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Titolo: spazio di testa: domanda

Salve, sono una biologa in prova presso un laboratorio di analisi
chimiche ambientali e vi scrivo nella speranza che possiate dedicarmi
qualche minuto del vostro tempo.
Devo mettere a punto la tecnica dello spazio di testa statico x
l'analisi di BTEX e solventi clorurati in campioni acquosi disponendo di
un GC/MS con colonna RTX-5. Seguendo le metodiche EPA  (incubazione a
80°C per 20' di 5 mL di un campione acquoso saturato con NaCl in vials
da 7.5 mL con tappo a vite e setto perforabile in silicone teflonato e
iniezione nel GS/MS di 200 microL della fase gassosa), per la
costruzione delle rette di taratura (da 0.05 PPM fino a 2 PPM) ho
utilizzato mix di BTEX e clorurati diluite alle concentrazioni suddette
nei 5 mL di acqua sottoposti a incubazione. Ho analizzato nello stesso
modo campioni incogniti e l'analisi interlaboratorio ha evidenziato una
sottostima dei miei risultati di 2 ordini di grandezza. Non riesco ad
individuare l' errore e ne va del mio posto di lavoro! Ho addotto come
causa il mancato equilibrio termodinamico nello spazio di testa in
queste condizioni operative oppure un allontanamento dal range di
sensibilità dello strumento. Sarebbe gradito ogni tipo di suggerimento!
Ringraziandovi anticipatamente per la cortesia, vi auguro buon lavoro.
Dott.ssa Stefania De Micheli

"adamunno" ha scritto nel messaggio

Non conosco questo tipo di analisi, certo che sbagliare di 2 ordini di
grandezza non è possibile salvo errori di calcolo o di calibrazione.
Quando hai preparato le curve di taratura hai effettuato diluizioni
corrette per avere da 0,05 a 2 ppm (occhio che nei 5 ml per avere ad es.
2 ppm dovevano essere sciolti 2/200 mg; se ne hai messo 2mg in 5 ml,
la concentrazione è 400 ppm e quindi usando questa curva sottostimi
il risultato di campioni incogniti di 200 volte)?
Sono anni che non uso il gascromatografo, ma penso che il mancato
equilibrio termodinamico non possa produrre una sottostima così elevata.
Ciao, Nino

equilibrio termodinamico non possa produrre una sottostima così elevata.
Caro Nino, grazie per la tua disponibilità! Sono d'accordo con te
sulla elevata provabilità che ho commesso un errore di calibrazione .
Quando ho preparato le curve di taratura ho usato delle mix SUPELCO in
metanolo certificate 2000 microg/mL. Per il punto a 2 ppm ho sciolto 5
microL di questa madre in 5 mL di acqua e ho proceduto all'analisi per
spaziodi testa. Non penso di aver sbagliato la diluizione! Domani
analizzerò le stesse diluizioni in metanolo, iniettandole in forma
liquida, per constatare con certezza se questo è il giusto range di
sensibilità dello strumento (i testi dicono di si!). Se ti viene in
mente qualche altra idea o se ti servono ulteriori particolari, ti
prego dicontattarmi in quanto la soluzione del problema deve essere
imminente pena la perdita del mio posto di lavoro. 
Grazie ancora, a presto Stefania.
--
Good luck!   ADaM   adamunno<at>NOSPAMdespammed.com
http://unno.altervista.org

 spaziodi testa.
Per fare le curve di taratura, è buona norma preparare soluzioni
standard a diverse diluizioni in matracci tarati, partendo dalle soluzioni
concentrate in commercio.
E' preferibile fare 3 diluizioni di un fattore 10 ciascuna, che una sola
di 1000; questo permette l'utizzo di volumi di sol. madre dell'ordine
delle decine di mL per volta e quindi minimizza l'errore (infatti,
con che precisione hai prelevato i 5 microL da sciogliere in 5 mL d'acqua?
E addirittura per il punto da 0,05 ppm?)
Ti conviene ripetere tutto dall'inizio.
E verifica bene anche il range di sensibilità dello strumento e
l'intervallo di concentrazione in cui sussiste proporzionalità del
segnale.
Auguri, Nino

Auguri, Nino
Prima di tutto grazie per essere così gentile e disponibile!
Forse mi sono espressa malissimo, scusami!
Ho costruito le rette di calibrazione per ciascuna sostanza da 0.05
microg/mL fino a 2 microg/mL diluendo una miscela standard certificata
SUPELCO e concentrata 2000 microg/mL in Metanolo come segue: da 2000
microg/mL  fino a 50microg/mL in metanolo passando per 1000 microg/mL,
500 microg/mL, 250 microg/mL, 100 microg/mL. Di ognuna di queste ho
iniettato 5microL in 5 mL di acqua distillata saturata con 1.8g di
NaCl (contenuta in vials da 7.5mL con tappo a vite e setto teflonato
perforabile). L'incubazione è avvenuta a 80°C per 20'. Io mi sto
convincendo che questo tempo è troppo poco affinchè queste sostanze
saturino lo spazio di testa. Cosa ne pensi? 
Grazie anticipatamente
Stefania


 --
E' probabile che il tempo non sia sufficiente per una saturazione
completa; perň, essendo il processo esponenziale, non č
ipotizzabile che il rendimento sia stato solo l'1% circa (visto
il tuo errore). Sinceramente, cercherei altrove.
Ciao, Nino 

il tuo errore). Sinceramente, cercherei altrove.
Caro Nino,
 scrivo per ringraziarti dell'aiuto che mi hai dato nella soluzione
del problema dell'analisi dello spazio di testa. I tuoi suggerimenti
sono stati preziosi e mi hanno aiutato a togliermi tantissimi dubbi.
Il problema che avevo non riguardava, per fortuna, la costruzione
della curva di calibrazione o la procedura analitica, ma la natura del
campione incognito che ho usato per le analisi interlaboratorio.
Infatti questo non č acquoso, come mi ha specificato il tecnico che lo
ha campionato, ma č un superconcentrato di solventi vari e idrocarburi
pesanti proveniente dagli scarichi di una conceria. Per l'analisi dei
solventi aromatici e clorurati ho utilizzato il metodo per i rifiuti
solidi ad elevate concentrazioni (sempre per spazio di testa ma previa
estrazione in metanolo).
Ora non mi resta altro che congedarmi ringraziandoti ancora per avermi
dedicato il tuo tempo !
Grazie ancora e buon lavoro.


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Di niente, sei troppo gentile.
Ho una figlia, come te da poco laureata in biologia e in prova
all'Università di Novara, e comprendo la tua apprensione e i
tuoi dubbi, che sono anche i suoi.
Auguri, Nino