mwirth-epo/epo-nmt-datasets huggingface dataset:
Quando sono in funzione gli utensili di taglio del gruppo di utensili di taglio 31, gli organi selettori 59 pongono in collegamento di fluido con i condotti aspiranti 53 le bocchette 55 della prima coppia di bocchette aspiranti.
When the cutting tools of the set of cutting tools 31 are operating, the selector members 59 place the nozzles 55 of the first pair of suction nozzles in fluid connection with the suction ducts 53.
Quando sono in funzione gli utensili di taglio del secondo gruppo di utensili di taglio 33, gli organi selettori 59 pongono in collegamento di fluido con i condotti aspiranti 53 le bocchette 57, della seconda coppia di bocchette aspiranti.
When the cutting tools of the second set of cutting tools 33 are operating, the selector members 59 place the nozzles 57 of the second pair of suction nozzles in fluid connection with the suction ducts 53.
[0051] Pertanto, in tutte le condizioni operative le bocchette aspiranti attive si trovano direttamente a valle degli utensili di taglio che generano i rifili, evitando rischi di sbandamenti o rotture dei rifili e conseguente perdita dei rifili stessi.
Therefore, in all operating conditions the active suction nozzles are located directly downstream of the cutting tools that generate the trims, avoiding risks of deviation or breaking of the trims and consequent loss thereof.
Inoltre, anche se i rifili formati non sono continui, bensì sono interrotti tra un ordine di lavoro e il successivo, le loro teste, cioè i lembi iniziali dei rifili vengono facilmente inseriti nelle rispettive bocchette aspiranti.
Moreover, even if the trims formed are not continuous, but are severed between one process order and the next, their heads, i.e., the leading edges of the trims, are easily inserted into the respective suction nozzles.
[0052] I sistemi aspiranti e i dispositivi di regolazione delle bocchette aspiranti sono sostanzialmente gli stessi richiesti da una macchina che presenta una sola coppia di bocchette aspiranti, e sono quindi compatti e di basso costo, oltre che facilmente controllabili con un solo attuatore di regolazione.
The suctions systems and the devices for adjusting the suction nozzles are substantially the same as those required by a machine with only one pair of suction nozzles, and are thus compact and low cost, besides being easily controllable with a single regulation actuator.
La macchina taglia-cordona (1) della rivendicazione 1 o 2, in cui le due bocchette aspiranti (55, 57) di ciascuna di dette prima e seconda coppia di bocchette aspiranti sono mobili trasversalmente al percorso di avanzamento (P), per adattarsi alla posizione dei rifili (R1, R2) generati dal rispettivo primo e secondo gruppo (31, 33) di utensili di taglio (35).
The slitter-scorer machine (1) of claim 1 or 2, wherein the two suction nozzles (55, 57) of each of said first and second pair of suction nozzles are movable transversely to the feed path (P), to adapt to the position of the trims (R1, R2) generated by the respective first and second set (31, 33) of cutting tools (35).
La macchina taglia-cordona (1) della rivendicazione 3, in cui le bocchette aspiranti (55) della prima coppia di bocchette aspiranti sono atte a muoversi trasversalmente al percorso di avanzamento (P) in modo simmetrico l’una all’altra; ed in cui le bocchette aspiranti (57) della seconda coppia di bocchette aspiranti sono atte a muoversi trasversalmente al percorso di avanzamento (P) in modo simmetrico l’una all’altra.
The slitter-scorer machine (1) of claim 3, wherein the suction nozzles (55) of the first pair of suction nozzles are adapted to move transversely to the feed path (P) symmetrically to one another; and wherein the suction nozzles (57) of the second pair of suction nozzles are adapted to move transversely to the feed path (P) symmetrically to one another.
La macchina taglia-cordona (1) della rivendicazione 3 o 4, in cui una prima bocchetta aspirante (55) della prima coppia di bocchette aspiranti è rigidamente collegata a una prima bocchetta aspirante (57) della seconda coppia di bocchette aspiranti; ed in cui una seconda bocchetta aspirante (55) della prima coppia di bocchette aspiranti è rigidamente collegata a una seconda bocchetta aspirante (57) della seconda coppia di bocchette aspiranti; in cui le rispettive prime bocchette aspiranti della prima e della seconda coppia di bocchette aspiranti (55, 57) sono poste su un primo lato del percorso di avanzamento, e le rispettive seconde bocchette aspiranti della prima e della seconda coppia di bocchette aspiranti (55, 57) sono poste su un secondo lato del percorso di avanzamento (P).
The slitter-scorer machine (1) of claim 3 or 4, wherein a first suction nozzle (55) of the first pair of suction nozzles is rigidly connected to a first suction nozzle (57) of the second pair of suction nozzles; and wherein a second suction nozzle (55) of the first pair of suction nozzles is rigidly connected to a second suction nozzle (57) of the second pair of suction nozzles; wherein the respective first suction nozzles of the first and of the second pair of suction nozzles (55, 57) are positioned on a first side of the feed path, and the respective second suction nozzles of the first and of the second pair of suction nozzles (55, 57) are positioned on a second side of the feed path (P).
La macchina taglia-cordona (1)di una o più delle rivendicazioni 3 a 5, comprendente un attuatore comune (71) per muovere la prima coppia di bocchette aspiranti (55) e la seconda coppia di bocchette aspiranti (57) trasversalmente al percorso di avanzamento (P).
The slitter-scorer machine (1) of one or more of claims 3 to 5, comprising a common actuator (71) to move the first pair of suction nozzles (55) and the second pair of suction nozzles (57) transversely to the feed path (P).
La macchina taglia-cordona (1) di una o più delle rivendicazioni precedenti, in cui la prima coppia di bocchette aspiranti (55) e la seconda coppia di bocchette aspiranti (57) sono in comunicazione con un sistema di aspirazione comune (51).
The slitter-scorer machine (1) of one or more of the preceding claims, wherein the first pair of suction nozzles (55) and the second pair of suction nozzles (57) are in communication with a common suction system (51).
La macchina taglia-cordona (1) della rivendicazione 7, in cui il sistema di aspirazione (51) comprende organi selettori (59), per generare un’aspirazione selettivamente attraverso la prima coppia di bocchette aspiranti (55) e attraverso la seconda coppia di bocchette aspiranti (57).
The slitter-scorer machine (1) of claim 7, wherein the suction system (51) comprises selector members (59), to generate suction selectively through the first pair of suction nozzles (55) and through the second pair of suction nozzles (57).
La macchina taglia-cordona (1) della rivendicazione 10, in cui le slitte sono mobili lungo un sistema di guide comuni (81) solidali ad una struttura portante (65).
The slitter-scorer machine (1) of claim 10, wherein the slides are movable along a system of common guides (81) integral with a load-bearing structure (65).
La macchina taglia-cordona (1) di una o più delle rivendicazioni precedenti, in cui l’unità di cordonatura (3) comprende una pluralità di gruppi di cordonatura (7, 9, 11) posti in sequenza lungo il percorso di avanzamento (P) e atti a essere attivati in maniera selettiva.
The slitter-scorer machine (1) of one or more of the preceding claims, wherein the scoring unit (3) comprises a plurality of scoring sets (7, 9, 11) positioned in sequence along the feed path (P) and adapted to be activated selectively.
''Procedimento di rivelazione di acidi nucleici e relativo kit" DESCRIZIONE La presente invenzione riguarda un nuovo procedimento di rivelazione di acidi nucleici bersaglio ed il relativo kit.
The present invention relates to a new method for the detection of target nucleic acids, and to a related kit.
La rivelazione di sequenze di DNA e RNA bersaglio è della massima importanza nella diagnostica molecolare e, in questo settore, vi è il problema generale dell'amplificazione delle sequenze di acido nucleico, che risulta necessaria per poter conseguire l'identificazione del bersaglio, che usualmente si trova diluito in una miscela di materiale genetico interferente.
The detection of DNA and RNA target sequences is of the utmost importance in molecular diagnostics and, in this sector the amplification of nucleic acid sequences, which is necessary in order to identify the target, which usually is diluted in a mixture of interfering genetic material, is a general issue.
Nei test standard di laboratorio, l'amplificazione degli acidi nucleici viene generalmente effettuata tramite la reazione a catena della polimerasi (PCR) o attraverso altre tecniche basate sulla PCR, come ad esempio la reai time-PCR (RT—PCR) o la digitai PCR.
In standard laboratory tests, the amplification of nucleic acids is generally carried out by means of the polymerase chain reaction (PCR) or through other PCR-based techniques, such as for example real-time PCR (RT-PCR) or digital PCR. These techniques require cyclic variation of the reaction temperature, the use of dedicated equipment, the use of trained staff and, in some cases, the use of expensive reagents.
La necessità di consentire 1'impiego dei saggi molecolari basati sulla rivelazione degli acidi nucleici al di fuori dei laboratori specializzati, allo scopo di implementare saggi diagnostici che possano essere effettuati in prossimità del sito di cura ed assistenza del paziente (point-of-care diagnostic tests), ha portato allo sviluppo di numerose tecniche di amplificazione isotermiche, che non richiedono la variazione ciclica della temperatura e che pertanto permettono l'uso di una strumentazione più semplificata.
The need to allow molecular assays based on the detection of nucleic acids to be used outside of specialized laboratories, in order to provide for diagnostic assays that can be carried out in the vicinity of the patient's point of care and assistance (point-of-care diagnostic tests), has led to the development of numerous isothermal amplification techniques, which do not require cyclic variation of the temperature and which, therefore, allow for the use of more simple equipment.
Tuttavia, molte di queste tecniche isotermiche presentano inconvenienti di tipo tecnico che, finora, non ne hanno consentito una reale applicazione estensiva in saggi molecolari commerciali.
However, many of these isothermal techniques have technical drawbacks that so far have not allowed them to be actually applied extensively in commercial molecular assays.
Un elenco non esaustivo di tali inconvenienti è fornito qui di seguito: Necessità di miscele complesse di enzimi/proteine, come ad esempio nella Helicase Dependent Amplification (HDA) (Vincent, Μ,, Y. Xu, and H. Kong, Helicase-dependent isothermal DNA amplification.
A non-exhaustive list of such drawbacks is provided below:The need for complex mixtures of enzymes/proteins, such as for example in the Helicase Dependent Amplification (HDA) (Vincent, M., Y. Xu, and H. Kong, Helicase-dependent isothermal DNA amplification.
5(8): p. 795-800), nella Recombinase Polymerase Amplification (RPA) (Piepenburg, 0., et al., DNA detection using recombination proteins.
795-800), in the Recombinase Polymerase Amplification (RPA) (Piepenburg, O., et al., DNA detection using recombination proteins.
4(7): p. e204) e nella Nucleic Acid Sequence Based Amplification (NASBA) (Compton, J., Nucleic acid sequence-based amplification.
4(7): p. e204) and in the Nucleic Acid Sequence Based Amplification (NASBA) (Compton, J., Nucleic acid sequence-based amplification.
Necessità di alcune operazioni postprocessamento, allo scopo di ottenere l'effettivo bersaglio, come nel caso della Rolling Circle Amplification (RCA) (Liu, D., et al., Rolling Circle DNA Synthesis: Small Circular Oligonucleotides as Efficient Templates for DNA Polymerases.
This requirement in turn entails high costs and careful processing and storage of reagents.The need for some post-processing steps in order to obtain the actual target, as in the case of the Rolling Circle Amplification (RCA) (Liu, D., et al., Rolling Circle DNA Synthesis: Small Circular Oligonucleotides as Efficient Templates for DNA Polymerases.
J Am Chem Soc, 1996.
J Am Chem Soc, 1996.
118(7): p. 1587-1594), che necessita del taglio con endonucleasi di restrizione. - Problemi di amplificazione aspecifica, che sono tipici delle tecniche basate sulla combinazione di una polimerasi e di un'endonucleasi atta a tagliare su un singolo filamento (nicking, intacco), come la Exponential Amplification Reaction (EXPAR) (Van Ness, J., L.K. Van Ness, and D.J. Galas, Isothermal reactions for thè amplificaiion of oligonucleotides.
1587-1594), which requires cleavage with restriction endonucleases.Non-specific amplification issues, which are typical of techniques based on the combination of a polymerase and an endonuclease designed to cut a single strand (nicking), as the Exponential Amplification Reaction (EXPAR) (Van Ness, J., L. K. Van Ness, and D. J. Galas, Isothermal reactions for the amplification of oligonucleotides.
Proc Nati Acad Sci U S A, 2003.
Proc Natl Acad Sci USA, 2003.
100(8): p. 4504-9) o la Primer Generation-Rolling Circle Amplification (PG-RCA) (Murakami, T., J. Sumaoka, and M. Komiyama, Sensitive isothermal detection of nucleic-acid sequence by primer generaiion-rolling circle amplification.
4504-9) or the Primer Generation-Rolling Circle Amplification (PG-RCA) (Murakami, T., J. Sumaoka, and M. Komiyama, Sensitive isothermal detection of nucleic-acid sequence by primer generation-rolling circle amplification.
Nucleic Acids Res, 2009.
Nucleic Acids Res, 2009.
37 (3): p. el9). - Progettazione di una miscela complessa di primers, come nel caso della Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) (Notomi, T., et al., Loopmediated isothermal amplification of DNA, Nucleic Acids Res, 2000.
37(3): p. e19).The design of a complex mixture of primers, as in the case of the Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) (Notomi, T., et al., Loop-mediated isothermal amplification of DNA.
E63) e della Cross-Priming Amplification (CPA) (EP 2382330 Al). - Complessità del prodotto di amplificazione, uno svantaggio che accomuna molte tecniche, quali la LAMP, la CPA, la RCA, il che a sua volta limita il novero di procedure applicabili per la rivelazione del risultato.
E63) and of the Cross-Priming Amplification (CPA) (EP 2382330 A1).The complexity of the amplification product, a disadvantage shared by many techniques such as LAMP, CPA, RCA, which in turn limits the number of applicable procedures for detection of the outcome.
Alcune procedure isotermiche più semplici richiedono comunque l'impiego di due enzimi.
Some of the more simple isothermal procedures still require the use of two enzymes.
Ad esempio, la Strand Displacement Amplification (SDA) (Walker, G.T., et al., Isothermal in vitro amplification of DNA by a restriction enzyme/DNA polymerase System.
For instance, the Strand Displacement Amplification (SDA) (Walker, G. T., et al., Isothermal in vitro amplification of DNA by a restriction enzyme/DNA polymerase system.
Proc Nati Acad Sci U S A, 1992.
Proc Natl Acad Sci USA, 1992.
392-6) e la Nicking and Extension Amplification Reaction (NEAR) (US 2009/0081670 Al) richiedono entrambe sia una polimerasi sia una endonucleasi nicking, mentre la Ramification Amplification (RAM) richiede una ligasi e una polimerasi (Yao, B., et al., Quantitative analysis of zeptomole microRNAs based on isothermal ramification amplification.
392-6) and the Nicking and Extension Amplification Reaction (NEAR) (US 2009/0081670 A1) both require a polymerase as well as a nicking endonuclease, while the Ramification Amplification (RAM) requires a ligase and a polymerase (Yao, B., et al., Quantitative analysis of zeptomole microRNAs based on isothermal ramification amplification.
Onde superare questi ed altri inconvenienti della tecnica nota, la presente invenzione mette a disposizione una nuova tecnica di rivelazione di acidi nucleici, chiamata "amplificazione isotermica degli acidi nucleici mediata da ibridazione cooperativa" ("Cooperative Hybridization Mediated Isothermal Amplification of Nucleic Acids", CHAMP)).
In order to overcome these and other drawbacks of the prior art, the present invention provides a new technique for the detection of nucleic acids, designated as “Cooperative Hybridization Mediated Isothermal Amplification of Nucleic Acids” (CHAMP).
Si tratta di una procedura semplice, che può essere realizzata in una singola provetta e che consente 1'amplificazione di una sequenza di acido nucleico, ad esempio un DNA bersaglio o una sequenza reporter, impiegando un solo enzima, segnatamente una endonucleasi atta a tagliare su un singolo filamento (nicking, intacco).
This is a simple procedure that can be carried out in a single test tube and that allows for the amplification of a nucleic acid sequence, for example a target DNA or a reporter sequence, by using a single enzyme, in particular an endonuclease designed to cut a single strand (nicking).
Ciò è ottenuto grazie a un'intelligente progettazione di sonde che sfruttano l'ibridazione cooperativa di oligonucleotidi (anche chiamata "stabilizzazione per impilamento delle basi", "base-stacking stabilization").
This is obtained by means of a smart design of probes that exploit the cooperative hybridization of oligonucleotides (also designated as “base-stacking stabilization”).
Questo fenomeno si riferisce alla stabilizzazione dell'ibridazione di un corto oligonucleotide su un filamento stampo di DNA, dovuta ad interazioni base-stacking della base terminale del primo oligonucleotide con quella di un secondo oligonucleotide adiacente, che si ibrida in tandem sullo stesso filamento stampo (Khrapko, K.R., et al., A method for DNA sequencing by hybridization with oligonucleotide matrix.
This phenomenon refers to the stabilization of the hybridization of a short oligonucleotide to a DNA template strand, due to base-stacking interactions of the terminal base of the first oligonucleotide with that of a second adjacent oligonucleotide that hybridizes in tandem with the same template strand (Khrapko, K. R., et al., A method for DNA sequencing by hybridization with oligonucleotide matrix.
1(6): p. 375-88; Zhang, D.Y., Cooperative hybridizat ion of oligonucleotides.
375-88; Zhang, D. Y., Cooperative hybridization of oligonucleotides.
J Am Chem Soc, 2011.
J Am Chem Soc, 2011.
133(4): p. 1077-86; Lane, M.J., et al., The thermodynamic advantage of DNA oligonucleotide ’stacking hybridization' reactions: energetics of a DNA nick.
1077-86; Lane, M. J., et al., The thermodynamic advantage of DNA oligonucleotide ‘stacking hybridization’ reactions: energetics of a DNA nick.
Nucleic Acids Res, 1997.
Nucleic Acids Res, 1997.
25(3): p. 611-7; Rroude, N.E., et al., Enhanced DNA sequencing by hybridization.
611-7; Broude, N. E., et al., Enhanced DNA sequencing by hybridization.
Proc Nati Acad Sci U S A, 1994.
Proc Natl Acad Sci USA, 1994.
91(8): p. 3072-6; Fu, D.J., et al., A DNA sequencing strategy that requires only five bases of known terminal sequence for priming.
3072-6; Fu, D. J., et al., A DNA sequencing strategy that requires only five bases of known terminal sequence for priming.
Proc Nati Acad Sci U S A, 1995.
Proc Natl Acad Sci USA, 1995.
92(22): p. 10162-6; Valentini, P., et al., Gold-Nanoparticle-Based Colorimetrie Discrimination of Cancer-Related Point Mutations with Picomolar Sensitivity.
10162-6; Valentini, P., et al., Gold-Nanoparticle-Based Colorimetric Discrimination of Cancer-Related Point Mutations with Picomolar Sensitivity.
La tecnica di amplificazione che forma oggetto della presente invenzione presenta il vantaggio di essere estremamente semplice ed universale.
The amplification technique which forms the object of the present invention has the advantage of being extremely simple and universal.
Il sito di intacco ("nicking site") è fornito dalla sonda, il che determina l'assenza di qualsivoglia limitazione relativamente alla scelta del bersaglio, che può possedere qualsiasi sequenza.
The nicking site is provided by the probe, which determines the absence of any limitation with respect to the choice of the target, which may have any sequence.
Il forno comprende anche una testata di ingresso 13 e una testata di uscita 14.
The oven also includes an inlet head 13 and an outlet head 14, separated from, but connected to, the internal area 11 of the oven.
La testata di ingresso 13 è rappresentata in fig. 4.
The inlet head 13 is shown in Fig. 4.
Analogamente alla testata 1 della tecnica nota (si veda ancora fig. 1), la testata di ingresso 13 comprende un involucro 15 e una serie di rulli 16, 17, 18 per il tensionamento e la guida dei nastri trasportatori che portano le fibre in entrata nel forno 10 e verso la parte interna 11 del forno 10.
Similarly to the head 1 of the prior art (see again Fig. 1 ), the inlet head 13 includes a housing 15 and a series of rollers 16, 17, 18 for tensioning and driving the conveyor belts that carry the fibres into the oven 10 and towards the internal part 11 of the oven 10.
Secondo la presente invenzione, la testata di ingresso 13 comprende, inoltre, un dispositivo 19 di riscaldamento preliminare.
According to the present invention, the inlet head 13 also comprises a pre-heating device 19.
La testata di uscita 14 è rappresentata in dettaglio nella fig. 5.
The outlet head 14 is shown in detail in Fig. 5.
Analogamente alla testata di uscita 6 secondo la tecnica nota (si veda ancora fig. 2), la testata 14 presenta un involucro 20 al cui interno sono disposti rulli di traino 21, 22 dei nastri trasportatori per estrarre dall'unità di riscaldamento 11 il tessuto non tessuto 12.
Similarly to the outlet head 6 according to the prior art (see again Fig. 2 ), the head 14 has a casing 20, inside which there are pulling rollers 21, 22 of the conveyor belts to extract the non-woven fabric 12 from the heating unit 11.
In base a una forma d'esecuzione preferita della presente invenzione, la testata di uscita 14 comprende, inoltre, un dispositivo 23 di raffreddamento preliminare, comprendente un'unità 24 di aspirazione dell'aria.
According to a preferred embodiment of the present invention, the outlet head 14 also comprises a pre-cooling device 23, including an air suction unit 24.
Detta unità 24 può consistere, preferibilmente, in un ventilatore.
Said unit 24 may consist, preferably, in a fan.
Nel funzionamento, al forno 10 vanno alimentate le fibre e le fibre a basso punto di fusione -per esempio in polipropilene o poliestere-, per la produzione di un tessuto non tessuto.
In operation, the oven 10 should be fed the fibres and the low-melting-point fibres -for example, polypropylene or polyester-, for the production of a non-woven fabric.
Esse vengono introdotte attraverso la testata 13 di ingresso e poste sui nastri trasportatori, tensionati e guidati dai rulli 16, 17 e 18.
They are introduced through the inlet head 13 and placed on conveyor belts, tensioned and driven by the rollers 16, 17 and 18.
In questo modo, sugli stessi nastri trasportatori si crea un letto 12 di fibre.
In this way, on the same conveyor belts, a bed 12 of fibres is created.
In ogni caso, detta aria calda viene inviata al letto 12 seguendo la direzione delle frecce F e P (si veda fig. 4), innalzandone così la temperatura, preriscaldando il materiale e recuperando una ragguardevole parte di energia che sarebbe altrimenti perduta.
According to the present invention, the pre-heating device 19 sends hot air taken from the oven, being exhaust air to be evacuated, to the bed 12, following the direction of arrows F and P (see Fig. 4 ), thus raising its temperature, pre-heating the material and recovering a substantial part of energy that would otherwise be lost.
Il passaggio dell'aria attraverso il materiale è favorito dall'azione aspirante di due ventilatori, che mantengono in depressione la zona sottostante il materiale.
Air passage through the material is favoured by the suction action of two fans, maintaining in depression the area around the material.