mlsa-iai-msu-lab/ru_sci_bench_zho_cite_reranking huggingface dataset:
嗜水气单胞菌TaqMan实时PCR检测方法的建立

目的 建立嗜水气单胞菌TaqMan实时PCR实验室检测方法.方法 根据嗜水气单胞菌主要黏附素基因(aeromonas hydrophila major adhesion gene,ahe)的保守序列设计引物和TaqMan探针.引物选取200～700 nmol/L 6个浓度梯度,探针选取100～400 nmol/L 4个浓度梯度,以完全随机设计资料的方差分析分别优化引物和探针的浓度.以45株霍乱弧菌、20株副溶血弧菌、10株河流弧菌、4株拟态弧菌、5株创伤弧菌、1株溶藻弧菌、1株弗尼斯弧菌、5株沙门菌属细菌、10株志贺菌属细菌和2株类志贺邻单胞菌为对照,评价该方法的特异性.对所建立的方法进行菌液灵敏度检测和DNA灵敏度检测,并将嗜水气单胞菌人工污染健康人的粪便,实验室内评价该方法从粪便中检测嗜水气单胞菌的能力.结果  6组引物浓度所得的循环阈值(cycle threshold,Ct)分别为(x±s):20.69±0.33、20.72±0.21、20.81±0.12、20.74±0.12、20.51±0.16和20.69±0.11,选择上下游引物的浓度为200 nmol/L(F=1.33,P=0.28),4组探针浓度所得的Ct值分别为(x±s):20.56±0.08、20.82±0.05、20.82±0.11和20.9±0.09,选择探针的浓度为100 nmol/L(F=5.26,P=0.01).该方法DNA的榆测下限为100 fs/μl,纯菌液的检测下限为80 CFU/ml,粪便中嗜水气单胞菌的检测下限为8×10~3 CFU/ml,人工粪便标本增菌8 h后的检测下限为8 CFU/ml.该方法对其他细菌的染色体无扩增.结论 以aha基因为目标检测片段建立的嗜水气单胞菌实时PCR方法灵敏度高、特异度强,可用于纯菌和粪便标本中嗜水气单胞菌的快速检测.
体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向视网膜色素上皮细胞分化的可行性研究

目的 探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)向视网膜色素上皮(RPE)细胞分化的可行性.方法 采用贴壁筛选法分离、培养Brown-Norway(BN)rMSCs.将反复冻融制成的BN大鼠RPE细胞裂解液加入到rMSCs培养体系中,鉴定被诱导的细胞是否同时表达RPE细胞的特征性标记物细胞角蛋白(CK)与S-100.结果 经RPE细胞裂解液诱导的rMSCs生长速度减慢,细胞呈长梭形,周边有毛刺样突起.免疫印迹法和双重免疫荧光标记显示部分经诱导的细胞同时表达CK与S-100.流式细胞术显示14.1%的细胞能够同时表达CK与S-100.结论 rMSCs经RPE细胞裂解液诱导后能够向RPE细胞方向分化.
小剂量马法兰治疗中、高危骨髓增生异常综合征临床疗效观察

目的 观察小剂量马法兰治疗中、高危骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效和药物不良反应.方法 共有按MDS国际预后积分系统(IPSS)判断为中、高危组的30例初治患者入组.治疗方案为:马法兰2 mg,口服,每日1次,直至病程进展所致全血细胞减少加剧或骨髓原始细胞比例增高停药.达完全缓解(CR)或部分缓解(PR)者继续用药直至病情复发停药.结果 按2006年MDS 国际工作组(IWG)疗效修订标准判定,CR 9例(30.0%),PR 3例(10.0%),骨髓缓解(MCR)加血液学进步(HI)3例(10.0%),MCR 1例(3.3%),病情稳定4例(13.3%),治疗失败10例(33.3%).总有效率66.7%.骨髓增生活跃及以下组患者的CR+PR率(60.0%)和总有效率(80.0%)明显高于骨髓增生明显活跃及以上组(分别为0%和40%)(P值分别为0.002和0.045).中位随访时间为15.5(1～52)个月,中位生存时间为18个月,中位无复发生存时间为11个月.治疗过程中3例患者出现轻度骨髓抑制,1例因血小板输注无效导致脑出血而死亡,未见其他明显药物不良反应.结论 小剂量马法兰是治疗中、高危MDS患者的一种安全、有效的方法,并且可能更适用于骨髓增生低下的患者.
细胞穿透肽PEP-1介导人铜,锌-超氧化物歧化酶转导入大鼠离体心脏及其对缺血再灌注损伤的保护作用

目的 采用离体心脏灌注模型,研究细胞穿透肽PEP-1介导入铜,锌-超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD,SOD1)穿透心肌组织能力及其对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建的原核表达载体pET15b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,分别转化大肠杆菌,表达和纯化SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白.采用Langendorff灌流系统,大鼠离体心脏停灌30 min后复灌60 min建立缺血再灌注损伤模型.大鼠随机分为对照组,100μmol/L SOD1蛋白预处理组,25、50、100μmol/L PEP-1-SOD1蛋白预处理组.免疫荧光及Western blot检测PEP-1-SOD1的转导效果,超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测转导的目的 蛋白的SOD活性.测定心肌组织丙二醛(MDA)含量和复灌后15 min内冠状动脉流出液肌酸激酶(CK)活性.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,复灌60 min时红四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积.结果 免疫荧光及Western blot检测均显示PEP-1-SOD1以剂量依赖性方式转导入离体灌注的心肌组织内,SOD1蛋白预处理组心肌组织内未见到目的 蛋白.对照组,SOD1组和25、50、100 μmol/L PEP-1-SOD1处理组的SOD活性分别为(10.06±0.77),(10.59±0.71)和(32.29±1.42)、(43.16±1.16)、(55.14±1.59)U/mg蛋白,MDA含量分别为(1.48±0.19),(1.39±0.11)和(1.01±0.14)、(0.73±0.13)、(0.50±0.06)nmol/mg蛋白,CK活性分别为(1.73±0.58),(1.68±0.14)和(1.40±0.28)、(0.97±0.39)、(0.61±0.56)U/mg蛋白,心肌细胞凋亡率(AI)分别为(17.25±0.75)%,(16.63±1.07)%和(11.50±0.57)%、(6.50±0.63)%、(4.13±0.52)%,心肌梗死面积百分比分别为(55.13±2.18)%,(52.13±2.59)%和(33.88±2.06)%、(25.50±2.16)%、(15.38±1.14)%.与对照组和SOD1组比较,PEP-1-SOD13种剂量组的SOD活性、MDA含量、CK活性、心肌细胞凋亡率及心肌梗死面积百分比指标差异均有统计学意义(均P<0.01).说明PEP-1-SOD1蛋白预处理组SOD活性以剂量依赖性方式显著高于SOD1组,MDA含量、CK活性及心肌细胞凋亡率均明显低于SOD1组,心肌梗死面积小于SOD1组.结论 PEP-1肽介导SOD1蛋白能直接以天然活性的形式高效穿透进入离体心肌组织,转导的PEP-1-SOD1融合蛋白对心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用.
热和紫外线照射对丙型肝炎病毒JFH-1株灭活效果的研究

目的 应用HCV JFH-1株细胞培养系统,研究热和紫外线照射对HCV的灭活效果.方法 感染性滴度为2.5×10~4 FFU/ml的丙型肝炎病毒JFH-1株(HCV JFH-1 strain)原液,经56℃水浴或紫外线照射不同时间后,感染Huh7-25-CD81细胞系,应用间接免疫荧光法测定病毒感染性滴度的动态变化.若被感染的细胞经旨传3代后,用问接免疫荧光法检测为阴性,则判定病毒原液已被完全灭活.结果 感染性滴度为2.5×10~4 FFU/ml的HCV JFH-1株原液,经56℃水浴孵育10 min、20 min、30 min后,其细胞的感染性滴度分别降至1.6×10~3 FFU/ml、3.1×10~2 FFU/ml和3.3×10 FFU/ml;该HCV JFH-1株原液暴露于紫外灯下(波长253.7 nm,辐照强度≥60 μW/cm2)30 cm处照射15 s、30 s、45 s后,其细胞的感染性滴度分别降至1.0×10~3 FFU/ml、1.1×10~2 FFU/ml和2.7×10 FFU/ml.经56℃水浴孵育40 min或紫外灯下照射(波长253.7 nm,辐照强度≥60 μW/cm~2)1 min后,应用间接免疫荧光法检测为阴性,被感染的细胞经盲传3代后,间接免疫荧光法检测仍为阴性,证明该病毒液已被完全灭活.结论 HCV JFH-1株对热和紫外线照射较为敏感,56℃下40 min或紫外线照射(波长253.7 nm,辐照强度≥60 μW/cm~2,距离30 cm)1 min,可完全灭活HCV JFH-1株.
粉尘螨变应原第5组分基因克隆及分子特征分析

目的 获得粉尘螨变应原第5组分的编码基因(Der f5)并了解其分子特征.方法 用RNAiso试剂盒提取粉尘螨总RNA,根据GenBank已公布的Der f5核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增获得其编码基因,插入pMD19-T Simple载体进行序列测定和分析.结果 获得的Der f5基因与参考序列(GenBank AY283283)同源性达97.8%,含1个完整的开放阅读框架(ORF),由132个氨基酸组成,信号肽位于1～19AA、跨膜区域位于1～19AA,为细胞外疏水性蛋白.二级结构由延伸主链(1.52%)、无规则卷曲(7.58%)和α螺旋(90.91%)组成.具有酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点2个.其氨基酸序列与屋尘螨变应原第5组分相似率为78%.结论 成功克隆了 Der f5,并初步预测得其分子特征.
减重步行激活SCI大鼠腰膨大前角神经元效应的激光共聚焦镜检研究

目的 探讨减重平板步行训练(BWSTT)促进脊髓损伤(SCI)功能恢复的脊髓可塑性机制.方法 将84只成年雌性Wistar大鼠随意分为假手术组(Sham组,n=18)、胸髓横断模型组(SCI组,n=33)和减重平板步行训练组(BWSTT组,n=33),每组大鼠再随机分为7,15,45 d 3个亚组.建立大鼠胸髓完全横断模型,观察BWSTT对SCI大鼠后肢运动功能的影响.采用激光共聚焦镜检免疫荧光双标技术.研究SCI大鼠腰髓前角腹内侧区神经元酪氨酸蛋白激酶受体(EphA4)、囊泡膜谷氨酸转运体2(VGluT2)的表达,以及两者双标免疫阳性细胞比率的变化.结果 BWSTT组大鼠的后肢运动功能较SCI组大鼠明显改善.胸髓横断大鼠BWSTT后,腰髓前角腹内侧区EphA4和VGIuT2的表达以及EphA4/VGhT2双标免疫阳性细胞比率均显著增加.结论 BWSTT通过增强胸髓横断大鼠腰髓前角神经元EphA4/VGIuT2的表达,促进后肢运动功能的恢复.
个体化、量化康复训练对屈指肌腱吻合术后功能恢复的影响

目的 探讨个体化、量化康复训练对屈指肌腱吻合术后功能恢复的影响.方法 将180例屈指肌腱吻合术患者随机分为量化组及对照组.量化组患者在术中测量所吻合肌腱的最大抗张强度(F_(max)),术中安装训练支具,测量吻合术后肌腱两断端分离达到2 mm间隙时的橡皮筋长度及载荷,并加装保护装置,术后给予个体化、量化康复训练.对照组患者术中未进行肌腱最大抗张强度测定,术后康复训练时亦无特殊保护装置,由患者自行训练手指活动功能.为进一步研究康复训练频率对疗效的影响,将量化组及对照组分别细分为A,B两亚组,分别给予每天3次(A组)、每天6次(B组)康复训练.结果 经3个月训练后,发现量化组术后无肌腱断离者,对照组有6例患者发生肌腱再断离,量化组优良率达91.1%,对照组优良率为80.0%,组间差异具有统计学意义(P<0.05);进一步分析发现,量化B组患者康复疗效明显优于其它亚组,组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 个体化、量化康复训练能有效防止肌腱吻合术后患者肌腱再断离,且每天训练6次可能是较佳康复治疗频率.
磁共振弥散加权成像对肝癌肝移植术后肿瘤复发的监测

目的 探讨磁共振弥散加权成像(DWI)对肝癌肝移植术后肿瘤复发的监测及其应用价值.方法 对14例肝癌肝移植受者术后进行了监测,采用磁共振(MRI)扫描仪进行常规增强平扫,其中横断位T2加权序列应用FRFSE序列、脂肪抑制T2加权序列应用fs-FRFSE序列、DWI应用SE-EPI序列,对各扫描序列的图像信号进行了分析,判断有无肝癌复发,并分别记录和比较各扫描序列检出的肝癌病灶数.计算和比较各扫描序列间的噪声比(CNR)及肿瘤与肝脏实质间的表观弥散系数(ADC).结果 FRFSE、fs-FRIRFsE及SE-EPI序列对肿瘤的信号强度依次由弱到强,其确认检出病灶数分别为25、27和27个,CNR分别为(25.856±10.122)、(37.988±17.403)和(69.535±32.730),三组间CNR的比较,差异均有统计学意义(P<0.05).肿瘤和肝脏实质ADC分别为(0.00163±0.00078)mm~2/s和(0.00140±0.00029)mm~2/s,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05),ADC伪彩图中,肿瘤组织信号等于或低于肝脏实质,但色彩不均一.结论 DWI对肝癌肝移植术后肿瘤复发的监测敏感有效,有良好的应用价值.
劈离式肝移植10例临床分析

目的 评价劈离式肝移植(SLT)的临床效果,并探讨其可行性.方法 回顾性分析2006年6月至2007年1月问10例SLT的临床资料,观察受者术后肝功能恢复状况,受者及移植肝存活率以及血管并发症、胆管并发症的发生率.结果 10例受者术后中位随访时间16个月(1～23个月),受者及移植肝1年存活率均为70%(7/10).肝动脉血栓形成1例(10%),胆管并发症4例(40%).结论 尽管SLT仍存在较高的技术并发症发生率,但受者及移植物存活率与全肝移植相近.为解决供者短缺的严重问题,可在临床上选择性应用SLT.
术中超声在肝脏肿瘤手术中的应用价值

目的 探讨术中超声在肝脏肿瘤手术中的应用价值.方法 对45例肝脏肿瘤患者行术中超声检查(Logiq 500型超声仪,5～7.5 MHz线阵式术中专用探头),并与术前超声(PHILIPSHDI 5000型超声仪,3.5～5 MHz凸阵式探头)和增强CT检查对比分析,比较三者在病灶检出率方面的差异.结果 术中超声对直径≥1 cm病灶的检出率为100%,高于术前超声(89.80%)和CT(97.96%)的检出率,但差异无统计学意义(术前超声χ~(c2)=3.372,P>0.05,CT Fisher确切概率为P=1.00);术中超声对直径<1 cm病灶的检出率为90.70%,明显高于术前超声的检出率(62.79%)和CT检出率(74.42%)(术前超声χ~2=9.382,CT χ~2=3.957,均P<0.05);术中超声对病灶的总体检出率为95.65%,明显高于术前超声的检出率(77.17%)和CT检出率(86.96%)(术前超声χ~2=13.378,CT χ~2=4.381,均P<0.05),所有新发现的病灶都在术中超声的引导下行手术切除或无水乙醇瘤内注射.结论 与术前影像学检查相比,术中超声可以提高隐匿部位和微小病灶的检出率,有助于指导外科操作和手术治疗.
大鼠30%体积肝脏移植后肝脏再生的分子机制

目的 研究不同冷缺血损伤条件下,大鼠30%体积肝脏移植后肝脏再生的分子机制.方法 建立Lewis大鼠之间30%体积肝脏的移植模型.实验分为:冷缺血1、8、16 h组,每组25只.观察移植后实验各组肝脏移植物的存活时间和肝脏再生.在术后90 min、1、2、4和7 d收集标本,观察肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和信号转导转录活化蛋白3(sisnal transduction and activator of transcription 3,STAT3)的表达情况.免疫组化检测细胞周期素D1(cyclin D1)表达和肝细胞摄取溴脱氧尿核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)情况.分析比较实验各组移植术后1 d BrdU染色阳性的肝细胞数.结果 本组共有75只大鼠行30%体积肝脏移植.与冷缺血11 h相比,8、16 h冷缺血损伤诱导组移植术后早期大鼠30%体积肝脏移植物内TNF-α和IL-6表达均明显增加,STAT3活性亦明显增强.冷缺血8 h组Cyclin D1在胞浆和细胞核内均有表达.冷缺血16 h组的移植肝无明显的Cyclin D1表达.冷缺血1、8 h组的移植肝脏移植术后1 d摄取BrdU均明显增多.冷缺血1 h组BrdU染色阳性的肝细胞数明显高于冷缺血8 h组(t=6.14,P<0.05).结论 大鼠30%体积肝脏移植后可能通过TNF-α/IL-6/STAT3/cyclin D1/DNA合成的途径调节肝脏再生.重度冷缺血损伤后大鼠30%体积肝脏移植物功能衰竭的原因可能是肝细胞对肝脏再生启动信号无反应.
TSA对人肝癌细胞株E-cadherin启动子区甲基化及表达的影响

目的 探讨去乙酰化转移酶抑制剂TSA对人肝癌SMMC-7721细胞株E-cadherin基因(E-cad)启动子区甲基化及其表达的影响.方法 TSA(300 nm/L)处理人肝癌SMMC-7721细胞,MTT法、TUNEL染色法分别检测细胞生长抑制及凋亡情况,甲基化特异性的PCR(methylation-specificPCR,MSP)检测处理前后E-cad启动子区CpG岛甲基化状态;Western blot检测处理前后E-cad及DNMT3b表达水平的变化.结果 TSA能抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长并诱导其发生凋亡,与对照组相比,实验组细胞生长抑制率为21.85%,对照组细胞凋亡率为(4.69±0.56)%,实验组凋亡率为(14.94±0.91)%,与对照组相比,凋亡细胞明显增多(P=0.000).用药前E-cad启动子区CpG岛为甲基化状态,E-cad蛋白表达阴性.TSA处理后E-cad启动子区CpG岛发生脱甲基化,E-cad蛋白恢复表达.TSA亦导致DNMT3b的表达水平降低. 结论去乙酰化转移酶抑制剂TSA能抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长,并可诱导其发生凋亡,逆转E-cad基因启动子区的甲基化状态,并恢复该基因表达.TSA有可能通过DNMT3b发挥脱甲基化作用.
miRNA-21在人黑素瘤细胞系A375和M14中的表达及功能初探

目的 探讨miRNA-21在人黑素瘤细胞系A375、M14中的表达及对其细胞活性的影响.方法 采用荧光定量PCR法,以U6基因为内参,分别检测A375、M14细胞中miRNA-21的相对含量.利用Lipofectamine~(TM)2000脂质体将三种浓度的miRNA-21抑制剂分别转染这两种细胞系,用CCK-8检测转染前后实验组、对照组的细胞活性.用SPSS13.0统计软件分析细胞活性的变化情况.结果 荧光定量PCR法检测提示,miRNA-21在A375细胞系中的表达(2~(-△CT)值为1.2928±0.1509)明显高于M14细胞系(2-~(-△CT)值为0.1894±0.1803).miRNA-21抑制剂浓度为90 nmol/L时,A375、M14细胞活性受到极显著抑制,细胞活性(R值)分别为0.7362±0.1662、0.7295±0.1478;当浓度为180 nmol/L、270 nmol/L时,A375细胞活性显著下降,R值分别为0.7248±0.3204、0.6767±0.2998,而M14细胞活性无显著变化.结论 miRNA-21在A375、M14两种人黑素瘤细胞系中均有不同程度的表达.miRNA-21在A375、M14细胞系中可以促进细胞增殖,可能下调了某些肿瘤抑制因子而起到癌基因样作用.
外用原花青素对皮肤急性光损伤日晒伤细胞及p53蛋白表达的影响

目的 评估外用葡萄籽提取物原花青素对急性光损伤的日晒伤细胞及p53蛋白表达的影响.方法 实验设计正常皮肤组、单纯2MED照射组、基质+2MED照射组、含葡萄籽提取物原花青素样品外用+2MED照射组,连续3天相同方法处理后24 h对皮肤取材,进行HE染色和p53免疫组化染色.结果 含葡萄籽提取物原花青素样品外用+2MED照射组的日晒伤细胞数与单纯接受紫外线照射的皮肤相比.差异有统计学意义(P<0.01).含葡萄籽提取物原花青素样品外用+2MED照射组的p53蛋白阳性细胞数与单纯接受紫外线照射的皮肤相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 葡萄籽提取物原花青素外用对紫外线造成的急性光损伤具有较好的防护作用,可作为一种天然的防晒成分加以开发.
慢性湿疹患者皮损IL-18的表达及意义

目的 探讨IL-18在慢性湿疹发病中的作用.方法 采用RT-PCR方法测定慢性湿疹患者皮损中IL-18、IFN-γmRNA表达水平.ELISA方法测定血清中IL-18、IFN-γ蛋白水平.用EASI标准对慢性湿疹患者病情进行评分.结果 慢性湿疹患者皮损和健康对照组皮肤组织IL-18 mRNA分别为(1.04±0.29)pg/mL、(0.52±0.15)pg/mL,IFN-γmRNA分别为(0.96±0.34)pg/mL、(0.47±0.12)pg/mL.慢性湿疹患者皮损中IL-18 mRNA、IFN-γmRNA高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),二者与慢性湿疹病情评分呈正相关.慢性湿疹患者和健康对照血清中IL-18蛋白分别为(475.8±59.4)pg/mL、(123.6±29.5)pg/mL,IFN-γ蛋白水平分别为(10.1±7.0)pg/mL、(11.1±3.4)pg/mL.血清中IL-18蛋白水平高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),IFN-γ蛋白水平低于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.01),二者与慢性湿疹病情评分无明显相关性.结论 IL-18可能参与慢性湿疹的发病过程,在皮损局部,可能与其诱导产生IFN-γ等Th1型细胞因子,介导超敏反应有关.
长脉冲可调脉宽Nd:YAG激光治疗毛细血管瘤124例

目的 探讨长脉冲可调脉宽Nd:YAG激光治疗毛细血管瘤的疗效及影响因素.方法 长脉冲可调脉宽Nd:YAG激光治疗毛细血管瘤患者124例,根据皮损面积、颜色、深浅选择参数,并根据即刻反应调整参数.治疗间隔1个月.结果 135个皮损的治愈率为74.07%,有效率为90.37%.各因素对疗效的影响:皮损面积越小,有效率越高(P<0.01),部位及皮损厚度的不同对疗效无影响(均为P>0.05).不良反应:术后水疱发生率为8.89%,萎缩性瘢痕发生率为2.96%.结论 长脉冲可调脉宽Nd:YAG激光治疗毛细血管瘤效果好,不良反应小,是治疗毛细血管瘤的有效方法之一.
层积前后肉苁蓉种子成分的红外光谱分析

采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR),分析研究肉苁蓉种子不同部位及其在层积处理后的光谱特征和成分差异.结果显示,肉苁蓉种子成分组成丰富,同时存在蛋白质、脂类和碳水化合物的特征吸收峰,并且推测含有果胶质和芳香类化合物.肉苁蓉种皮和种仁的成分差异很大,2926、1746、1161、721cm~(-1)处一系列强峰说明种仁中的油脂类成分含量非常高,而种皮中1054cm~(-1)处碳水化合物和果胶质类的特征吸收峰最强.经层积处理后肉苁蓉种皮的萌发抑制物质所在的吸收峰区域变化显著,而种仁中的脂类减少,可溶性的蛋白质和糖类成分增加.
霍山产3种药用石斛及其杂交优势种的ISSR-PCR分子标记鉴别

目的 :利用ISSR分子标记技术对安徽霍山产3种药用石斛及其杂交优势种进行鉴别.方法:优化ISSR-PCR反应体系:引物\[(AC)_8CT]0.5 μM,Mg~(2+) 2.0m M,dNTP 200 μM,Taq 1 U/20 μl,筛选出RP值高的引物,建立ISSR分子标记指纹图谱.结果:根据ISSR分子标记指纹图谱可以鉴别霍山产3种药用石斛及其杂交优势种.结论:ISSR分子标记技术可用于霍山产3种药用石斛及其杂交优势种鉴别,且简单、经济、重现性好.
毛竹种子萌发过程中生理生化特性变化的研究

以毛竹种子为材料,研究测定了种子萌发过程中部分生理指标的动态变化.结果表明:种子萌发期间,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性整体都表现出逐渐升高的趋势;丙二醛(MDA)含量呈逐渐下降趋势;可溶性糖含量先升高再降低;可溶性蛋白含量呈总体上升趋势.
成人Ph~+急性淋巴细胞白血病不同BCR-ABL转录本特征及预后比较

目的 比较成人Ph~+急性淋巴细胞白血病(ALL)不同融合基因转录本临床特征的差异,并探讨其与预后的关系.方法 回顾性分析1996年1月至2007年12月我院诊断为Ph~+ALL患者(年龄≥15岁)的资料,比较两个BCR-ABL转录本组间的临床特征,探讨两组患者预后的差异.结果 (1)106例患者中位年龄34岁,中位白细胞数28.5×10~9/L.p190组67例,p210组35例,p210组较p190组中位年龄偏大(40岁、31岁,P=0.002),初诊血小板数高(49.5×10~9/L、31.5×10~9/L,P=0.012),中、重度脾大的发生率高(48.6%、25.4%,P=0.019).(2)两组患者完全缓解(CR)率分别为92.2%(59/64)和93.9%(31/33).(3)p190组中位总生存(OS)和中位无复发生存(RFS)分别为13个月和10个月;p210组中位OS和RFS分别为15个月和10个月.两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 成人Ph~+ALL中BCR-ABL以p190表达为主;p210患者较p190具有年龄偏大,初诊血小板数偏高,中、重度脾大发生率高的特点;两组在CR率、RFS和OS上无明显差异.
胰淀素对大鼠胰岛β细胞电压门控L-型钙通道的影响

目的 观察胰淀素对大鼠胰岛β细胞电压门控L-型钙通道的影响.方法 用全细胞膜片钳技术观察胰淀素作用前后胰岛β细胞电压门控L-型钙通道门控特性、电流变化.结果 在葡萄糖5.5 mmol/L条件下,大鼠胰岛β细胞L-型钙通道电流约在-40 mV激活,+20 mV左右达高峰,峰值约为-120 pA,胰岛素分泌量为(0.76±0.12)μg/L;16.7 mmol/L葡萄糖刺激下峰电流电压左移、峰电流达-140 pA左右,胰岛素分泌量为(1.78±0.13)μg/L.用0.5、1.0、5.0、10.0μmol/L浓度胰淀素分别孵育胰岛β细胞,在5.5、16.7 mmoL/L葡萄糖条件下,0.5、1.0μmol/L胰淀素浓度的峰电位激活电压、电流、胰岛素分泌最与对照组相比,差异均无统计学意义,在5.5 mol/L葡萄糖条件下,5.0、10.0μmol/L胰淀素浓度的激活电雎增加为-30 mV,峰电流分别减小至-80 pA、-60 pA左右,胰岛素分泌量分别降低至(0.49±0.11)、(0.36±0.12)μg/L;在16.7 mmol/L葡萄糖条件下,激活电压由-40 mV增加到-30 mV,峰电流分别减小至-80 pA、-40 pA,胰岛素分泌量分别降低至(1.20±0.13)、(0.89±0.14)μg/L,与对照组相比差异具有统计学意义.结论 葡萄糖刺激胰岛β细胞电压门控L-型钙通道开放与胰岛素分泌同步,胰淀素抑制胰岛β细胞电压门控L-型钙通道开放和抑制胰岛素分泌作用同步并与其作用浓度正相关.
DNA修复基因多态性与非肌层浸润性膀胱癌易感性的相关性

目的 探讨上海地区汉族人群中DNA修复基因多态性与非肌层浸润性膀胱癌遗传易感性的关系. 方法 采用Taqman探针实时荧光定量PCR技术、病例对照研究方法,采集研究对象外周静脉血,检测94例病理证实原发非肌层浸润性膀胱癌患者和304例非肿瘤对照者的3个DNA修复基因(XPC,XPG,XRCC1)中的3个单核苷酸多态性位点.应用非条件Logistic回归模型,调整混杂因素后,分析各基因型与非肌层浸润性膀胱癌发生的关系以及与肿瘤临床病理特征之间的关系. 结果 膀胱癌组的XPC 939 Lys/Gln和XPC 939Gln/Gln基因型频率(70.0%,63/90)显著高于对照组(60.9%,185/304),XPG 1104 Asp/His和XPG 1104 His/His基因型频率(79.2%,57/72)亦高于对照组(73.0%,203/278).调整性别、年龄、吸烟等因素后,XPC 939 Lys/Gln和XPC939Gln/Gln基因型频率在膀胱癌患者中明显增高(校正OR为1.89,95%CI 1.14～3.23,P=0.02);XPG 1104 Asp/His和XPG 1104 His/His基因型频率在膀胱癌患者中轻度增高(校正OR为1.07,95%CI 0.86～1.87,P=0.048).XRCC1 Arg399Gln多态性与膀胱癌无关性(校正OR为1.15,95%CI 0.55～2.40,p=0.27).XPC和XPG多态性与肿瘤临床病理特征之间均无相关性(P>0.05).结论 XPC Lys939Gln和XPG Asp1104His基因多态性与上海地区汉族人群非肌层浸润性膀胱癌易感性有关.
von Hippel-Lindau病肾癌的诊治特点分析

目的 总结von Hippel-Lindau(VHL)病肾癌的诊治经验. 方法  VHL肾癌患者28例.男16例,女12例.平均年龄45岁.双肾癌15例(同时11例、异时4例),单侧肾癌13例.行VHL基因检测25例.行保留肾单位手术或肾癌根治术24例,观察等待2例,保守治疗2例.结果 25例受检者均有VHL基因胚系突变,其中无症状患者14例.9例患者中有29个实性肿瘤曾被观察,平均44(12～86)个月,肿瘤平均生长速度0.531 cm/年;观察结束时,19个(65.5%)肿瘤生长>3 cm,仅1个肿瘤转移.24例手术切除实性肿瘤87个,其中肿瘤剜除术62个(71.3%)、肾下极切除1个、根治性肾切除术24个.术后病理报告24例均为肾透明细胞癌.TNM分期T_(1a)8例、T_(1b)7例、T_2 8例、T_3 1例.肿瘤86个,Fuhrman分级Ⅰ级73个、Ⅱ级12个、Ⅲ级1个,钙化结节1个.28例患者平均随访50(5～237)个月,存活26例,死亡2例,肿瘤局部复发4例. 结论 基因检测可早期发现无症状VHL患者;VHL病肾癌多生长缓慢,>3 cm的肿瘤多数不发生转移,可随访观察;保留肾单位手术是治疗VHL病肾癌安全有效的方法.
~(131)I-cRGD环肽对荷黑色素瘤小鼠的靶向治疗作用

目的 用~(131)I标记环精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(cRGD)肽-探讨~(131)I-cRGD对荷黑色素瘤小鼠模型瘤体生长的双重抑制作用.方法 应用氯胺T法对cRGD进行~(131)I标记.建立荷黑色素瘤B16株小鼠模型,将20只荷瘤小鼠按完全随机化法分为4组,每组5只.即实验(~(131)I-cRGD)组、cRGD对照组、~(131)I-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(cGGG)对照组和空白对照(PBS)组.分别经尾静脉注射相应药物,观察各组倚瘤小鼠肿瘤体积和质量的变化,利用单因素方差分析比较各组之间的差异.结果 ~(131)I-cRGD的标记率和放化纯分别达到(89.14±4.57)%及(99.14±0.72)%.治疗第2l天时.各组与PBS组肿瘤体积相比.抑瘤率分别为64.92%(~(131)I-cRGD组)、37.70%(cRGD组)及24.78%(~(131)I-cGGG组);治疗第28天时,处死各组小鼠,其瘤质量(含治疗第21～28天自然死亡的4只小鼠)分别为~(131)I-cRGD组(6.48±5.19)g、cRGD组(10.81±6.25)g、~(131)I-cGGG组(14.21±5.91)g、PBS组(18.88±7.59)g(F=3.479,P<0.05),~(131)I-cRGD组与PBS组之间差异有统计学意义(t=3.12,P<0.05).各组与PBS组肿瘤质量相比,抑瘤率分别为65.72%(~(131)I-cRGD组)、42.76%(cRGD组)及24.77%(~(131)I-cGGG组).治疗第28天时,各组小鼠净体质量(净体质量=小鼠体质量-瘤质量,含治疗第2l～28天死亡的4只小鼠)分别为(29.12±8.66)g(~(131)I-cRGD组)、(25.89±6.49)g(cRGD组)、(24.29±2.97)g(~(131)I-cGGG组)、(20.92±5.95)g(PBS组).差异尤统计学意义(F=1.444,P>0.05).结论 ~(131)I-cRGD能抑制荷黑色素瘤小鼠肿瘤的生长,对黑色素瘤治疗具有潜在的价值.
系统性红斑狼疮合并中枢神经系统感染的临床特点分析

目的 分析系统性红斑狼疮(SLE)合并中枢神经系统(CNS)感染的临床特点及相关危险因素.方法 对18例诊断为SLE合并CNS感染的患者和随机抽取的36例SLE患者的临床资料进行回顾性分析.结果 CNS感染组与对照组在大剂量激素冲击(22%与3%,P<0.05),1年内日平均激素用量[(35±18)mg/d与(24±17)mg/d,P<0.05],外周血白细胞[(4.4±3.4)×10~9/L与(6.7±2.9)×10~9/L,P<0.05]、淋巴细胞计数[(0.7±0.6)×10~9/L与(1.5±0.7)×10~9/L,P<0.01]和临床转归(病死率22%与0,P<0.05)方面的差异有统计学意义.结论 SLE患者合并CNS感染的临床表现不典型.大剂量激素冲击治疗,日平均激素剂量大以及外周血白细胞、淋巴细胞减少是SLE患者发生CNS感染的危险因素.
中药单体丹皮酚治疗胶原诱导性关节炎的机制初探

目的 观察中药丹皮酚对胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用,并初步探讨其作用机制.方法 以胶原诱导法构建关节炎小鼠模型,将成功造模的小鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)阴性对照组、甲氨蝶呤(MTX)阳性对照组和丹皮酚组,分别给予相应处理,观察丹皮酚对CIA的临床评分、血清细胞因子、Th17及自身抗体滴度的影响.结果 丹皮酚能明显降低关节炎分值(2.36±044,P<0.01),抑制Th1型炎性细胞因子白细胞介素(IL)-12(463±56,P<0.05)、肿瘤坏死因子(TNF)-α(248±66,P<0.01)、干扰素(IFN)-γ(325±40,P<0.05)、IL-6(282±43,P<0.01)等的产生,促进Th2型细胞因子IL-4(1411±683,P<0.01)和IL-10(325±35,P<0.05)分泌,下调脾脏细胞中Th17丰度(1.73%,P<0.05),降低血清抗Ⅱ型胶原自身抗体含量(A值=0.064,P<0.01).结论 丹皮酚对CIA具有良好的治疗效果,为研发治疗人类类风湿关节炎药物提供一条新思路.
干细胞因子在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及意义

目的 探讨干细胞因子(SCF)在狼疮肾炎(LN)患者肾组织中的表达及其与狼疮活动、肾损害有关指标的关系.方法 采用原位杂交和免疫组织化学技术,分别在基因和蛋白质水平检测[34例LN,16例慢性肾小球肾炎(CGN),8名健康对照]肾组织中SCF及其受体c-kit(CD117)的表达,同时检测肥大细胞、巨噬细胞及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞的浸润情况.计算狼疮肾组织活动指数和慢性指数得分及肾间质损害程度.结果 ①LN及CGN肾组织中SCF的表达及肥大细胞较对照组明显增加(t=6.03～14.25,P<0.01).间质损害程度相似的LN与CGN相比较,肾间质SCF、肥大细胞差异无统计学意义.②SCF与肥大细胞、巨噬细胞、α-SMA及临床指标的相关性:相应部位SCF的表达、α-SMA的表达、肥大细胞、巨噬细胞的浸润数量呈显著正相关(r=0.47～0.86,P<0.01).SCF的表达、α-SMA的表达及巨噬细胞数量与肾病理活动性指数、慢性化指数、肾间质损害程度、尿蛋白定量均呈显著正相关(r=0.34～0.93,P<0.05或0.01),与肌酐清除率(Ccr)呈明显负相关(r=-0.39～0.61,P<0.01).SCF及巨噬细胞与抗dsDNA滴度、补体C3、SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分也有显著相关性.肥大细胞数与LN慢性指数特别是肾间质损害程度呈明显正相关(r=0.86,r=0.93,P<0.01)与Ccr呈明显负相关(r=-0.56,P<0.01).与LN活动指标无相关性.结论 SCF在LN肾组织呈广泛表达,其表达量与多种炎症细胞、肾脏固有细胞、肾功能、尿蛋白、疾病活动性及严重程度等密切相关,提示SCF可能是LN病理过程中一个关键的全程参与者.
抗苗勒管激素对卵巢黄素化颗粒细胞中芳香酶表达的影响

目的 探讨抗苗勒管激素(AMH)对卵巢黄素化颗粒细胞激素分泌和芳香酶P450mRNA表达的影响.方法 采集2006年6-12月在中山大学附属第二医院进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的10例不孕患者的卵巢黄素化颗粒细胞进行原代培养,按照加入AMH浓度的不同,将颗粒细胞分为A、B、C、D、E组及睾酮对照组、空白对照组,A～E组分别加入1、5、10、20、50μg/L的AMH及1×10~(-7)mol/L睾酮,睾酮对照组加入1×10~(-7)mol/L睾酮,空白对照组仅加入培养基.于培养24、48、72 h时分别检测各组细胞中的雌二醇水平;培养72 h后各组均进行细胞计数,并采用RT-PCR技术检测B、C、D、 E组及睾酮对照组细胞中芳香酶P450 Mrna的表达水平.结果 (1)培养24、48、72 h后颗粒细胞中的雌二醇水平,A组分别为(8.529±0.381)×10~4、(10.977±0.436)x 10~4、(13.309±0.506)×10~4pmol/L,B组分别为(7.027±0.276)×10~4、(9.167±0.300)×10~4、(10.794±0.555)×10~4 pmo/L,C组分别为(6.039±0.226)×10~4、(7.585±0.548)×10~4、(8.797±0.518)×10~4pmol/L,D组分别为(5.118±0.460)×10~4、(5.716±0.496)×10~4(6.205±0.667)x10~4pmol/L,E组分别为(4.932±0.148)×10~4(5.323±0.184)×10~4(5.629±0.212)x 10~4pmol/L,各组分别与空白对照组[分别为(0.001±0.001)×10~4(0.006±0.003)×10~4(0.029±0.011)×10~4pmol/L]比较,差异均有统计学意义(P<0.01);B、C、D、E组分别与睾酮对照组[分别为(8.418±0.569)×10~4(10.841±0.689)×10~4(13.301±0.637)×10~4pmol/L]比较,差异也均有统计学意义(P<0.01);B组分别与C、D、E组比较,C组分别与D、E组比较,差异也均有统计学意义(P<0.01);D组与E组之间比较,差异无统计学意义(P40.05).A、B、C、D、E组及睾酮对照组培养24 h后颗粒细胞中的雌二醇水平,分别与培养48、72 h比较,差异均有统计学意义(P<0.01);培养48 h后的雌二醇水平与培养72 h比较,差异也均有统计学意义(P<0.01).空白对照组培养24、48、72 h后的雌二醇水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)培养72 h后,B、C、 D、 E组颗粒细胞中芳香酶P450 Mrna的表达水平分别为0.6148±0.0046、0.5156±0.0012、0.4698±0.0027、0.4282±0.0017,分别与睾酮对照组(0.8224±0.0021)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);B组分别与C、D、E组比较,C组分别与D、E组比较,差异也有统计学意义(P<0.01);D组与E组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论AMH可能通过在卵巢局部抑制芳香酶活性而影响颗粒细胞的雌激素合成过程,促使卵泡内局部高雄激素环境的形成.
老年髋关节骨折手术治疗死亡率分析

目的 总结老年髋关节骨折手术治疗的术后死亡率,探讨术后患者死亡的原因. 方法 对1999年3月至2008年1月得到随访的349例老年(60～98岁)髋关节骨折手术治疗患者进行回顾性研究,总结总体死亡率和术后1年内死亡率,分析其构成特点及术后患者死亡的原因. 结果 手术治疗老年髋关节骨折术后死亡率为8.9%(31/349),术后1年内死亡率为5.4%(19/349).围手术期死亡3例,随访期内死亡28例.死亡原因依次为心血管事件(7例)、呼吸功能衰竭(7例)、慢性疾病引起的多器官功能衰竭(5例)、肿瘤(5例)、脑血管疾病(2例)、肝硬化(2例)、感染中毒性休克(1例)、脑外伤(1例),另1例原因不详.统计结果 显示年龄、性别是影响死亡率的主要因素,股骨近端防旋髓内钉内固定患者死亡率(1.8%)低于股骨近端髓内钉固定患者(17.8%),差异有统计学意义(χ~2=9.407,P=0.006);女性患者的股骨颈骨折发生率(59.4%)明显高于男性(41.6%),差异有统计学意义(χ~2=10.040,P=0.006). 结论 与相关文献比较,手术治疗老年髋关节骨折能够获得较低的死亡率.完善术前准备,选择微创的手术方法 有助于降低死亡率.
靶向血管内皮生长因子C短发夹式RNA对人乳腺癌MCF-7细胞生物学特性的影响

目的 研究重组质粒表达载体介导的短发夹式RNA(shRNA)对乳腺癌MCF-7细胞株中血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 脂质体介导重组质粒pSIREN-VEGF-C转染乳腺癌MCF-7细胞株,嘌呤酶素筛选阳性克隆;荧光定量PCR及Western blot检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C基因的表达;MTT法及Transwell体外侵袭实验检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞的增殖及侵袭能力.结果 转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%(P<0.05);MTT法和 Transwell体外侵袭实验显示,与阴性质粒组和空白对照组比较,转染重组质粒后各时间段乳腺癌MCF-7细胞增殖均明显受抑制(P<0.05),同时穿膜的肿瘤细胞数也明显减少[(29.0±1.9)个与(59.0±2.1)个和(61.0±2.2)个相比,P<0.05].结论 表达VEGF-C shRNA的重组质粒载体pSIREN-VEGF-C在乳腺癌MCF-7细胞中能高效、特异地发挥靶基因沉默作用,并对乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力有显著抑制作用.
荧光标记肿瘤转移体内模型的建立

目的 建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值.方法 人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养,转染pEGFP-N1质粒,24h检测转染效率,用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP.分别体内移植于BALB/c-nn裸鼠和C57BL/6J小鼠,观察成瘤潜伏期,绘制体内生长曲线,利用活体荧光成像系统活体连续观察GFP在体内的表达,观察肺部和淋巴结的转移情况,计算转移率.免疫组织化学检测与转移相关的分子CD44和E-cadherin在移植瘤中的表达.结果  MGC-803细胞和U14细胞pEGFP-N1转染24 h后的转染效率分别为30%和60%.获得了GFP(+)的单克隆MGC-803-GFP细胞株和U14-GFP细胞株.MGC-803-GFP在BALB/c-nu裸鼠和U14-GFP在C57BL/6J小鼠移植成瘤的潜伏期分别是3～5 d和2～4 d,成瘤率均为100%.利用活体荧光成像系统连续观察,可以清楚直观地观察表达GFP的MGC-803-GFP移植瘤在体内的生长,接种后第60天处死全部荷瘤鼠,解剖后仅有1只可见同侧腋窝下淋巴结的转移.接种U14-GFP后,分别在第28、37和52天观察了荷瘤小鼠肿瘤转移的发展过程.在U14-GFP原发瘤体积达到≥5 cm~3时,肺部和淋巴结转移率分别为67%和100%.在MGC-803-GFP和U14-GFP的移植瘤中都可以检测到CD44的表达,而无E-cadherin的表达.结论 成功建立了表达绿色荧光蛋白单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP,体内移植建立了荧光标记的肿瘤转移模型.该模型可用于可视化肿瘤体内的研究.
BJ46a基因在昆虫细胞的转染、蛋白表达及超微结构观察

目的 研究蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a在杆状病毒表达系统的表达及宿主细胞Sf9超微结构的变化.方法 将构建的杆状病毒重组穿梭载体Bacmid BJ46a,经Cellfectin脂质体介导转染Sf9昆虫细胞,获重组杆状病毒颗粒;以高滴度病毒感染Sf9昆虫细胞,行Western blot观察BJ46a融合蛋白的表达.在病毒扩增、蛋白表达过程应用透射电镜和超薄切片技术观察Sf9细胞超微结构的变化.结果 Western blot分析表明:在转染病毒的Sf9细胞出现BJ46a融合蛋白表达条带.电镜观察表明:Sf9细胞在病毒扩增过程,细胞核增大,病毒发生基质形成,杆状病毒在其周围装配.蛋白表达期间,杆状病毒量剧增,细胞核内外存在大量丝状纤维.结论 BJ46a基因可在杆状病毒表达系统成功表达,并伴随着宿主细胞超微结构的显著变化,其结果 为杆状病毒表达系统的研究奠定坚实的基础.
甘珀酸干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 观察缝隙连接阻断剂甘珀酸对局灶性脑缺血/再灌注损伤的影响.方法 采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO), 将动物随机分为脑缺血60min再灌注(MCAO)组 ,脑缺血再灌注加甘珀酸干预(MCAO+CBX)组和假手术组(sham).采用尼氏染色显示脑梗死灶并计算梗死灶体积;应用免疫荧光与TUNEL染色法分别观察脑缺血后3d与7d不同时间点缺血边缘区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达和细胞凋亡情况.结果 (1)缺血后3d 、7d MCAO+CBX组大鼠梗死体积小于MCAO组,3d 、7d MCAO+CBX组大鼠梗死体积较MCAO组分别缩小5%和4.6%;(2) 缺血后3d、7d于缺血边缘区可见大量TUNEL阳性染色细胞,且MCAO组大鼠缺血边缘区细胞凋亡数目明显多于MCAO+CBX大鼠(P<0.001);(3)缺血后3d和7d组缺血边缘区GFAP表达明显增强, 3d的MCAO组与MCAO+CBX组大鼠缺血边缘区GFAP的表达均较假手术组强(P<0.05),7d的MCAO+CBX组大鼠缺血边缘区GFAP的表达较假手术组强(P<0.001),但明显弱于MCAO组大鼠(P<0.01);结论 缝隙连接阻断剂甘珀酸可减少大鼠大脑中动脉阻塞后脑梗死体积,其机制可能与阻断缝隙连接后缺血边缘区神经元凋亡降低有关,星型胶质细胞的反应性变化参与了该过程.
高效液相色谱法考察芒果苷在Caco-2细胞上的转运特征

目的:建立芒果苷的高效液相色谱测定法,研究其在Caco-2细胞上的转运特征.方法:利用MTT实验筛选出芒果苷在Caco-2细胞中的安全浓度,然后用Caco-2细胞单层模型研究芒果苷的转运特征.采用HPLC法检测药物浓度,考察时间、药物浓度、P-糖蛋白抑制剂对芒果苷在Caco-2细胞上转运的影响.结果:芒果苷在Caco-2细胞单层膜上的转运量具有一定的浓度和时间依赖性,P-糖蛋白抑制剂维拉帕米和环孢素A能够增加芒果苷跨膜转运量.结论:芒果苷在Caco-2细胞上转运表现为被动扩散且有外转运蛋白参与芒果苷跨膜转运.
阿魏酸哌嗪胶囊健康人体生物等效性研究

目的:研究阿魏酸哌嗪胶囊和阿魏酸哌嗪片人体药动学和生物等效性.方法:按照两制剂两周期随机交叉设计,18名男性健康受试者单剂量口服试验胶囊(100 mg/粒×2粒)或参比片(50mg/片×4片).采用HPLC法测定血浆中阿魏酸哌嗪药物浓度.结果:阿魏酸哌嗪胶囊和阿魏酸哌嗪片的AUC_(0→τ)分别为(800.4±273.5)μg·h·L~(-1)、(810.1±300.3)μg·h·L~(-1);AUC_(0→∞)分别为(812.9±273.8)μg·h·L~(-1)、(825.9±302.7)μg·h·L~(-1);G_(max)(实测)分别为(1109.4±394.7)μg·h·L~(-1)、(1151.1±492.1)μg·h·L~(-1);t_(max)(实测)分别为(0.42±0.12)h、(0.42±0.13)h;t_(1/2)分别为(0.71±0.35)h、(0.8±0.5)h;阿魏酸哌嗪胶囊对阿魏酸哌嗪片的相对生物利用度为101.2%±19.8%.统计分析表明,主要药动学参数AUC_(0→t)、AUC_(0→∞)、C_(max)和t_(max)在2种制荆及给药周期间差异无显著性(P>0.05).结论:阿魏酸哌嗪胶囊与阿魏酸哌嗪片生物等效.
参芎葡萄糖注射液和5-氟尿嘧啶联合治疗急性重症胰腺炎的临床观察

目的:探讨参芎葡萄糖注射液和5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合治疗急性重症胰腺炎的临床疗效.方法:将45例急性重症胰腺炎的患者随机分为治疗组(22例)、对照组(23例),2组均采用一般治疗,治疗组使用参芎葡萄糖注射液100 mL,静脉点滴,qd,连续7 d,5-Fu 250 mg静脉点滴,qd,连续5 d,对照组使用奥曲肽注射液0.1 mg皮下注射,q8h,连续7 d,观察临床疗效、住院时间、住院费用.结果:2组的治愈率、好转率、总有效率及平均住院日差异无显著性(P>0.05),治疗组的平均住院费明显低于对照组(P<0.05).结论:参芎葡萄糖注射液和5-氟尿嘧啶联合治疗重症胰腺炎有较好的临床价值,可作为治疗急性重症胰腺炎的方法之一.
大黄素与姜黄素联用对肝癌细胞BEL-7402生长抑制的协同作用

目的:研究大黄素与姜黄素联合应用对肝癌细胞BEL-7402生长抑制的协同作用.方法:用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定药物作用于肝癌细胞BEL-7402的吸光值,计算细胞抑制率;流式细胞仪测定药物对肝癌细胞凋亡率与凋亡方式.结果:大黄素与姜黄素合用后,对肝癌BEL-7402细胞株的半数抑制浓度IC_(50)由16.60 mg·L~(-1)降低到5.84 mg·L~(-1),对细胞凋亡的抑制率和BEL-7402肿瘤细胞Caspase-3的表达也明显高于两者单用.大黄素与姜黄素合用对肝癌细胞BEL-7402的生长抑制有明显的协同增效作用.结论:大黄素与姜黄素联合应用可增强对BEL-7402肿瘤细胞株的敏感作用,降低大黄素的用量.
杀胚方剂辅助输卵管妊娠保守治疗的临床评价

目的:观察和评价中药杀胚方剂对甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮保守治疗未破裂型输卵管妊娠的辅助作用.方法:将118例未破裂型输卵管妊娠病例分为A、B2组,A组使用MTX+米非司酮+中药联合治疗;B组使用MTX+米非司酮治疗,定期监测血β-HCG及附件区包块大小变化,同时记录不良反应发生情况.结果:总治愈率A组明显高于B组(P<0.05).单疗程有效率A组高于B组但差异无显著性(P>0.05).治疗后包块缩小速度(P<0.01)、血β-HCG转阴时间(P<0.05)和临床痊愈时间(P<0.01)A组均较B组明显缩短.胃肠道反应(P<0.01)、肝功能损害(P<0.05)发生率A组显著低于B组.结论:MTX+米非司酮+中药三联药物治疗未破裂型输卵管妊娠具有方法简捷、疗效高、疗程短、不良反应少、保留生育功能等优点,具有推广潜力和价值.
氨酚曲马多胶囊的Ⅰ期临床药动学

目的:研究氨酚曲马多胶囊在健康人体内的药动学过程.方法:10名健康志愿者,男女各半,单剂量口服氨酚曲马多(盐酸曲马多37.5 mg+对乙酰氨基酚325 mg)2粒,用高效液相色谱法测定血浆中对乙酰氨基酚和曲马多的浓度,并采用PKS药动学程序对试验数据进行处理,求算有关药动学参数.结果:单剂量口服受试制剂2片后,其药-时曲线经拟合对乙酰氨基酚和曲马多均符合二室模型,其中C_(max),t_(max),t_(1/2),AUC_(0-24),AUC_(0-∞)对乙酰氨基酚分别为(9.5±2.4)mg·L~(-1),(0.68±0.24)h,(6.0±1.6)h,(30.9±8.5)mg·L~(-1)·h,(32.1±8.7)mg·L~(-1)·h;曲马多分别为(247.0±45.1)μg·L~(-1),(1.6±0.8)h,(5.5±1.4)h,(1 712.6±556.3)μg·L~(-1)·h,(1 872.8±623.3)μg·L~(-1)·h.结论:氨酚曲马多胶囊单剂量给药后在中国健康人体内耐受良好,人体内的药动学行为与文献报道基本一致.
基于自适应低通滤波的超声医学图像增强算法

目的 介绍一种超声医学图像增强的有效算法.方法 基于自适应低通滤波器的超声图像增强算法,首先采用对数变换的方法将超声医学图像中存在的乘性噪声变为加性噪声;再通过低通滤波器将对数图像分为高频分量和低频分量,对低频分量采用自适应直方图均衡处理,对高频分量进行加权;然后对低频分量和高频分量进行融合得到增强的对数图像;最后对对数图像进行指数变换得到输出图像.结果 原超声医学图像得到有效增强,边缘细节得以保留.结论 该算法有效地实现了超声医学图像增强,突出了超声图像的细节,改善了视觉效果,并对噪声具有良好的抑制作用.
子宫内膜厚度和胚胎移植位置与临床妊娠率的相关性

目的 探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中胚胎移植的位置和子宫内膜厚度与临床妊娠率的相关性.方法 回顾分析266例患者接受276个周期IVF-ET治疗的资料,根据子宫内膜厚度将患者分为A组(7～8.9 mm)和B组(9～16 mm);根据移植管距宫底的距离分为C组(5～10 mm)和D组(10～20 mm),分别比较A组与B组、C组与D组的临床妊娠率.结果 B组的临床妊娠率(50.00%)高于A组(23.33%),差异有统计学意义(P<0.05);C组临床妊娠率(45.86%)与D组(48.74%)间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IVF-ET过程中,超声导向能准确地显示子宫内膜厚度及胚胎放置在宫腔内的位置;子宫内膜厚度9～16 mm、移植胚胎距宫底5～20 mm有利于胚胎着床.
肝细胞癌与腹主动脉强化峰值时间的相关性

目的 探讨肝细胞癌强化峰值时间与腹主动脉强化峰值时间的相关性.方法 对43例确诊为肝细胞癌的患者,应用64层螺旋CT行常规肝脏平扫,选取肿瘤最大径层面,再以该层面为中心行持续动态增强扫描,取肿瘤强化最高区域和同层面腹主动脉中心分别作为感兴趣区(ROI),绘制二者的时间-密度曲线(TDC)并计算其强化峰值时间.结果 43例患者肝细胞癌的强化峰值时间为(30.04±6.36)s,腹主动脉的强化峰值时间为(23.38±4.92)s;肝细胞癌的强化峰值时间与腹主动脉的强化峰值时间呈正线性相关(r=0.662,P<0.05);肝细胞癌的强化走势有三种形式,23.26%与腹主动脉相似.结论 肝细胞癌的强化峰值时间与腹主动脉的强化峰值时间具有一定的相关性.
功能磁共振观察儿童文盲与非文盲语言加工相关脑区

目的 利用事件相关功能磁共振成像技术(fMRI)对儿童文盲和非文盲汉语加工相关脑区进行探讨.方法 分别对38名儿童(19名文盲和19名非文盲)进行汉字和简单图形判断的测试,同时采集其脑部的fMRI数据.使用基于Matlab7.0的SPM2软件进行数据分析,并生成脑功能区激活图像,对组内和组间数据分别进行单样本和双样本t检验分析.结果 儿童汉字加工激活了由多个脑区构成的神经网络,与成人基本一致,其中非文盲组和文盲组的差异性脑区位于左侧额中回(BA46/9),左侧角回(BA39),左侧梭状回(BA37).结论 左侧额中回(BA46/9)、左侧角回(BA39)及左侧梭状回(BA37)与汉语语义加工密切相关,读写能力在一定程度上改变了语言加工的神经网络联结模式.
静息态功能磁共振评价针刺足三里穴后效应

目的 研究针刺足三里穴后引起静息态脑功能活动的时间变化规律,探讨针刺后效应.方法 对17名健康志愿者,采集针刺双侧足三里穴拔针后的第10、25、45和60 min的静息态功能磁共振数据,利用REST软件计算低频振幅(ALFF),然后用SPM5与针刺前相应数据进行配对t检验,得到拔针后上述4个时间点相对于针刺前脑区ALFF的变化及其趋势.结果 针刺足三里穴拔针后引起了脑部ALFF变化,拔针后第10和第25 min ALFF显著增高脑区数量最多,主要包括双侧枕叶、双侧颞中回、左侧楔前叶、左侧顶下小叶、左侧中央后回、左侧小脑后叶、右侧扣带前回及右侧扣带后回等;拔针后第45和第60 min ALFF显著增高脑区逐渐减少,主要包括双侧枕叶、左侧楔前叶、左侧顶下小叶、左侧顶上小叶及右侧扣带后回等.结论 针刺后效应对静息态脑网络活动产生显著影响,拔针后第10和25 min为针刺后效应重要时间点.
医学影像物理学实验教材建设的改革与实践

目的:国内各院校在医学影像物理学实验课的开设彼此差异很大,随意性很强,自编的实验教材明显滞后,实验教材建设的改革势在必行.方法:我们总结了多年的教学经验,建立了实验课程新体系.结果:为适应现代影像技术的发展,教材的编写应不断追加最新研发的医疗器械和成像仪器的物理学内容特别是影像物理学实验所应用的新方法,使教材更能反映当今医学科技的最新研究成果和前沿科技发展状况.提出了课程改革的目标应是培养影像学生科学实验方法、技能,提高了学生实验素养与创新能力.结论:医学影像物理学实验教材建设改革的基本构思是:融入计算机技术;实验编写中除强调科学性、严谨性外,也要体现趣味性.为适应医学影像诊断技术的迅速发展,以及理论教材内容的不断变化,实验教材建设的改革也势在必行,我们在多年的实验教学实践中,不断总结教学经验,建立了实验课程新体系,提高了医学影像物理学实验的教学效果.