質問: **なぜ、anti-phosphorチロシン抗体を使う場合、バックグラウンドが高い、および/またはシグナルが減少するのでしょうか?** |
回答: 使用されるブロッキング溶液をチェックしてください。膜に結合するリン酸化タンパク質を有するPhosphotyrosineブロットを除いて、脱脂粉乳はすべてのブロットに適します。この試薬でブロッキングすることにより、潜在的なエピトープはブロットの全面に露出しています。この溶液中で抗Phosphotyrosine抗体を希釈すると、エピトープの多くをカバーし、検出に利用できる抗体が少なくなります。ブロッキング溶液としては「**1% BSA含有TBS + Tween 20**」をお勧めします。牛乳を使用しないでください。 |