D vitamini eksikliğinin teşhisi için genellikle kan testleri kullanılır. En yaygın olarak kullanılan test, 25-hidroksivitamin D (25(OH)D) seviyesinin ölçülmesidir. Bu test, D vitamini düzeyinin belirlenmesinde en güvenilir yöntemdir.
Kan testi, genellikle bir laboratuvar ortamında yapılır ve bir sağlık uzmanı tarafından istenir. Kan örneği alınarak 25(OH)D seviyesi ölçülür. 25(OH)D, D vitamini depolanmasını ve dolaşımını gösteren bir formdur. Test sonucunda D vitamini düzeyi belirlenir ve eksiklik durumu tespit edilebilir.