Prinzessin Eboli gehört dem Hofstaat der Königin Elisabeth an. Sie ist in den jungen Kronprinzen Don Karlos verliebt. Nachdem sie erfährt, dass dieser ihre Gefühle nicht erwidert, will sie sich an ihm und Elisabeth rächen. Daraufhin schließt sie sich mit dem Herzog von Alba und Pater Domingo zusammen. Außerdem wird sie zur Mätresse des Königs Philipp II.