質問: 実験計画について 実験系の作り方について質問します。 あるタンパク質の存在を調べ、それの組織・細胞への影響を調べたいです。 この場合、現在westernblot、免疫染色で存在を確認しているところなのですが、平行してpcrを行い、rnaを調べる必要がありますか? また、さらに細胞培養し、このタンパク質を添加して影響をみたいのですが、可能でしょうか?タンパクはdecoy receperの一種です。 動物実験ばかり行っていたので、分子的・細胞的実験については知識がありません、説明不足なところがあれば指摘していただけたら助かります。 よろしくお願いします。
回答: 目的タンパクの存在を確認するだけであれば,westernで充分かと思います.逆に言えば,pcrのみでは不十分なのでwesternで確認するというのが常道です.さらに免染で局在を観察するという感じでしょうか? 培養系への添加実験については,情報がないのでよくわかりませんが,細胞膜上にあるような受容体がターゲットなら,そのまま振りかけてもいいような気がします.