質問: q-14. 低濃度にも関わらず標準曲線のod値が高くなってしまいます
回答: a-14. 高いシグナルや早い呈色は,洗浄操作で除去しきれず残ってしまったdnphによる可能性があります。dnphは非常に粘性の高い分子なので,プロトコルのステップ5の洗浄操作は,遊離dnphを除くために非常に重要です。呈色時間を短縮するために,完全に洗浄を行い,標準曲線を繰り返しアッセイすることを推奨します。他の方法は,elisaでの抗体量を少なくすることです。例えば,1:1000の一次抗体と二次抗体の希釈率の代わりに,1:2000で調製します。