Comme on a pu le découvrir dans les bandes-annonces, Peter Parker va affronter des méchants issus des anciennes franchises de Spider-Man dans No Way Home. Le héros incarné par Tom Holland va donc découvrir les bad guys suivant : Docteur Octopus (Alfred Molina), Electro (Jamie Foxx), Le Lézard, Sand-Man ou encore Le Bouffon Vert.