natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Доказателство, че контролите отговарят на критериите за приемане на изпитването;
Photoperiod (dawn/dusk transitions are optional, however not considered necessary)
Данни за смъртността при всички нива на концентрацията на изпитване и в контролите;
16 h light, 8 h dark
Използваните техники за статистически анализ, обработка на данните и обосновка за използваните техники;
12-16 h light, 12-8 h dark
Данни за макроскопски биологични наблюдения на морфологията, включително вторични полови белези и вителогенин;
< 5 g per l
Резултати от анализите на данните, за предпочитане в таблична и графична форма;
Test chamber size
Проява на необичайни реакции от страна на рибите и всякакви видими въздействия, причинени от изпитвания химикал ( chemical )
10 l (minimum)
НАСОКИ ЗА ИНТЕРПРЕТИРАНЕТО И ПРИЕМАНЕТО НА РЕЗУЛТАТИТЕ ОТ ИЗПИТВАНЕТО
2 l (minimum)
Този раздел съдържа някои съображения, които трябва да се вземат предвид при тълкуването на резултатите от изпитването за различните измерени крайни точки.
5 l (minimum)
Резултатите трябва да се интерпретират внимателно, когато изглежда, че изпитваният химикал предизвиква ясно изразено токсично действие или оказва въздействие върху общото състояние на животното.
Test solution volume
При задаването на диапазона на изпитваните концентрации трябва да се внимава да не се превишава максималната поносима концентрация, за да се даде възможност за съдържателно интерпретиране на данните.
8 l (minimum)
Важно е да има поне едно третиране, при което не са налице признаци на токсично въздействие.
l (minimum)
Признаците на заболяване или на токсично въздействие следва да бъдат подробно оценявани и протоколирани.
4 l (minimum)
Например, възможно е образуването на VTG в женски животни да е също така повлияно от обща токсичност и начини на токсично действие, различни от ендокринните, напр. хепатотоксичност.
Volume exchanges of test solutions
Независимо от това, тълкуването на въздействията може да бъде подкрепено чрез други нива на третиране, които да не водят до невъзможност за разграничаване поради системна токсичност.
Minimum of 6 daily
Има няколко аспекта, които трябва да бъдат взети предвид при приемането на резултатите от изпитването.
Minimum of 5 daily
Като насока, нивата на VTG в контролните групи мъжки и женски животни следва да бъдат разграничени и разделени от около три порядъка при Pimephales promelas и зебровото данио, и от около един порядък при оризията.
Age of test organisms See paragraph 20
Примери за диапазона на стойностите, които се срещат в контролните групи и в групите на третиране, могат да бъдат намерени в протоколите за валидиране (1, 2, 3, 4).
See paragraph 20
Високите стойности на VTG в контролни мъжки екземпляри могат да поставят под съмнение реагирането на биологичното изследване и способността му да открива слаби естрогенни агонисти.
See paragraph 20 12.
Ниските стойности на VTG в контролни женски екземпляри могат да поставят под съмнение реагирането на биологичното изследване и способността му да открива инхибитори на ароматазата и естрогенни антагонисти.
Approximate wet weight of adult fish (g) Females:
Изследванията за валидиране са били използвани за изготвянето на тези насоки.
1,5 ± 20 %
Ако дадена лаборатория не е извършвала изследването преди това, или са направени съществени промени (например промяна на щама на рибите или доставчика), е целесъобразно да се проведе проучване на техническата компетентност.
Males:
Препоръчва се да се използват химикали, които обхващат широк спектър от механизми на действие или въздействия върху някои от крайните точки от изпитването.
2,5 ± 20 %
На практика всяка лаборатория се насърчава да изгради собствени контролни данни за минали периоди за мъжките и женските индивиди, както и да извърши изпитване на химикал, представляващ положителна контрола за естрогенна активност (напр.
Females:
17β-естрадиол при 100 ng/l, или известен слаб агонист), в резултат на което се увеличава VTG в мъжките риби, на химикал, представляващ положителна контрола за потискане на ароматазата (напр. фадрозол или прохлораз при 300 μg/l), в резултат на което се намалява VTG в женския индивид, и на химикал, представляващ положителна контрола за андрогенна активност (напр.
0,35 ± 20 %
17β-тренболон при 5 μg/l), в резултат на което се индуцират вторични полови белези в женски Pimephales promelas и японска оризия.
0,65 ± 20 %
Всички тези данни могат да бъдат сравнявани с наличните данни от изследванията за валидиране (1, 2, 3), за да се гарантира компетентността на лабораторията.
0,4 ± 20 %
Като цяло, измерванията на VTG следва да се считат за положителни, ако се наблюдава статистически значимо увеличаване на VTG при мъжките индивиди (p < 0,05), или статистически значимо намаление при женските индивиди (p < 0,05) най-малко при най-високата доза на изпитване, в сравнение с контролната група, и при липса на признаци за обща токсичност.
No. of fish per test vessel
Положителният резултат се подкрепя допълнително от доказване на биологически реалистична връзка между дозата и кривата на отклика.
6 (2 males and 4 females)
Както беше споменато по-горе, намалението на вителогенина може да не е изцяло с ендокринен произход;
10 (5 males and 5 females)
независимо от това положителният резултат по принцип следва да се тълкува като доказателство за ендокринна активност in vivo и обичайно следва да води до предприемане на действия за допълнително изясняване.
No. of treatments
Vitellogenin induction by 17ß-estradiol and 17ß-ethinylestradiol in male zebrafish (Danio rerio).
= 3 (plus appropriate controls)
Development of an ELISA for determination of the hepatic vitellogenin in Medaka (Oryzias latipes).
No. vessels per treatment
Fish full life-cycle testing for androgen methyltestosterone on medaka (Oryzias latipes).
4 minimum
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as „signposts“, not „traffic lights“, in risk assessment.
2 minimum
Effects of waterborne exposure to 17B-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
No. of fish per test concentration
Villeneuve and G.T.
16 adult females and 8 males (4 females and 2 males in each replicate vessel)
Ankley.
10 adult females and 10 males (5 females and 5 males in each replicate vessel)
Съкращения и определения
Feeding regime
Химикал
Live or frozen adult or nauplii brine shrimp two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Вещество или смес
Brine shrimp nauplii two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Коефициент на вариация.
None unless DO concentration falls below 60 % air saturation
Ензимно-свързан имуносорбентен анализ.
Clean surface, well or reconstituted water or dechlorinated tap water
Скорост на зареждане
Pre-exposure period
Мокро тегло на рибите на обем вода.
7 days recommended
Гъстота на отглеждане
Chemical exposure duration
Брой на рибите на обем вода.
Biological endpoints
VTG (вителогенин)
survival
Фосфогликопротеин, който е прекурсор на белтъците в яйчния жълтък и обикновено се среща в полово активните женски индивиди от всички яйценосни видове.
behaviour
ос ХХГ
sex characteristics
хипоталамус-хипофиза-гонадна ос.
VTG
МПК
Test acceptability
Максимално поносима концентрация, която представлява около 10 % от LC50.
Dissolved oxygen > 60 % of saturation;
Опитни условия за скрининговото изследване на ендокринната система при риби
mean temperature of 25 ± 2 °C;
Препоръчвани видове
90 % survival of fish in the controls;
Pimephales promelas
measured test concentrations within 20 % of mean measured values per treatment level.
Японска оризия
mean temperature of 24 ± 2 °C;
(Oryzias latipes)
mean temperature of 26 ± 2 °C;
зеброво данио
Some chemical characteristics of acceptable dilution water
Тип изпитване
< 20 mg/l
Проточно
< 2 mg/l
Температура на водата
Total organophosphorus pesticides
Качеството на осветлението
Appendix 4A
Луминесцентни крушки (широк спектър)
Spawning substrate for zebrafish
Светлинен интензитет
Spawning tray
10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, или 50-100 ft-c (заобикалящи равнища на осветеност в лабораторията) 10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, или 50-100 ft-c (заобикалящи равнища на осветеност в лабораторията)
all glass instrument dish, for example 22 × 15 × 5,5 cm (l × w × d), covered with a removable stainless steel wire lattice (mesh width 2 mm).
Фотопериод (преходните фази на разсъмване и здрач са по избор, но не се считат за необходими)
The lattice should cover the opening of the instrument dish at a level below the brim.
16 h светлина, 8 h тъмнина
On the lattice, spawning substrate should be fixed.
12-16 h светлина, 12-8 h тъмнина
It should provide structure for the fish to move into.
< 5 g на l
For example, artificial aquaria plants made of green plastic material are suitable (NB: possible adsorption of the test chemical to the plastic material should be considered).
Размер на камерата за изпитване
The plastic material should be leached out in sufficient volume of warm water for sufficient time to ensure that no chemicals may be disposed to the test water.
10 l (най-малко)
When using glass materials it should be ensured that the fish are neither injured nor cramped during their vigorous actions.
2 l (най-малко)
The distance between the tray and the glass panes should be at least 3 cm to ensure that the spawning is not performed outside the tray.
5 l (най-малко)
The eggs spawned onto the tray fall through the lattice and can be sampled 45-60 min after the start of illumination.
Обем на изпитвания разтвор
The transparent eggs are non-adhesive and can easily be counted by using transversal light.
8 l (най-малко)
When using five females per vessel, egg numbers up to 20 at a day can be regarded as low, up to 100 as medium and more than 100 as high numbers.
1,5 l (най-малко)
The spawning tray should be removed, the eggs collected and the spawning tray re-introduced in the test vessel, either as late as possible in the evening or very early in the morning.
4 l (най-малко)
The time until re-introduction should not exceed one hour since otherwise the cue of the spawning substrate may induce individual mating and spawning at an unusual time.
Обменени обеми на изпитвани разтвори
If a situation needs a later introduction of the spawning tray, this should be done at least 9 hours after start of the illumination.
Най-малко 6 дневно
At this late time of the day, spawning is not induced any longer.
Най-малко 5 дневно
Appendix 4B
Възраст на изпитваните организми
Spawning substrate for fathead minnow
Вж. точка 20
Two or three combined plastic/ceramic/glass or stainless steel spawning tiles and trays are placed in each of the test chamber (e.g., 80 mm length of grey semi-circular guttering sitting on a lipped tray of 130mm length) (see picture).
Вж. точка 20
Properly seasoned PVC or ceramic tiles have demonstrated to be appropriate for a spawning substrate (Thorpe et al, 2007).
Вж. точка 20 12.
It is recommended that the tiles are abraded to improve adhesion.
Приблизително мокро тегло на полово зряла риба (g)
The tray should also be screened to prevent fish from access to the fallen eggs unless the egg adhesion efficiency has been demonstrated for the spawning substrate used.
Женски:
The base is designed to contain any eggs that do not adhere to the tile surface and would therefore fall to the bottom of the tank (or those eggs laid directly onto the flat plastic base).
1,5 ± 20 %
All spawning substrates should be leached for a minimum of 12 hours, in dilution water, before use.
Мъжки:
Appendix 5A
2,5 ± 20 %
Assessment of secondary sex characteristics in fathead minnow for the detection of certain endocrine active chemicals
0,35 ± 20 %
Overview
0,65 ± 20 % Мъжки: 0,4 ± 20 %
Potentially important characteristics of physical appearance in adult fathead minnows in endocrine disrupter testing include body colour (i.e. light/dark), coloration patterns (i.e. presence or absence of vertical bands), body shape (i.e. shape of head and pectoral region, distension of abdomen), and specialized secondary sex characteristics (i.e. number and size of nuptial tubercles, size of dorsal pad and ovipositor).
Брой на рибите на съд за изпитване
Nuptial tubercles are located on the head (dorsal pad) of reproductively-active male fathead minnows, and are usually arranged in a bilaterally-symmetric pattern (Jensen et al.
6 (2 мъжки и 4 женски)
2001).
10 (5 мъжки и 5 женски)
Control females and juvenile males and females exhibit no tubercle development (Jensen et al.
Брой третирания
2001).
= 3 (плюс подходящи контроли)
There can be up to eight individual tubercles around the eyes and between the nares of the males.
Брой съдове на третиране
The greatest numbers and largest tubercles are located in two parallel lines immediately below the nares and above the mouth.
най-малко 4
In many fish there are groups of tubercles below the lower jaw;
най-малко 2
those closest to the mouth generally occur as a single pair, while the more ventral set can be comprised of up to four tubercles.
Брой на рибите на концентрация на изпитване
The actual numbers of tubercles is seldom more than 30 (range, 18-28; Jensen et al.
16 полово зрели женски и 8 мъжки (4 женски и 2 мъжки във всеки един съд с повторение)
2001).
10 полово зрели женски и 10 мъжки (5 женски и 5 мъжки във всеки един съд с повторение)
The predominant tubercles (in terms of numbers) are present as a single, relatively round structure, with the height approximately equivalent to the radius.
Режим на хранене
Most reproductively-active males also have, at least some, tubercles which are enlarged and pronounced such that they are indistinguishable as individual structures.
Живи или замразени полово зрели артемии или науплии от артемии два или три пъти дневно (ad libitum), налични в търговската мрежа храни или комбинация от горепосочените
Some types of endocrine-disrupting chemicals can cause the abnormal occurrence of certain secondary sex characteristics in the opposite sex;
Науплии от артемии два или три пъти дневно (ad libitum), налични в търговската мрежа храни или комбинация от горепосочените
for example, androgen receptor agonists, such as 17β-methyltestosterone or 17β-trenbolone, can cause female fathead minnows to develop nuptial tubercles (Smith 1974; Ankley et al.
Няма, освен в случаите, когато концентрацията на разтворения кислород падне под 60 % от стойността на насищане при равновесие с атмосферния въздух
2001; 2003), while oestrogen receptor agonists may decrease number or size of nuptial tubercles in males (Miles-Richardson et al.
Вода с чиста повърхност, кладенчова или възстановена вода или дехлорирана чешмяна вода
1999; Harries et al.
Период преди експозицията
2000).
препоръчват се 7 дни
Below is a description of the characterization of nuptial tubercles in fathead minnows based on procedures used at the U.S. Environmental Protection Agency lab in Duluth, MN.
Продължителност на експозицията на химикала
Specific products and/or equipment can be substituted with comparable materials available.
Биологични крайни точки
Viewing is best accomplished using an illuminated magnifying glass or 3X illuminated dissection scope.
преживяване
View fish dorsally and anterior forward (head toward viewer).
поведение
Place fish in small Petri dish (e.g., 100 mm in diameter), anterior forward, and ventral down.
и полови белези
Focus viewfinder to allow identification of tubercles.
VTG
Gently and slowly roll fish from side to side to identify tubercle areas.
Приемливост на изпитването
Count and score tubercles.
Разтворен кислород > 60 % от стойността на насищане;
Repeat the observation on the ventral head surface by placing the fish dorsal anterior forward in the Petri dish.
средна температурата 25 ± 2 °C;
Observations should be completed within 2 min for each fish.
90 % преживели риби в контролите;
Tubercle Counting and Rating
измерени концентрации на изпитване в рамките на 20 % от средните измерени стойности на ниво на третиране.
Six specific areas have been identified for assessment of tubercle presence and development in adult fathead minnows.
средна температурата 24 ± 2 °C;
A template was developed to map the location and quantity of tubercles present (see end of this Appendix).
средна температурата 26 ± 2 °C;
The number of tubercles is recorded and their size can be quantitatively ranked as:
Някои химични характеристики на приемлива вода за разреждане
0- absence, 1-present, 2-enlarged and 3-pronounced for each organism (Fig.
< 20 mg/l
1).
< 2 mg/l
Rate 0- absence of any tubercle.
Общо органофосфорни пестициди
Rating 1-present, is identified as any tubercle having a single point whose height is nearly equivalent to its radius (diameter).
Допълнение 4А
Rating 2- enlarged, is identified by tissue resembling an asterisk in appearance, usually having a large radial base with grooves or furrows emerging from the centre.
Субстрат за хвърляне на хайвер за зеброво данио
Tubercle height is often more jagged but can be somewhat rounded at times.
Вана за хвърляне на хайвера
Rating 3- pronounced, is usually quite large and rounded with less definition in structure.
всякакви стъклени съдове за инструменти с примерни дължина 22 cm × широчина 15 cm × дълбочина 5,5 cm, покрити с отстранима телена решетка от неръждаема стомана (с ширина на отворите 2 mm).
At times these tubercles will run together forming a single mass along an individual or combination of areas (B, C and D, described below).
Решетката следва да покрива отвора на съда за инструменти на равнище, по-ниско от върха на съда.
Coloration and design are similar to rating 2 but at times are fairly indiscriminate.
Върху решетката следва да бъде фиксиран субстрат за хвърляне на хайвер.
Using this rating system generally will result in overall tubercle scores of < 50 in a normal control male possessing a tubercle count of 18 to 20 (Jensen et al.
Той следва да представлява структура, в която рибите да могат да проникнат.
2001).
Например, подходяща е изкуствена аквариумна растителност, изработена от зелен пластмасов материал (NB: следва да се обърне внимание на възможна адсорбция на изпитвания химикал върху пластмасовия материал).
The actual number of tubercles in some fish may be greater than the template boxes (Appendix A) for a particular rating area.
Пластмасата следва да бъде промита в достатъчно количество топла вода за период, достатъчен, за да се гарантира, че няма да преминат химикали във водата за изпитването.
If this happens, additional rating numbers may be marked within, to the right or to the left of the box.
Когато се използват стъклени материали, следва да се гарантира, че при извършване на енергични движения рибите не се увреждат и не се притискат.
The template therefore does not need to display symmetry.
Разстоянието между ваната и стъклените стени трябва да бъде най-малко 3 cm, за да се гарантира, че хвърлянето на хайвер не се извършва извън ваната.
An additional technique for mapping tubercles which are paired or joined vertically along the horizontal plane of the mouth could be done by double-marking two tubercle rating points in a single box.
Хвърленият във ваната хайвер попада през решетката и може да бъде пробовзет 45-60 min след началото на периода на осветление.
Mapping regions:
Прозачните хайверни зърна не се слепват и могат лесно да бъдат преброени, като се използва напречно осветление.
A Tubercles located around eye.
Когато се използват пет женски животни на съд, брой на хайверните зърна до 20 на ден може да се счита за нисък, до 100 за среден и над 100 за висок.
Mapped dorsal to ventral around anterior rim of eye.
Ваната за хвърляне на хайвер се отстранява, хайверните зърна се събират и ваната се поставя отново в съда за изпитване или възможно най-късно вечерта, или много рано сутринта.
Commonly multiple in mature control males, not present in control females, generally paired (one near each eye) or single in females exposed to androgens.
Времето до повторното поставяне не следва да надвишава един час, защото в противен случай е възможно сигналът от субстрата за хвърляне на хайвер да предизвика чифтосване и хвърляне на хайвер по необичайно време.
B Tubercles located between nares, (sensory canal pores).
Ако в дадена ситуация се изисква по-късно въвеждане на ваната за хвърляне на хайвер, това следва да бъде направено поне 9 часа след началото на периода на осветление.
Normally in pairs for control males at more elevated levels (2- enlarged or 3- pronounced) of development.
През тази късна част от деня вече не се предизвиква хвърляне на хайвер.
Not present in control females with some occurrence and development in females exposed to androgens.
Допълнение 4Б
C Tubercles located immediately anterior to nares, parallel to mouth.
Субстрат за хвърляне на хайвер за Pimephales promelas
Generally enlarged or pronounced in mature control males.
Две или три комбинирани пластмасови/керамични/от неръждаема стомана къщички с форма на керемида и вани за хвърляне на хайвер се поставят във всяка камера за изпитване (напр. сив полукръгъл улук с дължина 80 mm, поставен върху вана с дължина 130 mm, с опорен издатък) (вж. изображението).
Present or enlarged in less developed males or androgen-treated females.
За аклиматизирани по подходящ начин керемиди от поливинилхлорид или керамичен материал е доказано, че са подходящи като субстрат за хвърляне на хайвер (Thorpe et al., 2007).
D Tubercles located parallel along mouth line.
Препоръчително е керемидите да са шлайфани за подобряване на прилепването.
Generally rated developed in control males.
Ваната също така следва да бъде преградена, за да се предотврати достъпът на рибите до падналите хайверни зърна, освен ако ефикасността на прилепването на хайверните зърна не е доказана за използвания субстрат за хвърляне на хайвер.
Absent in control females but present in androgen-exposed females.
Основата е проектирана да побира всички хайверни зърна, които не са прилепнали към повърхността на керемидата, и следователно биха паднали на дъното на контейнера (или хайверни зърна, положени направо върху плоската пластмасова основа).
E Tubercles located on lower jaw, close to mouth, usually small and commonly in pairs.
Преди употреба всички субстрати за хвърляне на хайвер трябва да се промият в продължение на минимум 12 часа във вода за разреждане.
Varying in control or treated males, and treated females.
Допълнение 5А
F Tubercles located ventral to E. Commonly small and paired.
Оценка на вторични полови белези у Pimephales promelas за откриване на определени химикали с активно действие върху ендокринната система
Present in control males and androgen-exposed females.
Общ преглед
Tubercle Template
При изпитвания за нарушители на функциите на ендокринната система потенциално важните характеристики на външния вид на полово зрели Pimephales promelas включват цвят на тялото (т.е. светло/тъмно оцветяване), начини на оцветяване (т.е. наличието или отсъствието на вертикални ленти), форма на тялото (т.е., форма на главата и гръдната област, разширяване на коремната кухина), както и специализирани вторични полови белези (т.е., брой и размер на размножителните туберкули, размери на дорзалните отлагания на колаген и яйцеполагалото).
Numerical Rating
Размножителните туберкули са разположени върху главата (дорзалните отлагания) на репродуктивно активните мъжки Pimephales promelas и обикновено са подредени двустранно симетрично (Jensen et al.
resent
2001).
Date
При контролните женски и ювенилните животни от мъжки и женски пол не се наблюдава развитие на туберкули (Jensen et al.
nlarged
2001).
Total Score
Възможни са до осем отделни туберкули около очите и между ноздрите на мъжките екземпляри.
ronounced
Най-голям брой и най-големи туберкули са разположени в два успоредни реда, непосредствено под ноздрите и над устата.
Appendix 5B
При много риби съществуват групи от туберкули под долната челюст;
Assessment of secondary sex characteristics in medaka for the detection of certain endocrine active chemicals
тези, които са най-близо до устата, обикновено са един чифт, докато разположените вентрално от тях могат да се състоят от до четири туберкули.
Below is a description of the measurement of papillary processes, which are the secondary sex characteristics in medaka (Oryzias latipes).