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Titolo: Richiesta informazioni Interferone Beta

Buongiorno,
sono alla ricerca di informazioni relative alla metodologia di
"produzione" dell'interferone beta (in laboratorio).
So solo che puň derivare da cellule animali (c'entra con il DNA
ricombinante?).
Sono estremamente ingnorante sull'argomento e sarei grata, a chiunque
potesse aiutarmi, se utilizzasse un linguaggio quanto piů possibile
"divulgativo".
Grazie molte.
Francesca.

 ricombinante?).
C'entra c'entra, a voglia se c'entra ;o)
Allora, io cercherò di essere il più possibile chiara e divulgativa, ma
se non riuscissi nei miei intenti, tu non avere tema nel chiedere
ulteriori delucidazioni ;o)
Più o meno funziona così: si preleva dalle cellule umane una specifica
sequenza genica, ossia un preciso pezzo di DNA od anche un determinato
frammento di cromosoma per dirla più facile (i geni costituiscono le
unità funzionali della molecola del DNA, ed il DNA o acido
desossiribonucleico è quindi la  molecola che porta l'informazione
genetica o, per dirla difficile ;o), la molecola informazionale centrale
e che, in soldoni, costituisce i cromosomi. Sui cromosomi i geni sono
*ordinati* e non sistemati a caso, ed ogni gene occupa una specifica
posizione detta locus o loci se si parla al plurale. In realtà il
postulato secondo cui ciascun gene ha una posizione fissa non è valido
in assoluto ma questo è un discorso che ci porerebbe moooolto lontano
;o) ). Questa operazione, ossia il tagliuzzare il DNA a nostro
piacimento andando a pescare proprio quelle parti che codificano, vale a
dire che danno le istruzioni per sintetizzare, costruire, una specifica
proteina, è stata resa possibile in massima parte dalla genetica
molecolare, ed un contributo sostanziale alla mappatura genetica
nell'uomo è stato dato proprio dalle metodologie del DNA ricombinante.
Ma torniamo a bomba :o) Per prendere quello specifico pezzo di DNA umano
(gli interferoni di tipo I, famiglia a cui appartiene l'interferone
beta, vengono prodotti da una famiglia multigenica collocata sul
cromosoma 9, sul braccio corto per la precisione) si usano delle forbici
speciali in grado di riconoscerlo e di tagliarlo per benino. Queste
forbici si chiamano *enzimi di restrizione*. Le stesse forbici vengono
utilizzate sul *vettore*, ossia un elemento di DNA capace di replicarsi,
perchè le estremità dei DNA devono essere coesive, in grado quindi di
legarsi, di appiccicarsi. Ma oltre a tagliare bisogna anche cucire, e
questa operazione viene effettuata da un enzima, la DNA-ligasi. Ogni
volta che il vettore si replica, viene replicato anche il segmento di
DNA umano inserito, e lo si può così moltiplicare a piacimento
(clonazione). I vettori vengono scelti in modo che rispondano a
specifiche caratteristiche in grado di facilitare i diversi passaggi
necessari alla clonazione. Ed ecco che entrano in gioco i plasmidi. Si
tratta di unità genetiche presenti normalmente nei batteri, costituiti
da DNA circolare o ad anello a doppio filamento, capaci di replicarsi
indipendentemente dal DNA batterico. Poi con questi plasmidi, che si
portano appresso i geni che abbiamo selezionato, si *infettano* cellule
batteriche o di mammifero (cellule transfettate), le quali cominceranno
così a produrre la proteina che a noi interessa a nostro piacimento.
Questo per sommi capi ed in estrema sintesi :o)
L'interferone beta 1b viene prodotto da colture di cellule transfettate
di
Escherichia coli, un batterio che in quanto tale produce un interferone
differente, sebbene molto simile, a quello naturale.
L'interferone beta-1a viene invece prodotto da colture di cellule
ovariche di criceto cinese transfettate, che essendo cellule di
mammifero, possono effettuare tutte quelle modificazioni
post-traduzionali (cioè dopo che sono state sintetizzate, prodotte in
base alle istruzioni date dal RNA messaggero, e quindi dal DNA)
complesse che la proteina richiede, nella fattispecie la glicosilazione
che in questa sede eviterei di spiegare ;o)  Gli interferoni prodotti
sono quindi analoghi alla molecola umana e con attività biologica
simile.
Spero di essere stata abbastanza chiara, certo la materia non aiuta! ;o)
spero anche di non avere dimenticato pezzi o scritto bischerate, ma vado
un po' di corsa puff puff pant pant :o)) e viaggio di memoria, e si sa,
la memoria inganna O:-))) Sono comunque a disposizione
;o)
Enjoy
Lauraallavolé