質問: q-7. 推奨する固定試薬または固定法は?固定法によって,染色結果は変わりますか?
回答: a-7. 参考文献2に記載されているように,固定の有無は染色結果に影響しません。従って,chp染色には固定は不要ですが,必要があればchp染色の前に組織を固定することができます。蛍光イメージング(f-chpやr-chpを使用する場合など)では,組織の固定にはパラホルムアルデヒドやグルタルアルデヒドではなく,ホルムアルデヒドの使用をお勧めします。ホルムアルデヒド固定組織では,特にfitc蛍光チャンネルにおいて自家蛍光が顕著に抑制されるためです。パラホルムアルデヒドやグルタルアルデヒドを用いて組織を固定する必要がある場合は,自家蛍光の問題を避けるため,組織をb-chpでまず標識し,赤色/近赤外色素(alexafluor 647など)または酵素(非蛍光検出の際のhrpなど)で標識されたストレプトアビジンで検出することをお勧めします。