質問: tae,ローディングバッファー,アガロースゲルについて 今度,pcrから電気泳動をしようと考えているのですが 皆さんは希釈,及び作成した tae,ローディングバッファー,アガロースゲルを どのくらいの期間を基準に新たに作成しているので しょうか? 御意見宜しくお願いします. またそれらに関して参考文献などがありましたら 宜しくお願いします.
回答: 私はこんな風にしています。今までいたいくつかのラボでも、みんなこういう感じでした、 ローディングバッファー:ふだん使っている分は、エッペンチューブに入れて、使い切るまで室温で保存(ベンチトップに常備)。最近はsds入りのものが一般的だと思いますが、これならまず腐りません。逆に、冷蔵保存するとsdsが析出して厄介です。ストックは冷凍保存しておけば半永久的に保ちます。 tae:50xのストック溶液は、オートクレーブをかけ、室温、または冷蔵で無期限保存。1xtaeは、5-10 lのタンクにmilliq水で希釈して作り、使い切るまで室温保存(非滅菌)。日常的にフラグメントのチェックなどに使う分には、泳動槽に入れっぱなしのバッファーを使い回す。蒸発して減った分は蒸留水で補う(目分量)。taeで補ってしまうとだんだん濃度が高くなり、過剰な電流がながれ、過熱したりフューズが切れたりする。ここ一番の泳動のとき(論文データとして使う可能性があるとか)、切り出しをするとき、サザンハイブリをするときを機会にして、新しいtaeに換える。 アガロースゲル:型ごとタッパーに入れ、蒸留水を少々かけ(タッパーの底にも少々)密閉して冷蔵保存。1ヶ月は楽勝で保ちます。私は、アガロースを溶解するのに、急がないときはオートクレーブを使うのですが、そのせいか、この状態で室温保存しても数ヶ月保っています。それでもやっぱり、ここ一番のときは、新しいのを作るんですが。