質問: 吸光光度法について uv-vis吸光光度法を用いて2価の鉄の定量をします。発色にはオルトフェナントロリンを用います。そこであるサンプルに対して溶液処理を行う際、試薬は酸、還元剤、オルトフェナントロリン、緩衝溶液の順で添加しないと発色に影響を及ぼしてしまうと思いますが、これは何故なのでしょうか?大分本を探してみたのですが記載されているものを見つけることができませんでした。 ご存じの方がいらっしゃいましたら教えていただきたくお願いいたします。
回答: 確かにその順序が良いと思いますが「絶対」というわけではないでしょう。 酸は緩衝溶液より前でないと緩衝されて酸の意味がないし、 フェナントロリンより前に鉄はfe^2+に還元されている必要があります。 フェナントロリンも塩基ですから、緩衝溶液より前に加える方が良いでしょう。 といった「都合」の集積がこの順序になったと言うことではないでしょうか。