質問: エンドサイトーシスの実験的証明 エンドサイトーシスが起こっていることを神経筋標本等を用いて、光学顕微鏡で証明するには一体どうしたらよいのでしょうか・・・・。 神経筋標本、光学顕微鏡を用いる、ということで、蛍光標識した物質を取り込ませる方法ではないようで・・・。 すみません。 どなたか教えて下さい。よろしくお願いいたします。
回答: 生きた細胞で何かを取り込ませた後、その細胞を固定して、その取り込ませたものを検出するような系を用いて顕微鏡下で観察すれば良いのではないでしょうか。 この場合だと何を取り込ませるかということが問題ですが、 私が以前やったことがあるのは、細胞表面のあるタンパク質に対する蛍光ラベルした抗体を細胞にふりかけて、蛍光顕微鏡で観察するというものでした。 これを応用して、抗体をふりかけた後に細胞を固定して、免疫染色の要領で二次抗体(ペルオキシターゼ等でラベルされたもの)で検出できるのではないでしょうか。 ちなみに、言葉の問題ですが、光学顕微鏡という言葉の範囲には蛍光顕微鏡も入ります。 また、神経筋標本というと、生きた標本もあれば固定した標本もあります。 一体、どこまでが使える範囲なのか把握しないと問題の意図する回答ができているかわかりません。