natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Всяка група от 10/20 индивида се добавя към случайно подбран съд за изпитване и се избират големите женски от F. fimetaria, така че да гарантират правилното разграничаване от мъжките от F. fimetaria.
A graph of the fitted model used for calculation, its function equation and its parameters (See (9));
Могат да се използват четири метода за прилагане на изпитвания химикал:
all information and observations helpful for the interpretation of the results;
смесване на изпитвания химикал в почвата с вода като носител, 2) смесване на изпитвания химикал в почвата с органичен разтворител като носител, 3) смесване на изпитвания химикал в почвата с пясък като носител, или 4) прилагане на изпитвания химикал върху повърхността на почвата.
power of the actual test if hypothesis testing is done (9);
Изборът на подходящ метод зависи от характеристиките на химикала и от целта на изпитването.
deviations from procedures described in this Test Method and any unusual occurrences during the test;
Независимо от това, може да се изискват процедури на прилагане, които са в съответствие с практическата употреба на изпитвания химикал (например пръскане на течна формулировка или употреба на специфични пестицидни формулировки, като например гранули или продукти за третиране на семена).
validity of the test;
Почвата се третира преди добавянето на колемболите, дава се възможност на колемболите да навлезат в почвата, освен когато изпитваният химикал се добавя към повърхността на почвата.
for NOEC, when estimated, the minimal detectable difference.
За неразтворимите във вода, но разтворими в органични разтворители химикали, изпитваният химикал може да бъде разтворен във възможно най-малкия обем подходящ носител (напр. ацетон), който все още гарантира доброто размесване на химикала с почвата, и да бъде смесен с част от необходимия кварцов пясък.
Wiles JA and Krogh PH (1998) Testing with the collembolans I. viridis, F. candida and F. fimetaria.
Когато се използва органичен разтворител, всички изпитвани концентрации и допълнителната отрицателна контрола на разтворител трябва да съдържат еднакво минимално количество от разтворителя.
In Handbook of soil invertebrate toxicity tests (ed.
Контейнерите за прилагането трябва да се оставят непокрити за определен период от време, за да се даде възможност на разтворителя, свързан с прилагането на изпитвания химикал, да се изпари, като се гарантира неразпръскване на токсичния химикал през този период.
H Løkke and CAM Van Gestel), pp. 131-156.
За малко разтворимите във вода и в органични разтворители химикали, кварцов пясък, който следва да е част от общото добавено в почвата количество пясък, се смесва с количеството изпитван химикал, така че да се получи желаната концентрация за изпитването.
Chapter C.36 of this Annex, Predatory mite (Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer) reproduction test in soil.
Прилагане на изпитвания химикал към повърхността на почвата
Toxicity testing with the collembolans Folsomia fimetaria and Folsomia candida and the results of a ringtest.
Когато изпитваният химикал е пестицид, може да е уместно същият да се прилага към повърхността на почвата чрез пръскане.
Danish Environmental Protection Agency, Environmental Project No. 1256, pp. 66.
Почвата се третира след добавянето на колемболите.
In Soil Zoology (Kevan D.K. McE., Ed).
Отначало изпитваните съдове се запълват с овлажнения почвен субстрат, след това се добавят индивидите, след което се претеглят изпитваните съдове.
Butterworths, London, pp. 412-416
С цел да се избегне всякаква директна експозиция на индивидите на изпитвания химикал чрез пряк контакт, изпитваният химикал се прилага най-малко половин час след въвеждането на колемболите.
Chemical is a substance or a mixture.
Прилагането следва да се извършва при температура с вариране в рамките на ± 2 °C и, за водни разтвори, емулсии или дисперсии, с количество прилагана вода между 600 и 800 l/m2 според препоръките от оценката на риска.
Main actions and timetable for performing a collembolan test
Специалните формулировки, като гранули или продукти за третиране на семена, могат да се прилагат по начин, съответстващ на използването им в селското стопанство.
Time (day)
Храната се добавя след пръскането.
Action
Средната температурата на изпитването следва да е 20 ± 1 °C с температурен диапазон 20 ± 2 °C.
23 to – 26
Изпитването се провежда при контролирани цикли светлина-тъмнина (за предпочитане 12 часа светлина и 12 часа тъмнина) с осветление от 400 до 800 lux в зоната на съдовете за изпитване.
Preparation of synchronous F. fimetaria culture
С цел проверка на влажността на почвата, съдовете се претеглят в началото, в средата и в края на изпитването.
Check pH of artificial soil and adjust accordingly
Загуба на тегло > 2 % се компенсира чрез добавяне на дейонизирана вода.
9 to – 12
Стойността на pH трябва да се измери в началото и в края както на изпитването за определяне на обхвата, така и на окончателното изпитване.
Preparation of synchronous F. candida culture
Измерванията трябва да се извършват в една допълнителна контролна проба и една допълнителна проба от третираните почвени проби (всички концентрации), подготвени и поддържани по същия начин като изпитваните култури, но несъдържащи колемболи.
2 to – 7
Процедура на изпитването и измервания
Pre-moist soil
За всяка тествана концентрация за изпитване количество почва за изпитване, съответстващо на 30 g мокро тегло, се поставя в съда за изпитване.
Distribute juveniles into batches
Приготвят се и контролите на вода, без изпитвания химикал.
Prepare stock solutions and apply test chemical if solvent required
Ако за прилагане на изпитвания химикал се използва носител, една поредица контроли, съдържащи само носителя, следва да бъдат включени допълнително към изпитваните поредици.
stock solutions and apply test chemical if solid chemical, water soluble or surface application is required.
Отделните колемболи внимателно се прехвърлят във всеки съд за изпитване (разпределени по изпитвателните съдове на случаен принцип) и се поставят върху повърхността на почвата.
Measure soil pH and weigh the containers.
За ефикасно прехвърляне на животните може да се използва смукателно устройство със слаба тяга.
Add food.
Броят на повторенията за концентрациите за изпитване и за контролите зависи от използвания план за изпитването.
Introduce collembolans.
За изпитване на F. fimetaria броят им на съд за изпитване следва да бъде 10 мъжки и 10 женски индивида на възраст 23-26 дена.
Range-finding test F. fimetaria:
В ден 21 колемболите се извличат от почвата и се преброяват.
Terminate test, extract animals, measure soil pH and loss of water (weight)
При F. fimetaria полът се разпознава по размера в партидата от синхронизирани индивиди, използвана при изпитването.
Definitive tests:
Женските индивиди са значително по-големи от мъжките (вж. допълнение 3)
Measure moisture content and replenish water and add 2-10 mg yeast
За изпитване на F. candida следва на съд за изпитване да се използват десет ювенилни индивида на възраст 9-12 дни.
Definitive F. fimetaria test:
В ден 28 колемболите се извличат от почвата и се преброяват.
Range-finding F. candida:
Като подходящ източник на храна към всеки съд се добавя, в началото на теста и след около 2 седмици, достатъчно количество, например 2-10 mg гранулирана изсушена хлебна мая, достъпна в търговската мрежа и предназначена за домашна употреба.
Definitive F. candida test:
В края на изпитването се оценяват смъртността и размножаването.
Guidance on rearing and synchronisation of F. fimetaria and F. candida
След 3 седмици (F. fimetaria) или 4 седмици (F. candida) колемболите се извличат от почвата за изпитване (виж допълнение 4) и се преброяват (12).
The time and durations given in this guidance should be checked for each specific collembolan strain to ensure that timing will allow for sufficient synchronised juveniles.
Дадена колембола се записва като мъртва, ако не е налична след извличането.
Basically, the incidence of oviposition after the adults are transferred to fresh substrate and egg hatching determines the appropriate day for egg collection and collection of synchronous juveniles.
Методът за извличане и преброяване следва да бъде валидиран.
It is recommended to have a permanent stock culture consisting of e.g. 50 containers/Petri dishes.
Валидността предполага по-голяма от 95 % ефикасност на извличането на ювенилни екземпляри,, определяна например чрез добавяне на точно известен брой в почвата.
The stock culture should be kept in a good feeding condition by weekly feeding, watering and removal of old food and carcasses.
Практично обобщение и график за провеждането на процедурата за изпитване са описани в приложение 2.
Too few collembolans on the substrate may result in inhibition by more fungal growth.
Когато е необходимо, се провежда изпитване за определяне на обхвата, например за пет концентрации на изпитвания химикал от 0,1, 1,0, 10, 100 и 1000 mg/kg сухо тегло на почвата и две повторения за всяко третиране и контрола.
If the stock culture is used for egg production too often, the culture may get fatigue.
Допълнителна информация върху смъртността или размножаването на Collembola, получена от изпитвания с аналогични химикали или от литературата, може също да бъде полезна при вземането на решение за диапазона на концентрациите, които да се използват при изпитването за определяне на обхвата.
Signs of fatigue are dead adults and mould on the substrate.
Продължителността на изпитването за определяне на обхвата е две седмици за F. fimetaria и 3 седмици за F. candida, за да се гарантира, че са получени ювенилни екземпляри от едно люпило.
The remaining eggs from the production of synchronous animals can be used to rejuvenate the culture.
В края на изпитването се оценяват смъртността и размножаването на Collembola.
In a synchronous culture of F. fimetaria, males are distinguished from females primarily by size.
Броят на полово зрелите и срещането на ювенилни екземпляри трябва да бъдат записани.
Males are clearly smaller than females, and the walking speed of the males is faster than for females.
Препоръчват се най-малко две повторения за всяко третиране с концентрация на изпитване и шест контролни повторения.
Correct selection of the gender requires little practice and can be confirmed by microscopic inspection of the genital area (13).
Кратността на разделянето може да варира в зависимост от зависимостта доза-отклик.
Rearing
За определяне на NOEC/LOEC следва да се изпитат най-малко пет концентрации в геометрична прогресия.
Preparation of culturing substrate
Препоръчват се четири повторения за всяко третиране с концентрация на изпитване, плюс осем контроли.
The culturing substrate is plaster of Paris (calcium sulphate) with activated charcoal.
Комбиниран подход дава възможност за едновременно определяне на NOEC/LOEC и ЕСх.
This provides a moist substrate, with the function of the charcoal being to absorb waste gases and excreta (14) (15).
За този комбиниран подход следва да бъдат използвани осем концентрации на третиране в геометрична прогресия.
Different forms of charcoal may be used to facilitate observations of the Collembola.
Ако при изпитването за определяне на обхвата не се наблюдават въздействия при най-високата концентрация (т.е.
For example, powdered charcoal is used for F. candida and F. fimetaria (producing a black/grey plaster of Paris):
1000 mg/kg), изпитването за размножаването следва да бъде проведено като гранично изпитване, като се използват концентрация на изпитване от 1000 mg/kg и контролата.
Substrate constituents:
Гранично изпитване ще предостави възможност да се демонстрира, че няма статистически значимо въздействие при пределната концентрация.
20 ml of activated charcoal
Репродуктивната способност е основната крайна точка (напр. брой ювенилни екземпляри, получени на съд за изпитване).
200 ml of distilled water
Статистическият анализ, напр.
200 ml of plaster of Paris
ANOVA процедури, сравнява третиранията с t-тест на Стюдънт, тест на Дънет или тест на Уйлямс.
50 g of activated pulverized charcoal
За индивидуалните средни от третиране се изчисляват доверителни интервали от 95 %.
260-300 ml of distilled water
Броят на преживелите полово зрели индивиди в нетретираните контроли е основен критерий за валидност и трябва да бъде документиран.
400 g plaster of Paris.
Също както и при изпитването за определяне на обхвата, всички други признаци за неблагоприятно въздействие трябва да бъдат протоколирани и в окончателния протокол.
The substrate mixture is allowed to set before use.
LCx и ECx
Breeding
Стойностите на ECx, включително свързаните с тях долни и горни 95 %-ни доверителни граници за параметъра, се изчисляват с помощта на подходящи статистически методи (например логистична функция или функция на Вейбул, метод на Спирмън-Карбър с изключване на данни, или обикновена интерполация).
Collembolans are held in containers such as Petri dishes (90 mm × 13 mm), with the bottom covered by a 0,5 cm layer of plaster /charcoal substrate.
За изчисляване на EC50 или всяка друга стойност ECx, пълният набор от данни (x) следва да бъде подложен на регресионен анализ.
They are cultured at 20 ± 1 °C at a light-dark cycle of 12-12 hours (400-800 Lux).
обикновено се оценява с пробит-анализ или подобен анализ, който отчита биномно разпределените данни за смъртността.
Containers are kept moist at all times ensuring that the relative humidity of the air within the containers is 100 %.
Трябва да се използват подходящи статистически методи (съгласно документ на ОИСР № 54 „Съвременни подходи за статистически анализ на данни за екотоксичност: ръководство за прилагане“ (9).
This can be guaranteed by presence of free water within the porous plaster, but avoiding generating a water film on the plaster surface.
По принцип неблагоприятните въздействия на изпитвания химикал в сравнение с контролата се проучват чрез тестване на едностранна хипотеза при p ≤ 0,05.
Water loss can be prevented by providing a humid ambient air.
Нормалното разпределение и хомогенността на дисперсията могат да бъдат тествани с помощта на подходящ статистически тест, напр. съответно тест на Шапиро-Уилк и тест на Левин (p ≤ 0,05).
Any dead individuals should be removed from the containers, as should any mouldy food.
Може да бъде извършен еднофакторен дисперсионен анализ (ANOVA) с последващи множествени сравнения.
To stimulate production of eggs it is necessary to transfer the adult animals to Petri dishes with newly prepared plaster of Paris/charcoal substrate.
За изчисляване дали са налице статистически значими разлики (p ≤ 0,05) между контролите и различните концентрации на изпитвания химикал могат да се използват множествени сравнения (например тест на Дънет) или трендови тестове със стъпка назад (напр. тест на Уйлямс) ( (избор на препоръчителния тест в съответствие с документ № 54 на ОИСР (9)).
Granulated dried baker's yeast is used as the sole food supply for both F. candida and F. fimetaria.
В противен случай за определяне на NOEC и LOEC могат да се използват непараметрични методи (напр.
Fresh food is provided once or twice a week, to avoid moulding.
U-тест на Бонферони по Holm или трендов тест на Йонкхере-Терпстра).
It is placed directly on the plaster of Paris in a small heap.
идентичността на изпитвания химикал, партида, пратка и номер по CAS, чистота;
The mass of baker's yeast added should be adjusted to the size of the collembolan population, but as a general rule 2-15 mg is sufficient.
физични и химични свойства на изпитвания химикал (напр. log Kow, разтворимост във вода, парно налягане, константа на Хенри (H) и, за предпочитане, информация относно съдбата на изпитвания химикал в почвата), ако са налични;
Synchronisation
формулирането на изпитвания химикал и добавките следва да бъде уточнено, ако не се изпитва чистият химикал;
The test should be performed with synchronised animals to obtain homogeneous test animals of the same instar and size.
идентификация на животинския вид и доставчика на изпитваните организми, описание на условията за размножаване и възрастовия диапазон на изпитваните организми;
Furthermore, the synchronisation enables discrimination of F. fimetaria males and females from the age of 3 weeks and onwards based on sexual dimorphism, i.e. size differences.
подробна спецификация, ако се използва естествена почва (произход, история, зърнометричен състав, pH, съдържание на органична материя)
The procedure below is a suggestion on how to obtain synchronised animals (the practical steps are optional).
способност на почвата за задържане на вода;
Synchronisation.
описание на техниката, използвана за прилагане на изпитвания химикал към почвата;
Prepare containers with a 0,5 cm layer of plaster of Paris/charcoal substrate.
стойност на рН и съдържание на вода в почвата в началото и в края на изпитването (контрола и всяко третиране);
For egg laying transfer 150-200 adult F. fimetaria and 50-100 F. candida from the best 15-20 containers of the stock culture with 4-8 weeks old substrate to the containers and feed them 15 mg baker's yeast.
подробно описание на метода на извличане и на ефикасността на извличането;
Avoid bringing juveniles together with adults as presence of juveniles may inhibit egg production.
броят на полово зрелите екземпляри и тяхната смъртност ( %), във всеки от съдовете за изпитване в края на изпитването;
Keep the culture at 20 ± 1 °C (the mean should be 20 °C) and a light-dark cycle of 12-12 hours (400-800 Lux).
описание на видими физиологични или патологични симптоми, или явни промени в поведението;
Ensure that fresh food is available and the air is water saturated.
стойностите на NOEC/LOEC, LCx за смъртността и ECx за размножаването (най-вече за LC50, LC10, ЕС50, и ЕС10) заедно с доверителни интервали от 95 %.
Lack of food may lead the animals to defecate on the eggs resulting in fungal growth on the eggs or F. candida may cannibalise its own eggs.
Графика на изгладения модел, използван за изчисляване, неговите функция и параметри (вж.
After 10 days the eggs are carefully collected with a needle and spatula and moved to “egg-paper” (small pieces of filter paper dipped in plaster of Paris/charcoal slurry) which is placed in a container with fresh plaster/charcoal substrate.
(9));
A few grains of yeast are added to the substrate to attract the juveniles and make them leave the egg-paper.
цялата информация и наблюдения, подпомагащи интерпретирането на резултатите;
It is important that the egg-paper and substrate are humid, or the eggs will dehydrate.
мощност на действителния тест, ако се използва проверка на хипотеза (9);
As an alternative, adult animals may be removed from the synchronisation culture boxes after producing eggs for 2 or 3 days.
отклонения от процедурите, описани в настоящия метод за изпитване, и всички необичайни обстоятелства по време на изпитването;
After three days most of the eggs on the egg-paper will have hatched, and some juveniles may be found under the egg-paper.
валидност на изпитването;
To have evenly aged juveniles, the egg-paper with un-hatched eggs is removed from the Petri dish with forceps.
за NOEC — когато се изчислява — минималната откриваема разлика.
The juveniles, now 0-3 days, stay in the dish and are fed baker's yeast.
Wiles JA and Krogh PH (1998) Testing with the collembolans I. viridis, F. candida and F. fimetaria.
Un-hatched eggs are discharged.
In Handbook of soil invertebrate toxicity tests (ed.
Eggs and hatched juveniles are cultured in the same manner as the adults.
H Løkke and CAM Van Gestel), pp.
In particular for F. fimetaria the following measures should be taken:
131-156.
ensuring sufficient fresh food, old moulding food is removed, after 1 week the juveniles are divided into new Petri dishes provided that the density is above 200.
Глава В.36 от настоящото приложение:, Изпитване за размножаване на хищен акар (Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer) в почвата.
Handling collembolans at test initiation
Toxicity testing with the collembolans Folsomia fimetaria and Folsomia candida and the results of a ringtest.
9-12 days old F. candida or the 23-26 days old F. fimetaria are collected, e.g. by suction, and released into a small container with moist plaster/charcoal substrate and their physical condition is checked under the binocular (injured and damaged animals are disposed).
Danish Environmental Protection Agency, Environmental Project No.
All steps should be done while keeping the collembolans in a moist atmosphere to avoid drought stress, e.g. by using wetted surfaces etc.
1256, pp. 66.
Turn the container up-side down and knock on it to transfer the collembolans to the soil.
In Soil Zoology (Kevan D.K. McE., Ed).
Static electricity should be neutralised, otherwise the animals may just fly into the air, or stick to the side of the test container and dry out.
Butterworths, London, pp.
An ioniser or a moist cloth below the container may be used for neutralisation.
412-416
The food should be spread all over the soil surface and not just in one lump.
Химикал означава вещество или смес.
During transportation and during the testing period it should be avoided to knock or otherwise physically disturb the test containers, as this may increase the compaction of the soil, and hamper the interaction between the collembolans.
Основни действия и график за извършване на изпитването на колемболи
Alternative Collembolan species
Време (ден)
Other collembolan species may be selected for testing according to this test method such as Proisotoma minuta, Isotoma viridis, Isotoma anglicana, Orchesella cincta, Sinella curviseta, Paronychiurus kimi, Orthonychiurus folsomi, Mesaphorura macrochaeta.
Действие
A number of prerequisites should be fulfilled in advance before using alternative species:
23 до – 26
They should be unequivocally identified;
Приготвяне на синхронна култура от F. fimetaria
The rationale for the selection of the species should be given;
Проверка на pH на изкуствена почва и съответно коригиране
It should be ensured that the reproductive biology is included in the testing phase so it will be a potential target during the exposure;
9 до – 12
The life-history should be known:
Приготвяне на синхронна култура от F. candida
age at maturation, duration of egg development, and instars subject to exposure;
2 до – 7
Optimal conditions for growth and reproduction should be provided by the test substrate and food supply;
Предварително навлажнена почва
Variability should be sufficiently low for precise and accurate toxicity estimation.
Разпределяне на ювенилните екземпляри в партиди
Extraction and counting of animals
Приготвяне на изходни разтвори и прилагане на изпитвания химикал, ако се изисква разтворител
Two methods of extraction can be performed.
на изходни разтвори и прилагане на изпитвания химикал, ако се изисква прилагане на химикал в твърдо състояние, разтворим във вода или прилагане на повърхността.
First method:
Измерване на рН на почвата и претегляне на контейнерите.
A controlled temperature gradient extractor based on principles by MacFadyen can be used (1).
Добавяне на храна.
The heat coming from a heating element at the top of the extraction box (regulated through a thermistor placed on the surface of the soil sample).
Въвеждане на колемболите.
The temperature in the cooled liquid surrounding the collecting vessel is regulated through a thermistor situated at the surface of the collection box (placed below the soil core).
Изпитване за определяне обхвата за F. fimetaria:
The thermistors are connected to a programmable controlling unit which raises the temperature according to a pre-programmed schedule.
Приключване на изпитването, извличане на животните, измерване на pH на почвата и на загубата на вода (тегло)
Animals are collected in the cooled collecting box (2 °C) with a bottom layer of plaster of Paris/charcoal.
Окончателни изпитвания:
Extraction is started at 25 °C and the temperature is increased automatically every 12 h by 5 °C and has a total duration of 48 hours.
Измерване на съдържанието на влага и допълване на вода, и добавяне на 2-10 mg мая
After 12 h at 40 °C the extraction is finished.
Окончателно изпитване за F. fimetaria:
Second method:
Изпитване за определяне обхвата за F. candida:
After the experimental incubation period the number of juvenile Collembola present is assessed by flotation.
Окончателно изпитване за F. candida:
For that purpose the test is performed in the vessels of approximately 250 ml volume.