質問: q-14. stopperを使用しないoris proでは,どのように遊走・浸潤前コントロールを設定すればよいですか?
回答: a-14. oris proではコントロールの設定にいくつか方法があります。1bcgが溶解し,細胞が接着・伸展した後,コントロールウェル(またはプレート)の細胞を固定する方法。アッセイが終了した後で,アッセイ用ウェルと一緒に細胞染色を行います。2bcgが溶解し,細胞が接着・伸展した後,すべてのウェルの画像を撮影する方法。この場合,アッセイ前に細胞染色しておくか,gfp発現細胞などを使用する必要があります。3アッセイ用ウェルのいくつかを,濃度の異なるサイトカラシンd(cytochalasin d)で処理する方法。サイトカラシンdはアクチン重合阻害物質で,細胞運動を阻害します。サイトカラシンdで処理された細胞は検出領域周辺で遊走できず,停止した状態となります。細胞毒性を示さず細胞運動を停止できる最適なサイトカラシンdの濃度(約0.5~2μm)を検証する必要があります。