質問: 制限酵素処理後の保存 プラスミドに挿入したdnaのシークエンスをしようとしています。サイクルシークエンスを行うときプラスミドが環状のままではpcr反応がうまくいきません。そのためあらかじめ制限酵素で線状にしようと考えたのですが、制限酵素処理を行ったあと線状になったプラスミドの長期保存は可能なんでしょうか。長期でなくても一週間ほど保存できればいいのですが。
回答: ciap処理しないとセルフライゲーションで元の環状に戻ってしまいますよ~。 私も、シーケンシングは環状のままで問題ないと思います。pcrの時のtemplateの濃度やdenature等の条件が悪かっただけじゃないでしょうか?