Newsgroup: it.scienza.chimica
Titolo: DNA: ESTRAZIONE E SOLUBILITA'

A SCUOLA, IN LAB., HO ESTRATTO IL DNA DALLA CIPOLLA CON IL SEGUENTE METODO:
-TAGLIUZZARE LA CIPOLLA, AGGIUNGERE SOLUZIONE OMOGENEIZZANTE (SDS),SCALDARE
A 60°, RAFFREDDARE, FRULLARE, FILTRARE
-DEPROTEINARE CON CLOROFORMIO (LA SOL. SI STATIFICA
COSI:CLOROFORMIO,PROTEINE, DNA NELLO STATO PIU' SUPERFICIALE)
-ASPIRARE LO STRATO(MILLIMETRICO!) DI DNA E RIDEPROTEINARE
-ASPIRARE LO STRATO DI DNA, METTERLO IN PROVETTA, RAFFREDDARE
-PRECIPITARE IL DNA CON ETANOLO FREDDO: SI FORMA UN FLOACCULO BIANCO DENSO E
GELATINOSO.
MI HANNO DETTO CHE E' IL FILAMENTO DI DNA LIBERO DA PROTEINE ISTONICHE, MA
SARA' VERAMENTE COSI'?
POI  HO TRASFERITO IL FLOACCULO IN UNA PROVETTINA CON TAPPO E CON DENTRO
ETANOLO, E L'HO PORTATA A CASA, SOLO CHE QUANDO L'HO RIGUARDATA IL "DNA" ERA
SCOMPARSO, COME MAI? IO HO PENSATO CHE CON IL CALDO SI SIA RISOLUBILIZZATO,
ORA LO CONSERVO IN FRIGO MA NON SUCCEDE NIENTE.... CIAO CIAO
ROMINA(PERPLESSA)

Non so dirti nulla riguardo al DNA, ma ti informo che quando scrivi a
lettere maiuscole in rete equivale ad urlare, oltre a non essere granché
leggibile.
Saluti
Tex

 ha scritto nel messaggio
news:ap139s$2oh$1...@atlantis.cu.mi.it...


c'è un tastierino sulla sinistra della tastiera con sopra raffigurato
una sorta di lucchetto, prova a premerlo.....
tos.


 ha scritto nel messaggio
news:3db45218...@news.tiscalinet.it...


eh he heh he he he :-)))
Uhm, hai controllato che il tasto a destra della lettera A,
quello grigio con il lucchetto, non sia bloccato ? (anche una
delle due frecce in su a doppio corpo, gli shift ....)
E che dire della lucina CAPS LOCK ? Rimane mica accesa ?
Nn ti abbacchiare, suvvia.
Ciao
Soviet-Mario

voce!!!!
Ti va di essere al 100%?
Scrivi sotto al messaggio a cui rispondi cancellando da quest'ultimo
tutte le parti che non servono a capire al tua risposta.
Si chiama "quotare bene" e oltre a essere una regola della netiquette
aiuta molto la comprensione (sai sempre con chi stai parlando e a cosa
ti riferisci) e a limitare lo spreco di banda visto che capita di
leggere messaggi che per rispondere una riga riportano un testo di
oltre 100 righe.
Oltre che a fare bella figura ti permette di avere maggiore attenzione
soprattutto su NG riguardanti temi informatici (e tutti i NG moderati)
in cui si presta particolare attenzione a queste cose. Regola molto
semplice da applicare ma molto utile.
Se poi vuoi farti una minicultura sui newsgroup e intento farti due
risate ti consiglio questo sito, oltre che istruttivo e' piuttosto
divertente: 
http://www2.freewebz.com/iosononiubbo/index1.htm
-- 
Ciao!!!
Michele
Physical Chemistry: The pitiful attempt to apply y=mx+b to everything in
the universe.

 voce!!!!
mi sa che nessuno ti sa rispondere qui prova a postare su
it.scienza.biologia
-- 
Francesco Rosano

e se poi becco la mia proff. di biochimica o l' ITP di lab. ? sarebbe una
figura pessima..penserebbero che non mi fido di quello che dicono.....

 wrote in message
ap669u$91l$1...@lacerta.tiscalinet.it...


 maggiore sicurezza).
Perchè? E' cosi' bello ricevere almeno 2-3 spam al giorno. Tipicamente belle
ragazze Ucraine o Rumene.
Ciao
Mauro

come si fa? e poi che rischi corro? ciao Romina

ORA LO CONSERVO IN FRIGO MA NON SUCCEDE NIENTE....
Ho un'ipotesi, di cui pero' non sono convintissimo:
potrebbe essere rimasta in soluzione una piccola quantita' di DNAasi
attiva, non denaturata dall'etanolo, che ha "mangiato" il DNA.
Ma onestamente non riesco a spiegarmi perche', visto che la
concentrazione di etanolo e' troppo elevata per consentire all'enzima
di mantenere la struttura.
Forse nelle vicinanze/all'interno del flocculo si sono create delle
zone a concentrazione piu' bassa? Considera che il flocculo, se non
hai centrifugato, contiene sia il dna che le proteine e i
polisaccaridi.
-- 
Saluti
dedioste

che bello, finalmente qualcuno sa di cosa sto' parlando, ne approfitto per
farti ancora qualche domanda: in realta' il mio DNA non si e' avvolto
intorno alla bacchetta, allora ho provato ad avvolgerlo intorno alla pipetta
pasteur che avendo un diametro inferiore e' piu' facile da far ruotare
dentro ad una provetta, ma anche cosi' non ci sono riuscita, e l'ho estratto
pinzandolo tra la parete della provetta e la pipetta. Il mio floacculo non
era per niente omogeneo, non c'era un unico filamento, ma un ammasso di
stutture filamentose spezzate bianche.Secondo te, il fatto che invece di
preparare la soluzione omogeneizzante come prescritto(100g SDS, 17.54g NaCl,
8.82gEDTA, 2 l H2O) con un pH=8.3; ho usato una soluzione gia' pronta
(tris/glycine/SDS) con un pH=8.77, ha influito molto sui risultati ottenuti?
se si' in che modo?
e l'aver utilizzato il frullatore invece dello stomacher puo' aver
danneggiato il DNA riducendolo alla moltitudine di frammenti ottenuti, e per
questo motivo quindi il mio DNA non si e' avvolto alla bacchetta? inoltre
durente la precipitazione con cloroformio mi e' stato detto di non agitare
assolutamente la provetta, e cosi' e' stato fatto, ma perche'?
ciao Romina

assolutamente la provetta, e cosi' e' stato fatto, ma perche'?
A questa non ti so rispondere... :(
-- 
Saluti
dedioste

 wrote in message
0mviru450bf0inipv...@4ax.com...


Sorry
e di cosa? :)
-- 
Saluti
dedioste

complimenti!!!! sei stato splendido!!! ho trovato tutte le risposte che
cercavo. Non 1000, 25000 grazie!!!!!!!!
per curiosità che facoltà frequenti?
ah, ho ancora una cosa da chiedere, che però non c'entra (si scrive cosi'?)
niente con il DNA: come mai si e' cancellato il primo mess. che ho scritto
io, e tutti quelli che sono seguiti prima della prima risposta scritta da
te? e' una cosa normale o ho combinato io qualche casino sul mio PC? ciao
ciao Romina.....e ancora GRAZIE!!!!!!