ONA通過廣泛的眼科調查進行診斷，其中可能包括： 視野檢查：視神經病變的視野缺損可採取多種模式，包括中心性、瀰漫性、弓形和高度缺損。 視窗缺損的模式不具有任何病因特異性，幾乎任何類型的視野缺損都可能發生在任何視神經病變中。 然而，海拔缺陷在缺血性視神經病中更常見，中樞性或盲腸性缺損常伴有毒性/營養性和遺傳性視神經病。 電生理檢查：視神經病變患者的視覺誘發電位 （VEP） 通常異常。 雖然 VEP 在視神經病變的診斷中不是必需的，但它對早期或亞臨床視神經病變患者有用，這些患者可能有正常的瞳孔反應，臨床檢查時沒有明顯的視盤改變 光學相幹斷層掃描：一種相對較新的技術，它使用低相干光穿透組織，並使用相機分析反射圖像。 通過在視神經頭周圍進行圓形掃描，可以分析周圍神經纖維層。 這在視神經炎、創傷性視神經病變和 Leber 遺傳性視神經病變患者的隨訪中很有用 ONA的癥狀通常包括隧道視力（也稱為暗點），視力模糊和其他視野喪失。 這些缺陷在使用上述技術的進一步調查中被診斷出來。