Newsgroup: it.scienza.chimica
Titolo: HPLC e tampone fosfato

Salve a tutto il gruppo,
sono nuovo di questo gruppo e mi scuso in anticipo per ogni mia
inesattezza,
per eventuali OT o per richieste stupide.
Sono poco entrato in tesi e al momento ho vari dubbi che non sempre
vengono
risolti in facoltà, anche perché sono diviso fra la facoltà e
un'azienda e non ho dei chiari punti di riferimento (leggi tecnici di
laboratorio).
Dovrò usare un HPLC utilizzando una fase mobile di K2PO4 e H3PO4 a pH
2.
Avendo sentito che questa fase mobile può provocare problemi a causa
di possibili cristallizzazioni all'interno della colonna mi chiedevo
se fra voi
ci fosse qualcuno che avesse avuto esperienze a riguardo,che magari
potesse darmi eventuali consigli o accorgimenti che potrei usare,
oltre ad un abbondante fase di lavaggio finale con H2O, per evitare
danni.
Qualsiasi suggerimento o avvertimento sarà ben gradito
Inoltre avrei una richiesta probabilmente più banale ma sono ignorante
in materia e quindi scusate ancora:
In quanti e quali modi posso far evaporare completamente una soluzione
acquosa (ca 200-300 mL)?
Vi chiedo questo perché forse dovrò utilizzare un rotavapor di quelli
che ci stanno ore (il refrigerante è l'acqua corrente del lavandino
[spero si capisca cosa intendo]).
Qualsiasi suggerimento sara apprezzatissimo e scusate ancora.
Ciao e grazie anticipatamente

 acquosa (ca 200-300 mL)?
Dipende dal vuoto che hai a disposizione (pompa ad acqua? pompa meccanica?
vuoto centralizzato?) e dalla stabilità alla temperatura dei soluti. Con una
pompa ad acqua in non perfetta efficienza ci potresti mettere un bel po', e
dovresti scaldare. Se invece riesci ad ottenere un bel vuoto efficiente puoi
cavartela in fretta (15 min o giù di lì) scaldando il bagno sui 60-70°C.
Se il soluto non è stabile al calore (e capita di frequente) la cosa
migliore è liofilizzare. Ovviamente, ci vuole un liofilizzatore.
Ciao
Tex

 [spero si capisca cosa intendo]).
Guarda che evaporare l'acqua al rotavapor non è un'impresa titanica.
Noi, a volte, evaporiamo la DMF; per cui, vedi tu...
:-)))
Dipende se la tua soluzione o il tuo soluto, meglio, sia stabile al calore.
Poi, con una banale pompa ad acqua e un bagno a 50-60°C, l'acqua la strippi
senza troppi problemi.
Ciao
WP
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Sapere che sappiamo ciò che sappiamo e che non sappiamo
ciò che non sappiamo, questa è vera conoscenza.
(Confucio, uno che la sapeva lunga)
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 di ultimissima generazione.
 
uhm questa informazione potrebbe tornarmi utile...sinceramente non so
se sia di nuova generazione, mi informerò ma hai avuto esperienze
dirette?
Cmq seguirà un ultimo lavaggio in metanolo che viene usato anche per
mantenere la colonna...ma secondo te se lascerò lavare per più di
mezz'ora solo con H2O potrò avere dei problemi più seri che bloccare
la colonna e quindi, sempre secondo quanto ho sentito, poter rovinare
la pompa? [ah, brutta cosa l'imprinting!].
Ad ogni modo qualsiasi ulteriore informazione sarà graditissima.
Grazie ancora per la vostra disponibilità.
Ps: Per quanto riguarda l'evaporazione proverò col rotavapor

30 mM non è poi cosi' bassa.
Un suggerimento utile credo sia quello
di cambiare gradualmente la polarità dell'eluente.
-- 
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 Ps: Per quanto riguarda l'evaporazione proverò col rotavapor
OK.
:-)))


Per fugarti un po' di dubbi sulla colonna, vai sul sito internet del
produttore. Di solito puoi trovare i "data sheets" relativi alle colonne con
i consigli, le migliori condizioni di impiego e le condizioni per cui si
degradano.
Normalmente questi data sheets sono inclusi anche nella confezione della
colonna, ma non è improbabile che si perdano.
Ciao
TEX