natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Стените на съда се изплакват с 4 ml вода.
Wash down the walls of the vessel with 4 ml water.
Поставя се винтовата капачка и колбата се затваря, без да се затяга капачката.
Put on the screw cap and close the flask loosely.
Прехвърля се в автоклав (т. 4.6) с вряща вода и пара за 30—60 min. Автоклавът се затваря и се включва на температура 110 oС (± 2) в продължение на 20 часа.
Transfer to an autoclave (4.6) with boiling water and steam for 30-60 minutes. Close the autoclave and autoclave at 110 (± 2) oC for 20 hours.
Преди отварянето на автоклава температурата се намалява до малко под 100 oC.
Before opening the autoclave reduce the temperature to just under 100 oC.
За да се избегне кристализация на Ва(ОН)2 . 8Н2О, към загрятата смес се прибавят 30 ml вода със стайна температура.
In order to avoid crystallisation of Ba(OH)2 · 8 H2O, add to the warm mixture 30 ml water which is at room temperature.
Леко се разклаща или разбърква.
Shake or stir gently.
Прибавят се 2,00 ml от концентрирания разтвор на вътрешния стандарт (α-метил-триптофан) (т. 3.16).
Add 2,00 ml concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Съдовете се охлаждат във вода/ледена вана в продължение на 15 min.
Cool the vessels on water/ice bath for 15 minutes.
След това се прибавят 5 ml ортофосфорна киселина (т. 3.14).
Then, add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Съдът се държи в охлаждащата вана и съдържанието се неутрализира със HCl (т. 3.11), като се бърка непркъснато и рН се коригира до 3,0 с помощта на HCl (т. 3.12).
Keep the vessel in the cooling bath and neutralise with HCl (3.11) whilst stirring and adjust the pH to 3,0 using HCl (3.12).
Прибавя се достатъчно количество метанол, за да се достигне концентрация между 10 и 30 % метанол в крайния обем.
Add sufficient methanol to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Прехвърля се в мерителна колба с подходящ обем и се разрежда с вода до достигане на обема, необходим за хроматографията (например 100 ml).
Transfer to a volumetric flask of appropriate volume and dilute with water to the defined volume necessary for the chromatography (for example 100 ml).
Добавянето на метанол не трябва да предизвика утаяване.
The addition of methanol shall not cause precipitation.
Стандартният разтвор и хидролизатите трябва да се пазят от пряка слънчева светлина.
Protect standard solution and hydrolysates against direct sunlight.
Ако не е възможно да се анализират в същия ден, хидролизатите могат да се съхраняват при температура 5 oС в продължение най-много на 3 дни.
If it is not possible to analyse the hydrolysates the same day, they may be stored at 5 oC for a maximum of 3 days.
Определяне с помощта на HPLC
HPLC determination
За ориентиране се предлагат следните условия за изократно елуиране; може да се използват и други, при условие, че дават равностойни резултати (вж. също и забележките т. 9.1 и т. 9.2):
The following conditions for isocratic elution are offered for guidance; other conditions may be used, provided they yield equivalent results (see also observations 9.1 and 9.2):
Колона за течна хроматография (т. 4.2):
Liquid chromatographic column (4.2):
125 mm × 4 mm, С18, пълнеж от 3 μm или еквивалентна
125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing or equivalent
Температура на колоната:
Column temperature:
стайна температура
Room temperature
Подвижна фаза (т. 3.22):
Mobile phase (3.22):
3,00 g оцетна киселина (т. 3.18) + 900 ml вода (т. 3.1) +50,0 ml разтвор (т. 3.21) на 1,1,1-трихлоро-2-метил-2-пропанол (т. 3.19) в метанол (точка 3.8) (1g/100ml).
3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2- methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1 g/100 ml).
Долива се до 1000 ml с вода (т. 3.1).
Make up to 1000 ml with water (3.1)
Скорост на изтичане:
Flow rate:
(1ml/min).
1 ml/min.
Общо време:
Total run time:
приблизително 34 min
approx. 34 min.
Дължина на вълната за откриване:
Detection wavelength:
възбуждане 280 nm, излъчване: 356 nm.
excitation: 280 nm, emission: 356 nm.
Обем на впръскване
Injection volume
Количеството триптофан (Х) се изчислява в g на 100 g проба.
The amount of tryptophane (X), in g per 100g sample, is calculated as follows:
A пикова площ на вътрешния стандарт, разтвор на стандарта за калибриране (т. 3.17)
A peak area of internal standard, calibration standard solution (3.17)
B пикова площ на триптофана, ексракт (т. 5.2) или хидролизат (т. 5.3)
B peak area of tryptophan, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
обем в ml (2 ml) на концентрирания разтвор на триптофан (т. 3.15), прибавен към калибрационния разтвор (т. 3.17)
volume in ml (2 ml) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to the calibration solution (3.17)
c концентрация в μmol/ml (= 2,50) на концентрирания разтвор на триптофан (т. 3.15), прибавен към калибрационния разтвор (т. 3.17)
c concentration in μmol/ml (= 2,50) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to calibration solution (3.17)
обем в ml на разтвора на вътрешния стандарт (т. 3.16), прибавен към екстракта (т. 5.2) (= 5,00 ml) или към хидролизата (т. 5.3) (= 2,00 ml)
volume in ml of concentrated internal standard solution (3.16) added at the extraction (5.2) (= 5,00 ml) or to the hydrolysate (5.3) (= 2,00 ml)
C пикова повърхност на вътрешния стандарт, екстракт (т. 5.2) или хидролизат (т. 5.3)
C peak area of internal standard, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
D пикова площ на триптофана, калибрационен стандартен разтвор (т. 3.17)
D peak area of tryptophan, calibration standard solution (3.17)
обем в ml (= 2,00 ml) от концентрирания разтвор на вътрешния стандарт (т. 3.16), прибавен към калибрационния стандартен разтвор (т. 3.17)
volume in ml (= 2,00 ml) of concentrated internal standard solution (3.16) added to calibration standard solution (3.17)
m тегло на пробата в g (коригирано, за да се получи началното тегло, ако продуктът е изсушен и/или обезмаслен)
m sample weight in g (corrected to original weight if dried and/or defatted)
M молекулно тегло на триптофана (= 204,23 g/mol)
M molar weight of tryptophan (= 204,23 g/mol)
Разликата в резултатите от две паралелни определяния на една и съща проба не трябва да надхвърля 10 % по отношение на най-високия резултат.
The difference between the results of two parallel determinations carried out on the same sample must not exceed 10 % relative to the highest result.
Резултати от съвместно изследване
Results of a collaborative study
Беше организирано съвместно изследване (4-то сравнение) в рамките на Общността, при което в 12 лаборатории бяха анализирани три проби, за да се сертифицира методът за изследване чрез хидролиза.
An EC collaborative study (4th intercomparison) was arranged in which three samples were analysed by up to 12 laboratories to certify the method for hydrolysis.
Бяха направени 5 еднакви анализа на всяка проба.
Replicate (5) analyses were performed on each sample.
Резултатите са представени в следната таблица:
The results are given in the following table:
Проба 1
Sample 1
Фураж за свине
Pig feed
Проба 2
Sample 2
Фураж за свине с добавен L-триптофан
Pig feed supplemented with L-tryptophan
Проба 3
Sample 3
Концентриран фураж за свине
Feed concentrate for pigs
Средна стойност в g/kg
Mean [g/kg]
CVr [ %]
CVr [%]
CVR [ %]
CVR [%]
L брой на лабораториите, предали резултати
L number of laboratories submitting results
n брой на запазените индивидуални резултати след елиминиране на отклоняващите се стойности (определни чрез тестовете на Cochran и Dixon)
n number of single results retained eliminating outliers (identified by Cochran, Dixon outlier test)
стандартно отклонение на повторяемостта
standard deviation of repeatability
стандартно отклонение на възпроизводимостта
standard deviation of reproducibility
r повторяемост
r repeatability
R възпроизводимост
R reproducibility
коефициент на вариация на повторяемостта, %
coefficient of variation of repeatability, %
коефициент на изменение на възпроизводимостта, %
coefficient of variation of reproducibility, %
Беше организирано друго съвместно изследване (3-то сравнение) в рамките на Общността, при което в 13 лаборатории бяха анализирани две проби, за да се сертифицира методът за екстракция на свободен триптофан.
Another EC collaborative study (3rd intercomparison) was arranged in which two samples were analysed by up to 13 laboratories to certify the method for extraction of free tryptophan.
Проба 4
Sample 4
Смес от пшеница и соя
Wheat and soya mixture
Проба 5
Sample 5
Смес от пшеница и соя (= проба 4) с добавен триптофан (0,457g/kg)
Wheat and soya mixture (= sample 4) with added tryptophan (0,457g/kg1)
n брой на запазените индивидуални резултати след елиминиране на отклоняващите се стойности (определни чрез тестовете на Cochran и Dixon)
n number of single results retained after eliminating outliers (identified by Cochran, Dixon outlier test)
Беше организирано друго паралелно проучване в рамките на Общността, при което в 7 лаборатории бяха анализирани четири проби, за да се сертифицира методът за определяне на триптофан чрез хидролиза.
Another EC intercomparison study was arranged in which four samples were analysed by up to 7 laboratories with the aim of a tryptophan certification for hydrolysis.
Резултатите са представени по-долу.
The results are given below.
Комбиниран фураж за свине
Mixed pig feed
Рибно брашно с ниско съдържание на мазнини
Low fat fish meal
Соево брашно
Soybean meal
Обезмаслено мляко на прах
Skimmed milk powder
Следните специални условия за хроматография могат да доведат до по-добро разграничаване на триптофана и α-метил-триптофана.
Following special chromatographic conditions may give better separation between tryptophan and α-methyl-tryptophan.
Изократно елуиране с последващо градиентно почистване на колоната:
Isocratic elution followed by gradient column cleaning:
Колона за течна хроматография:
Liquid chromatographic column:
125 mm × 4 mm, С18, пълнеж от 5 μm или еквивалентна
125 mm x 4 mm, C18, 5 μm packing or equivalent
Подвижна фаза:
Mobile phase:
А: 0,01 mol/l KH2PO4/метанол 95+5 (V+V).
0,01 mol/l KH2PO4/méthanol, 95+5 (V+V).
метанол
methanol
Програма за градиента:
Gradient program:
0 min
0 min.
15 min
15 min.
17 min
17 min.
19 min
19 min.
21 min
21 min.
33 min
33 min.
1,2 ml/min
1,2 ml/min.
приблизително 33 min
approx. 33 min.
Хроматографията варира според типа HPLC и според материала, използван за запълването на колоната.
The chromatography will vary according to the type of HPLC and column packing material used.
Избраната система трябва да може да разграничи триптофана от вътешния стандарт на равнището на базовата линия.
The chosen system must be capable of giving baseline separation between the tryptophan and the internal standard.
Освен това е важно продуктите на разлагането да се разделят добре от триптофана и вътрешния стандарт.
Moreover it is important that degradation products are well separated from the tryptophan and the internal standard.
Изследват се хидролизати без вътрешен стандарт, за да се провери базовата линия за примеси при наличие на вътрешен стандарт.
Hydrolysates without internal standard shall be run in order to check the base line under the internal standard for impurities.
Важно е също така е времето за елуиране да е достатъчно продължително, за да има възможност за елуиране на всички продукти на разлагането, в противен случай късните пикове, породени от елуирането, могат да интерферират със следващите хроматографски операции.
It is important that the run time is sufficiently long for the elution of all the degradation products, otherwise late eluting peaks may interfere with subsequent chromatographic runs.
В работния диапазон хроматографската система трябва да покаже линейна реакция.
In the range of operation, the chromatographic system shall give linear response.
Линейната реакция се измерва при постоянна концентрация (т.е. нормална концентрация) на вътрешния стандарт и при различни концентрации на триптофана.
The linear response shall be measured with a constant (the normal) concentration of the internal standard and varying concentrations of tryptophan.
Важно е височината на пиковете на триптофана и на вътрешния стандарт да се намира в линейния диапазон на системата HPLC/флуоресцентната система.
It is of importance that the size of both the tryptophan and internal standard peaks are within the linear range of the HPLC/fluorescence system.
Ако пикът или пиковете на триптофана и/или на вътрешния стандарт са прекалено ниски или прекалено високи, анализът се повтаря с проба с различна големина и/или изменен краен обем.
If either the tryptophan and/or the internal standard peak(s) is (are) too small or too high the analysis shall be repeated with another sample size and/or a changed final volume.
Бариев хидроксид
Barium hydroxide
С течение на времето разтварянето на бариевият хидроксид става все по-трудно.
With age barium hydroxide becomes more difficult to dissolve.
Това води до мътен разтвор при определяне с HPLC, което може да доведе до слаби резултати за триптофана.
This results in an unclear solution for the HPLC determination, which may produce low results for tryptophan.
ОПРЕДЕЛЯНЕ СЪДЪРЖАНИЕТО НА СУРОВИ МАСЛА И МАЗНИНИ
DETERMINATION OF CRUDE OILS AND FATS
Настоящият методът служи за определяне на съдържанието на сурови масла и мазнини във фуражите.
This method is for the determination of crude oils and fats in feed.
Той не обхваща анализа на маслодайните семена и плодове.
It does not cover the analysis of oil seeds and oleaginous fruit.
Използването на двете разгледани по-долу процедури зависи от характера и състава на фуража и причината за извършване на анализа.
The use of the two procedures described below depends on the nature and composition of the feed and the reason for carrying out the analysis.
Процедура А — Директно екстахируеми сурови масла и мазнини
Procedure A — Directly extractable crude oils and fats
Настоящият метод е приложим за фуражни суровини от растителен произход, с изключение на включените в обхвата на процедура Б.
This method is applicable to feed materials of plant origin, except those included within the scope of Procedure B.
Процедура Б — Общо съдържание на сурови масла и мазнини
Procedure B — Total crude oils and fats
Настоящият метод е приложим за фуражни суровини от животински произход и за всички комбинирани фуражи.
This method is applicable to feed materials of animal origin and to all compound feeds.
Той трябва да се използва за всички суровини, от които маслата и мазнините не могат да бъдат екстрахирани напълно, без преди това да се осъществи хидролиза (напр. глутени, мая, картофени протеини и продукти, подлежащи на преработка като екструдиране, сплескване и нагряване).
It is to be used for all materials from which the oils and fats cannot be completely extracted without prior hydrolysis (e.g. glutens, yeast, potato proteins and products subjected to processes such as extrusion, flaking and heating).
Във всички случаи, когато резултатът, получен при използване на процедура Б, е по-висок от получения по процедура А, за действителен се приема резултатът от процедура Б.
In all cases where a higher result is obtained by using Procedure B than by Procedure A, the result obtained by Procedure B shall be accepted as the true value.
Процедура А
Procedure A
Пробата се подлага на екстракция с петролен етер.
The sample is extracted with light petroleum.
Разтворителят се дестилира, след което остатъкът се изсушава и претегля.
The solvent is distilled off and the residue dried and weighed.
Процедура Б
Procedure B
Пробата се обработва със солна киселина под действието на топлина.
The sample is treated under heating with hydrochloric acid.
Сместа се охлажда и флитрира.
The mixture is cooled and filtered.
Остатъкът се измива, изсушава и се подлага на определяне на съдържанието в съответствие с процедура А.
The residue is washed and dried and submitted to the determination according to Procedure A.
Петролен етер с диапазон на кипене: 40—60 oC.
Light petroleum, boiling range: 40 to 60 oC.
Бромното число трябва да бъде под 1, а остатъкът при изпарение — под 2 mg/100 ml.
The bromine value must be less than 1 and the residue on evaporation less than 2 mg/100 ml.
Натриев сулфат, безводен.
Sodium sulfate, anhydrous.
Солна киселина, с = 3 mol HCl/l
Hydrochloric acid, c = 3 mol/l
Спомагателно средство за филтриране, напр. инфузорна пръст, Hyflo-supercel.
Filtration aid, e.g. Kieselguhr, Hyflo-supercel.
Екстракционен апарат.
Extraction apparatus.
Когато екстракционният апарат е снабден със сифон (апарат на Сокслет), скоростта на обратния поток трябва да бъде такава, че да се получават около 10 цикъла на час; когато апаратът не е от сифонен тип, скоростта на обратния поток трябва да бъде около 10 ml в минута.
If fitted with a siphon (Soxhlet apparatus), the reflux rate shall be such as to produce about 10 cycles per hour; if of the non-siphoning type, the reflux rate shall be about 10 ml per minute.
Екстракционни гилзи, незамърсени с вещества, разтворими в петролен етер и с пропускливост, която отговаря на изискванията в т. 4.1.
Extraction thimbles, free of matter soluble in light petroleum and having a porosity consistent with the requirements of point 4.1.
Сушилня или вакуумна сушилня, настроена на 75 ± 3 oС или въздушна пещ, настроена на 100 ± 3oС.
Drying oven, either a vacuum oven set at 75 ± 3 oC or an air-oven set at 100 ± 3 oC.
Процедура А (вж. т. 8.1)
Procedure A (see point 8.1)
Претеглят се 5 g от пробата с точност до 1 mg, прехвърлят се в екстракционна гилза (т. 4.2), която се закрива с памучен тампон, по който не трябва да има мазнини.
Weigh 5 g of the sample to the nearest 1 mg, transfer it to an extraction thimble (4.2) and cover with a fat-free wad of cotton wool.
Гилзата се поставя в екстрактора (т. 4.1) и се провежда екстракция в продължение на шест часа с петролен етер (т. 3.1).
Place the thimble in an extractor (4.1) and extract for six hours with light petroleum (3.1).
Екстрактът от петролния етер се събира в суха претеглена колба, в която са поставени парченца пемза.
Collect the light petroleum extract in a dry, weighed flask containing fragments of pumice stone.
Рзтворителят се отстранява чрез дестилация.
Distil off the solvent.
Остатъкът се изсушава, като се остави колбата за час и половина в сушилнята (т. 4.3).
Dry the residue maintaining the flask for one and a half hours in the drying oven (4.3).
Оставя се да се охлади в ексикатор и се претегля.
Leave to cool in a desiccator and weigh.
Изсушава се отново в продължение на 30 min, за да се гарантира, че теглото на маслата и мазнините ще остане постоянно (загубата на тегло между две последователни претегляния трябва да бъде по-малка или равна на 1 mg).
Dry again for 30 minutes to ensure that the weight of the oils and fats remains constant (loss in weight between two successive weighings must be less than or equal to 1 mg).
Претеглят се 2,5 g от пробата с точност до 1 mg (вж. т. 8.2), поставят се в бехерова чаша от 400 ml или конусообразна колба от 300 ml и се добавят 100 ml солна киселина (т. 3.3) и парченца пемза.
Weigh 2,5 g of the sample to the nearest 1 mg (see point 8.2), place in a 400 ml beaker or a 300 ml conical flask and add 100 ml of hydrochloric acid (3.3) and fragments of pumice stone.
Бехеровата чаша се покрива със стъкло за наблюдение или на конусообразната колба се поставя обратен хладник.
Cover the beaker with a watch glass or fit the conical flask with a reflux condenser.
Сместа се оставя да заври леко над слаб пламък или котлон и се задръжа така един час.
Bring the mixture to a gentle boil over a low flame or a hot-plate and keep it there for one hour.
Не трябва да се позволява на продукта да полепва по стените на съда.
Do not allow the product to stick to the sides of the container.
Съдържанието се охлажда, добавя се толкова филтратор (т. 3.4), колкото е достатъчно, за да се предотврати загубата на масло или мазнина по време на филтрирането.
Cool and add a quantity of filtration aid (3.4) sufficient to prevent any loss of oil and fat during filtration.
Сместа се филтрира през навлажнена, чиста от мазнини двойна филтърна хартия.
Filter through a moistened, fat-free, double filter paper.
Остатъкът се измива в студена вода до получаване на неутрален филтрат.
Wash the residue in cold water until a neutral filtrate is obtained.
Проверява се дали филтратът не съдържа масла или мазнини.
Check that the filtrate does not contain any oil or fats.
Наличието им показва, че преди хидролизата пробата трябва да бъде екстрахирана с петролен етер, като се използва процедура А.
Their presence indicates that the sample must be extracted with light petroleum, using Procedure A, before hydrolysis.
Двойната филтърна хартия с остатъка се поставя върху стъкло за наблюдение и се суши в продължение на час и половина в сушилня (т. 4.3) при 100 oС ± 3o С.
Place the double filter paper containing the residue on a watch glass and dry for one and a half hours in the air oven (4.3) at 100 ± 3 oC.
Двойната филтърна хартия със сухия остатък се поставя в екстракционна гилза (т. 4.2) и се покрива с чист от мазнини памучен тампон.
Place the double filter paper containing the dry residue in an extraction thimble (4.2) and cover with a fat-free wad of cotton wool.
Гилзата се поставя в екстрактора (т. 4.1) и се процедира, както е посочено във втори и трети параграф от точка 5.1.
Place the thimble in an extractor (4.1) and proceed as indicated in the second and third paragraphs of point 5.1.
Изразяване на резултата
Expression of result
Теглото на остатъка се изразява като процент от теглото на пробата.
Express the weight of the residue as a percentage of the sample.
Разликата между резултатите от две паралелни определяния, извършени с една и съща проба от един и същ аналитик, не трябва да бъдe повече от:
The difference between the results of two parallel determinations carried out on the same sample by the same analyst shall not exceed:
0,2 % като абсолютна стойност, за съдържание на сурови масла и мазнини под от 5 %,
0,2 %, in absolute value, for contents of crude oils and fats lower than 5 %,
4,0 % спрямо най-високия резултат за съдържание от 5 до 10 %,
4,0 % relative to the highest result for contents of 5 % to 10 %,
0,4 % като абсолютна стойност, за съдържание над 10 %.
0,4 %, in absolute value, for contents above 10 %.
При продукти с високо съдържание на масла и мазнини, които трудно се трошат или не са подходящи за получаване на хомогенна редуцирана проба за анализ, се процедира както следва.
For products with a high content of oils and fats, which are difficult to crush or unsuitable for drawing a homogeneous reduced test sample, proceed as follows.
Претегелят се 20 g от пробата с точност до 1 mg и се смесват с 10 g или повече безводен натриев сулфат (т. 3.2).
Weigh 20 g of the sample to the nearest 1 mg and mix with 10 g or more of anhydrous sodium sulfate (3.2).
Провежда се екстрахиране с петролен етер (т. 3.1), както е указано в точка 5.1.
Extract with light petroleum (3.1) as indicated in point 5.1.
Към получения екстракт се добавя петролен етер (т. 3.1) до 500 ml и се размесва.
Make up the extract obtained to 500 ml with light petroleum (3.1) and mix.
Вземат се 50 ml от разтвора и се поставят в малка суха претеглена колба, която съдържа парченцата пемза.
Take 50 ml of the solution and place in a small, dry, weighed flask containing fragments of pumice stone.
Разтворителят се отстранява чрез дестилация, съдържанието на колбата се изсушава и се процедира, както е указано в последния параграф на точка 5.1.
Distil off the solvent, dry and proceed as indicated in the last paragraph of point 5.1.
От останалия в гилзата остатък от екстракцията се отстранява разтвотителят, остатъкът се натрошава до размер на чстиците от 1 mm, връща се в екстракционната гилза (да не се добавя натриев сулфат) и се процедира, както е указано във втория и третия параграф на точка 5.1.
Eliminate the solvent from the extraction residue left in the thimble, crush the residue to a fineness of 1 mm, return it to the extraction thimble (do not add sodium sulfate) and proceed as indicated in the second and third paragraphs of point 5.1.
Съдържанието на масла и мазнини се изчислява като процент от пробата, като се използва следната формула:
Calculate the content of oils and fats as a percentage of the sample by using the following formula: