natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Проводимостта на дестилираната или дейонизираната вода не следва да надвишава 10 μScm– 1.
Preparation
25 ml от всеки от разтвори а)—г) се смесват и общият обем се допълва до 1 литър с дейонизирана вода.
The peat is air dried and ground to a fine powder.
Сборът от калциевите и магнезиевите йони в тези разтвори е 2,5 mmol/l.
A suspension of the required amount of peat powder in deionised water is prepared using a high-performance homogenising device.
Съотношението на Ca:Mg йони е 4:1, а на Na:K йони — 10:1.
The pH of this suspension is adjusted to 5,5 ± 0,5 with CaCO3.
Алкалността на този разтвор до достигане на pH 4,3 (KS4.3) е 0,8 mmol/l.
The suspension is conditioned for at least two days with gentle stirring at 20 ± 2 °C, to stabilise pH and establish a stable microbial component. pH is measured again and should be 6,0 ± 0,5.
Водата за разреждане се аерира до насищане с кислород, след това се съхранява около два дни без допълнително аериране преди употреба.
Then the peat suspension is mixed with the other constituents (sand and kaolin clay) and deionised water to obtain an homogeneous sediment with a water content in a range of 30–50 per cent of dry weight of the sediment.
ПОЗОВАВАНЕ
The pH of the final mixture is measured again and is adjusted to 6,5 to 7,5 with CaCO3 if necessary.
Глава В.1 от настоящото приложение, Изпитване за остра токсичност при риби.
However, if ammonia development is expected, it may be useful to keep the pH of the sediment below 7,0 (e.g. between 6,0 and 6,5).
Физични и химични характеристики на приемлива вода за разреждане
Samples of the sediment are taken to determine the dry weight and the organic carbon content.
(възприет от ОИСР (1992) (1))
If ammonia development is expected, the formulated sediment may be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test (e.g. sediment-water ratio 1 : 4, height of sediment layer as in test vessels) before it is spiked with the test chemical, i.e. it should be topped with water, which should be aerated.
Концентрации
At the end of the conditioning period, the overlying water should be removed and discarded.
Твърди частици
Thereafter, the spiked quartz sand is mixed with the sediment for each treatment level, the sediment is distributed to the replicate test vessels, and topped with the test water.
Общ органичен въглерод
The vessels are then incubated at the same conditions which prevail in the subsequent test.
< 2 μg/l
This is where the equilibration period starts.
Нейонизиран амоняк
The overlying water should be aerated.
< 1 μg/l
It can be mixed initially with the peat suspension (see above).
Остатъчен хлор
However, excessive degradation of the food source prior to addition of the test organisms — e.g. in case of long equilibration period — can be avoided by keeping the time period between food addition and start of exposure as short as possible.
< 10 μg/l
In order to ensure that the food is spiked with the test chemical, the food source should be mixed with the sediment not later than on the day the test chemical is spiked to the sediment.
Общо органофосфорни пестициди
Storage
< 50 ng/l
The dry constituents of the artificial sediment may be stored in a dry, cool place or at room temperature.
Общо органохлорни пестициди плюс полихлорирани бифенили
The prepared sediment spiked with the test chemical should be used in the test immediately.
Общ органичен хлор
Samples of spiked sediment may be stored under the conditions recommended for the particular test chemical until analysis.
< 25 ng/l
In co-operation with R. Nagel and B. Karaoglan.
Препоръчан изкуствен седимент — указания за приготвяне и съхранение
Culture methods for Lumbriculus variegatus
Съставки на седимента
Lumbriculus variegatus (MÜLLER), Lumbriculidae, Oligochaeta is an inhabitant of freshwater sediments and is widely used in ecotoxicological testing.
Съставка
It can easily be cultured under laboratory conditions.
Характеристики
An outline of culture methods is given in the following.
% седимент сухо тегло
Culture methods
Торф
Culture conditions for Lumbriculus variegatus are outlined in detail in Phipps et al.
Торф от торфен мъх, степен на разграждане:
A short summary of these conditions is given below.
„средна“, изсушен на въздух, без видими остатъци от растения, фино смлян (размер на частиците ≤ 0,5 mm)
A major advantage of L. variegatus is its quick reproduction, resulting in rapidly increasing biomass in laboratory cultured populations (e.g. (1), (3), (4), (5)).
Кварцов пясък
The worms can be cultured in large aquaria (57 - 80 l) at 23 °C with a 16 L:8 D photoperiod (100 – 1000 lx) using daily renewed natural water (45 - 50 l per aquarium).
Размер на зърната:
The substrate is prepared by cutting unbleached brown paper towels into strips, which may then be blended with culture water for a few seconds to result in small pieces of paper substrate.
≤ 2 mm, но > 50 % от частиците следва да бъдат в диапазон 50—200 μm
This substrate can then directly be used in the Lumbriculus culture aquaria by covering the bottom area of the tank, or be stored frozen in deionised water for later use.
75 — 76
New substrate in the tank will generally last for approximately two months.
Каолин
Each worm culture is started with 500 – 1000 worms, and fed a 10 ml suspension containing 6 g of trout starter food 3 times per week under renewal or flow-through conditions.
Съдържание на каолинит ≤ 30 %
Static or semi-static cultures should receive lower feeding rates to prevent bacterial and fungal growth. .
Източник на храна
Under these conditions the number of individuals in the culture generally doubles in approximately 10 to 14 d.
напр. прах от Urtica (Folia urticae), листа от коприва (Urtica dioica), фино смляни (размер на частиците ≤ 0,5 mm);
Alternatively Lumbriculus variegatus can also be cultured in a system consisting of a layer of quartz sand as used for the artificial sediment (1 - 2 cm depth), and reconstituted water.
в съответствие с аптечните стандарти, за консумация от човека в допълнение към сухия седимент
Glass or stainless steel containers with a height of 12 to 20 cm can be used as culture vessels.
0,4 — 0,5 %
The water body should be gently aerated (e.g. 2 bubbles per second) via a pasteur pipette positioned approx.
Органичен въглерод
2 cm above the sediment surface.
Коригира се чрез добавяне на торф и пясък
To avoid accumulation e.g. of ammonia, the overlying water should be exchanged using a flow-through system, or, at least once a week, manually.
Калциев карбонат
The oligochaetes can be held at room temperature with a photo period of 16 hours light (intensity 100 – 1000 lx) and 8 hours dark.
CaCO3, на прах, химически чист, в допълнение към сухия седимент
In the semi-static culture (water renewal once per week), the worms are fed with TetraMin twice a week (e.g. 0,6 - 0,8 mg per cm2 of sediment surface), which can be applied as a suspension of 50 mg TetraMin per ml de-ionized water.
Дейонизирана вода
Lumbriculus variegatus can be removed from the cultures e.g. by transferring substrate with a fine mesh net, or organisms using a fire polished wide mouth (approximately 5 mm diameter) glass pipette, to a separate beaker.
Проводимост ≤ 10 μS/cm, в допълнение към сухия седимент
If substrate is co-transferred to this beaker, the beaker containing worms and substrate is left overnight under flow-through conditions, which will remove the substrate from the beaker, while the worms remain at the bottom of the vessel.
30 — 50
They can then be introduced to newly prepared culture tanks, or processed further for the test as outlined in (3) and (4), or in the following.
Ако се очакват повишени концентрации на амоняк, например ако за изпитвания химикал е известно, че потиска нитрификацията, може да се окаже полезно 50 % от богатия на азот прах от Urtica да се заменят с целулоза (напр. α-целулоза на прах, химически чиста, размер на частиците ≤ 0,5 mm; (1) (2)).
An issue to be regarded critically when using L. variegatus in sediment tests is its reproduction mode (architomy or morphallaxis, e.g. (6)).
Приготвяне
This asexual reproduction results in two fragments, which do not feed for a certain period until the head or tail part is regenerated (e.g., (7), (8)).
Торфът се изсушава с въздух и се смила на фин прах.
This means that in L. variegatus exposure via ingestion of contaminated sediment does not take place continuously.
Приготвя се суспензия от изискваното количество торф на прах в дейонизирана вода, като се използва високопроизводително хомогенизиращо устройство.
Therefore, a synchronisation should be performed to minimise uncontrolled reproduction and regeneration, and subsequent high variation in test results.
Стойността на рН на тази суспензия се коригира до 5,5 ± 0,5 с CaCO3.
Such variation can occur, when some individuals, which have fragmented and therefore do not feed for a certain time period, are less exposed to the test chemical than other individuals, which do not fragment during the test (9), (10), (11).
Суспензията се аклиматизира най-малко два дни при 20 ± 2 °C, като се разбърква леко, за да се стабилизира рН и да се установи стабилна микробна съставка.
10 to 14 days before the start of exposure, the worms should be artificially fragmented (synchronisation).
Отново се измерва рН, което трябва да бъде 6,0 ± 0,5.
Large (adult) worms, which preferably do not show signs of recent morphallaxis should be selected for synchronisation.
След това торфената суспензия се смесва с другите съставки (пясък и каолин) и дейонизирана вода, за да се получи хомогенен седимент със съдържание на вода в интервала 30–50 % от сухото тегло на седимента.
These worms can be placed onto a glass slide in a drop of culture water, and dissected in the median body region with a scalpel.
Измерва се отново рН на крайната смес и, ако е необходимо, се коригира до 6,5—7,5 с CaCO3.
Care should be taken that the posterior ends are of similar size.
Независимо от това, ако се очаква изменение в стойностите на амоняка, може да бъде полезно рН на седимента да се поддържа под 7,0 (например между 6,0 и 6,5).
The posterior ends should then be left to regenerate new heads in a culture vessel containing the same substrate as used in the culture and reconstituted water until the start of exposure.
Вземат се проби от седимента, за да се определи сухото тегло и съдържанието на органичен въглерод.
Regeneration of new heads is indicated when the synchronised worms are burrowing in the substrate (presence of regenerated heads may be confirmed by inspecting a representative subsample under a binocular microscope).
Ако се очаква изменение в стойностите на амоняка, формулираният седимент може да бъде кондициониран в продължение на седем дни при същите условия, които преобладават в последващото изпитване (напр. съотношение седимент—вода от 1: 4, височина на слоя седимент както в съдовете за изпитване), преди към него да бъде добавен изпитваният химикал, т.е. следва към него да бъде добавена вода, която трябва да е аерирана.
The test organisms are thereafter expected to be in a similar physiological state.
В края на периода за кондициониране водата над седимента следва да се отстрани и изхвърли.
This means, that when reproduction by morphallaxis occurs in synchronised worms during the test, virtually all animals are expected to be equally exposed to the spiked sediment.
След това кварцовият пясък с добавка се смесва със седимента за всяко равнище на третиране, седиментът се разпределя по съдовете за повторенията и се залива с водата за изпитването.
Feeding of the synchronised worms should be done once as soon as the worms are starting to burrow in the substrate, or 7 d after dissection.
След това съдовете се инкубират при същите условия, които преобладават в последващото изпитване.
The feeding regimen should be comparable to the regular cultures, but it may be advisable to feed the synchronised worms with the same food source as is to be used in the test.
Оттук започва периодът на достигане на равновесие.
The worms should be held at test temperature, at 20 ± 2 °C.
Водата над седимента следва да бъде аерирана.
After regenerating, intact complete worms, which are actively swimming or crawling upon a gentle mechanical stimulus, should be used for the test.
Тя може първоначално да се смеси с торфената суспензия (вж. по-горе).
Injuries or autotomy in the worms should be prevented, e.g. by using pipettes with fire polished edges, or stainless steel dental picks for handling these worms.
Независимо от това, прекомерното разграждане на източника на храна преди да бъдат добавени изпитваните организми — например в случай на дълго време за достигане на равновесие — може да се избегне чрез поддържане на максимално кратък времеви интервал между добавянето на храната и началото на експозицията.
Sources of starter cultures for Lumbriculus variegatus (addresses in the U.S. adopted from (4))
За да се гарантира, че храната е с добавен изпитван химикал, източникът на храна следва да бъде смесен със седимента не по-късно от деня, в който изпитвания химикал се добавя към седимента.
Europe
Съхранение
U.S.A.
Сухите съставки на изкуствения седимент могат да се съхраняват в сухо и хладно място, или при стайна температура.
Department of Fisheries and Wildlife
Приготвеният седимент с добавен изпитван химикал следва да се използва незабавно в изпитването.
No. 13 Natural Resources Building
До анализа пробите от седимент с добавен химикал могат да се съхраняват при условията, препоръчани за конкретния изпитван химикал.
Summary of the ring test results
In co-operation with R. Nagel and B. Karaoglan.
“Sediment Toxicity Test with Lumbriculus variegatus”
Методи за отглеждане на Lumbriculus variegatus
Results of individual ring test runs:
Lumbriculus variegatus (Müller), Lumbriculidae, Oligochaeta обитава сладководни седименти и широко се използва при екотоксикологични изпитвания.
Mean worm numbers in the controls and solvent controls at the end of the test;
Той може лесно да се отглежда в лабораторни условия.
SD = standard deviation;
Кратко описание на методите за отглеждане е дадено по-долу.
CV = coefficient of variation
Методи за отглеждане
mean worm number in the controls
Условията на отглеждане на Lumbriculus variegatus са подробно описани във Phipps et al.
mean worm number in the solvent controls
По-долу е дадено кратко резюме на тези условия.
interlaboratory mean
Основно предимство на L. variegatus е бързото му размножаване, водещо до бързо увеличаване на биомасата в отглеждани в лабораторни условия популации(напр.
Mean total dry weights of worms per replicate in the controls and solvent controls at the end of the test;
(1), (3), (4), (5)).
CV = coeff. of variation
Червеите могат да бъдат отглеждани в големи аквариуми (57—80 l) при 23 °С, с времетраене на осветлението 16 L:8 D (100—1000 lx), като се използва ежедневно подновявана природна вода (45—50 l на аквариум).
total dry weight of worms per replicate (controls)
Субстратът се приготвя чрез нарязване на ленти на салфетки от неизбелена кафява хартия, които могат впоследствие да бъдат смесени с вода за отглеждането за няколко секунди, за получаване на малки парчета хартиен субстрат.
total dry weight of worms per replicate (solvent controls)
След това субстратът може да бъде пряко използван в аквариумите за отглеждане на Lumbriculus чрез покриване на дънната област на съда, или да се съхранява замразен в дейонизирана вода за по-късна употреба.
Toxicity of PCP:
Новият субстрат в съда обикновено е с трайност около два месеца.
Summary of endpoints in the ring test;
Всяко отглеждане на червеи започва с 500—1000 червея и се захранва с 10 ml суспензия, съдържаща 6 g стартерни фуражи за пъстърва 3 пъти седмично в условия на прилагане на полустатичен или проточен метод.
interlaboratory means for EC50, NOEC and LOEC;
Скоростта на подаване на храната за статичните или полустатичните култури следва да бъдат по-малка, за да се предотврати развитието на бактерии и патогенни гъбички. .
minimum detectable difference from the control values during hypothesis testing;
При тези условия броят на индивидите в културата по принцип се удвоява приблизително за 10 до 14 дни.
used as a measure of statistical power.
Като алтернатива, Lumbriculus variegatus също може да се отглежда в система, състояща се от слой от кварцов пясък, като използвания за изкуствения седимент (1—2 см дълбочина), и възстановена вода.
biological parameter
Като съдове за отглеждане могат да се използват контейнери от стъкло или неръждаема стомана, с височина от 12 до 20 cm.
Inter- laboratory mean (mg/kg)
Водното тяло следва леко да се аерира (напр.
Inter- laboratory factor
2 мехурчета в секунда) с помощта на пипета „Пастьор“, разположена на приблизително 2 cm над повърхността на седимента.
geometr. mean (mg/kg)
За да се избегне натрупване, например на амоняк, водата над седимента следва да се обменя, като се използва проточна система, или ръчно поне веднъж седмично.
total number of worms
Олигохетите могат да се държат при стайна температура със светъл период от 16 часа (интензитет 100-1000 lx) и 8 часа тъмнина.
total dry weight of worms
При полустатичните култури (сменяне на водата веднъж седмично) червеите се хранят с TetraMin два пъти седмично (например 0,6-0,8 mg на cm2 от площта на седимента), който може да се прилага като суспензия 50 mg TetraMin на ml дейонизирана вода.
mortality/survival
Lumbriculus variegatus може да бъде отстранен от културите в отделна бехерова чаша, например чрез прехвърляне на субстрат с фина мрежа, или на организми с помощта на стъклена пипета с широк отвор с огнева полировка (приблизително 5 mm в диаметър).
reproduction (increase of number of worms per replicate)
Ако заедно с това в тази бехерова чаша бъде прехвърлен субстрат, бехеровата чаша, съдържаща червеите и субстрата, се оставя за една нощ при проточни условия, което ще отстрани субстрата от бехеровата чаша, а червеите ще останат на дъното на съда.
growth (biomass increase per replicate)
След това те могат да бъдат въведени в наскоро приготвени съдове за отглеждане, или да бъдат допълнително обработени за изпитването, както е посочено в (3) и (4), или по-долу.
C.36 PREDATORY MITE (HYPOASPIS (GEOLAELAPS) ACULEIFER) REPRODUCTION TEST IN SOIL
Един въпрос, който следва да бъде разгледан критично при използването на L. variegatus в изпитвания със седимент, е начинът му на размножаване (архитомия или морфалаксис, напр.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 226 (2008).
(6)).
This test method is designed to be used for assessing the effects of chemicals in soil on the reproductive output of the soil mite species Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer Canestrini (Acari: Laelapidae), hence allowing for the estimation of the inhibition of the specific population growth rate (1,2).
В резултат от това безполово размножаване се получават два фрагмента, които не се хранят в продължение на определен период от време, докато не регенерира частта откъм главата или опашката (напр.
Reproductive output here means the number of juveniles at the end of the testing period.
(7), (8)).
H. aculeifer represents an additional trophic level to the species for which test methods are already available.
Това означава, че при L. variegatus експозицията чрез поглъщане на замърсени седимент не е непрекъснат процес.
A reproduction test without discrimination and quantification of the different stages of the reproductive cycle is considered adequate for the purpose of this test method.
Поради това следва да се извърши синхронизация с цел свеждане до минимум на неконтролираното размножаване и регенерация и следващото от това голямо вариране на резултатите от изпитването.
For chemicalsubstances with another exposure scenario than via the soil other approaches might be appropriate (3).
Известно вариране може да се получи, когато някои от индивидите, които са се разделили на фрагменти и поради това не се хранят в продължение на определен период, са по-малко експонирани на изпитвания химикал в сравнение с другите индивиди, които не се разделят на фрагменти по време на изпитването (9), (10), (11).
Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer is considered to be a relevant representative of soil fauna and predatory mites in particular.
От 10 до 14 дни преди началото на експозицията червеите следва да бъдат изкуствено разделени на сегменти (синхронизация).
It is worldwide distributed (5) and can easily be collected and reared in the laboratory.
За синхронизация следва да бъдат избрани големи (полово зрели) червеи, които, за предпочитане, не показват признаци на неотдавнашен морфалаксис.
A summary on the biology of H. aculeifer is provided in Appendix 7.
Тези червеи могат да бъдат поставени върху предметно стъкло в капка вода за отглеждане и им се извършва дисекция със скалпел в средната част на тялото.
Background information on the ecology of the mite species and the use in ecotoxicological testing is available (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10), (11), (12).
Следва да се вземат мерки задните краища да са със сходен размер.
Adult females are exposed to a range of concentrations of the test chemical mixed into the soil.
След това задните краища се оставят, до началото на експозицията, за регенерация на нови глави в съд за отглеждане, съдържащ същия субстрат, като използвания при отглеждането, и възстановена вода.
The test is started with 10 adult females per replicate vessel.
Има показания за регенерация на нови глави, когато синхронизираните червеи се заравят в субстрата (наличието на регенерирани глави може да бъде потвърдено чрез инспектиране на представителна подпроба с бинокулярен микроскоп).
Males are not introduced in the test, because experience has shown that females mate immediately or shortly after hatching from the deutonymph stage, if males are present.
След това се очаква изпитваните организми да са със сходен физиологичен статус.
In addition, inclusion of males would prolong the test in a way that the demanding discrimination of age stages would become necessary.
Това означава, че когато по време на изпитването се извърши размножаване чрез морфалаксис в синхронизирани червеи, почти всички животни се очаква да бъдат еднакво експонирани на седимента с добавка.
Thus, mating itself is not part of the test.
Храненето на синхронизираните червеи следва да се извърши веднага след като червеите започнат да се заравят в субстрата, или 7 дни след дисекцията.
The females are introduced into the test 28-35 days after the start of the egg laying period in the synchronisation (see Appendix 4), as the females can then be considered as already mated and having passed the pre-oviposition stage.
Режимът на хранене следва да бъде съпоставим с този при редовните култури, но може да е препоръчително синхронизираните червеи да се хранят със същия източник на храна, който ще се използва по време на изпитването.
At 20 °C the test ends at day 14 after introducing the females (day 0), which allows the first control offspring to reach the deutonymph stage (see Appendix 4).
Червеите следва да се държат при температурата на изпитването, на 20 ± 2 °C.
For the main measured variable, the number of juveniles per test vessels and additionally the number of surviving females are determined.
След регенерацията, за изпитването следва да се използват интактни цели червеи, които активно плават или пълзят след лек механичен стимул.
The reproductive output of the mites exposed to the test chemical is compared to that of the controls in order to determine the ECx (e.g. EC10, EC50) or the no observed effect concentration (NOEC) (see Appendix 1 for definitions), depending on the experimental design (see paragraph 29).
Следва да се избягват наранявания или автотомия при червеите, напр. чрез обработка на тези червеи с използване на пипети с ръбове, полирани с огнева полировка, или с направени от неръждаема стомана клечки за зъби.
An overview of the test schedule is given in Appendix 8.
Източници на стартерни култури за Lumbriculus variegatus (адреси в САЩ, взети от (4))
The water solubility, the log Kow, the soil water partition coefficient and the vapour pressure of the test chemical should preferably be known.
Европа
Additional information on the fate of the test chemical in soil, such as the rates of biotic and abiotic degradation, is desirable.
САЩ
The following criteria should be satisfied in the untreated controls for a test result to be considered valid: