natgillin/translations-raw huggingface dataset:
ИЗПИТВАНЕ ЗА РАЗМНОЖАВАНЕ НА ПРЕДСТАВИТЕЛИ НА СЕМ.
From a practical point of view, many Enchytraeus species are easy to handle and breed, and their generation time is significantly shorter than that of earthworms.
Настоящият метод за изпитване е еквивалентен на насоките за изпитване на ОИСР (ТG) 220 (2004).
The duration for a reproduction test with enchytraeids is therefore only 4-6 weeks while for earthworms (Eisenia fetida) it is 8 weeks.
Той е предназначен да бъде използван за оценяване на въздействието на химикали върху репродуктивната способност в почвата на червеи от вида Enchytraeus albidus Henle 1873.
Basic information on the ecology and ecotoxicology of enchytraeids in the terrestrial environment can be found in (9)(10)(11)(12).
Той се основава главно на метод, разработен от Агенцията по околна среда, Германия (1), който е бил предмет на кръгово изпитване (2).
Adult enchytraeid worms are exposed to a range of concentrations of the test chemical mixed into an artificial soil.
Други методи за изпитване на токсичността на химикали към представители на сем.
The test can be divided into two steps:
Enchytraeidae и земни червеи също са взети предвид (3) (4) (5) (6) (7) (8).
a range-finding test, in case no sufficient information is available, in which mortality is the main endpoint assessed after two weeks exposure and (b) a definitive reproduction test in which the total number of juveniles produced by parent animal and the survival of parent animals are assessed.
Обитаващите почвата прешленести червеи от род Enchytraeus са екологично значими видове по отношение на екотоксикологичните изпитвания.
The duration of the definitive test is six weeks.
Докато представителите на сем.
After the first three weeks, the adult worms are removed and morphological changes are recorded.
Enchytraeidae се срещат често в почвите, обитавани от земни червеи, вярно е също така, че те често са в изобилие в много почви, които не са обитавани от земни червеи.
After an additional three weeks, the number of offspring, hatched from the cocoons produced by the adults, is counted.
Представителите на сем.
The reproductive output of the animals exposed to the test chemical is compared to that of the control(s) in order to determine (i) the no observed effect concentration (NOEC) and/or (ii) ECx (e.g. EC10, EC50) by using a regression model to estimate the concentration that would cause a x % reduction in reproductive output.
Enchytraeidae могат да се използват при лабораторни изпитвания, както и в полуполеви и полеви изследвания.
The test concentrations should bracket the ECx (e.g. EC10, EC50) so that the ECx then comes from interpolation rather than extrapolation.
От практическа гледна точка много видове от род Enchytraeus са лесни за боравене и отглеждане и тяхното време за създаване на поколение е значително по-кратко от това на земните червеи.
The water solubility, the log Kow, the soil water partition coefficient (e.g. Chapter C.18 or C.19 of this Annex) and the vapour pressure of the test chemical should preferably be known.
Продължителността на едно изпитване за размножаване на представители на сем.
Additional information on the fate of the test chemical in soil, such as the rates of photolysis and hydrolysis is desirable.
Enchytraeidae следователно трае само 4-6 седмици, докато при земните червеи (Eisenia fetida) то е 8 седмици.
This test method can be used for water soluble or insoluble chemicals.
Основна информация относно екологията и екотоксикологията на представителите на сем.
However, the mode of application of the test chemical will differ accordingly.
Enchytraeidae в сухоземни условия могат да бъдат намерени в (9) (10) (11) (12).
The test method is not applicable to volatile chemicals, i.e. chemicals for which the Henry's constant or the air/water partition coefficient is greater than one, or chemicals for which the vapour pressure exceeds 0,0133 Pa at 25 °C.
Възрастни (полово зрели) представители на сем.
For the test to be valid, the following performance criteria should be met in the controls:
Enchytraeidae се експонират на диапазон от концентрации на изпитвания химикал, примесен с изкуствена почва.
adult mortality should not exceed 20 % at the end of the range-finding test and after the first three weeks of the reproduction test.
Изпитването може да бъде разделено на две стъпки:
assuming that 10 adults per vessel were used in setting up the test, an average of at least 25 juveniles per vessel should have been produced at the end of the test.
изпитване за определяне на обхвата, в случай че не е налице достатъчно информация, при която смъртността е основната крайна точка, оценена след две седмици експозиция, и б) окончателното изпитване за размножаване, в което се оценяват общият брой на ювенилните екземпляри, произлезли от родител, и преживяването на родителите.
the coefficient of variation around the mean number of juveniles should not be higher than 50 % at the end of the reproduction test.
Продължителността на окончателното изпитване е шест седмици.
Where a test fails to meet the above validity criteria the test should be terminated unless a justification for proceeding with the test can be provided.
След първите три седмици полово зрелите червеи се отстраняват и морфологичните промени се записват.
The justification should be included in the test report.
След още три седмици се отчита броят на новоизлюпените от пашкулчетата червеи, произлезли от полово зрели индивиди.
A reference chemical should be tested either at regular intervals or possibly included in each test to verify that the response of the test organisms has not changed significantly over time.
Репродуктивната способност на животните, експонирани на изпитвания химикал, се сравнява с тази на контролата(ите), за да се определи (i) концентрацията без наблюдавано въздействие (NOEC) и/или (ii) ECx (напр.
A suitable reference chemical is carbendazim, which has been shown to affect survival and reproduction of enchytraeids (13)(14), or other chemicals whose toxicity data are well known could be also used.
EC10, EC50), като се използва регресионен модел, за да се оцени концентрацията, която би причинила х % намаляване в репродуктивната способност.
A formulation of carbendazim known by the trade name of Derosal™ supplied by AgrEvo Company (Frankfurt, Germany) and containing 360 g/l (32,18 %) active ingredient was used in a ring-test (2).
Изпитваните концентрации трябва да обхващат ECx (напр.
The EC50 for reproduction determined in the ring test was in the range of 1,2 ± 0,8 mg active ingredient (a.i) /kg dry mass (2).
EC10, EC50), така че ЕСх впоследствие да се получи след интерполация, вместо след екстраполация.
If a positive toxic standard is included in the test series, one concentration is used and the number of replicates should be the same as that in the controls.
Разтворимостта във вода, log Kow, коефициентът на разпределение почва-вода (вж. напр. глава В.18 или В.19 от настоящото приложение) и парното налягане на изпитвания химикал следва да са известни.
For carbendazim, the testing of 1,2 mg a.i./kg dry weight (tested as a liquid formulation) is recommended.
Желателно е да е налична допълнителна информация относно съдбата на изпитвания химикал в почвата, като например скоростите на фотолиза и хидролиза.
DESCRIPTION OF THE TEST
Този метод за изпитване може да се използва за разтворими във вода и неразтворими химикали.
Equipment
Начините на прилагане на изпитвания химикал обаче съответно ще се различават.
The test vessels should be made of glass or other chemically inert material.
Методът за изпитване е неприложим за летливи химикали, т.е., химикали, за които константата на Хенри или коефициентът на разпределение въздух-вода е по-голям от единица, или за химикали, при които парното налягане превишава 0,0133 Pa при 25 °С.
Glass jars (e.g. volume: 0,20 - 0,25 litre; diameter: ≈ 6 cm) are suitable.
За да бъде изпитването валидно, при контролите следва да се изпълнят следните критерии:
The vessels should have transparent lids (e.g. glass or polyethylene) that are designed to reduce water evaporation whilst allowing gas exchange between the soil and the atmosphere.
Смъртността при възрастните индивиди не трябва да превишава 20 % в края на изпитването за определяне на обхвата и след първите три седмици от изпитването за размножаване.
The lids should be transparent to allow light transmission.
Ако се предположи, че са били използвани 10 възрастни индивиди на съд при подготвянето на изпитването, в края му трябва да са получени средно най-малко 25 ювенилни индивиди на съд.
Normal laboratory equipment is required, specifically the following:
Коефициентът на вариация около средната величина на ювенилните индивиди не трябва да е по-голям от 50 % в края на изпитването за размножаване.
drying cabinet;
Когато дадено изпитване не отговаря на посочените по-горе критерии, то следва да бъде прекратено, освен ако не може да бъде предоставена обосновка за продължаването му.
stereomicroscope;
Обосновката следва да се включи в протокола от изпитването.
pH-meter and photometer;
Референтният химикал или трябва да се изпитва редовно, или евентуално да бъде включен във всяко изпитване, за да се провери дали откликът на изпитваните организми не се е променил значително с течение на времето.
suitable accurate balances;
Подходящ референтен химикал е карбендазим, за когото е било доказано, че оказва въздействие върху преживяването и размножаването на представителите на сем.
adequate equipment for temperature control;
Enchytraeidae (13) (14), като също могат да бъдат използвани и други химикали, при които данните за токсичността са добре известни.
adequate equipment for humidity control (not essential if exposure vessels have lids);
В кръгово изпитване е използвана формулировка на карбендазим, известна с търговското наименование Derosal™, доставена от AgrEvo Company (Франкфурт, Германия) и съдържаща 360 g/l (32,18 %) активна съставка (2).
incubator or small room with air-conditioner;
Стойността на EC50 за размножаването, определена в кръговото изпитване, е в интервала 1,2 ± 0,8 mg активна съставка (a.i.) на kg суха маса (2).
tweezers, hooks or loops;
Ако в поредицата изпитвания е включена положителна стандартна проба за токсичност, използва се една концентрация, като броят на отделните повторения следва да е същият като този при контролите.
photo basin.
По отношение на карбендазим се препоръчва изпитване с 1,2 mg a.i./kg сухо тегло (изпитва се във вид на течна формулировка).
Preparation of the artificial soil
ОПИСАНИЕ НА ИЗПИТВАНЕТО
An artificial soil is used in this test (5)(7) with the following composition (based on dry weights, dried to a constant weight at 105 °C):
Оборудване
10 % sphagnum peat, air-dried and finely ground (a particle size of 2 ± 1 mm is acceptable);
Съдовете за изпитване следва да са направени от стъкло или друг химически инертен материал.
it is recommended to check that a soil prepared with a fresh batch of peat is suitable for culturing the worms before it is used in a test;
Подходящи са стъклени буркани (напр. с обем: 0,20—0,25 литра; диаметър: ≈ 6 cm).
20 % kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %);
Съдовете следва да са с прозрачни капаци (напр. стъкло или полиетилен), които са разработени така, че да намаляват изпаряването на водата, като същевременно дават възможност за газообмен между почвата и атмосферата.
approximately 0,3 to 1,0 % calcium carbonate (CaCO3, pulverised, analytical grade) to obtain a pH of 6,0 ± 0,5;
Капаците следва да бъдат прозрачни, за да се позволи пропускането на светлина.
the amount of calcium carbonate to be added may depend principally on the quality/nature of the peat;
Необходимо е обикновено лабораторно оборудване, по-специално следното:
approximately 70 % air-dried quartz sand (depending on the amount of CaCO3 needed), predominantly fine sand with more than 50 % of the particles between 50 and 200 microns.
сушилна камера;
It is advisable to demonstrate the suitability of an artificial soil for culturing the worms and for achieving the test validity criteria before using the soil in a definitive test.
стереомикроскоп;
It is especially recommended to make such a check to ensure that the performance of the test is not compromised if the organic carbon content of the artificial soil is reduced, e.g. by lowering the peat content to 4-5 % and increasing the sand content accordingly.
pH-метър и фотометър;
By such a reduction in organic carbon content, the possibilities of adsorption of test chemical to the soil (organic carbon) may be decreased and the availability of the test chemical to the worms may increase.
подходящи точни везни;
It has been demonstrated that Enchytraeus albidus can comply with the validity criteria on reproduction when tested in field soils with lower organic carbon content than mentioned above (e.g. 2,7 %) (15), and there is experience — though limited — that this can also be achieved in artificial soil with 5 % peat.
подходящо оборудване за контрол на температурата;
When using natural soil in additional (e.g. higher tier) testing, the suitability of the soil and achieving the test validity criteria should also be demonstrated.
подходящо оборудване за контрол на влажността (не е от съществено значение, ако съдовете за експозицията са снабдени с капаци);
The dry constituents of the soil are mixed thoroughly (e.g. in a large-scale laboratory mixer).
инкубатор или малко помещение с климатик;
This should be done at least one week before starting the test.
пинсети, куки или примки;
The mixed soil should be stored for two days in order to equilibrate/stabilise the acidity.
фотографска вана.
For the determination of pH a mixture of soil and 1 M potassium chloride (KCl) or 0,01 M calcium chloride (CaCl2) solution in a 1:5 ratio is used (see (16) and Appendix 3).
Приготвяне на изкуствената почва
If the soil is more acidic than the required range (see paragraph 11), it can be adjusted by addition of an appropriate amount of CaCO3.
В настоящото изпитване се използва изкуствена почва (5)(7) със следния състав (на базата на сухо тегло след изсушаване до постоянно тегло при температура от 105 °C):
If the soil is too alkaline it can be adjusted by the addition of more of the mixture, referred to in paragraph 11, but excluding the CaCO3.
10 % торфен мъх, изсушен на въздух и фино смлян (приема се размер на частиците от 2 ± 1 mm);
The maximum water holding capacity (WHC) of the artificial soil is determined in accordance with procedures described in Appendix 2.
препоръчва се да се провери дали преди използване в изпитването дадена почва, приготвена с прясна партида торф, е подходяща за отглеждане на червеите;
One or two days before starting the test, the dry artificial soil is pre-moistened by adding enough de-ionised water to obtain approximately half of the final water content, that being 40 to 60 % of the maximum water holding capacity.
20 % каолин (за предпочитане съдържанието на каолинит да е над 30 %);
At the start of the test, the pre-moistened soil is divided into portions corresponding with the number of test concentrations (and reference chemical where appropriate) and controls used for the test.
приблизително от 0,3 до 1,0 % калциев карбонат (CaCO3 на прах, с квалификация „чист“) за получаване на pH, равно на 6,0 ± 0,5;
The moisture content is adjusted to 40-60 % of the maximum WHC by the addition of the test chemical solution and/or by adding distilled or de-ionised water (see paragraphs 19-21).
количеството на калциевия карбонат за добавяне може да зависи основно от качеството/естеството на торфа;
The moisture content is determined at the beginning and at the end of the test (by drying to constant weight at 105 °C) and should be within the optimal range for the survival of the worms.
приблизително 70 % кварцов пясък, изсушен на въздух (в зависимост от количеството на необходимия CaCO3), предимно фин пясък с над 50 % от частиците между 50 и 200 микрона.
A rough check of the soil moisture content can be obtained by gently squeezing the soil in the hand, if the moisture content is correct small drops of water should appear between the fingers.
Преди използването на почвата в окончателното изпитване е препоръчително да се демонстрира пригодността на изкуствената почва за отглеждането на червеите и за постигането на критериите за валидност на изпитването.
Selection and preparation of test animals
Особено е препоръчително да се направи такава проверка, за да се гарантира, че ефективността на изпитването не е изложена на риск, ако съдържанието на органичен въглерод в изкуствената почва се намали, например чрез понижаване на съдържанието на торф до 4 — 5 % и съответно повишаване на съдържанието на пясък.
The recommended test species is Enchytraeus albidus Henle 1837 (white potworm), a member of the family Enchytraeidae (order Oligochaeta, phylum Annelida).
С подобно намаляване на съдържанието на органичен въглерод може да се намали и способността за адсорбция на изпитвания химикал в почвата (органичен въглерод) и да се увеличи наличният изпитван химикал за червеите.
E. albidus is one of the largest species of enchytraeids, with specimens of up to 35 mm in length being recorded (17)(18).
Беше показано, че Enchytraeus albidus може да изпълни критериите за валидност по отношение на размножаването, когато се изпитва в естествени почви с по-ниско съдържание на органичен въглерод от упоменатото по-горе (напр.
E. albidus has a world-wide distribution and is found in marine, freshwater and terrestrial habitats, mainly in decaying organic matter (seaweed, compost) and rarely in meadows (9).
2,7 %) (15), като е експериментално установено, макар и в ограничен мащаб, че това може да се постигне и в изкуствена почва със съдържание на торф 5 %.
Its broad ecological tolerance and some morphological variations might indicate that different races exist.
Когато се използва естествена почва в допълнително изпитване (напр. изпитване на по-високо стъпало), следва също да бъдат доказани пригодността на почвата и постигането на критериите за валидност на изпитването.
E. albidus is commercially available, as a fish food.
Сухите съставки на почвата се смесват старателно (напр. в голямо лабораторно устройство за смесване).
It should be checked whether the culture is contaminated by other, usually smaller, species (1) (19).
Това следва да се извърши най-малко една седмица преди началото на изпитването.
If contamination occurs, all worms should be washed with water in a petri dish.
Смесената почва следва да се съхранява в продължение на два дни, за да се достигне равновесие при киселинността/да се стабилизира киселинността.
Large adult specimens of E. albidus should then be selected (using a stereomicroscope) to start a new culture and all other worms are discarded.
За определянето на рН се използва смес от почва и разтвор на 1 М калиев хлорид (KCl) или 0,01 M калциев хлорид (CaCl2) в съотношение 1:5 (вж.
E. albidus can be bred easily in a wide range of organic materials (see Appendix 4).
(16) и Допълнение 3).
The life-cycle of E. albidus is short since maturity is reached between 33 days (at 18 °C) and 74 days (at 12 °C) (1).
Ако почвата е по-киселинна от изисквания диапазон (вж. точка 11), може да бъде коригирана чрез добавяне на подходящо количество CaCO3.
Only cultures that have been kept without problems in the laboratory for at least 5 weeks (one generation) will be used for the test.
Ако почвата е твърде алкална, може да се коригира чрез добавяне на повече от сместа, посочена в параграф 11, но без съдържание на CaCO3.
Other species of the Enchytraeus genus are also suitable, e.g. E. buchholzi Vejdovsky 1879 or E. crypticus Westheide & Graefe 1992 (see Appendix 5).
Максималната способност за задържане на вода (СЗВ) на изкуствената почва се определя в съответствие с процедурите, описани в допълнение 2.
If other species of Enchytraeus are used, they must be clearly identified and the rationale for the selection of the species should be reported.
Един или два дни преди началото на изпитването сухата изкуствена почва предварително се навлажнява чрез добавяне на дейонизирана вода, до получаване на приблизително половината от крайното съдържание на вода, което представлява 40 до 60 % от максималната способност за задържане на вода.
The animals used in the tests are adult worms.
В началото на изпитването предварително навлажнената почва се разделя на части, съответстващи на броя изпитвани концентрации (и референтен химикал, когато е целесъобразно) и контроли.
They should have eggs (white spots) in the clitellum region, and they should be approximately the same size (about 1 cm long).
Влажността се коригира до 40—60 % от максималната СЗВ чрез добавяне на разтвор на изпитвания химикал и/или като се добавя дестилирана или дейонизирана вода (вж. точки 19—21).
Synchronisation of the breeding culture is not necessary.
Съдържанието на влага се измерва в началото и в края на изпитването (чрез изсушаване до постоянно тегло при 105 °С) и следва да бъде в оптимални граници за преживяването на червеите.
If the enchytraeids are not bred in the same soil type and under the conditions (including feeding) used for the final test they must be acclimatised for at least 24 hours and up to three days.
Приблизителна проверка на съдържанието на влага в почвата може да се извърши чрез леко стискане в ръка на почвата — ако съдържанието на влага е коректно, трябва между пръстите да се появят малки капки вода.
A larger number of adults than that needed for performing the test should initially be acclimatised to allow scope for rejection of damaged or otherwise unsuitable specimens.
Избор и приготвяне на изпитваните животински видове
At the end of the acclimatisation period, only worms containing eggs and exhibiting no behavioural abnormalities (e.g. trying to escape from the soil) are selected for the test.
Препоръчаният за изпитването вид е Enchytraeus albidus Henle 1837 (бял червей), представител на семейство Enchytraeidae (клас Oligochaeta, тип Annelida).
The worms are carefully removed using jeweller's tweezers, hooks or loops and placed in a petri dish containing a small amount of fresh water.
E. albidus е един от най-големите видове измежду представителите на семейство Enchytraeidae, като е съобщавано за екземпляри, достигащи дължина до 35 mm (17) (18).
Reconstituted fresh water as proposed in Chapter C.20 of this Annex (Daphnia magna Reproduction Test) is preferred for this purpose since de-ionised, de-mineralised or tap water could be harmful to the worms.
Enchytraeus albidus се среща по целия свят в морски, сладководни и сухоземни местообитания, главно в разлагаща се органична материя (водорасли, компост) и рядко по ливади (9).
The worms are inspected under a stereomicroscope and any that do not contain eggs are discarded.
Неговата широка екологична толерантност и някои морфологични изменения може да показват, че съществуват различни подвидове.
Care is taken to remove and discard any mites or springtails that might have infected the cultures.
Enchytraeus albidus е достъпен в търговската мрежа като храна за риби.
Healthy worms not used for the test are returned to the stock culture.
Следва да се провери дали отгледаните екземпляри не са замърсени от други, обикновено по-дребни видове (1) (19).
Preparation of test concentrations
Ако е налице замърсяване, всички червеи следва да се измият с вода в стъкло на Петри.
Test chemical soluble in water
След това следва да се изберат едри полово зрели екземпляри от E. albidus (с използване на стереомикроскоп) за започване на нова култура, като всички други червеи се отстраняват.
A solution of the test chemical is prepared in deionised water in a quantity sufficient for all replicates of one test concentration.
E. albidus може да се отглежда лесно в широка гама от органични материали (виж допълнение 4).
It is recommended to use an appropriate quantity of water to reach the required moisture content, i.e. 40 to 60 % of the maximum WHC (see paragraph 13).
Жизненият цикъл при E. albidus е къс, тъй като той достига до зрелост между 33 дни (при 18 °C) и 74 (при 12 °С).
Each solution of test chemical is mixed thoroughly with one batch of pre-moistened soil before being introduced into the test vessel.
В изпитвания следва да се използват само култури, които са били държани безпроблемно в лаборатория в продължение на най-малко 5 седмици (едно поколение).
Test chemical insoluble in water