natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Процедура При изследването за константна серум-неутрализация по отношение на различни вируси върху микротитърни плаки се използват клетки от тип MDBK или други възприемчиви клетки.
Procedure The constant virus-varying serum neutralisation test on microtitre plates employs MDBK or other susceptible cells.
Colorado, Oxford или всеки друг референтен щам на вируса се използва при 100 TCID50 на 0,025 ml; инактивирани неразредени серумни проби се смесват с равен обем (0,025 ml) вирусна суспензия.
The Colorado, Oxford or any other reference strain of the virus is used at 100 TCID50 per 0,025 ml; inactivated undiluted serum samples are mixed with an equal volume (0,025 ml) of virus suspension.
Смесите вирус/серум се инкубират в продължение на 24 часа при температура 37 °C в микротитърни плаки, преди да бъдат добавени клетките от типа MDBK.
The virus/serum mixtures are incubated for 24 hours at 37 °C in the microtitre plates before the MDBK cells are added.
Клетките се използват при концентрация, при която след 24 часа се образува цялостен монослой.
Cells are used at a concentration which forms a complete monolayer after 24 hours.
Проверки i) изследване за вирусна инфекциозност, ii) проверки за серумна токсичност, iii) проверки на незаразени клетъчни култури, iv) референтни антисеруми.
Controls (i) virus infectivity assay, (ii) serum toxicity controls, (iii) uninoculated cell culture controls, (iv) reference antisera.
Тълкуване Резултатите от изследването за неутрализация и титърът на използвания в изследването вирус се отчитат след три до шест дни инкубиране при температура 37 °C.
Interpretation The results of the neutralisation test and the titre of the virus used in the test are recorded after three to six days incubation at 37 °C.
Серумните титри се смятат за отрицателни, ако няма неутрализиране при разреждане 1/2 (неразреден серум).
Serum titres are considered negative if there is no neutralisation at a dilution of 1/2 (undiluted serum).
Всеки друг вид изследване, одобрен в рамките на Решение 2004/558/ЕО [10].Шап
Any other test recognised in the framework of Decision 2004/558/EC [10].Foot-and-mouth disease (FMD)
Събирането на езофагеални/фарингеални проби и изследването на същите се извършва в съответствие със следния протокол:
Collecting oesophageal/pharyngeal samples and testing shall be carried out according to the following protocol:
Реактиви Преди вземането на пробите се приготвя транспортна среда.
Reagents Prior to sampling, transport medium is prepared.
От нея се разпределят обеми от два ml в толкова контейнера, колкото са животните, от които ще се вземат проби.
Two ml volumes are dispensed in as many containers as there are animals to be sampled.
Използваните контейнери трябва да издържат на замразяване върху твърд CO2 или в течен азот.
The containers used must withstand freezing over solid CO2 or liquid nitrogen.
Пробите се получават чрез използване на специално конструиран слюнков колектор или „пробанг“.
Samples are obtained by the use of a specially-designed sputum collector or ’probang’.
За получаване на проба пробанг-чашката се прекарва през устата, над гърба на езика и надолу в горната част на хранопровода.
To obtain a sample the probang cup is passed through the mouth, over the dorsum of the tongue and down into the upper part of the oesophagus.
Правят се опити да се изстърже повърхностния епител на горния хранопровод и фаринкса чрез движения, насочени странично и дорзално.
Attempts are made to scrape the surface epithelium of the upper oesophagus and pharynx by movements directed laterally and dorsally.
След това пробангът се издърпва, за предпочитане след като животното е преглътнало.
The probang is then withdrawn, if possible after the animal has swallowed.
Чашката трябва да е пълна и да съдържа смес от слуз, слюнка, хранопроводна течност и клетъчни остатъци.
The cup must be full and contain a mixture of mucus, saliva, oesophageal fluid and cellular debris.
Трябва да се внимава всяка проба да съдържа известно количество видим клетъчен материал.
Care must be taken to ensure that each specimen contains some visible cellular material.
Трябва да се избягва грубо манипулиране, което причинява кървене.
Very rough handling which causes bleeding must be avoided.
Пробите от някои животни могат да бъдат силно замърсени от преживна маса.
Samples from some animals may be heavily contaminated with ruminal contents.
Такива проби трябва да се отстранят и устата на животното да се изплакне с вода или за предпочитане с физиологичен разтвор, преди да се повтори вземането на проба.
Such samples must be discarded and the mouth of the animal flushed with water, or preferably physiological saline, before repeat sampling.
Обработване на пробите оценява се качеството на всяка проба, събрана в чашката на пробанга, и 2 ml от пробата се добавят към равен обем транспортна среда в контейнер, който може да издържи на замразяване.
Treatmentof samples: Each sample collected in the probang cup is examined for quality and 2 ml added to an equal volume of transport medium in a container which can withstand freezing.
Контейнерите се затварят плътно, запечатват се, дезинфекцират се и се етикетират.
The containers are tightly closed, sealed, disinfected and labelled.
Пробите се държат охладени (+4 °C) и се изследват в рамките на три до четири часа или се поставят върху сух лед (–69 °C) или течен азот и се държат замразени докато бъдат изследвани.
The samples are kept cool (+4 °C) and examined within three to four hours or placed over dry ice (-69 °C) or liquid nitrogen and kept frozen until examined.
Между две взимания на проби пробангът се дезинфекцира и измива три пъти с чиста вода.
Between animals the probang is disinfected and washed in three changes of clean water.
Изследване за вируса на шап пробите се инкубират в култури от първични клетки от щитовидна жлеза на говеда, като се използват най-малко три епруветки на проба.
Testing for FMD virus: Samples are inoculated into cultures of primary bovine thyroid cell cultures using at least three tubes per sample.
Могат да бъдат използвани и други възприемчиви клетки, напр. първични клетки от бъбреци на говеда или свине, но трябва да се има предвид, че те са по-малко чувствителни към някои щамове на вируса на шап.
Other susceptible cells such as primary bovine or porcine kidney cells can be used but it must be kept in mind that for some strains of FMD virus they are less sensitive.
Епруветките се инкубират при температура 37 °C в ролерен апарат и в рамките на 48 часа ежедневно се изследват за наличието на цитопатичен ефект (ЦПЕ).
The tubes are incubated at 37 °C on a roller apparatus and examined daily for 48 hours for the presence of a cytopathic effect (CPE).
Ако са отрицателни, културите са прехвърлят на случаен принцип върху нови култури и се изследват повторно в продължение на 48 часа.
If negative, cultures are blind passaged onto new cultures and re-examined for 48 hours.
Специфичността на всеки ЦПЕ трябва да бъде потвърдена.
The specificity of any CPE must be confirmed.
Препоръчвана транспортна среда:
Recommended transport media:
0,08-моларен фосфатен буфер с pH 7,2, съдържащ 0,01 % говежди серумен албумин, 0,002 % фенолно червено и антибиотици.
0,08M phosphate buffer pH 7,2 containing 0,01 % bovine serum albumin, 0,002 % phenol red and antibiotics.
Среда за тъканна култура (напр. минимална основна среда (MEM) на Eagle), съдържаща 0,04-моларен Hepes буфер, 0,01 % говежди серумен албумин и антибиотици, с pH 7,2.
Tissue culture medium (such as Eagle's MEM) containing 0,04 M Hepes buffer, 0,01 % bovine serum albumin and antibiotics, pH 7,2.
Към транспортната среда трябва да бъдат добавяни антибиотици, напр. пеницилин 1000 IU, неомицин сулфат 100 IU, полимиксин B сулфат 50 IU, микостатин 100 IU (на ml краен продукт).
Antibiotics (per ml final) must be added to the transport medium such as penicillin1000 IU, neomycin sulphate100 IU, polymyxin B sulphate50 IU, mycostatin100 IU.
Вирус неутрализационният тест се изпълнява в съответствие със следния протокол:
The virus neutralisation test shall be carried out according to the following protocol:
Реактиви Запасен антиген за вируса на шап се приготвя в клетъчни култури или върху говежди езици и се съхранява при температура –70 °C или по-ниска или при температура –20 °C след прибавяне на 50 % глицерин.
Reagents Stock FMDV antigen is prepared in cell cultures or on cattle tongues and stored at -70 °C or less or at -20 °C after the addition of 50 % glycerol.
Това е запасният антиген.
This is the stock antigen.
При тези условия шапният вирус е стабилен и за период от няколко месеца неговите титри се променят незначително.
FMDV is stable under these conditions and titres vary little over a period of months.
Процедура Изследването се провежда в плоскодънни микротитърни плаки за тъканни култури, като се използват възприемчиви клетки като IB-RS-2, BHK-21 или клетки от телешки бъбрек.
Procedure The test is carried out in flat-bottomed tissue culture grade microtitre plates using susceptible cells such as IB-RS-2, BHK-21 or calf kidney cells.
Серумите за изследването се разреждат в съотношение 1/4 със свободна от серуми среда за клетъчни култури с добавяне на 100 IU/ml неомицин или друг подходящ антибиотик.
Sera for the test are diluted 1/4 in serum-free cell culture medium with the addition of 100 IU/ml neomycin or other suitable antibiotics.
Серумите се инактивират при температура 56 °C в продължение на 30 минути и се използват количества от 0,05 ml за приготвяне на двойни серии върху микротитърни плаки, като се използват дозиращи тръбички от 0,05 ml.
Sera are inactivated at 56 °C for 30 minutes and 0.05 ml amounts are used to prepare a twofold series on microtitre plates using 0,05 ml diluting loops.
Към всяка ямка се добавя предварително титруван вирус, също разреден в свободна от серум среда за клетъчна култура и съдържащ 100 TCID50/0,05 ml.
Pre-titrated virus also diluted in serum-free culture medium and containing 100 TCID50/0.05 ml is then added to each well.
След инкубиране на 37 °C в продължение на един час, което позволява да се осъществи неутрализацията, към всяка ямка се добавя 0,05 ml от суспензията на клетки, съдържаща 0,5 до 1,0 × 106 клетки на 1 ml в среда за клетъчна култура, съдържаща серум, свободен от антитела на шап, и плаките се запечатват.
Following incubation at 37 °C for one hour to allow neutralisation to take place, 0,05 ml of suspension cells containing 0,5 to 1.0 × 106 cells per 1 ml in cell culture medium containing serum free of FMD antibody is added to each well and the plates are sealed.
Плаките се инкубират на 37 °C.
Plates are incubated at 37 °C.
Обикновено в рамките на 24 часа монослоевете се сливат.
Monolayers are normally confluent within 24 hours.
ЦПЕ е обичайно достатъчно напреднал за 48 часа за микроскопско отчитане на изследването.
CPE is usually sufficiently advanced at 48 hours for a microscopic reading of the test.
По това време може да бъде направено окончателно микроскопско отчитане или плаките могат да бъдат фиксирани и оцветени за макроскопско отчитане, например като се използва разтвор, съдържащ 10 % формалин, физиологичен разтвор и 0,05 % метиленово синьо.
At this time a final microscopic reading may be made or the plates may be fixed and stained for macroscopic reading, for instance using 10 % formol-saline and 0,05 % methylene blue.
Проверки Проверките при всяко изследване включват хомоложен антисерум с известен титър, клетъчна проверка, проверка на серумната токсичност, проверка на средата и титруване на вируса, въз основа на които се изчислява действителното количество на вирус в изследването.
Controls Controls in each test include homologous antiserum of known titre, a cell control, a serum toxicity control, a medium control, and a virus titration from which the actual amount of virus in the test is calculated.
Тълкуване Ямки с данни за ЦПЕ се считат за инфектирани и неутрализиращите титри се изразяват като реципрочна стойност на крайното разреждане на серума, наличен в смесите серум/вирус при крайна точка от 50 %, изчислена по метода на Spearman-Karber.
Interpretation Wells with evidence of CPE are considered to be infected and neutralisation titres are expressed as the reciprocal of the final dilution of serum present in the serum/virus mixtures at the 50 % end point estimated according to the Spearman-Karber method.
Изследванията се считат за валидни, когато действителното количество от вируса, използвано във всяка ямка при изследването, е между 101,5 и 102,5 TCID50 и когато титърът на референтния серум не е по-висок от двукратната стойност на неговия очакван титър, изчислен по начина на предишните титрувания.
Tests are considered to be valid when the actual amount of virus used per well in the test is between 101,5 and 102,5 TCID50 and when the titre of the reference serum is within twofold of its expected titre, estimated from the mode of previous titrations.
Когато проверките са извън тези граници, изследванията се повтарят.
When the controls are outside these limits the tests are repeated.
Краен титър, равен на 1/11 или по-малко, се приема за отрицателен.
An end point titre of 1/11 or less is taken as negative.
Откриването и количественото определяне на дадено антитяло чрез ELISA се извършва в съответствие със следния протокол:
The detection and quantification of antibody by ELISA shall be carried out according to the following protocol:
Реактиви Заешки антисеруми срещу антиген 146S от седем типа на вируса на шап, използвани при предварително определена оптимална концентрация в карбонатен/бикарбонатен буфер с pH 9,6.
Reagents Rabbit antisera to 146S antigen of seven types of foot-and-mouth disease virus (FMDV) used at a predetermined optimum concentration in carbonate/bicarbonate buffer, pH 9,6.
Антигените се приготвят от избрани щамове на вируса, отгледани върху монослоеве от клетки BHK-21.
Antigens are prepared from selected strains of virus grown on monolayers of BHK-21 cells.
Непречистените супернатанти се използват и предварително се титруват съгласно протокола, но без серум, за се получи разреждане, което след добавяне на равен обем на PBST (фосфатно буфериран физиологичен разтвор, съдържащ 0,05 % Tween-20 и индикатор фенолно червено) биха дали оптическа плътност между 1,2 и 1,5.
The unpurified supernatants are used and pretitrated according to the protocol but without serum, to give a dilution which after the addition of an equal volume of PBST (phosphate buffered saline containing 0,05 % Tween-20 and phenol red indicator) would give an optical density reading of between 1,2 and 1,5.
Могат да се използват инактивирани вируси.
The viruses can be used inactivated.
PBST се използва като разредител.
PBST is used as a diluent.
Антисеруми от морски свинчета се приготвят чрез заразяване на морски свинчета с антиген 146S на всеки серотип.
Guinea-pig antisera are prepared by inoculating guinea pigs with 146S antigen of each serotype.
Предварително определената оптимална концентрация се приготвя в PBST, съдържащ 10 % нормален говежди серум и 5 % нормален заешки серум.
A predetermined optimum concentration is prepared in PBST containing 10 % normal bovine serum and 5 % normal rabbit serum.
Използва се заешки имуноглобулин против морски свинчета в комбинация с пероксидаза от хрян, разтворен в PBST, съдържащ 10 % нормален говежди серум и 5 % нормален заешки серум, при предварително определена оптимална концентрация.
Rabbit anti-guinea-pig immunoglobulin conjugated to horseradish peroxidase is used at a predetermined optimum concentration in PBST containing 10 % normal bovine serum and 5 % normal rabbit serum.
Тест-серумите се разреждат с PBST.
Test sera are diluted in PBST.
Плаките за ELISA са покриват със слой от 50 µl заешки антивирусни серуми за една нощ във влажна камера при стайна температура.
ELISA plates are coated with 50 μl of rabbit antiviral sera overnight in a humidity chamber at room temperature.
На плаки с множество U-образни ямки (носещи плаки) се приготвят петдесет микролитра двойни серии разреждания с фактор 2 на всеки тест-серум, като се започва с разреждане 1/4.
Fifty microlitres of a duplicate, twofold series of each test serum starting at 1/4 are prepared in U-bottomed multiwell plates (carrier plates).
Към всяка ямка се добавят петдесет микролитра постоянна доза антиген и смесите се оставят за една нощ при температура 4 °C.
Fifty microlitres of a constant dose of antigen are added to each well and the mixtures are left overnight at 4 °C.
Добавянето на антиген намалява началното разреждане на антигена до 1/8.
The addition of the antigen reduces the starting serum dilution to 1/8.
Плаките за ELISA се измиват пет пъти с PBST.
The ELISA plates are washed five times with PBST.
Петдесет микролитра от смесите серум/антиген се пренасят от носещите плаки върху покритите със заешки серум плаки за ELISA, и се инкубират при температура 37 °C в продължение на един час на ротационен шейкър.
Fifty microlitres of serum/antigen mixtures are then transferred from the carrier plates to the rabbit-serum-coated ELISA plates and incubated at 37 °C for one hour on a rotary shaker.
След измиване, към всяка ямка се добавят 50 µl антисерум от морски свинчета срещу използвания в точка 4 антиген.
After washing, 50 μl of guinea-pig antiserum to the antigen used in point 4 is added to each well.
Плаките се инкубират при температура 37 °C за един час върху ротационен шейкър.
The plates are incubated at 37 °C for one hour a rotary shaker.
Плаките се измиват и към всяка ямка се добавят 50 µl заешки имуноглобулин против морски свинчета в комбинация с пероксидаза от хрян.
The plates are washed and 50 μl of rabbit anti-guinea-pig immunoglobulin conjugated to horseradish peroxidase is added to each well.
Плаките се инкубират при температура 37 °C в продължение на един час върху ротационен шейкър.
The plates are incubated at 37 °C for one hour on a rotary shaker.
Плаките се измиват и към всяка ямка се добавят 50 µl ортофенилен диамин, съдържащ 0,05 % H2O2 (30 % w/v).
The plates are washed and 50 μl of orthophenylene diamine containing 0,05 % H2O2 (30 %) w/v is added to each well.
Реакцията се спира след 15 минути с 1,25-моларна H2SO4.
The reaction is stopped after 15 minutes with 1,25M H2SO4.
Плаките се отчитат спектрофотометрично при 492 nm с четец за ELISA, свързан към микрокомпютър.
The plates are read spectrophotometrically at 492 nm on an ELISA reader linked to a microcomputer.
Проверки За всеки използван антиген 40 ямки не съдържат серум, а разреден в PBST антиген.
Controls For each antigen used 40 wells contain no serum but contain antigen diluted in PBST.
Двойни серии разреждания с фактор 2 от хомоложен говежди референтен антисерум.
A duplicated twofold dilution series of homologous bovine reference antiserum.
Двойни серии разреждания с фактор 2 от отрицателен говежди серум.
A duplicate twofold dilution series of negative bovine serum.
Тълкуване Титрите за определено антитяло се изразяват като крайното разреждане на тест-серумите, даващи 50 % от средната стойност на ОП, отчетени в контролните ямки с вирус, където отсъства тест-серум.
Interpretation Antibody titres are expressed as the final dilution of tests serum giving 50 % of the mean OD value recorded in the virus control wells where test serum is absent.
Титрите над 1/40 се считат за положителни.
Titres in excess of 1/40 are considered positive.
Препратки Hamblin C, Barnett ITR and Hedger RS (1986), „A new enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies against foot-and-mouth disease virus.
References Hamblin C, Barnett ITR and Hedger RS (1986) ‘A new enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies against foot-and-mouth disease virus.
I. Development and method of ELISA.“, Journal of Immunological Methods, 93, 115 до 121.11.
I. Development and method of ELISA.’ Journal of Immunological Methods, 93, 115 to 121.11.
Болест на Ауески
Aujeszky's disease (AJD)
Процедура При изследването за константна серум-неутрализация на различни вируси върху микротитърни плаки се използват клетки от типа MDBK или други възприемчиви клетки.
Procedure The constant virus-varying serum neutralisation test on microtitre plates employs Vero or other sensitive cell systems.
Вирусът на болестта на Ауески се използва при 100 TCID50 на 0,025 ml; инактивирани неразредени серумни проби се смесват с равен обем (0,025 ml) вирусна суспензия.
Aujeszky's disease virus is used at 100 TCID50 per 0,025 ml; inactivated undiluted serum samples are mixed with an equal volume (0,025 ml) of virus suspension.
Смесите вирус/серум се инкубират в продължение на два часа при температура 37 °C в микротитърни плаки, преди да бъдат добавени подходящите клетки.
The virus/serum mixtures are incubated for two hours at 37 °C in the microtitre plates before the appropriate cells are added.
Тълкуване Резултатите от неутрализационен тест и титърът на използвания в теста вирус се отчитат след три до седем дни инкубиране при 37 °C.
Interpretation The results of the neutralisation test and the titre of the virus used in the test are recorded after three to seven days incubation at 37 °C.
Серумни титри, по-ниски от 1/2 (неразреден серум) се смятат за негативни.
Serum titres less than 1/2 (undiluted serum) are considered negative.
Всеки друг вид изследване, одобрен в рамките на Решение 2008/185/ЕО [11].Трансмисивен гастроентерит
Any other test recognised in the framework of Decision 2008/185/EC [11].Transmissible gastro-enteritis (TGE)
Процедура При изследването за константна серум-неутрализация на различни вируси върху микротитърни плаки се използват клетки А72 (кучешки тумор) или други чувствителни системи от клетки.
Procedure The constant virus-varying serum neutralisation test on microtitre plates employs A72 (dog tumour) cells or other sensitive cell systems.
Вирусът на трансмисивния гастроентерит се използва при 100 TCID50 на 0,025 ml; инактивирани неразредени серумни проби се смесват с равен обем (0,025 ml) вирусна суспензия.
TGE virus is used at 100 TCID50 per 0,025 ml; inactivated undiluted serum samples are mixed with an equal volume (0,025 ml) of virus suspension.
Смесите вирус/серум се инкубират в продължение на 30 до 60 минути при температура 37 °C в микротитърни плаки, преди да бъдат добавени подходящите клетки.
The virus/serum mixtures are incubated for 30 to 60 minutes at 37 °C in the microtitre plates before the appropriate cells are added.
Във всяка клетка се слага 0,1 ml клетъчна суспензия.
Each cell receives 0,1 ml of cell suspension.
Тълкуване Резултатите от неутрализационния тест и титърът на използвания в теста вирус се отчитат след три до пет дни инкубиране при температура 37 °C.
Interpretation The results of the neutralisation test and the titre of the virus used in the test are recorded after three to five days incubation at 37 °C.
Серумни титри, по-ниски от 1/2 (крайно разреждане) се считат за отрицателни.
Serum titres less than 1/2 (final dilution) are considered negative.
Ако отделни неразредени серумни проби са токсични спрямо тъканните култури, тези серуми могат да бъдат разредени в съотношение 1/2, преди да бъдат използвани в изследването.
If undiluted serum samples are toxic to the tissue cultures, these sera may be diluted 1/2 before being used in the test. This is equivalent to 1/4 final dilution of serum.
Такова разреждане е еквивалентно на крайно разреждане от 1/4 на серума. В тези случаи серумни титри, по-ниски от 1/4 (крайно разреждане), се считат за отрицателни.
Serum titres of less than 1/4 (final dilution) are considered negative in these cases.
Везикулозна болест по свинете
Swine vesicular disease (SVD)
Изследванията за везикулозна болест по свинете (ВБС) се извършват в съответствие с Решение 2000/428/ЕО [12].Класическа чума по свинете
Tests for swine vesicular disease (SVD) shall be carried out according to Decision 2000/428/EC [12].Classical swine fever (CSF)
Изследванията за класическа чума по свинете се извършват в съответствие с Решение 2002/106/ЕО [13].Извършването на изследвания за класическа чума по свинете трябва да следва насоките, изложени в Ръководството за диагностични тестове и ваксини за сухоземни животни на OIE — глава 2.1.13.
Tests for classical swine fever (CSF) shall be carried out according to Decision 2002/106/EC [13].The performance of tests for CSF must follow the guidelines set out in the relevant chapter of the OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals.