質問: q-5. バンドが拡散してしまう
回答: a-5. ゲル中に泳動させるタンパク質量が過剰:ゲルに泳動させるタンパク質量を減らしてみて下さい。シグナルが過剰に発している:抗体やタンパク質の濃度を下げてください。試薬がコンタミネーションしている:各バッファーに微粒子や微生物のコンタミネーションがないことを確認して下さい。新しいバッファーを調製して下さい。インキュベーションや洗浄に使用するバッファー量が不十分:メンブレンのインキュベーションや洗浄に,十分量のバッファーを使用して下さい。メンブレン上に気泡が付いてしまっている:そっと気泡を除去して下さい。トランスファー時に,メンブレンとゲルの間に気泡が入らないように注意して下さい。インキュベーション中の振盪が均一になっていない:ロッカーやシェーカーでアジテーション(振盪 )が均一になるように調節して下さい。機器にコンタミネーションが起きている:電気泳動槽が十分に洗浄できているか確認して下さい。タンパク質やゲルの欠片が残存していない(メンブレン上がべたついていない)ことを確認して下さい。また洗浄を十分に行ってください。hrpがアグリゲーションしている:フィルターでhrp凝集物を除去して下さい。露出時間が長すぎる:露出時間を減らしてみてください。