natgillin/translations-raw huggingface dataset:
За предпочитане е решението за подбор на извадка от допълнителни ларви или от следващия надолу, или от следващия нагоре етап на развитие, да се прави въз основа на цялостна оценка на разпределението на етапите в контролата и при третиранията с химикала.
this information should include any information or narrative descriptions of deviations from the test method;
Това означава, че ако третирането с химикала е свързано със забавяне на развитието, тогава извадката от допълнителните ларви следва да бъде взета от следващия надолу етап.
Biological observations and data:
Обратно, ако третирането с химикала е свързано с ускоряване на развитието, тогава извадката от допълнителните ларви следва да бъде взета от следващия нагоре етап.
these include daily observations of mortality, food consumption, abnormal swimming behaviour, lethargy, loss of equilibrium, malformations, lesions, etc.
В случаи на тежки изменения в развитието на поповите лъжички, дължащи се на третирането с изпитвания химикал, може да не е налице припокриване на разпределението на етапите в третиранията с изчислената медианна стойност на етапа на развитие от контролите.
Observations and data collected at predetermined intervals include:
Само в тези случаи процесът на подбор следва да бъде модифициран чрез използване на етап, различен от медианната стойност на етапа от контролите, за постигане на извадки от ларви със съвпадащ етап за тиреоидната хистопатология.
developmental stage, hind limb length, snout vent length, and wet weight;
Освен това, ако етапите са неопределени (т.е., асинхронност), тогава за хистологичен анализ следва на случаен принцип да се изберат 5 попови лъжички от всяко повторение.
Statistical analytical techniques and justification of techniques used;
Обосновката за извадка от ларви, които не са на етап, равностоен на медианната стойност на етапа на развитие от контролите, следва да бъде протоколирана.
results of the statistical analysis preferably in tabular form;
Определяне на биологични крайни точки
Histological data:
По време на 21-дневната фаза на експозиция измерването на първичните крайни точки се извършва в дни 7 и 21, но е необходимо ежедневно наблюдение на изпитваните индивиди.
these include narrative descriptions, as well as graded severity and incidence scores of specific observations, as detailed in the histopathology guidance document;
В таблица 3 е даден преглед на крайните точки на измерване, както и на съответните моменти на извършване на наблюдение.
Ad hoc observations:
По-подробна информация за техническите процедури за измерване на апикални крайни точки и за хистологични оценки може да се намери в документите с насоки на ОИСР (9).
these observations should include narrative descriptions of the study that do not fit into the previously described categories.
Моменти на извършване на наблюдение за първични крайни точки в ИМЗ.
Data reporting
Апикални крайни точки
Appendix 2 contains daily data collection spreadsheets that can be used as guidance for raw data entry and for calculations of summary statistics.
Ежедневно
Additionally, reporting tables are provided that are convenient for communicating summaries of endpoint data.
Смъртност
Reporting tables for histological assessments can be found in Appendix 2.
Дължина на задни крайници Дължина
Performance Criteria and Test Acceptability/Validity
Дължина от върха на муцуната до клоачния отвор
Generally, gross deviations from the test method will result in unacceptable data for interpretation or reporting.
Мокро телесно тегло
Therefore, the following criteria in Table 4 have been developed as guidance for determining the quality of the test performed, the general performance of the control organisms.
Хистология на щитовидна жлеза
Table 4
Етап на развитие, дължина на задни крайници, SVL и мокро тегло са апикалните крайни точки на ИМЗ, като всяка от тях е обсъдена накратко по-долу.
Performance criteria for the AMA
По-нататъшна техническа информация за събирането на тези данни е на разположение в документите с насоки, към които е оваване, включително процедури за анализ с компютърни програми, които се препоръчват за използване.
Criterion
Етапът на развитие на попови лъжички на Х. laevis се определя с използване на критериите за определяне на етапи по Nieuwkoop и Faber (8).
Acceptable limits
Данните за етапа на развитие се използват, за да се определи дали развитието е ускорено, асинхронно, забавено или незасегнато.
Test concentrations
Ускорението или забавянето на развитието се определят чрез сравнение на средната стойност на етапа, достигнат от контролата и третираните групи.
Maintained at ≤ 20 % CV (variability of measured test concentration) over the 21 day test
Асинхронно развитие се протоколира, когато изследваните тъкани не са деформирани или анормални, но относителното разпределяне на морфогенезата или развитието на различни тъкани във времето е нарушено в рамките на отделна попова лъжичка.
Mortality in controls
Диференциацията и растежът на задните крайници се контролират от тиреоидни хормони и са основни ориентири за развитието, вече използвани при определянето на етапа на развитие.
≤ 10 % — mortality in any one replicate in the controls should not exceed 2 tadpoles
Развитието на задните крайници се използва в качествено отношение при определяне на етапа на развитие, но тук се разглежда като количествена крайна точка.
Minimum median developmental stage of controls at end of test
Поради това дължината на задните крайници се измерва като крайна точка за откриване на въздействия върху тиреоидната ос (фигура 2).
Spread of development stage in control group
С оглед на последователността дължината на задните крайници се измерва по левия заден крайник.
The 10th and the 90th percentile of the development stage distribution should not differ by more than 4 stages
Дължината на задните крайници се оценява както на ден 7, така и на ден 21 от изпитването.
Dissolved Oxygen
На ден 7 измерването на дължината на задните крайници е просто, както се вижда на фигура 2.
≥ 40 % air saturation [8]
Измерването на дължината на задните крайници в ден 21 обаче е по-сложно поради извивките на крайника.
pH should be maintained between 6,5-8,5.
Следователно измерванията на дължината на задните крайници в ден 21 трябва да започват от телесната стена и да следват средната линия на крайника по всички ъглови отклонения.
The inter-replicate/inter-treatment differentials should not exceed 0,5.
Измененията в дължината на задните крайници в ден 7, макар и това да не е очевидно на ден 21, все още се считат за значими за потенциална тиреоидна активност.
± 1 °C — the inter-replicate/inter-treatment differentials should not exceed 0,5 °C
Измерванията на дължината се правят от цифрови снимки, с използване на софтуер за анализ на изображения, както е описано в Ръководството на ОИСР за тиреоидна хистология на земноводни (9).
Test concentrations without overt toxicity
Дължина на тялото и мокро тегло
Replicate performance
Определянето на дължината от върха на муцуната до клоачния отвор (SVL) (фигура 2) и мокрото тегло са включени в протокола от изпитването за оценка на възможните въздействия на изпитваните химикали върху растежа на поповите лъжички в сравнение с контролата и са полезни за откриването на обща токсичност на изпитвания химикал.
≤ 2 replicates across the test can be compromised
Тъй като отстраняването на прилежащата вода за определяне на теглото може да предизвика стресиращи условия за поповите лъжички и може да причини увреждания на кожата, измерванията се извършват на ден 7 върху поповите лъжички от подпробата, а върху всички останали попови лъжички — при приключване на изпитването (ден 21).
Special conditions for use of a solvent
С оглед на последователността при измерването краниалният аспект на клоачния отвор се използва като каудален край.
If a carrier solvent is used, both a solvent control and clean water control should be used and results reported
Дължината от върха на муцуната до клоачния отвор (SVL) се използва, за да се оцени растежът на поповите лъжички, както е показано на фигура 2.
Statistically significant differences between solvent control and water control groups are treated specially.
Видове измервания на дължината на тялото и (Б) Измерване на дължината на задните крайници на попови лъжички на Х. laevis (1).
See below for more information
Независимо от това, че дължината от върха на муцуната до клоачния отвор и дължината на задните крайници са важни крайни точки за оценка на измененията в развитието, само по себе си забавянето на развитието не може да се счита за диагностичен показател за анти-тиреоидна активност.
Special conditions for static renewal system
Някои изменения могат да се наблюдават само при рутинен хистопатологичен анализ.
Representative chemical analyses before and after renewal should be reported
Диагностични критерии включват хипертрофия/атрофия на щитовидната жлеза, хипертрофия на фоликуларни клетки, хиперплазия на фоликуларни клетки и, като допълнителни качествени критерии:
Ammonia levels should be measured immediately prior to renewal
област на фоликуларния лумен, качеството на колоидите и височина/форма на фоликуларните клетки.
All water quality parameters listed in Table 1of Appendix 1 should be measured immediately prior to renewal
Скалата на степените на тежест на измененията (4 степени) следва да се протоколира.
Renewal period should not exceed 72 hours
Информация за получаване и обработка на проби за хистологичен анализ и за извършване на хистологични анализи на тъканни проби е на разположение в „Amphibian Metamorphosis Assay: Part 1 — Technical guidance for morphologic sampling and histological preparation“ и „Amphibian Metamorphosis Assay: Part 2 — Approach to reading studies, diagnostic criteria, severity grading and atlas“ (9).
Appropriate feeding schedule (50 % of the daily food ration of commercial tadpole feed)
Лаборатории, извършващи изследването за първи път, следва да търсят съвети от опитни патолози за обучение преди извършване на хистологичен анализ и оценка на щитовидната жлеза.
Test Validity
Явни и значими промени в апикалните крайни точки, показващи ускорение или асинхронност на развитието, могат да изключат необходимостта от извършване на хистопатологичен анализ на щитовидната жлеза.
The following requirements should be met to deem a test acceptable/valid:
Липсата на ясно изразени морфологични изменения или доказателства за забавяне на развитието обаче налагат хистологичен анализ.
Valid experiment in a test determined to be negative for thyroid activity:
Всички съдове за изпитване следва да се проверяват ежедневно за мъртви попови лъжички, а броят се записва за всеки съд.
For any given treatment (including controls), mortality cannot exceed 10 %.
Следва да се записват датата, концентрацията и номерът на всеки съд за всяко наблюдение на смъртност.
For any given replicate, mortality cannot exceed three tadpoles, otherwise the replicate is considered compromised
Мъртвите екземпляри следва да се отстраняват от съда за изпитването незабавно след забелязването им.
At least two treatment levels, with all four uncompromised replicates, should be available for analysis
Смъртност, превишаваща 10 %, може да показва неподходящи условия на изпитването или токсични въздействия, предизвикани от изпитвания химикал.
At least two treatment levels without overt toxicity should be available for analysis
Допълнителни наблюдения
Valid experiment in a test determined to be positive for thyroid activity:
Случаите на анормално поведение и макроскопски видими малформации и увреждания следва да бъдат записани.
Mortality of no more than two tadpoles/replicate in the control group can occur
Следва да се записват датата, концентрацията и номерът на всеки съд при анормално поведение и макроскопски видими малформации и увреждания.
Decision logic for the conduct of the AMA
Нормалното поведение се характеризира с попови лъжички, суспендирани във водната колона, с опашка, повдигната над главата, редовни ритмични движения на опашния плавник, периодично излизане на повърхността, подвижен оперкулум и реагиране на стимули.
Decision logic was developed for the AMA to provide logical assistance in the conduct and interpretation of the results of the bioassay (see flow chart in Figure 3).
Необичайно поведение може да включва например плаване на повърхността, лежане на дъното на съда, обърнато или неправилно плуване, липса на активност по излизане на повърхността и нереагиране на стимули.
The decision logic, in essence, weighs the endpoints in that advanced development, asynchronous development and thyroid histopathology are weighed heavily, while delayed development, snout-vent length and wet body weight, parameters that can potentially be affected by general toxicity, are weighed less heavily.
В допълнение, брутните разлики в потреблението на храна между третиранията следва да се записват.
Advanced development (determined using developmental stage, SVL and HLL)
Макроскопските малформации и увреждания могат да включват морфологични аномалии (напр. деформации на крайници), хеморагични увреждания, бактериални или гъбични инфекции, както и много други.
Advanced development is only known to occur through effects which are thyroid hormone related.
Тези определяния са качествени и следва да се считат за близки до клиничните признаци за заболяване/стрес и да се правят в сравнение с индивидите в контролите.
These may be peripheral tissue effects such as direct interaction with the thyroid hormone receptor (such as with T4) or effects which alter circulating thyroid hormone levels.
Ако появата или честота на поява е по-голяма в експонираните съдове, отколкото в контролите, тогава те следва да се разглеждат като доказателство за ясно изразена токсичност.
In either case, this is considered sufficient evidence to indicate that the chemical has thyroid activity.
Събиране на данни
Advanced development is evaluated in one of two ways.
Всички данни следва да бъдат събирани чрез електронни системи или системи за ръчно събиране, които отговарят на изискванията за добри лабораторни практики (ДЛП).
First, the general developmental stage can be evaluated using the standardised approach detailed in Nieuwkoop and Faber (8).
Характеризиране на изпитвания химикал:
Second, specific morphological features may be quantified, such as hind limb length, at both days 7 and 21, which is positively associated with agonistic effects on the thyroid hormone receptor.
физични и химични свойства;
If statistically significant advances in development or hind limb length occur, then the test indicates that the chemical is thyroid active.
информация за стабилността и биоразградимостта;
The evaluation of test animals for the presence of accelerated development relative to the control population will be based on results of statistical analyses performed for the following four endpoints:
Информация и данни за химикала:
hind limb length (normalised by SVL) on study day 7
метод и честота на изготвяне на разрежданията Информацията за изпитвания химикал включва действителни и номинални концентрации на изпитвания химикал и, в някои случаи, неизходен химикал, когато е необходимо.
hind limb length (normalised by SVL) on study day 21
За изходните разтвори, както и за изпитваните разтвори, може да се изискват измервания на изпитвания химикал;
developmental stage on study day 7
Разтворител (ако е различен от вода):
developmental stage on study day 21.
обосновка на избора на разтворител и характеризиране на разтворителя (природа, използвана концентрация);
Statistical analyses of hind limb length should be performed based on measurements of the length of the left hind limb.
Работни записи:
Hind limb length is normalised by taking the ratio hind limb length to snout-to-vent length of an individual.
те се състоят от наблюдения, свързани с функционирането на системата за изпитване и поддържащата среда и инфраструктура.
The mean of the normalised values for each treatment level are then compared.
Типичните записи включват:
Acceleration of development is then indicated by a significant increase of mean hind limb length (normalised) in a chemical treatment group compared to the control group on study day 7 and/or study day 21 (see Appendix 3).
температура на околната среда, температура на изпитването, период на осветеност, състояние на критичните компоненти на системата за експозиция (например помпи, броячи на цикли, налягане), дебит, нива на водата, изменения при съдовете с изходните разтвори и записи за храненето.
Statistical analyses of developmental stage should be performed based on determination of developmental stages according to the morphological criteria described by Nieuwkoop and Faber (8).
Общите параметри за качество на водата включват:
Acceleration of development is indicated when the multi-quantal analysis detects a significant increase of developmental stage values in a chemical treatment group compared to the control group on study day 7 and/or study day 21.
pH, DO, проводимост, общ йод, алкалност и твърдост;
In the AMA test method, a significant effect on any of the four endpoints mentioned above is regarded sufficient for a positive detection of accelerated development.
Отклонения от метода на изпитването:
That is, significant effects on hind limb length at a specific time point do not require corroboration by significant effects on hind limb length at the alternative time point nor by significant effects on developmental stage at this specific time point.
тази информация следва да включва информация или текстово описание на отклоненията от метода за изпитване;
In turn, significant effects on developmental stage at a specific time point do not require corroboration by significant effects at developmental stage on the alternative time point nor by significant effects on hind limb length at this specific time point.
Биологични наблюдения и данни:
The weight of evidence for accelerated development will nevertheless increase if significant effects are detected for more than one endpoint.
те включват ежедневни наблюдения на смъртност, консумация на храна, необичаен начин на плуване, летаргия, загуба на равновесие, деформации, увреждания и други.
Asynchronous development (determined using developmental stage criteria)
Наблюденията и данните, събирани на предварително определени интервали, включват:
Asynchronous development is characterised by disruption of the relative timing of the morphogenesis or development of different tissues within a single tadpole.
етап на развитие, дължина на задни крайници, дължина от върха на муцуната до клоачния отвор и мокро тегло;
The inability to clearly establish the developmental stage of an organism using the suite of morphological endpoints considered typical of any given stage indicates that the tissues are developing asynchronously through metamorphosis.
Статистически техники за анализ и обосноваване на използването на тези техники;
Asynchronous development is an indicator of thyroid activity.
резултати от статистическия анализ, за предпочитане в таблична форма;
The only known modes of action causing asynchronous development are through effects of chemicals on peripheral thyroid hormone action and/or thyroid hormone metabolism in developing tissues such as is observed with deiodinase inhibitors.
Хистологични данни:
The evaluation of test animals for the presence of asynchronous development relative to the control population will be based on gross morphological assessment of test animals on study day 7 and study day 21.
те включват текстово описание, както и степенувана тежест на уврежданията и поява на специалните наблюдения, както е описано подробно в документа с ръководството по хистопатология;
The description of normal development of Xenopus laevis by Nieuwkoop and Faber (8) provides the framework for identifying a sequential order of normal tissue remodelling.
Наблюдения ad hoc:
The term “asynchronous development” refers specifically to those deviations in tadpole gross morphological development that disallow the definitive determination of a developmental stage according to the criteria of Nieuwkoop and Faber (8) because key morphological landmarks show characteristics of different stages.
тези наблюдения следва да включват текстови описания на изследването, които не попадат в описаните по-горе категории.
As implicated by the term “asynchronous development”, only cases showing deviations in the progress of remodelling of specific tissues relative to the progress of remodelling of other tissues should be considered.
Протоколиране на данни
Some classical phenotypes include delay or absence of fore limb emergence despite normal or advanced development of hind limbs and tail tissues, or the precocious resorption of gills relative to the stage of hind limb morphogenesis and tail resorption.
В допълнение 2 се съдържат формуляри за ежедневно събиране на данни, които могат да бъдат използвани като насоки за въвеждане на необработени данни и за изчисляване на обобщени статистически данни.
An animal will be recorded as showing asynchronous development if it cannot be assigned to a stage because it fails to meet a majority of the landmark developmental criteria for a given Niewkoop and Faber stage (8), or if there is extreme delay or acceleration of one or more key features (e.g. tail completely resorbed, but forelimbs not emerged).
Освен това са представени таблици за протоколиране, които са удобни за съобщаване на обобщения на данните за крайните точки.
This assessment is performed qualitatively and should examine the full suite of landmark features listed by Nieuwkoop and Faber (8).
Таблиците за протоколиране за хистологичните оценки могат да бъдат намерени в допълнение 2.
However it is not necessary to record the developmental state of the various landmark features of animals being observed.
Критерии за параметрите и приемливост/валидност на изпитването
Animals recorded as showing asynchronous development are not assigned to a Nieuwkoop and Faber (8) development stage.
Като правило, големите отклонения от метода за изпитването ще доведат до неприемливи данни за интерпретиране или протоколиране.
Thus, a central criterion for designating cases of abnormal morphological development as “asynchronous development” is that the relative timing of tissue remodelling and tissue morphogenesis is disrupted whereas the morphology of affected tissues is not overtly abnormal.
Следователно, следните критерии в таблица 4 са разработени като насоки за определяне на качеството на извършеното изпитване и общите параметри на контролните организми.
One example to illustrate this interpretation of gross morphological abnormalities is that retarded hind limb morphogenesis relative to development of other tissues will fulfil the criterion of “asynchronous development” whereas cases showing missing hind limbs, abnormal digits (e.g. ectrodactyly, polydactyly), or other overt limb malformations should not be considered as “asynchronous development”.
Таблица 4
In this context, the major morphological landmarks that should be evaluated for their coordinated metamorphic progress should include hind limb morphogenesis, fore limb morphogenesis, fore limb emergence, the stage of tail resorption (particularly the resorption of the tail fin), and head morphology (e.g. gill size and stage of gill resorption, lower jaw morphology, protrusion of Meckel's cartilage).
Критерии за параметрите на ИМЗ
Dependent on the mode of chemical action, different gross morphological phenotypes can occur.
Критерий
Some classical phenotypes include delay or absence of fore limb emergence in spite of normal or advanced development of hind limbs and tail tissues, precocious gill resorption relative to hind limb and tail remodelling.
Допустими граници
Histopathology
Концентрации на изпитване
If the chemical does not cause overt toxicity and does not accelerate development or cause asynchronous development, then histopathology of the thyroid glands is evaluated using the appropriate guidance document (9).
Поддържа се при ≤ 20 % CV (вариация на измерената концентрация на изпитване) по време на 21-дневното изпитване.
Developmental retardation, in the absence of toxicity, is a strong indicator of anti-thyroid activity, but the developmental stage analysis is less sensitive and less diagnostic than the histopathological analysis of the thyroid gland.