natgillin/translations-raw huggingface dataset:
В изпитването следва да се използват ларви в първи стадий на развитие (максимум 48 h след излюпването).
As a minimum, samples of the overlying water, pore water and the sediment should be analysed at the start of exposure (in case of water spiking preferably one hour after application) and at the end of the test, at the highest concentration and a lower one.
Стадият на развитие на ларвите може да се провери чрез проверка на широчината на капсулата на главата (7).
This applies to vessels from both generations.
Двадесет ларви в първи ларвен стадий от 1-во поколение се разпределят на случаен принцип във всеки съд за изпитване, който съдържа система седимент-вода, като се използва пипета с тъп край.
From the crystallising dishes in the breeding cage only the overlying water is analysed, since this is what the egg ropes come into contact with (for the spiked sediment design an analytical confirmation of the sediment concentration may be considered).
Аерирането на водата се спира при добавянето на ларвите в съдовете за изпитване и не се подновява преди изтичането на 24 часа след добавянето на ларвите (вж. точка 32).
Further measurements of sediment, pore water or overlying water during the test may be conducted if deemed necessary.
В зависимост от използвания план за изпитване (вж. точки 19 и 20) броят на ларвите, използвани за всяка концентрация, е най-малко 120 (6 повторения на концентрация) за подхода за ECX и 160 за подхода за NOEC (8 повторения на концентрация).
These determinations of test chemical concentration inform on the behaviour/partitioning of the test chemical in the water-sediment system.
При постановката със седимент с добавка експозицията започва с поставянето на ларвите.
Sampling of sediment and pore water at the start and during the test (see paragraph 39) requires additional test vessels to perform analytical determinations.
Добавяне към водата над седимента
Measurements in sediment in the spiked water design might not be necessary if the partitioning of the test chemical between water and sediment has been clearly determined in a water/sediment study under comparable conditions (e.g. sediment to water ratio, type of application, organic carbon content of sediment), or if measured concentrations in the overlying water are shown to remain within 80 to 120 % of the nominal or measured initial concentrations..
Двадесет и четири часа след добавянето на ларвите в първи ларвен стадий от 1-во поколение, изпитваният химикал се добавя във водата над седимента и отново се прилага леко аериране (за възможни изменения на планирането на изпитването вж. точка 7).
When intermediate measurements are made (e.g. at day 7 and/or 14) and if the analysis needs large samples which cannot be taken from test vessels without influencing the test system, analytical determinations should be performed on samples from additional test vessels treated in the same way (including the presence of test organisms) but not used for biological observations.
Малки обеми от изходните разтвори на изпитвания химикал се въвеждат под повърхността на водата, като се използва пипета.
Centrifugation at e.g. 10000 g at 4 °C for 30 min is the recommended procedure to isolate interstitial (= pore) water.
След това водата над седимента се разбърква леко, като се внимава седиментът да остане незасегнат.
However, if the test chemical is demonstrated not to adsorb to filters, filtration may also be acceptable.
В постановката с вода с добавка експозицията започва с добавянето на добавката към водата (т.е., един ден след добавянето на ларвите).
In some cases it might not be possible to analyse concentrations in the pore water as the sample volume may be too small.
Събиране на имагиниралите полово зрели индивиди
Physical-chemical parameters
Имагиниралите индивиди от 1-то поколение се събират поне веднъж, но за предпочитане два пъти дневно (вж. точка 36) от съдовете за изпитване с аспиратор, всмукателен вентилатор или подобно устройство (вж. допълнение 5).
pH, dissolved oxygen in the test water and temperature of the water in the test vessels and crystallising dishes should be measured in an appropriate manner (see paragraph 10).
Трябва особено да се внимава полово зрелите индивиди да не бъдат увредени.
Hardness and ammonia should be measured in the controls and in one test vessel and crystallising dish at the highest concentration at the start and the end of the test.
Събраните индивиди от четири съда за изпитване в рамките на едно третиране се пускат в клетката за размножаване, към която те са били разпределени преди това.
The purpose of this life-cycle test is to determine the effect of the test chemical on the reproduction and, for two generations, the development rate and the total number of fully emerged and alive male and female midges.
В деня на имагинирането на първия (мъжки) индивид в блюдата кристализатори се слага добавка чрез поставяне с пипета под водната повърхност на малък обем изходен разтвор на изпитвания химикал (постановка с вода с добавка).
For the emergence ratio data of males and females should be pooled.
Концентрацията на изпитвания химикал в блюдото кристализатор номинално е същата, както в съдовете за третиране, които са разпределени за тази конкретна клетка за размножаване.
If there are no statistically significant differences between the sensitivities in the development rate of the separate sexes, male and female results may be pooled for statistical analysis.
За постановката със седимент с добавка блюдата кристализатори се приготвят около ден 11 след началото на експозицията (т.е. въвеждането на ларвите от 1-то поколение), така че в тях да може да се достигне равновесие около 48 часа преди получаването на първите яйчни маси.
Effect concentrations expressed as concentrations in the overlaying water (for spiked water) or in the sediment (for spiked sediment), are usually calculated based on measured concentrations at the beginning of the exposure (see paragraph 38).
Яйчните маси се събират от блюдото кристализатор в клетката за размножаване с пинсета или пипета с тъп край.
Therefore, for spiked water, the concentrations typically measured at the beginning of the exposure in the overlying water of the vessels for both generations and those of the crystallising dishes are averaged for each treatment.
Всяка яйчна маса се поставя в съд, съдържащ среда за отглеждане от клетката за размножаване, от която тази яйчна маса е била събрана (напр. гнездо от 12-гнездна микроплака, заедно с най-малко 2,5 ml среда).
For spiked sediment, the concentrations typically measured at the beginning of the exposure in the vessels for both generations (and optionally those of the crystallising dishes) are averaged for each treatment.
Съдовете с яйчна маса се покриват с капак, за да се предотврати значимо изпаряване.
To compute a point estimate, i.e. an ECx, the per-vessel and per-breeding cage statistics may be used as true replicates.
Яйчните маси се държат за наблюдение в продължение на най-малко шест дни след като са били получени, така че да могат да се класифицират като оплодени или неоплодени.
In calculating a confidence interval for any ECx the variability among vessels should be taken into account, or it should be shown that this variability is so small that it can be ignored.
За започване на 2-ро поколение от всяка клетка за размножаване се избират най-малко три, а за предпочитане шест оплодени яйчни маси, и заедно с малко храна им се дава възможност за излюпване.
When the model is fitted by Least Squares, a transformation should be applied to the per-vessel statistics in order to improve the homogeneity of variance.
Тези яйчни маси трябва да са произведени по време на пиковата стойност на яйцеполагането, която обикновено е около ден 19 от изпитването в контролите.
However, ECx values should be calculated after the response is transformed back to the original value (31).
В идеалния случай 2-рото поколение от всички третирания се започва на същия ден, но поради свързаните с химикала въздействия върху развитието на ларвите това може да не е винаги възможно.
When the statistical analysis aims at determining the NOEC by hypothesis testing, the variability among vessels needs to be taken into account, which is guaranteed by using ANOVA methods (e.g. Williams' and Dunnett's test procedures).
В такъв случай по-високата концентрация може да бъде започната по-късно от третиранията на по-ниски концентрации и контролата (на разтворител).
Williams' test would be appropriate when a monotonic dose-response is expected in theory and Dunnett's test would be appropriate where the monotonicity hypothesis does not hold.
а.
Alternatively, more robust tests (27) can be appropriate in situations where there are violations of the usual ANOVA assumptions (31).
При постановката с вода с добавка системата седимент-вода за 2-то поколение се приготвя чрез добавяне на изпитвания химикал във водата над седимента около 1 час преди добавянето на ларвите в първи ларвен стадий в съдовете за изпитване.
Emergence ratio
Малки обеми от разтворите на изпитвания химикал се въвеждат под повърхността на водата, като се използва пипета.
Emergence ratios are quantal data, and can be analysed by the Cochran-Armitage test applied in a step-down manner where a monotonic dose-response is expected and these data are consistent with this expectation.
След добавянето се прилага леко аериране.
If not, a Fisher's exact or Mantel-Haentzal test with Bonferroni-Holm adjusted p-values can be used.
б.
If there is evidence of greater variability between replicates within the same concentration than a binomial distribution would indicate (often referenced to as “extra-binomial” variation), then a robust Cochran-Armitage or Fisher exact test such as proposed in (27), should be used.
При постановката със седимент с добавка съдовете за изпитване, съдържащи системата седимент-вода за 2-то поколение се приготвят по същия начин, както за 1-то поколение.
The sum of live midges (males plus females) emerged per vessel, ne, is determined and divided by the number of larvae introduced, na:
Двадесет ларви в първи ларвен стадий (максимум 48 h след излюпването) от 2-ро поколение се разпределят на случаен принцип във всеки съд за изпитване, който съдържа системата седимент-вода с добавка, като се използва пипета с тъп край.
ER emergence ratio
Аерирането на водата трябва да се спре, когато ларвите в първи ларвен стадий се добавят в съдовете за изпитване, и да не се подновява преди изтичането на 24 часа след добавянето на ларвите.
number of live midges emerged per vessel
В зависимост от използвания план за изпитване (вж. точки 19 и 20) броят на ларвите, използвани за всяка концентрация, е най-малко 120 (6 повторения на концентрация) за подхода за ECX и 160 за подхода за NOEC (8 повторения на концентрация).
number of larvae introduced per vessel (normally 20)
Необходимо е да се хранят ларвите в съдовете за изпитване, за предпочитане всеки ден или най-малко три пъти седмично.
When ne is larger than na (i.e. when unintentionally more than the foreseen number of larvae where introduced) na should be made equal to ne.
Храна за риби (суспензия във вода или фино смляна храна, напр.
An alternative approach that is most appropriate for large sample sizes, when there is extra binomial variance, is to treat the emergence ratio as a continuous response and use procedures consistent with these ER data.
Tetra-Min или Tetra-Phyll; вж. подробности в допълнение 2) от 0,25-0,5 mg (0,35-0,5 mg за C. yoshimatsui) на ларва на ден е достатъчно количество храна за млади ларви в първите 10 дни от тяхното развитие.
A large sample size is defined here as the number emerged and the number not emerging both exceeding five, on a per replicate (vessel) basis.
За по-възрастни ларви може да е необходима малко повече храна:
To apply ANOVA methods, values of ER should first be transformed by the arcsin-sqrt transformation or Tukey-Freeman transformation to obtain an approximate normal distribution and to equalise variances.
0,5—1,0 mg на ларва на ден трябва да е достатъчно за оставащото време на изпитването.
The Cochran-Armitage, Fisher's exact (Bonferroni), or Mantel-Haentzal tests can be applied when using the absolute frequencies.
Дажбата храна във всички третирания и контролата следва да се намали, ако е забелязано развитие на гъбички, или ако в контролата има смъртност.
The arcsin-sqrt transformation is applied by taking the inverse sine (sine– 1) of the square root of ER.
Ако е невъзможно да се спре развитието на гъбички, изпитването трябва да се повтори.
For emergence ratios, ECx-values are calculated using regression analysis (e.g. probit, logit or Weibull models (28)).
Токсикологичната значимост на експозицията чрез поглъщане обикновено е по-висока при химикали с висок афинитет към органичен въглерод или при химикали, образуващи ковалентна връзка със седимента.
If regression analysis fails (e.g. when there are less than two partial responses), other non-parametric methods such as moving average or simple interpolation can be used.
Следователно, когато се изпитват химикали с такива свойства, количеството храна, необходимо за гарантиране на преживяването и нормалното развитите на ларвите, може да се добави към формулирания седимент преди периода на стабилизация, в зависимост от регулаторните нужди.
Development rate
За да се предотврати влошаването на качеството на водата, вместо храна за риби трябва да се използва растителна материя, например да се добавят 0,5 % (сухо тегло) фино смлени листа от коприва (Urtica dioica), черница (Morus alba), бяла детелина (Trifolium repens), спанак (Spinacia oleracea) или друг растителен материал (Cerophyl или алфа-целулоза).
Mean development time represents the mean time span between the introduction of larvae (day 0 of the test) and the emergence of the experimental cohort of midges (for calculation of the true development time, the age of larvae at the time of introduction should be considered).
Добавянето в седимента на цялата дажба от даден органичен източник на храна преди поставянето на добавката нито е обичайно, предвид качеството на водата и биологичните показатели (21), нито е стандартизиран метод, но нови изследвания сочат, че този метод функционира (19) (26).
The development rate (unit: 1/day) is the reciprocal of the development time and represents that portion of larval development which takes place per day.
Полово зрелите индивиди в клетката за размножаване обикновено не се нуждаят от храна, но плодовитостта и оплождането се подобряват, когато на имагиниралите полово зрели индивиди бъде предложен като храна наситен разтвор на захароза, напоен в тампон от памук (34).
Development rate is preferred for the evaluation of these sediment toxicity studies as its variance is lower, and it is more homogeneous and closer to a normal distribution compared to the development time.
Водата над седимента в съдовете за изпитване леко се аерира 24 часа след добавянето на ларвите в първи ларвен стадий от двете поколения, като аерирането продължава през цялото време на изпитването (следва да се вземат мерки концентрацията на разтворения кислород да не пада под 60 % от стойността на насищане във въздух).
Hence, more powerful parametric test procedures may be used with development rate unlike development time.
Аерирането се осъществява с помощта на стъклена пипета „Пастьор“, чийто отвор е закрепен на 2—3 cm над слоя седимент, с няколко мехурчета в секунда.
For development rate as a continuous response, ECx-values can be estimated by regression analysis (e.g. (29) (30)).
Когато се изпитват летливи химикали, следва да се разгледа възможността да не се аерира системата седимент-вода, като същевременно критериите за валидност за минимум 60 % от ASV (точка 10) трябва да бъдат изпълнени.
A NOEC for the mean development rate can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Повече подробна информация е предоставена в (16).
Since males emerge earlier than females, i.e. have a higher development rate, it makes sense to calculate the development rate for each gender separately in addition to that for the total midges.
Изпитването с C. riparius се провежда при постоянна температура 20 °С (± 2 °С).
For statistical testing, the number of midges observed on inspection day x are assumed to be emerged at the mean of the time interval between day x and day x – l (l = length of the inspection interval, usually 1 day).
Препоръчваните за C. dilutus и C. yoshimatsui температури са съответно 23 °C и 25 °C (± 2 °С).
The mean development rate per vessel ( x
Продължителността на излагане на светлина е 16 часа, а интензитетът на светлината трябва да бъде между 500 и 1000 lux.
) is calculated according to:
По отношение на клетките за размножаване може да бъде включена допълнителна фаза от един час разсъмване и здрач.
mean development rate per vessel
Продължителност на експозицията
i index of inspection interval
Постановка с вода с добавка:
m maximum number of inspection intervals
периодът на експозиция на 1-то поколение започва, когато изпитваният химикал се добавя във водата над седимента в съдовете за изпитване (което е един ден след въвеждането на ларвите — за възможни изменения на плана за експозицията вж. точка 7).
number of midges emerged in the inspection interval i
Експозицията на 2-рото поколение ларви започва незабавно, тъй като те са въведени в система седимент-вода, в която вече има добавка.
total number of midges emerged at the end of experiment (= Σfi)
Максималната продължителност на експозицията за 1-то поколение е 27 дни и 28 дни за 2-то поколение (1-вото поколение ларви прекарва един ден в съдовете без експозиция) за C. riparius и C. yoshimatsui.
development rate of the midges emerged in interval i
Като се има предвид припокриването, пълната продължителност на изпитването е около 44 дни.
day i
За C. dilutus максималните продължителности на експозицията са 64 и 65 дни, съответно за 1-вото и за 2-рото поколение.
inspection day (days since introduction of the larvae)
Общата продължителност е около 100 дни.
length of inspection interval i (days, usually 1 day)
Постановка със седимент с добавка:
Sex ratio
експозицията започва с поставянето на ларвите и е максимум 28 дни за двете поколения за C. riparius и C. yoshimatsui и максимум 65 дни за двете поколения за C. dilutus.
Sex ratios are quantal data and should therefore be evaluated by means of a Fisher's exact test or other appropriate methods.
Имагиниране
The natural sex ratio of C. riparius is one, i.e. males and females are equally abundant.
За двете поколения се определя времето на развитие и общият брой на напълно имагинирали и живи мъжки и женски индивиди.
For both generations the sex ratio data should be treated identically.
Мъжките лесно се разпознават по перестите си антени и слабото телосложение.
Since the maximum number of midges per vessel (i.e. 20) is too low for a meaningful statistical analysis, the total number of fully emerged and alive midges for each gender is summed over all vessels of one treatment.
Съдовете за изпитване с двете поколения се наблюдават най-малко три пъти седмично, за да се оцени визуално дали не е налично ненормално по отношение на контролите поведение на ларвите (напр. напускане на седимента, необичайно плуване).
These untransformed data are tested against the (solvent) control or pooled control data in a 2 × 2 contingency table.
По време на периода на имагиниране, който започва около 12 дни след въвеждането на ларвите за C. riparius и C. yoshimatsui (20 дни за C. dilutus), имагиниралите индивиди се броят и и определят по пол поне веднъж, но за предпочитане два пъти дневно (рано сутринта и късно следобед).
Reproduction, as fecundity, is calculated as the number of egg ropes per female.
След разпознаването индивидите от 1-то поколение внимателно се отстраняват от съдовете и се прехвърлят в клетка за размножаване.
More specific, the total number of egg ropes produced in a breeding cage is divided by the total number of alive and undamaged females added to that cage.
След разпознаването на индивидите от 2-то поколение, същите се отстраняват и умъртвяват.
A NOEC for fecundity can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Всички яйчни маси, положени в съдовете за изпитване от 1-то поколение, следва да бъдат събирани индивидуално и прехвърляни с най-малко 2,5 ml от водата, от която са събрани, върху 12-гнездови микроплаки (или други подходящи съдове), които са покрити с капак, за да се предотврати значимо изпаряване.
Fertility of the egg ropes is used to quantify the number of fertile egg ropes per female.
Броят на умрелите ларви и видимите какавиди, които не са успели да имагинират, също следва да се записва.
The total number of fertile egg ropes produced in a breeding cage is divided by the total number of alive and undamaged females added to that cage.
Примери за клетка за размножение, съд за изпитване и всмукателен вентилатор са дадени в допълнение 5.
A NOEC for fertility can be determined via ANOVA methods, e.g. Williams or Dunnett's test.
Размножение
The test report should provide the following information:
Въздействията върху размножаването се оценяват чрез броя на яйчните маси, получени от 1-то поколение индивиди, и от оплождането на тези яйчни маси.
physical nature and physical-chemical properties (water solubility, vapour pressure, log Kow, partition coefficient in soil (or in sediment if available), stability in water and sediment etc.);
Веднъж дневно яйчните маси се събират от блюдото кристализатор, което е поставено във всяка клетка за размножаване.
chemical identification data (common name, chemical name, structural formula, CAS number, etc.) including purity and analytical method for the quantification of the test chemical.
Яйчните маси следва да се събират и прехвърлят с най-малко 2,5 ml от водата, от която са събрани, в 12-гнездова микроплака (една яйчна маса във всяко гнездо) или в други подходящи съдове, които са покрити с капак, за да се предотврати значимо изпаряване.
test organisms used:
За всяка яйчна маса се документират следните характеристики:
information on how the egg masses and larvae were handled;
дата на получаване, размер (нормална, т.е.
information on handling of the emerged adults of the 1st generation with the help of an exhauster etc (see Appendix 5)
1,0 ± 0,3 cm, или малка; обикновено ≤ 0,5 cm), структура (нормална = във форма на банан със спираловидни низове от яйца, или необичайна, напр. низ от яйца, който не е със спираловидна форма) и оплождане (оплодена или неоплодена).
age of the test organisms at the time of insertion into the test vessels of the 1st and 2nd generation.
Оплождането на яйчната маса се оценява в рамките на шест дни след като е била получена.
sediment used, i.e. natural or formulated (artificial) sediment;
Яйчната маса се счита за оплодена, когато най-малко една трета от яйцата се излюпят.
natural sediment:
Общият брой на женските индивиди, добавени към клетката за размножение, се използва, за да се изчислят броят на яйчните маси на женски индивид и броят на оплодените яйчни маси на женски индивид.
location and description of sediment sampling site, including, if possible, contamination history;
Ако се изисква, броят на яйцата в яйчната маса може да бъде оценен, без да се нарушава целостта им, с използване на метод с пръстени (подробно описан в 32 и 33).
sediment characteristics:
Аналитични измервания
pH, organic carbon content, C/N ratio and granulometry (if appropriate).
Концентрация на изпитвания химикал
formulated sediment:
Като минимум следва да се анализират проби от водата над седимента, от водата между частиците на седимента и от седимента в началото на експозицията (при вода с добавка за предпочитане е един час след прилагането) и в края на изпитването при най-високата концентрация и при по-ниска такава.
preparation, ingredients and characteristics (organic carbon content, pH, moisture, etc. measured at the start of the test);
Това се прилага за съдове както с едното, така и с другото поколение.
preparation of the test water (if reconstituted water is used) and characteristics (oxygen concentration, pH, hardness, etc. measured at the start of the test);