質問: **時間が経つにつれて、ウェスタンブロットにおける抗体の活性が減少するのはなぜですか?** --------------------------------------------- 私たちの抗体をウェスタンブロット分析に使用していて、反応性が時間の経過とともに減少しているように見える場合は、考慮すべき点がいくつかあります。
回答: | **考えられる原因** | **解決案** | | 異なるサンプルを使用しました。 | • 培養中の細胞は時間の経過とともに特性が変化するので、新鮮な細胞を解凍することを推奨します。 | | サンプルは保存中または繰り返し凍結融解の間に分解しました。 | • 新鮮なサンプルを調製し、繰り返し凍結融解を避けてください。 | | 抗体は汚染されていました。 | • バイアルを遠心沈殿し、沈殿物を確認します。 | | 二次抗体試薬は機能していません。 | • 二次抗体試薬を変更してください。 | | 非効率的なタンパク質転写。 | • ゲルからブロットへのタンパク質の転写を確認するために、転写の後、India Inkでブロットを染色します。適切に保存した場合、抗体は非常に安定しており、時間が経つにつれて力価が低くなったり、消えたりする可能性が低いです。 |