Stężenie HMO zmniejsza się w trakcie laktacji. Poziom HMO wynosi 20 -25 g/L w siarze i 5-15 g/L w dojrzałym mleku matki. Stężenie niektórych z najliczniej występujących HMO, takich jak 2'fukozylaktoza (2'FL) i lakto-N-neotetraoza (LNnT), jest najwyższe w siarze i zmniejsza się w trakcie laktacji.