離婚成立日の翌日からです。 離婚成立前にすでに前夫と別居していたとしても、その別居期間は再婚禁止期間の100日には含まれません。100日に含まれるのは、あくまでも離婚成立後の経過日数です。
なお、離婚成立の当日は、原則は再婚禁止期間の100日には含まれません。なぜなら、民法140条で、日、週、月または年によって期間を計算する際は、原則、初日は数えないと定められているためです（初日不算入の原則）。そのため、離婚成立日の翌日から、再婚禁止期間の100日がカウントされます。 また、離婚成立日については、役所に離婚届を提出した時間帯に注意が必要です。夜間・休日の時間外受付窓口に提出していた場合、その場では書類の審査は行われず、後日、戸籍担当の職員により審査が行われます。その際に不備がなければ離婚届の提出時に遡って離婚が成立しますが、書類に不備があった場合、補正が完了した時が離婚成立日になります。