質問: q-4. プロトコル(b)の染色操作のステップ5において,分注に3分以上かかった場合に何か問題ありますか?
回答: a-4. 熱により解離したchp鎖が再構築されるには数時間かかるので,多少の遅れは問題ありません。しかし,加熱後数時間は置かないで下さい。組織学的研究では,正常組織のコントロールスライドを用いて,病理学的スライドと同じデッドタイムで染色することをお勧めします。この2つのスライドは直接比較できます。しかし,一本鎖のchp鎖は,加熱後再構築されますので(希釈溶液中では,非常に遅い速度で),変性コラーゲンへの結合を最大化するためには,冷却とデッドタイムを最小化することをお勧めします。