Medzi najťažšie úlohy, ktoré je nutné pri pestovaní hlivy ustricovej splniť, patrí príprava substrátu a jeho naočkovanie sadbou. Týmto substrátom pritom môže byť napríklad peň, klát, slama, štiepky alebo špeciálna záhradka, ktorá je už sadbou navrúbľovaná. Sadba potom môže byť klincová či zrnitá, pričom najdôležitejšie je, aby bola čo najčerstvejšia.