Trước hoặc sau khi rụng trứng 6 tiếng đồng hồ chính là thời điểm thụ tinh nhân tạo tốt nhất. Tuy nhiên, thời gian tiến hành thụ tinh nhân tạo cũng còn tùy thuộc vào thời điểm sử dụng HCG (thuốc kích thích rụng trứng).
Thông thường, kỹ thuật thụ tinh nhân tạo sẽ được thực hiện 2 lần:
1 Lần vào 24h - 48h sau khi cho HCG
Hoặc 1 lần vào 34h – 36h.