質問: 吸光光度法の検量線について 検量線を作成し、データーにばらつきが生じた場合はどのようにすべきなんでしょうか。無理やり線でつなぐのかなと思っているのですが・・回答をお願いします。
回答: >回帰式とは何でしょうか・・ xとyの関係を数式で表したものです。xに値を入れると、yの値が出て、予想することができます。株価の予想も可能ですが、当たるとは限りません。 検量線は、回帰式を標準液の濃度をx、測定値がyです。 回帰式を求めるは、先の方が書き込まれているように、最小2乗法を用います。分析機器に組み込まれているものは、おそらくこの方法でしょう。 エクセルの場合は、yに対するxの回帰なので、最小2乗法とは違うと想うのですが(未確認)、検量線がきちんとひけている場合は大差が無いので、エクセルの場合は、そのまま利用しています。 回帰式を描くには、 1) 散布図を描く 2) グラフをクリツク(8本の柱(正式名は知らない)が建つ) 3) 一番上のメニューバーの「グラフ(c)」をクリツクし、それにぶら下がっている「近似曲線の追加」をクリツク 4) 「種類」をクリック(直線回帰に設定されており、検量線はこれでok) 5) 「オプションのタグ」をクリツク 6) 「グラフに数式を表示」する、にチェック 7) 画面右下の「ok」をクリツク すると、グラフ上に数式が表示されます。 6)の時点で グラフにr-2乗を表示する、をチェックすれば、r-2乗が表示されます。相関係数rと決定係数r-2乗は、使い方が違うのですが、相関係数rを2乗したものが決定係数r-2乗なので、計算は単純です。 また、検量線は、切片が0のハズなので、6)の時点で、切片(s)を0として、ボックスにチェクをいれるべきかも。ただ、どのように補正しているのかは知らないので、私は入れませんが。 以上がエクセルの方法です。しかし、実際には大変です、というのは、普通の検量線の図は、濃度既知の標準液がx、吸光度がyだからです。すなわち、xからyを求めるのが回帰式ですが、求めたいのは吸光度yからその濃度のxを求めたいのです。 そこで、私は、通常の検量線の図とは逆ですが、吸光度をx、標準液の濃度をyとなるように散布図を描いて、y=ax+bの式をエクセルで求めています。 aとbの値は、上記1)~6)でグラフ上に表示されるので、その値を用い、xに吸光度を代入して、サンプルの濃度を算出しています。 最近の吸光度計は、検量線が組み込まれているので(学生実習用のものは、安価なので組み込まれていない場合も)、サンプルを測定すれば、その濃度が自動的に計算されます。この濃度と、上記の方法の値は微妙なズレがあると想いますが、誤差範囲でしょう。