natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Коефициентът на разпределение октанол/вода на дадено изпитвано вещество може да се изчисли чрез опитно определяне на капацитета „k“ за него и след това поставяне на „k“ в следната формула:
where tR is the retention time of the test substance, and t0 is the dead-time, i.e. the average time a solvent molecule needs to pass the column.
където
Quantitative analytical methods are not required and only the determination of retention times is necessary.
a, b коефициенти на линейна регресия.
The octanol/water partition coefficient of a test substance can be computed by experimentally determining its capacity factor k and then inputting k into the following equation:
Уравнението по-горе може да бъде получено чрез линейна регресия на log на коефициентите на разпределение октанол/вода на референтни вещества спрямо log на капацитетите на тези референтни вещества.
where
Методът на ВЕТХ с обърната фаза позволява коефициентите на разпределение да се определят в диапазон на log Pow от 0 до 6, но той може да бъде разширен така, че да обхване диапазон на log Pow между 6 и 10 в изключителни случаи.
a, b linear regression coefficients.
За тази цел може да е необходимо модифициране на подвижната фаза (3).
The equation above can be obtained by linearly regressing the log of octanol/water partition coefficients of reference substances against the log of capacity factors of the reference substances.
Методът не може да се прилага за силни киселини и основи, метални комплекси, вещества, които реагират с елуента или повърхностно активни средства.
Reverse phase HPLC method enables partition coefficients to be estimated in the log Pow range between 0 and 6, but can be expanded to cover the log Pow range between 6 and 10 in exceptional cases.
При веществата, които могат да съществуват в йонизирано състояние, измервания могат да се извършват върху тяхната нейонизирана форма (свободна киселина или свободна основа) само чрез използване на подходящ буфер с pH, по-ниско от pKa за свободната киселина или по-високо от pKa за свободната основа.
This may require that the mobile phase is modified (3).
Алтернативно, pH-метричният метод за изпитване на веществата, които могат да съществуват в йонизирано състояние (6) може да стане наличен и да се използва като алтернативен метод (6).
The method is not applicable to strong acids and bases, metal complexes, substances which react with the eluent, or surface-active agents.
Ако стойността на log Pow се определя за използване при класифициране на опасността за околната среда или в оценката на риска за околната среда, изпитването трябва да се провежда при обхват от стойности на рН, срещан в естествени условия, т.е., обхват от 5,0 — 9.
Measurements can be performed on ionisable substances in their non-ionised form (free acid or free base) only by using an appropriate buffer with a pH below the pKa for a free acid or above the pKa for a free base.
В някои случаи присъствието на примеси може да затрудни интерпретирането на резултатите, защото определянето на пиковете става несигурно.
Alternatively, the pH-metric method for the testing of ionisable substances (6) may become available and could be used as an alternative method (6).
За смеси, които водят до неразделена ивица, следва да бъдат протоколирани горната и долната граница на log Pow и % от площта за всеки log Pow пик.
If the log Pow value is determined for the use in environmental hazard classification or in environmental risk assessment, the test should be performed in the pH range relevant for the natural environment, i.e. in the pH range of 5,0 - 9.
За смеси, които са група от хомолози, следва също да се посочи среднопретеглената стойност на log Pow (7), изчислена въз основа на отделните стойности на Pow и съответните им стойности за % от площта (8).
In some cases impurities can make the interpretation of the results difficult due to uncertainty in peak assignments.
Всички пикове, които дават площ от 5 % или повече спрямо общата площ на пиковете, трябва да се вземат под внимание при изчислението (9):
For mixtures which result in an unresolved band, upper and lower limits of log Pow, and the area % of each log Pow peak should be reported.
Среднопретеглената стойност на log Pow е валидна само за вещества или смеси (напр. талово масло), състоящи се от хомолози (напр. от алкани).
For mixtures which are a group of homologues, the weighted average log Pow should also be stated (7), calculated based on the single Pow values and the corresponding area % values (8).
Смеси могат да бъдат измервани със смислени резултати, при условие че използваният аналитичен детектор има същата чувствителност към всички вещества в сместа, и че те могат да бъдат измерени по подходящ начин.
All peaks that contribute an area of 5 % or more to the total peak area should be taken into consideration in the calculation (9):
ИНФОРМАЦИЯ ЗА ИЗПИТВАНОТО ВЕЩЕСТВО
The weighed average log Pow is valid only for substances or mixtures (e.g. tall oils) consisting of homologues (e.g. series of alkanes).
Дисоциационната константа, структурната формула и разтворимостта в подвижната фаза следва да бъдат известни преди използването на метода.
Mixtures can be measured with meaningful results, provided that the analytical detector used has the same sensitivity towards all the substances in the mixture and that they can be adequately resolved.
Освен това би била полезна и информация относно хидролизата.
INFORMATION ON THE TEST SUBSTANCE
КРИТЕРИИ ЗА КАЧЕСТВО
The dissociation constant, structural formula, and solubility in the mobile phase should be known before the method is used.
За да се увеличи доверителността на резултатите, трябва да се правят по две определяния.
In addition, information on hydrolysis would be helpful.
Повторяемост:
QUALITY CRITERIA
Стойността на log Pow, получена при повтаряни измервания, направени при идентични условия и с използването на един и същи набор от референтни вещества, трябва да попада в обхват ± 0,1 log единици.
In order to increase the confidence in the measurement, duplicate determinations must be made.
Възпроизводимост:
Repeatability:
Ако измерванията се повтарят с различен набор от референтни вещества, резултатите може да се различават.
The value of log Pow derived from repeated measurements made under identical conditions and using the same set of reference substances should fall within a range of ± 0,1 log units.
Обикновено коефициентът на корелация R за връзката между log k и log Pow за набор от изпитвани вещества е около 0,9, което съответства на коефициент на разпределение октанол/вода от log Pow ± 0,5 log единици.
Reproducibility:
Междулабораторното сравнително изпитване е показало, че по метода на ВЕТХ могат да бъдат получени стойности на log Pow в рамките на ± 0,5 единици от тези по метода „разклащане в стъкленица“ (2).
If the measurements are repeated with a different set of reference substances, results may differ.
Други сравнения могат да бъдат намерени в посочената литература (4) (5) (10) (11) (12).
Typically, the correlation coefficient R for the relationship between log k and log Pow for a set of test substances is around 0,9, corresponding to an octanol/water partition coefficient of log Pow ± 0,5 log units.
Графиките с корелациите, основаващи се на структурно свързани референтни вещества, дават най-точните резултати (13).
The inter-laboratory comparison test has shown that with the HPLC method log Pow values can be obtained to within ± 0,5 units of the Shake-Flask values (2).
РЕФЕРЕНТНИ ВЕЩЕСТВА
Other comparisons can be found in the literature (4)(5)(10)(11)(12).
За да се определи корелация между измерения капацитет k на дадено вещество и неговия Pow, трябва да се изготви калибрационна графика, като се използват най-малко 6 точки (вж. параграф 24).
Correlation graphs based on structurally related reference substances give the most accurate results (13).
Подборът на подходящи референтни вещества е по преценка на потребителя.
REFERENCE SUBSTANCES
Референтните вещества обикновено следва да имат стойности на log Pow, които обхващат log Pow на изпитваното вещество, т.е., най-малко едно референтно вещество трябва да има по-високо Pow от това на изпитваното вещество, а друго — по-ниско Pow от това на изпитваното вещество.
In order to correlate the measured capacity factor k of a substance with its Pow, a calibration graph using at least 6 points has to be established (see paragraph 24).
Екстраполация трябва да се използва само в изключителни случаи.
It is up to the user to select the appropriate reference substances.
За предпочитане е тези референтни вещества да са структурно свързани с изпитваното вещество.
The reference substances should normally have log Pow values which encompass the log Pow of the test substance, i.e. at least one reference substance should have a Pow above that of the test substance, and another a Pow below that of the test substance.
Стойностите на log Pow на референтните вещества, използвани за калибрирането, следва да се основават на надеждни експериментални данни.
Extrapolation should only be used in exceptional cases.
Въпреки това, за вещества с високи стойности на log Pow (обикновено повече от 4) могат да се използват изчислени стойности, освен ако не са налични надеждни експериментални данни.
It is preferable that these reference substances should be structurally related to the test substance. log Pow values of the reference substances used for the calibration should be based on reliable experimental data.
Ако са използвани екстраполирани стойности, трябва да се посочи пределна стойност.
However, for substances with high log Pow (normally more than 4), calculated values may be used unless reliable experimental data are available.
В литературните източници (14) и (15) могат да се намерят подробни списъци със стойностите на log Pow за много групи от химикали.
If extrapolated values are used a limit value should be quoted.
Ако не са налични данни за коефициентите на разпределение на структурно свързани вещества, може да се използва по-общо калибриране, извършено с други референтни вещества.
Extensive lists of log Pow values for many groups of chemicals are available (14)(15).
В таблица 1 са посочени препоръчителни референтни вещества и техните Pow стойности.
If data on the partition coefficients of structurally related substances are not available, a more general calibration, established with other reference substances, may be used.
За веществата, които могат да съществуват в йонизирано състояние, дадените стойности се отнасят за нейонизираната форма.
Recommended reference substances and their Pow values are listed in Table 1.
Стойностите са проверени по отношение на достоверността и качеството по време на междулабораторното сравнително изпитване.
For ionisable substances the values given apply to the non-ionised form.
Таблица 1
The values were checked for plausibility and quality during the inter-laboratory comparison test.
Препоръчителни референтни вещества
Table 1
CAS номер
Recommended reference substances
Референтно вещество
CAS Number
рКа
Reference substance
утанон
pKa
(Етилметилкетон)
utanone
цетилпиридин
(Methylethylketone)
Анилин
cetylpyridine
Ацетанилид
Aniline
Бензилов алкохол
Acetanilide
етоксифенол
Benzyl alcohol
Феноксиоцетна киселина
ethoxyphenol
pKa = 3,12
Phenoxyacetic acid
Фенол
pKa = 3,12
pKa = 9,92
Phenol
2,4-Динитрофенол
pKa = 9,92
pKa = 3,96
2,4-Dinitrophenol
Бензонитрил
pKa = 3,96
Фенилацетонитрил
Benzonitrile
етилбензилов алкохол
Phenylacetonitrile
Ацетофенон
ethylbenzyl alcohol
итрофенол
Acetophenone
pKa = 7,17
itrophenol
итробензоена киселина
pKa = 7,17
pKa = 3,47
itrobenzoic acid
лороанилин
pKa = 3,47
pKa = 4,15
hloroaniline
Нитробензен
pKa = 4,15
Цинамилов алкохол
Nitrobenzene
(Канелен алкохол)
Cinnamyl alcohol
Бензоена киселина
(Cinnamic alcohol)
pKa = 4,19
Benzoic acid
p-Крезол
pKa = 4,19
pKa = 10,17
p-Cresol
(транс)
pKa = 10,17
Канелена киселина
(trans)
pKa = 3,89 (цис)
Cinnamic acid
4,44 (транс)
pKa = 3,89 (cis)
Анизол
4,44 (trans)
Метилбензоат
Anisole
Бензен
Methyl benzoate
етилбензоена киселина
Benzene
pKa = 4,27
ethylbenzoic acid
лорофенол
pKa = 4,27
pKa = 9,1
hlorophenol
Трихлороетилен
pKa = 9,1
Атразин
Trichloroethylene
Етилбензоат
Atrazine
2,6-Дихлоробензонитрил
Ethyl benzoate
лоробензоена киселина
2,6-Dichlorobenzonitrile
pKa = 3,82
hlorobenzoic acid
Толуен
pKa = 3,82
афтол
Toluene
pKa = 9,34
aphthol
2,3-Дихлороанилин
pKa = 9,34
Хлоробензен
2,3-Dichloroaniline
Алилфенилов етер
Chlorobenzene
Бромобензен
Allyl phenyl ether
Етилбензен
Bromobenzene
Бензофенон
Ethylbenzene
енилфенол
Benzophenone
pKa = 9,54
henylphenol
Тимол
pKa = 9,54
1,4-Дихлоробензен
Thymol
Дифениламин
1,4-Dichlorobenzene
pKa = 0,79
Diphenylamine
Нафтален
pKa = 0,79
Фенилбензоат
Naphthalene
Изопропилбензен
Phenyl benzoate
2,4,6-Трихлорофенол
Isopropylbenzene
pKa = 6
2,4,6-Trichlorophenol
Бифенил
pKa = 6
Бензилбензоат
Biphenyl
тор-Бутил-2,4-динитрофенол
Benzyl benzoate
1,2,4-Трихлоробензен
2,4-Dinitro-6-sec-butylphenol
Додеканова киселина
1,2,4-Trichlorobenzene
Дифенилов етер
Dodecanoic acid
Фенантрен
Diphenyl ether
n-Бутилбензен
Phenanthrene
Дибензил
n-Butylbenzene
2,6-Дифенилпиридин
Dibenzyl
Флуорантен
2,6-Diphenylpyridine
Трифениламин
Fluoranthene
ДДТ
Triphenylamine
ОПИСАНИЕ НА МЕТОДА
DDT
Предварителна преценка на коефициента на разпределение
DESCRIPTION OF THE METHOD
Ако е необходимо, коефициентът на разпределение на изпитваното вещество се оценява, за предпочитане, чрез изчислителни методи (вж. допълнението) или, когато е уместно, чрез използването на съотношението на разтворимостите на изпитваното вещество в чистите разтворители (10).
Preliminary estimate of the partition coefficient
Апаратура
If it is necessary, the partition coefficient of the test substance may be estimated preferably by using a calculation method (see Appendix, or where appropriate, by using the ratio of the solubility of the test substance in the pure solvents.
Изисква се течен хроматограф, оборудван с помпа с ниско равнище на пулсации и подходящ детектор.
Apparatus
УВ детекторът с дължина на вълната 210 nm или рефрактометричният детектор са приложими към голямо разнообразие групи от химикали.
A liquid-phase chromatograph fitted with a low-pulse pump and a suitable detection system is required.
Присъствието на полярни групи в неподвижната фаза може значително да влоши действието на колоната за ВЕТХ.
A UV detector, using a wavelength of 210 nm, or an RI detector is applicable to the wide variety of chemical groups.
Затова неподвижните фази трябва да имат минимален процент от полярни групи (16).
The presence of polar groups in the stationary phase may seriously impair the performance of the HPLC column.
Могат да се използват търговските пълнители от микрочастици за обърнати фази или готови напълнени колони.
Therefore, stationary phases should have a minimal percentage of polar groups (16).
Между инжекционната система и аналитичната колона може да се постави предпазна колона.
Commercial microparticulate reverse-phase packing or ready-packed columns can be used.
Мобилна фаза
A guard column may be positioned between the injection system and the analytical column.
За изготвянето на елуиращи разтворители (които се дегазират преди употреба) се използват метанол и дестилирана или дейонизирана вода с чистота „за ВЕТХ“.
Mobile phase
Използва се изократно елуиране.
HPLC-grade methanol and distilled or de-ionised water are used to prepare the eluting solvent, which is degassed before use.
Следва да се използват съотношения метанол/вода с минимално съдържание на вода от 25 %.
Isocratic elution should be employed.
Обикновено сместа метанол-вода 3:1 (v/v) е подходяща за елуиране на вещества с log P = 6 в рамките на един час при скорост на потока = 1 ml/min.
Methanol/water ratios with minimum water content of 25 % should be used.
За вещества със стойности на log P по-високи от 6 може да се наложи намаляване на времето за елуиране (също и на референтните вещества), като се намали полярността на подвижната фаза или дължината на колоната.
Typically a 3:1 (v/v) methanol-water mixture is satisfactory for eluting substances with a log P of 6 within an hour, at a flow rate of 1 ml/min.
Както изпитваните, така и референтните вещества трябва да са разтворими в подвижната фаза в концентрации, достатъчни да позволят откриването им.
For substances with a log P above 6 it may be necessary to shorten the elution time (and those of the reference substances) by decreasing the polarity of the mobile phase or the column length.
Добавките към сместа от метанол и вода могат да се използват само в изключителни случаи, тъй като те променят свойствата на колоната.
The test substance and the reference substances must be soluble in the mobile phase in sufficient concentration to allow their detection.
В тези случаи трябва да се потвърди, че времето на задържане на изпитваните и референтните вещества не е повлияно.
Additives may be used with the methanol-water mixture in exceptional cases only, since they will change the properties of the column.
Ако сместа метанол-вода не е подходяща, може да се използва смес от друг органичен разтворител и вода, например етанол-вода, ацетонитрил-вода или изопропилов алкохол (2-пропанол)-вода.
In these cases it must be confirmed that the retention time of the test and reference substances are not influenced.
Стойността на рН на елуента е решаваща за веществата, които могат да съществуват в йонизирано състояние.
If methanol-water is not appropriate, other organic solvent-water mixtures can be used, e.g. ethanol-water, acetonitrile-water or isopropyl alcohol (2-propanol)-water.
Тя трябва да бъде в работния обхват от рН на колоната, обикновено между 2 и 8.
The pH of the eluent is critical for ionisable substances.
Препоръчва се използването на буфери.
It should be within the operating pH range of the column, usually between 2 and 8.
Трябва да се внимава да се избегне утаяването на соли и замърсяването на колоната, което се получава при някои смеси органична фаза/буфер.
Buffering is recommended.
Измерванията с ВЕТХ с неподвижна фаза на базата на силикагел при рН над 8 обичайно не се препоръчват, тъй като употребата на алкална подвижна фаза може да доведе до бързо влошаване на качествата на колоната.
Care must be taken to avoid salt precipitation and column deterioration which occur with some organic phase/buffer mixtures.
Разтворени вещества
HPLC measurements with silica-based stationary phases above pH 8 are not normally advisable since the use of an alkaline mobile phase may cause rapid deterioration in the performance of the column.
Изпитваните и референтните вещества трябва да са достатъчно чисти, за да се определят пиковете за съответните вещества в хроматограмите.
Solutes
Ако е възможно, веществата, които ще се изпитват, и тези, които ще се използват за калибриране, се разтварят в подвижната фаза.
The test and reference substances must be sufficiently pure in order to assign the peaks in the chromatograms to the respective substances.
Ако за разтваряне на изпитваните и референтните вещества се използва различен от подвижната фаза разтворител, подвижната фаза следва да се използва за крайното разреждане преди инжектирането.
Substances to be used for test or calibration purposes are dissolved in the mobile phase if possible.
Условия на изпитването
If a solvent other than the mobile phase is used to dissolve the test and reference substances, the mobile phase should be used for the final dilution prior to injection.
Температурата по време на измерването не бива да се променя с повече от ± 1 °C.
Test conditions
Определяне на мъртвото време t0
The temperature during the measurement should not vary by more than ± 1 °C.
Мъртвото време t0 може да бъде измерено чрез използване на органични вещества, които не се задържат (например тиоуреа или формамид).
Determination of dead time to
Мъртвото време може да бъде получено по-прецизно с измерените времена на задържане, измерено или с набор от около седем члена на хомоложен ред (например n-алкилметилкетони) (17).
The dead time t0 can be measured by using unretained organic substances (e.g. thiourea or formamide).
Времената на задържане tR (nC + 1) се нанасят срещу tR (nC), където nC е броят на въглеродните атоми.
A more precise dead time can be derived from the retention times measured or a set of approximately seven members of a homologous series (e.g. n-alkyl methyl ketones) (17).
Получава се права линия tR (nC + 1) = A tR (nC) + (1 – A)t0, където A, представляващо k(nC + 1)/k(nC), е константа.
The retention times tR (nC + 1) are plotted against tR (nC), where nC is the number of carbon atoms.
Мъртвото време t0 се получава от отсечката (1 – A)t0 и наклона A.
A straight line, tR (nC + 1) = A tR (nC) + (1 – A)t0, is obtained, where A, representing k(nC + 1)/k(nC), is constant.
Регресионно уравнение
The dead time t0 is obtained from the intercept (1 – A)t0 and the slope A.
Следващата стъпка е да се начертае корелация на log k спрямо log P за подходящи референтни вещества със стойности на log P близки до очакваната стойност на изпитваното вещество.
Regression Equation
На практика се инжектират едновременно от 6 до 10 референтни вещества.
The next step is to plot a correlation log k versus log P for appropriate reference substances with log P values near the value expected for the test substance.
Времената на задържане се определят за предпочитане на записващ интегратор, свързан към детектора.
In practice, from 6 to 10 reference substances are injected simultaneously.
Съответните логаритми от капацитета, log k, се нанасят като функция от log P. Регресионното уравнение се съставя през равномерни интервали поне веднъж дневно, така че да бъдат отчетени възможните изменения в работата на колоната.
The retention times are determined, preferably on a recording integrator linked to the detection system.
ОПРЕДЕЛЯНЕ НА POW НА ИЗПИТВАНОТО ВЕЩЕСТВО
The corresponding logarithms of the capacity factors, log k, are plotted as a function of log P. The regression equation is performed at regular intervals, at least once daily, so that account can be taken of possible changes in column performance.
Изпитваното вещество се инжектира в най-малките откриваеми количества.
DETERMINATION OF THE POW OF THE TEST SUBSTANCE
Времето на задържане се определя с две повторения.
The test substance is injected in the smallest detectable quantities.
Коефициентът на разпределение на изпитваното вещество се получава чрез интерполация на изчисления капацитет върху калибрационната крива.
The retention time is determined in duplicate.
За много ниски или много високи коефициенти на разпределение се налага да се извърши екстраполация.
The partition coefficient of the test substance is obtained by interpolation of the calculated capacity factor on the calibration graph.
Особено в тези случаи внимание трябва да се обърне на доверителните граници на регресионната права.
For very low and very high partition coefficients extrapolation is necessary.
Ако времето на задържане на дадена проба е извън диапазона на времената на задържане, получени за еталоните, следва да бъде посочена пределна стойност.
Especially in these cases attention must be given to the confidence limits of the regression line.
ДАННИ И ПРОТОКОЛИРАНЕ
If the retention time of sample is outside the range of retention times obtained for the standards, a limit value should be quoted.
Протокол от изпитването
DATA AND REPORTING
В протокола трябва да се включи следното:
Test report
ако са определени — предварителната оценка на коефициента на разпределение, прогнозните стойности и използваният метод;
The following must be included in the report:
ако е използван изчислителен метод — пълното му описание, включително идентификация на базата данни и подробна информация относно подбора на фрагментите;
if determined the preliminary estimate of the partition coefficient, the estimated values and the method used;
изпитваните и референтните вещества:
and if a calculation method was used, its full description including identification of the data base and detailed information on the choice of fragments;
чистотата, структурната формула и CAS номера,
test and reference substances:
описание на оборудването и работните условия:
purity, structural formula and CAS number,
аналитичната колона, предпазната колона,
description of equipment and operating conditions:
подвижната фаза, детекторите, температурният обхват, pH;
analytical column, guard column,