質問: protein-aの固定化について 抗体精製などでprotein-aが固定化された素材が用いられていますが、 固定化方法がわからなくて困っています。 ほとんどの商品説明などでは「共有結合で固定化された」と簡潔に 記載されているだけで詳しい共有結合反応の記載がありません。 「protein a, immobilization」などのキーワードで文献検索を 行っているのですが、既にprotein-a固定化されている材料を 用いた文献ばかりでうまくヒットしていません。 合成方法、条件などもご存知でしたらお教えいただけたら嬉しいです。 よろしくお願いします。
回答: 担体となるgelにprotein-aを共有結合させたい、と言う質問ですね? ならば、アミノ酸側鎖に共有結合する活性基を結合させた担体として、affigel-10(bio-rad)や、各種のcyanogen bromide-activated-sepharose (sigma)が市販されていますので、それらのgelとprotein-aを混合し架橋したのちにブロッキング、洗浄するだけで使用出来ます。 バッファーはtrisなどが含まれていなければそれで良いです。ブロッキングは中性付近の1m tris-hcl(濃度は任意。10mm glycine-pbs でも可。)です。 担体に活性基を導入する方法を知りたいのなら、私は経験者ではなく概略しか知らないので回答不能です。