質問: q-5. 細胞の遊走,浸潤にはどのくらい時間がかかりますか?
回答: a-5. oris assayシリーズに共通の利点として,アッセイの途中に各ウェルの検出領域を顕微鏡で観察することができ,どのくらい細胞が遊走しているか確認できるという点が挙げられます。初めてoris assayシリーズを使用する際には,一定時間ごとに顕微鏡下で細胞の遊走状態を確認することをお勧めします。細胞の遊走距離やスピードは,細胞の種類や使用しているecmの種類によって異なります。再現性(cv<15%)と精度(z factor>0.4)の高い結果を得るためにも,細胞が検出領域の2/3を占めるエンドポイントとなる時間を決定する必要があります(実際には,細胞が検出領域を完全に埋めてしまう前にアッセイを終了することを推奨します)。例として,cell invasion assayでは,細胞が上方領域のecm内に浸潤していくには24~72時間かかります。アッセイ時間を延長して行う場合は,48~72時間ごとに新しい培地に交換し,阻害物質など実験に使用している試薬を新たに添加することを推奨します。