A ONA é diagnosticado por uma extensa investigação oftalmológica que pode incluir: Testes de campo visual: defeitos de campo visual em neuropatias ópticas podem assumir vários padrões, incluindo defeito central, difuso, arcuate, e altitudinal. O padrão de defeito visual arquivado não é específico de qualquer etiologia e quase qualquer tipo de defeito de campo pode ocorrer com qualquer neuropatia óptica. No entanto, os defeitos altitudinais são mais comuns nas neuropatias ópticas isquêmicas e centrais, ou defeitos cecocentrais acompanham frequentemente as neuropatias ópticas tóxicas/nutricionais e hereditárias. Testes electrofisiológicos: O potencial evocado visual (VEP) é frequentemente anormal nas neuropatias ópticas. Embora o VEP não seja necessário no diagnóstico da neuropatia óptica, pode ser útil em doentes com neuropatia óptica precoce ou subclínica que podem ter respostas pupilares normais e sem alterações discerníveis do disco óptico no exame clínico Tomografia de coerência óptica: uma técnica relativamente nova que utiliza luz de baixa coerência para penetrar o tecido e uma câmara para analisar a imagem refletida. Ao realizar varreduras circulares em torno da cabeça do nervo óptico, a camada de fibra nervosa peripapilar pode ser analisada. Isto tem sido útil no acompanhamento de pacientes com neurite óptica, neuropatia óptica traumática, e neuropatia óptica hereditária de Leber Os sintomas de ONA incluem frequentemente visão em túnel (também conhecido como escotoma), visão desfocada, e perda de outros campos visuais. Estes defeitos são diagnosticados com base em investigações adicionais utilizando as técnicas acima mencionadas.