Van dinsdag tot en met zondag van 8.15 tot 19.00 uur (laatste toegang om 18.45 uur).
Elke maandag gesloten en op de volgende dagen: 1 januari, 1 mei, 25 december. Op 31 oktober, 28 november, 19 december 2019 en 30 januari 2020 zal het Museo del Cenacolo Vinciano is de Laatste Maaltijd bovendien van 19.00 tot 22.00 uur open (laatste toegang om 21.45 uur).