Durante questo test, al cane viene iniettato un farmaco chiamato desametasone. Nei cani senza Cushing, quest’iniezione sopprime completamente la produzione di cortisolo.
Il veterinario lo determina misurando innanzitutto il livello "normale" di cortisolo nel sangue del cane. Successivamente, preleva altri due campioni di sangue 3-4 ore dopo l'iniezione di desametasone e 8 ore dopo l'iniezione.
Nei cani senza Cushing, i livelli di cortisolo dopo l'iniezione di desametasone sono bassi rispetto ai livelli "normali", poiché l'iniezione di desametasone impedisce alle ghiandole surrenali del cane di produrre cortisolo.
Nei cani con malattia di Cushing, i livelli di cortisolo dopo l'iniezione di desametasone rimangono elevati, poiché il desametasone non è in grado di sopprimere l'aumento di cortisolo prodotto nei cani affetti da questa patologia.