natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Хептан с качество за хроматография.
Acetone, chromatographic quality.
Диетилов етер, стабилизиран за анализ.
Elution solvent for purifying the oil by column/SPE chromatography, mixture hexane/diethyl ether 87/13 (v/v).
Ацетон с качество за хроматография.
Potassium hydroxide, approximately 2M methanolic solution: dissolve 11,2 g of potassium hydroxide in 100 ml of methanol.
Разтворител за елуиране, за пречистване на маслото чрез колонна хроматография/ТФЕ, смес от хексан/диетилов етер в съотношение 87/13 (v/v).
Silica gel cartridges, 1 g (6 ml), for solid phase extraction.
Калиев хидроксид, приблизително 2М метанолов разтвор: разтварят се 11,2 g калиев хидроксид в 100 ml метанол.
Apparatus
Патрони силикагел — 1 g (6 ml) за твърдофазна екстракция.
Screw-top test tubes (5 ml volume) with cap fitted with a PTFE joint.
Апаратура
Graduated or automatic pipettes, 2 ml and 0,2 ml.
Епруветки с отвор на винт (с вместимост 5 ml ) с капачка със снадка от политетрафлуороетилен.
Purification of oil samples
Градуирани или автоматични пипети, 2 ml и 0,2 ml.
When necessary, the samples will be purified by passing the oil through a silica gel solid-phase extraction cartridge.
Пречистване на пробите масло
A silica gel cartridge (3.1.2.8) is placed in a vacuum elution apparatus and washed with 6 ml of hexane (3.1.2.2); washing is performed without vacuum.
При необходимост пробите се пречистват чрез преминаване на маслото през патрон силикагел за твърдофазна екстракция.
Then a solution of the oil (0,12 g approximately) in 0,5 ml of hexane (3.1.2.2) is loaded onto the column.
Патрон силикагел (3.1.2.8) се поставя в апарат за вакуумно елуиране и се промива с 6 ml хексан (3.1.2.2); промиването се извършва без вакуум.
The solution is pulled down and then eluted with 10 ml of hexane/diethyl ether (87:13 v/v) (3.1.2.6).
След това разтвор на маслото (приблизително 0,12 g) в 0,5 ml хексан (3.1.2.2) се зарежда в колоната.
The combined eluates are homogenised and divided in two similar volumes.
Разтворът се прекарва през колоната и след това се елуира с 10 ml хексан/диетилов етер (87:13 v/v) (3.1.2.6).
An aliquot is evaporated to dryness in a rotary evaporator under reduced pressure at room temperature.
Комбинираните елуати се хомогенизират и се разделят на две еднакви по обем части.
The residue is dissolved in 1 ml of heptane and the solution is ready for fatty acid analysis by GC.
Една аликвотна част се изпарява до изсъхване в ротационен изпарител при понижено налягане при стайна температура.
The second aliquot is evaporated and the residue is dissolved in 1 ml of acetone for triglyceride analysis by HPLC, if necessary.
Остатъкът се разтваря в 1 ml хептан и разтворът е готов за анализ на мастни киселини чрез газова хроматография.
Procedure
Втората аликвотна част се изпарява и остатъкът се разтваря в 1 ml ацетон за анализ на триглицеридите чрез ВЕТХ при необходимост.
In a 5 ml screw-top test tube (3.1.3.1) weigh approximately 0,1 g of the oil sample.
Процедура
Add 2 ml of heptane (3.1.2.2), and shake.
В епруветка с отвор на винт с вместимост 5 ml (3.1.3.1) се претегля приблизително 0,1 g от пробата от маслото.
Add 0,2 ml of the methanolic potassium hydroxide solution (3.1.2.7), put on the cap fitted with a PTFE joint, tighten the cap, and shake vigorously for 30 seconds.
Добавят се 2 ml (3.1.2.2) хептан и се разклаща.
Leave to stratify until the upper solution becomes clear.
Добавят се 0,2 ml метанолов разтвор на калиев хидроксид (3.1.2.7), поставя се капачката със снадка от политетрафлуороетилен, затяга се и се разклаща енергично в продължение на 30 секунди.
Decant the upper layer containing the methyl esters.
Оставя се да се разслои до избистряне на горния слой от разтвора.
The heptane solution is ready for injection into the gas chromatograph.
Декантира се горният слой, който съдържа метиловите естери.
It is advisable to keep the solution in the refrigerator until gas chromatographic analysis.
Хептановият разтвор е готов за инжектиране в газовия хроматограф.
Storage of the solution for more than 12 hours is not recommended.
Препоръчва се разтворът да се запази в хладилника до анализа чрез газова хроматография.
PART B
Не се препоръчва съхраняване на разтвора в продължение на повече от 12 часа.
ANALYSIS OF FATTY ACID METHYL ESTERS BY GAS CHROMATOGRAPHY
ЧАСТ Б
This part gives general guidance for the application of capillary column gas chromatography to determine the qualitative and quantitative composition of a mixture of fatty acid methyl esters obtained in accordance with the method specified in Part A.
АНАЛИЗ НА МЕТИЛОВИ ЕСТЕРИ НА МАСТНИ КИСЕЛИНИ ЧРЕЗ ГАЗОВА ХРОМАТОГРАФИЯ
The part is not applicable to polymerised fatty acids.
В настоящата част се дават общи насоки за прилагането на капилярна газова хроматография за определяне на качествения и количествен състав на сместа от метилови естери на мастните киселини, получени в съответствие с метода, указан в част А.
Carrier gas
Частта не е приложима за полимеризирани мастни киселини.
Inert gas (helium or hydrogen), thoroughly dried and with an oxygen content of less than 10 mg/kg.
Газ носител
Note 1:
Инертен газ (хелий или водород), щателно подсушен и с кислородно съдържание по-малко от 10 mg/kg.
Hydrogen can double the speed of analysis but is hazardous.
Бележка 1:
Safety devices are available.
Водородът може да удвои скоростта на анализа, но е опасен.
Auxiliary gases
Достъпни са средства за безопасност.
Hydrogen (purity ≥ 99,9 %), free from organic impurities.
Спомагателни газове
Air or oxygen, free from organic impurities.
Водород (чистота ≥ 99,9 %), свободен от органични онечиствания.
Nitrogen (purity > 99 %).
Въздух или кислород, свободен от органични онечиствания.
Reference standard
Азот (чистота > 99 %).
Mixture of methyl esters of pure fatty acids, or the methyl esters of a fat of known composition, preferably similar to that of the fatty matter to be analysed.
Референтен еталон
Cis and trans isomers of octadecenoic, octadecadienoic and octadecatrienoic methyl esters are useful for the identification of trans isomers of unsaturated acids.
Смес от метилови естери на чисти мастни киселини или метиловите естери на мазнина с известен състав, за предпочитане сходен с този на мастното вещество, което ще се анализира.
Care should be taken to prevent the oxidation of polyunsaturated fatty acids.
Цис- и транс- изомерите на метилови естери на октадеценова, октадекадиенова и октадекатриенова киселина са полезни за идентифициране на транс-изомери на ненаситени киселини.
APPARATUS
Трябва да се вземат мерки за предотвратяване на окисляването на полиненаситените мастни киселини.
The instructions given are for the usual equipment used for gas chromatography, employing capillary columns and a flame-ionisation detector.
АПАРАТУРА
Gas chromatograph
Дадените инструкции се отнасят до обикновеното оборудване, използвано за газова хроматография, включващо капилярни колонки и пламъчно-йонизационен детектор.
The gas chromatograph shall comprise the following elements.
Газов хроматограф
Injection system
Газовият хроматограф се състои от следните елементи.
Use an injection system with capillary columns, in which case the injection system should be specially designed for use with such columns.
Система за инжектиране
It may be of the split type or the splitless on-column injector type.
Използва се инжекционна система с капилярни колонки, като в този случай системата за инжектиране следва да е специално проектирана за използване с такива колонки.
Oven
Тя може да е с колонен инжектор от тип със или без разделяне на пробата.
The oven shall be capable of heating the capillary column to a temperature of at least 260 °C and of maintaining the desired temperature to within 0,1 °C.
Пещ
The last requirement is particularly important when a fused silica tube is used.
Пещта трябва да е в състояние да нагрява капилярната колонка до температура от поне 260 °С и да поддържа желаната температура с точност до 0,1°С.
The use of temperature-programmed heating is recommended in all cases, and in particular for fatty acids with less than 16 carbon atoms.
Последното изискване е особено важно, когато се използва епруветка от кварц.
Capillary column
Използването на програмирано температурно нагряване се препоръчва във всички случаи и в частност за мастни киселини с по-малко от 16 въглеродни атома.
Tube, made of a material inert to the substances to be analysed (usually glass or fused silica).
Капилярна колона
The internal diameter shall be between 0,20 to 0,32 mm.
Тръба, изготвена от материал, инертен към веществата, които ще се анализират (обикновено от стъкло или кварц).
The internal surface shall undergo an appropriate treatment (e.g. surface preparation, inactivation) before receiving the stationary phase coating.
Вътрешният диаметър трябва да е между 0,20 и 0,32 mm.
A length of 60 m is sufficient for fatty acid and cis and trans isomers of fatty acids.
Вътрешната повърхност следва да се обработи по подходящ начин (напр. подготовка на повърхността, инактивация), преди да се запълни с покритието от неподвижната фаза.
Stationary phase, polar polysiloxane (cyanopropylsilicone) bonded (cross-linked) columns are suitable.
Дължина 60 m е достатъчна за мастни киселини и цис- и транс- изомери на мастните киселини.
Note 2:
Подходящи са колонки с неподвижна фаза полярен полисилоксан (цианопропилсиликон) омрежен (напречно свързан).
There is a risk that polar polysiloxanes may give rise to difficulties in the identification and separation of linolenic acid and C20 acids.
Бележка 2:
The coatings shall be thin, i.e. 0,1 to 0,2 μm.
Съществува риск полярните полисилоксани да създадат трудности при разпознаването и разделянето на линоленовата киселина и киселините с С20.
Assembly and conditioning of the column
Покритието трябва да е тънко, т.е.
Observe the normal precautions for assembling capillary columns, i.e. arrangement of the column in the oven (support), choice and assembly of joints (leak tightness), positioning of the ends of the column in the injector and the detector (reduction of dead-spaces).
0,1 до 0,2 μm.
Place the column under a flow of carrier gas (e.g. 0,3 bar (30 kPa) for a column of length 25 m and internal diameter 0,3 mm).
Сглобяване и кондициониране на колонката
Condition the column by temperature programming of the oven at 3 °C/min from ambient temperature to a temperature 10 °C below the decomposition limit of the stationary phase.
Спазват се нормалните мерки за безопасност при сглобяване на капилярните колонки, т.е. подреждането на колонката в пещта (носител), избор и сглобяване на свръзките (плътност за недопускане на изтичане), поставяне на краищата на колонката в инжектора и детектора (намаляване на мъртвите обеми).
Maintain the oven at this temperature for one hour until stabilisation of the baseline.
Поставя се колонката под поток от газ носител (напр.
Return it to 180 °C to work under isothermal conditions.
0,3 bar (30 kPa) за колонка с дължина 25 m и вътрешен диаметър 0,3 mm).
Note 3:
Колонката се кондиционира чрез програмиране на пещта за повишаване на температурата в сравнение с околната с 3 °С/min до температура с 10 °С по-ниска от границата за разграждане на неподвижната фаза.
Suitably pre-conditioned columns are available commercially.
Поддържа се температурата на пещта в продължение на един час до стабилизиране на базисната линия.
Flame ionisation detector and converter-amplifier
Понижава се до 180 °C за работа при изотермални условия.
Syringe
Бележка 3:
The syringe shall have a maximum capacity of 10 μl, graduated in 0,1 μl divisions.
Предварително кондиционирани по подходящ начин колонки се предлагат в търговската мрежа.
Data acquisition system
Пламъчно-йонизационен детектор и усилвателен преобразувател.
Data acquisition system connected online with the detectors and employed with a software program suitable for peak integration and normalisation.
Спринцовка
The operations described in 4.1 to 4.3 are for the use of a flame-ionisation detector.
Спринцовката трябва да има максимална вместимост 10 μl и да е градуирана на деления от 0,1 μl.
Test conditions
Система за събиране на данни
Selection of optimum operating conditions for capillary columns
Система за събиране на данни, свързана онлайн с детекторите и използвана със софтуерна програма, подходяща за интегриране на пиковете и нормализиране.
Owing to the efficiency and permeability of capillary columns, the separation of the constituents and the duration of the analysis are largely dependent on the flow-rate of the carrier gas in the column.
Дейностите, описани в точки 4.1.—4.3, се отнасят до използването на пламъчно-йонизационен детектор.
It will therefore be necessary to optimise the operating conditions by adjusting this parameter (or simply column head loss) depending on whether the aim is to improve separation or speed up analysis.
Условия на изпитване
The following conditions have proved to be suitable for the separation of FAMEs (C4 to C26).
Избор на оптимални условия на работа за капилярни колони
Examples of chromatograms are shown in Appendix B:
Предвид ефикасността и пропускливостта на капилярните колонки разделянето на различните съставки и времетраенето на анализа в голяма степен зависят от скоростта на потока на газа носител в колонката.
Injector temperature:
Следователно ще е необходимо да се оптимизират условията на работа чрез коригиране на този параметър (или просто — към намаляване на налягането на колонката) в зависимост от това дали се цели подобряването на разделянето или извършването на по-бърз анализ.
250 °C
Следните условия се оказаха подходящи за разделяне на метилови естери на мастни киселини (C4—C26).
Detector temperature:
Примери на хроматограми са показани в допълнение Б:
Oven temperature:
температура на инжектора:
165 °C (8 min) to 210 °C at 2 °C/min
250 °C
Carrier gas hydrogen:
температура на детектора:
column head pressure, 179 kPa
температура на пещта:
Total flow:
165 °C (8 min) до 210 °C при 2 °C/min
Split ratio:
газ носител водород:
Injection volume:
входно налягане на колоната, 179 kPa
Determination of the resolution (see Appendix A)
общ поток:
Calculate the resolution, R, of two neighbouring peaks I and II, using the formula:
съотношение на разделяне:
R = 2 × ((ddr(II) – dr(I))/(ω(I) + ω(II))) or R = 2 × ((tr(II) – tr(I))/(ω(I) + ω(II))) (USP) (United States Pharmacopeia),
обем на впръскване:
R = 1,18 × ((tr(II) – tr(I))/(ω0,5(I) + ω0,5(II))) (EP, BP, JP, DAB), (JP (Japanese Pharmacopeia), EP (Pharmacopée Européenne), BP (British Pharmacopeia))
Определяне на разделителната способност (вж. допълнение А)
dr(I) is the retention distance of peak I;
Изчисляване на разделителната способност R, на два съседни пика I и II, използвайки формулата:
dr(II) is the retention distance of peak II;
R = 2 × ((dr(II) – dr(I))/(ω(I) ω(II))) или R = 2 × ((tr(II) – tr(I))/(ω(I) ω(II))) (USP) (Фармакопея на САЩ),
tr(I) is the retention time of peak I;
R = 1,18 × ((tr(II) – tr(I))/(ω0,5(I) + ω0,5(II))) (EP, BP, JP, DAB), (JP (Фармакопея на Япония), EP (Европейска фармакопея), (BP (Фармакопея на Великобритания)
tr(II) is the retention time of peak II;
dr(I) е разстоянието на задържане на пик I;
ω(I) is the width of the base of peak I;
dr(II) е разстоянието на задържане на пик II;
ω(II) is the width of the base of peak II;
tr(I) е времето на задържане на пик I;
ω0,5 is the peak width of the specified compound, at mid-height of the peak;
tr(II) е времето на задържане на пик II;
If ω(I) ≈ ω(II), calculate R using the following formulas:
ω(I) е широчината на основата на пик I;
σ is the standard deviation (see Appendix A, Figure 1).
ω(II) е широчината на основата на пик II;
If the distance dr between the two peaks dr(II) - dr(I) is equal to 4σ, the resolution factor R = 1.
ω0,5 е широчината на пика на посоченото съединение, при средата на височината на пика;
If two peaks are not separated completely, the tangents to the inflection points of the two peaks intersect at point C. In order to completely separate the two peaks, the distance between the two peaks must be equal to:
Ако ω(I) ≈ ω(II), да се изчисли R, като се използват следните формули:
dr(II) - dr(I) = 6 σ from where R = 1,5 (see Appendix A, Figure 3).
σ е стандартното отклонение (вж. допълнение А, фигура 1).
EXPRESSION OF RESULTS
Ако разстоянието dr между двата пика dr(II) – dr(I) е равно на 4σ, разделителната способност R = 1.
Qualitative analysis
Ако два пика не са напълно разделени, допирателните към инфлексните точки на двата пика се пресичат в точка C. За да бъдат напълно разделени двата пика, разстоянието между тях трябва да бъде равно на:
Identify the methyl ester peaks of the sample from the chromatogram in Appendix B, figure 1, if necessary by interpolation, or by comparison with those of the methyl esters reference mixtures (as indicated at point 2.3).
dr(II) – dr(I) = 6 σ откъдето R = 1,5 (вж. допълнение A, фигура 3).
Quantitative analysis
ИЗРАЗЯВАНЕ НА РЕЗУЛТАТИТЕ
Determination of the composition
Качествен анализ
Calculate the mass fraction wi of the individual fatty acid methyl esters, expressed as a percentage by mass of methyl esters, as follows:
Разпознават се пиковете на метиловите естери за пробата от хроматограмата в допълнение Б, фигура 1, ако е необходимо чрез интерполация или чрез сравнение с тези на референтните смеси на метиловите естери (както е посочено в точка 2.3).
Method of calculation
Количествен анализ
General case
Определяне на състава
Calculate the content of a given component i, expressed as a percentage by mass of methyl esters, by determining the percentage represented by the area of the corresponding peak relative to the sum of the areas of all the peaks, using the following formula:
Изчислява се масовата част wi на отделните метилови естери на мастни киселини, изразена в проценти от масата на метиловите естери, както следва:
Ai is the area under the peak of the individual fatty acid methyl ester i;
Метод на изчисляване
ΣA is the sum of the areas under all the peaks of all the individual fatty acid methyl esters.
Общ случай
The results are expressed to two decimal places.
Изчислява се съдържанието на даден компонент i, изразено в проценти от масата на метиловите естери, чрез определянето на процента, представляващ площта на съответния пик, отнесена към сбора от площите на всички пикове, при използване на следната формула:
Note 4:
Ai е площта под пика на отделния метилов естер на мастна киселина i;
For fats and oils, the mass fraction of the fatty acid methyl esters is equal to the mass fraction of the triacylglycerols in grams per 100 g.
ΣА е сборът от площите под всички пикове на всички отделни метилови естери на мастни киселини.
For cases in which this assumption is not allowed, see 5.2.2.2.
Резултатите се изразяват с точност до две цифри след десетичната запетая.
Use of correction factors
Бележка 4:
In certain cases, for example in the presence of fatty acids with less than eight carbon atoms or of acids with secondary groups, the areas shall be corrected with specific correction factors (Fci).
За мазнини и масла масовата част на метиловите естери на мастни киселини е равна на масовата част на триацилглицеролите в грамове на 100 g.
These factors shall be determined for each single instrument.
За случаите, в които това допускане не се позволява, вж.
For this purpose suitable reference materials with certified fatty acid composition in the corresponding range shall be used.
5.2.2.2.
Note 5:
Използване на корекционни коефициенти
These correction factors are not identical to the theoretical FID correction factors, which are given in Appendix A, as they also include the performance of the injection system etc.
В определени случаи, например при наличието на мастни киселини с по-малко от осем въглеродни атома или на киселини с вторични групи, площите се коригират със специфични корекционни коефициенти (Fci).
However, in the case of bigger differences, the whole system should be checked for performance.
Тези коефициенти се определят за всеки един инструмент.
For this reference mixture, the mass percentage of the FAME i is given by the formula:
За тази цел трябва да се използват подходящи референтни материали със сертифициран състав на мастни киселини в съответния обхват.
wi = (mi /Σm) × 100
Бележка 5:
where
Тези корекционни коефициенти не са идентични с теоретичните корекционни коефициенти за FID, които се посочват в допълнение А, тъй като те включват и параметрите на инжекционната система и др.
mi is the mass of the FAME i in the reference mixture;
Въпреки това, в случаите на по-големи разлики следва да бъдат проверени параметрите на цялата система.
Σm is the total of the masses of the various components as FAMEs of the reference mixture.
За тази референтна смес, процентното съотношение на метилов естер на мастни киселини i е представено от формулата:
From the chromatogram of the reference mixture, calculate the percentage by area for the FAME i as follows:
wi = (mi/Σm) × 100
Ai is the area of the FAME i in the reference mixture;
където:
ΣA is the sum of all the areas of all the FAMEs of the reference mixture.
mi е масата на метиловия естер на мастни киселини i в референтната смес;
The correction factor Fc is then
Σm е общият сбор на масите на различните компоненти като метилови естери на мастни киселини в референтната смес.
For the sample, the percentage by mass of each FAME i is:
От хроматограмата на референтната смес се изчислява процентът на площта за метилов естер на мастни киселини i както следва:
Note 6:
Ai е площта на метилов естер на мастни киселини i в референтната смес;
The calculated value corresponds to the percentage of mass of the individual fatty acid calculated as triacylglycerols per 100 g fat.
ΣА е сумата от всички площи на всички метилови естери на референтната смес.
Use of an internal standard
Съответно корекционният коефициент Fc е
In certain analyses (for example where not all of the fatty acids are quantified, such as when acids with four and six carbons are present alongside acids with 16 and 18 carbons, or when it is necessary to determine the absolute amount of a fatty acid in a sample) it is necessary to use an Internal Standard.
За извадката, процентът от масата на всеки метилов естер на мастни киселини i е:
Fatty acids with 5, 15 or 17 carbons are frequently used.
Бележка 6:
The correction factor (if any) for the Internal Standard should be determined.
Изчислената стойност съответства на процента от масата на отделните мастни киселини, изчислени като триацилглицероли на 100 g мазнини.
The percentage by mass of component i, expressed as methyl esters, is then given by the formula:
Използване на вътрешен стандарт
Ai is the area the FAME i;
При определени анализи (например, когато не са определени количествено всички мастни киселини, например когато има наличие на киселини с четири и шест въглеродни атома, наред с киселини с 16 и 18 въглеродни атома, или когато е необходимо да се определи абсолютното количество на някоя мастна киселина в дадена проба) е необходимо да се използва вътрешен стандарт.
AIS is the area of the internal standard;
Често се използват мастни киселини с 5, 15 или 17 въглеродни атома.
Fi is the correction factor of the fatty acid i, expressed as FAME;
Трябва да се определи корекционният коефициент (ако има такъв) за вътрешния стандарт.
FIS is the correction factor of the internal standard;
Процентното съотношение по маса на компонента i, изразено като метилови естери, тогава се дава чрез формулата:
m is the mass of the test portion, in milligrams
Ai е площта на метилов естер на мастни киселини i;
mIS is the mass of the internal standard, in milligrams.
AIS е площта на вътрешния стандарт;
TEST REPORT
Fi е корекционният коефициент на мастната киселина i, изразена като метилов естер на мастни киселини;
The test report shall specify the methods used for the preparation of the methyl esters and for the gas chromatographic analysis.
FIS е корекционният коефициент на вътрешния стандарт;
It shall also mention all operating details not specified in this Standard Method, or regarded as optional, together with details of any incidents which may have influenced the results.
m е масата, в милиграми, на изпитваната проба
The test report shall include all the information necessary for complete identification of the sample.
mIS е масата, в милиграми, на вътрешния стандарт
PRECISION
ПРОТОКОЛ ОТ ИЗПИТВАНЕТО
Results of interlaboratory test