質問: q-10. oris assayで目的物質を評価したい場合,どのタイミングで添加すればよいでしょうか?
回答: a-10. orisの場合は,細胞が接着・伸展した時点で目的物質を添加し,stopperを外してアッセイをスタートさせればよいでしょう。oris proの場合は,bcgが溶解し,細胞が接着・伸展した時点で,細胞遊走が始まる前に添加する必要があります。細胞接着に要する時間は細胞の種類や使用するecmの種類によって異なりますが,コラーゲンiコーティングプレートの場合で約1時間,未修飾(tc treated)プレートの場合で約3時間程度かかります。接着しなかった細胞を除去するために,培養液を交換してから目的物質を添加することを推奨します。また,浸潤アッセイの場合,目的物質はbmeまたはコラーゲンi溶液に組み込んで添加するか,基質ゲルの重層後に加える培地に添加するとよいでしょう。