Film, kötü karakter Spot’un Örümcek Evreni ve insanlara zarar verecek planını devreye sokmasıyla birlikte, Miles ve Gwen’in yanı sıra çok sayıda süper kahramanın bir araya gelmesini anlatıyor. Tekrar birleşen eski dostların mücadelesi beyaz perdeye aktarılıyor.