質問: rnaの量について 先日よりrt-pcrを行っているのですが、 mrnaを逆転写する際に濃度を調製するために、 分光光度計にてmrna量を測定使用としているのですが 吸光度から濃度への変換の仕方が、1=40μg/mlで あったり45μg/ml出会ったりするのですがどれが正しい のでしょうか? また、測定器によるのでしょうか? よろしくお願い致します。
回答: 測定器では吸光度と濃度の関係は変化しません。 まあ、光路の長さが変われば、変化しますが、最近はすべて1cmのものしかないと思います。 僕はポスドク暦3年の若造ですが、「1 a260nm unit = 40μg/ml」しか知りません。 ご存知だとは思いますが、260nmの吸光度が1の場合、rnaが40μg/mlということです。 他の波長の場合は変わります。 試薬会社(インビトロジェン)のカタログで確認しましたが、やはり上の通りでした。 推測ですが、40μg/mlと45μg/mlの2つがあるのは、測定する吸光度に違いのような気がします。 もしそうだとすると、a260とa280でさえ2倍近く違うので、かなり近い波長になるかと。 ちなみに、ググルと、「mrna a260 40」のほうはいくつかありますが、「mrna a260 45」は見つけることができませんでした。 僕は回答者ですが、逆に、どこで、45のほうを見つけたのか知りたいぐらいです。