natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Съдовете за изпитване и другите апарати, които ще бъдат в контакт с изпитваните разтвори, трябва да бъдат направени изцяло от стъкло или друг химически инертен материал.
The items should be thoroughly washed to ensure that no organic or inorganic contaminants may interfere with the algal growth or composition of the test solutions.
Елементите трябва да бъдат добре почистени, за да се гарантира, че няма органични или неорганични замърсители, които да повлияят на растежа на водораслите или върху състава на изпитваните разтвори.
The test vessels will normally be glass flasks of dimensions that allow a sufficient volume of culture for measurements during the test and a sufficient mass transfer of CO2 from the atmosphere (see paragraph 30).
Съдовете за изпитване обикновено са стъклени колби с размери, които позволяват обем на културата, достатъчен за измервания по време на изпитването, и достатъчно масопренасяне на CO2 от атмосферата (вижте параграф 30).
Note that the liquid volume must be sufficient for analytical determinations (see paragraph 37).
Да се има предвид, че обемът на течността трябва да бъде достатъчен за аналитично определяне (вж. точка 37).
In addition some or all of the following equipment may be required:
В допълнение могат да се изискват някои или всички от следните уреди:
Culturing apparatus:
Апаратура за култивиране:
a cabinet or chamber is recommended, in which the chosen incubation temperature can be maintained at ± 2 °C.
препоръчва се шкаф или камера, в който избраната инкубационна температура да може да бъде поддържана с ± 2 °C.
Light measurement instruments:
Уреди за измерване на светлината:
it is important to note that the method of measurement of light intensity, and in particular the type of receptor (collector), may affect the measured value.
важно е да се отбележи, че методът на измерване на интензитета на светлината, и по-специално видът на рецептора (колектора), може да окаже въздействие върху измерената стойност.
Measurements should preferably be made using a spherical (4 π) receptor (which responds to direct and reflected light from all angles above and below the plane of measurement), or a 2 π receptor (which responds to light from all angles above the measurement plane).
Препоръчително е измерванията да бъдат направени с използването на сферичен (4 π) рецептор (който реагира на пряка и отразена светлина от всички ъгли над и под равнината на измерване), или 2 π рецептор (който реагира на светлината от всички ъгли над равнината на измерване).
Apparatus to determine algal biomass.
Апарат за определяне на биомасата от водорасли.
Cell count, which is the most frequently used surrogate parameter for algal biomass, may be made using an electronic particle counter, a microscope with counting chamber, or a flow cytometer.
Преброяването на клетки, което е най-често използваният сурогатен параметър за биомаса от водорасли, може да бъде направено с използването на електронен брояч на частици, микроскоп с броячна камера или поточен цитометър.
Other biomass surrogates can be measured using a flow cytometer, fluorimeter, spectrophotometer or colorimeter.
Другите заместители на биомасата могат да бъдат измерени с използването на поточен цитометър, флуориметър, спектрофотометър или колориметър.
A conversion factor relating cell count to dry weight is useful to calculate.
Полезно е да се изчисли коефициент на превръщане, свързващ броя на клетките със сухото тегло.
In order to provide useful measurements at low biomass concentrations when using a spectrophotometer, it may be necessary to use cuvettes with a light path of at least 4 cm.
За да се осигурят полезни измервания при ниски концентрации на биомаса при използването на спектрофотометър, може да е необходимо да се използват кювети с дължина на светлинния път поне 4 cm.
Test organisms
Изпитвани организми
Several species of non-attached microalgae and cyanobacteria may be used.
Могат да се използват няколко вида неприкрепени микроводорасли и цианобактерии.
The strains listed in Appendix 2 have been shown to be suitable using the test procedure specified in this test method.
Щамовете, изброени в допълнение 2, са демонстрирани като подходящи при използването на процедурата на изпитване, определена в настоящия метод на изпитване.
If other species are used, the strain and/or origin should be reported.
Ако се използват други видове, следва да се протоколира щамът и/или произходът.
Confirm that exponential growth of the selected test alga can be maintained throughout the test period under the prevailing conditions.
Трябва да бъде потвърдено, че експоненциалният растеж на избраните изпитвани водорасли може да бъде поддържан по време на периода на изпитване при преобладаващите условия.
Growth medium
Среда на растеж
Two alternative growth media, the OECD and the AAP medium, are recommended.
Препоръчват се две алтернативни среди на растеж, средите на ОИСР и на AAP.
The compositions of these media are shown in Appendix 3.
Съставът на тези среди е показан в допълнение 3.
Note that the initial pH value and the buffering capacity (regulating pH increase) of the two media are different.
Да се има предвид, че първоначалната стойност на pH и буферният капацитет (регулиращ увеличаването на pH) на двете среди са различни.
Therefore the results of the tests may be different depending on the medium used, particularly when testing ionising chemicals.
Следователно резултатите от изпитванията могат да бъдат различни в зависимост от използваната среда, особено когато се изпитват йонизиращи химикали.
Modification of the growth media may be necessary for certain purposes, e.g. when testing metals and chelating agents or testing at different pH values.
Може да е необходимо изменение на средата на растеж за определени цели, например когато се изпитват метали или хелатни агенти или за изпитване при различни стойности на pH.
Use of a modified medium should be described in detail and justified (3) (4).
Използването на изменена среда трябва да бъде подробно описано и обосновано (3) (4).
Initial biomass concentration
Начална концентрация на биомасата
The initial biomass in the test cultures must be the same in all test cultures and sufficiently low to allow exponential growth throughout the incubation period without risk of nutrient depletion.
Началната биомаса в изпитваните култури трябва да бъде еднаква във всички изпитвани култури и достатъчно ниска, за да позволява експоненциален растеж през целия инкубационен период без риск от изчерпване на хранителните вещества.
The initial biomass should not exceed 0,5 mg/l as dry weight.
Началната биомаса не трябва да превишава 0,5 mg/l като сухо тегло.
The following initial cell concentrations are recommended:
Препоръчват се следните начални концентрации на клетки:
5 × 103 – 104 cells/ml
5 × 103 – 104 клетки/ml
2-5 × 103 cells/ml
2-5 × 103 клетки/ml
104 cells/ml
104 клетки/ml
5 × 104 – 105 cells/ml
5 × 104 – 105 клетки/ml
Concentrations of test chemical
Концентрации на изпитвания химикал
The concentration range in which effects are likely to occur may be determined on the basis of results from range-finding tests.
Диапазонът на концентрациите, в който е възможно да настъпят въздействия, може да бъде определен на базата на резултати от изпитвания за определяне на обхвата.
For the final definitive test at least five concentrations, arranged in a geometric series with a factor not exceeding 3.2, should be selected.
За крайното определящо изпитване трябва да се изберат поне пет концентрации, подредени в геометрична прогресия с частно, което не превишава 3,2.
For test chemicals showing a flat concentration response curve a higher factor may be justified.
За изпитвани химикали, показващи полегата крива концентрация-отклик, може да бъде обосновано и по-високо частно.
The concentration series should preferably cover the range causing 5-75 % inhibition of algal growth rate.
Поредицата от концентрации трябва по възможност да обхваща диапазона, при който се постига 5—75 % потискане на скоростта на растеж на водораслите.
Replicates and controls
Повторения и контролни проби
The test design should include three replicates at each test concentration.
Планът на изпитването следва да включва три повторения от всяка една изпитвана концентрация.
If determination of the NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Ако не се изисква определяне на NOEC, планът на изпитването може да бъде изменен, за да се увеличи броят на концентрациите и да се намали броят на повторенията за всяка концентрация.
The number of control replicates must be at least three, and ideally should be twice the number of replicates used for each test concentration.
Броят на контролните повторения трябва да бъде поне три и в най-добрия случай следва да бъде два пъти повече от броя на повторенията, използвани за всяка една изпитвана концентрация.
A separate set of test solutions may be prepared for analytical determinations of test chemical concentrations (see paragraphs 36 and 38).
Може да бъде приготвен отделен набор от изпитвани разтвори за аналитично определяне на концентрациите на изпитвания химикал (вж. точки 36 и 38).
When a solvent is used to solubilise the test chemical, additional controls containing the solvent at the same concentration as used in the test cultures must be included in the test design.
Когато се използва разтворител, за да се разтвори изпитваният химикал, в плана на изпитването трябва да бъдат включени допълнителни контролни проби, съдържащи разтворителя в същата концентрация, каквато е използвана в изпитваните култури.
Preparation of inoculum culture
Подготвяне на инокулант
In order to adapt the test alga to the test conditions and ensure that the algae are in the exponential growth phase when used to inoculate the test solutions, an inoculum culture in the test medium is prepared 2-4 days before start of the test.
За да се адаптират изпитваните водорасли към условията за изпитване и да се гарантира, че водораслите са във фаза на експоненциален растеж, когато се използват за инокулация на изпитваните разтвори, се приготвя инокулант в изпитваната среда 2 — 4 дни преди започване на изпитването.
The algal biomass should be adjusted in order to allow exponential growth to prevail in the inoculum culture until the test starts.
Биомасата от водорасли следва да бъде приспособена, за да се осигури преобладаване на експоненциалния растеж в инокуланта до започване на изпитването.
Incubate the inoculum culture under the same conditions as the test cultures.
Инокулантът се инкубира при същите условия като изпитваните култури.
Measure the increase in biomass in the inoculum culture to ensure that growth is within the normal range for the test strain under the culturing conditions.
Измерва се увеличаването на биомасата в инокуланта, за да се гарантира, че растежът е в рамките на нормалния диапазон за изпитвания щам при условията за култивиране.
An example of the procedure for algal culturing is described in Appendix 4.
В допълнение 4 е описан пример за процедурата на култивиране на водорасли.
To avoid synchronous cell divisions during the test a second propagation step of the inoculum culture may be required.
За да се избегне синхронното делене на клетките по време на изпитването, би могло да се наложи втори стадий в размножаването на инокуланта.
Preparation of test solutions
Приготвяне на изпитваните разтвори
All test solutions must contain the same concentrations of growth medium and initial biomass of test alga.
Всички разтвори за изпитване трябва да съдържат еднакви концентрации на средата на растеж и начална биомаса на изпитваните водорасли.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by mixing a stock solution of the test chemical with growth medium and inoculum culture.
Изпитваните разтвори на избраните концентрации обикновено се приготвят чрез смесване на изходен разтвор на изпитвания химикал със средата на растеж и инокуланта.
Stock solutions are normally prepared by dissolving the chemical in test medium.
Изходните разтвори обикновено се приготвят чрез разтваряне на химикала в изпитваната среда.
Solvents, e.g. acetone, t-butyl alcohol and dimethyl formamide, may be used as carriers to add chemicals of low water solubility to the test medium (2)(3).
Разтворители, като например ацетон, трет-бутилов алкохол и диметилформамид, могат да се използват като носители за добавяне към изпитваната среда на химикали с малка разтворимост във вода (2)(3).
The concentration of solvent should not exceed 100 μl/l, and the same concentration of solvent should be added to all cultures (including controls) in the test series.
Концентрацията на разтворителя не трябва да превишава 100 μl/l и към всички култури (включително и контролните) в изпитваните серии следва да се добави същата концентрация на разтворителя.
Incubation
Инкубация
Cap the test vessels with air-permeable stoppers.
Съдовете за изпитване се запушват с въздухопропускливи запушалки.
The vessels are shaken and placed in the culturing apparatus.
Съдовете се разклащат и поставят в апаратурата за култивиране.
During the test it is necessary to keep the algae in suspension and to facilitate transfer of CO2.
По време на изпитването е необходимо водораслите да се държат в суспензия и да се улесни преносът на CO2.
To this end constant shaking or stirring should be used.
За тази цел следва да се извършва постоянно разклащане или разбъркване.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 24 °C, controlled at ± 2 °C.
Културите трябва да се поддържат при температура от 21 до 24 °C с регулиране в границите на ± 2 °C.
For species other than those listed in Appendix 2, e.g. tropical species, higher temperatures may be appropriate, providing that the validity criteria can be fulfilled.
За видовете, различни от посочените в допълнение 2, например тропическите видове, може да са подходящи по-високи температури, при условие че могат да бъдат изпълнени критериите за валидност.
It is recommended to place the flasks randomly and to reposition them daily in the incubator.
Препоръчва се колбите да бъдат поставяни на случаен принцип и местата им в инкубатора да бъдат сменяни всеки ден.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
Стойността на pH на контролната среда не трябва да се повишава с повече от 1,5 единици по време на изпитването.
For metals and chemicals that partly ionise at a pH around the test pH, it may be necessary to limit the pH drift to obtain reproducible and well defined results.
За метали и химикали, които частично се йонизират при стойности на pH около стойността на pH при изпитването, може да е нужно ограничаване на отклонението на pH, за да се получат възпроизводими и добре дефинирани резултати.
A drift of < 0,5 pH units is technically feasible and can be achieved by ensuring an adequate CO2 mass transfer rate from the surrounding air to the test solution, e.g. by increasing the shaking rate.
Отклонение < 0,5 pH единици е технически осъществимо и може да бъде постигнато с осигуряване на адекватна скорост на масопренасяне на CO2 от заобикалящия въздух към изпитвания разтвор, например чрез увеличаване на честотата на разклащане.
Another possibility is to reduce the demand for CO2 by reducing the initial biomass or the test duration.
Друга възможност е да се намали потребността от CO2 чрез намаляване на първоначалната биомаса или продължителността на изпитването.
The surface where the cultures are incubated should receive continuous, uniform fluorescent illumination e.g. of “cool-white” or “daylight” type.
Повърхността, където културите се инкубират, следва да получава непрекъсната, хомогенна флуоресцентна светлина, например от вида „студена бяла светлина“ или „дневна светлина“.
Strains of algae and cyanobacteria vary in their light requirements.
Щамовете от водорасли и цианобактерии се различават по отношение на изискванията си за светлина.
The light intensity should be selected to suit the test organism used.
Интензитетът на светлината следва да бъде избран така, че да подхожда на използвания изпитван организъм.
For the recommended species of green algae, select the light intensity at the level of the test solutions from the range of 60-120 μE · m– 2 · s– 1 when measured in the photosynthetically effective wavelength range of 400-700 nm using an appropriate receptor.
За препоръчваните видове зелени водорасли интензитетът на светлината на нивото на изпитваните разтвори се избира в диапазона от 60—120 μE · m– 2 s– 1, когато се измерва във фотосинтетично ефективния диапазон от дължини на вълната от 400—700 nm с използването на подходящ рецептор.
Some species, in particular Anabaena flos-aquae, grow well at lower light intensities and may be damaged at high intensities.
Някои видове, по-специално Anabaena flos-aquae, растат добре при по-ниски интензитети на светлина и могат да бъдат увредени при високи интензитети.
For such species an average light intensity in the range 40-60 μE · m– 2 · s– 1 should be selected.
За такива видове следва да се избере среден интензитет на светлината в диапазона 40—60 μE · m– 2 · s– 1.
(For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 4440 - 8880 lux for cool white light corresponds approximately to the recommended light intensity 60-120 μE · m– 2 · s– 1).
(За уреди за измерване на светлината, калибрирани в lux, еквивалентният диапазон от 4440—8880 lux за студена бяла светлина съответства приблизително на препоръчвания интензитет на светлината от 60—120 μE·m– 2 · s– 1).
Maintain the light intensity within ±15 % from the average light intensity over the incubation area.
Светлинният интензитет се поддържа в рамките на ± 15 % от средния интензитет на светлината над инкубационната площ.
Test duration
Продължителност на изпитването
Test duration is normally 72 hours.
Продължителността на изпитването обикновено е 72 часа.
However, shorter or longer test durations may be used provided that all validity criteria in paragraph 11 can be met.
Въпреки това може да се използва по-кратка или по-дълга продължителност на изпитванията, при условие че могат да бъдат спазени всички критерии за валидност в параграф 11.
Measurements and analytical determinations
Измервания и аналитични определяния
The algal biomass in each flask is determined at least daily during the test period.
Биомасата от водорасли във всяка колба се определя най-малко веднъж дневно по време на изпитването.
If measurements are made on small volumes removed from the test solution by pipette, these should not be replaced.
Ако измерванията се правят на малки обеми, взети от изпитвания разтвор с пипета, те не бива да се връщат обратно.
Measurement of biomass is done by manual cell counting by microscope or an electronic particle counter (by cell counts and/or biovolume).
Измерването на биомасата се извършва чрез ръчно преброяване на клетките с микроскоп или електронен брояч на частици (чрез преброяване на клетки и/или обем на биомасата).
Alternative techniques, e.g. flow cytometry, in vitro or in vivo chlorophyll fluorescence (5) (6), or optical density can be used if a satisfactory correlation with biomass can be demonstrated over the range of biomass occurring in the test.
Могат да се използват алтернативни техники, например поточна цитометрия, in vitro или in vivo хлорофилна флуоресценция (5) (6) или оптична плътност, при условие че може да бъде демонстрирана задоволителна корелация с биомасата в диапазона на биомасата, който се среща по време на изпитването.
Measure the pH of the solutions at the beginning and at the end of the test.
Стойността на pH на разтворите се измерва в началото и в края на изпитването.
Provided an analytical procedure for determination of the test chemical in the concentration range used is available, the test solutions should be analysed to verify the initial concentrations and maintenance of the exposure concentrations during the test.
При условие че е налице аналитична процедура за определяне на изпитвания химикал в използвания диапазон на концентрацията, изпитваните разтвори следва да бъдат анализирани, за да се потвърдят първоначалните концентрации и поддържането на концентрациите на експозиция по време на изпитването.
Analysis of the concentration of the test chemical at the start and end of the test of a low and high test concentration and a concentration around the expected EC50 may be sufficient where it is likely that exposure concentrations will vary less than 20 % from nominal values during the test.
Анализът на концентрацията на изпитвания химикал в началото и в края на изпитването при ниска и висока изпитвана концентрация, както и на концентрация около очакваната EC50 може да е достатъчен в случаите, при които има вероятност концентрациите на експозиция да варират с по-малко от 20 % от номиналните стойности по време на изпитването.
Analysis of all test concentrations at the beginning and at the end of the test is recommended where concentrations are unlikely to remain within 80-120 % of the nominal concentration.
Препоръчва се анализ на всички изпитвани концентрации в началото и в края на изпитването, ако вероятността концентрациите да останат в рамките на 80—120 % от номиналните е малка.
For volatile, unstable or strongly adsorbing test chemicals, additional samplings for analysis at 24 hour intervals during the exposure period are recommended in order to better define loss of the test chemical.
За летливи, нестабилни или силно адсорбиращи изпитвани химикали се препоръчва допълнително вземане на проби за анализ на 24-часови интервали по време на периода на експозиция, за да се определи по-добре загубата на изпитвания химикал.
For these chemicals, extra replicates may be needed.
За тези химикали може да са необходими допълнителни повторения.
In all cases, determination of test chemical concentrations need only be performed on one replicate vessel at each test concentration (or the contents of the vessels pooled by replicate).
Във всички случаи е необходимо определянето на концентрациите на изпитвания химикал да бъде извършвано само в един съд с повторна проба при всяка една изпитвана концентрация (или в обединеното съдържание на съдовете от повторенията).
The test media prepared specifically for analysis of exposure concentrations during the test should be treated identically to those used for testing, i.e. they should be inoculated with algae and incubated under identical conditions.
Изпитваната среда, приготвена специално за анализ на концентрации на експозиция по време на изпитването, следва да бъде третирана по същия начин както тези, използвани за изпитването, т.е., тя трябва да бъде инокулирана с водорасли и инкубирана при същите условия.
If analysis of the dissolved test chemical concentration is required, it may be necessary to separate algae from the medium.
Ако се изисква анализ на концентрацията на разтворения изпитван химикал, може да е нужно да се отделят водораслите от средата.
Separation should preferably be made by centrifugation at a low g-force, sufficient to settle the algae.
За предпочитане е отделянето да се прави чрез центрофугиране при ниска сила на притегляне, достатъчна за утаяване на водораслите.
If there is evidence that the concentration of the chemical being tested has been satisfactorily maintained within ± 20 % of the nominal or measured initial concentration throughout the test, analysis of the results can be based on nominal or measured initial values.
Ако има доказателство, че през цялото време на изпитването концентрацията на химикала, който се изпитва, е била задоволително поддържана в рамките на ± 20 % от номиналната или измерената първоначална концентрация, анализът на резултатите може да бъде базиран на номиналната или на измерената първоначална стойност.
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is not within the range of ± 20 %, analysis of the results should be based on geometric mean concentration during exposure or on models describing the decline of the concentration of the test chemical (3) (7).