質問: 緩衝液を替えた理由 質問させてください。 酵素の活性を調べる実験を2日行いました。 初日は モヤシのアミラーゼの活性を調べるもので 基質はデンプンにリン酸緩衝液を加え 緩衝液はリン酸緩衝液でした。 デンプンのヨウ素反応の退色を分光光度計で調べました 二日目は じゃがいものホスファターゼを調べるもので 基質はp-ニトロフェニルリン酸をtris緩衝液で調製 緩衝液はtrisーhcl緩衝液を用いました。 そこで緩衝液をリン酸緩衝液から わざわざtrisリン酸緩衝液に変えた理由は 何でしょうか。 基質の調整にtris緩衝液を用いたからでしょうか? それとも アミラーゼとホスファターゼの最適phの違いから でしょうか? あるいは別の可能性でしょうか? お分かりの方いらしたら回答よろしくお願いします。
回答: 別にバッファーを置換したわけではありませんよね。 変えたというか、それぞれの酵素を測定できる実績のあるバッファーを使っているのでしょう。 リン酸化に関する酵素(フォスファターゼ)を測定する場合に、 産物であるリン酸が山ほど含まれているリン酸バッファーを使うことは、 あまり無いと思います。