natgillin/translations-raw huggingface dataset:
За вземане на разградената утайка се използват бутилки с широко гърло, изработени от полиетилен висока плътност или подобен материал, с възможност за разширяване.
Equation [4] should be used for the normal incubation temperature of 35 °C (308 K):
Добавя се утайка до около 1 cm от горната част на бутилките и същите се затварят херметично, за предпочитане с предпазен клапан.
Equation [4]
След транспортиране до лабораторията взетата утайка може да се използва директно или да се постави в лабораторен реактор.
Alternative volume calculation.
Прекомерното количество биогаз се освобождава чрез внимателно отваряне на бутилките с утайката.
Pressure meter readings are converted to ml of gas produced using the standard curve generated by plotting volume (ml) injected versus meter reading (Appendix 2).
Алтернативно, като източник на инокулум може да се използва получена в лабораторни условия анаеробна утайка, но нейният спектър на действие може да е намален.
The number of moles (n) of gas in the headspace of each vessel is calculated by dividing the cumulative gas production (ml) by 25286 ml/mole, which is the volume occupied by one mole of gas at 35 °C and standard atmospheric pressure.
Предупреждение — от разградената утайка се получават запалими газове, които създават рискове от пожар и експлозия:
Since 1 mole of CH4 and 1 mole of CO2 each contain 12 g of carbon, the amount of carbon (mg) in the headspace (mh) is given by Equation [5]:
С цел да се намали фоновото получаване на газ и за намаляване на влиянието на празните контроли може да бъде взето под внимание предварително разграждане на утайката.
Equation [5]
Ако се изисква предварително разграждане, утайката трябва да бъде оставена до 7 дни да се разгради без добавяне на никакви хранителни вещества или субстрати, при 35 °C ± 2 °C.
Rationalising to allow for blank control production of gas:
За няколко изпитвани вещества е установено, че предварително разграждане за около 5 дни обикновено осигурява оптимален спад в получаването на газ в празната проба без неприемливо увеличаване на латентния или инкубационния период по време на етапа на изпитване, и без загуба на активност.
Equation [6]
За идпитвани вещества, които са, или се очаква да бъдат слабо биоразградими, се разглежда евентуална предварителна експозиция на утайката на изпитваното вещество, за да се получи инокулум, който да е по-добре приспособен.
mean of the difference between volume of gas produced in headspace in the test vessels and blank control vessels;
В такъв случай изпитваното вещество се добавя с концентрация на органичен въглерод от 5 mg/l до 20 mg/l към разградената утайка и се инкубира за максимум 2 седмици.
volume occupied by 1 mole gas at 35 °C, 1 atmosphere.
Предварително експонираната утайка се промива внимателно преди употреба (вж. точка 25) и в протокола от изпитването се посочват условията на предварителната експозиция.
The course of biodegradation can be followed by plotting the cumulated pressure increase Δp (millibars) against time, if appropriate.
Утайката се промива (вж. точки 22-24) непосредствено преди употреба, за намаляване на концентрация на неорганичен въглерод на по-малко от 10 mg/l в крайната изпитвана суспензия.
From this curve, identify and record the lag phase (days).
Утайката се центрофугира в херметично затворени епруветки (напр.
The lag phase is the time from the start of the test until significant degradation starts (for example see Appendix 3).
3000 g за 5 минути) и супернатантът се отстранява.
If intermediate samples of supernatant were taken and analysed (see paragraphs 40, 46 and 47), then the total C produced (in gas plus that in liquid) may be plotted instead of only the cumulative pressure.
Получената пелета се суспендира повторно в среда, от която е отстранен кислородът (точки 16 и 17), суспензията се центрофугира повторно и течният супернатант се отстранява.
Carbon in the liquid
Ако неорганичният въглерод не е бил достатъчно намален, процедурата по промиване на утайката може да се повтори още само до два пъти.
The amount of methane in the liquid is ignored since its solubility in water is known to be very low.
Това, както изглежда, не засяга неблагоприятно микроорганизмите.
Calculate the mass of inorganic carbon in the liquid of the test vessels using equation [7]:
Накрая, пелетата се суспендира в необходимия обем от среда за изпитване и се определя общата концентрация на твърди вещества [напр. ISO 11923 (15)].
Equation [7]
Общо крайната концентрация на твърди вещества в съдовете за изпитване трябва да бъде в интервала от 1 g/l до 3 g/l (или около 10 % от тази в неразредена разградена утайка).
mass of inorganic carbon in the liquid (mg);
Гореописаните операции се провеждат по такъв начин, че утайката да има минимален контакт с кислород (напр. с използване на азотна атмосфера).
concentration of inorganic carbon in the test vessels minus that in the control vessels at the end of the test (mg/l);
Изпълняват се следните първоначални процедури, с използване техники за поддържане на възможно най-малък контакт между разградената утайка и кислорода; например, може да е наложително да се работи в защитна камера с ръкавици в азотна атмосфера и/или бутилките да се прочистят с азот (4).
volume of liquid in the vessel (l).
Приготвяне на съдовете за изпитване и на контролите
Total gasified carbon
Приготвят се съдове за изпитване в най-малко три повторения (вж. точка 13, б) за изпитваното вещество, празните контроли, референтното вещество, контролите за потискане (при условие) и камерите за регулиране на налягането (процедура по избор) (вж. точки 7 и 19-21).
Calculate the total mass of gasified carbon in the vessel using equation [8]:
Могат също така да се приготвят допълнителни съдове за оценка на първичното биоразграждане, като се използват специфични анализи за изпитваното вещество.
Equation [8]
Един и същ набор от празни контроли може да се използва за множество изпитвани вещества по време на едно и също изпитване, при условие че парното пространство е в съответствие с условията.
mt = total mass of gasified carbon (mg);
Разреденият инокулум се приготвя преди да бъде добавен към съдовете, например с помощта на пипета с широк отвор.
mh and ml are as defined above.
Аликвотни части от добре разбъркан инокулум (точка 25) се добавят така, че общата концентрация на твърди вещества да е една и съща във всички съдове (между 1 g/l и 3 g/l).
Carbon of test substance
Добавят се изходни разтвори на изпитваното и референтното вещества, след корекция до стойност на pH 7 ± 0,2, ако е необходима.
Calculate the mass of carbon in the test vessels derived from the added test substance using equation [9]:
Изпитваното вещество и референтното вещество следва да бъдат добавени, като се използва най-подходящият път на прилагане (точка 19).
Equation [9]
Изпитваната концентрация на органичния въглерод, обикновено следва да бъде между 20 и 100 mg/l (точка 4).
mass of test substance carbon (mg);
Ако изпитваното вещество е токсично, изпитваната концентрация трябва да се намали до 20 mg С/l или дори по-малко, ако се измерва само първичната биоразградимост чрез специфични анализи.
concentration of test substance carbon in the test vessel (mg/l)
Следва да се отбележи, че варирането на резултатите от изпитването се увеличава при по-ниски концентрации на изпитване.
volume of liquid in the test vessel (l).
В съдовете с празни проби се добавя еквивалентно количество от носителя, използван за дозиране на изпитваното вещество вместо изходен разтвор, суспензия или емулсия.
Extent of biodegradation
Ако изпитваното вещество се прилага с използването на филтри от стъклено влакно или органични разтворители, към празните проби се добавя филтър или обем разтворител, еквивалентен на изпарилия се.
Calculate the percentage biodegradation from headspace gas using equation [10] and the total percentage biodegradation using equation [11]:
Приготвя се допълнително повторение с изпитваното вещество за измерването на стойността на pH.
Equation [10]
Ако е необходимо, стойността на рН се коригира до 7 ± 0,2, като се разрежда с малки количества разредена неорганична киселина или вещество с алкален характер.
Equation [11]
Същите количества неутрализиращи вещества следва да се добавят към всички съдове за изпитване.
Dh = biodegradation from headspace gas (%);
Не би следвало да се налага да се правят такива добавки, тъй като стойностите на рН на изходните разтвори на изпитваното вещество и на референтното вещество вече са били коригирани (вж. точки 19 и 20).
Dt = total biodegradation (%);
Ако следва да се измерва първичното биоразграждане, трябва да се вземе подходяща проба от съда с контролата за pH, или от допълнителен съд за изпитване, и концентрацията на изпитваното вещество следва да се измерва с използване на специфични анализи.
mh, mv and mt are as defined above.
Към всички съдове могат да се добавят магнити с покритие, ако реакционните смеси трябва да се разбъркват (по избор).
The degree of primary biodegradation is calculated from the (optional) measurements of the concentration of the test substance at the beginning and end of incubation, using equation [12]:
Следва да се гарантира, че общият обем течност V1 и обемът на парното пространство VH са едни и същи във всички съдове;
Equation [12]
Стойностите на V1 and Vh се отбелязват и записват.
primary degradation of test substance (%);
Всеки съд следва да бъде херметично затворени със септа с газонепроницаемо покритие и прехвърлен от защитната камера с ръкавици (вж. точка 26) в инкубатора (вж. точка 13, а)).
initial concentration of test substance (mg/l);
Неразтворими изпитвани вещества
concentration of test substance at end (mg/l).
Претеглени количества от вещества, които са малко разтворими във вода, се добавят направо в приготвените съдове.
If the method of analysis indicates significant concentrations of the test substance in the unamended anaerobic sludge inoculum, use equation [13]:
Когато е необходимо използването на разтворител (вж. точка 19), разтворът или суспензията на изпитваното вещество се прехвърля в празните съдове.
Equation [13]
Когато е възможно, разтворителят се изпарява чрез прекарване на газообразен азот през съдовете, и след това се добавят останалите съставки, а именно разредена утайка (точка 25) и вода, от която е отстранен кислородът, съгласно изискванията.
corrected primary degradation of test substance (%);
Следва също така да бъде подготвена допълнителна контрола на разтворител (вж. точка 19).
initial “apparent” concentration of test substance in blank controls (mg/l);
За други методи за добавяне на неразтворими вещества може да се направи справка с ISO 10634 (13).
“apparent” concentration of test substance in blank controls at end (mg/l).
Течните изпитвани вещества могат да се дозират със спринцовка в напълно приготвени херметично затворени съдове, ако се очаква, че първоначалната стойност на pH не надвишава 7 ± 1 — в противен случай дозирането се извършва както е описано по-горе (вж. точка 19).
Validity of results
Инкубиране и измервания на налягането на газовете
Pressure readings should be used only from vessels that do not show pink coloration (see paragraph 33).
Приготвените съдове се инкубират при 35 °C ± 2 °C за около 1 час, за да се позволи достигане на равновесие и излишъкът от газове да бъде освободен в атмосферата, например чрез разклащане на всички съдове един след друг, вкарване на иглата на манометъра (точка 13, в)) през запушалката и отваряне на клапана, докато манометърът отчете нулева стойност.
Contamination by oxygen is minimised by the use of proper anaerobic handling techniques.
Ако на този етап, или когато се правят междинни измервания, налягането в парното пространство е по-ниско от атмосферното, следва да се подаде газообразен азот, за да се възстанови атмосферното налягане.
It should be considered that the test is valid if the reference substance reaches a plateau that represents more than 60 % biodegradation [17].
Клапанът се затваря (вж. точка 13, в)) и се продължава с инкубирането на тъмно, като се гарантира, че всички части на съдовете се поддържат при температурата на разграждането.
If the pH at the end of the test has exceeded the range 7 ± 1 and insufficient biodegradation has taken place, repeat the test with increased buffer capacity of the medium.
Съдовете се наблюдават след инкубирането в продължение на 24 до 48 часа.
Inhibition of degradation
Съдовете се отхвърлят, ако съдържанието на съдовете показва ясно розово оцветяване в супернатанта, т.е. ако ресазуринът (вж. точка 16) е променил цвета си, показвайки наличие на кислород (вж. точка 50).
Gas production in vessels containing both the test substance and reference substance should be at least equal to that in the vessels containing only reference substance;
Въпреки че малки количества кислород могат да бъдат толерирани от системата, по-високи концентрации могат сериозно да потиснат хода на биоразграждането в анаеробни условия.
otherwise, inhibition of gas production is indicated.
Отхвърлянето на случаен отделен съд от набора от три повторения може да бъде прието, но по-голяма честота на неуспехите трябва да води до проучване на опитните процедури, както и до повтаряне на изпитването.
In some cases gas production in vessels containing test substance without reference substance will be lower than that in the blank controls, indicating that the test substance is inhibitory.
Съдържанието на всеки съд се смесва внимателно чрез бъркане или чрез разклащане в продължение на няколко минути поне 2 или 3 пъти седмично и малко преди всяко измерване на налягането.
The test report must include the following information:
Разклащането суспендира повторно инокулума и гарантира равновесието в газовата фаза.
common name, chemical name, CAS number, structural formula and relevant physical-chemical properties;
Всички измервания на налягането следва да бъдат извършвани бързо, тъй като в съдовете за изпитване може да настъпи понижаване на температурата, водещо до неверни показания.
purity (impurities) of test substance.
При измерването на налягането целият съд за изпитване, включително парното пространство, следва да бъде поддържан при температурата на разграждането.
volumes of diluted digester liquor (Vl) and of the headspace (Vh) in the vessel;
Налягането на газа се измерва, например, чрез вкарване през септата на иглата от спринцовка, прикрепена към манометъра (точка 12, в)).
description of the test vessels, the main characteristics of biogas measurement (e.g. type of pressure meter) and of the IC analyser;
Следва да се вземат мерки за предотвратяване на навлизането на вода в иглата от спринцовка;
application of test substance and reference substance to test system:
ако това се случи, трябва мокрите части да бъдат подсушени и да се постави нова игла.
test concentration used and any use of solvents;
Налягането трябва да се измерва в mbar (вж. точка 42).
name of sewage treatment plant, description of the source of waste water treated (e.g. operating temperature, sludge retention time, predominantly domestic, etc.), concentration, any information necessary to substantiate this and information on any pre-treatment of the inoculum (e.g. pre-digestion, pre-exposure);
Налягането на газовата фаза в съдовете може да се измерва периодично, например седмично и, по избор, излишъкът от газове се освобождава в атмосферата.
incubation temperature;
Като алтернатива, налягането се измерва само в края на изпитването, за да се определи количеството на получения биогаз.
pH and IC values at the end of the test;
Препоръчва се да се извършват междинни замервания на налягането на газовата фаза, тъй като повишаването на налягането предоставя насоки кога може да бъде приключено изпитването и позволява наблюдаването на кинетиката (вж. точка 6).
concentration of test substance at the beginning and end of the test, if a specific measurement has been performed;
Изпитването обикновено се прекратява след инкубационен период от 60 дни, освен в случаите когато кривата на биоразграждането, получена от измерването на налягането, е достигнала фазата на плато преди това;
all the measured data collected in the test, blank, reference substance and inhibition control vessels, as appropriate (e.g. pressure in millibars, concentration of inorganic carbon (mg/l)) in tabular form (measured data for headspace and liquid should be reported separately);
това е фазата, в която е достигнато максимално разграждане и кривата на биоразграждане е изравнена.
statistical treatment of data, test duration and a diagram of the biodegradation of test substance, reference substance and inhibition control;
Ако стойността във фазата на плато е по-малка от 60 %, интерпретирането е проблематично, тъй като тази стойност сочи, че само част от молекулата е минерализирана, или че е направена грешка.
percentage biodegradation of test substance and reference substance;
Ако в края на нормалния период на инкубация се получават газове, но очевидно не е достигната фаза на плато, следва да се разгледа удължаване на срока на изпитването, за да се провери дали фазата на плато (> 60 %) ще бъде достигната.
reasons for any rejection of the test results;
Измерване на неорганичен въглерод
discussion of results.
В края на изпитването, след последното измерване на налягането на газовете, утайката се оставя да се утаи.
The following chapters of this Annex:
Всички съдове се отварят един след друг и незабавно се взема проба за определяне на концентрацията (mg/l) на неорганичен въглерод в течния супернатант.
C.4, Determination of Ready Biodegradability;
Към течния супернатант не трябва да се прилага нито центрофугиране, нито филтруване, тъй като това би довело до неприемлива загуба на разтворен въглероден диоксид.
Modified MITI Test (II), OECD Guideline for Testing of Chemicals, No. 302C, OECD, Paris
Ако течността не може да бъде анализирана в момента, в който е взета проба от нея, тя се съхранява до 2 дни в херметично затворен флакон без парно пространство и охладена до температура от около 4 °C.
Bioassay for monitoring biochemical methane potential and anaerobic toxicity.
След измерването на неорганичния въглерод се измерва и се записва стойността на pH.
Water Res. 13, 485-492.
Като алтернатива, неорганичният въглерод в супернатанта може да се определи косвено чрез отделянето на разтворения неорганичен въглерод под формата на въглероден диоксид, който може да бъде измерен в парното пространство.
1 Pressure meter
След последното измерване на налягането на газовете, налягането във всички съдове за изпитване се коригира до изравняване с атмосферното налягане.
5 Head space (Vh)
Съдържанието на всеки съд се подкиселява приблизително до рН 1 чрез добавяне на концентрирана неорганична киселина (напр.
6 Digested sludge inoculum (Vl)
H2SO4) през септата на херметично затворените съдове.
The pressure-meter readings may be related to gas volumes by means of a standard curve produced by injecting known volumes of air at 35 °C ± 2 °C into serum bottles containing a volume of water equal to that of the reaction mixture, VR:
Разклатените съдове се инкубират при 35 °C ± 2 °C в продължение на приблизително 24 часа и се измерва с манометър налягането на газовете, получено в резултат на отделения въглероден диоксид.
Seal the bottles and place in a water bath at 35 °C for 1 hour to equilibrate;
Сходни замервания се извършват за съответните празни проби, референтни вещества и, ако са включени, съдовете с контроли за потискане (вж. точка 21).
Insert the syringe needle through the seal of one of the bottles, open the valve until the pressure meter reads zero and close the valve;
В някои случаи, особено когато същите съдове с контроли се използват за изпитване на няколко изпитвани вещества, трябва да бъдат взимани предвид измервания на междинните концентрации на неорганичен въглерод в съдовете за изпитване и в съдовете с контроли, когато това е подходящо.
Repeat the procedure for the remaining bottles;
В този случай трябва да бъде приготвен достатъчен брой съдове за всички междинни измервания.
Repeat the total procedure above using 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml, 6 ml, 8 ml, 10 ml, 12 ml, 16 ml, 20 ml and 50 ml of air;
Настоящата процедура е за предпочитане пред вземането на всички проби само от един съд.
Plot a conversion curve of pressure (Pa) against gas volume injected Vb (ml).
Последното може да се извършва само при условие, че обемът, необходим за анализ на DIC, не се счита за прекомерно голям.
Example of a degradation curve (cumulative net pressure increase)
Измерването на DIC трябва да бъде направено след измерването на налягането на газовете без освобождаване на излишъка от газове, както е описано по-долу:
Example of data sheets for the anaerobic biodegradation test — Data sheet for the test substance
вземат се проби от супернатанта с възможно най-малък обем, с помощта на спринцовка през септата и без отваряне на съдовете, и се определя неорганичният въглерод в пробата;
Laboratory:
след вземането на пробата излишъкът от газове се освобождава, или не;
Test No.:
следва да се има предвид, че дори малко намаление в обема на супернатанта (напр. около 1 %) може да доведе до значително увеличение на обема на газовете в парното пространство (Vh);
Test temperature: (°C):
уравненията (вж. точка 44) се коригират чрез увеличаване на Vh в уравнение 3, когато е необходимо.
Volume of headspace (Vh):
Специфични анализи
Volume of liquid (Vl ):
Ако трябва да се определи първичното разграждане при анаеробни условия (виж точка 30), от съдовете, съдържащи изпитваното вещество, в началото и в края на изпитването се взема проба с подходящ обем за специфични анализи.
Carbon in test substance Cc,v:
Ако бъде извършено това, се отбелязва, че обемите на парното пространство (Vh) и на течността (Vl) ще се променят, и това се взема под внимание при изчисляването на резултатите от получаването на газове.
Day
Като алтернатива могат да се вземат проби за специфични анализи от допълнителни смеси, които преди това са приготвени за тази цел (точка 30).
p1 (test)
По практически причини, налягането на газовете се измерва в милибари (1 mbar = 1h Pa = 102 Pa; 1 Pa = 1 N/m2), обемът — в литри, а температурата — в градуси по Целзий.
p2 (test)
Въглерод в парното пространство
p3 (test)
Тъй като както в 1 mol метан, така и в 1 mol въглероден диоксид, се съдържат по 12 g въглерод, масата на въглерода в даден обем на отделените газове може да бъде изразена като:
p (test)
Уравнение [1]
p4 (blank)
маса на въглерода (mg) в даден обем на отделения газ;
p5 (blank)
12 относителна атомна маса на въглерода;
p6 (blank)
брой молове газ в дадения обем.
p (blank)
Ако в значителни количества се получава газ, различен от метан или въглероден диоксид (напр.
p (net)
N2O), формулата [1] следва да бъде изменена, за да се опише възможността за въздействия от получените газовете.
test — blank
От законите за газовете n може да бъде изразено като:
mean (mbar)
Уравнение [2]
Δp (net)
налягане на газовете (Pa);
Cumulative
обема на газовете (m3);
headspace C [2](mg)
моларна газова константа [8,314J/(mol.K)];
Biodegradation [3](%)
температура на инкубирането (K).
test
Чрез комбинация от уравнение [1] и [2] и рационализиране, за да се даде възможност за получаване на газ в празните контроли:
test mean
Уравнение [3]
blank
маса на нетния въглерод, получен като газове в парното пространство (mg);
blank mean
средна стойност на разликата между началното и крайното налягане в съдовете за изпитване, минус съответстващата средна стойност в съдовете с празни проби (mbar);
test -blank
обем на парното пространство в съда (l);
liquid C [4](mg)
0,1 преобразуване както на N/m2 в mbar, така и на m3 в литри.
total C [5](mg)
Уравнение [4] следва да бъде използвано за нормалната температура на инкубиране от 35 °C (308 K):
Biodegradation [6](%)
Уравнение [4]
IC (end)
Алтернативно изчисляване на обема.
pH (end)
Показанията на манометъра трябва да се преобразуват в ml газове, получени при използване на стандартната крива, генерирана чрез начертаване на инжектирания обем (ml) спрямо показанията на манометъра (допълнение 2).
Reference substance:
Броят молове (n) газове в парното пространство на всеки съд се изчислява като се раздели кумулативното получаване на газове (ml) на 25286 ml/mol, което е обемът, заеман от един mol газове при 35 °C и стандартно атмосферно налягане.
Volume of liquid (Vl) (litres):