natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Наличието на съставки от животински произход, които могат да бъдат открити в подложените на анализ фуражни суровини и комбинирани фуражи, се определя въз основа на типични характеристики, които се установяват чрез наблюдение под микроскоп, като например мускулни влакна и други месни частици, хрущяли, кости, рога, косми, четина, кръв, пера, черупки от яйца, рибешки кости и люспи.
The constituents of animal origin which may be present in feed materials and compound feed sent for analysis are identified on the basis of typical and microscopically identifiable characteristics like muscle fibres and other meat particles, cartilage, bones, horn, hair, bristles, blood, feathers, egg shells, fish bones and scales.
Реагенти и апаратура
Reagents and equipment
Тетрахлоретилен (относителна плътност 1,62)
Tetrachloroethylene (specific gravity 1,62)
Оцветяващи реагенти
Staining reagent
Разтвор на ализариново червено (в 100 ml вода се разтварят 2,5 ml солна киселина 1М и към този разтвор се прибавят 200 mg ализариново червено)
Alizarin Red solution (dilute 2,5 ml 1M hydrochloric acid in 100 ml water and add 200 mg Alizarin Red to this solution)
Средства за фиксиране
Mounting media
Основа (NaOH 2,5 % w/v или KOH 2,5 % w/v)
Lye (NaOH 2,5 % w/v or KOH 2,5 % w/v)
Глицерол (неразреден, вискозитет: 1490 cP)
Glycerol (undiluted, viscosity: 1490 cP)
Norland ® Optical Adhesive 65 (вискозитет: 1200 cP) или смола с равностойни свойства за подготовка на предметно стъкло за постоянна употреба
Norland ® Optical Adhesive 65 (viscosity: 1200 cP) or a resin with equivalent properties for permanent slide preparation
Средства за фиксиране с оцветяващи свойства
Mounting media with staining properties
Разтвор на Лугол (2 g калиев йодид се разтварят в 100 ml вода и се прибавя 1 g йод, като се разклаща често)
Lugol solution (dissolve 2 g potassium iodide in 100 ml water and add 1 g iodine while frequently shaking)
Цистинов реактив (2 g оловен ацетат, 10 g NaOH на 100 ml вода)
Cystine reagent (2 g lead acetate, 10 g NaOH/100 ml water)
Реактив на Фелинг (приготвен предварително от равни части (1/1) от два основни разтвора А и Б. Разтвор А: 6,9 g меден (II) сулфат пентахидрат се разтварят в 100 ml вода. Разтвор Б: 34,6 g натриев калиев тартарат тетрахидрат и 12 g NaOH се разтварят в 100 ml вода)
Fehling’s reagent (prepared before use from equals parts (1/1) of two stock solutions A and B. Solution A: dissolve 6,9 g copper (II) sulphate pentahydrate in 100 ml water. Solution B: dissolve 34,6 g potassium sodium tartrate tetrahydrate and 12 g NaOH in 100 ml water)
тетраметилбензидин/водороден прекис 1 g 3,3’,5,5’ тетраметилбензидин (TMB) се разтварят в 100 ml безводна оцетна киселина и 150 ml вода.
Tetramethylbenzidine/Hydrogen peroxide.
Преди употреба 4 части от така приготвения разтвор на TMB се смесват с 1 част трипроцентен водороден прекис.
(dissolve 1 g 3,3’,5,5’ tetramethylbenzidine (TMB) in 100 ml glacial acetic acid and 150 ml water. Before use, mix 4 parts of this TMB solution with 1 part 3 % hydrogen peroxide)
Етанол ≥ 96 % (технически чист)
Ethanol ≥ 96 % (technical grade)
Ацетон (технически чист)
Acetone (technical grade)
Готов разтвор на натриев хипохлорит (9—14 % активен хлор)
Commercial sodium hypochlorite solution (9 - 14 % active chlorine)
Апаратура
Equipment
Аналитична везна с точност до 0,001 g
Analytical balance with an accuracy of 0,001 g
Апаратура за смилане:
Grinding equipment:
мелничка или хаванче
mill - or mortar
Сита с квадратни отвори с ширина на отвора 0,25 mm и 1 mm
Sieves with square meshes of 0,25 mm and 1 mm width
Конусовидна стъклена делителна фуния с вместимост 250 ml с тефлонов или стъклен спирателен кран в основата на конуса.
Conical glass separation funnel with a content of 250 ml with Teflon or ground glass stopcock at the base of the cone.
Диаметърът на отваряне на крана следва да бъде ≥ 4 mm.
Stopcock opening diameter shall be ≥ 4mm.
Възможно е да се използва също така и бехерова чаша с конично дъно за утаяване, при условие че лабораторията е доказала, че нивата на откриване са еквивалентни на тези, получени при използване на конусовидна стъклена делителна фуния.
Alternatively, a conical bottomed settling beaker may be used provided the laboratory has demonstrated that detection levels are equivalent to that obtained using the conical glass separation funnel.
Делителна фуния
Separation funnel
Стереомикроскоп с обхват на общото увеличение най-малко 6,5× до 40×.
Stereomicroscope covering at least a 6,5× to 40× final magnification range
Съставен микроскоп с обхват на общото увеличение най-малко 100× до 400× с преминаваща светлина и светло поле.
Compound microscope covering at least a 100× to 400× final magnification range with transmitted light bright field.
В допълнение могат да бъдат използвани поляризирана светлина и диференциален интерферентен контраст.
Polarised light and differential interferential contrast can additionally be used
Стандартна лабораторна стъклария
Standard laboratory glassware
Апаратура за подготовка на предметно стъкло:
Equipment for slide preparation:
класически микроскопски предметни стъкла, предметни стъкла с ямка, покривни стъкла (20×20 mm), щипци, фини шпатули
classical microscope slides, hollow slides, coverslips (20 × 20 mm), tweezers, fine spatula
Вземане на проби и подготовка на пробите
Sampling and sample preparation
Използват се представителни проби, взети в съответствие с разпоредбите в приложение I.
A representative sample, taken in accordance with the provisions laid down in Annex I shall be used.
С цел да се избегне кръстосано замърсяване в лабораториите апаратурата за многократно ползване се почиства внимателно преди употреба.
In order to avoid laboratory cross-contamination, all reusable equipment shall be carefully cleaned before use.
Преди почистването частите на делителните фунии се демонтират.
Separation funnel pieces shall be disassembled before cleaning.
Частите на делителните фунии и лабораторната стъклария се измиват предварително на ръка, а след това и машинно.
Separation funnel pieces and glassware shall be pre-washed manually and then washed in a washing machine.
Ситата се почистват с помощта на четка с твърд синтетичен косъм.
Sieves shall be cleaned by using a brush with stiff synthetic hairs.
Препоръчва се след пресяването на мастни вещества, като рибно брашно например, ситата да бъдат почиствани окончателно с ацетон и сгъстен въздух.
A final cleaning of sieves with acetone and compressed air is recommended after sieving of fatty material like fishmeal.
Подготовка на проби, различни от мазнини или масла
Preparation of samples other than fat or oil
Сушене на проба:
Sample drying:
пробите със съдържание на влага над 14 % се подлагат на предварително сушене.
samples with a moisture content > 14 % shall be dried prior to handling.
Предварително пресяване на проба:
Sample pre-sieving:
препоръчва се гранулираните фуражи и зърната да се пресяват предварително през сито с размер на отвора 1 mm, като двете получени в резултат фракции впоследствие се подготвят и анализират като отделни проби.
it is recommended to pre-sieve at 1 mm pelleted feeds and kernels and to subsequently prepare and analyse the two resulting fractions as distinct samples.
Разделяне на пробата на части и смилане:
Sub-sampling and grinding:
най-малко 50 g от пробата се отделят като част от пробата за целите на анализа, като впоследствие тя се смила.
at least 50 g of the sample shall be sub-sampled for analysis and subsequently ground.
Екстракция и подготовка на утайка:
Extraction and preparation of the sediment:
10 g (с точност до 0,01 g) от смляната част от пробата се прехвърля в делителна фуния или бехерова чаша с конично дъно за утаяване и се добавят 50 ml тетрахлоретилен.
a portion of 10 g (accurate to 0,01 g) of the ground sub-sample shall be transferred into the separation funnel or conical bottomed settling beaker and 50 ml of tetrachloroethylene shall be added.
Частта, която се прехвърля във фунията, е най-много 3 g за рибно брашно или други чисти животински продукти, минерални съставки или премикси, които образуват повече от 10 % утайка.
The portion transferred into the funnel shall be limited to 3 g in case of fishmeal or other pure animal products, mineral ingredients or premixes which generate more than 10 % of sediment.
Сместа се разклаща енергично в продължение на поне 30 секунди и внимателно се добавят още поне 50 ml тетрахлоретилен, като същевременно вътрешната повърхност на фунията внимателно се облива, за да бъдат отмити полепналите частици.
The mixture shall be vigorously shaken for at least 30 s and at least 50 ml more of tetrachloroethylene shall be added cautiously while washing down the inside surface of the funnel to remove any adhering particles.
Така получената смес се оставя да престои най-малко 5 минути, преди утайката да се отдели чрез отваряне на спирателния кран.
The resulting mixture shall be left to stand for at least 5 minutes before the sediment is separated off by opening the stopcock.
Ако се използва бехерова чаша с конично дъно за утаяване, сместа се разбърква енергично в продължение на поне 15 секунди, като всички частици по стените на бехеровата чаша се отмиват внимателно от вътрешната повърхност с най-малко 10 ml чист тетрахлоретилен.
If a conical bottomed settling beaker is used then the mixture shall be vigorously stirred for at least 15 s and any particles adhering to the side of the beaker shall be carefully washed down the inside surface with at least 10 ml of clean tetrachloroethylene.
Сместа се оставя да престои в продължение на 3 минути, след което се разбърква отново за 15 секунди, като всички частици по стените на бехеровата чаша се отмиват внимателно от вътрешната повърхност с най-малко 10 ml чист тетрахлоретилен.
The mixture shall be left to stand for 3 minutes and then stirred again for 15 seconds and any particles adhering to the side of the beaker shall be carefully washed down the inside surface with at least 10 ml of clean tetrachloroethylene.
Така получената смес се оставя да престои в продължение на най-малко 5 минути, като след това течната фракция се отстранява и изхвърля чрез внимателно преливане, като се внимава да няма загуба на утайка.
The resulting mixture shall be left to stand for at least 5 minutes and then the liquid fraction is removed and discarded by careful decanting, taking care not to lose any of the sediment.
Утайката се изсушава и след това се претегля (с точност до 0,001 g).
The sediment shall be dried and subsequently weighed (accurate to 0,001 g).
Ако над 5 % от утайката се състои от частици > 0,50 mm, тя се пресява през сито с големина на отвора 0,25 mm, като се изследват и двете получени по този начин фракции.
If more than 5 % of the sediment consists of particles > 0,50 mm, it shall be sieved at 0,25 mm and the two resulting fractions shall be examined.
Екстракция и подготовка на плаваща фракция:
Extraction and preparation of the flotate:
след възстановяването на утайката чрез описания по-горе метод в делителната фуния остават две фази:
after recovery of the sediment with the method described above, two phases should remain in the separation funnel:
течна фаза, състояща се от тетрахлоретилен, и твърда фаза, състояща се от плаващ на повърхността слой.
a liquid one consisting of tetrachloroethylene and a solid one made of floating material.
Тази твърда фаза представлява плаваща фракция и нейното възстановяване се извършва, като цялото количество тетрахлоретилен се излее от фунията с отварянето на спирателния кран.
This solid phase is the flotate and shall be recovered by pouring off completely tetrachloroethylene from the funnel by opening the stopcock.
Чрез обръщане на делителната фуния плаващата фракция се прехвърля в голямо блюдо Петри и се изсушава чрез въздух във вентилационен шкаф.
By inverting the separation funnel, the flotate shall be transferred into a large Petri dish and air dried in a fumehood.
Ако над 5 % от плаващата фракция се състои от частици > 0,50 mm, тя се пресява през сито с големина на отвора 0,25 mm, като се изследват и двете получени по този начин фракции.
If more than 5 % of the flotate consists of particles > 0,50 mm, it shall be sieved at 0,25 mm and the two resulting fractions shall be examined.
Подготовка на суровина:
Preparation of raw material:
извършва се подготовка на най-малко 5 g от отделената и смляна част от пробата.
a portion of at least 5 g of the ground sub-sample shall be prepared.
Ако над 5 % от веществото се състои от частици > 0,50 mm, то се пресява през сито с големина на отвора 0,25 mm, като се изследват и двете получени по този начин фракции.
If more than 5 % of the material consists of particles > 0,50 mm, it shall be sieved at 0,25 mm and the two resulting fractions shall be examined.
Подготовка на проби, които се състоят от мазнини или масла
Preparation of samples consisting of fat or oil
Подготовката на проби, които се състоят от мазнини или масла, се извършва съгласно следния протокол:
The following protocol shall be followed for the preparation of samples consisting of fat or oil:
ако мазнината е твърда, тя се загрява в пещ до втечняването ѝ,
if the fat is solid, it shall be warmed in a oven until it is liquid.
с помощта на пипета 40 ml от мазнината или маслото се прехвърлят от дъното на пробата в епруветка за центрофугиране,
by using a pipette, 40 ml of fat or oil shall be transferred from the bottom of the sample to a centrifugation tube.
центрофугира се в продължение на 10 минути при 4000 rpm,
centrifuge during 10 minutes at 4000 r.p.m.
ако след центрофугирането мазнината е твърда, тя се загрява в пещ до втечняването ѝ,
if the fat is solid after centrifugation, it shall be warmed in an oven until it is liquid.
центрофугира се отново в продължение на 5 минути при 4000 rpm,
repeat the centrifugation during 5 minutes at 4000 r.p.m.
с помощта на малка лъжичка или шпатула половината от отделените примеси се прехвърлят на микроскопски предметни стъкла с цел анализ, като за фиксиращо средство се препоръчва използването на глицерол,
by using a small spoon or a spatula, one half of the decanted impurities shall be transferred to microscopic slides for examination, Glycerol is recommended as mounting medium.
останалите примеси се използват за подготовка на утайката съгласно точка 2.1.3.3.
the remaining impurities shall be used for preparing the sediment as described in point 2.1.3.3.
Използване на оцветяващи реагенти
Use of staining reagents
С цел улесняване на правилното определяне на съставките от животински произход, при подготовката на пробите извършващият анализа може да използва оцветяващи реагенти в съответствие с насоките, определени от EURL-AP и публикувани на нейната интернет страница.
In order to facilitate the correct identification of the constituents of animal origin, the operator may use staining reagents during the sample preparation in accordance with guidelines issued by the EURL-AP and published on its website.
Когато за оцветяване на утайката се използва ализариново червено, се прилага следният протокол:
In case Alizarin Red solution is used to colour the sediment, the following protocol shall apply:
изсушената утайка се прехвърля в стъклена епруветка и се изплаква два пъти с около 5 ml етанол (всеки път се използва вихров смесител в продължение на 30 секунди, разтворителят се оставя да се утаи за около 1 минута и 30 секунди, след което се излива),
the dried sediment shall be transferred into a glass test tube and rinsed twice with approximately 5 ml of ethanol (each time a vortex of 30 s shall be used, the solvent shall be let settle about 1 min 30 s and poured off).
утайката се избелва, като се добавя най-малко 1 ml разтвор на натриев хипохлорит.
the sediment shall be bleached by adding at least 1 ml sodium hypochlorite solution.
Реакцията се оставя да протече в продължение на 10 минути. Епруветката се напълва с вода, утайката се оставя да се утаи за 2—3 минути, след което водата и отделените частици се изливат внимателно,
The reaction shall be allowed to continue for 10 min. The tube shall be filled with water, the sediment shall be let settle 2-3 min, and the water and the suspended particles shall be poured off gently.
утайката се промива още два пъти с около 10 ml вода (използва се вихров смесител за 30 секунди, оставя се да се утаи, водата се излива всеки път),
the sediment shall be rinsed twice more with about 10 ml of water (a vortex shall be used for 30 s, let settle, and pour off the water each time).
добавят се 2 до 10 капки от разтвора на ализариново червено и сместа се разбърква с помощта на вихров смесител.
2 to 10 drops of the Alizarin Red solution shall be added and the mixture shall be vortexed.
Реакцията се оставя да протече в продължение на 30 секунди и оцветената утайка се промива два пъти с около 5 ml етанол, след което се изплаква още веднъж с ацетон (всеки път се използва вихров смесител в продължение на 30 секунди, разтворителят се оставя да се утаи за около 1 минута, след което се излива),
The reaction shall be let occur for 30 s and the coloured sediment shall be rinsed twice with approximately 5 ml ethanol followed by one rinse with acetone (each time a vortex of 30 s shall be used, the solvent shall be let settle about 1 min and poured off).
оцветената утайка се изсушава.
the coloured sediment shall be dried.
Подготовка на предметно стъкло
Slide preparation
Микроскопските предметни стъкла се подготвят от утайката и, в зависимост от решението на извършващия анализа, от плаващата фракция или суровината.
Microscopic slides shall be prepared from the sediment and, depending of operator’s choice, from either the flotate or the raw material.
Ако при подготовката на пробите е използвано пресяване, подготовка се извършва и за двете получени фракции (ситна фракция и едра фракция).
In case sieving has been used during the sample preparation, the two resulting fractions (the fine and the coarse one) shall be prepared.
Пробите за анализ, отделени от нанесените върху предметни стъкла фракции, се считат за представителни по отношение на цялата фракция.
Test portions of fractions spread on slides shall be representative of the whole fraction.
Необходимо е да бъдат подготвени достатъчен брой предметни стъкла, за да се осигури възможност за цялостен протокол на изследването съгласно точка 2.1.4.2.
A sufficient number of slides shall be prepared in order to ensure that a complete examination protocol as laid down in point 2.1.4.2 can be carried-out.
Микроскопските предметни стъкла се фиксират с подходящи средства за фиксиране в съответствие със СОП, установени от EURL-AP и публикувани на нейната интернет страница.
Microscopic slides shall be mounted with the adequate mounting medium in accordance with the SOP established by the EURL-AP and published on its website.
Предметните стъкла се покриват с покривни стъкла.
The slides shall be covered with coverslips.
Протоколи за наблюдение за откриване на частици от животински произход в комбинираните фуражи и фуражните суровини
Observation protocols for the detection of animal particles in compound feed and feed material
Подготвените микроскопски предметни стъкла се наблюдават в съответствие с протоколите за наблюдение, илюстрирани на диаграма 1 за комбинираните фуражи и фуражните суровини, различни от чистото рибно брашно, или на диаграма 2 за чистото рибно брашно.
The prepared microscopic slides shall be observed in accordance with the observation protocols laid down in diagram 1 for compound feed and feed materials other than pure fishmeal, or in diagram 2 for pure fishmeal.
Микроскопските наблюдения се извършват, като се използва съставен микроскоп за утайката и, в зависимост от решението на извършващия анализа, за плаващата фракция или за суровината.
The microscopic observations shall be conducted using the compound microscope on the sediment and, depending of the operator’s choice, either on the flotate or on the raw material.
В допълнение към съставния микроскоп за едрите фракции може да се използва и стереомикроскоп.
The stereomicroscope may be used in addition to the compound microscope for the coarse fractions.
Всяко предметно стъкло се изследва цялостно при различни степени на увеличение.
Each slide shall be screened entirely at various magnifications.
Минималният брой предметни стъкла, които трябва да бъдат наблюдавани при всеки от установените в протокола за наблюдение етапи, следва да се спазва стриктно, освен ако не е възможно необходимият брой предметни стъкла да бъде осигурен с помощта на веществото в цялата фракция.
The minimum numbers of slides to be observed at each step of the observation protocol shall be strictly respected unless the entire fraction material does not permit to reach the stipulated slide number.
При всяко определяне се наблюдават максимум 6 предметни стъкла.
No more than 6 slides per determination shall be observed.
За да се улесни определянето на вида и произхода на частиците, извършващият анализа може да използва помощни средства, като например системи за подпомагане вземането на решения, бази данни с изображения и еталонни проби.
In order to facilitate the identification of the particles’ nature and origin, the operator may use support tools like decision support systems, image libraries and reference samples.
Протокол за наблюдение за откриване на частици от животински произход в комбинирани фуражи и фуражни суровини, различни от рибно брашно
Observation protocol for the detection of animal particles in compound feed and feed material other than fishmeal
след смилането на пробата 95 % от частиците са ≤ 0,50 mm
Grinding process of sample insures 95 % of particles ≤ 0.50 mm
пресяване през отвор 0,25 mm
Sieving on 0.25 mm mesh
3 предметни стъкла от утайка + 1 предметно стъкло от плаваща фракция или суровина
3 slides from sediment + 1 slide from flotate or raw material
3 предметни стъкла от < 0,25 mm утайка + 1 предметно стъкло < 0,25 mm плаваща фракция или суровина
3 slides from < 0.25 mm sediment + 1 slide < 0.25 mm flotate or raw material
над 5 открити частици от животински произход от един и същ вид?
> 5 animal particles of same nature detected?
резултатът от пробата се отчита съгласно т. 2.1.5.3 за РИБА
sample declared according to point 2.1.5.3 for FISH
анализът се повтаря съгласно т. 2.1.4.3
repetition of analysis according to point 2.1.4.3
брой частици от риба?
Number of fish particles?
1 предметно стъкло от утайка
1 slide from sediment
РИБА
FISH
1 предметно стъкло от > 0,25 mm утайка
1 slide from > 0.25 mm sediment
вид на частиците от животински произход?
nature of animal particles?
СУХОЗЕМНИ ЖИВОТНИ
TERRESTRIAL
1 предметно стъкло от плаваща фракция или суровина
1 slide from rotate or raw material
брой частици от сухоземни животни?
Number of terrestrial particles?
1 предметно стъкло от > 0,25 mm плаваща фракция или суровина
1 slide from > 0.25 mm flotate or raw material
открити ли са частици от животински произход?
animal particles detected?
резултатът от пробата се отчита съгласно т. 2.1.5.3 за СУХОЗЕМНИ ЖИВОТНИ
sample declared according to point 2.1.5.3 for TERRESTRIAL ANIMAL
резултатът от пробата се отчита съгласно т. 2.1.5.1
sample declared according to point 2.1.5.1
Протокол за наблюдение за откриване на частици от животински произход в рибно брашно
Observation protocol for the detection of animal particles in fishmeal
след смилането на пробата 95% от частиците са ≤ 0,50 mm
Grinding process insures 95% of particles ≤ 0.50 mm
3 предметни стъкла от утайка
3 slides from sediment
3 предметни стъкла от < 0,25 mm утайка
3 slides from < 0.25 mm sediment
над 5 открити частици от сухоземни животни?
> 5 terrestrial particles detected?
2 предметни стъкла от утайка
2 slides from sediment
2 предметни стъкла от > 0,25 mm утайка
2 slides from > 0.25 mm sediment
1 предметно стъкло от плаваща фракция или суровина
1 slide from flotate or raw material
1 предметно стъкло от < 0,25 плаваща фракция или суровина
1 slide from < 0.25 mm flotate or raw material
открити ли са частици от сухоземни животни?
terrestrial particles detected?
резултатът от пробата се отчита съгласно т. 2.1.5.1 за СУХОЗЕМНИ ЖИВОТНИ
sample declared according to point 2.1.5.1 for TERRESTRIAL ANIMAL