни.
At the start of the test, the main shoot length of test organism is 2,5 cm (see paragraph 29); it is measured with a ruler (see Appendix 4) or by photography and image analysis.
Съдовете за изпитването следва да бъдат достатъчно високи, така че поникът в контролните съдове да може да расте във водна среда, без да достига повърхността на изпитваната среда в края на изпитването.
The main shoot length of test organism appearing normal or abnormal needs to be determined at the beginning of the test, at least once during the 14-day exposure period and at test termination.
Препоръчва се използването на дебелостенни тръби за изпитване от боросиликатно стъкло без отвор, с вътрешен диаметър около 20 mm и дължина 250 mm, и алуминиеви капачки.
Note: As an alternative for those who do not have image analysis, if the workbench is sterilised prior to addition of plants to test vessels, a sterile ruler can also be used to measure the length of the main shoot at test initiation and during the test.
Тъй като модифицираната среда на Andrews съдържа захароза (която стимулира растежа на гъбички и бактерии), изпитваните разтвори трябва да се приготвят в стерилни условия.
Changes in plant development, e.g. in deformation in the shoots, appearance, indication of necrosis, chlorosis, break-up or loss of buoyancy and in root length and appearance, should be noted.
Всички течности, както и оборудването, се стерилизират преди употреба.
Significant features of the test medium (e.g. presence of undissolved material, growth of algae, fungi and bacteria in the test vessel) should also be noted.
Стерилизация се извършва посредством обработка с горещ въздух (210°С) в продължение на 4 часа или чрез обработка в автоклав в продължение на 20 минути при температура от 121°С.
In addition to determinations of main shoot length during the test, effects of the test chemical on three (or more) of the following measurement variables should be also assessed:
В допълнение непосредствено преди употреба всички колби, блюда, чаши и т.н., както и останалото оборудване, се подлагат на обработка с пламък върху стерилна работна маса.
Total lateral branches length
Културите и съдовете за изпитването не следва да се съхраняват заедно.
Total shoot length
Това се постига най-добре с използването на осигуряващи необходимите за растежа параметри на околната среда отделни климатични камери, инкубатори или помещения.
Total root length
Осветлението и температурата следва да могат да се контролират и да се поддържат на постоянно ниво.
Fresh weight
Изпитван организъм
Dry weight
Myriophyllum spicatum е подводно двусемеделно растение от семейство Haloragaceae.
Number of whorls
Между юни и август над водната повърхност се показват неразличими розово-бели цветове.
Note 1:
Растенията са вкоренени в земята чрез система от устойчиви коренища и се срещат в цялото северно полукълбо в еутрофни, но незамърсени и наситени на калций спокойни води с кален субстрат.
The observations made during the range-finding test could help in selecting relevant additional measurements among the six variables listed above.
Myriophyllum spicatum предпочита сладките води, но може да бъде открито и в бракични води.
Note 2:
За изпитването за токсичност без седименти са необходими стерилни растения.
The determination of the fresh and dry weights (parameters iv and v) is highly desirable.
Ако лабораторията за изпитване не разполага с редовни култури от Myriophyllum spicatum, стерилен растителен материал може да бъде получен от друга лаборатория или (нестерилен) растителен материал може да бъде взет на място или предоставен от търговски доставчик; ако растенията са събрани на място, следва да се предвиди извършване на таксономна проверка на вида.
Note 3:
Ако са събрани на място или предоставени от търговски доставчик, растенията следва да се стерилизират (1) и съхраняват в култура в същата среда, която се използва за изпитването, в течение на минимум осем седмици преди да се използват.
Due to the fact that sucrose and light (exposure of roots to light during the test) may have an influence on auxin (plant growth hormone) transport carriers, and that some chemicals may have an auxin-type mode of action, the inclusion of root endpoints (parameter iii) is questionable.
Полевите обекти за събиране на място на началните култури трябва да са без явни източници на замърсяване.
Note 4:
Необходимо е специално внимание, за да се гарантира, че при събирането на Myriophyllum spicatum на място е взет правилният вид, особено в региони, където растението може да се кръстоса с други видове от същия род.
The ring test results show high coefficients of variation (> 60 %) for the total lateral branch length (parameter i).
Ако са получени от друга лаборатория, те следва да се съхраняват по същия начин в течение на минимум три седмици.
Total lateral branch length is in any case encompassed within the total shoot length measurement (parameter ii) which shows more acceptable coefficients of variation of < 30 %.
За източника на растителен материал и вида, използвани в изпитването, следва винаги да се протоколира.
Note 5:
Качеството и еднородността на използваните за изпитването растения оказват значително влияние върху резултата от изпитването и поради това растенията следва да бъдат грижливо подбрани.
Resulting from the above considerations, the recommended main measurement endpoints are: total shoot length, fresh weight and dry weight (parameters ii, iv and v); parameter vi — number of whorls — is left to the experimenter's judgment.
Следва да се използват млади бързорастящи растения без видими увреждания или обезцветяване (хлороза).
Main shoot length and number of whorls have an advantage, in that they can be determined for each test and control vessel at the start, during, and at the end of the test by photography and image analysis, although a (sterile) ruler can also be used.
Подробности за подготвянето на изпитваните организми са дадени в допълнение 4.
Total lateral branches length, total root length (as a sum of all lateral branches or roots) and total shoot length (as a sum of main shoot length and total lateral branches length) can be measured with a ruler at the end of exposure.
Култивиране
The fresh and/or dry weight should be determined at the start of the test from a sample of the pre-culture representative of what is used to begin the test, and at the end of the test with the plant material from each test and control vessel.
За намаляване на честотата за поддържане на културата (например когато не са планирани изпитвания с Myriophyllum за известен период), културите могат да се съхраняват при намалено осветление и температура (50 μE m– 2 s– 1, 20 ± 2 °C).
Total lateral branches length, total shoot length, total root length, fresh weight, dry weight and number of whorls may be determined as follows:
Подробности за култивирането са дадени в допълнение 3.
The lateral branch length may be determined by measuring all lateral branches with a ruler at the end of exposure.
Най-малко от 14 до 21 дни преди изпитването достатъчно изпитвани организми се прехвърлят по стерилен начин в прясна стерилна среда и се култивират в течение на 14—21 дни при условията на изпитването като предкултура.
The total lateral branches length is the sum of all lateral branches of each test and control vessel.
Подробности за приготвянето на предкултури са дадени в допълнение 4.
The main shoot length may be determined by image analysis or using a ruler.
В система за изпитване без седименти се препоръчва използването само на една хранителна среда за Myriophyllum spicatum, както е описано в допълнение 2.
The total shoot length is the sum of the total lateral branches length and the main shoot length of each test and control vessel at the end of exposure.
За култивиране и изпитвания на Myriophyllum spicatum се препоръчва използването на модифицирана среда на Andrews, както е описано в (1).
The root length may be determined by measuring all roots with a ruler at the end of exposure.
Модифицираната среда на Andrews се подготвя от пет отделно приготвени изходни хранителни разтвора с добавка на 3 % захароза.
The total root length is the sum of all roots of each test and control vessel.
Подробности за приготвянето на средата са дадени в допълнение 2.
The fresh weight may be determined by weighing the test organisms at the end of exposure.
За получаването на разтворите за изпитване е необходима десетократна концентрация на модифицираната среда на Andrews (чрез разреждане, когато е уместно).
All plant material of each test and control vessel will be rinsed with distilled water, dabbed dry with cellulose paper.
Съставът на тази среда е даден в допълнение 2.
After this preparation the fresh weight will be determined by weighing.
Разтворите за изпитване обикновено се приготвят чрез разреждане на изходен разтвор.
The starting biomass (fresh weight) is determined on the basis of a sample of test organisms taken from the same batch used to inoculate the test vessels.
Изходните разтвори на изпитвания химикал обикновено се приготвят чрез разтваряне на химикала в деминерализирана (т.е. дестилирана или дейонизирана) вода.
After the preparations for the determination of the fresh weight the test organisms will be dried at 60 °C to a constant weight.
Хранителните вещества се добавят чрез използване на десетократната концентрация на модифицираната среда на Andrews.
This mass is the dry weight.
Стерилизацията на изходните разтвори на изпитвания химикал може да се извършва в автоклав при температура от 121°С в продължение на 20 минути или чрез стерилно филтруване, при условие че използваната техника за стерилизация не променя характеристиките на изпитвания химикал.
The starting biomass (dry weight) is determined on the basis of a sample of test organisms taken from the same batch used to inoculate the test vessels.
Изпитваните разтвори могат да се приготвят и в стерилна деминерализирана вода или среда при стерилни условия.
All whorls will be counted out along the main shoot.
При избора на процедурата на стерилизация на изходните разтвори на изпитвания химикал следва да се вземат под внимание термостабилността и адсорбцията върху различни повърхности.
Frequency of measurement and analytical determinations
Поради това се препоръчва изходните разтвори да се приготвят в стерилни условия, т.е. за разтварянето на изпитвания химикал да се използва стерилен материал в стерилни условия (напр. стерилизация чрез фламбиране, шкафове с ламинарен поток и т.н.) в стерилна вода.
If a static test design is used, the pH of each treatment should be measured at the beginning and at the end of the test.
Тази техника на приготвяне на стерилни изходни разтвори се използва както за веществата, така и за смесите.
If a semi-static test design is used, the pH should be measured in each batch of ‘fresh’ test solution prior to each renewal and also in the corresponding ‘spent’ solutions.
Най-високата изпитвана концентрация на изпитвания химикал обикновено не следва да надвишава неговата разтворимост във вода при условията за провеждане на изпитването.
Light intensity should be measured in the growth chamber, incubator or room at points in the same distance from the light source as the test organisms.
За изпитвани химикали с малка водоразтворимост може да е необходимо да се приготви концентриран изходен разтвор или химикалът да се диспергира, като се използва органичен разтворител или диспергиращо средство, за да се улесни добавянето на точни количества от изпитвания химикал към средата на изпитване и да се подпомогне неговото диспергиране и разтваряне.
Measurements should be made at least once during the test.
Следва да се положат всички усилия, за да се избегне използването на такива материали.
The temperature of the medium in a surrogate vessel held under the same conditions in the growth chamber, incubator or room should be recorded at least daily (or continuously with a data logger).
Не следва да има фитотоксичност в резултат на използването на спомагателни разтворители или диспергиращи средства.
During the test, the concentrations of the test chemical(s) are determined at appropriate intervals.
Например обичайно използваните разтворители, които не предизвикват фитотоксичност при концентрации до 100 μl/l, включват ацетон и диметилформамид.
In static tests, the minimum requirement is to determine the concentrations at the beginning and at the end of the test.
Ако се използва разтворител или диспергиращо средство, следва да бъде отчетена неговата крайна концентрация и тя да се поддържа на минимално ниво (≤ 100 μl/l), а всички третирани и контролни проби следва да съдържат еднаква концентрация на разтворителя или диспергиращото средство.
In semi-static tests where the concentrations of the test chemical(s) are not expected to remain within ± 20 % of the nominal concentration, it is necessary to analyse all freshly prepared test solutions and the same solutions at each renewal.
Допълнителни насоки относно използването на диспергиращи средства са дадени в (5).
However, for those tests where the measured initial concentrations of the test chemical(s) are not within ± 20 % of nominal but where sufficient evidence can be provided to show that the initial concentrations are repeatable and stable (i.e. within the range 80 - 120 % of the initial concentration), chemical determinations may be carried out on only the highest and lowest test concentrations.
Изпитвани и контролни групи
In all cases, determination of test concentrations prior to renewal need only be performed on one replicate vessel at each test concentration (or the contents of the vessels pooled by replicate).
Предварителното познаване на токсичността на изпитвания химикал по отношение на Myriophyllum spicatum, например от изпитване за определяне на обхват, ще помогне при избирането на подходящи изпитвани концентрации.
If there is evidence that the test concentration has been satisfactorily maintained within ± 20 % of the nominal or measured initial concentration throughout the test, analysis of the results can be based on nominal or measured initial values.
В окончателното изпитване за токсичност обикновено следва да се използват пет (както в изпитването на потискането на растежа на видове от рода Lemna, глава С.26 от настоящото приложение) до седем изпитвани концентрации, подредени в геометрична прогресия; те следва да бъдат подбрани така, че стойностите на NOEC и ЕС50 да попадат в обхвата на концентрациите (вж. по-долу).
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is not within ± 20 %, analysis of the results should be based on the geometric mean concentration during exposure or models describing the decline of the concentration of the test chemical (5).
За предпочитане е кратността на разделяне между изпитваните концентрации да не надхвърля 3,2; могат обаче да се използват и по-големи стойности, при които кривата концентрация-отклик е полегата.
Under some circumstances, e.g. when a preliminary test indicates that the test chemical has no toxic effects at concentrations up to 100 mg/l or up to its limit of solubility in the test medium or in case of a formulation up to its limit of dispersibility, a limit test involving a comparison of responses in a control group and one treatment group (100 mg/l or a concentration equal to the limit of solubility), may be undertaken.
Следва да се представи обосновка, ако са използвани по-малко от пет концентрации.
It is strongly recommended that this is supported by analysis of the exposure concentration.
При всяка от изпитваните концентрации следва да се използват най-малко пет повторения.
All previously described test conditions and validity criteria apply to a limit test, with the exception that the number of treatment replicates should be doubled.
При задаването на обхвата на изпитваните концентрации (за изпитване за определяне на обхват и/или за окончателно изпитване за токсичност) трябва да се има предвид следното:
Growth in the control and treatment group may be analysed using a statistical test to compare means, e.g. a Student's t-test.
за определяне на ECx изпитваните концентрации следва да обграждат стойността на ECx, за да се гарантира подходяща доверителна вероятност.
Response variables
Например, ако се оценява EC50, най-високата изпитвана концентрация следва да е по-висока от стойността на EC50.
The purpose of the test is to determine the effects of a test chemical on the vegetative growth of Myriophyllum spicatum.
Ако стойността на EC50 попада извън обхвата на изпитваните концентрации, свързаните с нея доверителни интервали ще бъдат големи и правилната оценка за статистическата съгласуваност на модела може да не е възможна.
This test method describes two response variables.
Ако целта е да се оцени LOEC/NOEC, най-ниската изпитвана концентрация следва да е достатъчно ниска, така че растежът да не бъде значимо по-малък от този в контролата.
Average specific growth rate
В допълнение най-високата изпитвана концентрация следва да е достатъчно висока, така че растежът да бъде значимо по-малък от този в контролата.
This response variable is calculated on the basis of changes in the logarithms of main shoot length, and in addition, on the basis of changes in the logarithms of other measurement parameters, i.e. total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls over time (expressed per day) in the controls and each treatment group.
Ако това не е така, изпитването ще трябва да се повтори с използване на различен обхват за концентрациите (освен ако най-високата концентрация е на границата на разтворимостта или максимално изискваната пределна концентрация, например 100 mg/1).
Note: For the measurement parameter total lateral branches length and total root length a calculation of the average specific growth rate is not possible.
Всяко изпитване следва да включва контроли, които да са съставени от същата хранителна среда, изпитвани организми (избор на възможно най-хомогенен растителен материал — свежи странични разклонения от предкултурите, скъсени на 2,5 cm от основата), условия на околната среда и процедури, както в съдовете за изпитване, но без изпитвания химикал.
At the beginning of the test, the test organism has no lateral branches and no roots (based on the preparation from the pre-culture); starting from the value zero, the calculation of the average specific growth rate is not defined.
Ако се използва спомагателен разтворител или диспергиращо средство, следва да бъде включена допълнително контролна третирана проба, като разтворителят/диспергиращото средство следва да присъстват в същата концентрация като тази в съдовете с изпитвания химикал.
Yield
Броят на повторенията на съдове с контроли (и съдове с разтворител, ако е приложимо) следва да бъде поне десет.
This response variable is calculated on the basis of changes in main shoot length, and in addition, on the basis of changes in other measurement parameters — i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls, and other parameters if deemed useful — in the controls and in each treatment group until the end of the test.
Ако не се изисква определяне на NOEC, планът за изпитването може да бъде променен, като се увеличи броят на концентрациите и се намали броят на повторенията за всяка от концентрациите.
Toxicity estimates should be based on main shoot length and three additional measurement variables (i.e. preferably total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls, see paragraph 37 and Notes 2, 4 and 5 to this paragraph), because some chemicals may affect other measurement variables much more than the main shoot length.
Във всички случаи обаче броят на контролните повторения следва да е най-малко десет.
This effect would not be detected by calculating main shoot length only.
Експозиция
The average specific growth rate for a specific period is calculated as the logarithmic increase in the growth variables — main shoot length and three additional measurement variables (i.e. total shoot length, fresh weight, dry weight or number of whorls) — using the formula below for each replicate of control and treatments:
Свежите странични разклонения от предкултурата, скъсени на 2,5 cm от основата, се разпределят на случаен принцип в съдовете за изпитване при стерилни условия; всеки съд за изпитване следва да съдържа по едно странично разклонение с дължина от 2,5 cm с апикална меристема в единия край.
average specific growth rate from time i to j
Избраният растителен материал във всеки съд за изпитване следва да е с едно и също качество.
measurement variable in the test or control vessel at time i
За минимизиране на влиянието на пространствените различия в интензитета на светлината и температурата се изисква схема за случаен подбор за разполагане на съдовете за изпитване в инкубатора.
measurement variable in the test or control vessel at time j
При извършване на наблюдения също се изискват блокова схема или промяна на разполагането на случаен принцип (или по-честа промяна на разполагането).
t time period from i to j
Ако предварително изпитване за стабилност показва, че концентрацията на изпитвания химикал не може да бъде поддържана (т.е. измерената концентрация пада под 80 % от първоначално измерената концентрация) за времето на изпитването (14 дни), се препоръчва полустатичен режим на изпитване.
For each treatment group and control group, calculate a mean value for growth rate along with variance estimates.