# 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정
(행정규칙구분=고시, 공포일자=20230331, 시행일자=20230331, 소관부처=환경부)
행정규칙번호: 2023-61
출처: 국가법령정보센터

행정규칙명: 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정
행정규칙종류: 고시
발령일자: 20230331
발령번호: 2023-61
시행일자: 20230331
소관부처: 환경부
담당부서기관: 환경부(토양지하수과)
현행여부: Y

조문내용:
['제1조(목적) 이 고시는 「물환경보전법」 제61조 및 같은 법 시행규칙 제89조에 따라 골프장의 맹독성ㆍ고독성농약 사용여부 및 「농약관리법」 제23조 및 같은 법 시행령 제19조에 따른 ‘농약의 안전사용기준’ 준수여부를 확인하기 위하여 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사 등에 필요한 사항을 정함을 목적으로 한다.', '제2조(농약사용량 조사) ① 골프장의 설치ㆍ관리자는 골프장에서 사용한 농약(천연식물보호제 포함)의 종류 및 사용량을 별지 제1호서식의 골프장의 농약 사용대장에 작성하고 3년간 보관하여야 한다.② 특별자치시장ㆍ특별자치도지사ㆍ시장ㆍ군수ㆍ구청장(구청장은 자치구의 구청장을 말하며, 이하 "시장ㆍ군수ㆍ구청장"이라 한다)은 골프장의 농약 사용대장 비치여부 및 허위 작성여부 등을 관리ㆍ감독하며, 시장ㆍ군수ㆍ구청장은 맹ㆍ고독성농약의 사용여부와 골프장에 사용된 농약사용량 등을 조사하여 별지 제2호서식의 골프장 현황과 별지 제3호서식의 골프장별 농약사용량 조사결과를 작성하여 상반기는 9월말, 하반기는 다음연도 1월말까지 특별시장ㆍ광역시장ㆍ도지사에 보고하여야 한다.③ 특별시장ㆍ광역시장ㆍ특별자치시장ㆍ특별자치도지사ㆍ도지사는 제2항에 따라 매 반기마다 시장ㆍ군수ㆍ구청장이 보고한 농약사용량을 종합ㆍ분석하여 별지 제2호서식의 골프장 현황과 별지 제4호서식의 골프장별 농약사용량 조사결과를 다음년도 2월 말까지 환경부장관에게 보고하여야 한다.④ 제2항 및 제3항에 따른 조사결과는 토양지하수정보시스템(https://sgisin.nier.go.kr)에 입력하여 제출하여야 한다.⑤ 환경부장관은 골프장의 농약사용에 관한 관리ㆍ감독이 필요하다고 판단되는 경우 제2항의 골프장 농약사용에 대한 관리ㆍ감독 및 사용량 조사 등을 유역(지방)환경청장에게 지시할 수 있다.', '제3조(농약잔류량 검사 및 결과보고) ① 시장ㆍ군수ㆍ구청장은 제5조의 시료채취 방법 및 제6조의 검사방법에 따라 관할구역내 골프장에 대해 농약잔류량 검사를 실시하여야 한다.② 시장ㆍ군수ㆍ구청장은 골프장별 농약잔류량 검사결과를 별지 제5호서식에 따라 작성하여 상반기는 9월말, 하반기는 다음연도 1월말까지 특별시장ㆍ광역시장ㆍ도지사에게 보고하여야 한다.③ 특별시장ㆍ광역시장ㆍ특별자치시장ㆍ특별자치도지사ㆍ도지사는 제2항에 따라 시장ㆍ군수ㆍ구청장이 보고한 농약잔류량 검사결과를 검토ㆍ평가한 후 그 결과를 별지 제5호서식 및 제6호서식에 따라 작성하여 다음연도 2월말까지 환경부장관에게 보고하여야 한다.④ 제2항 및 제3항에 따른 농약잔류량 검사결과는 토양지하수정보시스템(https://sgisin.nier.go.kr)에 입력하여 제출하여야 한다.⑤ 환경부장관은 골프장의 농약잔류량 검사가 필요하다고 판단되는 경우 제1항의 골프장 농약잔류량 검사를 유역(지방)환경청장에게 지시할 수 있다.', '제4조(검사항목) 농약잔류량 검사항목은 별표1과 같다.', '제5조(시료채취 방법) 농약잔류량 검사를 위한 시료채취 방법은 별표 2와 같다.', '제6조(검사방법) 농약잔류량 검사방법은 별표 3과 같으며, 유효측정농도는 토양의 경우 0.01 ㎎/㎏, 수질의 경우는 0.0005 ㎎/L이상으로 한다.', '제7조(검사기관) 골프장의 농약잔류량 검사기관은 다음 각 호와 같다.1. 국립환경과학원2. 시ㆍ도보건환경연구원3. 유역(지방)환경청4. 기타 환경부장관이 지정하는 기관', '제8조(맹ㆍ고독성농약 사용여부 확인) 농약잔류량 검사결과, 제4조 별표 1에 규정된 고독성 농약 성분이 유효측정농도 이상으로 검출되는 경우 「물환경보전법」 제61조 및 같은 법 시행규칙 제89조에 따라 맹ㆍ고독성농약을 사용한 것으로 확인한다.', '제9조(농약의 안전사용기준 준수 여부 확인) 농약잔류량 검사결과, 「농약관리법」 제23조 및 같은 법 시행령 제19조에 의한 ‘농약의 안전사용기준’에 따라 잔디 등 적용대상농작물 이외의 농약성분이 유효측정농도 이상으로 검출된 경우 적용대상농작물 이외의 농약을 사용한 것으로 확인한다.', '제10조(조사결과의 공개) ① 환경부장관은 특별시장ㆍ광역시장ㆍ특별자치시장ㆍ특별자치도지사ㆍ도지사가 보고한 골프장 농약사용량 조사결과 및 농약잔류량 검사결과 등을 국립환경과학원장에게 자료검증을 실시하도록 하고, 특별한 사유가 없는 한 환경부 홈페이지 또는 토양지하수정보시스템(http://sgis.nier.go.kr) 등을 통해 자료를 공개할 수 있다.② 특별자치시장ㆍ특별자치도지사ㆍ시장ㆍ군수ㆍ구청장은 각 골프장 사업자에게 제2조, 제3조, 제8조 및 제9조에 따른 농약사용량 조사결과 및 농약잔류량 검사결과 등이 표기된 표지판을 클럽하우스 등 이용자가 보기 쉬운 곳에 설치하도록 할 수 있다.③ 골프장 클럽하우스 등에 설치할 표지판 양식은 별표4와 같다.', '제11조(재검토기한)「훈령ㆍ예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」에 따라 이 예규에 대하여 2017년 1월 1일 기준으로 매3년이 되는 시점(매 3년째의 12월 31일까지를 말한다)마다 그 타당성을 검토하여 개선 등의 조치를 하여야 한다.']


별표

별표 0001: 검사 항목(제4조 관련)

[별표 1]

검사 항목(제4조 관련)

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┃대상 농약(27종)                                                           ┃

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┃기본항목(25종)│다이아지논(Diazinon), 디니코나졸(Diniconazol),            ┃

┃              │디메토에이트(Dimethoate), 디클로르보스(Dichlorvos),       ┃

┃              │디클로베닐(Dichlobenil), 아세페이트(Acephate),            ┃

┃              │아족시스트로빈(Azoxystrobin), 이프로디온(Iprodione),      ┃

┃              │카두사포스(Cadusafos), 카바릴(Carbaryl), 카벤다짐(Carben  ┃

┃              │dazim), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlo ┃

┃              │rpyrifos), 테부코나졸(Tebuconazole), 트리플록시스트로빈(T ┃

┃              │rifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole),              ┃

┃              │티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl), 티플루자마이드(T    ┃

┃              │hifluzamide), 페니트로티온(Fenitrothion), 포레이트(Phorat ┃

┃              │e), 포스티아제이트(Fosthiazate),                          ┃

┃              │프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochlori    ┃

┃              │de), 플루톨라닐(Flutolanil), 피리메타닐(Pyrimethanil),    ┃

┃              │피프로닐(Fipronil)                                        ┃

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┃선택항목(2종) │옥신코퍼(Oxine-copper), 티람(Thiram)                      ┃

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별표 0002: 시료채취 방법(제5조 관련)

[별표 2]

시료채취 방법(제5조 관련)

 1. 토양 시료채취 방법

  가. 검사시기 : 건기(4~6월) 1회, 우기(7~9월) 1회 총 2회 불시에 실시한다.

  나. 시료의 채취 및 조제 

    (1) 시료채취지점 선정

      ① 지점선정은 골프장 규모에 따라 18홀 미만은 2개홀 이상, 18홀은 3개홀 이상, 18홀 초과시 9홀 증가시마다 1개홀 이상씩 추가하여 오염의 개연성이 높은 홀을 검사지점으로 임의 선정한다. 다만, 검사결과 맹ㆍ고독성 농약이 검출된 이력이 있는 홀은 반드시 포함하도록 하며, 민원이 발생하거나 필요시에는 검사지점을 조정 할 수 있다.

      ② 1개 홀 당 그린과 페어웨이(티그라운드 포함)를 구분하여 시료채취 지점으로 각각 선정한다.

    (2) 시료의 채취 및 보관

      ① 시료는 토양오염공정시험기준(환경부고시) ES 07130의 2.0 시료의 채취방법에 따라 대상지역내에서 지그 재그형으로 5∼10개 지점의 시료를 채취한다. 다만, 그린의 경우에는 사업주와 협의하여 경기에 지장이 없는 범위내에서 시료채취 지점을 조정할 수 있다.

      ② 대상지역을 대표할 수 있다고 인정될 경우 홀컷터로 채취된 토양을 분석용 시료로 사용할 수 있다.

      ③ 토양시료는 표토층(0∼15㎝)을 채취하고 각 홀당 토양은 약 0.5㎏의 혼합시료를 현장에서 각각 만들어 최종 분석용 시료로 사용한다.

      ④ 채취된 시료는 즉시 실험하여야 하며, 그렇지 못한 경우에는 4℃에서 최대 7일간(추출 후 40일) 보관할 수 있다. 

  2. 수질 시료채취 방법

  가. 검사시기 : 건기(4~6월) 1회, 우기(7~9월) 1회 총 2회 불시에 실시한다.

    (1) 우기(7~9월) 시료채취

      ① 강우 등으로 인해 가능한 최종 유출수가 방류되는 시점에 시료를 채취할 수 있도록 한다.

      ② 강우량을 고려한 시료채취 시기는 다음과 같이 조절한다. 

       ㆍ 강우량이 50 ㎜이내 일 때 : 2～3일 경과 전

       ㆍ 강우량이 50～100 ㎜이내 일 때 : 5일 경과 전

       ㆍ 강우량이 100 ㎜이상 일 때 : 7일 경과 전

  나. 시료의 채취 및 조제 

    (1) 시료채취지점 선정(총 3개 지점 이상)

      ① 유출수가 흐르는 경우 골프장 부지경계선의 각 최종 유출구에서 1개 지점 이상 채취한다. 유출수가 흐르지 않을 경우에는 최종 유출구 전단의 집수조 또는 연못 등에서 시료를 채취한다. 

      ② 나머지 시료는 최종 유출구 가까운 연못의 2개 지점 이상에서 채취한다. 

    (2) 시료의 채취 및 보관

     ① 시료는 수질오염공정시험기준(환경부고시) ES04130.1의 2.0 시료의 채취방법에 따라 시료의 성상, 유량, 유속 등의 시간에 따른 변화를 고려하여 현장물의 성질을 대표할 수 있도록 채취하여야 하며, 수질 또는 유량의 변화가 심하다고 판단될 때에는 오염상태를 잘 알 수 있도록 시료의 채취횟수를 늘려야 하며, 이때에는 채취시의 유량에 비례하여 시료를 서로 섞은 다음 단일시료로 한다.

     ② 시료용기는 3~5L의 갈색유리병을 사용하고, 사용 전 미리 질산 및 정제수로 씻은 다음, 아세톤으로 세정한 후 120 ℃에서 2시간 정도 가열한 후 방냉하여 준비한다.

     ③ 채취된 시료는 즉시 실험하여야 하며, 그렇지 못한 경우에는 4℃에서 최대 7일간(추출 후 40일) 보관할 수 있다. 

별표 0003: 농약잔류량 검사방법(제6조 관련)

[별표 3]

농약잔류량 검사방법(제6조 관련)

1. 농약잔류량 검사방법 개요

  가. 다성분시험방법 적용 대상 농약의 적용검출기

      1) 토양 중 잔류농약 분석법

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  대상 농약(27종)                                                 │적용검출기  

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  아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos),            │GC-MS       

  클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos),     │(19종)      

  다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil),                  │            

  디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazol),              │            

  페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil),                 │            

  플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate),            │            

  이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate),                       │            

  피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole),             │            

  티플루자마이드(Thifluzamide),                                   │            

  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) │            

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  아세페이트(Acephate), 디클로르보스(Dichlorvos),                 │GC-MS       

  프로파모카브하이드로클로라이드(Pr                               │(3종)       

  opamocarb-hydrochloride)                                        │            

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  카바릴(Carbaryl), 카벤다짐(Carbendazim),                        │HPLC        

  티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl)                            │(3종)       

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  옥신코퍼(Oxine-copper)                                          │HPLC        

                                                                  │(1종)       

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  티람(Thiram)                                                    │GC-NPD      

                                                                  │(1종)       

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     * 토양의 검출농도는 생시료 무게로 나타낸다.

      2) 수질 중 잔류농약 분석법

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  대상 농약(27종)                                                 │적용검출기  

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  아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos),            │GC-MS       

  클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos),     │(20종)      

  다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil),                  │            

  디클로르보스(Dichlorvos), 디메토에이트(Dimethoate),             │            

  디니코나졸(Diniconazol),  페니트로티온(Fenitrothion),           │            

  피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil),                     │            

  포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione),             │            

  포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil),                    │            

  테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),         │            

  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) │            

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  아세페이트(Acephate),                                           │GC-MS       

  프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride)       │(2종)       

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  카바릴(Carbaryl), 카벤다짐(Carbendazim),                        │HPLC        

  티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl)                            │(3종)       

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  옥신코퍼(Oxine-copper), 티람(Thiram)                            │HPLC        

                                                                  │(2종)       

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  나. 동 시험방법 이외의 방법이라도 측정결과가 같거나, 그 이상의 정확도가 있다고 판단될 경우로서 국내외의 공인기관에서 인정하고 있는 시험방법은 사용할 수 있다.

  골프장 토양 중 잔류농약 분석법                                                                      

    아족시스트로빈, 카두사포스, 클로로탈로닐, 클로르피리포스, 다이아지논,                             

  디클로베닐, 디메토에이트, 디니코나졸, 페니트로티온, 피프로닐, 플루톨라닐,                           

  포스티아제이트, 이프로디온, 포레이트, 피리메타닐, 테부코나졸,                                       

  티플루자마이드, 트리플록시스트로빈,                                                                 

  트리플루미졸-기체크로마토그래피-질량분석법                                                          

  (Azoxystrobin, Cadusafos, Chlorothalonil, Chlorpyrifos, Diazinon, Dichlobenil, Dimethoate,          

  Diniconazole, Fenitrothion, Fipronil, Flutolanil, Fosthiazate, Iprodione, Phorate, Pyrimethanil,    

  Tebuconazole, Thifluzamide, Trifloxystrobin,                                                        

  Triflumizole- Gas Chromatograph-Mass Spectrometry)                                                  

1.0  개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 토양을 초순수+아세토니트릴(50+100)로 추출하고 20 mL 분취하여 농축한 후 기체크로마토그래피-질량분석기(gas chromatograph/mass spectrometer, GC/MS)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 잔류농약 22종을 측정하는 기체크로마토그래프/질량분석기법이며, 유효측정농도는 토양 0.01 mg/kg 이다.

1.3  간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

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  NO. │국문명            │영문명          │CAS NO.       

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  1   │디클로베닐        │Dichlobenil     │1194-65-6     

───┼─────────┼────────┼───────

  2   │카두사포스        │Cadusafos       │95465-99-9    

───┼─────────┼────────┼───────

  3   │포레이트          │Phorate         │298-02-2      

───┼─────────┼────────┼───────

  4   │디메토에이트      │Dimethoate      │60-51-5       

───┼─────────┼────────┼───────

  5   │다이아지논        │Diazinon        │333-41-5      

───┼─────────┼────────┼───────

  6   │피리메타닐        │Pyrimethanil    │53112-28-0    

───┼─────────┼────────┼───────

  7   │클로로탈로닐      │Chlorothalonil  │1897-45-6     

───┼─────────┼────────┼───────

  8   │페니트로티온      │Fenitrothion    │122-14-5      

───┼─────────┼────────┼───────

  9   │클로르피리포스    │Chlorpyrifos    │2921-88-2     

───┼─────────┼────────┼───────

  10  │포스티아제이트    │Fosthiazate     │98886-44-3    

───┼─────────┼────────┼───────

  11  │피프로닐          │Fipronil        │120068-37-3   

───┼─────────┼────────┼───────

  12  │트리프르미졸      │Triflumizole    │68694-11-1    

───┼─────────┼────────┼───────

  13  │플루톨라닐        │Flutolanil      │66332-96-5    

───┼─────────┼────────┼───────

  14  │티플루자마이드    │Thifluzamide    │130000-40-7   

───┼─────────┼────────┼───────

  15  │디니코나졸        │Diniconazole    │83657-24-3    

───┼─────────┼────────┼───────

  16  │트리플옥시스트로빈│Trifloxystrobin │141517-21-7   

───┼─────────┼────────┼───────

  17  │테부코나졸        │Tebuconazole    │107534-96-3   

───┼─────────┼────────┼───────

  18  │이프로디온        │Iprodione       │36734-19-7    

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  19  │아족시스트로빈    │Azoxystrobin    │131860-33-8   

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3.0  분석기기 및 기구

3.1  기체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 0.20∼0.35 mm, 필름두께 0.1∼0.5 μm, 길이 30~60 m의 DB-5MS 등의 모세관 컬럼이나 이와 동등한 분리능을 가진 것을 택하여 시험한다.

3.1.2  운반기체는 99.999 % 이상의 헬륨으로 유량은 0.5 ～ 2 mL/min, 시료주입부 온도는 220 ~ 260 ℃, 컬럼온도는 표준물질이 최적조건으로 분리되도록 승온(80 ~ 300 ℃)조작 한다.

3.2  질량분석기

3.2.1  질량분석기는 사중극자형(quardrupole) 또는 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.2.2  이온화방식은 전자충격(electron impact, EI)을 사용하고 이온화에너지는  70 eV으로 고정한다.

3.2.3  검출방법은 선택이온검출법(selected ion monitoring, SIM)을 사용하고, 이온질량수(m/z)는 표2를 참고한다. 

3.2.4  연결관의 온도는 280 ℃로 한다.

3.3  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.4  진탕기

3.5  원심분리기

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세톤

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.09)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  노말헥산

노말헥산(n-hexane, C6H14, 분자량 : 86.17)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  아세토니트릴

아세토니트릴(acetonitrile, C2H3N, 분자량 : 14.05)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  무수황산나트륨

무수황산나트륨(anhydrous sodium sulphate, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험 할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.5  플로리실

플로리실은 입경 147 ∼ 246 μm로, 130 ℃에서 3시간 건조 후 데시케이터에서 30분간 방냉한 것을 사용한다. 또는 시판용 플로리실 카트리지 제품을 사용할 수 있다. 

4.1.6  염화나트륨

염화나트륨(sodium chloride, NaCl, 분자량 : 58.45) 50 g을 정제수 500 mL에 녹이고 추출용매 10 mL를 넣고 흔들어 혼합한 다음 추출용매 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 0.100 g을 취하여 아세톤에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 표준원액을 단계적으로 아세톤+노말헥산(1:1) 으로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  토양 50 g 을 250 mL 플라스크에 취하고, 초순수 50 mL 넣어 10분 후 아세토니트릴 100 mL를 넣어 진탕하여 30 분간 추출한다.

6.1.3  추출이 끝나면 염화나트륨　30 g을 첨가하여 초순수 층을 과포화 시킨 후, 3,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음 상등액(아세토니트릴 층)을 20 mL 분취한다.

6.1.4  7.1.3의 분취액을 구데르나다니쉬(KD) 농축기 또는 회전증발농축기로 완전 건고 후 아세톤+노말헥산( 1:1 ) 5 mL로 재용하여 시험용액으로 한다.

6.2  정제

6.2.1  플로리실

6.2.1.1  안지름 10 mm, 길이 10 mm의 유리관 하부에 콕을 부착한 것으로 밑바닥에 탈지면 또는 유리섬유를 깔고 플로리실 5 g을 크로마토그래프용 노말헥산에 침적시켜 충전하고 상부에 크로마토그래프용 무수황산나트륨을 넣고 소량의 노말헥산으로 안정화시킨다. 

6.2.1.2  농축액을 플로리실 컬럼의 상부에 조용히 옮기고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 한 다음 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(1:1) 5 mL씩으로 플라스크 및 컬럼의 내벽을 수회 씻어서 넣고, 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(1:1) 50 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한 방울의 속도로 유출시킨다. 

6.2.1.3  유출액은 플로리실컬럼 용출실험에서 얻어진 분석대상성분의 유출 범위량까지 받아 농축기의 플라스크에 옮기고 농축기에서 액량이 5 mL이하가 될 때까지 농축한다. 유출액은 실온에서 조용히 공기(또는 질소)를 송기하여 잔류 유기용매를 1 mL 이하로 휘발시킨다. 잔류물에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(1:1)을 1 mL까지 정확히 넣어 녹이고 시료용액으로 한다.

[주 1] 플로리실컬럼 용출실험은 다음과 같이 수행한다. 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 혼합 표준용액을 컬럼에 조용히 넣고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 조절한다. 크로마토그래프용 아세톤 2 mL로 컬럼의 내벽을 씻어준 다음 콕을 열어 액면을 조절하고 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(1:1) 200 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한방울의 속도로 유출시킨다. 유출액을 10 mL단위로 시험관에 분취하여 각각 순서에 따라 일정량을 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여  아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole)의 유출시점과 종료점을 확인한다.

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.3  검정곡선의 작성

6.3.1  표준용액 0.1 ∼ 5.0 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 기체크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(1:1)을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide), 트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0  결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하고, 시료량(c kg)으로 나누어 주고 최종부피(d mL)와 전체의 1/5를 분취하여 시험을 진행했으므로 5를 곱하여 분석믈질의 농도(Cs, mg/L)를 구한다.   

Cs(mg/kg) =  x                  (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

8.0 참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2   환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  EN 15662 Method, European Standards, 2009

8.5  US GS Method 5660, 1995

8.6  Pesticide Protocols, Human Press, 2006

9.0 부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

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  정량한계      │ 잔디 0.05 mg/kg, 토양 0.01 mg/kg                           

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

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표 3. 분석대상 농약의 질량스펙트럼 이온

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  물질명          │분자량│정량이온 (m/z)│확인이온 (m/z)  

─────────┼───┼───────┼────────

  Dichlobenil     │171   │171           │173             

─────────┼───┼───────┼────────

  Cadusafos       │270   │159           │158             

─────────┼───┼───────┼────────

  Phorate         │260   │75            │121             

─────────┼───┼───────┼────────

  Dimethoate      │229   │87            │93              

─────────┼───┼───────┼────────

  Diazinon        │304   │137           │304             

─────────┼───┼───────┼────────

  Pyrimethanil    │199   │198           │199             

─────────┼───┼───────┼────────

  Chlorothalonil  │265.9 │266           │133             

─────────┼───┼───────┼────────

  Fenitrothion    │277   │125           │277             

─────────┼───┼───────┼────────

  Chlorpyrifos    │351   │197           │314             

─────────┼───┼───────┼────────

  Fosthiazate     │283   │195           │97              

─────────┼───┼───────┼────────

  Fipronil        │437   │367           │369             

─────────┼───┼───────┼────────

  Triflumizole    │346   │73            │278             

─────────┼───┼───────┼────────

  Flutolanil      │323   │173           │145             

─────────┼───┼───────┼────────

  Thifluzamide    │528   │194           │166             

─────────┼───┼───────┼────────

  Diniconazole    │326   │268           │270             

─────────┼───┼───────┼────────

  Trifloxystrobin │408   │116           │131             

─────────┼───┼───────┼────────

  Tebuconazole    │308   │125           │250             

─────────┼───┼───────┼────────

  Iprodione       │330   │314           │187             

─────────┼───┼───────┼────────

  Azoxystrobin    │403   │344           │388             

━━━━━━━━━┷━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━━━

━━━━━━━━━┯━━━━━━━━━

  성 분 명        │머무름 시간(분)   

─────────┼─────────

  Dichlobenil     │9.76              

─────────┼─────────

  Cadusafos       │14.09             

─────────┼─────────

  Phorate         │14.17             

─────────┼─────────

  Dimethoate      │14.55             

─────────┼─────────

  Diazinon        │15.37             

─────────┼─────────

  Pyrimethanil    │15.50             

─────────┼─────────

  Chlorothalonil  │15.90             

─────────┼─────────

  Fenitrothion    │17.79             

─────────┼─────────

  Chlorpyrifos    │18.33             

─────────┼─────────

  Fosthiazate     │18.90/18.98       

─────────┼─────────

  Fipronil        │19.58             

─────────┼─────────

  Triflumizole    │20.21             

─────────┼─────────

  Flutolanil      │21.38             

─────────┼─────────

  Thifluzamide    │21.88             

─────────┼─────────

  Diniconazole    │23.13             

─────────┼─────────

  Trifloxystrobin │24.40             

─────────┼─────────

  Tebuconazole    │25.11             

─────────┼─────────

  Iprodione       │26.07             

─────────┼─────────

  Azoxystrobin    │33.57             

─────────┴─────────

표 5.  기체크로마토그래프-질량분석기 분석조건(예)

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  항 목                         │조 건                                                     

────────────────┼─────────────────────────────

  컬럼                          │DB-5MS(30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)                      

────────────────┼─────────────────────────────

  운반기체(유속)                │헬륨(1.0 mL/min)                                          

────────────────┼─────────────────────────────

  주입구 온도                   │260 ℃                                                    

────────────────┼─────────────────────────────

  분할 비(Split Ratio)          │splitless                                                 

────────────────┼─────────────────────────────

  오븐 온도                     │80 ℃(2 min) → 10 ℃/min → 200 ℃(2 min)                

                                │→ 5 ℃/min → 260 ℃(2 min) 10 ℃/min → 300 ℃(2 min)   

────────────────┼─────────────────────────────

  이온화전압(ionization voltage)│EI 70 eV                                                  

────────────────┼─────────────────────────────

  검출기                        │선택이온 검출법 : 각 물질별 이온질량수 입력               

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그림 1. 표준물질의 GC-MS 크로마토그램

[Dichlobenil, Cadusafos, Phorate, Dimethoate, Diazinon, Pyrimethanil, Fenitrothion, Chlorpyrifos, Fosthiazate, Fipronil, Triflumizole, Flutolanil, Thifluzamide, Diniconazole, Edifenphos, Trifloxystrobin, Tebuconazole, Iprodione, Azoxystrobin]

  골프장 토양 중 잔류농약 분석법                                              

      디클로르보스, 프로파모카브하이드로클로라이드,                           

  아세페이트-기체크로마토그래피-질량분석법                                    

  (Dichlorvos, Propamocarb-hydrochloride, Acephate - Gas Chromatograph-Mass   

  Spectrometry)                                                               

1.0  개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브-하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 토양을 정제수+아세톤(20+100)로 추출 후, 아세톤을 완전히 농축하여 남은 초순수 20 mL를 디클로로메탄+아세톤(1:1)으로 추출, 정제하여 농축 후 기체크로마토그래피-질량분석기(gas chromatograph/mass spectrometer, GC/MS)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 잔류농약 3종을 측정하는 기체크로마토그래프/질량분석기법이며, 유효측정농도는 토양 0.01 mg/kg 이다.

1.3  간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

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  NO. │국문명                        │영문명                    │CAS NO.     

───┼───────────────┼─────────────┼──────

  1   │디클로르보스                  │Dichlorvos                │62-73-7     

───┼───────────────┼─────────────┼──────

  2   │프로파모카브하이드로클로라이드│Propamocarb-hydrochloride │25606-41-1  

───┼───────────────┼─────────────┼──────

  3   │아세페이트                    │Acephate                  │30560-19-1  

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3.0 분석기기 및 기구

3.1  기체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 0.20∼0.35 mm, 필름두께 0.1∼0.5 μm, 길이 30~60 m의 DB-5MS 등의 모세관 컬럼이나 이와 동등한 분리능을 가진 것을 택하여 시험한다.

3.1.2  운반기체는 99.999 % 이상의 헬륨으로 유량은 0.5 ～ 2 mL/min, 시료주입부 온도는 220 ~ 260 ℃, 컬럼온도는 표준물질이 최적조건으로 분리되도록 승온(80 ~ 300 ℃)조작 한다.

3.2  질량분석기

3.2.1  질량분석기는 사중극자형(quardrupole) 또는 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.2.2  이온화방식은 전자충격(electron impact, EI)을 사용하고 이온화에너지는  70 eV으로 고정한다.

3.2.3  검출방법은 선택이온검출법(selected ion monitoring, SIM)을 사용하고, 이온질량수(m/z)는 표2를 참고한다. 

3.2.4  연결관의 온도는 280 ℃로 한다.

3.3  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.4  진탕기

3.5  원심분리기

4.0 시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세톤

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.09)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  노말헥산

노말헥산(n-hexane, C6H14, 분자량 : 86.17)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  무수황산나트륨

무수황산나트륨(anhydrous sodium sulphate, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험 할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.5  플로리실

플로리실은 입경 147 ∼ 246 μm로, 130 ℃에서 3시간 건조 후 데시케이터에서 30분간 방냉한 것을 사용한다. 또는 시판용 플로리실 카트리지 제품을 사용할 수 있다. 

4.1.6  염화나트륨

염화나트륨(sodium chloride, NaCl, 분자량 : 58.45) 50 g을 정제수 500 mL에 녹이고 추출용매 10 mL를 넣고 흔들어 혼합한 다음 추출용매 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의  디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 0.100 g을 취하여 아세톤에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 표준원액을 단계적으로 아세톤:노말헥산=1:1 으로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  토양 50 g 을 250 mL 플라스크에 취하고, 정제수 20 mL 넣어 10분 후 아세톤 100 mL를 넣어 진탕하여 30 분간 추출한다.

6.1.3  6.1.2를 3,000 rpm으로 10분간 원심분리 하여 상등액을 전액 250 mL 플라스크에 취하고 구데르나다니쉬(KD) 농축기 또는 회전증발농축기로 아세톤만 완전히 농축 후 남은 초순수 20 mL를 200 mL 분액깔대기에 옮긴다.

6.1.4  6.1.3의 분액깔대기에 염화나트륨 10 g 첨가하여 초순수층을 과포화시킨다.

6.1.5  6.1.4의 과포화 시킨 초순수층에 디클로로메탄+아세톤(1:1) 50 mL 넣어  5분간  강하게 흔들어 섞은 다음 가만히 두었다가 정제수 층을 다른 분액깔때기(B)에 취한다.

6.1.6  분액깔때기(B)에 추출용매 50 mL를 넣어 같은 방법으로 2회 더 추출한다.

6.1.7  무수황산나트륨을 이용하여 추출물 중의 수분을 제거한다.

6.1.8  6.1.7의 액을 구데르나다니쉬(KD) 농축기 또는 회전증발농축기로 1 mL까지 농축하여 시험용액으로 한다. 

6.2  정제

6.2.1  플로리실

6.2.1.1  안지름 10 mm, 길이 10 mm의 유리관 하부에 콕을 부착한 것으로 밑바닥에 탈지면 또는 유리섬유를 깔고 플로리실 1 g을 크로마토그래프용 노말헥산에 침적시켜 충전하고 상부에 크로마토그래프용 무수황산나트륨을 넣고 소량의 노말헥산으로 안정화시킨다. 

6.2.1.2  농축액을 플로리실 컬럼의 상부에 조용히 옮기고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 한 다음 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 2 mL씩으로 플라스크 및 컬럼의 내벽을 수회 씻어서 넣고, 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 50 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한 방울의 속도로 유출시킨다. 

6.2.1.3  유출액은 플로리실컬럼 용출실험에서 얻어진 분석대상성분의 유출 범위량까지 받아 농축기의 플라스크에 옮기고 농축기에서 액량이 5 mL이하가 될 때까지 농축한다. 유출액은 실온에서 조용히 공기(또는 질소)를 송기하여 잔류 유기용매를 1 mL 이하로 휘발시킨다. 잔류물에 크로마토그래프용 노말헥산+아세톤(1:1) 5 mL를 정확히 넣어 녹이고 시료용액으로 한다.

[주 1] 플로리실컬럼 용출실험은 다음과 같이 수행한다. 디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 혼합 표준용액을 컬럼에 조용히 넣고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 조절한다. 크로마토그래프용 아세톤 2 mL로 컬럼의 내벽을 씻어준 다음 콕을 열어 액면을 조절하고 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(1:1) 200 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한방울의 속도로 유출시킨다. 유출액을 10 mL단위로 시험관에 분취하여 각각 순서에 따라 일정량을 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여  디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate)의 유출시점과 종료점을 확인한다.

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된  디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.3  검정곡선의 작성

6.3.1  표준용액 0.1 ∼ 5.0 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 기체크로마토그래프용 노말헥산+아세톤(1:1)을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터  디클로르보스(Dichlorvos), 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate)의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0  결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하고, 시료량(c kg)으로 나누어 주고 최종부피(d mL)와 전체의 1/5를 분취하여 시험을 진행했으므로 5를 곱하여 분석믈질의 농도(Cs, mg/L)를 구한다.   

Cs(mg/kg) =  x                  (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

c : 분석물질의 농도(mg/L)

d : 최종부피(mL)

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  식품의약품안전청, 식품공전 10.1.4 - 식품 중 잔류농약 분석법

8.5  EN 15662 Method, European Standards, 2009

8.6  US GS Method 5660, 1995

8.6  Pesticide Protocols, Human Press, 2006

9.0  부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 잔디 0.05 mg/kg, 토양 0.01 mg/kg                           

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

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표 3. 분석대상 농약의 질량스펙트럼 이온

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  물질명                    │분자량│정량이온 (m/z)│확인이온 (m/z)  

──────────────┼───┼───────┼────────

  Dichlorvos                │221   │109           │185, 79         

──────────────┼───┼───────┼────────

  Propamocarb-hydrochloride │224   │58            │129             

──────────────┼───┼───────┼────────

  Acephate                  │183   │136           │94              

━━━━━━━━━━━━━━┷━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━━━

━━━━━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━━

  성 분 명                  │머무름 시간(분)   

──────────────┼─────────

  Dichlorvos                │8.236             

                            │                  

  Propamocarb-hydrochloride │10.32             

                            │                  

  Acephate                  │10.84             

━━━━━━━━━━━━━━┷━━━━━━━━━

표 5. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석조건(예)

 ━━━━━━━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

  항 목                         │조 건                                                   

────────────────┼────────────────────────────

  컬럼                          │DB-5MS(30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)                    

────────────────┼────────────────────────────

  운반기체(유속)                │헬륨(1.0 mL/min)                                        

────────────────┼────────────────────────────

  주입구 온도                   │260 ℃                                                  

────────────────┼────────────────────────────

  분할 비(Split Ratio)          │splitless                                               

────────────────┼────────────────────────────

  오븐 온도                     │ 80 ℃(2 min) → 10 ℃/min → 200 ℃(2 min) → 300 ℃   

────────────────┼────────────────────────────

  이온화전압(ionization voltage)│EI 70 eV                                                

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  검출기                        │선택이온 검출법 : 각 물질별 이온질량수 입력             

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그림1. 표준물질 GC-MS 크로마토그램

(Dichlorvos, Propamocarb-HCl, Acephate)

  골프장 토양 중 잔류농약 분석법                                                      

  카벤다짐, 카바릴, 티오파네이트메틸-고성능액체크로마토그래피법                       

  (Carbendazim, Carbaryl, Thiophanate-methyl- High Perfomance Liquid Chromatography)  

1.0  개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 잔디, 토양 중에 함유되어 있는 카벤다짐(Carbendazim), 카바릴(Carbaryl), 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl) 의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 잔디, 토양을 정제수+아세토니트릴(50+100)로 추출하여 20 mL 분취하여 농축한 후 고성능액체크로마토그래프(high performance liquid  chromatograph, HPLC)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 잔디, 토양 중에 함유되어 있는 잔류농약 3종을 측정하는 고성능액체크로마토그래프법이며, 유효측정농도는 토양 0.01 mg/ kg이다.

1.3 간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표1. 분석대상 농약성분

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  No. │국문명          │영문명                │CAS NO.     

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  1   │카벤다짐        │  Carbendazim         │10605-21-7  

───┼────────┼───────────┼──────

  2   │카바릴          │ Carbaryl             │63-25-2     

───┼────────┼───────────┼──────

  3   │티오파네이트메틸│   Thiophanate-methyl │23564-05-8  

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3.0 분석기기 및 기구

3.1  고성능액체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 3 mm ～ 5 mm, 길이 15 cm ～ 25 cm의 스테인리스 강관에 옥타데실실릴기(ODS)를 화학결합시킨 실리카겔(입경 5 μm ～ 10 μm)을 충전한 것 또는 이와 동등의 분리능을 갖는 것(Shiseido Capcell Pak C18 등)을 택하여 시험한다.

3.1.2  이동상은 아세토니트릴+정제수(6:4)의 혼합비로 사용하고 유속은 0.7~1.0 mL/min으로 사용한다.

3.2  자외선 검출기

자외선 검출기(UV detector)는 235 nm에서 검출할 수 있는 것으로 사용한다.

3.3  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.4  질소농축기

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세토니트릴

아세토니트릴(acetonitrile, CH3CN, 분자량 : 41.05)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  메탄올 

메탄올(methanol, CH3OH, 분자량 : 32.04) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  정제수

액체크로마토그래프용 시약을 사용하며, 바탕시험 할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  디클로로메탄

디클로로메탄(methylene chloride, CH2Cl2, 분자량 : 84.93) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.5  아미노프로필 카트리지

아미노프로필을 함유한 실리카겔 1 g을 충진한 것 또는 시판 NH2(amino-propyl)

카트리지를 사용한다.

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 카벤다짐(Carbendazim, C9H9N3O2, 분자량 : 191.19) ,카바릴 (Carbaryl, C12H11NO2, 분자량 : 201.22) 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl , C12H14N4O4S2 , 분자량 :342.39) 0.100 g을 각각 취하여 아세토니트릴에 녹여 100 mL로 한다. 

 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

카벤다짐(Carbendazim, C9H9N3O2, 분자량 : 191.19) ,카바릴 (Carbaryl, C12H11NO2, 분자량 : 201.22) 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl , C12H14N4O4S2 , 분자량 :342.39)   표준원액을 단계적으로 아세토니트릴로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 인증시료를 확보할 수 있는 경우 인증표준물질을 분석한 결과 값과 인증 값과의 상대백분율로 나타내고, 인증시료를 확보할 수 없는 경우 이를 정확한 농도로 첨가한 시료로 대체한다. 정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  토양 50 g 을 250 mL 플라스크에 취하고, 초순수 50 mL 넣어 10분간 후 아세토니트릴 100 mL를 넣어 진탕하여 30분간 추출한다.

6.1.3  추출이 끝나면 염화나트륨　20 g을 첨가하여 초순수 층을 과포화 시킨 후, 3,000 rpm으로 10분간 원심분리를 하여 상등액(아세토니트릴 층)을 20 mL 분취한다.

6.1.4  아미노프로필 카트리지를 10 % 메탄올 함유 디클로로메탄 5 mL로 안정화시킨다.

6.1.5  아미노프로필 카트리지에 원심분리를 하여 상등액(아세토니트릴 층)을 20 mL를 통과시킨 후 10 % 메탄올 5 mL로 용출한다.

6.1.6  질소농축 하에 완전히 건고하여 아세토니트릴 1 mL로 용해한다.

6.1.7  6.1.6의 분석시료 1 mL를 분취하여 시험용액으로 한다.

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 카벤다짐(Carbendazim), 카바릴(carbaryl), 티오파네이트메틸(thiophanate-methyl) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.3  검정곡선의 작성

6.3.1  표준용액 0.5 ∼ 10 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 액체크로마토그래프용 아세토니트릴을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 카벤다짐(Carbendazim), 카바릴(carbaryl), 티오파네이트메틸(thiophanate-methyl) 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0  결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하여 분석믈질의 농도(Cs, mg/L)를 구한다. 

Cs(mg/L) =                     (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  US EPA Method 614, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.5  US EPA Method 622, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.6  Standard Method 6410B, 2005, Extractable base/neutrals and acids in water by LLE GC/MS

9.0 부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 토양 0.01 mg/kg                                            

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

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  성 분 명              │머무름 시간(분)   

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   Carbendazim          │2.816             

                        │                  

     Thiophanate-methyl │3.448             

                        │                  

  Carbaryl              │4.223             

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표 4.  액체크로마토그래프 분석조건(예) 

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  항 목           │조 건                         

─────────┼───────────────

  컬럼            │ C18(250mm×4.6mm,5μm)       

─────────┼───────────────

  유속            │0.7 mL/min                    

─────────┼───────────────

  컬럼 온도       │40 ℃                         

─────────┼───────────────

  이동상          │ 초순수/Acetonitrile  =40/60  

─────────┼───────────────

  InjectionVolume │ 10 uL                        

─────────┼───────────────

  검출기          │ 235 nm                       

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그림 1. 표준물질의 액체 크로마토그램

(Carbendazim, Carbaryl, Thiophanate-methyl)

  골프장  토양 중 잔류농약 분석법                         

  옥신코퍼 - 고성능액체크로마토피법                       

  (Oxine-copper : High Perfomance Liquid Chromatography)  

1.0  개요

1.1  목적

  이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 옥신코퍼(Oxine-copper)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 토양을 아세톤으로 추출 후 수증기증류장치에서 증류한 다음, 증류액을 디클로로메탄으로 액액분배 한다. 이것을 완전농축하고 잔류물을 메탄올로 재용해하여 고성능액체크로마토그래프(high performance liquid  chromatograph, HPLC)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

  이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 옥신코퍼(Oxine-copper)를 측정하는 액체크로마토그래프법이며, 유효측정농도는 0.01 mg/kg이다.

1.3  간섭물질

  분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표1. 분석대상 농약성분

━━━┯━━━━┯━━━━━━┯━━━━━━

  No. │국문명  │영문명      │CAS NO.     

───┼────┼──────┼──────

  1   │옥신코퍼│Oxine-copper│10380-28-6  

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3.0  분석기기 및 기구

3.1  고성능액체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 2~5 mm, 길이 200~500 mm의 스테인레스 강관에 다공성 스틸렌디비닐벤젠 공중합체를 충전한 것 또는 이와 동등의 분리능을 갖는 것을 택하여 시험한다.

3.1.2  이동상은  (CH3COO)3Alㆍmethanol용액을 사용하여 8-quinolinol의 aluminium chelate가 약 3～4분에서 유출되도록 유속을 조정한다.

3.2  검출기는 형광광도형검출기를 사용하며, 여기파장 380nm, 형광파장 520nm에서 측정한다

3.3  수증기 증류장치 

3.4  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세톤

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.09)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  클로로포름

클로로포름(chloroform, CHCI3, 분자량 : 119.38) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  정제수

액체크로마토그래프용 시약을 사용하며, 바탕시험 할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  디클로로메탄

디클로로메탄(methylene chloride, CH2Cl2, 분자량 : 84.93) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.5  메탄올

메탄올(methanol, CH3OH, 분자량 : 32.04)은 바탕시험할 때 분석물질의 피크부근에 불순물피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.6  에틸렌디아민 4-아세트산 2-소듐

에틸렌디아민 4-아세트산 2-소듐(ethylenediamine 4-acetic acid 2-sodium)

4.1.7  염산

염산(hydrochloric acid, HCl, 분자량 : 36.46, 비중 : 1.18, 함량 : 36.5 ~ 38 %) 

4.1.8  황산구리

황산구리 (copper(II) sulfate pentahydrate, CuSO4ㆍ5H2O, 분자량 : 249.68)

4.1.9  수산화나트륨

수산화나트륨(sodium hydroxide, NaOH, 분자량 : 40.00)은 바탕시험할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용하거나 오븐에서 500 ～ 700 ℃로 8시간 정도 가열한 후 사용한다.

4.1.10  염화나트륨

염화나트륨(sodium chloride, NaCl, 분자량 : 58.44)은 바탕시험할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용하거나 오븐에서 500 ～ 700 ℃로 8시간 정도 가열한 후 사용한다.

4.1.11  무수황산나트륨

무수황산나트륨(sodium sulfate anhydrous, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용하거나 오븐에서 500 ～ 700 ℃로 8시간 정도 가열한 후 사용한다.

4.1.12  스타이렌디비닐벤젠 공중합체

다공성 스타이렌디비닐벤젠 공중합체(stylenedivinylbenzene)은 평균입경 10 ㎛의 가스크로마토그래프용을 사용한다.

4.1.13  초산알루미늄메탄올용액(CH3COO)3Alㆍmethanol)

무수초산알루미늄(Aluminum acetate，unhydrous(CH3COO)3Al) 10 g을 메탄올(methanol) 1ℓ에 녹이고  0.45 ㎛ filter로 여과한 것을 사용한다

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 옥신코퍼(Oxine-copper, C18H12CuN2O2 분자량 : 351.85) 0.100 g을 취하여 클로로포름에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

옥신코퍼(Oxine-copper)표준원액을 단계적으로 아세토니트릴로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 인증시료를 확보할 수 있는 경우 인증표준물질을 분석한 결과 값과 인증 값과의 상대백분율로 나타내고, 인증시료를 확보할 수 없는 경우 이를 정확한 농도로 첨가한 시료로 대체한다. 정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  토양(50 g) 시료를 정밀히 취하여 500 mL 삼각플라스크에 넣고 정제수 50 mL 넣은 다음에 1 N HCl 5 mL 및 acetone을 시료량에 따라 100 ~ 200 mL를 첨가하여 실리콘마개로 막고 30분간 격렬히 진탕한다.

6.1.3  여지(No.2) 위에 여과보조제로 celite 545를 1 cm 두께로 균일하게 깔고 추출액을 흡입여과기로 여과하고, 잔류물에 acetone 소량으로 씻고 여과한다. 

6.1.4  여액을 농축플라스크에 합하여 1 % CuSO4용액 0.5 mL을 넣고 40 ℃ 이하의 수욕상에서 감압하에 acetone을 날려보낸다.

6.1.5  잔류물을 정제수 100 mL로 1 ℓ 증류플라스크에 씻어 넣고 ethylene diamine 4-acetic acid 2-sodium 50 g 및 무수Na2CO3 6 g을 넣고 수증기 증류장치에 부착하여 가열하여 수증기 증류를 행한다. 

6.1.6  수기에 1N HCl 20 mL 및 1 % CuSO4 0.5 mL를 넣고 냉각관 선단을 수기의 용액에 잠기도록 하여 유출액을 200 mL까지 받는다. 

6.1.7  냉각관을 소량의 증류수로 씻어 유출액에 합하여  500 mL 분액깔때기에 옮기고 여기에 NaCl 60 g 및 dichloromethane 100 mL를 넣고 5분간 격렬히 진탕하고 잠시 방치한 다음 dichloromethane층은 버리고 물층을 취한다. 

6.1.8  물층에 1 N NaOH용액을 가하여 pH를 7～8로 조정한 후 dichloromethane 100 mL를 넣어 5분간 격렬히 진탕하고 잠시 방치한 다음 dichloromethane층을 취한다. 남은 물층에 dichloromethane 100 mL를 넣어 위와 같은 방법으로 dichloromethane층을 분취하여 300 mL 둥근바닥플라스크에 합한다.

6.1.9  40℃ 이하의 수욕상에서 감압하에 용매를 날려보낸 다음 잔류물에 methanol을 가하여 녹이고 5 mL로 하여 시험용액으로 한다.

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 옥신코퍼(Oxine-copper) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

7.3  검정곡선의 작성

7.3.1  표준용액 0.5 ∼ 10 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 액체크로마토그래프용 아세토니트릴을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 옥신코퍼(Oxine-copper)의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

7.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0  결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하고, 시료량(c kg)으로 나누어 주고 최종부피(d mL)와 분석물질의 농도(C, mg/L)를 구한다.          

Cs(mg/kg) =  ×                  (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

c : 분석물질의 농도(mg/L)

d : 최종부피(mL)

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  US EPA Method 614, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.5  US EPA Method 622, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

9.0 부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 0.01 mg/kg                                                 

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

━━━━━━━┯━━━━━━━━━

  성 분 명    │머무름 시간(분)   

───────┼─────────

  Oxine-copper│8.5               

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표 4. 액체크로마토그래프 분석조건(예)

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    항 목 │조 건                                       

─────┼──────────────────────

  컬럼    │ 충진제 : 다공성 스틸렌디비닐벤젠 공중합체  

          │ 200~500 mm × 2 ~ 5 mm, 5 μm              

─────┼──────────────────────

  유속    │0.7 mL/min                                  

─────┼──────────────────────

  컬럼온도│40 ℃                                       

─────┼──────────────────────

  이동상  │ (CH3COO)3Al?methanol                      

─────┼──────────────────────

  검출기  │ 형광광도형검출기(FLD)                      

          │ Exciting : 380 nm, Emission : 520 nm       

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그림 1. 표준물질의 액체크로마토그램(Oxine-copper)

  골프장  토양 중 잔류농약 분석법   

   티람 - 가스크로마토그래피        

  (Thiram - Gas Chromatography)     

1.0  개요

1.1  목적

  이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 티람(Thiram)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 토양을 메탄올로 추출하고, Dimethyl dithiocarbamic acid benzyl화시킨 후 정제 및 농축하여 잔류물에 acetone을 가하여 정확하게 4mL로 되게 한 다음 시험용액으로 한다. 

1.2  적용범위

  이 시험기준은 골프장 토양 중에 함유되어 있는 티람(Thiram)을 측정하는 가스크로마토그래프법이며, 유효측정농도는 0.01 mg/kg이다.

1.3  간섭물질

  분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

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  No. │국문명│영문명│CAS NO.   

───┼───┼───┼─────

  1   │티람  │Thiram│137-26-8  

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3.0  분석기기 및 기구

3.1  가스크로마토그래프

고감도질소인 검출기(NPD)가 부착된 가스크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 0.20 ～ 0.53 mm, 필름두께 0.25 ～ 3.0 μm, 길이 20 ～ 100 m의 DB-1 또는 DB-5 등의 모세관 컬럼이나 동등한 분리능을 가진 것을 택하여 시험한다.

3.2  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세톤

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.09)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  노말헥산

노말헥산(n-hexane, C6H14, 분자량 : 86.17)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  정제수

액체크로마토그래프용 시약을 사용하며, 바탕시험 할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  디클로로메탄

디클로로메탄(methylene chloride, CH2Cl2, 분자량 : 84.93) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.5  메탄올

메탄올(methanol, CH3OH, 분자량 : 32.04)은 바탕시험 할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.6  무수황산나트륨

무수황산나트륨(sodium sulfate anhydrous, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용하거나 오븐에서 500 ～ 700 ℃로 8시간 정도 가열한 후 사용한다.

4.1.7  실리카겔(silicagel, SiO2?nH2O)

크로마토그램용 0.063 ～ 0.200 mm(70 ～ 230 mesh)의 것을 사용한다. 실리카겔을 크로마토그래프용 노말헥산으로 씻은 다음 여과하여 비커에 넣고 층의 두께를 10 mm 이하로 하여 130 ℃에서 4시간 건조한 다음 데시케이터 안에서 30분간 식힌다. 또는 시판용 실리카 카트리지 제품을 사용할 수 있다.

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 티람(Thiram, C6H12N2S4,,분자량 :221.25) 0.10 g을 취하여 아세톤에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

티람(Thiram) 표준원액을 단계적으로 아세토니트릴로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 인증시료를 확보할 수 있는 경우 인증표준물질을 분석한 결과 값과 인증 값과의 상대백분율로 나타내고, 인증시료를 확보할 수 없는 경우 이를 정확한 농도로 첨가한 시료로 대체한다. 정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0 분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  토양(50 g) 시료를 정밀히 취하여 500 mL 삼각플라스크에 넣고  2M NaOH 5 0mL 및 methanol 100 mL를 가하여 실리콘 고무마개를 하고 수냉 하면서 30분간 교반한다. 

6.1.3  여지(No.2) 위에 여과보조제로 celite 545를 1cm 두께로 균일하게 깔고 추출액을 흡입여과기로 여과한다.

6.1.4  잔류물을 methanol/물(1:1) 50mL로 세척하고  여과한 다음 다시 잔류물을 소량으로 세척한 후 여과한다.

6.1.5  위의 여액을 분액깔때기에 옮기고 여기에 benzyl chloride 0.5mL를 가하여 가끔 흔들어 섞으면서 3시간 방치한 후 4% NaCl용액 100mL을 가하고 n-hexane 100mL씩으로 2회 추출하여 n-hexane층을 합하여 무수 Na2SO4로 탈수한 후 이를 40℃ 이하의 수욕상에서 감압하에 용매를 날려보내고 잔류물에 n-hexane 5mL을 가하여 녹인다.

6.1.6  활성화된 5 %함수 silicagel 10 g을 n-hexane에 현탁시켜 칼럼에 충진하고 상단에 무수 Na2SO4 5 g을 같은 용액으로 현탁시켜 충진한 다음 현탁액이 무수 Na2SO4층의 상단에 소량 남을 때까지 유출시킨다. 여기에 위의 용액을 칼럼에 따르고 n-hexane/ethyl ether 혼합액(90:10) 100 mL로 용출한다. 용출액을 40 ℃ 이하의 수욕상에서 감압하에 용매를 날려보내고 잔류물에 acetone을 가하여 정확하게 4 mL로 되게 한 다음 시험용액으로 한다. 

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 가스크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 티람(Thiram) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.3  검정곡선의 작성

6.3.1  Dimethyl dithiocarbamic acid sodium 100㎎/ℓ acetone용액 1mL에 2M NaOH용액 50mL 및 methanol 50mL를 가하고 여기에 benzyl chloride 0.5mL를 가하여 분석조작법에 따라 benzyl화 반응을 행하여 n-hexane 전용 후 용매를 유거한다. 잔류물을 acetone으로 용해?희석하여 0.1～2㎍/mL 농도로 단계적으로 조제하여 가스 크로마토그래프에 주입해서 peak 높이 또는 peak 면적을 측정해서 검량선을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 티람(Thiram) 의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0 결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하고, 시료량(c, kg)으로 나누어 주고 최종부피(d, mL)와 분석물질의 농도(C, mg/L)를 구한다.          

Cs(mg/kg) =  ×                  (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

c : 분석물질의 농도(mg/L)

d : 최종부피(mL)

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  US EPA Method 614, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.5  US EPA Method 622, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

9.0 부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 0.01 mg/kg                                                 

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

━━━━━┯━━━━━━━━━

  성 분 명│머무름 시간(분)   

─────┼─────────

  Thiram  │27.6              

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표 4.  가스크로마토그래프 분석조건(예)

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  항 목               │조 건                                                   

───────────┼────────────────────────────

  컬럼                │DB-5(30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)                      

───────────┼────────────────────────────

  운반기체(유속)      │질소(1.0 mL/min)                                        

───────────┼────────────────────────────

  주입구 온도         │260 ℃                                                  

───────────┼────────────────────────────

  분할 비(Split Ratio)│splitless                                               

───────────┼────────────────────────────

  오븐 온도           │ 80 ℃(2 min) → 10 ℃/min → 200 ℃(2 min) → 300 ℃   

───────────┼────────────────────────────

  검출기              │질소인검출기(NPD)                                       

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그림1. 표준물질 GC 크로마토그램(Thiram)   

  골프장 수질 중 잔류농약 분석법                                                                      

  아족시스트로빈, 카두사포스, 클로로탈로닐, 클로르피리포스, 다이아지논,                               

  디클로르보스, 디클로베닐, 디메토에이트, 디니코나졸, 페니트로티온,                                   

  피프로닐, 플루톨라닐, 포스티아제이트, 이프로디온, 포레이트, 피리메타닐,                             

  테부코나졸, 티플루자마이드, 트리플록시스트로빈,                                                     

  트리플루미졸-기체크로마토그래피-질량분석법                                                          

  (Azoxystrobin, Cadusafos, Chlorotholonil, Diazinon, Dichlobeni, Dichlorvos, Dimethoate,             

  Diniconazole, Fenitrothion, Fipronil, Flutolanil, Fosthiazate, Iprodione, Phorate, Pyrimethanil,    

  Tebuconazole, Thifluzamide, Trifloxystrobin,                                                        

  Triflumizole- Gas Chromatograph-Mass Spectrometry)                                                  

1.0 개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 토양 수질을 디클로로메탄으로 추출하여 농축한 후 기체크로마토그래피-질량분석기(gas chromatograph/mass spectrometer, GC/MS)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 잔류농약 23종을 측정하는 기체크로마토그래프/질량분석기법이며, 유효측정농도는 0.0005 mg/L이다.

1.3  간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

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  NO. │국문명            │영문명          │CAS NO.       

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  1   │디클로르보스      │Dichlorvos      │62-73-7       

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  2   │디클로베닐        │Dichlobenil     │1194-65-6     

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  3   │카두사포스        │Cadusafos       │95465-99-9    

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  4   │포레이트          │Phorate         │298-02-2      

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  5   │디메토에이트      │Dimethoate      │60-51-5       

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  6   │다이아지논        │Diazinon        │333-41-5      

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  7   │피리메타닐        │Pyrimethanil    │53112-28-0    

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  8   │클로로탈로닐      │Chlorothalonil  │1897-45-6     

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  9   │페니트로티온      │Fenitrothion    │122-14-5      

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  10  │클로르피리포스    │Chlorpyrifos    │2921-88-2     

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  11  │포스티아제이트    │Fosthiazate     │98886-44-3    

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  12  │피프로닐          │Fipronil        │120068-37-3   

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  13  │트리플루미졸      │Triflumizole    │68694-11-1    

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  14  │플루톨라닐        │Flutolanil      │66332-96-5    

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  15  │티플루자마이드    │Thifluzamide    │130000-40-7   

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  16  │디니코나졸        │Diniconazole    │83657-24-3    

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  17  │트리플록시스트로빈│Trifloxystrobin │141517-21-7   

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  18  │테부코나졸        │Tebuconazole    │107534-96-3   

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  19  │이프로디온        │Iprodione       │36734-19-7    

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  20  │아족시스트로빈    │Azoxystrobin    │131860-33-8   

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3.0  분석기기 및 기구

3.1  기체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 0.20∼0.35 mm, 필름두께 0.1∼0.5 μm, 길이 30~60 m의 DB-5MS 등의 모세관 컬럼이나 이와 동등한 분리능을 가진 것을 택하여 시험한다.

3.1.2  운반기체는 99.999 % 이상의 헬륨으로 유량은 0.5 ～ 2 mL/min, 시료주입부 온도는 220 ~ 260 ℃, 컬럼온도는 표준물질이 최적조건으로 분리되도록 승온(80 ~ 300 ℃)조작한다.

3.2  질량분석기

3.2.1  질량분석기는 사중극자형(quardrupole) 또는 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.2.2  이온화방식은 전자충격(electron impact, EI)을 사용하고 이온화에너지는 70 eV으로 고정한다.

3.2.3  검출방법은 선택이온검출법(selected ion monitoring, SIM)을 사용하고, 이온질량수(m/z)는 표1를 참고한다. 

3.2.4  연결관의 온도는 280 ℃로 한다.

3.3  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세톤

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.09)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  노말헥산

노말헥산(n-hexane, C6H14, 분자량 : 86.17)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  무수황산나트륨

무수황산나트륨(anhydrous sodium sulphate, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험 할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  플로리실

플로리실은 입경 147 ∼ 246 μm로, 130 ℃에서 3시간 건조 후 데시케이터에서 30분간 방냉한 것을 사용한다. 또는 시판용 플로리실 카트리지 제품을 사용할 수 있다. 

4.1.5  디클로로메탄

디클로로메탄(methylene chloride, CH2Cl2, 분자량 : 84.93) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.6  염화나트륨

염화나트륨(sodium chloride, NaCl, 분자량 : 58.45) 50 g을 정제수 500 mL에 녹이고 추출용매 10 mL를 넣고 흔들어 혼합한 다음 추출용매 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

 고순도의 아아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 0.100 g을 취하여 아세톤에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 표준원액을 단계적으로 아세톤:노말헥산=1:1 으로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재 작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  시료 500 mL를 1 L 분액깔때기에 취하고, 염화나트륨 과포화용액 약 50 mL를 넣는다.

6.1.3  디클로로메탄 50 mL를 넣어 5분간 강하게 흔들어 섞은 다음 가만히 두었다가 물층을 다른 분액깔때기(B)에 취한다.

6.1.4  분액깔때기(B)에 추출용매 50 mL를 넣어 같은 방법으로 추출한다.

6.1.5  무수황산나트륨을 이용하여 추출물 중의 수분을 제거한다.

6.1.6  6.1.5의 액을 구데르나다니쉬(KD) 농축기 또는 회전증발농축기로 1 mL까지 농축하여 시험용액으로 한다.

6.2  정제

6.2.1  플로리실

6.2.1.1  안지름 10 mm, 길이 10 mm의 유리관 하부에 콕을 부착한 것으로 밑바닥에 탈지면 또는 유리섬유를 깔고 플로리실 1 g을 크로마토그래프용 노말헥산에 침적시켜 충전하고 상부에 크로마토그래프용 무수황산나트륨을 넣고 소량의 노말헥산으로 안정화시킨다. 

6.2.1.2  농축액을 플로리실 컬럼의 상부에 조용히 옮기고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 한 다음 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 2 mL씩으로 플라스크 및 컬럼의 내벽을 수회 씻어서 넣고, 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 50 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한 방울의 속도로 유출시킨다. 

6.2.1.3  유출액은 플로리실컬럼 용출실험에서 얻어진 분석대상성분의 유출 범위량까지 받아 농축기의 플라스크에 옮기고 농축기에서 액량이 5 mL이하가 될 때까지 농축한다. 유출액은 실온에서 조용히 공기(또는 질소)를 송기하여 잔류 유기용매를 1 mL 이하로 휘발시킨다. 잔류물에 크로마토그래프용 노말헥산+아세톤(1:1)을 1 mL까지 정확히 넣어 녹이고 시료용액으로 한다.

[주 1] 플로리실컬럼 용출실험은 다음과 같이 수행한다. 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 혼합 표준용액을 컬럼에 조용히 넣고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 조절한다. 크로마토그래프용 아세톤 2 mL로 컬럼의 내벽을 씻어준 다음 콕을 열어 액면을 조절하고 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 200 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한방울의 속도로 유출시킨다. 유출액을 10 mL단위로 시험관에 분취하여 각각 순서에 따라 일정량을 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole)의 유출시점과 종료점을 확인한다.

6.3  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.4  검정곡선의 작성

6.4.1  표준용액 0.1 ∼ 5.0 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 기체크로마토그래프용 노말헥산+아세톤(1:1)을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 카두사포스(Cadusafos), 클로로탈로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 다이아지논(Diazinon), 디클로르보스(Dichlorvos), 디클로베닐(Dichlobenil), 디메토에이트(Dimethoate), 디니코나졸(Diniconazole), 페니트로티온(Fenitrothion), 피프로닐(Fipronil), 플루톨라닐(Flutolanil), 포스티아제이트(Fosthiazate), 이프로디온(Iprodione), 포레이트(Phorate), 피리메타닐(Pyrimethanil), 테부코나졸(Tebuconazole), 티플루자마이드(Thifluzamide),  트리플록시스트로빈(Trifloxystrobin), 트리플루미졸(Triflumizole)의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.4.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0  결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하여, 시료량(c mL)으로 나누어 주고 마지막으로 최종부피(d mL)를 곱하여 분석믈질의 농도(Cs, mg/L)를 구한다.    

Cs(mg/L) =   x                       (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  환경부, 먹는 물 수질공정시험기준 

8.5  US EPA Method 614, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.6  US EPA Method 622, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.7  Standard Method 6410B, 2005, Extractable base/neutrals and acids in water by LLE GC/MS

8.8  Pesticide Protocols, Human Press, 2006 

9.0  부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

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  정량한계      │ 0.0005 mg/L                                                

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

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표 3. 분석대상 농약의 질량스펙트럼 이온

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  물질명          │분자량│정량이온 (m/z)│확인이온 (m/z)  

─────────┼───┼───────┼────────

  Dichlorvos      │221   │109           │185             

─────────┼───┼───────┼────────

  Dichlobenil     │171   │171           │173             

─────────┼───┼───────┼────────

  Cadusafos       │270   │159           │158             

─────────┼───┼───────┼────────

  Phorate         │260   │75            │121             

─────────┼───┼───────┼────────

  Dimethoate      │229   │87            │93              

─────────┼───┼───────┼────────

  Diazinon        │304   │137           │304             

─────────┼───┼───────┼────────

  Pyrimethanil    │199   │198           │199             

─────────┼───┼───────┼────────

  Chlorothalonil  │265.9 │266           │133             

─────────┼───┼───────┼────────

  Fenitrothion    │277   │125           │277             

─────────┼───┼───────┼────────

  Chlorpyrifos    │351   │197           │314             

─────────┼───┼───────┼────────

  Fosthiazate     │283   │195           │97              

─────────┼───┼───────┼────────

  Fipronil        │437   │367           │369             

─────────┼───┼───────┼────────

  Triflumizole    │346   │73            │278             

─────────┼───┼───────┼────────

  Flutolanil      │323   │173           │145             

─────────┼───┼───────┼────────

  Thifluzamide    │528   │194           │166             

─────────┼───┼───────┼────────

  Diniconazole    │326   │268           │270             

─────────┼───┼───────┼────────

  Trifloxystrobin │408   │116           │131             

─────────┼───┼───────┼────────

  Tebuconazole    │308   │125           │250             

─────────┼───┼───────┼────────

  Iprodione       │330   │314           │187             

─────────┼───┼───────┼────────

  Azoxystrobin    │403   │344           │388             

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  성 분 명        │머무름 시간(분)   

─────────┼─────────

  Dichlorvos      │8.35              

                  │                  

  Dichlobenil     │9.76              

                  │                  

  Cadusafos       │14.09             

                  │                  

  Phorate         │14.17             

                  │                  

  Dimethoate      │14.55             

                  │                  

  Diazinon        │15.37             

                  │                  

  Pyrimethanil    │15.50             

                  │                  

  Chlorothalonil  │15.90             

                  │                  

  Fenitrothion    │17.79             

                  │                  

  Chlorpyrifos    │18.33             

                  │                  

  Fosthiazate     │18.90/18.98       

                  │                  

  Fipronil        │19.58             

                  │                  

  Triflumizole    │20.21             

                  │                  

  Flutolanil      │21.38             

                  │                  

  Thifluzamide    │21.88             

                  │                  

  Diniconazole    │23.13             

                  │                  

  Trifloxystrobin │24.40             

                  │                  

  Tebuconazole    │25.11             

                  │                  

  Iprodione       │26.07             

                  │                  

  Azoxystrobin    │33.57             

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표 5. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석조건(예)

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  항 목                         │조 건                                                     

────────────────┼─────────────────────────────

  컬럼                          │DB-5MS(30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)                      

────────────────┼─────────────────────────────

  운반기체(유속)                │헬륨(1.0 mL/min)                                          

────────────────┼─────────────────────────────

  주입구 온도                   │260 ℃                                                    

────────────────┼─────────────────────────────

  분할 비(Split Ratio)          │splitless                                                 

────────────────┼─────────────────────────────

  오븐 온도                     │80 ℃(2 min) → 10 ℃/min → 200 ℃(2 min)                

                                │→ 5 ℃/min → 260 ℃(2 min) 10 ℃/min → 300 ℃(2 min)   

────────────────┼─────────────────────────────

  이온화전압(ionization voltage)│EI 70 eV                                                  

────────────────┼─────────────────────────────

  검출기                        │선택이온 검출법 : 각 물질별 이온질량수 입력               

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그림 1. 표준물질의 GC-MS 크로마토그램

    [Dichlorvos, Dichlobenil, Cadusafos, Phorate, Dimethoate, Diazinon, Pyrimethanil, Chlorothalonil, Fenitrothion, Chlorpyrifos, Fosthiazate, Fipronil, Triflumizole, Flutolanil, Thifluzamide, Diniconazole, Trifloxystrobin, Tebuconazole, Iprodione, Azoxystrobin]

  골프장 수질 중 잔류농약 분석법                                                  

      프로파모카브하이드로클로라이드, 아세페이트                                  

  -기체크로마토그래피-질량분석법                                                  

  ( Propamocarb-hydrochloride, Acephate - Gas Chromatograph-Mass Spectrometry)    

1.0  개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb- hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 수질 시료를 바로 농축한 후 기체크로마토그래피-질량분석기(gas chromatograph/mass spectrometer, GC/MS)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 잔류농약 2종을 측정하는 기체크로마토그래프/질량분석기법이며, 유효측정농도는 0.0005 mg/L이다.

1.3  간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

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  NO. │국문명                        │영문명                    │CAS NO.     

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  1   │프로파모카브하이드로클로라이드│Propamocarb-hydrochloride │25606-41-1  

───┼───────────────┼─────────────┼──────

  2   │아세페이트                    │Acephate                  │30560-19-1  

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3.0  분석기기 및 기구

3.1  기체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 0.20∼0.35 mm, 필름두께 0.1∼0.5 μm, 길이 30~60 m의 DB-5MS 등의 모세관 컬럼이나 이와 동등한 분리능을 가진 것을 택하여 시험한다.

3.1.2  운반기체는 99.999 % 이상의 헬륨으로 유량은 0.5 ～ 2 mL/min, 시료주입부 온도는 220 ~ 260 ℃, 컬럼온도는 표준물질이 최적조건으로 분리되도록 승온(80 ~ 300 ℃)조작 한다.

3.2  질량분석기

3.2.1  질량분석기는 사중극자형(quardrupole) 또는 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.2.2  이온화방식은 전자충격(electron impact, EI)을 사용하고 이온화에너지는  70 eV으로 고정한다.

3.2.3  검출방법은 선택이온검출법(selected ion monitoring, SIM)을 사용하고, 이온질량수(m/z)는 표2를 참고한다. 

3.2.4  연결관의 온도는 280 ℃로 한다.

3.3  농축장치

진공펌프가 연결된 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세톤

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.09)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  노말헥산

노말헥산(n-hexane, C6H14, 분자량 : 86.17)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  무수황산나트륨

무수황산나트륨(anhydrous sodium sulphate, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험 할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  플로리실

플로리실은 입경 147 ∼ 246 μm로, 130 ℃에서 3시간 건조 후 데시케이터에서 30분간 방냉한 것을 사용한다. 또는 시판용 플로리실 카트리지 제품을 사용할 수 있다. 

4.1.5  디클로로메탄

디클로로메탄(methylene chloride, CH2Cl2, 분자량 : 84.93) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.2 표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 0.100 g을 취하여 아세톤에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 표준원액을 단계적으로 아세톤:노말헥산=1:1 으로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  시료 250 mL를 500 mL 플라스크에 취하고, 회전증발농축기를 사용하여 시료를 완전히 농축(건고) 후 아세톤 2 mL로 재용해 한다. 회전증발농축기는 진공펌프가 연결된 것을 사용하며 다음의 조건을 만족하는 제품 또는 동등 이상의 것을 사용한다.

표 2. 회전증발농축기 운전조건

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  구 분       │운전조건  │비 고                 

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  펌핑 속도   │38 L/min  │60 Hz에서 최대속도    

              │          │                      

  최대 진공도 │9 mbar    │또는 7 torr           

              │          │                      

  수욕조 온도 │45 ~ 50 ℃│                      

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6.2  정제

6.2.1  플로리실

6.2.1.1  안지름 10 mm, 길이 10 mm의 유리관 하부에 콕을 부착한 것으로 밑바닥에 탈지면 또는 유리섬유를 깔고 플로리실 1 g을 크로마토그래프용 노말헥산에 침적시켜 충전하고 상부에 크로마토그래프용 무수황산나트륨을 넣고 소량의 노말헥산으로 안정화시킨다. 

6.2.1.2  농축액을 플로리실 컬럼의 상부에 조용히 옮기고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 한 다음 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 2 mL씩으로 플라스크 및 컬럼의 내벽을 수회 씻어서 넣고, 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 50 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한 방울의 속도로 유출시킨다. 

6.2.1.3  유출액은 플로리실컬럼 용출실험에서 얻어진 분석대상성분의 유출 범위량까지 받아 농축기의 플라스크에 옮기고 농축기에서 액량이 5 mL이하가 될 때까지 농축한다. 유출액은 실온에서 조용히 공기(또는 질소)를 송기하여 잔류 유기용매를 1 mL 이하로 휘발시킨다. 잔류물에 크로마토그래프용 노말헥산+아세톤(1:1)을 1 mL까지 정확히 넣어 녹이고 시료용액으로 한다.

[주 1] 플로리실컬럼 용출실험은 다음과 같이 수행한다. 프로파모카브-HCl(Propamocarb-HCl), 아세페이트(Acephate) 혼합 표준용액을 컬럼에 조용히 넣고 콕을 열어 액면이 무수황산나트륨의 상단에 이르도록 조절한다. 크로마토그래프용 아세톤 2 mL로 컬럼의 내벽을 씻어준 다음 콕을 열어 액면을 조절하고 컬럼의 상부에 크로마토그래프용 아세톤+노말헥산(3:7) 200 mL를 넣은 분액깔때기를 연결하여 컬럼과 분액깔때기의 콕을 열고 매초 한방울의 속도로 유출시킨다. 유출액을 10 mL단위로 시험관에 분취하여 각각 순서에 따라 일정량을 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate)의 유출시점과 종료점을 확인한다.

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb- hydrochloride), 아세페이트(Acephate) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.3  검정곡선의 작성

6.3.1  표준용액 0.1 ∼ 5.0 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 기체크로마토그래프용 노말헥산+아세톤(1:1)을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 기체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 프로파모카브하이드로클로라이드(Propamocarb-hydrochloride), 아세페이트(Acephate)의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0  결과보고

7.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하여, 시료량(c mL)으로 나누어 주고 마지막으로 최종부피( d mL )를 곱하여 분석믈질의 농도(Cs, mg/L)를 구한다.    

Cs(mg/L) =  x                         (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

    SANCO/825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  식품의약품안전청, 식품공전 10.1.4 - 식품 중 잔류농약 분석법

8.5  EN 15662 Method, European Standards, 2009

8.6  US GS Method 5660, 1995

8.7  Pesticide Protocols, Human Press, 2006

9.0  부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 0.0005 mg/L                                                

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

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표 4. 분석대상 농약의 질량스펙트럼 이온

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  물질명                    │분자량│정량이온 (m/z)│확인이온 (m/z)  

──────────────┼───┼───────┼────────

  Propamocarb-hydrochloride │224   │58            │129             

──────────────┼───┼───────┼────────

  Acephate                  │183   │136           │94              

━━━━━━━━━━━━━━┷━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━━━

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  성 분 명                  │머무름 시간(분)   

──────────────┼─────────

  Propamocarb-hydrochloride │10.32             

                            │                  

  Acephate                  │10.84             

━━━━━━━━━━━━━━┷━━━━━━━━━

표 6. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석조건(예)

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  항 목                         │조 건                                                 

────────────────┼───────────────────────────

  컬럼                          │DB-5MS(30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)                  

────────────────┼───────────────────────────

  운반기체(유속)                │헬륨(1.0 mL/min)                                      

────────────────┼───────────────────────────

  주입구 온도                   │260 ℃                                                

────────────────┼───────────────────────────

  분할 비(Split Ratio)          │splitless                                             

────────────────┼───────────────────────────

  오븐 온도                     │80 ℃(2 min) → 10 ℃/min → 200 ℃(2 min) → 300 ℃  

────────────────┼───────────────────────────

  이온화전압(ionization voltage)│EI 70 eV                                              

────────────────┼───────────────────────────

  검출기                        │선택이온 검출법 : 각 물질별 이온질량수 입력           

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그림 1. 표준물질의 GC-MS 크로마토그램

(Propamocarb-HCl, Acephate)

  골프장 수질 중 잔류농약 분석법                                                      

  카벤다짐, 카바릴, 티오파네이트메틸                                                  

  -고성능액체크로마토그래피법                                                         

  (Carbendazim, Carbaryl, Thiophanate-methyl-High Perfomance Liquid Chromatography)   

1.0  개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 카벤다짐(Carbendazim), 카바릴(Carbaryl), 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 수질 시료를 디클로로메탄으로 추출하여 농축한 후  고성능액체크로마토그래프(High Performance Liquid  chromatograph, HPLC)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 에 나타나있는 잔류농약 2종을 측정하는 액체크로마토그래프법이며, 유효측정농도는 0.0005 mg/L이다.

1.3  간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

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  No. │국문명          │영문명                │CAS No.     

───┼────────┼───────────┼──────

  1   │카벤다짐        │  Carbendazim         │10605-21-7  

───┼────────┼───────────┼──────

  2   │카바릴          │ Carbaryl             │63-25-2     

───┼────────┼───────────┼──────

  3   │티오파네이트메틸│   Thiophanate-methyl │23564-05-8  

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3.0  분석기기 및 기구

3.1  고성능액체크로마토그래프(High Performance Liquid chromatograph)  

3.1.1  컬럼은 안지름 3 mm ～ 5 mm, 길이 15 cm ～ 25 cm의 스테인리스 강관에 옥타데실실릴기(ODS)를 화학결합시킨 실리카겔(입경 5 μm ～ 10 μm)을 충전한 것 또는 이와 동등의 분리능을 갖는 것(Shiseido Capcell Pak C18 등)을 택하여 시험한다.

3.1.2  이동상은  아세토니트릴 : 정제수 (60 : 40)의 혼합비로 사용하고 유속은 0.7~1.0 mL/min으로 사용한다.

3.2  자외선 검출기

3.2.1  자외선 검출기(UV detector)는 235 nm에서 검출할 수 있는 것으로 사용한다.

3.3  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.4  질소농축기

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세토니트릴

아세토니트릴(Acetonitrile, CH3CN, 분자량 : 41.05)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  디클로로메탄(Dichloromethane)

디클로로메탄(methylene chloride, CH2Cl2, 분자량 : 84.93) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  정제수

액체크로마토그래프용 시약을 사용하며, 바탕시험 할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4  무수황산나트륨

무수황산나트륨(anhydrous sodium sulphate, Na2SO4, 분자량 : 142.04)은 바탕시험 할 때 표준물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.2  표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 카벤다짐(Carbendazim, C9H9N3O2, 분자량 : 191.19) ,카바릴 (Carbaryl, C12H11NO2, 분자량 : 201.22) 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl , C12H14N4O4S2 , 분자량 :342.39) 0.100 g을 각각 취하여 아세토니트릴에 녹여 100 mL로 한다. 

이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

카벤다짐(Carbendazim, C9H9N3O2, 분자량 : 191.19) ,카바릴 (Carbaryl, C12H11NO2, 분자량 : 201.22) 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl , C12H14N4O4S2 , 분자량 :342.39)  표준원액을 단계적으로 아세토니트릴로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0  정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 인증시료를 확보할 수 있는 경우 인증표준물질을 분석한 결과 값과 인증 값과의 상대백분율로 나타내고, 인증시료를 확보할 수 없는 경우 이를 정확한 농도로 첨가한 시료로 대체한다. 정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0  분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  시료 500 mL를 1 L 분액깔때기(A)에 취하고, 추출용매(Dichloromethane) 50 mL를 넣어 5분간 강하게 흔들어 섞은 다음 Dichloromethane층을 다른 분액깔때기(B)에 취한다.

6.1.3  분액깔때기(A)에 추출용매 50 mL를 넣어 같은 방법 2번 추출한다.

6.1.4  무수황산나트륨을 이용하여 추출물 중의 수분을 제거한다.

6.1.5  6.1.4의 액을 질소농축기로 건고한 후 아세토니트릴 1 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

7.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 카벤다짐(Carbendazim, C9H9N3O2, 분자량 : 191.19) ,카바릴 (Carbaryl, C12H11NO2, 분자량 : 201.22) 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl , C12H14N4O4S2 , 분자량 :342.39) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

7.3  검정곡선의 작성

7.3.1  표준용액 0.5 ∼ 10 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 액체크로마토그래프용 아세토니트릴을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 카벤다짐(Carbendazim, C9H9N3O2, 분자량 : 191.19) ,카바릴 (Carbaryl, C12H11NO2, 분자량 : 201.22) 티오파네이트메틸(Thiophanate-methyl , C12H14N4O4S2 , 분자량 :342.39) 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

7.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

8.0  결과보고

8.1  각 분석물질 별 봉우리의 면적(Ax)을 구한 다음 검정곡선식의 y(i)값에 대입하여 x(i)값을 계산하여 분석믈질의 농도(Cs, mg/L)를 구한다. 

Cs(mg/L) =                     (식 1)  

 여기서, a : 검정곡선의 기울기

b : 검정곡선의 절편값

9.0  참고자료

9.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods, 

SANCO/825/00 rev.7(200).

9.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

9.2  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

9.3  식품의약품안전청, 식품공전 10.1.4 - 식품 중 잔류농약 분석법

9.4  US EPA Method 614, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

9.5  US EPA Method 622, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

9.6  Standard Method 6410B, 2005, Extractable base/neutrals and acids in water by LLE GC/MS

10.0  부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 0.0005 mg/L                                                

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

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  성 분 명              │머무름 시간(분)   

────────────┼─────────

     Carbendazim        │2.816             

────────────┼─────────

    Thiophanate-methyl  │3.448             

────────────┼─────────

   Carbaryl             │4.223             

━━━━━━━━━━━━┷━━━━━━━━━

표 4. 액체크로마토그래프 분석조건(예)

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  항 목           │조 건                         

─────────┼───────────────

  컬럼            │ C18(250mm×4.6mm,5μm)       

─────────┼───────────────

  유속            │0.7 mL/min                    

─────────┼───────────────

  컬럼 온도       │40 ℃                         

─────────┼───────────────

  이동상          │ 초순수/Acetonitrile  =40/60  

─────────┼───────────────

  InjectionVolume │ 10uL                         

─────────┼───────────────

  검출기          │ 235 nm                       

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그림 1. 표준물질의 액체 크로마토그램

(Carbendazim, Carbaryl, Thiophanate-methyl)

  골프장  수질 중 잔류농약 분석법                                 

  옥신코퍼, 티람 - 고성능액체크로마토피법                         

  ( Oxine-copper, Thiram -High Perfomance Liquid Chromatography)  

1.0  개요

1.1  목적

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 옥신코퍼(Oxine-copper), 티람(Thiram)의 농도를 측정하기 위한 방법으로 골프장 수질 시료를 벤젠코폴리머중합체가 함유된 카트리지로 고상추출한 다음, 아세토니트릴로 재용출하고 농축한 후 고성능액체크로마토그래프(high performance liquid  chromatograph, HPLC)로 정성 및 정량하는 방법이다. 

1.2  적용범위

이 시험기준은 골프장 수질에 함유되어 있는 잔류농약 2종을 측정하는 액체크로마토그래프법이며, 유효측정농도는 0.0005 mg/L이다.

1.3  간섭물질

분석결과에 오류를 가져올 수 있는 주요 오염원으로는 용매, 시약, 유리 기구 및 그 외 분석과정 중에 사용하는 모든 기구 등이다. 이들은 크로마토그램 상의 바탕선을 상승시키는 등 시료분석 과정에 영향을 줄 수 있으며, 분석자료의 질을 저하시킬 수 있다. 따라서 모든 시약은 순도 및 불순물의 종류와 함량을 고려하여 엄선하고 필요한 경우 용매나 시약은 증류 및 정제하여 사용한다. 각 실험실에서는 오염원으로 인한 영향 유무나 수준에 대해 정제수 바탕시료(reagent blank)의 측정을 통한 평가가 필요하다.

2.0  용어정의

분석대상 농약성분은 표 1과 같다.

표 1. 분석대상 농약성분

───┬────┬──────┬──────

  No. │국문명  │영문명      │CAS NO.     

───┼────┼──────┼──────

  1   │옥신코퍼│Oxine-copper│10380-28-6  

───┼────┼──────┼──────

  2   │티람    │Thiram      │137-26-8    

───┴────┴──────┴──────

3.0 분석기기 및 기구

3.1  고성능액체크로마토그래프

3.1.1  컬럼은 안지름 3 mm ～ 5 mm, 길이 15 cm ～ 25 cm의 스테인리스 강관에 옥타데실실릴기(ODS)를 화학결합시킨 실리카겔(입경 5 μm ～ 10 μm)을 충전한 것 또는 이와 동등의 분리능을 갖는 것을 택하여 시험한다.

3.1.2  이동상은  0.05 M 인산완충액 : 아세토니트릴 (40 : 60)의 혼합비로 사용하고 유속은 0.7~1.0 mL/min으로 사용한다.

3.2  자외선 검출기

자외선 검출기의  파장은 Oxine-copper  235 nm, Thiram 270 nm를 택하여 사용한다.

3.3  농축장치

구데르나다니쉬(K.D.) 농축기 또는 회전증발농축기를 사용하거나 이와 동등 이상의 성능을 가진 것을 사용한다.

3.4  벤젠코폴리머중합체 카트리지

SDVB(Stylenedivinylbenzen) 벤젠코폴리머중합체가 함유된 카트리지(265 mg)를 사용한다.

4.0  시약 및 표준용액

4.1  시약

4.1.1  아세토니트릴

아세토니트릴(acetonitrile, CH3CN, 분자량 : 41.05)은 바탕시험 할 때 분석물질의 피크부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.2  클로로포름

클로로포름(chloroform, CHCI3, 분자량 : 119.38) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.3  정제수

액체크로마토그래프용 시약을 사용하며, 바탕시험 할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.4 인산염

인산염 0.0069 g을 물에 녹여 1 L로 한다. 사용하기 전에 여과하고 헬륨으로 기체를 제거 한다.

4.1.5 아세톤 

아세톤(acetone, CH3COCH3, 분자량 : 58.08) 100 mL를 약 1 mL ～ 5 mL로 농축한 것을 5 μL 취하여 기체크로마토그래프에 주입할 때 표준물질의 피크 부근에 불순물 피크가 없는 것을 사용한다.

4.1.6 2 % 디에틸렌글리콜

디에틸렌글리콜(diethylene glycol, C4H10O3 , 분자량: 106.12) 2 g을 아세톤에 녹여 100 mL로 한다.

4.1.7 0.1 mg/L 염산(Hydrochloric acid )

염산(hydrochloric acid ,HCl) 0.1 mg을 정제수에 녹여 1L로 한다.

4.2 표준용액

4.2.1  표준원액(1,000 mg/L) 

고순도의 옥신코퍼(Oxine-copper , C18H12CuN2O2 분자량 :351.85) 0.100 g을 취하여 클로로포름에 녹여 100 mL로 한다. 고순도의 티람(Thiram, C6H12N2S4, 분자량 :221.25) 0.100 g을 취하여 아세토니트릴에 녹여 100 mL로 한다. 이 용액은 여러 개의 바이알에 공기층이 남지 않도록 나누어 넣은 다음 밀봉하여 냉장 보관하고, 4주일 이내에 사용한다. 또는 소급성이 있는 시판 용액을 사용한다.

4.2.2  표준용액

옥신코퍼(Oxine-copper), 티람(Thiram) 표준원액을 단계적으로 아세토니트릴로 희석하여 분석에 알맞은 농도로 제조한다. 검정곡선 작성 시 제조한다.

5.0 정도보증/정도관리(QA/QC)

5.1  방법검출한계 및 정량한계

5.1.1  방법검출한계 및 정량한계는 정제수에 정량한계 부근의 농도가 되도록 표준물질을 첨가한 시료 7개를 준비하고 각 시료를 7.0 분석 절차와 동일하게 측정하여 표준편차를 구한다.

5.1.2  표준편차에 3.14를 곱한 값을 방법검출한계로, 10을 곱한 값을 정량한계로 나타낸다. 측정한 정량한계는 시험방법에서 제시한 정량한계 이하의 값이어야 한다.

5.2  방법바탕시료의 측정

5.2.1  시료군마다 1개의 방법바탕시료를 측정한다. 방법바탕시료는 정제수를 사용하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하며 측정값은 방법검출한계 이하이어야 한다. 

5.2.2  고농도의 시료 분석 후 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검하는 것이 바람직하다.

5.3  검정곡선의 작성 및 검증

5.3.1  정량범위 내에서 바탕시료를 포함하여 4개 이상의 농도에 대해 검정곡선을 작성하고 얻어진 검정곡선의 결정계수(R2)가 0.98 이상 또는 감응계수의 상대표준편차가 25 % 이하이어야 하며 감응계수의 상대표준편차가 허용범위를 벗어나면 재 작성한다.

5.3.2  검정곡선의 직선성을 검증하기 위하여 각 시료군마다 1회의 검정곡선 검증을 실시하는 것이 바람직하다. 방법검출한계의 5 ∼ 50배 또는 검정곡선의 중간 농도에 해당하는 표준용액을 측정한다. 측정값은 검정곡선 작성 시의 값과 25 % 이내에서 일치하여야 한다. 만약 이 범위를 넘는 경우, 검정곡선의 재작성이 요구된다. 

5.4  정확도 및 정밀도

5.4.1  정확도와 정밀도는 정제수에 정량한계 농도의 10배가 되도록 표준물질을 첨가한 시료를 4개 이상 준비하여 6.0 분석절차와 동일하게 측정하여 구한다.

5.4.2  정확도는 인증시료를 확보할 수 있는 경우 인증표준물질을 분석한 결과 값과 인증 값과의 상대백분율로 나타내고, 인증시료를 확보할 수 없는 경우 이를 정확한 농도로 첨가한 시료로 대체한다. 정확도는 4회 이상 측정한 평균값과 인증된 농도 또는 제조한 농도에 대한 상대 백분율로서 나타내고 그 값이 70 ∼ 130 % 이내이어야 한다.

5.4.3  정밀도는 측정값의 상대표준편차(RSD)로 산출하며 측정한 결과 25 % 이내 이어야 한다.

5.5  내부정도관리 주기 및 목표

5.5.1  방법검출한계, 정량한계, 정밀도 및 정확도는 연 1회 이상 산정하는 것을 원칙으로 하며, 분석자의 교체, 분석 장비의 수리 및 이동 등의 주요 변동사항이 생길 경우에는 다시 실시한다. 단, 장비의 청소 및 측정 장비의 감도가 의심될 때에는 언제든지 측정하여 확인하여야 한다. 

5.5.2  검정곡선 검증 및 방법바탕시료의 분석은 각 시료군마다 실시하며, 고농도의 시료 다음에는 방법바탕시료를 측정하여 오염여부를 점검한다.

5.5.3  각 정도관리 항목에 대한 정도관리 목표 값은 표 2와 같다.

6.0 분석절차

6.1  전처리

6.1.1  시료와 표준용액을 냉장고에서 꺼내어 상온으로 한다.

6.1.2  시료 250 mL를 1 L 삼각플라스크에 취하고, 0.1 mg/L 염산을 가해 pH 3.5 조절한다.

6.1.3  벤젠코폴리머중합체 카트리지(265 mg)를 아세토니트릴 5mL과 초순수 5 mL를 차례대로 흘려 안정화시킨다.

6.1.4  시료 250 mL를 통수 시킨 후 카트리지를 정제수 10 mL로 흘려보낸다.

6.1.5  유출액을 버리고 약 10분간 공기를 흡입시켜 수분을 제거 한다.

6.1.6  수분을 제거한 카트리지에 아세토니트릴 5 mL를 전개하여 용출액을 100 mL 둥근바닥플라스크에 받고 2 % 디에틸렌글리콜 아세톤 용액 0.5 mL를 가하여 40 ℃에서 1 mL 까지 농축한다.

6.1.7  감압농축한 시료를 질소기류하에서 건고한다.

6.1.8  이 잔류물에 정제수 및 아세토니트릴(13 : 7)혼액 2 mL를 가해 시험용액으로 한다.

6.2  분석방법 

전처리에서 얻어진 시료용액 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 같은 조건에서 작성된 옥신코퍼(Oxine-copper), 티람(Thiram) 표준액의 크로마토그램과 비교한다.

6.3  검정곡선의 작성

6.3.1  표준용액 0.5 ∼ 10 mL를 단계적으로 취하여 10 mL 부피플라스크에 넣고 액체크로마토그래프용 아세토니트릴을 넣어 표선을 채운 다음 일정량을 미량주사기를 사용하여 액체크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 작성하여 각 성분의 양과 피크의 높이 또는 면적과의 관계식을 작성한다. 미리 작성한 검정곡선식으로부터 옥신코퍼(Oxine-copper), 티람(Thiram)의 양(ng)을 구한 후, 각 성분별 농도(mg/L)를 산출한다.

6.3.2  시료분석결과 검정곡선 농도범위를 벗어나면 시료를 희석하여 재 분석하여야 한다.

7.0 결과보고

7.1  각 시료 별 크로마토그램으로부터 각 물질에 해당되는 피크의 높이 또는 면적을 측정한 후 다음의 식을 사용하여 농도(mg/L)를 계산한다.

농도(mg/L) =                     (식 1)  

 여기서, As : 검정곡선에서 얻어진 분석성분의 양(ng)

Vf : 최종액량(mL)

Wd : 시료의 량(mL)

Vi : 시료의 주입량(μL)

8.0  참고자료

8.1  European Commission, Guidance Document on Residue Analytical Methods,  SANCO/ 825/00 rev.7(200).

8.2  환경부, 골프장의 농약사용량 조사 및 농약잔류량 검사방법 등에 관한 규정(2019. 01)

8.3  국립농산물품질관리원, 농산물 등의 유해물질 분석법(2012. 04).

8.4  US EPA Method 614, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.5  US EPA Method 622, 1982, The Determination Of Organophosphorus Pesticides In Industrial And Municipal Wastewater

8.6  Standard Method 6410B, 2005, Extractable base/neutrals and acids in water by LLE GC/MS

9.0 부록

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  정도관리 항목 │정도관리 목표                                               

────────┼──────────────────────────────

  정량한계      │ 0.0005 mg/L                                                

  검정곡선      │결정계수(R2) > 0.98 또는 감응계수의 상대표준편차 25 % 이내  

  정밀도        │상대표준편차가 25 % 이내                                    

  정확도        │70 ~ 130 %                                                  

━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

━━━━━━━┯━━━━━━━━━

  성 분 명    │머무름 시간(분)   

───────┼─────────

  Oxine-copper│9.0               

              │                  

  Thiram      │12.2              

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표 4. 액체크로마토그래프 분석조건(예)

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  항 목           │조 건                                                 

─────────┼───────────────────────────

  컬럼            │ C18(250mm×4.6mm,5μm)                               

─────────┼───────────────────────────

  유속            │0.7 mL/min                                            

─────────┼───────────────────────────

  컬럼 온도       │40 ℃                                                 

─────────┼───────────────────────────

  이동상          │ 0.05M 인산완충액/Acetonitrile  =60/40-40/60(40min)   

─────────┼───────────────────────────

  InjectionVolume │ 30uL                                                 

─────────┼───────────────────────────

  검출기          │ UVD                                                  

                  │ Oxine-copper : 235nm /  Thiram : 270nm               

━━━━━━━━━┷━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

그림 1. 표준물질의 액체크로마토그램(Oxine-copper)

그림 2. 표준물질의 액체크로마토그램(Thiram) 

별표 0004: 표지판(제10조제3항 관련)

[별표 4]

표지판(제10조제3항 관련)

                                      980mm                                                               

        │                                                                                │              

        ├────────────────────────────────────────┤              

        │                                                                                │              

          20mm  100mm   40mm  200mm   200mm           120mm   80mm  200mm             20mm                

        │    │      │    │      │              │      │    │                │    │              

        ├──┼───┼──┼───┼───────┼───┼──┼────────┼──┤              

        │    │      │    │      │              │      │    │                │    │              

  ─┬─┌────────────────────────────────────────┐─┬─        

    │  │                                                                                │  │  20mm    

    │  │                                                                                │─┼─        

    │  │      □ ○○○○년도 농약사용량 조사결과                                       │  │  80mm    

    │  │    ┌───┬──────────────┬───────────────┐    │─┼─        

    │  │    │홀수  │골프장 면적(㎡)             │농약사용량                    │    │  │  80mm    

    │  │    │      │                            │                              │    │  │          

    │  │    │      │                            │                              │    │  │          

    │  │    │      ├──────┬───────┼──────┬────────┤    │─┼─        

    │  │    │      │총면적      │ 농약사용면적 │총사용량(kg)│단위면적당      │    │  │  50mm    

    │  │    │      │            │              │            │사용량(kg/ha)   │    │  │          

    │  │    ├───┼──────┼───────┼──────┼────────┤    │─┼─        

        │    │      │            │              │            │                │    │  │  50mm    

  650mm │    │      │            │              │            │                │    │  │          

        │    │      │            │              │            │                │    │  │          

    │  │    └───┴──────┴───────┴──────┴────────┘    │─┼─        

    │  │                                                                                │  │  20mm    

    │  │                                                                                │─┼─        

    │  │      □ ○○○○년도 농약잔류량 조사결과                                       │  │  80mm    

    │  │    ┌──────┬───────────────┬───────────┐    │─┼─        

    │  │    │구  분      │검출농약                      │검출농도범위          │    │  │  50mm    

    │  │    ├──────┼───────────────┼───────────┤    │─┼─        

    │  │    │토 양       │                              │    ○○∼○○  mg/kg │    │  │  100mm   

    │  │    ├──────┼───────────────┼───────────┤    │─┼─        

    │  │    │수 질       │                              │                 mg/L │    │  │  100mm   

    │  │    └──────┴───────────────┴───────────┘    │─┼─        

    │  │                                                                                │  │  20mm    

  ─┼─└───┬─────────────────────────┬──────────┘─┴─        

    │          │                                                  │`                                   

                │                                                  │                                    

  1m            │                                                  │                                    

                │                                                  │                                    

    │  ┌───┴─────────────────────────┴──────────┐              

    │  │                                                                                │              

  ─┴─└────────────────────────────────────────┘              

  1. 표지판의 크기는 가로 980mm, 세로 650mm로 한다.                                                       

  2. 표지판은 바닥으로부터 1m 이상 떨어져야 하며, 이용자가 보기 쉬운 곳에 설치하여야 한                   

  다.                                                                                                     

  3. ‘○○○○년도 농약사용량 조사결과’, 및 ‘○○○○년도 농약잔류량 조사결과’라는 글자는 명조체      

  로 하고 글자 높이는 50mm로 한다.                                                                        

  4. 기타 표안의 글자는 검정색 고딕체로 하고 글자 높이는 30mm로 한다.                                     

  5. 농약사용량은 화학농약을 대상으로 하여 성분량기준으로 작성하며, 총사용량은   정수로 표기하            

  고 단위면적당 사용량은 소수점 첫째자리까지 작성한다.                                                    

  6. 농약잔류량 조사결과는 유효측정농도 이상 검출된 농약성분명과 농도범위를    작성한다.                  

  7. 앞판의 문자표시 부분의 재질은 스테인리스 스틸을 기본으로 한다.                                       

별표 0001: 골프장의 농약사용 대장

[별지 제1호 서식] 

골프장의 농약사용 대장

※ EXCEL로 작성할 수 있음

┌─────┬────────┬──────┬────┬──────┬───┬─────┬───┐

│품목명    │                │농약등록번호│        │규 격       │      │유효성분량│      │

│(상표명)  │                │            │        │            │      │          │      │

├─────┼────────┼──────┼───┬┴──────┼───┼─────┼───┤

│농약 구분 │                │원산지      │      │적용병해      │      │작물명    │      │

├─────┼────┬───┼──────┼───┼───────┼───┴─────┴───┤

│날    짜  │입고량  │출고량│사용량      │재고량│사 용   내 역 │확       인(결 재)        │

│          │        │      │            │      │              ├───┬─────┬───┤

│          │        │      │            │      │              │담당자│O  장     │O  장 │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│　        │　      │　    │　          │      │              │　    │　        │　    │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│          │        │      │            │      │              │      │          │      │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│          │        │      │            │      │              │      │          │      │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│　        │　      │　    │　          │      │　            │　    │　        │　    │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│          │        │      │            │      │              │      │          │      │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│          │        │      │            │      │              │      │          │      │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│          │        │      │            │      │              │      │          │      │

├─────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼───┼─────┼───┤

│          │        │      │            │      │              │      │          │      │

└─────┴────┴───┴──────┴───┴───────┴───┴─────┴───┘

297㎜×210㎜[일반용지 60g/㎡(재활용품)]

1) 골프장 설치ㆍ운영 담당자가 작성하며, 구매 또는 골프장에서 직접 제조하는 농약(천연식품보호제 포함)별로 각각 작성

2) 방제업자 등 외부 위탁업체에서 해당 골프장에 사용한 것을 포함하여 작성

3) 엑셀로 작성해도 되나, 정기적(주간 또는 월간)으로 출력하여 확인(결재)을 받은 후 보관)

4) "상품명"은 농약에 표기된 제조사의 상품명을 기재하고, 골프장에서 직접 제조한 천연식물보호제의 경우는 "직접제조천연식물보호제"로 표기

5) "농약등록번호"는 농약상품에 표기되어 있는 등록번호를 기재 (예 : ‘1-살충-477’, ‘51-살균-87’ 등)

6) "규격"은 농약에 표기된 포장 최소단위의 무게 또는 부피를 기재 (예 : ‘1 kg’, ‘1L’ 등)

7) "유효성분"은 농약의 유효성분을 기재 (예 : ‘flutolanil’ 등)

8) "농약 구분"은 농약의 종류를 기재 (예 : ‘살충제’, ‘제초제’, ‘살균제’)

9) "원산지"는 농약상품에 표기되어 있는 원산지를 기재 (수입 또는 국내 중 선택)

10) "적용병해"는 농약에 적용되는 병해충을 기재 (예 : ‘갈색잎마름병’, ‘라이족토니아마름병’ 등)

11) "작물명"은 농약을 사용한 작물을 기재(예 : ‘잔디’, ‘소나무’ 등)

12) "사용내역"은 농약을 사용한 골프코스의 홀과 지역 등을 자세히 작성

13) "확인"은 골프장 농약사용에 대해 책임지는 부서 및 총괄 책임자까지 해당별 결재선에 따라 확인(결재) 받는다. (예: 이름(인))

별표 0002: 골프장 현황

[별지 제2호 서식] 

골프장 현황

 ?? 골프장 일반현황

┌──┬────┬────┬────┬──┬───┬───┬────┬────┬────┬──┐

│시도│골프장명│등록일자│개장일자│형태│회사명│소재지│홈페이지│운영상태│전화번호│홀수│

├──┼────┼────┼────┼──┼───┼───┼────┼────┼────┼──┤

│    │        │        │        │    │      │      │        │        │        │    │

├──┼────┼────┼────┼──┼───┼───┼────┼────┼────┼──┤

│    │        │        │        │    │      │      │        │        │        │    │

└──┴────┴────┴────┴──┴───┴───┴────┴────┴────┴──┘

 ?? 골프장 면적현황

┌───┬──────────────┬───────────────────────────────┬──────────────────────────────────────────────────────┬──┐

│코스  │골프장 면적 총괄(㎡)        │농약 사용면적(㎡)                                             │농약 미사용면적(㎡)                                                                                         │비고│

│총길이├───┬────┬─────┼──┬────┬──┬────┬──┬────┬────┬──┼──┬───┬──┬───┬─────┬────┬───┬───┬────┬───┬───┬───┬────┤    │

│(m)   │총면적│농약    │농약      │소계│티      │그린│훼어웨이│러프│조성녹지│연습그린│기타│소계│원형보│벙커│저류지│카트 도로 │티하우스│기타  │클럽  │진입도로│주차장│저류지│배수지│기타시설│    │

│      │      │사용면적│미사용면적│ⓒ  │그라운드│    │        │    │        │        │    │ⓓ  │전지역│    │      │          │        │시설물│하우스│        │      │      │      │        │    │

│      │      │ⓐ      │ⓑ        │    │        │    │        │    │        │        │    │    │      │    │      │          │        │      │      │        │      │      │      │        │    │

├───┼───┼────┼─────┼──┼────┼──┼────┼──┼────┼────┼──┼──┼───┼──┼───┼─────┼────┼───┼───┼────┼───┼───┼───┼────┼──┤

│      │      │        │          │    │        │    │        │    │        │        │    │    │      │    │      │          │        │      │      │        │      │      │      │        │    │

├───┼───┼────┼─────┼──┼────┼──┼────┼──┼────┼────┼──┼──┼───┼──┼───┼─────┼────┼───┼───┼────┼───┼───┼───┼────┼──┤

│      │      │        │          │    │        │    │        │    │        │        │    │    │      │    │      │          │        │      │      │        │      │      │      │        │    │

└───┴───┴────┴─────┴──┴────┴──┴────┴──┴────┴────┴──┴──┴───┴──┴───┴─────┴────┴───┴───┴────┴───┴───┴───┴────┴──┘

※ EXCEL로 작성

297㎜×210㎜[일반용지 60g/㎡(재활용품)]

1) "?? 골프장일반현황"과 "?? 골프장 면적현황"은 같은 골프장을 순서대로 이어서 작성

2) 골프장 현황은 반드시 엑셀로 작성하여 제출 또는 전산입력하여 출력 후 보고

3) 같은 골프장에서 회원제 및 대중제를 운영하는 경우 각각 분리하여 작성

4) "운영상태"는 운영중, 폐업, 휴업 등 구분하여 작성

5) "형태"는 회원제, 대중제, 간이, 체력단련장, 기타 등으로 구분하여 작성

6) "농약 사용면적 ⓐ"는 "농약 사용면적 소계 ⓒ"를 기재

7) "농약 미사용면적 ⓑ"는 "농약 미사용면적 소계 ⓓ"를 기재

별표 0003: 골프장별 농약사용량 조사결과 (시장·군수·구청장)

[별지 제3호 서식]

골프장별 농약사용량 조사결과 (시장ㆍ군수ㆍ구청장)

┌──┬──┬────┬────┬───┬──────┬───┬───────┬──────┬──────┬───┬──────┬────┬────┐

│구분│시도│골프장명│소재지  │형태  │종류        │구분  │상표명        │농약등록번호│ 농약 제형ⓕ│원산지│총사용량(㎏)│적용병해│적용작물│

│    │    │        │        │ⓐ    │ⓑ          │ⓒ    │ⓓ            │ⓔ          │            │ⓖ    │ⓗ          │        │        │

├──┼──┼────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │○○○  │○○시  │대중제│소계 ( ⓘ개)│-     │              │            │-           │-     │            │        │        │

│    │    │        │○○동  │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │화학농약    │살충제│○○○        │            │액상수화제  │수입  │○○.○○   │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │천연식물    │살균제│○○○        │            │-           │국내  │○○.○○   │        │        │

│    │    │        │        │      │보호제      │      │              │            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │천연식물    │살충제│직접제조      │            │-           │국내  │○○.○○   │        │        │

│    │    │        │        │      │보호제      │      │천연식믈보호제│            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

├──┼──┼────┼────┼───┼──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │소계 ( ⓘ개)│-     │              │            │-           │-     │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

│    │    │        │        │      ├──────┼───┼───────┼──────┼──────┼───┼──────┼────┼────┤

│    │    │        │        │      │            │      │              │            │            │      │            │        │        │

└──┴──┴────┴────┴───┴──────┴───┴───────┴──────┴──────┴───┴──────┴────┴────┘

※ 토양지하수정보시스템(https://sgisin.nier.go.kr)에서 내려받은 EXCEL 양식으로 작성할 것

297㎜×210㎜[일반용지 60g/㎡(재활용품)]

1) 같은 골프장에서 회원제 및 대중제를 운영하는 경우 각각 분리하여 작성

2) "형태 ⓐ"은 회원제, 대중제, 간이, 체력단련장, 기타 등으로 구분하여 작성

3) "종류 ⓑ" 는 화학농약, 천연식물보호제로 구분하여 작성 

4) "구분ⓒ"은 농약의 종류를 기재 (예 : ‘살충제’, ‘제초제’, ‘살균제’)

5) "상표명 ⓓ"은 반드시 사용된 농약의 "상표명"을 작성하고 직접 제조한 천연식물보호제의 경우는 "직접제조천연식물보호제"으로 표기

6) "농약등록번호 ⓔ"는 농약상품에 표기되어 있는 등록번호를 기재 (예 : ‘1-살충-477’, ‘51-살균-87’ 등)

7) "농약제형 ⓕ"는 액상수화제, 혼합액제 등을 정확히 파악하여 기재하고 천연식물보호제의 경우는 "-"로 표기

    - 올바른 입력 예 : 액상수화제, 혼합액제

    - 틀린 입력 예 : 액상(액상수화제를 줄여서 입력), 혼액(혼합액제를 줄여서 입력)

8) "원산지 ⓖ"은 농약상품에 표기되어 있는 원산지를 기재 (예: 국내/수입 중 택일)

9) "총사용량 ⓗ"은 실물량 사용량을 기준으로 소수점 이하 2자리까지 기재  

10) "소계 (ⓘ개)"는 사용된 농약 총 개수를 기재하고, 농약 총사용량 합을 작성

별표 0004: 골프장별 농약사용량 조사결과 (시·도지사)

[별지 제4호서식]

골프장별 농약사용량 조사결과 (시ㆍ도지사)

┌──┬───┬────┬──┬───┬──┬──────────────┬─────────┬───────────────────┬───┐

│구분│시?도│골프장명│형태│소재지│홀수│골프장 면적(㎡)             │ 총 농약 사용량   │단위면적 당 농약사용량(kg/ha)         │비  고│

│    │      │        │    │      │    │                            │(kg)              ├─────────┬─────────┤      │

│    │      │        │    │      │    │                            │                  │전체면적 대비     │농약사용면적 대비 │      │

│    │      │        │    │      │    ├──┬─────┬─────┼────┬────┼────┬────┼────┬────┤      │

│    │      │        │    │      │    │ 계 │ 사용면적 │미사용면적│화학농약│천연식물│화학농약│천연식물│화학농약│천연식물│      │

│    │      │        │    │      │    │ⓐ  │ⓑ        │ⓒ        │ⓓ      │보호제  │ⓕ      │보호제  │ⓗ      │보호제  │      │

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │ⓔ      │        │ⓖ      │        │ⓘ      │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

├──┼───┼────┼──┼───┼──┼──┼─────┼─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┤

│    │      │        │    │      │    │    │          │          │        │        │        │        │        │        │      │

└──┴───┴────┴──┴───┴──┴──┴─────┴─────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴───┘

※ EXCEL로 작성할 수 있음

297㎜×210㎜[일반용지 60g/㎡(재활용품)]

1) "골프장 면적"은 ‘별지 2호’서식으로 보고된 골프장별 면적을 사용 (‘계’ⓐ = ⓑ+ⓒ)

2) "총 농약사용량" 중 화학농약"ⓓ"는 사용된 화학농약의 상표명으로 당해골프장에 사용된 총 유효성분량(kg), 천연식물보호제"ⓔ"는 사용된 천연식물보호제로 당해 골프장에 사용된 총량(kg)

3) 전체면적 대비 화학농약 사용량인 "ⓕ"는 화학농약 총 사용량인 "ⓓ"를 골프장 전체면적 "ⓐ"로 나눈 후, ha 단위로 환산한 값

 [ ⓕ = ⓓ / ⓐ × (1㎡/10,000ha) ]

4) 전체면적 대비 천연식물보호제 사용량인"ⓖ"는 천연식물보호제 총 사용량 "ⓔ"를 골프장 전체면적 "ⓐ"로 나눈 후, ha 단위로 환산한 값

 [ ⓖ = ⓔ/ ⓐ × (1㎡/10,000ha) ]

5) 농약 사용면적 대비 화학농약 사용량인 "ⓗ"는 화학농약 총 사용량인 "ⓓ"를 농약사용면적인 "ⓑ"로 나눈 후, ha 단위로 환산한 값

 [ ⓗ = ⓓ / ⓑ × (1㎡/10,000ha) ]

6) 전체면적 대비 천연식물보호제 사용량인 "ⓘ"는 천연식물보호제 총 사용량 "ⓔ"를 농약 사용면적체면적 "ⓑ"로 나눈 후, ha 단위로 환산한 값

 [ ⓖ = ⓔ/ ⓑ × (1㎡/10,000ha) ]

별표 0005: 골프장 농약잔류량 검사결과

[별지 제5호 서식]

골프장별 농약잔류량 검사결과

┌───┬────┬───┬──┬───────┬──┬──┬──────┬──────────────────┬────────────────┐

│시도  │골프장명│형태  │전체│소재지        │시료│시료│검사항목    │검출농도1)                          │농약 사용현황                   │

│      │        │      │홀수│              │채취│채취│            ├───────┬──────────┼────┬─────┬─────┤

│      │        │      │    │              │일자│홀  │            │토 양(mg/kg)  │수 질(mg/L)         │품목명3)│독성구분4)│농약 살포 │

│      │        │      │    │              │    │번호│            ├──┬────┼───┬──────┤        │          │시기5)    │

│      │        │      │    │              │    │    │            │그린│페어웨이│유출구│유출구 외2) │        │          │          │

├───┼────┼───┼──┼───────┼──┼──┼──────┼──┼────┼───┼──────┼────┼─────┼─────┤

│(예시)│○○○  │회원제│18  │○○시 ○○동 │5.30│5   │Benfuracarb │ND  │0.26    │ND    │ND          │벤즈(유)│고독성    │5.10      │

│○○도│        │      │    │△△번지      │    │    │            │    │        │      │            │        │          │          │

├───┼────┼───┼──┼───────┼──┼──┼──────┼──┼────┼───┼──────┼────┼─────┼─────┤

│(예시)│○○○  │회원제│18  │○○시 ○○동 │5.30│5   │Carbofuran  │ND  │0.12    │ND    │ND          │카보(입)│보통독성  │5.10      │

│○○도│        │      │    │△△번지      │    │    │            │    │        │      │            │        │          │          │

├───┼────┼───┼──┼───────┼──┼──┼──────┼──┼────┼───┼──────┼────┼─────┼─────┤

│(예시)│○○○  │대중제│9   │○○시 ○○동 │5.31│8   │Benfuracarb │ND  │0.26    │ND    │ND          │벤즈(유)│고독성    │5.10      │

│○○도│        │      │    │△△번지      │    │    │            │    │        │      │            │        │          │          │

├───┼────┼───┼──┼───────┼──┼──┼──────┼──┼────┼───┼──────┼────┼─────┼─────┤

│(예시)│○○○  │대중제│9   │○○시 ○○동 │5.31│8   │Carbofuran  │0.09│ND      │0.0013│ND          │카보(입)│보통독성  │5.10      │

│○○도│        │      │    │△△번지      │    │    │            │    │        │      │            │        │          │          │

├───┼────┼───┼──┼───────┼──┼──┼──────┼──┼────┼───┼──────┼────┼─────┼─────┤

│      │        │      │    │              │    │    │            │    │        │      │            │        │          │          │

├───┼────┼───┼──┼───────┼──┼──┼──────┼──┼────┼───┼──────┼────┼─────┼─────┤

│      │        │      │    │              │    │    │            │    │        │      │            │        │          │          │

└───┴────┴───┴──┴───────┴──┴──┴──────┴──┴────┴───┴──────┴────┴─────┴─────┘

※ 토양지하수정보시스템(https://sgisin.nier.go.kr)에서 내려받은 EXCEL 양식으로 작성할 것

297㎜×210㎜[일반용지 60g/㎡(재활용품)]

1) 검출농도는 소숫점 이하 토양은 둘째자리, 수질은 넷째자리까지 기재 (유효측정농도 토양ㆍ 0.01㎎/㎏, 수질 0.0005㎎/L)

2) 유출구 외는 유출구를 제외한 집수조 및 연못 등에서 시료를 채취한 경우 기재

3) 농약 품목(상표)명을 기재, 제형은 (  )안에 표기, 사용한 농약이 동일 유효성분(검출항목)일 경우 사용품목 모두 기재

4) 농약의 독성정도를 고독성, 보통독성, 저독성, 어독성 등급 등으로 구분 기재

5) 각 홀별로 시료채취시점에서 가장 최근에 농약을 살포한 일자 기재

별표 0006: 골프장 농약잔류량 평가결과

[별지 제6호 서식]

골프장 농약잔류량 평가결과

 ?? 골프장별 농약성분 검출결과

┌────┬────┬──────┬────────┬──────┬───────────┬────────────┐

│골프장명│시료채취│품목명      │검출농도(㎎/㎏) │사용량      │조치내역              │비 고                   │

│        │홀 번호 │(성분명)    │                │(실물량, ㎏)│                      │                        │

├────┼────┼──────┼────────┼──────┼───────────┼────────────┤

│○○○  │3       │지오릭스(유)│토양(그린) 0.12 │2.5         │행정처분              │※ 경과 등 세부사항 기재│

│(대중)  │        │(엔도설판)  │                │            │(일자, 과태료금액 등) │   (조치공문 사본 첨부) │

├────┼────┼──────┼────────┼──────┼───────────┼────────────┤

│:       │        │            │                │            │                      │                        │

│:       │        │            │                │            │                      │                        │

├────┼────┼──────┼────────┼──────┼───────────┼────────────┤

│:       │        │            │                │            │                      │                        │

│:       │        │            │                │            │                      │                        │

└────┴────┴──────┴────────┴──────┴───────────┴────────────┘

 ?? 적용대상농작물이외의 농약성분 검출결과

┌────┬────┬─────┬────────┬──────┬───────────┬────────────┐

│골프장명│시료채취│품목명    │검출농도(㎎/㎏) │사용량      │조치내역              │비 고                   │

│        │홀 번호 │          │                │(실물량, ㎏)│                      │                        │

├────┼────┼─────┼────────┼──────┼───────────┼────────────┤

│○○○  │5       │디코폴(유)│토양(그린) 0.52 │3.0         │행정처분              │※ 경과 등 세부사항 기재│

│(대중)  │        │(Dicofol) │                │            │(일자, 과태료금액 등) │   (조치공문 사본 첨부) │

├────┼────┼─────┼────────┼──────┼───────────┼────────────┤

│:       │        │          │                │            │                      │                        │

│:       │        │          │                │            │                      │                        │

├────┼────┼─────┼────────┼──────┼───────────┼────────────┤

│:       │        │          │                │            │                      │                        │

│:       │        │          │                │            │                      │                        │

└────┴────┴─────┴────────┴──────┴───────────┴────────────┘

 ?? 조사의견 및 운영 우수사례 발굴

 1) 농약 검사결과에 대한 종합의견

┌───────────────────────┬────┬─────────────────┬──────────────────────────┐

│구         분                                 │골프장명│골프장 업체측 의견                │조사자(검사자) 의견                                 │

├───────────────────────┼────┼─────────────────┼──────────────────────────┤

│맹?고독성 농약이 검출된 골프장1)             │        │※ 골프장 관리자 의견 등 기재     │※ 전년도에 맹?고독성 농약이 검출된 지점인 경우 검 │

│                                              │        │  (행정처분 의견진술서 사본 첨부) │사결과치 비교 등                                    │

├───────────────────────┼────┼─────────────────┼──────────────────────────┤

│적용대상농작물이외의 농약성분이 검출되거나, 농│        │※ 골프장 관리자 의견 등 기재     │※ 시료채취와 농약살포시기의 상관관계, 병충해       │

│약잔류량 검출농도가 높은 골프장2)             │        │                                  │발생으로 이한 다량의 농약살포, 기후여건 등 검출     │

│                                              │        │                                  │농도가 높게 나타날 수 있는 상황을 파악하여          │

│                                              │        │                                  │의견 기재                                           │

└───────────────────────┴────┴─────────────────┴──────────────────────────┘

 ※ 대상 : 1) 맹?고독성 농약을 사용한 전 골프장,  2) 토양, 수질 각 시료별로 잔류량 검출농도가 유효측정농도의 10배 이상으로 상위 2~3개 골프장

2) 골프장 운영 우수사례(※골프장별로 환경오염을 최소화하기 위해 조치한 사례 기재)

  - 골프장별로 병충해에 강한 잔디 식재(면적), 친환경 미생물제제 사용사례(사용량), 단위면적당 농약사용량이 매우 적게 사용한 골프장의 운영상 개선내용, 골프장 잔디 생육조건 강화를 위한 조치사항(시설개선 등)이 있는 경우 등(관련자료 첨부)


부칙

['부칙 이 고시는 발령한 날부터 시행한다.', '부칙 이 고시는 발령한 날부터 시행한다.', '부칙 이 고시는 발령한 날부터 시행한다.', '        부칙 이 고시는 공포한 날부터 시행한다. 다만. [별표1]의 기본항목 중 클로로탈로닐은 2024년1월1일부터 시행한다.']

부칙 공포정보: ['20130319', '20161230', '20190104', '20230331'] (공포번호: ['2014-37', '2016-265', '2019-6', '2023-61'])