Toute étape de centrifugation est déconseillée. En effet, une centrifugation inutile risque d’avoir une influence négative sur la formation des sphéroïdes. Toutefois, si vous souhaitez tout de même centrifuger les cellules au départ, veillez à ne pas dépasser 200 à 300 x g pendant 2 à 5 min.