L'esame della prolattina richiede un normale prelievo di sangue da una vena del braccio; viene condotto in genere al mattino a digiuno, preferibilmente a 3-4 ore dal risveglio (i valori aumentano la notte). Poiché il risultato è fortemente influenzato dallo stress, in genere si consiglia che il prelievo avvega in posizione distesa, dopo un'attesa di 30 minuti dal posizionamento dell'ago.