質問: q-4. きれいな創傷(ギャップ)を得るためにはどうしたら良いですか?
回答: a-4. きれいな創傷(ギャップ)を得るためには,インサートと24ウェルプレートが単層形成の間,接触していなければなりません。このアッセイを利用するに当たり,以下のステップにご注意下さい。1. 過剰に多くの細胞を播種しないことが重要です。創傷治癒アッセイの実施前に,通常の24ウェルプレートを用いて細胞の用量曲線を作成し,一定の時間内(例えばオーバーナイトのインキュベーションにおいて)で単層の形成に必要な細胞数を決定して下さい。2. 細胞添加後,プレートのフタを閉めて穏やかにそのフタを1度押さえて下さい。その後は,単層の形成が完了するまでは触れずに何もしないで下さい。もし可能であれば,インサートを取りはずす準備ができるまではプレートを移動しないで下さい。3. インサートを除去した後,すべての培地交換を行って下さい。